CZ414197A3

CZ414197A3 - Kovové komplexy polyaminoxidů a jejich použití v diagnostickém zobrazení

Info

Publication number: CZ414197A3
Application number: CZ974141A
Authority: CZ
Inventors: Dominique Meyer; Olivier Rousseaux; Michael Schaefer; Christian Simonot
Original assignee: Guerbet S. A.
Priority date: 1995-06-29
Filing date: 1996-06-25
Publication date: 1998-03-18
Also published as: PL325531A1; DE69616548D1; WO1997001359A3; HUP9900449A3; EP0835140B1; CN1074934C; FR2736051B3; EA199800101A1; CA2222697A1; DE69616548T2; BR9609519A; AU6461696A; EA000378B1; WO1997001359A2; IL122621A0; HUP9900449A2; TR199701716T1; SK173797A3; KR19990028556A; SK282197B6

Description

Oblast techniky

Vynález se týká kovových komplexů po 1 van í noky se 1 i n , způsobu jejich přípravy a jejich užití v diagnostickém zobrazen i t echπ i kv

c.í

Tyto sloučeni nv jsou ové, prodávané ve .formě jako kontrastní činidlo

Gadolejan meg’lumi^ru je nové sítě při 37*.θ·? a 20 MHz je asi 3,5 mM^-1s^-1 rozvětvenu deriváty kvselinv tiadosoli megiuminu pod značkou Dotarepro zobrazení magnetickou rezonanscabilní komplex, jehož relaxivita s tejného sp řádu velikosti jako jiných kontrastních činidel. Komplexy gadol laxivitu R vyšší než káni stejné intenzí á r n i i ni a podle mM^-1s^-1 ty signálu koncentrace komplexu Gd^Jpředloženého vynálezu nižší než koncentrace předloženého vynálezu . To umožňuje d i agnos t :i ckou +

a p ro z. is tedy i podávat směs, jejíž mosloučun.inv podle pop ří pádě současnosti na

Tak jak osmolal vynálezu pro stejnou a zejména než u ne ionických možno je šes tkrá t.

používané v íta roztoků komplexů podle ižší než výrobku in jako je gadodi ivní hmotnostní r e 1 a x i v i tu je n

s.l oučen vvšš i kos t i až desetkrát předJ úženého

DotarcnR používat roztoků, jejichž akt než u známých sloučenin pro dosaženi obrázků úrovně nepřípustných sekundárních těžkých kovů jako Gd^tyto kompl nebo jódu a jsou nepropustné dostatečně rozpustné. Zej měnit vl i ven kolem at (línat ickvcli judu’· bez dosažen i

Kromě iontů j \ a torny

X a jsou hydro f i I η ích skup i n v běžné radiologii nebo v dicbtomograf i i .

b tomu obsáhupaprsky torinos l j • · · · * ·

-2Podstata vynálezu

Sloučeniny podle předloženého vvnádezu mají vzorec ch₂

CH₂ — N-CH-COOM

R ve kterém

R je skupina vzorce:

-(CH₂)2OO-NH’CH2-CO-NH ve kterém

X je brom

R^ je vodík, alkyl s 1 až 3 atomy uhlíku hydroxvalkyJ se 2 až 8 atomy uhlíku,

R₉ je mono nebo polyhydroxya1ky! se 2 až R| je vodík a R-, je skuj) i na vzorce nebo jód, alkyl se 2 nebo mono nebo poly8 atomy uhlíku, nebo

k d c

X je definováno výše a Rj, Rg maji některý z významů definovaných výše pro , R._? s výjimkou A, když -CO-NR^Rp nebo _CR’|R’_? obsahují alespoň dvě hydroxy1ové skupiny a M představuje vodík nebo kat iont minerální nebo organické báze.

Jako farmaceuticky přípustné kat ionty lze uvést Na⁺ nebo ktiLionry odvozené od lysinu, argininu, N-mechylg lykam t nu nebo diethanolaminu.

Alkylové skupiny mohou být lineární nebo rozvětvené.

