CZ30398A3 - Benzimidazolové sloučeniny, farmaceutický prostředek obsahující tyto sloučeniny a použití těchto sloučenin jako chemoterapeutických činidel - Google Patents
Benzimidazolové sloučeniny, farmaceutický prostředek obsahující tyto sloučeniny a použití těchto sloučenin jako chemoterapeutických činidel Download PDFInfo
- Publication number
- CZ30398A3 CZ30398A3 CZ98303A CZ30398A CZ30398A3 CZ 30398 A3 CZ30398 A3 CZ 30398A3 CZ 98303 A CZ98303 A CZ 98303A CZ 30398 A CZ30398 A CZ 30398A CZ 30398 A3 CZ30398 A3 CZ 30398A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- group
- compound
- carboxamide
- benzimidazole
- alkyl
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 193
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 title claims description 12
- 125000003785 benzimidazolyl group Chemical class N1=C(NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 title claims description 4
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 title description 8
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 title description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 61
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 48
- -1 CH2CH2OH) Chemical class 0.000 claims abstract description 44
- 102100023712 Poly [ADP-ribose] polymerase 1 Human genes 0.000 claims abstract description 43
- 229920000776 Poly(Adenosine diphosphate-ribose) polymerase Polymers 0.000 claims abstract description 40
- 101710179684 Poly [ADP-ribose] polymerase Proteins 0.000 claims abstract description 38
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims abstract description 34
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims abstract description 27
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 25
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 24
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 22
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 20
- 125000002768 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 18
- JJDMKDXGNVJWCD-UHFFFAOYSA-N 1h-benzimidazole-4-carboxamide Chemical class NC(=O)C1=CC=CC2=C1N=CN2 JJDMKDXGNVJWCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims abstract description 11
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 11
- 125000000954 2-hydroxyethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 claims abstract description 9
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims abstract description 9
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 9
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 9
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 claims abstract description 9
- 125000003107 substituted aryl group Chemical group 0.000 claims abstract description 9
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 claims abstract description 8
- 102000012338 Poly(ADP-ribose) Polymerases Human genes 0.000 claims abstract description 3
- 108010061844 Poly(ADP-ribose) Polymerases Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 claims abstract 6
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 claims abstract 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 119
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 91
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 36
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 21
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 21
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 19
- 125000006297 carbonyl amino group Chemical group [H]N([*:2])C([*:1])=O 0.000 claims description 18
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 18
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 17
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 17
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 13
- KKTUQAYCCLMNOA-UHFFFAOYSA-N 2,3-diaminobenzoic acid Chemical compound NC1=CC=CC(C(O)=O)=C1N KKTUQAYCCLMNOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 12
- 150000003536 tetrazoles Chemical group 0.000 claims description 11
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 10
- MKRGNKRNZLHINT-UHFFFAOYSA-N 2-(4-methoxyphenyl)-1h-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C1=NC2=CC=CC(C(N)=O)=C2N1 MKRGNKRNZLHINT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 9
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 claims description 8
- KOUGHMOSYJCJLE-UHFFFAOYSA-N chembl131719 Chemical compound N=1C=2C(C(=O)N)=CC=CC=2NC=1C1=CC=C(O)C=C1 KOUGHMOSYJCJLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 8
- JCMGIFLIMIXLTP-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-1h-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound C1=CC(C(N)=O)=C2NC(C)=NC2=C1 JCMGIFLIMIXLTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 108010049290 ADP Ribose Transferases Proteins 0.000 claims description 7
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 claims description 7
- CORDOWZJZKLEHO-UHFFFAOYSA-N 2-(4-aminophenyl)-1h-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound N1C=2C(C(=O)N)=CC=CC=2N=C1C1=CC=C(N)C=C1 CORDOWZJZKLEHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- BWXFCEOBQGOLJF-UHFFFAOYSA-N 2-[3-(trifluoromethyl)phenyl]-1h-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound N1C=2C(C(=O)N)=CC=CC=2N=C1C1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 BWXFCEOBQGOLJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 6
- NVVWVYYHTKCIAE-UHFFFAOYSA-N 2-(3'-methoxyphenyl) benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound COC1=CC=CC(C=2NC3=CC=CC(=C3N=2)C(N)=O)=C1 NVVWVYYHTKCIAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- HRZOSZZKYDGKSC-UHFFFAOYSA-N 2-(4-cyanophenyl)-1h-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound N1C=2C(C(=O)N)=CC=CC=2N=C1C1=CC=C(C#N)C=C1 HRZOSZZKYDGKSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- OBBJGEVEIULNEO-UHFFFAOYSA-N 2-phenyl-1h-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound N=1C=2C(C(=O)N)=CC=CC=2NC=1C1=CC=CC=C1 OBBJGEVEIULNEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 5
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 5
- XIQDETZLOXHMNE-UHFFFAOYSA-N 1-benzoyl-2-(4-methoxyphenyl)benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C1=NC2=C(C(N)=O)C=CC=C2N1C(=O)C1=CC=CC=C1 XIQDETZLOXHMNE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- AXPSEYPVFKMYID-UHFFFAOYSA-N 2-(4-nitrophenyl)-1h-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound N1C=2C(C(=O)N)=CC=CC=2N=C1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 AXPSEYPVFKMYID-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- VANPTVOCOWCFLO-UHFFFAOYSA-N 2-(trifluoromethyl)-1h-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC2=C1NC(C(F)(F)F)=N2 VANPTVOCOWCFLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- PMISIOUALHNLES-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(trifluoromethyl)phenyl]-1h-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound N1C=2C(C(=O)N)=CC=CC=2N=C1C1=CC=CC=C1C(F)(F)F PMISIOUALHNLES-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- NTGUQSZMGNQYBK-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(trifluoromethyl)phenyl]-1h-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound N1C=2C(C(=O)N)=CC=CC=2N=C1C1=CC=C(C(F)(F)F)C=C1 NTGUQSZMGNQYBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 102000009062 ADP Ribose Transferases Human genes 0.000 claims description 4
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims description 4
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims description 4
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 claims description 4
- KXFVEKRQOAGNIL-UHFFFAOYSA-N 2-(4-methoxyphenyl)-n-methyl-1h-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound N1C=2C(C(=O)NC)=CC=CC=2N=C1C1=CC=C(OC)C=C1 KXFVEKRQOAGNIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- HKEVHFACOUZGFC-UHFFFAOYSA-N C1=CC(OC)=CC=C1C(NC1=C2C(=O)NC(O)=O)=NC1=CC=C2CC1=CC=CC=C1 Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(NC1=C2C(=O)NC(O)=O)=NC1=CC=C2CC1=CC=CC=C1 HKEVHFACOUZGFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N Carbamic acid Chemical group NC(O)=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 3
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 3
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 3
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 229910000318 alkali metal phosphate Inorganic materials 0.000 claims 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims 2
- ZRIUUUJAJJNDSS-UHFFFAOYSA-N ammonium phosphates Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]P([O-])([O-])=O ZRIUUUJAJJNDSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- RQKYHDHLEMEVDR-UHFFFAOYSA-N oxo-bis(phenylmethoxy)phosphanium Chemical compound C=1C=CC=CC=1CO[P+](=O)OCC1=CC=CC=C1 RQKYHDHLEMEVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 125000003917 carbamoyl group Chemical group [H]N([H])C(*)=O 0.000 claims 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 claims 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 abstract description 11
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 abstract description 11
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 abstract description 8
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 abstract description 6
- 102000011724 DNA Repair Enzymes Human genes 0.000 abstract 1
- 108010076525 DNA Repair Enzymes Proteins 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 108
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 70
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 63
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 52
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N DMSO Substances CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 45
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 45
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 39
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 39
- 239000000047 product Substances 0.000 description 37
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 34
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 29
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 28
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 26
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 26
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 26
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 22
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 19
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000012661 PARP inhibitor Substances 0.000 description 17
- 229940121906 Poly ADP ribose polymerase inhibitor Drugs 0.000 description 17
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 229960004050 aminobenzoic acid Drugs 0.000 description 15
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 15
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 14
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 description 14
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 12
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 12
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- BPEGJWRSRHCHSN-UHFFFAOYSA-N Temozolomide Chemical compound O=C1N(C)N=NC2=C(C(N)=O)N=CN21 BPEGJWRSRHCHSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 229960004964 temozolomide Drugs 0.000 description 11
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 10
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 10
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 9
- 159000000021 acetate salts Chemical class 0.000 description 9
- 150000001556 benzimidazoles Chemical class 0.000 description 9
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 9
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 description 9
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 9
- JWODGKSSAMJXMR-UHFFFAOYSA-N 4,5-dioxo-1-propan-2-ylpyrrolidine-3-carbonitrile Chemical compound CC(C)N1CC(C#N)C(=O)C1=O JWODGKSSAMJXMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 8
- JJPIVRWTAGQTPQ-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3-nitrobenzoic acid Chemical compound NC1=C(C(O)=O)C=CC=C1[N+]([O-])=O JJPIVRWTAGQTPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 7
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 7
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 6
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KXDAEFPNCMNJSK-UHFFFAOYSA-N Benzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC=C1 KXDAEFPNCMNJSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 6
- 150000003936 benzamides Chemical class 0.000 description 6
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 6
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 6
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 6
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 6
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 6
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 6
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 6
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 5
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 description 5
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 5
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 5
- FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J sodium diphosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 5
- VVQNAFBGAWCMLU-UHFFFAOYSA-N 1h-benzimidazole-4-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC2=C1N=CN2 VVQNAFBGAWCMLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 4
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 4
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 4
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 4
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LVUZVFVJPPDROZ-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-1h-benzimidazole-4-carboxylic acid Chemical compound C1=CC(C(O)=O)=C2NC(C)=NC2=C1 LVUZVFVJPPDROZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VKPLPDIMEREJJF-UHFFFAOYSA-N 3-methoxybenzamide Chemical compound COC1=CC=CC(C(N)=O)=C1 VKPLPDIMEREJJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091026813 Poly(ADPribose) Proteins 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 230000005025 clonogenic survival Effects 0.000 description 3
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 description 3
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 238000009650 gentamicin protection assay Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=N1 PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 3
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 3
- IGLWGHRTQOYFDV-UHFFFAOYSA-N 2-carbamoyl-3-nitrobenzoic acid Chemical compound NC(=O)C1=C(C(O)=O)C=CC=C1[N+]([O-])=O IGLWGHRTQOYFDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LZGYSXDYTDCYCR-UHFFFAOYSA-N 2-phenyl-1h-benzimidazole-4-carboxylic acid Chemical compound N=1C=2C(C(=O)O)=CC=CC=2NC=1C1=CC=CC=C1 LZGYSXDYTDCYCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GSCPDZHWVNUUFI-UHFFFAOYSA-N 3-aminobenzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC(N)=C1 GSCPDZHWVNUUFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NGMMGKYJUWYIIG-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxybenzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC(O)=C1 NGMMGKYJUWYIIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRNWOUGRCWSEMX-KEOHHSTQSA-N ADP-beta-D-ribose Chemical compound C([C@H]1O[C@H]([C@@H]([C@@H]1O)O)N1C=2N=CN=C(C=2N=C1)N)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SRNWOUGRCWSEMX-KEOHHSTQSA-N 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- 230000005778 DNA damage Effects 0.000 description 2
- 231100000277 DNA damage Toxicity 0.000 description 2
- 239000012623 DNA damaging agent Substances 0.000 description 2
- 230000033616 DNA repair Effects 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091081548 Palindromic sequence Proteins 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 2
- RWZYAGGXGHYGMB-UHFFFAOYSA-N anthranilic acid Chemical compound NC1=CC=CC=C1C(O)=O RWZYAGGXGHYGMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 2
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 125000005392 carboxamide group Chemical group NC(=O)* 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 2
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 2
- 229940043239 cytotoxic antineoplastic drug Drugs 0.000 description 2
