DE1768720A1

DE1768720A1 - Verfahren zur Herstellung neuer Arzneimittel auf Basis von Triazenen

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Publication number: DE1768720A1
Application number: DE19681768720
Authority: DE
Inventors: Heinz Dr Foerster; Dieter Dr Steinhoff; Dr Hobik Hans Peter; Robert Dr Bierling; Dr Seidel Hans Joachim; Lieselotte Dr Juehling
Original assignee: Bayer AG
Current assignee: Bayer AG
Priority date: 1968-06-22
Filing date: 1968-06-22
Publication date: 1971-08-19
Also published as: FR2011475A1; RO53603A; BE734938A; NL6909495A; IL32292A0

Description

FARBENFABRIKENBAYERAG 1768720

Py/Bi

LEVERKUSEN- Bayerwerk P.tent-Abteilun« ₂1 . Juni 1968

Verfahren zur Herstellung neuer Arzneimittel auf Basis

von Triazenen.

Die vorliegende Erfindung betrifft neue im Phenyllcern substituierte 1-Phenyl-3,3-dialkyltriazene und deren Verwendung als Arzneimittel.

Ee wurde gefunden, daß man neuartige im Phenylkern substituierte 1-Phenyl-3,3-dialkyltriazene* erhält, wenn man aromatische Amine der allgemeinen Formel

worin

für einen gegebenenfalls substituierten O-Alkylrest, einen gegebenenfalls substituierten O-Phenylrest, einen gegebenenfalls substituierten O-Beneylreet sowie für KH₂, Mono- sowie Dialkyl- bzw. Cycloalkylamino

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BAD ORIGINAL.

steht, wobei im Falle des Di Ikylamlnorestes die Alkyl· gruppen gemeinsam Bestandteil eines 5- lila 7-gliedrigen heterocyclischen Ringsystems sein können, R₁ weiterhin einen Phenylaaino- sowie «inen I-Fhenyl-

N-alkylamino-Rest bedeutet,

die Reste

R₂ bis Rj für Wasserstoff, Halogen, Alkoxy, Merkaptoalkyl, SuIfonylalkyl, -0-GH₂-OOQI stehen, wobei I für Wasserstoff, Natrium, Kalium oder Kalzium steht und R₂ bis R, weiterhin Alkyl oder eine Witrogruppe bedeuten sowie für einen gegebenenfalls substituierten Phenylrest stehen können,

in wäßrig saurer Lösung diazotiert und mit einem sekundären 1min der- Formel

worin

Re und R₆ für gegebenenfalls durch Halogen substituierten Alkylgruppen stehen,

uaaetxt.

Gegebenenfalls substituierte O-Alkylreste (R₁) enthalten bis xu 8 (yorzugaweiseV4) Kohlenstoffatome und können geradkettig und verzweigt sein sowie gegebenenfalls auch eine Doppelbindung enthalten. Als Substituenten des Alkylrestes selen Hydroxy, Halogene (Chlor, Brom, Jod), Alkoxy (vorzugsweise 1-4 Kohlenstoffatome), KH₂, Mono- sowie Dialkylaminu mit bis xu 4 Kohlenstoffatomen pro Alkylrest genannt, wobei 2 Alkylreete gemeinsam

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BAD ORIGINAL

auch Bestandteil eines heterocyclischen Ringsyetems (vorzugsweise 5- bie 7-gliedrig) sein können, welches im Falle des 6-Rings als weitere« Heteroatom noch Sauerstoff, Schwefel sowie eine niedere>N-Alkylgruppe enthalten kann; weitere eventuelle Substituenten des O-Alkylrestes sind die Fhenyj amino- sowie die N-Phenyl-N-alkyl-araino-Gruppe, vorzugsweise mit "bis zu 4 Kohlenstoffatomen im Aikylrest.

Als Substituenten am O-Fhenyl- bzw. O-Benzylrest (R₁) seien die Halogene (vorzugsweise Chlor,Brom, Jod), Alkyl» und AlIroxy-Gruppen (vorzugsweise bis zu 4 Kohlenstoffatomen) genatuit, sowie bis zu 2,VOrZUgSWeISe 1,Nitrogruppe.

Die Definition des heterocyclischen Ringsystems (R₁) hat den gleichen Bedeutungsumfang wie oben für den Fall der Substitution, am. O-Alkylrest angegeben ist.

Im Falle, daß R₁ einen N-Fhenyl-N-alkylaminorest bedeutet, enthält der Aikylrest vorzugsweise bis zu 4 Kohlenstoffatomen.

Als Halogenatome (R₂)R-ZtR₄) seien vorzugsweise Chlor, Brom, Jod genannt; die Alkoxy-, Merkaptoalkyl-, Sulfonylalkyl sowie Alkylreste enthalten bis zu 4» vorzugsweise bis zu 2, Kohlenstoff atome. Die gegebenenfalls eine Doppelbindung enthaltenden Alkylgruppen (R^, R₆) enthalten ia allgemeinen bis zu 4, vorzugaweiee 1, Kohlenstoffatome. Als Halogene in den Reuten P_rt

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kommen die vorgenannten inbetraeht,

Die neuen Verbindungen entsprechen ."Irr allgemeinen Formel

= N - N:

III

worin die Beste R.. bis Rg die oben angegebene Bedeutung besitzen.

