DE1804448B2

DE1804448B2 - pharmazeutisch verträgliche Salze davon und Verfahren zur Herstellung der Verbindung

Info

Publication number: DE1804448B2
Application number: DE19681804448
Authority: DE
Inventors: Kevan Woodley Berkshire Brown; John Frederick Isleworth Middlesex Cavalla
Original assignee: John Wyeth and Brother Ltd
Current assignee: John Wyeth and Brother Ltd
Priority date: 1967-10-26
Filing date: 1968-10-22
Publication date: 1980-07-03
Also published as: NL6815215A; JPS4810466B1; CH609051A5; CH540280A; FR7971M; IE32443B1; BE722290A; DE1804448A1; DE1804448C3; FR1587945A; CA930740A; NL165932C; NL165932B; IE32443L; GB1237194A

Description

Die Erfindung betrifft den in den Ansprüchen gekennzeichneten Gegenstand, nämlich ein neues 2-ArylthiazoI, dessen pharmazeutisch verträgliche Salze, sowie ein Verfahren zur Herstellung der Verbindung.

Das neue 2-ArylthiazoI gemäß der Erfindung hat die nachstehende Forme!!

CII=CH -COOH

ist also 0-(2-p-Chlorphenyl-thiazol-4-yl)-acrylsäure. Die erfindungsgemäßen Verbindungen, d. h. die vorstehende Verbindung, als auch ihre Salze, besitzen pharmazeutische Aktivität, z. B. antithrombotische Eigenschaften.

Die Verbindung der Forme! I kann erfindungsgemäß erhalten werden, indem man in an sich bekannter Weise ein Thiazol der allgemeinen Formel II

worin R einen durch chemische Umsetzung in den Acrylsäurerest - CH = CH - COOH überführbaren Rest bedeutet, in die Verbindung der Formel I überführt.

Beispielsweise kann die Verbindung der Formel I durch Kondensation von 2-(p-Chlorpheny))-4-formyI-thiazol mit Malonsäure oder einem Ester derselben hergestellt werden, wobei ein erhaltener Ester hydrolysiert wird.

Die bei den beschriebenen Verfahren einzusetzenden Ausgangsmaterialien sind bekannte Verbindungen, oder können in ähnlicher Weise wie bekannte Verbindungen hergestellt werden (z. B. GB-PS 10 99 389).

Die Verbindung der Formel I enthält ein basisches Stickstoffatom und ist daher zur Salzbildung mit Säuren befähigt, obgleich diese Salze leicht hydrolysiert werden.

Die Träger für pharmazeutische Zubereitungen, welche die erfindungsgemäßen Verbindungen enthalten, können sowohl fest als auch flüssig oder auch fest-flüssige Mischungen sein, und es können irgendwelche geeignete, dem Fachmann bekannte Träger eingesetzt werden. Die Wahl des im Einzelfall zu verwendenden Trägerstoffes richtet sich nach der als Wirkstoff verwendeten Verbindung, der Art der Verabreichung und den pharmazeutischen Richtlinien.

ίο Die Zubereitungen können beispielsweise jeweils in

Form von Tabletten, Kapsem oder Lösungen vorliegen. Die antithrombotischen Eigenschaften der aktiven Verbindungen der Erfindung wurden durch pharmako-

logische in vitro- und in vivo-Untersuchungen durch die

is Wirkung der Verbindungen auf die Blutplättchen gezeigt. Die Verfahren wurden von Fenichel et aL in

Biochemical Pharmacology, VoL 23, 1974, Seiten 3273

bis 3282 beschrieben.

Es wird angenommen, daß die Thrombozyten-Aggre-

gation die Anfangsstufe .einer Thrombusbildung ist, und es wird hi Betracht gezogen, daß die Verbindungen, weiche eine Aggregation verhindern oder die Klebrigkeit der Plättchen verringern, den Beginn des arteriosklerotischen Prozesses inhibieren können. Die Wirkung von Arzneimitteln auf die Aggregation wird im thrombozytenreichen Plasma gemessen, das Adenosindiphosphat enthält, welches die Aggregation in vitro deutlich erhöht, und das sin physiologisches Mittel für eine entsprechende Wirkung in vivo sein kann.

