DE1795484A1 - Verfahren zur herstellung von antibiotica - Google Patents
Verfahren zur herstellung von antibioticaInfo
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Description
Patentanwälte
Dr. F. Zumsteln sen. - Dr. E. Assmann
Dr. R. Koenlgsberger - DIpI.-Phys. R. Holzbauer - Dr, F. Zumsteln jun.
TEUEFON: SAMMEU- NR. 22 S3 At
B M D N C H E N 2.
BRAUHAUSSTRASSE 4/i;i
TEUEQRAMME: ZUMPAT
BANKKONTO -BANKHAUS H. AUFHÄUSER
Kr/Hack FK: 2613
GLAXC LABORATORIES LIIwITED, Greenfcrd, Kiddiesex, Großbritannien
Verfahren zur Herstellung von Antibiotica
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von neuen Derivaten des Cephalosporins C und verwandter Verbindungen.
Die Konstitution dec Cephalosporin C kann durch folgende
Struktur wiedergegeben werden:
7 ^ Λ R.CG.MH.CH - CH,-
ι ! O = C ■ - IT 5", 3 C-CH0OAc
8 \*^ 2
CO2H
worin R die Gruppe -(CH2K .CH(ITH2)COCH bedeutet und in derselben
Weise wird die Struktur der neuen nachfolgend aufgeführten Derivate bezeichnet.
409838/1001 ^ 0RISINAL
Es wurde gefunden, daß Cephalosporin C und verwandte Verbindungen mit bestimmten Verbindungen von hochnucleophiler
Natur wie nachfolgend beschrieben reagieren, indem die Acyloxygruppc
des CephalosporinmolekUls unter Bildung neuer Derivate ersetzt wird. Diese Derivate besitzen antibakterielle Aktivität,
welche in vielen Fällen derjenigen des Stamm-Cephalosporina
überlegen ist.
Die Verbindungen gemäß der Erfindung besitzen im allgemeinen den bedeutenden Vorteil einer verbesserten Stabilität
gegenüber Abbau in vivo, was sich z.B. durch Tierversuche ergibt, im Vergleich mit den entsprechenden Acetoxyverbindungen.
Da die letzteren eine Aktivität gegenüber penicillinreaistenten Organismen besitzen, ist dies sehr wichtig. Die Verbindungen
nach der Erfindung besitzen ebenfalls Bedeutung als Zwischenprodukte zur Umwandlung in andere Cephalosporinderivate.
Das erfindungsgemäße Verfahren zur Herstellung von Derivaten des Cephalosporins C besteht darin, daß in einem
polaren Medium eine Verbindung der allgemeinen Formel
N - | CH - | CH | CH9 |
O = | C - | N | I C — |
COOH |
ιτ
worin R eine Acylgruppe, insbesondere eine niedere Alkanoylgruppe und
2 3
R und R beides Wasserstoffatome oder Rp ein Wasserstoffatom
und R, eine Acylgruppe oder eine mit Triaryl substituierte
409838/1001
BAD ORIGINAL
Alleylgruppe, z.B. eine Triphenylmethylgruppe bedeuten,oder worin
p "Z
R und H^ zusammen eine zweiwertige Acylgruppe bilden, welche
von einer Di carbon säur 3 °ieh ableitet oder ein Salz da.von mit
einem starken nucleophilen Jleakticnspartner, i n.sbesandere
(a) Thioharnstoff oder substituierte Thioharnstoffe einschließlich
aliphatisch, aromatisch, alicyclisch oder heterocyclisch
substituierter Thioharnstoffe;
(b) aromatischen und aliphatischen Ihioaniiden, z.T... Thioacetarnid
und Thicsemioarbazid·,
(c) Thiophene1 und substituierte Thiophenole\'
(d) substituierte und uiisubs^ituierte primäre und sekundäre
aromatische Ainirie, die vorzugsweise i'rei von ho"' erocy:~ lcche.'
(e) Tiiiole und eunptita;. er te Thiole, ine !>::-:>
rid ere A;i.:.. ij.iiclc
und s-ibstixuierte Ariincthiole ;
dee Hydr-ige/iphosphs^iCit (UPO., ; und des ThiosulphationG (S.-^O-,)',
(si ΐ/.rrol^- ν nc subs „i :-u"".. ,-r rG Pyrrole. ::.?. Alx.y". pyrrole , urju-
3a die Gruppe R' auch die Gruppe HOOC . CK ('."IL· ). (CMy )-. 00
und cixe 3ruppo R eine Acetylgrupps darstellen li<irjrif z:;t ersichflioh,
daß unter die allgemeine fornel 11 auch Cephalosporin
G alg auch dessen !Derivate fallen.
Da IV ganz allgemein eine Äeylgruppe larsfeiit, kann can
andere epesifj sehe Aoyloerivate verwenden, wofür Sei^piele in
uen Aikanoyl--, Alkencyl-, cubstituierten Alkanoyl- z.B. Aralka-'1C./.1-,
Aryioryaikanoyl--, S-Arylthioalkanoyi- und S-Aralkylthicalkanoyl-Cephalospoi'inderivatanvon
den verstehend aufgeführten
4 0 9 Β * I 1 0 0 1 BAD ORIGINAL
nucleophilen Verbindungen als Beispiele aufgeführt seien. Diese
Acylderivate können die folgenden Formeln besitzen:
1.) R!(CH2)nC0, worin R' einen Aryl-, Cycloalkyl-,
substituierten Aryl- oder substituierten Cycloalkylrest und η eine ganze Zahl zwischen 1 und 4 bedeuten. Als Beispiele dieser
Gruppe seien Phenylacetyl, Nitrophenylacetyl und Phenylpropionyl ·
aufgezählt.
2.) CjÄ +1 co>
worin n eine ganze Zahl von 2-7
bedeutet- Die Alkylgruppe kann geradkettig oder verzweigtkettig und kann ge\vünschtenfall3 durch ein Sauerstoff- oder ein Schwefel-,. ;
atom unterbrochen sein. Beispiele derartiger Gruppen sind Hexanoyl-,'
Heptanoyl-, Octanoyl- und Butylthioacetylreste.
3.) ^n^n-i^' worin η eine ganze Zahl zwischen 2 und
ist. Die Alkenylgruppe kann geradkettig oder verzweigt sein .und
gegebenenfalls kann sie durch ein Sauerstoffatom oder Schwefelatom
unterbrochen sein. Als Beispiele derartiger Gruppen seien Acrylyl-, Crotonyl- und Allylthioacetylgruppen aufgeführt.
4.) R1O CIi11R'".CO, worin R1 die unter 1.) angegebene
Bedeutung besitzt und R" und R"1, die gleich oder verschieden
sein können, Wasserstoffatome oder Alkylgruppen bedeuten. Ein ·
Beispiel einer derartigen Gruppe stellt die Phenoxyacetylgruppe dar. *
5.) R'SCR11R'". CO, worin R!, R" und R"1 die vorherstehend angegebene Bedeutung besitzen. Beispiele derartiger
Thiogruppen sind S-Phenylthioacetyl-, S-Chlorphenylthioacetyl-
und S-BroiTiphenylthioacetylgruppen.
6.) R-(CH9) S(CH9) CR11R1".CO, worin Rf, R" und R"1
die vorstehend angegebene Bedeutung besitzen, m eine ganze Zahl
409838/1001 bad original
-. 5 —
1795Λ8Λ
zwischen 1 und 4 Und η die Zahl O oder eine ganze Zahl zwischen
1 und 4 "bedeuten. Beispiele derartiger Gruppen sind 3-3-i-nzylthioaeetyl-,
Benzylthiopropionyl- und 3-rhonäthylthioaoetylgruppen.
7.) R!C0, worin R' die vorstehend angegebene Bedeutung
besitzt. Als Beispiel derartiger Gruppen aeier; 3enzo"l~-, subßti-'
tuierte Benzoyl- und Cyclcperitanovlgrappen aufgeführt, pp.lle
die Benzoy!gruppe substituiert ist, können die Substi tarnten
aus Alkyl- oder Alkoxygruppen sein und die SubctiTUdiiufn kennen
in den 2- oder 2- und o-Stellungen stehen. Eine goeignets 2,6-disu"bstituierte
Benzoylgruppe stellt s.3. das 2,6--Dirso'incxybenzoyl
dar.
Die Umsetzung kann bequem erweise bewirkt \;eviaL·, inderr
die Reaktionsteilnehmer in Lösung incubiert werden, d.h. die
Reaktionsteilnehmer werden in der Lösung bei naSiger l'ercperatur,
z.B. 15-7O0C, vorzugsweise 37-500C, während eines Zeixrauas von
einigen Stunden oder auch Tagen gehalten, bis das gev.öirachte
Derivat in optimalen Ausbeuten erhalten ist. Diο Reaktion verläuft
besonders gut, wenn sie bei einer Temperatur ve:: etwa 37 C
während eines Zeitraums zwischen 48 und 72 Stunden durengefvJirt
wird. Die P.eaktions teilnehmer werden vorteilhaf τ einreise in ein
Verhältnis von etv/a 1 molaren Äquivalent der Verbindung der allgemeinen
?orr.el II auf 1-10 molare Äquivalente des nueleophilen
Re ag ens es angewandt. Der pH-\Vert der Reaktionslösung v/ird vorteilhafterweise
innerhalb der "Grenzen 5,0 - 3, bevorzugt 6-7, gehalten. Erforderlichenfalls sollte der pH-Wert der Lcour:g auf
den gewünschten Wert durch Zugabe eines fuffermittela, z.B.
Natriumacetat oder bei Verwendung eines Alkalisalzes des
L Π 9 8 .1 8 / 1 0 0 1 BAD ORIGINAL
Cephalosporins der allgemeinen Formel II durch Zugabe von z.B.
Essigsäure eingestellt werden.
Da die Reaktion nach einem polaren oder ionischen Mechanismus abzulaufen scheint, ist es notwendig, ein stark polares
Medium anzuwenden, damit die Reaktion bei meßbarer Geschwindigkeit
abläuft. Das am allgemeinsten geeignete Lösungsmittel besteht aus Wasser, jedoch kann in den Fällen, bei welchen das ■
nucleophile Mittel in Wasser nicht sehr löslich int, ein Gemisch aus Wasser und einer mit Wasser mischbaren organischen Flüssigkeit,
z.B. Dimethylformamid, Aceton oder Äthanol angewandt werden; geeignete Verhältnisse für derartige Lösungsmittelinischungen
sind 50:50 (v/v) oder 30:70 (v/v). Nichtwäßrige polare Lösungsmittel, wie z.B. Aceton, können ebenfalls angewandt werden.
Das Reaktionsprodukt kann aus dem Reaktionsgemische welches
z.B. unverändertes Cephalosporin oder andere Substanzen enthalten kann, durch eine Vielzahl von Verfahren, z.B. Kristallisation,
lonophoresc, Papierchromatographie oder Chromatographie auf Ionenaustauschharzen abgetrennt v/erden.
Gegebenenfalls kann in einigen Fällen die erhaltene Verbindung dann mit einem v/eiteren nucleophilen Mittel incubiert
v/erden, um einen Ersatz des ersten nucleophilen Mittels zu bewirken. Dies kann bei bestimmten nucleophilen Mitteln von Vorteil
sein.