Přednost se dává sloučeninám. ve kterých -CONR^Rq nebo -CONR’|R’₂ nesou alespoň šest, hvdroxy 1 ových skupin a zejména představuj í -C0X'(CH₉ (CHOH)₄-CH₂OH) _? .

Sloučeniny vzorce I mohou bvt připraveny reakcí a in i n u vzorce II.

X	CO-NR.FL
\___	/ ²
nh₂-ch₂-co-nh—	\—X	II
X	CO-NRjRz

ve kterém X,R^,R₇	maj í význam	li vedený	výše s	komp 1 exern
gadolinia vzorce III	odpoví daj i cím	formě vyv	i n ut é I.	. ve které
R=-(CH₂)₂COOH v	pr i tom nos t .i	č i n i d L a	spojeni ,	zejména
takového, jaká se	používají v	syntéze	pep t idů,	, jak o j e
karbdiimid, například ve vodném roztoku.
Aminy vzorce	11, pro které	je R.určeno A,	mohoLi být

získány reakcí HNRjR? se sloučeninou vzorce IX':

X CO-CI

X CO-CI ve kterém funkce NH_? je chráněná ve formě ftalimidu, a dále hydraz i no 1yzou.

Ani i.noa I koho 1 V HSR^R? J^s°u známé nebo nv zpúsobv analogickými k tčiii, které jsou ře. Zejména je možné uvést aminoa1 koho 1y mohou být připravepopsány v lit e r a mdostupne v obchodě.

<h; f i novane tím, ze

i) R = H a R₂ - CH(CH₂OH)₂.

ji) r^ _ 11 a R₂ CH₂-CHOH-CH₂OH i i i) R_} - CH₂(CI1OH)₄CH₂OU a R₂ - CH-_S . CH₂CH₂CH₂OH nebo R_x, • · ♦ 14» •4· • · ·· • 4· • 4 4 44

4·

4 4« *

4·4 « · · «4 « · · · • · ·4444 • 4 ·4

4**·«·· *** ti obecněji sloučeniny popsané v patentových spisech EP-A- 558395, EP-A-25083 a EP-A-33426.

Aminy vzorce II, ve kterých R_? značí A a značí H, se jednoduše získají reakcí aminu vzorce H₉N,A se sloučeninou vzorce IV předběžně N-chráněnou. Budiž poznamenáno, že amin H₂NA, který odpovídá aminu vzorce II, ve kterém R_? značí A, může být připraven shodné se způsobeni navrženým výše.

Složení kontrastních činidel pro zobrazení magnetickou rezonancí, která odpovídají vzorci I vc farmaceutíčky přípusmém pojivu jsou dalším předmětem předloženého vynálezu.

Jejich farmaceutická forma bude přizpůsobena cestě podávání.

Přednostně budou směsi kontrastních látek vodné roztoky fyziologicky přijatelných solí komplexu podle vzorce 1. Směsi podle předloženého vynálezu mohou kromě jiného obsahovat stabilizátory. rozličné přísady určené k tomu, abv udržovaly roztok izotonícký nebo aby umožnily udržovat jeho pH, jakož i jiné přísady běžně používané v technice.

Koncentrace směsi bude přizpůsobena cestě a oblasti podávání. Obecně bude 0,01 M až 0,5 M, přednostně 0,05 M až 0.1 M .

Jednotná dávka budu zřejmě funkci struktury komplexu a povahy zkoušky. Obecně se podává 0,005 mmol/kg až 0,1 mmol/kg.

Dále jsou popsány způsoby přípravy komplexu podle vzorce III ve vodném roztoku, aminu vzorce 1I, ve kterém Rj = Ro = Cíl _? (CHOH ) ₄CÍI _?OII a koniplexu, vc k terém Rj = 11 ti R_? = A s R' j -- R’ ₂ - CH_?(CHOH)₄CH₂OH.

