CZ49895A3 - Sulfated alpha-glycolipid derivatives as inhibitors of cellular adhesion - Google Patents

Description

Předložený vynález poskytuje nové serie^ sulfátoýanýcfj o(-g lýko lip idových sloučenin, jejich farmaceuticky přijat' telných solí a jejich farmaceutických přípravku jako in hibitorů selektinera zprostředkované buněčné adheze, které .jsou vhodné při léčbě záriětlivych_chor.obnv.ch—prsc-es-ů— a—j-iných^--

patologických stavů zprostředkovaných vazbou selektinú, zahrnutých v mezibuněčné adhezi.

Dosavadní stav techniky

P-selektin /CD52, GMP140,-PADGEM/ je membránový glykoprotsin velikosti přibližně 140. kDa, exprimovaný aktivovanými destičkami a vaskulárními endothéiiálními buňkami. V kli- .

dových destičkách a vaskulárních endótheliálních buňkách je P-selektin sekvestrován v 3 granulích /Hsu-Lin S. a kel.,

J.3iol.Chem., 250, 9121-9125 /1984/, a Stenberc Ρ.Ξ., J.

Cell Diol., 101, 880-385 /1935// e Weibel-Palaáa-ových tělíscích /ílcDver a spol., J.Clin.I.nvest., 34, 92-99 /1989/, a Scnfanti R. a spal., Blecd, 73, 1109-1112 /1939// odpovědi na media tory zánětu jako je trembin /ilsu-Lin S., a kol., J. Biol.Chem., 253, 9121-9125 /1934/ a Gtenberg P.S., J.Cell .Sici101, £80-235 /1985//, histamin /Hattori R. a kol., J.Biol.Chem., 254, 7758-7771 /1939/, složky kcmplementu /Hattori R., a spol., J.Sici.Chem., 254, 90529050 /1939// nebo peroxidy /Patel X.D., a spol., J.Cell.Biol., 112, 749-759 /1991// a cytokinv jako j-e interleukin-1 á faktor tumor neerosis, je P-selektin rychle mobilizován z těchto intracalulámích zásobníku k buněčnému povrchu, kde zprostředkuje počáteční vazebné interakce aktivovaných destiček s “* ! , i i ieukocvty a vaskulární stěnou a Isukocvtú s aktivovanými ]

vaskulárními“éndetheliálními buňkami. P-selektin jo členem rodiny adhezních molekul, které zahrnují Ξ-seIektin /BLAM-l/p který je exprimován aktivovanými vaskulárními endotheliál-2nimi buňkami a L-selektin /Leu 8, LAM-1, LEČAM/, který je axprimován leukocyty. Tyto proteiny jsou membránové proteiny typu I a jsou složeny 2 aminoterminalních čomén následovaných doménou podobnou epidarmalnímu růstovému faktoru /EG?/, různým poetem opakování odvozených od receptoru konplementu /CR/, hydrofobní membránovou ‘‘soanning 'oblastí a cytoplasmickou-doménou.-- Jak - je- in- — dikováno vysokou sekvenční homclogií, nejsou tyto proteiny pouze strukturně ale také funkčně spojené, modulací dopravy leukocytú periferní krve způsobením adhezivních interakcí mezi leukocyty a endotheliálními buňkami. Tyto vazebné interakce jsou převážně způsobeny kontakty mezi lektinovou doménou salektinu a různými karbóhydrátovými licandv.

I když je v současnosti rozšířen- názor_t že,interakce lektinová dcména/karbchydrát je v první řadě zodpovědná za zpras Předkováni vazby ?-selaktin/myoloidní buňka, není přesný molekulový charakter P-selsktinovéhc licandu znám. Vazba ?-selektinu k myeloidním buňkám je Ca“'¹’ závislá jakož i citlivá k neuraminidasa a proteasa. Vazba ?-salektinu k myeloidní buněčné linii může být inhibevána růstem buněk za přítomnosti selenátu sodného a inhibitoru sulfataca. P-sel-ektin byl zjištěn jako vázající se k karbohydrátu La' /CD15//Larsan Ξ. a kol., Cell, 53, 457474 /1990// a jeho « w 4 * alacvj.cvan-o zořme, e i a i y i — i e' /3 La'/ /Erbe V.E. a kol., J.Cell Eiol., 119, 215-217 /1992// a je zde zřejmá, že tyto karbohydráty a/nebo jim podobná látky jsou přítomny k R-selektinu při neznámém počtu buněčných povrchových proteinů, zahrnujících L-Selektin. Různé aniontevé polymery, zahrnující hsparin, zucoidan a dextran sulfát, byly také prokázány jako ir.hibující P-selektinem^zprosPředkovanou? adhezi'/Skinnera kol., Siochem. Eiophys . Pes .Commun., 154, 1375-1579 /1939/ a J.Eiol.Chom., 2S5, 5371-5374 /1991//. Dála byl P-selektin tako shledán jako vázající 3-sulfatované palaktosyl-3ceramidy /sulfatidy/ /Aruffo A., a kol., Cell, 67,

35-44 /1991//. I když je třeba ještě zhodnotit tuto fyziologickou relevanci, je známo, že myeloidní buňky mohou exprimovat velká množství sulfatidú při aktivaci. Toto potvrzuje/ že by sulfatidy mohly mít podíl v leukocytové extravasaci v místech zánětu nahrazením adhezi zprostředkujících leukocytovýcn povrchových ligandů, a tím umožnění účinného výstupu leukocytů z krevního proudu v místech zánětu.

Objevilo se mnoho publikací/ které popisují nová činidla jako· inhibitory buněčné adhezs. některé z -těchto- publikací,-ale -nejen-ty,-zahrnují- použití-----— peptidů a karbohydrátových 'Struktur , v Mezinárodní patentové přihlášce WO 92/01718, publikované 6.února 1992; použití,substituovaných .laktosových a laktosaminových derivátů v Mezinárodní patentové přihlášce WO 93/10795, publikované 10.června 1993; použití glykokon jugátů, v Mezinárodní patentové přihlášce NO 93/05303 publikc-. váné. 1.dubna. 1593 ; použití sulfatovaných glykolipido- vých derivátů Y.Suzukim a kol., Biochem.Bíophys .P.es. Commun., 190, 425-434 /1993/ a použití oligosacharidů i-i.S.í-ulliganam a kal·., Naturs, 354, 145-151 /*21993/.

Nicméně existuje mnoho situací, ve kterých je odvádění leukocytů adnezí k endctheliálním buňkám abnormální a konečným výsledkem je poškození tkáně místo její opravy. Existuje zde tedy potřeba vyvinout specifické a účinná sloučeniny, které nohou inhibovat počáteční buněčný·adhezní proces. Je objektem předloženého' vynálezu poskytnout nové sulfatované glykolioidy, které jsou inhibitory buněčné adheza a jsou proto vhodné pro použití při léčbo a/nebo prevenci akutních nebo chronick' zánětlivých chorob jako je rheumatoidňí arthritis, asthma, alergické stavy, psoriasis, saptický šok a jiné indikace .-4jako je reperfuzní poškození, syndrom rsspiračního stře su dospělých, ischemie, vředová kolitida, vasculitida, atherosklerosa a zánětlivé střevní choroby, sklsrosa multiplex a nádorové metastázv.

Podesta vynálezu

Předložený 'vynález- poskytuje -nové -suifatované.

OČ-glykolipidy obecného vzorce I

OR^{6 R}'Sto,

RO-Χ^ή R^O C /1/

NHR ο^Λγ·¹⁵

OR^S ·· i?.

ve kterém R, R“, R“, R^J, R', R'^í a R^w mají dále uvedený význam, nebo jejich netoxické farmaceuticky přijatelné soli, solváty nebo hydráty, které jsou inhibitory selektinem zprostředkované buněčné adhaze. Předložený vynález také poskytuje farmaceutická přípravky, obsahující uvedené- suifatované íí-glykolipidy a způsob léčby nebo prevence stavů, které jsou charakterizovány selektinem zprostředkovanou buněčnou adhazí jako jsou zánětlivé choroby a patologické stavy u savců...... ' ' Předložený vynález poskytuje nové suifatované ^ý-glykoligidcvé .sloučeniny, která jsou inhibitory ?-salaktinem zprostředkované, buněčné adhaze a které mají obecný vzorec 1

-5OR⁶

NHR /1/

R²©

0R^s kde .

R je acylový zbytek mastné kyseliny,

R¹ Je^-(CHsCH) -(.C.H_O) -CH-,..:_____________ - . ----------- —----~ 2 3 4 ^m 6 ^{n 3}

R , R , R a R jsou nezávisle alespoň dva -SO-H,

3 4 ³

R , R , R 5 6

R a R jsou každý nezávisle vodík, nesubstituovaný nebo substituovaný alkanoyl, arylalkyl nebo arylkarbony1, kde uvedený substituent je vybrán ze skupiny, zahrnující halogen, C^^alkyl, trifluormethyl, hydroxy a C^_₄alkoxy, m je celé číslo 0 nebo 1, n je celé číslo od 5 do 14, včetně, nebo jejich netoxicke farmaceuticky přijatelné sole, solváty nebo hydráty.

Předložený vynález také poskytuje způsob léčení nebo prevence zánětlivých chorob a jiných patologických stavů, charakterizovaných buněčnou adhezí zprostředkovanou selektinem, který se vyznačuje tím, že se podává terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce I nebo její netoxicke farmaceuticky přijatelné soli, solvátu nebo hydrátu.

-6Výraz C^^^alkyl a C₁_₄alkoxy jak je zde použit a v nárocích /pokud ze souvislosti nevyplývá jinak/ znamená alkylové skupiny s přímým nebo rozvětveným řetězcem, jako je methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl terč. butyl. Výhodně obsahují tyto skupiny 1 až 2 atomy uhlíku. -Výraz arylalkyl jak je zde použit a v nárocích . znamená fenylovou skupinu, která je připojeny přes alkylovou skupinu, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku jako je methyl, ethyl, propyl, butyl a podobně a nejvýhodněji znamená benzyl nebo fenylethyl. Pokud není uvedeno jinak, výraz halogen, jak je zde použit a v nárocích, zahrnuje brom, chlor, jod a fluor, zatímco výraz halogenid zahrnuje chloridový, bromidový a jodidový aniont. Výhodně je halogenem chlor nebo brom. Výraz alkanoyl jak je zde použit a v nárocích znamená acetyl, propionyl a podobně.

Výraz nezávisle alespoň dva -SO^H jak je použit zde a v nárocích, znamená, že alespoň jakékoliv dva substituenty vybrané z R , IV a R musí být -SO-^H jakož i jakékoliv tři substituenty i všechny čtyři substituenty mají tento význam a jsou poskytnuty disulfatované, trisulfatované nebo tetrasulfatované glykolipidy. Vlnitá čára /j/V ve strukturním vzorci, ke které je připojen R^q jak j_e použita zde a v nárocích znamená, že vazba může být buá v axiální nebo ekvatoriální konfiguraci která se objevuje v monosacharidech vybraných z galaktosy a glukosy a raannosy.

Výraz netoxická farmaceuticky přijatelná sůl jak je použit zde a v nárocích, zahrnuje netoxické adiční sole s bázemi anorganickými a organickými. Vhodné anorganické báze jako jsou báze alkalických kovů a kovů alkalických zemin zahrnují kovové kationty jako sodíku, draslíku, hořčíku, vápníku a podobně. Vhodné organické

-7báze zahrnují aminy jako je amonium, trialkylaminy, pyridin, ethanolamin, N-methylglukamin, N-methylmorfolin, lysin, arginin a podobně.

Určité sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou existovat v nesolvatovaných formách jakož i solvatovaných formách, zahrnujících hydratované formy jako jsou monohydráty, dihydráty, hemihydráty, trihydráty, tetrahydráty a podobně. Produkty mohou být pravé solváty zatímco v některých případech mohou produkty pouze zadržovat náhodně rozpouštědlo nebo být směsí solvátu a náhodné z_adržen_ého_rozpouštědla. Je třeba„uvést,_že_pro —, odborníky v. oboru, bude zřejmé, že solvatované .formy jsou ekvivalentní nesolvatovaným. formám .a, jsou míněny .. jako spadající do rozsahu.předloženého, vynálezu.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu obsahují monosacharid vybraný z galaktosy a glukosy. ^a mannosy. Přirozeně se vyskytující sulfatidy z mozkové tkáně jsou částí, třídy sloučenin známých jako sulfatované cerebrosidy /N.S.Radin Handbook of Heurochemistry, vol.3, 415424 /1965//. Komerčně dostupné sulfatidy jsou směsí sloučenin, ve kterých je hexosovou skupinou převážně galaktosa a konfigurace hexosy v přírodních sulfatidech je v β-anomerní formě /C.C.Sweeley, Pure and Appl.Chem.,

61/7/ 1307-1312 /1989//.Naopak sloučeniny podle vynálezu jsou v alfa-ancmemí formě karbohydrátového podílu jak je uvedeno v chemickém

vzorci,, kde naaxialni vazha v pplo?e i.

v metode podle predlozeneho vynalezu výraz terapeuticky účinné množství znamená celkové množství každé účinné složky metody, které je účinné pro dosažení významného zlepšení pacientova stavu, tj. uzdravování chronických stavů, charakterizovaných buněčnou adhezí zprostředkovanou selektinem nebo zvýšením rychlosti uzdravování . .1 I . ... * takových stavů. Jestliže se aplikuje jednotlivá účinná složka, podávaná samotná, znamená výraz totéž pto samotnoú_s.l.o.žku—„Jestliže—se—podává—v—k-omb-i-naci-y— výrazse týká kombinovaných množství účinných složek, která vedou k terapeutickému účinku, jsou-li podávána v kom-3binaci, po sobě nebo současně. Výraz '* léčení, ošetření, léčba jak je použit v popise a v nárocích znamená prevenci nebo zmírnění choroby, tkáňového poškození a/nebo symptomů spojených s buněčnou adhezí zprostředkovanou seléktinem.

Výraz acylový zbytek mastné kyseliny jak je zde použit a jak je použit v nárocích znamená acylový zbytek přirozeně se vyskytující nasycené nebo nenasycené mastné kyseliny nebo odvozený od mastné kyseliny. Vhodné nasycené mastné kyseliny jsou ty, které jsou zde popsány a jiné známé mastné kyseliny jako je kyselina máselná, isovalerová, kapronová, kaprylová, kaprinová^Lau-;“ rová, myristová, palmitová, stearová, arachidová, .· behěnová, lignocerová, cerotová a podobně. Vhodné nena- .v. sycené mastné kyseliny zahrnují cis a trans isomery mastných kyselin jako je A. -decylenová, stillingová, g

-dodecylenová, palmitolejová, olejová, ricinoolejová, petrselinová, vaccenová, linoleová, linolenová, eleostepařové, punicová, likanová, parinarová, gadoleinová ; arachidonová, 5-eikoseinová, 5-dokoseinová, cetolejová, eruková, 5,13-aokosadienová, nervonová a podobně.

Podle předloženého vynálezu mohou být použity chránící skupiny hydroxyskupiny pro blokování nebo chránění hydroxylové skupiny a jsou to skupiny v oboru dobře známé odborníkům a výhodně mohou být uvedené skupiny odstraněny, je-li to žádoucí, metodami, které nevedou k jakékoliv destrukci zbývajícího podílu molekuly, například, chemickou nebo enzymatickou hydrolýzou, zpracováním s chemickými redukčními činidly za mírných podmínek, ozářením ultrafialovým zářením nebo katalytickou hydrogenací. Hydroxy-chránící /blokující/ skupiny, které jsou používány výhodně jsou ty, které jsou obvyklé v chemii karbohydrátů, zejména pro primární alkoholy, sekundární alkoholy a vicinální cis a trans dioly.

-9Vhodné hydroxy-chránící skupina mohou být například acylové skupiny jako je acetyl, trichloracetyl, f enoxykarbonylbenzylox.ykarbonyl. benzhvdryloxykarbonyl, trityloxykarbonyl, a 2,2,2-trichlorethoxykarbonyl, etherové skupiny jako je methoxymethyl, benzyloxymethyl, allyl, benzyl,, p-methoxybenzyl, p-nitrobenzyl, benzhydryl, trityl nebo organosilylskupiny jako je tri/C^-Cg/alkylsilyl /např. trimethylsilyl, triethylsilyl, triisopropylsilyl, isopropyldimethylsilyl, terc.butyldimethylsilyl, methyldiisopropylsilyl nebo methyl-di-terc.butylsilyl/, tere.butyl-difenylsilyl, triarylsilyl /např...------------ - ... ....

'trifenylsilyl/' tri-p-xylysilyl/”nebo trialkylsilyl·/např.· -....... tribenzylsilyl/. Příklady takových a jiných vhodných hydroxy-chránících skupin a metody pro jejich formaci a odstranění jsou známy v oboru, např. viz Protective Groups in Organic Synthesis, 2.vydání, T.W.Greene a

P.G.M.Wuts, John Wiley and Sons, New York, 1994, kápitola 2 a zde uvedené odkazy.

Sloučeniny vzorce I mohou být připraveny různými postupy, které jsou ilustrovány zde v příkladech, v reakčních schématech a jejich variacích, které by měly být pro odborníky v oboru zřejmé. Různé sulfátem substituo váné glykolipidové sloučeniny vzorce I, kde karbohydrátovou skupinou je galaktosa a glukosa se výhodně připraví z meziproduktů vzorce V.a, Vb nebo Vc jak je obecně ilustrováno v reakčních schématech .3,4,5,6 a 7.

Příprava generických azidodiol-lipidů vzorce II________ /občas označovaných jako azidosfingosiny/, kde R^ má výhodně definovaný význam, je ilustrována v reakčním schématu 1. 2,4-0-Benzylíden-D-th.reosa se výhodně nechá reagovat s požadovanou fosfoniovou solí Wittigovou reakcí podle obecného postupu, který popsal P.Zimmermann a spol., Liebigs Ann.Chem., 663-667 /1988/ za vzniku . _?_o.žaďov a n éhio._t r a n s _o 1 e f i nu,’ _k d e n= 5-14T' ol_'ěf i nová ' .......

-10skupina musí být zachována v procesu pro poskytnutí sloučenin vzorce I, kde m=l, v definici íó nebo, je-li to žádoucí, může být olefin redukován obvyklými hydrogenačními postupy za případného poskytnutí sloučenin vzorce I, kde m=0 v definici r\ Hydroxyfunkce meziproduktu se zpracuje s anhydridem kyseliny trifluorsulfonové a azidem sodným za vzniku cyklického azidomezi-___ produktu s inverzí konfigurace s následujícím zpracováním s kyselinou pro odstranění benzylidenové blokující skupiny za vzniku požadovaného azidodiolového meziproduktu vzorce II, kde R¹ je -(CH=CH) -(CH-,) -CH_.

V předloženém procesu je výhodné blokovat /chránit/ sekundární alkohol nebo alylický alkohol a v takovém případě může být ve sloučenině vzorce II nejprve chráněn snadněji chranitelný primární alkohol, obvyklými bio- 'i kovacími /chránícími/ skupinami s organosilylovou skupinou jako je terc.butyldimethylsilyl s následující reakcí s požadovaným R substituentem, jak byl dříve definován a kde X je obvyklá odštěpitelná skupina dobře : známá v oboru jako je chlor, brom, jod, fluorsulfonvl a podobně. Po té, co je nahrazení skončeno, může být si- “ lylová blokovací skupina snadno odstraněna jako pomocí tetrabutylamoniumfluoridu za vzniku požadované sloučeniny vzorce III, které je nyní vhodná pro použití v kopulační reakci s karbohydrátovou skupinou, jak je ilustrováno v reakčním schématu 2.

-11Reakční schéma 1

-CHO © + Ph₃P“(CH₂)_nCH₃

OH

OH

m

Toto jsou různé způsoby, které jsou vhodné pro přípravu sloučenin vzorce Va,Vb aVc majících galaktosu a glukosu, s ^-anomerní konfigurací v 1-poloze a tyto jsou uvedeny v příkladech. Nicménějscu preferovaný způsoly výroby p(-anonierních glykolipidů podle předloženého vynálezu ilustrovány v reakčním schématu 2.-— — ------ —

-12Reakční schéma 2 a/galaktosa/ glukosa OH HC

HO-***7~*4-* SEt HO

--N-r----------OTEŠ ^teso-yVo

TESO V-fA SEt TESO

IV ho^A^r’

OTEŠ

TESO

IHa

OBz teso-V*^*A n₃

A^r’

TESO

OBz

TFA

OH

ΗΟ-Α***^*ή

N₃ ^H0 λ/γ«'

OBz Va=galakto. Vb= gluko b/ mannosa

OAc ( OAc

AcO-^Vl·⁰.

ΑοΟ-Α*****ή

N₃

HO^AyR¹

Br

OBz ma

OAc / OAc

AcO-VA^L⁰.

ΑσθΑ*-*^**Λ N₃

O.

OBz

Vc = manno

-13Příprava bud oč. -galakto nato ο^-gluko meziproduktu vzorce Va nsbo Vb se výhodně provádí kopulací galaktopyranosidu vzorce IV s azidoalkoholem vzorce Ha a odstraněním silylových chránících skupin kyselinou jako je kyselina trifluoroctová a podobně, jak je uvedeno v reakčním schématu 2, část /a/. Ve výhodném provedení azidoalkohol vzorce III, kde j_e benzoyl, je ilustrován v reakčním schématu 2 a v následujících reakčních schématech 3,4,5,6 a 7. Použití R = benzoyl je míněno pouze pro ilustrativní účely a není zamýšleno jako omezující. Plně chráněné /blokované/ pyráňošidy vzorce-IVa a IVb jsou snadno...při.pravitelné.. z odpovídajících l-ethylthio-B-galakto—nebo - β-gluko-pyranosidu „ s. chlor tri-.. ethylsilanem. v inertním organickém rozpouštědle za přítomnosti, mírné organické báze.

Příprava «^-manno-meziproduktu vzorce Vc je snadno proveditelná reakcí azidcalkoholu vzorce lila a tetra-Oacetal- ^-D-mannoSylbromidu známými kondenzačními postupy. Výsledný meziprodukt se hydrolyzuje za řízených podmínek pro odstranění acetylových blokujících skupin za vzniku požadovaného 0^-manno-meziproduktu vzorce Vc, jak je uvedeno v reakčním schématu 2 část /b/.

-14Způsoby přípravy sulfatovaných Q-glykolipídů vzorce I jsou obvyklým způsobem ilustrovány a shrnuty v reakčních sc-hema-t-eeh-~3,4->-5t6~ a^- 7t~J e'sťii'že·j'e~za“dou'c í”přTpfavit dT- sulfatovaný karbon·,-drátový _{glykolipld I(jsou} nožné kombinace předloženého vynálezu jak jsou popsány v reakčních schématech 3,4 a 5. Odborníkům v oboru bude zřejmé, že selektivní blokování a odblokování k^rbohydrátú, které se používá pro přípravu rúznýcii poloh sulfatovaných isomerů, je v oboru dobře známo, jak . i je ilustrováno zde různými příklady a jak je popsáno v Protecti<re Groups in Organic Synthesis, druhé vyd., T.W.Greene a P.G.M.Wuts , John Wiley and Sons, New York,

1991, kapitola 2 a zde uvedené citace. Pro odborníky v oboru bude dále zřejmé, že specifické blokovací skupiny mohou _s. být použity podle axiální nebo ekvatoriální .polohy hydroxylových skupin v preferované karbohydrátové skupině pódle>, předloženého vynálezu. Reakční schéma 3 tak představuje přípravu 2,4-disulfát , 2,3-disulfát a 4,6-disulfát-glykolipidů galakto a gluko; _a manno-pyranosidy vzorce I. Sekvence v reakčním schématu 4 uvádí příklady přípravy 3,4-disulfát, 2,6-disulfát a 3,6-disulfát-glykolipidů galaktopyranosidů vzorce I

-15a reakční schéma uvádí příklady přípravy 3,4-disulfát,

2,6-disulfát a 3,6-disulfátglykolipidů galaktopyranosidů vzorce I a reakční schéma 5 je příkladem přípravy 3,4-disulfát, 3,6-disulfát a 2,6-disulfátglykolipidů gluko a manno pyranosidů vzorce I. Navíc je příprava trisulfatovaných glykolipidů vzorce I popsána v reakčním schéma 6 pro přípravu 3,4,6-trisulfát a 2,4,6-trisulfátglykolipidů galakto, , gluko a mannopyranosidů vzorce J a reakční schéma 7.uvádí příltlady přípravy 2,3,4-trisulfát a 2,3', 6-trisulf átglykolipidů· , galakto, gluko a mannopyranosidů vzorce I. Plně tetrasulfatované glvkolipi^v vzorce I ae'připraví jak je uvedeno v příkladech.

-- - - ve způsobu přípravy sulfatovahýýh -glykolipidů vzorce............

I jsou zahrnuty některé známé postupy, které obecně následují sekvenci reakčních stupňů jak je ilustrováno v reakčních schématech 3,4,5,6 a 7. Každý reakční stupeň je obecně dobře _r znám odborníkům v oboru, vhodně se podle potřeby použije chránících/blokováních/ skupin, jestliže je potřeba ov2 3 livnit požadované výsledky. Ve sloučeninách vzorce I, R , R ,

5 6 , - - , '

R , R a R substituenty mohou také být změněny standardními dobře známými postupy pro získání jiné ale žádoucí modifikace sloučenin vzorce I. Toto je obvyklým způsobem ilustrováno v reakčním schématu dvojitými šipkami,které znamenají, že chemické struktury mohou být vzájemně zaměněny dobře známou hydrolýzou a esterifikačními nebo etherifikačními postupy. Pro odborníky v oboru by mělo být zřejmé, že výběr a tím výsledek bude záviset na cha- _s rakteru, počtu a poloze substituentů. Je rovněž nutno upozornit, že příklady uvedené ve schématech jsou pouze ilustrativní a nejsou míněny jako omezujícíprotože mohou být žádoucí jejich mírné modifikace pro dosažení konkrétního výsledku, nebo jsou takové modifikace nezbytné.

-16Jak je použit v popise a v reakčních schématech, znamená λ výraz redukce dobře známé redukční postupy pro azidoskupinu jako je hydrogenolýza vodíkem a palladiem; reakce přenosu vodíku s cyklohexanem/kyselinou mravenčí/palladiem a výhodně se sirovodíkem ve vodném pyridinu.

—------------------Výraz^-' acyTa-ce^—jak^jě^ždé-pbužit je zamýšlen tak, * -1 že zahrnuje běžně známé acylační postupy pro přípravu amidů jako je použití odštěpitelných skupin a aktivace skupin *

acylové části mastné kyseliny. Například použití chloridů kyselin a karbodiimidu jako aktivačních skupin v organických rozpouštědlech jako je tetrahydrofuran, dichlormethan nebo směs voda-organická rozpouštědla za přítomnosti báze - ' .

jako je triethylamin, pyridin, dimethylaminopyridin ra a 50% octan sodný.

v'

Výraz sulfatace použitý v popise a v reakčních sche- / matech zahrnuje běžné sulfatační postupy s oxidem _} « sírovým a obvykle jako komplex s trimethylaminern nebo ·.

pyridinem v rozpouštědle jako je dimethylformamid, pyri--· > -<· din a podobně. Výhodně se použije přebytek oxidu sírového pro sulfataci požadovaných hydroxyskupin, zatímco hydroxyskupiny, které mají být zachovány, jsou blokovány /chráněny/.

Používané výrazy blokovací a chránící zahrnují běžné a dobře známé chránící skupiny jako jsou ty, které

---j s o u—z-d e—i-lu s tr o ván y—a~ js ou^—u veďertý^v^- Peo tectlve Groups

In Organic Synthesis, druhé vyd., T.W.Greene a P.G.M.Wuts, John Wiley and Sons, New York, 1991, kapitola 2 a zde uvedené citace. Například použití acetalů a ketalů s kyselým katalyzátorem; použití trisubstituovaných organosilylových činidel jako je terc.butyldimethylsilylchloríd a triethylsilylchlorid; methoxymethylbromidu; benzylbromidu; benzoylchlořiďu a podobně. Reakce může být provedena v tetrahydrofuranu, dichlormethanu, dimethylformamidu a podobně,-za-přítomnosti báze jako je triethylamin, di-17methylaminopyridin, pyridin, hydrid sodný a podobně a popřípadě s imidazolem jako katalyzátorem.

Výraz hydrolýza jak je zde.použit i v reakčnich schématech zahrnuje běžné hydrolyzační postupy dobře známé odborníkům v oboru. Například hydrolýza benzylidenu, isopropylidenu, p-methoxybenzylu /PMB/, methoxymethylu /MOM/ a podobně, může být provedena za kyselých podmínek jako je 90% kyselina trifluoroctová, 3N kyselina chlorovodíková, kyselina p-toluensulfonová a podobně v rozpouštědlech jako je dichlormethan a tetrahydrofuran. Také může být p-methoxy-benzyl odstraněn zapoužití dičhlordihýdroxýchinbnu. Dále mohou být organosílylové blokovací skupiny jako je terc.butyldimethylsilyl a triethylsilyl, výhodně odstraněny použitím tetrabutylamoniumfluoridu /TBAF/ v tetrahydrofuranu a kyselině octové.Ještě dále mohou být také benzoátové a acetátové blokovací skupiny odstraněny použitím alkoxidů sodíku nebo draslíku.

1^345

Sloučeniny vzorce Ia až I£, kde R, R , R~, R , R , R a R mají dříve definovaný význam mohou být připraveny z ^.-pyranosidů vzorce Va,Vb nebo Ve sekvencemi reakcí ilustrovaných v reakčním schématu 3. Odborníkům v oboru budě zřejmé, že volba reakční cesty bude záviset na požadovaných sloučeninách vzorce I, které mají být připraveny a na vhodném výběru odpovídajícího výchozího materiálu.

Při provedení postupů v reakčním schématu 3 se ^-galakto sloučenina vzorce Va zpracuje s benzaldehyddimethylacetalem a kyselým katalyzátorem pro blokování a chránění ....... — a 6 polohy u hydroxyskupin za vzniku odpovídajícího pj^-galaktopyranosidu vzorce. VI.

Jestliže je žádoucí připravit 2,3-disulfat^galaktosloučeninu vzorce-lb, podrobí se meziprodukt vzorce VI redukci azidoskupiny a potom acylaci výsledné aminoskupiny požadovaným

----akti-vova-n-ým-acy-lovým- zby-tkem-mast né—kyseliny., majícím., .význam....,

R jak je zde definován. Výsledný pyranosid se pak sulfatuje

-18v poloze 2 a 3 karbohydrátové skupiny zpracováním s přebytkem komplexu oxid sírový-trimethylamin a potom se alkalizuje anorganickou bází jako je hydrogenuhličitan sodný, hydrogenuhličitan draselný, uhličitan vápenatý a podobně. Výsledná sodná sůl sulfatovaného a chráněného meziproduktu s e“p'o'd rob í“ko n venč n í~“h y d r olý ze^- ~p r o - ods tra ně ní—b e nz y 1-id e nové chránící skupiny a je-li to žádoucí, benzoylové chránící skupiny. Odborníkům v oboru bude zřejmé, že odstranění a zavedení požadovaných R , R a R skupin do sloučeniny vzorce lb může být zaměněno nebo vynecháno v závislosti na určitém substituentu, který je žádoucí v přípravě sloučenin, majících sulfátovou skupinu v poloze 2 a 3 ^-galakto sloučenin vzorce lb. Podle následující obecné sekvence stupňů popsané výše mohou být připraveny 2,3-disulfatované glukosloučeniny vzorce le _{a z} odpovídajících alfa-glukopyranosidů Vb a alfa-manno-pyranosidů vzorce Vd.

-19Reakční schéma

HO.

HO·

OH

5ΪΑ

HO o.

Ph í-0

Ph λ-0

O 1

N,

OBz

Blodáng

Va.nebo Vb nebo Vc

HO O

Ni

HO o,

VI

N,

Ph

Xo

0. I

Bii

Ni vna

Ph

Xo o

OBz ijredukce 2>acylace ph

BzO O

OBz ,redukce

BzO—nhr ^H0 <Vy

OBz λ-0

ΗΟ-Χ-'^'-ξ NHR žjacylace Ph λ-ο

HO O, ijhydrolýza ²)blokování '-'Y .....

OBz

1> sulfatace' ²* hydrolýza

HO

BzO

OBz

HO q

HO.

NaOiS¹

NHR

3ŽA

NaQ»SO o.

NHR

OBz ‘Κ/γ*

OBz

OBz sulfatace

BzO-X—NHR

OR^ť >C<t

NaOiSO-***f*^

NHR

NaQ,SO

NaQjSO Q

OBz

OR* ^γ·

VHb «z η redukce 2’acylace ’

BzO O,

NHR

R’

OBz ⁿ hydrolýza ®sulfatace

OSOiNa NaOaSCUy. ^ 0

BzO NHR

8zO

OBz

OSOiNa ^NaO’^sa^>o

R1O-X*^*^ NHR fl*O fi' °^γ'

OR*

OR· ^N3O’^sc^yL-'^ox rjoA**7*\ ^{nhr to}°^° ο^λγ,

Ia = 2.4-galakto ^0RS Id = 2,4-glu to Ig = 2.4-manno

Ib = 2,3-galakto

Ie = 2,3-glu^ko Ih = 2,3-manno

Ic = 4,6-gafe to If = 4,6-gtuto li = 4,6-manno

-20Pro přípravu 2,4-disulfatovaných sloučenin vzorce I4Xd a

I9 se odpovídající pyranošid vzorce ví selektivně blokuje chránící skupinou a výhodně benzoylovou skupinou známými metodami a metodami popsanými K.Janssonem a kol., v J.Org.

Chem., 53, 5629-5647 /1988/ za vzniku sloučenin vzorce Vila.

Azidoskupinav-e- s-loučenině—V-IIa-se-redukuj.e-_a_pak„_s.e_ac.yl.u.j.e.___ zbytkem požadované mastné kyseliny jak je zde popsáno. Benzylidenová skupina výsledného meziproduktu se hydrolyzuje a výsledný primární alkohol se blokuje esterifikací benzoylovou skupinou. 3,6-Blokovaný pyranošid se pak podrobí sulfataci zbývajících 2,4-dihydroxyskupin a potom, je-li to žádoucí,„hydrolyzuje se. pro odstranění jedné nebo více blokujících skupin za vzniku odpovídajících 2,4-disulfatovaných galakto a gluko. _a mannosloučenin vzorce Ia,Id a Ig.

Pro přípravu 4,6-disulfatovaných sloučenin vzorce Io jf _a ji se odpovídající pyranošid vzorce VI blokuje chránící skupinou a výhodně benzoylskupinou za získání sloučeniny vzorce Vllb. /Azidoskupina chráněného pyranosidu vzorce Vllb se redukuje a výsledná aminoskupina acyluje požadovaným aktivovaným acylovým zbytkem mastné kyseliny. Výsledný pyranosid se podrobí obvyklé hydrolýze pro odstranění benzylidenové chránící skupiny a hydroxyskupiny v polohách 4 a 6 se pak sulfatují jak je zde popsáno za vzniku požadovaného inhibitoru- selektinem zprostředkované buněčné adheze. Výsledná sodná sůl sulfatovaného a blokovaného ^-glykolipi-du_mů.ž.e.,_ie-li_ž.ád.o.ucí., být selektivně odstraněna hydro-_

3 5 lýzoz R , R a R blokujících skupin a pak nahrazena jinými substituenty metodami známými v oboru pro přípravu sloučenin, majících sulfátovou skupinu v poloze 4 a 6 ^-galaktosloučenin vzorce Ic. Podobně, podle obecného sledu stupňů popsaného výše, mohou být připraveny sloučeniny vzorce If .a li mohou být připraveny z odpovídajících o(glukopytanosidů vzorce Vb a -mannopyranosidů Vc.

Pro provedení způsobu z reakČního schématu 4 se ^-galaktosloučenina vzorce Va .zpracuje se,„2,2-dimethoxypropanem a kyselým katalyzátorem pro chránění a blokování hydroxyskupin v polohách 3 a 4 za vzniku odpovídajícího o(-galaktopyranosiau vzorce VIII.

Reakční schéma 4

-22HO

HO

OH

O6i . — ——Ka . i—Qgj----__

1) redukce _m ^acvlace o ⁰⁸¹ | ⁰²⁰ <\χγ OBz hydrolýza x O ™ 1 X o _Z ^OTBOMS

- blok. .’>fV£-q ‘k/xY vin—.^-Qgj_ n <* w, |_1} redukce pjacylace

NHň <Áf^R'

OBz

Kb ο^χγ’

-oetHO

HO.

oez

OSO^ta

NHR tu —NHR <\>γ· h· sulfatace |²hydrolýza ^redukce otboms i ^cylaca °^- Υ 'Τ*' ή NHR ^Bl° °^Αγ*'

OBz

Hftydrolýza otboms i ácylace

HO NaQiSO'

AcO t---BzO o

NHR

NaChSO

NaQ,:

^A

HO O.

OBz η sulfatace 2) hydrolýza ft<0 ,⁰³°^³

OH

NHR pru /

FPO—NHR NaO_aSO^/ 0 JI R¹

OBz

1)TBAF sulfatace πθ osojua | hydrolýza

HO^Z o

NHR

OH

OR*

Ik = 2,6-gafcfcto <<Ύ'

OH

NaCfcSO -^0F*

NaCbSO-\*<**U NHR

FBO 0 JL Ri '-'Lr

OFP

Ij = 3,4-gaisktO

R*0 ,⁰³^

NaOjSO-A^**^ NHR

RzO o 1 o» 'Ύ

II = 3,6-gala’^to

ORS

-23Jestliže je žádoucí připravit 2,6-disulfátg.alaktosloučeninu vzorce IX, meziprodukt vzorce VIII se podrobí redukci azidoskupiny a potom acylaci pro zabudování požadovaného acyíovéhc zbytku mastné kyseliny, kde R má výše uvedený význam. $\-Glykolipid se sulfatuje v poloze 2 a 6 karbohydrátové skupiny zpracováním s přebytkem komlexu oxid sírový-pyridin a výsledná sůl se podrobí obvyklé hydrolýze pro odstranění isopropylidenové chránící skupiny.

4 5

Pro odborníky bude zřejmé, ze požadované R , R a R substituenty mohou pak být zavedeny do sloučenin, majících sulfátovou skupinu v poloze 2 a 6 za vzniku ^-galaktosloučenin vzorce I'k. .... ............... .........

Pro přípravu 3,4-disulfát-galaktosloučenin vzorce jj se meziprodukt vzorce VIII zpracuje s blokující skupinou a výhodně benzoylskupinou známými metodami za vzniku sloučenin vzorce IXa. Azidoskupina se redukuje a potom acyluje jak bylo popsáno dříve a výsledný pvranosid se podrobí seletivní hydrolýze pro odstranění isopropylidenové skupiny. Výsledné neblokované hydroxyskupiny v poloze 3 a 4 jsou sulfatovány a zbývající blokované hydroxyskupiny mohou být, je-li to žádoucí, odstraněny nebo vyměněny za jiné 2 5 6

R , R a R° substituenty, které jsou žádoucí ve sloučeninách, majících sulfátovou skupinu v poloze 3 a 4 za vzniku Agalaktosloučenin vzorce ij.

Pro přípravu 3,6-disulfatovaných galaktosloučenin vzorce II se meziprodukt vzorce VIII selektivně zpracuje se dvěma rozdílními blokujícími skupinami. Je výhodné nejprve blokovat primární alkoholovou skupinu v .poloze. .6. tri- . .. organosilylovou skupinou jako je /C^-Cg/alkylsilyl a triarylsilyl a výhodně terč.butyldimethylsilylová skupina. Sekundární hydroxyskupina pak může být výhodně blokována jinými běžnými skupinami jako je benzoylskupina za vzniku sloučeniny vzorce IXb. Azidoskupina se redukuje a pak se acyluje požadovaným acylovým zbytkem mastné kyseliny a výsled ______ n ý_ .p.l.n.ě. „c.h r.á n,ě ný.. g l.y ko.l i p.id _s e._s.e l.e k.t i v n ě _hy ď rol yzu. j e_p.r.o„_.__.

odstranění isopropylidenové chránící skupiny. Hydroxyskupina

-24Reakční schéma 5 Vb 'Vc

In = 3,6-gftfco °^{RÍ í0} = 2.6-glito

Iq = 3,6-manno Ir = 2,6-manno

-25v poloze 4 se selektivně blokuje acetylací a silylová chránící skupina v poloze 6 se pak odstraní standardními postupy jako pomocí tetrabutylamoniumfluoridu. Dostupné 3,5-dihydroxyskupiny se nyní výhodně sulfátují obecnými zde popsanými postupy.a výsledná 3,6-disulf.atovaná galaktosloučenina může být, je-li to žádoucí, hydrolyzována 2 4 5 za -vzniku sloučeniny, kde R , R a R jsou vodík nebo 2 4 5

R , R a R mohou být acylovány za poskytnutí 3,6-disulfatovaných galaktosloučenin vzorce II.

Alternativně může být příprava gluko a mannosloučenin

3,4-disulfátů,3,6-disulfátua 2,6-disulfátů vzorce' 17 provedena z rrfpoyídajících alfa-glukopyranosidů vzoroe Vb nebo álfa-manhopyranósidů Vc podle reakčních sekvencí popsaných v reakčním schématu 5.

Pro provedení způsobu podle reakčního schématu 5 se,^-gluko nebo Cý-mannosloučenina Vb či Vc zpracuje s blokující skupinou a výhodně s benzaldehyddimethylacetalem pro blokování hydroxyskupin v polohách 4 a 6 za vzniku odpovídajícího pyranosidového meziproduktu vzorce X. částečně blokovaný meziprodukt vzorce X se pak selektivně blokuje chránící skupinou a výhodně benzoylskupinou metodami podobnými těm, které jsou popsány K.Janssonem a spol., v J.Org.Chem., 53,

5629-5647 /1988/ za vzniku sloučenin vzorce Xla a Xlb.

Jestliže je žádoucí připravit 2,6-disulfatovanou gluko-sloučenin.u vzorce Iq, odpovídající glukomeziprodukt vzorce Xlb se nejprve blokuje odlišnými blokovacími skupinami jako je methoxymethylskupina před tím, než se hydrolyzuje benzylidenová skupina. Výsledný meziprodukt se pak postupně zpracuje s blokujícími skupinami tak,-že-se-nejprve-blokuje primární alkohol organosilylovou skupinou jako je terc.butyldimethylsilyl a potom se sekundární alkoholy blokují esterifikací benzoalskupinou. Azidoskupina v plně chráněném pyranosidu se redukuje a potom se acyluje požadovaným zbytkem mastné kyseliny jak je zde popsáno. Výsledný chráněný glykolipid se podrobí selektivní hydrolýze pro odstranění

----------------—ja-k—si-l-y-l-ové -tak methox-ymefehyl-ové- chránící-skupiny- -známými---------postupy. 3,4-Blokovaný pyranosid se pak sulfátuje v poloze 2 a 6 jak zde bvlo ooosáno a ootom se, je-li to žádoucí

-26hydrolyzuje pro odstranění jedné nebo více blokujících skupin za vzniku odpovídajících 2,6-disulfatovaných gluko-sloučenin vzorce >i_o. odborníkům v oboru by mělo být zřejmé, že obecné stupně syntézy uvedené výše mohou být použity pro přípravu 2,6-mannopyranosidu vzorce Ir z odpovídajícího mannopyranosidů vzorce Xlb a výhodně postupy .po.psanými_v- -příkladu-2 5-,------------------------—-----~------Pro přípravu 3,4-disulfatovaných glukosloučenin vzorce Im se odpovídající glukomeziprodukt vzorce Xla hydrolyzuje pro odstranění benzylidenové blokující skupiny a pak se výsledný primární alkohol v poloze 6 blokuje selektivní esterifikací benzoylovou skupinou. Azidoskupina se redukuje a pak se acyluje zbytkem požadované mastné kyseliny a výsledný meziprodukt se zpracuje k komplexem oxidu sírového na sulfát v poloze 3 a 4 a je-li to žádoucí, popřípadě se hydrolyzuje pro odstranění jedné nebo více blokujících skupin za vzniku 3,4-disulfatovaných glukosloučenin vzorce Im. Odborníkům v oboru by mělo být zřejmé, že podle obecného ·postupu syntézy popsaného výše mohou být získány 3,4-di- ' sulfatované mannosloučeniny vzorce Ip z odpovídajících mannopyranosidových meziproduktů vzorce Xla.