Bevorzugte Cephalosporin-Verbindungen der allgemeinen
■2
Formel II sind Cephalosporin C und sein Benzylanaloges (R =
Phenylacetyl), insbesondere in Form ihrer Alkalisalze, beispielsweise des Natriumsalzes. Wie sich jedoch aus den nachfolgenden
Beispielen ergibt, ergaben sich auch bei anderen
409838-/1001 BÄÖ 0R1G1NÄL
-7- 1735484
derartiger Analogen Verbindungen nit einer vorteilhaften Aktivität
.
Zu geeigneten nucleophilen I'itteln der Gruppe (a), den
Thioharnstoffen, gehören Verbindungen der allgemeinen Formel
R4 H6
IT-C-IT
x. yy '· ^s 7
worin Tc , R"3, H' und Ilr, die gleich oder verschieden sein können,
Wasserstoff atome oder Alkyl-, Cycloalkyl·-, Alkenyl-, Aryl-,
oder Aralkyigrupper., sowie substituierte Gruppe-:·, vor: diesen
■Typen bedeuten oder v/orin Λ und H" zusammen eine Alkylengrupp-J,
s.B. eine 'kzir,■". engruppe bilden. 3οί3χιϊ·:ί1β derartiger
Thioharnstoffe ist Ihicharnstoff selbst, 17-Phenyltbicharnstoff,
!!,N'-Diphen}7·'!thioharnstoff und Äthyl^nthicharnc-roff.
Ü8 Beispiele fur die substituierten und unsubstituierten
primären und 3 2kj.ridärc:i Amins (d) seien AnU in, p-Nitroanilin,
p-iiitro-ll-jnethylanilin, Sulphanilsäure und p-Aminobenzoesäure
aufgeführt. In aieae Gruppe fallen auch die
r7ar!ithyla;nine ?;ie 2.3, a-Kaphthyiamin und substituierte ITaphthyl-
Besonders bevorzugt wird es, substituierte Thiole zu
verwenden einsc.hiießljeh von Aninothiolen und substituierten
Aiiünotiiioleu als nucleophile Llittel der Gruppe (c-)· Beispiele
derartiger nucleophiler J^ittel sind 2-Aninoäthanthiol, 2-Anino-2--rethylpropan-1
-thiol, 3-Din:ethylarriincpropan-1 -thiol und
■:-Pi peridii'ioäthan-i -thiol.
913 8/1001
179548
Die als nucleophile Mittel in Form ihrer Metallsalze verwendeten Anioiien liegen vorzugsweise in Form ihrer Alkalisalze,
z.B. der llatriumsalze vor.
v/ie vorstehend aufgeführt, sind die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren erhältlichen Verbindungen neu. Die neuen Verbindungen
können in die folgenden allgemeinen Klassen eingeteilt werden, die den vorstehend aufgeführten Klassen der nucleophilen
Mittel entsprechen:
(a) Solche mit der allgemeinen Formel: . ·
N-CH-CH CH0 w/
ι ι ι ^ Jj^ 5
0 = i - N C- CH0-S-Cv ^R
worin R , R , R , R , R und R die vorstehend angegebenen Bedeutungen
besitzen;
(b) solche mit der allgemeinen Formel:
V - CH-CH CH2 /
II! / \5
O=C-H C- CH, - S - CH
CO0H S
worin R , R , R und R die vorstehend angegebenen 3edeutungen
besitzen und R einen aliphatischen oder aromatischen Rest bedeutet;
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BAD ORIGINAL ORlQiNAL INSPECTED
(c) solche mit der allgemeinen Formel:
R2 3
HH - CH - CH CE9
rz/ IIS V
**■' O = C-F C- CH9-S-R-
CO2E
2 1^
worin R und R die vorstehend angegebenen Bedeutungen "besitzen
lind R einen aromatischen oder substituierten aromatischen Rest
"bedeuten, sowie deren Alkalimetallsalze.
Zu dieser Unterklasse gehören Verbindungen, die sich von in dem Kern mit einer Amino- oder einer substituierten A:::inogruppe,
z.B. einer Alkylamino- oder Dialkylaminogruppe,substituierten
Tliiophenolen ableiten. Einfache Beispiele derartiger
Thiophenole sind o- und p-Aminothiophenol. Dazu gehören auch
Verbindungen, die sich von Thiophenolen ableiten, welche eine konjugierte Elektronen-anziehende Gruppe, d.h. eine derartige
Gruppe in o- oder p-Stellung oder gegebenenfalls in mehr al κ
einer derartigen Stellung enthalten. Beispiele dieser Art nucleophiler Kittel sind die verschiedenen !Titrothiophenole, z.B.
o-Hitrothiophenol und o,p-I)initrothiophenol.
Unter dem Ausdruck "Elektronen-anziehende Gruppe", dor
in der organischen Chemie bekannt ist, wird ein Substituent verstanden,
welcher Elektronen stärker als Wasserstoff anzieht, (siehe z.B. A.M. Remiek "Electronic Interpretations of Organic
Chemistry", John Wiley & Sons Inc., IJe?; York, 1943).
Beispiele für Elektronen-anziehende Gruppen, die in den bei aem erfindungsgemäßen Verfahren verwendeten nucleo-
4098 33/1001
10 -
philen Mitteln vorhanden sein können, sind Nitrogruppen, '
IVitrosogruppen, Carbonylgruppen, Carboxylgruppen, Cyanogruppen
und Trifluorrnethylgruppen.
(d) Solche mit der allgemeinen Formel:
a s
N - CH - CH CH9 «10
Il / VI
O=C-N C-CH2-N x
CO2H
2 3 9
worin R , R und Ti die vorstehend angegebenen Bedeutungen
besitzen und R ein Wasseretoffatom oder eine Alkylgruppe
bedeutet, sowie deren· Alkalisalze^
(e) (1) solche mit der allgemeinen Formel:
IT - CH - CH CH9 VIIa
ill ii
O=C-N C-CH9-S-R
CO2H
2 3
worin R und Ir die vorstehend angegebenen Bedeutungen be-
sitsen und R eine aliphatisch^ oder vorzugsweise substituierte
aliphatisch^ Gruppe bedeutet, sowie deren Alkalimetallsalze;
(2) solche mit der allgemeinen Formel:
R2
N - CH - CH CH2
o = C - N C-CH9-S-R12 VIIb
CO2H
A09838/1001
BAD ORIGINAL
- 11 - T795 48A
worin ί\ ei nt,-η heteroeyclischen Hing bedeutet, sowie deren
Salze, Wichtige Mitglieder der Unterklasse sirri Verbindungen, die von heterocyclischen Verbindungen mit geeigneten Substituenten
herstammen und die aus 5- oder o-gliedrigen Ringen und
aus heterocyclischen Verbindungen dieser Art, welche an 6-gliedrige
carbocyclische Ringe, z.B. Benzolringe, gebunden sind,
sich ableiten. Heteroatome, die in dem Ring vorhanden sein können, sind Stickstoff, Schwefel und Sauerstoff, wobei mindestens
einer davon Stickstoff sein rcui?. Üblicherweise ist die
Mercaptogruppe an ein Kohlenstoffatom des heterocyclischen
Rings gebunden und ein heterocyclisches Stickstoffatom steht
anstellend an dieses Kohlenstoffatom. Der heterocyclische Ring kann andere Substituents, ζ. 3. N-Alky !gruppen, ketonischen
Sauerstoff und dergleichen enthalten. In diese Unterklasse fallen deshalb Derive-te dos Thiazolins, Hydantoins, Imidazole,
Thiazols, Cxazols und dergleichen, ;jedoch enthält es keine
cyclischen Thioharnstoffe.
.Beispiele heterocyclische!" nucleophilei- Mittel, welche "
verwendet werden kennen, sind somit 2-I'ercaptcthia2:olin,
2-Iiercaptohydantoin, 1 -Methyl-t-mercapto-imidazol, 2-I.!ercaptoimidazol,
2-Mercapto-bensimida;iol, 2-Mercapto-benzthiazol,
2-IIercapto~benzoxazol und 2-Iaercapto-pyridin.
Als Beispiele für die Gruppe R'* seien aufgeführt:
A09630/1001 BADORIG1NAL
- 12 -
179b48A
- C
^IT—CH,
S CH,
N CH
il
V!T CH
cn,
CH CH
J \
/ITH-CO - CH j
V 'CO—HH
CH
- C
- C'
-ITH-C
CH
,CH
XCH
CH
Selbstverständlich können, obwohl diese heterocyclischon Verbindungen eis Thiole (Mercaptoverbindungen) oder Thionverbindungen
aufgeführt aind, diese als Thion-, Mercaptoswitteriontautomere
vorliegen und erfindungsgemäß werden auch derartige tautomere Formen umfai3t. Es sei bemerkt, daß die
heterocyclischen Verbindungen ala Mercapto- oder Thionverbindüngen
aus Gründen der Herköinmlichkeit beschrieben sind.
(f) Solche der allgemeinen Formel :
N - CH l3 O = C
- CH
CH
*C
CO2H
- IT.
VIII
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BAD ORIGINAL
I 7 9 r> 4 3
_2 3 -
worin h. und R' die vorstehend angegebenen Bedeutungen besitzen,
sowie deren Alkalisalze. Verbindungen dieser J.ri zc±qq?\ in: allgemeinen
vorteilhafte Löslichkeitseigenachaften in -.vaijrigen
!.!edier, und besitzen eine verbesserte in vitro-Aktivität gegenüber
grampositiven Organismen im Vergleich mit dem otamm-Oephalosporin,
falls das letztere aktiv ist.
(g) Solche mit der allgemeinen Pormel:
R? ^S N - CH - CH CH9
I I I -15 I^
Λ' 0 = C -IT ^C-CH2-R -\K
CO2H
2 3
v/orin R und R die vorstehend angegebene Bedeutung besitzen
1 "5
und R die Gruppe -S2O, oder -EPO,, bedeutet, sowie deren
Alkalisalze.
(h) Solche der allgemeinen Pormel;
N - CH - CH CHo
i I i = C-K /J-CH0-I1
CO2H
2 3
worin R und R die vorstehend angegebenen Bedeutungen besitzen und deren in dem Pyrrolring substituierte Derivate sov/ie deren Alkalisalze.
worin R und R die vorstehend angegebenen Bedeutungen besitzen und deren in dem Pyrrolring substituierte Derivate sov/ie deren Alkalisalze.
Die vorstehend aufgeführten Verbindungen besitzen im
allgemeinen antibakterielle Aktivität, wenn mindestens eine
40963c·'/1001
BAD ORIGINAL
Acylgruppe an der Aminogruppe in der 7-Stellung vorhanden ist
und einige dieser Verbindungen zeigen eine überlegene antibakterielle Aktivität gegenüber bestimmten Organismen, als es
das Stamm-Cephalosporinderivat selbst tut. Verbindungen von besonderer
Bedeutung sind die Thiouronium-^ubstituierten Thiouroniura-
und Azidderivate. Verbindungen, deren 7-Stellung durch eine unsubstituierte Aminogruppe besetzt ist, sind besonders
wertvoll al3 Zwischenprodukte zur Herstellung von Cephalosporinanalogen.
