DE1773841C - Verfahren zur Vorbereitung, Konservierung und zum Transport von Blut und Serumproben - Google Patents
Verfahren zur Vorbereitung, Konservierung und zum Transport von Blut und SerumprobenInfo
- Publication number
- DE1773841C DE1773841C DE1773841C DE 1773841 C DE1773841 C DE 1773841C DE 1773841 C DE1773841 C DE 1773841C
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- blood
- transport
- samples
- preservation
- glucose
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 title claims description 23
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims description 23
- 210000002966 Serum Anatomy 0.000 title claims description 10
- 238000004321 preservation Methods 0.000 title claims description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N D-Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 15
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 15
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 claims description 8
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 7
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 7
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 7
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 claims description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 3
- 230000002378 acidificating Effects 0.000 claims description 2
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 claims description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 5
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000773 point of departure Toxicity 0.000 description 2
- 210000001736 Capillaries Anatomy 0.000 description 1
- 102000005548 Hexokinases Human genes 0.000 description 1
- 108020002022 Hexokinases Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive Effects 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000001413 cellular Effects 0.000 description 1
- 238000007374 clinical diagnostic method Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 1
- 238000009114 investigational therapy Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000011068 load Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000001264 neutralization Effects 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Substances OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000004753 textile Substances 0.000 description 1
Description
Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein
Verfahren zur<Vorbereitung, Konservierung und zum Transport von Blut- und Serumproben zur Bestimmung
der Inliultssloffe, vorzugsweise der Lipide und
der Gluko.te. bei dem man eine abgemessene Menge
der /u untersuchenden Flüssigkeit auf einen saugfähigen
Träger auftrag:, trocknet und erst unmittelbar vor der Untersuchung ehiiert.
Der qualitative Nachweis und die quantitative Bestimmung von Bestandteilen oder Inhaltsstoffen
des Blutes oder Serums haben für die medizinische Diagnostik in den letzten Jahren zunehmend an
Bedeutung gewonnen.
Insbesondere die Untersuchung von Blutproben stieß bisher auf Schwierigkeiten, da sowohl durch
den Transport der Proben zum Laboratorium als auch durch die gelegentlich unvermeidbare Lagerung
die Untersuchungsergebnisse verfälscht wurden. Da Triglyccride nur im Serum und nicht im Blut bestimmt
werden konnten, war außer der umständlichen und unangenehmen Venenpunktion die Abtrennung des
Serums notwendig. Weiterhin war es nötig, die Proben für den Transport in bruchsicheren und sterilen
Behältnissen /11 verpacken.
F.s ist zwar bekannt, Blutproben zur Glukosebestimmung auf Filterpapier /u bringen und zu
trocknen; da jedoch die Bliitglukosevvcrte bei diesen
Proben bereits innerhalb von 2 Stunden signifikant abnehmen, hat es sich als notwendig erwiesen, die
Proben in einer umständlichen und zeitraubenden Prozedur mit F:ormaldchyddampf zir stabilisieren
(vgl. Am. J. Clin. Path., 45 [1966], S. 297). Durch die Einwirkung des lormaldehyds wird außerdem
die I lution der an sich leicht löslichen Glukose so erschwert, daß vor der Bestimmung mindestens
20 Minuten eluiert werden muß.
Es wurde nun überraschenderweise gefunden, daß sich eine nachträgliche Stabilisierung von Blutproben
zum Zweck der Bestimmung der Inhaltsstoffe erübrigt, wenn man einen saiigfähigen Träger mit ioncnaustauschenden
Eigenschaften verwendet.
Das erfindiingsgeniäße Verfahren ermöglicht überraschenderweise
auch, Lipide, z. B. Triglyceride im Blut zu bestimmen. Da sämtliche Treniioperationen,
die für die Scrumgewinnung notwendig sind, wegfallen, läßt sich die zur Bestimmung benötigte Menge
Blut von 0,5 ml auf 0,05 ml reduzieren. Bedeutsam ist dies insbesondere auch für Reihenuntersuchungen,
da die geringe Blutmenge als Kapillarblut entnommen werden kann und nicht mehr durch Venenpunktion
gewonnen werden muß. L:in weiterer Vorteil des crfindungsgcmäßen
Verfahrens besteht darin, daß von kleinen l.aboratoriiimstieren in Reihentests uiibcschadei
mehrere Blutproben' entnommen werden können, wodurch die Treffsicherheit der Ergebnisse
erheblich gesteigert wird.