-27Reakčni schéma 6

OH hoX-tA n₃

PMBO o.

blokování

Ph λ* O

BzO N,

OH

ΧΠ OBz ¹) redukce

2) .. acylaca

NHR

PMBO o.

PMBO

NaO₃SO

It = 2,4,6-ga^to Iv = 2,4,6-gIuko Ix = 2,4,6-manno

OR

-28Pro přípravu 3,6-disulfatovaných gluko-sloučenin vzorce Ifc se odpovídající gluko-meziprodukt vzorce Xla dále blokuje odlišnou blokující skupinou jako je methoxymethylskupina za vzniku sloučeniny vzorce Xic. Hydrolýza benzylidenové skupiny se provádí postupnou ochranou skupin primárního a sekundárního alkoholu organosilyl a pak benzoylskupinou jak je popsáno výše a ilustrováno v reakčním schématu 5 za vzniku plně chráněné pyranosidové sloučeniny________ ve které je.azidoskupina redukována a potom acylována požadovaným zbytkem mastné kyseliny. Plně chráněný glvkolipid se podrobí selektivní hydrolýza pro odstranění jak silylové tak methoxymethylové skupiny známými postupy a výsledné hydroxyskupiny v poloze 3 a 4 se sulfatují komplexem oxidu sírového jak je zde obecně popsáno. 3,6-Disulfatovaná gluko se popřípadě hydrolyzuje za vzniku 3,6-disulfatovaných gluko-sloučenin vzorce IH.Obecnými zde popsanými postupy lze z meziproduktu vzorce Xic připravit 3,6-mannosloučeniny vzorce Iq.

Obecné postupy pro přípravu trisulfatovaných galakto,manno a gluko-sloučenin vzorce až Ik a vzorce až lad,ze vhodných výchozích materiálů jsou ilustrovány v reakčních schématech 6 a 7. V reakčním schématu 6 příprava 3,4,6trisulfátových a 2,4,6-trisulfátových sloučenin galakto ,manno 12 3 5 a gluko-glykolipidů vzorce is až ΐχ , kde R, R , R , R a R mají dříve definovaný význam, může být provedena ze sloučeniny vzorce XII podle obecného sledu reakcí popsaného v reakčním schématu 6. Příprava 3,4,6-galaktosloučenin vzorce Is může být provedena z odpovídajících galaktomeziproduktů vzorce XII postupy popsanými v příkladech 19 a 21. Odpovídající 3,4,6-tridulfát-glukosloučeniny vzorce Iu a 3,4, žř-trisulfátmannosloučeniny vzorce Iw mohou být připraveny z odpovídajících gluko a manno meziproduktů vzorce XII podle obecných postupů použitých pro přípravu sloučenin vzorce Is.

-29Reakční schéma 7.

OH

HO-X**^**\ ^N;i HO O, ’

Va čtVha.· Vc

OBz

HO o ,R

OBz

N₃

OBz blokování

HO n

Ph

A

Q

MOMO-***?**\

Ύ

OBZ blokování

N₃

R¹

OBz

Onaďkoa 2) ácylace.

MOMO o.

NHR

OBz

1) sulfetaoe

2) tyčkoLýza • —......*OTBDMS ^Β20-\£-°,

MOMO-X**^<f**\ N₃

-'V

OBz .1)h)dpaLýza -²) blctawaií

MOMO o

OH

NaO₃SO«T*^^ q

Na0₃SO-X*^^*\ NHR NaQsSO q

OH

-^yR¹ OBz

1) E±tae

2) acýlace ³) h/řkoLýza _HO-X**^**^ NHR HO o

OR^b

OBz	OS03Na
	HO^ < „ 1

^yR¹ OBz

1) sulfatace ^tyiralýza

NaO₃SO-\**y*\ NHR

NaOaSÓ o^A. _Ri

OR⁵

Iy = 2,3,4-gala kto Iaa = 2,3,4-glu-to Iac = 2.3,4-manno

NaO₃SO—NHR

NaOgSO. O^A^rI· OBz

OSO₃Na

R⁴0.

NaO₃SO o—NHR NaQjSO

Iz = 2,3,6-galskto OR⁵

Iab = 2,3,6-glu^to lad = 2,3,6-manno— _

-30Pro přípravu 2,4.6-trisulfátových sloučenin vzorce It,Iv alx se odpovídající galakto, giuko nebo mannosloučeniny vzorce

XII selektivně zpracuje se dvěma rozdílnými blokujícími skupinami. Výhodné je nejprve zpracovat sloučeninu vzorce XII s blokující skupinou jako je benzaldehyddimethylacetal ______pro- h 1 okován i. .hydr o xy skupin_v _ po.1 o.ze. 4 a _6_a_po.tom_s.e._______,___ druhou blokující skupinou jako je benzoylskupina metodami popsanými dříve. Azidoskupina chráněného pyranosidu se redukuje a potom se acyluje žádoucím zbytkem mastné kyselina jak je zde popsáno. Výsledný pyranosid se podrobí hydrolýze pro odstranění jak benzylidenové a p-methoxybenzylové blokující skupiny postupy, které jsou v oboru známé Neblokovaný pyranosid se pak zpracuje s přebytkem komplexu oxid sírový-pyridin a pak se alkalizuje anorganickou bází jako je hydrogenuhličitan sodný. Výsledná 2,4,6-trisulfátová sloučenina může být, je-li to žádoucí, podrobena konvenční hydrolýze pro odstranění blokujících skupin za vznikusloučenin vzorce ’ It,Iv nebo Ix.

V reakčním schématu 7 může být příprava 2,3,4-trisulfáto vých a 2,3,6-trisulfátových sloučenin galakto a gluko-glykolipidů vzorce iy až lad, kde R, R^, R^, R^ a mají dříve definovaný význam, provedena z odpovídajících sloučenin vzorce Va,Vb nebo Vc obecnými postupy popsanými v reakčním schématu 7.

_____Je-li žádoucí připravit 2,3,4-trisulfátové sloučeniny_ vzorce iy,iaa či) Iáčr^,x’^e3P^{rve se} primární alkohol sloučeniny vzorce Va nebo Vb esterifikuje blokující skupinou jako je benzoyl a pak sě azidoskupina redukuje a acyluje mastnou kyselinou. Výsledný pyranosid, který je blokován v poloze 6 se zpracuje s komplexem oxid sírový-pyridin a potom se alkalizuje hydrogenuhličitanem sodným za vzniku 2,3,4-trisulfátpyranosidu,-který se pak popřípadě hydrolyzuje za vzniku 2,3,4-trisulfátových sloučenin vzorce iy,Iaa nebo Iac.

-33 V ještě dalším výhodném provedení vynálezu mají sloučeniny vzorce I vzorec

kde R je acylový zbytek mastné kyseliny, R¹ je -(CH=CH) o o λ c (CH₂)_n-CH₃, R/R/R* a R° jsou nezávisle alespoň dva -so₃h,

O O Λ C £ rSr^³, r\ R⁰ a R° jsou nezávisle vodík, nesubstituovaný nebo substituovaný alkanoyl, arylalkyl nebo arylkarbonyl, kde uvedený substituent je vybrán ze skupiny, zahrnující halogen,

Cj^alkyl, trifluormethyl, hydroxy a C^_^alkoxy, m je celé číslo 0 nebo 1, n je celé číslo 5 až 14 včetně, nebo jejich netoxické farmaceuticky přijatelné soli, solváty 2 3 4 nebo hydráty. Ve zvláště výhodném provedení jsou R , R , R a R⁶ nezávisle dva -SO₃H. V dalším výhodném provedení jsou r2,r\ r⁴, r⁵ a R⁶ každý nezávisle vodík nebo benzoyl.

-34V jiném aspektu poskytuje předložený vynález způsob léčby nebo prevence chorob zprostředkovaných inhibicí selekti nem zprostředkované buněčné adheze u savců v případě takové potřeby, který zahrnuje podání uvedenému savci účinného , —množs-t-v-í--s-l-ouěen-i-ny— vzorce ·I— nebo-je jí— ne toxické—farmaceu-’—“ ticky přijatelné soli, solvátu nebo hydrátu. Ve zvláště výhodném provedení poskytuje tento vynález způsob léčení se zánětem spojených chorob nebo patologických stavů v savce v případě takové potřeby, který zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučenina vzorce I nebo její netoxické farmaceuticky přijatelné soli, solvátu nebo hydrátu, takovému savci.

V ještě dalším aspektu poskytuje předložený vynález farmaceutické přípravky, obsahující alespoň jednu sloučeninu vzorce I v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.

Aktivita buněčné adheze

1. Vazba P-selektin adhezního receptoru

P-selektin /GMP140, granulový membránový protein-140, PADGEH nebo CD62/ je na vápníku závislý transmembránový protein nalezený v alfa granulích éndotheliáiních buněk a destiček. Je to indukovatelný selektin produkovaný na akti_v-ovaném-endothel-iu—a-dest-ičkách-,—k-te-rý—ro-z-po-2-ná-vá— a-l-£a-(-2--3)sialylované a alfa(1-3)fukosylované laktosoaminoglykany, který obsahuje sekvence, Lewis x /Zhou a spol., J.Cell.

Bol., /1991/ 115 /2/:557-564/ a sulfatidy /3-sulfatované galaktosylceramidy, Aruffo a spol., Cell /1991/ 67:35-44/. P-selektin může být zodpovědný za počáteční adheži i mezi endotheliem a neutrofily jak je zřejmé z leukocytového nabalování indukovaného p-selektinem v tekoucích buňkách Lawrence M. a T.Springer, Cell/1991/ 65:859-873/.

Podle dostupnosti rozpustných forem P-selektinu přiDraupnúph -i a Ir 4 Π Λ h - » y. - 1 1 -1 r ..

-35/1991/, byla vazebná ELISA zkouška modifikována Foxallem a spol., J.cell.Biol., 117, 895-902/1992/ pro měření inhibitorů P-selektinové vazby k imobilizovanýrn sulfatidům.

Takové inhibitory byly testovány v dále popsané zkoušce.

0,1 ml sulfatidu /SIGMA/ nebo lysosulfatidu /SIGMA/ vždy po 1 /Ug./ml v MeOH byl přidán do jamek 96-jamkové ELISA plotny /ProBind, falcon/ a nec$L vyschnout přes noc při teplotě místnosti. Další den byly antigenem potažené plotny blokovány po 1,5 hodiny při teplotě místnosti 5% BSA /ICN/ v pufru, obsahujícím 20 mM Hepes a 0,15M NaCl, pH

8,0. Původní přirozený P-selektin a jeho mutanty byly nejprve smíseny s HRP-konjugovaný kozí anti-humánním IaG /Fisher Scientific/, sériově zředěny a pak. inkubovany 30 minut při 37 °C v pufru, obsahujícím 20 mM Hepes, 0,15 M NaCl, 1% BSA a 0,8 mM CaC^z pH 8,0 před přídavkem k BSA blokovaným plotnám, po 30 minutách inkubace, byly konjugované imunokomplexy fuzní protein-HRP ihkubovánv na blokovaných antigenem potažených plotnách po 45 minut při 37. °C za přítomnosti nebo nepřítomnosti testovaných sloučenin a pak promyty pro odstranění nenavázaných proteinů. Navázané komplexy byly detegovány přídavkem substrátového pufru /96 mM NaCAc.31^0, 5 mM monohydrát kyseliny citrónové, 1,4 mM močovina/H2Q2/z obsahujícím 3,3',5,5 tetramethylbenzidin /SIGMA/. Reakce byly ukončeny přídavkem 3N kyseliny sírové a absorbance odečtena na ELISA čtečce při zdvojených vlnových délkách 450 a 630 nm.

Účinnost těchto sloučenin byla porovnána s účinností sulfatidů /pozitivní kontrola/ nebo lysosulfatidu /negativní kontrola/. 'Data jsou získána jako procenta inhibice specifické vazby — % inhibice = / specifická vazba:testovaná slouč.

xlOO soecifická vazba: vehikulum , \ J

-36a vyneseny graficky jako dávka vs. procenta inhibice Rg vazba. Z tohoto grafu se spočte IC^.q/^uM/ a uvádí se. jako buněk prostý údaj v tabulce 1.

2. HL-SO buněčná vazba k P- a E-selektin RG

Konstrukce receptoru globulinu /Rg/

Chimerní P- a E-selektin receptor globulin /Rg/ zahrnuje doménu lidskéholektinu, EGF doménu a dvě komplementová opakování lidských selektinů, fúzovaných k otáčce, CHl a

CH2 domény lidského IgGl. tyto proteiny byly připraveny podle

Aruffa a spol., Cell.,/1991/ 67: 35-44., Walz a spol., Science /1990/ 250, 1132-1135. . /

Buněčná vazebná zkouška pro Rg >*

HL-60 buněčná linie, získaná z American Type Culture Collection, ATCC č. CCL240, byla použita pro hodnocení P-selektin Rg vazby. Zkoušky byly provedeny ™ _t na 96-jamkových tkáňových kultivačních miskách. Jamky byly ·’ nejprve potaženy s 0,5 ^ug kozího anti-humánního Fc antiséra přes noc a nespecifická vazebná místa byla blokována inkubací jamek s 1% netučnéhó sušeného mléka ve fosfátem pufrovaném salinickém roztoku /PES obsahující 0,9 mři CaCl₂ a 0,3 mři MgSCL/ po 30 minut. Rg pak byl navázán k anti

Fc-potaženým jamkám inkubací 50 ng v 50 ^ul ΡΒΞ po dvě .hodiny_._B.uňk_y_,_pr-omy-té-d-V-akr-át-a-rasuspeiado-vané—v—P-BS--pro odstranění stop mediových složek, byly značeny 10 ,uU 7 kalcein-acetoxymethylesteru po 30 minut při 3 x 10 buňkách na ml při teplotě místnosti. Sérum obsahující medium /RPf4I se 20 % fetálního telecího sera/ bylo přidáno a buňky byly promyty, potom resuspnedovány v PBS a dále

-Πshromážděny. Značené buňky, resuspendované v PBS, byly přidány ke dvakrát promytým Rg-obsahujícím jamkám v množství 200000 na jamku. Po 30 minutách inkubace za mírné ho třepání byly jamky aspirovány a promyty třikrátPBS pro odstranění nenavázaných buněk. K určitým jamkám byly přidány známé počty buněk pro stanovení standardní křivky fluorescenčních jednotek na buňku. Fluorescence na plotně byla kvantifikována za použití zařízení pro odečítání fluorescence plotny. Fo vydělení slepou hodnotou představující vazbu buněk k jamkám neobsahujícím Rg /méně než 5000 buněk/, byla vypočtena specifická vazba k P- nebo E-selektinu.

Inhibitory vazby buněk

Testované sloučeniny byly připraveny rozpuštěním na konečnou koncentraci 20 mg/ml v dimethylsulfoxidu /DMSO/, zředěny v PBS na 2 mg/ml a před použitím krátce zpracovány ultrazvukem. Rg potažené jamky byly předem inkubovány při teplotě místnosti po 15 minut s inhibitorem a 200000 buněk bylo přidáno za získání konečné indikované koncentrace inhibitoru ve 160 ^ul PBS. Hodnoty jsou získány jako procenta inhibice specifické vazby:

% inhibice / specifická vazba:test.slouč.

!- l specifická vazba: vehikulům x 100 a byl získán graf dávka vs. procenta inhibice Rg'vazby/ ve kterém se vypočte IC^q/^uM/ a uvede se v tabulce 1.

3. Reverzní pasivní Artušova reakce u krys

Reverzní pasivní artušova reakce u krys je modifikací metody Mulligana a spol.., jak je popsána v J.Clin.__

TnvéstT, /Γ99Γ/88: ”1396^14061 “Toto ' jé experimentální' model, ve kterém interakce komplexů antigen-protilátka

-38a komplementu vede k těžké vaskulitidě, která je spojena s edéměm, indurací, erythemem a hemorrhageou.. Interakce mez komplexem antigen-protilátka a komplementem vede k lokalizaci influxu neutrofilů. tyto neutrofily uvolňují různé mediátory, které jsou spojeny s poškozením tkáně ^a^vaskuTárnl^-permeabil-xtourr-Lokartizováná— zánětl-ivá— reak------ce je měřena za použití různých technik např. vaskulární permeability a tok neutrofilů, které se hodnotí jak biochemicky tak mikroskopicky.

Samci krys Sprague Dawley prosté specifických patogenů s kanylovanou jugulární vénou /280-320 g, Hill Top Labs, PA/ byly použiti v této studii. Zvířata byla aklimatizována alespoň jeden den a jednotlivě držena v nerezových klíckách. Dorsální oblast krys se vystříhá 2 dny.před pokusy a rozdělí na čtyři části na každé straně dělící střední linie. Před všemi injekcemi se krysám podá sedativum - 0,4 ml na 300 g krysu ketamin/ronpun /1000 mg /10 ml/ ketamin.HCl se smísí se 40 mg/2,0 ml/ Rompunu/

IP nebo inhalační anestesií metafanem /methoxyfluran/.

Hovězí sérový albumin /BSA/ a králičí polyklonální

IgG bohatý v anti-BSA jsou dostupné od Sigma Chemical 125

Co. /st.Louis, 140/. radioaktivně značený I-BSA /spAct 1-5 yUCi/^ug/ je dostupný od Dupont NEN /Boston , MA/.

Každé kryse se podá intradermální /ID/ injekce /0,4 mg, 0,6 mg a 0,8 mg/ anti-BSA v objemu 100 ^ul na injekci v normálním salinickém roztoku. ID injekce jsou náhodně podány blízko středu dorsální oblasti na obou místech zad. Ihned po ID injekcích anti-BSA se krysám podají intravenosně /IV/ injekce BSA /10 mg v 1 ml/ v 125 - , normálním salinickém roztoku, obsahujícím I značeny BSA nebo 5,0 ^uCi/kg tělesné hmotnosti/ pro kvantifikaci

-39dermálně vaskuláeního poškození, protizánětlivá činidla jakož i inhibitory adneze molekul podle předloženého vynálezu jsou podány IV v jediné dávce 3 mg ihned po BSA. Čtyři /4/ hodiny po IV injekci BSA, jsou krysy anestetizovány mejtafanem a 2 až 3 ml krve se odeberou kanylou do zkumavky, obsahující antikoagulant /EDTA nebo heparin/ a plasma se oddělí a uchovává pro kvantifikaci neutrofilú a albuminu. Krysy byly usmrceny a kůže, obklopující místa injekce /15 mm průměr/ se vyřízne a zváží. Vzorky kůže a fixovaný objem plasmy /0,1 až 1-,0 ml/ se analyzují v gama-čítači'· na-obsah - I. Vzorky kůže z kontralaterální- — ho místa, ze zpracují a analyzují na myeloperoxidasovou aktivitu /HPO/ jakož i měření akumulace neutrofilú.

Podle potřeby, se. vzorky. také. podrobí his.tolog.ickému. hodnocení reakčních míst.

Vaskulární. permeabilita /VP/

Výpočet exudace plasmového proteinu do kůže může být proveden stanovením radioaktivity ve tkáni a jeho vztahem k hladině radioaktivního albuminu v krvi v době usmrcení. Rovnice uvedená dále představuje výpočet pro >

mikrolitr extravazatované plasmy /Issekutz a Issekutz, Pharmacological methods in the control of inflammation /1989/ 129-150/.

CPI·! ve tkáni

Procenta inhibice testovanou sloučeninou při 3 mg byla stanovena následovně:

1Ό0

-40Myeloperoxidasa /MPO/

MPO je lokalizována v azurofilních granulích polymorfonukleárních leukocytú /PMN/. Díky jeho hojnosti v těchto buňkách /5 % suché hmotnosti/ se tento enzym používá jako markér pro obsah tkáňových neutrofilů. Pro obsah tkáňové MPO byla použita metoda^-Břaďley^-á spoH73a'kjbpb^ psána v J.Invest.Dermatol. /1982/ 78: 2QG-209. Biopsie z každé ošetřené skupiny byly umístěny do plastových zkumavek /15 x 100 mm/, obsahujících 10 ml 0,5% hexadecyltrimethylamoniumbromidu /HTAB/ v 0,05M pufru fosfátu draselného o pH 6,0. Tkáň pak byla homogenizována s homogenizerem brinkmann Polytron /10s/. Supernatant /0,05 ml/ byl zkoušen smísením s 0,150 ml o-dianisidinu /0,334 mg/ml/ a 0,0005% peroxidem vodíku v 0,05M pufru fosforečnanu draselného o pH 6,0 na 96-jamkových mikrotitračních plotnách. Změna v absorbanci při 450 nm se měří oři teplotě místnosti za použití V kinetického “ max 7.

odečítače plotny /Molecular Devices, Palo Alto, Calif.,

USA/. Procenta inhibice testovanou sloučeninou při 3 mg„ dávky byla stanovena následovně:

% inhibice= j__ absorbance biopsií ošetř,t.sl. _χ absorbancs bioosií ošetř.veh.

In vivo .experimentální výsledky naměřené u vaskulárn; permeability /VP/ a myeloperoxidásy /MPO/při jediné dávce -t e s-t ον an é- slouč e n.i.n_y__j.s.o.u_u ve de ny_v_t a bu.lc.e_l...__

-41Tabulka 1

příkl.č.	P-selektin	RPA VP % inhib.*	’ MPO % inhib.'1
buněk ICS0//’	prostý UM/	HL-60 IC50/zuM/
1	, 0,3		8,3 ......	. 68	AI 97 ...... ...
2	0,2		17	14	0 í
4	9		8	...XX NA	NA
7	0,4		11	88	97 ,
10	6,4		8	11	71,6
11	.1,7		8,9	32..	53,7
~15	2,2			50'	' ~ o” r'
23	8		2,6	0	26,4

^x % inhibice při 3 mg bezvýznamný

XXX , nehodnoceno

Biologické výsledky reprezentativních sloučenin podle předloženého vynálezu jsou uvedeny v tabulce 1. Jak v buněčných tak buněk prostých in vitro zkouškách a v in vivo testech provedených na RPA krysím modelu bylo prokázáno, že sloučeniny vzorce I jsou inhibitory P-selektinem zprostředkované vazby a, což je důležitější, potvrzují, že sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou inhibitory selektinú použitelnými při léčbě zánětlivých stavů u savců.

proto jsou sloučeniny vzorce I a jejich farmaceutické přípravky použitelné při léčbě a/nebo prevenci chorob nebo patologických stavů, které jsou zprostředkovány vazbou selektinú v buněčné adhezi. Takové choroby a stavy zahrnují akutní nebo- chronické zánětlivé choroby jako je rheumatoidní arthtitis, astma, alergické stavy, psoriasis, septický šok, syndrom respiračního dvojitého stresu u dospěTých,’ zánětlivé střevní·· onemocněni·' a~očn'í'“'zánětlivé ~~

-42choroby; autoimunitní choroby; trombóza nebo stavy nevhodné agregace destiček a kardiovaskulární choroby, .reperfuzní . poškození, skleróza multiplex a neoplastické choroby, včetně metastatických stavů.

_vΓším“provedení’“te’ňto vynálěT^žahrnujě“fářmaceutické přípravky, obsahující alespoň jednu sloučeninu vzorce I v kombinaci s farmaceutickým nosičem nebo ředidlem.

V ještě dalším provedení tento vynález poskytuje i způsob léčby'nebo prevence chorob nebo‘jiných patologických stavů, charakterizovaných selektinem zprostředkovanou buněčnou adhezí u savců v případě takové potřeby, _>:který zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučeniny vzorce I nebo její netoxické farmaceuticky přijatelné soli, solvátu nebo hydrátu, tomuto savci.

V ještě dalším provedení tento vynález zahrnuje metodu inhibice nebo redukce zánětlivého chorobného procesu u savce v případě takové potřeby, která zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučeniny vzorce

I nebo její netoxické farmaceuticky přijatelné soli, solvátu nebo hydrátu uvedenému savci.

Pro terapeutické použití se farmakologicky aktivní sToučeniny^-vzorce—budou“ϊΓότπΓά'ΠΓέ^-oodavat^-jako—fař= maceutický přípravek, obsahující jako /nebo/ podstatnou účinnou složku alespoň jednu takovou sloučeninu ve spojení s pevným nebo kapalným farmaceuticky přijatelným nosičem a popřípadě s farmaceuticky přijatelnými pomocnými látkami a přísadami, za použití standardních a obvyklých technik.

Farmaceutické přípravky zahrnují vhodné dávkové formypro'orální7“parěnterální /zahrnující subkutánní, intramuskulární, intradermální a intravenozní/, transder-43mální, bronchiální, rektální, topické, oftalmické, intraartikulární nebo nasální podání. Jestliže se použije pevný nosič, může být přípravek tabletován, umístěn do tvrdé želatinové kapsle v práškové nebo peletové formě, nebo být ve formě trocheje nebo lozengu. Pevný nosič může obsahovat obvyklé přísady jako jsóu pojivá, plniva, tabletační lubrikanty, desintegrátory, smáčecí činidla a podobně, tableta může být, je-li to žádoucí, potažena filmem obvyklými technikami. Jestliže se použije kapalný nosič, může být přípravek ve formě sirupu, emulze,„měkké želatinové,kapslesterilního_________ vehikula pro injekce, vodné nebo nevodné suspenze, nebo to může být suchý produkt pro rekonstituci vodou nebo jiným vhodným: vehikulem.před. použitím. .Kapalné přípravky mohou obsahovat běžná aditiva jako jsou suspendační činidla, emulgační činidla, nevodné vehikulum /včetně jedlých olejů/, ochranné látky, jakož i chutová a/nebo barvící činidla. Pro parenterální podání, bude vehikulum normálně .obsahovat sterilní vodu, alespoň z.větší části, i když může být také použit salinický roztok, roztoky glukózy a podobně. Nohou být také použity injektova.telné suspenze a v takovém případě mohou být použita běžná suspendační činidla.

K parenterálníra dávkovým formám mohou být přidány obvyklé chránící látky, pufrovací činidla a podobně. Zvláště vhodné je podání sloučeniny vzorce I přímo v transdermálních přípravcích se zesilovači permeace jako je DHSO a. iontoforézou. Jiné topické přípravky dobře známé v oboru, mohou být podány pro léčbu kožního zánětu. Farmaceutické přípravky se připraví obvyklými metodami vhodnými pro přípravu požadovaného přípravku, obsahujícího vhodná množství účinné složky, to znamená sloučeniny vzorce I podle předloženého vynálezu. Viz například Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA, 17 .vydání ,--1985.

Dávka sloučenin vzorce I pro dosažení terapeutického

-44věk, hmotnost a pohlaví pacienta a způsob podání, ale také na stupni požadovaná inhibice buněčné adhsze a schopnosti jednotlivé Sloučeniny být využita pro konkrétní chorobu. Předpokládá se, že léčba a dávkování jednotlivé sloučeniny mohou být podobné dávkování a léčbě, které se používá jí u.dexamethason -fos-f-átu-a—dáv- kování by mělo být upraveno odborníkem v oboru s přihlédnutím k relativní hladině aktivity. Rozhodnutí jak se použije jednolivá dávka / a počet podání za den/ je v moci lékaře a může se měnit úpravou dávky podle konkrétních okolností pro zajištění inhibice nebo redukce selektinem zprostředkované buněčné adhsze.

Vhodná dávka sloučeniny vzorce I nebo její farmaceutického přípravku, který ji obsahuje savci, který je postižen, nebo pravděpodobně je postižen některým ze zde uvedených stavů, je množství aktivní složky od 0,1 ^ug/kg do 100 mg/kg tělesné hmotnosti, pro systémové podání může být dávka v rozmezí od 0,1 do 100 mg/kg tělesné hmotnosti pro aktivní složku a výhodně v rozmezí od 0,1 do 50 mg/kg tělesné hmotnosti. Pro topické podání, například na kůži nebo do oka, může,, být vhodná dávka aktivní složky v rozmezí od 0,1 ^ug do asi 100 mg/ml kapalného nosiče nebo přísady a výhodně asi 0,1 mg až 10 mg/ml. Pro orální dávkování, zahrnující léčbu nebo profylaxi zánětlivých chorob nebo stavů, může být vhodná dávka v rozmez.í_o.d_as-i—1— mg—do—— 100 mg/kg tělesné hmotnosti savce a výhodně od asi 1 mg do asi 50 mg/kg tělesné hmotnosti. Účinná složka bude výhodně podávána je stejných dávkách jednou až čtyřikrát denně. Obvykle se však podává malá dávka zpočátku a dávkování se postupně zvyšuje až do dosažení optimálního dávkování pro hostitele při léčbě.

Následující příklady jsou míněny spíše jako ilustrativní a nijak^vynález neomezující ,-a-v~rozsahu-— předloženého vynálezu jsou možné různé variace.

-45Příklady provedení vynálezu

Příklad 1 · · .......

(2S, 3R,4E)-3-Benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2,3-di-Obenzoyl-4,6-di-O-/natrium oxysulfonyl)- cí -D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen

C¹ » Ί — *3 Λ _ 1 o ιΛ Γ\ rtl ř 1 i H Art» 1 iciiyx -> J v J-O 4_ Jj Jř X XM.OÍA J.

rra 1 a > Hτλλλr*a n r\β ϊ Λ 'JUJ.VAlWWWj b Ct * i V W <1

-HO -OH

HO

SEt

X οΛζ

Směs ethyl-l-thio-fi-D-galaktopyranosidu /24,86 g, 0,111 mol/ /Připraven jak popsal R.U.Lemieux v Can.J.Chem.,29,

1079 /1951// a 2,2-dimethoxypropanu /500 ml/ se zpracuje s kyselinou p-toluensulfonovou /0,625 g/ a míchá se při 22 °C 24 hodin. Přidá se voda a po 15 minutách se reakční směs ochladí na lázni ledové vody a míchá se dalších 30 minut. Potom se přidá triethylamin /5 ml/ a směs se 20 minut míchá. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se čistí chromatografií na silikagelu /9-x 12 cm, 50 % až 70 % ethylacetát/toluen/ a získá se titulní sloučenina /25,5 g, 87 %/ jako bílá pevná látka. Řekrystalizací z ethylacetátu a hexanu se získají bílé hranoly.

t. t. = 90-93°C; [a]^²: +20.8° (o2.8, CHCI₃);

IR (KBr) (cm'¹): 3200 (šináw OH);

-461H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 1-33 (3H, t, J=7.3 Hz, -SCH2CH3). 1-36 and 1.52 (2 x 3Η, 2s, -CH3 of tsopropylidenv), 2.2 a 2:5 OH), 2.75 {2H, m, -SCH2CH3), 3.57 (1H, dd, J=10.2 a 7.0 Hz, H-2), 3.81 (1H, dd,

J-,1.5 a. 4.0 Hz, H-6), 3.89 (1H, m, H-5), 3.98 (1H, J=11.5 7.2 Hz, H-6), ^09-(-1H,-dd,-J=7.0-a:.^-5.6_Hz,J±J),_4^1JlH_i^^^.6^ ^2.£Hz,21-4\_

4.27 (1Η, d, J=10.2 Hz, H-1);

Elementární analýza pro ^cn^H2O°5^S: -vypočteno 49,98. % C, .7,63 % H, 12,13 % S nalezeno 49,89 % C, 7,49 % H, 12,33 % S.

B. Ethyl-6-0-terc.butyIdimethylsily1-3,4-0-isopropylÍT den-l-thio-S-D-galaktopyranosid

SEt \ .O OTBDMS

XA

HO

HO

Roztok ethyl-3,4-0-isopropyliden-l-thio-G-D-galaktopyranosidu /8,65 g, 32,7 mmol/ v suchém pyridinu /125 ml/- se zpracuje při O-5 °C. s terc.butyldimethylsilyl-_ chloridem /5,92 g, 39,2 mmol/ a výsledná směs se 5 hodin míchá. Potom se přidá methanol /15 ml/ a roztok se míchá dalších 15 minut. Rozpouštědlo se pak odpaří za vakua a zbytek se zředí ethylacetátem /500 .ml/ , promyje studenou kyselinou chlorovodíkovou 2N, nasyceným hydrogenuhličitanem sodným, solankou a suší se nad bezvodým síranem horečnatým. Odpařením rozpouštědla za vakua se získá olej, který se čistí chromatografií na silikagelu /9x 11 cm,10% až 20% ethylacetát/toluen/-a-získá-se titulní sloučenina /12,4-g>—

100 %/ jako olej.

-47[¢¢: + 2.8° {c=1.0, CHCI3):

¹Κ NMR 400 MHz (CDCI3) δ ppm: 0.08 (6H, s, S1CH3), 0.9 (9H, s,Si-fBu),1.32 (3H, t, J=7.5 Hz, -SCH2CH3) 1-35 a ; 1.53 (2 X 3H, 2s, -CH3 isopropýliden^, 2.7 (2H, m, -SCH2CH3), 3.56 (1H, dd, J 10.2 a; 7.0 Hz, H-2), 3.8-3.9 (3H, m, H-5 a H-6), 4.05 (1H, dd, J=7.0 a J=5.5 Hz, H-3),

4.24 (1H, d, J=10.2 Hz, H-1) 4.26 (1H, dd, J=5.5 ai. 2.0 Hz, H-4).

C.....Ethyl-6-O-terc.butyldimethylsilyl-3, .4-Orisopro.pyr liden-2-0-p-methoxybenzyl-l-thio-8-D-galaktopyranosid .

OPMB

SEt HO

Roztok ethyl-6-0-terc.butyldimethylsilyl-3,4-O-isopropyliden-l-thi-8-D-galaktopyranosidu /12,4 g, 32,7 mmol/ v Ν,Ν-dimethylformamidu /45 ml/ se přidá k suspenzi hydridu sodného /1,35 g 80% v minerálním oleji, 45,0 mmol/ v N,N-dimethylformamidu /90 ml/ a výsledná směs se míchá při 22 °C 2 hodiny. Reakční směs se pak ochladí na 0 až 5 °C, zpracuje se.po kapkách s p-methoxybenzylchloridem /8,1 ml, 59,8 mmol/ a míchá se při 22 °C 2 hodiny. Reakční směs se opět ochladí na ledové lázni a zpracuje se po kapkách s vodou /20 ml/. Reakční směs se pak zředí vodou /300 ml/ a extrahuje se etherem /3 x 300 ml/. Spojené extrakty se promyjí solankou, suší se nad bezvodým síranem horečnatým a odpaří se. Vzniklý olej še čistí silikagelovou chromátografií /9 x 12 cm, až 10 % ethylacetát/toluen/ a získá se titulní sloučenina /10,5 g, 64 %/ jako olej.

-48IR (NaCI, film) O_max (cm'¹): 1612 (aromat.?)ai 1516;

1H NMR 200 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.06 {6H, s, SÍCH3), 0.88 (9H, s, Si tBu), 1.29 (3H, t, J=7.4 Hz, -SCH2CH3), 1.34 a . 1.44 (2 x3H, 2s, -CH3 ^z isopropyliden^a), 2.7 (2H, m, -SCH9CH3), 3.41 (1H, dd, J=6.1 a 9.9 Hz, H2), 3.79 (3H, s, -OCH3), 3.7-3.9 (3H, m, H-5 a H-6), 4.15-4.25 (2H, m, H-3

Hz, -OCH2 ² 4-methoxybenzyl^)4.74 (1H, d, JaB=1 1 -0 Hz, -OCH2 4methoxybenzyl, 6.86 (2H, d, J=8.7 Hz, H-3 ² 4-methoxybenzyP a: 7.35 (2H, d, J=8.7 Hz, H-2^ 4-methoxybenzylu)

D. Ethyl-2-O-p-methoxybenzyl-l-thio-B-D-galaktopyranosid \ ,O OTBDMS

OPMB

SEt

OPMB

Roztok ethyl-6-0-terc.butyldimethylsilyl-3,4-0-isopropyliden-2-0-p-methoxybenzyl-l-thio-B-D-galaktopyranosidu (10,50 g, 21,05 mmol) v 80% vodné kyselině octové /100 ml/ se zahřívá na 60 °C 1,5 hodiny. Ochlazená směs se odpaří za vakua a poslední stopy kyseliny octové se odstraní současným odpařením s toluenem. Chromatografií zbytku na silikagelu /7 x 13 cm, 0 až 10 % methanol/chloroform/ se získá titulní sloučenina /5,67 g, 78 %/ jako pevná látka. Rekrystalizací z dichlormethanu se získá bílá pevná látka.

Mtel31-132°C. [a]^:+22.7° (c=1.0, CHCI3);

IR (KBr) Omax (cm-¹): 3500 a> 3300 OH) ai 1605 (aromatic·)

-491h NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 1.35 (3H, t, J=7.5 Hz, -SCH2CH3), 22.8 (tširáý, OH a -SCH2CH3), 3.5-3.6 (2H, m, H-2 a H-5 libující ),

3.61 (1K, dd. J=3.0 a: . 8.9 Hz, H-3), 3.81 (3H, s, -OCH3), 3.84 (1H, dd, J=4.3 a. 12.0 Hz, H-6), 3.95 (1H, dd,J=6.0 a 12.0 Hz, H-6), 4.03 (1H, d, J=3.0 Hz, H4), 4.44 (1H, d, J=9.5 Hz, H-1), 4.62 a ' 4.91 (2H, 2d, J=10.8 Hz, -CH2 ^z 4-methoxybenzyM6.91 (1H, d, J=8.6 Hz, H-3 ^z- 4rnethoxybenzyítf), a 7.34 ppm (1H, d, J=8.6 Hz, H-2 _z 4-methoxybenzý¹ lu).

Elementární analýza pro C^gH^OgS: vypočteno 55,80-%. C,.. 7,02-%-H, 9,31 %..S_. nalezeno 55,64 % C, 6,78 % H, 9,23 % S.

E. Ethyl-2-0-p-methoxybenzyl-3,4-tri-0-acetyl-l-thioβ-D-galaktopyranosid

HO OH AcO OAc

OPMB OPMB

Roztok ethyl-2-0-p-methoxybenzyl-T-thio-B-D-galaktopyranosidu /5,67 g, 16,46 mmol/ ve směsi pyridinu /100 ml/ a acetanhydridu /50 ml/ se míchá při 22 °C 3 hodiny. Přebytek činidel se odpaří za vakua a poslední stopy se odstraní současným odpařením s toluenem. Zbytek se čistí silikagelovou chromatografií /7 x 13 cm, 0% až 20 % ethylacetát/ toluen/ a získá se titulní sloučenina /7,29 g, 94 %/ jako olej.

-501R (NaCI, film) Omax (cm*¹): 1750 (C=Oz acetatu);

1K NMR 200 MHz (CDCI3) 5 (ppm): 1,34 (3H, t, J=7.4 Hz, -SCH2CÍI3),

1.97,1.03 a 2,13 (3 x3H, 3s,-OAc), 1.97, 2.03 a 2.13 (3 x3H, 3s,

-OAc), 2.7-2.8 <2H, m, -SCH2CH3), 3-64 (1H, t, J=9.8, H-2)* 3.79 (3H, s,

-----------0GH3)₁-3.86-(4H_ř-m_í_H=5)_!4,53(2H,J_,J^9^Hz,_H_:£a __________ putující 4.78 {1H, d, J=10.4 Hz. -CH₂OPMB), 4.98 (1H, dd, J=3.4 a··'

9.7 Hz, H-3), 5.4 (1H, d, J=3.4 Hz, H-4), 6.86 (1H, d, J=8.5 Hz, H-3 zs 4methoxybenzylu) a 7.24 ppm (1H, d, J=8.5 Hz, H-2 2s4-methoxybenzylů ).

F. (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(2-0-p-methoxybenzyl-3,4,6-tri-0-acetyl- -D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen a (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-l-(2-0-p-methoxybenzyl-3,4, 6-tri-0-acetyl-8-D-galaktopyranosyloxy)-4oktadecen

AcO OAc

AcO

PMBO

OBz

AcO OAc —wAcO

PMBO

N3

(CH₂)₁₂CHj

OBz

Postup A

Roztok (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-4-oktadecen1-olu /1,11 g, 2,58 mmol/ /připraven obecným postupem popsaným P. Zimmermanem a spol., Liebigs Ann.Chem., 663-667 /1988//, ethyl-2-O-p-methoxybenzy1-3,4,6-tri-0-acetyll-thio-8-D-galaktopyranosidu /1,62 g, 3,44 mmol/ a 2,6di-terc.butyl-4-methylpyridinu /1,10 g, 5,37 mmol/ ve směsi ethyletheru /20 ml/ a dichlormethanu /20 ml/ se míchá 30 minut při 22 °c s práškovanými 48 molekulovými síty. Potom se přidá dimethyl(methylthio)-sulfoniumtriflát /1,30 g, 5,03 mmol/ /popsáno P.Fugedi-m a spol., Carbohydr. Res., 149-/1986/ C9-C12/ a výsledná směs..se.míchá 3,2 hodiny. Potom se přidá triethylamin /2 ml/ a reakční směs se míchá

-51dalších 30 minut. Reakční směs se pak filtruje přes Celíte, zředí se ethylacetátem, promyje se vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou, suší se nad bezvodým síranem hořečnatým a zahustí. Chromatografií zbytku na sloupečku silikagelu /5 x 11 cm, 0% až 20% ethylacetát/toluen/ se získá titulní materiál /1,86 g, 86 %/ jako čirý olej. Podl

NMR je produkt směs a D anómeru v poměru asř 86:14.

Čištěnám vzorku na preparativních destičkách se získá čistý anomer jako sirup, mající následující charakteristiky.. _ _____ _ [a]_D : + 22.2° (c=1.0, CHCI3).

IR (NaCI, film) vmax(cm’1): 2105 (N3), 1753 (C=0₂ aceteluja 1735.

1K NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (3H, t, J=7.0 Hz, -CH3), 1.2-1.4 (22H, širdíý -{CH2)11-), 1.99, 2.00 a 2.11 (3 x 3H, 3s, -OAc), 2.08 {2H, m, =CH-CH2-), 3.50 (1H, dd, J=11.0 a 7.9 Hz, H-1), 3.76 (1H, dd, J=11.0 a 4.0 Hz, H-1), 3,79 (3H, s, -OCH3), 3.83 (1H, dd, J=10.6 Hz, H-2‘), 3.98 (1H, m, H-2). 4.05 (2H, d, J=6.5 Hz, H-6‘), 4.21 (1H, t, J-6.5 Hz, H-5'), 4.56 (1H, d, JaB=1 1-9 Hz, -CH22e 4-methoxybenzý]u#.86 (1H, d, J=3.6 Hz, H1), 5.29 (1H, dd, J=10.6 a. . 3.4 Hz, H-3‘), 5.44 {IH.sreký, d, J=3.4 Hz, H4‘), 5.58 (1H, dd, J=14.3 a 7.9 Hz, H-4), 5.62 (1H, dd, J=7.9 a 4.0 Hz,

H-3), 5.95 (1H, dt, J=14.3 a 6.7 Hz, H-5), 6.85 (2H, d, J=8.7 Hz, H-3 . 4methoxybenzyf 7.26 (2H, d, J=8.7 Hz, H-2$ 4-methoxybenzyl'iu7.46, 7.6 a 8.06 (5H, 3m, benzoat··).