Bei dem in vitro-Test wird menschliches Blut in siliconisierten Vakuumbehältern unter Verwendung von 3,8% Natriumeitrat als antikoagulierendes Mittel gesammelt Zentrifugieren bei 900 g während eines Zeitraums von 2 Minuten bei 5° C trennt die roten Blutzellen von dem thrombozytenreichen Plasma ab. Das überstehende thrombozytenreiche Plasma wird abpipettiert und der Rest 10 Minuten lang bei 1000 g bei 25°C zentrifugiert, um ein thrombozytenarmes Plasma zu gewinnen. In einem automatischen Payton-Aggregometer wird eine Zelle, die 1,0 ml thrombozytenreiches Plasma enthält, bei 1100 Umdrehungen pro Minute gerührt und die zu untersuchende Verbindung in 0,2 ml einer gepufferten Kochsalzlösung bei einem pH-Wert von 7,4 zugegeben und 5 Minuten lang mit dem

4> thrombozytenreichen Plasma im Gleichgewicht gehalten. Zum Zeitpunkt 0 wird entweder Adenosindiphosphat, Epinephrin oder Kollagen zu dem untersuchten System in 0,1 ml gepufferter Kochsalzlösung zur Induktion der Thrombozyten-Aggregation zugegeben.

FQr jedes dieser Systeme werden auch geeignete Kontrollversuche ohne die Zugabe einer Verbindung durchgeführt

In diesen in vitro Systemen werden die Ergebnisse als Konzentration an Verbindung angegeben, welche die erste Phase-Aggregation um mehr als 40% inhibieren.

Bei Konzentrationen, wo die Inhibierung der zweiten Phase der Thrombozyten-Aggregation eintritt, war dies

immer 90% oder darüber.

In diesen Systemen wurde /?-(2-p-Chlorphenyl-thia-

M zol-4-yl)-acryIsäure mit Acctylsalicylsäure, eine Verbindung, die als ein mögliches antithrombotisches Mittel vorgeschlagen worden ist, verglichen. In dem 2-μΜοΙ-Adenosindiphosphat-Testsystem inhibierte die Verbindung A bei 2,5 und 3,0 χ 10~^J Mol in wirksamer Weise

fc"' die erste Phase einer Thrombozyten-Aggregation und inhibierte die zweite vollständig. Bei 1,25 χ 10 ⁴ Mol inhibierte Acetylsalicylsäure die zweite Phase der Thrombozyten-Aggregation, jedoch nicht die erste

Phase, Die gleiche Situation wurde for die Epinephrwmdqzierte Aggregation beobachtet, wo die Verbindung A die erste und zweite Phase bei 3,0 χ K)-³MoI inhibierte, wohingegen Acetylsalicylsäure lediglich die zweite Phase (bei der Konzentration von 2£ χ IQ-* Mol) inhibierte. Durch Acetylsalizylsäure inhibierte Kollagen-induzjerte Thrombozyten-Aggregation bei 2£ χ 10-⁴MoI; es wurden 3,0 χ 10~³Μο1 von Verbindung A benötigt, um einen vergleichbaren Spiegel der Inhibierung zu erzielen.

Bei dem in vivo-Test wurden die Verbindungen auf ihre Leistungsfähigkeit hin untersucht, eine durch Adenosindiphosphat induzierte Reduktion der zirkulierenden Blutplättchen bei männlichen Charles River-Ratten zu inhibieren. Die zu untersuchende Verbindung wird durch die Magensonde als wässerige Suspension von 1 ml" verabreicht 30 Minuten nach der Verabreichung wird durch Herzpunktur eine Kontroll-Blutprobe von 0,1 ml erhalten, wonach man in die Beinvene 15 mg/kg Adenosi.idiphosphat injiziert. 20, 40 und 60 Sekunden nach der Adenosindiphosphat-injektion werden Herz-Blutproben entnommen. fControll-Ratten werden in der gleichen Weise behandelt, mit der Ausnahme, daß sie 1 ml Wasser erhalten. Das thrombozytenreiche Plasma wird von den roten Blutzellen abgetrennt und die Plättchen werden in einem Coulter-Zähler gezahlt Die Zeitintervalle von 20 und 40 Sekunden sind die Intervalle von Bedeutung, da die Ratten nach 60 Sekunden sich von den Wirkungen des Adenosindiphosphats zu erholen beginnen, wobei gleichzeitig ein Am»ieg der zirkulierenden Plättchen sowohl bei den behandelten als auch bei den Kontrollgruppen stattfinden. Es wurde gefunden, daß die Verbindung A hinsichtlicn ihrer Schutzwirkung gegen Adenosindiphosphat-induziertei· Plättchenverlust bei den Ratten aktiver ist als Acetylsalicylsäure. Bei einer oralen Dosis von 50 mg/kg mit einem Zeitraum von 30 Minuten für die Absorption schützt die Verbindung A bei Intervallen bei 20 und 40 Sekunden nach der Adenosindiphosphat-Injektion in wirksamer Weise die Plättchen, wohingegen Acetylsalicylsäure keinerlei Schutz verleiht Die Verbindung A war sogar bei einer oralen Dosis von 10 mg/kg in dem Intervall von 20 Sekunden aktiv; bei dieser Dosierung war gegenüber den Kontrollen bei 40 oder 60 Sekunden kein statistisch signifikanter Unterschied vorhanden.