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LORVXNYJRCVWLH-UHFFFAOYSA-N methyl 2-[4-(trifluoromethyl)phenyl]-1h-benzimidazole-4-carboxylate Chemical compound N=1C=2C(C(=O)OC)=CC=CC=2NC=1C1=CC=C(C(F)(F)F)C=C1 LORVXNYJRCVWLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000003439 radiotherapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical class O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000005292 vacuum distillation Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- KRCCCWVXRVDONW-UHFFFAOYSA-N 1,3-benzoxazole-4-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC2=C1N=CO2 KRCCCWVXRVDONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XIZCDQOKKYYCRH-UHFFFAOYSA-N 1h-benzimidazole-2-carboxamide Chemical class C1=CC=C2NC(C(=O)N)=NC2=C1 XIZCDQOKKYYCRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KKTUQAYCCLMNOA-UHFFFAOYSA-M 2,3-diaminobenzoate Chemical compound NC1=CC=CC(C([O-])=O)=C1N KKTUQAYCCLMNOA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OUYLJUGKAHFFAR-UHFFFAOYSA-N 2-(4-methoxyphenyl)-1-methylbenzimidazole-4-carboxamide Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C1=NC2=C(C(N)=O)C=CC=C2N1C OUYLJUGKAHFFAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DEOIUABBTFOUKH-UHFFFAOYSA-N 2-(4-nitrophenyl)-1h-benzimidazole-4-carboxylic acid Chemical compound N=1C=2C(C(=O)O)=CC=CC=2NC=1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 DEOIUABBTFOUKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MXIUWSYTQJLIKE-UHFFFAOYSA-N 2-(trifluoromethyl)benzoyl chloride Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC=C1C(Cl)=O MXIUWSYTQJLIKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical compound CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RUJYJCANMOTJMO-UHFFFAOYSA-N 3-(trifluoromethyl)benzoyl chloride Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(C(Cl)=O)=C1 RUJYJCANMOTJMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RUQIUASLAXJZIE-UHFFFAOYSA-N 3-methoxybenzoyl chloride Chemical compound COC1=CC=CC(C(Cl)=O)=C1 RUQIUASLAXJZIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OXZYBOLWRXENKT-UHFFFAOYSA-N 4-(trifluoromethyl)benzoyl chloride Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=C(C(Cl)=O)C=C1 OXZYBOLWRXENKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USEDMAWWQDFMFY-UHFFFAOYSA-N 4-cyanobenzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=C(C#N)C=C1 USEDMAWWQDFMFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SKDHHIUENRGTHK-UHFFFAOYSA-N 4-nitrobenzoyl chloride Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(C(Cl)=O)C=C1 SKDHHIUENRGTHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PWJFNRJRHXWEPT-UHFFFAOYSA-N ADP ribose Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(O)C(O)C(O)C=O)C(O)C1O PWJFNRJRHXWEPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005730 ADP ribosylation Effects 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONWGRYXSLTXUDZ-UHFFFAOYSA-N C1=CC(OC)=CC=C1C1=NC2=C(C(O)=O)C=CC=C2N1 Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C1=NC2=C(C(O)=O)C=CC=C2N1 ONWGRYXSLTXUDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005971 DNA damage repair Effects 0.000 description 1
- 231100001074 DNA strand break Toxicity 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 101001113483 Homo sapiens Poly [ADP-ribose] polymerase 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000007093 Leukemia L1210 Diseases 0.000 description 1
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- BXDZOYLPNAIDOC-UHFFFAOYSA-N N-[5-[(5-tert-butyl-1,3-oxazol-2-yl)methylsulfanyl]-1,3-thiazol-2-yl]-1-[2-[2-[2-[2-[2-[[2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxoisoindol-4-yl]amino]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethylamino]-2-oxoethyl]piperidine-4-carboxamide Chemical compound CC(C)(C)c1cnc(CSc2cnc(NC(=O)C3CCN(CC(=O)NCCOCCOCCOCCNc4cccc5C(=O)N(C6CCC(=O)NC6=O)C(=O)c45)CC3)s2)o1 BXDZOYLPNAIDOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- MXMOTZIXVICDSD-UHFFFAOYSA-N anisoyl chloride Chemical compound COC1=CC=C(C(Cl)=O)C=C1 MXMOTZIXVICDSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940058303 antinematodal benzimidazole derivative Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 1
- CHCFOMQHQIQBLZ-UHFFFAOYSA-N azane;phthalic acid Chemical compound N.N.OC(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O CHCFOMQHQIQBLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007514 bases Chemical group 0.000 description 1
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- ILAHWRKJUDSMFH-UHFFFAOYSA-N boron tribromide Chemical compound BrB(Br)Br ILAHWRKJUDSMFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004657 carbamic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000003857 carboxamides Chemical class 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000010307 cell transformation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000007810 chemical reaction solvent Substances 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000030609 dephosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006209 dephosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 1
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 description 1
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000005251 gamma ray Effects 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 230000008316 intracellular mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- DOTKOAHLDHXKOF-UHFFFAOYSA-N methyl 2-(4-methoxyphenyl)-1h-benzimidazole-4-carboxylate Chemical compound N=1C=2C(C(=O)OC)=CC=CC=2NC=1C1=CC=C(OC)C=C1 DOTKOAHLDHXKOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDCLJQZLTMJECA-UHFFFAOYSA-N methyl 2-amino-3-nitrobenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1N HDCLJQZLTMJECA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HGDDYLPGUIZRHE-UHFFFAOYSA-N methyl 2-phenyl-1h-benzimidazole-4-carboxylate Chemical compound N1C=2C(C(=O)OC)=CC=CC=2N=C1C1=CC=CC=C1 HGDDYLPGUIZRHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012022 methylating agents Substances 0.000 description 1
- 230000001035 methylating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013081 microcrystal Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000006225 natural substrate Substances 0.000 description 1
- 230000017066 negative regulation of growth Effects 0.000 description 1
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 description 1
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 description 1
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 235000011837 pasties Nutrition 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 230000008823 permeabilization Effects 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920000137 polyphosphoric acid Polymers 0.000 description 1
- 230000009290 primary effect Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/415—1,2-Diazoles
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
- C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
- C07D235/06—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/4164—1,3-Diazoles
- A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/66—Phosphorus compounds
- A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
- C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
- C07D235/06—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 2
- C07D235/08—Radicals containing only hydrogen and carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
- C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
- C07D235/06—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 2
- C07D235/10—Radicals substituted by halogen atoms or nitro radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
- C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
- C07D235/06—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 2
- C07D235/12—Radicals substituted by oxygen atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
- C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
- C07D235/06—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 2
- C07D235/14—Radicals substituted by nitrogen atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
- C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
- C07D235/06—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 2
- C07D235/16—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
- C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
- C07D235/18—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with aryl radicals directly attached in position 2
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Data Exchanges In Wide-Area Networks (AREA)
Description
Benzimidazolové sloučeniny, farmaceutický prostředek obsahující tyto sloučeniny a použití těchto sloučenin jako chemoterapeutických činidel
Oblast techniky
Vynález se týká určitých nových benzimidazolových sloučenin, které jsou předmětem zájmu z toho důvodu, že jsou přinejmenším potenciálně vhodné jako chemoterapeutická činidla vzhledem k jejich schopnosti inhibovat aktivitu enzymu poly-ADP-ribosyltransferázy (EC 2.4.2.30), která je rovněž známa pod označením póly(ADP-ribóza)-polymeráza, všeobecně označovaná jako ADPRT nebo PARP. Tato všeobecně používaná zkratka PARP bude používána v celém textu tohoto vynálezu.
Dosavadní stav techniky
Pokud se týče dosavadního stavu techniky, potom přinejmenším u vyšších organizmů je o enzymu póly ADP-ribosyltransferáze známo, že katalyzuje přenos ADP-ribosové části z oxidované formy, NAD+, nikotinamidadenindinukleotidu na nukleární akceptorové proteiny, přičemž se tvoří homo-ADP-ribosové polymery, a dále je známo, že tento proces se vyskytuje u řady celulárních příhod, jako je například oprava DNA poškození, vývoj celulární diferenciace, transformace buněk onkogeny a genová exprese. Společným znakem u celé řady těchto procesů j e tvorba a oprava poruch DNA řetězce a toto působení, do kterého je zapojen PARP enzym, se jeví jako faktor opětného spojení DNA řetězce zprostředkované ligázou
II. Ve většině případů bylo zjištěno, že funkce póly
ADP-ríbosylace se v těchto případech vyskytla v důsledku použití inhibitorů PARP enzymu, a tato skutečnost vedla k závěrům, že tyto inhibitory, tím, že jsou zapojeny do intracelulárního mechanizmu DNA opravy, mohou mít vhodný chemoterapeutický účinek pokud by byly schopné modifikovat charakteristiky souvisící s odolností vůči léčení a dále potenciovat nebo zvyšovat účinnost cytotoxických léčiv při chemoterapii nebo ozařování při radioterapii, kde primární účinek tohoto léčení spočívá v tom, že se dosáhne DNA poškození u cílových buněk, jako je tomu například při mnoha formách protinádorové terapie.
V této souvislosti je třeba uvést, že z dosavadního stavu techniky je známo několik skupin PARP inhibitorů, včetně benzamidových sloučenin a různých nikotinamidových a benzamidových analogů, zejména jsou v tomto směru známé
3-substituované bezamidy s malými substitučními skupinami, jako je například 3-aminoskupina, 3-hydroxyskupina a 3-methoxyskupina. PARP inhibiční účinek určitých N-substituovaných benzamidových sloučenin je například uváděn v evropském patentu EP-A-0 305 008, kde je rovněž navrhováno použití těchto sloučenin v medicíně pro zvýšení cytotoxicity radiace nebo jako chemoterapeutických léčiv.
Vzhledem k možnosti použití benzamidových sloučenin jako chemoterapeutických činidel byla podle různých studií prováděných s těmito sloučeninami, o kterých je známo, že inhibují PARP inhibiční účinek, potvrzena skutečnost, že tyto sloučeniny mohou potenciovat cytotoxicitu u celé řady protinádorových činidel in vitro, jako je například bleomycin a methylační léčiva. Konkrétnější vymezenější výsledky potom dále ukázaly, že tyto benzamidové sloučeniny mohou rovněž potenciovat účinnost cytotoxických léčiv in • «
vivo, i když požadované dávky k dosažení tohoto účinku se jeví jako příliš vysoké (například v oblasti 0,5 gramu/kilogram na jednu dávku v případě 3-aminobenzamidu), takže se zde mohou vyskytnout s tím souvisící problémy týkající se přípravy vhodných farmaceutických prostředků a přípravků a s omezeními týkajícími se zamezení toxicity. Kromě toho je třeba uvést, že podle dosavadního stavu techniky bylo zjištěno, že celá řada známých benzamídových sloučenin vykazuje jednoznačně účinnost jako radiosenzitizéry, což znamená, že například zvyšuje ničení nádorových buněk vyvolané ionizačním zářením jak in vitro tak in vivo, přičemž se předpokládá, že v mnoha případech tento účinek souvisí s tím, že tyto sloučeniny působí jako PARP inhibitory a jako látky zapojené do procesu DNA oprav.
Ovšem bez ohledu na existující výsledky testů in vivo a in vitro, podle kterých bylo zjištěno, že PARP inhibitory mají značný potenciál jako vhodná chemoterapeutická léčiva, což si zasluhuje dalších klinických vyhodnocení, například v souvislosti s nádorovou terapií, je ale třeba uvést, že v současné době dostupné PARP inhibitory nejsou považovány zatím za zcela vhodné látky aby mohly představovat možné kandidáty léčiv, takže v tomto oboru stále existuje potřeba nalézt a vyvinout větší skupinu sloučenin, které by byly potenciálně vhodné jako látky, které projevují PARP inhibiční vlastnosti.
Podstata vynálezu
Podle předmětného vynálezu byla identifikovány nová skupina nebo řada sloučenin, které jsou zajímavé jako PARP inhibitory, přičemž tyto sloučeniny jsou využitelné v medicíně, zejména je možno je použit pro podávání ve
λ' spojení s přinejmenším určitými cytotoxickými léčivy nebo radioterapeutickými metodami pro zvýšení cytotoxické účinnosti těchto látek nebo metod. Všeobecně je možno uvést, že v rozsahu sloučenin podle předmětného vynálezu jsou určité benzimidazolové deriváty, konkrétně je možno uvést benzimidazol-4-karboxamidové sloučeniny, které budou definovány dále. Vzhledem ke struktuře těchto sloučenin je • zřejmé, že mnoho z těchto sloučenin je zejména dobře přizpůsobitelných ke konkurování s přirozeným substrátem
- NAD+ pro PARP enzym.
Podle prvního aspektu se tedy předmětný vynález týká použití sloučenin definovaných v tomto popisu pro přípravu léčiva nebo veterinárního přípravku aplikovatelného pro inhibování aktivity enzymu póly-(ADP-ribózy)polymerázy nebo PARP (rovněž označovanému jako ADP-ribosyltransferáza neboli ADPRT), přičemž toto inhibování enzymu představuje součást terapeutického léčení, přičemž tato sloučenina představuje aktivní inhibiční činidlo PARP enzymu a touto sloučeninou je benzimidazol-4-karboxamid obecného vzorce I :
nebo farmaceuticky přijatelnou sůl a/nebo prekurzorovou formu této sloučeniny, přičemž ve výše uvedeném obecném vzorce I:
R je zvolen ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu (jako například CH2CH2OH), acylovou skupinu (jako je například acetylová skupina nebo benzoylová skupina) a případně substituovanou arylovou skupinu (jako je například fenylová skupina) nebo aralkylovou skupinu (jako je například benzylová skupina nebo karboxybenzylová skupina), a
R’ je zvolen ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu (jako například CH2CH2OH), acylovou skupinu (jako je například acetylová skupina nebo benzoylová skupina) a případně substituovanou arylovou skupinu (jako je například fenylová skupina) nebo aralkylovou skupinu (jako je například benzylová skupina nebo karboxybenzylová skupina).
Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží použití benzimidazolových sloučenin, které mají následující obecný vzorec I:
nebo farmaceuticky přijatelné soli odvozené od této sloučeniny a/nebo prekurzorové formy této sloučeniny, ve kterém :
všechny substituenty mají výše definovaný význam, s tou podmínkou, že :
R’ neznamená případně substituovanou aralkylovou skupinu, a
R neznamená 4’-methansulfonyloxy-2’-methoxyfenylovou skupinu, při terapii jako účinné farmaceutické látky, zejména, ovšem nikoliv výlučně, jako PARP inhibitorů.
Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží nové benzimidazolové sloučeniny, které mají uvedený obecný strukturní vzorec I, nebo farmaceuticky přijatelných solí odvozených od těchto sloučenin a/nebo prekurzorových forem těchto sloučenin, ve kterém jednotlivé substituenty mají stejný význam jako bylo definováno výše s tou podmínkou, že R’ neznamená případně substituovanou aralkylovou skupinu a R neznamená 4’-methansulfonyloxy-2’-methoxyfenylovou skupinu nebo nesubstituovanou arylovou skupinu, jako je například fenylová skupina.
Alkylové skupiny, které jsou přítomny jako takové nebo jako součást jiných skupin, obvykle obsahují 1 až 8 atomů uhlíku, ve výhodném provedení podle vynálezu 1 až 6 atomů uhlíku a podle ještě výhodnějšího provedení 1 až 4 atomy uhlíku. Konkrétně je možno uvést, že v případě, kdy R a/nebo R’ představují alkylovou skupinu, potom se jedná obvykle o alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, jako je například methylová skupina, ethylová skupina, n-propylová skupina, i-propylová skupina, n-butylová skupina, t-butylová skupina nebo cyklohexylová skupina. V případě, kdy R a/nebo R’ znamená fenylovou skupinu nebo zahrnuje fenylovou skupinu, potom tato skupina může být substituována, zejména v poloze 4 (para), ovšem alternativně nebo navíc může být tato skupina substituována v poloze 2 a/nebo v poloze 3, například různými substituenty, mezi které je možno zařadit hydroxyskupinu, alkoxyskupinu (jako je například methoxyskupina nebo ethoxyskupina), dále kyanoskupinu, karboxyskupinu, amidovou skupinu, tetrazolovou skupinu, aminovou skupinu nebo substituovanou aminovou skupinu, skupinu CVj (jako je například CF^) nebo skupinu V, kde V znamená halogen.
