CZ304749B6 - Ecteinascidin mající pět spojených kruhů s 1,4-můstkem, farmaceutický prostředek, použití a způsob - Google Patents

Abstract

Ecteinascidinové sloučeniny obecného vzorce I, mající systém pěti spojených kruhů ecteinascidinu s 1,4-můstkem, který má strukturu obecného vzorce VIa nebo VIb a sloučeniny, ve kterých je -NH.sub.2.n. nebo -OH skupina na 1,4-můstku derivatizována. Takové sloučeniny jsou použitelné při léčení nádorů.

Description

Ecteinascidin mající pět spojených kruhů s 1,4-můstkem, farmaceutický prostředek, použití a způsob

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká protinádorových derivátů ecteinascidinu.

Dosavadní stav techniky

Ecteinascidiny jsou neobyčejně schopné protinádorové látky izolované z mořské sumky Ecteinascidia turbinata. Některé ecteinascidiny byly popsány v předchozích patentech a ve vědecké literatuře.

US patent 5 256 663 popisuje farmaceutické prostředky obsahující látky extrahované z tropického mořského bezobratlovce, Ecteinascidia turbinata, a označuje je jako ecteinascidiny a použití takových prostředků jako antibakteriálních, protivirových a/nebo protinádorových sloučenin u savců.

US patent 5 089 273 popisuje nové látky extrahované z tropického mořského bezobratlovce, Ecteinascidia turbinata, a označuje je jako ecteinascidiny 729, 743, 745, 759A, 759B a 770. Tyto sloučeniny jsou použitelné jako antibakteriální a/nebo protinádorová činidla u savců.

US patent 5 478 932 popisuje ecteinascidiny izolované z karibské sumky Ecteinascidia turbinata, které poskytují in vivo ochranu proti P388 lymfomu, B16 melanomu, M5076 vaječníkovému zhoubnému nádoru, Lewisově rakovině plic a štěpům z cizí tkáně LX-1 lidské plíce a MX-1 prsní žlázy.

US patent 5 654 426 popisuje několik ecteinascidinů izolovaných z karibské sumky Ecteinascidia turbinata, které poskytují in vivo ochranu proti P388 lymfomu, B16 melanomu, M5076 vaječníkovému zhoubnému nádoru, Lewisově rakovině plic a štěpům z cizí tkáně LX-1 lidské plíce a MX-1 prsní žlázy.

US patent 5 721 362 popisuje syntetický proces pro výrobu sloučenin ecteinascidinu a jim podobných struktur.

WO 00/69862, ze kterého si předkládaný vynález nárokuje prvenství, popisuje syntézy sloučenin ecteinascidinu z kyanosafraktinu B.

Zvídavý čtenář je odkázán na: Corey, E. J., J. Am. Chem. Soc., 1996, 118 pp.9202 - 9203; Rinehart, et al., Journal of National Products, 1990, „Bioactive Compounds from Aquatic and Terrestrial Sources“, vol. 53, pp. 771 - 792; Rinehart et al., Pure and Appl. Chem., 1990, „Biologically active natural products“, vol. 62, pp. 1277 - 1280; Rinehart et al., J. Org. Chem., 1990, „Ecteinascidins 729, 743, 745, 759A, 759B a 770; Potent Antitumour Agents from the Caribbean Tunicate Ecteinascidia turbinata“, vol., 55, pp. 4512 - 4515; Wright et al., J. Org. Chem., 1990 „Antitumour Tetrahydroisoquinoline Alkaloids from the Colonial Ascidian Ecteinascidia turbinata“, vol. 55, pp. 4508 - 4512; Sakai et al., Proč. Nati. Acad. Sci. USA 1992, „Additional antitumour ecteinascidins from a Caribbean tunicate: Crystal structures and activities in vivo“, vol. 89, 11456 - 11460; Science 1994, „Chemical Prospectors Scour the Seas for Promising Drugs“, vol. 266, pp. 1324; Koenig, K. E., „Asymmetric Synthesis“, ed. Morrison, Academie Press, lne., Orlando, FL, vol. 5, 1985, p. 71; Bartoň, et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans., 1, 1982, „Synthesis and Properties of a Series of Sterically Hindered Guanidine Bases“, pp. 2085; Fukuyama et al., J. Am. Chem. Soc., 1982, „Stereocontrolled Totatl Synthesis of (+) - Saframycin B“, vol. 104, pp. 4957; Fukuyama et al., J. Am. Chem. Soc., 1990, „Total Synthesis of (+) - Saframycin A“, vol.

-1 CZ 304749 B6

112, ρ. 3712; Saito, et al., J. Org. Chem., 1989, „Synthesis of Saframycins“, vol. 54, 5391; Still, et al., J. Org. Chem., 1978, „Rapid Chromatographic Techniques for Preparative Separations with Moderate Resolution“, vol. 43, p. 2923; Kofron, W. G.; Baclawski, L. M„ J. Org. Chem., 1976, vol. 41, 1879; Guan et al., J. Biomolec. Struc. & Dynam., vol. 10 pp. 793 - 817 (1993); Shamma et al., „Carbon-13 NMR Shift Assignments of Amines and Alkaloids“, p. 206 (1979); Lown et al„ Biochemistry, 21,419 - 428 (1982); Zmijewski et al., Chem. Biol. Interactions, 52, 361 - 375 (1985); Ito, CRC CRIT. Rev. Anal. Chem., 17, 65 - 143 (1986); Rinehart et al., „Topics in Pharmaceutical Sciences 1989“ pp. 613 - 626, D. D. Breimer, D. J. A. Cromwelin, K. K.: Midha, Eds., Amsterdam Medical Press Β. V„ Noordwijk, The Netherlands (1989); Rinehart et al., „Bioío logical Mass Spectrometry“, 233 - 258 eds. Burlingame et al„ Elsevier Amsterdam (1990); Guan et al., Jour. Biomolec. Struct. & Dynam., vol. 10 pp. 793 - 817 (1993); Nakagawa et al„ J. Amer. Chem. Soc., 111: 2721 - 2722 (1989); Lichter et al., „Food and Drugs from the Sea Proceedings“ (1972), Marině Technology Society, Washington, D. C. 1973, 117 - 127; Sakai et al., J. Amer. Chem. Soc. 1996, 119, 9017; Garcia-Rocha et al., Brit. J. Cancer, 1996, 73: 875 - 883; and Po15 mmier et al., Biochemistry, 1996, 35: 13303 - 13309; Rinehart, K. L„ Med. Res. Rev., 2000, 20, 1 - 27 and I. Manzanares et al., Org. Lett., 2000, 2(16), 2545 - 2548.

Nejslibnější ecteinascidin je ecteinascidin 743, který je ve stadiu klinických pokusů pro léčení nádorů. Et 743 tvoří komplex tris(tetrahydroisochinolinfenolové) struktury následujícího obecné20 ho vzorce Ia:

V současné době je připravován izolací z extraktů mořské sumky Ecteinascidia turbinata. Výtěžek je nízký a hledají se alternativní procesy přípravy.

Ecteinascidiny zahrnují systém pěti spojených kruhů (A) až (E), jak je ukázáno na následující struktuře obecného vzorce XIV:

V ecteinascidinu 743 má 1,4-můstek následující strukturu obecného vzorce IV:

-2CZ 304749 B6 (IV).

Další známé ecteinascidiny zahrnují sloučeniny s různým můstkovým cyklickým kruhovým systémem, jako se vyskytují v ecteinascidinu 722 a 736, kde má můstek strukturu obecného vzorce V:

o

(VI), a v ecteinascidinu 594 a 596 má můstek strukturu obecného vzorce VII:

(VII).

-3 CZ 304749 B6

Úplná struktura pro tyto a další podobné sloučeniny je popsána v J. Am. Chem. Soc. (1996) 118, 9017-9023.

Jsou známé další sloučeniny s pěti spojenými kruhovými systémy. Všeobecně jim chybí můstko5 vý kruhový systém, který je přítomen v ecteinascidinech. Zahrnují bis(tetrahydroisochinolinchinon)-protinádorové-antimikrobiální antibiotické safraciny a saframyciny a mořské přírodní produkty typu renieramicinů a xestomycinů izolované z pěstovaných mikroorganismů nebo hub.

Všechny mají všeobecnou dimerickou tetrahydroisochinolinovou uhlíkatou kostru. Tyto sloučeniny mohou být klasifikovány do 4 typů, typ I až IV s ohledem na způsob oxidace aromatických ío kruhů.

Typ I, dimemí isochinolinchinony, je systém obecného vzorce VIII, který se nejobvykleji vyskytuje v této třídě sloučenin, viz následující tabulka I.

-4CZ 304749 B6

Tabulka I

Struktura typu I antibiotika saframycinu

Substituenty

Sloučenina	r’4*	RUb	R«	R25“	R«b	R2*
saframycin A	H	H	CN	0	0	ch3
saframycinB	H	H	H	0	O	ch3
saframycin C	H	OCHj	H	0	0	ch3
saframycin G	H	OH	CN	0	0	ch3
saframycin H	H	H	CN	OH	CH2COCH3	ch3
saframycin S	H	H	OH	0	O	ch3
saframycin Y3	H	H	CN	nh2	H	ch3
saframycin Ydj	H	H	CN	nh2	H	C2Hs
saframycin Ad]	H	H	CN	0	0	c2h5
saframycin Ycfe	H	H	CN	nh2	H	H
saframycin Y2b	H	Q*	CN	nh2	H	ch3
saframycin Yžb-d	H	Q*	CN	nh2	H	c2h5
saframycin AH2	H	H	CN	H	OH4	ch3
saframycin AH2Ac	H	H	CN	H	OAc	ch3
saframycin AH|	H	H	CN	OH“	H“	ch3
saframycin AHiAc	H	H	CN	OAc	H	ch3
saframycin AR3	H	H	H	H	OH	ch3

^a přiřazení jsou zaměnitelná ^b kde skupina Q je obecného vzorce:

-5CZ 304749 B6

Typ I aromatických kruhů se nachází u saframycinů A, B a C; G a H; a S izolovaných ze Streptomyces lavendulae jako minoritní komponenty. Kyano derivát saframycinů A, nazývaný kyanochinonamin, je známý z japonského patentu JP-A2 59/225189 a 60/084288. Saframyciny Y₃,

Yd_b Adi a Yd₂ byly produkovány S. lavendulae přímou biosyntézou s vhodným doplněním kultivačního média. Diméry saframycinů Y_2b a Y_2b j tvořené spojením dusíku na C-25 jedné sloučeniny a C-14 další sloučeniny byly také produkovány v doplněném kultivačním médiu S. lavendulae. Saframycin AR, (=AH₂), vzniklý mikrobiální redukcí saframycinů A na C-25 pomocí Rhodococcus amidophilus, byl také připraven nestereoselektivní chemickou redukcí ío saframycinů A borohydridem sodným jako směs epimerů 1:1, po čemž následuje chromatografická separace (druhý izomer AHi je méně polární). Stejnou mikrobiální konverzí byl produkován další redukční produkt saframycinů AR₃, 21-dekyano-25-dihydro-saframycin A, (=25dihydrosaframycin B). Další možností mikrobiální konverze saframycinů A je použití druhu Nocardia produkujícího saframycin B a dále redukce pomocí druhů Mycobacterium, které pro15 dukují saframycin AH'Ac. Pro biologické studie byly také chemicky připraveny 25-O-acetáty saframycinů AH₂ a AHj.

Sloučeniny typu I obecného vzorce X byly také izolovány z mořských hub, viz tabulka II.

-6CZ 304749 B6

Tabulka II

Struktury sloučenin typu I z mořských hub

O^R

	Substituenty
RW	R	R21	R
renieramycin A	OH	H	H	-C(CH3>CH-CH3
renieramycin B	OC2H5	H	H	-C(CH3)=CH-CHj
renieramycin C	OH	O	0	-C(CH3)=CH-CH3
renieramycin D	OC2H5	0	O	-C(CH3)CH-CH3
renieramycin E	H	H	OH	-C(CH3>=CH-CH3
renieramycin F	OCH3	H	OH	-C(CHj)=CH-CH3
xestomycin	och3	H	H	-ch3

Renieramyciny A až D byly izolovány z antimikrobiálního extraktu hub, druhu Reniera sebraných v Mexiku, spolu s biogeneticky odpovídajícím monomemím isochinolinovým renieronem a podobnými sloučeninami. Struktuře renieramycinu A byla původně přiřazena opačná stereochemie na C-3, C—11 a C-13, avšak pečlivá analýza ’HNMR dat pro nové podobné sloučeniny renieramycinu E a F izolovaných ze stejné houby sebrané u Palau odhalila, že spojení kruhů u ío renieramycinu bylo identické se saframyciny. Tento výsledek vedl k závěru, že dříve přiřazená stereochemie renieramycinů A až D musí být ta samá, jako u saframycinů.

Xestomycin byl nalezen v houbě, druhu Xestospongia sebrané z vod u Srí Lanky.

Sloučeniny typu II obecného vzorce XI s redukovaným hydrochinonovým kruhem zahrnují saframyciny D a F, izolované z 5. lavendulae, a saframyciny Mx-1 a Mx-2, izolované z Myxococcus xanthus. Viz tabulka III.

-7CZ 304749 B6

Tabulka III

saframycin D saframycin F saframycin Mx-1 saframycin Mx-2

O

O

H

H

O

O

OCH₃

OCH₃

H

CN

OH

H

O

O

H

H

O

O ch₃

CHa

CHj

CH₃ nh₂ nh₂

Skelet typu III se nachází v antibiotických safracinech A a B, izolovaných z pěstované Pseudomonas fluorescens. Tato antibiotika obecného vzorce XII se skládají z tetrahydroisochinolinchinonové podjednotky a tetrahydroisochinolinfenolové podjednotky.

ŇH₂ kde R²¹ je -H v safracinu A a R²¹ je -OH v safracinu B.

Saframycin R, sloučenina klasifikovaná pouze jako skelet typu IV, byl také izolován ze S. lavendulae. Tato sloučenina obecného vzorce XIII se skládá z hydrochinonového kruhu s glykolickým esterovým postranním řetězcem na jednom z fenolických kyslíků aje použitelná jako proléčivo saframycinu A, z důvodů její mírné toxicity.

-8CZ 304749 B6

Tyto známé sloučeniny zahrnují systém pěti spojených kruhů obecného vzorce XIV:

V tomto textu nazýváme tento systém kruhů jako systém pěti spojených kruhů ecteinascidinu, ačkoli bude popsáno, že kruhy A a E jsou fenolické v ecteinascidinech a v některých dalších sloučeninách, zatímco v ostatních sloučeninách, jmenovitě v saframycinech, kruhy A a E jsou chinolické. Ve sloučeninách jsou kruhy B aD tetrahydro, zatímco kruh Cje perhydro.

Podstata vynálezu

v němž:

Ri je vodík nebo skupina C(=O)R', kde R' je Ci-C₁₂ alkyl;

R₂ je vodík nebo C]-C₄ alkyl;

X₂ znamená skupinu OX, nebo N(Xi)₂, kde jedno nebo každé Xi nezávisle znamená atom vodíku, nesubstituovaný C]-C₁₈ alkyl nebo C(=O) R', kde R' je vybrán z vodíku, OH, NO₂, NH₂, SH, CN, halogenu, C(=O)H, C(=O)CH₃, CO₂H, Ci-C,«alkylu, C₂-Ci« alkenylu, C₂-C,« alkynylu, heterocyklylu, který může být aromatický nebo částečně nebo úplně nasycený a mající 4 až 8 atomů v kruhu, výhodněji 5 až 6 atomů v kruhu, s jedním nebo více heteroatomy vybranými z dusíku, síry a kyslíku, a nesubstituovaného karbocyklického arylu obsahujícího 1 až 3 samo-9CZ 304749 B6 statné nebo spojené kruhy, a majícího 6 až 18 atomů uhlíku v kruhu, přičemž každý z alkylu, alkenylu, alkynylu a heterocyklylu jsou nezávisle případně substituované jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny obsahující halogen, kyano, hydroxyl, nitro, azido, C]-C₆ alkynoyl, karboxamid, Ci~C|₂ alkyl, C₂-Ci₂ alkenyl, C₂-C|₂ alkynyl, C,-C|₂ alkoxy, aryloxy jako je fenoxy, C_t-C,₂ alkylthio, C|-C_]2 alkylsulfinyl, C_t-C,₂ alkylsulfonyl, karbocyklický aryl obsahující 1 až 3 samostatné nebo spojené kruhy mající 6 až 18 atomů uhlíku v kruhu, a aralkyl, který má alkylovou skupinu mající 1 až 4 atomy uhlíku, která je substituovaná arylem majícím 6 až 10 atomů uhlíku, a který je nesubstituovaný nebo substituovaný 1 až 5 substituenty; nebo dvě Xi skupiny mohou společně tvořit cyklický substituent na atomu dusíku; nebo X, je SO₂CH₃ když X₂ je OX,; nebo N(X,)₂ je NHCO(C,-Ci₂)alkylCOOH, NHBiotin, NH(aa)_y, kde aaje nesubstituovaný acyl aminokyseliny, kde acyl je alkanoyl jako je C|_₆ alkanoyl a y je 1, 2, 3, chráněný NHCOCH(NH₂)CH₂SH, NHCO(C₂-C_l2)alkenylaryl, který je substituovaný CF₃ nebo m-methoxykarbonylbenzoylNH; s výlukou, kdy N(Xj)₂ je NH₂;

X₃ znamená skupinu OH a CN skupinu;

X4 je vybrán z vodíku a Ci-C|8 alkylu; a

X₅ je vybrán z vodíku nebo (C|-Ci₂)alkylu.

Předkládaný vynález poskytuje sloučeniny mající systém pěti spojených kruhů ecteinascidinu a týká se ecteinascidinů 583 a 597. V ecteinascidinech 583 a 597 má 1,4-můstek strukturu obecného vzorce Via:

(Via) (VIb)

Některé sloučeniny tohoto vynálezu mají systém pěti spojených kruhů ecteinascidinu a můstek, který má strukturu obecného vzorce Via s výhodně substituovanou skupinou -NH₂. Tyto sloučeniny mohou být acylovány na -CHNH₂- skupině přítomné v obecném vzorci VI. Další odvozené sloučeniny tohoto vynálezu zahrnují ty, kde tato -CHNH₂-skupina je nahrazena skupinou CHNHX, nebo -C(X₂)₂-, kde X, nebo X₂ jsou definovány níže. Zbylé substituenty na systému pěti spojených kruhů ecteinascidinu mohou být stejné jako v přírodních sloučeninách, konkrétně přírodních ecteinascidinech, nebo jiné.

Další sloučeniny tohoto vynálezu mají systém pěti spojených kruhů ecteinascidinu a m§stek, který má strukturu obecného vzorce VIb, kde -NH₂ skupina na můstku byla nahrazena OH skupinou, která může být výhodně substituována. Tyto sloučeniny mohou být acylovány na -CHOH- skupině přítomné v obecném vzorci VIb. Další odvozené sloučeniny tohoto vynálezu zahrnují ty, kde tato -CHOH- skupina je nahrazena skupinou -CHOXi nebo -C(X₂)₂- kde X, nebo X₂ jsou definovány níže. Zbylé substituenty na systému pěti spojených kruhů ecteinascidinu mohou být stejné jako v přírodních sloučeninách, konkrétně přírodních ecteinascidinech, nebo jiné.

Ve sloučeninách tohoto vynálezu může být stereochemie můstkového atomu uhlíku nesoucího -OH nebo -NH₂ skupinu (nebo jejich substituované deriváty) stejná jako v přírodních sloučeninách, konkrétně přírodních ecteinascidinech, nebo jiná.

- 10CZ 304749 B6

Sloučeniny tohoto vynálezu exhibitují protinádorovou aktivitu a vynález poskytuje farmaceutické prostředky sloučenin spolu se způsoby pro přípravu prostředků a způsoby léčení používající sloučeniny nebo prostředky.

Vynález také poskytuje nové polysyntetické a syntetické způsoby výroby sloučenin tohoto vynálezu.

V jednom aspektu poskytuje předkládaná vynález nové sloučeniny obecného vzorce:

v němž:

skupiny substituentů definované R_b R₂ jsou nezávisle na sobě vybrány z atomu vodíku, skupiny C(=O)R', substituovaného nebo nesubstituovaného Cl až 08 alkylu, substituovaného nebo nesubstituovaného C2 až C18 alkenylu, substituovaného nebo nesubstituovaného C2 až C18 alkynylu, substituovaného nebo nesubstituovaného arylu, každá z R' skupin je nezávisle na sobě vybrána ze skupiny obsahující atom vodíku, skupinu OH, NH₂, NO₂, SH, CN, atom halogenu, skupinu =0, C(=0)H, C(=O)CH₃, C0₂H, substituovaný nebo nesubstituovaný Cl až Cl8 alkyl, substituovaný nebo nesubstituovaný C2 až Cl8 alkenyl, substituovaný nebo nesubstituovaný C2 až C18 alkynyl, substituovaný nebo nesubstituovaný aryl,

X₂ znamená skupinu OX, nebo N(Xj)₂, přičemž každý Xi nezávisle znamená atom vodíku, skupinu C(=O)R', v níž R' znamená, jak je shora uvedeno, substituovaný nebo nesubstituovaný Cl až 08 alkyl, substituovaný nebo nesubstituovaný C2 až C18 alkenyl, substituovaný nebo nesubstituovaný C2 až Cl8 alkynyl, substituovaný nebo nesubstituovaný aryl nebo dvě Xj skupiny mohou společně tvořit cyklický substituent na atomu dusíku,

X₃ znamená skupinu ORi, v níž R, znamená jak shora uvedeno, skupinu CN, (=O) nebo atom vodíku,

X₄ znamená atom vodíku nebo Cl až C18 alkyl a

X₅ znamená atom vodíku nebo skupinu nebo R,, kde Ri znamená jak shora uvedeno, s výjimkou sloučenin 14 a 47 z USA patentu 5 721 362.

- 11 CZ 304749 B6

V podobném aspektu vynález poskytuje sloučeniny obecného vzorce:

N(Xi)2

OXt

Me kde skupiny substituentů definované R_b R₂, X₃, X₄ a X₅ jsou definovány výše; a X] je nezávisle vybrán z H, C(=O)R', substituovaného nebo nesubstituovaného Cl až Cl8 alkylu, substituovaného nebo nesubstituovaného C2 až Cl8 alkenylu, substituovaného nebo nesubstituovaného C2 až Cl8 alkynylu, substituovaného nebo nesubstituovaného arylu nebo ze dvou Xi skupin, které mohou společně tvořit cyklický substituent na atomu dusíku.

Alkyl skupiny mají vhodněji od 1 do 12 atomů uhlíku, více vhodněji od 1 do 8 atomů uhlíku, stále ještě vhodněji od 1 do 6 atomů uhlíku a nej vhodněji 1, 2, 3 nebo 4 atomy uhlíku. Methyl, ethyl, propyl včetně isopropylu jsou konkrétní vhodné alkylové skupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu. Jak je použito v tomto vynálezu, termín alkyl, pokud není jinak specifikováno, označuje jak cyklickou, tak acyklickou skupinu, ačkoli cyklická skupina bude obsahovat alespoň tříčlenný uhlíkový kruh. Alkylové skupiny mohou mít přímý řetězec, nebo rozvětvený.

Vhodné alkenylové a alkynylové skupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu mají jednu nebo více nenasycených vazeb a od 2 do 12 atomů uhlíku, více vhodněji od 2 do 8 atomů uhlíku, stále ještě vhodněji od 2 do 6 atomů uhlíku a nejvhodnější 2, 3 nebo 4 atomy uhlíku. Termín alkenyl a alkynyl, jak je použit v tomto vynálezu, označuje jak cyklickou, tak acyklickou skupinu, ačkoli přímé nebo větvené necyklické skupiny jsou všeobecně více vhodné.

Vhodné alkoxyskupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu zahrnují skupiny mající jeden nebo více atomů kyslíku a od 1 do 12 atomů uhlíku, více vhodněji od 1 do 8 atomů uhlíku, stále ještě vhodněji od 1 do 6 atomů uhlíku a nejvhodněji 1,2, 3 nebo 4 atomy uhlíku.

Vhodné alkylthioskupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu mají jednu nebo více thioéterových vazeb a od 1 do 12 atomů uhlíku, více vhodněji od 1 do 8 atomů uhlíku, stále ještě vhodněji od 1 do 6 atomů uhlíku. Konkrétně, alkylthioskupiny mající 1, 2, 3 nebo 4 atomy uhlíku, jsou vhodné.

Vhodné alkylsulfinylskupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu zahrnují takové skupiny, které mají jednu nebo více sulfoxidových (SO) skupin a od 1 do 12 atomů uhlíku, více vhodněji od 1 do 8 atomů uhlíku, stále ještě vhodněji od 1 do 6 atomů uhlíku. Konkrétně, alkylsulfinylskupiny mající 1, 2, 3 nebo 4 atomy uhlíku, jsou vhodné.

Vhodné alkylsulfonylskupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu zahrnují takové skupiny, které mají jednu nebo více sulfonylových (SO₂) skupin a od 1 do 12 atomů uhlíku, více vhodněji od 1 do 8 atomů uhlíku, stále ještě vhodněji od 1 do 6 atomů uhlíku. Konkrétně, alkylsulfonylskupiny mající 1, 2, 3 nebo 4 atomy uhlíku, jsou vhodné.

Vhodné aminoalkylskupiny zahrnují takové skupiny, které mají jednu nebo více primárních, sekundárních a/nebo terciárních aminoskupin a od 1 do 12 atomů uhlíku, více vhodněji od 1 do 8 atomů uhlíku, stále ještě vhodněji od 1 do 6 atomů uhlíku a nejvhodněji 1, 2, 3 nebo 4 atomy uhlíku. Sekundární a terciární aminoskupiny jsou všeobecně více vhodné než primární aminoskupiny.

- 12CZ 304749 B6

Vhodné heteroaromatické skupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu zahrnují jeden, dva nebo tři heteroatomy vybrané z N, O nebo S atomů a zahrnují například kumarinyl, včetně 8-kumarinylu, chinolinyl včetně 8-chinolinylu, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidyl, furyl, pyrrolyl, thienyl, thiazolyl, oxazolyl, imidazolyl, indoiyl, benzofuranyl a benzothiazolyl. Vhodné heteroalicyklické skupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu zahrnují jeden, dva nebo tři heteroatomy vybrané zN, O nebo S atomů a zahrnují například tetrahydrofuranyl, tetrahydropyranyl, piperidinyl, morfolinyl a pyrrolidinyl skupiny.

Vhodné karbocyklické arylové skupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu zahrnují jednoduché a vícenásobné kruhové sloučeniny, včetně vícenásobných kruhových sloučenin, které obsahují separátní a/nebo spojené arylové skupiny. Typické karbocyklické arylové skupiny obsahující 1 až 3 separované nebo spojené kruhy a mající od 6 do 18 atomů uhlíku. Konkrétně vhodné karbocyklické skupiny zahrnují fenyl včetně substituovaného fenylu, jako je

2-substituovaný fenyl, 3-substituovaný fenyl, 2,3-substituovaný fenyl, 2,5-substituovaný fenyl, 2,3,5-substituovaný a 2,4,5-substituovaný fenyl včetně těch sloučenin, kde jeden nebo více fenylových substituentů je elektron-odčerpávající skupina, jako je halogen, kyano, nitro, alkanoyl, sulfinyl, sulfonyl a podobně; naftyl včetně 1-naftylu a 2-naftylu; bifenyl; fenathryl; a anthracyl.

Skupiny substituentů definované jako R_b R₂, X_b X4 a X₅ jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny obsahující H, OH, OR', SH, SR', SOR', SO₂R', NO₂, NH₂, NHR', N(R')₂, NHC(O)R', CN, halogen, =0, substituovaný nebo nesubstituovaný Cl až C18 alkyl, substituovaný nebo nesubstituovaný C2 až Cl8 alkenyl, substituovaný nebo nesubstituovaný C2 až C18 alkynyl, substituovaný nebo nesubstituovaný aryl, substituovaná nebo nesubstituované heteroaromatická skupina.

Odkazy v tomto vynálezu na skupiny R' ve sloučeninách předkládaného vynálezu označují specifickou část, která může být substituována v jedné nebo více dostupných pozicích jednou nebo více vhodnými skupinami, například halogenem, jako je fluor, chlor, brom a jod; kyano; hydroxyl; nitro; azido; alkanoyl, jako je Cl až C6 alkanoyl skupina, jako je acyl a podobně; karboxyamido; alkyl skupiny včetně těch skupin, které mají 1 až 12 atomů uhlíku nebo od 1 do 6 atomů uhlíku a více vhodněji 1 až 3 atomy uhlíku; alkenyl a alkynyl skupiny včetně těch skupin, které mají jednu nebo více nenasycených vazeb a od 2 do 12 atomů uhlíku nebo od 2 do 6 atomů uhlíku; alkoxyskupiny mající jeden nebo více atomů kyslíku a od 1 do 12 atomů uhlíku nebo 1 až 6 atomů uhlíku; aryloxy, jako je fenoxy; alkylthioskupiny včetně těch skupin, které mají jednu nebo více thioéterových vazeb a od 1 do 12 atomů uhlíku nebo od 1 do 6 atomů uhlíku; alkylsulfinylskupiny včetně těch skupin, které mají jednu nebo více sulfmylových skupin a od 1 do 12 atomů uhlíku nebo od 1 do 6 atomů uhlíku; alkylsulfonylskupiny včetně těch skupin, které mají jednu nebo více sulfonylových skupin a od 1 do 12 atomů uhlíku nebo od 1 do 6 atomů uhlíku; aminoalkyl skupiny, jako jsou skupiny mající jeden nebo více atomů dusíku a od 1 do 12 atomů uhlíku nebo od 1 do 6 atomů uhlíku; karbocyklický aryl mající 6 nebo více atomů uhlíku, konkrétně fenyl (například R bude substituovaná nebo nesubstituované bifenylová skupina); a aralkyl, jako je benzyl.

R, je vhodněji C(=O)R', kde R' je vhodněji H nebo substituovaný nebo nesubstituovaný alkyl, více vhodněji acetyl.

R₂ je vhodněji H nebo methyl, více vhodněji methyl.

Typicky jeden z Xj nebo Xje často atom vodíku. X₂, nebo kde je to možné tak, X_b je vhodněji H; -NHCOalkyl, konkrétně alkyl do 16 atomů uhlíku, jako je 1, 4, 7, 15 atomů uhlíku dlouhý alkyl a může být substituován halogenem, výhodně úplně substituován halogeny; -NHalkylCOOH, konkrétně alkyl do 4 atomů uhlíku; chráněná skupina -NHCOC(NH₂)CH₂SH, kde NH₂ a/nebo SH jsou chráněné; -NHbiotin; -NHaryl; -NH(aa)_y, kde aaje acyl aminokyseliny a y je vhodněji 1, 2 nebo 3 a kde některá NH₂ skupina je výhodně substituována nebo chráněna, jako je amidová terminální skupina nebo Boc skupina; ftalimido skupina tvořená -NX₂-; alkyl mající

- 13 CZ 304749 B6 vhodněji 1 až 4 atomy uhlíku; arylalkenyl, obzvláště skořicyl, který může být substituován jako

3-trifluormethyl;

Vhodné příklady skupiny X₂ zahrnují NHAc, NHCO(CH₂)₂COOH, NHCOCH(NHAlloc)CH₂SFm, NHCO(CH₂)_I4CH₃, NHTFA, NHCO(CH₂)₂CH₃, NHCOCH₂CH(CH₃)₂, NHCO(CH₂)₆CH₃, NHBiotin, NHBz, NHCOCinn, NHCO-(p-F₃C)Cinn, NHCOVal-NH₂, NHCOValN-Ac, NHCOVal-N-COCinn, NHCOVal-Ala-NH₂, NHCOVal-Ala-N-Ac, NHCOAla-NH₂, OH, OAc, NHAc, NHCO(CH₂)₂COOH, NHCOCH(NHAlloc)CH₂SFm, NHCOCH(NH₂)CH₂SFm, NPhth, NH-(m-CO₂Me)-Bz, NHCO(CH₂)₁₄CH₃, NMe₂, NHTFA, NHCO(CH₂)₂CH₃, NHCOCH₂CH(CH₃)₂, NHCO(CH₂)₆CH₃, NHAlloc, NHTroc, NHBiotin, NHBz, NHCOCinn, NHCO-(p-F₃C)-Cinn, NHCOVal-NH₂, NHCOVal-N-Ac, NHCOVal-N-COCinn, NHCOValAla-NH₂, NHCOVal-Ala-N-Ac, NHCOVal-Ala-N-COCinn, NHCOAla-NH₂, NHCOAla-NAc, NHCOAla-N-COCinn, spolu s podobnými skupinami, kde počet atomů uhlíku je různý, neboť jsou použity různé skupiny substituentů nebojsou provedeny jiné změny tohoto druhu za vzniku podobných skupin.