Wenn die erfindungsgemäßen Verbindungen als Arzneimittel eingesetzt werden, können sie an warmblütige Tiere, z.B. Kaninchen, Hunde, Katzen oder Affen, allein, oder zusammen mit pharmazeutisch \ erträglichen Trägern verabreicht werden. Die Menge richtet sich dabei nach der Löslichkeit und der chemischen Natur der verwendeten Verbindungen, dem gewählten Verabreichungsweg und den biologischen Gegebenheiten.

Die Verabreichung kann beispielsweise oral unter Verwendung von pharmazeutischen Corrigentien, wie

Stärke, Milch oder Zucker erfolgen.

Außerdem können die Verbindungen oral in Form von Lösungen oder parenteral durch Injektion verabreicht werden. For die parenteral Verabreichung können sie in Form einer sterilen Lösung oder Suspension eingesetzt werden, wobei die Lösung zweckmäßigerweise noch andere gelöste Stoffe, wie beispielsweise ausreichend Kochsalz oder Traubenzukker enthält, um die Lösung isotonisch zu machen.

Die Dosierung richtet sich nach der Verabreichungsform und der jeweils zur Anwendung kommenden Verbindung. Darüber hinaus richtet sie sich nach dem Behandlungsobjekt. Im allgemeinen wird die Behandlung mit kleinen Dosen, die merklich unter der optionalen Dosis liegen, begonnen. Die Dosierung wird dann allmählich mit kleiner Zuwachsrate gesteigert, bis die optimale Wirkung unter den gegebenen Umständen erreicht ist Im allgemeinen ist es zweckmäßig, die erfindungsgemäß erhältlichen Verbindungen in solchen Mengen zu verabreichen, daß eine befriedigende Wirkong erzielt wird, ohne daß es dabei zu unangenehmen oder schädlichen Nebenwirkungen kommt

Das nachfolgende Beispiel dient zur weiteren Erläuterung der Erfindung.

Beispiel
/?-(2-p-Chlorphenyl-thiazol-4-yl)-acrylsäure

(a) 4-Chlormethyl-2-p-chlorphenyI-thiazol (4 g), Hexamin (3,2 g) und 50<¥aige wässerige Essigsäure (20 ml) wurden 45 Minuten lang am Rückfluß erhitzt, abkühlen gelassen, mit Wasser (100 ml) verdünnt und mit Äther extrahiert Der Ätherextrakt wurde der Reihe nach mit Wasser, gesättigter Natriumbicarbonat-Lösung und Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und der Äther abgedampft Der_ ölige Rückstand kristallisierte beim Trituieren mit Äther. Man erhielt 4-Furmyl-2-p-chlorphenyl-thiazol (2,6 p>; Schmelzpunkt 120° bis 122° C.

Analyse für CioHeClNOS:

Berechnet: C 53,70%, H 2,70, N 6,25%;
Gefunden: C 53,51%, H 2,76%, N 5,83%.

(b) Eine Mischung des nach (a) hergestellten Aldehyds (2,24 g) mit Malonsäure (1,04 g), Pyridin (0,8 ml) und absolutem Äthanol (15 ml) wurde 1 Stunde lang am Rückfluß erhitzt und abkühlen gelassen. Der kristalline so Niederschlag wurde abfiltriert, mit wenig Äthanol gewaschen und durch Absaugen getrocknet. Die so erhaltene Titelverbindung (1,57 g) hatte einen Schmelzpunkt von 22 Γ bis 222° C.

Analyse für C₁₂H₈ClNO₂S:

Berechnet: C 54,25%, H 3,03%, N 5,27%;
Gefunden: C 53,94%, H 3,03%, N 5,13%.

Claims

Patentansprüche:

1. 0-(2-p-Chlorphenyl-thiazol-4-yl)-acrylsäure und pharmazeutisch verträgliche Salze davon.

2. Verfahren zur Herstellung von 0-{2-p-Chlorphenyl-thiazol-4-yl)-acrylsäure, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise 4-Formyl-2-p-chlorphenyl-thiazol mit Malonsäure oder einem Ester derselben kondensiert und einen gegebenenfalls erhaltenen Ester hydrolysiert.