Bevorzugte neue Verbindungen sind die der allgemeinen Formel

R₁O

IV

worin

für einen geradkettigen oder verzweigten, gegebenenfalls eine Doppelbindung enthaltenden Alkylrest mit bis zu 8 Kohlenstoffatomer steht, welcher durch Halogen (vorzugsweise Chlor, Brom, Jod), OH, O-Alkyl (vorzugsweise bis zu 4 Kohlenstoffatomen), Benzyl, NH₂, N-Alkyl (vorzugsweise bis zu 4 Kohlenstoffatomen)_f K,N-Dlalkyl mit vorzugsweise bis zu 4 Kohlenstoffatomen im Alkylrest substituiert sein kann, sowie für einen cycloaliphatIschen Rest mit 5 oder 6 Kohlenstoffatomen, wobei im Falle des Dialkylaminorestes die beiden Alkylreste gemeinsam auch Bestand-

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BAD

teil eines 5- bis 7-gliedrigen heterocyclischen Ringsystems sein können, welches als weiteres Heteroatom noch Sauerstoff, Schwefel sowie im Falle des 6-Rings einen niedereix>N-Alk:ylrest enthalten kann,

Rc und Rg für gleiche oder verschiedene gegebenenfalls eine Doppelbindung enthaltende Älkylreste mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen stehen, und

A Wasserstoff sowie die Gruppe -0-GH₂-COOI bedeuten kann, wobei X für Wasserstoff, Natrium, Kalium oder Kalzium steht.

Die Herstellung der neuen Verbindungen sei an folgendem Beispiel erläutertί

+ HCl + NaNO₂

+ HN=

CH,

Als für das Verfahren Verwendung findende Amine (II) seien z.B. genannt: 4-Aminobenzoesäuremethylester, 4-Aminobenzoesäureäthylester, 4-Aminobenzoesäurepropylester, 4-Aminobenzoesäureiso-propylester, 4-Aminobenzoesäurepropylester, 4-Aminobenzoesäure-iso-butylester, 4-Aminobenzoesäure-sec.-butylester, 4-Aminobenzoeaäure-n-butylester, 4-Aminobenzoeaäure-n-pentyl~ ester, 4-Aminobenzoesäure-2-methyl-butylester, 4-Aminobfmzoesäure-n-hexylester, 4-Aminobenzoesäure-n-heptylester, 4-Amino-

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benzoesäure-n-oktylester, 4-Aminoben ' 4~AniinoToenzoesäure-( 2-bromathy.13ί sr). methoxyäthylester), 4-AminobenzoeBäure--(2-methoxypröpyl eater), 4"Aainobenzoeeäure-(2-n-propoxyäthylet' ?r), 4-Amlnobeasoeeäura-(2-aminoäthylester), 4-Aminobenzoesäuren 2^ethylaMinoäthylester), 4-Aminobenzoesäure-(2-dimethylaMinoäthyleeter)_t 4-Am.lno — benzoesäure — (2-piperidyläthyleeter), 4-Amlnobeneoeaäure~(2-morpholyläthylester), 4-Amiaobenzoeoäuie-(2-Ii-aiethylpiperazyläthylester), 4-Aminobenzoe8äure-(2-phenylai4inoäthylastor), 4~Aminobenzoe8äure-phenyle8ter_t 4-AMlnoben«oe8äure-4-chlorph.enylester, 4-AmlnobenzoeBäure-2-chlorphenylester, 4~AainobenzoeHäure-4-bromphenyle8ter, 4-imlnobeneoeeäure-4-methoxyphenylester, 4-Aminobenzoesäare-benzyleeter, 4-Aaüjiobenzoesäure-4-nitrobenzylester, 4-AmInobenzoeBäure-4"brc»- benzylester, 4-Amino~2-nitro-benzoesäureäthjrlester_t 4-AMino-3-nitro-benzoesäureäthyleeter _t 4-Amino-2-aethoxy-ben*oeBäureäthy¹ · ■ ester, 4-Amlno-2~oxyessigsäure-benzoeeäureäthyleeter_t 2-Aiaino-3-oxyessigsäure-benzoesäureäthyleeter, 4-AMino-2-thio«ethylbenzoesäureäthylester, 4-Amino~2-methyl8ulfonyl-benzoeeäareäthylester, 4-Amino-2-chlor-benzoeaäul■e-äthyleβteΓ, 4-Aalno-2-brombenzoesäure-äthylester, 4-Aaino-2,^-dichlor-benmoesäureäthylester, 4-Amino-3-phenyl-benzoeβäure-äthyleβt·r_f 4-Aelno-2-phenylbenzoesäure-äthylester, 4-Aaino-2-nitro-ben«oeeäur·- (2-dläthylaminoäthyleBter), 4-Amino-3-nitro-benzoeefture~(2-diäthylaminoäthylester), 4-Amino-3-nitro-benzoeeäure-(2-diäthyl.-aminoäthylester), 4-Amino-3-oxyes8ig8äure-ben»oeeänre-(2-di-