X₃ je vhodněji OH nebo CN,

X₄ je H nebo Me, vhodněji Me.

X₅ je H nebo Cl až Cl8 alkyl, vhodněji H.

V dalším, obecnějším aspektu tohoto vynálezu, jsou sloučeniny typicky obecného vzorce XVIIb:

och₃

h₃c, kde R¹ a R⁴ společně tvoří skupinu obecného vzorce Via nebo VIb:

H NH₂

H OH (Via) (VIb) v nichž R⁵ znamená atom vodíku nebo skupinu -OH,

R⁷ znamená skupinu -OCH3 a R⁸ znamená skupinu -OH nebo R⁷ a R⁸ společně tvoří skupinu -O-CH2-O-,

- 14CZ 304749 B6

Rl⁴³ i R^14b znamená atom vodíku nebo jeden znamená atom vodíku a druhý znamená skupinu -OH, -OCH3 nebo -OCH₂CH₃ nebo R^l4a a R^l4b společně tvoří ketoskupinu,

R¹⁵ znamená atom vodíku nebo skupinu -OH a

R²¹ znamená atom vodíku nebo skupinu -OH nebo -CN, a deriváty zahrnují acylderiváty, deriváty, v nichž skupina -NCH₃- v poloze 12 je nahrazena skupinou -NH- nebo -NCH₂CH₃-, a deriváty, v nichž -NH₂ skupina ve sloučenině obecného vzorce Via nebo -OH skupina ve sloučenině obecného vzorce VIb jsou substituovány, takže se získají sloučeniny, v nichž skupina -CHNH₂ sloučeniny obecného vzorce Vlaje nahrazena skupinou -CHNHX] nebo -CHN(X])₂ nebo v nichž je -CHOH skupina sloučeniny obecného vzorce VIb nahrazena skupinou CHOXi, v níž X, znamená jak shora uvedeno v předcházejícím nároku, s výjimkou ecteinascidinu 583, ecteinascidinu 597, N-acetylecteinascidinu 597 a s výjimkou sloučenin 14 a 47 z USA patentu 5 721 362.

Vhodné sloučeniny jsou obecného vzorce XVIIb.

Dále, ve vhodných sloučeninách tohoto vynálezu, R⁷ a R⁸ společně tvoří skupinu -O-CH₂-O-.

Acylderiváty mohou být N-acyl nebo N-thioacyl deriváty těchto látek, stejně jako cyklické amidy. Acylskupiny mohou být například alkanoyl, haloalkanoyl, arylalkanoyl, alkenyl, heterocyklylacyl, aryl, arylaroyl, haloaroyl, nitroaroyl nebo jiné acylskupiny. Acyl skupiny mohou mít vzorec -CO-R³, kde R^a mohou být různé skupiny, jako je alkyl, alkoxy, alkylen, arylalkyl, arylalkylen, acyl aminokyseliny nebo heterocyklyl, každý výhodně substituovaný halogenem, kyano, nitro, karboxyalkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, heterocyklyl, heterocyloxy, alkyl, amino nebo substituovaná aminoskupina. Další acylující činidla zahrnují isothiokyanáty, jako je aryl isothiokyanát, jmenovitě fenylisokyanát. Alkyl, alkoxy nebo alkylen skupiny R^a mají vhodněji 1 až 6 nebo 12 atomů uhlíku a mohou být lineární, větvené nebo cyklické. Aryl skupiny jsou typicky fenyl, bifenyl, naftyl. Heterocyklické skupiny mohou být aromatické nebo částečně nebo úplně nasycené a vhodněji mají 4 až 8 atomů v kruhu, více vhodněji 5 až 6 atomů v kruhu sjedním nebo více heteroatomů vybraných z dusíku, síry a kyslíku.

Bez vyčerpávajícího popisu zahrnuje R^a typicky alkyl, haloalkyl, alkoxyalkyl, haloalkoxyalkyl, arylalkylen, haloalkylarylalkylen, acyl, haloacyl, arylalkyl, alkenyl a aminokyselina. Například, R^a-CO- může být acetyl, trifluoracetyl, 2,2,2-trichlorethoxykarbonyl, isovalerylkarbonyl, trans-3-(trifluormethyl)cinnamoylkarbonyl, heptafluorbutyrylkarbonyl, dekanoylkarbonyl, trans-cinnamoylkarbonyl, butyrylkarbonyl, 3-chlorpropionyIkarbonyl, cinnamoylkarbonyl,

4-methylcinnamoylkarbonyl, hydrocinnamoylkarbonyl nebo trans-hexenoylkarbonyl nebo alanyl, arginyl, aspartyl, asparagyl, cystyl, glutamyl, glutaminyl, glycyl, histidyl, hydroxypropyl, isoleucyl, leucyl, lysyl, methionyl, fenylalanyl, prolyl, seryl, threonyl, thyronyl, tryptofyl, tyrosyl, valyl stejně jako jiné méně běžné acyly aminokyselin, stejně jako ftalimido a jiné cyklické a amidy. Další příklady mohou být nalezeny podle seznamu chránících skupin.

Sloučeniny, kde -C0-R³ je odvozeno od aminokyselin a zahrnují aminoskupinu, mohou samy tvořit acyl deriváty. Vhodné N-acyl sloučeniny zahrnují dipeptidy, které naopak mohou tvořit N-acyl deriváty.

R^14a a R^14b jsou vhodněji vodík. Vhodněji R¹⁵ je vodík. O-acyl deriváty jsou vhodněji alifatické O-acylderiváty, obzvláště acyl deriváty mající 1 až 4 atomů uhlíku a typicky O-acetyl skupinu, jmenovitě na pozici 5.

Vhodné chránící skupiny pro fenoly a hydroxyskupiny zahrnují étery a estery, jako je alkyl, alkoxyalkyl, aryloxyalkyl, alkoxyalkoxyalkyl, alkylsilylalkoxyalkyl, alkylthioalkyl, arylthioalkyl, azidoalkyl, kyanoalkyl, chloralkyl, heterocyklyl, arylacyl, haloarylacyl, cykloalkylalkyl, alkenyl,

- 15CZ 304749 B6 cykloalkyl, alkylarylalkyl, alkoxyarylalkyl, nitroarylalkyl, haloarylalkyl, alkylaminokarbonylarylalkyl, alkylsulfinylarylalkyl, alkylsilyl a další étery a arylacyl, arylalkyluhličitan, alifatický uhličitan, alkylsulfinylarylalkyluhličitan, alkyluhličitan, arylhaloalkyluhličitan, arylalkenyluhličitan, arylkarbamát, alkylfosfinyl, alkylfosfinthionyl, arylfosfinthionyl, arylalkylsulfonát a další estery. Takové skupiny mohou být výhodně substituované dříve zmíněnou skupinou v R¹.

Vhodné chránící skupiny pro aminy zahrnují karbamáty, amidy a další chránící skupiny, jako je alkyl, arylalkyl, sulfo- nebo halo-arylalkyl, haloalkyl, alkylsilylalkyl, arylalkyl, cykloalkylalkyl, alkylarylalkyl, heterocyklylalkyl, nitroarylalkyl, acylaminoalkyl, nitroaryldithioarylalkyl, dicykloalkylkarboxamidoalkyl, cykloalkyl, alkenyl, arylalkenyl, nitroarylalkenyl, heterocyklylalkenyl, heterocyklyl, hydroxyheterocyklyl, alkyldithio, alkoxy- nebo halo- nebo alkylsulfínyl arylalkyl, heterocyklylacyl a další karbamáty a alkanoyl, haloalkanoyl, arylalkanoyl, alkenoyl, heterocyklylacyl, aroyl, arylaroyl, haloaroyl, nitroaroyl a další amidy, stejně jako alkyl alkenyl, alkylsilylalkoxyalkyl, alkoxyalkyl, kyanoalkyl, heterocyklyl, alkoxyarylalkyl, cykloalkyl, nitroaryl, arylalkyl, alkoxy- nebo hydroxy-arylalkyl a mnoho dalších skupin. Takové skupiny mohou být výhodně substituovány dříve zmíněnou skupinou v R¹.

Příklady takových chránících skupin jsou uvedeny níže v následujících tabulkách.

chránící skupiny pro -OH skupinu

éter	zkratka
methyl methoxymethyl	MOM
benzyloxymethyl	BOM
methoxyethoxymethyl	MEM
2-(trimethylsilyl)ethoxymethyl	SEM
methylthiomethyl	MTM
fenylthiomethyl	PTM
azidomethyl kyanomethyl 2,2-dichlor-l, 1-difluorethyl 2-chlorethyl 2-bromethyl tetrahydropyranyl	THP
1-ethoxyethyl	EE
fenacyl 4-bromfenacyl cyklopropylmethyl alkyl propargyl isopropyl cyklohexyl t-butyl benzyl 2.6- dimethylbenzyl 4-methoxybenzyl o-nitrobenzyl 2.6- dichlorbenzyl 4-methoxybenzyl	MPMn
o-nitrobenzyl 2,6-dichlorbenzyl 3,4-dichlorbenzyl 4-(dimethylamino)karbonylbenzyl 4-methylsulfínylbenzyl	Msib

- 16CZ 304749 B6

4-methylsulfinylbenzyl
9-anthrylmethyl 4—pikolyl heptafluor-p-tolyl tetrafluor-4-pyridyl trimethylsilyl	TMS
t-butyldimethylsilyl	TBDMS
t-butyldifenylsilyl	TBDPS
triisopropylsilyl	TIPS
estery arylformiát arylacetát aryllevulinát arylpivaloát	ArOPv
arylbenzoát aryl-9-fluorkarboxylát arylmethyluhličitan 1 -adamantyluhličitan t-butyluhličitan	BOC-OAr
4-methylsulfinylbenzyluhličitan	Msz-Oar
2,4-dimethylpent-3-yluhličitan	Doc-Oar
aryl-2,2,2-trichlorethyluhličitan arylvinyluhličitan arylbenzyluhličitan arylkarbamát dimethylfosfinyl	Dmp-OAr
dimethylfosfinothioyl	Mpt-OAr
difenylfosfinothioyl	Dpt-Oar
arylmethansulfonát aryltoluensulfonát aryl-2-formylbenzensulfonát

chránící skupiny pro -NH₂ skupinu

karbamáty	zkratka
methyl
ethyl
9-fluorenylmethyl	Fmoc
9-(2-sulfo)fluorenylmethyl
9-(2,7-dibrom)fl uoreny lmethy 1
17-tetrabenzo[a,c,g,i]fluorenylmethyl	Tbfmoc
2-chlor-3-indenylmethyl	Climoc
benz[f]inden-3-ylmethyl	Bimoc
2,7-di-t-butyl[9-(10,10-dioxo-l 0,10,10,10-	DBD-Tmoc
-tetrahydrothioxanthy 1)] methyl
2,2,2-trichlorethyl	Troc
2-trimethylsilylethyl	Teoc
2-fenylethyl	hZ
1 -(1 -adamanty 1)-1 -methy lethyl	Adpoc
2-chlorethyl
1, l-dimethyl-2-chlorethyl
1,1 -dimethyl-2-bromethyl
1, l-dimethyl-2,2-dibromethyl	DB-t-BOC
1,1 -dimethyl-2,2,2-trichlorethy 1	TCBOC

- 17CZ 304749 B6

-methyl-1 -(4-bifenyl)ethy 1

1- (3,5-di-t-butylfenyl)-l-l-methylethyl

2- (2'- a 4'-pyridyl)ethyl

2,2-bis(4'-nitrofenyl)ethyl n-(2-pivaloylamino)-l,l-dimethylethyl

2-[(2-nitrofenyl)dithio]-l-fenylethyl

2-(n,n-dicyklohexylkarboxamido)ethyl t-butyl

1- adamantyl

2- adamantyl vinyl allyl

1-isopropylallyl cinnamyl

4-n itrocinnamy 1

3- (3 '-pyridyl)prop-2-enyl

8- chinolyl n-hydroxypiperidinyl alkyldithio benzyl p-methoxybenzyl p-nitrobenzyl p-brombenzyl p-chlorbenzyl

2,4-dichlorbenzyl

4- methylsulfinylbenzyl

9- anthrylmethyl difenylmethyl fenothiazinyl_( 10)-karbonyl n-p-toluensulfonylaminokarbonyl n'-fenylaminothiokarbonyl amidy formamid acetamid chloracetamid trifluoracetamid fenylacetamid

3-fenylpropanamid pent-4-enamid pikolinamid

3- pyridylkarboxamid benzamid p-fenylbenzamid n-ftalimid n-tetrachlorftalimid

4- nitro-n-ftalimid n-dithiasukcimid n-2,3-difenylmaleinamid n-2,5-dimethy lpyrrol n-2,5-bis(triisopropylsiloxyl)pyrrol n-1,1,4,4-tetramethyldisilaazacyklopentanový adukt 1,1,3,3-tetramethyl-l ,3-disilaisoindolin

Bpoc t-Burmeoc

Pyoc

Bnpeoc

NpSSPeoc

BOC

1- Adoc

2- Adoc Voc

Aloe nebo Alloc

Ipaoc

Coc

Noc

Paloc

Cbz nebo Z

Moz

PNZ

Msz

TFA

TCP

Dts

BIPSOP

STABASE

BSB

- 18CZ 304749 B6 speciální skupiny chránící -NH skupinu n-methylamin n-t-butylamin n-allylamin n-[(2-trimethylsilyl)ethoxy]methylamin SEM n-3-acetoxypropylamin n-kyanomethylamin n-(l-isopropyl-4-nitro-2-oxo-3-pyrrolidin-3-yl)amin n-2,4-dimethoxybenzylamin Dmb

2-azanorbomen n-2,4-dinitrofenylamin n-benzylamin Bn n-4-methoxybenzylamin MPM n-2,4-dimethoxybenzylamin DMPM n-2-hydroxybenzylamin Hbn n-(difenylmethyl)amin DPM n-bis(4-methoxyfenyl)methylamin n-5-dibenzosuberylamin DBS n-trifenylmethylamin Tr n-[(4-methoxyfenyl)difenylmethyl]amin MMTr n-9-fenylflurenylamin Pf n-ferrocenylmethylamin Fcm n-2-pikolylamin-n'-oxid η-1,1 -dimethylthiomethylenamin n-benzylidenamin n-p-methoxybenzylidenamin n-difenylmethylenamin n-(5,5-dimethyl-3-oxo-1 -cyklohexenyl)amin n-nitroamin n-nitrosoamin difenylfosfinamid Dpp dimethylthiofosfinamid Mpt difenylthiofosfinamid Ppt dibenzylfosforamidát

2- nitrobenzensulfenamid Nps n-l-(2,2,2-trifluor-l ,l-difenyl)ethylsulfenamid TDE

3- nitro-2-pyridinsulfenamid Npys p-toluensulfonamid Ts benzensulfonamid

Vhodné třídy sloučenin tohoto vynálezu zahrnují sloučeniny obecného vzorce XVIIb, kde jeden nebo více, vhodněji všechny následující předpoklady jsou: aminoskupina v obecném vzorci Vlaje substituována; hydroxyskupina v obecném vzorci VIb je substituována;

R⁵ jeOR,;

R⁷ a R⁸ tvoří společně skupinu -O-CH2-O-;

R^14a a R^14b jsou obě -H;

R¹⁵ je H; a/nebo

-19CZ 304749 B6

R^{20 21} je OH nebo-CN.

Konkrétní produkty ecteinascidinu tohoto vynálezu zahrnují sloučeniny obecného vzorce XVIII:

kde R¹ a R⁴ tvoří skupinu obecného vzorce Via nebo VIb:

(Via) (Vlb)

R²¹ je -H, -OH nebo -CN, více konkrétně -OH nebo -CN;

a jejich acylderiváty, více konkrétně 5-acylderiváty včetně 5-acetyl derivátu a kde -NH₂ skupina 10 v obecném vzorci Via a -OH skupina v obecném vzorci Vb jsou výhodně substituovány.

Sloučeniny předkládaného vynálezu, jmenovitě s jednou nebo dvěma skupinami X_t mohou být připraveny synteticky z meziproduktů sloučenin (47), což je popsáno v US patent 5 721 362 nebo z podobných sloučenin. Z tohoto důvodu poskytuje předkládaný vynález postup, který zahrnuje substituci 1,4-můstkové aminoskupiny podle následujícího reakčního schématu:

kde X] je definováno výše a ostatní skupiny v molekule mohou být chráněny nebo substituovány podle požadavků nebo jakje vyhrazeno.

Sloučeniny tohoto vynálezu jmenovitě se skupinami X₂ a -OX₂ mohou být připraveny z meziproduktů sloučenin (15) popsaných v US patentu 5 721 362 nebo z podobných sloučenin. Z tohoto důvodu poskytuje předkládaný vynález postup, který zahrnuje substituci 1,4-můstkové aminoskupiny podle následujícího reakčního schématu:

-20CZ 304749 B6

kde X] je definováno výše a ostatní skupiny v molekule mohou být chráněny nebo substituovány podle požadavků nebo jak je vyhrazeno. Reakce může pokračovat za vytvoření substituentu OX_b kde Xi je vodík a potom následuje konverze na sloučeninu, kde X] je jiná skupina.

Je zřejmé, že sloučeniny tohoto vynálezu mohou být také připraveny modifikací syntetických kroků uvedených v US patentu 5 721 362. Z tohoto důvodu mohou být například různé reaktivní skupiny připojeny na funkční pozici, například na pozici 5 nebo 18.

Více běžný způsob přípravy sloučenin tohoto vynálezu byl poprvé popsán v WO 00/69862, který je začleněn v referenci tohoto vynálezu a ze kterého je nárokováno prvenství.

V typickém způsobu se WO aplikace týká způsobu přípravy sloučeniny se strukturou spojených kruhů obecného vzorce XIV:

který zahrnuje jednu nebo více reakcí vycházejících ze sloučeniny mající kyanoskupinu na pozici 21 obecného vzorce XVI:

kde:

R¹ je amidomethylenová skupina nebo acyloxymethylenová skupina;

R⁵ a R⁸ jsou nezávisle na sobě vybrány z -H, -OH nebo -OCOCH₂OH nebo R⁵ a R⁸ tvoří společně ketoskupinu a kruh A je p-benzochinonový kruh;

R^14a a R^14b jsou oba dva -H nebo jeden je -H a druhý je -OH, -OCH₃ nebo -OCH₂CH₃ nebo R^14a a R^14b tvoří společně ketoskupinu; a

-21 CZ 304749 B6

R¹⁵ a R¹⁸ jsou nezávisle na sobě vybrány z -H, -OH nebo R¹⁵ a R¹⁸ jsou oba dva ketoskupina a kruh A je p-benzochinonový kruh.

Takové reakce mohou konkrétně poskytovat způsob přípravy výchozích materiálů pro reakce dle schémat I a II spolu s odpovídajícími sloučeninami.

Protinádorová účinnost těchto sloučenin zahrnuje leukémii, nádor plic, nádor tlustého střeva, nádor ledviny, nádor prostaty, nádor vaječníků, nádor prsu, zhoubný nádor a melanom.

Další obzvláště vhodný aspekt předkládaného vynálezu jsou farmaceutické prostředky použitelné jako protinádorová činidla, která jako účinnou složku obsahují sloučeninu nebo sloučeniny tohoto vynálezu, stejně jako způsob pro jejich přípravu.

Příklady farmaceutických prostředků zahrnují některé pevné prostředky (tablety, pilulky, kapsle, granule atd.) nebo kapalné prostředky (roztoky, suspenze nebo emulze) s vhodnými prostředky pro orální, lokální nebo parenterální podávání.

Podávání sloučenin nebo prostředků předkládaného vynálezu může být provedeno nějakým vhodným způsobem, jako je nitrožilní infuze, orální podávání, intraperitoneální a nitrožilní podávání.

Abychom se vyvarovali chyb, jsou stereochemie zjištěné v tomto vynálezu založeny na našem správném pochopení stereochemie přírodních produktů. Pokud by byla chyba objevena ve stereochemii, potom je potřeba provést odpovídající korekci, která bude provedena ve vzorcích v rámci tohoto vynálezu. Tento vynález se také týká stereoisomerů, aby se zjistilo, zda-li jsou syntézy jsou proveditelné.

Detailní popis vhodného postupu

Sloučeniny tohoto vynálezu mohou být synteticky připraveny z meziproduktů sloučenin 47 a 15 popsaných v US patentu 5 721 362, sloučeniny 36 popsané v WO 00/69862 a ze sekundárních produktů (v tomto vynálezu očíslovány jako 23 a 24) získané v několika krocích odstraněním chránících skupin použitím A1C1₃ a sloučeniny 33 popsané v WO 00/69862.

-22CZ 304749 B6

Sloučenina 1 odpovídá syntetickému meziproduktu 47 popsanému v US patentu 5 721 362. Sloučeniny 27 a 28 uvedené v tabulce IV jsou popsány jako 35 a 34 v WO 00/69862.

Některé vhodné způsoby výroby sloučeniny obecného vzorce I jsou popsány níže v následujících 5 reakčních schématech s příklady typických skupin substituentů. Tyto typické substituenty nejsou omezeny tímto vynálezem a postup může být chápán ve větším rozsahu bez zvláštního ohledu na označení jednotlivých sloučenin a meziproduktů.

Početné účinné protinádorové sloučeniny byly připraveny z těchto sloučenin a předpokládá se, že ío mnohem více sloučenin může být připraveno v oblasti tohoto vynálezu.

-23 CZ 304749 B6

Schéma I

R: a: AcNHb: F3CCONHc;CH₃(CH₂)₂CONHd: (CH₃)2CHCH₂CONHe: CH₃(CH₂)6CONHf: CH₃(CH₂)_]4CONHg:BzNHh: CinnCONHCina:

i: p-FjC-CinnCONHj: PhtNk: BiotinCONH1: HO2CCH₂CH₂CONHm: (CH₃)₂Nn:BnNHo: PrNH24

}B JB

R:

p.NHz-ValCONHq; Ac-JV-ValCONHr: CinnCO-X-ValCONHs: NHz-Ala-ValCONHt; Ac JV-Ala-ValCONHn: CinnCO-Ař-Ala-ValCONHv:NH₂-AlaCONHw: Ac-TV-AlaCONHx: CinnCO-tf-AlaCONHy: FmSCH₂CH(NHAlIoc)CONHz: FmSCHjCHCNHzJCONH7: Boc-A-ValCONH8: Boc-AAIaCONH9: Boc-A-Ala-ValCONH

-25 CZ 304749 B6

°\ 1°

19,21a, 21c, 21e-í, 216, 2111,22a·

R^v: a: Acb: F3CCOc: CH₃(CH₂)₂COe: CH₃(CH₂)éCOf: CH₃(CH₂)_WCOCinn:

O”

15,16*, 17a-c, 17e-f, 176,1711,18a* h: CinnCOH: MeSOi15: H16: H19: HSchéma IV

-26CZ 304749 B6

Typy reakcí jsou následující:

Metody A, B, C, E a M zahrnují různé acylační způsoby s chloridy, anhydridy kyselin, kyselinami nebo sulfonyl chloridy za vzniku amidu nebo esterové vazby.

Metody D a H zahrnují reduktivní alkylační reakce mezi aldehydem a 1 nebo aminem a 5 za vzniku 2m nebo 3o.

Metoda F transformuje sloučeninu 1 na 2n reakcí s BnBr a Cs₂CO₃.

Metoda G zahrnuje odstranění methoxymethylové skupiny (MOM) nebo MOM/terc-butyloxykarbonyl skupiny nebo MOM/allyloxykarbonylové skupiny použitím trimethylchlorsilanu (TMSC1) a jodidu sodného.

Metody I (AgNO₃) a J (CuBr) konvertují CN na OH v pozici C-21.

Metoda K zahrnuje hydrolysu karbamátové vazby použitím vodné trifluoroctové kyseliny.

Metoda L konvertuje karbonylovou skupinu na alkohol redukcí s NaCNBH₃ za přítomnosti kyseliny octové. Touto reakcí vzniká nové chirální centrum. Z výpočtu stérických účinků a spektroskopických dat se zdá, že hlavní produkt je sloučenina 11, která má R konfiguraci na tomto centru a sekundární produkt 12* má S konfiguraci. Na tomto základě, 13, 15, 17, 19, 21 budou mít R konfiguraci a 14*, 18* a 22* budou mít S konfiguraci. Tato zjištění byla uskutečněna na základě dostupných spektrálních dat a jako taková, za nepřítomnosti specifických studií potvrzujících přiřazení, by měla být považována pouze za prozatímní.

K přípravě dalších sloučenin tohoto vynálezu mohou být použity modifikované postupy. Konkrétně výchozí látky a/nebo činidla a reakce mohou být různé, což poskytuje další kombinace skupin substituentů.

V dalším aspektu je předkládaný vynález orientován na použití známé sloučeniny, safracinu B, také označovanému jako chinonamin, v polosyntetické syntéze.

Všeobecně, vynález se týká polysyntetického postupu pro tvorbu meziproduktů, derivátů a odpovídajících struktur ecteinascidinu nebo jiných tetrahydroisochinolinfenolových sloučenin pocházejících z přírodních bis(tetrahydroisochinolin)alkaloidů.

Vhodné výchozí látky pro polysyntetický postup zahrnují třídy saframycinových a safracinových antibiotik dostupných z různých vypěstovaných živných půd a také třídy reineramycinových a xestomycinových sloučenin dostupných z mořských hub.

Obecný vzorec XV pro výchozí sloučeniny je následující:

kde:

R¹ je amidomethylenová skupina, jako je -CH2-NH-CO-CR^25aR^25bR^25c, kde R^25c, kde R^25a a R^25b tvoří ketoskupinu nebo jeden je -OH, -NH2 nebo -OCOCH₃ a druhý je -CH₂COCH₃, -H, -OH nebo -OCOCH₃ tak, že když je R^25a -OH nebo -NH2, potom R^25b není -OH, a R^25c je -H, -CH3 nebo -CH₂CH₃ nebo R¹ je acyloxymethylenová skupina, jako je -CH₂-O-CO-R, kde R je -C(CH₃)=CH-CH₃ nebo -CH₃;

R⁵ a R⁸ jsou nezávisle na sobě vybrány z -H, -OH nebo -OCOCH₂OH nebo R⁵ a R⁸ jsou oba dva ketoskupina a kruh A je p-benzochinonový kruh;

R^14a a R^14b jsou oba dva -H nebo jeden je -H a druhý je -OH, -OCH₃ nebo -OCH₂CH₃ nebo R^14a a R^14b tvoří společně ketoskupinu; a

R¹⁵ a R¹⁸ jsou nezávisle na sobě vybrány z -H, -OH nebo R¹⁵ a R¹⁸ jsou oba dva ketoskupina a kruh Aje p-benzochinonový kruh; a R²¹ je-OH nebo-CN.

Všeobecně je obecný vzorec pro tuto třídu sloučenin uveden níže:

kde skupiny substituentů definované R_b R₂, R₃, R4, R5, R_ň, R₇, Rs, R9, R,o jsou každý nezávisle na sobě vybrán ze skupiny obsahující H, OH, OCH₃, CN, =0, CH₃; kde X jsou různé amidy nebo estery obsažené ve zmíněných přírodních produktech; kde každý tečkovaný kruh reprezentuje jednu, dvě nebo výhodně tři dvojné vazby.

Takto, podle předkládaného vynálezu, nyní poskytujeme polosyntetické způsoby pro přípravu nových a známých sloučenin. Polosyntetické postupy vynálezu zahrnují množství transformačních kroků za vzniku požadovaného produktu. Každý krok je sám o sobě postupem v souladu s tímto vynálezem. Vynález není omezen postupy, které jsou ukázány a alternativní postupy mohou být provedeny například změnou pořadí transformačních kroků, pokud je to vhodné.

Konkrétně tento vynález zahrnuje poskytnutí výchozí látky, která má kyanoskupinu na pozici 21 obecného vzorce XVI:

-28CZ 304749 B6

kde R¹, R⁵, R⁸, R^14a, R^14b, R¹⁵ a R¹⁸ jsou definovány výše.

Další sloučeniny obecného vzorce XVI s jiným substituentem na pozici 21 mohou také reprezentovat možnou výchozí látku. Všeobecně jsou použitelné některé deriváty schopné nukleofilní substituce na hydroxyskupině na pozici 21 sloučeniny obecného vzorce XV, kde R²¹ je hydroxyskupina. Příklady vhodných substituentů na pozici 21 zahrnují, ale nejsou omezeny na: thioskupinu;

alkylthioskupinu (alkyl skupina má od 1 do 6 atomů uhlíku);

arylthioskupinu (aryl skupina má od 6 do 10 atomů uhlíku a je nesubstituovaná nebo substituovaná 1 až 5 substituenty vybranými například z alkyl skupiny mající od 1 do 6 atomů uhlíku, alkoxyskupin majících od 1 do 6 atomů uhlíku, halogenů, thioskupin a nitroskupin);

aminoskupinu;

mono- nebo di-alkylaminoskupinu (každá alkylskupina má od 1 do 6 atomů uhlíku);

mono- nebo di-arylaminoskupinu (každá aryl skupina je definována výše ve vztahu k arylthioskupinám) α-karbonylalkylskupinu obecného vzorce -C(R^a)(R^b)-C(=O)R^c, kde R^a a R^b jsou vybrány z atomů vodíku, alkylskupin majících od 1 do 20 atomů uhlíku, arylskupin (jak je definováno výše ve vztahu k arylthioskupinám) a aralkylskupiny (ve kterých má alkylskupina od 1 do 4 atomů uhlíku a je substituována arylovou skupinou definovanou výše ve vztahu k arylthioskupinám), s podmínkou, že jeden z R^a a R^b je atom vodíku.

R^c je vybráno z atomu vodíku, alkylskupiny mající od 1 do 20 atomů uhlíku, arylskupiny (jak je definováno výše ve vztahu k arylthioskupinám), aralkylskupiny (ve kterých má alkylskupina od 1 do 4 atomů uhlíku a je substituována arylovou skupinou definovanou výše ve vztahu k arylthioskupinám), alkoxyskupinu mající od 1 do 6 atomů uhlíku, aminoskupiny nebo mononebo di-alkylaminoskupiny, jakje definováno výše.

Takto, v obecném aspektu, se předkládaný vynález týká prostupů, kde první krok je vytvoření derivátu na pozici 21 použitím nukleofilního činidla. Takové sloučeniny označujeme jako sloučeniny, které mají Nuc skupinu na pozici 21. Vhodné výchozí sloučeniny mají strukturu obecného vzorce XIV:

-29CZ 304749 B6

kde alespoň jeden kruh A nebo Λ je chinolický.

Z tohoto důvodu je možné kromě použití sloučenin, která mají kyanoskupinu na pozici 21, použít i postupy používající jiné sloučeniny obsahující nukleofil, za vzniku podobných sloučenin obecného vzorce XVI, kde pozice 21 je chráněna jinou nukleofilní skupinou, Nuc skupinou na pozici

21. Například sloučenina, která má Nuc skupinu na pozici 21, obecného vzorce XVI s alkylamino substituentem na pozici 21 může vzniknout reakcí sloučeniny obecného vzorce XV, kde R je hydroxyskupina, s vhodným alkylaminem. Sloučenina, která má Nuc skupinu na pozici 21, obecného vzorce XVI s alkylthio substituentem na pozici 21 může také vzniknout reakcí sloučeniny obecného vzorce XV, kde R²¹ je hydroxyskupina, s vhodným alkanthiolem. Alternativně, sloučenina, která má Nuc skupinu na pozici 21, obecného vzorce XVI s α-karbonylalkyl substituentem na pozici 21 může vzniknout reakcí sloučeniny obecného vzorce XV, kde R²¹ je hydroxyskupina, s vhodnou karbonylovou sloučeninou, typicky za přítomnosti báze. Pro jiné sloučeniny, které mají Nuc skupinu na pozici 21, jsou možné další způsoby.

Přítomnost kyanoskupiny na pozici 21 je vyžadována pro některé konečné produkty, jmenovitě ecteinascidin 770 a ftalascidin, zatímco pro jiné konečné produkty vystupuje jako chrániči skupina, která může být snadno změněna na jiný substituent, jako je hydroxyskupina. Přijetí sloučeniny, která má kyanoskupinu na pozici 21, jako výchozí látku účinně stabilizuje molekulu během dalších syntetických kroků, dokud není výhodně odstraněna. Další sloučeniny, které mají Nuc skupinu na pozici 21, mohou nabídnout tuto a jiné výhody.