Die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren vorbereiteten
und getrockneten Proben können auf einfache Weise im Briefumschlag versandt werden und
gestatten es trotzdem, quantitative Bestimmungen mit großer methodischer Genauigkeit auch noch
lange Zeit nach der Blutentnahme durchzuführen.
Sowohl bei Proben für die Glukosebestimmung als auch bei .solchen für die Triglyeeridbestinmnmg
wurde in jeweils 25 Ansätzen gegenüber den u η behandelten Probeii ein Korrelationskoeflizient nach
Pearson von r = 0,99 ermittelt.
Als saugfähige Träger mit ionenaustauschenden Eigenschaften verwendet man vorzugsweise lonenaustauscherpapiere.
Als lonenausUiuscherpapiere kommen
je nach Art der nachzuweisenden Blut- oder Serumbestandteile sowohl Kationenaustauscher als
auch Aiiionenaustaiischer in I-rage. Gluko.se wild
vorzugsweise im schwach sauren Bereich stabilisiert, wobei zu niedrige pH-Bereiche zu vermeiden sind,
da sonst Glukose aus der Zellulose des Papiers abgespalten wird und dann /ti hohe Glukosegehalte vorgetäuscht
werden.
Da Triglyceride im Verlauf enzymalischer Untersuchungen alkalisch verseift, werden, erweisen sich
zur Vorbereitung und Stabilisierung derartiger Proben insbesondere Anionenaustauschcrpapiere als geeignet.
Selbstverständlich ist es möglich, an Stelle von Filterpapier die verschiedensten saugfähigen Träger,
wie gepreßte Zellulose, hydrophile Kunststoffe oder Textilgewebe, Dochte oder auf geeigneten Unterlagen
mittels Haftstoffen (beispielsweise Leimzusatz) fixierte, organische oder anorganische Pulver- oder Granulatschichten
mit ionenaustauschenden Eigenschaften zu verwenden, wobei es gleichgültig ist, ob die ioncnaustauschenden
Eigenschaften auf der Molekularstruktur des saugfähigen Trägers beruhen oder dem
Träger erst durch nachträgliche Imprägnierung verliehen werden.
Wenn nach dem erfnulungsgemäßen Verfahren
Blut untersucht werden soll, ist zu berücksichtigen, daß die Ergehnisse auf Grund des zellulären Anteils
um etwa 30% niedriger liegen als die unter Verwendung von Serum gewonnenen Werte; es ist jedoch
nicht schwierig, den für die jeweilige Bestimmung maßgebenden Korrekturfaktor an Hand von Vergleichsversuchen
zu bestimmen.
In den folgenden Beispielen sind typische und bevorzugte Ausführungsformen des erfindungsgemäßen
Verfahrens beschrieben.
| Ta hei le I | llexukinase-Methode | Glukose in | Minuten nach | CiOD/l'OI | (-Methode | |
| Glukose in | l'iipivrclimt | Ciliikose- | Glukose in | |||
| enteiucilUcr | |i»B"A,l | Applikation | cnlciwciUtcr | Glukose in | ||
| Mimilcii ii;i<-li (■ i11 - | ΙΙΙιιίμιπΙν | 132 | Hlnlprobe | l'apiereluat | ||
| kosc-/\pplik;itioil | |ιιιμ",'.,| | 308 | 0 | [niü'7,.1 | ImS1YnI | |
| 131 | 219 | 30 | 131 | 135 | ||
| 0 | 328 | 124 | 60 | 336 | 333 | |
| M) | 220 | 120 | 204 | 216 . | ||
| 60 | 130 | 115 | 120 | |||
| 120 | ||||||
Reihenuntersuchung des Blutglukosegehalts
beim Kaninchen (unter zusätzlicher Glukosebelastung)
beim Kaninchen (unter zusätzlicher Glukosebelastung)
Kationenaustauscherpapier wird in quadratische Stücke von 3 cm Kantenlängc zerschnitten.