V případech, kdy R’ znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu, potom mezi výhodné sloučeniny výše uvedeného strukturního vzorce I je možno zařadit sloučeniny, ve kterých R znamená fenylovou skupinu nebo benzylovou skupinu, které mají přinejmenším jeden substituent na benzenovém kruhu a tento substituent je vybrán ze souboru zahrnujícího hydroxyskupinu, alkoxyskupinu, N02, N3, NR^R^ (kde a Rg každý jednotlivě a na sobě nezávisle znamenají atom vodíku, alkylovou skupinu nebo alkoxyskupinu), dále NHCOR3 (kde R3 je alkylová skupina nebo arylová skupina), CO2R^ (kde R4 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu), amidovou skupinu (jako například skupinu CONH2), tetrazolovou skupinu, alkylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, skupinu CVj nebo V (kde V znamená halogen) a skupinu CN.
Konkrétně j sou výhodné podle předmětného vynálezu sloučeniny, ve kterých R představuje substituovanou fenylovou skupinu obecného strukturního vzorce II :
(Π) • · ve kterém R-^, R2 a Rg jsou každý nezávisle na sobě vybrány ze souboru zahrnujícího atom vodíku, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu, N02, N3, NR^Rg (kde R5 a Rg každý jednotlivě a na sobě nezávisle znamenají atom vodíku, alkylovou skupinu nebo alkoxyskupinu), dále NHCOR3 (kde R-j je alkylová skupina nebo arylová skupina), CO2R^ (kde R4 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu), amidovou skupinu (jako například skupinu CONH2), tetrazolovou skupinu, alkylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, skupinu CV3 nebo V (kde V znamená halogen) a skupinu CN.
Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží postup přípravy sloučeniny obecného strukturního vzorce I, který byl definován výše, ve kterém R znamená případně substituovanou fenylovou skupinu obecného strukturního vzorce II, který byl definován výše, přičemž podstata tohoto postupu spočívá v provedení reakce alkylesteru kyseliny 2,3-diaminobenzoové s chloridem arylkyseliny, přičemž takto získaný produkt se zpracuje kyselinou octovou při zvýšené teplotě, přičemž dojde k tvorbě benzimidazolového kruhu, a potom následuje reakce s kapalným amoniakem za vzniku amidového derivátu.
V případě, že R’ představuje substituovanou fenylovou skupinu, potom tato skupina má výhodně strukturní obecný vzorec III :
r8 (III) •4 44 • · · 4
4
Φ
Φ· • 44
4Φ • ·Φ
4
44Φ4
4 4 4φ • Φ4
4444
ve kterém :
Ry, Rg a R10 jsou každý nezávisle vybrán ze souboru zahrnujícího atom vodíku, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu, N02, Ng, NR^Rg (kde a Rg každý jednotlivě a na sobě nezávisle znamenají atom vodíku, alkylovou skupinu nebo alkoxyskupinu), dále NHCOR3 (kde R3 je alkylová skupina nebo arylová skupina), CO2R4 (kde R4 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu), amidovou skupinu (jako například skupinu C0NH2), tetrazolovou skupinu, alkylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, skupinu CV3 nebo V (kde V znamená halogen) a skupinu CN.
Sloučeniny výše uvedeného strukturního vzorce I, který byl definován výše, které mají aromatický kruh obsahující skupinu CN jako substituent, je možno v mnohých případech rovněž využít jako meziprodukty pro přípravu ostatních sloučenin podle předmětného vynálezu, neboř kyanoskupina jako substituent může být obvyklým způsobem převedena na řadu různých jiných funkčních skupin, včetně aminové skupiny, karboxylové skupiny, amidové skupina a tetrazolové skupiny, přičemž se použije běžně známých metod v tomto oboru.
Do rozsahu benzimidazolových sloučenin popisovaných v tomto vynálezu ve výhodném provedení náleží látky, které jsou z hlediska svého použití zvláště zajímavé, a sice (a) 2-methylbenzimidazol-4-karboxamíd, (b) benzimidazol-4-karboxamid, (c) 2-fenylbenzimidazol-4-karboxamid, (d) 2-(4’-methoxyfenyl)benzimidazol-4-karboxamid, (e) 2-(4’-trifluormethylfenyl)benzimidazol-4karboxamid
-· ·· ·· • · · • · • · • · · ·· *···
| ·· | ·· | |||
| • · | • · | • · | • | • |
| • · | • | • · | • · | |
| • · · | • · | ·«· | • | • |
| • · | • | • | • | • |
| • · | ···· | • · | • · |
(f) 2-(4’-hydroxyfenyl)benzimidazol-4-karboxamid, (g) 2-trifluormethylbenzimidazol-4-karboxamid, (h) 2-(4’-methoxyfenyl)-N-methylbenzimidazol-4karboxamid, (i) 2-(4’-nitrofenyl)benzimídazol-4-karboxamid, (j) 2-(4’-kyanofenyl)benzimidazol-4-karboxamid, (k) 2- (3 ’ -trifluormethylfenyl) benzimidazol-4karboxamid, (l) 2-(3’-methoxyfenyl)benzímídazol-4-karboxamid, (m) 2-(4’-methoxyfenyl)-l-N-benzoylbenzimidazol-4karboxamid, (n) 2-(4’-aminofenyl)benzimidazol-4-karboxamid, (o) 2-(2’-trifluormethylfenyl)benzimidazol-4karboxamid, (p) N-karboxybenzyl-2-(4’-methoxyfenyl)benzimidazol-
4-karboxamid.
V případě výše uvedených sloučenin podle předmětného vynálezu, u nichž se vyskytuje elektronově bohatý aromatický kruh, se předpokládá, že přinejmenším v některých případech může být karboxamidová skupina může být uzavřena do fixované konformace, která je zejména příznivá pro prezentování této sloučeniny jako inhibitoru NAD+ vazeb na PARP enzym, což souvisí s intramolekulární vodíkovou vazbou mezi dusíkem imidazolového kruhu a jedním z vodíkových atomů karboxamidové skupiny.
Jak již bylo výše uvedeno, do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží postup přípravy sloučenin, které jsou definovány výše (včetně meziproduktů, což přichází v úvahu v některých případech), a rovněž rozsah předmětného vynálezu zahrnuje terapeutické použiti těchto sloučenin pro léčení savců. Toto použití zahrnuje použití výše uvedených látek pro přípravu medicínských nebo veterinárních přípravků a farmaceutických prostředků obsahujících účinné PARP inhibiční množství účinné sloučeniny podle vynálezu pro podání pacientovi v kombinaci s cytotoxickým léčivem nebo radioterapeutickou metodou, přičemž účelem je zvýšení cytotoxické účinnosti těchto látek, resp. metod. Tyto přípravky nebo prostředky je možno připravit libovolnou běžně známou a používanou metodou podle dosavadního stavu techniky v oboru farmacie, přičemž tyto prostředky nebo přípravky jsou určeny pro podání libovolným vhodným způsobem, jako je například perorální aplikace, parenterální podání (včetně subkutánního, intramuskulárního nebo intravenózního podávání) nebo místní aplikace, přičemž metoda podávání, typ používaných přípravků nebo prostředků, resp. formulací, a dávkové množství je obecně určováno běžně známými a podrobnými návody používanými v souvislosti s chemoterapií nebo radioterapií za použití cytotoxických léčiv.
Při přípravě těchto farmaceutických prostředků ve formě sterilních kapalných přípravků pro parenterální použití je možno předem určené terapeuticky účinné ne-toxické množství každé jednotlivé sloučeniny, která je uvažována k použití, rozpustit ve fosfátovém pufrovacím slaném roztoku, přičemž tento přípravek je možno připravit v jednotkové dávkové formě a naplnit jej do zapečetěných ampuli, které jsou připraveny k použití. Všeobecně je možno rovněž uvést, že přinejmenším pokud se týče vodného roztoku koncentrace odpovídající maximálně 200 miligramům/mililitr jsou výhodné k použití podle předmětného vynálezu, ovšem množství a dávkovači metoda, které jsou potřebné k dosažení optimální účinnosti, se samozřejmě mohou měnit v širokém rozsahu a budou v každém jednotlivém případě záviset na • · • · • · stanovisku lékaře nebo veterináře, který ošetřuje daného pacienta nebo zvíře. V případech, kdy se uvedená sloučenina používá ve spojené s cytotoxickým léčivem, je možno toto cytotoxické léčivo podávat současně, přičemž je možno jej běžným způsobem inkorporovat do stejného farmaceutického prostředku nebo kompozice.
Jak již bylo výše uvedeno, projevují sloučeniny podle předmětného vynálezu přinejmenším účinnost jako PARP inhibitory, přičemž při in vitro testech, které budou popisovány v dalším textu, tyto sloučeniny vykazovaly pozitivní farmakologickou účinnost, o které se předpokládá, že reflektuje účinnost, kterou je možno zjistit in vivo v průběhu terapeutického klinického použití.
V dané souvislosti je třeba rovněž zdůraznit, že všude v popisu předmětného vynálezu, kde se popisují sloučeniny výše definovaného obecného vzorce I se tato zmínka rovněž vztahuje na jejich farmaceuticky přijatelné soli a jiné ostatní farmaceuticky přijatelné bioprekurzory (prekurzorové formy), kde to ovšem přichází v úvahu. Tímto výše uvedeným termínem prekurzor léčiva, který je použit v popisu předmětného vynálezu, se míní modifikovaná forma derivátu sloučeniny podle předmětného vynálezu nebo deriváty farmakologicky účinných sloučenin, které podléhají biologickému degradování in vivo a po podání se převedou takto na uvedenou účinnou sloučeninu, zejména po perorálním podání nebo po intravenózním podáni v průběhu terapeutického léčení savců. Tyto prekurzory léčiv se všeobecně používají z toho důvodu, neboť mají zvýšenou rozpustnost ve vodném prostředí, což napomáhá překonat problémy s jejich formulováním, a rovněž v některých případech je možno tímto způsobem dosáhnout relativně pomalého nebo kontrolovaného • · · · * · · · • · · • · ·
• · · · · · · • · ··· · · uvolňování účinné látky.
Prekurzor léčiva, který splňuje všechny farmakologické požadavky musí být ve vodě rozpustný derivát, který je netoxický a odpovídajícím způsobem stabilní v roztoku při fyziologické hodnotě pH, ovšem musí se samozřejmě jednat o látku, která se biologickými účinky rozpadá nebo konvertuje, například účinkem enzymatické degradace nebo v důsledku změny hodnoty pH v daném prostředí, na účinnou sloučeninu na místě, ve kterém je zapotřebí po jejím podání jejího účinku v průběhu terapie. V případě benzimidazolových sloučenin podle předmětného vynálezu je možno tyto formy prekurzorů léčiv dosáhnout převedením na karbamáty nebo deriváty aminokyselin, jako je například glycin nebo jiné aminokyselinové karbamátové deriváty, nebo na fosfátové deriváty. Tyto fosfátové deriváty je možno připravit tak, že jsou citlivé na enzymatickou defosforylaci in vivo, přičemž tyto formy jsou v současné době považovány za výhodné, zejména patří k výhodným provedením ve vodě rozpustné amonné soli nebo soli s alkalickými kovy těchto fosfátů. Tyto sloučeniny je možno v mnohých případech připravit běžným způsobem ze sloučenin výše uvedeného strukturního obecného vzorce I, které mají přinejmenším jednu hydroxylovou skupinu jako substituent, jako je tomu například v případě části R s aromatickým kruhem, reakcí s dibenzylfosfonátovou sloučeninou, ve výhodném provedení v přítomnosti terciární bazické sloučeniny, jako je například
N,N-diisopropylethylamin.
V případech, kdy R představuje fenylovou skupinu (nebo benzylovou skupinu) a kdy je nutné, aby substituent byl jiný než hydroxylová skupina, jako je například NO2, CC^H, CN, atd., na poloze 4’, což je nutné z hlediska dosaženi • · ·
uspokojivé PARP inhibiční účinnosti, může být hydroxylový substituent, podléhající fosforylaci nebo jiné prekurzorové modifikaci, k dispozici na jiné poloze aromatického kruhu, jako například na poloze 3’.
V případě všech ve vodě rozpustných prekurzorových forem, u kterých se předpokládá forma fosfátu, je karbamátová část nebo j iná prekurzorová část rozpouštěj ící se ve vodě složkou R nebo R’ výše uvedeného strukturního vzorce I.
Rovněž se předpokládá jako samozřejmé, že v případě všech sloučenin, které jsou v tomto textu uváděné a které mohou existovat ve více než jedné enantiomerní formě, všechny tyto formy, směsi obsahující tyto formy a jejich přípravy, a stejně tak i použití těchto všech forem náleží rovněž do rozsahu předmětného vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
V následuj ících příkladech budou blíže popsány benzimidazolové sloučeniny podle předmětného vynálezu, postupy jejich přípravy a rovněž tak jejich meziprodukty a postupy jejich přípravy a jednotlivé fáze těchto syntetických postupů s různými výhodnými sloučeninami, které jsou zejména zajímavé z hlediska předmětného vynálezu, a dále použití těchto sloučenin jako chemoterapeutických činidel a farmakologické testy a dosažené výsledky s těmito látkami, přičemž všechny tyto příklady jsou pouze ilustrativní a nijak neomezují rozsah předmětného vynálezu.
V prvním příkladu (příklad 1), je popsán postup přípravy různých meziproduktů, to znamená sloučenin, které • · • · jsou nutné pro přípravu benzimidazolových sloučenin podle předmětného vynálezu, které jsou dále popisovány v příkladech 2 až 6.
Přikladl
Postup přípravy sloučenin představujících meziprodukty.
(a) Postup přípravy 3-nitroftalamové kyseliny.