P ř í k1adv proveden j__v v 11 á1ezu

Př íprava komp1exu vzorce II1

Etapa a)

167 g dimulhyIbromg1utaranu se pomalu vlije do suspenze 30 g 1,4,7,10 tu tra cyklododekan a 97 g uhličitanu draselného • · •

A*·

A · ·· • ·· • · A ·· •♦ »· ···

Μ·»

A

V

A «

aCctuiii Li*llu. SiuCS Se ΠΊ ichék pud 1iičí'liií auíiuSfcrULl při 60^uC 48 hodin, během kterých se přidá 83 g diinethyl-2bromg1utaranu. Potom se reakční prostředí přefiltruje a koncentrovaný roztok se zkoncentrujc do sucha. Zbytkový olej se vyčistí chromatografi i na oxidu křemičitém v eluentu s g rad i enteni dichlořme t han-met hano 1u (100/0 až 80/20) výtěžkem 43 g oktaesteru ve formě oleje.

Etapa b)

Výše uvedený olej v roztoku v 72 ml mechaiiolu se zavede do vodného roztoku NaOh (68 g NaOH, 340 ml vody) a směs se pří míchání udržuje na teplotě 70 ⁽⁾C po 48 hodin.

Methanol se odstraní při sníženém tlaku a vodnti fáze se extrahuje methylench1oridem před zavedením 800 ml kationické pryskyřice pro výměnu iontů AmberliteR dodávané společností Rohm a llaas pod značkou IRC 50 (slabá kyselina).

	Po	1 hodině styku	se pryskyřice odstraní a	do roztoku
se	zavede	6 8 0 m .1 a n	i. oni	cké pryskyřice AmberliteR	pro výměnu
iontů ooznačené IRA	458	(silná zásada).
	Po	12 hodinách	se	pryskyřice odděl i	a zavede	do kolony,
π a.	1 uzený	produkt se	i zo 1	u j e e1uc í 4 litry	vodného	roztoku 3N
kyše 1 i nv	octové, potom 4	1 i try roztoku 6N.
	Po	ods t raněn i	rozpouštěd1 a př i	s n í ž e n é in	tlaku je

výtěžek 31 g bílých krystalu.

RMN¹³C(200 MHz.DMSO-d6,T=30 °C,24.31,48,62,172,174.

Etapa c)

29,4 g ok takyse I iny získané výše popsaným způsobem se suspenduje ve 530 ml vody s 15.8 g GdCln, 6 při míchání, pomalu se přidá vodný roztok 1N NaOH až do dosažení stabilní hodnoty pil - 6,5. Prostředí se potom přefiltruje na filtru M i 1 1 i p í > i u R s velikostí otvoru 0,45 μη a filtrát se zkonciuril· rujc do sucha. Po desikaci se získá výtěžek 49.3 g sodné soli komplexu gadolinia podle vzorce III, ve formě pevné látky obsahující NaCl vzniklý během tvorby komplexu.

Tento produkt může být vyčištěn srážením ve vodném cta-

« · « · « • · ·· ···· nnlij ix zpracováním pro odstraněni přebytku Gu^⁺ který nebyl zkomplexován některou chelátující pryskyřicí například dodávanou společností Biorad Laboratoř i es pod značkou CHELEX.

Relaxivita Rj (37 °C,20 MHz) = 5,9 mM*¹s^_I.

Ch romatograf i e : HPLC nti koloně Hibar LicrosorbR Diol μπι, I=25cm, d=4mm, (Měrek), eluent CH^CN/KH_?P0₄

0,01 M (50/50 - v/v)

Doba prodlení : 2 minuty.

Příprava aminu vzorce II ve kterém R ] = R->=CH->-CHOH ) ^CH -,OH ti X = 1 (sloučenina I Ia)

Etapa a)

Při míchání se zavede po malých množstvích 179 g chloridu N-ftaloyiglyci nu do roztoku pří 0°C 119 g chloridu kyseliny 5 - ami no-2,4,6 - t r i j odo.i zof ta I ové v 500 ni 1 dimethylacetamidu. Směs se míchti několik hodin při teplotě 0°C, potom se nechči přes noc ustát pří pokojové teplotě a zavede se pomalu litru vody, vytvořena ve 3 litrech ethylacetátu. roztokem uhličitanu sodného, zkoncentruje. Výtěžek je 6 -1 r i j odo- 5 - f tal i micloace t am i sraženina se izoluje a rozpustí Tento roztok se promyje vodným potom vodou, usuší se. potom se 25 g chloridu kyseliny 2.4-, oi zoftalové.