Vhodné výchozí látky zahrnují takové sloučeniny obecného vzorce XV nebo XVI, kde R^14a a R^14b jsou oba dva atomy vodíku. Vhodné výchozí látky také zahrnují sloučeniny obecného vzorce XV nebo XVI, kde R¹⁵ je atom vodíku. Dále, vhodné výchozí látky zahrnují sloučeniny obecného vzorce XV nebo XVI, kde kruh E je fenolický kruh. Vhodné výchozí látky dále zahrnují sloučeniny obecného vzorce XV nebo XVI, kde alespoň jeden, lépe dva nebo tři z R , R , R a R není vodík.

Příklady vhodných výchozích látek pro tento vynález zahrnují saframycin A, saframycin B, saframycin C, saframycin G, saframycin H, saframycin S, saframycin Y₃, saframycin Yd|, saframycin Ad,, saframycin Yd₂, saframycin a, renieramycin B, renieramycin C, renieramycin D, renieramycin E, renieramycin F, xestomycin, saframycin D, saframycin F, saframycin Mx-1, saframycin Mx-2, safracin A, safracin B, safracin R. Vhodné výchozí látky mají kyanoskupinu v pozici 21 pro skupinu R²¹.

V obzvláště vhodném aspektu vynález zahrnuje polysyntetický postup, kde transformační kroky jsou aplikovány na safracin B:

-30CZ 304749 B6

Safracin B reprezentuje kruhový systém podobný ecteinascidinům. Tato sloučenina má stejnou pentacyklickou strukturu a stejný způsob substituce v pravém aromatickém kruhu, kruh E.

Více vhodnější výchozí látky tohoto vynálezu mají kyanoskupinu na pozici 21. V současné době je nejvhodnější sloučeninou předkládaného vynálezu sloučenina obecného vzorce 2.

Tato sloučenina je získána přímo ze safracinu B a je považována za klíčový meziprodukt v polysyntetickém postupu.

Kyanosafracin B byl získán fermentací Pseudomonas fluorescens, což je produkční kmen produkující safracin B, a zpracováním kultivační tekutiny za přídavku kyaniových iontů.

Vhodný kmen Pseudomonas fluorescens je kmen A2-2, FERM BP-14, který je použit 15 v proceduře EP-A-055 299. Vhodný zdroj kyanidových iontů je kyanid draselný. V typickém laboratorním provedení je kultivační tekutina zfiltrována a je přidán nadbytek kyanidových iontů.

Po vhodné době míchání, jako je 1 hodina, je pH upraveno, řekněme na 9,5, a extrakcí organickým rozpouštědlem vzniká surový extrakt, který může být dále čištěn za vzniku kyanosafracinu B.

-31 CZ 304749 B6

Všeobecně, konverze kyanoskupiny na pozici 21 výchozí sloučeniny na produkt tohoto vynálezu zahrnuje:

a) konverzi, pokud je to nezbytné, chinonového systému kruhu E na fenolový systém;

b) konverzi, pokud je to nezbytné, chinonového systému kruhu A na fenolový systém;

c) konverzi fenolového systému kruhu A na methylendioxyfenolový kruh;

d) tvorbu můstkového spiro systému obecného vzorce IV, VI nebo VII přes pozici 1 a pozici 4 kruhu S; a

e) derivatizaci, pokud je vhodná, jako je alkylace.

Krok (a), konverze, pokud je to nezbytné, chinonového systému kruhu E na fenolový systém, může být provedena běžnými redukčními postupy. Vhodné činidlo je vodík na paladiu/uhlíku, ačkoli i další redukční činidla mohou být použita.

Krok (b), konverze, pokud je to nezbytné, chinonového systému kruhu A na fenolový systém, je stejný jako v kroku (a) a není potřeba dalších detailů.

Krok (c), konverze fenolového systému kruhu A na methylendioxyfenolový kruh, může být proveden několika způsoby, třeba spolu s krokem (b). Například, chinonový kruh A může být demethylován v methoxy substituent na pozici 7 a redukován na dihydrochinon a zreagován s vhodným elektrofilním činidlem, jako je CH₂Br₂, BrCH₂Cl nebo podobným divalentním činidlem přímo za vzniku methylendioxy kruhového systému nebo s divalentním činidlem, jako je thiokarbonyldiimidazol, se kterým vzniká substituovaný methylendioxy kruhový systém, který může být přeměněn na požadovaný kruh.

Krok (d) je typicky prováděn vhodnou substitucí na pozici 1 s můstkovým činidlem, které může pomáhat vytvářet požadovaný můstek a které vytváří ex-endochinonový methid na pozici 4 a umožňuje methidu, aby reagoval s 1-substituentem za vzniku můstkové struktury. Vhodná můstková činidla jsou obecného vzorce XIX:

kde Fu označuje chránící skupinu, jako je -NHProt⁴³ nebo OProt^4b, Prot³ je chránící skupina a tečkovaná čára ukazuje polohu výhodné dvojné vazby.

Vhodný methid je tvořen hydroxyskupinou na pozici 10 na spojení kruhů A a B za vzniku neúplné struktury obecného vzorce XX:

-32CZ 304749 B6 nebo, více vhodněji neúplná struktura obecného vzorce XXI:

O

kde skupina R je vybrána z obecných vzorců IV, V, VI nebo VII. Pro první dvě takové skupiny, skupina R typicky nabývá tvaru -CHFu-CH₂-SProt³. Chránící skupiny mohou být potom od5 straněny a modifikovány, jak je vhodné, za vzniku požadované sloučeniny.

Typický postup pro krok (d) je uveden v US patentu 5 721 362, který je začleněn v referenci. Konkrétní odkaz je na pasáž ve sloupci 8, krok (1) a příklad 33 US patentu a podobné pasáže.

io Derivatizace v kroku (e) může zahrnovat alkylací, například se skupinou R^a-CO-, stejně jako konverzi 12-NCH₃ skupiny na 12-NH nebo 12-NCH₂CH₃. Taková konverze může být provedena před nebo po jiných krocích za použití dostupných způsobů.

Takže může být například přeměněna na meziprodukt Int—25:

a z tohoto derivátu je možné vytvořit množství cysteinových derivátů, které mohou být přeměněny na sloučeniny tohoto vynálezu. Vhodné cysteinové deriváty jsou doloženy následujícími dvěma sloučeninami:

Jeden způsob tohoto vynálezu přeměňuje kyanosafracin B na Int-25 provedením sekvencí reakcí, které nezbytně zahrnují (1) odstranění methoxyskupiny umístěné na kruhu A, (2) redukci kruhu A a vytvoření methylen-dioxyskupiny v jednom kruhu, (3) hydrolysu amidové funkční skupiny umístěné na uhlíku 1, (4) přeměnu výsledné aminoskupiny na hydroxylovou skupinu, viz schéma V.

-33CZ 304749 B6

Schéma V

-34CZ 304749 B6

-35 CZ 304749 B6

Způsob umožňující chránění a odstranění chránění primárního alkoholu na pozici 1 v kruhu B sloučeniny Int-25 přímo použitím cysteinového zbytku lnt-29 za vzniku meziproduktu lnt-27. Cysteinový derivát lnt-29 má chráněnou aminoskupinu β,β,β-trichlorethoxykarbonylovou chránící skupinou, která má kompatibilitu s přítomnou allylovou a MOM skupinou. Meziprodukt Int27 je přímo oxidován a cyklizován. Tyto okolnosti spolu s různou strategií odstraňování chránících skupin v pozdějších krocích syntézy vytvářejí nový a více přizpůsobitelný způsob průmyslovému vývoji než postup, který je veden v US 5 721 362.

Konverze sloučeniny mající kyanoskupinu na pozici 2 na meziprodukt Int-25 obvykle zahrnuje následující kroky (viz schéma V):

vytvoření chránící sloučeniny obecného vzorce Int—14 reakcí Int-2 s anhydridem terc-butoxykarbonylové kyseliny;

přeměnu Int—14 na di-chráněnou sloučeninu obecného vzorce Int—15 reakcí s brommethylmethyléterem a diisopropylethylaminem v acetonitrilu;

selektivní eliminaci methoxyskupiny chinonového systému v Int—15 za vzniku sloučeniny obecného vzorce Int—16 reakcí s methanolickým roztokem hydroxidu sodného; přeměnu Int—16 na methylen-dioxy sloučeninu obecného vzorce Int—18 použitím následující vhodné sekvence: (1) chinonová skupina sloučeniny Int—16 je redukována 10% Pd/C v atmosféře vodíku; (2) hydrochinonový meziprodukt je přeměněn na methylendioxy sloučeninu obecného vzorce Int—17 reakcí s bromchlormethanem a hydrogenuhličitanem česným v atmosféře vodíku; (3) Int-17 je přeměněn na sloučeninu obecného vzorce Int—18 chráněním volné hydroxylové skupiny OCH₂R skupinou. Tato reakce je provedena s BrCH₂R a hydrogenuhličitanem česným, kde R může být aiyl, CH=CH₂, OR' atd.

eliminaci terc-butoxykarbonylu a methyloxymethyl chránících skupin Int— 18 za vzniku sloučeniny obecného vzorce Int—19 reakcí s roztokem HCl v dioxanu. Tuto reakci je také možno provést smícháním Int-18 s roztokem trifluoroctové kyseliny v dichlormethanu;

vytvoření thiomočovinové sloučeniny obecného vzorce Int-20 reakcí Int—19 s fenylisothiokyanátem;

přeměnu sloučeniny obecného vzorce Int-20 na amin obecného vzorce Int—21 reakcí s roztokem kyseliny chlorovodíkové v dioxinu;

přeměnu sloučeniny obecného vzorce Int—21 na N-Troc derivát Int-22 reakcí s trichlorethyl chloroformiátem a pyridinem;

vytvoření chráněné hydroxyskupiny sloučeniny obecného vzorce Int-23 reakcí Int-22 s brommethylmethyléterem a diisopropylethylaminem;

přeměnu sloučeniny obecného vzorce Int-23 na N-H derivát Int-24 reakcí s kyselinou octovou a zinkem;

přeměnu sloučeniny obecného vzorce Int-24 na hydroxy sloučeninu obecného vzorce Int-25 reakcí s nitridem sodným v kyselině octové. Alternativně může být použit oxid dusičitý ve směsi kyseliny octové a acetonitrilu, po čemž následuje zpracování hydroxidem sodným. Také může být použit nitrit sodný ve směsi anhydrid kyseliny octové-kyselina octová, po čemž následuje zpracování hydroxidem sodným.

Z meziproduktu Int-25 přeměna na konečnou sloučeninu Int—35 nebo Int-36 tohoto vynálezu může potom pokračovat, jak je ukázáno ve schématu VI:

-36CZ 304749 B6

Schéma VI

Konverze Int-25 na Int-36 obvykle zahrnuje následující kroky (viz schéma VI):

přeměna sloučeniny obecného vzorce Int-24 na derivát Int-30 chráněním primárního hydroxylu (S)-N-2,2,2-trichlorethoxykarbonyl-S-(9H-fluoren-9-ylmethyl)cysteinem Int-29;

přeměnu chráněné sloučeniny obecného vzorce Int-30 na fenolový derivát Int—31 rozštěpením alkylové skupiny pomocí tributylcín hydridu a dichlorpaladia-bis(trifenylfosfinu);

přeměnu fenolové sloučeninu obecného vzorce Int-31 na sloučeninu obecného vzorce Int-32 oxidací anhydridem kyseliny benzenselenové při nízké teplotě;

přeměnu hydroxyskupinu sloučeniny obecného vzorce Int-32 na lakton Int-33 následující sekvencí reakcí: (1) reakce sloučeniny obecného vzorce Int-32 s2 ekv. anhydridu kyseliny trifluoroctové a 5 ekv. DMSO; (2) reakce s 8 ekv. diisopropylethylaminu; (3) reakce s 4 ekv. t-butylalkoholu; (4) reakce s7 ekv. 2-terc-butyl-l,l,3,3-tetramethylguanidinu; (5) reakce s 10 ekv. acetanhydridu;

přeměnu laktonové skupiny sloučeniny Int-33 na hydroxylovou skupinu sloučeniny Int-34 odstraněním MOM chránicí skupiny pomocí TMSI;

rozštěpení N-trichlorethoxykarbonyl skupiny sloučeniny obecného vzorce Int-34 na sloučeninu Int-35 reakcí se Zn/AcOH;

přeměnu aminoskupiny sloučeniny Int-35 na odpovídající α-ketolaktonovou skupinu sloučeniny Int-36 reakcí s N-methylpyridiniumkarboxaldehyd chloridem, po čemž následuje reakce s DBU;

Přeměna meziproduktu sloučeniny Int-25 na ET-743 použitím cysteinového derivátu 37 může být provedena podobným způsobem a se stejnými činidly, jako s cysteinovým derivátem Int-29, s výjimkou přeměny (f) a (g). Reakční sekvence se zobrazena na následujícím schématu VII:

-37CZ 304749 B6

Schéma VII

Předpokládá se, že tyto syntetické způsoby mohou být snadno modifikovány, konkrétně vhodnými změnami výchozí látky a činidel tak, aby poskytovaly sloučeniny tohoto vynálezu s odlišnými kruhovými systémy nebo funkčními skupinami.

Nové účinné sloučeniny

Bylo zjištěno, že sloučeniny tohoto vynálezu mají účinnost při léčení rakoviny, jako je leukémie, rakovina plic, rakovina tlustého střeva, rakovina ledvin a melanomu.

Z tohoto důvodu poskytuje předkládaný vynález způsob léčení některých savců, jmenovitě člověka, napadeného rakovinou, což zahrnuje podávání napadenému jedinci terapeuticky účinné množství sloučeniny tohoto vynálezu nebo jejího farmaceutického prostředku.

Předkládaný vynález se také týká farmaceutické přípravy, která jako účinnou složku obsahuje sloučeninu nebo sloučeniny tohoto vynálezu, stejně jako postupů pro jejich přípravu.

Příklady farmaceutických prostředků zahrnují některé pevné prostředky (tablety, pilulky, kapsle, granule atd.) nebo kapaliny (roztoky, suspenze nebo emulze) s vhodným podáváním, jako je orální, lokální nebo parenterální podávání a prostředky mohou obsahovat čistou sloučeninu nebo její kombinaci s nějakým nosičem nebo jinými farmakologicky účinnými sloučeninami. Tyto prostředky by měly být sterilizovány, pokud budou podávány parenterálně.

Podávání sloučenin nebo prostředků předkládaného vynálezu může být provedeno některými vhodnými způsoby, jako je nitrožilní infuze, orální podávání, intraperitoneální a nitrožilní podávání. Vhodná frekvence podávání je do 24 hodin, více vhodněji 2 až 12 hodin a nejvhodněji 2 až 6 hodin. Krátký čas infuze, který dovoluje, aby bylo podávání provedeno bez nutnosti zůstat v nemocnici přes noc je obzvláště žádoucí. Ačkoli, infuze mohou trvat 12 až 24 hodin nebo dokonce déle, pokud je to požadováno. Infuze by měla být prováděna ve vhodných intervalech, řekněme od 2 do 4 týdnů. Farmaceutické prostředky obsahující sloučeniny tohoto vynálezu mohou být dodávány liposomovým nebo nanosférovým zapouzdřením, ve sloučeninu trvale uvolňujících prostředcích nebo jinými standardními podávacími způsoby.

-38CZ 304749 B6

Správná dávka sloučenin se bude lišit podle konkrétního prostředku, způsobu podávání a konkrétního místa podávání, stavu pacienta a léčeného nádoru. Další faktor, jako věk, hmotnost, pohlaví, strava, čas podávání, rychlost exkrece, stav pacienta, kombinace léčiv, citlivost pacienta a závažnost onemocnění by měla být vzata na zřetel. Podávání může být provedeno kontinuálně nebo periodicky v rámci maximální tolerované dávky.

Sloučeniny a prostředky tohoto vynálezu mohou být použity s jinými léčivy a mohou tak poskytovat kombinovanou terapii. Další léčiva mohou tvořit část stejného prostředku nebo mohou být dodána jako samostatný prostředek pro podávání ve stejný nebo jiný čas. Identita jiného léčiva není konkrétně omezena a vhodné jsou:

a) léčiva s antibiotickými účinky, obzvláště ta, která zasahují cytoskeletální prvky včetně mikrotubulových modulátorů, jako je taxanové léčivo (jako je taxol, paclitaxel, taxoter, docetaxel), podofylotoxiny nebo vinca alkaloidy (vincristin, vinblastin);

b) antimetabolická léčiva, jako je 5-fluoruracil, cytarabin, gemcitabin, analogy purinu, jako je pentostatin, methotrexát;

c) alkylační činidla na bázi yperitu obsahující dusík (jako je cyklofosfamid nebo ifosfamid);

d) léčiva, která zasahují DNA, jako je antracyklinové léčivo adriamycin, doxorubicin, farmorubicin nebo epirubicin;

e) léčiva, která zasahují topoisomerasy, jako je etoposid;

f) hormony a agonisté hormonů nebo antagonisté, jako je estrogen, antiestrogen (amoxifen a podobné sloučeniny) a androgen, flutamid, leuprorelin, goserelin, cyprotron nebo octretoid;

g) léčiva, která zasahují signální transduktor v nádorových buňkách včetně derivátů protilátek, jako je herpecin;

h) alkylační léčiva, jako je platina (cis-platina, karbonplatina, oxaliplatina, paraplatina) nebo nitrosomočovina;

i) léčiva potenciálně působící na metastasy nádorů, jako jsou inhibitory metaloproteinasy;

j) genová terapie a antimediátorová činidla;

k) terapeutické protilátky;

l) jiné bioaktivní sloučeniny mořského původu, jmenovitě dideminy, jako je aplidin;

m) analogy steroidů, konkrétně dexamethason;;

n) protizánětlivá léčiva, konkrétně dexamethason;

o) antiemetická léčiva, konkrétně dexamethason.

Předkládaný vynález se také vztahuje na sloučeniny tohoto vynálezu vhodné pro použití pro léčení a pro použití sloučenin pro přípravu prostředků pro léčení rakoviny.

-39CZ 304749 B6

Cytotoxická aktivita

Buněčné kultury. Buňky byly sklizeny v logaritmické růstové fázi na Eaglově minimálním základovém médiu s Eaglovými doplňkovými solemi s 2,0 mM glutaminem, s neesenciálními aminokyselinami, bez uhličitanu sodného (EMEM/neaa); doplněného o 10% plodového telecího séra (FCS), a roztoku 10 ² M uhličitanu sodného a 0,1 g/1 penicilinu G a síranu streptomycinu.

Byla provedena jednoduchá rastrovací procedura, aby se zjistily a srovnaly protinádorové aktivity těchto sloučenin a byla použita adaptovaná forma, která byla popsána v Bergeron et al. (1984). Použitá buněčná nádorová linie P-388 (suspenzní kultura lymfoidních plasmatických buněk z DBA/2 myši), A-549 (jednovrstevná kultura rakovinových buněk lidské plíce), HT-29 (jednovrstevná kultura rakovinových buněk lidského tlustého střeva) a MEL-28 (jednovrstevná kultura rakovinových buněk lidského melanomu).

Buňky P-388 byly naočkovány do 16 mm jamek při koncentraci lxlO⁴ buněk na jamku v 1 ml alikvotního média MEM 5FCS obsahujícího příslušné koncentrace léčiva. Jako kontrola růstu byla použita separátní sada léčiv zajišťující, aby buňky setrvávaly v exponenciální fázi růstu. Všechna zjištění byla prováděna dvakrát. Po 3 dnech inkubace při teplotě 37 °C v atmosféře o koncentraci 10 % CO₂ a 98 % vlhkosti byla přibližná hodnota IC₅₀ zjištěna srovnáním růstu buněk v jamkách s léčivem s růstem buněk v kontrolních jamkách.

A-549, HT-29 a MEL-28 388 byly naočkovány do 16 mm jamek při koncentraci 2x10⁴ buněk na jamku v 1 ml alikvotního média MEM 10FCS obsahujícího příslušné koncentrace léčiva. Jako kontrola růstu byla použita separátní sada bez léčiv zajišťující, aby buňky setrvávaly v exponenciální fázi růstu. Všechna zjištění byla prováděna dvakrát. Po 3 dnech inkubace při teplotě 37 °C v atmosféře o koncentraci 10 % CO₂ a 98 % vlhkosti byly jamky obarveny 0,1 % Genciánovou violetí. Přibližná hodnota IC₅₀ byla zjištěna srovnáním růstu buněk v jamkách s léčivem s růstem buněk v kontrolních jamkách.

1. Raymond J. Bergeron, Paul F. Cavanaugh, Jr., Steven J. Kline, Robert G. Hughes, Jr., Gary T. Elliot and Carl W. Porter. Antineoplastic and antiherpetic activity of spermidine catecholamide iron chelators. Biochem. Bioph. Res. Comm. 1984, 121 (3) 848 - 854.

2. Alan C. Schroeder, Robert G. Hughes, Jr. and Alexander Bloch. Effects of Acyclic Pyrimidine Nucleoside Analoges. J. Med. Chem. 1981, 24 1078 - 1083.

Příklady biologických účinných sloučenin popsaných v předkládaném vynálezu jsou uvedeny v tabulce IV (IC50 (ng/ml)) na následující stránce.

-40CZ 304749 B6

DU-145

O*

•A θ'

θ’

ΙΑ

Ο

Ο ο

[ 0,5

«Α ον

Ο

ο

ο ο

ΙΑ θ'

ΙΑ θ'

ο «*

•Λ θ'

Ο •X

ο

o X *A

S-

2-

o IA

o X

MEL-28

*A O*

«η θ’

5·

*Λ θ'

ο **

ο ο

ΙΑ ο“

ΙΑ θ'

ο *χ

ο

8

ΙΑ θ'

ΙΑ Ο

ο χ

ΙΑ θ'

ο_

ο ·*—

s-

s.

O X

s

o X

HT-29

5·

ia θ'

Ο

ΙΑ θ'

ο

8 «Μ

*Α θ'

m cř

ο

ο

8

ΙΑ θ'

Ο ν «Μ

ΙΑ θ'

2>

ΙΑ θ'

ο *ν

ο

&

<=L «*·

o X

A-549

W> O*

ΙΑ θ'

&

ν%

ο -4-

S

«Λ θ'

ΙΑ θ'

ο

ο ο ——

ΙΑ

ΙΑ ©“

ΙΑ &

ο

ο ο

S-

A;

£

o X *·

P-388

5·

ΙΑ θ'

©'

ΙΑ θ'

ο **

ο ο

θ'

ΙΑ θ'

ο ·*

ο

ο ο

ΙΑ θ'

ΙΑ θ'

ο >

«η θ'

ο X ·*·

ο 2

O <A*

o,

o

O m

o X

Q

ϋ <

ο <

ο <

ο <

Ο <

υ <

«ε

U <

ο <

υ <

<

ϋ <

ο <

ο <

υ <

υ <

CJ <

O <

u <

o <

o <

o <

X

5 o

X ο

X ο

X ο

X ο

X ο

X ο

χ ο

X ο

X ο

X ο

X Ο

X ο

X ο

X ο

X ο

X ο

X ο

X o

X o

X o

X o

X o

«Μ X

o Σ

ο Σ

V Σ

V Σ

ο Σ

«> Σ

Σ

V Σ

Σ

V Σ

ο Σ

4» Σ

V Σ

Ο Σ

V Σ

V Σ

ο Σ

i

Σ

V Σ

w Σ

v Σ

v Σ

X

a X z o <

• X ζ § #Ί Ur

X Ζ δ •4»-s t£ ο

1 X ζ § X υ χ 4. 'η? X V

1 X 1 ^5 X δ

1 X Š << <Ί X υ •J, δ

X 1 Λ α.

X Ε 0

« X ζ ο υ C e <? Ο •Ί ι&» £

χ § Ο C :c ο 3

1 X 1 X X ο υ ό* χ

4 X ζ Ε η

X £ α.

< 8 *5 X ζ

X =r ι

1 X Ή 5 8 g ϋ

• X i < X ζ

• X 1 > eá R? 4 •2

X l H > ύ Z t τ § β Q

1 X § CS < k X z

1 X z 8 rt i .£ U

4 X I 1 X i í

ó X

Sloučenina

4?

3

Ο

Τ3

υ Μ-

<4-1 -Ί

ω χι-

χ

••Η

X -<fr

ντ

Ο

σ' •'Τ

4?

·£

Xf

>

X

O\ W-*

-41 CZ 304749 B6

O X

o *»

o

1

ΙΛ O“

cř

o“

o X

fc a

5-

*Ί ©”

£

—

g

o

o

o

O •n

«η θ'

o x

5-

©“

o X

fc

o'

3·

•n

V>

o o

A

o

A,

o X

1

2-

o X

O •s

o «θ'

g

O o

v> θ'

O

o o 4*·

©*

o

o •x

•V o

o

cT

o «η*

v>

*O

8

Λ

A

o

O

o X

§

O X,

o X

o «k

O

©

g

v> ©s

o

o o

o X

©*

S-

o _x

©

©'

©*

©^

*n

O

8

Λ

Λ

o

o

O

o

O

*n

o

o

*1 o

<a

©

o

s

cř

>.

*o*

©*

o'

o'

Λ

9

θ'

m

u <

tí <

u <

tí <

tí <

tí <

o <

tí <

X

•3

tí <

X

tí <

tí <

tí <

tí <

tí <

tí <

í

tí <

o <

u <

tí <

3

I

X

X

X

X

X

x

z

z

z

z

z

z

2 *

z

z

z

z

z

z

z

z

z

Z

z

o

o

o

o

o

o

O

O

0

υ

o

o

c

υ

o

α

u

C

o

υ

o

υ

o

u

01

tí

tí

tí

tí

tí

tí

tí

tí

tí

tí

tí

tí

tí

tí

tí

tí

tí

tí

tí

2

2

2

2

2

2

2

2

2

X

2

2

X

2

2

2

2

2

2

2

2

2

Ξ

s

2

1

a X

X

z

1

ó

1 o

Ó

a X z

§

a X z

a X z

< X z

o u !.

X §

o

$

>

o o ra

X u

o

8 w

• X

8

X σ

4. -s

<5

ó

X

X

/-X e«

-5

X

z

i

ó

X

X

$

X υ 's; χ

š X

X O Z X

i c

« ď & tí

• o o c

«Ή X

*4 X

X

k X z u

• X z u

1 X

É u

X o 3 X

o o· X u X·»*

X o rÍ X

s l*\ X

o Ϊ »«·

ϋ •n b

a z 4-* Λ

ř

|

<

u

o

c

2

44

z

z

z

<

<

<

u-

o

u

u

A.

L>

CU

řu

F«4

ffl

X

o

o

<*4

•c

·**·

* C0

r-

m

cd

KO

\©

X)

o

Ό

tí

60

43

Ό

cm

<s

CM

<S

ot

CM

Ol Ol

rs

Ol

OJ

m

Ol

Ol

m

m

m

CO

co

CO

CO

CO

CO

cO

cn

-42CZ 304749 B6

O

0,5

-

-

—

-

2

-

—

-

O*

o m

o «Α

o

»a

θ'

o wÝ

o «Rt

o v.

000!<

«Γ

!

O-s

o

«Λ «?

-

—

_

-

o

—

-

-

o

o »A

O Ά

o «*.

«Λ

5·

O «Λ

O «X «->·

O «s

Λ

ο

—

3-

o

•A cT

*n

-

-

1*

2

—

—

-

θ'

O

o •Λ

o <t

*A

o

cT

O v?

w*·

O St.

s o Λ

θ'

-

O

o

w% θ'

*n

—

—

—

—

O *“

%A

—

—

o

O

C> W*J

o

»A

2

eř

O

2-

o

Λ*

os

—

o s»

o

«Α C?

-

—

—

—

o

V»

-

-

o“

o

O Ά

o s»

5-

<s

o 1-Jt,

Λ

dř

—

5

o <

u <

tí <

u <

tí <

tí <

tí <

tí <

3

tí <

3

5Ž

tí <!

3

tí <

u ’Κ

tí <

<

tí <

tí <

•3

υ

tí <

tí <

5

δ

z υ

δ

δ

z o

δ

δ

z u

δ

δ

z L>

δ

z υ

z υ

δ

z o

δ

z o

δ

δ

δ

z υ

z ο

δ

υ 2

tí 2

I

Z

tí 2

tí 2

tí 2

tí 2

tí 2

tí 2

tí 2

tí 2

2

tí s

tí 2

2

tí 2

u 2

tí 2

u 2

tí 2

tí 2

tí 2

tí 2

ž -s g

1 X 2 c ee

« SC 5 a.

1 X z o υ 3 5? X Z

1 X 1 $ * z ύ <

i δ O **3 z 1 o O o c 0

1 X i ca < «4 X z

• X ! 3 > ή < k z • tí <

β X δ o 5 «>

1 X z 8 Ol < t •M X z

> X z 8 a Z 1 tí <

« X ! % c c U

X § I 3 X δ s X u <8 a.

1 X δ X s. X O SC o V) E u.

X Z o σ

Ó X

ó X »

• <

8 š UU

X s X o

+1 s Λ δ

X & X υ

c U

9 d *8 2

Ó tí < »

E m

c ΓΑ

O CO

o.

cr en

Ul m

«4 en

w m

«3 en

en

cn

X m

X m

N m

OO C4

A

♦ Ό t^e

ctf r* »·»

jo t

tí r*

4) t

«Μ

43 Γ' 1·^

F7 ••Μ

« ca O0

-43 CZ 304749 B6

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Metoda A: Do roztoku 1 ekv. sloučeniny 1 (23 pro tvorbu 25) odpařeného spolu s bezvodým toluenem v CH2CI2 (0,08 M) v atmosféře argonu bylo přidáno 1,2 ekv. anhydridu. Po reakci byla provedena TLC a reakce byla ukončena kyselinou nebo bází, směs byla extrahována CH₂C1₂ a organické vrstvy byly vysušeny Na₂SO4. Po chromatografií byla získána čistá sloučenina.

Sloučenina 2a (použitím Ac₂O jako anhydridu): ’H NMR (300 MHz, CDCf): δ 6,77 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,53 (bd, 1H), 5,18 (dd, 2H), 5,02 (d, 1H), 4,58 (ddd, 1H), 4,52 (bs, 1H), 4,35 (d, 1H),

4,27 (s, 1H), 4,19 - 4,15 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,55 (s, 3H), 3,54 - 3,43 (m, 2H), 2,93 (bd, 2H), 2,35 - 2,02 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,89 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCb): δ 170,5, 168,7, 168,4, 149,7, 148,5, 145,8, 141,0, 140,4, 131,0, 130,5, 125,7,

124,5, 120,3, 117,9, 113,5, 113,4, 102,0, 99,1,61,4, 60,3, 59,6,58,8,55,0, 54,5, 52,1,41,8,41,3, 32,6, 23,7, 20,9, 20,2, 16,1, 9,5; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C35H40N4O10S: 708,2. Nalezeno (M+H⁺): 709,2.

Sloučenina 2b (použitím (F₃COO)₂O jako anhydridu): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,74 (s, 1H), 6,41 (bd, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,05 (d, 1H), 4,60 (bp, 1H), 4,54-4,51 (m, 1H), 4,36 - 4,32 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,48 - 3,43 (m, 2H), 2,99 - 2,82 (m, 2H), 2,46 - 2,41 (m, 1H), 2,30 - 2,03 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,04 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 168,9, 168,5, 156,3, 155,8, 155,3, 149,3, 148,5, 146,0, 141,2,

140,6, 132,0, 130,2, 124,8, 120,2, 117,9, 113,2, 102,1, 99,2, 61,5, 60,6, 59,7, 59,1, 58,7, 57,5, 54,9, 54,6, 52,9, 42,0, 41,4, 31,6, 23,8, 20,2, 14,1, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro

C₃₅H₃₇F₃N₄OioS: 762,2. Nalezeno (M+H⁺): 763,2.

-44CZ 304749 B6

Sloučenina 21 (použitím anhydridů kyseliny jantarové): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,79 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,63 (bd, 1H), 5,18 (dd, 2H), 5,02 (d, 1H), 4,59 - 4,53 (m, 2H), 4,35 (d, 1H),

4,28 (s, 1H), 4,21 - 4,17 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,54 - 3,44 (m, 2H), 2,92 (bd, 2H), 2,69 - 2,63 (m, 2H), 2,53 - 2,48 (m, 2H), 2,38 - 2,07 (m, 2H), 2,28 (s, 6H), 2,18 (s, 3H), 2,02 (s,

3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C37H42N4O12S: 766,2. Nalezeno (Μ+ΕΓ): 767,3.