Eine Verbindung, die entsprechend der Erfindung hergestellt ist und die von besonderer Bedeutung ist, besteht in dem
Thiouroniumderivat des Benzylcephaloaporins und kann durch
folgende Formel v/iedergegeben v/erden:
C-CH2-S-C XI
Das Ultraviolettspektruni dieser Verbindung zeigt folgende Werte:
>H2° 2600 Ä, E^ 189. Es neigt markante biologische Aktivität
max ' cm
gegenüber Staph.aureus und B.subtilis. Die Aktivität dieses
Derivates gegenüber Staph.aureus war gegenüber derjenigen des Stamm-Cephalosporin C, Bensylcephalosporin und dem Thiouroniumsalz
des Cephalosporiii C überlegen. Es zeigte sich, daß es nicht nur eine signifikante Aktivität gegen penicillinsensitive
Stämme von Staph.aureus besaß, sondern auch eine markante Aktivität gegen wichtige 3tamine von penicillinresistenter.
409838/1001
BAD ORIGINAL
" 15 " 1 7 9 b 4 8 4
Stämmen von Staph.aureus. weiterhin erwies es sich höchst resistent
gegenüber Staphylokokkcn-Penieillinase ebenso wie natürlich
Cephalosporin C und Bonzylcephalcsporin. Eine andere Verbindung,
die ebenfalls wichtig ist, stellt das Thiouroniumsalz
des Cephalosporins C dar, welches sich gegenüber Staph.auroua
und B.oubtilis aktiver erwieg als Cephalosporin C.
Andere wichtige Verbindungen entsprechend der Erfindung,
v/elche eine etwas ähnliche Aktivität -wie die Verbindung der
Formel XI aufv/eisen, sind:
1) T-rencylthioaoetamidooeplialosporin-thiouroniunsals
CrHK. CH0. S. CH0. CCI-TH . CH - CH CH0
r\ ~. π T\T Γ CV *^.P TT "·"
2 ) 7-AllyIthioacetamidocephalcsporin-thiouror.iun^a"1 τ
'^.'.7./-J = OIiVhrj . ο . νΐίο . ^u . IMi » ^iI — Lh
C
C.
d.
,,
C = C - ii
XIII
3) 7-3-Benzylthiopropiunanidcccphal ο sporin-thi our oniuir.salz
CH2.S(CHg)2CO.HH.CH - CH
= C
II
.C-CH0-S-C 2
XIY
4 O S :■■ .rc- /1 O O 1
ßAD ORIGINAL
17 9 b 4 8 4
4) T-ii-PhenylpropioiianiidoGephalosporin-thiouroniunsalz
6H5.(CHg)2.CO.KE.CH
O = C
O = C
CK
GH
-c-
coj
.X2
XV
5) T-Pentancarboxamidocephalosporin-thiouroniuinsalz
CHx (CH0),,. CO. NH. CH - CH
— η
XVI
6) Y-n-Butylthioacetamidocephalosporin-thiouroniucisalz
I
C-CHo-S-C
C-CHo-S-C
;(CHg)5S.CH2.CO.HH.CH - CH ^2 m
O=C
XVII
co;
7) Y-p-Chlorphenylthioacetamidocephalosp-orin-thiouroniuinaalz
O=C -
C-CH2-S-C
co;
RHr
XVIII
409838/1001
ORIGINAL
8) 7 -ß-Phenä t-hyl thi ο ac e ta:si d ο c e phal ο 3 ρ or in-1 hi ourcni ums al ζ
-ö.
C6H5(CH2)2S„CH2.Cu.Mi«CH - CH "
IT
C-CH9-S-C , ■
V, ^ —it
9) 7-Piienylacetamiaoceplialosporin-azid
,S.
.CH2CC.TJH.CH - CH
O = C - H
O = C - H
CH,
- CH2 - iT
C"
CO2H
10) 7-Benzylthioacetamidoceph.alosporin-azid
,SH. CH - CIi CHo
!
O = C - IJ
O = C - IJ
β - CH9 - N,
11) 7-Phenylacetainidocephalosporin-inercaptopyridinderivat
C6H5.CH2CO.HH.CH - CH
CH
- N
-C ι
CO2H
■N-
XXII
40983B/1001
BAD ORIGINAL
- 18 -
12) T-Phenylacetarr-idocephalosporin-N-athyl-thiouroniumsalz
CcHkCH0.CO.NH.CH - CH CH0 ΤΓΤ n w
6 5 2 . - ,2 ira.C2H5
O=C-N C= CH-S-C XXIII
COO
13) T-Phenylacetamidocephalosporin-mereaptobenzoxazolderivat
C^-Hr- ♦ CH0CO. NH. CH — CH Cn0 »τ η' ηττ
6 5 d. ! I I^ Λ - Kj OH
O = C - N C-CHo-S-C ' ' "^1'
- C CH
CO2H
Die entsprechend der Erfindung erhaltenen Verbindungen können hydrolysiert v/erden, insbesondere diejenigen, die direkt
aus Cephalosporin C erhalten v/urden, wobei die entsprechenden 7-Aminocephalosporansäurederivate erhalten v/erden, die die
folgende Formel besitzen
- CH - CH CH0 I i i
CO2H
worin Z den Rest eines starken nucleophilen Mittels, v/ie sie oben definiert wurden, bedeutet. Diese Derivate stellen wichtige
Zwischenprodukte zur Herstellung von Acylderivaten dar, z.B.
von Phenylacetylderivaten.
09838/1001
BAD ORIGINAL
Die entsprechend der Erfindung hergestellten Verbindungen können zur Verabreichung auf irgendeine übliche v/eise entsprechend
anderen antibiotisch wirksamen Substanzen formuliert
werden.
So können die Verbindungen zu injizierbaren Präparaten
in Lösung oder Suspension in einem geeigneten Kedium, z.B.
sterilem, pyrogen-freien 'wasser verarbeitet werden. Andererseits können sie mit festen Trägerstoffen vermischt und dann gegebenenfalls
zu Tabletten gepre;3t oder in Kapseln abgefüllt v/erden. Sie können auch mit geeigneten Grundlagen zur Herstellung von
Suppositorien vermischt werden.
Einige der erfindungsgemäß erhältlichen Verbindungen besitzen
eine niedrige Löslichkeit und e,? wurde gefunden, daß die Löslichkeit dieser Verbindungen verbessert werden kann,
wenn ein physiologisch verträgliches, wasserlösliches Amid als Löslichkeitsaktivator zugesetzt wird.
Das wasserlösliche, verwendbare Amid muß physiologisch
verträglich sein und darf infolgedessen keine unzulässigen
toxischen Effekte bei den angewandten Verhältnissen hervorrufen.
Bevorzugt werden Harnstoff oder nicotinamid verwendet,
da diese Substanzen physiologische Substanzen darstellen und im Fall von Harnstoff der Körper mit einem genügenden Entfcrnungomechanismus
für dasselbe versehen ist, während Nicotinamid ein Glied des B-Komplexes der Vitamine ist. Jedoch können andere
wasserlösliche Amide, z.B. Acetamid ebenfalls verwendet werden, welche keine unzulässigen toxischen Effekte hervorrufen. Ss sei
S «/1001
- 20 -
bemerkt, daß die Verabreichung eines wasserlöslichen Amides, insbesondere parenteral, Atnlc.ß zu. einigen Nebeneffekten, wie
z.B. Verminderung des Blutdruckes geben kann, jedoch können derartige kleine ITebeneffekte in vielen Fällen hingenommen werden.
Im allgemeinen wird die Verwendung von Amiden, welche Feststoffe bei 200C sind, bevorzugt.
Obwohl die erfindungsgemäß erhältlichen Verbindungen sowohl
für orale als auch für parenterale Verabreichung formuliert werden können, sind sie von besonderer Bedeutung zur Herstellung
von injizierbaren Präparaten für intramusculäre oder
subcutane Injektion. Die Präparate können auch als trockene Genische des antibiotischen Materials zusammen mit dem Amid
hergestellt werden, wobei diese Gemische zur Auflösung oder Dispersion in pyrogen-freiem Wasser vor der Injektion geeignet
sind. Die Substanzen können auch zur oralen Verabreichung verarbeitet
werden, wobei gegebenenfalls weitere Trägerstoffe, z.B. Geruchsmittel und Süßungsmittel zugesetzt werden können.
Lösungen und Suspensionen der aktiven Substanzen entsprechend der Erfindung kennen auch v/eitere löalichaachende
Substanzen enthalten, insbesondere physiologisch verträgliche wasser-mischbare organische Lösungsmittel für das aktive ?tlaterial,
z.B. Alkohol, Propylcnglycol, Dimethylformamid, Dimethylacetamid und dergleichen. Es sei bemerkt, daß einige dieser
Substanzen zur parenteralen Verabreichung nicht geeignet sind, während sie für orale Verabreichung geeignet sind und umgekehrt.
Das Verhältnis von Amid zu Antibioticum in den Präparaten variiert entsprechend der Konzentration der Lösung, die ge-
409838/1001
BAD ORJGJNAL
1795434
vmnscht v/ird. vVerm es gewünscht v;ird, dan Antibioticum in einer
wäßrigen Lösung, die "bereits das Amid enthält, zu lösen, wird
es im allgemeinen bevorzugt, daß die lösung gesättigt oder nahezu
gesättigt im Hinblick auf das Amid sein sollte, da bei größeren !'engen des Amides in der Lösung auch die Löslichkeit
des Antibiotikums darin größer ist. Die I.Ienge an erforderlichem
Amid hängt sowohl von dem speziellen Amid und dem speziell
verwendeten Antibioticum ab, jedoch sollte im allgemeinen dao Amid in einer Menge vorhanden sein, die mindestens das 2-fache
und vorzugsweise das 10-20-fache der gesamten Gev/ichtsnenge
des vorhandenen Antibioticums ausmacht, da die Löslichkeit des
Antibioticums im allgemeinen mit steigenden !.!engen Amid ansteigt.
Die Verbindungen entsprechend der Erfindung Irönnen in
Kombination mit anderen antibakteriellen Antibiotica, insbesondere
den Penicillinen, z.B. Penicillin 3· und/oder den 2etra~
cyelinen verabreicht werdan.
Die folgenden Beispiele dienen zur weiteren rrlivuteruiv"
der Erfindung. Bei den Beispielen wurden die folgenden Tests und Versuchsanordnungen angewandt.
Papi erchromatographi
e
Wasserfreies Mnatriumhydrogenphosphat (7,05 g) in
2,5 Liter Wasser (0,02 K) wurde mit Phosphorsäure auf pH 6 eingestellt; ^natman-Papiere T-To. 1 (30 χ 50 cn) wurden in dio
vorstehende Lösung eingetaucht und bei 370C über !!acht ge-
brccknet.
4098 3 3/1001
BAD ORIGINAL
Plydratisiertes Natriuinacetat (13,6 g) in 1 Liter Wasser
(0,1 M) wurde mit Essigsäure auf pH 5 eingestellt; Vhatman-Papiere
No.1 (30 χ 30 c:n) wurden in die vorstehende Lösung eingetaucht und getrocknet.
Die Papierchromatogramme wurden auf den phoaphat-gepufferten
Papieren in (Λ) Butan-1-ol-Äthanol-Wasser (4:1:5;
Volumen) und (B) Propan-1-ol-'Vasser (7:3- Volumen) laufen gelassen.
Ebenso wurden die Natriumacetat-gepufferten Papiere in Essigsäureäthylester-Natriumacetat-System (Essigsäureäthylester
gesättigt mit Natriumacetat-Puffer pH 5,0) laufen gelassen.