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äthylaminoäthylester als Natrium- oder Kalziuraoalz, 4-Aminobenzoeeäure-S-chlor-benzylester, ?~-Amino-~4-nitro~beuzoeBäureäthvl-

ester, 2-Aoino-^L}~nitro~benzoesäure--äthyT ester, 3-Amino«5-nitro-2-oxyessigBäure-benzoesäure-äthylester, 3-Amino-5-ni tro-2-methoxy-benzoesäure-eithyhleBter, 3-Au no-6-nitro-benzoesäureäthylester, 3-Amino~5-nitro-6-oxyesBigsäure-benzoesäure-äthyl~ eeter, 2~Amino~4-phenyl-benzoesäure-äthyle8ter, 2-Amino-5-phenyl-benzoesätire-äthylester, 3~Amino-6-phenyl-benBoesäureäthylester.

AIb sekundäre Amine seien beispielhait genannt: Dimethylamin, Diäthylamin, Dipropylamin, Dlbutylamin, Mpentylamin, MethyläthylaiLiu, Methyl-propylamin, Methyl-butylamin, Äthyl· propyl" amin, Ätbyl-butylamin, Bi8-(2~dichloräthyl)amin, Bi8-(2-dibromäthyl)-aiain, Diallylamin.

Die aromatischen Amine werden in wäßriger Lösung durch Anwendung von mindestens zwei Äquivalenten Mineralsäure gelöst und durch Hinzufügen eines Äquivalents Natriumnitrit in bekannter Weise diazotiert.

Die Diazoniumsalzlösung läßt man dann vorzugsweise bei -5 biß +2O⁹C zu einer wäSrigen Lösung fließen, die mindestens ein Äquivalent eines see. Amins und mindestens zwei Äquivalente einer Base, z.B. Soda, enthält.

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BAD

Überraschenderweise zeigten die neuen Triazene eine erheblich höhere cytostatische Wirkung als das aus dem Stand der Technik bekannte 1-Phenyl-3,3-dimethyltriazen (Proc. Soc. exper.Blol.Med. 90, 484 (1955)).

Die erfinderungsgemäßen Stoffe stellen somit eine Bereicherung der Technik dar.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind wertvolle Arzneimittel (Chemotherapeutika) und sind u.a. cytostatisch wirksam. Sie können gegen alle Formen von malignen Tumoren eingesetzt werden.

Weiterhin sind die neuen Verbindungen iaimunsuppressiv wirksam und können bei Organtransplantationen und allen Erkrankungen Verwendung finden, deren Ursache Antikörperreaktionen sind. Besonders immunsuppressiv wirksame Verbindungen sind solche auf Basis Dimethylamin (Rc und R^ = CH,), wobei weiterhin der Rest R. vorzugsweise für Wasserstoff steht.

Im allgemeinen hat es sich als vorteilhaft erwiesen, Mengen von etwa 10 mg bis etwa 25 mg, im Fall der Verwendung als Immunsuppressiva etwa 15 bis etwa 25 mg, pro Kilo Körpergewicht pro Tag zur Erzielung wirksamer Ergebnisse zu verabreichen. Trotzdem kann es gegebenenfalls erforderlich sein, von den genannten Mengen abzuweichen, und zwar in Abhängigkeit vom Körper gewicht des Versuchstieres bzw. der Art des Applikationeweges, aber auch auf Grund der Tierart und deren individuellem Verhalten gegenüber dem Medikament bzw. der Art von dessen Formulierung und dem Zeitpunkt bzw. Intervall, zu welchem die Verabreichung erfolgt. So kann es in einigen Fällen auereichend sein, mit weniger als der vorgeannten Mindestmenge auszukom-

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BAD

men, während in anderen Th ι <\,\ diö genannte obere G-rer.ae überschritten werden muß. Im Falle der Applikation größerer Mengen

kann es empfehlenawört sein, diese in mehrere Kirizelgaben über den Tag zu verteilen. Pur die Applikation in der Humanmedizin ist der gleiche Dosiernngeapielraum vorgesehen. Sinngenri3 gelten auch dia weiteren '>bip;en

Die Chemotherapeutika können entweder >. lh solche od-sr aber in Kombination mit pharmazeutisch annehmbaren Trägern zur Anwendung gelangen. Als Darreichungsformen in Kombination mit verschiedenen inerten Trägern kommen Tabletten, Kapseln, Puder, Sprays, wäßrige Suspensionen, in^lzierbare Lösungen, Elixiere, Sirupe und dergleichen in Betracht. Derartige Träger umfassen feste Verdünnungsmittel oder Füllstoffe, ein steriles wäßriges Medium sowie verschiedene nichttoxische organische Lösungsmittel und dergleichen. Selbstverständlich können die für eine orale Verabreichung in Betracht könnenden Tnbletten und dergleichen mit Süßstoffzusatz un< ähnlichem versehen werden. Die therapeutisch wirksame Verbindung soll im vorgenannten Fall in einer Konzentration von etwa 0,5 bis 90 Gewichtsprozent der Gesamtmischung vorhanden sein, d.h. in Mengen, die ausreichend sind, um den obengenannten Dosierungsspielraum zu erreichen.