Sloučenina 25 (ze sloučeniny 23 použitím 1 ekv. Ac₂O jako anhydridů): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,59 (s, 1H), 5,97 (dd, 2H), 5,87 (s, 1H), 5,53 (s, 1H), 5,51 (d, 2H), 5,00 (d, 1H), 4,62 - 4,58 (m, 1H), 4,44 (s, 1H), 4,31 (s, 1H), 4,29 (d, 1H), 4,16 (d, 1H), 4,09 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,54 - 3,52 (m, 1H), 3,44 - 3,42 (m, 1H), 2,93 - 2,91 (m, 2H), 2,46 (dd, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,23 (dd, 1H), 2,15 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 1,90 (s, 1H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,1, 169,0,

148,3, 146,4, 146,0, 143,0, 136,4, 130,7, 129,2, 120,4, 119,0, 118, 112,3, 107,8, 101,4, 61,1,

60,5, 59,2, 58,8, 54,7, 54,5, 51,6, 43,3, 41,4, 31,4, 23,8, 22,9, 16,2, 8,7; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃iH₃₄N₄O₈S: 580,2. Nalezeno (M+H⁺): 581,3.

Příklad 2

Metoda B: Do roztoku 1 ekv. 1 (2p pro 2t a 9 a 11 pro 13e—f) a 1,5 ekv. kyseliny dvakrát odpaře20 né s bezvodým toluenem v CH₂C1₂ (0,05 M) v atmosféře argonu byly přidány 2 ekv. DMAP a 2 ekv. EDC.HC1. Reakční směs byla míchána po dobu 3 hodin a 30 minut. Po této době byla směs zředěna CH₂C1₂, promyta nesyceným vodným roztokem chloridu sodného a organická vrstva byla vysušena Na₂SO₄. Po chromatografii byla získána čistá sloučenina.

Sloučenina 2e (použitím CH₃(CH₂)₆CO₂H jako kyseliny): *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,76 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,50 (bd, 1H), 5,18 (dd, 2H), 5,02 (d, 1H), 4,60 (ddd, 1H), 4,53 (bp, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,19 (d, 1H), 4,18 (dd, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), 3,48 - 3,43 (m, 2H), 2,93 (bd, 2H), 2,29 - 1,99 (m, 4H), 2,29 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,31 - 1,23 (m, 10H), 0,89 (t, 3H); ’³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,9, 170,6, 168,4, 149,6,

148,5, 145,8, 141,0, 140,4, 130,9, 130,5, 125,7, 124,5, 120,4, 117,9, 113,4, 102,0, 99,2, 61,5,

60,2, 59,6, 59,3, 58,7, 57,5, 55,0, 54,5, 51,9, 41,8, 41,4, 36,4, 32,7, 31,7, 29,3, 29,1, 25,4, 23,7,

22,6, 20,3, 16,1, 14,0, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C_4]H₅₂N₄Oi₀S: 792,3. Nalezeno (M+H ):

793,3.

-45 CZ 304749 B6

Sloučenina 2f (použitím CH₃(CH₂)₆CO₂H jako kyseliny): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,76 (s, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,50 (bd, 1H), 5,18 (dd, 2H), 5,02 (d, 1H), 4,60 (ddd, 1H), 4,56-4,50 (bp, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,28 (bs, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,28 (bs, 1H), 4,20 (d, 1H), 4,18 (dd, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,54 - 3,44 (m, 2H), 2,93 - 2,92 (bd, 2H), 2,37 - 2,01 (m, 4H), 2,29 (s, 3H),

2,28 (3H), 2,18 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,60 - 1,56 (m, 2H), 1,40 - 1,20 (m, 24H), 0,88 (t, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₄9H₆8N₄O]₀S: 904,5. Nalezeno (M+H⁺): 905,5.

Sloučenina 2g (použitím PhCO₂H jako kyseliny): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,69 - 7,66 (m, ίο 2H), 7,57 - 7,46 (m, 3H), 6,69 (s, 1H), 6,35 (d, 1H), 6,06 (dd, 2H), 5,14 (dd, 2H), 5,07 (d, 1H),

4,76 (dt, 1H), 4,58 (bp, 1H), 4,36 - 4,33 (m, 2H), 4,24 - 4,18 (m, 2H), 3,62 (s, 3H), 3,55 (s, 3H), 3,49-3,46 (m, 2H), 2,94 (bd, 2H), 2,62 - 2,55 (m, 1H), 2,28 - 1,93 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 1,93 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,5, 168,4, 166,4, 149,3,

148,4, 145,9, 141,1, 140,6, 134,5, 134,2, 131,6, 131,4, 130,5, 128,6, 126,9, 125,2, 124,5, 120,7,

118,0, 113,4, 102,0, 99,2, 61,6, 60,2, 59,8, 59,2, 58,6, 57,4, 55,0, 54,6, 53,2, 41,9, 41,4, 32,9,

23,9, 20,2, 15,7, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₄₀H₄₂N₄OioS: 770,3. Nalezeno (M+H)⁺: 771,3.

Sloučenina 2k (použitím (+)-biotinu jako kyseliny): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,78 (s, 1H), 20 6,04 (dd, 2H), 6,00 (s, 1H), 5,80 (s, 1H), 5,39 (bd, 1H), 5,18 (dd, 3H), 4,78 (d, 1H), 4,64 - 4,51 (m, 3H), 4,34 - 4,28 (m, 3H), 4,19 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,47 - 3,39 (m, 2H), 3,19 - 3,13 (m, 1H), 3,02 - 2,74 (m, 4H), 2,28 - 1,47 (m, 10H), 2,28 (s, 6H), 2,14 (s,3H), 2,02 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,3, 171,3, 165,6, 163,7, 149,6, 148,4, 145,9, 141,0, 140,5,

131,1, 130,7, 125,8, 124,8, 120,2, 118,4, 113,7, 113,3, 102,0, 99,1, 61,5, 61,4, 61,3, 60,0, 59,6,

-46CZ 304749 B6

59,3, 58,4, 57,4, 56,1, 55,2, 54,6, 51,8, 42,2, 41,3, 41,1, 35,2, 32,1, 28,2, 28,1, 25,4, 24,0, 20,3,

16,1, 9,5; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₄3H₅₂N₆OhS₂: 892,3. Nalezeno (M+H⁺): 894,1.

AcHN

Sloučenina 2t (ze sloučeniny 2p použitím Acl-L-alaninu jako kyseliny): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,74 (s, IH), 6,60 - 6,56 (m, IH), 6,26 (bt, IH), 6,04 (dd, 2H), 5,58 (bt, IH), 5,17 (dd, 2H), 5,00 (d, IH), 4,64 - 4,60 (m, IH), 4,56 (bp, IH), 4,48 (dt, IH), 4,35 (d, IH), 4,29 (s, IH), 4,20 - 4,14 (m, 2H), 4,12 - 4,05 (m, IH), 3,75, 3,76 (2s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,47 - 3,42 (m, 2H),

2.98 - 2,89 (m, 2H), 2,42 - 1,98 (m, 3H), 2,42 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H),

1.98 (s, 3H), 1,36, 1,33 (2d, 3H), 1,06, 1,03 (2d, 3H), 0,94, 0,93 (2d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 171,9, 170,2, 169,6, 169,7, 168,5, 149,6, 148,6, 145,9, 141,1, 140,5, 131,8, 130,3,

125,4, 124,4, 120,3, 117,9, 113,4, 102,0, 99,2, 61,5, 60,2, 59,6, 59,4, 59,3 58,5, 57,8, 57,7, 57,4,

54,9, 54,5, 52,0, 51,9, 48,9, 48,8, 42,0, 41,3, 32,7, 32,2, 32,1, 23,8, 23,1, 23,1, 20,3, 19,2, 19,2,

19,1, 18,4, 17,7, 17,7, 16,2, 9,5. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₄₃H₅₄N₆O₁₂S: 878,3. Nalezeno (M+řT): 879,2.

Sloučenina 2w (použitím Ac-L-alaninu jako kyseliny): *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,89, 6,77 (2s, IH), 6,25 (dd, IH), 6,05 (dd, 2H), 5,72, 5,55 (2bd, IH), 5,22 - 5,13 (2dd, 2H), 5,02, 5,01 (2d, IH), 4,60 - 4,18 (m, 7 H), 3,77, 3,74 (2s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,48 - 3,43 (m, 2H), 2,93 - 2,91 (bd, 2H), 2,42 - 1,98 (m, 2H), 2,42, 2,37 (2s, 3H), 2,29, 2,28 (2s, 3H), 2,17, 2,15 (2s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,99, 1,97 (2s, 3H), 1,46, 1,22 (2d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,5,

170.1, 169,9, 169,3, 169,2, 168,6, 149,8, 149,4, 148,7, 148,5, 145,9, 141,1, 140,5, 140,4, 132,0, 131,6, 130,6, 130,2, 125,5, 124,9, 124,4, 120,4, 120,2, 117,9, 113,6, 113,4, 102,0, 99,2, 61,6, 61,5, 60,4, 60,3, 59,6, 59,5, 59,4, 59,2, 58,8, 58,3, 57,5, 55,0, 55,0, 54,6, 52,2, 51,8, 48,6, 48,5,

42.1, 42,0, 41,4, 32,5, 32,4, 23,8, 23,7, 23,2, 23,2, 20,3, 19,9, 19,8, 16,0, 15,9, 9,6. ESI-MS m/z:

Vypočteno pro C38H45N5O11S: 779,3. Nalezeno (M+H⁺): 780,2.

-47CZ 304749 B6

Sloučenina 2y (použitím FmSCH₂CH(NHAlloc)-CO2H jako kyseliny): *HNMR (300 MHz, CDCI3): δ 7,77 - 7,67 (m, 4H), 7,42 - 7,26 (m, 4H), 6,75 (s, 1H), 6,12 (bd, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,97 - 5,88 (m, 1H), 5,53 (bd, 1H), 5,35 - 5,21 (m, 2H), 5,15 (dd, 2H), 4,99 (d, 1H), 4,61 - 4,55 (m, 4H), 4,34 (d, 1H), 4,30 (s, 1H), 4,20 - 4,17 (m, 4H), 3,70 (s, 3H), 3,54 (s, 3H), 3,46 (d, 1H),

3,45 - 3,40 (m, 1H), 3,21 - 3,14 (m, 1H), 3,04 - 2,83 (m, 5H), 2,41 - 2,03 (m, 2H), 2,33 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^^NsO^: 1031,3. Nalezeno (M⁺): 1032,2.

Sloučenina 7 (použitím Boc-E-valinu jako kyseliny): *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,80 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,86 (bd, 1H), 5,15 (dd, 2H), 5,02 (d, 1H), 4,98 (bd, 1H), 4,63-4,60 (m, 1H), 4,55 (bp, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,30 (s, 1H), 4,22-4,16 (m, 2H), 3,83 (dd, 1H),3,76 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,48 - 3,42 (m, 2H), 2,93 - 2,90 (m, 2H), 2,41 - 2,03 (m, 3H), 2,41 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,01 (d, 3H), 0,87 (d, 3H); ^,3C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ

170.4, 170,2, 168,5, 165,2, 155,3, 148,6, 145,9, 141,1, 140,5, 131,6, 130,4, 125,5, 124,5, 120,5, 118,0, 113,5, 113,4, 102,0, 99,2, 61,6, 60,0, 59,6, 59,3, 58,4, 57,5, 55,0, 54,6, 52,1, 42,0, 41,4, 32,7, 31,6, 28,3, 23,8, 20,2, 19,1, 17,5, 16,3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^HjsNjCfoS:

865.4. Nalezeno (M+H): 866,3.

-48 CZ 304749 B6

Sloučenina 8 (použitím Boc-L-alaninu jako kyseliny): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,81 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,86 (bp, 1H), 5,16 (dd, 2H), 5,03 (bp, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,56 - 4,50 (m, 2H), 4,34 (d, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,20 - 4,15 (m, 2H), 3,98 - 3,78 (m, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,555 (s, 3H), 3,47 - 3,43 (m, 2H), 2,91 (bd, 2H), 2,37 - 2,02 (m, 2H), 2,37 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,37 (d, 3H); ^I3C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,5, 170,1, 168,4,

154,6, 149,5, 148,5, 145,8, 141,0, 140,4, 131,3, 130,4, 125,6, 124,4, 120,3, 117,9, 113,3, 101,9,

99,1, 61,4, 60,1, 59,6, 59,2, 58,5, 57,4, 54,9, 54,4, 52,1, 49,9, 41,8, 41,3, 32,4, 28,3, 23,8, 20,2,

19,5, 16,1, 9,5. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C41H51N5O12S: 837,3. Nalezeno (MÁLE): 838,4.

BocHN

Sloučenina 9 (použitím Boc-L-alaninu jako kyseliny): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,76 (s, 1H), 6,66 (bd, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,58 (bd, 1H), 5,17 (dd, 2H), 5,01 (d, 1H), 4,99 (bp, 1H), 4,66 - 4,63 (m, 1H), 4,56 (bp, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,19 - 4,05 (m, 4H), 3,76 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,47 - 3,42 (m, 2H), 2,92 - 2,89 (m, 2H), 2,44 - 2,02 (m, 3H), 2,44 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,41 (s, 9H), 1,32 (d, 3H), 1,03 (d, 3H), 0,93 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,1, 170,2, 169,7, 168,5, 149,7, 148,7, 145,9, 141,0, 140,5, 132,0, 130,2,

125,3, 124,4, 120,3, 117,9, 113,5, 102,0, 99,2, 61,5, 60,2, 59,6, 59,4, 58,5, 57,7, 57,4, 55,0, 54,6,

51,9, 50,2, 42,0, 41,4, 32,7, 32,2, 28,2, 23,8, 20,3, 19,1, 18,1, 17,8, 16,3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₄₆H₆₀N6Oi₃S: 936,4. Nalezeno (M⁺): 937,2.

Sloučenina 13e (použitím 5 ekv. CH₃(CH₂)6CO₂H jako kyseliny, 7 ekv. DMAP a 7 ekv. EDC HC1): 'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,68 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,02 - 4,98 (m, 2H), 4,56 (bp, 1H), 4,34 (d, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,19 (d, 1H), 4,11 (dd, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,46 (d, 1H), 3,42 - 3,39 (m, 1H), 2,89 - 2,87 (m, 2H), 2,32 - 1,96 (m, 4H), 2,30 (s, 3H),

2,26 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,60 - 1,55 (m, 2H), 1,32 - 1,23 (m, 8H), 0,90 (t, 3H); ¹³CNMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,5, 168,6, 167,1, 148,9, 148,2, 145,8, 141,1, 140,6, 130,7,

125,3, 125,1, 124,7, 120,9, 118,1, 113,6, 113,1, 102,0, 99,2, 71,4, 61,5, 60,0, 59,8, 59,2, 58,6,

57,4, 55,0, 54,6, 41,6, 41,5, 33,8, 31,7, 29,1, 28,9, 24,7, 23,9, 22,6, 20,2, 15,9, 14,0, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₄iH₅iN₃0nS: 793,3. Nalezeno (M+l-Ε): 794,9.

-49CZ 304749 B6

Sloučenina 13f (použitím 4 ekv. CH₃(CH₂)i4CO₂H jako kyseliny, 6 ekv. DMAP a 6 ekv. EDC HC1): *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,68 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,02-4,98 (m, 2H), 4,56 (bp, 1H), 4,34 (d, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,19 (d, 1H), 4,12 (dd, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,46 (d, 1H), 3,45 - 3,41 (m, 1H), 2,89 - 2,87 (m, 2H), 2,37 - 1,96 (m, 4H), 2,30 (s, 3H),

2,26 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 1,63 - 1,58 (m, 2H), 1,35 - 1,23 (m, 24H), 0,88 (t, 3H); ^l3CNMR(75 MHz, CDC1₃): 172,6, 168,6, 167,1, 148,9, 148,2, 145,8, 141,1, 140,6, 130,7, 125,3,

125,1, 124,7, 120,9, 118,1, 113,6, 113,1, 102,0, 99,2, 71,4, 61,5, 60,0, 59,8, 59,2, 58,6, 57,4, 55,0, 54,6, 41,6, 41,5, 33,9, 31,9, 31,7, 30,9, 29,7, 29,5, 29,3, 29,2, 29,1, 24,7, 23,9, 22,7, 20,2, 15,9, 14,1,9,6.

Příklad 3

Metoda C: Do roztoku 1 ekv. 1 odpařeného dvakrát spolu s bezvodým toluenem v CH₂C1₂ (0,05 M) v atmosféře argonu bylo přidáno 1,05 ekv. anhydridu kyseliny fialové. Po 30 minutách byla reakční směs ochlazena na 0 °C a bylo přidáno 2,5 ekv. Et₃N a 1,5 ekv. ClCO₂Et. O 5 minut později byla reakční směs zahřáta na pokojovou teplotu a míchána po dobu 7 hodin. Potom byla zředěna CH₂C1₂, promyta nasyceným vodným roztokem NaHCO₃ a organická vrstva byla vysu20 šena Na₂SC>4. Po chromatografií (hexan/EtOAc, 3:2) byla získána sloučenina 2d v 85% výtěžku.

Sloučenina 2j: *HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,91 - 7,70 (m, 4H), 6,67 (s, 1H), 6,06 (dd, 2H), 5,19 (dd, 2H), 5,05 (d, 1H), 4,64 - 4,62 (m, 2H), 4,37 (d, 1H), 4,32 (s, 1H), 4,20 (d, 1H), 4,12 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), 3,50 (d, 1H), 3,41 - 3,40 (m, 1H), 2,85 - 2,83 (m, 2H),

2,36 - 2,11 (m, 2H), 2,33 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,05 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C41H40N4O11S: 796,2. Nalezeno (M+H)⁺: 797,2.

Příklad 4

Metoda D: Do roztoku 1 ekv. 1 v CH₃CN/CH₂C1₂ 3:1 (0,025 M) v atmosféře argonu byl přidán 1 ekv. formalinového roztoku (37 %) a 1 ekv. NaCNBH₃. Roztok byl míchán při pokojové teplo-50CZ 304749 B6 tě po dobu 30 minut. Potom byly přidány 2 ekv. kyseliny octové a roztok změnil barvu na oranžovo-žlutou a reakční směs byla míchána po dobu 1 hodiny a 30 minut. Po této době byla reakční směs zředěna CH₂C1₂, zneutralizována NaHCO₃ a extrahována CH₂C1₂. Organická vrstva byla vysušena Na₂SO4. Po chromatografií byla získána čistá sloučenina.

Sloučenina 2m: ^]HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,66 (s, 1H), 6,03 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 4,98 (d, 1H), 4,58 (bp, 1H), 4,32 (d, 1H), 4,25 (s, 1H), 4,15 - 4,13 (m, 1H), 3,95 (dd, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,54 - 3,41 (m, 3H), 2,92 - 2,80 (m, 2H), 2,33 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,17 - 2,07 (bp, 6H), 2,16 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 1,86 (dd, 2H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro ío C₃₅H4₂N4O₉S: 694,3. Nalezeno (M+H⁺): 695,3.

Příklad 5

Metoda E: Do roztoku 1 ekv. 1 (3p pro 3q-r, 3s pro 3u, 3v pro 3x 11 pro 13c, 13h, 131 a 24 pro 26) v CH₂C1₂ (0,08 M) v atmosféře argonu bylo při pokojové teplotě přidáno 1,1 ekv. pyridinu. Potom byla reakční směs ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přidáno 1,1 ekv. chloridu kyseliny octové. O 5 minut později byla reakční směs zahřáta na pokojovou teplotu a míchána po dobu 45 minut. Potom byla zředěna CH₂C1₂, promyta nasyceným vodným roztokem NaCl a organická vrstva byla vysušena Na₂SO₄. Po chromatografií byla získána čistá sloučenina.

Sloučenina 2c (použitím butyryl chloridu): 'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,76 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,52 (bd, 1H), 5,17 (dd, 2H), 5,02 (d, 1H), 4,61 (ddd, 1H), 4,52 (bp, 1H), 4,34 (dd, 1H), 4,27 (s, 1H), 4,19 (d, 1H), 4,17 (dd, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,47 - 3,43 (m, 2H), 2,92 (bd, 2H),

2,34 - 1,98 (m, 4H), 2,28 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,71 - 1,58 (m, 2H),

0,96 (t, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,7, 170,6, 168,4, 149,6, 148,5, 145,8, 141,0,

140.4, 131,0, 130,5, 125,7, 124,6, 120,4, 117,9, 113,4, 102,0, 99,1, 61,5, 60,1, 59,6, 59,2, 58,6,

57.4, 55,0, 54,5, 51,9, 41,8, 41,3, 38,2, 32,7, 23,7, 20,2, 18,8, 16,1, 13,7, 9,5. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₇H44N40ioS: 736,3. Nalezeno (M+ffi): 737,2.

-51 CZ 304749 B6

Sloučenina 2d (použitím isovaleryl chloridu): HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,76 (s, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,50 (bd, 1H), 5,17 (dd, 2H), 5,02 (d, 1H), 4,63 (ddd, 1H), 4,53 (bp, 1H), 4,35 (dd, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,20 (d, 1H), 4,18 (dd, 1H),3,76 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,47 - 3,43 (m, 2H), 2,92 (bd, 2H), 2,30 - 1,92 (m, 5H), 2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 0,99 (d, 3H), 0,93 (d, 3H) ; ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,3, 170,6, 168,4, 149,6, 148,5, 141,0, 140,5, 130,9,

130,5, 125,7, 124,6, 120,4, 118,0, 113,5, 113,4, 102,0, 99,2, 61,5, 60,1, 59,6, 59,3, 58,6, 57,5, 55,0, 54,6, 51,8, 45,6, 41,9, 41,4, 31,8, 25,8, 23,8, 22,5, 22,4, 20,2, 16,3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₈H4₆N₄OioS: 750,3. Nalezeno (M+H⁺): 751,3.

- 7,51 (m, 2H), 7,44 - 7,37 (m, 3H), 6,85 (s, 1H), 6,24 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,72 (d, 1H), 5,16 (dd, 2H), 5,05 (d, 1H), 4,71 (ddd, 1H), 4,54 (bp, 1H), 4,35 (dd, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,22 -4,17 (m, 2H), 3,68 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,48 - 3,44 (m, 2H), 2,97 - 2,95 (m, 2H), 2,51 - 2,45 (m, 1H),

2,27 - 2,03 (m, 1H), 2,27 (s, 6H), 2,19 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ

170,5, 168,4, 164,5, 149,7, 148,5, 145,8, 142,1, 141,0,140,4, 134,7, 131,1, 130,5, 129,8, 128,8,

127,9, 125,5, 124,4, 120,4, 119,7, 118,0, 113,4, 113,3, 102,0, 99,1, 61,4, 60,3, 59,6, 59,2, 58,8,

57,4, 54,9, 54,5, 52,6, 41,7, 41,4, 32,7, 23,8, 20,2, 16,3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₄₃H₄₄N₄OioS: 796,3. Nalezeno (M+H⁺): 797,2.

Sloučenina 2i (použitím trans-3-(trifluormethyl)cinnamoyl chloridu): *HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,82 - 7,51 (m, 5H), 6,85 (s, 1H), 6,29 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,72 (d, 1H), 5,17 (dd, 2H), 5,05 (d, 1H), 4,73-4,69 (m, 1H), 4,55 (bp, 1H), 4,36 (d, 1H), 4,39 (s, 1H), 4,23 - 4,18 (m, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,48 - 3,44 (m, 2H), 2,96, (bd, 2H), 2,49 - 2,44 (m, 1H),

2,27 - 2,04 (m, 1H), 2,27 (s, 6H), 2,19 (s, 3H), 2,04 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃):

-52CZ 304749 B6 δ 170,3, 168,4, 163,8, 149,7, 148,5, 145,9, 141,1, 140,5, 135,5, 134,6, 131,6, 131,0, 130,6, 129,5,

126,3, 126,2, 125,6, 124,4, 123,7, 123,6, 121,5, 120,3, 117,9, 113,5, 113,3, 102,0, 99,2, 61,4,

60,4, 59,6, 59,2, 58,9, 57,5, 54,9, 54,5, 52,6, 41,8, 41,4, 32,6, 23,8, 20,3, 16,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C43H43N4F3O10S: 864,3. Nalezeno (M+H⁺): 865,0.

Sloučenina 3q (ze sloučeniny 3p použitím acetyl chloridu): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,54 (s, 1H), 6,08 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,81 (s, 1H), 5,59 (d, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,67 (dt, 1H), 4,58 (bp, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,26 (dd, 1H), 4,21 - 4,16 (m, 1H), 4,09 (dd, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,45 - 3,42 (m, 2H), 2,91 - 2,88 (m, 2H), 2,49 (s, 3H) 2,29 - 1,98 (m, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,06 (d, 3H), 0,96 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,2, 169,5, 168,6,

148,1, 145,9, 143,3, 141,1, 140,4, 130,4, 130,1, 120,4, 120,2, 118,5, 118,0, 113,5, 102,0, 61,4,

60,4, 59,3, 58,8, 57,7, 54,7, 54,6, 51,8, 42,0, 41,5, 32,7, 32,3, 23,8, 23,3, 20,5, 19,1, 18,0, 16,2,

9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C38H45N5O10S: 763,3. Nalezeno (M+H⁴): 764,3.

Sloučenina 3r (ze sloučeniny 3p použitím cinnamoyl chloridu): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,59 (d, 1H), 7,50 - 7,46 (m, 2H), 7,37 - 7,34 (m, 3H), 6,57 (s, 1H), 6,42 (d, 1H), 6,30 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,81 (s, 1H), 5,64 (d, 1H), 5,03 (d, 1H), 4,70 - 4,67 (m, 1H), 4,58 (bp, 1H),

4,30 - 4,24 (m, 3H), 4,21-4,17 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,45 (bd, 2H), 2,92 - 2,89 (m, 2H), 2,56 (s, 3H), 2,28 - 2,03 (m, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,10 (d, 3H), 1,00 (d, 3H);

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,2, 170,1, 169,4, 168,5, 165,3, 148,1, 145,9, 143,4, 141,2,

140,4, 134,8, 130,5, 130,1, 129,7, 128,8, 127,8, 120,6, 120,4, 120,2, 118,5, 118,0, 113,5, 113,5, 102,0, 61,4, 60,4, 59,4, 58,9, 57,7, 54,7, 54,6, 51,9, 42,0, 41,5, 32,7, 23,8, 20,5, 19,2, 18,0, 16,4,

9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C45H49N5O10S: 851,3. Nalezeno (M+H⁴): 852,3.

-53CZ 304749 B6

Sloučenina 3u (ze sloučeniny 3s použitím cinnamoyl chloridu): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,63 (d, 1H), 7,50 - 7,47 (m, 2H), 7,38 - 7,35 (m, 3H), 6,62 (d, 1H), 6,55 (s, 1H), 6,41 (d, 1H), 6,35 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,82 (s, 1H), 5,60 (d, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,68 - 4,60 (m, 2H), 4,58 (bp, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,26 (dd, 1H), 4,21 -4,15 (m, 2H), 4,10 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,45-3,43 (m, 2H), 2,91 - 2,88 (m, 2H), 2,48 (s, 3H), 2,30 - 2,03 (m, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,41 (d, 3H), 1,04 (d, 3H), 0,94 (d, 3H); ^l3C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,8, 170,2,

169,6, 168,5, 165,4, 148,0, 145,9, 143,3, 141,6, 141,1, 140,5, 134,7, 130,6, 129,8, 129,8, 128,8, 127,8, 120,3, 120,1, 118,7, 118,0, 113,5, 102,0, 61,5, 60,3, 59,4, 58,8, 57,7, 54,7, 54,6, 51,9, 49,0, 42,1, 41,5, 32,6, 32,3, 23,8, 20,5, 19,2, 18,6, 17,7, 16,3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C48H54N6OHS: 922,4. Nalezeno (M+H⁺): 923,1.

Sloučenina 3x (ze sloučeniny 3v použitím cinnamoyl chloridu): HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,60 (d, 1H), 7,49 - 7,46 (m, 2H), 7,37 - 7,34 (m, 3H), 6,59 (s, 1H), 6,48 (d, 1H), 6,39 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,84 (s, 1H), 5,58 (d, 1H), 5,03 (d, 1H), 4,64 - 4,59 (m, 1H), 4,58 (bp, 1H), 4,36 - 4,8 (m, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,26 (d, 1H), 4,22 - 4,17 (m, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,45 - 3,43 (m, 2H), 2,92 (d, 2H), 2,53 (s, 3H), 2,28 - 2,03 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,54 (d, 3H); ^l3C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,4, 170,1, 168,6, 164,9, 148,2, 145,9, 143,2, 141,1, 134,8, 130,5, 130,0, 129,7, 128,8, 127,8, 120,4, 120,4, 120,0, 118,8, 118,0, 113,6, 113,4, 102,0,

61,4, 60,4, 60,4, 59,3, 59,1, 54,8, 54,6, 51,7, 48,7, 41,9, 41,5, 32,5, 23,8, 20,5, 20,0, 16,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C4₃H₄₅N5OiiS: 823,3. Nalezeno (M+H⁺): 824,3.

-54CZ 304749 B6

Sloučenina 13c (ze sloučeniny 11 použitím 20 ekv. butyryl chloridu a 30 ekv. pyr): 'HNMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,68 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,02 (bt, 1H), 5,01 (d, 1H), 4,57 (bp, 1H), 4,34 (dd, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,19 (d, 1H), 4,12 (dd, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,46 (d, 1H), 3,45 - 3,42 (m, 1H), 2,88 (bd, 2H), 2,30 - 2,16 (m, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 2,02 - 1,96 (m, 1H), 1,68 - 1,56 (m, 2H), 0,98 (t, 3H); ¹³C NMR (75 MHz,

CDCI3): δ 172,5, 168,8, 167,3, 149,1, 148,4, 146,0, 141,3, 140,9, 131,0, 125,6, 125,0, 121,2,

118,3, 113,8, 113,3, 102,2, 99,4, 71,7, 61,7, 60,3, 60,0, 59,4, 58,8, 57,6, 55,2, 54,9, 41,9, 41,7,

36,1, 32,0, 24,2, 20,5, 18,5, 16,1, 13,9, 9,8. ESI-MS m/z: Vypočteno pro Csv^NjOnS: 737,3. Nalezeno (M+Na⁺): 760,2.

Sloučenina 13h (ze sloučeniny 11 použitím 5 ekv. cinnamoyl chloridu, 7,5 ekv. pyr a CH₃CN jako spolurozpouštědla): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,68 (d, 1H), 7,56 -7,53 (m, 2H), 7,43 - 7,39 (m, 3H), 6,72 (s, 1H), 6,30 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,22 - 5,13 (m, 3H), 5,04 (d, 1H), 4,58 (bp, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,31 (s, 1H), 4,21 (d, 1H), 4,15 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,48 (d, 1H), 3,43 - 3,39 (m, 1H), 2,90 - 2,88 (m, 2H), 2,47 - 2,41 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,07 - 2,03 (m, 1H), 2,04 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 168,6, 167,1,

165.6, 148,8, 148,2, 145,7, 141,1, 140,6, 134,4, 130,9, 130,7, 130,4, 128,9, 128,2, 128,1, 125,2,

124.7, 120,9, 118,1, 117,3, 113,7, 113,1, 102,0, 99,2, 71,9, 61,5, 60,0, 59,8, 59,3, 58,5, 57,4,

54,9, 54,6, 41,7, 41,5, 31,8, 23,9, 20,2, 16,0, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C42H43N3OHS:

797,3. Nalezeno (M+lT): 798,8.

Sloučenina 131 (ze sloučeniny 11 použitím 5 ekv. methansulfonyl chloridu a 5 ekv. Et₃N jako báze): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,65 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,00 (d, 1H), 4,93 (dd, 1H), 4,58 (bp, 1H), 4,34 (dd, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,16 - 4,12 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,46 (d, 1H), 3,44 - 3,39 (m, 1H), 3,11 (s, 3H), 2,96 - 2,81 (m, 2H), 2,50 - 2,42 (m, 1H),

2,30 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,04 - 1,97 (m, 1H), 2,03 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C34H39N3O12S2: 745,2. Nalezeno (M+ET): 746,2.