Die Elektrophorese wurde auf Whatman 3MM-Papier bei
17 v/cm (während 2,5-4 Stunden, falls nichts anderes angegeben ist) in wäßriger Collidinacetatlösung (0,05 M bezüglich
Acetat) pH 7,0 und Pyridinacetatlösung (0,05 M bezüglich
Acetat) pn 4,0 laufen gelassen.
Die Ergebnisse der Elektrophorese sind ausgedrückt als der von den Derivaten erzielte Abstand in Beziehung zu dem Abstand
von Cephalosporin C oder gegebenenfalls Benzylcephalosporin
C unter denselben Bedingungen. Ein positiver (+) V/ert
bedeutet Wanderung zur Anode, d.h. das Molekül ist negativ geladen, während ein negativer (-) Wert eine Wanderung gegenüber
der Kathode bedeutet, d.h. positive Ladung.
Die Glieder der Benzylcephalosporinreihe sind als dunkle
40983 8/1001
BAD ORIGINAL
Flecken zu sehen, v/er.ri äas Papier vor eine Quelle für Ultraviolettlicht
( A 230-300 mu) gebracht wird (Benzylcephalosporinderivate
geben natürlich keine Färbung mit ITinhydrin}. Sie
ließen sich auch mittels Bioautographen auf Agarplatten, die
mit S. aureus C864 (Oxford H-Stamm), B.subtilis ATCC 6633
oder V.cholerae C833 (abgeschwächter Laboratoriumcstamm) inoculiert
waren, feststellen«
Die Glieder der Cephalosporin-C-Reihe liefen sich ala
dunkle Flecken sehen, wenn das Papier vor eine Quölle für Ultraviolettlicht (230-300 irfi) gebracht wurde und erscheinen
als dunkle Flecken, wenn das Papier mit ITinhydrin besprüht
wird. Sie lassen sich auch mittels Bioautographen auf Platten, die mit S.aureus C864 (Oxford Η-Stamm) oder B.subtilis ATCC
6633 inoculiert sind, feststellen.
(a) Herstellung des Thiouroniur.salzes Von CephaltsOorin C
5 g des ITatriumsalzes von Cephalosporin 0 wurden zusammen
mit 8 g Thioharnstoff in 200 con destilliertem .-/asser
gelöst und im Dunkeln bei 37° einige Tage stehen gelassen. Der Verlauf der Reaktion wurde durch PapierChromatographie verfolgt.
Nach 4-5 Tagen zeigte sich, daß wenig Cephalosporin C
übrig war. Die erhaltene Losung wurde mit 1000 ecm Aceton
behandelt und auf 0 C abgekühlt. Der ölige, sich bildende Niederschlag wurde durch Zentrifugation abgetrennt und es ergab
sich bei weiterer Behandlung mit Aceton ein blaßbrauner feater Stoff (3,7 g). Unter denselben Bedingungen blieb eine
0 9 S ;: * / 1 0 0 1
Losung von Thioharnstoff (Konzentration 4 g/1000 ecm) klar.
Der blaßbraur.e Feststoff, der das gesamte biologisch aktive
Material enthielt, wurde in 50 ecm Wasser gelöst und durch
eine Säule (26,0 χ 2,5 cm) von Dowex - 1 (x 8) im Acetatzuatand
gegeben. Das Thiouroniurasalz wurde rasch aus der Kolonne gelöst
und erscheint meist mit der Lösungsmittelfront. Me Kolonne wurde mit Wasser eluiert und 25 ccm-Fraktionen gesammelt.
Die Untersuchung dieser Fraktionen durch Papierchromatographie zeigte, daß nur Spuren von Thioharnstoff in den Lösungen
des Thiouroniumsalzes vorhanden waren und daß das gesamte
unumgesetzte Cephalosporin C entfernt war. Die wäßrigen
Lösungen, die die Thiouroniumverbindung enthielten, wurden
gefriergetrocknet, wobei sich ein cremefarbiger fester Stoff (2,58 g) ergab. Dieses Material wurde weiterhin durch Extraktion
mit absolutem Methanol zur Entfernung des vorhandenen Katriumacetates
gereinigt, wobei die Thiouroniumverbindung als flockiger, fester Stoff (2,18 g) erhalten wurde. Ultraviolettabsorption
(in H9O) ^ max. sehr breit 2590 - 2640 Ä e]J 161.
Da3 Thiouroniumsalz wurde als weißer mikrokristalliner
Feststoff durch vorsichtige Ausfällung aus einer wäßrigen Lb'3ung mittelsMethanol erhalten. Ultraviolett-Absorption(in KgO)
λ max. sehr breit 2590 - 2640 % eJJ 189. Bei der Elektro-
ι cm
phorese auf Papier zeigte das Produkt, wie zu erwarten, keine
Änderung bei pH 7,0 oder pH 4,0.
Bei Papierchromatographie in Butan-1-ol-äthanol-l7asser
war der Rf-Wert (J 0,02) des Salzes niedriger als derjenige
409838/1001
BAD ORIGINAL
I 79b. 34
des Cephalosporins C (0,03). In gleicher Weise war der Hf-Wert
in Propanol-v/^sser niedriger (0,11) im Vergleich zu Cephalosporin
C (0,22). Durch Papierchromatographie wurde festgestellt, daß sich bei saurer Hydrolyse sowohl a-.usinoadipinsäure als
auch Thioharnstoff ergibt.
Aus diesen Eigenschaften ergibt sich, daß die Acetoxygruppe
in dem Cephalosporin C durch den Thiouroniunrest
ersetzt wurde.
(b) Saure Hydrolyse des Cephalosporin-thiouroniunsalzes
50 mg Cephalosporin-thiouroniumsalz wurden in ·2 ecm
Salzsäure von verschiedenen Stärken (a) n/10, (b) 1n, (c) 2n,
(d) 3n, (e) 4n, (f) 5n gelöst und 1. beim Raumtemperatur von
ca. 25°C und 2. bei 37°C einige Tage stehen gelassen. Aliquote Teile von 10 /al wurden in geeigneten Zwischenräumen entnommen.
Die Reaktionen wurden durch Papierchromatcgraphie-und
Elektrophorese verfolgt. In allen Fällen wurde die Thiouroniumverbindung (Rf 0,11) in ein schneller wa2iderndes Material (TS
0,20) verwandelt, welches sehr nchv/ach biologisch aktiv sowohl gegenüber S.aureus \m& B.subtilis war und leicht unter U.V.Licht
als dunkle Zone (wie sämtliche Cephalosporinderivaxe) sich feststellen
ließ. Beim Besprühen der Chrcmatogramme mit (a) wäßrigem
Pyridin und anschließend (b) mit einer Acetonlösung von Phenylacetylchlorid
ergab dieses rascher wandernde I.Iaterial (Ef 0,20} ein sehr biologisch aktives I'aterial. Ähnliche Verfahren
wurden angewandt, um dieses Material nach der Elektrophorese
festzustellen, bei welcher es sich, schneller zu der
PH
Kathode bei/4,0 bewegte als das CephaiosporinthiouroniumEuls.
Kathode bei/4,0 bewegte als das CephaiosporinthiouroniumEuls.
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BAD ORIGINAL
■1796484
Aufgrund direkter Analogie mit Cephalosporin ist dieses Material das 7-Aminocephalosporan-Thiouroniumsalz. Aus diesen
Vorversuchen ergab es sich, daß geeignete Bedingungen für die Herstellung von 7-Aminocephalosporan-Thiouroniumsalz (d.h.
des Thiouroniumkerne3) vorliegen, wenn das Thiouroniumsalz
mit .2-3n-Salzsäure 3-4 Tage lang behandelt wird.
(c) Abtrennung des Thiouroniumkernes aus der sauren Hydrolyse
des Cephalosporin-C-Thiouroniumsalzes -
Die Säule und die Puffer wurden entsprechend dem Verfahren von Hirs, Moore und Stein, J.Biol.Chem. 1952, 195, 669
hergestellt.
500 mg Cephalosporin-C-Thiouroniumsalz wurden in
20 ecm 2n-Salzsäure gelöst und 3 Tage stehen gelassen. Der pH-Wert
der Lösung wurde dann auf pH 4,0 mit Natriumhydrogenearbonat eingestellt. Die Lösung wurde dann biologisch bei diesem
Punkt untersucht und es zeigte sich, daß etwa 305» der ursprünglichen
biologischen Aktivität noch vorhanden waren. Diese Lösung wurde durch eine Kolonne (2,5 x 30 cm) von Dowex -50
(ML-Zustand) gegeben und mit einem Ammonium-Formiat-Puffer
■(pH 4,05, 0,2M) eluiert. Fraktionen von 10 ecm wurden gesammelt
und entsprechend ihrer Ultraviolettabsorption analysiert. Es wurden 60 Fraktionen gesammelt, von denen die Fraktionen 8-28
die Gipfelfraktion enthielten. Die Untersuchung dieses liateriala nach der Gefriertrocknung zeigte, daß es unverändertes Cephalosporin-C-Thiouroniumsalz
zusammen mit anderen Hydrolyseprodukten enthielt. Es war kein Thiouroniumkern in irgendeiner dieser
Fraktionen vorhanden.
409838/1001
BAD ORJGJNAt
ρι->
Portgesetzte üluierung der Säule mit Ammoniumacetatouffer
(pH 6,8, 0,2 M) ergaben den TC err. als breiten Gipfel (Pre-ktionen 70 - 90). Diese Lösung, welche den Ihiouroniurnkern
enthielt, was durch Papierchrornatographie und Biov^rsuch nach
der Besprühung mit Pyridin und Phenylaeetylchlorid gezeigt wurde,
wurde unter Verwendung eines großen Überschusses von Phenylacetylchlorid
phenylacetyliert, wobei der pK-Wert der Lösung
bei 7 durch Zugabe von IJatriumhydrogencarbonat gehalten wurde.
Die erhaltene Lösung enthielt Bensylcephalosporin-Ihiouroniumsalz
als einzig aktives Material. Direkte Isolierung des Kerns war nicht möglich in diesem Pail, da nicht der gesamte Anmoniumacetatpuffer
entfernt werden konnte. *
Bei den Beispielen 6-19 wurde das folgende Versuchsverfahren angewandt.
250 mg (0,5 mi.Iol) des llatriusisalses von Cepjialosporin C
wurden in 10 ecm einer wäßrigen Losung de? in elrvir jl^nge von
5 Juli öl vemvendeten nucleophilen Reagenses gelöst. Eor pE-V;rert
dc-r Lösung lag zwischen 5,0 und 7,5 und wurde erforderlichenfalls
auf einen wert innerhalb dieses Bereiches durch Zugabe von Essigsäure eingestellt. In bestimmten Fällen, v/o die Löslichkeit
in Wasser niedrig war, z.B. bei Diphenylthioharnstcff, wurde die Reaktion in 507'igem (v/v) Dimethylformamid durchgeführt. Das
Gemisch wurde bei 370C gehalten und nach entsprechenden Zwischenräumen,
z.B. 24, 4S und 72 Stunden wurden 5 oder 10 μΙ-Prcben
auf Papier aufgetragen zur Analyse sowohl durch Elektrophorse als auch durch Chromatographie. Durch Bioautographien ergaben
sich die neuen Substitutionsprodukte und das restliche Ceph:.lo~
4 0 9 8 3 ε / 1 0 0 1
179b484
sporin C. Ähnliche Ergebnisse wurden nach der Besprühung mit ITinhydrin erhalten.