Im Falle der oralen Anwendung können Tabletten selbstverständlich auch Zusätze wie Natriumeitrat, Calciumcaroonat und Dicalciumphosphat zusammen mit verschiedenen Zuschlagstoffen wie Stärke, vorzugsweise Kartoffelstärke und dergleichen und Bindemitteln wie Polyvinylpyrrolidon, Gelatine und dergleichen enthalten. Weiterhin können Gleitmittel wie Magne-

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_BAD

siumstearat, Natriumlaurylsulfat und ία I lc um κιι-α Tablettieren mi tverwendet werden. Im Falle wäßcigfi.. Suspensionen und/oder ΕΙΙχ1ί·ΐ·οη . die für orale A i\w en du ..·-':-2 η gedacht an·., kann der

mit Vfcr&f hiedenea G-ot-ch-u taufbeöfKireni; !'arbt) fcoffen, ~ und/oder zusammen mit 7m.^v-! uv-gara! +.f.«In wli itfaueer, Äthanol, Propylenglycol, Gl/zerin ui.a a. ! inhun da rar ti gen Verbindungen bzw. Kombinationen Verwendung rind in.

Für den Fall der parenteralen Anwendung können Losungen der Wirkstoffe in Sesam- oder Erdnußöl oder in wäßrigem Propylenglycol oder N,N-Dimethylfonnanid eingesetzt wi- ·η, ebenso wie sterile wäßrige Lösungen im Falle der wasserlöeliehen Verbindungen. Derartige wäßrige Lösungen sollten im Bedarfsfall L·: üblicher tfeise abgepuffert sein, und weiterhin fjollt.; daa t'lüBaige Verdünnungsmittel vorao durcl· 7uoatz der erforderi L-chun Müuge Salz oder Glucose isotonisch eingestellt werden. Derartige wäßrige Lösungen eignen sich inebeuondfjre für , intramuskuläre und intraperitonet·.la Injektionen.

In den Fällen, wo die Verbindungen baeiBuhe Gruppen enthalten, können Salze mit physiologisch verträglichen Säuren, z.B. Salzsäure, Zitronensäure, Schwefelsäure-, Halogenwasserstoffsäuren, Phosphorsäure, Essigsäure, Weinsäure, Methansulfonsäure, Hydroxyäthansulfonsäure, Acetursäure, Maleinsäure, Fumarsäure _% Naphthalin-1,5-disulfonsäure, Salizylsäure, Benzoesäure, Milchsäure, 3-Hydroxynaphthoesäure-2 hergestellt und eingesetzt werden.

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BAD ORlGfNAL

Die cytostatische Wirkung der neuen Verbindungen wurde an verschiedenen experimentell erzeugten Tiertuinoren und ar menschlichen·Diokdarm-U^rKinom "QW 77", wachsend in der Backentasche von Heiiusteri» und der Leukämie L 1i~.1t rauhgewieeen. Dazu wurden die Yei uuchßti ere (,Mäuss und Ratten) nach der Tumorinokulation an mehreren Tagen intraperitonal mit einer Suspension der mikronieierten Prüfpräparate behandelt. Nach Abschluß des Versuches wurde das durchschnittliehe Tumorgewicht mehrerer Tiere ermittelt und mit dem einer gleichgroßen Anzahl nicht behandelter Kontrolltiere verglichen. Die Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle 1 zusammengestellt.

Die tumorhemmende Wirkung wird bei den soliden Geschwülsten in Form der international gebräuchlichen T/C-Quotienten (T - Tmaorgewicht der behandelten Tiere, C = Tumorgewicht der Kontrolltiere) angegeben, d/a bedeutet: Zahl der toten Tiere / Zahl der lebenden Tiere. Die Ergebnisse der Versuche mit der Mäußeleukämie L 1210 werden nach internationalem Gebrauch ale mittlere Überlebenszeit (ÜLZ 50) angegeben, hier in" ^. Die Überlebensveit 50 der Kontrollgruppe wir dabei als 100 $> gesetzt.

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Tabelle 1

Dosis: in mg/kg,	täglich	an vier aufeinanderfolgenden	0,4	0/5	Leukämie 1210 der Maus in % Überl.Zeit 50 DOS-iS jb	131,3	Tage	Vl	0,4	0/5
p-substituierte " Verbindungen d. allg. Form	Ehrlich Carcinom der Maus Dosis T/C d/a	0,3	0/5	150	143,8		0,2	0/5
R₁=CH-0 —	150			200	156,o 173,o	Jens en«-Sarkom der Ratte Dosis T/C d/a
R₂=H	250	0,3	0/5	125 100	143,8	75	0,4	0/5
R₃=R₄=CH₃-		0,3	0/5	150		150	0,2	0/5
R₁=C₂H₅O-	175	0,0	0/5		156,8
R₂=H	250	0,4	0/5	300	113,3	75	0,4	Οζ-
R₃=R^=CH₃-	350	0,2	0/5	75	153,3	150	0,0	0/5
R₁=TiCJH₇O-	150			150	153,3
R₂=H	250	0,4	0/5	300	113*3	7 Γ	0,4	O/^l5
R₃=R₄=CH₃-		0,2	1/4	75	173,3	Ι 50	0,2	0/S
R₁=IC H₇O-	150			150
R₂=H	250	0,5	0/5		133	75
R₃=R₄=CH₃-		0,2	1/3	100	156	ι so
R₁=HC₄H₉O-	200	0,6	0/5	200	118
¹R₂=H	3OO	0,3	0/4	100	150
R₁=SeCC₄HqO*-	200	0,1	1/4	200	160
	3OO	o,3	0/4	250
R₃=R₄=CH₃-	4oo	°'¹	0/4
R₁=C₆H₅CH₂O-	350
R₂=H	750