-55CZ 304749 B6

Sloučenina 26 (ze sloučeniny 24 použitím 1,05 ekv. acetyl chloridu a bez báze): 'HNMR (300 MHz, CDCb): δ 6,51 (s, 1H), 6,05 (d, 2H), 5,95 (s, 1H), 5,60 (d, 1H), 5,59 (bp, 1H), 5,03 (d, 1H), 4,58 - 4,53 (m, 2H), 4,27 (s, 1H), 4,26 (d, 1H), 4,20 - 4,16 (m, 2H), 3,43 - 3,42 (m, 2H), 2,90 - 2,88 (m, 2H), 2,27 - 2,11 (m, 2H), 2,27 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,85 (s, 3H); ^,3C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,4, 169,5, 168,9, 145,8, 144,5, 140,9, 140,4,

C32H34N4O9S: 650,2. Nalezeno (M+H⁺): 651,3.

Příklad 6

Metoda F: Do roztoku 1 ekv. 1 v DMF (0,03 M) v atmosféře argonu bylo při pokojové teplotě přidáno 0,9 ekv. CS2CO3 a 0,9 ekv. BnBr. Po 2 hodinách a 30 minutách byla reakce ukončena μΐ AcOH zředěným hexanem/EtOAc (1:3). Potom byla reakční směs ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přidáno 1,1 ekv. chloridu kyseliny octové. O 5 minut později byla reakční směs zahřáta na pokojovou teplotou a míchána po dobu 45 minut. Potom byla promyta H₂O a extrahována hexanem/EtOAc (1:3). Organická vrstva byla vysušena Na₂SO₄. Po chromatografn byla získána čistá sloučenina 2n.

Me

O

CN

Sloučenina 2n: 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,32 - 7,20 (m, 5H), 6,56 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H),

C₄₀H₄₄N₄O₉S: 756,3. Nalezeno (M+Na⁺): 779,2.

Příklad 7

Metoda G: Do roztoku 1 ekv. 2a-n, 2t, 2w, 2y, 11, 12*, 13a-c, 13a-f, 131, 14a* nebo 7-9 v CH₃CN/CH₂C1₂ 5:4 (0,026 M) v atmosféře argonu bylo při pokojové teplotě přidáno 6 ekv. Nal a 6 ekv. čerstvě destilovaného TMSC1. Po 20 minutách byla reakce ukončena přidáním nasyceného vodného roztoku Na₂S₂O₄, zředěna CH₂C1₂, promyta Na₂S₂O₄ (3x) nebo NaCl. Vodná vrstva byla extrahována CH₂C1₂. Organická vrstva byla vysušena Na₂SO₄. Po chromatografií byly získány čisté sloučeniny 3a-n, 3p, 3s-t, 3v-w, 3y-z, 15, 16*, 17a-c, 17e-f, 17h, 171, 18a*.

^Hy^{NHAc 0Me}

N-O ČN

-56CZ 304749 B6

Sloučenina 3a (z 2a): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,56 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,78 (s, 1H), 5,52 (bd, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,58 (ddd, 1H), 4,53 (bs, 1H), 4,27 - 4,25 (m, 2H), 4,19 - 4,15 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,44 - 3,43 (m, 2H), 2,92 - 2,90 (m, 2H), 2,36 - 2,02 (m, 2H), 2,36 (s, 3H),

2,30 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,88 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,5, 168,8,

168,4, 148,1, 145,8, 143,1, 141,0, 140,3, 130,7, 129,9, 129,0, 120,3, 119,0, 117,9, 113,5, 102,0,

61,3, 60,3, 60,2, 59,3, 58,9, 24,7, 54,5, 51,9, 41,8, 41,4, 32,4, 23,7, 22,8, 20,4, 16,0, 9,5; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^H^N^S: 664,2. Nalezeno (M+FÚ): 665,2.

Sloučenina 3b (z 2b): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,52 (s, 1H), 6,41 (bd, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,72 (s, 1H), 5,05 (d, 1H), 4,60 (bp, 1H). 4,54 - 4,51 (m, 1H), 4,32 (s, 1H), 4,26 - 4,18 (m, 3H), 3,74 (s, 3H), 3,46 - 3,42 (m, 2H), 2,97 - 2,80 (m, 2H), 2,44 - 2,38 (m, 1H), 2,30 - 2,03 (m, 1H),

2,30 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 168,8, 168,5,

156,3, 155,8, 155,3, 147,6, 146,0, 143,1, 141,2, 140,5, 130,5, 129,9, 120,7, 120,6, 120,1, 118,0,

117,9, 113,2, 101,1, 61,4, 60,7, 60,1, 69,5, 58,9, 54,6, 54,5, 52,8, 42,0, 41,5, 31,9, 23,8, 20,4,

15,6, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₃H₃₃F₃N₄O₉S: 718,2. Nalezeno (M+EÉ): 719,2.

Sloučenina 3c (z 2c): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,54 (s, 1H), 6,03 (dd, 2H), 5,82 (s, 1H), 5,49 (bd, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,61 (ddd, 1H), 4,53 (bp, 1H), 4,27 - 4,24 (m, 2H), 4,19 - 4,15 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,44 - 3,41 (m, 2H), 2,90 (bd, 2H), 2,31 - 1,94 (m, 4H), 2,31 (s, 3H), 2,28 (s,

3H), 2,15 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,67 - 1,57 (m, 2H), 0,95 (t, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ

171,8, 170,5, 148,0, 145,8, 143,1, 141,0, 140,4, 130,8, 129,0, 120,4, 120,2, 119,0, 118,0, 113,4, 102,0, 61,4, 60,2, 59,4, 58,9, 54,7, 54,5, 51,7, 41,8, 41,4, 38,2, 32,6, 23,8, 20,5, 18,8, 16,0, 13,7,

9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C35H40N4O9S: 692,0. Nalezeno (M+EÉ): 693,9.

-57CZ 304749 B6

Sloučenina 3d (z 2d): ‘HNMR (300 MHz, CDCI₃): δ 6,54 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,76 (s, 1H),

5,48 (bd, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,66-4,60 (m, 1H), 4,52 (bp, 1H), 4,27-4,23 (m, 2H), 4,19-4,15 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,44 - 3,42 (m, 2H), 2,90 (bd, 2H), 2,33 - 1,90 (m, 5H), 2,33 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 0,98 (d, 3H), 0,92 (d, 3H); ^l3C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ

171,3, 170,6, 168,5, 148,0, 145,8, 143,1, 141,1, 14,4, 130,8, 129,0, 127,6, 120,5, 120,3, 119,1, 118,0, 113,5, 102,0, 74,2, 61,4, 60,3, 59,4, 58,8, 54,7, 54,6, 51,7, 45,5, 41,9, 41,5, 32,7, 25,8,

23,8, 22,5, 22,4, 20,5, 16,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro CmRuNAS: 706,3. Nalezeno (M+Na⁺): 729,2.

O

Sloučenina 3e (z 2e): ‘HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,54 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,75 (s, 1H),

5,48 (bd, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,60 (ddd, 1H), 4,53 (bp, 1H), 4,27 - 4,24 (m, 2H), 4,19 - 4,15 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,48 - 3,42 (m, 2H), 2,91 (bd, 2H), 2,32 - 1,97 (m, 4H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,62-1,41 (m, 2H), 1,390 - 1,25 (m, 8H), 0,89 (t, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,0, 170,6, 168,4, 148,0, 145,8, 143,1, 141,0, 140,4, 130,8, 129,0, 120,4,

120,2, 119,0, 118,0, 113,7, 113,5, 102,0, 61,4, 60,3, 59,4, 58,9, 54,7, 54,6, 51,8, 41,8, 41,5, 36,3,

32,6, 31,7, 29,3, 29,1, 25,4, 23,8, 22,6, 20,5, 16,1, 14,0, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₅H4oN₄OioS: 748,3. Nalezeno (M+H⁺): 749,3.

Sloučenina 3f (z 2f): ‘HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,55 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,73 (s, 1H), 20 5,48 (bd, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,60 (ddd, 1H), 4,56 - 4,50 (bp, 1H), 4,28 - 4,24 (m, 2H),

4,20 - 4,14 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,44 - 3,40 (m, 2H), 2,92 - 2,90 (bd, 2H), 2,35 - 1,95 (m, 4H), 2,32 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,62 - 1,58 (m, 2H), 1,38 - 1,20 (m, 24H), 0,88 (t, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₄₇H₆₄N₄O9S: 860,4. Nalezeno (M+Ef): 861,5.

-58CZ 304749 B6

Sloučenina 3g (z 2g): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,69 - 7,66 (m, 2H), 7,57 - 7,45 (m, 3H),

6,48 (s, IH), 6,35 (d, IH), 6,06 (dd, 2H), 5,70 (s, IH), 5,07 (d, IH), 4,78 - 4,74 (m, IH), 4,58 (bp, IH), 4,33 (s, IH), 4,26 - 4,18 (m, 3H), 3,61 (s, 3H), 3,47 - 3,45 (m, 2H), 2,92 (bd, 2H), 2,60 - 2,53 (m, IH), 2,28 - 1,93 (m, IH), 2,28 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 1,93 (s, 3H); CNMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,7, 170,5, 166,4, 147,7, 145,9, 143,0, 141,1, 140,5, 134,2,

131,6, 130,8, 129,4, 128,6, 127,0, 120,4, 118,5, 118,0, 113,7, 113,4, 102,0,61,5, 60,3,60,1,59,7,

58,8, 54,7, 53,1, 41,9, 41,5, 32,8, 23,9, 20,4, 15,6, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₈H₃₈N₄O₉S: 726,2. Nalezeno (M+H⁺): 727,2.

^-Ph

ío Sloučenina 3h (z 2h): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,60 (d, IH), 7,54 -7,51 (m, 2H), 7,44 - 7,38 (m, 3H), 6,63 (s, IH), 6,22 (d, IH), 6,05 (dd, 2H), 5,79 (s, IH), 5,73 (d, IH), 5,05 (d, IH), 4,71 (ddd, IH), 4,55 (bp, IH), 4,29 (s, IH), 4,26 (s,lH), 4,21 -4,17 (m, 2H), 3,68 (s, 3H),

3,48 - 3,42 (m, 2H), 2,95 - 2,93 (m, 2H), 2,49 - 2,44 (m, IH), 2,29 - 2,03 (m, IH), 2,29 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H). ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,4, 168,4, 164,5, 148,1,

145,8, 143,1, 142,0, 141,0, 140,4, 134,7, 130,8, 129,8, 129,2, 128,8, 127,9, 120,2, 119,8, 118,9,

118,0, 113,6, 113,3, 102,0, 61,4, 60,4, 60,2, 59,4, 59,0, 54,6, 54,6, 52,5, 41,8, 41,5, 32,6, 23,8, 20,5, 16,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro CWEoN^S: 752,2. Nalezeno (M+Na⁺): 775,8.

Sloučenina 3i (z 2i): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,82 (s, IH), 7,66-7,51 (m, 4H), 6,64 (s, 20 IH), 6,26 (d, IH), 6,05 (dd, 2H), 5,77 (s, IH), 5,74 (d, IH), 5,04 (d, IH), 4,72 (ddd, IH), 4,56 (bp, IH), 4,29 (s, IH), 4,26 (dd, IH), 4,22 - 4,16 (m, 2H) 3,70 (s, 3H), 3,46 - 3,44 (m, 2H), 2,94 (bd, 2H), 2,47 - 2,40 (m, IH), 2,30 - 2,03 (m, IH), 2,30 (s,3H), 2,28 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,3, 163,9, 148,1, 143,1, 141,1, 140,4, 135,6, 131,7,

130,9, 129,5, 129,0, 126,2, 123,6, 121,7, 120,3, 118,0, 113,3, 102,0, 99,2, 61,4, 60,4, 60,2, 59,4,

59,1, 54,7, 54,6, 52,5, 41,8, 41,5, 32,6, 23,8, 20,5, 16,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro

C₄iH₃₉N₄F₃O₉S: 820,2. Nalezeno (M+H+): 821,3.

-59CZ 304749 B6

Sloučenina 3j (z 2j): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,79 - 7,68 (m, 4H), 6,26 (s, 1H), 6,06 (dd, 2H), 5,77 (s, 1H), 4,98 (d, 1H), 4,61 - 4,55 (m, 2H),4,33 - 4,21 (m, 2H), 4,09 (d, 1H), 4,97 (dd, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,47 - 3,31 (m, 2H), 2,93 -2,77 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,33 - 2,14 (m, 2H),

2,23 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,05 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃9H₃₆N₄OioS: 752,2. Nalezeno (M+H+): 753,2.

Sloučenina 6: 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,95 (dd, 1H), 7,66 - 7,45 (m, 3H), 6,13 (s, 1H),

6,07 (dd, 2H), 5,88 (d, 1H), 5,64 (s, 1H), 5,06 (d, 1H), 4,83 - 4,81 (m, 1H), 4,53 (bp, 1H), ío 4,30 - 4,17 (m, 4H), 3,79 (s, 3H), 3,61 (s, 3H), 3,45 - 3,40 (m, 2H), 2,94 - 2,85 (m, 2H),

2,29 - 2,04 (m, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,04 (s, 6H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro

C₄₀H₄₀N₄Oi,S: 784,2. Nalezeno (M+H⁺): 785,1.

Sloučenina 3k (z 2k): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,78 (s, 1H), 6,55 (s,lH), 6,45 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,38 (bd, 1H), 5,29 (bs, 1H), 5,15 (d, 1H), 4,66 (m, 1H), 4,60 (bp, 1H), 4,55 - 4,51 (m, 1H), 4,40 (d, 1H), 4,34 - 4,29 (m, 2H), 4,25 (s, 1H), 4,14 (d, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,43 - 3,39 (m, 2H), 3,09 - 3,05 (m, 1H), 2,96 - 2,90 (m, 3H), 2,70 (d, 1H), 2,34 - 1,94 (m, 4H), 2,34 (s, 3H),

2,30 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,81-1,25 (m, 6H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ

171,5, 170,8, 168,7, 163,8, 148,8, 145,8, 142,8, 141,1, 140,3, 131,2, 128,9, 120,7, 120,3, 120,1,

118,3, 113,5, 102,0, 61,9, 61,2, 60,2, 59,8, 59,4, 56,4, 55,1, 54,7, 51,3, 41,8, 41,4, 41,1, 34,5,

32,6, 27,8, 27,7, 25,0, 24,1, 20,7, 16,1, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C_4iH₄₈N₆Oi₀S₂: 849,0. Nalezeno (M+H): 850,0.

-60CZ 304749 B6 ^Z-CO₂H

Sloučenina 31 (z 21): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,57 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,90 (bp, 1H), 5,63 (bd, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,60 - 4,55 (m, 2H), 4,27 - 4,17 (m, 4H), 3,76 (s, 3H), 3,47 - 3,39 (m, 2H), 2,90 (bd, 2H), 2,68 - 2,61 (m, 2H), 2,58 - 2,02 (m, 4H), 2,32 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H); ^IJC NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 176,4, 170,5, 170,2, 168,6, 148,1, 145,8,

143,1, 141,0, 140,3, 130,7, 129,2, 120,3, 120,0, 119,0, 118,0, 113,5, 113,3, 102,0, 61,3, 60,4,

60,3, 59,2, 58,9, 54,6, 54,4, 51,9, 41,8, 41,4, 32,3, 30,2, 29,6, 29,1, 28,3, 23,7, 20,5, 16,0, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C35H38N4O11S: 722,2. Nalezeno (M+H⁺): 723,2.

ío Sloučenina 3m (z 2m): Ή NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,45 (s, 1H), 6,02 (d, 2H), 5,67 (s, 1H), 4,98 (d, 1H), 4,55 (bp, 1H), 4,27 - 4,22 (m, 2H), 4,14 (d, 1H), 3,94 (dd, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,65 - 3,38 (m, 3H), 2,96 - 2,79 (m, 2H), 2,44 - 2,02 (m, 7H), 2,34 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,88 - 1,82 (m, 1H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₃H₃₈N₄O₈S: 650,2. Nalezeno (M+H⁺): 651,3.

Sloučenina 3n (z 2n): HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,31 - 7,21 (m, 5H), 6,37 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,67 (s, 1H), 5,04 (d, 1H), 4,52 (bp, 1H), 4,24 - 4,22 (m, 3H), 4,11 (dd, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,62 (dd, 2H), 3,42 - 3,41 (m, 2H), 3,19 - 3,18 (m, 1H), 3,03 - 2,83 (m, 2H), 2,34 - 2,30 (m, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,05 - 2,02 (m, 1H), 2,02 (s, 3H), 1,93 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,7, 168,5, 147,7, 145,6, 142,9, 141,0, 140,4, 140,1, 130,6, 129,3, 128,2,

128,2, 126,8, 120,7, 118,2, 118,0, 113,0, 113,3, 101,9, 99,1, 61,5, 60,1, 59,6, 59,5, 59,2, 54,7,

51,3, 41,6, 41,5, 33,4, 23,8, 20,5, 15,3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₈H₄₀N₄O₈S: 712,3. Nalezeno (M+H⁺): 713,3.

-61 CZ 304749 B6

Sloučenina 3p (z 2p): Ή NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,73 (bp, 1H), 6,51 (s, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,03 (d, 1H), 4,64 (dt, 1H), 4,55 (bp, 1H), 4,31 (s, 1H), 4,26 (dd, 1H), 4,21 (d, 1H), 4,17 (dd, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,49 - 3,42 (m, 2H), 2,99 (d, 1H), 2,90 - 2,88 (m, 2H), 2,47 - 1,97 (m, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 0,97 (d, 3H), 0,79 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCb): δ 173,6, 170,4, 168,5, 147,6, 145,9, 143,1, 141,1, 140,5, 130,8, 129,0, 120,8, 120,6,

118,8, 118,0, 113,5, 113,3, 102,0, 61,5, 60,6, 60,2, 60,0, 59,6, 58,6, 54,7, 54,6, 51,9, 52,0, 41,5, 33,0, 31,6, 23,9, 20,4, 19,6, 16,8, 16,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₆H4₃N₅O₉S: 721,3. Nalezeno (M+H³): 722,2.

Sloučenina 3s (z 9 použitím 9 ekv. TMSC1 a Nal. Reakce byla ukončena solným roztokem a N₂CO₃): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,74 (d, 1H), 6,55 (s, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,61 (d, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,68-4,64(m, 1H), 4,57 (bp, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,27 (dd, 1H), 4,20-4,16(m, 2H), 4,04 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,52 - 3,43 (m, 3H), 2,91 - 2,89 (m, 2H), 2,49 (s, 3H), 2,29 - 2,02 (m, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,33 (d, 3H), 1,07 (d, 3H), 0,97 (d, 3H);

^l3CNMR (75 MHz, CDCb): δ 175,2, 170,2, 170,2, 168,5, 148,0, 145,9, 143,3, 141,1, 140,4, 130,4, 130,1, 120,4, 120,2, 118,5, 118,0, 113,5, 102,0, 61,5, 60,4, 60,3, 59,4, 58,8, 57,4, 54,7,

54,6, 51,8, 50,9, 42,0, 41,5, 32,7, 32,2, 23,8, 21,8, 20,5, 19,3, 18,0, 16,3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃9H4gN₆OioS: 792,3. Nalezeno (M+H⁺): 793,3.

Sloučenina 3t (z 2t): ’H NMR (300 MHz, CDCb): δ 6,59 (bd, 1H), 6,53 (s, 1H), 6,28 - 6,22 (m, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,89 (s, 1H), 5,60, 5,58 (2d, 1H), 5,01 (d, 1H), 4,66 - 4,62 (m,lH), 4,57 (bp,

-62CZ 304749 B6

1H), 4,50 - 4,43 (m, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,25 (d, 1H), 4,20 - 4,12 (m, 2H), 4,09 - 4,04 (m, 1H), 3,78, 3,77 (2s, 3H), 2,28 - 1,98 (m, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,16, 2,15 (2s,3H), 2,03, 2,02 (2s,3H), 1,98 (s, 3H), 1,36, 1,32 (2d, 3H), 1,05, 1,03 (2d, 3H), 0,93 (d,3H); ¹³CNMR (75 MHz, CDC1₃): δ

171,9, 170,1, 169,7, 169,6, 168,5, 148,0, 145,9, 143,2, 141,1, 140,4, 130,6, 129,8, 120,3, 120,2,

118,7, 118,0, 113,4, 102,0, 61,4, 60,3, 60,3, 59,4, 58,8, 57,7, 57,6, 54,6, 54,5, 51,9, 48,9, 48,9, 42,0, 41,5, 32,6, 32,3, 32,2, 23,8, 23,1, 20,5, 19,2, 19,1, 19,1, 18,5, 17,7, 17,7, 16,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C_4]H5oN₆OiiS: 834,3. Nalezeno (M+I-f): 835,3.

Sloučenina 3v (z 8; reakce byla ukončena solným roztokem Na₂CO₃): 'HNMR (300 MHz, ío CDC1₃): δ 6,70 (bp, 1H), 6,52 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,03 (d, 1H), 4,58 - 4,53 (m, 2H), 4,30 (s,

1H), 4,25 (dd, 1H), 4,20 - 4,14 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,45 - 3,42 (m, 2H), 3,30 (dd, 1H), 2,90 -2,88 (m, 2H), 2,38 - 2,00 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,25 (d, 3H); '³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 175,0, 170,3, 168,4, 147,6, 145,9, 143,1, 141,1,

140,5, 130,8, 129,0, 120,9, 120,5, 118,7, 118,0, 113,5, 113,3, 102,0, 61,5, 60,2, 60,1, 59,6, 58,8,

54,8, 54,6, 52,1, 50,8, 41,9, 41,5, 32,7, 23,9, 21,6, 20,4, 16,1, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro

C₃4H₃9N₅O9S: 693,2. Nalezeno (M+H⁺): 694,3.

Sloučenina 3w (z 2w; reakce byla ukončena solným roztokem): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,67, 6,55 (2s, 1H), 6,30 (m, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,86, 5,79 (2s, 1H), 5,65, 5,54 (2bd, 1H), 5,03,

5,02 (2d,lH), 4,60 - 4,17 (m, 7H), 3,79, 3,76 (2s, 3H), 3,45 - 3,40 (m, 2H), 2,92 - 2,85 (bd, 2H),

2,46 - 1,95 (m, 2H), 2,46, 2,40 (2s, 3H), 2,17, 2,15 (2s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,98, 1,95 (2s, 3H), 1,45, 1,20 (2d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,5, 170,1, 169,9, 169,1, 168,6, 148,2,

147,7, 145,9, 143,2, 141,1, 140,4, 130,9, 130,4, 130,0, 129,8, 120,8, 120,3, 118,8, 118,0, 113,6, 113,4, 102,0, 61,5, 61,4, 60,5, 60,4, 59,3, 59,1, 58,7, 54,8, 54,6, 51,9, 51,7, 48,5, 42,1,41,9, 41,5,

32,4, 32,3, 23,8, 23,2, 20,5, 19,9, 16,0, 15,8, 9,6. ESI-MS m/z. Vypočteno pro C₃₆H4iN₅Oi₀S:

735,3. Nalezeno (M+H¹): 736,2.

-63 CZ 304749 B6

Sloučenina 3y (z 2y): ‘HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,77 - 7,68 (m, 4H), 7,42 - 7,26 (m, 4H), 6,53 (s, 1H), 6,05 (bd, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,96 - 5,87 (m, 1H), 5,74 (s, 1H), 5,58 (bd, 1H), 5,38 - 5,20 (m, 2H), 5,00 (d, 1H), 4,60 - 4,55 (m, 4H), 4,33 - 4,08 (m, 6H), 3,73 (s, 3H),

3,44 - 3,42 (m, 2H), 3,19-3,13 (m, 1H), 3,05 - 2,83 (m, 5H), 2,38 - 2,02 (m, 2H), 2,38 (s, 3H),

2,24 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C52H53N5O11S2: 987,3. Nalezeno (M+H⁺): 988,1.

Sloučenina 3z byla také získána reakcí 2y: 'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,76 (d, 2H), 7,66 (dd, 2H), 7,42 - 7,30 (m, 4H), 6,49 (s, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,67 (bp, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,59 - 4,54 (m, 2H), 4,30 (bs, 1H), 4,25 - 4,23 (dd, 1H), 4,19 - 4,09 (m, 3H), 3,71 (s, 3H), 3,68 - 3,43 (m, 2H), 3,33 (dd, 1H), 3,14 - 2,85 (m, 5H), 2,46 (dd, 1H), 2,35 - 2,24 (m, 2H), 2,25 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C48H49N5O9S2: 903,3. Nalezeno (M+H⁺):

904,2.

Sloučenina 15 (z 11): ‘HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,56 (s, 1H), 6,03 (dd, 2H), 5,74 (s, 1H), 5,04 (d, 2H), 4,54 (bp, 1H), 4,26 - 4,23 (m, 2H), 4,20 - 4,14 (m, 2H), 4,02 - 3,96 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,42 - 3,39 (m, 2H), 2,93 - 2,90 (m, 2H), 2,31 - 2,03 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃iH₃₃N₃O₉S: 623,2. Nalezeno (M+H⁺):

624,2.

64CZ 304749 B6

Sloučenina 16* (z 12): 'HNMR (300 MHz, 45° CDC1₃): δ 6,49 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,57 (s, 1H), 4,94 (bd, 1H), 4,47 (s, 1H), 2,24 - 4,17 (m, 3H), 4,05 (d, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,57 - 3,55 (m, 2H), 3,40 - 3,37 (m, 1H), 2,98 - 2,90 (m, 1H), 2,73 (d, 1H), 2,51 - 2,47 (bm, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,66 (dd, 1H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro

C₃,H33N3O₉S: 623,2. Nalezeno (M+H⁴): 624,3.

Sloučenina 17a (z 13a): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,50 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,67 (s, 1H),

5,02-4,99 (m, 2H), 4,56 (bp, 1H), 4,27 (s, 1H), 4,25 (dd, 1H), 4,17 (d, 1H), 4,11 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,44 - 3,41 (m, 2H), 2,88 - 2,86 (m, 2H), 2,31-1,97 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), io 2,16 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,97 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 169,7, 168,5, 167,0, 147,2,

145,7, 142,9, 141,1, 140,6, 130,9, 128,7, 121,2, 120,7, 118,1, 118,0, 113,5, 102,0, 71,6, 61,4,

60,2, 60,0, 59,9, 59,0, 54,7, 41,6, 41,3, 31,5, 23,9, 20,5, 20,3, 15,8, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C33H35N3O10S: 665,2. Nalezeno (M+H⁴): 666,1.

Sloučenina 17b (z 13b): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,46 (s, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,68 (s, 1H), 5,09 (bt, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,62 (bp, 1H), 4,31 (s, 1H), 4,24 (dd, 1H), 4,19 - 4,14 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,46 - 3,40 (m, 2H), 2,93 - 2,75 (m, 2H), 2,44 - 2,37 (dd, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,10 - 2,04 (m, 1H), 2,04 (s, 3H); ’³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 168,6, 164,9, 147,0, 145,9, 142,9, 141,2, 140,7, 132,2 (CF3?), 130,6, 129,5, 125,1, (CF3?), 121,6, 120,5 (CF3?), 118,0, 117,3, 113,7, 113,3, 113,3 (CF3?), 102,1, 74,8, 61,4, 60,6, 60,1, 59,9, 58,9, 54,6,

41,7, 41,6, 31,0, 23,9, 20,4, 15,5, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C33H32F3N3OHS: 719,2. Nalezeno (M+H⁴): 720,2.

Sloučenina 17c(z 13c): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,47 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,66 (s, 1H), 5,02 - 4,99 (m, 2H), 4,57 (bp, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,24 (dd, 1H), 4,18 (d, 1H), 4,11 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,45 - 3,41 (m, 2H), 2,87 - 2,85 (m, 2H), 2,31 - 1,99 (m, 4H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H),

-65CZ 304749 B6

2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,67 - 1,55 (m, 2H), 0,97 (t, 3H); ⁿCNMR (75 Hz, CDC1₃): δ 172,3,

168,5, 167,0, 147,2, 145,8, 142,9, 141,1, 140,6, 131,0, 128,8, 121,2, 120,8, 118,1, 118,1, 113,6,

113,1, 102,0, 71,4,61,4, 60,2, 59,9, 59,9, 58,8, 54,8, 54,7, 41,6, 35,9, 31,7, 24,0,20,4, 18,2, 15,8,

13,7, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro CjjHjgNsOmS: 693,2. Nalezeno (M+H⁺): 694,2.

Sloučenina 17e (z 13e): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,47 (s, 1H), 6,03 (dd, 2H), 5,66 (s, 1H), 5,02 - 4,98 (m, 2H), 4,56 (bp, 1H), 4,27 (s, 1H), 4,24 (dd, 1H), 4,17 (d, 1H), 4,10 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,44 - 3,42 (m, 2H), 2,87 - 2,85 (m, 2H), 2,30 - 1,98 (m, 4H), 2,30 (s, 3H), 2,29 (s, 3H),

2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,61-1,57 (m, 2H), 1,31-1,23 (m, 8H), 0,89 (t, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,6, 168,5, 167,0, 147,2, 145,8, 142,9, 141,1, 140,6, 130,0, 128,7, 121,2,

120,8, 118,1, 118,1, 113,6, 113,1, 102,0,71,4,61,4, 60,2, 59,9,58,8, 54,8, 54,7,41,6,33,8,31,7,

31,6, 29,1, 28,9, 24,7, 24,0, 22,6, 20,4, 15,8, 14,1, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C39H47N3O10S: 749,3. Nalezeno (M+H⁺): 750,9.

Sloučenina 17f (z 13f): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,48 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,66 (s, 1H), 5,02 - 4,98 (m, 2H), 4,57 (bp, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,25 (dd, 1H), 4,17 (d, 1H), 4,10 (dd, 1H, 3,79 (s, 3H), 3,44 - 3,40 (m, 2H), 2,87 - 2,85 (m, 2H), 2,37 - 1,98 (m, 4H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H),

2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,62 - 1,55 (m, 2H), 1,35 - 1,26 (m, 24H), 0,88 (t, 3H); ^l3C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 172,6, 168,6, 167,1, 147,2, 145,7, 142,8, 141,0, 140,6, 130,9, 128,7, 121,2, 120,7, 118,1, 117,9, 113,5, 113,1, 102,0,71,4,61,4, 60,3,59,8, 58,8, 54,7, 54,6,41,6, 33,8,31,9,

31,6, 29,7, 29,5, 29,4, 29,3, 29,2, 24,6, 23,9, 22,7, 20,5, 15,9, 14,1, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₄7H6₃N₃O₁₀S: 861,4. Nalezeno (M+H⁺): 862,3.

Sloučenina 17h (z 13h): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,64 (d, 1H), 7,5 -7,52 (m, 2H), 7,43 - 7,40 (m, 3H), 6,51 (s, 1H), 6,28 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,70 (s, 1H), 5,17 (bt, 1H), 5,04

-66CZ 304749 B6 (d, 1H), 4,58 (bp, 1H), 4,30 (s, 1H), 4,26 (d, 1H), 4,20 (d,lH), 4,14 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,45 (d, 1H), 3,42 - 3,39 (m, 1H), 2,92 - 2,80 (m, 2H), 2,42 (dd, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,09 - 2,04 (m, 1H), 2,04 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 168,5, 167,0, 165,6,

147,2, 145,8, 145,6, 142,9, 141,1, 140,6, 134,5, 131,1, 130,4, 128,9, 128,8, 128,1, 121,1, 120,8,

118,1, 118,0, 117,4, 113,6, 113,1, 102,0,71,9,61,5, 60,3, 59,9,58,7, 54,7, 54,7,41,7,41,6,31,8, 24,0, 15,9, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C40H39N3O10S: 753,2. Nalezeno (M+l-E): 754,7.

Sloučenina 171 (z 1311): HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,43 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,70 (s, 1H), 5,00 (d, 1H), 4,94 - 4,90 (m, 1H), 4,59 (bp, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,24 (d, 1H), 4,17 - 4,11 (m, 2H),

3,78 (s, 3H), 3,46 (d, 1H), 3,45 - 3,39 (m, 2H), 3,10 (s, 3H), 2,94 - 2,78 (m, 2H), 2,50 - 2,42 (m,

1H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H) ,2,17 (s, 3H), 2,08 - 2,03 (m, 1H), 2,03 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 168,8, 166,9, 147,8, 146,1, 143,2, 141,4, 140,8, 130,7, 129,4, 121,3, 120,5,

118,2, 118,0, 113,6, 113,3, 102,3, 77,4, 61,4, 61,0, 60,5, 60,1, 59,6, 55,0, 54,8, 41,8, 41,7, 39,6, 33,0, 24,3, 20,6, 16,0, 9,8. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C32H35N3O11S2: 701,2. Nalezeno (M+Na⁺): 724,6.