Einem unter Glukoscbelastung stehenden Kaninchen (I g Glukose/kg Gewicht) werden während 2 Stunden
im Abstand von 30 bzw. 60 Minuten jeweils vier Blutproben /ti 0,1 ml entnommen. Zwei dieser Proben
werden sofort auf die vorbereiteten lonenaustauschcrpapiere
aufgetragen, während mit den beiden anderen je eine herkömmliche Bestimmung nach der rlexokinase/G-6-PDII-
und GOD/POD-Methode durchgeführt wird. Die präparierten Papierstücke werden schließlich nach dem Trocknen in je 2 ml 0,33 n-Perchlorsäurc
15 Minuten cluiert, worauf das dekantierte und /entrifugierle Eluat ebenfalls nach der
Hexokinase/G-6-PDH- und GOD/POD-Methode untersucht
wird. Für sämtliche Bestimmungsmethoden werden gut übereinstimmende Werte gefunden (vgl.
Tabelle 1).
Kontrollimtersuchungen an Blutproben auf lonenaustauscherpapier
zeigten nach 2 Monaten Lagerung, daß sich der Glukosegehalt nicht meßbar verändert
hat.
B e i s ρ i e, 1 2
Triglyeeridbestimmung in Kaninchenblut
Kationenaustauscherpapier wird in quadratische Stücke von 3 cm Kantenlänge zerschnitten. Nach
dem Aufbringen von jeweils 0,1 m' Blut und Trocknen
werden die einzelnen Proben in einem Gemisch von 0,1 ml 0,9%iger Kochsalzlösung und 0,5 ml Unnormaler
äthanolischer Kalilauge bei 700C I Stunde
im geschlossenen Schliffröhrchen hydrolysiert. Die Bestimmung der Triglyceride erfolgt anschließend
und wird nach der Methode der cnzymatischen Neutralfeltbistimmung durchgeführt (vgl. F. II.
Schmidt, Z. KHn. Chem. u. KHn. Biochem.,
[1968], S. 156). Die Werte für das Papiereluat werden mit dem empirischen Faktor 1,515 multipliziert,
damit man sie mit den Werten für Serum vergleichen kann.
Die Ergebnisse sind in Tabelle II zusammengestellt:
| l'apiereluat |
I'upicreluat χ
1,515 |
Serum
(Vergleich) |
·/, Dif ferenz |
| 'iiB"/c. | »'S "A> | mg"/.. | |
| 333 | 504 | 485 | 31 |
| 85 | 129 ■ | 134 | 36 |
| 107 | 162 | 164 | 35 |
| 124 | 188 | 192 | 35 |
| 513 | 776 | 805 | 36 |
| 135 | 204 | 205 | 34 |
| 143 | 217 | 208 | 31 |
Claims (3)
1. Verfahren zur Vurbcicitung, Konservierung
as und zum Transport von Blut- und Serumproben
zur Bestimmung der lnhaltsstoffc, bei dein man
eine abgemessene Menge der zu untersuchenden Flüssigkeit auf einen saugfälligen Träger aufträgt,
trocknet und erst unmittelbar vor der Untersuchung eluiert, dadurch gekennzeichnet,
daß man einen saugfähigen Träger mit ionenaustauschenden Eigenschaften* verwendet.
2. Verfahren gemäß Anspruch I, dadurch gekennzeichnet,
daß man zur Bestimmung von Glukose
in Blut schwach saures Kationenaustauscherpapier verwendet.
3. Verfahren gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet,
daß man zur Bestimmung von Lipidcn in Blut Anionenaustauscherpapier verwendet.