Podle tohoto provedení byl anhydrid kyseliny
3-nitroftalové (v množství 10,0 gramů, což je 50 mmolů) přidán po částech během intervalu 20 minut ke koncentrovanému vodnému roztoku amoniaku (15 mililitrů), přičemž takto vzniklá reakční směs byla potom promíchávána při teplotě 30 °C po dobu dalších 30 minut. Tímto způsobem vykrystalovala hmota ftalamátu amonného, který se při ochlazování usazoval v tomto světle žlutém roztoku, načež byla tato hmota oddělena a znovu rozpuštěna v minimálním množství teplé vody. K tomuto podílu byla potom přidávána koncentrovaná kyselina chlorovodíkové (v množství 4,5 mililitru), což bylo provedeno po kapkách a za míchání, načež byla výsledná pastovitá hmota promyta vodou a usušena ve vakuu a tímto způsobem shora uvedeným postupem byla připravena požadovaná 3-nitroftalamová kyselina ve formě jemného bílého prášku.
Výtěžek : 9,01 gramu (83 %) .
| Teplota tání | : 217 °C, | |||
| Analýza pro | C8H6N2O5 : | |||
| vypočteno : | 45,71 % C | 2,86 | % | H 13,33 % N |
| nalezeno : | 45,76 % C | 2,79 | % | H 13,21 % N. |
| vmaX/cm_1 : | 3466,52, 3321,84, | 1668,64, 1604,98 a | ||
| 1525,89, | ||||
| δΗ (d6-DMSO, | 200 MHz) : |
7,75 (1Η, br, s, CONH), 7,8 (1H, t, Ar-5H),
8,16 (1H, brs, CONH), 8,2 (1H, d, Ar-6H),
8,3 (1H, d, Ar-4H),
5C (dg-DMSO) :
127,32, 130,06, 132,28, 133,49, 134,78, 147,71, 166,25, a 166,60, m/z (El) : 192 (M+-l), 177, 149, 103, 75.
(b) Postup přípravy 2-amino-3-nitrobenzoové kyseliny (neboli 3-nitroanthranilové kyseliny)
Podle tohoto provedení bylo použito promíchávaného roztoku obsahujícího hydroxid draselný (v množství 24,1 gramu) ve vodě (110 mililitrů) při teplotě 0 °C, přičemž do tohoto roztoku byl přidán brom (2,46 mililitru), načež následoval přídavek 3-nitroftalamové kyseliny (použito 10 gramů, což je 47,62 mmolu). Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu 3 hodin při teplotě 60 °C, načež byla ochlazena na teplotu místnosti a potom byla promíchávána po dobu dalších 12 hodin. Tímto způsobem vznikla oranžová sraženina, která byla oddělena a potom znovu rozpuštěna v minimálním množství vody, načež byl tento podíl okyselen přídavkem koncentrované kyseliny chlorovodíkové, což bylo provedeno po kapkách. Rekrystalizací takto vzniklé výsledné žluté pevné látky z horké vody byla připravena požadovaná 3-nitroanthranilová kyselina ve formě žlutých mikrokrystalků.
%) .
°C,
3,29 % H 15,38 % N
3,07 % H 15,21 % N.
vmQV/cm'1 : 3476,17, 3344,99, 3094,21 a 1687,93,
IllaX' gramu (74 : 208 - 209
C7H6N204 :
46,15 % C
45,83 % C
Výtěžek : 6 Teplota tán Analýza pro vypočteno nalezeno • · • · δΗ (d6-DMSO, 200 MHz) :
6,76 - 6,84 (1H, t, Ar-5H), 8,29 - 8,41 (2H, dd, Ar-4/6H),
8,60 (2H, s, Ar-NH2), 13,4 - 14,0 (1H, br s, Ar-CO2H),
5C (d6-DMSO) :
113,19, 131,19, 131,97, 140,02, (Ar-4/5/6CH), 115,02, (Ar-C-NH2), 132,77 (Ar-C-C02H), 147,09 (Ar-C-N02), 168,95 (Ar-CO2H), m/z (El) : 182 (M+), 164.
(c) Postup přípravy methylesteru kyseliny 2-amino-3nitrobenzoové.
Podle tohoto provedení byl plynný chlorovodík probubláván roztokem 2-amino-3-nitrobenzoové kyseliny (použito 0,5 gramu, což je 2,75 mmolu) v methanolu (40 mililitrů), což bylo prováděno v intervalu 15 minut při teplotě 0 eC. Takto získaná reakční směs byla potom zahřívána při teplotě varu pod zpětným chladičem po dobu 5 hodin, načež byla ponechána ochladit na teplotu místnosti, přičemž toto ochlazování probíhalo po dobu dalších 12 hodin, a tímto způsobem se v tomto roztoku usadil methylester kyseliny 2-amino-3-nitrobenzoové ve formě žluté pevné látky.
Výtěžek
Teplota
Analýza vypočteno : nalezeno : vmax/cm_1 : δΗ (d6-DMSO, 3,95 (3H, s, 8,28 - 8,33 pro : 95 - 96 C8H«N2°
48,98 %
49,09 %
3452,5,
200 MHz)
0CHH3), 6,79 - 6,87 (1H, (1H, dd, Ar-4H), °C,
8n8^2u4 ·
C
4,08 % H
C 3,78 % H
3316,9, 1702, t,
8,41 - 8,46
Ar-5H), (1H, dd, Ar-6H),
8,45 - 8,46 (2H, br s, Ar-NH2), m/z (El) : 196 (M+), 164, 118, 90, 63.
>
(d) Postup přípravy 2,3-diaminobenzoové kyseliny
Při provádění tohoto postupu bylo použito roztoku 3-nitroanthranilové kyseliny (v množství 2,44 gramu, což je 13 mmolů) v methanolu (120 mililitrů), přičemž k tomuto roztoku bylo přidáno paladiun na uhlíku jako katalyzátor (10 % paladium, přibližně 200 miligramů), přičemž tento přídavek byl proveden opatrným způsobem a tento katalyzátor byl přidáván ve formě suspenze v methanolu (10 mililitrů) , načež byla takto připravená reakční směs promíchávána pod atmosférou vodíku po dobu 2 hodin dokud neustala absorpce plynu. Použitý katalyzátor byl potom odstraněn filtrací přes vrstvu celitu a získaný filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku, čímž byl získán surový produkt. Vyčištěním tohoto produktu v chromatografické koloně na silikagelu, kde jako elučního činidla bylo použito směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 4 : 1 byla získána požadovaná
2,3-diaminobenzoová kyselina ve formě červené pevné látky. Výtěžek : 1,34 gramu (66 %).
v_„v/cm-1 : 3433,73, 2882,02, 2602,30 a 1658,99, δΗ (dg-DMSO, 200 MHz) :
5,8 - 7,4 (4H, br s, 2 x NH2), 6,45 (1H, t, Ar-5H),
6,75 (1H, d, Ar-4H), 7,20 (1H, d, Ar-6H), 5C (dg-DMSO) :
110,31, 115,45, 118,33, 120,55, 135,03,
140,36, 170,68, m/z (El) : 152 (M+), 134, 106, 79.
(e) Postup přípravy methylesterú kyseliny 2,3-diaminobenzoóvé.
Při provádění postupu podle tohoto postupu byl použit • · roztok 2,3-diaminobenzoové kyseliny (použito 0,2 gramu, což je 1,32 mmolu) v methanolu (40 mililitrů), který byl nasycen chlorovodíkem stejným způsobem jako je uvedeno shora, a takto získaná reakční směs byl v následující fázi zahřívána při teplotě varu pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. V dalším postupu byla po odpaření použitého rozpouštědla získána pevná látka ve formě zbytku, přičemž tento pevný podíl byl rozpuštěn ve vodě a v dalším postupu byla hodnota pH takto získaného roztoku upravena na 7,0 za použití hydrogenuhličitanu sodného. Po extrahování tohoto podílu ethylesterem kyseliny octové (použity dva podíly po 30 mililitrech) byly organické vrstvy spojeny a tento spojený podíl byl usušen (síranem horečnatým) a použité rozpouštědlo bylo odstraněno, přičemž tímto způsobem byl získán methylester kyseliny 2,3-diaminobenzoové ve formě hnědého oleje, který při triturováni s benzínem (40/60) ztuhl.
Výtěžek : 121,6 miligramu (56 %) .
Teplota tání : 62-63 °C, Analýza pro <-:8^10^2θ2 ' vypočteno : 57,83 % C 6,02 % H 16,87 % N nalezeno : 58,35 % C 5,80 % H 16,69 % N.
δΗ (dg-DMSO, 200 MHz) :
3,87 (3H, s, OCH3), 4,90 (2H, br s, Ar-2-NH2),
6,32 (2H, br s, Ar-S-Nl·^), 6,46 - 6,54 (1H, t, Ar-5H) , .6,80 - 6,84 (1H, dd, Ar-4H), 7,18 - 7,23 (1H, dd, Ar-6H) , m/z (El) : 166 (M+), 134, 106, 79.
Tento methylester kyseliny 2,3-diaminobenzoové byl rovněž připraven redukováním methylesteru kyseliny 2-amino-3-nitrobenzoové, přičemž tento postup se prováděl následujícím způsobem : roztok methylesteru kyseliny 2-aminobenzoové (v množství 284 gramů, což je 1,45 mmolu) • · >
v methanolu (40 mililitrů), který obsahoval paladium na uhlíku jako katalyzátoru (10 % Pd, přibližně 50 miligramů) byl promícháván pod atmosférou vodíku po dobu 24 hodin. Takto získaný roztok byl zfiltrován přes celit za účelem odstranění katalyzátoru, načež bylo použité rozpouštědlo odpařeno ve vakuu a tímto způsobem byl získán požadovaný methylester ve formě hnědé pevné látky (výtěžek 180 miligramů, což je 75 %) a tento produkt byl identický s methylesterem kyseliny 2,3-diaminobenzoové, připraveným shora popsaným způsobem.
(f) Postup přípravy methylesteru kyseliny 2-amino-3-Nbenzoylaminobenzoové.
Podle tohoto provedení byl použit roztok benzoylchloridu (v množství 38,4 μΐ, což je 0,331 mmolu) v tetrahydrofuranu (5 mililitrů), který byl přidáván po kapkách do roztoku methylesteru kyseliny 2,3-diaminobenzoové (použito 50 miligramů, což je 0,301 mmolu) v suchém tetrahydrofuranu (5 mililitrů), který obsahoval triethylamin (46 μΐ) a 4-dimethylaminopyridin (1,8 miligramu, což je 5 molových %). Po promíchání této reakční směsi, které probíhalo po dobu 24 hodin při teplotě 45 °C, byla použitá rozpouštědla odpařena a surový produkt byl přečištěn v chromatografické koloně na silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi benzínu (40/60) a ethylacetátu v poměru 3:2. Rekrystalizací ze směsi ethylacetátu a benzínu (40/60) byla získána požadovaná titulní sloučenina ve formě bílých krystalků.
Výtěžek : 60 miligramů (74 %). δΗ (dg-DMSO, 200 MHz) :
3,95 (3H, s, 0CH3), 6,64 (2H, br s, Ar-NH2),
6,69 - 6,77 (ÍH, t, Ar-5H), 7,46 - 7,50 (ÍH, d, Ar-4H), >
| 7,70 | (3H, | m, | Ph-3 a Ph-3 | 4H) , |
| 7,85 | (1H, | d, | Ar-6H), | |
| 8,14 | (2H, | d, | Ph-2H a Ph-2 | H), |
9,8 - 9,9 (1H, br, s, Ar-NHCO), m/z (El) : 270 (M+), 253, 105.
(g) Postup přípravy methylesteru kyseliny 2-amino-3-N-(4’- methoxybenzoy1)aminobenzoové.
Při prováděni tohoto postupu byl použit roztok methylesteru kyseliny 2,3-diaminobenzoové (460 miligramů, což je 2,77 mmolu) v suchém tetrahydrofuranu (20 mililitrů), přičemž do tohoto roztoku byl přidán 4-methoxybenzoylchlorid (v množství 387 μΐ, což je 2,77 mmolu), dále triethylamin (v množství 385,5 μΐ, což je 2,77 mmolu) a
4-dimethylaminopyridin (17 miligramů, což je 5 % molových). Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána při teplotě místnosti po dobu přes noc a tímto způsobem byla získána nerozpustná sraženina, která byla oddělena filtrací. Oddělený filtrát byl potom odpařen za sníženého tlaku a zbytková pevná látka byla potom opětně rozpuštěna ve vroucím methanolu, načež byl tento podíl zfiltrován za horka za účelem odstranění nerozpustného materiálu. Použité rozpouštědlo bylo potom odstraněno ve vakuu a pevný zbytek byl spojen s předtím získanou sraženinou. Rekrystalizací z vodného roztoku methanolu byly získány bílé krystalky požadované titulní sloučeniny.
Výtěžek : 513,2 miligramu (62 %) .
| Teplota táni | : 179 - 180 | °c, | |||
| Analýza pro | C16H16N2°4 | ||||
| vypočteno : | 64,0 % C | 5,33 | % | H | 9,33 % N |
| nalezeno : | 64,26 % C | 5,31 | % | H | 9,17 % N. |
| vmax/cnrl : | 3425,54, | 3341,54 | 3277,84, 1699,24, 1632,12, |
·· >
| 1251 | ,11, | ||
| δΗ ( | d6-DMSO, 200 | MHz) : | |
| 3,92 | (3H, s, OMe) | , 3,94 | (3H, |
| 6,68 | - 6,75 (1H, | ΐ, Ar- | 5H) , |
| 7,13 | - 7,17 (2H, | d, J=8 | ,8, Ph |
| 7,43 | - 7,46 (1H, | d, Ar- | 4H), 7 |
| 8,07 | - 8,12 (2H, | d, J=8 | ,8, Ph |
| 9,7 | (1H, br, s, - | NHC0-) | > |
OMe), 6,59 (2H, s, Ar-NH2),
3/3 Η),
- 7,83 (1Η, d, Ar-6H),
3,3 Η),
5C (d6-DMSO) :
51,98, 55,76, 110,62, 113,79, 114,67, 125,0, 126,84,
129,12, 130,14, 133,20, 147,36, 162,21, 165,74, 168,33, m/z (El) : 300 (M+) , 135, 107, 77.
(h) Postup přípravy methylesteru kyseliny 2-fenylbenzimidazol-4-karboxylové.