Sloučenina 18a* (z 14a): ^]H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,49 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,69 (s, 1H), 4,50 - 4,06 (m, 7H), 3,80 (s, 3H), 3,53 (d, 1H), 3,41 - 3,38 (m, 1H), 2,96 - 2,87 (m, 1H), 2,75 (d, 1H), 2,33 - 1,84 (m, 2H), 2,33 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,94 (s, 3H);

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₃H₃₅N₃Oi₀S: 665,2. Nalezeno (M+tÉ): 666,7.

Příklad 8

Metoda H: Do roztoku 1 ekv. 5 v CH₃CN (0,05 M) v atmosféře argonu byl při pokojové teplotě přidán amin a 3 ekv. AcOH. Po 40 minutých bylo přidáno 1,5 ekv. NaCNBH₃ a roztok byl míchán po dobu 40 minut. Potom byla reakční směs zředěna CH₂C1₂, zneutralizována NaHCO₃ a extrahována CH₂C1₂. Organická vrstva byla vysušena Na₂SO₄. Po chromatografíi byla získána čistá sloučenina.

-67CZ 304749 B6

Sloučenina 3o (použitím propylaminu): 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,51 (s, IH), 6,02 (dd, 2H), 5,71 (s, IH), 5,01 (d, IH), 4,53 (bp, IH), 4,24-4,19 (m, 3H), 4,10 (dd, IH), 3,77 (s, 3H), 3,41 - 3,40 (m, 2H), 3,17 - 3,16 (m, IH), 3,00 - 2,82 (m, 2H), 2,46 - 1,97 (m, 4H), 2,29 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,44 - 1,25 (m, 2H), 0,84 (t, 3H); ¹³CNMR (75 MHz, CDCf): δ 172,5, 168,6, 147,6, 145,5, 142,9, 140,8, 140,4, 130,6, 129,1, 120,8, 120,7, 118,2,

113.7, 113,2, 101,9, 61,4, 60,1, 60,0, 59,5, 59,0, 54,7, 54,6, 49,2, 41,5, 32,9, 23,8, 23,3, 20,6,

15.7, 11,7, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃4H4₀N₄O₈S: 664,3. Nalezeno (M+H⁺): 665,3.

Příklad 9

Metoda I: Do roztoku 1 ekv. 3b—i, 3k-1, 3q, 3s, 3u-v, 3x-y nebo 15 v CH₃CN/H₂O 3:2 (0,009 M) bylo přidáno 30 ekv. AgNO₃. Po 24 hodinách byla reakce ukončena přidáním směsi 1:1 nasyceného vodného roztoku NaCl a NaHCO₃, míchána po dobu 10 minut a zředěna a extrahována

CH₂C1₂. Organická vrstva byla vysušena Na₂SO₄. Po chromatografií byly získány čisté sloučeniny 4b—i, 4k—1, 4q, 4s, 4u-v, 4x-y nebo 19.

Sloučenina 4b: t_R = 48,2 min [HPLC, Symmetry 300 Cl8, 5 pm, 250x4,6 mm, λ = 285 nm, průtok = 1,2 ml/min. teplota = 40 °C, grád.: CH₃CNaq.-NH₄OAc (lOmM), 1 % DEA, pH = 3,0, 10 % - 60 % (90')]; *HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,53 (s, IH), 4,69 (bd, IH), 6,02 (dd, 2H), 5,69 (bp, IH), 5,17 (d, IH), 4,81 (s, IH), 4,52-4,46 (m, 3H), 4,16-4,10 (m, 2H), 3,74 (s, 3H),3,51 3,48 (m, IH), 3,25 - 3,20 (m, IH), 2,83 - 2,80 (m, 2H), 2,45 - 2,40 (m, IH), 2,29 - 2,02 (m, IH), 2,29 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,02 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 168,8, 168,6, 156,8, 156,3, 155,7, 147,4, 145,7, 142,9, 141,1, 140,9, 131,2, 129,7, 120,8, 120,7, 117,9, 114,9, 112,7, 101,9, 81,4, 62,0, 60,1, 57,7, 57,6, 56,0, 54,8, 52,9, 42,2, 41,3, 29,7, 23,6, 20,5, 15,6, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₂H₃₄F₃N₃O₁₀S: 709,2. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 692,2.

Sloučenina 4c: 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,56 (s, IH), 6,01 (dd, 2H), 5,70 (s, IH), 5,57 (bd, IH), 5,15 (d, IH), 4,77 (s, IH), 4,61 - 4,57 (m, IH), 4,50 - 4,42 (m, 2H), 4,15 - 4,07 (m, 2H),

3,77 (s, 3H), 3,49 - 3,47 (m, IH), 3,23 - 3,15 (m, IH), 2,85 - 2,82 (m, 2H), 2,32 - 1,98 (m, 4H),

2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 1,65 - 1,58 (m, 2H), 0,96 (t, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 171,8, 170,5, 147,9, 145,6, 143,0, 141,0, 140,8, 131,6, 128,8, 121,0, 120,7,

118,9, 115,3, 101,8, 81,5, 61,6, 60,3, 57,8, 57,6, 57,6, 56,0, 55,0, 51,9, 42,0, 41,3, 38,3, 32,6,

-68CZ 304749 B6

23,7, 20,5, 18,9, 16,1, 13,8, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C34H41N3O10S: 683,2. Nalezeno (M-H₂O+H): 666,3.

vx

Sloučenina 4d: 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,56 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,72 (bs, 1H), 5,55 5 (bd, 1H), 5,15 (d, 1H), 4,78 (s, 1H), 4,64 - 4,60 (m, 1H), 4,48 - 4,42 (m, 2H), 4,17 - 4,12 (m,

1H), 4,09 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,53 - 3,48 (m, 1H), 3,27 - 3,20 (m, 1H), 2,90 - 2,75 (m, 2H), 2,34 - 1,91 (m, 5H), 2,34 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 0,98 (d, 3H), 0,93 (d, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C35H43N3O10S: 697,3. Nalezeno (M-H₂O+H ): 680,0.

Sloučenina 4e: 'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,56 (s, 1H), 6,02 (d, 2H), 5,70 (s, 1H), 5,55 (bd, 1H), 5,15 (d, 1H), 4,77 (s, 1H), 4,61 - 4,55 (m, 1H), 4,50 - 4,42 (m, 2H), 4,17 - 4,14 (m, 1H), 4,08 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,51 - 3,48 (m, 1H), 3,26 - 3,19 (m, 1H), 2,86 - 2,79 (m, 2H),

2,32 - 1,98 (m, 4H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 1,65 - 1,58 (m, 2H), 1,37 - 1,22 (m, 8H), 0,89 (t, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C38H49N3O10S: 739,3. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 722,3.

Sloučenina 4f: 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,56 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,70 (s, 1H), 5,57- 5,53 (bd, 1H), 5,14 (d, 1H), 4,77 (s, 1H), 4,58 (ddd, 1H), 4,47-4,43 (m, 2H), 4,18-4,13 (m, 1H), 4,08 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,50 - 3,46 (m, 1H), 3,25 - 3,19 (m, 1H), 2,28 - 2,82 (m, 1H), 2,32 - 1,95 (m, 4H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 1,40 - 1,20 (m, 26H), 0,88 (t, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₄6H₆5N₃OioS: 851,4. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 834,5.

-69CZ 304749 B6

Sloučenina 4g: Ή NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,70 - 7,67 (m, 2H), 7,56 - 7,45 (m, 3H), 6,49 (s, 1H), 6,42 (d, 1H), 6,03 (dd, 2H), 5,66 (s, 1H), 5,20 (d, 1H), 4,82 (s, 1H), 4,73 (dt, 1H), 5,52 - 4,45 (m, 2H), 4,16 - 4,10 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,52 (bd, 1H), 3,27 - 3,22 (m, 1H), 2,90 - 2,85 (m, 2H), 2,62 - 2,56 (m, 1H), 2,28 - 1,92 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,92 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,4, 168,5, 166,4, 147,6, 145,7, 142,9,

141,1, 140,9, 134,4, 131,5, 129,3, 128,6, 127,0, 125,1, 121,2, 120,5, 115,1, 112,6, 101,8, 81,5,

61,6, 60,1, 57,9, 56,0, 55,0, 53,3, 42,1, 41,3, 32,7, 23,9, 20,4, 15,6, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₇H₃₉N₃O₁₀S: 717,2. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 699,9.

O

Sloučenina 4h: 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,60 (d, 1H), 7,55 - 7,51 (m, 2H), 7,44 - 7,38 (m, 3H), 6,55 (s, 1H), 6,25 (d, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,80 (d, 1H), 5,71 (s, 1H), 5,18 (d, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,69 (ddd, 1H), 4,49 - 4,43 (m, 2H), 4,16 - 4,09 (m, 2H), 3,68 (s, 3H), 3,51 - 3,49 (m, 1H),

3.26 - 3,20 (m, 1H), 2,89 - 2,86 (m, 2H), 2,52 - 2,47 (m, 1H), 2,29 - 2,03 (m, 1H), 2,29 (s, 3H),

2.27 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,4, 168,5, 164,5, 147,9,

145,6, 143,0, 141,8, 141,5, 141,0, 140,8, 134,8, 131,6, 129,7, 129,0, 128,8, 127,9, 121,0, 120,5,

120,1, 118,7, 115,2, 112,7, 101,8, 81,6, 61,7, 60,2, 57,7, 57,6, 56,0, 54,9, 52,7, 42,0, 41,3, 32,5,

23,7, 20,5, 16,3, 9,6. ESI-MS m/z Vypočteno pro C₃₉H_4IN₃Oi₀s: 743,2. Nalezeno (M-H2O+IT):

726,3.

Sloučenina 4i: ‘HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,83 (s, 1H), 7,65 - 7,51 (m, 4H), 6,65 (s, 1H), 6,29 (d, 1H), 6,03 (dd, 2H), 5,81 (d, 1H), 5,71 (s, 1H), 5,18 (d, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,71 - 4,67 (m, 1H), 4,49 - 4,47 (m, 2H), 4,16 - 4,09 (m, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,51 - 3,49 (m, 1H), 3,23 - 3,20 (m,

-70CZ 304749 B6

ΙΗ), 2,88 - 2,86 (m, 2H), 2,47 - 2,33 (m, 1H), 2,30 - 2,02 (m, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C4oH₄oN₃F₃0₁₀S: 811,2. Nalezeno (M-H₂O+EE): 794,2.

O OH

Sloučenina 4k: Ή NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 8,32 (bp, 1H), 6,56 (s, 1H), 6,54 (s, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,48 (bd, 1H), 5,14 (d, 1H), 4,75 (s, 1H), 4,68 - 4,63 (m, 1H), 4,55 - 4,45 (m, 3H), 4,33 (dd, 1H), 4,22 (bp, 1H), 4,05 (dd, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,53 - 3,45 (m, 1H), 3,22 - 3,13 (m, 1H), 3,10 - 3,02 (m, 1H), 2,94 - 2,84 (m, 3H), 2,66 (d, 1H), 2,34 - 1,91 (m, 4H), 2,34 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,10 (bs, 3H), 2,01 (bs, 3H), 1,75 - 1,22 (m, 6H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,0,

170,4, 163,7, 148,9, 145,5, 142,7, 141,1, 140,5, 131,8, 128,8, 122,2, 120,3, 112,6, 101,7, 82,0,

62,1, 60,1, 59,7, 57,2, 56,4, 55,7, 55,3, 51,2, 41,9, 41,2, 41,1, 34,3, 32,9, 27,8, 27,5, 24,8, 23,9,

20,7, 16,2, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^ELwNsOnS^ 840,0. Nalezeno (M-H₂O⁺): 822,3.

--''''COzH

V^H OMe

AcO\

-l-Me

Sloučenina 41: 'lINMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,58 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,82 - 5,72 (bm, 2H), 15 5,15 (d, lH),4,79(bs, 1H), 4,57 - 4,45 (m, 3H), 4,22-4,15 (bp, 1H), 4,11 (dd, 1H), 3,78 (s, 3H),

3,59 - 3,49 (bp, 1H), 3,30 - 3,23 (bp, 1H), 2,91 - 2,83 (m, 2H), 2,68 - 2,45 (m, 4H), 2,35 - 2,02 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,01 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₄H₃₉N₃Oi₃S: 713,2. Nalezeno (Μ-ΙΙ,Ο+Η ): 696,2.

Sloučenina 4q: ^]HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,55 (s, 1H), 6,07 (d, 1H), 6,02 (d, 2H), 5,75 (s, 1H), 5,64 (d, 1H), 5,15 (d, 1H). 4,78 (s, 1H), 4,67 - 4,62 (m, 1H), 4,50 - 4,45 (m, 2H), 4,14 -71 CZ 304749 B6

4,09 (m, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,51- 3,47 (m, 1H), 3,25 - 3,20 (m, 1H), 2,85 - 2,82 (m, 2H), 2,50 (s, 3H), 2,29 - 1,98 (m, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,06 (d, 3H), 0,97 (d, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C37H46N4O11S: 754,3. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 737,3.

Sloučenina 4s ESI-MS m/z: Vypočteno pro C38H49N5O11S: 783,3. Nalezeno (M⁺): 766,3.

Sloučenina 4u ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₄7H₅5N₅Oi₂S: 914,0. Nalezeno (M-ILO+HJ: 897,0.

Sloučenina 4v 'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,70 (bp, IH), 6,54 (s, IH), 6,02 (d, 2H), 5,16 (d, IH), 4,79 (s, IH), 4,55 - 4,48 (m, 3H), 4,15 - 4,07 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,52 -3,49 (m, IH),

3,32 - 3,21 (m, 2H), 2,85 - 2,80 (m, 2H), 2,31 - 2,02 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,26 (d, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C33H40N4O10S: 684,2. Nalezeno (M-HzO+Ff): 667,2.

-72CZ 304749 B6

Sloučenina 4x ESI-MS m/z: Vypočteno pro C42H46N4O11S: 814,9. Nalezeno (M-H₂O+ET):

797,9.

Sloučenina 4y ‘H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,77 - 7,67 (m, 4H), 7,42 - 7,28 (m, 4H), 6,55 (s, 1H), 6,18 - 6,06 (bp, 1H), 6,02 (dd, 2H), 6,03 - 5,86 (m, 1H), 5,70 (bp, 1H), 5,58 (bd, 1H), 5,35 - 5,20 (m, 2H), 5,15 (d, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,60 - 4,55 (m, 3H), 4,46 (d, 1H), 4,20 - 4,11 (m, 4H), 3,73 (s, 3H), 3,49 - 3,47 (m, 1H), 3,21 - 3,15 (m, 2H), 3,06 - 2,70 (m, 6H), 2,38 - 2,11 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,24 (s,3H), 2,11 (s, 3H), 2,02 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 169,8, 168,9,

147.8, 145,8, 145,7, 143,0, 141,0, 140,8, 132,5, 131,4, 127,5, 127,1, 127,0, 125,0, 120,6, 119,8,

117.9, 115,1, 101,8, 81,4, 65,8, 61,6, 60,3, 57,8, 55,9, 55,0, 54,0, 52,4, 47,0, 42,1, 41,3, 37,2,

36,5, 33,3, 23,6, 20,4, 16,1, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C51H54N4O12S: 978,3. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 961,3.

Sloučenina 19: ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,58 (s, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,71 (s, 1H), 5,16 (d, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,47 - 4,43 (m, 2H), 4,15 - 4,11 (m, 1H), 4,08 (dd, 1H), 4,01 - 3,96 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,49 - 3,45 (m, 1H), 3,21 - 3,17 (m, 1H), 2,88 - 2,83 (m, 2H), 2,35 - 2,02 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,02 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C30H34N2O10S:

614,2. Nalezeno (M-H₂O+ET): 597,1.

Příklad 10

Metoda J: Do roztoku 1 ekv. 3a, 3n-p, 3r, 3t, 17cc, 17e-f, 17h, 1711 nebo 18a* v THF/H₂O 4:1 (0,03 M) bylo přidáno 5 ekv. CuBr. Po 24 hodinách byla reakční směs zředěna CH₂CI₂, promyta nasyceným vodným roztokem NaHCO₃ a NaCl a organická vrstva byla vysušena Na₂SO4. Po

-73CZ 304749 B6 chromatografii byly získány čisté sloučeniny 4a, 4n-p, 4r, 4t, 21a, 21c, 21e-f, 21h, 2111 nebo 22a*.

Sloučenina 4a: tR = 24,6 min [HPLC, Symmetry 300 Cl8, 5 μπι, 250x4,6 mm, λ = 285 nm, průtok = 1,2 ml/min. teplota = 40 °C, grád.: CH₃Naq.-NH4OAc (lOmM), 1 % DEA, pH = 3,0, 10 % - 60 % (90')]; ‘H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,57 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,79 (bs, 1H), 5,60 (bd, lH),5,15(d, lH),4,77(s, 1H), 4,56 (ddd, 1H), 4,46-4,43 (m, 2H), 4,15 (dd, 1H), 4,09 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,49 - 3,47 (m, 1H), 3,23 - 3,10 (m, 1H), 2,91 -2,76 (m, 2H), 2,31-2,11 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 1,89 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ

170,4, 168,8, 168,5, 148,0, 145,6, 143,0, 141,0, 140,7, 131,5, 128,8, 120,9, 120,6, 118,9, 115,2, 112,7, 101,8, 81,5, 61,6, 60,2, 57,7, 57,4, 55,9, 55,0, 52,1, 52,0, 41,3, 32,4, 23,6, 22,9, 20,5, 16,1, 9,5. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₂H₃₇N₃O₁₀S: 655,2. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 638,1.

Sloučenina 4n: ^]H NMR (300 MHz, CDC13): δ 7,29 - 7,21 (m, 5H), 6,39 (s, 1H), 5,99 (dd, 2H), 5,66 (s, 1H), 5,16 (d, 1H), 4,74 (s, 1H), 4,52 (d, 1H), 4,44 (bp, 1H), 4,12 (d, 1H), 4,03 (dd, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,64 (dd, 2H), 3,48 - 3,47 (m, 1H), 3,21 - 3,17 (m, 2H), 2,95 (d, 1H), 2,84-2,75 (m, 1H), 2,35 - 2,30 (m, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,07 - 2,01 (m, 1H), 2,01 (s, 3H), 1,93 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC13): δ 172,6, 168,6, 147,6, 145,4, 142,8, 140,9, 140,8, 140,2,

131,3, 130,8, 129,1, 128,8, 128,2, 126,8, 121,4, 120,9, 117,9, 115,6, 112,4, 101,7, 81,8, 60,9, 60,1, 59,5, 57,8, 57,6, 56,1, 54,9, 51,4, 41,8, 41,3, 33,3, 23,6, 20,6, 15,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₇H4iN₃O9S: 703,3. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 686,7.

Sloučenina 4o: 'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,53 (s, 1H), 6,00 (dd, 2H), 5,69 (bp, 1H), 5,14 (d, 1H), 4,74 (s, 1H), 4,44 - 4,49 (m, 2H), 4,13 (bd, 1H), 4,04 (dd, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,49 - 3,47 (m,

1H), 3,22 - 3,16 (m, 2H), 2,96 - 2,75 (m, 2H), 2,51 - 2,02 (m, 4H), 2,29 (s, 3H), 2,28 (s, 3H),

2,15 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,42 - 1,25 (m, 2H), 0,86 (t, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₃H4iN₃O9S: 655,3. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 638,3.

-74CZ 304749 B6

Sloučenina 4p: 'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,67 (bp, 1H), 6,52 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,67 (bp, 1H), 5,16 (d, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,63 - 4,60 (m, 1H), 4,49 (d, 1H), 4,45 (bp, 1H), 4,16 (d, 1H), 4,08 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,52 - 3,9 (m, 1H), 3,25 - 3,20 (m, 1H), 3,00 (d, 1H),

2,85 - 2,82 (m, 2H), 2,32 - 2,02 (m, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,02 (s, 3H),

0,99 (d, 3H), 0,81 (d, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^Hh^OioS: 712,3. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 695,2.

Sloučenina 4r: ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,59 (d, 1H), 7,49- 7,46 (m, 2H), 7,36 - 7,34 (m, 3H), 6,58 (s, 1H), 6,42 (d, 1H), 6,34 (d, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,79 (s, 1H), 5,69 (d, 1H), 5,15 (d, 1H), 4,78 (s, 1H), 4,70 - 4,65 (m, 1H), 4,50 - 4,47 (m, 2H), 4,28 (dd, 1H), 4,15 (d, 1H), 4,10 (dd, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,49 (d, 1H), 3,25 - 3,22 (m, 1H), 2,85 - 2,83 (m, 2H), 2,57 (s, 3H),

2,28 - 2,14 (m, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 1,10 (d, 3H), 1,01 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,1, 170,0, 168,6, 165,2, 148,0, 145,7, 143,2, 141,12, 140,84, 134,8,

131,2, 129,9, 129,6, 128,8, 127,8, 120,8, 120,7, 120,6, 118,4, 115,3, 112,7, 101,8, 81,5, 61,7,

60,4, 57,8, 57,7, 57,5, 56,0, 55,0, 52,0, 42,2, 41,3, 32,7, 32,6, 23,7, 20,5, 19,2, 18,0, 16,4, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C44H50N4O11S: 842,9. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 825,3.

Sloučenina 4t: ^]H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,54 (s, 1H), 6,49 (d, 1H), 6,21 -6,16 (m, 1H), 6,07 - 5,96 (m, 2H), 5,78 (s, 1H), 5,63 (bd, 1H), 5,14 (d,lH), 4,81, 4,78 (2s, 1H), 4,64 - 4,60 (m, 1H), 4,53 - 4,08 (m, 6H), 3,78, 3,7s (2s, 3H), 3,65 - 3,45 (m, 1H), 3,33 - 3,22 (m, 1H), 2,90 -2,66 (m, 2H), 2,48 (s, 3H), 2,28 - 1,99 (m, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,16, 2,13 (2s, 3H), 2,01 (s,

-75CZ 304749 B6

3Η), 1,99 (s, 3H), 1,37, 1,34 (2d, 3H), 1,08 - 1,03 (m, 3H), 0,96 - 0,93 (m, 3H); ^l3C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 171,8, 170,1, 169,6, 169,5, 169,5, 168,7, 147,9, 145,7, 143,1, 141,0, 140,8,

131.3, 129,6, 120,7, 120,4, 118,5, 115,2, 112,6, 101,8, 81,4, 61,6, 60,4, 60,3, 57,7, 57,6, 57,5,

55,9, 54,9, 51,9, 48,9, 48,9, 42,2, 41,3, 32,5, 32,3, 23,6, 23,2, 20,5, 19,2, 19,1, 18,6, 17,7, 17,6,

16.3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C4oH₅iN₅Oi₂S: 825,3. Nalezeno (M-H₂O+H⁺)·' 808,3.

Sloučenina 21a: 'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,52 (s, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,64 (s, 1H), 5,13 (d, 1H), 5,00 (t, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,48 - 4,45 (m, 2H), 4,15 - 4,12 (m, 1H), 4,02 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,50 - 3,47 (m, 1H), 3,22 - 3,17 (m, 1H), 2,82 - 2,79 (m, 2H), 2,30 - 1,98 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,98 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₂H₃₆N₂0nS: 656,2. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 639,2.

Sloučenina 21c: ^]H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,45 (s, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,63 (s, 1H), 5,13 (d, 1H), 5,03 (t, 1H), 4,77 (s, 1H), 4,50 - 4,48 (m, 2H), 4,14 (bd, 1H), 4,02 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,51 -3,49 (bd, 1H), 3,21 - 3,12 (m, 1H), 2,85-2,75 (m, 2H), 2,31 -2,02 (m, 4H), 2,31 (s, 3H),

2,29 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,66 - 1,56 (m, 2H), 0,97 (t, 3H); ¹³C NMR (75 MHz,

CDC1₃): δ 172,4, 168,6, 166,9, 147,1, 145,6, 142,8, 141,1, 131,8, 128,6, 125,1, 121,4, 115,4, 101,8, 81,5, 71,6, 61,2, 60,2, 58,2, 57,9, 56,1, 55,0, 41,8, 41,4, 36,0, 31,6, 23,9, 20,4, 18,3, 15,8,

13,7, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃4H4oN₂OhS: 684,2. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 667,2.

Sloučenina 21e: ’HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,49 (s, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,63 (s, 1H), 5,13 (d, 1H), 5,02 (t, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,47 - 4,46 (m, 2H), 4,13 (dd, 1H), 4,02 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,50-3,49 (m, 1H), 3,21 -3,19 (m, 1H), 2,81 -2,78 (m, 2H), 2,30-2,02 (m, 4H), 2,30 (s, 3H),

2,29 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,62 - 1,54 (m, 2H), 1,32 - 1,25 (m, 8H), 0,90 (t, 3H);

-76CZ 304749 B6

CNMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,7, 168,6, 166,9, 147,1, 145,5, 142,8, 141,1, 141,0, 131,7,

128,6, 121,4, 117,9, 115,4, 112,3, 101,8, 81,5, 71,5, 61,2, 60,2, 58,1, 57,9, 56,1, 55,0, 41,8, 41,4,

33,9, 31,7, 31,6, 29,1, 28,9, 24,7, 23,9, 22,6, 20,4, 15,8, 14,1, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro Ca^gNzOnS: 740,3. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 723,2.

Sloučenina 21f: *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,50 (s, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,63 (s, 1H), 5,13 (d, 1H), 5,02 (t, 1H), 4,77 (bs, 1H), 4,50 - 4,48 (m, 2H), 4,16 - 4,12 (m, 1H), 4,02 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,51 - 3,49 (m, 1H), 3,22 - 3,19 (m, 1H), 2,82 - 2,77 (m, 2H), 2,37 - 2,02 (m, 7H), 2,30 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,65 - 1,59 (m, 7H), 1,40 - 1,16 (m, 24H), 0,88 (t, 3H);

io ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^H^^O^S: 852,4. Nalezeno (M-H2O+H⁴): 835,4.

Sloučenina 21 h: 'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,64 (d, 1H), 7,55 - 7,52 (m, 2H), 7,42 - 7,40 (m, 3H), 6,54 (s, 1H), 6,30 (d, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,65 (s, 1H), 5,19 - 5,16 (m, 2H), 4,79 (s, 1H), 4,50 - 4,49 (m, 2H), 4,15 (d, 1H), 4,05 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,51 (d, 1H), 3,22 - 3,19 (m, 1H), 2,89 - 2,76 (m, 2H), 2,45 - 2,41 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,13 - 2,03 (m, 1H), 2,03 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 168,6, 166,9, 165,7, 147,1, 145,5, 145,4, 142,8,

141,1, 141,0, 134,6, 131,9, 130,3, 128,9, 128,1, 121,3, 117,6, 115,4, 112,3, 101,8, 81,5, 72,0, 61,2, 60,3, 58,2, 57,9, 56,1, 55,0, 41,9, 41,4, 31,8, 23,9, 20,3, 15,9, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C39H40N2O11S: 744,2. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 727,2.

Sloučenina 2111: 'Η NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,45 (s, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,68 (s, 1H), 5,12 (d, 1H), 4,92 (t, 1H), 4,78 (s, 1H), 4,53-4,42 (m, 2H), 4,15-4,03 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,51-3,48 (m, 1H), 3,24 - 3,20 (m, 1H), 3,10 (s, 3H), 2,83 - 2,78 (m, 2H), 2,50 - 2,42 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,08 - 2,03 (m, 1H), 2,03 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro

C31H36N2O12S2: 692,2. Nalezeno (M-H₂O+H): 675,2.

-77CZ 304749 B6

Sloučenina 22a*: 'H NMR (300 MHz, CDCI₃): δ 6,50 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,67 (s, 1H), 4,73 (bp, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,48 - 4,38 (m, 4H), 4,12 - 4,10 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,61 - 3,59 (m, 1H), 3,22 - 3,18 (m, 1H), 2,89 - 2,80 (m, 1H), 2,70 (d, 1H), 2,33 - 1,86 (m, 2H), 2,33 (s, 3H),

2,30 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 1,94 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^H^OnS:

656,2. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 639,2.

Příklad 11

Metoda K: Roztok 7 v CH₂C1₂/H₂O/TFA 2:1:4 (0,013 M) byl míchán po dobu 15 minut při pokojové teplotě. Potom byla reakční směs zředěna CH₂C1₂, zneutralizována nasyceným vodným roztokem NaHCO₃ a Na₂CO₃ a extrahována CH₂C1₂. Organická vrstva byla vysušena Na₂SO₄. Po chromatografii (CH₂Cl₂/MeOH) byla získána čistá sloučenina 2p.

Sloučenina 2p: 'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,93 (bp, 1H), 6,72 (s, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,15 (dd, 2H), 5,03 (d, 1H), 4,66 - 4,63 (m, 1H), 4,54 (bp, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,32 (s, 1H), 4,23 (d, 1H), 4,17 (dd, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,49 - 3,42 (m, 2H), 3,04 (d, 1H), 2,93 - 2,90 (m, 2H), 2,28 - 2,03 (m, 3H), 2,28 (s, 6H), 2,14 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 0,97 (d, 3H), 0,77 (d, 3H);

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^ELnNsOioS: 765,3. Nalezeno (M+H⁺): 766,3.

Příklad 12

Metoda L: Do roztoku 10 v CH₂CN (0,03 M) byly přidány 2 ekv. NaCNBH₃ a 4 ekv. AcOH. Po 4 hodinách byla směs zředěna CH₂C1₂, zneutralizována nasyceným vodným roztokem NaHCO₃ a extrahována CH₂C1₂. Organická vrstva byla vysušena Na₂SO₄. Po chromatografii (hexan/EtOAc

-78CZ 304749 B6

Sloučenina 11: 'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,77 (s, IH), 6,03 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,04 (d, IH), 4,53 (bp, IH), 4,34 (d, IH), 4,27 (s, IH), 4,20 (d, IH), 4,19 (dd, IH), 4,01 (bdd, IH), 3,77 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,55 - 3,39 (m, 2H), 2,94 - 2,91 (m, 2H), 2,30 - 1,98 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); ^I3C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,6, 168,6, 149,6, 148,3,

145,7, 141,0, 140,4, 131,6, 130,3, 124,8, 124,7, 120,5, 118,0, 113,3, 102,0, 99,1, 69,8, 61,4, 60,4, 59,6, 59,1, 59,0, 57,4, 54,9, 54,6, 41,4, 41,4, 35,0, 23,8, 20,3, 15,7, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₃H₃₇N₃OioS: 667,3. Nalezeno (M+H+): 668,2.

Sloučenina 12*: 'H NMR (300 MHz, 45 °C, CDC1₃): δ 6,70 (s, IH), 6,04 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), ío 4,88 (bd, IH), 4,49 (bs, IH), 4,33 (bd, IH), 4,27 - 4,24 (m, IH), 4,24 (s, IH), 4,08 (d, IH), 3,79 (s, 3H), 3,60 - 3,55 (m, 2H), 3,56 (s, 3H), 3,42 - 3,39 (m, IH), 3,00 - 2,91 (m, IH), 2,76 (d, IH), 2,50 - 2,42 (m, IH), 2,32 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,66 (dd, IH); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₃H₃₇N₃Oi₀S: 667,3. Nalezeno (M+FT): 668,2.

Příklad 13

Metoda M: Do roztoku 1 ekv. 11 pro 13a-b nebo 12* pro 14* v CH2CI2 (0,1 M) v atmosféře argonu bylo přidáno 30 ekv. pyridinu. Potom byla reakční směs ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přidáno 20 ekv. anhydridu a 5 ekv. DMAP. O 5 minut později byla reakční směs zahřáta na pokojovou teplotu a míchána po dobu 24 hodin. Potom byla reakce ukončena přidáním NaCl, extrahována CH₂C1₂, a organické vrstvy byly vysušeny Na₂SO₄. Po chromatografii byla získána čistá sloučenina.

Sloučenina 13a (použitím Ac₂O): ^]H NMR (300 MHz, CDC13): δ 6,70 (s, IH), 6,04 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,02 - 4,99 (m, 2H), 4,56 (bp, IH), 4,34 (dd, IH), 4,27 (s, IH), 4,18 (d, IH), 4,14 (dd, IH), 3,78 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,46 - 3,39 (m, 2H), 2,90 - 2,87 (m, 2H), 2,30 - 1,96 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,99 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC13): δ 169,7, 167,1, 148,9, 148,2, 145,9, 141,2, 140,6, 130,7, 130,7, 125,3, 124,6, 120,8,

118,1, 113,5, 113,1, 102,0, 99,2, 71,6, 61,4, 60,0, 59,9, 59,2, 58,7, 57,4, 55,0, 54,6, 41,5, 31,6,

23,9, 20,3, 20,2, 15,8, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₅H₃9N₃0nS: 709,6. Nalezeno (M+H⁺):

710,2.