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BAD ORlGfNAL

Worts, der iabelle 1

I	&?&$$■%>* Ü Ti &>tI i?f^ f*Hi	= H	lhrlicli Oa der feus Π' ^:·'ί t, "Φ/Ci	0,9	-iciiiom ά Ai	Iieukämie 1210 der Maus in # Überl.Zeit 50 Poeis %	,3
I '		= R₄ - CH₃-	125	0,.2	0/4	75 131	,3
(C₂	Ii-1 ) ^Xi ^v ti ί¹» "υ ίι ί ι ^U"*	¹ HCl (C₂H₅)2R-CH₂-CH₂-O-	250		0/4	. 50 156	,8
H₂	β Il	^R2 -				2OJ 168
H₃	= R₄ » CH₅-	H-
H₁ =	H₂CMIH^H₂-O-	R₁ .		0,8
	~- ΤΙ	R₂ =	175	0,3	0/4
R₃	-■ R₄ - CH₃	R₃ =	250		0/4
R₁-HOGH₂CHj^O-	= H
R₂	= R₄ a CH₃-		0,3
«3	C₂H₅O-	250	0,5	0/4
H	250	0,2	0/4	250 180
R₄ - O₂H₅-	350		0/4
	0,5
350	0,3	0/4
500	0,1	0/4
700	3/1

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BAD

Ports, der Tabelle 1

R -R^

R₂=H

R₁=NH

-NMNi-N_x

COOCH-

/CH-,

500 0,5 0/5 800 0,1 1/4

100 0,4 0/4 175 0,3 0/4

300 0,2 0/4

100 153,3

300

Testtumorj G.W. 77
Verbindungen der
allg. B'orm

Dosis T/C d/a

R₂=H

40 0,4 0/5 75 0,3 0/5

=(C₂H

HCl

R₂=H
R₃=R₄=CH₃-

75

100

0,3 0/5

0,2 1/

Bei den Testtieren der Prüfung am G.W. 77 ^wa** keine Gewichts abnahme zu beobaohten.

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BAD

In der Tabelle 2 werden die Testergebnisse des aus dem Stand der Technik bekannten 1~Phenyl-3,3~&imethyltriazene (Proc. Soc. exper. Biol, Med. 90, 484 (1955)) angegeben. Getestet wurde an folgenden Tumoren:

Ehrlich-Carcinom, Jensen Sarkom, menschliches Dickdarmcarcinom "GW 77" und Leukämie 1210.

Tabelle 2

Ehrlich-Carcinom der Maus

Dosis T/C d/a

Jensen-Sarkom der Ratte

Dosis T/C d/a

GW 77

Dosis T/C d/a

Leukämie 1210 der Maus Überl.zeit 50 in $> Dosis $>

50
100

0,9 0,3

0/5 0/5

30 0,8 0/5 60 0,6 0/5

10 0,7 0/5 20 0,6 0/5 40 0,4 0/5

50 75

126

140

Das Testen bei höherer Dosierung hat mehrere tote Tiere zur Folge. Bei den Testtieren der Prüfung am GW 77 war eine starke Gewichtsabnahme zu beobachten.

Die maximalen Hemmwerte des größten Teils der erfindungsgemäßen Verbindungen beim Ehrlich-Gareinom und Jensen-Sarkom liegen unter 0,3, zwischen 0,2 und 0,0.

In zwei Fällen wurden beim GW 77, einem sehr resistenten Tumor, bei Behandlung mit zwei erfindungsgemäßen Verbindungen (siehe Tabelle 1) Werte von 0,3 und 0,2 erhalten, ohne daß die Behandlung einen Gewichtsverlust der Tiere zur Folge gehabt hätte.

Die maximalen Hemmwerte der erfindungsgemäßen Verbindungen für

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die mittlere Überlebenszeit 50 "bei der Leukämie 1210 variieren mit einer Ausnahme zwischen. 153»3 % und 180 % (vgl. Tabelle 1 mit Tabelle 2).

Von sswei Vertretern der erfindun&sgf >"äßen Verbindungen, dem 1-(p-Carbäthyoxy-phenyl)~3,3--dimethylt.i ^razen und dem 1-(p~ Buthoxy-phenyl)-3,3-dimethyltria ssen wurden die DIy^. ,,--Werte (Maus p.o.) bestimmt» Sie liegen bei 2000 wp-Jkg. Der DL_Krt~ Wert (Maus p.o.) des literaturbekannten 1-Phenyl~3»3-dimethyl-· triazene wurde bei 300 mg/kg gefunden. Vergleicht man die Toxizität der Substanzen derart miteinander, daß man den Anteil der DLcq in % ausdrückt_? der nötig ist, um aei einer Therapie am Ehrlich-Oarcinom einen T/C-Quotienten von 0,3 κυ eri'eicheLij, so bra.ucht man a.B, "vom p--(Carbäthoxy-phenyl)-3,3-dimethyltriazen nur 12_V5 % der DLj-q, vährend man vom 1-Phenyl~ 3_f3~dimethyltriazen 33,3 % der DijcQ benötigt. Daraus ergibt Bich ganz klar der günstige therapeutische Index der erfindungsge-BiäSen Verbindung (vgl. Tabelle 1 und Tabelle- 2).