Podle tohoto postupu byl použit roztok methylesteru kyseliny 2-amino-3-N-benzoylaminobenzoové (v množství 6,3 miligramu, což je 0,023 mmolu) v ledové kyselině octové (0,5 mililitru), přičemž tento roztok byl promícháván při teplotě varu pod zpětným chladičem po dobu 15 minut. Po ochlazení bylo použité rozpouštědlo odstraněno za sníženého tlaku, čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.
δΗ (d6-DMSO, 200 MHz) :
| 4,09 | (3H, s, | OCH- | 7,40 - 7,48 | (1H, t, | Ar-5H), | |
| 7,64 | - 7,70 | (3H, | m, | 2-Ph-3H a 3 | -Ph-4H) , | » |
| 7,93 | -7,97 | (1H, | d, | Ar-4H), 8,06 | - 8,10 | (1H, d, Ar-6H) |
| 8,39 | - 8,41 | (2H, | d, | 2-Ph-2/2 Η), | ||
| 12,4 | - 12,5 | (1H, | br, | s, Ar-NHCO) |
Příklad 2
Postup přípravy benzimidazol-4-karboxamidu (sloučenina NU1066).
* · * * (a) První stupeň - postup přípravy benzimidazol-4karboxylové kyseliny (sloučenina NU1067).
Podle tohoto postupu byla použita směs obsahuj ící 2,3-diaminobenzoovou kyselinu (použito 0,5 gramu, což je 3,29 mmolu) a kyselinu mravenčí (v množství 405 μΐ, což je 9,87 mmolu) v kyselině chlorovodíkové (4 M roztok, 10 mililitrů), přičemž tato směs byla zahřívána při teplotě varu pod zpětným chladičem po dobu jedné hodiny. Takto vzniklá sraženina byla potom při ochlazování roztoku oddělena, potom byl tento podíl opětně rozpuštěn ve vroucím methanolu a získaný roztok byl odbarven aktivním uhlím. Odpařením rozpouštědla byla získána benzoxazol-4karboxylová kyselina ve formě bílého prášku.
Výtěžek : 407,9 miligramu (77 %).
Analýza pro ^8^6^2θ2 : vypočteno : 46,28 % C 3,88 % H 13,49 % N nalezeno : 46,11 % C 3,63 % H 13,27 % N.
SH (dg-DMSO, 200 MHz) :
7,7 - 7,8 (IH, t, Ar-5H), 8,2 - 8,3 (2H, dd, Ar-4/6H), 9,65 (IH, s, imidazol-2H).
(b) Druhý stupeň - postup přípravy benzimidazol-4karboxamidu (sloučenina NU1066).
Podle tohoto postupu byla použita suspenze benzimidazol-4-karboxylové kyseliny (v množství 3,97,4 miligramu, což je 2,45 mmolu) ve thionylchloridu (10 mililitrů), přičemž tato suspenze byla zahřívána při teplotě varu pod zpětným chladičem po dobu 3,5 hodiny a potom byl použitý thionylchlorid odstraněn vakuovou destilací. Tímto způsobem byla získána zbytková pevná látka, která byla • · • ♦ · ·
suspendována v suchém tetrahydrofuranu (10 mililitrů) a potom byl tento podíl přidán po kapkách do koncentrovaného vodného roztoku amoniaku (50 mililitrů), což bylo provedeno za míchání v intervalu 30 minut. Přebytkový podíl rozpouštědla byl potom odstraněn ve vakuu a takto získaný zbytek byl rozpuštěn v minimálním objemu vody a potom byl tento roztok extrahován ethylacetátem (dva podíly po 20 mililitrech). Pevná látka byla získána po odpaření spojených organických vrstev, přičemž tato pevná látka byla potom rozpuštěna v kyseliny chlorovodíkové (0,1 M roztok, použito 10 mililitrů) , načež byla nerozpuštěná sraženina odstraněna odfiltrováním. Hodnota pH získaného vodného roztoku filtrátu byl potom opatrným způsobem upravena na 9 po malých postupných krocích, při kterých byla upravována hodnota pH o jednu jednotku, přičemž v každém stupni byla provedena extrakce ethylacetátem (10 mililitrů). Jednotlivé extrakty byly spojeny a tento spojený podíl byl usušen (síranem horečnatým) a použité rozpouštědlo bylo potom odpařeno. Rekrystalizací z ethylacetátu byl získán požadovaný produkt, benzimidazol-4-karboxamid.
| Výtěžek : | 50 miligramů (13 %). | |||||
| Analýza pro | C9H7N3O : | |||||
| vypočteno | 59,63 % C | 4,35 | % H | 26,09 | % N | |
| nalezeno | 59,95 % C | 3,90 | % H | 24,59 | % N | |
| uv/nm : | 210, 270, 291, |
vmQV/cm_1 : 3321,84, 3150,16, 1747,73, 1680,21, δΗ (dg-DMSO, 200 MHz) :
7.4 (ÍH, t, Ar-5H), 7,8 - 8,0 (3H, dd, Ar-4/6H),
8.5 (ÍH, br s, imidazol-2H), 9,4 (ÍH, br s, CONH),
13,1 (ÍH, br s, CONH), m/z (El) : 161 (M+), 141, 116, 99.
· * * ♦ · · · · · ♦ • 9 · 99 9«99 9 • 9 · í# 9 9 · 9 99999
999 999 9 99 ·♦ ·9·9 99 9999 t>i 9»
Příklad 3
Postup přípravy 2-methylbenzimidazol-4-karboxamidu (sloučenina NU1064).
(a) První stupeň - postup přípravy 2-methylbenzimidazol4-karboxylové kyseliny.
Podle tohoto provedení byla kyselina octová (použito 0,23 mililitru) přidána do roztoku 2,3-diaminobenzoové kyseliny (200 miligramů, což je 1,32 mmolu) v kyselině chlorovodíkové (4 M roztok, použito 3,2 mililitru) a takto připravená reakční směs byla potom zahřívána při teplotě varu pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny. Použitá rozpouštědla byla potom odpařena a zbytkový podíl pevné látky byl opětovně rozpuštěn ve vroucím methanolu (5 mililitrů) a tento roztok byl odbarven aktivním uhlím. Po odstranění rozpouštědla byla získána 2-methylbenzimidazol4-karboxylová kyselina ve formě amorfní bílé pevné látky. Výtěžek : 167,5 miligramu (72 %) .
δΗ (dg-DMSO) :
2,9 (3H, s, imidazol-2CH3), 7,6 - 7,8 (1H, t, Ar-5H),
8,1 (2H, dd, Ar-4/6H), m/z (El) : 176 (M+), 158, 130.
(b) Druhý stupeň - postup přípravy 2-methylbenzimdiazol4-karboxamidu (sloučenina NU1064).
Podle tohoto postupu byla použita suspenze 2-methylbenzimidazol-4-karboxylové kyseliny (v množství 500 miligramů, což je 2,84 mmolu) ve thionylchloridu (10 mililitrů), přičemž tato suspenze byla zahřívána při teplotě varu pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin a potom byl použitý thionylchlorid odstraněn vakuovou destilací. Tímto
26‘% .
• · • « • ♦ · ·· · · · · · · · 9 ··· · · · * · · •A ···· ·· *··· 9· ·· způsobem byla získána zbytková pevná látka, která byla opětně suspendována v suchém tetrahydrofuranu a potom byl tento podíl přidán po kapkách do koncentrovaného vodného roztoku amoniaku (50 mililitrů), což bylo provedeno za mícháni v intervalu 30 minut a za míchání. Použité rozpouštědlo bylo potom odstraněno ve vakuu a takto získaný zbytek byl znovu rozpuštěn v minimálním objemu horké vody a potom byl tento roztok extrahován ethylacetátem (dva podíly po 30 mililitrech). Odpařením použitého rozpouštědla byla získána hnědá pevná látka, která byla potom rekrystalována z ethylacetátu, a tímto způsobem byla připravena požadovaná titulní sloučenina ve formě bílé pevné látky.
| Výtěžek : 70,1 miligramu | (14 %). | |||
| Analýza pro | CgHgNjO : | |||
| vypočteno : | 61,71 % C | 5,14 | % H | 24,00 % N |
| nalezeno : | 61,47 % C | 4,96 | % H | 23,39 % N. |
| uv/nm : 209, | 270, | |||
| vmax/cm_1 : | 3296,77, 3071,07, | 1913,63 | , 1859,62, 1805,60, | |
| δΗ (dg-DMSO, | 200 MHz) : |
2,68 (3H, s, imidazole-2CH2) , 7,30 - 7,38 (1H, t, Ar-5H) ,
7,72 - 7,46 (1H, d, Ar-4H), 7,86 - 7,90 (1H, d, Ar-6H),
7,72 - 7,90 (1H, br s, imidazol-NH), 9,4 (1H, br s, CONH),
12,8 (1H, brs, CONH), m/z (El) : 175 (M+) , 158, 130.
·)
Příklad 4
Postup přípravy 2-fenylbenzimidazol-4-karboxamidu (sloučenina NU1070).
(a) První stupeň - Postup přípravy 2-fenylbenzimídazol-4karboxylové kyseliny.
• · · ® • · *
Podle tohoto provedení byla použita směs obsahuj ící 2,3-diaminobenzoovou kyselinu (v množství 0,1 gramu, což je 0,66 mmolu), kyselinu benzoovou (použito 80,2 miligramu, což je 0,66 mmolu) a kyselinu polyfosforečnou (přibližně 5 mililitrů), přičemž tato reakční směs byla zahřívána při teplotě v rozmezí od 150 do 160 “C po dobu 30 minut a potom po ochlazení byl k tomuto produktu přidán rozdrcený led (přibližně 10 gramů). Nerozpustný podíl byl odstraněn z takto získaného tmavého roztoku odfiltrováním, přičemž filtrát byl extrahován ethylacetátem (dva podíly po 20 mililitrech) za účelem odstranění nezreagované kyseliny benzoové. Vodný roztok byl potom opatrně neutralizován hydroxidem sodným (10 M roztok), načež byl tento podíl zfiltrován a filtrát byl opětně extrahován ethylacetátem (použity dva podíly po 30 mililitrech). Získané extrakty byly spojeny a tento spojený podíl byl usušen (síranem hořečnatým) a použité rozpouštědlo bylo odpařeno. Chromatografickým zpracováním v koloně naplněné silikagelem, kde jako elučního činidla bylo použito směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 85 : 15 byla získána požadovaná titulní sloučenina.
Výtěžek : 31,2 miligramu (20 %). δΗ (d6-DMSO, 200 MHz) :
7,4 (1H, t, Ar-5H), 7,62 (3H, brs, 3-Ph-4H a 3 -Ph-4H), 7,91 (1H, d, Ar-6H), 7,97 (1H, d, Ar-4H), 8,39 (2H, d, Ph-2H a Ph2 ~H), m/z (El) : 238 (M+), 220, 192, 77.
(b) Druhý stupeň - postup přípravy 2-fenylbenzimidazol4-karboxamidu (sloučenina NU1070).
Podle tohoto postupu byla kyselina 2-fenylbenzimidazol-4-karboxylová (použito 50 miligramů, což
28, • · φ € « • · · 9 9 · · · Φ · · · · • φ · e * · ··· • φ ···· ·φ »··β ·φ ·· je 0,21 mmolu) rozpuštěna v suchém tetrahydrofuranu (10 mililitrů), načež byl přidán thionylchlorid (použito 16,8 μΐ, což je 0,231 mmolu) a DMF (0,05 mililitru). Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána při teplotě místnosti po dobu 12 hodin, kdy se vytvořila bílá sraženina, načež potom byla v dalším postupu takto získaná suspenze přidána po kapkách do promíchávaného vodného roztoku amoniaku (10 mililitrů), což bylo provedeno v intervalu 10 minut. Takto získaná směs byla potom promíchávána po dobu dalších 30 minut, načež byla zředěna vodou (20 mililitrů) a neutralizována kyselinou chlorovodíkovou (4 M roztok). Při ochlazování této reakční směsi se vysrážela bílá pevná látka, která byla potom oddělena filtrací a tímto způsobem byl získán požadovaný 2-fenylbenzimidazol-4-karboxamid. Výtěžek : 31 miligramů (62 %).
vmax/cm_1 : 3320» 3180, 1660, a 1600, δΗ (dg-DMSO, 200 MHz) :
7,45 (1H, t, Ar-5H), 7,72 (3H, d, 3-Ph-4H),
7,87 (1H, d, Ar-4H), 7,97 (1H, br s, CONH),
7,99 (2H, d, Ar-6H), 8,38 (2H, d, Ph-2-H a Ph-2-H),
9,5 (1H, br s, CONH), m/z (El) : 237 (M+), 220, 192, 165, 77.
Příklad 5
Postup přípravy 2-(4’-methoxyfenyl)benzimidazol-4karboxamidu (sloučenina NU1076).
(a) První stupeň - postup přípravy acetátové soli methylesteru kyseliny 2-(4’-methoxyfenyl)benzimidazol4-karboxylové.
Podle tohoto postupu byl methylester kyseliny
2-amino-3-N-(4’-methoxybenzoyl)benzoové (použito 480 • · · · · · .·· · · -9 Λ · ···> · · ··
V « · ·· 9 · ·· · • · * · · · · 9 · · · ·· • ♦ · · ♦ · ··· ·« ···· ·· ···· ·< ·· miligramů, což je 1,6 mmolu) rozpuštěn v ledové kyselině octové (použito 15 mililitrů), načež byla tato reakční směs zahřívána při teplotě v rozmezí od 120 do 130 °C po dobu 30 minut. Použité rozpouštědlo bylo potom odstraněno a získaný pevný zbytek byl potom rekrystalován ze směsi ethylacetátu a benzínu (40/60), čímž byl získán požadovaný titulní produkt ve formě bílé krystalické pevné látky.
Výtěžek : 409 miligramů (75 %).
Teplota tání : 141 - 142 °C.