Postup B

Ve větším měřítku se lépe rozdělí dva anomery jako tetra-acetáty-jak je popsáno-dále......- - ---------------- ----- ----------52(2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen a (2S,3R,4E)-2azido-3-benzoyloxy-l-(2,3,4,β-tetra-O-acetyl-C-D-galaktopyranosyloxy )-4-oktadecen

Roztok, obsahující směs (2S,3R,4Ě)-2-azido-3-benzoyloxy-1-(2-0-p-methoxybenzyl-3,4,6-tri-0-acetyl- K-Dgalaktopyranosyloxy)-4-oktadecen a (2S,3R,4E)-2-azido-3benzoyloxy-1-(2-O-p-methoxybenzyl-3,4,6-tri-0-acetylβ-D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecenu /0,163 g, 0,191 mmol poměr a 0= 86:14/ v suchém dichlormethanu /10 ml/ se ochladí na 0 až 5 °C a zpracuje se s. kyselinou trifluoroctovou /5 ml/. Po 2 hodinách při 0 až 5 °C se rozpouštědlo odpaří za vakua a zbytek se zředí pyridinem /5 ml/ a acetanhydridem /5 ml/ a míchá se při 22 °C 2 hodiny. Přebytek činidel se odpaří za vakua. Zbytek se čistí chromatografií na silikagelu /0 až 5 % ethylacetát/toluen/ a získají se dva čisté anomery /spojený výtěžek 83 %/.

IR-(GH2Gl2)OFnax-(cm^j-a-anomer:-3050r2930-(e^H)721O0(N3)7T750 (C=O), 1228 (C-O);

IR (CH2CI2) Umax (crrr¹) β-anomer 3050, 2930, 2955 (C-H), 2130 (N3), 1750 (C=O), 1220 (C-O);

-531H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm) a-anomer: 0.89 (3H, t, J=7.0 Hz, -CH3),

l. 25 (20H, š _s, -(CH2)1O·), 1.39 (2H, m, -CH2-), 2.00, 2.01, 2.09, 2.15 (4 x 3H, 4s, 4 x -OCOCH3), 2.09 (2H, m, =CH-Ctí2-). 3.52 (1H, dd, J=10.7 and

7.7 Hz, H-1), 3.88 (1H, dd, J=10.7 a . 3.5 Hz, H-1), 3.91-3.95 (1H, m, H-2), 4.09-4.10 (2H, m, H-6'), 4.24 (1H, td, J=6.5 a 1.1 Hz, H-5‘), 5.14-5.17 (2H, m, H-1' a H-2'), 5.34-5.39 (1H, m, H-3'), 5.49 (1H, dd, J=3.3 a . 1.1 Hz, H-4‘), 5.53-5.60 (2H, m, H-3 a H-4), 5.93-5.99 (1H, m, H-5), 7.45-8.06 ’ (5H, 3m, -C₆H₅).

•H NMR 400 MHz (CDCÍ3) δ (ppm) β-anomer: 0.89 (3H, i, J=7.0 Hz, -CH3),

1.25 (20H, šs, -(CH2)1O-), 1-39 (2H, m. -CH2-), 2.00, 2.03, 2.11, 2.16 (4 x -3H, 4s, 4 x-OCOCH3), 2.09 (2H, m, =CH-CH2), 3.58-3.63 (1H,.m, H-1)„. 3.89-3.97 (3H, m, H-1, H-5’a H-2), 4.11 (1H, dd, JaB=11-2 ai JaX=6.7 Hz, H-6’). 4.14 (1H, dd, JAB=11.2 a Jbx=6.7 Hz, H-6'), 4.51 (1H, d, J= 7.9 Hz, H-1'), 5.02 (1H, dd, J=10.5 a? J 3.4 Hz, H-3'), 5.42 (1H. dd, J=10.5 ai

7.9 Hz, H-2'), 5.39 (1H, d, J=3.4 Hz, H-4¹), 5.53-5.62 (2H, m, H-3 a. H :-4),

5.94 (1H, dt, J=14.3 ar i 6.9 Hz, H-5), 7.45-8.08 (5H, 3m, -C6H5).

G. (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(-D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadeoen

Postup A

AcO OAc ve».

Η»

PMBO I =

HO OH

Ng

HO I

OBZ

OBZ

-54Roztok {2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-l-(2-0-p-methoxybenzyl-3,4,6-tri-0-acetyl- οζ -D-galaktopyranosyloxy)-4oktadecenu /1,27 g, 1,52 mmol/ v methanolu /25 ml/ a suchém dichlormethanu /10 ml/ v methanolu /25 ml/ a suchém dichlormethanu /10 ml/ se zpracuje s roztokem methoxidu sodného /0,8_ ml, 0,nunol^ θ>2Μ/ při 0 až 5 °C a pod argonem...,_,_______

Směs se míchá 7 hodin potom se přidá pryskyřice Dowex 50W-X /asi 2 g/ a míchá se do dosažení pH asi 7. Pryskyřice se odfiltruje a směs se za vakua odpaří. Výsledný zbytek se rozpustí v dichlormethanu /40 ml/ a tento roztok se zpracuje s kyselinou trifluoroctovou /5 ml/ při 0 až 5 °C po 30 minut. Směs se odpaří za vakua a společně se odpaří s toluenem. Zbytek se čistí silikagelovou chromatografií /3 x 12 cm, 50 % až 100 % ethylacetát/toluen/ a získá ,#· se titulní sloučenina /0,782 g, 87 %/:

Postup B

(CHjJiaCHa

Roztok (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-l-(2,3,4,6tetra-O-acetyl- {( -D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecenu_ /1,0 g, 1,32 mmol/ v dichlormethanu /10 ml/ se pomalu přidá k čerstvě připravenému roztoku sodíku /0,608 g, 26,4 mmol/ v methanolu /15 ml·/ při -40 °C a pod argonem. Teplota chladíc lázně vystoupí během 1,5 hodiny na -25 °C. Reakční směs se ochladí na -40 °C a neutralizuje se roztokem kyseliny octové /1,5 ml, 26,4 mmol/ v dichlormethanu /2 ml/. Směs se zahustí za vakua, získá se zbytek, který se rozpustí v dichlormethanu /25 ml/. Zbylá pevná látka/octan sodný/ se odfiltruje_a promyje^se dichlormethanem_/5_j,,x„10 ml/.

-55Spojený filtrát a promývací roztok se odpaří a zbytek se čistí silikagelovou chromatografií /20 g, 0 % až 35 % methanol/dichlormethan/ a získá se titulní sloučenina /0,545 g, %/.

IR (nujol) {cm’¹): 3600-3060 (O-H), 2930, 2860 (C-H), 2100 (-N3).

¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (3H, t, J=6.8 Hz, -CH3), 1.2-1.4 (22H, -{CH2)11-), 2.09 (2H, m, =CH-CH₂-), 2.50 -OH), 3.57 (1H, dd, J=10.4 and 6.2 Hz, H-1), 3.7-4.1 (7H, m, H-2¹, H-3‘, H-5\ H-6^S, H-2 S' H-1), 4.15 (1H, s, H-4'), 4.94 (1H, s, H-1'), 5.61 (1H, dd, J=15.3 a. 8.0

.. -Hz,.H-4), 5.72 (1H, dd, J=8.0 a . 6.0 Hz, H-3), 5.98 (1H. dt, J=15.3 3:..:/7.0--. Hz, H-5), 7.45-8.07 (5H, 3m, benzoat ).

Postup C

TESO OTEŠ

TESO

OBz

Roztok ethyl-l-thio-D-galaktopyranosidu /4,48 g, 19,98 mmol/ v suchém N,N-dimethylformamidu /200 ml/ se zpracuje s imidazolem /6,8 g, 99,88 mmol/, chlortriethylsilanu /16,8 ml, 99,88 mmol/ a 4-N,N-dimethylaminopyridinu /80 mg/ a míchá se při 22 °C 72 hodin. Reakční směs se pak zředí studenou vodou /200 ml/ a extrahuje se hexanem /700 ml/. Organická fáze se promyje studenou vodou /500 ml/, solankou, suší se nad bezvodým síranem hořečnatým a odpaří se. Zbylý olej se čistí chromatografií na silikagelu /6,5x12,5 cm,

0-50 % toluen/hexan/ a získá se 11,81 g /87 %/ ethyl-2,4,6tetra-O-triethylsilyl-l-thio-D-D-galaktopyranosidu jako oleje.

Roztok ethyl-l-thio-B-D-galaktopyranosidu /4,48 g, 19,98 mmol/ v suchém N,N-diméthylformamidu /200 ml/ se zpracuje s imidazolem /6,8 g, 99,88 mmol/, chlortriethylsilanem /16,8 ml, 99,88 mmol·/ a 4-N,N-dimethylaminopyridinem /80 mg/· a míchá se při 22 °C 72 hodin, Reakční směs se—pak-zř-edí_s.tudenO-U_V-OdO-U_Z2.0-0_ml/,.a extrahuje se hexanem /700 ml/. Organická fáze se promyje studenou vodou /500 ml/, solankou, suší se nad bezvodým síranem horečnatým a odpaří. Zbylý-olej se čistí chromatografií na silikagelu /6,5 x 12,5 cm, 0-50 % toluen/hexan/ a získá se 11,81 g /87 %/ ethyl-2,3,4,6-tetra-O-triethylsilyl-l-thio-DD-galaktopyranosidu jako oleje.

Md²: -21° (C 1·°· ^CHC,3)

IH (Na Cl film) v™, (cm-1): 1100 (-šW^i-0).

¹H NMR 200 MHz (CDCI3) 5 (ppm): 0.4-0.8 (24H, m, S1CH2), 0.8-1.1 (36H, m, SiCHgCHa). 1.23 (3H, t, J=7.4 Hz, SCH2QH3), 2.65 (2H, m, SCH2CH3),:

3.34 (1H ,m, H-6), 3.42 (1H, dd, J=2.1 & J=8.5 Hz, H-3), 3.65 (2H, m, H-5 a 'ii-6 pffisáizjící )) 3.82 (1H, t, J=8.5 Hz, H-2), 3.93 (1H,áizriqř « H-4),

4.2 (1H, d, J=8.5 Hz, H-1).

Roztok (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-4-oktadecen1-olu /83 mg, 0,19 mmol/, ethyl-2,3,4,6-tetra-O-triethylsilyl-l-thio-B-D-galaktopyranosidu /171 mg, 0,25 mmol/ a 2,6-di-terc.butyl-4-methylpyridinu /119 mg, 0,577 mmol/ ve směsi ethyletheru /1,5 ml/ a dichlormethanu /1,5 ml/ se míchá 30 minut při 22 °C s prákovanými 4A molekulovými síty /100 mg/. Potom se přidá dimethyl(methylthio)-sulfoniumtriflát /95 mg, 0,366 mmol/ a výsledná směs se 1 hodinu míchá. Přidá se triethylamin /0,5 ml/ a v míchá se pokračuj dalších 20 minut. Reakční směs se pak odfiltruje, zředí se hexanem,-promyje-se-zředěným hydrogenuhličitanem sodným,

-57solankou, suší se nad bezvodým síranem horečnatým a zahustí se. Filtrací zbytku na silikagelu /0-80 % toluen-hexan/ se získá jako meziprodukt tetrasiiylový derivát /0,2 g/.

Tento materiál se rozpustí v dichlormethanu /5 ml/ a zpracuje se 90% vodou kyselinou trifluoroctovou /0,25 ml/ po 1 hodinu při 22 °C. Po zředění dichlormethanem se.reakční směs. promyje nasyceným hydrogenuhličitanem sodným, solankou, suší se nad bezvodým síranem horečnatým a odpaří se.

NMR tohoto surového materiálu indikuje směs a β anomerů v poměru 93:7. Chromatografii na silikagelu /1,4 x 8 cm, eluce 0-10 % methanol-dichlormethan/ se získá titulní sloučenina /85 mg, 75 %/ jako sklovitá pevnálátka, která je identická podle NMR s produktem připraveným ve výše popsaném postupu B.

H. (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-Í-(4,6-0-benzyliden- f( D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen

HO OH

O

OBz (CHíhjCHj

OBz

Dimethylacetal benzaldehydu /0,28 ml, 1,87 mmol/ a pak kyselina para-toluensulfonová /15 mg/ se přidá k míchanému roztoku (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-l-{ </-D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecenu /0,549 g, 0,928 mmol/ v acetonitrilu /15 ml/ při 22 °C. Směs se míchá 45 minut, potom se přidá triethylamin /asi 0,5 ml/ a směs se odpaří za vakua. Zbytek se čistí silikagelovou chromatografií /72 g, 20 % aceton/toluen/ a získá se titulní sloučenina /0,521 g, 81 %/ jako pevná látka.

-58.22 [<χβ : +36.0 (c=1.0, CHCI3).

IR (KBr) Umax (cnr¹): 3380-3280 (N-H a.' O-H), 2925, 2860 {C-H)_r 2130 (N3), 1710 (C=O ester);

1H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (3H, t, J=76.9 Hz, -CH3), 1.26-1.42 (22 H, s,-(CH2)1 1-), 2.11 (2H, m, =CH-CH2-), 3.59 (1H, dd, J-10.4 a> 76Ϊ3ΗΖ7Η-1 )73782( TH? ~ VH-5')73;88XtHrnr,~H=2·)·;r-3.93-3;98-(-3H_rm_rH-1~ H-2* ai H-3'), 4.11 (1H, dd, J=12.6 a‘ 1.5 Hz, H-6'), 4.28-4.32 (2H, m, H4* as H-6'), 5.02 (1H, s, H-1‘), 5.58 (1H, S, -O-CH-O-), 5.62 (1H, dd, J=15.2 ai 8.1 Hz, H-4), 5.73 (1H, dd, J=8.1 ai 5.7 Hz, H-3), 5.98 (1H, dt, J=15.2 as 6.9 Hz, H-5), 7.37-8.08 (1 OH, 4m, 2 x -ΟβΗβ).

I. (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(2,3-di-Obenzoyl-4,6-O-benzyliden- o( -D-galaktopyranosyloxy)· 4-oktadecen

<CH2>«CH3

OBZ

OBz

Roztok (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy~l-(4,6-Obenzyliden- -D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecenu /1,26 g, 1,85 nunol/ v pyridinu /15 ml/ se ochladí na 5 °C pod argonem.

K tomuto roztoku se přikape benzoylchlorid /0,8 ml, 6,89 mmol/ a potom 4-dimethylaminopyridin /asi 40 mg/ a tato směs se míchá při 5 °C po 18 hodin. Směs se zpracuje s methanolem /5 ml/ při 5 °C a míchá se 0,5 hodiny. Reakční směs se zředí ethylacetátem /300 ml/, prómyje se 1M vodným studeným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a solankou. Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem horečnatým, filtruje a zahustí. Zbytek se čistí silikagelovou chromtografií /80_g,. 0 % až„2_% ethylaCetát/toluen/ a získá se titulní sloučenina /1,64 g, 100 %/ jako světležlutý olej.

-59IR (CH2CI2) (cm'¹): 3050, 2930, 2855 (C-H), 2100 (-N3), 1730 (C=O), 1265 (C-O);

1H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (3H, t, J=7.0 Hz, -CH3), 1.25 (20 _H_-•-_δΛ(θΗ2)Τ0^),-·1·.37 (2Η; γπγ·ΌΗ2·),-2.06 (2H, m, -CH-CHH 3.59 (1H, dd, J=10.4 a 7.4 Hz, H-1), 3.91-3.99 (3H, m, H-1, H-5' ai H-2), 4.16 (1H, dd, J=12.6 as 1.6 Hz, H-6'), 4.36 (1H, dd, J=12.6 a : 1.5 Hz, H-6j, 4.70 (1H. dd, J=3.2 a. 1.0 Hz, H-4‘), 5.43 (1H, d, J=3.3 Hz, H-1*), 5.53-5.61 (3H, m, H-3, H-4 at -O-CH-O-), 5.79 (1H, dd, Jab=10.8 at · JaX=3.3 Hz, H-2' _ H-3'), 5Έ4 (1H, dd, JAB=10 3 & . JbX=3.3 Hz, H-g H-3'), 5.92J1H, dt, J=14.4a: ^: 6.9 Hz, H-5), 7.33-8.03(20 H, 2m, 4x-C6Hs)7

J. (2S, 3R, 4E) -3-Benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-.l- (2,3di-O-benzoyl-4,6-O-benzyliden--D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen ,

OBz

OBz

Sirovodík se probublává roztokem (2S,3R,4E)-2-azido-3 benzoyloxy-l-í 2,3-ďi-0-benzoyl-4,6-O-benzyliden-. .

galaktopyrahosyloxy)-4-oktadecenu /300 mg, 0,34 mmol/ v pyridinu /13 ml/ a vodě /4 ml/ při 22 °C 15 minut..

Směs se pak těsně uzavře a míchá 6 hodin. Opět se probublá vá sirovodík 15 minut a směs se míchá přes noc při 22 °C. Další den se tento postup opakuje za míchání po 7 hodin. Rozpouštědla se pak odpaří.a zbytek se rozpustí v toluenu. Tento roztok se odpaří a zbytek se rozpustí v tetrahydro-60furanu /15 ml/. K tomuto míchanému roztoku se přidá vodný ro2tok octanu sodného /50%, 1,8 ml/ a pak se přikape roztok hexadekanoylchloridu /0,1 ml, 0,34 mmol/ v tetra*)· hydrofuranu /0,5 ml/ při teplotě místnosti, protože se reakce jeví jako ukončená, opakuje se stejný postup s roz_____tokem_octanu_sodného_Jve^_vodě-/50_%-,_-O._r6-ml/_a-hexadekanoyl·------------a chlorid /33 ml, 0,11 mmol/. Směs se míchá při 22 °C,0,5 hodiny, potom se zředí ethylacetátem /45 ml/ a promyje se studeným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného /1M, 2 x 15 ml/, vodou /2 x 15 ml/ a solankou /2 x 15 ml/.

Organická vrstva se suší nad bezvodým sípaném hořečnatým, filtruje a zahustí se. Zbytek se čistí silikagelovou chromatografií /20 g, 0 % až 35 % ethylacetát/hexan/ a získá se titulní sloučenina /345 mg, 92 %/ jako bílá pevná

- látka. IR (CH2CI2) Umax (cm*¹): 3050, 2930, 2855 (C-H), 1720 (C=O ester ), 1675 (C=O amid ), 1265 (C-O);

¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (6H, t, J- 7.0 Hz, 2 x -CH3), 1.231.30 (44H, m, -(CH2)10- a -(CH2)12-). 1.56-1.67 (4H, m, -(CH2)2-), 1.99 (2H, m, =CH-CH2-). 2.10-2.18 (2H, m, -NHCOCJH2-), 2.36 (1H, t, J=7.5 Hz,

-NH-), 3.75 (1H, dd, J=10.9 a 5.2 Hz, H-1), 3.90-3.94 (2H, m, H-1 a H5'), 4.09 (1H, dd, J=12.6 a 1,4 Hz, H-6¹), 4.32 (1H, dd, J=12.6 a , 1.2 Hz,

H-6*), 4.52-4.57 (1H, m, H-2), 4,66 (1H, d, J=3.3 Hz, H-4'), 5.37 (1H, d, J=3.3 _Hz, H-1‘), 5.46-5.56 (3H, m, H-4, H-3 a -O-CH-O-). 5.70-5.75 (1H, m_ ‘ přesahující H-2' a H-3', H-5), 5.79 (1H, dd, J'AB-10-θ a JAX=3.3 Hz,

H-2' čiH-3'), 5.84 (1Η, dd, JaB=10.8 a JBX=3.3 Hz, H-2'či H-3'), 7.328.03 (20H, 3m, 4 x -C6H5).

-61K. (2S,3R,4Ε)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-(2,3-di-Obenzoyl- V -D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen

OBx

Kyseliny trifluoroctová /90%, 0,5 ml/ se přidá k mícha nému roztoku (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylaminol-(2,3-di-O-benzoyl-4,6-O-benzyliden- -D-galaktcpyranosyloxy)-4-oktadecenu /340 mg, 0,31 mmol/ v dichlormethanu /15 ml/ při 5 ⁹C. Směs se míchá 0,5 hodiny při 5 °C a pří 22 °C 1 hodinu. Opět se přidá kyselina trifluoroctová /stejné množství/ a reakční směs se míchá další hodinu při 22 °C. Směs se zředí ethylacetátem /30 ml/ a promyje se studeným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného /1M, x 15 ml/, vodou /2 x 15 ml/ a solankou /15 ml/. Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem hořečnatým, filtruje a zahustí. Zbytek se čistí silikagelovou chromatografií /15g 0 % až 60 % ethylacetát/hexan/ a získá se titulní sloučenina /238 mg, 76 %/ jako bílá pevná látka.

IR (CH2CI2) Umax (cm'¹): 3050, 2930. 2860 (C-H), 1725 (OO ester ·), 1675 (C=O amid ), 1265 (C-O);

-621H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 x -CH3), 1.231.31 (44H, m, -(CH2)10t a . -(CH2)12-). 1.56-1.61 (4H, m, -(CH2)2-). 1·θθ (2H, m, =CH-CH2-), 2.15 (2H, m, -NHCOCH2-), 2.44 (1H, _šs, -OH), 2.69 (1H, d, J=2.9 Hz, -OH), 3.79 (1H, dd, J=11.4 a. 3.5 Hz, H-1), 3.88 (1H, dd Trefující H-6‘, J=11,4 a 3.9 Hz, H-1), 3,92-3.99 (2H, m, H-6‘), 4.07 (Ť Η, ΐΓϋ^.ϊΈΓΗ-δ'Γ^γΐΉΓ p7H^r4')74753-4T60“(1H7m7H-2)75;33 (1H, d, J=3.1 Hz, H-1'), 5.46-5.55 (2H, m, H-4 a H-3), 5.65-5.80 (4H, m, H5, H-2', H-3‘ a -NH-), 7.33-8.02 (15H, 2m, 3 x -C6H5).

L. (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2,3-di-Obenzoyl-4,6-di-0-/natrium oxysulfonyl/- ¢( -D-galakto- · pyranosyloxy/-4-oktadecen

OBx OBz

Komplex oxid sírový-trimethylamin /320 mg, 2,3 mmol/ se přidá k míchanému roztoku (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2hexadekanoylamino-1-{2,3-di-O-benzoyl-^-D-galaktopyranosyloxy )-4-oktadecenu /230 mg, 0,23 mmol/ v suchém dimethylformamidu /20 ml/ při 22 C pod argonem, tato směs se zahřívá na 80 až 85 °C jednu hodinu, potom se opět přidá komplex oxidu sírového-trimethylaminu /160 mg, 1,15 mmol/. Po 1 hodině se reakční směs ochladí na 5 °C a zpracuje se s vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného /1M, až do zvýšení pH na 8-9/ a tento roztok se míchá 0,75 hodiny. Rozpouštědla se odpaří za vakua a zbytek se rozpustí v dichlormethanu/methanolu /8:2/. Hydrogenuhličitan sodný se odfiltruje na Celitu a filtrát se odpaří, zbytek se čistí· silikagelovou sloupcovou chromatografií /25 g, 0 % az 30 %

-63methanol/chloroform/ a dále na silikagelové destičce /chloroform/methanol 8:2/ a získá se titulní sloučenina /233

IR (nuiol) Umax (cm-¹): 3700-3200 (N-H), 2920, 2850 (C-H), 1720 (C=O ester ), 1655 (C=O amid );

¹H NMR 400 MHz (DMSO-d6) δ (ppm): 0.84 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 x -CH3), 1.13-1.52 (48 H, m, -(CH2)1 V a -(CH2)13-), 1-79^2.00 (4H, 2m, =CHCH2- a -NHCOCH2-), 3-55 (1H, dd, J=10.5 a 7.1 Hz, H-1), 3.84-3.91 (1H, m H-6‘, H-5'),.3.87 (1H, dd, J=12.1 a 8.4 Hz, H-6'), 4.10 (1H, dd, J=12.1 a 2.3 Hz, H-6’), 4.27-4.33 (Ίη, Ή-17Η-2);

4.32 (1H, d, J=7.1 Hz, H-1), 4.75 (1H, d, J=3.1 Hz, H-4’), 5.13 (1H, d, J=3.4 Hz, H-1'), 5.40-5.58 (4H, m, H-2', H-3¹, H-3 a H-4), 5.71 (1H, dt, J=15.1 a 6.7 Hz, H-5), 7.35-7.93 (15H, 3m, 3 x -C6H5).

Příklad 2 (2S, 3R, 4E)-3-Hydroxy-2-hexadekanoylamino-l-/4,6-di-O/natrium oxysulfonyl/- εζ -D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen

-64Čerstvě připravený roztok methoxidu sodného v methanolu /Q,98M, 2 ml, 1,96 mmol/ se přidá k míchanému roztoku (2S, 3R, 4E) -3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l'-/2,3-di'-0benzoyl-4,6-di-0-(natrium oxysulfonyl)- -D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecenu /120 mg, 0,098 mmol./ v dichlormetha _nu_/1.m 1 / a methanolu /5 ml/ při 22 °C. Reakční směs se_ 1_ hodinu míchá, potom se opět přidá stejné množství methoxidu sodného a tato směs se míchá další jednu hodinu. Po neutralizaci pryskyřicí Dowex 50W8 /H⁺/,voda, se směs filtruje a pryskyřice se promyje směsí dichlormethan/metha nol /1:1, 3x5 ml/. Tento roztok se zpracuje s Rexynem 102 /Na⁺/ pryskyřicí po dobu 1 hodiny, pak se filtruje a rozpouštědla se odpaří za vakua. Stejný postup se dvakrát aplikuje na získaný zbytek. Nakonec se pryskyřice čistí na silikagelových destičkách /20 % až 30 % methanol/voda/ chloroform 35:5:60/ a získá se titulní sloučenina /19 mg, 21 %/ jako špinavě bílá pevná látka.

IR (nujol) Omax (cm~¹): 3600-3100 (N-H a O-H), 2930, 2860 (C-H), 1630 (C=Oamid );

NMR 400 MHz (DMSO-d6) δ (ppm): 0.84 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 x -CH3),

1.22-1.44 (48 H, m, -(CH2)11- a -(CH2)13-), 1·92 (2H, m, =CH-Ctí2-), 2.04 (2H, i, J=7.3 Hz, -NHCOCH2’). 3-41 (1H, ddd, H-2'), 3.49 (1H, dd, J=10.5 a 3.3 Hz, H-1), 3.61 (1H, dd, J=10.5 a ' 3.5 Hz, H-1), 3.68 (1H, •dd7-J^1G72-a—379-H-z-H-^)_r3r72-(-lH,-dd,-J=-U.4-a__8.5-Hz,-H=6!),-3.86_ (1H, dd, J=11.4 a 2.4 Hz, H-6'), 3.89-3.95 (2H, m, H-3 and H-5'), 4.10 (1H, š S, -OH), 4.38 (1H, d, J=2.9 Hz, H-4*), 4.67 (1H, d, J=3.6 Hz, H-1'),

4.84 (1H, š s, -OH), 4.91 (1H, d, J=7.4 Hz, -OH), 5.33 (1H, dd, J=15.3 a

6.9 Hz, H-4), 5.51 (1H, dt, J=15.3 a 6.7 Hz, H-5), 7.43 (1H, d, J=9.3 Hz, -NH-).

-65Příklad 3 ( 25,3R, 4E) — 3-benzoyloxy-2-(cís-l3-tetrakosenoylamino)1-/2,3-di-0-benzoyl-4,6-di-0-(natrium oxysulfonyl/-D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen

Roztok (23,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-l-(2,3,4,6tetra-O-acetyl- -D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecenu popsaný v příkladu 1-P postup B /1,5 g, 2,0 mmol/ v pyridinu /85 ml/ a vodě /17 ml/ se nasytí sirovodíkem a míchá se při 22 °C 24 hodin. Rozpouštědla.se odpaří za vakua a zbytek se suší společným odpařením s toluenem. Získaný zbytek se rozpustí v dichlormethanu /170 ml/ pod argonem a zpracuje se s kyselinou nervonovou/1,47 g, 4,0 mmol/ a hydrochloridem l-ethyl-3-(3-dimethylaminopropylJkarbodiimidu /1,17 g, 6,1 mmol/ při teplotě místnosti. Výsledná směs se míchá 18 hodin, potom se zředí dichlormethanem /1,3 1/ a promyje se vodou /650 ml/ a solankou /650 ml/. Organické fáze se suší nad bezvodým síranem horečnatým, filtrují a zahustí. Zbytek se čistí chromatografií na silikagelu /180 g, 0 % až 20 % ethylacetát/toluen/ a získá se titulní sloučenina /1,58 g, 73 %/ jako bezbarvý olej.

-66[a]_D : +66.2° (c=1.0, CHCI3).

IR {čisty; Omax (cnr¹): 3500-3150 (O-H a N-H), 2930, 2860 (C-H), 1740 (C=O ester ), 1650(0=0 amid ¹H NMR (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (6H, t, J=6.7 Hz, 2x-CH3), 1.24-1.36 (54H,_____________ m, -(CH2)io<'{CH2)Í1- a -(ČH2)6’). 1.60-1.66 (2H, m, -CH2-), 2.01,

2.03, 2.11 a 2.14 (4 x 3H, 4s, 4 x -OCOCH3), 2.00-2.09 (6H, m přesahující -OCOCH3, 3 X =CH-CH2-), 2.16-2.30 (2H, m, -NHCOCH2-),

3.65 (1H, dd, J=10.6 a 3.2 Hz, H-1), 3.79 (1H, dd, J=10.6 a 3.3 Hz, H1), 4.02 (1H, dd, J=11.2 a 7.1 Hz, H-6j, 4.10 (1H, dd, J=11.2 a 5.8 Hz,

H-6’), 4.17 (1H, š t, H-5'), 4.54 {1H, m, H-2), 4.98 (1H, d, J=3.7 Hz, H-1'),

5.15 (1H, dd, J=11.0 a 3.7 Hz, H-2’), 5.32-5.40 (3H, m, c/s-CH=CH- a

H-3'), 5.45 (1H, d, J=2.5 Hz, H-4’), 5.48-5.59 (2H, m, H-3 a H-4), 5.73 (1H, d, J=9.4 Hz, -NH-), 5.91 (1H, dt, J=14.8 a 6.8 Hz, H-5), 7.43-8.02 (5H, 3m, *· ·,·.·.?

-C6H5)·

Elementární analýza pro Cg^H^jíO .· ·ί£ ‘f ««* vypočteno 69,90 % C, 9,59 % H, 1,29 % N ‘ nalezeno 69,83 % C, 9,47 % H, 1,51 % N

B. (2S,3R,4E)-3-Benzoyloxy-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)1-( -D-galaktopyranosyU-4-oktadecen

OBz

OBz

-5ΊRoztok methoxidu sodného v methanolu /0,2M, 0,73 ml/ se přidá k míchanému roztoku (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-(cis15-tetrakosenoylamino)-1-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-oý-Dgalaktopyranosyloxy)-4-oktadecenu /1,58 g, 1,46 mmol/ v methanolu /36 ml/' při 5'°C ’a pod argonem. Roztok se míchá 5 hodin při 5 °C. K této směsi se přidá pryskyřice Amberlite IRC-50 /H⁺/ a v míchání se pokračuje až je pH roztoku neutrální. Reakční směs se filtruje a zahustí se za vakua. Zbytek se čistí chromatografií na silikagelu /135 g, 0 % až J20 % methanol/chloroform/ a získá se titulní sloučenina /1,20 g, 84 %/ jako olej.

[a]p²: +42.8° (c=1.0, CHCI3).

IR (KBr) Umax (cnr¹): 3600-3200 (O-H a* N-H), 2930,2860 (C-H), 1725 (C=O ester.), 1650 (C=O amid j.

1H NMR (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (6H, t, J=6.7 Hz, 2 x -CH3), 1.26-1.28 (54H, m, -(CH₂)1O-. -(CH2)11- a -(CH₂)6-), 1.60-1.63 (2H, m, -CH₂-), 2.00-2.08 (6H, m, 3 x =CH-CH2-). 2.18-2.22 (2H, m, -NHCOCH2-), 3.64 (1H, dd,

J=10.6 a 5.4 Hz, H-1), 3.79-3.97 (6H, 2m, H-1, H-6', H-5’, H-3' ai H-2’),

4.10 (1H, ,šs. H-4‘), 4.50-4.57 (1H, m, H-2), 4.88 (1H, š S, H-1’), 5.32-5.40 (2H, m, c/s-CH=CH-), 5.53 (1H, dd, J=15.3 a, 7.2 Hz, H-4), 5.64 (1H, t,

J=7.2 Hz, H-3), 5.89 (1H, dt, J=15.3 a 6.8 Hz, H-5), 5.96 (1H, š s, -NH-),

7.45-8.04 (5H, 3m, -C6H5).

Elementární analýza pro ϋ^Ηθ,-ΝΟ^: vypočteno 72,25 % C, 10,47 % H, 1,53 % N nalezeno 72,01 % C, 10,38 % H, 1,79 % N.

-68C. (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)l-(4,6-0-benzyliden- <j(-D-galaktopyranosyloxy )-4-oktadecen

HO OH

HO 7 ^H^^kiCHsCHťCHíhCHj °X>Y^(CH₂),₂CH_í Οβζ

NHCO(CH_I)_nCH^H(CH_J)₇CH₃

OBz

Senzaldehyd /6 ml, velký přebytek/ se přidá k roztoku (2Ξ,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)-1( cZ “^D galaktopyranosyloxy)-4-oktadecenu /555 mg, 0,607 mmol/ v kyselině mravenčí /6 ml/ při 22 °G a pod argonem.

Směs se míchá 1,75 hodiny, potom se zředí chloroformem /60 ml/ a promyje se nasyceným studeným roztokem hydrogenuhličitanu sodného /70 ml/ a solankou /30 ml/. Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem hořečnatým, filtruje a zahustí. Zbytek se čistí chromatografií na silikagelu /36 g t:

% až 80 % ethylacetát/toluen/ a získá se titulní, sloučenina /461 mg, 76 %/ jako bílá pevná látka.

[a]0²: -15.1° (¢=1.0, CHCI3).

IR (KBr) Umax (cm-1): 3600-3200 (O-H and N-H), 2930, 2860 (C-H), 1725 (C=O ester ), 1630 (C=O amid ,).

ΪΗ NMR (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (6H, t, J=6.7 flž72Y^CR3)7lT25^76T(58H7 m, -(CH2)11-, -(CH₂)11-, -{CH2)6- a =CH-CH2·), 2.00-2.08 (4H, m, 2 x =CH-CH2'), 2.15-2.23 (2H, m, -NHCOCH2-), 2.43 a 2.52 (2 x 1H, 2 š s, 2 x -OH), 3.65 (1H, dd, J=10.7 at . 5.6 Hz, H-1), 3.75 (1H, s, H-5’), 3.93-3.96 (3H, m, H-1, H-2¹ a H-3¹), 4.07 (1H, dd, J=12.5 a 1.2 Hz, H-6’), 4.26 (1H, dd Eřeshrjící H-4', J=12.5 a 3.1 Hz, H-6'), 4.24-4.28 (1H, š s, H4‘), 4.55 (1H, m, H-2), 4.96 (1H, S, H-1’), 5.36 (2H, m, c/s-CH=CH-), 5.51-5.56 (1H, m, zfearujícá -O-CH-O-, H-4), 5.55 (1H, s, -O-CH-O-), 5.64 (1HJ, J=6.9 Hz, H-3), 5.81 (1H, dj=9.1 Hz, -NH-), 5.89 (1H, dt, J=15.3 a 6.9 Hz’H-5), 7.36-8.04'(ToH, 4m, 2 X-C6H5).

-69Elementární analýza pro C^HggNOgZ vypočteno 74,29 % C, 9,95 % H, 1,40 % N nalezeno 73,94 % C, 3,81 % H, 1,50 % N

D. - (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-(cis-15-tetrakosenoylaminp)-1(2,3-di-0-benzoyl-4,6-O-benzyliden-tf( -D-galaktopyranosyloxy )-4-oktadecen

(2S, 3R, 4E)-3-ben.zoyloxy-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)1— C 4,6-O-benzyliden- X -D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen (425 mg, 0,42 mmol/.se nechá reagovat obecným postupem popsaným v příkladu 1-1 a- získá se., tak titulní sloučenina /332 mg, 65 %/ jako olej.

[α]θ²: +87.0° (c=1.0, CHCI3).

IR (KBr) Umax (cnr¹): 3600-3200 (0-H and N-H), 2930,2860 (C-H), 1720 (C=O ester ), 1640 (C=O amid >).

1H NMR (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (6H. t, J=6.7 Hz, 2 x -CH3), 1.23-1.28 (54H, m, -(CH2)'11-, -(ČH2)11- a -(CH2)5-). 1.56-1.61 (2H, m, -CH2-), 1.96-2.04 (6H, m, 3 x=CH-CH2-), 2.14 (2H, m, -NHCOCH2-), 3.79 (1Ή, dd, J=10.9 a 5.2 Hz, H-1), 3.91 (1H, dd, J=10.9 a 3.9 Hz, H-1), 3.92 (1H, s, H-5'),

4.09 (1H, dd, J=12.6 a, 1.0 Hz, H-6'), 4.32 (1H, dd, J=12.6a .0.9 Hz, H6’), 4.55 (1H, m, H-2), 4.66 (1H, d, J=3.0 Hz, H-4*), 5.32-5.39 (3H, m, H-1‘ a c/s-CH=CH-), 5.46-5.56 (2H, m, H-4 a H-3), 5.56 (1H, s, -O-CH-O-), 5.70-5.75 (2H, m, H-4 a -NH-), 5.77 (1H, dd, JaB=1 0.8 a JaX=3.2 Hz, H2'_f-£ixH-3j₁ 5.80 (1H, dd, JaB=10.8 a JbX= 3.4 Hz, H-2itó1-3'), 7.328.03 (1ÓH, 3m, 2 x-Čefls). ~

-70Elementární analýza pro vypočteno 75,40 % C, 8,91 % H, 1,16 % N nalezeno 75,34 % C, 8,81 % H, 1,36 % N.

E, { 2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-(cÍs-l5-tetrakosenoylamino)1“(2,3-di-O-benzoyl-Ď-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen

Ph v~° o J

BzO

O.

BzO,

NHCO(CHi)l »CH=CH(^cHs kČHi ,(CHá«CH3

HO

ΒΖΟ&Δ . N BzO* 1

NHC0(CHí)uCH=CH(CH2)7CH3 ,(CHí)iíCH3

OBz

OBz (2S,3R,4E) -3-Benzoyloxy-2-(cis-15-tetrákosenoylamino)-1-(2,3-di-0-benzoyl-4,6-0-benzyliden-e^-D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen /317 mg, 0,262 mmol/ se nechá reagovat obecným postupem popsaným v příkladu 1-K a získá se titulní sloučenina /215 mg, 74 %/ jako olej.

Ια]θ²:+74.0° (c=1.0, CHCI3).

IR (KBr) Umax (cm’1): 3650-3150 (O-H a : N-H), 2930, 2860 (C-H), 1725 (C=O ester ), 1645 (C=O amid j.

1-H NMR (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (6H, t, J-6.7 Hz, 2 x -CH3), 1.23-1.28 (54H, m, -(CH2)11-, -(CH2)11- a. -(CH2)5-). 1.58-1.62 (2H, m, -CH2-), 1.97-2.05 (6H, m, 3 x =CH-CH2-), 2.16 (2H, m, -NHCOCH2-). 2.57 (1H, š s, -OH),

3.79 (1H, dd, J=11.2 a 5.5 Hz, H-1), 3.88 (1H. dd, J=11.2 a . 4.0 Hz, H1), 3.91 (1H, dd, J=11.8 a 4.2 Hz, H-6'), 3.98 (1H, dd, J=11.8 a. 5.4 Hz, H-6'), 4.08 (1H, št, H-5'), 4.45 (1H, š s, H-4'), 4.57 (1H, m, H-2), 5.33 (1H, d, J=3.1 Hz, H-1'), 5.36 (2H, m, c/s-CH=CH-), 5.49 (1H, dd, J=14.5 a 7.4 Hz, H-4), 5.54 (1H, t, J=7.4 Hz, H-3), 5.68 (1H, dd, JAB=10.7 a JaX=2.5 Hz, Η-2η±εΗ;3'), 5.71 (1H, dd, JaB=10.7 a Jbx=3.2 Hz, H-2k=boH-3'), 5.76 (1H, dt, J=14.5 _a 6.7 Hz, H-5), 5.81 (1H, d, J=9.1 Hz, -NH-), 7.338.02 Í15H. 3m. 3 x-CfiHKÍ

-71Elementární analýza pro ^C69^H103^NOll^: vypočteno 73,83 % C, 9,25 % H, 1,25 % N nalezeno 73,61 % C, 9,14 % H, 1,45 % N.

F. (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-(cis-l5-tetrakosenoylamlno)1-/2,3-di-O-benzoyl-4,6-di-0-/natrium oxysulfonyl/- <?{ D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen

HO _Z ^OH

ΒζΟ-\-**>ή NHCOÍCHahjCHsCHÍCHjVCH, ^8X0O ^^(CHjhjCH,

NeSOp OSOsNe

BzO

OBz

NHCOíCK^-jCH^CHÍCHJtCHj (CHjJijCHj

OBz

Komplex oxidu sírového-pyridinu /0,115 g, 0,72 mmol/ se přidá do vodného roztoku (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-(cis 15-tetrakosenoylamino)-l-/2,3-di-O-benzoyl- -D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecenu /200 mg, 0,18 mmol/ v pyridinu· /5 ml / pod argonem. Reakční směs se míchá 2 hodiny při 40 á 3,5 hodiny při 50 °C, potom se přidá voda /5 ml/ a pak pevný hydrogenuhličitan sodný /0,2 g/. Roztouštědla se odpaří ve vakuu a zbytek se čistí silikagelovou chromatografií /15 g, 5 % až 20 % methanol/chloroform/ a získá se titulní sloučenina /0,222 g, 93 %/ jako bezbarvá pevná látka.

[ot]^: +44.2’ (c=1.0, CHCl3/MeOH 9:1).

IR (KBr) Umax (cm¹): 3700-3150 (O-H a N-H), 2930, 2860 (C-H), 1730 (C=O ester ), 1640 (C=O amid ).

-721H NMR (DMSO-dg) δ (ppm): 0.82-0.89 (6H, m, 2 x -CH3), 1-13-1.22 (56H, m, -(CH2)11-, -<CH2)11- a -(CH2)6-), 1.82-1.99 (8H, 2m, 3 x =CH-CH2a -NHCOCH2-), 3.55 (1H, dd, J=10.3 a 7.1 Hz, H-1), 3.86-3.91 (2H, m, H-1 a H-6’), 4.12 (1H, dd, J=11.9 a. 2.4 Hz, H-6'), 4.30-4.33 (2H, m, H-2 a H-5¹), 4.77 (1H, d, J=2.5 Hz, H-4'), 5.13 (1H, d, J=3.3 Hz, H-1'), 5.31 (2H, m, *c/s-CH=CH-),5.42 (1H, dd, JaB=10.8 a—JaX=3.3 Hz, Η-2^Η‘3“), 5.49 (1H, dd, JaB-10.8 a JBX=3.0 Hz, H-2^X,H-3^,)1 5.41-5.57 (1H, m ctesghující H-2' a (TH, Qí, J=15.1 a

H-3', H-3), 5.54 (1H, dd, J=15.1 a 6.7 Hz, H-5), 7.35-7.92 (ίδΗ, 3m, 3 x

7.5 Hz, H-4), 5.72

-C6H5 a -NH-).

Příklad 4 (2S,3R,4E)-3-Hydroxy-2-{cis-15-tetrakosenoylamino)-1-/4,6di-O- (na triům oxysulfonyl )-c(_-D-galaktopyranosyloxy/-4oktadecen

NaSO# .°SOl^Na (X-0

BzO I

NaSOjO OS°»^Na —

NHCOlCHůuCHsCmCHifrCHi ^Η°~^·**ηοΊ

NHCOÍCHjJ^CHsCHÍCHjhCH, TCHíhíCHs

OBZ

(2S,3R,4E)-3-Benzoyloxy-2-{cis-15-tetrakosenoylamino)1-(2,3-di-0-benžoyl-4,6-di-O-(natriumoxysulfonyl)-t/ -Dgalaktopyranosyloxy)-4-oktadecen /122 mg, 0,092 mmol/ se nechá reagovat obecným postupem podle příkladu 2-A a získá se titulní sloučenina /71 mg, 76 %/ jako.bílá pevná látka.