Eitipa b)

Roztok 1000 ml dimethy1acetam idu, 104 g chloridu kyseliny uvedené výše, 208 g disorbíty lami nu a 50 ml t r i e t hv 1 tůninu se udržuje 5 hodin při 80°C. Vytvořená sraženina se oddělí a rozpouštědlo se odstraní destilací pod sníženým tlakem, zbytek se rozpustí ve vodě při pil - 3 a uvede se do styku se 750 m.l pryskyřice pro výměnu kat iontů Aiabe r 1 i teR dodávané společnosti Rohm a llatt.s pod značkou I R\ 77 (silná kasal iiia) . Po dvou hodinách míchání se pryskyřice oddělí a zavede do vodného roztoku ( 700 ml) vyčištěného di amidu 17 m! hvdrátu hydrazinu. Po pěti hodinách ni íchání při 80 °C se prostředí okysel i při teplotě místnosti přidáním 26 ml vodného roztoku *4 • ·· • 44· • 4· • I··* •· • * · · · kyseliny chloiúvodíkové 10?\. Sraženina se izoluje a roztok se nechá projit kolonou 500 m] slabé anionické pryskyřice pro výměnu iontů (Amber liteR IRA 67), potom 80 m.l slabé kationické pryskyřice (Amber! iteR IRC 50), získaný roztok se zpracuje 4 litry pryskyřice Amberl.i teR silně kyselé, na které se zachytí konečný produkt. Tento se eluuje vodným roztokem NH^OH. Amin vzorce TI se získá su 70 % výtěžku ve formě pevné látky.

Chromatografie HPLC: kolona LiChrospherR 100 RP

18,5 um (Měrek)“h=25cm,d-mm.

Eluent:CH^CN/PICR B8 0,05 M(Vaters) 5/95 , výkon: lml/rriin

Dobéi prodlení ízomerů: asi 8 min x: PIC B8: směs: kyseliny oktansul fonová/mcthanol /kalc iumace tát/voda,

Příprava aminu vzorce II, ve kterém R~R->~

CH_?(CHOH)₄CH_?QH a X=Rr (s1oučenina IIb)

Použije se stejný způsob jako předešlý pro získání žádaného produktu. Molekulární složení jeho spektra hmoty elektrickým napravováním je správné. V kapalinové chromatografi i vysokého výkonu jsou doby prodlení i zornérů asi 8 min za stejných podmínek jako dříve.

Kyselina 5-am i no-2,4,6 - t r.i brom i zof t a I ová jako vvchozí látka se připraví s 85 % výtěžku reakcí 100 ml bromu s roztokem v 1300 ml vody a 380 ml koncentrované chlorovodíkové kyseliny a 87 g kyseliny 5 - am i no i zof t a .1 qvú .

CCM; SiO^Murck:

C₆H_ó/CH₃COC₂H₅/HCO_?H (60/25/ 1 1 ) Rf=C) , 8 , ( CH ₃) _?CI 1011/Cll₇C00C₂l I _ς /XH₄0H ( 3 5 / 3 5 /40) R t' = 0.4 .

Příslušný chlorid kyseliny se připraví klasickým zpusohum reakcí SOCI? s odpovídající di kyšu linou s výtěžkem 88 0.

CCM: Si 0 , Můrek:

ClkClo Rf=0,9.

· ·	• ·		« · · ·
	* * * *	• · * *	•	• ·
	• · ·	• *		• «
	• * « · ·	• ·	• · ·	• ·
	• ·	4 ·		• ·
-6’	»·« **	4 « * · 9 9 Φ	* *	•

Ftalimidy (chlorid kyseliny a uiamid) mají doby prodlení 11 minul popřípadě 15 až 30 minut v kapalinové chromatografii vysokého výkonu, na koloně LiChrospherR 100 RP18.5 μπι (Měrek) 1=250 mm, d=4 mm, s výkonem 1 mL/min v eluentu v prvním případě se směsí 60/40 acetoni triiu a vodným roztokem 0,01 M KH_?PO^ a v druhém případě se stejnou směsí v poměrech 7/97 (v/v).