Family
ID=
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0750185A2 (de) * | 1995-06-24 | 1996-12-27 | Roche Diagnostics GmbH | Element und System zum Sammeln, Transportieren und Lagern von zu analysierendem Probenmaterial |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0750185A2 (de) * | 1995-06-24 | 1996-12-27 | Roche Diagnostics GmbH | Element und System zum Sammeln, Transportieren und Lagern von zu analysierendem Probenmaterial |
| EP0750185A3 (de) * | 1995-06-24 | 1997-08-13 | Boehringer Mannheim Gmbh | Element und System zum Sammeln, Transportieren und Lagern von zu analysierendem Probenmaterial |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE1698180B2 (de) | Verfahren zur herstellung eines blutserum-bezugsnormals | |
| DE2936307A1 (de) | Verfahren zur direkten bestimmung eines freien analyten in einer probe | |
| DE2156604A1 (de) | Kontrollstandard für flüssiges Blutserum | |
| DE2333434C3 (de) | Verfahren zur Durchführung serologischer Untersuchungen nach dem Prinzip der Komplementbindungsreaktion und gebrauchsfertige Schnelltestpackung hierfür | |
| DE2602997C2 (de) | Lyophilisierte Kollagenzubereitung und Verfahren zu ihrer Herstellung | |
| EP0349934B1 (de) | Verfahren zur Bestimmung der Ionenstärke oder des spezifischen Gewichts von wässrigen Flüssigkeiten | |
| DE2538388B2 (de) | Verfahren zur Herstellung eines stabilen, nicht-radioaktiven Trägermaterials für mit radioaktiven Elementen markierte Diagnosemittel und seine Verwendung für mit Tc-99m-markierte Diagnosemittel | |
| DE3237233C2 (de) | Testvorrichtung für die quantitative Analyse von Substanzen in Körperflüssigkeiten | |
| DE2806860C3 (de) | Verfahren zur Bestimmung der Konzentration der freien Fraktion eines Hormons in einer biologischen Flüssigkeit | |
| DE2850950C3 (de) | Verwendung von nativem oder thermisch modifiziertem Cytochrom c als Stabilisator für ein immunochemisches Meßreagens, immunochemisches Meßreagens sowie Pufferlösung zur Probenverdünnung bei immunchemischen Meßverfahren | |
| DE2710674A1 (de) | Blutstabilisatoren | |
| DE1773841C (de) | Verfahren zur Vorbereitung, Konservierung und zum Transport von Blut und Serumproben | |
| DE1617734B1 (de) | Verfahren zur Herstellung eines immunologischen Reagens | |
| DE68907365T2 (de) | Verfahren zur Bestimmung des Vorhandenseins leichter Ketten in Urinproben, Komplex von Vorbereitungen zur Erledigung des Verfahrens und damit verbundenes Reagenz. | |
| DE1773841B1 (de) | Verfahren zur Vorbereitung,Konservierung und zum Transport von Blut- und Serumproben | |
| DE69419313T2 (de) | Nachweis von krankheit des zentralnervensystems | |
| DE68903670T2 (de) | Physiologisch aktive, fluessige, allergenische zusammensetzungen aus biologischen rohmaterialien. | |
| DE2936540A1 (de) | Trockene radioimmunoassay-test-zusammensetzung, enthaltend eine stabilisierte mischung aus einem radiomarkierten liganden und einem antikoerper, deren anwendung und verfahren zu deren herstellung | |
| DE2511688A1 (de) | Reagenz zur erkennung von syphilis und verfahren zu dessen herstellung | |
| DE2539258C3 (de) | Radioimmunologisches Analyseverfahren zur Bestimmung des Gesamt-Thyroxins in einer Serumprobe | |
| DE2539219A1 (de) | Radioimmunologisches untersuchungsverfahren zur in-vitro-bestimmung der renin-aktivitaet und besteck zur durchfuehrung dieses verfahrens | |
| DE102018214263A1 (de) | Stabiler Urin-Indikator mit Langzeitdetektion | |
| AT320165B (de) | Geraet zum isolieren und nachweisen von barbitursaeurederivaten und von glutethimid in biologischen fluessigkeiten | |
| DE1913817C3 (de) | Verwendung eines Verfahrens zur Vorbereitung, Konservierung und zum Transport von Blut- und Serumproben | |
| DE1943881C3 (de) | Verfahren zur quantitativen Bestimmung der Thrombinaktivität in Blutplasma und dessen Fraktionen |