-73IR (KBr) Omax (cm-1): 3600-3150 (O-H a N-H), 2930, 2860 (C-H), 1650 (C=O amid ).

1H NMR (DMSO-d6) δ (ppm): 0.84 (6H, t, J=6.7 Hz, 2 x -CH3), 1.2-1.47 (56H, m, -(CH2)1 V, -(CH2)11- a -(CH2)6-). 1.91-2.05 (8H, 2m, 3 x=CHCH2- a -NHCOCH2-), 3.41 (1H, š ddd, J=10.1 a 3.6 Hz, H-2'), 3.49 (1Hdd,J==10 5a 3 5Hz,H!), 3?6T(1H7dd7J=íO:5“a 3.4Hz,H-1), 3.71 (1H, dd, J=11.4 a 8.5 Hz’ H-6'), 3.65-3.73 ('2H, m, přesahující H-1 a H-6', H-5' a H-3'), 3.85 (1H, dd, J=11.4 a 2.2 Hz, H-6¹), 3.91-3.96 (2H, m, H2 a H-3), 4.31 (1H, d, J=9.0 Hz, -OH), 4.38 (1H, d, J=2.4 Hz, H4'), 4.68 (1H, d, J=3.6 Hz, H-1'), 4.83 (1H, d, J=6.0 Hz, -OH), 4.91 (1H, d, J=7.4 Hz, -OH), 5.27-5.35 (3H, m, cis-CH=CH- a H-4), 5.50 (1H, dt, J=15.3 a 6.7 Hz, H-5), 7.42 (1H, d, J=9.2 Hz, -NH-).

Příklad 5 (2 S,3R)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2,3-di-Obenzoyl-4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)- -D-galaktopyrano.r syloxy/-oktadecen

A. (2R,3R)-1_r3-O-Benzyliden-oktadecen-l,2,3-triol

OH

OH

Roztok (2R,3R,4E)-1,3-0-benzyliden-4-oktadecen1,2,3-triolu /připraven obecným postupem popsaným P.Zimmermanem a spol.,· Liebigs Ann.Chem.,·663-667 /1988//./3,00 g, 7,72 mmol/ Ve směsi ethylacetátu /100 ml/ a 0,02M methoxidu sodného v methanolu /100 ml/ se. hydrogenuje nad 0,35 g 10% Pd na aktivním uhlí při 22 °C a pod 1 atm vodíku 1 hodinu, přidá se kyselina octová /0,2 ml/ a katalyzátor se odfiltruje.'· Filtrát-se odpaří-za vakua .a zbytek· se odfiltruje na sloupečku silikagelu za použití směsi ethyl-14r acetátu a toluenu /5:95/ jako elučního činidla a získá se 2,88 g /95 %/ titulní látky jako bílé pevné látky.

t. t 64-65°C (hexan ) [<x]_D : +6.0° (c=1.0, CHCI3).

IR (KBr) Umax (crrr¹): 3450 (OH)_; ‘H NMR 400 MHz (CDCI3) 3 (ppm): 0.89 (3H, t, J = 7.0 Hz, -CH3), 1.21.8 (28H, m, -(CH2)14-) 3.48 (1H, s, H-2), 3.87 (1 H_(šw t, J=7

- -Hz, H-3), 4.06 (1H, dd, J=1.06 a - -11.8 Hz, H-1), 4.24·(ÍH, dd, J=1.85 a 11.8 Hz, H-1), 5.58 (1H, s, -O-CH-O-), 7.3-7.5 (5H, m, -C6H5).

Elementární analýza pro vypočteno 76,87 % C, 10,84 % H nalezeno 75,93 % C, 10,58 % H

B. (2S,3R)-2-Azido-l,3-0-benzyliden-oktadekan-l,3-diol

O'

P^O-^V(CH₂)₁₄CH₃

OH

Roztok (2R,3R)-1,3-0-benzyliden-oktadekan-l,2,3triol /2,780 g, 7,11 mmol/ v dichlormethanu /25 ml/ se ochladí na -15 °C a postupně se zpracuje s pyridinem /1,16 ml, 14,3 mmol/ a triflicanhydridem /1,5 ml, 8,9 mmol/. Po 15 minutách při -15 °c, se přidá suspenze práškovaného azidu sodného /2,12 g, 32,7 mmol/ v N,N-dimethylformamidu /80 ml/ a výsledná směs se míchá při 22 °C 4 hodiny. Reakční

-75směs se pak zředí hexanem /300 ml/ a studenou vodou /200 ml/. Vodná fáze se extrahuje hexanem /2 x 100 ml/ a spojené organické extrakty se promyjí solankou a suší se nad bezvodým síranem horečnatým. Odpařením rozpouštědla se získá o-l-e-j-,—k-t-e-rý- -se— zřed-í— chloroformem—/50 ml/-a—methanolem-/-50-------ml/, zpracuje se s kyselinou p-toluensulfonovou /0,080 g/ a míchá se při 22 °C 45 minut. Přidá se pevný hydrogenuhličitan sodný /500 mg/ a po 15 minutách se roztok filtruje a zahustí ve vakuu. Chromatografií zbylého oleje na silikagelu /3x9 cm/ ža použití směsi hexanu a toluenu /6:4/ se.získá 2,20 g /74 %/ titulního materiálu jako jehlic.

t.t.= 53-53.5°C (hexan ). [c]q²:+32.5° (¢=1.0, CHCI3).

IR (KBr) Umax (cnr 1): 2118.

1H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.9 (3H, t, J=6.9 Hz, -CH3), 1.2-1.9 (28H. m, -(CH2)14-). 3.41 (^1H- ^J=5·²» ¹¹-° ^{a 11}-° ^Hz- ^H'²)· ³·⁵⁸ (1H, ddd, J=2.6,11.0 a 11.0 Hz, H-3), 3.68 (1H, dd, J=11.0 Hz, H-1 ax),

4.38 (1H, dd, J=5.2 a 11.0 Hz, H-1 eq), 5.47 (1H, s, -O-CH-O-), 7.3-7.5 (5H, m, -C6H5).

E-l-emen-tá-rn-í— a-na-l-ýza—p-ro-Cj-g-H^-j-NjO^:-vypočteno 72,25 % C, 9,94 % H, 10,11 % N nalezeno 72,17 % C, 9,93 % H, 10,28 % Ni

-76C. (2S,3R)-2-Azido-oktadekan-l,3-diol

Na

0-^V· (CH^CH, ₀>~<L_N₃

HO.

(CHjJnCHa

OH

Roztok (2Si3R)-2-azido-l,3-0-benzyliden—oktadekan1,3-diolu /2,15 g, 5,17 mmol/ ve směsi chloroformu /70 ml/ a_methanolu /70 ml/ se zpracuje sJcyseJLinou p-toluensulfonovou /0,080 g/ a výsledná směs se míchá při 22 °C 70 hodin. Výsledná směs se pak míchá s hydrogenuhličitanem sodným /0,5 g/, filtruje se a odpaří. Chromatografií zbytku na silikagelu za použití gradientu methanol v dichlormethanu se získá 1,38 g /81 %/ titulního materiálu jako bílé pevné látky.

t.t .= 75-75.5°C (hexan ). [α]β²: +9.0° (c=1.0, CHCI3).

IR (KBr) Umax (cm'¹): 3340 (OH), 2150 (N3).

1H NMR 200 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.87 (3H, t, J=6.4 Hz, -CH3), 1.151.7 (28 H, m, -(CH₂)14)-, 2.0 (1Η, šrnfcý, -OH), 3.43 (1H. dt, J=5.0 a 5.0 Hz, H-2), 3.77 (1Η, m, H-3), 3.89 (2H, d, J=5.0 Hz, CH2-1).

Elementární analýza pro vypočteno 66,01 % C, 11,39 % H, 12,83 % N nalezeno 65,84 % C, 11,44 % H, 12,92 % N.

-77D. (2S,3R)-2-Azido-l-terc.butyldimethylsilyl-oktadekan1,3-ďiol

N₃

-------------------I OH

OH

Roztok (2S,3R)-2-azido-oktadekan-l,3-diolu /1,332 g,

4,06 mmol/ v pyridinu /15 ml/ se zpracuje s terc.butyldimethylsilylchloridem /0,736 g, 4,88 mmol/ a výsledná směs se míchá při 22 °C 18 hodin. Přidá se methanol /1 ml/ , a rozpouštědlo se odstraní za vakua. Zbytek se čistí silikagelovou chromatografií /2 x 12 cm/ za použití ethylacetátu a toluenu /2:98/ a získá se 1,63 g /90 %/ titulní látky jako oleje.

[a]g :+15°(c=1.0, CHCI3).

IR (NaCI, film) Omax (cm'¹): 3450 (OH), 2100 (N3).

1H NMR 200 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.11 (6H, s, S1CH3), 0.88 (3H, t,

J=6.7 Hz, -CH3), 0.91 (9H, s, Si-í-Bu), 1.1-1.8 (29H, m, -{CH2)14- a

-OH), 3.35 (1H, dt, J=5.4 a J=5.4 Hz, H-2), 3.7 (1H, m, H-3), 3.89 (2H, d, J=5.4 Hz, CH2-1).

Elementární analýza pro ^C24^H5i^N3°2^S^^: vypočteno 65,25 % C, 11,64 % H, 9,51 % N nalezeno 65,22 % C, 11,44 % H, 9,65 % N.

-78E. (2S,3R)-2-Azido-3-benzoyl-oktadekan-l,3-diol

N₃

OH íi₃

OBz

Roztok (2S,3R)-2-azido-l-terc.butyldimethylsilyloktadekan-1,3-diolu /1,63 g, 3,69 mmol/ ve směsi toluenu /12 ml/ a pyridinu /12 mi/ se zpracuje při 0 až 5 °C s benzoylchloridem /1,037 g,, 7,38 mmol/ a krystalem 4rdime.thylaminopyridinu a výsledná směs še míchá při 0 až 5 °C 48 hodin. Přidá se methanol /2 ml/ a rozpouštědlo se odpaří za vakua. Zbytek se zředí ethylacetátem /200 ml/, promyje studenou O,1N kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným hydrogenuhličitanem sodným, solankou a suší se nad síranem horečnatým, odpařením rozpouštědla se získá olej /2,4 g/, který se rozpustí v tetrahydrofuranu /50 ml/, ochlazeném na 0 až 5 °C a postupně se zpracuje s kyselinou octovou /1,38 g/ a IM roztokem tetrabutylamoniumflúoridu /11 ml,

11,0 mmol/ v tetrahydrofuranu. Po 18 hodinách se reakční směs zředí ethylacetátem /200 ml/, promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, solankou a suší se nad bezvodým síranem horečnatým. Odpařením rozpouštědla za vakua se získá olej, který se čistí silikagelovou chromatografií /3 x 12 cm/. Elucí směsí ethylacetátu v toluenu /2:98/ se získá 1,525 g /95 %/ titulní látky ve formě oleje.

[a]_D :-16° {c=1.0, CHCI3).

IR (NaCl, film) (cm'¹): 3450 (OH), 2110 (N3) a 1722 (C=O of benzoat ).

. -79¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (3H, t, J=6.8 Hz, -ΟΗβ), 1.151.5 a 1.7-1.9 (28H, 2m, -(CH2)i4-), 2.2 (šircký, OHsaiěšý D2O)·, 3.65-3.75 a. 3.8-3.85 (2H a. 1H, 2m, CH2-1 a H-2), 5.28 (1H, m, H-3), 7.47, 7.6 a 8.07 (2H, 1H a 2H, 3m, -C6H5).

Elementární analýza pro ^C25^H41^N3°3^: vypočteno 69,57 % C, 9,57 % H, 9,74 % N nalezeno 69,37 % C, 9,53 % H, 9,64 % N

F. (2S,3R)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(2-0-p-methoxybenzyl3,4,6-tri-O-acetyl-^-D-galaktopyranosyloxy)-oktadecen_;

AcO OAc

AcO

SEt

PMBO _N AcO OAc * 4 DUDO 1 * _Λβ PMBO l ^0Sz O^AyíCHaluCHa:

OBz (2S,3R)-2-Azido-3-benzoyl-oktadekan-l,3-diol /3,11 g, 7,21 mmol/ a ethyl-2-0-p-methoxybenzyl-3,4,6-tri-0-acetyl1-thio-O-D-galáktopyranosid popsaný v příkladu 1-E /4,52 g, 9,51 mmol/ se nechá reagovat podle obecného postupu .popsaného—v_příkladu-l=F—a—z íská_s.e_5-,-4-7_g—/9-0—%-/_83-i-l-7směsi 6ζ;β anomerů, které se rozdělí chromatografií. Získá se čistý pZ-anomer jako olej.

-80[a]_D : +24° (c=1.0, CHCI3).

IR (NaCI, film) (cm-1): 2105 (N3), 1742 a· 1725 (C=O ester).

¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.86 (3H, t, J=6.8 Hz, -CH3), 1.1-1.5 {26H,šixcký . -(CH2)13-), 1-36 a 1.40 (2H, 2m, -CH2-4), 1.96,199 a

2.11 (3 x 3H, 3s, -COCH3), 3.54 (1H, dd, J=8.07 a : 10.7 Hz, H-1), 3.79 (3H, s, -OCH3),,3.83 (1H, dd, J=3.6 a 10.7Hz, H-1), 3.85 (1H, dd, ώ=10.1 a. 3.56 Hz, H-2'), 3.94 (1H, m, H-2), 4.03 (2H, d, J=6.6 Hz, -CH2OAC), 4.18 (1H, í, J=6.6 Hz, H-5'), 4.57 (1H, d, Jab= 11.9 Hz, CH2 p-methoxybenzyi),

4.63 (1H, d, Jab= 11-9 Hz, CH2 p-methoxybenzyl), 4.88 (1H, d, J=3.56 Hz, Η-Γ), 5.25-5.3 (2H, m, H-3 a H-3¹ pčescbjjící ξ 5.44 (iH.šiccký <j, . J=2.5 Hz, H-4’), 6.85 a. 8.3 (2 x 2H, 2d, J=8.5 Hz, H-2 ε.....-H-3 -p-- - - — methoxybenzyl), 7.47, 7.58 a 8.06 (2H, 1H a 2H, 3m, -C6H5).

Elementární analýza pro ^C45^H65^N3°12^: vypočteno 64,34 % C, 7,80 % H, 5,0 % N nalezeno 64,13 % C, 7,66 % H, 5,05 % N

G. (2S,3R)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-( oí, -D-galaktopyranosyloxy)-oktadekan

AcO OAc n₃

PMBO I =

HO OH

HO I

N₃ (CHzJnCHj (CH2)hCH₃

OBz

OBz (2S, 3R)-2-AzÍdo-3-benzoyloxy-4~(2-0-p-methoxybenzyl3,4,6-tri-O-acetyl-^f-D-galaktopýranosyloxy)-oktadekan (4,30 g, 5,12) se nechá reagovat obecným postupem popsaným v příkladu 1-G postup A a získá se 2,50 g /82 %/ titulního materiálu jako bílé sklovité látky.

-81[a]_D :+52° (c=1.0, CHCI3).

ÍR (NaCI, film) (cm‘1): 3400 (OH), 2105 (N3), 1720 (C=O ester).

~ ¹HŇMR“400 MHFfCDOlšrS (ppm): Ól9 (3H7tJ=6L8'Rz7ČH3)?t3^L5 (26H, šixcký -(CH₂)13-), 1.8 (2H, m, -CH₂-4), 2.7 (4H, š s, -OH), 3.60 (1H, dd, J=5.7 a 10.5 Hz, H-1), 3.76 (1H, m, H-2), 3.85 (2H, m, H-6‘), 3.86-3.98 (3H, m, H-2¹, H-3‘ a H-5¹), 4.01 (1H, dd, J=3.2 a 10.5 Hz, H-1), 4.13 (1H, š s, H-4*), 4.90 {1H, š s, H-1'), 5.4 (1H, m, H-3), 7.47, 7.61 a 8.05 (2H, 1Ha 2H, 3m,-C6H5).

Elementární analýza pro ^C3i^H51^N3Ó₈: vypočteno 62,71 % C, 8,66 % H, 7,08 % N nalezeno 62,62 % C, 8,60 % H, 7,08 % N.

H. (23,3R)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(4,6-O-benzyliden-C^-Dgalaktopyranosyloxy)-oktadekan

OH

V-λ

HO I =

HO OH

HO (CHíínCHj

OBz

(CHsh^CHs

-82( 2S,3R)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-( -D-galaktopyranosyloxy ) -oktadekan /0,50 g, 0,84 mmol/ se nechá reagovat obecným postupem popsaným v příkladu 3-C a získá se titulní sloučenina /0,37 g, 65 %/ jako lepkavá pevná látka.

[a]^:+19.7° (otO, CHCI3).

IR (NaCl, film) Umax (cm’1): 2100 (N3), 1715 (C=O ester).

1'H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (3ΗΛ J=6.8 Hz, -CH3), 1.25 (26H, šixcfcý -(CH2)13-), 1.8 (2H, m, -CH₂-4), 3.66 (1H,ld, J=5.8 a/Ί 0.5 Hz; H1), 3.77 (1H, m, H-2), 3.82 (1H, š s, H-5*), 3.95 (2H, m, H-2‘ a H-3' přesahující ), 4.02 (1H, dd, J=8.3 a> 10.5 Hz, H-1), 4.11 (1H, dd, J=1.6 a¹ 12.6 Hz, H-6'), 4.28 (1H, dd, J=1.3 a 12.6 Hz, H-6’), 4.32 (1H, š s, H-4'),

4,99 (1H, šj, j-1.9 Hz, H-1‘), 5.4 (1H, m, H-3), 5.57 (1H, s, -O-CH-O-), 7.37, 7.50 7.61 a 8.06 (3H, 4H, 1H a 2H, 4m, 2 x -C6H5).

Elementární analýza pro vypočteno 66,94 % C, 8,13 % H, 6,16 % N nalezeno 66,57 % C, 7,94 % H, 6,05 % N:

-83I. (2S,3R)-2-Azido~3-benzoyloxy-l-{2,3-di-0-benzoyl-4,6O-benzylidsn- -D-galaktopyranosyloxy)-oktadekan

(2S,3R)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-{4,6-0-benzyliden- d(-dgalaktopyranosyloxyj-oktadekan /0,370 g, 0,543 mmol/ se nechá reagovat obecným postupem popsaným v příkladu 1-1 a získá se 0,413 g /86 %/ titulního materiálu jako skla [alQ²: -32.5° (c=1,0, CHCI3).

IR (NaCI, film) Umax (cnr¹): 2105 (N3) ai 1725 (C=O ester).

¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (3H, t, J=6.8 Hz, -CH3), 1.2-1.4 (26H, šiccký, “(CH2)l3->, 1-65 a 1.83 (2 χ 1H, 2m, -CHa-4), 3.64 (1H, dd, J=7.9 a 10.5 Hz, H-1), 3.93 (1H, m, H-2), 3.98 (1H, š s, H-5'), 4.0 (1H, dd, J=3.25 a> 10.5 Hz, H-1), 4.14 (1H, dd, J=1.2 a 12.5 Hz, H-6'), 4.33 (1H,_ irarJ^rfá Ϊ 2.5 Hz, H-“6’), 4.69 (ÍH? šhxkýd, J=3 Hz, H-4*)?5.43 (1H, d, J=3.3 Hz, H-1'), 5.57 (1H, $, -O-CH-O-), 5.78 (1H, dd, J=3.2 a 10.8 Hz, H3'), 5.84 (1H, dd, J=3.3 a 10.8 Hz, H-2'), 7.36, 7,5 a 8.0 (7H, 7H a

6H, 3m, 4χ-ΟρΗ5).

Elementární analýza pro C_c-H^_nN„n

63 3l0‘ vypočteno 70,17 % C, 7,13 % H, 4,72 %.N nalezeno 69,80 % C, 7,00 % H, 4/67 % N,

-84J. (2S,3R)-3-Benzoyloxy-2-hsxadekanoylamino-l-{2,3-di-Obenzoyl-4,6-0-benzyliden--D-galaktopyranosyloxy}oktadekan

OBz OBz (2S,3R)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(2,3-0-benzoyl4,6-0-benzyliden-^-D-galaktopyranosyloxy)-oktadekan /0,708 g, 0,795 mmol/ se nechá reagovat obecným postupem popsaným v příkladu 1-J a získá se 0,841 g /96 %/ titulního materiálu jako bílé pěny.

[ct]Q²: +92.5° (c=1.0, CHCI3).

IR (KBr) “Umax (cm’¹): 1720 (C=O ester) a 1652 (C=O amid ).

¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 x -CH3), 1.2-1.9 (54 H, m, -(CH2)l4-.a' -(CH2)13-). 2.16 (2H, t, J-7.2 Hz, -NHCOCH2’).

3.69 (1H, dd, J=5.6 a 10.9 Hz, H-1), 3.86 (1H, dd, J=4.6.a 10.9 Hz, H1), 3.90 (1H, š s, H-5*), 4.02 (1H. dd, J=0.9 a 12.5 Hz, H-6‘), 4.26 (1H, dd, J=0.8 a. J=12.5 Hz, H-6'), 4.51 (1H, m, H-2), 4.63 (1H, š d, J=3.2 Hz, H4'), 5.16 (1H, m, H-3), 5.38 (1H, d, J=3.3 Hz, H-1 j, 5.75 (1H, dd, J=3.2 a

10.8 Hz, H-3'), 5.80 (1H, dd, J=3.3 a. 10.8 Hz, H-2'), 5.97 (1H, d, J=9 Hz, -NH-), 7.3-7.6 a 7.95-8.03 (14H a 6H, 2m, 4 x -C6H5).

Elementární analýza pro ^C68^H95^NO11^: vypočteno..74,.08 % C, θ/6? %_H,_ 1,27 % N .....

nalezeno 74,23 % C, 8,90 % H, 1,41 % N.

-85K. (2S,3R)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-(2,3-di-Obenzoyl-<^ -D-galaktopyranosyloxy)-oktadekan

OBz

ΒζθΛ-***Τ*Α BzO I °Αγ

OBz

HO y^0H

NHCOtCHaJ^CHa (CHaJuCHj (2S,3R)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-(2,3-0- benzoyl-4,6-0-benzyliden- <=/ -D-galaktopyranosyloxy)-oktadekan /0,802 g, 0,727 mmol/ se zpracuje obecným postupem^ popsaným v příkladu 1-K a získá se 0,578 g /78 %/ titul-ního materiálu jako bílého skla.

[ag :+70.7° (c=1.0, CHCI3).

IR (NaCI, film) Umax (cnr¹}: 1720 (C=O ester) a 1650 (C=O amid ).

¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (6H, t, J=6.6 Hz, 2 X-CH3), 1.2-1.9 (54 H, m, -(CH2)14’ a -(CH₂)13-), 2.18 (2H, t, J=7.5 Hz, -NHCOCH2-), -3r75-3;95-(4 H, m,H -1-a—H-6'pčes=nající-),-4.06-(-1 H ,-m, H-5¹),4.42- (! H,— _St h-4·), 4.51 (1H, m, H-2), 5.17 (1H. m, H-3), 5.34 (1H, d, J=2.6 Hz, H-1*), 5.68 (2H, m, H-2' ai H-3'cfeatnjící ), 6.1 (1H, d, J=9 Hz, -NH-), 7.3-7.6 a: 7.9-8.0 (9H a 6H, 2m, 3 X -C6H5).

Elementární analýza pro ^C61^H91^NO11^: vypočteno 72,23 % C, 9,04 % H, 1,38 % N nalezeno 72,40 % C, 9,13 % H, 1,47 % N.

-86L. ( 2S, 3R)-3-Benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2,3-di-Obenzoyl-4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)--D-galaktopyranosyloxy /-oktadekan

OBz

NaSO.O

- Λ

ΒζΟ-λ

OSOjNa l^-0

BzO

NHCO(CH₂)„CH3. O^^íyíCH^CH,

OBz (2S, 3R) -3-Benzoyloxy-2-?hexadekanoylamino-l-{ 2,3-diO-benzoyl-ťC-D-galaktopyranosyloxy/-oktadekan /0,543 g, 0,535 mmol/ se nechá reagovat podle obecného postupu popsa ného v příkladu 1-L a získá se 0,500 g /77 %/ titulní látky jako bílé pevné látky.

[cc]^: +56.4° (c=1.0, CHCl3/MeOH 8:2).

IR (KBr) (cm’¹): 1728 (C=O ester) a 1640 (C=O amid).

¹H NMR 400 MHz (DMSO-d6) δ (ppm): 0.83 (6H, t, J=6.0 Hz, 2 x -CH3), 1.11.4 (52H, -(CH2)12- a -{CH₂)i 3·), 165 (2H, m, -CH2-4), 18-2.0 (2H, m, -NHCOCH2-), 3.53 (1H, dd, J=6.9 a 11.0 Hz, H-1), 3.85-3.95 (2H, m,

H-6'), 4.12 (1H, dd, J=2.5 a 11.0 Hz, H-1), 4.24 (1H, m, H-2), 4.31 (1H, m, H-5‘), 4.77 (1H, d, J=2.8 Hz, H-4'), 5.13 (1H, d, J=3.2 Hz, H-1'), 5.16 (1H, m,' H-3), 5.42 (1H, dd, J=3.2 a 10.8 Hz, H-2'), 5.47 (1H, dd, J=2.8 a 10.8 Hz, H-3'), 7.3-7.6 a 7,8-7.9 (9H a 6H, 2m, 3 x -C6H5).

-87Příklad 6 .(2S, 3R)-2-Hexadekanoylamino-3-hydroxy-l-( 4,6-di-Onatrium oxysulfonyl)- -D-galaktopyranosyloxy)-oktadekan

OBz

OH

Roztok (2S,3R,4E)-2-hexadekanoylamino-3-hydroxy-l-/4,6 di-O-(natrium oxysulfonyl)-/7-D-galaktopyranosyloxy/4-oktadecen popsaný v příkladu 2-A /0,150 g, 0,166 mmol/ ve směsi tetrahydrofuranu /20 ml/, vody /5 ml/ a ethanolu /5 ml/ se hydrogenuje nad 10% palladiem na aktivním uhlí /0,030 g/ při 22 Ca pod tlakem jedné atmosféry 4 hodiny. Katalyzátor se odfiltruje přes sloupeček Celitu a odpaří se rozpouštědlo. Získá se 0,150 g /100 %/ titulního materiálu jako bílé pevné látky.

IR (KBr) Umax (cnr¹): 1730 (C=O amid ).

1H NMR 400 MHz (DMSO-d6) δ (ppm): 4.27 (1H, d, J=8.6 Hz, -OH), 4.49 .(_1.H,_d,J=6,5_Hz,_4D_H)_a_4.._8_8_{_1_H,_d,_J=7.4_Hz,^QH);-(DM,S_Ckd6_+_D2_O)-d_ (ppm): 0.84 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 X -CH3), t.Ί-í-6 (54 H, m, -(CH2)14- £ ' -(CH2)13-), 2.08 (2H, t, J=6.6 Hz, -NHCOCH2-), 3.40 (1H, dd, J=3.6, a

10.1 Hz, H-2'), 3.46 (1H, m, H-3), 3.50 (1H, dd, J=3.4 a 10.5 Hz, H-1),

3.61 (1H, dd, J=3.6 a 10.5 Hz, H-1), 3.66 (1H, dd, J=3.0 a 10.1 Hz, H3’), 3.66 (1H, m přejiti H-3¹, H-2), 3.73 (1H, dd, J=8.3 a. 11.4 Hz, H-6¹) 3.87 (1H, dd, J=2.2 a 11.4 Hz, H-6’), 3.96 (1H, šircký d. H-5'),

4.38 (1H, d, J=3.0 Hz, H-4’), 4.68 (1H, d, J=3.6 Hz, H-1’), 7.53 (1H, d, J=9 Hz, -NH-).

-88Příklad 7 (2S,3R,4E)-3-bsnzoyloxy-2-hexadekanoylamino-1-/2,3-di-Obenzoyl-4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)- (/-D-glukopyrancsyloxy/-4-oktadecen ...

A. (2S,3R,4E) -2-Azido-3-benzoyloxy-l-{2,3,4-tětr'a-Oacetyl-c( -D-glukopyran'osyloxy)-4-oktadecen a (2S,3R,4E)2-azido-3-benzoyloxy-l- (2,3,4,6-tetra-O-acetyl-Š-Dglukopyranosyloxy)-4-oktadecen

Roztok (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-4-oktadecen-lolu /připravený podle obecného postupu popsaného P.Zimmermanem a spol., Liebigs Ann.Chem., 663-667 /1988//, /2,43 g, 10,0 mmol/ v suchém benzenu /150 ml/ a nitromethanu /150 ml/ se zahřívá pod refluxem. Benzen se oddestiluje a roztok se zahustí za vakua na 75 ml. K tomuto roztoku se přidá 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-^ -D-glukosylbromidu /připraven jak popsal C.E.Redemann a spol., Org.Synth.Coll, sv.IIX, str.11 /1955//, /6,2 g, 15 mmol/ a kyanid rtutnatý /3,7 g, 15 mmol/ při 22 °C a pod argonem a výsledná směs se zahřívá na 80 až 85 °C po 15 až 20 minut. Reakčni směs se pak ochladí na 5 °C a zředí se ethyletherem/vodou /1:1, 150 ml/. Sirovodík se probublává směsí a vzniklá černá sraženina se odfiltruje na Celitu a promyje se ethyletherem /4 x 150 ml/. Organické fáze se promyjí studeným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného /1M, 4 x 100 ml/, vodou /3 x 100 ml/ a solankou /100 ml/, suší se nad bezvodým síranem hořečnatým, filtruje a zahustí. Černý vzniklý zbytek se čistí chromatografií na silikagelu /65 g,

-890 % až 30 % ethylacetátu/hexanu/ a získá se β-anomer /3,90 g, 76 %/ jako bílá gumovitá pevná látka a -anomer titulní sloučeniny /0,49 g, 9,5 %/ jako žlutý olej.

IR (CH2CI2) (cnr¹) a-anomer 3060, 2930 (C-H), 2100 (N3), 1750 ________(C=O), 1225 (C-O).________.___________________________________________ ~ ^J| a.

IR (CH2CI2) Umax (crrr¹) β-anomer: 3060, 2930 (C-H), 2110 (N3), 1760 (C=O), 1220 (C-O).

¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm) a-anomer: 0.89 (3H, t, J=6.9 Hz, -CH3),

1.25 (20H, š s, -(CH2)1O-). 1-40 (2H, m, -CH2-), 2.03, 2.05, 2.07, 2.09 (4 x 3H, 4s presující =CH-CH2-, 4 x -OCOCH3), 2.03-2.14 (2H, m, =CHCH2-), 3.52 (1H, dd, J=10.8 a 8.0 Hz, H-1), 3.87 (1H, dd, J=10.8 a 3.6 Hz, H-1), 3.96 (1H, dt, J=8.0 a 3.6 Hz, H-2), 4.04 (1H, ddd, J=T0.2,4.5 a 2.3 Hz, H-5'), 4.11 (1H, dd, J=12.4 a 2.3 Hz, H-6·), 4.27 (1H, dd,

J=12.4 a>. 4.5 Hz, H-6'), 4.91 (1H, dd, J=10.2 a 3.7 Hz, H-2'), 5.08 (1H, t, J=10.2 Hz, H-4teboH-3'), 5.12 (1H, d, J=3.7 Hz, H-1'), 5.51 (1H, t, J=10.2 Hz, ' H-3*refcH-4'), 5.54-5.61 (2H, m, H-3 a H-4), 5.92-6.00 <1H, m, H-5), 7.46- ⁴ 8.06 (5H, 3m, -C6H5).

¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm) β-anomer: 0.89 (3H, t, J=6.9 Hz, -CH3), 1.26-1.41 (22H, m, -{CH2)11-), 2.02, 2.04, 2.06, 2.10 (4 x 3H, 4s pfeBtojící =CH-CH2-, 4 X -OCOCH3), 2.02-2.16 (2H, m, =CH-CH2), 3.61 (1H, dd, J=9.5 a > , 4.9 Hz, H-1), 3.70 (1H, ddd, J=9.5, 2.4 a 4.7 Hz, H-5'), 3.89-3.97(2H, m, H-1 a» H-2), 4.13 (1H, dd, J=12.3 a 2.4 Hz, H-6'), 4.23 __(1H, dd, J=12.3 a 4.7 Hz, H-6¹), 4,56 (1H, d, J=8.0 Hz, H-1 j, 5.04 (1H, dd,

J=9.5 a 8.0 Hz, H-2j, 5.11 (1H, t, J=9.5 Hz, H-4feo H-3¹), 5.22 (1H, t,

J=9.5 Hz, H-3hfcH-4'), 5.54-5.62 (2H, m, H-3 a H-4), 5.94 (1H, dt, J=14.3 a 6.8 Hz, H-5), 7.45-8.07 (5H, 3m, -C6H5).

-90B. ( 2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-( ¢( -D-glukopyranosyloxy)-4-oktadecen

(2S, 3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(2,3,4,6-tetra-Oacetyl-o4-D-glukopyranosyloxy)-4-oktadecen /990 mg, 1,3 . mmol/ se-nechá -reagovat -obecným’· postupem·¹ popsaným 'v pří-’ ^j kladu 1-G .postup B a získá.se titulní sloučenina /590 mg, %/ ve formě oleje.

IR {CH2CI2) Umax (cm-¹): 3600-3150 (O-H), 3060, 2940, 2860 (C-H), 2110 (N3), 1720 (C=O ester).

1η NMR 400 MHz (DMSO-de) δ (ppm): 0.84 (3H, t, J=6.8 Hz, -CH3), 1.191.33 (22H, m, -{CH2)11·), 2.02 (2H, m, =CH-CH2-), 3.08 (1H, dt, J-9.3 a

5.2 Hz, H-3'rebH-4’), 3.19 (1H, ddd, J=9.7, 6.1 a 3.6 Hz, H-2'), 3.36-3.48 (4H, m, Η-β'ί^Η^', H-5', H-1 a, H-6'), 3.58 (1H, ddd, J=9.8, 5.7 a ' 4.0 Hz, H-6*), 3.73 (1H, dd, J=10.6 a 5.3 Hz, H-1), 4.16 (1H, m, H-2), 4.43 (1H, t, J=5.7 Hz, -OH-6*), 4.64 (1H. d, J=6.1 Hz, -OH-2'), 4.70 (1H, d, J=3.6 Hz, H-1'), 4.80 (1H, d, J=4.7 Hz, -OH-3h±oOH-4'), 4.90 (1H, d, J=5.2 Hz, -OH-3tóE-OH-4'), 5.56 (1H, dd, J=15.0 a 7.5 Hz, H-4), 5.62 (1H, dd, J=7.5 a . 3.8 Hz, H-3), 5.86 (1H, dt, J=15.0 a 6.8 Hz, H-5), 7.52-7.99 (5H, 3m, -C6H5).

-91C. (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(4,6-0-benzyliden--D-glukopyranosyloxy)-4-oktadecen

(2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(p(-D-glukopyranošyloxy)-4-oktadecen /59 mg, 0,1 mmol/ se nechá reagovat podle obecného postupu jak je popsán v příkladu 1-H v tetrahydrofuranu místo acetonitrilu a získá se titulní sloučenina -x /50 mg, 73 %/ jako světlezlutý olej. IR /CHjC^/

Umax (cm-¹): 3700-3580 (Ó-H), 3060, 2935, 2860 (C-H), 2100 (N3), 1720 ...

(C=0 ester).

¹H NMR 400 MHz (DMSO-d6) S (ppm): 0.84 (3H, t, J=6.9 Hz, -CH3), 1.25- _s 1.43 (22H, m, -{CH2)11-). 2.11 (2H, m, =CH-Ctí2-). 2.49 (1H, d, J=10.1 Hz, -OH), 2.72 (1H, s, -OH), 3.51-3.59 (2H, m, H-6' a H-5'), 3.66 (1H, m, H-2'), 3.76 (1H, t, J=10.3 Hz, H-4’), 3.88 (1H, dd, J=9.9 a 4.7 Hz, H-1), 3.91-4.03 (3H, m, H-1, H-2 a H-3'), 4.30 (1H, dd, J=10.2 a 4.8 Hz, H-6'), 4.91 (1H, d, J=3.9 Hz, Η-Γ), 5.56 (1H, s, -O-CH-O-), 5.62 (1H, dd, J=15.3 a 8.1 Hz, H-4), 5.72 (1H, dd, J=£.1 a 4.9 Hz, H-3), 6.00 (1H, dt, J=15.3 a 6.8 Hz, H-5), 7.37-8.08 (10H, 4m, 2 X -C6H5).

D. (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(2,3-di-O-benzoyl4,6-0-benzyliden-^-D-glukopyranosyloxy)-4-oktadecen

OBz

-92(2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-( 4,6-0-benzyliden- (X -D-glukopyranosyloxyj-4-oktadecen /300 mg, 0,44 mmol/ se nechá reagovat podle obecného postupu popsaného v příkladu 1-1 a získá se titulní sloučenina /404 mg, 100 %/ jako světležlutý olej.

IR (CH2CI2) «max (cm-1): 3060, 2930,2860 (C-H)721107N3), 1725 <C=O ester).

1H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (3H, t, J=6.S Hz, -CH3). 1.24-1.39 (22H, m, -(CH2)11-), 2-06 (2H, m, =CH-CH2-). S·⁴⁸ (^1H·^dd·^J=10·^{5 a 8}'³ Hz, H-1), 3.86 (1H, t, J=9.9 Hz, H-4·), 3.90-4.00 (3H, (I), H;1, H_:2 a. H-6’), . 4.12(1H,td, J=9.9a 4.8 Hz, H-5'), 4.36 (1H, dd, J=10.3a 4.8HZ.H-6),

31 (1H dd, J=9.9 a 3.8 Hz, H-2'), 5.34 (1H, d, J=3.8 Hz, H-1'), 5.51-5.56 (2H, m, H-3 a H-4), 5.58 (1H, s, -O-CH-O-), 5.88-5.95 91H, m, H-5), 6.09 (1H t, J=9.9 Hz, H-3'), 7.31-8.03 (20 H, 2m, 4 X -C6H5)·

E. (2S,3R.4E)-3-Benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l- (2,3di-O-benzoyl-4,6-0-benzyliden- Of-D-glukopyranosyloxy) 4-oktadecen

(2S, 3R, 4E )-2-Azido-3-benzoyloxy-l- (2,3-di-0-benzoyl4,6-0-benzyliden- -D-glukopyranosyloxy)-4-oktadecen .

/100 mg, 0,11 mmol/ se nechá reagovat podle obecného postupu popsaného v příkladu 1-H a získá se titulní sloučenina /102 mg, 84 %/ jako bílá chmýřovitá látka.

-971η NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 1.23-1.28 a 1.56-1.67 (56H, 2 sely m, 2 x -(CH2) 11 - a -(CH2)6-)> 1 -94-2.05 a 2.09-2.23 (8H, 2 sety m, 3 x =GH-CH2- a -CH2CONH-), 3.67 (1H, dd, J=10.7 a 3.7 Hz, H-1), 3.83 (1H, t, J=10.3 Hz, H-6'), 3.91 (1H, dt, J=10,7 a 4.3 Hz, H-1), 3.92 (1H, t, J=9.3 Hz, H-4‘), 4.04 (1H, dt, J=9.7 a 4.7 Hz, H-5‘), 4.33 (1H, dd, J=10.3 a 4.7 Hz, H-6’), 4.47-4.53 (1H, m, H-2), 5.25 (1H, d, J=3.8 Hz, H-1^!), 5.32 (1H, dd’ J=9.9 a 3Ση^Η·2ΤΤ3Γ(2Η7Ρ74=4.7 Hž7c/s)-CH=CH-)r—

5.45-5.53 (2H, m, H-4 a H-3), 5.57 (1H, s, -O-CH-O), 5.66 (1H, dt, J=14.4 a 6.7 Hz, H-5), 5.79 (1H, d, J=9.1 Hz, -NH-), 6.07 (1H, t, J=9.8 Hz, H-3¹),

7.31 -7.55 a 7.92-8.01 (20H, 2 set y m, 4 x -C6H5)·

B. (2S,3R,4E)-3-Benzoyloxy-l-(2,3-di-O-benzoyl-^ -Dglukopyranosyloxy)-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)-4oktadecen

O' 8íO azo

OH — HO—

NHCOÍCKJuOfcOXCHj^CHj BzO-\x“*^*A NHCOÍOyuObCHCCHJíCH, = βζΟ I ; ₄

OBz

OBz (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-l-(2,3-di-0-benzoyl-4,6-0benzyliden-fc/ -D-glukopyranosyloxy)-2-(cis-15-tetrakosenoyl amino)-4-oktadecen /180 mg, 0,148 mmol/ se nechá reagovat jak je popsáno v příkladu 1-K a získá se titulní sloučenina /133 mg, 80 %/ jako světležlutý olej.

IR (CH2CI2) Dmax (cm-1): 3600 (O-H), 3440 (N-H), 3060, 2930, 2860 (C-H), 1725 a 1675(0=0).

-93|R (CH2CI2) Umax (cnv¹): 3060, 2935, 2860 (C-H), 1730 (C=O ester), 1675 (C=O amid ).

¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.87-0.91 (6H, m, J=6.9 Hz, 2 x -CH3),

1.23-1.26 (46H, m, -(CH2)11- a' -(CH2)12-). 1.58-1.60 (2H, m, -CH2-),

1.96 (2H, m, =CH-CH2-),_2.10:2.23 (2H, m, -CH2CONH-), 3.67 (1H, dd, 10.6 a. 3.7 Hz, H-1), 3.83 (1H, t, J=9.9 Hz, H-4'), 3.89-3.94 (2H, m, H-1 a H6*), 4.04 (1H, td, J=9.9 a: 4.7 Hz, H-5’), 4.33 (1H, dd, J=10.3 a 4.7 Hz, H-6'), 4.50 (1H, m, H-2), 4.25 (1H, d, J=3.8 Hz, H-1 *), 5.31 (1H, dd, J=9.8 a 3.8 Hz, H-2’), 5.45-5.53 (2H, m, H-3 a H-4), 5.57 (1H, s, -O-CH-O-),

5.66 (1H, dt, J=14.4 a 6.8 Hz, H-5), 5.78 (1H, d, J=8.4 Hz, -NH-), 6.07 (1H, t, J=9.9 Hz, H-3'),’7.30-8.01 (20 H, 2m, 4 x -C6H5). - —

F. {2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-(2,3-di-O-benzoyl-¢(-D-glukopyranosyloxy)-4-oktadecen

OH

(2S,3R, 4E)-3-Benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-(2,3di-O-benzoyl-4,6-O-benzyliden- 0^ -D-glukopyranosyloxy)4-oktadecen /100 mg, 0,09 mmol/ se nechá reagovat podle obecného postupu popsaného v příkladu 1-K a získá se titulní sloučenina /75 mg, 82 %/ jako bílá amorfní pevná látka.

IR (CH2CI2) Umax (cm*1): 3600, 3440 (O-H a. N-H), 3060, 2930, 2860 (C-H), 1725 (C=O ester), 1675 (0=0 amid ).