Analýza pro ^16^14^2θ3 · CHjCC^H :
| vypočteno : | 63,16 % C 5,26 % H | 8,19 % N | ||
| nalezeno : | 63,68 % | C 4,79 | % H | 7,88 % N. |
| vmax/cm-1 : | 3375,33, | 1718,46, | 1696,80, | 1282,81, |
| 1257,81, 1257,34, | ||||
| δΗ (dg-DMSO, | 200 MHz) | |||
| 2,02 (3H, s, | ch3co2h), | 3,97 (3H, | s, OMe), | 4,09 (3H, s, OMe), |
| 7,2.1 | - 7,25 | (2H, | d, | J=8,6, Ph-3/3 | H), | ||
| 7,39 - | - 7,46 | (1H, | t, | Ar-5H), 7,90 | - 7, | 93 (1H, d, | Ar-4H), |
| 8,00 - | - 8,04 | (1H, | d, | Ar-6H), | |||
| 8,36 - | - 8,40 | (2H, | d, | J=8,6, Ph-2,2 | H), | 12,1 (1H, | s, Imz-H) |
| 12,3 - | - 12,4 | (1H, | br | , s, ch3co2h), |
5C (dg-DMSO) :
21,35, 52,37, 55,64, 114,41, 121,68, 122,35, 124,34,
129,56, 153,63, 161,27, 166,13, 172,37, m/z (El) 282 (M+-CH3C02H), 250, 222, 77, 60, 43, 32.
(b) Druhý stupeň - Postup přípravy 2-(4’-methoxyfenyl)benzimidazol-4-karboxamidu (sloučenina NU1076).
Při provádění tohoto postupu byla acetátová sůl methylesteru kyseliny 2-(4’-methoxyfenyl)benzimidazol-4karboxylové rozpuštěna v přebytkovém podílu kapalného amoniaku a potom byla tato směs zahřívána při teplotě 100 °C
30·-·· · · · · · · · · · » Λ · φ · · · > · · · » · • · · · φ · · · * ·· ···· ΦΦ ··!· ·Φ ΦΦ v utěsněné tlakové nádobě při tlaku 4,0 MPa po dobu přes noc. Amoniak byl potom ponechán odpařit a zbytkový pódii pevné látky byl shromážděn a promyt ledově chladnou vodou (použity tři podíly po 5 mililitrech). Rekrystalizací z vodného roztoku methanolu byla získána požadovaná titulní sloučenina.
Výtěžek
226,4 miligramu (80 %) .
Teplota táni
261 - 263 °C,
Analýza pro vypočteno : nalezeno :
C15H13N3°2 · °’2 CH30H :
66,70% C 5,08 % H 15,35 % N
66,07% C
4,23 % H 15,29 % N
3321,47, 3140,72, 1656,23, 1608,25,
1421,43, 1242,55, áH (d6-DMSO, 200 MHz) :
3,96 (3H, s, OMe), 7,23 - 7,27 (2H, d, J=8,6, Ph-3/3 H) ,
7,37 - 7,45 (1H, t, Ar-5H), 7,78 - 7,82 (1H, d, Ar-4H),
7,8.7 (1H, brs, Imz-H) , 7,93 - 7,96 (1H, d, Ar-6H) ,
8,27 - 8,31 (2H, d, J=8,6, Ph-2,2 H),
9,4 - 9,5 (1H, br s, -CONH), 13,3 - 13,4 (1H, br, s, -CONH), m/z (El) : 267 (M+), 249, 222, 206, 77, 32.
Příklad 6
Postup přípravy 2-(4’-trifluormethyl)benzimidazol-4karboxamidu (sloučenina NU1077).
(a) První stupeň - postup přípravy methylesteru kyseliny 2-amino-3-N-(4’-trifluormethylbenzoyl)aminobenzoové.
Podle tohoto provedení byl použit roztok methylesteru kyseliny 2,3-diaminobenzoové (v množství 300 miligramů, což je 1,807 mmolu), ke kterému byl přidán
4-trifluormethylbenzoylchlorid (použito 268,4 μΐ, což je 1,807 mmolu), triethylamin (použito 251,4 μΐ, což je 1,807 *3 -. ·· ♦· ·· ·· ·· ·· □ 1· -· · · · · · · · · · · • · · · · · · · · · · · · • · · ··· · · · «· ···· ·· ··«· ♦· ·· mmolu) a 4-dimethylaminopyridin (použito 11 miligramů,což je 5 molových procent), přičemž takto připravená reakční směs byla potom promíchávána při teplotě místnosti po dobu přes noc. Použité reakční rozpouštědlo bylo potom odstraněno za sníženého tlaku a takto získaná pevná látka byla potom promyta ethylacetátem. Rekrystalizaci ze směsi methanolu a vody, která byla provedena dvakrát byla získána požadovaná titulní sloučenina ve formě bílé pevné látky.
Výtěžek : 83,6 miligramu (14 %).
Teplota tání : 180 - 181 °C, Analýza pro C16H13F3N2O3 : vypočteno : 56,80 % C 3,85 % H 8,28 % N nalezeno : 56,75 % C 3,50 % H 8,28 % N.
uv/nm 222, 5H (<Í6DMS0’ 200 MHz) ·’
3,93 (3H, s, OMe), 6,70 - 6,76 (3H, m, Ar-5H, Ar-NH2),
7,4.6 - 7,49 (1H, d, Ar-4H) , 7,81 - 7,85 (1H, d, Ar-6H) ,
7,99 - 8,03 (2H, d), 8,29 - 8,33 (2H, d),
10,5 (1H, s, -NHCO-), m/z (El) : 338 (M+), 321, 289, 145, 32.
(b) Druhý stupeň - postup přípravy acetátové soli methylesteru kyseliny 2-(4’-trifluormethylfenyl)benzimidazol-4-karboxylové.
Podle tohoto postupu byl použit methylester kyseliny 2-amino-3-N-(4’-trifluormethylbenzoyl)aminobenzoové (v množství 75,7 miligramu, což je 0,224 mmolu), který byl rozpuštěn v ledové kyselině octové (5 mililitrů) a tato reakční směs byla potom promíchávána při teplotě 125 °C po dobu 0,5 hodiny. Použité rozpouštědlo bylo potom odpařeno a zbylá pevná látka byla promyta benzínem (40/60), a tímto shora popsaným způsobem byla získána požadovaná titulní η ~ ·· ♦· ·♦ ·· ····
-··· · · 9 · · · «· * * ♦ 9 9 9 9 9 · 9 9 99
9 9 9 9 9 9 99
9999 99 9999 9999 sloučenina.
Výtěžek : 59,6 miligramu (70 %).
Teplota tání : 138 - 140 °C,
Analýza pro ^16^11^3^2^2^3^2^ ' vypočteno : 56,84 % C 3,94 % H 7,37 % N nalezeno : 56,78 % C 3,98 % H 7,36 % N.
uv/nm 206, 319, δΗ (dg-DMSO, 200 MHz) :
2,01 (3H, s, CH3CO2H), 7,44 - 7,52 (1H, t, Ar-5H,),
7,97 - 8,14 (4H, m), 8,65 - 8,66 (2H, d),
12,1 (br s, imidazol-NH), 12,7 - 12,8 (1H, br s, CH3CO2H), m/z (El) : 320 (M+-CH3CO2H), 301, 288, 260, 145, 60, 43 .
(c) Třetí stupeň - postup přípravy 2-(4’-trifluormethyl)benzimidazol-4-karboxamid (sloučenina NU1077).
Podle tohoto postupu byla acetátová sůl methylesteru kyseliny 2-(4’-trifluormethylfenyl)benzimidazol-4karboxylové rozpuštěna v přebytkovém množství kapalného amoniaku a tato reakční směs byla zahřívána při teplotě 100 °C v utěsněné tlakové nádobě při tlaku 4,0 MPa po dobu 12 hodin. Amoniak byl potom ponechán odpařit a pevný zbytek byl promyt ledovou chladnou vodou (použity tři podíly po 5 mililitrech). Rekrystalizací tohoto produktu ze směsi
| methanolu a vody byl získán | požadovaný | produkt ve formě | |||
| j emně b ilých | j ehliček. | ||||
| Výtěžek : 19 | ,1 gramu (48 %). | ||||
| Teplota tání | : 301 - 305 °C, | ||||
| Analýza pro | C15H10F3N3° · | CH3OH : | |||
| vypočteno : | 56,97 % C | 4,18 % H | 12,46 | % | N |
| nalezeno | 56,45 % C | 3,50 % H | 12,41 | % | N. |
δΗ (d6-DMSO, 200 MHz)
33.*-. ,
7,45 (1H, t, Ar-5H), 7,88 - 7,92 (1H, d, Ar-4H,),
7,99 (1H, br s, imidazole-NH), 8,03 (1H, d, Ar-6H),
8,06-8,10 (2H, d, J=8,l), 8,55-8,59 (2H, d, J=8,l),
9,3 - 9,4 (1H, br s, -CONH), 13,7 - 13,8 (1H, br s, -CONH), m/z (El) : 288 (M+-NH3), 260, 69,.
Příklad 7
Postup přípravy 2-(4’-hydroxyfenyl)-l-H-benzimidazol-4karboxamidu (sloučenina NU1085).
Podle tohoto postupu byl pod atmosférou argonu 1 M roztok bromidu boritého v dichlormethanu (použito 3,8 mililitru, což je 3,79 mmolu) převeden do nádoby obsahující 2-(4’-methoxyfenyl)benzimidazol-4-karboxamid (sloučenina NU1076 z příkladu 5) (použito 202,4 miligramu, což je 0,758 mmolu). Takto získaný výsledný roztok byl potom zahříván při teplotě varu pod zpětným chladičem po dobu 24 hodin za použití vzduchového chladiče. Použité rozpouštědlo bylo úplně odstraněno destilací až do sucha. Získaný pevný zbytek byl potom zpracován 10 %-ním roztokem hydroxidu sodného (10 mililitrů), načež následoval přídavek koncentrované kyseliny chlorovodíkové k neutralizování této reakční směsi (pH 7) . Vzniklá bílá sraženina byla potom oddělena filtrací a rozpuštěna v ethylacetátu (10 mililitrů). Organické rozpouštědlo bylo promyto vodou (dva podíly po 3 mililitrech), načež byl tento podíl usušen síranem hořečnatým a takto získaný produkt byl potom zbaven rozpouštědla odpařením za sníženého tlaku.
Výtěžek : 109,5 miligramu (57 %).
Teplota tání : 266 - 267 °C, Analýza pro C-£4H-qN302 . 0,75 MeOH:
vypočteno : 63,04% C 4,69 % H 15,76 %N nalezeno : 63,27% C 4,37 % H 15,67 %N
Vmax/cm-1 : 3424,01, 3384,16, 3309,20, 3249,55, 3155,62,
1642,35, 1618,02, 1594,50, 1577,74, δΗ 7,03 - 7,07 (2H, d, J=8,5), 7,34 - 7,42 (1H, t),
7,75 - 7,79 (1H, d), 7,85 (1H, br s), 7,90 - 7,94 (1H, d), 8,15 - 8,19 (2H, d, J=8,5), 9,4 - 9,6 (1H, br s), 10,0 - 10,4 (1H, br s), 13,0 - 13,4 (1H, br s,), m/z (El) : 253 (M+), 236, 208, 93.
Příklad 8
Postup přípravy 2-(4’-methoxyfenyl)-l-methylbenzimidazol4-karboxamidu (sloučenina NU1090).
Podle tohoto postupu byly 2-(4’-methoxyfenyl)benzímidazol-4-karboxamíd (sloučenina NU1076 z příkladu 5) (použito 105,3 miligramu, což je 0,394 mmolu) a práškovitý hydroxid draselný (použito 22 miligramů, což je 0,394 mmolu) suspendovány v acetonu (4 mililitry) a tato reakční směs byla promíchávána tak dlouho, dokud veškerý podíl pevných látek nebyl rozpuštěn. Potom byl přidán methyljodid (použito
24,6 gl, což je 0m394 mmolu) a tato reakční směs byla zahřívána při teplotě místnosti po dobu přes noc. Použité rozpouštědlo bylo potom odstraněno za sníženého tlaku a zbytková bílá pevná látka byla přečištěna ve chromatografické koloně, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 95 : 5, čímž byla připravena požadovaná titulní sloučenina ve formě jemných bílých krystalků.
Výtěžek : 33,2 miligramu (30 %). Teplota tání : 289 - 292 C, Analýza pro ^16^15^3θ2 : vypočteno : 68,33 % C 5,34 % H 14,95 % N nalezeno : 68,62 % C 5,36 % H 14,67 % N vmQV/cm'1 : 3309,23, 3141,44, 1671,29, 1605,30, max n C ·· ·· ·· ·· ····
J Λ · · · · 90 9 9 99 9
9 9 99 9 9 9 9999 9
999 999999 >9 9999 99 9999 9999
1255,08, δΗ : 3,95 (3Η, s), 4,02 (3Η, s), 7,22 - 7,27 (2Η, d),
7,44 - 7,52 (IH, t), 7,86 - 8,00 (5H, m), 9,4 (IH, br s, NH), m/z (El) : 281 (M+), 264,250.
Příklad 9
Postup přípravy 2-(4’-methoxyfenyl)-1-benzoylbenzimidazol4-karboxamidu (sloučenina NU1101).