Die Elektrophoreseergebnisse sind als Wanderungsabatand
des Derivates in Beziehung zu der Stamm-Cephalosporinverbindung
unter denselben Bedingungen angegeben. Ein positiver (+)Vfcrt bedeutet Wanderung zu der Anode, d.h. das Molekül ist
negativ geladen, während ein negativer (-)Wert Y/anderung zur Kathode bedeutet, d.h. das Molekül ist positiv geladen. Die Ergebnisse
dieser Beispiele sind in Tabellenform nachfolgend wiedergegeben.
Bei- liucleophiles spiel Mittel
Reaktions- Rf-V/ert Elektrophorese
medium
auf CephJ pH 4,0 jC bezogen
pH 7,0
Formel d.Derivates (in allen
Fällen R^=H5 r2'
HOOC-CH(IiH9)-(CH9)^-CO-)
Thioharnstoff
Ho0
0,53
-0,19
-0,26
Formel III K4, r5, Rb u.
FJ = H
Phenyl thioharnstoff
K2O
Reaktion durchgeführt bei 500C
,
Formel III r4 = Phenyl R5,r6 u.Ri
= H
Diphenylthioharnstoff ■
Dimethyl- j
formamid/ !
H2O
(70:30 v/v); 2,43**
Formel III m = Phenyl R° = P
u.R' = H
Äthylenthioharn stoff
Dimethyl- \ formamid/ \
H2O ,
(70:30 v/v)! 0,64
Formel III
r4 u.r6 zusammen
= Äthylen
T?5 ii r7 —* TT
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ORIGINAL
Ί795484
Bei spiel |
i i Nucleophiles Mittel |
Reaktions- medium |
Rf-v/ort auf Ceph C "bezöge |
Elektr .pH 4,0 η |
oühorese pH 7,0 |
Pormel d.Deri- vatea(in ειΐΐοη Fällen ?,2=Η;Ε3 HOOC-CiI(NlI2)- (CH2)3-CO-) |
ι |
6 | Thioacet- amid |
H2O | 1,41** | — | - | Formel IV r4 und r5= H R8 = Methyl |
|
7 | Anilin . | H2O | 1,86 | -0,12 | +0,69 | Formel VI RIO = H . r9 = Phenyl |
|
8 | N-Methyl- anilin |
ÄtOH/H9O (50:50 v/v) |
2,17 | -0,17 | +0,65 | Pormel VI RIO = !,!ethyl r9 = Phenyl |
|
9 | p-Nitro- anilin |
.Dimethyl formamid/ K2O (70:30 v/v) |
1,84 | +0,85 | +0,72 | Formel VI R^O = η R9=_/~\_HÖ2 |
|
10 | Uatrium-p- amino- bensoat |
H2O | 0,52 | Pormel VI R10 = H R9=- /7~\ -COOIT |
|||
11 | Natrium- sulf- anilat |
H2O | 0,36 | — | — | Poracjl VI R10= II Q /'—\ A =—c" 'V -oO,Jj |
|
12 | a-Naphthyl- amin |
Dimethyl- formamid /HpO (70:30 v/v) |
I 2,19 |
Pormel VI PJ6= H r9=~O |
|||
13 | TMo- phenol |
Ät0H/H20 (50:50 v/v) |
2,17 | — | - | Formel -V R9= Phenyl |
|
** Reaktionslösung enthält auch weitere biologisch aktive Verbindungen.
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• ·
• · ■
- 30 -
■ 179b484
Bei spiel |
ITucleophiles Mittel |
Reaktions- medium |
Rf ~.v ort auf Cep C bezog |
Elektr« h. pH 4,0 en |
• | DOhorese "pH 7,0 |
I | Formel d.Deri vates (in allen Fällen R2=H;r3= HOOC-CII(NHp)- (CHg)3-CO- ) |
14 | 2-Amino- ätiianthiol |
H2O | 0,42 | +0,33 | +0,35 | Formel VII R11= -CgH4-NH |
||
15 | ITatrium- thiosulfat |
H2O | 0,32 | +1,86 | +2,29 | Formel IX R1^= SgO, Na-SaIz |
||
16 | Natrium-. azid-Ion |
H2O | 1,14 | +1,02 | ' +1,04 | Formel VIII ...: Natriumsalz |
||
17 | Natrium- phosphat |
H2O | 0,66 | - | - | Formel IX R1 = HPO, Natriumsalz |
||
18 | Pyrrol | H2O · | 1,73 | - | — | Formel X | ||
19 | p-Nitro-E- methyl anilin |
Dimethyl formamid /H2O |
2.03 | Formel VI R10= CH5 r9="O"n°2 |
(a) 72 mg des·Natriumsalzes des Benzylcephalosporins
wurden zusammen mit 128mg Thioharnstoff in 3 cbm destilliertem
Y/asser gelöst und im Dunkeln bei 37°C einige Tage stehen gelassen
Nach 3 Tagen wurde der gebildete weiße Niederschlag durch Zentrifugieren
entfernt.
Dieses Material wurde mit Aceton und Äther gewaschen und ergab einen weißen, festen Stoff (28,9 mg). Eine v/eitere
409838/10 01
BAD ORIGINAL
Ί V y b 4 8 Λ
Menge (etwa 5 mg) diest-s Materials wurde aus den Mutterlaugen
erhalten. Diener Feststoff ergab einen einzigen "biologisch aktiven
Flecken "bei der Chromatographie im Propanol/Wasser-System
(7:3; Volumen). Rf-Wert = 0,74. R-V/ert Benzyl ceph.= 0,91.
Die Untersuchung der Mutterlauge durch Chromatographie zeigte das Vorhandensein von unverändertem ITatriumsalz
des Benzylcepholosporins (Rf 0,81), von Thioharnstoff (Rf 0,50) und geringer Mengen des Benzylcephalosporin-Thiouroniumaalzes
(Rf 0,74). Das auf diese Weise erhaltene Benzylcephalosporin-Thiouroniumsalz
war in V/asser sehr spärlich löslich ( «5 mg/ccn)
Bei der Papierelektrophorese ergab sich, daß es keine Ladungsänderung bei pH 7,0 erhält. Ultraviolettspektrum
(in H9O) /\max. 2600 Ä E^n, 189.
(b) Bei der Phenylacetylierung eines entsprechend Beispiel
1(b) erhaltenen Gemisches in wäßrigem Aceton (50 v/v) unter Verwendung eines großen Überschusses von Phenylacetylchlorid,
d.h. den Bedingungen, die zur Umsetzung mit dem Cephalosporinkern verwendet wurden, ergab sich eine Lösung, die das
Benzylcephalosporin-Thiuroniumsalz, das durch seinen Rf-Wert im
Vergleich mit einer, authentischen Probe identifiziert wurde, zusammen mit anderem biologisch aktiven Material, z.B. dem .
Cephalosporin-C-Thiouroniurnsalz und N-Phenylacetyl-cephalosporin-C-Thiouroniumsalz
enthielt. Die Gesamtausbeute der Umwandlung von Cephalosporin-C-Thiouroniumsalz in das Benzylcephalosporin-Thiouroniumsalz
liegt in der Größenordnung von 4/u.
Copy
409838/1001
SAD ORIGINAL
Beispiele 21 - 34.:
250 mg (0,5 KiMoIe) des ITatriurnsalzes von Cephalosporin
C wurden in einer wäßrigen Acetonlosung (50 v/v j 10 ecm)
des nucleophilen Mitteln (1,5 mMol, d.h. 3 molare Äquivalente)
gelöst. Der pll-V/ert der Lösung "betrug zwischen 5,0 und 7,5
und wurde erforderlichenfalls auf einen Wert innerhalb dieses Bereiches durch Zugabe von Essigsäure oder Natriunbicarbonat
eingestellt. Das Gemisch wurde bei 37 oder 500C gehalten und
nach entsprechenden Zwischenräumen, z.B. 24, 48 und 72 Stunden usv/.) wurden 5 oder 10 ul-Proben zur Analyse sowohl durch
Elektrophorese als auch durch Chromatographie entnommen. Bei Bioautographien ergab sich das neue Substitutionsprodukt und
restliches Cephalosporin C. Ähnliche Ergebnisse wurden nach Besprühen mit Ninhydrin erhalten.
Beispiele 35-54
Aufgrund der durchschnittlich größeren mikrobiologischen Aktivität der Benzylcephalosporin-C-P.eihe und auch der
bequemeren Untersuchung wegen wurden verdünntere Lösungen als im Vorstehenden angewandt, z.B. wurde 7-Phenylacetainidocephalosporansäure
(Benzylcephalosporin C) als Natriumsalz in einer Menge von 10 mg in einer wäßrigen Acetonlöaung (50 v/vj
2 ecm) des nucleophilen Mittels (3 molare Äquivalente) gelöst. Die Reaktion wurde wie bei den vorstehenden Beispielen durchgeführt
mit der Ausnahme, daß aliquote Teile von etwa 1 ul zur Chromatographie und Elektrophorese verwendet wurden.
4098 3 3/1001
Die Ergebnisse sind in tabellarischer Form in den nachfolgenden Tabellen II und III v/iodergegeben. In den Tabellen
bedeutet ?.V. das System Propancl/v/asser und 3.E.V7. das System
Butanol/Äthanol/tVasser.
Tabelle II
Nucleophile Substitution von Cet)halosporin C
'Bei- i
ispiel!
I Hucleophiles Mittel
l·? R Ceph.-C-Y/ert
TTT^ E.E.V/.
TTT^ E.E.V/.
Elektrophorese :pH~4".ü pH '/'.0
21 lthylenthioharnstoff
22 2-Mercaptothiazolin
23 2-Mercaptohydantoin
24 i-I.Iethyl-2-iaercaptoimidazol
25 2-IvIercapto-imidazol
26 2-Mercaptobenziraidasol
27 2-Mercaptobenzothiazol
28 2"Mereaptobenzoxasol
29 2-Aminothiophenol
30 4-Aminothiophenol j 31 4-Kitrothiophenol
32 2,4--Dinitrothiophenol
35 j 2--Amincathanthiol
thiol
0.63 j von Ceph.C r0.27 nicht trenn-j
bar !
bar !
| -0.67
1.55 1.64 0.75
i 2.0 j 2.0
J1.,
i 2.4 2.25 1.75 2.0 0.44-4.11
5.35
5.35
•-0.77
von Ceph.C J-0.15 nicht trenn-!
bar
bar
von Ceph.C j-0.16 nicht trenn-'
bar I
bar I
4.6
8.0
8.0
10.0
10.0
j 8.0
8.0
8.0
10.0
10.0
j 8.0
!