-941H NMR 400 MHz (CDCI3) 5 (ppm): 0.89 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 x -CH3), 1.231.32 (46H, m, -(CH2)11- &· -(CH2)12·). 1.57-1.67 (2H, m, -CH₂-), 1.99 (2H, m, =CH-CH2-). 2.18 (2H, m, -CH2CONH-), 3.74 (1Ή, dd, J=10.8 a

4.8 Hz, H-1), 3.85-3.98 (4H, m, H-6', H-5' a H-1), 3.94 (1H, t, J=8.8 Hz,

H-4¹), 4.55 {1H, m, H-2), 5.21 (1H, d> J=3.7 Hz, H-1’), 5.28 (1H, dd, J=10.1

3.3.7 Hz,H-2'), 5.47-5.57(2H,m,H-3 a___l±4),. STIJIH^dJ^lOJ1 a_

8.8 Hz, H-3'), 5.75 (1H, dt, J=14.6 a, 6.8 Hz, H-5), 5.82 (1H, d, J=9.2 Hz, -NH-), 7.33-8.01 (15H, 3m, 3 x -CeHs).

G. (2S,3R,4E)-3-Benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2, 3di-O-benzoyl-4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)- -Dglukopyranosyloxy/-4^oktadecen

OBz (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-(2,3di-O-benzoyl- -D-glukopyranosyloxy)-4-oktadecen /72 mg, 0,07 mmol/ se nechá reagovat podle obecného postupu popsaného v příkladu 1-L a získá se titulní sloučenina /69 mg, 81 %/ jako béžová pevná látka.

IR (nujol) Vmax (cnr¹): 3700-3100 (O-H a N-H), 2930, 2860 (C-H), 1725____ (C=O ester), 1655 (C=O amid ).

-951H NMR 400 MHz (DMSO-d6) δ (ppm): 0.84 (6H, t, J=6.7 Hz, 2 x -CH3), 1.06-1.38 (48H, m, -{CH2)11- a -(CH₂)13-). 1.76-2.02 (4H, m, =CH-CH2a -CH2CONH-), 3.54 (1H, dd, J=10.5 a 7.3 Hz, H-1), 3.71 (1H, dd,

J=11.1 a 9.5 Hz, H-6’), 3.88 (1H, dd, J=10.5 a 4.8 Hz, H-1), 3.97 (1H, ^š t, H-5·). 4.21 (1H, t, J=9.9 Hz, H-4'), 4.26-4.31 (1H, m, H-2), 4.37 (1H, d,

J=9.5 Hz, H-6'), 5.03 (1H, dd, J=9.9 a 3.6 Hz, H-2’), 5.16 (1H, d, J=3.6 Hz, H-1'), 5.46 (1H, dd, J=7.2 a 5.0 Hz, H-3), 5.58 (1H, dd, J=15.3 a 7.4 Hz, H-4), 5.72 (1H, t ratojjH H-5, J=9.9 Hz, H-3'), 5.70-5.76 (1H/m, H-5), 7.36-7.92 (16H, 4m, 3 X -C6H5 a -NH-).

Příklad 8_ _ _ _ ~ ~ _____ __ _______ (2S,3R,4E)-3-Hydroxy-2-hexadekanoylamino-l-/4,6-di-O(natrium oxysulfonyl)-D-glukopyranosyloxy/-4oktadecen

OBZ OH (2S,3R,4E)-3-Benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-1-/2,3di-O-benzoyl-4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)-^'-D-glukopyranosyloxy/-4-oktadecen se nechá reagovat jak je popsáno v příkladu 2-A a získá.se tak titulní sloučenina.

IR (nujol) Umax (cm'¹): 3600-3200 (OH a NH), 1640 a 1550 (C=O).

-961H NMR 400 MHz (DMSO-dg) δ (ppm): 0.85 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 X CH3),

1.24 (46H, m, - (CH₂)11 - a - (CH2)12 -). 1 5-1.7 (2H, m, CH₂), 1.87-2.00 (2H, m, =CH-CH2), 2.05 (2H, t, J=7.3 Hz, CH2CO), 3.22 (1H, dd, J=9.3 a

3.7 Hz, H-1), 3.5-3.67 (5H, 2 sety m, H-2’, H-3', H-5’, H-3, H-6'), 3.67-3.8 (1H, m, H-2), 3.72 (1H, dd, J=3.5 a 8.6 Hz, H-2, H-1), 3.93 (1H, t, J=7.8 Hz, H-4), 4.09 (1H, d, J=10.4 Hz, H-6), 4.64 (1H, d, J=3.7 Hz, H-1 j, 5.32 (IH-dd..4=15.3 a 7.1 Hz, H-4) 5.52 (1H, dt, J=15.2 a 6.6 Hz, H-4), 7.45 (1H, d, J=9.2 Hz, NH), 4.6, 4.87 a 5.31 (3H. 3 sety s, OH).

Příklad 9 (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-l-/2,3-di-0-benzoyl-4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)-D-glukopyranosyloxy)-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)-4-oktadecen

A. {2S,3R,4E)-3-Benzoyloxy-l-(2,3-do-0-benzoyl-4,6-O-benzyliden- C^-D-glukopyranosyloxy)-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)A'

4-oktadecen

__t 2S.3R.4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-I-(2,3-di-0-benzoyl-4,6-_

O-benzyliden-c/-D-glukopyranosyloxy)-4-oktadecen se získá v příkladu 7-D /150 mg, 0,17 mmol/ a nechá se reagovat jak je popsáno v příkladu 3-A a 2Íská se titulní sloučenina /1.90 mg, %/ jako žlutá guma.

IR (CH2CI2) t>max (cm*¹): 3420 (N-H), 3060, 2930, 2860 (C-H), 1730 a

1675(0=0).

-971H NMR 400 MHz (CDCI3) δ {ppm): 1.23-1.28 a 1.56-1.67 (56H, 2 sety m, 2 x -(CH₂)11- a -(CH2)6’), 1.94-2.05 a 2.09-2.23 (8H, 2 sety m, 3 x=CH-CH2-a -CH2CONH-), 3.67 (1H, dd, J=10.7 a 3.7 Hz, H-1), 3.83 (1H, t, J=10.3 Hz, H-6'), 3.91 (1H, dt, J=10.7 a 4.3 Hz, H-1), 3.92 (1H, t, J-9.3 Hz, H-4'), 4.04 (1H, dt, J=9.7 a 4.7 Hz, H-5'), 4.33 (1H, dd, J=10.3 a 4.7 Hz, H-6'), 4.47-4.53 (1H, m, H-2), 5.25 (1H, d, J=3.8 Hz, H-1‘), 5.32 (1H, ďd, J=9.9 a 3.8 Hz, H-2'), 5.36 (2H, § t,\l=4.7 Ηζ,τ/δ)-ΟΗ=ΟΗ-),

5.45-5.53 (2H, m, H-4 a H-3), 5.57 (1H, s, -O-CH-O), 5.66 (1H, dt, J=14.4 a 6.7 Hz, H-5), 5.79 (1H, d, J=9.1 Hz, -NH-), 6.07 {1H, t, J=9.8 Hz, H-3'), 7.31-7.55 a 7.92-8.0Í (20H, 2 set y ' m, 4 X -C6H5).

B.~ ( 2S, 3R, 4E) -3-Benzoyloxy-l- (2', 3-di-0-benzoyl-ť( -Dglukopyranosyloxy)-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)-4oktadecen

O‘ BzO

BzO

NHCťXCHjJtaCHaCmCHiJrCMj

OBz

(2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-l-(2,3-di-0-benzoyl-4,6-Obenzyliden-^ -D-glukopyranosyloxy)-2-(cis-15-tetrakosenoyl amino)-4-oktadecen /180 mg, 0,148 mmol/ se nechá reagovat jak je popsáno v příkladu 1-K a získá se titulní sloučenina /133 mg, 80 %/ jako světležlutý olej.

IR (CH2CI2) Umax (cm-¹): 3600 (O-H), 3440 (N-H), 3060, 2930, 2860 (C-H), 1725 a 1675(0=0).

-98¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (6H, t, J=6.8 Hz, 2x -CH3), 1.231.28 (56H, m, 2x-(CH₂)n- a -(CH₂)6), 1.60-1.63 (1H, m, -OH), 1.90-2.05 ____ (6Π. 3 x xCH-Ch^-), 2.10-2.25 (2H, m, -ChkCONH-), 3.13 (1H. š s,_______

-OH), 3.74 (1H, dd, J=10.6 a 4.6 Hz, H-1), 3.85-3.98 (5H, m, H-1, H-6', ^H*⁵’^a. /-52-4.59 (1H, m, H-2),.5.22 (1H, d, J=3.7 Hz, H-1‘), 5.28 (1H, dd, J=10.1 a 3.7 Hz, H-2'), 5.36 (2H, š t, J=4.6 Hz, c/s-CH=CH-),

5.51 (1H, dd, J=14.7 a 7.4 Hz, H-4), 5.55 (1H, š t, J=7.4 Hz, H-3), 5.71 (1H, dd, J=10.0 a 8.9 Hz, H-3'), 5.76 (1H, dt, J=14.7 a 6.9 Hz, H-5),

5.82 (1H, d, J=9.2 Hz,-NH-), 7.33-7.58a 7.95-8.01 (15H, 2sety m,3x -C6H5). _fí;

C. (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-l-/2,3-di-O-benzoyl4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)-K,-D-glukopyranosyloxy/-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)-4-oktadecen

OH

HO—

ΒζθΧ^*\

BzO I 0.

OSOjNa

NaSO/J-v^^O

NHCO(CHi]i]CH=CH(CHí}tCH3 ^(CHjJííCH,

ΒζΟ-Λ^—

BzO 1

NHCOCChlt )_nCH_sCH(CH,)₇CH_}

OBz

OBz (2S, 3R,4E)-3-benzoyloxy-l-( 2,3-di-O-benzoyl-l- t£D-glukopyranosyloxy)-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)-4-oktadecen /129 mg, 0,115 mmol·/ se nechá reagovat jak je popsáno v příkladu 1-L a získá se titulní sloučenina /149 mg, %/ jako bílá pevná látka.

IR (Nujol) Umax (cnr’): 3560, 3450, 3420 (N-H), 1730, 1680 a 1650 (C«O).

-99Η ΝΜκ 400 MHz (uMSO-άθ) δ (ppm): 0.83 (3H, í, J-6.8 Hz, ^Hs), 0.83 (3H, t, J=6.8 Hz, -CH3), 1.12-1.37 (56H, m, 2x -(CH2)11- a -(CH.2)6-),

l. 74-1.81 a 1.86-2.07 (8H, 2 sety m, 3 x =CH-CH2- a -CJ^CONH-),

5.53 (1H, dd, J-10.5 a - 7.4 Hz, H-1), 3.70 (1H, dd, J=11.1.Hz, a 9.2 Hz, H-5'), 3.87 (1H, dd, J=10.7 a 4.9 Hz, H-1), 3.95 (1H, § t, J=9.5 Hz, H-6'),

4.20 (1H, t, J=9.7 Hz, H-4'), 4.24-4.31 (1H, m, H-2), 4.36 (1H, g d, J=10.0 Hz, H-6'), 5.02 (1H, dd, J=10.3 a 3.7 Hz, H-2'). 5.14 (1H. d, J-3.6 Hz, H1'), 5.30 (2H, š t, J=4.8 Hz, c/s-CH=CH-), 5.44 (1H, dd, J=7.3 a 4.9 Hz, H3), 5.56 (1H, dd, J=15.1 a 7.5 Hz, H-4), 5.71 (1H, d, J=9.6 Hz, H-3¹), 5.73 (1H, dt, J=15.1 a “67 Hz, H-5), 7.34-7.39,”7,46-7.61á’ 7.78-7.91 (15H,~ m, 3x-C6H5).

Příklad 10 (2S,3R,4E)-1-/2,3-Di-O-benzoy1-4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl )- oC-D-galaktopyranosyloxy/-3-benzoyloxy-2-hexanoylamino-4-undecen

A. (2S,3R,4E)-1,3-O-Benzyliden-4-undecen-l,2,3-triol

OH OH

Reakci 2,4-0-benžyliden-D-threosy /jak popsal P.Zimmermann a R.R.Schmidt, Liebigs Ann.Chem., 663-667 /1988// /23,5 g, 0,112 mol/ s n-heptyltrifenylfosfoniumbromidem /popsáno C.P.Hauserem, T.W.Brooksem, M.L.Milesem, M.A. Raymondem a G.B.Butlerem, J.Org.Chem., 28, 372/1963/ /64 g, 0,145 mol/ a fenyllithia /0,393 mol/ za použití postupu popsaného P.Zimmermannem a R.R.Schmidtem, se získá

15,14 g /46 %/ titulní látky jako bílé pevné látky po chromatografii.

-100_t>t50-52°C; [a]_D : -2° (c=0,5, CHCI3).

IR (KBr) Umax (cm’¹): 3380 (OH).

1H NMR 400 MHz (CDCla) 5 (ppm): 0.89 (3H, t, J=6.9 Hz, -CH3), 1.2-1.45______ (8H, m, -(CH₂)4-)_t 2.09 (2Η, m, =CHCH2-), 2.64 (1H, d, J=10.4 Hz, -OH),

3.54 (1H, m, H-2), 4.09 (1H, dd, J=1.3a 11.8 Hz, H-1), 4.25 (1H, dd, J=1.9 a 11.8 Hz, H-1), 4.42 (1H, d, J=6 Hz, H-3), 5.63 (1.H, s,-O-CH-O-), 5.67 (1H, m, J=15.6 Hz, H-4), 5.88 (1H, m, J=15.6 Hz, H-5), 7.38 a 7.53 (3H a 2H, 2m, -C6H5).

Elementární analýza pro ^ci3^H26°3^: vypočteno 74,45 % C, 9,02 % H nalezeno 74,47 % C, 8,87 % H.

B. (2S,3R,4E)-2-Azido-l,3-O-Benzyliden-4-undecen-l,3-diol (CH2)sCH₃

OH

H ^(CHjkCHa

N₃ (2S,3R,4E)-1,3-O-Benzyliden-4-undecen-l,2,3-triol /9,20 g, 31,7 mmol/ se nechá reagovat obecným postupem jak je popsán v příkladu 19-B a získá se 5,32 g /53 %/ titulního materiálu jako oíěTjěí [a]^: -17° (c=1.0, CHCI3).

IR (NaCI, film) Umax (cm-¹): 2105 (N3).

-1011η NMR 200 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (3H, t, J=6.5 Hz, -CH3), 1.2-1.5 (8H, m, -(CH2)4·), 2.11 (2H, m, =CHCH2-) 3:46 (1H, ddd, J=4.7 Hz, 9.0 a

10.7 Hz, H-2), 3.62 (1H, dd, J=10.7 a 10.7 Hz, H-1), 4.05 (1H, dd, J=7.4 a 9.0 Hz, H-3), 4.34 (1H, dd, J=4.7 a 10.7 Hz, H-1), 5.49 (1H, s, -O-CH___-____0-),-5.59-{-1H,-ddt, J=7.4,-15.5-a—1.3-Hz,-H=4),-6.00-(-tH,-dt,_J=6.8_a___t5.5_____

Hz, H-5), 7.3-7.5 (5H, m, -C6H5).

Elementární analýza pro ^cig^H25^N3°2^: vypočteno 68,54 % C, 7,99 % H, 13,32 % N nalezeno 68,59 % C, 7,49 % H, 13,-41 % N„

C. (2S,3R,4E)-2-Azido-4-undecen-l,3-diol

H

Ph

(CHjJsCHa

N₃

(CHaJsCHa (2S,3R,4E)-2-Azido-4-undecen-l,3-diol /5,32 g, 11,9 mmol/ se nechá reagovat postupem obecně popsaným v příkladu 19-C a získá se 3,48 g /91 %/ titulního materiálu jako bílé pevné látky.

t.t29-30°C (hexan ); [a]_D : -51° (c=1.0, CHCI3).

IR (NaCI, film) Umax (cm-1): 3350 (OH), 2100 (N3).

-1021η NMR 200 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.88 (3H, t, >6.5 Hz, ΌΗ3), 1-2-17 (8H, m, -(CH2)4-), 2.1 (4H, m, =CHCH2- a 2 x -OH), 3.51 (1H, dt, J=5.3 a 5.3 Hz, H-2), 3.78 (2H, ^š d, CH2-1), 4.25 (1H, š t, H-3), 5.53 (1H, ddt, J=15.4, 7.2 a 13 Hz, H-4), 5.82 (1H, dt, >15.4 a 6.6 Hz, H-5). “

Elementární analýza pro ^cn^H21^N3°2^: vypočteno 58,12 % C, 9,31 % H, 18,49 %'N nalezeno 58,21 % C, 9,22 % H, 18,27 % N.

D. (2Ξ,3R,4E)-2-Azido-l-0-terc.butyldimethylsilyl-4undecen-1,3-diol n₃ n₃ » TBDMSO^^^Áx^^ÍCHjJsCHj OH OH (2S,3R;4E)-2-Azido-4-undecen-l,3-diol /2,74 g, 12,06 mmol/ reaguje podle obecného postupu popsaného v příkladu 19-D a .získá se 3,96 g /96 %/ titulního materiálu.

[a]|y: -3.5° (c=1.0, CHCI3). ,

IR (NaCl, film) u_max (cm-1): 3440 (OH), 2100 (N3).

1H NMR 200 MHz (ČĎCI3) δ (ppm): 0.09' (6H, s, -S1CH3), 0.9 (12H, §· s, -Si-f-Bu a -CH3), 1.2-1.5 (8H, m, -(CH2)4·), 2.06 (2H, m, =CHCH2-). 2.32 (1H, d, >5.0 Hz, -OH), 3.42 (1H, m, H-2), 3.80 (2H, m, CH2-1), 4.21 (1H, m, H-3), 5.49(1 H, ddt, >15.4, 7.0 a 1.3 Hz, H-4), 578 (1H, m, H-5).

Elementární analýza pro ^ci7^H35^N3°2^S^^: vypočteno 59,78 % C, 10,33 % H, 12,30 %. N nalezeno 59,71 % C, 10,24 % H, 12,16 % N:

-103E. ( 2S, 3R, 4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-0-terc.butyldimethyl-4 undecen-l-ol

TBDMSO.

N,

(CH₂)_sCH₃

TBDMSO,

OBz (2S,3R,4E)-2-Azido-l-O-terc.butyldímethylsilyl-4undecen-l,3-diol /3,96 g, 11,6 mmol/ reaguje podle obecného postupu. popsaného v^příkladu 19rE .,a získá, se, 5,2..g.

/100 %/ surového titulního materiálu^ který se použije jako takový v následujícím stupni.

IR (NaCI, film) O_max (cm’¹): 2100 (N3). 1725 (C=O ester).

¹H NMR 200 MHz.(CDCI₂) δ (ppm): 0.07 (6H, s, -S1CH3), 0.86 (3H, t, J=6.7 Hz, -CH3), 0.91 (9H, s, -Si-f-Bu), 1.2-1.5 (8H, m, -(CH₂)4-), 2.08 (2H, m, =CHCH2-), 3.6-3.9 (3H, m, CH₂-1 a. H-2), 5.5-5.7 (2H, m, H-3 a H-4),

5.92 (1H, dt, J=6.7 a 14.4 Hz, H-5), 7.45, 7.56 a 8.06{2H,1Ha 2H, 3 m, -C6H5).

F. (2S, 3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-4-undecen-l-ol

N3

N_a

TBDMSO,

-(CH₂)_sCH₃

OBz

OBz (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-0-terc.butyldimethylsilyl-4-undecen-l-ol /5,20 g, 11,6 mmol/ se zpracuje podle obecného postupu popsaného v příkladu 19-E a získá se 3,26 g /85 %/ titulní látky jako oleje.

-104[<X]_D : -65° (O1.0, CHCI3).

IR (NaCI, film) Umax (cm'¹): 2105 (N3), 1720 (C=O ester).

1H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.87 (3H. t, J=6.8 Hz, -CH3), 1.2-1.4 (8H, m, -(CH2)4-), 2.09 {2H, m, =CHCtí2-), 3.63 (1H, dd, J=11.7 a 7.1 Hz, H-1), 3.76 (1H, dd, J=11.7 a 4.0 Hz, H-1), 3.81 (1H, m, H-2), 5.58-5.65 (2H, m, H-3 a H-4), 5.95 (1H, m, H-5), 7.44, 7.59 a 8.06 (2H, 1H a 2H, 3 m, -C6H5).

Elementární vypočteno nalezeno analýza pro ^ci8^H25^N3°3‘⁰'⁵ H₂O: 63,51 % C, 7,70 % H, 12,34 % N 63,45 % C, 7,45 % H, 12,29 % N.

G. (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoylóxy-l-(2,3,4,6-tetra-Oacetyl-θ(-D-galaktopyranosyloxy)-4-undecen a (2S,3R,4É)2-azido-3-benzoyloxy-l-(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-B-Dgalaktopyranosyloxy)-4-undecen *'

AcO OAc

AcO 2 ♦ HO,

Ks

AcO OAc

AcO

OBz

OAc .(CHíJsCHj

OBz (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-4-undecen-l-ol /4,17 g, 12,58 mmol) a 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-ť(-D-galaktopyranosylbromid /jak je popsán P.Zimmermannem a R.R. Schmidtem, Liebigs Ann.Chem., 663-667 /1988// /8,2 g,

20,0 mmol/ reaguje podle obecného postupu popsaného v příkladu 1-A a získá se 1,11 g /13 %/ ^-anomeru a 5,72 g /68 %/ G-anomeru.

-105α-anomer: jehlice,, t.t.67-68°C (hexan· ).

[a]n²: +70° (c=1.0, CHCI3),

IR (KBr) Umax (cm'¹): 2100 (N3), 1752,1745 a .1722 (C=O ester).

¹H NMR 400 MHz (CDČI3) δ (ppm): 0,87 (3H, t, J=6.8 Hz, -CH3), 1.2-1.4 (8H, m, -(CH2)4-), 2.0, 2.01, 2.09 £ 2.15 (4 x 3H, 4s, 4 x -OCOCH3), 2-08 (2H, m, =CH-CH2). 3.52 (1H, dd, J=d0.7 a 7.7 Hz, H-1), 3.88 (1H, dd,

J=10.7 a 3.54 Hz, H-1), 3.93 (1H, m, H-2), 4.09 (2H, m, H-6'), 4.24 (1H, m, H-5), 5,13-5.18 (2H, m, H-1' a -H-2'), 5.34-5.39 (1H, m,.H-3'), 5.49 (1H, dd, ... J=3.3 a 1.2 Hz, H-4'), 5.53-5.61 (2H, m, H-3 a H-4), 5.9-6.0 (1H, m,

H-5), 7.47, 7.59 a 8.05 (2H, 1H a. 2H, 3m, -C6H5).

Elementární analýza pro ^C32^H43^N3°12 vypočteno 58,03 % C, 6,55 % H, 6,35 nalezeno 58,14 % C, 6,38 % H, 6,37 % N % N.

β-anomer: čirý olej [a]^: -28° (c=1.0, CHCI3).

IR (NaCl, film) Umax (cm'¹): 2108 (N3), 1750 a 1725 (C=O).

¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.87 <3H, t, J=6.8 Hz, -CH3), 1.26-1.4 (8H, m, -(CH2)4-). 1.99, 2.03, 2.11 a 2.16 (4 x 3H, 4s, 4 x -OCOCH3),

2.09 (2H, m, =CH-CH2), 3.60 (1H, m, H-1), 3.85-3.97 (2H, m, H-1 a H-2),

4.12 (2H, ABX systém, JAB= 11 Hz, Jax= 5.07 Hz a Jbx=5.1 Hz, H-6‘),.

4.51 (1H, d, J=7.97 Hz, H-1'), 5.02 (1H, dd, J=10.54 a ' 3.41 Hz, H-3'), 5.25 (1H, dd, J=10.54 a 7.97 Hz, H-2j, 5.39 (1H, dd, J=3.41 a 0.87 Hz, H4'), 5.53-5.62 (2H, m, H-3 a - H-4), 5.94 (1H, dt, J=14.3 a 7.1 Hz, H-5), 7.27, 7.48 a 8.06 (2H, 1H a ¹2H, 3m, -C6H5).

Elementární analýza pro ^C32^H43^N3°i2^: vypočteno 58,03 % C, 6,55 % H, 6,35 % N nalezeno 57,89 % C, 6,29 % H, 6,30 % N. ................. .1..

-106H. (2Ξ,3R,4E)-2-Aziďo-3-benzoyloxy-l-( fK.-D-galaktopyranosyloxy)-4-undecen

Roztok (2S > 3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-l-(2,3,4,6tetra-O-acetyl-¢(-D-galaktopyranosyloxy)-4-undecenu /0,720 g, 1,09 mmol/ ve směsi methanolu /30 ml/ a dichlormethanu /10 ml/ se zpracuje při 0-5 °Č s 0,4 ml /0,11 mmol/

0,29M roztoku methoxidu sodného v methanolu. Po 2 hodinách při 22 °C se roztok neutralizuje Dowexwm-50W 8% XL /H⁺/, filtruje a chroniatografu je na silikagelu /2,5 x 8 cm/.

Elucí gradientem methanolu /10-20 %/ v chloroformu se získá 0,439 g /81 %/ titulní látky jako lepkavého skla.

[«]□ : +45.5° (c=1.1, CHCI3).

IR (NaCI, film) «max (cm'¹): 2100 (N₃) a 1720 (C=O ester).

1H NMR 400 MHz (DMSO-de) δ (ppm): 0.81 (3H, t, J=6.8 Hz, CH₃), 1.2-1.4 (8H, m, (CH₂)₄), 2.03 (2H. m, =CH-2Ha), 3.4-3.6 (5H, m, H-1, H-2', H-3' a ’CFgOH)73:62(1H;aiP<ý-t-H-5^L)-3r70(4H_rm-H-4l)_r3.74-(.1H,-dcl,J=t0.8a J=5.1 Hz, H-1), 4.15 (1H, m, H-2), 4.37 (1H, d, J=4.2 Hz, OH, . D2O), 4.42 (1H, d, J—6.2 Hz, OH, zgxš&ý O2O), 4.53 (1H, t,

J=5.5 Hz, OH, jaůfefr O₂O), 4:60 (1H, d, J=5.3 Hz. OH.*™?'

DjO), 4.70 (1H, d, J=3 34 Hz, H-1’). 5.57 (1H, dd, J=14.8 and J=7.5 Hz, H4), 5.62 (1H, dd, J=7.5 ai J=3.9 Hz, H-3), 5.85 (1H, dt, J=14.8 a, J=6.8 Hz, H-5), 7.54, 7.65 a: 7.98 (2H, 1Ha 2H, 3m, C₆H₅).

-107Elementární analýza pro ^C24^H35^N3°g·θ'^{25 H}2^0: vypočteno 57,88 % C, 7,18 % H, 8,44 % N nalezeno 57,75 % C, 6,99 % H, 8,-39 % N.

I. (2S, 3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(4,6-O-benzyliden..A“P”galaKtopy.ťanosyjLpxy )-4-undecen________

OBz

Roztok (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-l-(<íf -Dgalaktopyranosyloxy)-4-undecenu /0,418 g, 0,847 mmol/ v 98% kyselině mravenčí /3 ml/ se zpracuje pří 22 °C s benzaldehydem /3 ml/. Po 1,5 h se reakční směs zředí ethylacetátem /75 ml/, promyje se nasyceným hydrogenuhličitanem sodným a suší /síran horečnatý/. Zbytek se získá po odpaření rozpouštědla a chromatografuje se na silikagelu /2,5 x 12 ml, eluce gradientem ethylacetátu 20-30 % v toluenu/ a získá se 0,390 g /79 %/ titulní látky jako bílé pevné látky po trituraci ve směsi ethylacetátu a hexanu.

_t. _t = 109-110°C; [α]θ²: +33’ (c=1.0, CHCI3).

IR (KBr) Umax (cm'¹): 2138 (N3) a. 1718(00 ester).

-108¹H NMR 400 MHz (DMSO-d6) δ (ppm): 0.82 (3H, t, J=6.8 Hz, CH3), 1.2-1.4 (8H, m, (CH2)4), 2.05 (2H, m, =CH-CH?). 3.53 (1H, dd, J=10.7 a J=7.35 Hz, H-1), 3.65 (IHšircký s, H-5'), 3.69 (1H, m, rčedrÉzí cfcdd při ^2θ zarčnený t J—10.3 a. J=3.4 Hz, H-2¹), 3.74 (1H, m přssahijící H-1, H3’). 3.77 (1H, dd, J=10.7 a J=4.9 Hz, H-1), 4.02 (2H, AB rast ABX systém, Jax - 1 -0, Jbx = 1.4 a Jab = 11.8 Hz, Δν= 25.2 Hz, CH2O-6j, 4.16 (2H, m, H-2 a H-4‘), 4,66 (1H, d, J=6.1 Hz, OH, znčřrý , P₂O), 4.82 (1H, d, J=5.9 Hz, OH, D₂O), 4.84 (1H, d, J=3.4 Hz, H-1’), 5.54 (1H, s, CHC₆H₅), 5.59 (1H, dd, J=14.8 a J=7.6 Hz, H-4), 5.64 (1H, dd, ^=7:63^-~d=3:9“Hz7H-3)75;87^_(ŤH7ddrd-14:8“ar^^_d-6:8HZ7H-5j7V;357^_^^_^ .....--7.43, 7.55, 7.68 a 7.98 (3H, 2H, 2H, 1H a 2H, 5m, 2 x C₆H_S).

Elementární analýza pro C^H^N^Og:

vypočteno 64,01 % C, 6,76 % H, 7,22 % N nalezeno 63,90 % C, 6,67 % H, 7,23 % N.

-q

J. (2S,3R,4E)-2-Azido-l-(2,3-di-0-benzoyl-4,6-O-benzyliden- ¢¢D-galaktopyranosyloxy)-3-benzoyloxy-4-undecen ii>

-.4

---Koz tok (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-T-(4,6-O-benzyliden— c( -D-galaktopyranosyloxy)-4-undecenu /0,350 g, 0,60 mmol/ v suchém pyridinu /8 ml/ se zpracuje při 0 až 5 °C s benzoylchloridem /0,34 g, 2,4 mmol/ a malým krystalem 4-dimethylaminopyridinu. Po 16 h při 0 až 5 °C se přidá methanol /2 ml/ a reakčni směs se odpaří za vakua. Chromatografií zbytku na silikagelu /2,5 x 10 cm/ za použití gradientu ethylacetátu /0 až 5 %/ v toluenu se získá 0,460 g /96 %/ titulního materiálu jako hustého oleje.

-109[αξ +119° (c=1.0, CHCI₃).

IR (NaCI, film) (cm-1): 2105 (N₃) a. 1720 (C=O ester).

1η NMR 400 MHz (CDCI₃) δ (ppm): 0.87 (3H, t, J=6.7 Hz. CH₃), 1.2-1.4 (8H, m, (CH₂)₄), 2.07 (2H, m, =CH-£ih), 3.58 (1H, dd, J=10.3 a J=7.5 Hz, H1), 3.93 (1H, dd. J=10.3 a, J=3.9 Hz, H-1), 3.97 (1H, m, H-2), 3.99 (1H,

- širvkýS, H-5’), 4.20_(2H, AB část. ABX systém Jax = 1.2 Hz,Jbx= 1.3 Hz a Jas = 12.4 Hz, Δν= 79.2 Hz, CH₂O-6'), 4.70 (1 Η,3τ^ d, J=3 Hz, H-4‘), 5.42 (1H, d, J=3.3 Hz, H-1'), 5.53-5.61 (2H, m, H-3 a: H-4), 5.58 (1H, s, CHC₆H₅), 5.78 (TH, dd, J-10.8 a J=3.3 Hz, H-2'), 5.84 (1H, dd. J=10.8 a· J=3.4 Hz, H-3‘), 5.92 (1H, dt, J=14.2 a J=6.7 Hz. H-5), 7.34-7.6 a 8.0-8.02 (14 H a 6H, 2m. 4 x C₆H₅).

Elementární analýza pro C^H^N^O.^:

vypočteno 68,43 % C, 6,0 % H, 5,32 % N nalezeno 68,50 % C, 5,97 % H, 5,36 % N:

K. (2S, 3R, 4E) - (2,3-di-0-benzoyl-4,6-di-O-benzyliden-r

- -D-galaktopyranosyloxy)-3-benzoyloxy-2-hexanoylamino4-undecen

Roztok {2S,3R,4E)-2-azido-l-(2,3-di-0-benzoyl-4,6Q-benzyliden-í(-D-galaktopyranosyloxy)-3-benzoyloxy-4undecen /0,450 g, 0,57 mmol/ se redukuje a acyluje postupem obecně popsaným v příkladu 1-5 s tím rozdílem, že se použije hexanoylchlorid /0,80 g, 0,59 mmol/ jako acylační činidlo. Chromatografií na silikagelu /gradient ethylacetátu 10 až 20 % v toluenu, 2,5 x 12 cm/ se získá 0,413 g/84%/ titulního materiálu jako oleje.

-110+13.5^q (c=1.0, CHCI₃).

IR (NaCI, film) (cm-¹): 1720 (C=O ester) a 1660 (C=O amid ).

¹H NMR. 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.85 and 0.90 (2 x 3H, 2t, 3=7.0 a 3=6.8 Hz, 2 x CH₃), 1.2-1.4 a 1.55-1.65 (14 H, m. (CH₂)₄) a (CH₂)₃),

1.99 (2H, m, ^CH-Qtb), 2.14 (2H, m, COCH₂), 3.75 (1H, dd, J=10.9 a J=5.2Hz, H-1), 3^1 (1H,dď, 3=10.9 a 3=4.0 Hz, H-1), 3.91 (1H, s,_

H-5), 4.21 (2H, AB aBX systém Jax= 1.1 Hz, 3gx = 1.3, Jab = 12.5 Hz, Δν= 88.9 Hz, CH₂O-6'), 4.55 (1H, m, H-2), 4.66 (1H, šrtrký d, J=3 Hz, .^41),-5.38-(-1-14,-d,-J=3.32-Hz^H-1^5,49-(-1-H-dd_rJ=-14,6-a—J=7,4-1-Hz^-H-4), 5.53 (1H, dd, J=7.4 a 3=5.3 Hz, H-3), 5.56 (1H, s, CHC₆H₅), 5.7-5.75 (2H, m, H-5 a NH), 5.76 (1H, dd, 3=10.8 a 3=3.3 Hz, H-2¹), 5.81 (1H, dd, 3=10.8 a 3=3.3 Hz, H-3'), 7.3-7.6 ai 7.9-8.05 (14H a 6H, 2xm, x ΟβΗβ).

Elementární analýza pro C5ι^Η79^ΝΟχχ^: vypočteno 71,06 »_{c> 6>90 % H> 162 %} „ nalezeno 70,82 % C, 6,81 % H, 1,81 ί N,

L. (2S,3R,4E)-l-(2,3-di-Obenzoyl- -D-galaktopyranosylo:<y)3-banzoyloxy-2-hexanoylamino-4-undecen

(2S,3R,4E)-l-(2,3-di-0-Benzoyl-4,6-di-O-benzyliden-D-galaktopyranosyloxy)-3-benzoyloxy-2-hexanoylamino4-undecen (0/410 g, 0,476 mmol/ se nechá reagovat podle postupu obecně popsaného v příkladu 1-K a získá se 0,276 g /75 %/ titulního materiálu jako amorfní pevné látky.

-111[α]θ : +107° (¢=1.0, CHCI₃).

IR (KBr) (cm-1): 1725 (C=O ester) a. 1655 (C=O amid ).

1H NMR 400 MHz (CDCI₃) δ (ppm): 0.85 and 0.89 (2 x 3H, 2s, J=7.0 a J=6.6 Hz, 2 x CH₃), 1.23-1.35 a 1.55-1.65 (12 H a 2H, 2m, (CH₂)4) a (CH₂)₃), 1,99 (2H, m, =CH-CH₉). 2.15 (2H, m, COCH₂), 3.79 (1H, dd, J=11.2 a J=5.4 Hz, H-1), 3.88 (1H, dd, J=11.2 a J=4.0 Hz, H-1), 3.91 (1H, dd,

1.9 a ~ J=4.2 Hž, 1H, CH₂O-6'), 3.97 (1H, dd; 3=11:9 a - 3=5.4 Hz,------CH₂O-6‘), 4.07 (1H, siKk/t, J=5 Hz, H-5·), 4.45 (1 H,ši**ý _d| j=2 Hz, H-4'), 4.56 (1H, m, H-2), 5.3 (1H, d, J=3.2 Hz, H-1'), 5.49 (1H, dd, J=14.5 a.

J=7.3 Hz, H-4), 5,53 (1H, dd, J=7.3 a J=6.0 Hz, H-3), 5.67 (1H, dd, 3=10.7 a. J=2.6 Hz, H-3'), 5.71 (1H, dd, J=10.7 a J=3.2 Hz, H-2'), 5.76 (1H, dt, > J=14.5 a „ J=7.0 Hz, H-5), 5.82 (1H, d, J=9.3 Hz, NH), 7.3-7^6 ai 7.9-9.0 (9H a 6H, 2m, 3 x C₆H₅).

M. (2S,3R,4E)-l-/2,3-di-0-benzoyl-4,6-di-0-(natrium oxysulfonyl)- c(-D-galaktopyranosyloxy/-3-benzoyloxy-2hexanoylamino-4-undecen

Roztok (2S,3R,4E)-1-(2,3-di-O-benzoyl-e^-D-galaktopyranosyloxy) -3-benzoyloxy-2-hexanoylamino-4-undecenu ' /0,270 g, 0,35 mmol/ v suchém pyridinu^-/25 ml/ se zpracuje s komplexem oxid sírový-pyridin /0,33 g/ a výsledná směs se udržuje na 40 °C 8 h. Ochlazená směs se zpracuje s vodou /5 ml/ a pevným hydrogenuhličitansm sodným /0,5 g/. Po ukončeni vývoje plynu se rozpouštědlo odpaří a zbytek se extrahuje směsí chloroformu a methanolu /7:3/. Spojené extrakty se zahustí a chromatografují se na silikagelu /3 x Í1 cm/, el~uce'gradientem methanolu 10-20'% v chloroformu/ - .....

-112a získá se 0,315 g /92 %/ titulní látky jako amorfní pevné látky.

[cc]q²: +99° (c=1.0, CHCI₃).

1RXraí)5^'(črrři):'1727(G=O ester)! 1640 (C=O amid ).

¹H NMR 400 MHz (DMSO-d₆) δ (ppm): 0.74 and 0.78 (2 χ 3H gt,.J=7-.-ts_ a J=6.5 Hz, 2 x CH₃), 1.0-1.4 (14 H, m, (CH^) a (CH₂)₃), 1.87 (2H, m, COCH₂), 1.98 (2H, m, ^CH^hb), 3.55 (1H, dd, J=10.4 a J=3.9 Hz, H-1),

3.85 (2H, m, H-1 a H-5‘), 4.12 (1H, dd, J=11.9 a J=2.6 Hz, CH₂O-6'), 4.27 (1H, m, H-2), 4.32 (1H,šúxký dd, CH₂O-6j, 4.8 (1H široký _{df J=3 Hz}, H-4‘), 5.14 (1H, d, J=3.4 Hz, H-1'), 5.41 (1H, dd, J=10.8 a · J=3.4 Hz, H-2'),

5.45-5.5 (2H, m, H-3 a - H-3’), 5.57 (1H, dd, J=15.2 a J=7.4 Hz, H-4),

5.72 (1H, dt, J=15.2 a J=6.6 Hz, H-5), 7.35-7.4, 7.45-7.61 a 7.81-7.93 (4H, 5H a 7H, 3 x m, 3 x C₆H₅ a NH).

Elementární analýza pro £44853^0^782^2·21^0:

vypočteno 52,12 % C, 5,67 % H, 1,38 % N nalezeno 52,12 % C, 5,43 % H, 1,45 % N.

Příklad 11 (2S,3R,4E)-2-Hexadekanoylamino-3-benzoyloxy-l-/2,3-di-Obenzyl-4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)- 0(-D-galaktopyranosyl oxy/-4-oktadecen

-113A. Ethyl-4,6-0-benzyliden-l-thio-B-D-galaktopyranosid

Qenzaldehyddimethylacetal /2,0 ml, 13,3 mmol/ a pak kyselina para-toluensulfonová /15 mg/ se přidají k'míchanému roztoku ethyl-l-thio-B-D-galaktopyranosidu /1,3 g, 5,80 mmol/ v acetonitrilu /20 ml/ při 22 °C. Směs se míchá 1 hodinu, potom se přidá triethylamin /asi 3 ml/. Směs se pak odpaří ve vakuu. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a promyje se vodou a 1M vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem horečnatým, filtruje a zahustí. Zbytek se vysrááí z ethylacetátu/ hexanu a získá se titulní sloučenina /1,3 g, 72 %/ jako bílá pevná látka.

¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 1.35 (3H, t=J=7.4 Hz, -CH3), 2.57 (1H, s, -OH). 2.59 (1H, d, J=10.1 Hz, -OH), 2.70-2.90 (2H, m, -SCH2-), 3.54 (1H, d, J=1.3 Hz, H-5), 3.69 (1H, ddd, J=12.3, 9.1 a 3.5 Hz, H-3), 3.82 (1H, ddd, J=10.5, 9.2 a 1.4 Hz, H-2), 4.04 (1H, dd, J=12.5 a 1.8 Hz, H-6),

4.27 (1H, dd, J=3.6 a 1.0 Hz, H-4), 4.36 (1H, dd, J=12.3 a 1.8 Hz, H-6),

4.35 (1H, d, J=9.5 Hz, H-1), 3.55 (1H, s, -O-CH-O-), 7.34-7.52 (5H, m,

-C6H5).

-114B. Ethyl-2,3-di-O-benzyl-4,6-0-benzyliden-l-thio-fí-p-galaktopyranosid

Roztok ethyl-4,6-0-benzyliden~l-thio-B-D-galakto- a pyranosidu /1,3 g, 4,17 mmol/ v tetrahydrofuranu /20 ml/ AA se přidá k hydridu sodnému /980 mg, 60% suspenze v oleji, T

24,5 mmol, promyto hexanem/ při 22 °C a tento roztok se minut míchá. Roztok se ochladí na O °C a přidá se roztok benzylbromidu /asi 2 ml, asi 17 mmol/ v dimethyl- ?>

formamidu /12 ml/. Výsledná směs se míchá při 22 °C asi % hodinu, potom se nalije do studeného 1M vodného roztoku i hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje se ethylacetátem.

Organické vrstvy se promyjí 1M vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou, suší se nad bezvodým síranem hořečnatým, filtrují a odpaří. Zbytek se čistí triturací s ethylacetátem /asi 5 ml/ a hexanem /asi 150 ml/ a získá se titulní sloučenina /1,24 g, 60 %/ jako bílá pevná látka .

1Ή NMR 200 MHz (CDCI3) δ (ppm): 1.33 (1H. t, J=6.4 Hz, -CH3), 2.69-2.88 (2H, m, -CH2S-), 3.36 (1H, š s, H-5), 3.59 (1H, dd, J=9.1 a 3.4 Hz, H-3),

3.89 (1H, t, J=9.4 Hz, H-2), 3.96 (1H, dd, J=12.3 a 1.8 Hz, H-6), 4.16 (1H, d, J=3.4 Hz, H-4), 4.31 (1H, dd, J=12.3 a 1.4 Hz, H-6), 4.44 (1H, d, J=9.6 Hz, H-1),-4.76 (2H, š s, CH₂-benzyl), 4.83 (1H. d, JaB=10.2 Hz, CH₂benzyl), 4.87 (1H, d, Jab=10-2 Hz, CH₂-benzyl), 5.48 (1H, s, -O-CH-O-), 7.28-7.57 (5H, m, -C6H5).

-115C. (23,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(2,3-di-O-benzyl4.6- 0-benzyliden- -D-galaktopyranosyloxy} -4-oktadecen a í 23,3R,4E)=2-azido-3-benzoyloxy-l-(2 -3-di-Q-benzyl4.6- 0-benzyliden-G-D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen

Ph

Na .<CHí)«CH₃

OBz

Ethal-2, 3-di-O-benzyl-4,6-0-benzyliden-l-thio-G-Dgalaktopyranosid /1,4 g, 2,85 mmol/ a (2S,3R,4E)-2-azido3-benzoyloxy-4-oktadecen-l-ol /0,60 g, 1,40 mmol/ se nechá reagovat postupem obecně popsaným v příkladu 1-F za použití toluenu místo ethyletheru. -anomer /942 mg, 78 %/ a G-anomer /257 mg, 21 %/ titulní sloučenina se získají po chromatografií na silikagelu.