-79CZ 304749 B6

Sloučenina 13b (použitím (F₃COO)₂O): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,67 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,10 (bt, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,62 (bp, 1H), 4,34 - 4,32 (m, 2H), 4,19-4,15 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,47 (d, 1H), 3,44 - 3,41 (m, 1H), 2,94 - 2,77 (m, 2H), 2,47 - 2,37 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,07 - 2,04 (m, 1H), 2,04 (s, 3H); ¹³CNMR(75 MHz, CDC1₃): δ 168,7, 164,9, 148,7, 148,2, 145,9, 141,2, 140,7, 131,6, 130,3,

125.7, 124,0, 120,6, 118,0, 113,3, 102,1,99,2, 74,7,61,4, 60,5,59,1,59,2,58,7,57,4, 54,9, 54,6,

41.7, 41,5, 31,1, 23,9, 20,2, 15,5, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₅H₃₆F₃N₃OnS: 763,2. Nalezeno (M+EÉ): 764,2.

Sloučenina 14a* (použitím Ac₂O): 'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,71 (s, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,16 (dd, 2H), 4,65 - 4,10 (m, 7H), 3,79 (s, 3H), 3,57 - 3,54 (m, 1H), 3,56 (s, 3H), 3,43 - 3,40 (m, 1H), 2,97 - 2,88 (m, 1H), 2,78 (d, 1H), 2,33 - 1,82 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,94 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₅H₃9N₃0nS: 709,6. Nalezeno (M+EÉ): 710,7.

Sloučeniny 23 a 24:

Sloučenina 23: *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,52 (s, 1H), 5,95 (dd, 2H), 4,97 (d, 1H), 4,42 (d, 1H), 4,28 (bs, 2H),4,15(d, 1H), 4,05 (dd, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,51 - 3,50 (m, 1H), 3,40 - 3,39 (m, 1H), 3,27 (t, 1H), 2,91 - 2,89 (m, 2H), 2,38 - 2,36 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,14 (s, 3H); ¹³CNMR(75 MHz, CDC1₃): δ 173,9, 148,1, 146,2, 142,8, 136,2, 130,4, 129,5, 120,8, 118,2,

112.7, 112,7, 107,7, 101,3, 61,1, 60,9, 60,4, 59,4, 58,8, 54,6, 54,6, 53,5, 43,3, 41,4, 33,0, 23,9,

15.7, 8,7; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₂9H₃₂N₄O₇S: 580,2. Nalezeno (M+H⁺): 581,3.

-80CZ 304749 B6

Sloučenina 24: ^]H NMR (300 MHz, CDC13): δ 6,40 (s, 1H), 6,02 (d, 2H), 5,00 (d, 1H), 4,46 (bp, 1H), 4,24 (s, 1H), 4,21 - 4,14 (m, 3H), 3,39 - 3,37 (m, 2H), 3,29 (t, 1H), 2,93 - 2,78 (m, 2H), 2,31 - 2,03 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,25 (bs, 3H), 2,14 (s, 6H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC13): δ

173,6, 168,9, 145,6, 145,3, 140,9, 140,2, 139,3, 126,1, 123,9, 120,2, 119,7, 118,1, 117,7, 113,6, 113,3, 101,9, 61,3, 60,3, 59,1, 59,1, 54,7, 54,6, 53,3, 41,9, 41,4, 33,0, 23,5, 20,5, 16,8, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₀H₃₂N₄O₈S: 608,2. Nalezeno (M+lT): 609,3.

io Příklad 14

_(BoQgO

EtOH. 7h,23«C

Μθ

Do roztoku Int-2 (21,53 g, 39,17 mmol) v ethanolu (200 ml) byl přidán terc-butoxykarbonyl 15 anhydrid (7,7 g, 35,25 mmol) a směs byla míchána po dobu 7 hodin při teplotě 23 °C. Potom byla reakční směs zkoncentrována ve vakuu a zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografií (SiO₂, hexan:ethylacetát 6:4) za vzniku Int—14 (20,6 g, 81 %) jako žluté pevné látky.

Rf: 0,52 (ethylacetát: CHC1₃ 5:2).

'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,49 (s, 1H), 6,32 (bs, 1H), 5,26 (bs, 1H), 4,60 (bs, 1H), 4,14 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,05 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,81 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 3,7 (s, 3H), 3,34 (br d, J = 7,2 Hz, 1H), 3,18 - 3,00 (m, 5H), 2,44 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,82 (s, 3H), 1,80 - 1,65 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 0,86 (d, J = 5,7 Hz, 3H)

13,

C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 185,5, 180,8, 127,7, 155,9, 154,5, 147,3, 143,3, 141,5, 135,3, 130,4, 129,2, 127,5, 120,2, 117,4, 116,9, 80,2, 60,7, 60,3, 58,5, 55,9, 55,8, 54,9, 54,4, 55,0, 41,6, 40,3, 28,0, 25,3, 24,0, 18,1, 15,6, 8,5.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₄H₄₃N₅O₈: 649,7. Nalezeno (M+H)⁺: 650,3.

-81 CZ 304749 B6

Příklad 15

Sloučenina Int—15

K míchanému roztoku Int-14 (20,6 g, 31,75 mmol) v CH₃CN (159 ml) byl přidán při teplotě 0 °C diisopropylethylamin (82,96 g, 476,2 mmol), methoxymethylen bromid (25,9 g, 317,5 mmol) a dimethylaminopyridin (155 mg, 1,27 mmol). Směs byla míchána při teplotě 23 °C po dobu 24 hodin. Reakce byla ukončena při teplotě 0 °C vodným roztokem 0,1 N HC1 (750 ml) (pH = 5) a směs byla extrahována CH2CI2 (2 x 400 ml). Organická fáze byla vysušena (síranem sodným) a koncentrována ve vakuu. Zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografií (SiO₂, gradient hexan: ethylacetát 4:1 do hexan:ethylacetát 3:2) za vzniku Int—15 (17,6 g, 83 %) jako žluté pevné látky.

Rf: 0,38 (hexan:ethylacetát 3:7).

'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,73 (s, 1H), 5,35 (bs, 1H), 5,13 (s, 2H), 4,50 (bs, 1H), 4,25 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,03 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,84 (bs, 1H), 3,82 - 3,65 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,39 - 3,37 (m, 1H), 3,20 - 3,00 (m, 5H), 2,46 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,85 (s, 3H), 1,73 - 1,63 (m, 1H), 1,29 (s, 9H), 0,93 (d, J = 5,1 Hz, 3H) ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 185,4, 180,9, 172,4, 155,9, 154,5, 149,0, 148,4, 141,6, 135,1, 131,0, 129,9, 127,6, 124,4, 123,7, 117,3, 99,1, 79,3, 60,7, 59,7, 58,4, 57,5, 56,2, 55,9, 55,0, 54,2, 50,0,41,5,39,9, 28,0, 25,2, 24,0, 18,1, 15,6, 8,5.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^H^NsC)?: 693,8. Nalezeno (M+H)⁺: 694,3.

-82CZ 304749 B6

Příklad 16

Do nádoby obsahující Int—15 (8 g, 1,5 mmol) v methanolu (1,6 1) byl přidán vodný roztok 1 M hydroxidu sodného (3,2 1) při teplotě 0 °C. Reakční směs byla míchána po dobu 2 hodin při této teplotě a potom byla reakce ukončena upravením pH na 5 přidáním 6 M HC1. Směs byla extrahována ethylacetátem (3 x 1 1) a spojené organické vrstvy byly vysušeny síranem sodným a zkoncentrovány ve vakuu. Zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografií (SiO₂, gradient CHCfi do ío CHCl₃:ethylacetát 2:1) za vzniku Int— 16 (5,3 mg, 68 %).

Rf: 0,48 (CH₃CN:H₂O 7:3, RP-C18) *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,73 (s, 1H), 5,43 (bs, 1H), 5,16 (s, 2H), 4,54 (bs, 1H), 4,26 (d, 15 J = 1,8 Hz, 1H), 4,04 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 3,84 (bs, 1H), 3,80 - 3,64 (m, 1H), 3,58 (s, 3H),

3,41 - 3,39 (m, 1H), 3,22 - 3,06 (m, 5H), 2,49 (d, J = 18,6 Hz, 1H), 2,35 (s, 3H), 2,30 - 2,25 (m, 1H), 2,24 (s, 3H), 1,87 (s, 3H), 1,45 - 1,33 (m, 1H), 1,19 (s, 9H), 1,00 (br d, J = 6,6 Hz, 3H)

13,

C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 184,9, 180,9, 172,6, 154,7, 151,3, 149,1, 148,6, 144,7, 132,9, 20 131,3, 129,8, 124,5, 123,7, 117,3, 116,8, 99,1, 79,4, 59,8, 58,6, 57,7, 56,2, 55,6, 54,9, 54,5, 50,1,

41,6, 40,1, 28,0, 25,3, 24,4, 18,1, 15,7, 8,0.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^EfisNíOg: 679,7. Nalezeno (M+H)⁺: 680,3.

Příklad 17

Sloučenina Int-17

Me

1) HyPďC 10%/DMF, 23°C

..... »

2) CICHaBr/CszCOs/KXFC

taV- 17

-83 CZ 304749 B6

Do odplyněného roztoku sloučeniny Int—16 (1,8 g, 2,64 mmol) v DMF (221 ml) bylo přidáno 10% Pd/C (360 mg) a směs byla míchána v atmosféře vodíku (atmosférický tlak) po dobu 45 minut. Reakční směs byla zfiltrována přes celit v atmosféře argonu do nádoby obsahující bezvodý Cs₂CO₃ (2,58 g, 7,92 mmol). Potom byl přidán bromchlormethan (3,40ml, 52,8 mmol) a nádoba byla uzavřena a reakční směs byla míchána při teplotě 100 °C po dobu 2 hodin. Reakce byla ochlazena, zfiltrována přes celit a promyta CH₂C1₂. Organická vrstva byla zkoncentrována a vysušena (síranem sodným) za vzniku Int—17 jako hnědého oleje, který byl použit v dalším kroku bez dalšího čištění.

Rf: 0,36 (hexamethylacetát 1:5, SiO₂).

'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,68 (s, 1H), 6,05 (bs, 1H), 5,90 (s, 1H), 5,79 (s, 1H), 5,40 (bs, 1H), 5,31 - 5,24 (m, 2H), 4,67 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 4,19 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,07 (bs, 1H), 4,01 (bs, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,67 (s, 3H), 3,64 - 2,96 (m, 5H), 2,65 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 2,01 - 1,95 (m, 1H), 1,28 (s, 9H), 0,87 (d, J = 6,3 Hz, 3H) ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,1, 162,6, 154,9, 149,1, 145,7, 135,9, 130,8, 130,8, 130,7, 125,1, 123,1, 117,8, 100,8, 99,8, 76,6, 59,8, 59,2, 57,7, 57,0, 56,7, 55,7, 55,2, 49,5, 41,6, 40,1,

36,5, 31,9, 31,6, 29,7, 28,2, 26,3, 25,0, 22,6, 18,2, 15,8, 14,1, 8,8

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C36H47N5O9: 693,34. Nalezeno (M+H)⁺: 694,3.

Příklad 18

Do nádoby obsahující roztok Int-17 (1,83 g, 2,65 mmol) v DMF (13 ml) byl přidán Cs₂CO₃ (2,6 g, 7,97 mmol) a allylbromid (1,15 mol, 13,28 mmol) při teplotě 0 °C. Výsledná směs byla míchána při teplotě 23 °C po dobu 1 hodiny. Reakční směs byla zfiltrována přes celit a promyta CH₂C1₂. Organická vrstva byla vysušena (síranem sodným) a zkoncentrována. Zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografií (SiO₂, CHCl₃:ethylacetát 1:4) za vzniku Int—18 (1,08 g, 56 %) jako bílé pevné látky.

Rf: 0,36 (CHCl₃:ethylacetát 1:3).

’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,27 - 6,02 (m, 1H), 5,94 (s, 1H), 5,83 (s, 1H), 5,37 (dd, Ji = 1,01 Hz, J₂ = 16,8 Hz, 1H), 5,40 (bs, 1H), 5,25 (dd, J, = 1,0 Hz, J₂ = 10,5 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,91 (bs, 1H), 4,25 - 4,22 (m, 1H), 4,21 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,14 - 4,10 (m, 1H), 4,08 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,00 (bs, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,59 (s, 3H), 3,56 - 3,35 (m, 2H), 3,26 - 3,20 (m,

-84CZ 304749 B6

2H), 3,05 - 2,96 (dd, Jj = 8,1 Hz, J₂ = 18 Hz, 1H), 2,63 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,09 (s, 3H), 1,91 - 1,80 (m, 1H), 1,24 (s, 9H), 0,94 (d, J = 6,6 Hz, 3H) ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,0, 154,8, 148,8, 148,6, 148,4, 144,4, 138,8, 133,7, 130,9,

130,3, 125,1, 124,0, 120,9, 117,8, 117,4, 112,8, 112,6, 101,1, 99,2, 73,9, 59,7, 59,3, 57,7, 56,9,

56,8, 56,2, 55,2, 40,1, 34,6, 31,5, 28,1, 26,4, 25,1, 22,6, 18,5, 15,7, 14,0, 9,2.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^lbNíCC: 733,4. Nalezeno (M+H)⁺: 734,4.

Příklad 19

Me

4.3M HCI/dioxan

l.2h, 23°C oA*^nhy°<

Me O

Do roztoku Int—18 (0,1 g, 0,137 mmol) v dioxanu (2 ml) byla přidána 4,2 M HCI/dioxan (1,46 ml) a směs byla míchána po dobu 1,2 hodiny při teplotě 23 °C. Reakce byla ukončena při teplotě 0 °C přidáním nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (60 ml). Směs byla extrahována ethylacetátem (2 x 70 ml). Organické vrstvy byly vysušeny (síranem sodným) a zkoncentrovány ve vakuu za vzniku Int—19 (267 g, 95 %) jako bílé pevné látky, která byla použita v další reakci bez dalšího čištění.

Rf: 0,17 (ethylacetát:methanol 10:1, SiO₂).

’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,49 (s, 1H), 6,12 - 6,00 (m, 1H), 5,94 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 5,34 (dd, J = 1,0 Hz, J = 17,4 Hz, 1H), 5,25 (dd, J = 1,0 Hz, J = 10,2 Hz, 1H), 4,18 - 3,76 (m, 5H), 3,74 (s, 3H), 3,71 - 3,59 (m, 1H), 3,36 - 3,20 (m, 4H), 3,01 - 2,90 (m, 1H), 2,60 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,97 - 1,86 (m, 1H), 0,93 (d, J = 8,7 Hz, 3H)

C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 175,5, 148,4, 146,7, 144,4, 142,4, 138,9, 133,7, 131,3, 128,3,

120,8, 117,9, 117,4, 113,8, 112,4, 101,1,74,2, 60,5,59,1,56,5,56,1,56,3, 56,0, 55,0, 50,5,41,6,

39,5, 29,5, 26,4, 24,9, 21,1, 15,5, 9,33.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₂H₃9N₅O₆: 589. Nalezeno (M+H)⁺: 590.

-85CZ 304749 B6

Příklad 20

trii- 19

Vnb- 20

Do roztoku Int-19 (250 g, 0,42 mmol) v CH₂C1₂ (1,5 ml) byl přidán fenylisothiokyanát (0,3 ml, 2,51 mmol) a směs byla míchána při teplotě 23 °C po dobu 1 hodiny. Reakční směs byla zkoncentrována ve vakuu a zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografií (SiO₂, gradient hexan do 5:1 hexan:ethylacetát) za vzniku Int-20 (270 mg, 87 %) jako bílé pevné látky.

ío Rf: 0,56 (CHC1₃.ethylacetát 1:4).

*H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 8,00 (bs, IH), 7,45 - 6,97 (m, 4H), 6,10 (s, IH), 6,08 - 6,00 (m, IH), 5,92 (s, IH), 5,89 (s, IH), 5,82 (s, IH), 5,40 (dd, J = 1,5 Hz, J = 17,1 Hz, IH), 3,38 (bs, IH), 5,23 (dd, J = 1,5 Hz, J = 10,5 Hz, IH), 4,42 - 4,36 (m, IH), 4,19 - 4,03 (m, 5H), 3,71 (s, 3H),

3,68 - 3,17 (m, 4H), 2,90 (dd, J = 7,8 Hz, J = 18,3 Hz, IH), 2,57 (d, J = 18,3 Hz, IH), 2,25 (s,

3H), 2,12 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,90 (dd, J = 12,3 Hz, J = 16,5 Hz, IH), 0,81 (d, J = 6,9 Hz, 3H).

¹³C NMR (75 MHz, CDCf): δ 178,4, 171,6, 148,6, 146,8, 144,3, 142,7, 138,7, 136,2, 133,6, 130,7, 129,8, 126,6, 124,2, 124,1, 120,9, 120,5, 117,7, 117,4, 116,7, 112,6, 112,5, 101,0, 74,0,

60,6, 59,0, 57,0, 56,2, 56,1, 55,0, 53,3, 41,4, 39,7, 26,3, 24,8, 18,3, 15,5, 9,2.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^ELuNeCfS: 724,8. Nalezeno (M+H)⁺: 725,3.

Příklad 21

Me let-20 tak- 21

-86CZ 304749 B6

Do roztoku Int-20 (270 mg, 0,37 mmol) v dioxanu (1 ml) byla přidána 4,2 M HCl/dioxan (3,5 ml) a reakční směs byla míchána při teplotě 23 °C po dobu 30 minut. Potom byl přidán ethylacetát (20 ml) a H₂O (20 ml) a organická vrstva byla dekantována. Vodná fáze byla zalkalizována nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (60 ml) (pH = 8) při teplotě 0 °C a potom byla extrahována CH₂C1₂ (2 x 50 ml). Spojené organické extrakty byly vysušeny (síranem sodným) a zkoncentrovány ve vakuu. Zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografií (SiO₂, ethylacetát:methanol 5:1) za vzniku sloučeniny Int—21 (158 mg, 82 %) jako bílé pevné látky.

Rf: 0,3 (ethylacetát:methanol 1:1).

’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,45 (s, 1H), 6,12 - 6,03 (m, 1H), 5,91 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 5,38 (dd, Ji = 1,2 Hz, J₂ = 17,1 Hz, 1H), 5,24 (dd, J, = 1,2 Hz, J₂ = 10,5 Hz, 1H), 4,23 - 4,09 (m, 4H), 3,98 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 3,90 (bs, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,36 - 3,02 (m, 5H), 2,72 - 2,71 (m, 2H), 2,48 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,85 (dd, Ji = 11,7 Hz, J₂ = 15,6 Hz, 1H).

C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 148,4, 146,7, 144,4, 142,8, 138,8, 133,8, 130,5, 128,8, 121,5,

120.8, 118,0, 117,5, 116,9, 113,6, 112,2, 101,1, 74,3, 60,7, 59,9, 58,8, 56,6, 56,5, 55,3, 44,2,

41.8, 29,7, 26,5, 25,7, 15,7, 9,4.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^H^Oj: 518,3. Nalezeno (M+H)⁺: 519,2.

Příklad 22

Do roztoku Int-21 (0,64 g, 1,22 mmol) v CH₂C1₂ (6,13 ml) byl přidán pyridin (0,104 ml, 1,28 mmol) a 2,2,2-trichlorethylchloroformiát (0,177 ml, 1,28 mmol) při teplotě -10 °C. Směs byla míchána při této teplotě po dobu 1 hodiny a potom byla reakce ukončena přidáním 0,1 N HCI (10 ml) a extrahována CH₂C1₂ (2x10 ml). Organická vrstva byla vysušena síranem sodným a zkoncentrována ve vakuu. Zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografií (SiO₂, hexamethylacetát 1:2) za vzniku Int-22 (0,84 g, 98 %) jako bílé pěny.

Rf: 0,57 (ethylacetát:methanol 5:1).

'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,50 (s, 1H), 6,19 - 6,00 (m, 1H), 6,94 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,73 (bs, 1H), 5,37 (dq, J, = 1,5 Hz, J₂ = 17,1 Hz, 1H), 5,26 (dq, J, = 1,8 Hz, J₂ = 10,2 Hz, 1H), 4,60 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,22 - 4,10 (m, 4H), 4,19 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,02 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,37 - 3,18 (m, 5H), 3,04 (dd, J, = 8,1 Hz, J₂ = 18 Hz, 1H), 2,63 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,85 (dd, J, = 12,3 Hz, J₂ = 15,9 Hz, 1H).

-87CZ 304749 B6 ^l3C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 154,3, 148,5, 146,7, 144,5, 142,8, 139,0, 133,8, 130,7, 128,7,

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^H^Cy^Cb: 694,17. Nalezeno (M+H)⁺: 695,2.

Příklad 23

Sloučenina Int-23

Me

Ink- 22

V-0 \ ČN

NHTroc

BrMOM, CHgCN, D1PEA _Mť DMAP. 30°C, lOh.

<

Me

NHTroc tak- 23

Do roztoku Int-22 (0,32 g, 0,46 mmol) vCH₃CN (2,33 ml) byl přidán diisopropylethylamin (1,62 ml, 9,34 mmol), brommethylmethyléter (0,57 ml, 7,0 mmol) a dimethylaminopyridin (6 mg, 0,046 mmol) při teplotě 0 °C. Směs byla zahřívána při teplotě 30 °C po dobu 10 hodin. Potom byla reakční směs zředěna dichlormethanem (30 ml) a nalita do vodného roztoku HC1 o pH = 5 (10 ml). Organická vrstva byla vysušena síranem sodným a rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku za vzniku zbytku, který byl čištěn sloupcovou chromatografií (SiO₂, hexamethylacetát 2:1) za vzniku Int-23 (0,304 g, 88 %) jako bílé pěny.

Rf: 0,62 (hexamethylacetát 1:3).

'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,73 (s, 1H), 6,10 (m, 1H), 5,94 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,88 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,39 (dq, Ji = 1,5 Hz, J₂ = 17,1 Hz, 1H), 5,26 (dq, J, = 1,8 Hz, J₂ = 10,2 Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,61 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,55 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 4,25 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,22 - 4,11 (m, 4H), 4,03 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), 3,38 - 3,21 (m, 5H), 3,05 (dd, J, = 8,1 Hz, J₂ = 18 Hz, 1H), 2,65 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 1,79 (dd, J, =12,3 Hz, J₂ = 15,9 Hz,lH);

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C34H39CI3N4O8: 738,20. Nalezeno (M+H)⁺: 739,0.

Příklad 24

Sloučenina Int-24

-88CZ 304749 B6

Do suspenze Int-23 (0,304 g, 0,41 mmol) v 90 % vodné kyselině octové (4 ml) byl přidán práškový zinek (0,2 g, 6,17 mmol) a reakce byla míchána po dobu 7 hodin při teplotě 23 °C. Směs byla zfiltrována přes celit, který byl promyt CH₂C1₂. Organická vrstva byla promyta vodným nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (pH = 9) (15 ml) a vysušena síranem sodným. Rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku za vzniku Int-24 (0,191 g, 83 %) jako bílé pevné látky.

Rf: 0,3 (ethylacetát:methanol 5:1) ’H NMR (300 MHz, CDCfi): δ 6,68 (s, IH), 6,09 (m, IH), 5,90 (d, J= 1,5 Hz, IH), 5,83 (d, J = 1,5 Hz, IH), 5,39 (dq, J, = 1,5 Hz, J₂ = 17,1 Hz, IH), 5,25 (dq, Ji = 1,5 Hz, J₂ = 17,1 Hz, IH), 5,25 (dq, Ji = 1,5 Hz, J₂ = 10,2 Hz, IH), 5,10 (s, 2H), 4,22 - 4,09 (m, 3H), 3,98 (d, J = 2,4 Hz, IH), 3,89 (m, IH), 3,69 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,37-3,17 (m, 3H), 3,07 (dd, J, = 8,1 Hz,

J₂ = 18 Hz, IH), 2,71 (m, 2H), 2,48 (d, J = 18 Hz, IH), 2,33 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 1,80 (dd, J, = 12,3 Hz, J₂ = 15,9 Hz, IH)

13,

C NMR (75 MHz, CDCfi): δ 148,5, 148,2, 144,3, 138,7, 133,7, 130,7, 129,9, 125,0, 123,9,

121,3, 117,9, 117,5, 113,6, 112,0, 101,0, 99,2, 74,0, 59,8, 59,7, 58,8, 57,6, 57,0, 56,2, 55,2, 44,2,

41,5, 31,5, 26,4, 25,6, 22,5, 16,7, 14,0, 9,2.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃iH₃₈N₄O₆: 562,66. Nalezeno (M+H)⁺: 563,1.

Příklad 25

Sloučenina lnt-25

Do roztoku Int-24 (20 mg, 0,035 mmol) v H₂O (0,7 ml) a THF (0,7 ml) byl přidán NaNO₂ 30 (12 mg, 0,17 mmol) a 90 % vodný roztok AcOH (0,06 ml) při teplotě 0 °C a směs byla míchána při teplotě 0 °C po dobu 3 hodin. Po zředění CH₂C1₂ (5 ml) byla organická vrstva promyta vodou (1 ml), vysušena síranem sodným a zkoncentrována ve vakuu. Zbytek byl čištěn sloupcovou

-89CZ 304749 B6 chromatografií (SiO₂, hexan:ethylacetát 2:1) za vzniku Int-25 (9,8 mg, 50 %) jako bílé pevné látky.

Rf: 0,34 (hexan:ethylacetát 1:1).

'H NMR (300 MHz, CDCh): δ 6,71 (s, 1H), 6,11 (m, 1H), 5,92 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,87 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,42 (dq, J, = 1,5 Hz, J₂ = 17,1 Hz, 1H), 5,28 (dq,J, = 1,5 Hz, J₂= 10,2 Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,26 - 4,09 (m, 3H), 4,05 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,97 (t, J = 3,0 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,67-3,32 (m, 4H), 3,58 (s, 3H), 3,24 (dd, J, =2,7 Hz, J₂ = 15,9 Hz, 1H), 3,12 (dd, J, = 8,1 Hz, J₂ = 18,0 Hz, 1H), 2,51 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 1,83 (dd, J, = 12,3 Hz, J₂= 15,9 Hz, 1H) ⁱ³C NMR (75 MHz, CDCh): δ148,7, 148,4, 138,9, 133,7, 131,1, 129,4, 125,1, 123,9, 120,7,

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃iH₃₇N₃O₇: 563,64. Nalezeno (M+H)⁺: 564,1.

Příklad 29

Sloučenina Int-29

HO' ;,2,2-trichlorethyl chlormravenčan _Ηθ·

Výchozí látka (2,0 g, 5,90 mmol) byla přidána do suspenze hydridu sodného (354 mg, 8,86 mmol) v THF (40 ml) při teplotě 23 °C, potom byl do suspenze přidán allylchlorformiát (1,135 ml, 8,25 mmol) při teplotě 23 °C a směs byla refluxována po dobu 3 hodin. Suspenze byla ochlazena, zfiltrována, pevná látka byla promyta ethylacetátem (100 ml) a filtrát byl zkoncentrován. Surový olej byl převrstven hexanem (100 ml) nechán stát přes noc při teplotě 4 °C. Potom bylo rozpouštědlo dekantováno a světle žlutá usazenina byla promyta CH₂C1₂ (20 ml) a vysrážena hexanem (100 ml). Po 10 minutách bylo rozpouštědlo znovu dekantováno. Tento postup byl opakován, dokud nevznikla bílá pevná látka. Ta byla zfiltrována a vysušena za vzniku požadované sloučeniny Int—29 (1,80 g, 65 %) jako bílé pevné látky.

Ή NMR (300 MHz, CDCh): δ 7,74 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,62 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 7,33 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,30 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 5,71 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,73 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 4,59 (m, 1H), 4,11 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 3,17 (dd, J = 6,0 Hz, J = 2,7 Hz, 2H), 3,20 (dd, J = 5,4 Hz,

J = 2,1 Hz, 2H).

¹³C NMR (75 MHz, CDCh): δ 173,6, 152,7, 144,0, 139,7, 137,8, 126,0, 12: 73,4, 52,4, 45,5, 35,8, 33,7.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₂₀Hi₈Cl₃NO4S: 474,8. Nalezeno (M+Na)⁺: 497,8

Příklad 30

Sloučenina Int-30

-90CZ 304749 B6

Byla vytvořena azeotropická směs sloučeniny Int-25 (585 mg, 1,03 mmol), sloučeniny Int-29 (1,47 g, 3,11 mmol) a bezvodého toluenu (3 x lOml). Do roztoku Int-25 a Int-29 v bezvodém CH₂C1₂ (40 ml) byl přidán DMAP (633 mg, 5,18 mmol) a EDC.HC1 (994, mg, 5,18 mmol) při teplotě 23 °C. Reakční směs byla míchána při teplotě 23 °C po dobu 3 hodin. Směs byla rozdělena nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a vrstvy byly odděleny. Vodná vrstva byla promyta CH₂C1₂ (50 ml). Spojené organické vrstvy byly vysušeny síranem sodným, zfiltrovány a zkoncentrovány. Surový produkt byl čištěn sloupcovou chromatografií (ethylacetát/hexan 1:3) za vzniku Int-30 (1,00 g, 95 %)jako světle žluté pevné látky.

'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,72 (m, 2H), 7,52 (m, 2H), 7,38 (m, 2H), 7,28 (m, 2H), 6,65 (s, 1H), 6,03 (m, 1H), 5,92 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,79 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,39 (m, 1H), 5,29 (dq, J = 10,3 Hz, J = 1,5 Ηζ,ΙΗ), 5,10 (s, 2H), 4,73 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,66 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,36 - 3,96 (m, 9H), 3,89 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,55 (s, 3H), 3,33 (m,

1H), 3,20 (m, 2H), 2,94 (m, 3H), 2,59 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,83 (dd,

J= 16,0 Hz, J = 11,9 Hz, 1H).

C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 169,7, 154,0, 148,8, 148,4, 145,7, 144,5, 140,9, 139,0, 133,7,

130.9, 130,6, 127,6, 127,0, 124,8, 124,6, 124,1, 120,8, 119,9, 118,2, 117,7, 117,3, 112,7, 112,1,

101,3, 99,2, 74,7, 73,9, 64,4, 59,8, 57,7, 57,0, 56,8, 55,4, 53,3, 46,7, 41,4, 36,5, 34,7, 31,5, 26,4,

24.9, 22,6, 15,7, 14,0, 9,1.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₅iH₅₃C1₃N₄Oi₀S: 1020,4. Nalezeno (M+H)⁺: 1021,2

Příklad 31

-91 CZ 304749 B6

Do roztoku Int-30 (845 mg, 0,82 mmol), kyseliny octové (500 mg, 8,28 mmol) a (PPh₃)₂PdCl₂ (29 mg, 0,04 mmol) v bezvodém CH₂C1₂ byl při teplotě 23 °C přidán po kapkách Bu₃SnH (650 mg, 2,23 mmol). Reakční směs byla míchána při této teplotě po dobu 15 minut za tvorby bublin. Surový produkt byl ochlazen vodou (50 ml) a extrahován CH₂C1₂ (3 x 50 ml). Organické vrstvy byly vysušeny síranem sodným, zfiltrovány a zkoncentrovány. Surový produkt byl čištěn sloupcovou chromatografií (ethylacetát/hexan v gradientu od 1:5 do 1:3) za vzniku sloučeniny Int-31 (730 mg, 90 %)jako světle žluté pevné látky.

’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,72 (m, 2H), 7,56 (m, 2H), 7,37 (m, 2H), 7,30 (m, 2H), 6,65 (s, 1H), 5,89 (s, 1H), 5,77 (s, 1H), 5,74 (s, 1H), 5,36 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 5,20 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 4,75 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,73 (m, 1H), 4,48 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,08 (m, 4H), 3,89 (m, 1H), 3,86 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,69 (s, 3H), 3,38 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 3,02 - 2,89 (m, 4H), 2,67 (s, 1H), 2,61 (s, 1H), 2,51 (dd, J = 14,3 Hz, J = 4,5 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,95 (s, 3H), 1,83 (m, 1H).