4.0
4.0
0.2
-0.39
i+0.65
j+0.79
!+0.80
j+0.04 i+0.93 !+0.63 !-fO.22
-0.20 +0.52
+0.39
+0.22 j +0.54 +0.50 +0.74 +0.53 +0.69 +0.55 +0.25
! 0.55 ι I-0-50 j -0.0S
4098 ·3ΰ/1001 BAD ORIGINAL
- 34
Tatelle III
I79S484
Bei spiel |
! liucleophiles Hittel | R-Benzyl-C C-\Vert |
4- | I von Benzyl Ceph-C nicht trennbar |
I
Y |
eph.- | Ac* | j Elektrophorese |
4.0 | I pH | 0 | 7.0 |
IB.E.-.7. A | • | 1.15 | .08 | ■pH | .17 | -1 | .58 | |||||
35 | Äthylenthioharnatoff | 1.17 | 0 | .06 | -0 | .20 | -0 | .20 | ||||
36 | 2-Mercaptothiazolin | v.Benzyl- Ceph.-C nicht trennbar |
3 | .09 | -0 | .20 | +0 | .56 | ||||
37 | 2-Mercaptohydantoin | 1.15 | 0 | .41 | -0 | .H | -0 | •51 | ||||
38 | i-I.lethyl-2-mercapto- imidazol |
1.25 | 0 | .25 | -0 | .22 | +0 | .19 | ||||
39 | 2-Mercapto-imidazol | 1.25 | 0 | ■ 9 | -0 | .17 | +0 | .18 | ||||
40 | 2-Mercaptobenzimidazöl | 1.25 | 1 | 5 | -0 | .45 | +0 | .29 | ||||
41 | 2-Mercaptobenzothiazol | 1.20 | 3. | .3 | +0. | ,66 | +0 | .48 | ||||
42 | 2-Mercaptobenzoxazol | 1.25 | 3 | 35 | +0. | 27 | +0. | 54 | ||||
43 | 2-Aminothiophenol | 1.20 | 3- | 4 | +0. | 0 | +0. | 0 | ||||
44 | 4-Aninothiophenol | 0.80 | 3. | 35, | +0. | 65 | -0. | 73 | ||||
45 | 4--lTitrothiophonol | 0.75 | 3. | 05 | +0. | 27 | -0. | 25 | ||||
46 | 2-Aminoäthanthi öl | 1.1 | 0. | 05 | -o· | 27 | +0. | 25 | ||||
47 | 3-Din:ethylaminopropan- thiol |
1 | 0. | 0 | -0. | 73 | +0. | 55 | ||||
48 | 2~I/icrcapto~4--ir.ethyl- pyrimidin |
1.15 | 3. | 3 | +0. | 72 | +0. | 52 | ||||
49 | 2-Ar.ino-5-mercapto-1 ,3, thiadiazol |
1.0 | 0. | 6 | +0. | 3 | ||||||
50 | 2-Hercaptopyridin | 1.0 | 3. | — | - | |||||||
51 | Äthylthioharnstoff | 1.23 | 0 | 0 | +0. | |||||||
52 j | Isopropylthioharnstoff | 1.25 | 0 | 12 | 0 | 12 | +0. | 68 | ||||
53 | Anilin | 3. | 46 | -0. | 04 | 44 | ||||||
54 | p-Nitroanilin | 2. | +0. | |||||||||
* A't.Ac. = Essigsäureäthyleater
/»09830/1 001
BAD
5 g Cephalosporin C in 75 ecm Wasser wurden unter Rühren
zu einer Lösung von 5 g 2-Mercaptoben2cxazol in 215 ecm Aceton
und 60 ecm Wasser zugegeben und der pH-Wert von 5 mit n-Natriuinhydrcgencarbonat
auf 6,6 eingestellt. Das Gemisch (ca. 60 v/v Aceton) wurde "bei 370C vier Tage gehalten, wobei sich "bei
Papierchromatographie das Vorhandensein nur noch geringer Mengen Cephalosporin C ergab. Das Reaktionsgemiseh wurde dann bei
auf 2 Liter mit Aceton verdünnt.
Filtrierung nach 3 Stunden ergab einen ziemlich weißen
festen Stoff (4 g Ausbeute, 80$ Gewicht/Gewicht Cephalosporin C), der durch Papierchromatographie einen Gehalt einer kleinen
Menge (ca.5 ^Cephalosporin C ergab. Das rohe Substitutionsprodukt zeigte die chrcmatographischeii und elektrophore-tischen
Eigenschaften, die in Tabelle II (Beispiel 28) aufgeführt sind. Es war in Wasser stark löslich.
Herstellung des 2~Mercr,ptobenzthiazolderivatos von
<■
Bensylcephalooporin C
435 mg des lTatriunsalze3, von Benzylcephalosporin C in
4 ecm Wasser wurden zu einer Lösung von 496 mg 2-Kereaptobenzothiazol
in 6 ecm Aceton gegeben und der auftretende pH-Y/ert
auf 7,0 mit n-IIatriumhydrogencarbonat eingestellt. Das
Genisch wurde bei 500C während 65 Stunden gehalten, wo praktisch
das gesamte Ausgangsmaterial umgesetzt war (Papier-
403 /10 0 1
BAD ORIGINAL
Π95484
Chromatographie).'Das Aceton wurde dann im Vakuum entfernt und
die hinterbleibende wäßrige Suspension mit 10 ecm Wasser behandelt
und mit Easigsäureäthylester bei pH 6 in Gegenwart von gesättigtem Natriumchlorid (5 ecm) extrahiert. Ein ziemlich
weißer, fester Stoff (A) wurde während der Extraktion abgetrennt. Die hinterbleibende wäßrige Lösung nach dieser Extraktion
wurde auf pH 2 eingestellt und weiterhin mit Essigsäureäthylester extrahiert. Der Extrakt bei pH 6 (486 mg) enthielt
unverändertes nucleophiles Mittel und das gewünschte Substitutionsprodukt. Der Extrakt bei pH 2 (65 mg) enthielt Spuren
von unverändertem Benzylcephalosporin C.
Der Peststoff (A) (unlöslich in Aceton; 136 mg) bestand
aus dem gewünschten Substitutionsprodukt mit den in Tabelle III (Beispiel 41) aufgeführten chromatographischem und elektro- ·'
phoretischen Eigenschaften und war chromatographisch homogen.
100 mg des Natriumsalzes von Benzylcephalosporin C r'
wurden in 1 ecm Wasser gelöst und mit einer Lösung von 85 mg
(3 molare Äquivalente) von 1-Methyl-2-mercaptoimidazol in 1 ecm
Aceton behandelt. Die erhaltene Lösung wurde bei 370G einige
Tage stehen gelassen, wobei die Reaktion durch Papierchromatographie verfolgt wurde. Nach. 4 Tagen wurde der Überschuß des
nucleophilen Mittels aus dem Reaktionsgemisch durch Extraktion mit Chloroform (2x1 ecm) entfernt und der pH-Wert der hintor-
409833/1001
BAD ORIGINAL
• ·
7 y r -'· 3
bleibenden wäßrigen Lösung auf ca. 2,5 entweder mit Phosphorsäure
oder mit Amberlite IH.120 (H+) eingestellt. lurch Extraktion
mit Essigsäureäthylester (3x2 ecm) wurde dan restliche
unveränderte Benzylccphalosporin C entfernt. Die hintcrbleibendo
wäßrige Lösung, die das neue Substitutionsprodukt enthielt, v/urde
auf pH 7 mit liatriumhydrogencarbonat oder Deacidite G(CO-,")
eingestellt und gefriergetrocknet.
Durch Untersuchung mittels Papierchromatographic und
Elektrophorese ergab sich nur ein biologisch aktives Material,
d.h. das Benzylcephalosporin-Thioimidazoliniumsalz, obwohl unterschiedliche
Mengen organischer Salze vorhanden waren, je nachdem, ob lonenaustauschharse zur Einregelung des ρΕ-..'ertes verwendet
wurden. Das Benzylcephalosporin-Thioimidazoliniumsalz
war sowohl gegenüber S.aureua als auch V.cholerae aktiv,
(a) Herstellung von Phenoxynethylcephalosporin
?00 ffigrn 7-Aminocephalosporansäure [IkCk) (E '_ = 260 1
= 300 κμ), gelöst in 25 ml 3'piger 'JaHC0, (5 molare Ä'qui/alente)
wurde mit 16 ml Aceton behandelt, Me Lösung wurde auf unterhalb 50C .abgekühlt und mit einem LIagnetrührer gerührt, während 576 mg
Phenoxyaeetylchiorid, gelöst in 10 ml Aceton tropfenweise im
Verlauf von 30 Minuten zugegeben wurden. Die Lösung wurde im
Verlauf einer Stunde auf Raumtemperatur gebracht. Das Aceton
wurde irr. vakuum entfernt und die wäßrige Schicht mir 2 χ 25 ml
A'ther extrahiert. ITac-n Einstellung des pH-i/ertes auf 4,0 mit
3-1-H9SO^ wurde der Überschuß au Phenoxyessigsäure extrahiert
8AD ORIGINAL
- 38 -
•17 9h 4 84-
mit 1 χ 50 ml Benzol. Schließlich, wurde der pH-Wert der wäßrigen
Schicht auf 2,0 eingestellt und dann mit 3 x 50 ml Essigsäureäthylester
extrahiert. Diese Extrakte wurden zu3amroengegeben, 10 Minuten über Na^SO. getrocknet und das Volumen im Vakuum
eingeengt, wobei sich 724 mg eines Cls ergaben. Dieses wurde
in einem minimalen Volumen Aceton (etwa 3 ml) aufgenommen und dazu 326 mg Natrium-2-Äthylhexoat (1,1 molares Äquivalent) in
wäßrigem Aceton zugegeben. Die Lösung wurde 1 1/2 Stunden kalt gehalten und das Produkt durch Filtration abgetrennt, mit
trockenem Aceton gev/aschen und getrocknet. Ausbeute: 470 mg.
'· U-V·* min. " "5 B]Jn » 126^nax. - 263. b]*, - 190.
'· U-V·* min. " "5 B]Jn » 126^nax. - 263. b]*, - 190.
2. Chromatographie: Propanol/Wasser (7:3) Hp = 0,73-
Essigsäureäthylester/pH 5 Puffer Rj, = 0,33.
3- Elektrophorese: bei pH 4,0 und 7,0 RQet)v η = 1»0·
(b) Herstellung der Phenoxymethylcephalosporin-Thiouronium-Verbindung:
200 mg des Natriumsalzes von Phenoxymethylcephalosporin und 240 mg Thioharnstoff wurden in 2 ml K2O gelöst und im Dunkeln
3 Tage bei 370C gehalten. Beim Abkühlen der Lösung auf O0C wurde
ein Niederschlag erhalten, der bei 0 C filtriert und mit wenig
eiskaltem V/asser gewaschen wurde. Der Peststoff wurde in einem
Vakuum-Exsiccator über Nacht getrocknet, wobei sich 67,2 mg
Peststoff ergaben.
1. U.V.: Schulter bei 258-265 ιημ Λ . 237 mu. *-min 230 mu.
1. U.V.: Schulter bei 258-265 ιημ Λ . 237 mu. *-min 230 mu.
409 8387 1 001
2. Chromatographie
3. Elektrophorese:
J J —
17
Propanol/iLjO 0,665
Essigsäureäthylester/Puffer 0 Keine Bewegung bei pH 4,0 und 7,0.
(a) Herstellung; von n-Heptylcephalosporin
500 mg von 7ACA wurden in 25 ml 3^igem NaHCO, und 16 ml
Aceton gelöst. Die Lösung wurde auf unterhalb 5 C abgekühlt und 0,73 ml (2,5 molare Äquivalente) Caprylylchlorid in 10 ml
trockenem Aceton tropfenweise im Verlauf von 30 Minuten zugegeben.