IR (CH2CI2) Umax (cm“¹) a-anomer; 3060, 2930,2860 (C-H), 2110 {N3) a' 1720 (C=O).

¹H-NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm) a-anomer: 0.89 (3H, t, J=6.8 Hz, -CH3),

1.25-1.38 (22H, m, -(CH2)11-), 2.04-2.09 (2H, m, =CH-CH2), 3.58 (1H, dd, J=10.9 a 7.5 Hz, H-1), 3.67 (1H, š s, H-5'), 3.73 (1H, dd, J=10.9 a 4.7 Hz, H-1), 3.92-3.97 (1H, m, H-2), 4.00 (1H, dd, J=10.1 a, 3.4 Hz, H-3'),

4.01 (1H, dd, J=12.5 a. 1.5 Hz, H-6'), 4.09 (1H, dd, J=10.1 & 3.4 Hz, H2j, 4.19 (1H, d, J=3.4, H-4'), 4.21 (1H, dd, J=12.5 Hz a. 1.3 Hz, H-6’), 4.68 (1H, d, JaB=12.0 Hz, CH2-benzyl), 4.74 (1H, d, JAB=12.2 Hz, CH2-benzyl),

4.83 (1H, d, Jab=12.2 Hz, CH2-benzyl), 4.85 (1H, d, Jab=12.0 Hz, CH2benzyl), 4.93 (1H, d, J=3.4 Hz, H-1 j, 5.49 (1H, s, -O-CH-O-), 5.58 (1H, dd, J=14.7 a 8.1 Hz, H-4), 5.63 (1H, dd, J=8.1 a. 4.1 Hz, H-3), 5.90 (1H, dt, J=14.7 a 6.7 Hz, H-5), 7.22-7.61 a 8.06-8.08 (20 H, 2 sety . m, 4 x -C6H5). .............

-116• ¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm) β-anomer: 0.89 (3H, t, J=6.8 Hz, -CH₃),

1.24-1.33 (22H, m, -(CH₂)11-), 1.99-2.04 (2H, m, =CH-CH2-), 3.33 (1H, š s, * H-5’), 3.57 (1H, dd, J=9.6 a 3.6 Hz, H-3'), 3.61 (1H, d, J=4.7 Hz, H-1),

3.89 (1H, dd, J=9.6 a 7.8 Hz, H-2‘), 3.98-4.05 (3H. m, H-6', H-2 a H-1),

4.12 (1H, d, J=3.5 Hz, H-4'), 4.30 (1H, d, J=12.5 Hz, H-6'), 4.41 (1H, d, J=7.8 _t-----------Hz,H-1^,),4.76(1H_>d,JAB=12.4Hz,CH2’benzyr4.78(1H_ld;j_AB=12;r

Hz, CH₂ benzyl), 4.84 (i H, d, Jab=10-8 Hz, CH2 benzyl), 4.94 (1H, d, JAB=10.8Hz, CH₂ benzyl), 5.50 (2H, s,-O-CH-O-). 5.57(1 H. dd.J=15.4 a · 7.9 Hz, H-4), 5.68 (1H, dd, J=7.9 a 3.2 Hz, H-3), 5.88 (1H, dd, J=15.3 a 6.7 Hz, H-5), 7.28-7.59 a 8.06-8,09 (20H, 3 sety m, 4x-C₆H₅).

D. (2S,3R,4E)-2-Hexadekanoylamino-3-benzoyloxy-l-(2,3-di-Ot '#1 benzyl-4,6-O-benzyliden-<-D-galaktopyranosyloxy) -4oktadecen

NHCO(Crt2)i4^CH3

OBz __(.2 S, 3 R, 4 E) - 2 - A z i d o-3-benzoylo xy^1--- (2,3-d-i-- O -be n-z-y-1-—

4,6-O-benzyliden-^-D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen /306 mg, 0,36 mmol/ se nechá reagovat postupem obecně popsaným v příkladu 1-J a získá se titulní sloučenina /410 mg, 100 %/ jako bílá pevná látka.

-117iR (CH2CI2) Umax (cm-1): 3440 (N-H), 3060, 2930,2860 (C-H), 1715 a 1675 (C=O).

1H NMR.200 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.88 (6H, t, J=6.7 Hz, 2 x -CH₃), 1.26l. 70 (48H, m, -(CH₂)_ir ai -(CH₂)₁₃-)_t 1.96-2.09 (4H, m, =CH-CH2- a -NHCOCtk-), 3.65 (1H, š s, H-5'), 3.78 (2H, šd, J=4.3 Hz, H-6'), 3.95 (1H, dd, J=10.1 a 3.4 Hz, H-3*), 3.99 (1H, d, J=10.5 Hz, H-1), 4.08 (1H. dd, J=To.Ta~ ~3?4Hz, Η-29, 4.19^(1 H, d, J=10.5 Hz,H-1), 4.21 (1H, d, J=3.4 Hz, H-4'), 4.40-4.52 (1H, m, H-2), 4.72 (1H, d, JaB=11-3 Hz, CH₂-benzyl),

4.82 (1Ή, d, Jab=11 3 Hz, CH₂-benzyl), 4.75-4.82 (2H, CH₂-benzyI), 4.95 (1H, d, J=3.4 Hz, Η-Γ), 5.46 (1H, dd, J=14.9 a 7.2 Hz, H-4), 5.47 (1H, s, -O-CH-O-), 5.58 (1H, š t, J=7.2 Hz, H-3), 5.76 (1H, dt, J=14.9 a 6.5 Hz, H-5), 5.89 (1H, d, J=9.1 Hz, -NH-), 7.24-7.62 a 8.01-8.05 (20H, 2 sety m, 4x-C₆H5).

E. (2S,3R,4E)-2-Hexadekanoylamino-3^benzoyloxy-l-(2,3-diO-benzyl- X.-D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen

BnO

NHCO{CH₂),_<CH₃

(^2)12^3

OBZ

C2S73R,4E)-2-hexadekanoylamino-3-benzoyloxy-l-(2,3-diO-benzyl-4,6-O-benzyliden-^-D-galaktopyranosyloxy)-4-oktade cen /400 mg, 0,37 mol/ se nechá reagovat podle obecného postupu popsaného v příkladu 1-K a získá se titulní látka /239 mg, 56 %/ jako bílá pevná látka.

-118IR {CH2CI2) Umax (cm-¹): 3600 (O-H), 344 (N-H), 3060, 2930, 2860 (C-H),

1720 a 1670(0=0).

¹H NMR 400 MHz (DMSO-de) δ (ppm): 0.85 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 x -CH₃),

l. 19-1.28,1.40-1.5 (48H, 2 set/ m, *(CH2)11- a: -(CH2)13-)i 1.95-2.16 --------(4H, 2 set-y- m, =CH=CH2 a --CH2CONH-),„3.43.(1H, dd, J=10.3 a. _ 6.2

Ηζ,.Η-1.), 3.49 (1H, dd, J=11.4 a 5.1 Hz, H-6')), 3.53 (1H, dd, J=11.4 a

5.5 Hz, H-6'), 3.61 (1H, št, J=6.2 Hz, H-5'), 3.67 (1H, dd, J=10.1 a 2.8 Hz, H-3'), 3.67 (1H, dd, J=10.3 a 5.4 Hz, H-1), 3.77 (1H, dd, J=10.1 a

3.5 Hz, H-2'), 4.01 (1H, d, J=2.6 Hz, H-4'), 4.35-4.40 (1H, m, H-2), 4.52 (1H, d, JaB=H.9 Hz, CH2-benzyl), 4.58 (1H, d, JAB=12.2 Hz, CH2-benzyl), 4.61 (1H, d,“JAB=12.2 Hz, CH₂-benzyl), 4.68 (1H, d,~dAB=¹1-9 Hz, CH₂-benzyl), 4.64-4.69 (1H, s, -OH), 4.88 (1H, d, J=3.5 Hz, H-1‘), 5.49.(1H, dd, J=7.5 ai

5.5 Hz, H-3), 5.55 (1H, dd, J=14.9 a, 7.5 Hz, H-4), 575 (1H, dt, J=14.9 a

Hz, H-5), 7.20-7.38, 7.47-7.52, 7.61-7.66 a . 7.95-7.97 (15H, 4 sety m, 3 x -C₆H₅), 7.86 (1H, d, J=8.9 Hz, -NH-).

F. {2S,3R,4E)-2-hexadekanoylamino-3-benzoyloxy-l-/2,3-di-Obenzyl-4,6-di-O-{natrium oxysulfonyl)- o£.-D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen

HO _Z ^OH

BnO / :

NaSOf) OSOjNa

NHCOtCHíh^Hj a^zY<^(CHí)«CH3 OBz

A*-*T*A nhco(cHj)₁₄ch₃ BnO ' ΐ

OBz (2S, 3R, 4E) -2-IIexadekanoylamino-3-benzoyloxy-l- (2,3di-O-benzyl-ck -D-galaktopyranosykoxy)-4-oktadecen /230 mg, 0,24 mmol/ se nechá reagovat podle obecného postupu popsaného v příkladu 1-L a získá se titulní sloučenina /142 mg, 50 %/ jako bílá pevná chmýřovitá látka.

-119IR (Nujol) bmax (cm*¹): 3430 (N-H), 1725, 1755 a 1635 (C=O).

¹H NMR 400 MHz (DMSO-d₆) δ (ppm): 0.85 (6H, t, J=6.7 Hz, 2 x -CH₃),

1.19-1.3, 1.3-1.45 (48H, 2 sefy· m,-(CH₂)11-a, (CH₂)₁₃-), 1.95-2.05,

2.05-2.10 (4H, 2 sety m, =CH-CH2 and -CH2ČONH-) 3.56 (1H, dd, J=10.7 a 6.7 Hz, H-1), 3.62 (1H, dd, J=i 0.0 a 3.5 Hz, H-2'), 3.77 (1H, dd,

J=10.0 a 2.7 Hz, H-3'), 3.76-3.79 (1H, m, H-5'), 3.85 (1H, dd, J=11.3 a.

-------8.7-Hz-,_rH-6-)_r4,10-(-1 H_ršd_;J=8;8-Hz_rH-1-)r4z10-(-1 H_rdd-J=1-lT3a—2.0—

Hz, H-6'), 4.29 (1H, d, Jab=11.2 Hz, CH₂-benzyl), 4.2-4.31 (1H, ni, H-2),

4.55 (1H, d, JAB=11.9 Hz. CH₂-benzyl), 4.59 (1H, d, JAB=11.9 Hz, CH₂benzyl), 4.67 (1H, J=2.7 Hz, H-4'), 4.92 (1H, d, Jab=1 1 -2 Hz, CH₂-benzyl),

4.92 (1H, d, J=3.6 Hz, H-1 j, 5.50 (1H, dd, J=5.5 Hz, H-3), 5.58 (1H, dd,

J=15.0 a. 7.5 Hz, H-4), 5.72 (1H, dt, J=15.0 Hz, H-5), 7.19-7.27,7.38-7.40,

7.47-7.51, 7.59-7.62 a 7.96-7,98 (15H, 5 sety m, 3x-C₆H₅)a 7.83 (1H, d, j=8.7 Hz,-NH-).

i $

Příklad 12 (2S,3R,4E)-3-Benzoyloxy-2-{cis-15-tetrakosenoylamino)- » v

l“/2/6-di-O-(natrium oxysulfonyl)- ρζ-D-galaktopyranosyl— oxy/-4-oktadecen

A. (2S,3R,4E)-3-Benzoyloxy-2-{cis-15-tetrakosenoylamino)1-(3,4-O-isopropyliden-0( -D-galaktopyranosyloxy)4-oktadecen

HO OH

(CHílnCHj

Cfiz

-120Míchaný roztok (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-(cis-15tetrakosenoylamino)-1-( o^=D=galaktopyranosyloxy)-4-oktadecenu /626 mg, 0,68 mmol/, popsanému v příkladu 3-B ve 2,2-dimethoxypropanu /29 ml/ se zpracuje s kyselinou -para-toluensulfonovou /3.9 ,mg/ při 22 °C a. pod argonem.

Výs.ledná směs s.e míchá 17 hodin při teplotě místnosti. Přidá se voda /25 ml/ a pak kyselina p-toluensulfonová /55 mg/ a směs se míchá při teplotě místnosti další 2 hodiny. Reakční směs se pak zředí dichlormethanem /6 ml/ a zpracuje se s triethylaminem /0,195 ml/ a míchá se 15 minut při 22 °C, Směs se zahustí za~vakua a' zbytek“ se odpaří spolu.s toluenem a čistí se chromatografií na silikagelu /60 g, 30 % až 55 % ethylacetát/toluen/ a získá se titulní sloučenina /597 mg, 92 %/.

[a]^: +34.3° (c=1.0, CHCI₃).

IR (neat).Omax (cnr¹): 3700-3150 (O-H and N-H), 3070-2700 (C-H), 1720 (C=O ester ), 1650 (C=O amid ).

¹H NMR (CDCfe) δ (ppm): 0.89 (6H, t, J=6.7 Hz, 2 x -CHg), 1.24-1.35 (52H, m.p&siujfcf -C-(CH₃)2,-{CH2)iO-.-(CH₂)ii-a . -(CH₂)₅-), 1.35 a 1.48 (6H, s, _?C-(CH₃)₂), 1.56-1.63 (4H, m, 2 x -CH₂-), 2.00-2.08 (6H, m, 3 x =CH-CH2-), 2.15-2.25 (3H, m, -NHCOCH2- a -OH), 2.77 (1H, š s, -OH),

3.81 (1H, dd, J=11.1 a 5.2 Hz, H-1), 3.79-3.93 (4H, m H-1,

H-1, H-6* a H-2'), 4.19 (1H, ddd, J=6.4, 4.0 a 2.1 Hz, H-5'). 4.26 (1H; dd, J=6.6 a . 2.1 Hz, H-4'), 4.34 (1H, t, J=6.6 Hz, H-3j, 4.55 (1H, m, H-2),

4.82 (1H, d, J=3.8 Hz, H-1'), 5.36 (2H, m, c/s-CH=CH-), 5.54 (1H, dd,

J=15.3 a· 7.4 Hz, H-4), 5.66 (1H, t, J=7.4 Hz, H-3), 5.88 (1H, dt, J=15.3 ai 6.9 Hz, H-5), 6.16 (1H, d, J=9.4 Hz, -NH-), 7.44-8.05 (5H, 3m, -C₆H₅).

Elementární analýza pro ^C58^H99^N°9 ^: vypočteno 72,99 % C, 10,45 % H, 1,47 % N nalezeno 73,10 % C, 10,35 % H, 1,62 % N.

-121B. (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)1-/3,4-0-isooropyliden-2,6-di-0 -(natrium oxysulfonyl)-D-galaktopyranosylox.y/-4-oktadecen _T0—OSOjNa •Q

NHCOíCH^jCHsCHtCH* NaSO,OtJ X_>x(CH_j)₁₂CH,

CSz

OBz

Komplex oxidu sírového-pyridinu /0,693 g, 4,35 mmol/ se přidá do roztoku (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-l-(3,4-0isopropyliden-J^-D-galaktopyranosyloxy)-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)-4-oktadecenu /0,575 g, 0,6 mmol/ v pyridinu /17 ml/ při teplotě místnosti a pod argonem, reakční směs se míchá 5 hodin při teplotě místnosti, potom se přidá voda /10 ml/ a pak hydrogenuhličitAn sodný pevný /1 /1,46 g/. Rozpouštědla se odpaří za vakua a výsledný zbytek se trituruje s methanolem /25 ml/ a filtruje. Filtrát se zahustí za vakua a zbytek se čistí chromatografií na silikagelu /130 g, 10 % až 30 % methanol/chloroform/ a získá se titulní látka /0,695 g, 100 %/ jako bílá pevná látka.

[oc]q²: +38.6⁰ (c=1.0, CHCl3/MeOH 8:2).

IR (KBr) _Umax (cm-1): 3700-3150 (O-H a N-H), 2930. 2860 (C-H), 1720 (C=O ester ), 1640 (C=O amid ).

«í

-1221H NMR (DMSO-d₆) δ (ppm): 0.85 (6H, t, J=6.4 Hz, 2 x -CH₃), 1.20-1.35 (57H, m cřesainjící -C-(CH₃)₂, *(CH₂)iq-, *(CH₂)n-, (CH^g- 3 C{CH₃)₂)_I 1-39 (3H, s, -C-(CH₃)₂), 1.39-1.46 (2H, m -C-(CH₃)₂,

-CH₂-), 1.95-2.16 (8H, m, 3 x^CH-CHr a -NHCOCH2-), 3.40 (1H, dd, J=9.9 a 7.0 Hz, H-1), 3.78 (1H, dd, J=9.9 a 6.6 Hz, H-1), 3.82-3.88 a 4.09-4.13 (4H, 2m, H-6‘, H-4' a H-5’), 3.98 <1H, dd, J=8.4 ai . 5.0 Hz, H-3'), 4.0 (1H, dd, J=84 a 3.1Hz, H-2’), 4.27 (1H, m, H-2), 5.07 (1H, d, J=3.1 Hz, H-1 ’), 5.32 (2H, m, c/'s-CH=CH-), 5.51 (1H, dd, J=7.4 a 4.6 Hz, H-3), 5.55 (1H, dd,J=14.4a: 7.4 Hz, H-4), 5.74 (1H, dt, J=14.4 a 6.9 Hz,

H-5), 7.82 (1H, d, J=8.2 Hz, -NH-), 7.49-7.96 (5H, 3m, -C₆H₆).

C. {2S,3R,4E)-3-Benzoyloxy-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)1-/2,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)-/^-D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen \ .0 OSOjNa

NeSOjO ₀

NHCO(CH ib jCHsCHtCHib^ J „(CHíHíCHj

HO OSOjNe

NHCOťCHjJwCHaCHtCfyTCHa

NaSOtO ,(CHíhzCHj

Οβζ

Οβζ (2S,3E,4E)-2-benzoyloxy-l-/3,4-O-isopropyliden2,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)-{^-D-galaktopyranosyloxy/2-(cis-15-tetrakosenoylamino)-4-oktadecen /0,695 g, 0,6 mmol/ se zpracuje s kyselinou trifluoroctovou /90%, ml/ a výsledná suspenze se míchá 30 minut při teplotě místnosti. Směs se zahustí za vakua a zbytek se společně odpaří s toluenem /2 x 25 ml/. Zbytek se pak rozpustí ve směsi methanol/chloroform /2:8, 40 ml/ a zpracuje se s pryskyřicí Rexyn 102 /Na⁺/. Směs se asi 15 minut míchá. Pryskyřice se odfiltruje a promyje se směsí methanol/chloroform /2:8/. Filtrát se nakonec zahustí za vakua. Získaný zbytek se čistí chromatografií na silikagelu /150 g, 10% až 30% methanol/chloroform/ a získá se titu-lní -sloučen-i-na .....

/0,66 g, 98 %/ jako špinavě bílá pevná látka.

-1?V [αζ : +32.3° (c=1.0, CHCía/MeOH 8:2).

IŘ (KBr) Umax (cnr 1): 3700-3150 (O-H a. N-H), 2930, 2860 (C-H), 1685 (C=O amid ), 1210 (S=O).

-----------------¹-H-NMR-{DMSO-d6)5{ppm>0;83-0.86-{6Hrm;-2-x--eH3)7t20T.49(56H;-------·-----^m , -(CH2)io-, -(CH₂)i2- a -(CH₂)6-), 1.95-2.18 (8H, m, 3 x =CH-Ctí2_^a -NHCOCH2-), 3.39-3.43 (1H, m, H-1), 3.66-3.86 (6H, m, H-1, H-3', H-4‘,

H-5* a H-6'), 4.23-4.30 (1H, m,Přející H-2', H-2), 4.28 (1H, dd,

J=10.0 a 3.6 Hz, H-2'), 4.62 (1H, d, J=3.7 Hz, -OH), 4.82 (1H, d, J=3.2 Hz,

-OH), 4.86 (1H, d, J=3.6 Hz, H-1‘), 5.31 (2H, m, c/s-CH=CH-), 5.48 (1H, dd,

J=7.3a> 4.8 Hz, H-3), 5.56 (1H, dd, J=15.1 a. 7.3 Hz, H-4), 5.74 (1H, di,

J=15.1 a 6.8 Hz, H-5), 7.40-7.96 (5H, 3m, -C₆H₅), 7.82 (1H, d, 0=8.4 Hz, ^{S 3}

-NH-). = ^a

Pnkhriia (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)1-/3,4-di-0-benzoyl-2,6-di-O-{natrium oxysulfonyl)- D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen

HO OSOjNa _

NHCOÍCHJuCHaCHtCHjJyCHj po OSO/ia

NaSOjO '

NHCOtCHjJuCH^HtCHjhCHj TCHjhjCH, oez

OBz

K míchanému roztoku (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-l-/2di-O-(natrium oxysulfonyl)- -D-galaktopyranosyloxy/-2(cis-15-tetrakosenoylamino)-4-oktadecenu /205 mg, 0,18 mmol/ v pyridinu /2 ml/ při 0 °C se přidá benzoylchlorid /104 ml, 0,90 mmol/ a potom dimethylaminopyridin /1 krystal/. Směs se míchá 2 hodiny při 22 °C a opět se pak

-124opět přidá benzoylchlorid /11 ,ul, 0,09 mmol/. Směs se míchá 30 dalších minut při 22 °C, potom se přidá methanol /1,5 ml/ a v míchání se pokračuje 15 minut. Směs se odpaří za vakua a výsledný zbytek se čistí chromatografií na silikagelu /asi 130 g, 5% až 25 % methanol/chloroform/. Zbytek se rozpustí v methanol/chloroformu /12 ml, 2:8/ a zpracuje se s pryskyřicí Rexyn 102 /Na⁺/ a výsledná směs se 1 hodinu míchá, filtruje se přes mikrovláknový papír a odpaří za vakua. Zbytek se společně odpaří s toluenem a pak se čistí chromatografií na silikagelu /72 g, 10 % až 25 % methanol/chloroform/ a získá se titulní sloučenina

-----/116'mg,· 49 %/ jako bílá pevná látka. - .....—-(ccJo : +67.6° (c=1.0, CHCl3/MeOH 8:2).

IR (KBr) -Umax (cnr¹): 3700-3150 (O-H and N-H), 2930, 2860 (C-H), 1735 (C=O ester ), 1640 (C=O amid ), 1270 (S=O).

¹H NMR (DMSO-d6) δ (ppm): 0.83 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 X-CH3), 1.20-1.46 (56H, m , -(CH2)1O-, -(CH2)12- ai -(CH2)6-), 1.94-2,18 (8H, m/3 x =CHCH2- a -NHCOCH2-), 3.60 (1H, dd, J=10.1 a 7.3 Hz, H-1), 3.72 (1H, dd, J=10.3 a 6.9 Hz, H-6'), 3.79 (1H, dd, J=10.3 ai 6.4 Hz, H-6’), 3.86 (1H, dd, 4=10.0 a 5.7 Hz, H-1), 4.33-4.40 (2H, m, H-2 a H-5'}, 4.63 (1H, dd, J=10.8 a 3.4 Hz, H-2'), 5.28-5.36 (4H, m, H-1', H-3' a c/s-CH=CH-),

5.54 (1H, dd, 4=7.3 ai 4.7 Hz, H-3), 5.62 (1H, dd, J=15.0 a 7.3 Hz, H-4),

5.67 (1H, d, J=3.0 Hz, H-4'), 5.79 (1H, dt, J=15.0 a- 6.7 Hz, H-5), 7.36-9.21 (16H, 4m, 3 x-C6H5 a -NH-).

-125Příklad 14 (2Ξ, 3R,4E)-3-Hydroxy-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)1-/2,6-di-O-{natrium oxysulfonyl)-D-galaktopyranosyloxy/-4-oktaděcen

NHCO(C Hjh _aCH =CH(CHiHCH₃

NaSOjO Í

HO -OSOjhb

NflS0,0 θ νηοο<οη^,₃οη=<:η(οΗι)70Η₃ (CHj),aCH3

Οβ£

Čerstvě připravený roztok methoxidu sodného v methanolu /0,2M, 1,07 ml, 0,21 mmol/ se přidá k míchanému roztoku (2Ξ,3R,4E)-3-benzoyloxy-l-/2,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)cZ.-D-galaktopyranosyloxy/-2-(cis-15-tetrakosenoylamino) 4-oktadecenu /0,372 g, 0,33 mmol/ v methanolu /13 ml/ a dichlormethanu /13 ml/ při 22 °C a pod argonem. Směs se míchá 47 hodin, potom se přidává pryskyřice Dowex-50W 8% XL 100-200 mesh až do dosažení hodnoty pH asi 7. Pryskyřice se odfiltruje a promyje se směsí chloroform/methanol /7:3/. Filtrát se pak zpracuje s pryskyřicí Rexyn 102 /Ha⁺/ a míchá se asi 15 minut. Pryskyřice se odfiltruje a opět se promyje směsí chloroform/methanol /7:3 až 1:9/. Filtrát se pak zahustí za vakua. Zbytek se čistí chromatografií na silikagelu /80 g, 10 % až 35 % methanol/chloroform/ a získá se titulní sloučenina /0,157 g, 47 %/ jako bílá amorfní pevná látka.

-126IR (KBr) Umax (cnr¹): 3700-3100 (O-H and N-H), 2930,2860 (C-H), 1735 (C=O ester ), 1640 (C=O amid =), 1250 a 1010 (S=O).

1H NMR (DMSO-d6) δ (ppm): 0.84 (6H, t, J=6.7 Hz, 2 x -CH3), 1.22-1,50 (56H, m , -(CH₂)1O-. -(CH₂)i₂- a -(CH₂)6-), 1-89-2.12 (8H, m, 3 x =CHCfci2- a -NHCOCH2-). 3-45 (1H, dd, J=9.8 a 5.2 Hz, H-1), 3.57 (1H, dd,

J=9.8 a 3.8 Hz, H-1), 3.67-3.84 (6H, m, H-6‘, H-4‘, H-3’, H-2 a H-3),

3.97 (ÍH, št, J=6.8 Hž, H-5‘), 4.24 (1H, dd, J«10.3 a 3.6 Hz, H-2’), 4.56 (1H, d, J=4.0 Hz, -OH), 4.74 (1H, d, J=4.1 Hz, -OH), 4.84-4.86 (1H, m pkatopK H-1', -OH), 4.85-(1 H, d, J=3.6 Hz, H-1'), 5.27-5.33 (2H, m, cisCH=CH-), 5.34 (1H, dd, J=8,5 Hz, -NH-).

Příklad 15 (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2,6-di0-(natríum oxysulfonyl)-p^-D-galaktopyranosyloxy/-4oktadecen

A. {2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylaraino-l( ¢(.-D-galaktopyranosyloxy) -4-oktadecen

HO OH ^H0 A /^/(CH₂)₁₂CH₃

HO OH

Η0&Δ

HO 1 O_x

NHC0(CH,)₁₄CH₃ ,(CH₂)₁₂CH₃

OBz

OBz i2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-( A*-D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen /0,729 mg, 1,23 mmol/ popsaný v příkladu 1-G se nechá reagovat postupem obecně popsaným v příkladu 1-J a získá se 0,772 g /78 %/ titulní látky jako bílé pevné látky.

t.t.

= 59-60°C (aceton ). [oc]_D : +50.5° (¢=1.0, MeOH).

IR (NaCI, film) Umax (cm’¹): 1720 (C=O ester) ai 1650 (C=O amid ).

¹H NMR 400 MHz (DMSO -de) δ (ppm): 0.85 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 x -CH3), 1v2-^6 (48H_rmr-(GH2)n-ar--(CH2)l3-)r2:0 a- 2.09 (2 x 2Hr2m;=CH^ CH2- a -NHCOChÍ2-), 3.37-3.69 (8H, m, H-1, H-2', H-3', H-4', H-5* a. H6¹), 4.17 (1H, d, J=7.3 Hz, -OH), 4.35 (1H, d, J=4.2 Hž, -OH), 4.36 (1H, m, ffeséujkí ’ -OH, H-2), 4.50 (1H, t, J=5.5 Hz, -OH), 4.54 (1H, d, J=5.1 Hz, -OH), 4.61 (1H, d, J=2.8 Hz, H-1'), 5.47-5.55 (2H, m, H-3 a H-4 jxesahjjjH . )> 5.77 (1H, dt, J=6.5 a J=14.2 Hz, H-5), 7.50, 7.64 a 7.95 (2H, 1H a 2H, 3m, -C6H5), 7.80 (1H, d, J=9.1 Hz, -NH-).

Elementární analýza pro C^H^NO^í vypočteno 70,02 % C, 10,15 % H, 1,74 % N nalezeno 70,03 % C, 10,13 % H, 1,96 % N.

B. (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-(3,4-Oisopropyliden- o^-D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen

HO OH

CX--'⁰.

HO-X^T-A NHCOtCHjJnCHg

OBz

..(CHjJnCHg (2S,3R,4E)-3-Benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-(-Dgalaktopyranosyloxy)-4-oktadecen /0,764 g, 0,95 mmol/ se zpracuje podle obecného postupu popsaného v příkladu 1-A a získá se 0,793 g /99 %/ titulního materiálu jako hustého skla.

[α]θ²:+ 38° (c=1.0, CHCI3).

IR (NaCI, film) υ™ 0*0): 1722 (C=O ester) a 1647 (C=O amid ).

-1281H NMR 400 MHz (DMSO-d6) δ (ppm): 0.84 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 x -CH3),

1.19 (51H, m, -(CH2).11- -(CH2)13 a -C(CH3)2·). 1-34 (3H. S, -C(CH3)2-).

1.99 and 2.07 (2 x 2H, 2m, =CH-CH2- a -NHC0CH2-), 3.42-3.55 (4H, m, H-1, H-2’ a H-6'), 3.68 (1H, dd, J=5.7 a 10.3 Hz, H-1), 3.88 (1H, m, H-5'), 4.01 (1H, dd, J=5.8 a 7.1 Hz, H-3'), 4.10 (1H, dd, J=2.2 a 5.8 Hz, H^), 4Ό^Πΐΐ1η,1Τ2)74^6 (ÍH7ď7J=3?45^-HŽ7H-1‘)74.67XTHrt7J=574“Hž; ΌΗ, zarěréý- D2O), 4.80 (1H, d, J=6.5 Hz, -OH, saršě-ý poQ), 5 47 (1H. dd. J=5.8 a. 7.7 Hz. H-3), 5.51 (1H, dd, J=7.7 a 14.6 Hz, H-4), 5.76 (1H, dt, J=6.7 a 14.6 Hz, H-5), 7.48, 7.63 a 7.94 (2H, 1H a 2H, 3m, -ΟθΗβ), 7.80 (1H, d, J=9 Hz, -NH-).

Elementární analýza pro 0;-_ηΗ_θΕΝ0_ο:

ou 00 y vypočteno 71,14 % C, 10,15 % H, 1,66 % N nalezeno 71,08 % C, 10,14 % H, 1,86 % N.

C. (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/3,4-Oisopropyliden-2,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)-^-Dgalaktopyranosyloxy/-4-oktadecen

HO I O„

NHCO<CH₂)₁₄CH₃

4CH₂)1ZCH3

NHCOÍCHJuCHa NaSOiO I 7

O. ^^(CHjhjCHs

OBz

OBZ

C2S73RT4E^3-benzoyloxy-2-hexaděkanoy lamino-Ι^Γ3Τ4^Οisopropyliden-dS-D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen /0,757 mg, 0,89 mmol/ se nechá reagovat postupem obecně popsaným v příkladu 12-B a získá se 0,814 g /87 %/ titulní látky jako amorfní pevné látky.

-129[ag :+39° (c=1.0, MeOH).

IR (NaCI, film) Umax (cm’¹): 1725 (C=O ester) a 1635 (C=O amid ).

1H NMR 400 MHz (DMS0-d6) 5 (ppm): 0.85 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 X-CH3), 1.11.5 (51H, m, -C(CH3)2-, -(CH2)11- a -(0*2)13).¹³⁹ (^3Η· ^s· -^C(CH3)2-), 1.96-2.17 (4H, m, =CH-CHp- a -NHC0CH2-). 3.40 (1H, dd, J=6.9 a 9.9 Hz, H-1), 3.78 (1H, dd, J=6.7 a 9.9 Hz, H-1), 3.87 (2H, m, H-6‘), 3.99 (1H,

8:35 Hž7H-3T4:05 (lHrddr3=3;1a -8.4 Hz_;-H-2‘), 4ťl0 ' (1H, d, J=4.8 Hz, H-4¹), 4.11 (1H, m dosahující H-4', H-5), 4.27 (1H, m, H-2), 5.08 (1H, d, J=3.1 Hz, H-1'), 5.52 (1H, dd, J=4.5 a 7.4 Hz, H-3),

5.56 (1H. dd, J=7.4 a 14.4 Hz, H-4), 5.75 (1H, dt, J=6.6 a 14.4 Hz, H-5), 7.51, 7.62 a 7.95 (2H, 1H a 2H, 3m, -C6H5), 7.83 (1H, d, J=8.2 Hz,

,._-NH-). .. _______________________

Elementární analýza pro C_S0Hg₃NO₁₅S₂Na₂.3H₂O: vypočteno 54,48 % C, 8,14 % H, 1,27 % řJ nalezeno 54,63 % C, 7,52 % H, 1,44 % N.

D. (2S,3R,4E)-3-Benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2,6-diO-(natrium oxysulfonyl)-^-D-galaktopyranosyloxy/-4oktadecen

O OSQ,Na

Ma

NaSOjO I

ŇHCOfCHjkfCHj

_.{^CH2)l2^CH3

OBz

NHCOÍCHjJnCHa

OBz

Roztok (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino1-/3,4-0-isopropyliden-2,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)-^D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen /0,810 g, 0,773 mmol/ ve směsi tetrahydrofuranu /20 ml/ a 80% vodné kyseliny octové /20 ml/ se zahřívá na 55 °c 2 hodiny. Rozpouštědlo se odpaří za vakua a zbytek se čistí chromatografií na silikagelu /15 % až 30 % methanol/chloroform/ a získá se 0,708 g /91 %/ titulní látky jako sklovité- pevné látky.

-130[a]_D :+41.5° (c=1.0, MeOH).

IR (KBr) Umax (cnr¹): 1725 (C=0 ester) a 1640 (C=0 amid ).

¹H NMR 400 MHz (DMSO-ds) 3 (ppm): 0.85 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 x -CH3), 1.2- _

1.5 (48H, m, -(CH2)11- a -(CH2)13), 1.95-2.2 (4H, m, =CH-CH2- a -NHCOCH2-), 3.41 (1H, dd, J=7.1 a 10.1 Hz, H-1), 3.65-3.85 (6H, m, H-1, H-3f-H-4VH-5í-a—H-6^)_r4725-{-1H-m-_EŽKčh4íh^—Η=2'γΗ-2)7-4;29-(ΤΉ^dd, J=3.6 a 9.8 Hz, H-2’), 4.62 (1H, d, J=3.7 Hz, -OH zrfrěý

D2O), 4.83 (1H, d, J=3.4 Hz,-OH, „ zaršněný D2O), 4.86 (1H, d, J=3.6 Hz, Η-Γ), 5.49 (1H, dd, J=4.7 a 7.3 Hz, H-3), 5.56 (1H, dd, J=7.3 a 15.0 Hz, H-4), 5.73 (1H, dt, J=6.6 a 15.0 Hz, H-5), 7.50, 7.62 a 7.95 (2H, 1H a 2H, 3m, -C6H5), 7.83 (1H. d, J=8.4 Hz, -NH-).

f

Příklad 16 (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/3,4-di-Obenzoyl-2,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)- c^-D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen

HO OSOiNa ,ο&Α

NaSOsO I

NHCO{CH2)t4CH₃ .(CHjJuCHj

BzO OSOjNa

BzO-\x-T-A NHCCXCHíIhCH NaSOjO I O.

(CHiJuCHa

OBz

OBz (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2,6di-O-(natrium oxysulfonyl)-/-D-galaktopyranosyloxy)-4oktadecen /0,345 g, 0,342 mmol/ se nechá reagovat postupem obecně popsaným v příkladu 13-A a získá se 0,285 g /68 %/ titulní látky jako amorfní pevné látky po chromatografii a lyofilizaci.

-13122 í^ab

CQO Π MaOW\ •~r w V-*” ¹ *v, ιίΟ'-'ι »/.

HPLC na Zorbax Rx-C_g, 3,9 mm x 30 cm, eluce acetonitril/ 0,0114 vodný octan amonný, 75:25, průtoková rychlost 1 ,1/min, UV detektor 239 nm, retenční čas 3,8 min, čistota 94 %:

IR (KBr) (cm-¹): 1730 (C=O ester) a 1660 (G=O amid ).

¹H NMR 400 MHz (DMSO-de) δ (ppm): 0.85 (6H, t, J=6.7 Hz, 2 x -CH3), ΙΟΊ* (48H, m' -(CH2)11- á ' -(CHáh 3), 196-2.22 (2 x 2H, 2ωΓ=ΟΗ-<3Η2a -NHCOCH2-). 3.71 (1H, .§ t, H-1), 3.80 (1H,.dd, J=5.8 a 10.2 Hz, H1), 4.0 (2H, d, Η -6'), 4.37 (1 , H-5'), 4.65 (1H, dd, J=3.3 a 10.8

Hz, H-2’), 4.9 (1H, šinký, H-2), 5.20 (1H, d, J=3.3 Hz, H-1), 5.26 (1 H,§ d,

H-3'), 5.48 (1H, dd, J=8.4 a 15.3 Hz, H-4), 5.66 (1H, § s, H-4’), 5.80 (1H, dt, J=6.6 a J=15.3 Hz, H-5), 5.92 (1H, t, H-3), 7.35-8.2 (16H, m, 3Χ-Ο6Η5 a -NH-).

Příklad 17 (2S,3R,4E)-2-Hexadekanoylamino-3-hydroxy-l-/2,6-di-O-(natrium oxysulfonyl) - {( -D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen

HO OSO,Na ο&Δ NaS0,0 I

NHCOfCHjJuCH, _ '(CHJuCH,

OBz

(2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2, 6άΐ’-Ο-(natriům oxysulfonyl)-0Č-D-galaktopyranosyloxy/-4oktadecen /0,200 g, 0,198 mmol/ se nechá reagovat postupem obecně popsaným v příkladu 14-A a získá se 0,141 g /79 %/ titulní látky jako amorfní pevné látky.

-132[a]_D :+40° (c=0.53, MeOH).

HPLC na Zorbax Rx-Cg, 4,6 mm x 25 cm, eluce acetonitril/

0,01M vodný očtan amonný, 60:40, průtoková rychlost 1 ml/min, UV detektor 210 nm, retenční čas 4,5 min, čistota 99 5:

IR (KBr) Umax (cm*¹): 1630 (C=O amid ).

¹H NMR 400 MHz (DMSO-d6) δ (ppm): 0.84 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 x -CH3), 1.11.5 (48H, m,-(CH2)H-a -(CH2)13). 1.42a 1.92 (2 χ 2H, 2m, =CHCH2- a -NHCOCH2-), 3.46 (1H, dd, J=5.3 a J=10.0 Hz, H-1), 3.58 (1H, dd, J=3.9 a 10.0 Hz, H-1), 3.65-3.85 (6H, m, H-2, H-3', H-4¹, H-5' a H6*), 3.97 (1H, m, H-3), 4.25 (1H, dd, J=3.7 a 10.3 Hz, H-2¹), 4.57 (1H, d, J=4.0 Hz, -OH, zarěnsý D2O), 4.74 (1H, d, J—4.1 Hz, -OH, zaněrrý D2O), 4.85 (1H, d, J=1.6 Hz, -OH zamařáý D2O), 4.86 (1H, d, J=3.7 Hz, Η-Γ), 5.34 (1H, dd, J=6.8 a 15.4 Hz, H-4), 5.54 (1H, dt, J=6.7 a 15.4 Hz, H-5), 7.48 (1H, d, J=8.6 Hz, -NH-).

Příklad 18 (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2,3-di-Obenzoyl-4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)- ,^-D-mannopyranosyloxy/-4-oktadecen

OAc

A. (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(2,3,4,6-tetra-0acetyl- t/.-D-mannopyranosyloxy) -4-oktadecen / OAe

OAe

oez

-133Roztok (23,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-4-oktadecen1-olu /1,0 g, 2,43 mmol/ a 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-^ D-mannopyranosylbromidu /0,36 g, 2 mmol/ v dichlormethanu se ochladí na -25. °C a zpracuje se s triflátem stříbrným /0,625 g, 2,43 mmol/ po 1 hodině míchání se reakce přeruší ___přídavkem.kollidinu- /0,606 g, 5- mmol/. Nerozpustná- Sůl---------------se filtruje přes Celíte. Filtrát se promyje studenou zředěnou kyselinou chlorovodíkovou a potom solankou. Po sušení nad síranem horečnatým se rozpouštědlo odpaří a zbytek se chromatografuje na silikagelu /5 až 10 % ethylacetát/hexan/ a získá se titulní sloučenina /0,837 g, 55 %/.

IR (CH2CI2) Omax (cm-1): 2105 (-N3), 1752 (-OAc), 1723 (-OBz).

1H NMR 400 MHz {CDCI3) 5 (ppm): 0.89 (3H, t, >6.83 Hz, -CH3), 1.25 (2 OH, _ěs, -(CH2)1O). 1-39 (2H, m, -CH2-), 2.01, 2.06, 2.07, 2.17 (4x3H, 4 S,

4-OAc), 2.09 (2H, m, CH2 ally'u), 3.55 (1H, dd, >10.67 a 8.28 Hz, H-1),

3.84-(1 H, dd, >10.73 a 3.85 Hz, H-1), 3.99-4.04 (2H, m, H-2, H-5*), 4.11 (1H, dd, >12.25 a 2.33 Hz, H-6'), 4.29 (1H, dd, >12.27 a 5.34 Hz, H6*), 4.89 (1H, d, >1.55 Hz, H-1*), 5.27-5.32 (2H, m-2', H-4*), 5.37 (1H, dd, >10.02 a 3.25 Hz, H-3'), 5.56-5.62 (2H, m, H-3, H-4), 5.91-6.00 (1H, m,

H-5), 7.45-8.07 (5H, 3m, -C6H5).

B. ( 2S, 3R, 4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-( <?(-D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecen

OAc

CBz

OH

Οβϊ

-134Roztok (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-l-{2,3,4,6ťetra-O-acetyl-íX,-D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecenu /0,329 g, 1,09 mmol/ v ethanolu /15 ml/ se zpracuje při teplotě místnosti s 1,5-diazabicyklo|4.3.0j-non-5-enem /0,135 g, 1,09 mmol/. Po 30 minutách byla určitá debenzylace_zjevná a reakční směs byla ochlazena na ledu. Po dalších 180 minutách se přidá kyselina octová /0,066 g, 1/1 mmoL/ a rozpouš-tědl-o—se^-odpaří-T—zbytek^-se—čist-í—ehromatogra-f-i-í—n-a— silikagelu /5 až 10 % methanol/dichlormethan/ a získá se titulní sloučenina /0,51 g, 79 %/ jako sklovitý sirup.

IR (CH2CI2)) Omax (cm’1): 3600, 3400 (-OH), 2108 (-N3), 1721 (-OBz)

1H NMR 400 MHz (DMSO-d6) δ (ppm): 0.83 (3H, t, J=7.0 Hz, -CH3), 1.101.40 (22H, šs, -(CH₂)11), 2.02 (2H, m, CH₂ allyl u), 3.7-3.28 (7H, m, H-1, H-2', H-3', H-4’, H-5\ 2 x H-6'), 3.80 (1H, dd, J=10.61 a : 4.50 Hz, H-1),

4.10 (1H, m, H-2), 4.64 (1H, d, J=1.38 Hz, H-1'), 5.48-5.90 (3H, 2m, H-3, IH4, H-5), 7.48-8.0 (5H, 3m, Ar).