Příprava tun i nu vzorce II s R— i ί, R—A , R — R —

CH₂(CHOH)₄CIUOH. X=I (s 1 oučen i na I I c)

Po dobu 24 hodin při 70 °C se míchá roztok ve 400 ml dímethylacetamidu, který obsahuje 59 g chloridu kyseliny 2,4, 6-trijodo-5-fta 1imi dačetam idi sof ta love, 200 g aminu vzorce II a získaného reakcí předešlým způsobem a 29,5 ml tributy lani i. n u.

Potom se odstraní rozpouštědlo při sníženém tlaku a zbytek se vyčisti chromatograf i i ntt 4 kg adsorbentu XAD1600 (Rohm a Haas) v eluentu se směsí CH^OH/H^O.

Vodný roztok, který obsahuje ftalimid (80 % teorie), se zpracuje jako při přípravě předešlým způsoben hydrátem hvdrazinu. aby se získal amin vzorce II s výtěžkem 85 %.

SuperdexR 30 v koloně 16 mm/60 cm

Ch romatog ra f .i e : gel (Pharmac i a) .

El uent: tampon N’aC I pH=7,2.

Výkon 1 ml/min.

Objem eluce: 102 ml

HPLC kolona SvmmetrvR C

0,1 M/NaH₇PO₄(),05 M/NaN~(),01 M d=4,6 mm,

FLuent: CH₃CN/KH₇P0₄ 0,01 M (15/85) (bez CILCN během ? min).

Vy k on 1 mI/min.

Doba prodlení izonerú: asi 18 min.

•·· • ·« * • « · ♦· • · • · ·· · • · · « ·* • · · ·· • · · · · · · • · · · O' Ht’ ···

P Γ j p Γ clV cl ¢1111 i. i Γΰ v z. u I. UC 11 SK —H . K —A , K j ~ H 'j —

CH₂(CHOH)₄CH₂OH a X=Br (sloučenina lid)

Etapa (a):

Při teplotě 70 °C se zavede 17,3 g chloridu kyseliny 5 - f ta I. i m i dače tam i do-2,4,6 -1 r i brom i zof ca.l ové v 185 ml dimethylacetamidu, 11,3 ml t r i t:thy 1 umí nu a 66,6 g sloučeniny líh. Po 24 hodinách míchání se prostředí při teplotě místnosti vlije do 2 litrů methylenchloridu a vytvořená sraženina se oddělí. Vyčisti se chromatugrafi i vodného roztoku na 3 i polystyrénové pryskyřice typu X.AD1600, dodávané společností Rohifi a Haas. Výtěžek 90 %.

Etapa (b) :

Při teplotě 80°C se po dobu 5 hodin udržuje roztok

37,5 g sloučeniny dříve izolované ve 130 ml vody a 2 ml 35%-ního vodného roztoku hydrazinu. Po ochlazení se prostředí, přivede na pH = l přidáním vodné kyseliny chlorovodíkové ION', potom se chromatografuje postupně na 100 ml kationické pryskyřice AmberLiteR (IRN77) a anioriickc pryskyřice (IRA67) a na 500 ml kyselé polystyrénové pryskyřice pro výměnu kationtů typu IMAC HP222 dodávané společností Rohm a Haas, načež se produkt eluujc vodným roztokem NH^OH 3M, potom se po koncentraci izoluje sražením v ethanolu.

Chromatograf je HPLC: kolona I. i Ch rospliu rR 100RP18,5,25 μ m , l.-25crn, d = 4mtn, (Měrek), eluent: vodná HC 1 (pH3,4)/CH^CX97/3 výkon 1 ml/min., doba prodlení:4,5 až 8 min.

Spektrum hmoty (elektrický postřik): konformní.

