DD271641A1 - Verfahren zur isolierung von pregnant mare's serum gonadotrophin pmsg - Google Patents

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Isolierung von Pregnant Mares Serum Gonadotrophin (PMSG). Das Verfahren hat das Ziel, in leicht beherrschbarer Weise die kostenguenstige Produktion groesserer Mengen von hochreinem PMSG aus dem Serum traechtiger Stuten zu ermoeglichen. Die Aufgabe wird durch den Einsatz der monoklonalen Antikoerper BL-PMSG/1 bis 2, insbesondere durch die Verwendung des monoklonalen Antikoerpers BL-PMSG/1, als bindungsvermittelnde Substanzen in affinitaetschromatographischen Verfahren geloest.

Description

-2- 271

Gewinnung von PM8G au· 8<t«t*r»ser<um

1, Präparation des Immoblllilerten monoklonailen Antlkö r,per« 1KX>img de· fnonoklonailen Antikörpers werden null iOml CNiBf* aktiv!«"t»r Sttpihttroae »ur ReekHon gebracht, Niach der Haaiktlon wird daj AMInHetigeil laut Hei«tellervor*chrlft gewaichen, «och vorh an den« reaktive Qruippen blockiert und mit dem Wa «cn puffo r »qtiJilbfler t.

2. Da« so prÄpailerte Afilnltitigel wJrd Mit 34 Stutensaruwi \n ReakMon gebracht Dabei kenn da« Serum langsam über da« QeI₁ welches In eine SHuIe gepackt wurde, gepuimipt werden oder die Belaiduing dos Qe)Isewlgt Im ßetch-Verfehren. Nach der Beladung wird da« Geil vom Ffemdsuibstainzen irelge*« sehen. Die eiutlon dies PM¹SG ar folgt mit Eselgiflure/Ammonacetat· Lösung I₁M 3,0-3,5,1 mof/Φ), Dan«irlhailtenetoochrelne PMSQ wind Im einen neulralon Puffer ütoerlüthrt.

Claims (2)

1. Werfaihirem .zur teoillleiruing von iPiregmaint M aire's Semm Qtoinadiotrapihilin (IPMSQ))

   bis
2. 2 (ZIiM 0272 umd 02711 boworaugt der monaMonato Antikörper BL-PMSG/1« am feste Träigieirw>a*eirliailiiiein getbyindiein« als sipeüiiifilscih bindende itamipoiiwrotein füir <#θ

   Öle Erfindung betrifft ein Verf aihren zurGewinnung von Pregnant Mare's Serum Gomadotroiphln (MSO) au« dem Serum von trächtigen Stuten. Dieses Hormon «Ad in der WetertafiirmedMn ta »atomem biotechnischer vieriaihren .tut Bruntt- umd

   Gh a reMerlileru η ο der bekaminrten technischen Lö tunigien

   Zur Qewlnnuing von gereinigten oder »ragerelcherten PM'SQ-PrApair.aiten vwerden verichledeme Fraiktlonlerungiimethoden elngeseui, die auf iFIlitongtscMMon umd ikonwentianellen Ohiorimaitographileimethoden beruhen, Gegenüber den k'la«ilechen Verfahren, die auf veiwchledenewFllungem sowie lonenauit«

   weisen afinltitschiromatogrftphliche Verfa*>f.en unter Verwendumg ikonvenitloinöMer poly/klomaler Antlkönper Vorteile auf, wie höhere^nrelcherumg des PMSG giegenfliber iFremdproiteiliivera, schomemdoro Prftparallonsbedlmgiumgien urad dawilt bessere Erhaltumg dflr biologkchen Elgienschafiten des PMSiQ.

   Anitlköriper besteht da^ln, daß die Gewlnnuing der goolgweten Amitlköripeir uinitremmteair mit den generelilen NaehteHen von

   zJB.hilinsilc'hiichdorSipezlfl«

   nfichs-ten sowie sehr aufwendige ¥erfaihren zur iBnieiliuinig der 'MoinospezWiiÄ. Olese iNactoelte wenden noch gr*v!e riwdier, woran mam berücksichtigt, daß aufgrund der !begrenzten V'erweimdniiniisdiaiuier des aiiiiiinilitäitschir.omiategir.aipihlec'hoin Reagens' die.

   MonoWonaile Antiköriper, die von peTmuameint wachseinden und pr.odwzJer.enden Wytoildomen «ezwmlieil wenden, ete*ien ta praktisch ausreichander Menge und über einen tiheope-Msein unibegireniten ZeUfauim zur Veflüigiuing, so daß »leih auf Ihrer

   Die EriFindu ng tat des Ziel, ein zelteparendes, kostengiinstilges, echoine ndee und eimfach zu ikamAalbemdies Vwf mhiem zur Gewinnung von PMSG aius dem Serum trachiilger Stuiten »niuigietoem.

   Dafilegung des Wesens 'der iErflnd#ng

   Der Erfiindu ng liegt die Auigabe zuigirumde, eim nachwoizilöh ibiames VGriaihron zur AimiinMuing von PlMS(G aws Sojfum oder Plasma won tröchitig* η Stuiem zu eralwickeiln, welches nach dem ΡιηΙιηφ der AWiniMlftchpemaitogr.aipihte aribelM um ^J

   Als TrägerOTaitefiaMeineignen sich alle Gubstainzein, die sich ailsfesitpthaae^^

   oder utolhprodiulkte des PMSG werfen nniiit dem träigtenfi-xterten «loinoikteirailew Anit*§nper

   wird diieser Kompilex von BegileHau bs t a nzen freig ewasch em. list die W/aschiflässjgikeiiit von iieglbiitlkoffinpameiiiitein ff ei, was duir<ch Analy se gepraft wird, wird das geb um deine PMSG schonend desoribiert. Zw iDe soripititen dienen ulbMche lEMemsMiitoell, die die

   Das öliuiierte meSG wird danach In «!nein Pufiier überfülhirt, ta dem es ölber illnpiir<e ZaIt iMtiair isit.

   riBi-PMS'G/luindisimdilmZIMuira^^

   VM 4m Hyferiidomen iH-iBl-PMStG/1 und 2 sezenniiert. Öle iHybridome sfad an der SeMlom iiiiowlssenichafton der iKaiM-Marx-Uiniversitäit zugängiliicb,