Při prováděni tohoto postupu byl použit roztok obsahující 2-(4’-methoxyfenyl)benzimidazol-4-karboxamid (sloučenina NU1076 z přikladu 5) (použito 75,1 miligramu, což je 0,281 mmolu) a práškový hydroxid sodný (použito 15,8 miligramu, což je 0,281 mmolu) v acetonu (3 mililitry) a takto připravený roztok byl promícháván tak dlouho, dokud se nerozputil veškerý podíl pevných látek. Potom byl přidán benzoylchlorid (v množství 32,6 μΐ, což je 0,281 mmolu) a takto získaný roztok byl potom promícháván po dobu přes noc při teplotě místnosti, přičemž se vytvořila bílá sraženina. Použitá rozpouštědla byla odstraněna za sníženého tlaku a bílá pevná látka představující zbytek byla přečištěna ve chromatografické koloně za použití dichlormethanu a methanolu v poměru 95 : 5. Takto získaná výsledná pevná látka byla potom rekrystalována ze směsi benzínu (40/60) a ethylacetátu, čímž byl získán čistý produkt ve formě třpytivě bílých hranolků.
| Výtěžek : 15 | ,6 miligramu | (15 %) | • | ||
| Teplota tání | : 207 - 210 | °c, | |||
| Analýza pro | C22H17N3°3 | . 025 | CH3OH : | ||
| vypočteno : | 70,45% C | 4,47 | % H | 11,08 % | N |
| nalezeno : | 70,45% C | 4,60 | % H | 10,99 % | N |
| vmax/cm_1 : | 3445,99, 3318,55, | 2922,99 | , 1689, | 7 |
δΗ : 3,86 (3H, s, OCH3), 7,02 - 7,06 (2H, d),
1666,36, _ _ ·· ·· ·· ·· 9· ··
36· -··· · · ♦ · ··«*· • · · · · · · · · · · · · • · · ·«· ··· ·* ···· ·· ···· ·· ··
7,50 - 7,65 (4Η, τη), 7,72 - 7,82 (3Η, m) ,
7,88 - 7,92 (2Η, d), 8,08 (1Η, s, CONH),
8,10 - 8,14 (1Η, d), 9,1 - 9,2 (1H, br s, CONH), m/z (El) : 371 (M+), 105.
Další příklady
Při provádění dalších postupů podle následujících příkladů, což platí rovněž pro postupy podle předchozích příkladů, bylo použito určitých standardních postupů. Tato postupy zahrnuj í :
(1) reakci methylesteru kyseliny 2,3-diaminobenzoové s chloridy arylových kyselin (standardní postup A);
(2) tvorbu benzimidazolového kruhu cyklizací katalyzovanou kyselinou (standardní postup B);
(3) tvorba amidové sloučenina reakcí s kapalným amoniakem (standardní postup C).
Detailní provedení použitá při praktické aplikaci těchto standardních postupů jsou popsána v dalším popisu.
Standardní postup A :
Podle tohoto provedení byl připraven roztok obsahující methylester kyseliny 2,3-diaminobenzoové (1 ekvivalent), suchý triethylamin (1 až 1,5 ekvivalentu) a dimethylaminopyridin (DMAP - 5 molových %) v polovičním požadovaném objemu suchého tetrahydrofuranu (THF), který byl chlazen na lázni ledu a soli. Požadovaný chlorid kyseliny (1 ekvivalent) byl rozpuštěn ve zbývajícím podílu suchého tetrahydrofuranu (THF) a tento podíl byl přidán ·· 44 44 ·· 44 44 • · · 4 4 4 4 4 44 4 44
4 4 444 4 44 • 4 4444 44 4444 4444 k ochlazenému roztoku za míchání během intervalu 30 minut. Tato reakce byla potom pomalu ponechána ohřát na teplotu místnosti a potom byla promíchávána po dobu přes noc. Použité rozpouštědlo bylo zfiltrováno a tím byla oddělena sraženina, která byla suspendována v ethylacetátu, potom byl tento produkt dvakrát promyt vodou, načež následovalo promyti nasyceným roztokem solanky a usušení síranem horečnatým. Organická vrstva byla potom přidána k reakčnímu filtrátu a použité rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku. Pevný zbytek byl potom opětně rozpuštěn v ethylacetátu, tento podíl byl potom promyt dvakrát vodou, načež následovalo promyti solankou a usušení produktu síranem horečnatým. Po odstranění použitých rozpouštědel za sníženého tlaku byl získán zbytek pevných látek, přičemž tento produkt byl přečištěn v chromatografické koloně a/nebo rekrystalován ze vhodných rozpouštědel.
Standardní postup B
Výchozí látka byla rozpuštěna v ledové kyselině octové a tento produkt byl ponořen do předem zahřáté olejové lázně o teplotě 120 °C. Tento roztok byl potom zahříván po vhodně dlouhý časový interval a potom byl tento produkt ochlazen na teplotu místnosti. Kyselina octová byla potom odstraněna za sníženého tlaku a pevný zbytek byl přečištěn ve chromatografické koloně a/nebo rekrystalován ze vhodných rozpouštědel.
Standardní postup C
Výchozí látka byla rozpuštěna v přebytkovém množství čerstvě zkondenzovaného kapalného amoniaku. Tento produkt byl potom zahříván při teplotě 80 °C v utěsněné nádobě, kde _ο·· ·· ·· ·· ··44 ο» -· · · · ·· · · ··· • · · · · ♦ 4 · · 4 · ·· ··· ··· · ·f
4· 4444 ·· ···· ···· byl generován tlak 4,0 MPa, po dobu 24 hodin. Použitý amoniak byl potom odpařen a získaný pevný zbytek byl potom přečištěn ve chromatografické koloně a/nebo rekrystalován ze vhodných rozpouštědel.
Příklad 10
Postup přípravy 2-(4’-kyanofenyl)-l-H-benzimidazol-4karboxamidu (sloučenina NU1092).
(a) První stupeň - postup přípravy methylesteru kyseliny 2-amino-3-N-(4’-kyanobenzoyl)aminobenzoové.
Při tomto postupu bylo použito standardního postupu A, viz výše, přičemž podle tohoto provedení byly methylester kyseliny 2,3-diaminobenzoové (v množství 300 miligramů, což je 1,81 mmolu), triethylamin (použito 251 μΐ, což je 1,81 mmolu) a DMAP (11 miligramů) rozpuštěny v THF (7,5 mililitru) a tato reakční směs byla chlazena. V dalším postupu byl k této reakční směsi přidán 4-kyanobenzoylchlorid (v množství 299 miligramů, což je
1.81 mmolu), který byl rozpuštěn v THF (7,5 mililitru). Takto získaný produkt byl přečištěn v chromatografické koloně, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 99 : 1, načež potom následovala rekrystalizace ze vroucího methanolu. Tímto způsobem byl získán požadovaný produkt.
Výtěžek : 196 miligramů (37 %). Teplota tání : 198 - 202 °C, vnlQV (cm-1) : 3486,40, 3374,02, 3245,61, 2231,25,
1688,04, 1646,65 δΗ : 3,93 (3H, s, C02CH3), 6,68 - 6,76 (ÍH, t),
6,72 (2H, br s, NH2), 7,45 - 7,49 (ÍH, d),
7.81 - 7,86 (1H, d), 8,11 - 8,15 (2H, d, J=8,4),
3Sk*·-. .o
8,25 - 8,29 (2H, d, J=8,4), 10,01 (1H, br s, NH), m/z (El) : 295 (M+), 278, 263, 246, 130, 102.
(b) Druhý stupeň - postup přípravy methylesteru kyseliny
2-(4’-kyanofenyl)-lH-benzimidazol-4-karboxylové.
Při tomto postupu bylo použito standardního postupu B, viz výše, přičemž podle tohoto provedení byl použit methylester kyseliny 2-amino-3-N-(4’-kyanobenzoyl)aminobenzoové (v množství 301 miligramů, což je 1,02 molu) získaný postupem podle prvního stupně, přičemž tato látka byla zahřívána v ledové kyselině octové (10 mililitrů). Takto získaný produkt byl potom rekrystalován dvakrát za použiti směsi benzínu (40/60) ethylacetátu. Tímto způsobem byl připraven požadovaný produkt.
Výtěžek : 203 miligramů (72 %). Teplota tání : 195 - 198 °C,
| vmax (cm > | : 3447,66, 2228,84, 1691,90, | 1288,11, | |||
| áH : | 4,09 | (3H, s, CO2CH3), | 7,44 - 7,53 | (1H, | t) , |
| 7,97 | - 8,01 | (1H, d), 8,10 - | 8,13 (2H, d, | J=8 | ,4), |
| 8,58 | - 8,62 | (2H, d, 1=8,4), | 12,8 (1H, br | s) , | |
| m/z | (El) : | 277 (M+), 245, | 217. |
(c) Třetí stupeň - postup přípravy 2-(4’-kyanofenyl)-1-Hbenzimidazol-4-karboxamidu (sloučenina NU1092).
Při této přípravě bylo použito standardního postupu C, viz výše, přičemž podle tohoto provedeni byl methylester kyseliny 2-(4’-kyanofenyl)-l-H-benzimidazol-4-karboxylové (použito 169,5 miligramu, což je 0,612 mmolu) zpracováván amoniakem pod tlakem. Získaný surový produkt byl rekrystalován ze vroucího methanolu a tímto způsobem byla připravena požadovaná titulní sloučenina ve formě čistých bílých krystalků.
Výtěžek : 116,5 miligramu (73 %) .
Teplota tání : > 310 °C,
Analýza pro vypočteno : nalezeno :
C15H1ON40·0’2 Me0H : 67,95% C 4,05 % H
67,81% C 3,89 % H
20,85 % N
20,87 % N
V max (cm’1) :
3332,27,
3274,86,
3177,98, 2230,85,
1658,54, 1608,10 δΗ : 7,45 - 7,49 (1H, t), 7,87 - 7,91 (1H, d),
7,91 (1H, br s), 7,98 - 8,02 (1H, d),
8,13 - 8,17 (2H, d, J=8,3), 8,50 - 8,54 (2H, d, J=8,3),
9,2 - 9,4 (1H, br s), 13,6 - 13,8 (1H, br s), m/z (El) : 262 (M+), 245, 217, 102.
Příklad 11
Postup přípravy 2-(4’-nitrofenyl)-l-H-benzimidazol-4karboxamidu (sloučenina NU1091).
(a) První stupeň - postup přípravy methylesteru kyseliny 2-amino-3-N-(4’-nitrobenzoyl)aminobenzoové.
Při této přípravě bylo použito standardního postupu A, viz výše, přičemž podle tohoto provedeni byly methylester kyseliny 2,3-diaminobenzoové (v množství 300 miligramů, což je 1,807 mmolu), suchý triethylamin (použito 276,6 gl, což je 1,988 mmolu) a DMAP (11 miligramů) rozpuštěny v suchém THF (12 mililitrů). K této reakční směsi přidán 4-nitrobenzoylchlorid (v množství 335,2 miligramu, což je 1,807 mmolu), který byl rozpuštěn v suchém THF (12 mililitrů). Takto získaný produkt byl přečištěn v chromatografické koloně, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 99 : 1, načež potom následovala rekrystalizace z methanolu.
41.*í. .·* ·· ···· r· • · · · · * · · · • · · ·· ····· • · · · · · »·«···· • · · · · · e ·· ·· «··· ·· ···♦ «·
| Tímto způsoben | i byl získán požadovaný produkt v čisté formě | |||
| Teplota tání : | 196 - 197 | °c, | ||
| Analýza pro | C15H13N3°5 | |||
| vypočteno : | 57,14% C | 4,12 % | H | 13,33 % N |
| nalezeno : | 57,08% C | 3,78 % | H | 13,25 % N |
| vmax : | 3382,31, | 3293,01, | 3226,56, 1702,05, |
1657,83, 1525,37 δΗ : 3,94 (3Η, s, CO2CH3), 6,70 - 6,78 (1H, t) ,
6,66 (2Η, br s, NH2), 7,48 - 7,51 (1H, d),
7,83 - 7,87 (1H, d), 8,33 - 3,38 (2H, d, J=8,8),
8,46 - 8,51 (2H, d, J=8,8), 10,15 (1H, br s, NH), m/z (El) : 315 (M+), 297, 265, 165.
(b) Druhý stupeň - postup přípravy methylesteru kyseliny
2-(4’-nitrofenyl)-lH-benzimidazol-4-karboxylové.
Při této přípravě bylo použito standardního postupu B, viz výše, přičemž podle tohoto provedení byl použit methylester kyseliny 2-amino-3-N-(4’-nitrobenzoyl)aminobenzoové (v množství 340,2 miligramů, což je 1,08 molu), přičemž tato látka byla zahřívána v ledové kyselině octové (10 mililitrů) po dobu 15 minut. Takto získaný produkt byl po rekrystalizaci z methanolu získán v čistém stavu.
| Výtěžek : 208 miligramů (65 %). | ||||
| Teplota tání : | : 208 - 210 °C, | |||
| Analýza pro | C15H11N3°4 | .· | ||
| vypočteno : | 60,61% C | 3,70 % | H 14,14 | % N |
| nalezeno : | 60,69% C | 3,57 % | H 13,96 | % N |
| vmax : | 3433,70, | 1720,14, | 1601,84, | 1513,07, |
| δΗ : | 4,21 | (3H, | s, | co2ch3), | 7,57 | - 7,65 | (1H, | t) , |
| 8,10 | - 8,12 | (1H, | d) | , 8,23 - | - 8,27 | (1H, d) | > | |
| 8,60 | - 8,64 | (2H, | d, | 1=8,8), | 8,78 | - 8,82 | (2H, | d, 1=8,8), |
13,04 (1H, br s, NH), m/z (El) : 297 (M+), 265.
(c) Třetí stupeň - postup přípravy 2-(4’-nitrofenyl)-1-Hbenzimidazol-4-karboxamidu (sloučenina NU1091) .
Při této přípravě bylo použito standardního postupu C, viz výše, přičemž podle tohoto provedení byl methylester kyseliny 2-(4’-nitrofenyl)-l-H-benzimidazol-4-karboxylové rozpuštěn v kapalném amoniaku a zahříván za konstantního objemu v tlakové nádobě. Získaný surový produkt byl potom přečištěn v chromatografické koloně, přičemž jako elučního činidla bylo použito dichlormethanu a methanolu v poměru 99 : 1, načež byla provedena rekrystalizace z methanolu a tímto způsobem byla připravena požadovaná titulní sloučenina.
Teplota tání : > 310 °C, δΗ : 7,48 - 7,56 (1H, t), 7,90 - 7,94 (1H, d),
8,00 (1H, s, NH), 8,00 - 8,04 (1H, d),
8,52 - 8,56 (2H, d, J=8,8), 8,60 - 8,64 (2H, d, J=8,8),
9,3 - 9,4 (1H, br s, NH), 13,8 - 14,0 (1H, br s, NH).
Příklad 12
Postup přípravy 2-(3’-trifluormethylfenyl)-1-H-benzimidazol4-karboxamidu (sloučenina NU1093).