Př í p raya__ aminu vzorce I I , ve kterém R -CH R_o~Cll_? (CHOH) ?CH_?Oli a X~I (sloučenina lle)

5 g cli I or i du kyše 1 nv > - ť t a i i mi dače tam i d- 2 t r i j odosof ta Iové se nrzpus t í

V Li

0 ml dimcthy láce taní liti při tep I o tě mis Lnosli se

- ( X-me t hy 1 ) am i nohu lan -1.2,

-t r i o Iu a 2 2,8 m 1 t ri but v Iami n u , prostředí se při míchání hodin konzervuje při teplotě místností, potom koncentruje • ·· • · · * φ · · φ · φφ ·

ΊΟ * *·· ·· při sníženém tlaku. Zbytek se vyčisti chromatograťi i z vodného roztoku na katíontové pryskyřici H⁺AmberliteR IRN77. Výtěžek > 95%.

Etapa (b):

g předchozího produktu se zavede při 80°C clo 50 ml vody obsahující 1,43 ml vodného roztoku 35%-ního hvdrazinu a směs se udržuje při této teplotě po dobu 5 hodin před přivedením na pH=l přidáním vodné kyseliny chlorovodíkové ION. Sražen i na se odděl í a vodná fáze se chromatograťuje na 100 ml kat iontové pryskyřice H⁺Amber1 iteR 1RC50, potom na 200 ml aniontové pryskyřice 0H⁺AmberI iteR IRA67.

Koncentrací se získá výsledný produkt s 80%-ním výtěžkem .

CCM: na křemíkové desce Měrek 60F, eluent octan etvlnv/ izopropano1/vodný roztok amoniaku 15N (35/35/40). Rf=0,7.

Příklad 1

Sloučenina vzorce J ve které N=N'a a

I CO-NICHj-tCH OHK-CHj-OHh

R = .(CHjjj-CO-NH-CHj-CO-NH

/ \ ( CO-M(CH,-(CH OHJj-CHyOHjj

Po dobu 48 hodin se udržuje teplota místnosti při míchání, 1 g sloučeniny gadolinia vzorce III, 5 g sloučen inv Ila a 6,8 g chlorhydrát 1 - (3 - d i me thy 1 ani i nop ropy 1 ) - 3 - ct hv 1karbod i ímidu ve 13 ml vody, pil reakční ho prostředí se udržuje na hodnotě 7, opakovaným přidáním vodného roztoku kvselinv chlorovodíkové IN.

Reakční prostředí, ke je podrobeno uI irafi I iraci nova prodávané společností membránu z po]ycthersu1fonu kterému bvlo přidáno ?() ml vodv, s jednou kazetou ni ni settc tvou

Societě Pil trou (USA) obsahující s prahem odříznutí 5 KDa.

Získají se 2 g hrubého produktu ve formě sodné soli,

• · · * · « * • « ··

·· ····

která může být vyčištěna chromatografH stérickým vyloučením na koloně gelu SuperdexR. dodávané společností Pharmacia, v eluentu z vody.

Chromatograf ie HPLC: kolona Hibar LícrosorbR Diol 5 μπι 1=2 5 cm, d = 4 mm (Měrek)

Eluent: KH₇P0₄0.01 M/CH-CN(45/55)

Výkon 1 ml/min

Doba prod lení: 6 mi n.

P ř í k l ad 2

Sloučenina vzorce I, ve které M=Na a

0r CO-N[CH.-(CH OH)_;-CH_rOH),

R -(CHjl^CO-NH-CHj-CO-NH——9r ůr CO-N[CH_r(CH OH).-CH,-OH]j g 1 - (3-d i me thv 1 um i no-p ropy 1) - 3-ethy 1 kar bod i. im i du se zavede po malých dávkách do roztoku sestávajícího ze 100 ml vody. 7,4 g komplexu gadolinia vzorce IIJ a 37 g aminu vzorce lib, při udržování prostředí na pH 7 přidáním kyseliny chlorovodíkové 1N. Po 48 hodinách míchání při teplotě místnosti se prostředí podrobí u1 irafi 11raci , jako v příkladu 1, avšak s membránou s prahem rozříznutí 3KDa, potom sc uvede do styku s 500 ml aniontové pryskyřice pro výměnu iontů AmberliteR IRA 45 8 ' (zásad i t.á forma) .