Die Lösung wurde dann im Verlauf einer Stunde auf Raumtemperatur gebracht, das Aceton wurde in Vakuum entfernt und
die hinterbleibende Lösung 2 χ mit 25 ml Äther extrahiert. Der pH-Wert wurde auf 3,0 vor der Benzolextraktion (1 χ 50 ml) eingestellt
und danach weiterhin auf 2,0 vor der Extraktion mit Essigsäureäthylester (3 x 50 ml) gebracht. Die Essigsäureäthylesterschichten
wurden dann zusammengegossen, über NapSO.
getrocknet und im Vakuum eingeengt, wobei sich 39^ mg einen
kristallinen Peststoffes ergaben. Dieser wurde in wenig Aceton
gelöst und 170 mg (1,1 molares Äquivalent) iJatrium-2-äthylhexoat
in wäßrigem Aceton zugegeben. Die Lösung wurde eine Stunde in den Eisschrank gestellt und das Produkt durch Filtrieren gesammelt,
mit trockenem Aceton gewaschen und getrocknet. Ausbeute: 298 mg.
λ 22° Λ
2. Chromatographie: Butanol/ÄtOH/H20 H^ 0,75
Propanol/H20 Rj. 0,84
Essigsäureäthylester/Puffer P. 0,70
0 9 H 23 / 1 0 0 1
BAD ORIGINAL
3. Elektrophorese! pH 7,0 R
Ceph#c
pH 4,0 RCepll>c= 1,04.
(b) Herstellung der n-Heptylcephalosporin-Thiouroniumverbindun/?;
150 mg des Natriumsalzes von n-Heptylcephalosporin und
70 mg Thioharnstoff wurden in 5 ml H2O in der Dunkelheit bei
370C während 3 Tagen incubiert. Diese Lösung hatte sich am Ende
dieser Zeit völlig verfestigt und wurde mit HpO verrieben und das gallertige Material abfiltriert, mit HgO gewaschen und im
Vakuum-Exsiccator getrocknet, wobei sich 124 mg eines amorphen
Pulvers ergaben.
1. U.V-: Schulter bei 258-265 mu, jedoch ist die Probe nicht rein.
2. Chromatographie: Propanol/H20 Rp = 0,770
Essigsäureäthylacetat/Puffer Rp = 0,102
3. Elektrophorese:, bei pH 4,0 und 7,0 keine Bewegung.
In gleicher Weise wurden verschiedene andere Acylderivate des Cephalosporin-Thiouroniumderivates hergestellt. Die Ergebnisse
sind in den nachfolgenden Tabellen IV und IVa aufgeführt.
Bei spiel |
Acylgruppe | R-Benzyl-Cenh-vVert-Elektrophorese | 0,16 | pH 4.0 | PH 7.0 |
60 | S-Phenyl-thioacetyl C6H5-S-CH2CO- |
B.E.W. At.Ac. | 0,29 | mm | |
61 | S-Benzyl-thioacetyl C/-He—CHp- S. CHp CO- |
0,88 | 0,09 | -0.11 | -0.14 |
62 | Benzoyl | 0,92 | - i |
- | - |
63 | 2,6-Dimethoxybenzoyl | 0,80 | -0.17 | ||
0,88 (Propanol Wasser- System) |
409838/1 001
BAD ORIGINAL
- 41 -
i 7 9 b Λ 3 4
bei- j ■spiel
Acylgruppe
U.V.-Werte
^1cm
p-Bromphenylthioacetyl
p-tert.-Sutylphenylthioacetyl
p-(CH5)3cC.C6H4.S.CH2CO-
ß-Benzylthiopropi onyl C6H5CH2.S.CH2.CH2.CO-
Phenäthylthioacetyl C6H5CH2.CH2.S.CH2.CO-n-Butyl
thioace tyl
Propargylthioacetyl CH = C.CH2-S.CH2.CO-
p-Chlorphenylthioacetyl
256-257
245
Ebene
Ebene
261-262
j 290
nicht voll
j gelöst
380
260
260
260
260
254-256
200 163
207 208
326
Beispiele 71 -
cephalοsporansäure
1,9 g 7-Aminocephalosporansäure (7 mMol) v/urden in 100 ml
Essigsäureäthylester suspendiert und mit 2 g (13,3 mMol) Allylthioacetylchlorid
behandelt. Nach 1,25 'stündigem Kochen unter Rückfluß wurde die Lösung von einer geringen Menge unlöslichen
Materials abfiltriert und das Filtrat im Vakuum zur Trockne gebracht.
Die hinterbleibende gummiartige Masse v/urde in einem Gemisch
aus Aceton 20 ml und 20 ml Äther gelöst, filtriert und mit einer 10bigen Lösung von ITatriumäthylhexanoat in n-Butanol
(15 ml) und anschließend mit Äther (150.ml) behandelt. Der er-
409838/1001
BAD ORIGINAL
haltene cremefarbige niederschlag wurde, abfiltriert und getrocknet
(2,34 g). Die Kristallisation aus wäßrigem Aceton ergab das Produkt in Form eines weißen kristtillinen festen Stoffes
(1,13 δ), >~.v (Phosphatpuffer bei pH 6) 260 mu ( f = 9,080).
Eine v/eitere Kristallisation ergab ein Material von V „_ (wie
IHc*jC ·
oben) 260 mu ( S = 9,300), /aj^ + 117° (c = 0,87; H2O).
Das Verfahren wurde auch erfolgreich für Acylierungen λ^οη 7-Aminocephalosporansäure mit Cyclopenta.noylchlorid,
p-Bromphenylthioacetylchlorid, n-Butanoylchlorid, p-Mtrophenylacetylchlorid,
n-Butancarboxychlorid, n-Pentancarboxychlorid,
trans-Cinnamoylchlorid und ß-Phenylpropionylchlorid verwendet.
Die erhaltenen Natriumsalze wurden dann mit Thioharnstoff entsprechend dem vorstehenden allgemeinen Verfahren umgesetzt.
Die erhaltenen Thiouroniumsalze hatten die folgenden Eigenschaften
:
•!Bei spiel |
Acylgruppc | U.V.Daten | E1cm | ε |
71 72 73 74 75 76 77 78. 79 |
Cyclopentanoyl p-Bromphenylthioacetyl n-Butanoyl Allylthioacetyl p-Nitrophenylacetyl n-Butancarboxy n-Pentancarboxy trans-Cinnamoyl C^-H-. CE=CH. CO- ß-?henylpropionyl |
H2O Xmax.W |
224 283 207 208 376 233 240 862 224 |
9000 I 8730 j 17000 I ~ i I i |
262,5 258 263 261 270 263 263 178 259-262 |
409838/1001
BAD ORIGINAL
"I 7 9 b 4
In ähnlicher 'Veise v/urden die Azide der n-Pentancarboxamidocephalosporansäure,
Benzylthioacetylamidocephalosporansäure
und T-p-Chlorphsnylthioacetaraidocephalosporansäure herge
stellt, die die folgenden U.V.-Daten besaßen.
LSei- ispiel |
Acylgruppen | U.V.-Daten ! | E1CI2 |
80 81 82 |
n-Pentancarboxy Benzylthioacetyl p-Chlorphenylthioacetyl |
242 216 332 |
|
262 260 255-256 i |
Die Elementaranalysen einiger der vorstehenden Verbindungen sind in Tabelle VII aufgeführt:
409838/1 001
OO CO OO
Bei | Formel | Gefunden | C | H | Br | Cl i | N | S | Berechnet | C | H | Br j Gl | - | N | S |
spiel | G17H18N4O4S3-H2O | 44.3 | 4.3 | - | - | 12.3 | 21.8 | 44.7 | 4.4 | - | - | 12.3 | 21.07 | ||
60 | C18H20N4O4S3^H2O | 45.5 | 4.7 | - | - | 12.2 | 20.9 | 45.9 | 4.7 | - | 7.0 | 11.9 | 20.4 | ||
61 | C1 „HO1 ClN. Ox-S,. 2H9O | 39.8 | 4.09 | - | 6.5 | 10.8 | 19.4 | 40.1 | 4.2 | - | — | 11.0 | 18.9 | ||
70 | C15H20N4°4S2-H2° | 44.1 | 5.5 | - | - | 14.2 | 16.1 | 44.8 | 5.5 | - | - | 13.9 | 15.9 | ||
71 | C17H17Br.N4O4S3 · | 39.0 | 3.6 | 5.6 | - | 10.9 | 18.5 | 39.5 | 3.4 | 15.4 | - | 10.8 | 18.6 | ||
72 | C14H20N4O5S3.H2O | 40.4 | 4.9 | - | - | 13.2 | 23.I | 40.0 | 4.8 | - | - | 13.3 | 22.9 | ||
74 | C15H22N4O4S2.1/2H2O | 45.8 | 5.9 | - | - | 13.8 | 15.1 | 45.6 | 5.9 | - | — | 14.2 | 16.2 | ||
77 | C18n20N4°4S2-H20 | 49.4 | 5.5 | - | - | 12.7 | 14.4 | 49.3 | 5.1 | - | - | 12.8 | 14.6 | ||
79 | C19H22N4O4S3JAH2O | 48.0 | 5.0 | - | - | 11.8 | 20.7 | 48.0 | 4.9 | - | — | 11.8 | 20.23 | ||
66 | C14H16N4°4S3'H2° | 39.9 | 4.4 | - | - | 13.1 | 22.9 | 40.2 | 4.3 | - | — | 13.4 | 23.0 | ||
69 | C17H17N5O4S2.1/2H2O | 48.0 | 4.3 | — | — | 16.4 | 15.0 | 47.6 | 4.2 | - | 16.4 | 15.0 | |||
81 |
Die Aktivität von verschiedenen in den vorstehenden Beispielen hergestellten Verbindungen gegenüber unterschiedlichen
Stämmen von S.aureus wurde mit dem R ohr vor dünnung s versuch festgestellt
und mit verwandten Cephalosporinverbindungen verglichen. Hie Ergebnisse sind in. den Tabellen VIII, IX und X zusammengefaßt.