C. (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(4,6-O-benzyliden(-D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecen

Roztok (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-l-( e(-Dmannopyranosyloxy)-4-oktadecenu /0,750 g, 1,27 mmol/ a benzaldehyddimethylacetalu /0,193 g, 1,27 mmol/v dichlormethanu /10 ml/ a acetonitrilu /25’ ml/še 'ochladí’ na 5 °c

-135a po kapkách se zpracuje s trimethylsilylchloridem /0,138 g, 1,27 mmoL/. Po 30 minutách se přidá další'benzaldehyddimethylacetal /0,097 g, 0,64 mmoL/. Po míchání dalších 30 minut se roztok zředí ethylacetátem a promyje se studenýmhydrogenuhličitanem sodným a solankou. Po sušení ' /síran-hořečnatýZ-se organická fáze odpaří a surový produkt se chromatografuje na silikagelu /10 % acetonitril v dichlormethanu/ a získá se titulní sloučenina /507 mg, 59 %/ jako bezbarvá guma.

IR (CH2CI2) Um» (cm'¹): 3595 (-OH), 2150 (-N3), 1721 (C=O).

¹H NMR 400 MHz (DMSO) δ (ppm): 0.84 (3H, t, J=6.81 Hz, -CH3), 1.10-1.40 (22H, š_s, -(CH2)11), 2.04 (2H, m, CH2 allylu), 3.51 (TH, dd, J=7.4a 10.4 Hz, H-1), 3.64 (1H, m, H-5'), 3.70-3,90 (5H, 2m, H-6*, H-4', H-3*, H-2', H-1), 4.09 (1H, dd, J=4.62 a 9.81 Hz, H-6'), 4.18 (1H, m, H-2), 4.73 (1H, s, H-1’), 5.58-5.70 (3H, m, H-3, H-4, -OCHO-), 5.83-5.89 (1H, m, H-5), 7.34-8.0 (10H, 5m, 5-C6H5).

D. (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoýloxy-l-(2,3-di-O-benzoyl4,6-O-benzyliden-0<( -D-mannopyranosyloxy) -4-oktadecen

—136—

Roztok (2S,3R,4E)-2-azido~3-benzoyloxy-l-{4,6-0benzyliden-ÍÍ.-D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecenu /500 mg,

0,74 mmol/ v pyridinu /5 ml/ se ochladí na ledu a zpracuje se s benzoylchloridem /620 mg, 4,41 mmol/ a 4-dimethylaminopyridinem /10 mg/. Směs se míchá při 5 °C 1,5 h a 20 °C

20~hodi-n-7 - po tom-se-přiďá-methanoí“/’tmT/-a“mfchá^s e------------další hpdinu. Roztok se zředí ethylacetátem a promyje se studeným hydrogenuhličitanem a solankou, po sušení nad síranem hořečnatým Se organická fáze odpaří s surový produkt se čistí chromatografií na silikagelu /10 % ethylacetátu v hexanu/ a získá se 631 mg /97 %/ titulní sloučeniny.

IR (CH2CI2) Umax (cm-1): 2110 (-N3), 1730 (-OBz).

1H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (3H, t, J=6.86 Hz, -CH3), 1.24-1.55 (22H, š sa m,-(CH₂)ii), 2.10 (2H, m, CH₂ ailylu), 3.59 (1H,dd,

J=10.55 a 8.31 Hz, H-1), 3.95 (2H, dd, J=10.55 a . 4.08 Hz, H-1', t, 3

J=10.27 Hz, H-6'), 4.06-4.16 (2H, m, H-2, H-5’), 4.30-4.40 (2H, dd, J=10.10 ' y a 4.80 Hz, H-6', t, J=9.97 Hz, H-4'), 5.09 (1H, d, J=1.83 Hz, H-1'), 5.555.66 (2H, m, H-3, H-4), 5.67 (1H, s, -OCHO-), 5.76 (1H, dd, J=3.53 a 1.51

Hz, H-2'), 5.83 (1H, dd, J=10.27 a 3.56 Hz, H-3'), 6.0 (1H, m H-5), 7.308.10 (20 H, 5m, Ar).

E.-(2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-(2,3-di-O--benzoyi-4-7-6-0-benzy-l-iden--*(—D-mannopyranosyToxyj-4--oktadecen

Ph-^γΒ2θ-Χ-*<Δ NHCOtCH^iCth ^5s^(CH2)₁₂CH₃ oetz

Οβζ

-137Sirovodík se 10 minut probublává roztokem (2S,3R,4E)-2azido-3-benzoyloxy-l-(2,3-di-0-benzoyl-4,6-O-benzyliden-/yD-mannopyranosyloxy)-4-oktadecenu /382 mg, 0,43 mmol/ v pyridinu /10 ml/ a vodě /2 ml/. Tento roztok se míchá při teplotě místnosti 18 hodin a opět se zpracuje s po 5 minut. Po 8hodinovém stání se opět do roztoku probublává další H^S /5 minut/. Výchozí materiál zmizí po dalších 20 hodinách. Rozpouštědlo se odpaří á zbytek se azeotropně destiluje třikrát s toluenem. Surový amin se rozpustí ve směsi tetrahydrofuranu /12 ml/ a 50% vodného octanu sodného /2 ml/. K této směsi se po kapkách přidá palmitoylchlorid _ /118 mg,-0,43 .mmol/.. Po 30 minutách se-reakční směs..zředí - ethylacetátem a promyje se nasyceným hydrogenuhličitanem sodným a solankou. Organická fáze. se.suší nad síranem, hořečnatým a odpaří se. Surový produkt se čistí chromatografií. na silikagelu /1 % acetonitrilu v dichlormethanu/ a získá se 240 mg /51 %/ titulní sloučeniny.

IR {CH2CI2) Umax (cm-¹): 1730 (-OBz), 1677 (amid ), 1603 (>=<) .

¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (6H, 2 pfeedijící t, 2 x CH3), 1.23-1.39 (46H, m, a gs, -(CH2)11- a -(CH2)12), ¹·θ7 (2H, m, -(CH2)-). 2.09 (2H, m, CH2 allyl ), 2.27 (2H, m, -COCH2-), 3.75 (1H, dd, J=3.86 a; 10.47 Hz, H-1), 3.92 (1H, t, J=10.27 Hz, H-6’), 3.96 (1H, dd,

J=4.32 a 10.62 Hz, H-1), 4.05 (1H, m, H-5'), 4.30 (1H, t, J=9.61 Hz, H-4),

4.32 (1H, dd, J=4.06 a¹ 10.33 Hz, H-6), 4.57 (1H, m, H-2), 4.96 (1H, d, J=0.94 Hz, H-1'), 5,58-5.71 (3H, m, H-3, H-4, -OCHO-), 5.73 (1H, dd, J=1.41 ai 3.53 Hz, H-2^r), 5.79 (1H, dd, J=3.57 a, 10.23 Hz, H-3'), 5.97 (2H, m, H-5, =NH), 7.31-8.08 (20H, 6 m, Ar).

F. (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-(2,3-di0-benzoyl- a( -D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecen

-138OH / Ofi£

08z

1)1 jCH,

NHCO(CHj)₁₄eh, ^(CH^CHj oez “ K~ro rtoku^-^ Ξ—3Rt4'E j^3~=be'n’z'óy loxy- 2-hexad^kanoy lamí no-l-{2,3-0-benzoyl-4,6-benzyliden-/,-D-mannopyranosyloxy 4-oktadecenu /240 mg, 0,218 mmol/ v dichlormethanu /10 ml/ se přidá 90% vodná kyselina trifluoroctová /0,15 ml/. Protože reakce není úplná po 24 hodinách při teplotě místnosti·, přidá se další činidlo /50% TFA-voda, 0,3 ml/ a v míchání se pokračuje dalších 16 hodin, reakční směs se pak nalije’ do nasyceného hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje se ethylacetátem. Extrakty se promyjí solankou, suší a odpaří. Surový diol se čistí chromatografií na silikagelu /0-15 % acetoňitrilu v dichlormethanu/ a získá se 176 mg /80 %/ titulní sloučeniny.

* ¹H NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): 0.89 (6H, t; J=6.72 Hz, 2X-CH3), 1.25l. 40 (46H, š s, -(CH2)12- a -(CH2)11), 1 ..66 (2H, m, -CH2-), 2.08 (2H, m, CH2 allyb), 2.25 (3H, m, N-COCH2, -OH), 2.85 (1H, d, J=4.97, -OH), 3.79 (1H, dd, J=5.12 a 10.73 Hz, H-1), 3.87 (1H, m, H-5'), 3.93-4.01 (3H, m, 2 X H-6', H-1), 4.30 (1H, dt, J=4.92 a. 9.68 Hz, H-4'), 4.60 (1H, m, H-2), 4.90 ; ; (1H, d, J=1.60 Hz, H-1'), 5.51 (1H, dd, J=3.38 a 9.80 Hz, H-3'), 5.58 (1H, dd, J=1.72 a 3.28 Hz, H-2'), 5.55-5.67 (2H, m, H-3, H-4), 5.90-5.97 (2H, m, H-5, NH), 7.75-8.06 (15H, 6m, Ar).

-139G. (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2,3di-O-benzoyl-4, 6-di-(natrium oxysulfonyl)-^ -D-mannopyranosyloxy/-4-oktadecen

OH / C&.

NHCOÍCHducha

CQZ

C8í

Roztok (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino1- (2,3-di-0-benzoyl- £-D-mannopyranosyloxy/-4-oktadecenu /217 mg, 0,214 mmol/ a komplex oxid sírový-pyridin /136 mg, 0,851 mmol v pyridinu /15 ml/ se zahřívá na 60 °C 16 hodin. Reakční směs se ochladí /led-voda/ a přidá se hydrogenuhličitan sodný /197, mg, 2,4 mmol/ ve vodě /4 ml/ .

Celá směs se odpaří dosucha a zbytek se azeotropně destiluje s toluenem. Zbylá pevná látka se trituruje v chloroform-methanolu /4:1/ a filtruje. Nakonec se filtrát odpaří a surový produkt se čistí chromatografii na silikagelu /5, 10,15 % methanol v chloroformu/, a získá se 235 mg produktu. Tento sklovitý produkt se rozpustí ve 20% methanol-chloroformu a míchá se 1 h za přítomnosti pryskyřice Amberlite IKF-64 /Na forma, 850 mg/. Směs se pak filtruje a pryskyřice se promyje methanol-dichlormethanem /1:1/. Filtrát se odpaří dosucha, disulfát se znovu rozpustí v dioxanu, vymrazí a lyofilizací se získá 240 mg /92 %/ titulní sloučeniny jako bílé pevné látky.

-140IR (Nujol) Umax (cnr¹): 1725 {-OBz), 1650 (N-CO), 1602 (>=<).

1H NMR 400 MHz (DMSO-d6) δ (ppm): 0.85 (6H, 2 uesatující t, 2 x CH3), l, 10-1.33 (46 H, m a, Š s, -(CH2)l2-> -(CH2)11-). 1-46 (2H, m -CH2-), 2.02-2.13 (4H, m, -COCH2-, CH2 allyíu,, 3.61 (1H, dd, J=6.96 a 10.52 a 10.57 Hz, H-1), 3.95 (1H, dt, J=1.32 a. 9.61 Hz, H-6'), 4.35-4.46 (3H, m, H-4‘, H-6¹, H-2)· 4-95 (1H, d, J=0.98 Hz. H-1¹). 5.41-5.46 (2H, m, H-2', H3'), 5.51 (1H, m, H-3), 5.61 (1H, m, H-4), 5.79 (1H, m, H-5), 7.35-8.03 (16H, cfHa m, N-H, 3x - Ar).

Příklad 19 (2S,3R,4E)-l-/2-0-benzoyl-3,4,6-tri-0-(natrium oxysulfonyl)¢(-D-galaktopyranosyloxy/-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-4-oktadečen

A. (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-l-(6-0-terc.butyldimethylsilyl-3,4-O-isopropyliden- /^-D-galaktopyranosyloxy)2-hexadekanoylamino-4-oktadecen ,0 OTBOMS

NHCO(CHi)i4CHj

-^xíCHzhaCHs

OBz

NHCO(CHi),«CH₃

OBz

Roztok (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino1—(3,4-O-isopropyliden- ΐ^-D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecenu /1,51 g, 1,79 mmol/ v suchém pyridinu /25 ml/ se zpracuje při 0 °C s terč.butyldimethylsilylchloridem /0,32 g, 2,12 mmol/ a výsledná směs se míchá při 22 °C 18 hodin. Potom se přidá další terc.butyldimethylsilylchlorid /0,12 g,

0,80 mmol/ a roztok se dalších 6 hodin míchá. Reakční směs se pak zahus tí“za'“vakua'. Zbytek získaný'po odpařeni se

-141chromatografuje na silikagelu úeluce toluenem-ethylacetátem 8:2/ a získá se 1,34 g /78 %/ titulní látky jako bílého skla.

[a]|ý +45° (c=1.0, CHCI3).

______IR (NaCI, film) Umax (cnr¹):1738 (C=O ester) and 1645 (C=O amid ).

¹H NMR 400 MHz (CDCI₃) δ (ppm): 0.07 a 0.08 (2 x 3H, 2s/SiCH₃), 0.9 (15H, m, Si-t-Bu a 2 x CH₃), 1.3 and 1.6 (48H, m, (CH₂)n a (CH₂)₁₃)

1.34 a 1.48 (2 x 3H, 2s, C(CH₃)₂), 2.04 (2H, m, COCH₂), 2.18 (2H, m, =CHCH₂), 2.69 (1H, d, J=6.4 Hz, OH, zapěný . D₂O), 3.68 (1H, dd, J=4.7

- ar 10.8 Hz, H-1), 3.75 (1H, dd, J=6.4 a. 3=10.0 Hz, H-6¹), 3.75 (1H, m přesahující , H-6¹, H-2‘), 3.84 (1H, dd, J=6.7 a J=10.0 Hz, H-6), 3.88 (1H, dd, J=3.4 a J=10.8 Hz, H-1), 4.10 (1H, m, H-5'), 4.25 (2H, m, H-3’ a H-4’), 4.51 (1H, m, H-2), 4.73 (1H, d, J=3,64 Hz, H-1’), 5.54 (dd, J=7.5, H-4), 5.66 (1H,šín±ý t, J=7.3 Hz, H-3), 5.88 (1H, dt, J=6.75 a J=15.3 Hz, H-5), 5.96 (1H, d, J=9.3 Hz, NH), 7.45, 7.58 a 8.03 (2H, 1H a 2H, 3m, C₆H₅).

Elementární analýza pro CggHggNOgSi: vypočteno 70/17 % C, 10/41 % H, 1,46 % N nalezeno 70,25 % C, 10,53 % H, 1,53 % N.

B, (2S,3R,4E)-l-(2-0-benzoyl-6-0-terc-butyldiinethylsilyl3,4-O-isopropyliden-0( -D-galaktopyranosyloxy)-3-benzoyl oxy-2-hexadekanoylamino-4-oktadecen

O OTBOMS

NHCO(CHí)uCH3 .(ČHahzCHa \ .0 OTBDMS

BzO ’

NHCO(CH!)l4CH3

-142Roztok (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-l-(6-0-terč.butyldimethylsilyl-3,4-0-isopropyliden- -D-galaktopyranosyloxy ).-2-hexadekanoylamino-4-oktadecenu /1,29 g, 1,34 mmol/ v pyridinu /25 ml/ se zpracuje při 22 °C s banzoylchloridem /0,31 ml,

2,67 mmol/ a 4-dimethy.laminopyridinem /0,020 g/. Po 1 ho'ďině^—S’epřidá methahol 75 ml/ a roztok se odpaří za vakua. Zbytek se zředí ethylacetátem /200 ml/, promyje se nasyceným hydrogenuhličitanem sodným, solankou a suší se /si»ť.......

ran horečnatý/. Odpařením rozpouštědla za vakua se získá olej, který se chromatografuje na silikagelu /23 x 13 cm/. Elucí gradientem ethylacetátu /0-6 %/ v toluenu se získá 1/35 g /94 %/ titulní látky jako bílé amorfní pevné látky,..

[a]p: + 50° (c=1.0, CHCI₃).

IR (KBr) Umax (cnr¹): 1725 (C=O ester) a 1648 (C=O amid-).

¹H NMR 400 MHz (CDCI₃) δ (ppm): 0.1 a: 0.105 (2 x 3H, 2s, SiCH₃), 0.9 (15H, m, Si-t-Bu a 2 x CH₃), 1.1-1.6 (48H, m, (CH₂)n a (CH^u), 1.36 a 1.55 (2 x3H, 2s, C(CH₃)₂), 1.95-2.08 (4H, m. COCH₂ a- =CH-CH_?).

3.62 (1H, dd, J=5.2 a J=10.6 Hz, H-1), 3.8-3.9 (2H, m, H-1 a H-6'), 3.92 (1H, dd, J=6.8 a. J=9.95 Hz, H-6')_t 4.12 (1H, m, H-5'), 4,34 (1H, dd, J=2.3 a J=5.5 Hz, H-4'), 4.46 (1H, m, H-2), 4.50 (1H, dd, J=7.7 a J=5.5 Hz, H3’), 5.04 (1H, d, J=3.6 Hz, H-1'), 5.19, (1H, dd, J=7.7 a J=3.6 Hz, H-2'),

5.48 (1H, dd, J=15.1 a J=7.3 Hz, H-4), 5.55 (1H, a^t, H-3), 5.63 (1H, d, J=9.2 Hz, NH), 5.78 (1H, dt, J=15.1 and J=6.7 Hz, H-5), 7.42, 7.54, 7.96 ~a 8.06 (4H, 2H, 2H a 2H, 4m,2xC₆H₅).

Elementární analýza pro 3^Ηχθ^: vypočteno 71,21 % C, 9,77 % H, 1,32 % N nalezeno 71,40 % C, 9,77 % H, 1,42 % N.

-143C. (2S,3R,4E)-1- (2-0-benzoyl-¢( -D-galaktopyranosyloxy-3benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-4-oktadecen

OBz

OBz ·*, ] l -λ 1

Roztok (2S,3R,4E)-1-(2-O-benzoyl-S-O-terč.butyldimethylsilyl-3,4-0-isopropyliden-^-D-galaktopyranosyloxy“2-hexadekanoylamino-4-oktadecen /1,31 g, 1,23-mmol/ v-~ . _ dichlormethanu /50 ml/, se zpracuje při 22 °C s 5 ml 90% vodné kyseliny trifluoroctové. Po 1,5 hodině se reakční směs zředí dichlormethanem /200 ml/, promyje se nasyceným hydrogenuhličitanem sodným, solankou a suší se /Síran horečnatý/. Zbytek získaný po odpaření rozpouštědla za vakua se chromatografuje na silikagelu /2,5 x 13 cm/. Elucí gradientem methanolu /0-10 %/ v chloroformu se získá 0,852 g /76 %/ titulní látky jako amorfní pevné látky.

[ajg:+50.5°(c=1.0, CHCI₃).

IR (KBr) (cm·¹): 1722 (C=O ester) a> 1642 (C=O amid ).

¹H NMR 400 MHz (DMSO-d6) δ (ppm): 0.844 and 0.846 (2 x 3H, 2t, J=6.6 a J=6.3 Hz, 2 x CH₃), 1.1 -1.4 (48H, m, (CH₂)n a (CH₂)₁₃), 1.8 - 2.0 (4H, m, COChha =CH-£H2), 3.41 (1H, dd, J=10.3 a J=7.1 Hz, H-1),

3.52 (2H, m, .zghraje AB část ABX systému po D₂Ovýrěš. Jax = 5.75, J_Bx = 6.6 a Jab = 10.9 Hz, Δν = 23.9 Hz, CH2 OH-6’), 3.71 (1H, dd,

-144J=10.3a J=4.5 Hz, H-1), 3.T4 (1H, g^i^· t, H-5*), 3.84 (1H. m, d,

J-3.2 Hz □□ D₂O výiěně > H-4'), 4.0 (1H, m, z^mje dd pO D₂O výměně , J=10.3 a J=3.2 Hz, H-3'), 4.30 (1H, m, H-2), 4.60 (1H, t, J=5.5 Hz, OH, zaraéý D₂O), 4.76 (1H, d, J=4.38 Hz, OH, . D₂O),

--------495(1 _HrdrJ=3;6-_Hzr_H-₁')r4;97-(₁HrdrJ=6:₆-Hzr_OHr^ěHv'~_D2O)7------5.08 (1H, dd, J=10.3a J=3.6 Hz, H-2j, 5.42 (1Η, dd, J=7.5 ε J=5.8Hz,

H-3), 5.50 (1H, dd; J=15.1 a J=7.5 Hz, H-4), 5.72 (1H, dt, J=15.1 a

J=6 68 Hz, H-5), 7.81{1H, d, J=8.9 Hz, NH), 7.46, 7.61, 7.87 a 7.97 (4H,

2H, 2H a 2H, 4m, 2 xC₆H₅).

Elementární analýza pro ^C54^Hg5^NOiQ^: vypočteno 71,41 % C, 9,43 % H, 1,54 % N nalezeno 71,36 % C, 9,39 % H, 1,60 % N.

D, (2S,3R,4E)-l-/2-0-benzoyl-3,4,6-tri-0-(natrium oxysulfonyl )- -D-galaktopyranosyloxy/-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-4-oktadecen

OBz OBz

Roztok (2S,3R,4E)-1-(2-O-benzoyl-e^-D-galaktopyranosyloxy)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-4-oktadecenu /0,80 g, 0,88 mmol/ v suchém pyridinu /40 ml/ se zpracuje s komplexem oxidu sírového-pvridinu /1,68 g, 10,6 mmol/ a výsledná směs se míchá při 60 °C 24 hodin. Ochlazená reakční směs se pak zpracuje s vodou /5 ml/ a po 10 min se 2 g pevného hydrogenuhličitanu sodného. Po ukončení vývoje planu se_wroztok„ odpaří dosucha^a-zbytek-se trituruje se směsí chloroformu a methanolu /7:3/ a. filtruje se.

-145Filtrát se zahusti a chromatografuje se na silikagelu /2,5 x 13 cm/. Elucí gradientem methanol- voda - chloroform /od 20:0:80 do.40:10:50/ se získá 1,06 g /99 %/ titulní látky jako sklovité pevné látky.

[a]_D: + 68.6° (c=T.O, CHCI₃-MeOH; 7-3)._________________

HPLC na Zorbax RCX-8, 4,6 x 250 mm, eluce 25% 0,0lM vodným .o.c.t.an.em_amo-n-ným-v—aceton-i-t-r-í-l-u-,—p-r-ů-tok-ová—rych-lost—0v5—ml/min, UV detektor 239 nm, retenční čas 6,3 min, čistota 95,5 %.

IR (KBr) υ™ (cm'¹): 1725 (C=O ester) a 1650 (C=O amid).

¹H NMR 400 MHz (DMSO-d6) δ (ppm): 0.84 (6H, t, J=6.7 Hz, 2 x CH₃), 1.0 1.4 (48H, m, (CH₂)n a (CH^ia), 1.6 -1.9 (2H, m, =CH-CH2), 1.97 (2H, m, COCth), 3.49 (1H, dd, J=10.6 a >8.1 Hz, H-1), 3.81 (1H, dd, >10.6 a >4.1 Hz, H-1), 3.85 (1H, dd, >12.1 a> >8.6 Hz, H-6'), 4.09 (1H, dd, >12.1 a >2.3 Hz, H-6'), 4.18 (1H, m, H-5'), 4.2 (1H, m, H-2), 4.71 (1H, dd, >10.6 a >3.07 Hz, H-3'), 4.81 (1H, d, >3.07 Hz, H-4'), 5.03 (1H, dd, >10.6 a >3.7 Hz, H-2'), 5.09 (1H, d, >3.7 Hz, H-1’), 5.37 (1H, dd, >7.4 a >5.1 Hz, H-3), 5.50 (1H, dd, >15.3 a >7.4 Hz, H-4), 5.66 (1H, dt, >15.3 a >6.7 Hz, H-5), 7.79 (1H, d, >8.5 Hz, NH), 7.41,7.48, 7.59,7.87 a. 8.02 (4 x 2H, 4 x m, 2 x C₆H₅).

Elementární analýza pro ^C54^H82^NO19^S3^Na3·^4H2^O: vypočteno 50,42 % C, 7,05 % H, 1,09 % N nalezeno 50,35 % C, 6,69 % H, 1,17 % N.

Příklad 20 (2S,3r,4E}-2-Hexadekanoylamino-3-hydroxy-l-/3,4-tri-O(natrium oxysulfonyl)-(?/-D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen

-146NaOsSO .OSO?** bílo

NaO^OA—TA BzO

NHCO(CH2)₁₄CHj

OBz

NaOjSO _z ^osPj^Na (Xo

HaOjSOA^SA ι_!λ *

NHCOÍCH^CH,

Roztok (2Ξ,3R,4E)-l-/2-0-benzoyl-3,4,6-tri-O-(natrium oxysulfonyl)- ;/-D-galaktopyrano5yloxy/-3-benzoyloxy-2hexadekanoyiamino-4-oktadecen /0,411 g, 0,339 mmol/ ve směsi methanolu /25 ml/ a dichlormethanu /25 ml/ se zpracuje při 22 °C a pod argonem s 5 ml 0,2M roztoku methoxidu sodného v methanolu. Po 18 hodinách se přidá voda /5 ml/ a reakčni směs se neutralizuje pryskyřicí Dowex 50W 8%

XL 100 /H⁺/ a filtruje. Filtrát se zpracuje s pryskyřicí Amberlite IRC-50 /Na⁺ / a filtruje a chromatografuje se na silikagelu. Elucí gradientem methanol - voda- chloroform /od 20:0:8O-do-40íl0:50/ se získá.0,257 g /75 %/ titulní látky jako bílé pevné látky po trituraci s methanolem.

[<x]^:+21° (¢=1.0, H₂O).

IR (KBr) vmax (cm'¹): 1640 (C=O amid ).

¹H NMR 400 MHz (DMSO-d₆) 6 (ppm): 0.85 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 x CH₃), 1.21.5 (48H, m, (CH₂)h at (CH₂)₁₃), 1-93 (2H, m, =CH-CH₂), 2.06 (m, 2H, COCH₂), 3.56 (1H, m, H-1), 3.63 (1H, m, dd _po D_aO výměně J=10.1 a J=3.6 Hz, H-2·). 3.65-3.75 (2H, m, H-2 a H-5’), 3.79 (1H, dd, J=11.0 a J=7.6 Hz, H-1), 3.95 (1H, m.šircký t po D₂O^ýtaiě ' H-3), 4.0-4.1 (2H, m, CH?O-6*). 4.33 (1H, dd, J=10.1 a J=3.1 Hz, H-3'), 4.47 (1H, d,

J=7.8 Hz, OH, zjiěráý D₂O), 4.7(1H, d, J=3.1 Hz, H-4'), 4.77 (1H, d,

J=3.7 Hz, H-1'), 4.86 (1H, d, J=5.9 Hz, OH, D₂O), 5.36 (1H, dd,

J=15.3 a J=6,9 Hz, H-4), 5.53 (1H, dd, J=15.3 a J=6.6 Hz, H-5), 7.61 (1H, d, J=8.7 Hz, NH).

-147Elementární analýza pro C^gH^NO^SgNag vypočteno 43,12 % C, 7,78 % H, 1,26 % N .6H₂O:

nalezeno 43,35 % C, 7,02 % H, 1,33 % N.

Příklad 21 (2S, 3R,„4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2-0-(4methoxybenzyl)-3,4-tri-O-(natrium oxysulfonyl)--D-galaktopyranosvloxy/-4-oktadecen

A. (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-l-/2-0-(4-methoxy- —benzyl) -o^ -D-galaktopyranošýloxýy-^-oIčtaděcěn '' ' '

OBz OBz

Roztok (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-1-/2-0-(4methoxybenzyl)-3,4,6-tri-O-acetyl-ů( -D-galaktopyranošyloxy/-4-oktadecenu /1,30 g, 1,55 mmol, popsán v příkladu 1, stupeň F/_ ve směsi methanolu. /25 ml/ a dichlormethanu /10 ml/ se zpracuje při 0-5 °C s 0,8 ml /0,16 mmol/ 0,2M roztoku methoxidu·sodného v methanolu. Po 7 hodinách se reakční směs neutralizuje iontovýměnnou pryskyřicí Dowex 50-W 8% XL /H⁺/, filtruje a zahustí. Chromatografií zbytku na silikagelu /3 x 10 cm, eluce gradientem ethylacetá tu v toluenu 50 až 100 %/ se získá .0,96 g /87 %/ titulní látky jako hustého oleje.

[α]β²: +45.4° (c=1.0, CHCI₃).

IR (NaCI, film) vmax (cm'¹): 2110 (N₃), 1720 (C=O ester).

-148¹H NMR 400 MHz (DMSO-de) δ (ppm): 0.85 (3H, t, J=6.8 Hz, CH₃), 1.1-1.4 (22H, m, (CH₂)i i). 2.03 (2H, m, =CH-CH?). 3.4-3.5 (4H, m, H-1, H-3 ai CH₂O-6'), 3.54 (1H, dd, J=9.5 a, J=3.5 Hz, H-2), 3.62 (1Ht, H-5'),

3.7 (3H, s, OCH₉). 3.71 (1H. m, H-4'), 3.77 '(ÍH, dd, J=í0.7 a J=4.5 Hz, H1), 4.09 (1H, m, H-2), 4.45-4.55 (4H, m, 2 x OH a Ο£ί±> Ar; 2 x OH zaěwý DaOpotóáABsystén Jas=1 1-9 Hz, Δν=6.6 Hz, OCth Ar), 4.8 —(1H, d,-J=3.5 Hz, H-ť), 4.82 (1H, d, J=5.8.Hz, OH. zaiwirý D₂O), 5.58 (1H, dd, J=14.5 a 7.5 Hz, H-4), 5.61 (1H, dd, J=7,5 a. J=4.5 Hz, H-3), 5.85 (1H, dt, J=14.5 a J=6.7 Hz, H-5), 6.81 ai 7.25 (2 x 2H, 2 x d, J=8.6 Hz,

H-2, H-2' ai . H-3, H-3' of p-methoxybenzyl), 7.55, 7.68 ai 8.0 (2H, 1H ί 2H, 3m, CeHs).

Elementární analýza pro C^gH^N^Og. 0,51^0: vypočteno 64,98 % C, 8,11 % H, 5,83 % N nalezeno 64,80 % C, 7,90 % H, 5,90 % N.

B (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2-0-(4methoxybenzyl)- v‘\.-D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen

OBz

HO ,OH

NHCOtCH^zCHa

PMBO ^Λ ! JCH^jCHa

OBz ______(25,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-/2-0-(4-methoxybenzyl)- ^-D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen /0,43 g, 0,60 mmol/ se redukuje a acyluje postupem obecně popsaným v příkladu I-J a získá se 0,458 g /82 %/ titulní látky jako amorfní pevné látky.

-149[<*É? :+45° (c=1.0, CHCI₃).

IR (KBr) vmax (cnr¹): 1722 (C=0 ester) a. 1650 (C=O amid-).

tH NMR 400 MHz (DMSO-dg) δ (ppm); 0.65 (6H, t, 3=6.7 Hz, 2 x CH3), 1.1«

1.5 (48H, m, (CH₂)n) a (CH₂)i₃). 2.0 (2H, m, =CH-CH_?). 2.05 (2H, m, COCH₂), 3.35-3.5 (3H, m, H-1 a CH₂O-6'), 3.50 (1H, dd, 3=10.0 a

-------J=3.5-Hz, H-2')_r3.60 {-1H_išln±ý- trH-5'-)r3;64 (1Hr dd, 3=10.5 3 - 3=5:6 Hzr ~

H-1), 3.69 (3H, s, OCH₃), 3.7 (1H, m, H-4'), 3.73 (1H, m, ržeďází čtídd po D₂O výréx- , J=10.0 a. 3=3.2 Hz, H-3'), 4.37 (1H, m, H-2), 4.45 (1H, d, 3=4.2 Hz, zarě&v . D₂O, OH), 4.47 (2H, s, CH₂ . methoxybenzyl), 4.5 (1H, t, 3=5.5 Hz, zarŠT&iý . D₂O, OH), 4.73 (1H, d, 3=6.0 Hz, zaměněný D₂O, OH), 4.74 (1H, d, 3=3.5 Hz, H-1'), 5.48 (1H, dd, 3=7.6 a' 3=5.6 Hz, H3), 5.53 (1H, dd, 3=14.7 a 3=7.6 Hz, H-4), 5.76 (1H~ df 3=14.7^_a· 3=67

Hz, H-5), 6.79 a; 7.22 (2 X 2H, 2d, 3=8.6 Hz, H-2, H-2' a.. H-3, H-3' . methoxybenzyl), 7.83 (1H, d, 3=9.0 Hz, NH), 7.51, 7.65.a 7.95 (2H, 1H ai 2H, 3m, CgHs).

Elementární analýza pro C₅₅Hg_gNO₁₀.0,5H₂O: vypočteno 70,78 % C, 9,72 % H, 1,50 % N nalezeno 70,83 % C, 9,61.%.H, 1,57 % N.

C. (2S, 3R,4E)-3-benzoyloxa-2-hexadekanoylamino-l-/2-0-{4methoxybenzyl)-3,4,6-tri-0-(natrium oxysulfonyl)-ρ<ζ-Dgalaktopyranosyloxy/-4-oktadecen

HO ^^0H „o&A

PMBO \

NHCOíCHzJuCHa

JCHduCH,

NaO₃SO .OSOsNa

NaOaSOA^*T*Á PMBO \

OBz

NHCO(ČH2)₁₄CH₃

OBz

-150(ř· {2S,3R,4Ε)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2-0“ (4-raethoxybenzyl)- X-D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen/0,419 g, 0,45 mmol/ se sulfatuje postupem obecně popsaným v příkladu 19-D a získá se 0,552 g /98 %/ titulní lá_tky_j.ako ^amorfnÁ P^evné látky. ___ _ ___ [a]_D : +43° (č=1.0, CHCI₃-MeOH 7:3).

IR (KBr) vmax (cm*1): 1720 (C=O ester) a 1630 (C=O amid ).

¹H NMR 400 MHz (DMSO-d₆) δ (ppm): 0.85 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 x CH₃), 1.11.5 (48H, m, (CH₂)_n a, (CH₂)₁₃), 1.9-2.1 (4H, m, =CH-CH_? a COCH^

3.56 (1H, dd, J=10.8 a J=7.0 Hz, H-1), 3.65 (1H, dd, J=9.9 a J=3.4 Hz/ -H-2'), 3.69 (3H, s, OCH₃), 3.75 (1H, dd, J-10.8 a J=4.8 Hz, H-1), 3.82 (1H, dd, J=12.6 a J=9.3 Hz, CH₂O-6'), 4.05-4.1 (2H, m, H-5' a CH₂O-6‘), 4.3 (1H, m, H-2), 4.54 (2H, ABq, J_AS=11.1 Hz, Δν=24.3 Hz, CH₂O methoxybenzyl), 4.57 (1H, jfssehijící . CH₂, H-3'), 4.80 (1H, d, J=2.7 Hz, H-4*), 4.91 (1H, d, J=3.4 Hz, H-1'), 5.49 (1H, dd, J=7.4 and J=5.3 Hz, H3), 5.57 (1H, dd, J=15.1 ai J=7.4 Hz, H-4), 5.72 (1H, dt, J=15.1 a' J=6.63 Hz, H-5), 7.51, 7.63 a 7.97 (2H, 1H a 2H, 3m, C₆H₅), a 7.87 (1H, d, J=8.6 Hz, NH).

Příklad 22 (2S,3R,4E)-2-Hexadekanoylamino-3-hydroxy-l-/2-0-(4methoxybenzyl)-3,4,6-tri-O-(natrium oxysulfonyl)-o(-Ď·μ· ·χ'··ί

galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen

OBz

-151(2S,3R,4E) -3-Benzoyloxy-2-hexadekanoylami.no1** /2”0*“ ( -rnatbriVvIndĎn ?y1 Λ £ _M 4 _rs / — _ jl. _Λ-ι ί - „ * ' ^v ' · ---- —j. _{z w} f -z , y — cx x~v’ (, uctLF-LUÍft OXySUlIOnV 1 ) — οζ -D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen /0,30 g, 0,244 mmol popsaný v příkladu 21/ se nechá reagovat postupem obecně popsaným v „příkladu.. 2_4„.a_.získá~.se~.O ,-241 ~g-/8-7 - %/_________ titulní látky jako bílého„amorfního prášku po lyofilízaci z dioxanu.

[a]g, : + 40° (c=1.0, CHCb-MeOH 7:3).

IR (KBr) vmax (cm-¹): 1640 (C=O -amid ).iH NMR 400 MHz (DMSO-d6) δ (ppm): 0.85 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 x CH3), 1.11.5 (48H, m, (CH2)n) a (CHaJn). 1.91 (2H, m, =CH-QH2), 1.99 (m, 2H, CH2), 3.61 (1H, dd, J=11.0 a. J=5.9Hz, H-1),3.64(1H, dd, J=10.0a J=3.5 Hz, H-2'), 3.65-3.75 (m, 2H, H-1 a H-2), 3.73 (3H, s, OCH3), 3.80 (1H, dd, J—13.0 a J—10.0 Hz, CH2O-6), 3.92 (1H, m, pčs+ézí rat ‘ po D2O yýr&B. _ , H-3), 4.0-4.1 (2H, m, H-5' a CH2O-6'), 4.56 (1H, dd, J=10.0 and J=3.2 Hz, H-3'), 4.56 (2H, ABq, Jab=¹¹-4 Hz a Δν=31 Hz, CH2 methoxybenzyl), 4.78 (1Η, d, J=6.1 Hz, zapěný °2°· ⁴·⁷⁹ (¹

J=3.2 Hz, H-4¹), 4.90 (1H, d, J=3.5 Hz, H-1'), 5.37 {1H, dd, J=15.3 a J=6.6 Hz, H-4), 5.48 (1H, dt, J=15.3 a. J=6.4 Hz, H-5), 6.84 a 7.32 (2d, J=8.7 Hz, H-2, H-2' ai H-3, H-3' methoxybenzyl), 7.48 (1H, d, J=8.5 Hz, NH).

Příklad 23 (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2,3,4,6tetra-0-(natrium oxysulfonyl)-^-D-galaktopyranosyloxy/4-oktadecen

-152HO OH

HO o

NHCO(CHz)i*CH3

TCH^CHs v

OBZ

SO OSOjNa

NaO₃SO

NaOjSO ^OSOjNa

NaO₃S0NHC0(CHz)uCH3 _ JCHaJnCHj

OBz

Roztok {2S,3R,4E) - 3-benzoyloxy-l-(-D^galaktopyranšyloxy)-2-hexadekanoylamino-4-oktadecenu /0,467 g, 0,58 mmol, popsán v přikia'du^—i5~A-/—v~suchém— pyr-i-d-i-nu—/2-5-ml/—— se zpracuje s komplexem oxid sírový-pyridin /1,40 g/ a udržuje se na 60 °C 20 hodin.Ochlazená směs se pak zpracuje s vodou /5 ml/ a práškovaným hydrogenuhličitanem sodným /2 g/. Výsledná směs se míchá 30 min, filtruje a zahustí se za vakua. Zbytek se chromatografuje na silikageJ lu za použití směsi chloroformu a methanolu /7:3/, potom chloroformu, methanolu a vody /5:4:1/ jako elučním činidlem a získá se 0,661 g /94 %/ titulní látky jako bílé amorfní pevné látky.

[α]θ: +43° (c=1.0, CHCI₃-MeOH 7:3). J

HPLC na Zorbax Rx C-8, 4,6 mm x 25 cm, 0,01M vodný octan amonný-acetonitril 1:1, průtoková rychlost 1 ml/min, UV detektor 239 nm, retenční čas 5,7 min, čistota 97 %:

IR (KBrj Umax (cm’¹): 1720 (C=O ester) and 1640 (C=Q amid ).

¹H NMR 400 MHz (DMSO-d₆)-5 (ppm): 0;85 (6H,-t,-J=6.6-Hz,.2.x_CH₃),J,J_ a 1.5 (48H, m, (CH₂)n a (CH₂)₁₃), 1.9 ε 2.2 (4H, m, =CH·^ a. COChL·), 3.57 (1H, šúxký t. 3=9.7 Hz, H-5’), 3.80 (1H, dd, 3=11.3 a. J=9.4 Hz, H-1), 3.86 (1H, dd, J=11.3 a. 3=4.8 Hz, H-1), 4.02 (2H,sircký d, 3=9.7 Hz, CH₂O-6‘), 4.11 (1H, m, H-2), 4.29 (1H, dd, 3=10.8 a. J=3.0, H-2‘), 4.34 (1H, dd, J=10.8 a 3=2.3 Hz, H-3'), 4.85 (1H, šircký s, H-4*), 5.15 (1H, d, 3=3.0 Hz, H-1*), 5.57 (1H, dd, 3=15.2 a J=6.9 Hz, H-4), 5.64 (1H, dd,

3=6.9 a J=5.0 Hz, H-3), 5.72 (1H, dt, 3=15.2 ε J=6.9 Hz, H-5), 7.76 (1H, d, 3=6.7 Hz, NH), 7.51, 7.62 a 7.95 (2H, 1H a 2H, 3m, C₆H₅).

-153Elementární analýza pro C^H^NC^S^Na^. 6H vypočteno 42,75 % C, 6,79 % H, 1,06 % N nalezeno 42,39 % C, 6,12 % H, 1,29 % N.

O:

Příklad 24 (2S, 3R, 4E) -2-Hexadekanoylamino-3-hydroxy-l-/2,3,4-tetraO-(natrium oxysulfonyl) - K~D-galaktopyranosyloxy-4oktadecén

NaOjSO

NaOjSO

OSO/ta

NaO,SO

NaOjSO

NHCO(CHJ„CH,

JCHJuCH,

OSO/ta

NHCOtCH^CHj

NaOjSO

Roztok {2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino1-/2,3,4,6-tetra-o- (natrium oxysulfonyl) - ¢( -D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecenu /0,370.g, 0,30 mmol, popsán v příkladu 23/ ve směsi methanolu /25 ml/ a dichlormethanu /25 ml/ se zpracuje při 22 °C se 3 ml /0,6 mmol/ 0,2M roztoku methoxidu sodného v methanolu. Po 18 hodinách se přidá voda /5 ml/. , pH směsi se upraví na 7 iontovýměnnou pryskyřicí Dowex-50W 8% XL /H⁺/ a roztok se filtruje.

Filtrát se pak zpracuje s prys kyřicí Amberlite IRP-64 /Na /, filtruje, zahustí a chromatografuje se na silikagelu /2,5 x 12 cm/. Elucí smě'sí chloroform, methanol a voda /od 7:3:0 do 5:4:1/ se získá 0,273 g /80 %/ titulního.materiálu jako amorfní pevné látky.

[α]β²: +38° (c=1.0, H₂O).

IR (KBr) vmax (cnr¹): 1615 (C=O of amid .).

-154Ή NMR 400 MHz (DMSO-d₆) δ (ppm): 0.85 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 x CH₃), 1.11.5 (48H, m, (CH₂)n) a (CH₂)i₃), 1.92 (2H, m, =CH-CtL·), 2.13 (2H, m,

COCH₂), 3.53 (1H, m, H-5¹), 3.66 (2H, m, H-1 a H-3), 3.78 (1H, dd, J-12.1 a J=9.í Hz, H-1), 4.02 (2H, m, CH₂O-6‘), 4.05 (1H, m, H-2), 4.30 (1H, dd,

J=10.7 a J=3.56 Hz^K-^,*4.44 (ΪΗ, ďd, J=10.7 a~ j=2.8'Ηζ,-Η-3'), 4.88---------------(1H, d, J=2,8 Hz, H-4'), 5.03 (1H, d, J=6.1 Hz, D₂O, OH), 5.12 (1H, d, J=3.56 Hz, H-1'), 3.36 (1H, dd, J=15.3 a J=6.35 Hz/H^)?5:56-——— (1H, dt, J=15.3 a J=6.7 Hz, H-5), 7.64 (1H, d, J=7.3 Hz, NH).