Po odstranění pryskyřice a odpaření vody se získá 14g produktu ve formě pevné látky

Hrubý produkt muže bvi také izolován z reakčního prostředí sražením ethylalkoholem.

Ch roma tograf i u : I1PLC kolona Hibar licrosorbk Diol 5 μι:ι

- 2 5 cítí, d = 4 inm ,

b. ucíii KH₂ P0₄0,0 1 M/CH_aCN (45/55 - v/v) , Výkon 1 m l /min.

Doba p rod lení: 5 in i 11.

	• • a	• • *	« ·· • < · * i	·♦ • · v *	• · · · • •
12-	• • 9 • · ·	• · ·♦· · • 4	• » • · «1 · •IF»	• ♦♦ · • • *	« *

Příklad 3

Sloučenina vzorce I ve které Μ-Na a (CHihťO-NH-CHjťO-NH

Br

CONHCH<CONH

σθ·Ν[0Η_;·(0Η0Η>,<Η_:ΌΗ]_;

Br

CONHCH<CONH

Rr

CON[CH_;(CrlOHj,CFbOH]_;

Br CONÍCH<fCHOHkCH<OHlRozpustí se 0,3 g komplexu gadolinia vzorce III či 3,5 g sloučeniny vzorce líc v iu mi vody ti zavede se po kapkách roztok kyseliny chlorovodíkové 1N až do pil 6,5, potom se přidá 1,1 g chlorhydrátu 1 - (3- dime thy.l am i nopropyl) - 3 ethylkarbod i. i nsi d u .

Po 24 hodinách míchání při teplotě místnosti se přidá 80 ral vody a provede se vyčistění prostředí jako v předešlém příkladu til traf i lat raci s membránou s prahem rozříznutí 8 KDa pro izolaci 125 g sodné soli komplexu ve formě bílého prášku.

.1 e. také možné provést reakci při 40 °C, popřípadě za přítomnosti katalytického množství sodné soli kyseliny (N-hvd roxysuke.i ηi m i dy1)- 3 -suIfonové.

Produkt může být vyčištěn sražením v izopropanolu.

Chromatografiu stér.ického vyloučení: 4 kolony, dodávané společností Shodex (JP) pod značkou OH Pak SB-()H0 o průměru 8 mm ti délce 30 cm umístěné v sér i i , nap l něné gelem pol vhyd roxymethakry .1 átu , meze vyloučení vzhledem k pullulanu: 10⁶ kDa (SB-804). 1(P kDa (SB-803), 10⁴ kDa (SB-802-5). 10⁴ kDa (SB-802-.γ). L-luent votlný NaC! 0,16

H/Cl ( 7(1 / ?() V/V) , vvkon 0.8 ml/min. , T-30 °C. Doba prodlen í : 3 4.4 min.

Příklad 4

Sloučenina vzorce I, ve které M-Na «

	Hr y	rnww.irimcH.ffll. /-----................
0Γ	CON’HCH<CONH—<
(CH^€O-N’H<H’-CO-N'H—(	“VB;	C0 N\|cH_;-(CHOHk< [ΡΌΗ]_;
	λ y	CONÍCH^iCHOHlfCH-OH]'
	CONHCH<CON^!H-{	Br

CON[CH:fCHOHkCH_:-OH]2

Rozpustí se 1,8 g sodné soli komplexu vzorce lil ti

21,8 g aminu (sloučenina vzorce Ila) ve 45 _m] vodv, po okyselení vodnou kyselinou chlorovodíkovou 1N až do pil 6 se prostředí uvede na teplotu 40°C před zavedením 2,2 g chlorhydrátu

- (3-d i rnu thylam inopropy 1)-3-e chy 1 karbod i imidu ti 0,165 g sodné soli kyseliny (N-hydroxysukc i n.i m i dy 1 u)-3-sul f onové . Po dvou hodinách míchání se směs vlije do 600 ml ethanolu a vytvořená sraženina se rozpustí ve 270 ml vody.