^I3C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 168,2, 152,5, 148,1, 146,2, 144,4, 144,3, 143,3, 139,6, 134,6, 129,7, 129,6, 126,2, 125,6, 123,4, 123,3, 121,6, 118,5, 116,3, 110,7, 110,2, 105,1, 99,4, 98,5,

75,2, 73,3, 61,7, 58,4, 57,9, 56,3, 56,1, 55,1, 54,7, 53,9, 51,9, 45,2, 40,1, 35,6, 33,3, 24,8, 23,3,

14,5, 7,3.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C4₈H4₉C1₃N₄OioS: 980,3. Nalezeno (M+H)⁺: 981,2.

Příklad 32

Sloučenina Int-32

tot- 31 Ws- 32

Do roztoku Int—31 (310 mg, 0,32 mmol) v bezvodém CH₂C1₂ (15ml) byl při teplotě -10 °C přidán kanylou 70 % roztok anhydridu kyseliny benzenselenové (165 mg, 0,32 mmol) v bezvodém CH₂C1₂ (7 ml) a teplota byla udržována při -10 °C. Reakční směs byla míchána při teplotě 10 °C po dobu 5 minut. Potom byl při této teplotě přidán nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (30 ml). Vodná vrstva byla promyta více CH₂C1₂ (40 ml). Organické vrstvy byly vysušeny síranem sodným, zfiltrovány a zkoncentrovány. Surový produkt byl čištěn sloupcovou chromatografií (ethylacetát/hexan v gradientu od 1:5 do 1:1) za vzniku Int-32 (287 mg, 91 %, HPLC: 91,3 %) jako světle žluté pevné látky jako směs dvou isomerů (65:35), které byly dále použity v dalším kroku.

-92CZ 304749 B6 *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ (Směs izomerů) 7,76 (m, 4H), 7,65 (m, 4H), 7,39 (m, 4H), 7,29 (m, 4H), 6,62 (s, 1H), 6,55 (s, 1H) 5,79 - 5,63 (m, 6H), 5,09 (s, 1H), 5,02 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,99 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,80 - 4,63 (m, 6H), 4,60 (m, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,38 (d, J = 12,8 Hz, J = 7,5 Hz, 1H), 4,27 (dd, J = 12,8 Hz, J = 7,5 Hz, 1H), 4,16 - 3,90 (m, 10H), 3,84 (s, 3H), 3,62 (s, 3H), 3,50 (s, 3H), 3,49 (s, 3H), 3,33 - 2,83 (m, 14H), 2,45 - 2,18 (m, 2H), 2,21 (s, 6H), 2,17 (s, 6H), 1,77 (s, 6H), 1,67 (m, 2H).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ (Směs izomerů) 168,6, 168,4, 158,6, 154,8, 152,8, 152,5, 147,3,

147.2, 146,8, 144,1, 144,0, 140,8, 139,7, 137,1, 129,8, 129,3, 128,4, 128,7, 126,5, 125,5, 123,7, 123,6, 123,5, 123,4, 122,2, 121,3, 118,3, 115,8, 115,5, 110,2, 106,9, 103,5, 103,2, 100,1, 99,6,

97.9, 97,7, 93,8, 73,4, 70,9, 69,2, 64,9, 62,5, 59,3, 58,9, 58,4, 56,7, 56,3, 56,2, 55,4, 55,2, 55,1,

54.9, 54,7, 54,3, 54,1, 53,8, 52,8, 45,5, 40,5, 40,0, 39,8, 35,8, 35,5, 33,9, 33,7, 30,1, 28,8, 24,2,

24.1.21.2, 14,5, 14,4, 12,7, 6,0, 5,7.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^CljNíOnS: 996,3. Nalezeno (M+H)⁺: 997,2.

Příklad 33

Sloučenina Int-33

1HL·- 32 lnb-33

Reakční nádoba byla dvakrát zahřáta, několikrát vyčištěna vakuem/argonem a byla udržována v atmosféře argonu po dobu reakce. Do roztoku DMSO (39,1 ml, 0,55 mmol, 5 ekv.) v bezvodém CH₂C1₂ (4,5 ml) byl při teplotě -78 °C přikapáván anhydrid kyseliny triflátové (37,3 mg, 0,22 mmol, 2 ekv.). Reakční směs byla míchána při teplotě -78 °C po dobu 20 minut, potom byl při této teplotě přidán kanylou roztok Int-32 (110 mg, 0,11 mmol, HPLC: 91,3 %) v bezvodém CH₂C1₂ (1 ml jako hlavní přídavek a 0,5 ml na promytí). Během přidávání byla teplota udržována při -78 °C v obou nádobách a barva se změnila ze žluté na hnědou. Reakční směs byla míchána při teplotě -40 °C po dobu 35 minut. Během této doby se barva roztoku změnila ze žluté na tmavě zelenou. Po této době byl po kapkách přidán iPr₂NEt (153 ml, 0,88 mmol, 8 ekv.) a reakční směs byla udržována při teplotě 0 °C po dobu 45 minut a barva roztoku se změnila na hnědou. Potom byl po kapkách přidán t-butanol (41,6 ML, 0,44 mmol, 4 ekv.) a 2-t-butyl-l,l,3,3-tetramethylguanin (132,8 ml, 0,77 mmol, 7 ekv.) a reakční směs byla míchána při teplotě 23 °C po dobu 40 minut. Po této době byl po kapkách přidán anhydrid kyseliny octové (104,3 ml, 1,10 mmol, 10 ekv.) a reakční směs byla udržována při teplotě 23 °C po dobu 1 hodiny. Potom byla reakční směs zředěna CH₂C1₂ (20 ml) a promyta nasyceným vodným roztokem NH4CI (50 ml), hydrogenuhličitanem sodným (50 ml) a chloridem sodným (50 ml). Spojené organické vrstvy

-93 CZ 304749 B6 byly vysušeny síranem sodným, zfiltrovány a zkoncentrovány. Zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografií (eluent: ethylacetát/hexan gradient 1:3 do 1:2) za vzniku sloučeniny Int-33 (54 mg, 58 %) jako světle žluté pevné látky.

'HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,85 (s, 1H), 6,09 (s, 1H), 5,99 (s, 1H), 5,20 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 5,14 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 5,03 (m, 1H), 4,82 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 4,63 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,35 -4,17 (m, 4H), 3,76 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,45 (m, 2H), 2,91 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,12 (m, 2H), 2,03 (s, 3H).

^I3C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 168,5, 167,2, 152,7, 148,1, 147,1, 144,5, 139,6, 139,1, 130,5,

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₆H₃9Cl₃N₄OnS: 842,1. Nalezeno (M+H)⁺: 843,1

Příklad 34

Sloučenina Int-34

Me

TrocHN cl

Me

TrocHN

Me

Do roztoku Int-33 (12 mg, 0,014 mmol) v suchém dichlormethanu (1,2 ml) a HPLC acetonitrilu (1,2 ml) byl přidán při teplotě 23 °C jodidu sodného (21 mg, 0,14 mmol) a čerstvě destilovaného (přes hydrid vápenatý za atmosférického tlaku) trimethylsilylchloridu (15,4 mg, 0,14 mmol). Reakční směs se zbarvila do oranžova. Po 15 minutách byl roztok zředěn dichlormethanem (10 ml) a promyt vodným nasyceným roztokem Na₂S₂O4 (3x10 ml). Organická vrstva byla vysušena síranem sodným, zfiltrována a zkoncentrována. Byla získána sloučenina Int-34 (13 mg, kvantitativně) jako světle žlutá pevná látka, která byla dále použita bez dalšího čištění.

‘H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,85 (s, 1H), 6,09 (m, 1H), 5,99 (s, 1H), 5,27 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 5,14 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 5,03 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,82 (d, J= 12,2 Hz, 1H), 4,63 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,34 (m, 1H), 4,27 (bs, 1H), 4,18 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,44 (m, 1H), 3,42 (m, 1H), 2,91 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,03 (s, 3H).

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₄H₃₅N₄OioS: 798,1. Nalezeno (M+H)⁺: 799,1

Příklad 35

Sloučenina Int-35

-94CZ 304749 B6

Ink- 34 \nb-35

Do roztoku Int-34 (13 mg, 0,016 mmol) ve směsi kyseliny octové /H₂O (90:10, 1 ml) byl přidán práškový zinek (5,3 mg, 0,081 mmol) při teplotě 23 °C. Reakční směs byla zahřívána při teplotě 70 °C po dobu 6 hodin. Po této době byla ochlazena na 23 °C, zředěna CH₂C1₂ (20 ml) a promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (15 ml) a vodným roztokem Et₃N (15 ml). Organická vrstva byla vysušena síranem sodným, zfiltrována a zkoncentrována. Zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografií se silikagelem-NH₂ (eluent: ethylacetát/hexan gradient od 0:100 do 50:50) za vzniku sloučeniny Int-35 (6,8 mg, 77 % po dvou krocích) jako světle žluté pevné látky.

*HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,51 (s, IH), 6,03 (dd, J = 1,3 Hz, J = 26,5 Hz, 2H), 5,75 (bs, IH), 5,02 (d, J = 11,6 Hz, IH), 4,52 (m, IH), 4,25 (m, 2H), 4,18 (d, J= 2,5 Hz, IH), 4,12 (dd, J = 1,9 Hz, J = 11,5 Hz, IH), 3,77 (s, 3H), 3,40 (m, 2H), 3,26 (t, J = 6,4 Hz, IH), 2,88 (m, 2H), 2,30 - 2,10 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,02 (s, 3H).

C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 174,1, 168,4, 147,8, 145,4, 142,9, 140,8, 140,1, 131,7, 130,2, 129,1, 128,3, 120,4, 118,3, 117,9, 113,8, 111,7, 101,7, 61,2, 59,8, 59,2, 58,9, 54,4, 53,8, 54,4,

41,3, 41,5, 34,1, 23,6, 20,3, 15,5, 9,4.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₁H₃₄N₄O_gS: 622,7. Nalezeno (M+H)⁺: 623,2.

Příklad 36

Sloučenina Int-36

CHO

³⁶

Do roztoku N-methylpyridin-4-karboxaldehyd jodidu (378 mg, 1,5 mmol) v bezvodém DMF (5,8 ml) byl přidán bezvodý toluen (2x10 ml), aby se odstranila voda azeotropickou směsí tolu-95 CZ 304749 B6 enu a vody. Roztok Int-35 (134 mg, 0,21 mmol), do kterého byl předtím přidán bezvodý toluen (2x10 ml), bezvodý CH₂C1₂ (destilovaný přes CaH₂, 7,2 ml), byl přidán kanylou při teplotě 23 °C do tohoto oranžového roztoku. Reakční směs byla míchána při teplotě 23 °C po dobu 4 hodin. Po této době byl při teplotě 23 °C po kapkách přidán DBU (32,2 ml, 0,21 mmol) a reakční směs byla míchána při této teplotě po dobu 15 minut. Do reakční směsi byl přidán nasycený vodný roztok šťavelové kyseliny (5,8 ml) a směs byla míchána po dobu 30 minut při teplotě 23 °C. Potom byla reakční směs ochlazena na teplotu 0 °C a potom byl po částech přidán NaHCO₃ a nasycený vodný roztok NaHCO₃. Směs byla extrahována Et₂O. K₂CO₃ byl přidán do vodné vrstvy a ta byla extrahována Et₂O. Spojené organické vrstvy byly vysušeny MgSO₄ a rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku. Surový produkt byl čištěn sloupcovou chromatografií (AcOEt/hexan z 1/3 do 1/1) za vzniku sloučeniny Int-36 (77 mg, 57 %) jako světle žluté pevné látky.

‘H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,48 (s, 1H), 6,11 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 6,02 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 5,70 (bs, 1H), 5,09 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 4,66 (bs, 1H), 4,39 (m, 1H), 4,27 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 4,21 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 4,16 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,54 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 3,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 2,88 - 2,54 (m, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,04 (s, 3H). ¹³CNMR (75 MHz, CDC1₃): δ 186,7, 168,5, 160,5, 147,1, 146,4, 142,9, 141,6, 140,7, 130,4, 129,8, 121,7 (2C), 120,0, 117,8, 117,1, 113,5, 102,2,61,7,61,4, 60,3,59,8,58,9, 54,6,41,6,36,9, 29,7, 24,1, 20,3, 15,8, 14,1, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃iH₃iN₃O₄S: 621,7. Nalezeno (M+H)⁺: 622,2.

Hlavní odkazy

Evropský patent 309 477.

US patent 5 721 362.

Skai, R., Jares-Erijman, E. A., Manzanares, I., Elipe, Μ. V. S., and Rinehart, K. L., J. Am. Chem. Soc. (1996) 118,9017- 9023.

Martinez, E. J., Owa, T., Schreiber, S. L. and Corey, E. J., Proč. Nati. Acad. Sci. USA, 1999, 96, 3496-3501.

Japonský patent JP-A2 59/225189.

Japonský patent JP-A2 60/084288.

Arai, T.: Kubo, A. In The Alkaloids, Chemistry and Pharmacology; Brossi, A. Ed.; Academie: New York, 1983, Vol. 21; pp. 56 - 110.

Remers, W. A.: In The Chemistry of Antitumour Antibiotics; Vol. 2; Wiley; New York, 1988, pp. 93-118.

Gulavita N. K.; Scheuer, P. J.: Desilva, E. D. Abst. Indo-United States Symp. on Bioactive Compounds from MArine Organisms, Goa, India, Fe. 23 - 27, 1989, p. 28.

Arai, T.: Takahashi, K; Kubo, A., J. Antibiot., 1977, 30, 1015 - 1018.

Arai, T.; Takahashi, K. Nakahara, S.: Kubo, A., Experientia, 1980, 36, 1025 - 1028.

Miakmi, Y.; Takahashi, K; Yazawa, K.; Hour-Young, C.; Arai, T.; Saito, N.; Kubo, A., J. Antibiot., 1988, 41, 734 - 740.

Arai, T.; Takahashi, K.; Ishiguro, K.; Yazawa, K., J. Antibiot., 1980, 33, 951 - 960.

Yazawa, K.; Takahashi, K.; Mikami, Y.; Arai, T.; Saito, N.; Kubo, A., J. Antibiot., 1986, 39, 1639- 1650.

Ara, T.; Yazawa, K.; Takahashi, K.; Maeda, A.; Mikami, Y., Antimicrob. Agent Chemother., 1985, 28,5- 11.

Takahashi, K.; Yazawa, K.; Kishi, K.; Mikami, Y.; Arai, T.; Kubo, A., J. Antibiot., 1982, 35, 196 -201.

Yazawa, K.; Azalka, T.; Takahashi, K.; Mikami, Y.; Arai, T., J. Antibiot., 1982, 35, 915 - 917. Frincke, J. M.; Faulkner, D. J., J. Am. Chem., 1989, 54, 5822 - 5824.

-96CZ 304749 B6

Kubo, A.; Saito, N.; Kitahara, Y.; Takahashi, K.; Tazawa, K.; Arai, T., Chem. Pharm. Bull. 1987, 35, 440 - 442.

Trewitzsch-Kienast. W.; Irschik, H.; Reichenback, H.; Wray, V.; Hofle, G., Liebigs Ann. Chem., 1988, 475-481.

Ikeda, Y.; Idemoto, H.; Hirayama, F.; Yamamoto, K.; Iwao, K.; Asano, T.; Munakata, T., J. Antibiot., 1983, 36, 1279 - 1283.

Asaoka, T.; Yazawa , K.; Mikami, Y. Arai, T.; Takahashi, K., J. Antibiot., 1983, 36, 1184-1194.

Munakata et al., US patent 4, 400, 752, 1984.

Y. Ikeda et al., The Journal of Antibiotics, Vol XXXVI, N°10, 1284, 1983.

R. Cooper, S. Unger, The Journal of Antibiotics, VOL XXXVIII, N°l, 1985.

Corey et al., US patent 5 721 362, 1998.

Corey et al., J. Am. Chem. Soc., Vol. 118, p. 9202 - 9204, 1996.

Proč. Nati. Acad. Sci. USA, Vol. 96, pp. 3496 - 3501, 1999.

Claims (36)

1. Ecteinascidinová sloučenina následujícího obecného vzorce I v němž:

Ri je vodík nebo skupina C(=O)R', kde R' je Ci-C]₂ alkyl;

R₂ je vodík nebo C1-C4 alkyl;

X₂ znamená skupinu OXi nebo N(Xi)₂, kde jedno nebo každé Xi nezávisle znamená atom vodíku, nesubstituovaný Ci-Cig alkyl nebo C(=O) R', kde R' je vybrán z vodíku, OH, NO₂, NH₂, SH, CN, halogenu, C(=O)H, C(=O)CH₃, CO₂H, Ci-Ci₈alkylu, C₂-Ci₈ alkenylu, C₂-C₁₈ alkynylu, heterocyklylu, který může být aromatický, nebo částečně nebo úplně nasycený a mající 4 až 8 atomů v kruhu, výhodněji 5 až 6 atomů v kruhu, s jedním nebo více heteroatomy vybranými z dusíku, síiy a kyslíku, a nesubstituovaného karbocyklického arylu obsahujícího 1 až 3 samostatné nebo spojené kruhy, a majícího 6 až 18 atomů uhlíku v kruhu, přičemž každý z alkylu, alkenylu, alkynylu a heterocyklylu jsou nezávisle případně substituované jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny obsahující halogen, kyano, hydroxyl, nitro, azido, Ci-C₆ alkynoyl, karboxamid, Ci-C_]2 alkyl, C₂-Ci₂ alkenyl, C₂-Ci₂ alkynyl, Ci-Ci₂ alkoxy, aryloxy jako je fenoxy, C]-Ci₂ alkylthio, Ci-C]₂ alkylsulfmyl, C]-Ci₂ alkylsulfonyl, karbocyklický aryl obsahující 1 až 3 samostatné nebo spojené kruhy mající 6 až 18 atomů uhlíku v kruhu, a aralkyl, který má alkylovou skupinu mající 1 až 4 atomy uhlíku, která je substituovaná arylem majícím 6 až 10 atomů uhlíku, a který je nesubstituovaný nebo substituovaný 1 až 5 substituenty; nebo dvě Xj

-97CZ 304749 B6 skupiny mohou společně tvořit cyklický substituent na atomu dusíku; nebo Xi je SO₂CH₃ když X₂ je OXi; nebo N(X,)₂ je NHCO(C,-C|₂)alkylCOOH, NHBiotin, NH(aa)_y, kde aaje nesubstituovaný acyl aminokyseliny, kde acyl je alkanoyl jako je C,_6 alkanoyl a y je 1, 2, 3, chráněný NHCOCH(NH₂)CH₂SH, NHCO(C₂-Ci₂)alkenylaryl, který je substituovaný CF₃ nebo mmethoxykarbonylbenzoylNH; s výlukou, kdy N(X|)₂ je NH₂;

X₃ znamená skupinu OH a CN skupinu;

X₄ je vybrán z vodíku a Cj-Cis alkylu; a

X₅ je vybrán z vodíku nebo (C,-C|₂)alkylu.

2. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 1, obecného vzorce I, kde Ri znamená skupinu C(=O)R', v níž R' znamená (Ci-C₄)alkyl.

3. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 2, obecného vzorce I, kde Ri znamená acetyl.

4. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 1, 2 nebo 3 obecného vzorce I, kde R₂ znamená atom vodíku nebo methyl.

5. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 4, obecného vzorce I, kde R₂ znamená methyl.

6. Ecteinascidinová sloučenina podle kteréhokoliv z předcházejících nároků 1 až 5, obecného vzorce I, kde X₃ znamená skupinu OH.

7. Ecteinascidinová sloučenina podle kteréhokoliv z předcházejících nároků 1 až 6, obecného vzorce I, kde X₄ znamená atom vodíku nebo methyl.

8. Ecteinascidinová sloučenina podle kteréhokoliv z předcházejících nároků 1 až 7, obecného vzorce I, kde X₅ znamená atom vodíku nebo C,-C₄ alkyl.

9. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 8, obecného vzorce I, v němž X₅ znamená atom vodíku.

10. Ecteinascidinová sloučenina podle kteréhokoliv z předcházejících nároků 1 až 9, obecného vzorce kde substítuenty R_b R₂, X_b X₃, X₄ a X₅ znamenají jak uvedeno v nároku 1.

11. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 10, v němž X, znamená atom vodíku.

-98CZ 304749 B6

12. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 10, kde N(Xi)₂ je -NHCO(C]-Ci₈)alkyl, který je případně substituovaný halogenem; -NHCO(C]-Ci₂)alkylCOOH; chráněný -NHCOCH(NH₂)CH₂SH, kde NH₂ a/nebo SH jsou chráněné; -NHBiotin; -NH(aa)_y, kde aa je nesubstituovaný acyl aminokyseliny a y je 1, 2, 3; ftalimid tvořený ze dvou Xj skupin se sousedním dusíkem;

5 -NH(nesubstituovaný(Ci-Ci₂)alkyl; nebo -NHCO(C₂-Ci₂)alkenylaryl, který je substituovaný

3-trifluormethylem.

13. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 10, kde N(Xj)₂ znamená skupinu NHAc, skupinu

NHCO(CH₂)₂COOH, skupinu NHCOCH(NHCOOCH₂CH=CH₂)CH₂S-9-fluorenylmethyl, skulo pinu NHCO(CH₂)₁₄CH₃, NHCOCF₃, NHCO(CH₂)₂CH₃, NHCOCH₂CH(CH₃)₂, NHCO(CH₂)₆CH₃, NHBiotin, NHBz, NHCOCH=CHPh, NHCOCH=CH-(p-F₃C)-Ph, NHVal-NH₂, NHValAla-NH₂, NHAla-NH₂, NHCOCH(NH₂)CH₂S-9-fluorenylmethyl, fitalimidskupinu, NH-(m)CO₂Me)-Bz nebo NMe₂ skupinu

15 14. Ecteinascidinová sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 9 obecného vzorce kde substituenty R_b R₂, X), X₃, X₄ a X₅ znamená jak uvedeno v nároku 1.

15. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 14, kde X, znamená atom vodíku.

16. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 14, kde OXi znamená skupinu OH, OAc, OCOCF₃, OCOCH₂CH₂CH₃, OCO(CH₂)₆CH₃, OCO(CH₂)₁₄CH₃, skupinu OCOCFFCHPh nebo skupinu OSO₂CH₃.

(XVIIb),

-99CZ 304749 B6 kde

R⁵ je vodík, OH nebo acyloxy skupina;

R⁷ je OCH3 a R⁸ je OH nebo R⁷ a R⁸ společně tvoří skupinu O-CH2-O;

R^14a a R^14b jsou oba H nebo jeden je H a druhý je OH, OCH₃ nebo OCH₂CH₃ nebo R^14a a R^14b společně tvoří ketoskupinu;

R¹⁵ je H nebo OH;

R²¹ je H, OH nebo CN; a

R¹ a R⁴ společně tvoří skupinu obecného vzorce Via nebo VIb (Via) (VIb) kde -NH₂ skupina vzorce (Via) a -OH skupina vzorce (VIb) jsou acylované acylovou skupinou vzorce -COR^a, kde R^a je vybrán zCi ]₈alkylu, C₂ i₈alkenylu, arylalkylu, který má alkylovou skupinu mající 1 až 4 atomy uhlíku, která je substituovaná arylem majícím 6 až 10 atomů uhlíku, a který je nesubstituovaný nebo substituovaný 1 až 5 substituenty, arylalkenylu jako je cinnamoyl, a heterocyklylu, přičemž každý je případně substituovaný halogenem, kyano skupinou, nitro skupinou, karboxyalkylem, Ci-Cj₂ alkoxylem, arylem obsahujícím 1 až 3 samostatné nebo spojené kruhy, a majícím 6 až 18 atomů uhlíku v kruhu, aryloxylem jako je fenoxy, heterocyklylem, heterocyklyloxylem, Ci-C_]2 alkylem nebo NH₂ skupinou; kde heterocyklyl může být aromatický nebo částečně nebo úplně nasycený, mající 4 až 8 atomů v kruhu, výhodněji 5 až 6 atomů v kruhu s jedním nebo více heteroatomy vybranými z dusíku, síry a kyslíku; nebo COR^a je nesubstituovaná aminokyselina; nebo

- NH₂ skupina vzorce Via a -OH skupina vzorce VIb jsou derivatizované za vzniku derivátů sloučeniny, kde -CHNH₂ skupina Vlaje nahrazena skupinou -CHNHX] nebo -CHN(Xi)₂ skupinou, a kde —CHOH skupina VIb je nahrazena skupinou —CHOX], kde Xj je jak definováno v předcházejícím nároku; aderiváty, kde skupina -NCH₃ v poloze 12 je nahrazena skupinou -NH nebo -NCH₂CH₃; s výjimkou sloučeniny vzorce

- 100CZ 304749 B6

18. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 17, kde R⁵ znamená acyloxyskupinu s až 4 atomy uhlíku.

19. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 18, v němž R⁵ znamená acetyloxyskupinu.

20. Ecteinascidinová sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 17,18 nebo 19, kde R⁷ a R⁸ společně tvoří skupinu -O-CH₂-O-.

21. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 17, kde acylová skupina znamená skupinu obecného vzorce -CO-R³, kde R^a znamená alkyl, alkenyl, arylalkyl, arylalkenyl nebo heterocyklyl, každý případně substituovaný halogenem, kyano skupinou, nitroskupinou, karboxyalkylem, alkoxyskupinou, arylem, aryloxyskupinou, heterocyklyl skupinou, heterocyklyloxy-skupinou, alkylovou nebo NH₂ skupinou, nebo -CO-R³ je nesubstituovaná aminokyselina.

22. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 21, kde R^a znamená alkyl, halogenalkyl, alkoxyalkyl, halogenalkoxyalkyl, arylalkenyl, halogenalkylarylalkenyl, arylalkyl, nebo alkenyl; nebo CO-R^a je nesubstituovaná aminokyselina.

23. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 21, kde R^a-CO- znamená acetyl, trifluoracetyl, isovaleryl, trans-3-(tri-fluormethyl)cinnamoyl, heptafluorbutyryl, dekanoyl, trans-cinnamoyl, butyryl, 3-chlorpropyonyl, cinnamoyl, 4-methylcinnamoyl, hydrocinnamoyl, trans-hexenoyl, alanyl, arginyl, aspartyl, asparagyl, cystyl, glutamyl, glutaminyl, glycyl, histidyl, hydroxyprolyl, isoleucyl, leucyl, lysyl, methionyl, fenylalanyl, prolyl, seryl, threonyl, tryptofyl, tyrosyl, valyl nebo ftalimidoderivát.

24. Ecteinascidinová sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 21 až 23, kde CO-R^aje odvozena od nesubstituované aminokyseliny.

25. Ecteinascidinová sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 17 až 20, kde O-acylderivát znamená alifatický O-acylderivát.

26. Ecteinascidinová sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 17 až 25, kde R^14a a R^14b znamenají atom vodíku.

27. Ecteinascidinová sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 17 až 26, kde R¹⁵ znamená atom vodíku.

28. Ecteinascidinová sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 17 až 27 obecného vzorce XVIII kde R²¹ znamená atom vodíku, skupinu OH nebo CN; a R¹ a R⁴ tvoří skupinu obecného vzorce Via nebo VIb

- 101 CZ 304749 B6

4* hnh₂

H OH (Via) (VIb) kde NH₂ skupina vzorce (Via) a OH skupina vzorce (VIb) jsou acylované acylovou skupinou vzorce COR^a, kde R^a je vybrán z alkylu, alkenylu, arylalkylu, arylalkenylu, a heterocyklu, kde každý je případně substituovaný halogenem, kyano, nitro, karboxyalkyl, alkoxy, aryl, aryloxy,

5 heterocyklyl skupinou, heterocyklyloxy, alkyl nebo NH₂ skupinou; nebo COR^a je nesubstituovaná aminokyselina.

29. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 1, kterou je

Me.

_H NHAc ₀Me AcO \ 3

Me

O₍

H NH

OMe

Me

102CZ 304749 B6 >- (CH₂)_aCH₃ >-(CH₂)₁₄CH₃

103 CZ 304749 B6

- 104CZ 304749 B6 ./

- 105 CZ 304749 B6

-106CZ 304749 B6

- 107CZ 304749 B6

108CZ 304749 B6

- 109CZ 304749 B6

-110CZ 304749 B6 >........(CH₂)₆CH₃ >-{CH₂)₁₄CH₃

-111

- 112CZ 304749 B6

Me

-113 CZ 304749 B6

- 114CZ 304749 B6

- 115CZ 304749 B6

- 116CZ 304749 B6

117CZ 304749 B6

30. Ecteinascidinová sloučenina, podle nároku 1, kterou je sloučenina 4b (4b)

- 118CZ 304749 B6

31. Ecteinascidinová sloučenina, podle nároku 1, kterou je sloučenina 4h

33. Ecteinascidinová sloučenina vzorce, vzorce (XVIIb),

-119CZ 304749 B6 kde Rl a R4 společně tvoří skupinu vzorce Via nebo VIb (Via) (VIb) kde -CHNH₂ skupina vzorce (Via) je nahrazena skupinou -CHNHX, nebo -CHN(Xi)₂, a kde -CHOH skupina (VIb) je nahrazena skupinou -CHOX, kde každý Xj je nezávisle nesubstituovaný arylacyl, kde acyl je alkanoyl jako Ci-C₆ alkanoyl, nebo substituovaný nebo nesubstituovaný heterocyklylacyl, kde heterocyklyl může být aromatický nebo částečně nebo úplně nasycený, mající 4 až 8 atomů v kruhu, výhodněji 5 až 6 atomů v kruhu s jedním nebo více heteroatomy vybranými z dusíku, síry a kyslíku, a kde acyl je alkanoyl jako C|-C_ňalkanoyl;

R⁵ je vodík, -OH nebo O-acyl, kde acylová skupina je tvořena skupinou vzorce -COR^a, kde R^a je vybrán z Ci galkylu, C!_₁₂alkoxylu, C_{2 18}alkenylu, arylalkylu, který má alkylovou skupinou mající 1 až 4 atomy uhlíku, která je substituovaná arylem majícím 6 až 10 atomů uhlíku, a kteiý je nesubstituovaný nebo substituovaný 1 až 5 substituenty, arylu, arylalkenylu, jako je cinnamoyl, a heterocyklylu, přičemž každý je případně substituovaný halogenem, kyano skupinou, nitro skupinou, karboxyalkylem, Ci-Cj₂ alkoxylem, arylem obsahujícím 1 až 3 samostatné nebo spojené kruhy, a majícím 6 až 18 atomů uhlíku v kruhu, aryloxylem jako je fenoxy, heterocyklylem, heterocyklyloxylem, Ci-C_]2 alkylem, amino skupinou nebo substituovanou aminoskupinou; kde heterocyklyl může být aromatický nebo částečně nebo úplně nasycený, mající 4 až 8 atomů v kruhu, výhodněji 5 až 6 atomů v kruhu s jedním nebo více heteroatomy vybranými z dusíku, síry a kyslíku; nebo COR^aje aminokyselina; nebo

R⁷ je -OCH3 a R⁸ je -OH nebo R⁷ a R⁸ společně tvoří skupinu -O-CH2-O;

R^l4a a R^l4b jsou oba-H nebo jeden je -H a druhý je -OH, -OCH₃ nebo -OCH₂CH₃ nebo R^14a a R^14b společně tvoří ketoskupinu;

R¹⁵ je-H nebo-OH;

R²¹ je —H, —OH nebo —CN; a deriváty, kde skupina-NCH₃ v poloze 12 je nahrazena skupinou -NH nebo -NCH₂CH₃.

34. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 33, kde R⁷ a R⁸ společně tvoří skupinu vzorce -O-CH2-O.

35. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 33 nebo 34, kde heterocyklylacyl je heteroaromatický acyl.

36. Ecteinascidinová sloučenina podle nároku 33 nebo 34, kde heterocyklus substituovaného nebo nesubstituovaného heterocyklylacylu má 4 až 8 atomů v kruhu, výhodněji 5 až 6 atomů v kruhu s jedním nebo více heteroatomy vybranými z dusíku, síry a kyslíku, aje to aromatický heterocyklyl, částečně nebo zcela nasycený heterocyklyl.

-120CZ 304749 B6

37. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje ecteinascidinovou sloučeninu podle kteréhokoliv z předcházejících nároků 1 až 36 společně s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.

5

38. Použití ecteinascidinové sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 36 pro výrobu farmaceutického přípravku pro léčení nádoru.

39. Použití podle nároku 38, kdy farmaceutický přípravek pro léčbu nádoru je určen pro léčbu nádoru v kombinaci s dalším léčivem.