Elementární analýza pro .8H₂O:

vypočteno 38,36 % C, 7,16 % H, 1,12 % N ^;‘ nalezeno 38,25 % C, 6,23 % H, 1,23 % N.

Příklad 25

í., {2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/3,4-di-0- ?. benzoyl-2,6-di-0-(natrium oxysulfonyD-c^-D-mannopyranosyloxy/-4-oktadecen

A. (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(6-O-terc.butyldimethylsilyl- (/-D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecen

Studený /5 °c/ roztok {2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxyl-(č<-D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecenu popsaného v příkladu 18-B /0,59 g, 1,0 mmol/ v pyridinu /20 ml/ se zpracuje s terc.butyldimethylsilylchloridem /0,3 g, 2,0 mmol/.

-155Roztok se ponechá v mrazničce /-20 °C$ přes víkend /asi 64 hodin/ a potom se rozpouštědlo odstraní za vakua.Zbytek se rozpustí v ethylacetátu, promyje se studenou kyselinou chlorovodíkovou /O,1N/ a solankou. Organická fáze se suší nad bezvodým síranem hořečnatým, filtruje a zahustí. Zbytek se čistí chromatografií na silikagelu a získá se titulní sloučenina /0,606 g, 86 % jako vis kozrí'^—o Γβji '

IR (CH₂CI₂) Vmaxícm-I): 3580 (OH), 2920, 2850 (C-H), 2090 (N₃), 1715 (C=O).

¹H NMR 200 MHz (CDCfe) δ (ppm): 0.10 <6H_f S, -SÍ(CH₃)₂), 0.88 (3H, t, J=6.7 Hz, -CH3), 0.91 (9H, s, tekutý 1),1.24-1.34 (22H, m5(CH₂)i 1-), 2.0-2.1(2H, m, =CH-CH2-), 2.46 (1H, d, J-3.9 Hz, -OH), 2.69 (1H, d, J=4.4 Hz, -OH), 3.25 (1H, d, J=1.3 HZ, -OH), 3.49 (1H, dd, J=10.0a 7.3 Hz, H-1), 3.4-4.1 (8H, m,

H-1, H-2, H-2', H-3’, H-4', H-5' a H-6*), 4.85 (1H, d, J=1.2 Hz, H-1'), 5.5-5.6 a 5.8-6.1 (3H, 2 sety of m, H-3, H-4 a H-5), 7.4-7.6 a 8.03-8.07 (5H, 2 set y m, -C6H5).

B. (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(6-O-terc.butyldimethylsilyl-3-O-benzoyl-^L-D-mannopyranosyloxy)-4oktadecen

Roztok benzoylchloridu /131 mg, 0,935 mmol/ v methylenchloridu se přikape k roztoku (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-1- ( 6-O-terc.butyldimethylsilyl- ck^-D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecenu /0,6 g, 0,85 mmol/ v pyridinu /15 ml/ při 0 °C. Reakční směs. se nechá stát ..v mrazničce /-20. °C/~ přes noc. Opět se přidá benzoylchlorid /24 mg, 0,17 mmol/

-157a reakce se míchá při O °C další 2 hodiny. Tento proces se opakuje podruhé, potom se rozpouštědlo odpaří a zbytek se rozpustí v ethylacetátu. Organická fáze se promyje studenou zředěnou kyselinou chlorovodíkovou a solankou, suší se nad síranem hořečnatým bezvodým, filtruje se — -a~ zahus ti-.—Zbytek— se-č-i-s-tí—eh-roma-tog-r-a-f-i-í - na silikag.elu_/.O_.až---— < 5% acetonitril/methylenchlorid/ a získá se titulní sloučenina /0,442 g, 64 %/ jako viskozní olej/.

IR (CH₂CI₂) (cm*¹): 3680,3600, 3480 (OH), 2920, 2850 (C-H), 2090 <N3), 1715(0=0).

1H NMR 400 MHz (CDCI₃) δ (ppm): 0.11 (6H, 2s, -Si(CH3)2)> 0-89 (3H, t, J=6.8 -3

Hz, -CH3), 0.92 (9H, s, fófcbutyl), 1.2-1.45 (22H, m, -(CH2)11 -), 2.03-2.16 (3H, m, -OH a =CH-CH2·). 3.08 (1H, d, J=3.2 Hz, -OH-4’), 3.53 (1H, dd, J=10.2 a 7.8 Hz, H-1), 3.76 (1H,td,J=9.5 a 4.8 Hz, H-5*), 3.86-4.00 (4H, m, H-1,

H-6* a H-2), 4.15 (1H, td, J=9.6 a, : 3.1 Hz, H-4‘), 4.15· (1H, šd, H-2'), 4.92 (1H, d, J=1.5 Hz, H-1'), 5.38 (1H, dd, J=9.7 a 3.2 Hz, H-3’), 5.57 (1H, dd,,

J=14.6 a 8.0 Hz, H-4), 5.58-5.61 (1H, m, H-3), 5.96 (1H, td, J=14.6 a 6.9

Hz, H-5), 7.45-7.49, 7.57-7.60 a 8.06-8.12 (1 OH, 3 sety m,2x-C6H5).

C.(2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(3-0-benzoyl-^-Dmannopyranosyloxv)-4-oktadecen

OBz

-158Roztok (2S,3R,4E)^2-azido-3-benzoyloxy-l-(6-0-terc. butyldimethylsilyl-3-0-benzoyl-0(.-D-mannopyranosyloxy )4-roktadecen /0,346 g, 0,427 mmol/ v 10% vodném acetonitrilu se zpracuje s kyselinou chlorovodíkovou /2N, 0,5 ml/ .

—-—--——Reakce-se-míchá—při—2-2—e~45-minut—potom“s a^-zředí—ethytace^ tátem a promyje se studeným vodným hydrogenuhličitanem · sodným a solankou. Organická fáze se suší nad bezvodým síranem horečnatým, filtruje a zahustí. Zbytek se čistí slpoupcovou chromatografií na silikagelu /30% acetonitril/ methylenchlorid / a získá se titulní látka /0,266 g, 90 % /^ , jako bezbarvý hustý olej.

IR (CH₂CI₂) (cnr¹): 3680, 3600 (OH), 2925, 2850 (C-H), 2100 (N3), 1720 (C-O).

¹H NMR 400 MHz (CDCI₃) δ (ppm): 0.89 (3H, t, J=6.8 Hz, -CH3), 1.25-1.40 (22H, m, -(CH2)11-), 2.10 (2H, ap qa, =CH-CH2-), 2.25 (1H, t, J=6.4 Hz, -OH6'), 2.45 (1H, d, J=4.9 Hz, -OH-2'), 2.77 (1H, d, J=5.1 Hz, -OH-4’), 3.56 (1H, dd, J=10.4 a: 7.7 Hz, H-1), 3.79 (1H, dt, J=9.7 a 3.7 Hz, H-5‘), 3.91-3.95 (3H, m, H-1 a H-6·), 3.97 (1H, m, H-2), 4.24 (1H, td H2‘, J=9.7 a 5.1

Hz, H-4*), 4.21-4 28 (1H, m, H-2'), 4.95 (1H, d, J=1.4 Hz, H-1'), 5.37 (1H, dd, J=9.8 a 3.2 Hz, H-3'), 5.57-5.64 (2H, m, H-3 a H-4), 5.98 (1H, dt, J=14.2 ai 6.7 Hz, H-5), 7.45-7.49, 7.57-7.63 a 8.06-8.11 (10H,3sety m,2x -C6H5). ......

-159D. (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(2-0-terc.butyldimsthylsilyl-3-0-benzoyl-4,6-0-isopropyliden-C/-Dmannopyranosyloxy)-4-oktadecen

K roztoku (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyl-l-(3-0benzoyl-“D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecenu /0,265 g,

0,382 mmol/ ve 2,2-dimethoxypropanu /5 ml/ se přidá kyselina p-toluensulfonová /bezvodá, 25 mg/. Roztok se míchá při 22 °C 2 hodiny, pak se nalije do studeného nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Vodná vrstva se extrahuje ethylacetátem a spojené organické extrakty se promyjí solankou, suší se nad bezvodým síranem hořečna^rtým, filtrují a zahustí, bez čištění se surový zbytek rozpustí v pyridinu a výsledný roztok se ochladí v ledu a po kapkách se zpracuje s terc.butyldimethylsilyltriflátem /0,264 ml, 1,15 mmol/. Reakční směs se míchá při 22 °C 24 hodin, potom se nalije do studeného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Vodná fáze se extrahuje ethyletherem a spojené extrakty se promyjí solankou, suší se nad bezvodým-síranem—hořečna-fe-ým—f-i-lferu-jí-a—zahus.tí. Zbytek_ se čistí sloupcovou chromatograf ií na silikagelu /2%' acetonitril/raethylenchlorid/ a získá se titulní látka /0,29 g, 91 %/ jako bezbarvý olej.

-160IR (CH₂CI₂) (cm'¹): 2930, 2850 (C-H), 2100 (N3). 1720 (C=O).

¹H NMR 400 MHz (CDCI3) 8 (ppm): -0.10 a 0.00 (6H, 2s, -Si(CH3)2), 0.89 (3H, t, J=7.1 Hz, -CH3), 0.90 (9H, s, ter -butyl), 1.25-1.32 (20H, m, -(CH2)1O-). 1.38-1.43 (2H, m, -CH2-), 1.55 a 1.57 (6H, 2s, -C(CH3)2), 2.11 (2H, qa, J=6.8 Hz, =CH-CH2-), 3.50 (1H, dd, J=10J a 8.3 Hz, H-1),(4H, m, Η’-ϊΓίΤ-δ^ ^Η^), 4.01 (1H, dt, J=8.2 a 4.0 Hz, H-2), 4.35 (1H, d, J=2.9 Hz, H-2’), 4.36 (1H, t, J=10.1 Hz, H-4'), 4.73 (1H, d, J=1.3 Hz, H-1 j, 5.32 (1H, dd, J=10.0a 2.9 Hz, H-3'), 5.56-5.64 (2H, m, H-3 a H-4), 5.98 (1H, dt, J=14.2 a 6.8 Hz, H-5), 7.43-7.50, 7.56-7.61 a 8.05-8.09 (10H, 3 seb m, 2 x -C6H5).

E. (2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(2-O-terc.butyldimethylsilyl-3-O-benzoyl--D-mannopyranosyloxy)-4oktadecen

Roztok (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-l-(2-0-terc. butyldimethylsilyl-3-0-benzoyl-4,6-0-isopropyliden-í^ D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecenu /0,280 g, 0,335 mmol/ v methylenchloridu /minimální množství/ se přidá po kapkách, ale rychle, ke studené /5 °C/ 90% vodné kyselině trifluoroctové /2 ml/. Reakční směs se míchá 10.minut, potom se zředí methylenchloridem a promyje se studenou solankou /3x/ vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou.

Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem hořečnatým, filtruje a zahustí. Zbytek se čistí sloupcovou ohromatografií na silikagelu / 5 až 10 % acetonitril/methylenchlořid/.....

a získá se titulní sloučenina /0,231 g, 85 %/ jako bezbarvý olej.

-151IR (CH₂CI₂) (cm*¹): 3600 (OH), 2925, 2850 (C-H), 2100 (N₃), 1718 (C=O).

¹H NMR 400 MHz (CDCI₃) δ (ppm): -0.03 a 0.03 (6H, 2s, -Si(CH₃)2), 0.89 (3H, t, >6.9 Hz, -CH₃), 0.90 (9H, s, ferdbutyl), 1.25-1.29 (20H, m, -(CH2)1O“).

1.40 (2H, m, -CH2-), 2.02 (1H, dd, J=7.6 a 5.3 Hz, -OH-6’), 2.10 (2H, qa, >6.9 Hz, =CH-CH2-), 2.35 (1H, d, J=5.2 Hz, -OH-4'), 3.54 (1H, dd, >10.6 a.

'“7.9Hž,H-1)73775TlRďt,'>9Ťa ΊΓδΤΐζ?Η-57, &88-3.94 (3H, m, H-6‘ a ' Ή-1), 3.98 (1H, dt, J=7.9 a 4.0 Hz, H-2), 4.27 (1H, td, >9.7 a 5.2 Hz, H-4'),

4,28 (1H, šd, H-2j, 4.76 (1H, d, >1.6 Hz, H-1'), 5.31 (1H, dd, >9.7 a 2.9 Hz, H-3⁶), 5.57-5.65 (2H, m, H-3 a H-4), 5.98 (1H, dt, >14.2 a 6.9 Hz, H-5), 7.44-7.49, 7.57-7.61 ai 8.06-8.10 (WH, 3 sety m, 2 X -C6H5).

F. {2S,3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-I’-{2,6-di-0-terc.· butyldimethylsilyl-3-O-benzoyl- {\/-D-mannopyranosyloxy) 4-oktadecen

Studený /5 °C/ roztok (2S,3R,4E)-2-azido-3-benzoyloxy-1-{2-0-terc.butyldimethylsilyl-3-O-benzoyl--Dmannopyranosyloxy)-4-okatadecen /0,225 g, 0,278 mmol/ v pyridinu se zpracuje s terč.butyldimethylsilylchloridem 85 mg, 0,57 mmol/. Reakční směs se nechá stát při ve studené místnosti /7 °C/ přes víkend /65 hodin/ , pak se nalije do studeného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje se methylenchloridem. Organické extrakty se promyjí solankou /2x/, zředěnou kyselinou chlorovodíkovou a opět solankou, suší se nad bezvodým síranem horečnatým, filtruje se a zahustí. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu /methylenchlorid/ a získá se titulní látka /0,247 g, 96 %/ jako bezbarvý olej.

-162IR (CH₂CI₂) (cm-¹): 3600 (OH), 2925, 2850 (C-H), 2100 (N3), 1718 (C=O).

¹H NMR 400 MHz (CDCI₃) δ (ppm): -0.05, 0.01, 0.11 a. 0.11 (12H, 4s, 2 x -Si(CH3)2), 0.89 (3H, t, J=7.0 Hz, -CH3), 0.90 a 0.92 (18H, 2 x fefc-.butyi),

l. 25-1.32 (20H, m, -(CH2)io-), 1.40 (2H, m, -CH2-), 2.09 (2H, qa, J=6.9 Hz, =CH-CH2-), 2.71 (1H, d, J=3.7 Hz, -OH), 3.53 (1H, dd, J=10.8 a 8.2 Hz, H-1) 3:7071 H7dt? J=974 a? 4;7ΉζΓΗ-5'), 3.88^3.95Π(3Η * m, H-6' a ‘ Ή-Ϊ), 3.99 (ΪΗ m, H-2), 4.22 (1H, td, J=9.7 a 3.7 Hz, H-4'), 4.24 (1H. š d, H-2'), 4.75 (1H, d, J=1.7 Hz. H-1'), 5.33 (1H, dd. J=9.8 a 3.0 Hz, H-3'), 5 56-5,63 (2H, m, H-3 a ' H-4), 5.96 (1H, dt, J=14.2 a 6.9 Hz, H-5), 7.43-7.49, 7.56-7.61 a 8.068.12(1 OH, 3 sety m, 2 x -C6H5).

G. (2S,3R,4E)-2-Azido-3~bénzoyloxy-l-(2,6-di-O-terc. butyldimethylsilyl-3,4-di-O-benzoyl-e^-D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecen

OTBOMS < OTBOMS ho-vMX _n 0^

(CH2)₁₂CH₃

Roztok (2S,3R,4E)-2-aZido-3-benzoyloxy-l-(2,6-di-Oterc .butyldimethylsilyl-3-O-benzoyl- «^-D-mannopyranosyloxy).-4-oktadecenu /0,242 g, 0,262 mmol/ ve studeném /5 °C/ pyridinu se zpracuje s benzoylchloridem /74 mg, 0,52 mmol/. Reakční směs se míchá 20 hodin při 22 °C , potom se nalije do studeného vodného hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje se methylenchloridem. Spojené organické extrakty se dvakrát promyjí solankou /2x/, zředěnou kyselinou chlorovodíkovou a opět solankou, suší se nad bezvodým síranem horečnatým, filtrují a zahustí. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu /methylenchlorid/ a získá se titulní sloučenina /0,233 g, 87 %/ jako bezbarvý olej.

-163IR (CH2CI2) Umax (cm·¹): 2930, 2855 (C-H), 2100 (N3), 1722 (C=O).

Ή NMR 400 MHz (CDCI3) δ (ppm): -0.09, -0.01, 0.00 and 0.02 (12H, 4s, 2 x -Si(CH3)2), 0-89 a 0.92 (18H, 2s, 2 x íer^utyl), 0.89-0.92 (3H, t, -CH3),

1.25-1.31 (20H, m, -(CH2)1O-). h_42_(2H, m. -CH2-), 2.11 (2H, qa, J=6.9 Hz,___ =CH^_-Cfí2-)73.58(rH; dd? j7ToJa^_ 8?2 Hz, H-1), 3.77-3.84 (2H, m, H-6’),

3.97 (i A, dd, J=10,8 a. 3.7 Hz, H-1), 4.00-4.03 (1H, m, H-5*), 4.06 (1H, dt, J=8.2 a 3.9 Hz, H-2), 4.38 (1H, š dd, H-2'), 4.84 (1H, d, J=1.7 Hz, H-ť), 5.54 (1H, dd, J=10.1 a 2.9 Hz, H-3'), 5.59-5.67 (2H, m, H-3 a H-4), 5.85 (1H, t, J=10.1, H-4'), 5.99 (1H, dt, J=14.2 a 6.9 Hz, H-5), 7.34-7.38, 7.46-7.51, 7.587.62, 7.94-7.98 a 8.08-8.10 (15H, 5 setY m, 3X-C6H5); · --· ·

H. (2S, 3R, 4E)-2-Hexadekanoylamino-3-benzoyloxy-l-(2, e-diO-terc.butyldimethylsilyl-S^-di-O-benzoyl-^-D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecen

BzO

BzO

(2S, 3R,4E)-2-Azido-3-benzoyloxy-l-(2,6-di-O-terč.butyldimethylsilyl-3,4-di-O-benzoyl-j^ -D-mannopyranosyloxy) 4-okatadecen /0,23 g, 0,224 mmoL/ se nechá reagovat postupem obecně popsaným v příkladu 1-J a získá se titulní sloučenina /0,249 g, 90 %/ jako bezbarvý olej.

-164IR (CH₂CI₂) Vmax (cm-1): 3680, 3600,3430 (OH and NH), 2925, 2850 (C-H), 1728, 1675 (C=O).

¹H NMR 400 MHz (CDCt₃) 5 (ppm): -0.11, -0.06, -0.05 a -0.02 (12H, 4s, 2 x -Si(CH3)2), 0.85 á 0.88 (18H, 2$, 2 x ře/^utyl), 0.89 (6H, t, J=6.7 Hz, 2 x -CH3), 1.21-1.38 (46H, m, -(CH2)11- a -<CH2)12-). 1-68 (2H, m, -CH2-), 2.07 (2H, qa, J=7.0 Hz, =CH-CH2-), 2.27 (2H, m, -NHCOCH2-). 3.69 (1H, dd, J=10.5

-- - s__3.5 Hz, H-1), 3.73-3,80.(2H, m, H-6’), 3.88,(1 H, dd,J=10.5 a 3.9Hz, H1), 3.95 (1H, dt, J=10.1 a; 3.1 Hz, H-5‘), 4.33 (1H, dd, H-2'), 4.57 (1H, m, H— 2), 4.68 (1H, d, J=1.5 Hz, H-1'), 5.51 (1H. dd, 3=10.1 a 2.9 Hz, H-3‘), 5.59 “ * (1H, dd, J=1 5.2Τ^776Ήζ7Η^4)75:67-(1Ή7ϊΓ3=7:6-ΗζγΗ-3)75785-(ΊΉ7Ϊγ-3=-1

Hz, H-4'), 5.92-5.99 (1H, m, H-5), 5.95 (1H, d, J=9.5 Hz, -NH-), 7.34-7.59 a 7.92-8.06 (15H, 2 sety : m, 3 x -C6H5).

I. (2S,3R,4E)-2-Hexadekanoylamino-3-benzoyloxy-l-(2-0terc.butyldimethylsilyl-3,4-di-O-benzoyl-ů^ -D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecen

Roztok {2S_/3R,4E)-2-hexadekanoylamino-3-benzoyloxy^τ 1-(2,6-di-O-terc.butyldimethylsilyl-3,4-di-O-benzoyl-{i( ----D-mannopyranos-yloxy-)-—4—oktadecenu_/&,-23fL_g_,_0,185 mmol/_ v methylenchloridu /10 ml/ se ochladí na 'ledu a zpracuje se s 90% vodnou kyselinou trifluoroctovou /1 ml/.

Roztok se míchá 30 minut při 5 °C, pfcom se 2ředí methylechloridem a promyje se postupně vodou, vodným hydrogenuhličitanem sodným a solankou. Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem hořečnatým, filtruje a zahustí. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu /5 až 10 % acetonitril/methylenchlorid/ a získá se titulní látka /0,181 g, 87 %/ jako-vískózní-bezbarvý olej.

-165¹H NMR 400 MHz (CDCI₃) δ (ppm): -0.09 a· -0.03 (6H, 2s, -Si{CH3)₂), 0.870.92 (6H, m, 2x -CH3), 0.89 (9H, s, ΌΗ3, íe^butyl), 1.21-1.38 (46H, m, -(CH2)11- a -(CH₂)i₂-), 1-67 (2H, rn, -CH2-),.2.Q8_(2H. aD-qa____1

-CH₂-), 2.26 (2H,m, -CH₂-), 2.40 (1H. ^š s, -OH), 3.71 {1H, dd pfcsivjící H6‘, J=10.6 a 4.0 Hz, H-1), 3.6-3.8 (2H, m, H-6'), 3.89 (1H, dd, J=10.6 a 4.0 Hz, H-1), 3.90-3.94 (1H, m, H-5'), 4.33 (IH^dd, H-2'), 4.59 (1H, m, H-2), 4.72 (1H, d, J=1.6 Hz, H-1’), 5,57-5.62 (1H, m, H-4), 5.61 (1H, dd H-4,

J=10.2 and 3.0 Hz, H-3¹), 5.67 (1.H, t, J=7.4 Hz, H-3), 5.77 (1H, t, J=10.0 Hz, H-----4'),-5:94 (1 Hrd, J=9.5 Hz, -NH-);5.95 (1H/dtrj=15.1 a' ,6.6 Hz, H-5), 7.35- *

7.59, 7.93-7.93 a ' 8.04-8.06,(15H, 3 sety: 'm, 3 X-C6H5).

J. (2S,3R,, 4E)-2-Hexadekanoylamino-3-benzoyloxy-l-( 3,4-di-Obenzoyl-p^-D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecen

BzO BzO

OH

OTBDMS -O

<°Sh

NHCO(CH2)₁₄CH₃ _ . (CH₂)₁₂CH₃

NHCO{CH2)₁₄CH₃ .(CH₂)₁₂CH₃

OBz

OBz

Studený /0 °C/ roztok (2S,3R,4E)-2-hexadekanoylamino3-benzoyloxy-l-(2-0-terc.butyldimethylsilyl-3,4-di-Obenzoy.l-O^-D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecen /0-, 162-g, 0,144 mino/ v tetrahydrofuranu se zpracuje s kyselinou octovou /0,099 ml, 1,73 mmol/ a potom s tetrabutylamoniumfluoridem /1M v tetrahydrofuranu, 0,863 ml, 0,863 mmol/. Ledová lázeň se odstraní a reakce se ponechá při 22 °c 7 dnů.

I když je ještě přítomen výchozí materiál, reakční směs se zředí ethylacetátem a promyje se studeným vodným hydrogenuhličitanem sodným a solankou. Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem hořečnatým, filtruje a zahustí. Zbytek sě .čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu /15- % ~aceto-_: nitril/methylenchlorid/ a nezreagovaný materiál se odstraní.

-166IR (Nujol) O_max(crn-1): 3600 (OH, NH), 2930, 2855 (C-H), 1725, 1675 (C=O).

Ή NMR 400 MHz (CDCI₃) δ (ppm): 0.89 (6H, t, J=6.8 Hz, 2 x -CH3), 1.23-1.50 (46H, m, -(CH2)11- a. -(CH2)12-X 1·66 (2H, m, -CH2-), 2.08 (2H, qa, J=7.0. Hz, =CH-CH2-), 2.25 (2H, m, -NHCOCH2-), 2.33 (1H, d, J=4.9 Hz, -OH), 2.61 (1H. brt, -OH), 3.66-3.78 (3H, m, H-6‘ a: H-1), 3.92 (1H, dd, J=10.8 a. 4.2 Hz,-H-J.)_Í_3.93-3,9_7_(1 H, m,.H-5').,.4.30_(1H, š dd, H-2¹), 4.59 (1H, m, H-2), 4.94 (1H, d, J=1.4 Hz, H-1’), 5.58 (1H_t dd, J=15.1 a 7.3 Hz, H-4), 5.65 (1H, t, J=7.3 Hz, H-3), 5.69-5.75 (2H, m, H-4' a H-3‘), 5.91 (1H, d, J=8.8 Hz, -NH-), 5.94 {TH7dt7J=T57Í-á~7:0-HzrH=5jr7:36--7T59-ar—7794-8;06-(45H-2-s&Vy— -C6H5).

K. (2S,3R,4E)-2-Hexadekanoylamino-3-běnzoyloxy-l-/2,6di-O-(natrium oxysulfonyl)-3,4-di-O-benzoyl-Q^ -Dmannopyranosyloxy/-4-oktadecen

BzO BzO

OH < OH

NHCO(CH2)₁₄CH₃ _ •<s.

BzO

BzO

OSO₃Na

OSO₃Na

NHCO(CH2)₁₄CH₃

(CH2)₁₂CH₃

OBz

OBz (2S,3R,4E)-2-Hexadekanoylamino-3-benzoyloxy-l-(3,4di-O-benzoyl-^-D-mannopyranosyloxy)-4-oktadecen /0,091 g, 0,09 mmol/ se nechá reagovat postupem obecně popsaným v příkladu 1-L a získá se titulní sloučenina /0,089 g, 81 %/ .jako bílá pevná látka.

-168IR (CH2CI2) Umax (cm-¹): 2920, 2850 (C-H), 1720, 1645 (C=O).

¹H NMR 400 MHz (CDCI₃) δ (ppm): 0.83-0.86 (6H, m, 2 x -CH3), 1.14-1.40 (46H, m, -(CH₂)1 V a. -(CH₂) 12-). 1·50 (2H, m, -CH₂-), 2.05 (2H, qa, J=6.8 Hz, =CH-CH2-), 2.12 (2H, g t, -NHCOCH2-), 3.56 (1H, dd, J=9.9 a: 7.3 Hz, H6')Γ5ϊ79^5;89 (2ΗΓΓήΤΗ-6'á^—H^rí)73:87’(TH, dd,’J=107rá^579“Hž,~H-í)7

4.12 (1H, m, H-5j, 4.40 (1H, m, H-2), 4.62 (1H, š s, H-2'), 5.07 (1H, šs, H-1'), 5.37-5.44 (2H, m, H-4¹ a ¹ H-3’), 5.52 (1H, dd, J=7.4 a 4.9 Hz, H-3), 5.65 (1H, dd, J=15.3 a 7.4 Hz, H-4), 5.S3 (1H, dí, J=15.3 a , 6.8 Hz, H-5), 7.407.65, 7.81-7.87 a 7.98-7.99 (15H, m, 3 sety m, 3 x -ΟθΗβ), 8.08 (1H, d, J=8.7 Ηζ,-ΝΗ-). _ . ...... . __ .

Claims (4)

1^ Sulfatovaný glykolioid obacaého vzorce kde

R je acylový zbýtek mastné kyseliny,

R¹ je -(CH=CH) -{CH,) -CH,, m z n J ,R a R^ jsou nezávisle alespoň dva -SO,H,

R²,R³, R⁴ 5 6

R a R jsou nezávisle vodík, nesubstituovaný nebo substituovaný alkanoyl, arylalkyl nebo arylkarbonyl, kde uvedený substituent je vybrán ze skupiny, zahrnující halogen, C₁_₄alkyl, trifluormethyl, hydroxy a C^^alkoxy, m je celé číslo 0 nebo 1,

-n—-je— ee-l-é—č-í-slo—od—5—do—1-4—včetně.,—--— nebo j eK<5 netoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo- hydrát.

Sulfatovaný glykolipid podle nároku 1,obecného vzorce

-170- ’ '

NHR

OR³ kde R je acylový zbytek mastné kyseliny,

R¹ je -(CH=CH) -(CH,) -CH,, q *> j m 2 n 2

R ,R ,R’ a R_ gsou.nezávisle .alespoň,dva. ______________________

2 3 4 ^J

R ,R , R

R^a R^ jsou každý nezávisle vodík, nesubstituovaný nebosubstituovaný alkanoyl, arylalkyl nebo arylkarbonyl, kde uvedený substituent je vybrán z halogenu, C₁_₄alkylu, trifluormethylu, hydroxy a C^^alkoxy, m je celé číslo 0 nebo 1, n je celé číslo od 5 do 14 včetně, nebo jeíjd· netoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

3. 'Sulfatovaný glykolipid podle nároku 1 obecného vzorce.

ΙΛ i

-171kde ...

R je acylový zbytek mastné kyseliny,

R¹ je -(CH=CH) -(CH,) -CH,, ₂ 3 ₄ 2 n 3

R , R ,R 'a .. . ....

__________________{_}_____________

R° jsou nezávisle alespoň ava -SO^KV r²,r³,r⁴

F.£a_r6_jsou každý nezávisle vodík, nesubstituovaný nebo__ substituovaný alkanoyl, arylalkyl nebo arylkarbonyl, kde uvedený substituent je vybrán ze skupiny, zahrnující halogen, C-^alkvl, trifluormethyl, hydroxy a C_7-4alkoxy_í , f m je celé číslo 0 nebo 1, n je celé číslo od 5 do 14 včetně, nebo jehó netoxické farmaceuticky přijatelná sul, solvát nebo hydrát.

⁴· Sulfatovaný glykolipid podle nároku 1 obecného vzorce ?

I i

kde

R je acylový zbytek mastné kyseliny,

R¹ ₃a -(CH=CH)_m-(CH₂)_n-_CH₃,

R²,R³, R⁴

R⁵ a R⁵ jsou každý nezávisle vodík, nesubstituovaný nebo substituovaný alkanoyl, arylalkyl nebo arylkarbonyl, kde uvedený substituent je vybrán ze skupiny, zahrnuji-172cí halogen, C^_^alkyl, trifluormethyl, hydroxy a' C₁_₄alkoxy, m je celé číslo 0 nebo 1, n je celé číslo od 5 do 14 včetně, nebo jeho; netoxické farmaceuticky přijatelné sole, solváty nebo fiydřatyí

5. _ Sulfatovaný glykolipid podle nároku 1, kde R⁴_aR⁶ jsouSO

R^z, R^J a R³ jsou každý nezávisle vodík, nesubstituovaný nebo*substituovaný“alkanoy 17 arylalky^nebo^arýlkarbonýl, kde uvedený substituent je vybrán ze skupiny, zahrnující halogen. C^^alkyl, trifluormethyl, hydroxy a C^_₄alkoxy nebo jeho' neto?;ická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

6. Sulfatovaný glykolipid podle nár-nku i, kde R a jsou SO H.

- ů. 5 ^J 3 a R” , R* a R každý nezávisle jsou vodík, nesubstituovaný nebo substituovaný alkanoyl, arylalkyl nebo arylkarbcnyl, kde uvedený substituent je vybrán ze skupiny, zahrnující halogen, C^^alkyl, trifluormethyl, hydroxy a C^^alkoxv, nebo je^_e netoxická, farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

fl

3 6

7-. Sulfatovaný glykolipid podle nároku 1, kde R a R jsou -SO,H a R , R a R každý nezávisle jsou vodík, nesubstituovaný nebo substituovaný alkanoyl, arylalkyl nebo arylkarbonyl, kde

-173τ uvedeny substituenfc je vybrán ze skupiny, zahrnující halogen C^^alkvl, trifluormethyl, hydroxy a C^_^alkoxy nebo netoxické farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát této sloučeniny.

_ _8- - Sulfatovaný- glykolipid- podle nároku i; kde' R²a R^3- jsou -SO,H

-4-5-6—:--ί ~ ' ³ a R , R a R jsou každý nezávisle vodík, nesubstituovaný nebo suostituovany alkanoyl, arylalxyl nebo arylkarbonyl, _kd.e_u vedený— s-u-bs-t-i-fe-uen-t—je—vybrán ze~sk u o iny, zahrnující halogen, cy^alkyl, trifluormethyl, hydroxy a C. ^alkoxy nebo jdio, nstoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

3 4

9. Sulfatovaný glykolipid podle nároku 1, kde R a R jsou -SO-H a κ ,P/ a R jsou nezávisle každý vodík, nesubstituovaný nebo substituovaný alkanoyl, arylalkyl nebo arylkarbonyl, kde uvedený substituent je vybrán ze skupiny, .zahrnující halogen, C^,,alkyl, trifluormethyl·, hydroxy a C^__?,alkoxy nebo jeho netoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

2 4 .

10. Sulfatovaný glykolipid podle nároku 1, kde R a R jsou -SO,H

2 5 5 a R“' R a jsou nezávisle každý vodík, nesubstituovaný nebo substituovaný alkanoyl, arylalkyl nebo arylkarbonyl, kde uvedený substituent je vybrán za skupiny, zahrnující halogen, C^_^alkyl, trifluormethyl, hydroxy a C-^alkoxy nebo,jeho netoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

2 3 5

11, Sulfatovaný glykolipid podle nároku 5, kde R ,R a R- jsou kazoy nezávisle vodík, nebo benzovl, nebo jeho netoxická rarmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

12.

3 d 5,

Sulfatovaný glykolipid podle nároku 5, kde R ,R* a R jsou každý nezávisle vodík nebo benzoyl, nebo jáip netoxická. farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

-174

13. sulfatovaný.glykolipid podle nároku 7, kde R², R⁴ a R⁵ jsou každý nezávisle vodík nebo benzoyl, nebo j&o netoxické farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

4 5 6 .

Sulíatovaný glykolipid podle nároku a, kde R ,R a R jsou každý nezávisle vodík, nebo benzoyl, nebo je ho netoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

¹⁵ · Sulfatovaný glykolipid podle nároku 9, kde R²,R⁵a R° jsou

-k-a-zdý-n-ezavrsTe^-voHXk nebo benzoyl, nebo j^_o netoxická ^^r^^a““^uti^c:<y _prt jatelná._sů_i_,^ solvát ..nebo. hydrát-. ----- .r.

'' Sulfatovaný glykolipid podle, nároku 10, kde R³,R⁵ a R⁵ jsou

16.

každý nezávisle vodík nebo benzoyl, nebo jeho netoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hvurát.

17.

Sulfatovaný glykolipid podle nároku 11, kde R²aR³ a R⁵jsou jsou benzoyl, nebo jeho netox ická rarmaceuticky přijatelná, sůl, solvát nebo hydrát.

18. Sulfatovaný glykolipid podle nároku 13,kde R³,R⁴a.R⁵ jsou benzoyl, nebo jeř¹⁰ netoxická farmaceuticky přijatelná sul, solvát nebo hydrát.

19. - Sulfatovaný glykolipid podle nároku 13-, kde R²,r⁴ a benzoyl, nebo je ^ho netoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát,

20· Sulfatovaný glykolipid podle nároku 14,kde R⁴,R^a Rgjsou benzoyl, nebo je.^° netoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

Sulfatovaný glykolipid podle nároku 15_řkde R²,R^_a r®

21. _ .. ,iy £ κ asou _A , j m¹. . . ϊι ‘ —Λ,ι- . Λ .teí· 1¼. - .. hi U, řw - J.!*''· t·?· i-k. .* x (. J benzoyl, nebo j&° netoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

-17522. Sulfatovaný glykolipid podle nároku 16,kde R^,R a R jsou banzoyl, nebo je ho netoxické farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

23·.

Sulfatovaný cívkolipid podl

- -palmi.fcove kyseliny ₁Lignocerové·· liny nebo stearovc kyseliny, farmaceuticky přijatelná sůl

3 nároku 1, kde R je acylový zbytek kyseliny?'* nervonove úkyšá-' ’ ‘ nebo jífc_o solvát n netoxická

Ví 11 »- <u i-> ·*-» H T Ul, u u · ^z<i· Sulfatovaný glykolipid podle nároku 17, kde R je acylový zbytek palmitové kyseliny, lignocerové kyseliny , nervonové kyseliny nebo stearové kyseliny, nebo jeho netoxické farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

-1762 5. Sulfatovaný glykolipid podle nároku 18, kde R je acylový zbytek palmitové kyseliny, lignocerové kyseliny, nervonové kyseliny nebo stearové kyseliny, nebo.je ho netoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

26. Sulfatovaný glykolipid podlé náíbku 19, kde R je acylový zbytek kyseliny palmitové, kyseliny lignocerové, kyseliny nervonové nebo stearové, nebo jeho netoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

2? . Sulfatovaný glykolipid .podle nároku 20, kde R je acylový

---------—kys e lxny-palmitové-,1 ignoce-rové··,—ne-r vonové-nebo -stearové·,' — nebo jeho. netoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

2g. Sulfatovaný glykolipid podle nároku 21, kde R je acylový zbytek palmitové kyseliny, lignocerové kyseliny, nervonové kyseliny nebo stearové kyseliny, nebo jeho netoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

29. Sulfatovaný glykolipid podle nároku 22, kde R je acylový zbytek palmitové kyseliny, lignocerové kyseliny, nervonové kyseliny nebo stearové kyseliny, nebo jdno netoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

30. Sulfatovaný glykolipid podle nároku 1, kde m je 1 a n je 12·,· nebo jeho netoxická, farmaceuticky přijatelná-sůl, solvát nebo hydrát.

31. Sulfatovaný glykolipid podle nároku 1, kde m je 0 a n je 14, nebo jeho netoxická, farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo hydrát.

32. Sulfatovaný glykolipid podle nároku 24, kde R je acylový zbytek nervonové kyseliny, nebo jeho netoxická farmaceuticky

-‘-—přijaťeTná“sůl“ sbTvá'e~heb'o“hydrat'7*^*‘ ~

33. Sulfatovaný glykolipid' podle nároku 32, kde m je 1 a n je 12 nebo jďioí netoxická farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo. hydrát.

34. Sulfatovaný glykolipid podle nároku 32, kde m je 0 a n je

14, nebo jeho netoxická.farmaceuticky přijatelná sůl, 'šoTvat“ ňěbcThýdřaT. ...... '

35. Sulfatovaný glykolipid podle nároku 1, vybraný ze skupiny zahrnující {2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hsxadekanoylamino-l-/2,3-di-0benzoyl-4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)- í^-D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen, (2S,3R,4E)-3-hydroxy-2-hexadekanoylamino-l-/4,6-di-0{natrium oxysulfonyl)- j(_-D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen, (2S,3R,4E)-3-banzoyloxy-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)1-/2,3-di-0-benzoyl-4,S-di-O-{natrium oxysulfony1/^-D-galaktopyranosyloxy)-4-oktadecen, (2S,3R,4E)-3-hydroxy-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)-1-/4,6di-O-(natrium oxysulfonyl)-<X.-D-galaktopyranosyloxy/4-oktadecen,

T21S73'R^—3-Sěň^oyltrey~2^he'xaďe'ka'nOy'tam±nff-l--/-2—3-di— 0—benzoyl-,4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)-^-Dgalaktopyranosyloxy/-oktadecen, (2S,3R)-2-hexadekanoylamino-3-hydroxy-l-(4,6-di-0-natriům oxysulfonyl)-D-galaktopyranosyloxy)-oktadekan, (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2,3-di-0benzoyl-4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)-C^-D-glukopyranosyloxy/-4-oktadecen,

-178(2S,3R,4E)-3-hydroxy-2-hexadekanoylamino-l-/4,6-di-O-(natriům oxysulfonyl)- (4 -D-glukopyranosyloxy/-4-oktadecen, (23,3R,4E)-3-benzoyloxy-l-/2,3-di-0-benzoyl-4,6-di-0(natrium oxysulfonyl)- «(-D-glukopyranosyloxy)-2-(cis-15'tétrakosenoy lamino) -4-oktadecen, (2S,3R,4E)-1-/2,3-di-0-benzoyl-4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)o/_s-D-galaktopyranosyloxy/-3-benzoyloxy-2-hexanoylamino-4undecen, (2S,3R,4E)-2-hexadekanoylamino-3-benzoyloxy-Í-/2,3-di-0benzyl-4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)- <ř>C-D-ga 1'aktopyranosyloxy/-4-oktadecen, (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-(cis-15-tetrakosenoylamino)1-/2,6-di-O-(natrium. oxysulfonyl)-c^-D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen, (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-{cis-15-tetrakosenoylamino)1-/3,4-di-0-benzoyl-2,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)-¢¢D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen, (2S,3R,4E)-3-hydróxy-2-(cis-15-tetrakosenoylamino )-1-/2,6di-O-(natrium oxysulfonyl )-<p^-D-galaktopyranosyloxy/-4- . oktadecen, (2Ξ,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2,6-di-0(natrium oxysulfonyl)-c/_K-D-galaktopyranosyloxy/-4oktadecen, (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/3,4-di-0benzoyl-2,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)- c^-D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen,

-179(2S,3R,4E)-2-hexadekanoylamino-3-hydroxy-l-/2,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)-¢(-D-galaktopyranosyloxy/-4-oktadecen, (2S,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadskanoylamino-l-/2,3-di-0benzoyl-4,6-di-O-(natrium oxysulfonyl)- Aj_-D-mannopyranosyloxy/-4-oktadecen, (2S,3R,4E)-l-/2-0-benzoyl-3,4,6 -tri-O-(natrium oxysulfon-y-1-)-—D—galak-topyr.anosylo.xy,Zr.3^b.en.z.oy.Loxy-2-hexadeka- , noylamino-4-oktadecen, (2S, 3R,4E)-2-hexadekanoylamino-3-hydroxy-l-/3,4,6-tri-O(natrium oxysulfonyl)-c/-D-galaktopyranosyloxy/-4oktadecen, (2S, 3R,4É)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2-C-(4methoxybenzyl)-3,4,6-tri-O-(natrium oxysulfonyl)- >ý-Dgalaktopyranosyloxy/-4-oktadecen, (2S,3R,4E)-2-hexadekanoylamino-3-hydroxy-l-/2-0-(4methoxybenzyl)-3,4,6-tri-0-(natrium oxysulfonyl)- -Dgalaktopyranosyloxy/-4-oktadecen, (2Ξ,3R,4E)-3-benzoyloxy-2-hexadekanoylamino-l-/2,3,4,6tetra-O- (natrium oxysulfonyl) - /Jý-D-galaktopyranosyloxy/4-oktadecen a (2S, 3R, 4E) -2-hexadekanoylamino-3-hydroxy-r^z72'73T4T6 tetra-O-(natrium oxysulfonyl)-cý-D-galaktopyřanosyloxy/4-oktadecsn, nebo jejich netoxické farmaceuticky přijatelné sole, solváty nebo hydráty.

-1803g. Farmaceutický přípravek pro léčbu chorob nebo jiných patologických stavů charakterizovaných selektinem zprostředkovanou buněčnou adhezí,v yznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství sulfatovaného glykolipid^ oodle nároku 1 soolu s farmaceuticky ořijatelným nosičem ΐ nebo ředidlem.