Aus der Tabelle 1 ist zn entnehmen, daß die Toxizität der übrigeii Verbindungen in der Nähe der Toxizität der zitierten Verbindun gen liegt.

Die starke Gewichtsabnahme bei den Hamstern bei der Therapie mit 1-Phenyl~3,3~cs.lmothyltriazen deutet ebenfalls auf eine hohe Toxizität hin. Dageger wird bei der Therapie mit den erfindungsgemäßen Verbindungen keine Gewichtsabnahme festgestellt. üb kommt noch hinzu, daß von den aus dem Stand der Technik

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bekannten 1-Phenyl-3,3~dialkyltriazenen (Lit„8.üben) behauptet wird, nur die 3»3-Dimethyl~triasiaiiö aeien wirksam, was unseren Befunden widerspricht (siehe fabeile 1)

Die erflndungsgeinlßen VerMndimgöii Übiiitieifea. in der Wirkung beim Shrlieh-Carelnom, Jensen^Barkom» am menschlichen .üiekdarßi"-Careinom (G¥ 77), wachsend in der Baakentasche von Hamatam und in der Leukämie 1210 den Stand der Technik beträchtitea und sie sind sehr viel weniger toxisch als das aus dem Stand der Technik bekannte i-PhenylXJ^-dimethyltrlazen.

Die immunsuppressive Wirksamkeit der erfindungsgemäßen Verbindungen wird an zwei Testen nachgewiesen:

1· Hämagglutinationeteat an der Maus

Ca. 20 g schwere männliche Händler-Mäuse erhielten 0,2 ml einer 5$igen Suspension von gewaschenen Haramelerythrozyten i.v. 1 Tag später wurden die Tiere einmal durch i.p.-Injektion der Testsubstanzen behandelt. Am 7. Tag nach der Immunisierung wurden die Tiere durch Herzpunktion entblutet und im Serum der Hämagglutinationstiter bestimmt. Pro Dosis und Substanz wurde ein Kollektiv von 10 Tieren eingesetzt. Getestet wurde ein Mischserum aus diesen 10 Tieren. Der Hämagglutinationstiter wird angegeben durch die letzte Verdünnung, in der eine Agglutination noch sicher ablesbar ist, in Potenzen der Zahl 2, z.B.5—>2 - Titer der . Kochsalzkontrolle in der Serumverdünnung 1:2 , behandelte Gruppe Titer 1 : 2².
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10 9 8 3 4 /16 4 0 bad

Auswertung; Eine sichere Abnahme des "ggiutinin titers liegt vor, wenn die behandelte Gruppe mindestens 2 .Verdünnungsstufen niedriger liegt als die Kontrolle.

2, Hauttransplantationstest an der Inzueht-Maua

Gea tanzte Hautstückchen von ca. 1 cm , "chmesser werden zwischen den Stämmen C3H'und B6D2P1 ausgetauscht, i Tag nach der Transplantation wird mit der The ·,.■;*.) e begonnen/ Wenn nicht anders angegeben, wird jeden 2. Tiß behandelt» Die Abstoßung wird makroskopisch bestimmt, dir- iberlebensverlängerung der Transplantate wird in '& -n Vergleich zur Kontrolle angegeben. Z.B. bedeutet + 3Ο·^₃ daß das Transplantat im Mittel des Kollektivs von IO Tieren langer überlebt als die mittlere Abstoßongszeifc der Kontrollgruppe.

Auswertung: Eine immunsuppressive Wirkung einer Teotsubstanz wird dann genommen, wenn die prozentuale Verlängerung der Überlebenszeit größer als 20$ ist.

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^ßAD

Hämagglutinationstest an der Maus

Erfindungsgemäße Verbindung

CH,-O-C-

/⁰¹V

_„

CH.

C₅H₇O-C-/

O
η

-N=N-N

CH,

PS

CH-x, .CH-.

-N_V

'^Λ3

.CH-CH₀
/ 2

'3

13

-N=N-N

fCH,

It

H_oC=CHCH_o0-C-f \>-N=N-

It

H0CH₂CH₂0-C-f3 -N=N-n(

CH-

PM

ClCH₀CH₀O-C-

.CH.