Untersuchte | Verbindung | von Beispiel | Il | 21 | Minimale Kemmungskonsen- trr.tion (/7ml) |
S.aurous |
ti | It | 26 | S.aureus CBt-I | 663 | ||
I! | Il | 27 | Oxford-Stamm | 62 | ||
Cephalosporin C | 11 | Il | 28 | 62 | - | |
Il | Il | 29 | 8 | - | ||
ti | 30 | 20 | 62 | |||
— | 0,5 | |||||
- | 31 | |||||
- | 62 | |||||
- | 31 | |||||
- | ||||||
Cephalosporin C-Thiouroniumsalz | ||||||
Verbindung | ||||||
Il | ||||||
Il | ||||||
Il | ||||||
Il | ||||||
!! |
Untersuchte Verbindung
r.iinimale Kemmungskonzontration ( VmI)
S.aureus CÖ64
Oxford
Oxford
663
Benzylcephalosporin
Benzylcephalosporin-Thiouroniumsalz
Verbindung von Beispiel 40
Il | Il | Il | 41 |
Il | It | It | 42 |
It | 11 | ti | 51 |
11 | Il | It | 52 |
Il | ti | tt | 53 |
M | ;t | 11 | 54 |
0,16
0,06
0,04
0,01
0,04
0,02
0,01
0,01
0,04
409838/1001
. BAD ORIGINAL
ι Untersuchte Verbindungen |
(I | Beispiel | 60 | Minimale Heamungskonzen- ; tr at ion (>"·/πΐ) |
0664 tcnun |
S.aureuB 604 |
Il | Il | 61 | S.aureus Oxford-S |
0,08 | ||
Il | Il | 71 | 0,01 | 0,04 | ||
Verbindung von | ti | II | 72 | 0,02 | 2,5 | |
I! | Il | It | 73 | 31 | 0,31 | |
1! | ti | It | 74 | <0,01 | 0,31 | |
Il | Il | 11 | 75 | 0,08 | 0,15 | |
Il | ti | It | 76 | 0,04 | 0,15 | |
It | It | Il | 77 | 0,01 | • 0,62 | |
Il | I! | ti | 78 | 0,16 | 0,16 | |
Il | It | II | 79 | 0,04 | 2,0 | |
Il | It | I! | 65 | 0,5 | 0,16 | |
Il | ti | It | 66 | ' 0,08 | 0,62 | |
Il | ti | It | 67 | 0,05 | 0,16 | |
Il | Il | It | 68 | 0,01 | 0,62 | |
Il | It | Il | 69 | 0,08 | 0,16 | |
Il | ti | ti | 70 | 0,02 | 0,08 " | |
Il | !I | It | 80 | 0,04 | 0,08 | |
Il | It | ti | 81 | 0,02 | 0,31 | |
Il | ti | II | 82 | 0,16 | 0,08 | |
It | Il | Il | 20 | 0,04 | 0,16 | |
Il | Il | Il | 50 | 0,04 | 0,30 | |
It | Il | Il | 51 | 0,06 | 0,31 | |
Il | II | 42 | 0,04 | |||
It | 0,31 | 0,31 | ||||
Il | * 0,04 | |||||
11 |
409838/ 1001
I 7 y b 4 8 A
Beispiel 82 '■ . "
(a) Herstellung von sterilen Phonylacetyl-CeOhalosporin-Thi our oniurns 0.1z
Es wurde eine sterile Apparatur verwendet und durchv/ega
aseptische Bedingungen eingehalten.
Eine 6 $ige Lösung von Thioharnstoff in sterilen, pyrogenfreiem
Wasser wurde hergestellt und ebenfalls eine IQ^ige Lösung
des Natriumsalzes der Phenylacetamidocephalosporansäure in sterilem,
pyrogenfreiem Wasser. Steriler Stickstoff wurde durch jede der Lösungen geblasen, um sämtliches Kohlendioxyd su entfernen
und die Lösungen wurden einzeln sterilisiert, indem sie durch ein 5/3-gesintertes G-laafilter filtriert wurden. !Die sterilen
Lösungen wurden vermischt. Die Luft in dem Behälter vrurde
durch Stickstoff ersetzt und der Behälter verschlossen. Der Behälter wurde dann langsam rotiert und bei 370C 65 Stunden gehalten.
Der erhaltene niederschlag wurde durch Filtration unter vermindertem Druck abgetrennt.
Der Niederschlag wurde mit sterilem, pyrogen-freiem 'wasser
gewaschen, um überschussigen. Thioharnstoff zu entfernen durch
wiederholte Dispersion im //asser, bis die spektroskopische U.V.-Untersuchung des Niederschlages einen Harnstoffgehalt, welcher
1,5 a/o nicht überschritt, aufwies.
Der Niederschlag wurde bis zum konstanten Gewicht in einem Exsikkator unter vermindertem Druck bei Raumtemperatur getrocknet.
Der erhaltene trockene Kuchen wurde su einem feinen Pulver in einem sterilen Glasmcrser gemahlen. Das erhaltene
409033/1001
ßAD ORIGINAL
Ί7 9548A
sterile Pulver des Phenylacetrlcephalosporin-Thiouroniumsalzes
(P.A.T.) warde dann zur Herstellung von Präparaten für intramusculäre
Injektion der folgenden Zusammensetzung verwendet: P.A.T. 0,1 g
Harnstoff (steriles Pulver) 1,0 g
Steriles, pyrogenfreies V/asser
(zur Ergänzung) 1,2 ml.
Eine 20^ige Lösung von Harnstoff in sterilem, pyrogenfreiem
V/aaser wurde hergestellt, durch Filtration durch ein 5/3-gesintertes Glasfilter sterilisiert und die erhaltene Lösung
gefriergetrocknet. Der gefriergetrocknete Kuchen wurde durch Vermählen in einem sterilen Glasmörser auf ein feines
Pulver vermählen.
(c) In.jekti ons präparat
Die erforderlichen Mengen von sterilem P.A.T. und sterilem
Harnstoff wurden abgewogen, einheitlich vermischt und in sterile 5 ml-Ampullen verteilt, sodaß jede Ampulle 1,1 g Gemisch ent- ·
hielt. Die Ampullen wurden hermetisch abgeschlossen, um Bakterien auszuschließen.
Unmittelbar, bevor die Ampullen zur Verwendung kommen, wird 1,2 ml steriles, pyrogenfreies Wasser durch den Ampullenverschluß
injiziert und die Ampulle geschüttelt. Auf diose V/eise werden 2 ml einer Lösung von P.A.1. in Harnstoff, die zur intramusculären
Verwendung geeignet ist, erhalten.
409838/1001
BAD ORiGJNAL
100 | mg |
20 | ng |
74 | rag |
mg | |
2 | mg |
Beispiel 83
Orale Tabletten
P.A.T. (feine Teilchen) Maisstärke
Lactose Polyvinylpyrrolidon Magnesiumstearat
Stärke, lactose und P.A.T. v/erden durch ein Sieb mit einer
Öffnungsweite von 99 (60 mesh sieve) gesiebt, trocken vermischt und mit einer Lösung von Polyvinylpyrrolidon in Chloroform
granuliert. Die Masse wird durch ein Sieb mit einer Xaschenweite
von 553 (12 mesh sieve) gesiebt und die erhaltenen Körner
bei 40 C zur vollständigen Entfernung des Chloroforms getrocknet".
Die getrockneten Körner werden durch ein Sieb mit einer liasclienweite
von 395 (16 mesh screen) gegeben. Das Magnesiumstearat
wird mit den abgetrennten feinen Teilen vermischt und das Gemisch mit den Körnern vermischt.
Tabletten wurden durch Prossen von 200 mg auf
einer 5/40,6 cm Stanzscheibe (5/16" punches) hergestellt. Die
Tabletten können auch mit einem ITiIm oder gewünschtenfall3 mit
Zucker überzogen werden.
409838/1001
BAD ORIGINAL
I50 g 7-Aminocephalosporansäure wurden in I872 ml eines 1-molaren
Phosphatpuffers von pH 7 gelöst und βθ g Natriumazid hinzugegeben.
Das Gemisch wurde bei 8o°C während 25 Minuten gerührt, auf Raumtemperatur abgekühlt und in 9 1 Methanol gegossen.
Nach 2-stündigem Stehen bei Raumtemperatur wurde das Gemisch durch Kieselgur filtriert und der pH-Wert des Filtrates auf
J>,6 mit konzentrierter Salzsäure eingestellt und das Gemisch
bei O0C während 1 Stunde gehalten. Der Niederschlag wurde abfiltriert,
mit Methanol, Aceton und Äther gewaschen und im Vakuum bei 40°C getrocknet, wobei 90 g des rohen Azides der
7-Aminocephalosporansäure (Ausbeute 64 % der Theorie) erhalten
wurden.
409 838/1001
BAD ORIGINAL
Claims (1)
- PatentanspruchVerfahren zur Herstellung von Derivaten deo" Cephalosporin C der allgemeinen Formel^N-CH- CH CH.R3 O = C - N^ ^J-CH2ZCOOHworin Z einen gegebenenfalls substituierten Thioharnstoffrest, einen aliphatischen oder aromatischen Thioaraidrest, einen gegebenenfalls substituierten Thiophenolrest, einen gegebenenfalls substituierten primären oder sekundären aromatischen Aminorest, einen gegebenenfalls oubotituierten Thiolrest, einen Azido-, Hydrogenpho3phat- oder Thiosulfatrest oder einen gegebenenfalls substituierten Pyrrolrest, R2 und R, jeweils Y/aoserotoffatotne oder R2 . ein Waoserotofiatom und R, eine Acylgruppe bedeuten, da- · durch gekennzeichnet, daß in einem polaren Medium eine Verbindung der allgemeinen Formel^N - CH - CH CH9 " .p O = C-]COOIIgegebenenfalls in Form eines AlkalisalzQs worin R1 eine Acylgruppe/bedeutet und R2 und R5 die vorstehend angegebene Bedeutung besitzen, unter nucleophiler' vorzugsweise eine Acetylgruppe409838/1001BAD ORIGINALSubstitution mit einem gegebenenfalls substituierten Thioharnstoff oder einem aliphatischen oder aromatischen Thioamid oder einem gegebenenfalls substituierten Thiophenol oder einem gegebenenfalls substituierten primären oder sekundären aromatischen Aniin, oder einem gegebenonfalls substituierten Thiol, oder einem Metallazid, Metallhydrogenphosphat oder Metallthiosulfat oder einem gegebenenfalls substituierten Pyrrol umgesetzt und die so erhaltene Verbindung gewünschtenfalls an der gegebenenfalls in 7-Steilung vorhandenen Acylgruppe in üblicher Weise hydrolysiert und gegebenenfalls mit einem anderen Acylreet in üblicher Weise acyliert wird. :409838/100.1SAD ORIGINAL
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GB17845/61A GB1012943A (en) | 1961-05-16 | 1961-05-16 | Improvements in or relating to antibiotics |
GB302662 | 1962-01-26 | ||
GB1784561 | 1962-05-02 | ||
GB302662 | 1962-05-02 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE1795484A1 true DE1795484A1 (de) | 1974-09-19 |
DE1795484B2 DE1795484B2 (de) | 1975-09-04 |
DE1795484C3 DE1795484C3 (de) | 1976-04-15 |
Family
ID=
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2804896A1 (de) * | 1977-02-08 | 1978-08-17 | Toyama Chemiecal Co | Verfahren zur herstellung von 7-(substituiert)-amino-3-substituiert- thiomethyl-cephemcarbonsaeuren |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2804896A1 (de) * | 1977-02-08 | 1978-08-17 | Toyama Chemiecal Co | Verfahren zur herstellung von 7-(substituiert)-amino-3-substituiert- thiomethyl-cephemcarbonsaeuren |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CH565184A5 (de) | 1975-08-15 |
NO133673B (de) | 1976-03-01 |
SE317380B (de) | 1969-11-17 |
AT265520B (de) | 1968-10-10 |
NO133673C (de) | 1976-06-09 |
AT265513B (de) | 1968-10-10 |
DE1795727A1 (de) | 1974-04-04 |
BE617687A (fr) | 1962-11-16 |
DE1745624B2 (de) | 1974-05-16 |
JPS3917936B1 (de) | 1964-08-25 |
DE1795484B2 (de) | 1975-09-04 |
DE1745624A1 (de) | 1972-02-17 |
CH554371A (de) | 1974-09-30 |
DK128611B (da) | 1974-06-04 |
CH520709A (de) | 1972-03-31 |
FR2030M (fr) | 1963-10-25 |
DE1745624C3 (de) | 1974-12-12 |
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C3 | Grant after two publication steps (3rd publication) |