Roztok se podrobí ultraťiltraci jako v předešlém příkladu na membráně mající práh odříznutí 1 kDa. Po odpaření vody se získá 15 g produktu ve formu bílého prášku.

Chromatograf i e stérického vyloučeni: stejné podmínky jako v příkladu 3. Doba prodlení: 33,7 min.

P ř i k .Lad 5

Sloučenina vzorce I, ve které M-Na

CO-N-CH,-(CHOHi.-CH.OH

I

CH,

Použitím způsobu podle příkladu 1 se získá z aminti Tle a z komplexu vzorce lil (sodná sůl) produkt.

HPLC: podmínky jako v příkladu 2. Doba prodlení:3 min.

, · - v i '-'jVOKATNi KANCELÁŘ •Ů'r.'ť’··' ’ -y''' ív,_t ftcKr ŮVOOŘIK KALENSKÝ

A PARTNEŘI

-1Ί-	• ·· ' · · ... * ...» ... · · ... · * · • · · · ... ·* ·······	♦ * · · * · • · · • · ♦ v · ♦ · • · ·
		. Zj *:	v. n	‘0
		1 Λ ,¾..		ť .·
\ r r* u v L3	N A ROK Y

Claims

A PARTNEŘI

-1Ί- • ·· ' · · ... * ...» ... · · ... · * · • · · · ... ·* ······· ♦ * · · * · • · · • · ♦ v · ♦ · • · · . Zj *: v. n ‘0 1 Λ ,¾.. ť .· \ r r* u v L3 N A ROK Y

1. Komplex gadolinia vzorce;

OOC-CH-N—CH₂—CH₂ — N —CH-COOM I I

R R ve kterém R je skupinti vzorce:

-(CH₂)_rCO-NH-CH₂-CO-NH í k u

X je brom nebo jód, Rj je vodík, alkyl s hydroxvalkyl se 2 až 8 atomy uhlíku,

R-, je mono nebo po I yhvdroxyal ky.1 se 2 až R| je vodík a je skupina vzorce

1 až 3 atomv uhl nebo mono nebo poly8 atomy uhlíku, nebo

CO-NR/Rý kde

X je definováno výše a mají některý 7 významů definováných výše pro R, , R -, s výjimkou A, když -C0-NRjR2 ^r'^cbo CR’-|R'2 obsahují alespoň dvě hvdroxylové skupiny ti M představuje vodík ttebo kationt minerální nebo organické báze.
2. Komplex podle nároku 1, vzorce I, ve kterém -COXR^R^ nebo -CONR’|R’_? obsahují alespoň šest hydroxylových skupin.
3. Komplex podle alespoň jednoho z nároků 1 a 2 podle vzorce

1, ve kterém M je organický nebo minerální kut iont zvolcnv ze skupiny zahrnující N’a⁺ a kat ionty odvozené z lysinu, argininu ne t hy 1 g I ukam i nu a d i e t hano 1 tun i nu .
4. Komplex podle alespoň jednoho z nároků 1 až 3, vzorce I, ve kterém a R₉ představují CH_? (CHOH) ^-01Ι_?0Η a B je brom.
5. Komplex podle alespoň jednoho z nároků 1 až 4 vzorce 1, ve kterém Rj je vodík, R_? je A a R’| ti R’,_? představuji

CH^ (CHOH) -CH-^OH ti X představuje brom.
6. Směs kontrastního činidla pro zobrazení magnetickou resonancí, vyznačující se tím, žc obsahuje komplex podle alespoň jednoho z nároků 1 až 5 ve formě soli s farmaceuticky přípustnou baží ve spojení s farmaceutickým pojivém.
7. Směs kontrastního činidla pro zobrazení paprsky X. vyznačující se tím, že obsahuje komplex podle alespoň jednoho z nároků 1 až 3, ve kterém X představuje 1, ve formě soli farmaceuticky přípustné báze ve spojení s farmaceutickým poj i v Ulil .