-N=N-N^ 0

^l3

mg Elnw»/_kg

200 5

250 5

Titer

50

300

Lt A 11 515

,CH,

1Ö9834/16ÄÖ - 19 - ■ 200

200

300

« 0

5 «»0

5*2-

6 » 2

5*2

5- * 2

6 » 2

IP

Injs"dh.t-Maus

CII, · "3

he A 11 513 - 20 -

109834/1640

Erfindungsgemäße Verbindi-rigan ^α'^?ί ^ίΚ -^im"' ^ΰ6 2 3

■^g Un*) (in

+ 18 2;

	Ab- be-	■¥ H-(	+113
90		■49	+130
70 (bis zvr stoßun,-/, handelt;	.0»		+145
■ 70 ρ	+ 27	+ 32
135 ρ	+ 87

PH

\^-n=n»n; ^d 30 + 8

OH₅

CH-» ^M CH,

0 w

»N«4*~N^ ^? 9^!> + 1 '5 f 30

0 „

It own. , Uli-,

BAD

Beispiel 1: .

I65 g (l Mol) 4-Aminohenzoesäureäthylester werden in 1,6 1 Wasser und 250 ml 12 η Salzsäure gelöst und eine Stunde bei 30 C gerührt. Bei 0 C läßt man dann rasch eine Lösung von 69 g Natriumnitrat in 70 ml Wasser einlaufen. Dann wird eine Lösung aus 300 g Soda, 600 ml Wasser und 132 g einer Sigen Dirnethylaminlösung bereitet, zu welcher die Diazoni-

umsalzlösung bei 0 C rasch getropft werden muß. Das gebildete 1- /~4-Äthylearboxy~phenyl__7-3,3-dimethyltriazeix der Formel

C₂H₅O-C-^

scheidet sich kristallin aus und wird abgesaugt und an der Luft getrocknet. Es ist aus wässrigem Alkohol umkristalli sierbar. Pp. 39 - 41° C.
Analyse: C₁₁H₁₅N₃O₂ (221)-

Berechnet: C 59,7^ H 6,7$ N
Gefunden : C.59,353* H-6,

'Die in der nachfolgenden Tabelle 3 aufgeführten erfindungsgemäßen Verbindungen wurden analog erhalten.

Fallen die Triazene als Öle an, so werden sie mit Methylenchlorid extrahiert, die organische Phase wird über Natriumsulfat getrocknet und das Methylenchlorid wird abdestilliert, Die Verbindungen sind dann genügend reim. Teilweise sind die öle deotillierbar.

109834/1640 Le A 11 513 - 21 -

Beispiel Erfindungsgemäße Verbindung

ti

fCH,

CH

► -Ν=Ν-Νχ

CIi

Siedepunkt Analyse

(C)

baw.Brechungs- Ber.N Gef.lf Index

20/Po 20,00

56-37 17,89 17,76

CH.

Il

CH

\\-N=N-N

CH

O it

(CH₂) -5°"^C-

'CH-•17,89

ia:vi.o8 16,95 17.

CH-,

. CH-. O
t 3 ti

15,7 rf

O ^v" '

16,78 16,42

it

(C₂H₁.) N-CH₂CH₂O-C-^JA -N=N-N^

CH 1,5820 19,13 ί β „ B

HCl;

CH

Oil

it

.CH-,

CH-

CII-.

CH-.

12,78 12,70

17>95 17,78

81

17,78 18,32

Il

/OH₃ niol·^: dost.
■Öl

!.· 16,48

Lm A 11 513

109834/1640

— 22 -BAD ORIGrMAL

Beispiel Erfindungsgemäße Verbindung

Schmelzpunkt Siedepunkt

bzw.BrechungB-index

Analyse
Ber.N Gef.N

13 fV

⁰ lt

ti

ti ι~Λ.

C₀H₁-OC-^A)-N=N-NC

CH -

80 H*85 14,51

16,91 16₈T0

0,05πιπ\/134 15,18 15,76

19

20

2 CH

-C-/^-N=N-n(

CH,

^A3

CO₂CH₃

^X3

' n-N=N-Nv ^

S ^ ^CH3

^U NO₀ ^y

0 ^

0 ClCH₂CH₂O-C-/

175 2T.09 27,25

88 22,2o 21,80

81 21,14 21,8o

nicht dest·

PO öl .
η °= 1,5770 15,20 15*00

87 16,42 16,02

Le A 11

- 23 109834/1640

Claims

αν

Patentansprüche

1. Verbindungen der allgemeinen Formel

worin

R₁ für einen gegebenenfalls substituierten O-Alkylrest, einen gegebenenfalls substituierten O-Phenylrest, einen gegebenenfalls substituierten O-Benzylrest sowie für NH₂, Mono- sowie Dialkyl- bzw. Cycloalkylamino steht, wobei im Falle des Dialkylaminorestes die Alkylgruppen gemeinsam Bestandteil eines 5- bis 7-gliedrigen heterocyclischen Ringsystems sein können, R^ weiterhin einen Phenylamino- sowie einen N-Phenyl-N-alkylamino-Rest bedeutet,

die Reste

R₂ bis R₄ für Wasserstoff, Halogen, Alkoxy, Merkaptoalkyl, SuIfonylalkyl, -0-CH₂-COOX stehen, wobei X für Wasserstoff, Natrium, Kalium oder Kalzium steht und R₂ bis R₄ weiterhin Alkyl oder eine Nitrogruppe bedeuten sowie für einen gegebenenfalls substituierten Phenylrest stehen können,

Rc und Rg für gegebenenfalls eine Doppelbindung enthaltende und gegebenenfalls durch Halogen substituierte Alkylgruppen stehen,

gegebenenfalls in Form ihrer Salze mit physiologisch verträglichen Säuren.

109 8 34/1640 Le A 11 515 - ²* ~

2, Verbindungen der Formel

A-

worin ^

R₁ für einen geradkettigen oder verzweigten, gegebenenfalls eine Doppelbindung enthaltenden Alkylrest mit bis zu 8 Kohlenstoffatomen steht, welcher durch Halogen (vorzugsweise Chlor, Brom, Jod), OH, O-Alkyl (vorzugsweise bis zu 4 Kohlenstoffatomen), Benzyl, NH₂J H-Alkyl (vorzugsweise 4 Kohlenstoffatome), ϊΐ,Μ-Dialkyl mit vorzugsweise bis zu 4 Kohlenstoffatomen im Alkylrest substituiert sein kann, sowie für eiii'jn cyr;loaliphatischen Rest mit 5 oder 6 Kohlenstoffatomen, wobei im Falle des Dialkylaminore-Btes die beiden Alkylreste gemeinsam auch Bestandteil alnee 5- bis 7~glie&rigen heterooyclischen m Ringaystemü sein können, welches als weiteres Heteroatom noch Sauerstoff, Schwefel sowie im Falle des 6-Rings einen niederen N-Alkylrest enthalten kann,

Rc und Rg für gleiche oder verschiedene gegebenenfalls eine Doppelbindung enthaltende Alkylreete mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen stehen, und

A Wasserstoff sowie die Gruppe -0-CH₂-OOOI bedeuten kann,

wobei X für Wasserstoff, Natrium, Kalium oder Kalzium steht,

gegebenenfalls in Form ihrer Salze mit physiologisch verträglichen Säuren.

10983 4/1640 Le A 11 513 - 25 -

BAD

3. 1-(4-lthylearboxy-phenyl)-3,3~dimethyltriazin,

4. 1-(4-(2-Diäthylaminoäthyloarboxy)"phenyl)-3,3~dimethyl- ' triazen, gegebenenfalls in Form seiner Salze mit physiologisch verträglichen Säuren.

5. Verbindungen der Formel

CpH,-0OC-f \\~N = N - κC ° \ — / OH

''0-CH₀-O-O-Y ' ³

Y = Na, Ca.
T"

6. 1-(4-Benzyl-carboxy~plienyl)-3,3'-dimethyltria2im,

7. Arzneimittel ,gekennzeichnet durch einen Gehalt an einer Verbindung gemäß Anspruch 1.

8. Verfahren zur.Herstellung von Arzneimitteln, dadurch gekennzeichnet, daß man Verbindungen gemäß Anspruch 1 als Wirkstoff verwendet.

9. Cytostatika, gekennzeichnet durch einen Gehalt an einer Verbindung gemäß Anspruch 1.

10. Verfahren zur Herstellung cytoetatischer Mittel, dadurch gekennzeichnet, daß man Verbindungen gemäß Anspruch 1 als Wirkstoff verwendet.

11. Immunsuppressive Mittel, gekennzeichnet durch einen Gehalt an einer Verbindung gemäß Anspruch 1.

109834/1640

^t1 ?¹? - 26 -

12. Verfahren zur Herstellung immunsuppresßiver Mittel, dadurch gekennzeichnet, daß man Verbindungen gemäß Anspruch als Wirkstoff verwendet.

13. Verfahren zur Herstellung neuartiger im Phenylkern substituierter 1-Phenyl-3,3-dialkyltriazene, dadurch gekennzeichnet, daß man aromatische Amine der allgemeinen Formel

worin

R.J für einen gegebenenfalls substituierten O-Alkylrest, einen gegebenenfalls substituierten O-Phenylrest, einen gegebenenfalls substituierten O-Benzylrest sowie für NHp, Mono- sowie Dialkyl-*· bzw. Cycloalkylamino steht, wobei im Falle des Dialkylamlnorestes die Alkylgruppen gemeinsam Bestandteil eines 5~ bis 7-gliedrigen heterocyclischen Ringsystems sein können, R.J weiterhin einen Phenylamino- sowie einen N-Phenyl-N-alkylamino-Rest bedeutet,

die Reste

g bis R. für Wasserstoff, Halogen, Alkoxy, Merkaptoalkyl, SuIfonylalkyl, -0-CH₂-COOX stehen, wobei X für Wasserstoff, Natrium, Kalium oder Kalzium steht und R₂ bis R. weiterhin Alkyl oder eine Nitrogruppe bedeuten sowie für einen gegebenenfalls substituierten Phenylrest stehen können,

le A 11 515 - 27 ~

: 109834/1840

in wäßrig saurer Löaung diazotiert und mit einem sekundären Amin der Formel

-R₅
HN<^ ° II

worin

R_r und Rg für gegebenenfalls α.,roh Halogen substituierte Alkylgruppen stehen, die gegebenenfalls

eine Doppelbindung enthalten,

umsetzt.

Le A 11 513 - 28 ~ A 09 ?314IA(ΰ UO

BAD ORIGINAL