(a) První stupeň - postup přípravy methylesteru kyseliny 2-amino-3-N-(4’-nitrobenzoyl)aminobenzoové.
Při této přípravě bylo použito standardního postupu A, viz výše, přičemž podle tohoto provedení byly methylester kyseliny 2,3-diaminobenzoové (v množství 200 miligramů, což je 1,205 mmolu), suchý triethylamin (použito 704 μΐ, což je • 4 • Λ • e *· ♦ · • · · · · · · · * · · 1 • ♦ · φ 9 · ·<····· ··· · · · · · · ··»« ·· 9999 (r £4
5,06 mmolu) a dimethylaminopyridin (DMAP, 7,3 miligramu) rozpuštěny v suchém THF (7,5 mililitru). K této reakční směsi přidán 3-trifluormethylbenzoylchlorid (v množství 183 μΐ, což je 1,205 mmolu), který byl rozpuštěn v suchém THF (7,5 mililitru). Takto získaný produkt byl přečištěn v chromatografické koloně, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 99 : 1, ve které byly odstraněny znečišťující složky, a polárnější produkt byl eluován směsí dichlormethanu a methanolu v poměru 97:3. Potom následovala rekrystalizace z methanolu, čímž byl byl získán požadovaný produkt ve formě bílé pevné látky. Výtěžek : 160,4 miligramu (26 %) .
| Teplota tání | : 157 - 159 | °C. | ||||
| Analýza pro | C16H13F3N2° | 3 : | ||||
| vypočteno : | 56,80% C | 3,85 | % | H 8,28 | % | N |
| nalezeno : | 57,14% C | 3,57 | % | H 8,10 | % | N |
| vmax : | 3368,48, | 3283,82, | 2953,87, | 1705,98 |
1650,77, 1250,02 δΗ 3,93 (3H, s, CO2CH3), 6,69 - 6,77 (1H, t),
6,73 (2H, s, NH2), 7,45 - 7,49 (1H, d),
7,82 - 7,92 (2H, m), 8,06 - 8,10 (1H, d),
8,40 - 8,44 (1H, d), 8,48 (1H, s, 2 -H), 10,1 (1H, s, m/z (El) : 338 (M+), 320, 288, 260, 173, 145.
(b) Druhý stupeň - postup přípravy acetátové soli methylesteru kyseliny 2-(3’-trifluormethylfenyl)-1-Hbenzimidazol-4-karboxylové.
Při této přípravě bylo použito standardního postupu B, viz výše, přičemž podle tohoto provedení byl roztok methylesteru kyseliny 2-amino-3-N-(3’-trifluormethylbenzoyl)aminobenzoové v ledové kyselině octové (6 mililitrů) »* Mk ·· «* 4444
Λ φ · Φ Φ Φ Φ Φ Φ φ φ * • « » φ · · 4 ·4 · • 4 4 4 * 4' 4 4 44444 • φ · Φ 4 ·444 ♦ ♦ 4444 44 4«íi ÍJ 4* zahříván po dobu 15 minut. Po odstranění rozpouštědla za sníženého tlaku následovalo usušení takto získaného produktu za vysokého vakua, přičemž tímto způsobem byl získán požadovaný produkt ve formě čisté bílé Výtěžek Teplota Analýza pevné látky.
pro vypočteno : 56, nalezeno : 56, vmax : 34 1328,24, 1313,53
7,37 % N
7,32 % N
2959,13, 1707,99,
SH : 2,01 (3H, s, CH3C02H), 4,09 (3H, s, C02CH3),
7,44 - 7,51 (ÍH, t), 7,79 - 8,13 (4H, m),
8,71 - 8,75 (ÍH, d), 8,82 (ÍH, s), 11,8 - 12,2 (ÍH, br s),
12,8 - 13,0 (ÍH, br s), m/z (El) : 320 (M+ -CH3CO2H), 288, 260.
(c) Třetí stupeň - postup přípravy 2-(3’-trifluormethylfenyl)-l-H-benzimidazol-4-karboxamidu (sloučenina NU1093).
Při této přípravě bylo použito standardního postupu C, viz výše, přičemž podle tohoto provedení byla použita acetátová sůl methylesteru kyseliny 2-(3’-trifluormethylfenyl)-l-H-benzimidazol-4-karboxylové (v množství 134,8 miligramu, což je 0,358 mmolu), přičemž tato sloučenina byla zpracovávána přebytkovým množstvím kapalného amoniaku v utěsněné nádobě. Takto získaný produkt byl potom přečištěn rekrystalizací z methanolu, a tímto postupem byl získán požadovaný produkt ve formě šedavé bílých krystalků. Výtěžek : 78 miligramů (72 %).
Teplota tání : 268 - 270 °C,
Analýza pro C-£3H-^0F3N3O . 0,6 CH3OH :
« · · ti w · • φ
| • · *> · | • * | Γ · | • · · ♦ | |
| Φ · · | 1 φ | • | • · · | |
| ** €··♦ | φφ | • · · 9 | «Φ | ♦ Λ |
vypočteno : 57,74% C nalezeno : 57,68% C vmax : 3488,83, 1600,93, 1329,63
3,82 % H 12,95 % N
3,82 % H 12,96 % N
3348,86, 3176,45, 1667,66, δΗ : 7,44-7,52 (1H, t), 7,88 8,66 - 8,70 (1H, d), 8,70 (1H, s,
8,04 (5H, m),
H), 9,3 (1H, br s, NH),
13,6 (1H, br s, NH), m/z (El) : 305 (M+), 288, 260, 145.
Příklad 13
Postup přípravy 2-(4’-methoxyfenyl)-l-H-benzimidazol-4karboxamidu (sloučenina NU1098).
(a) První stupeň - postup přípravy methylesteru kyseliny 2-amino-3-N-(4’-methoxybenzoyl)aminobenzoové.
Při této přípravě bylo použito standardního postupu A, víz výše, přičemž podle tohoto provedení byly methylester kyseliny 2,3-diaminobenzoové (v množství 670,3 miligramu, což je 4,038 mmolu), suchý tríethylamín (použito 842,6 μΐ, což je 6,057 mmolu) a DMAP (25 miligramů) rozpuštěny v suchém THF (20 mililitrů). K této reakční směsi přidán roztok 3-methoxybenzoylchloridu (v množství 567 μΐ, což je 6,038 mmolu) v suchém THF (12 mililitrů). Takto získaný pevný zbytek byl přečištěn v chromatografické koloně, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 99 : 1, načež potom byl takto získaný produkt dvakrát rekrystalován ze směsi benzínu (40/60) a ethylacetátu. Tímto způsobem byl získán požadovaný produkt.
Výtěžek : 282,6 miligramu (23 %).
Teplota tání : 124 - 125 °C,
Analýza pro <316^16^2θ4 ' • •·· · · < · «·«♦ • 9 · * · « · ·· ♦ {· ♦ ·>· f · 9 99 9 ♦9 • 9 9 9 9 9 9· •k? ♦ · · · 9 9 9 999 *4· ·
| vypočteno : | 64,0% C | 5,33 % H | 9,33 | % N | |
| nalezeno : | 63,9% C | 5,11 % H | 9,24 | % N | |
| vmax | : 3386,19, | 3292,38, | 1697,97, | 1586,87, | |
| 1520,79, 1250,27, | |||||
| δΗ : 3,92 | (3H, s), 3,93 | (3H, s), | 6,61 | (2H, s | ., nh2), |
| 6,68 - 6,76 | (1H, ΐ), 7,22-7,27 | (1H, | d), | ||
| 7,44 - 7,47 | (1H, d), 7,49 - 7,57 | (1H, | ΐ) , | ||
| 7,66 (1H, s | ,2 -Η), 7,67-7,71 | (1H, | d) , | ||
| 7,79 - 7,84 | (1H, d), 9,8 | (1H, s, | NH), | ||
| m/z (El) : | 300 (M+), 283, 135, | 107. | |||
| (b) Druhý stupeň - postup | přípravy | acetátové | soli | ||
| methylesteru kyseliny | 2-(3’-methoxyfenyl) | -1-H- |
benzimidazol-4-karboxylové.
Při této přípravě bylo použito standardního postupu B, viz výše, přičemž podle tohoto provedení byl zahříván roztok methylesteru kyseliny 2-amino-3-N-(3’-methoxybenzoyl)aminobenzoové (použito 356,9 miligramu, což je 1,19 mmolu) v ledové kyselině octové (12 mililitrů). Po odstranění rozpouštědla za sníženého tlaku následovala rekrystalizace ze směsi benzínu (40/60) a ethylesteru kyseliny octové a tímto způsobem byl získán požadovaný produkt ve formě čisté látky.
Výtěžek
235,6 miligramu (58 %).
Teplota tání : 93 - 94 °C,
| Analýza pro | C16H14N2°3 | . CH3CO2H : | |||
| vypočteno : | 63,16% C | 5,26 % | H 8,18 | % | N |
| nalezeno | 62,66% C | 5,13 % | H 8,06 | % | N |
| vmax : | 3453,23, | 3375,10, | 1706,75, | 1257,40, |
<5h : 1,99 (3H, s, CH3CO2H) , 3,96 (3H, s) , 4,06 (3H, s) ,
7,15 - 7,21 (1H, d), 7,38 - 7,46 (1H, t),
7,51 - 7,59 (1H, t), 7,91 - 8,00 (3H, m), e 9
8,04 - 8,08 (1H, d), 12,0 (1H, s), 12,5 (1H, s), m/z (El) : 282 (M+- CH3CO2H), 250.
(c) Třetí stupeň - postup přípravy 2-(3’-methoxyfenyl)l-H-benzimidazol-4-karboxamidu (sloučenina NU1098).
Při této přípravě bylo použito standardního postupu C, viz výše, přičemž podle tohoto provedení byl použit roztok methylesteru kyseliny 2-(3 ’-methoxyfenyl)-1-H-benzimidazol4-karboxylové (v množství 203 miligramů, což je 0,596 mmolu) v kapalném amoniaku a tento roztok byl zahříván za konstantního objemu. Takto získaný pevný zbytek byl potom rekrystalován z methanolu, čímž byl získán požadovaný čistý produkt.
| Výtěžek : 73,5 | i miligramu | (46 %). | ||
| Teplota tání : | 223 - 225 | °c, | ||
| Analýza pro | C15H13N3°2 | |||
| vypočteno : | 67,42% C | 4,87 % | H 15,73 | % N |
| nalezeno : | 67,52% C | 4,91 % | H 15,62 | % N |
| vmax : | 3408,59, | 3388,94, | 3168,65, 1662,05, |
1625,86, 1603,39,
| δΗ : 3,99 | (3H, | s, OCH3), 7,22 | - 7,27 (1Ή, d), | |
| 7,43 - 7,51 | (1H, | t), | 7,58 - 7, | 66 (1H, t), |
| 7,85 - 8,01 | (5H, | m) , | 9,4 - 9,5 | (1H, br s), 13,5 |
| m/z (El) : | 267 | (M+) | , 250. | |
| P ř í k 1 a | d | 14 |
Postup přípravy 2-(2’-trifluormethylfenyl)-1-H-benzimidazol4-karboxamidu (sloučenina NU1104).
(a) První stupeň - postup přípravy methylesteru kyseliny 2-amino-3-N-(2’-trifluormethylbenzoyl)aminobenzoové.
• · · · · > · · ·· · · • · · · · to ♦ to < to· · • to * ·· · · · to · • to toto· f · · «··· · • toto · to · » · · ·· to··· toto ···· tof ··
Při této přípravě bylo použito standardního postupu A, viz výše, přičemž podle tohoto provedeni byl roztok methylesteru kyseliny 2,3-diaminobenzoové (v množství 564 miligramů, což je 3,4 mmolu) v THF (20 mililitrů) společně s triethylaminem (použito 709 μΐ, což je 5,1 mmolu) a dimethylaminopyridinem (DMAP, 21 miligramu) promíchávány a k této reakční směsi byl přidán roztok
2-trifluormethylbenzoylchloridu v THF (20 mililitrů). Výsledný olejový zbytek byl potom absorbován na oxidu křemičitém a potom byl tento podíl podroben zpracování v chromatografické koloně, kde jako elučního činidla bylo použito směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 99 : 1. Takto získaný produkt byl rekrystalován ze směsi benzínu (40/60) a ethylacetátu, a tímto postupem byla připravena titulní sloučenina v čistém stavu.
Výtěžek : 303 miligramů (26 %).
Teplota tání : 163 - 166 °C,
Analýza pro ^16^13^3^2θ3 ' vypočteno : 56,80% C 3,85 % nalezeno : 56,91% C 3,75 % vmax 3329,85, 3243,90,
1663,58, 1312,69,
H 8,28 % N
H 8,29 % N
2955,52, 1696,66, δΗ : 3,94 (3H, s, CO2CH3), 6,58 (2H, s, NH2),
6,74 - 6,82 (1H, t),
7,79 - 8,03 (5H, m), m/z (El) : 338 (M+) ,
7,57 - 7,62 (1H, d),
10,0 (1H, s, NH),
321, 289, 173, 145.
(b) Druhý a třetí stupeň - postup přípravy 2-(2’-trifluormethyl)-l-H-benzimidazol-4-karboxamidu (sloučenina NU1104).
Podle tohoto postupu byl získaný produkt z prvního stupně podroben postupně zpracování standardními postupy • 99 9 9 9' 99 f · · ·· • · ♦ φ 9 9<
• « 9 · 9· ♦ · ·< · * · *9 9·»
B a C, přičemž byla získána požadovaná titulní sloučenina.
Příklad15
Postup přípravy 2-(4’-aminofenyl)-l-H-benzimidazol-4karboxamidu (sloučenina NU1103).
(a) První stupeň - postup přípravy methylesterú kyseliny 2-amino-3-N-(4’-aminobenzoyl)aminobenzoové.
Podle tohoto postupu byl methylester kyseliny 2-amino-3-N-(4’-nitrobenzoyl)aminobenzoové (tato látka byla získána postupem podle prvního stupně v příkladu 11) suspendován v methanolu (40 mililitrů) a k této suspenzi byla přidána směs 10 0-ního paládia jako katalyzátoru na aktivním uhlí (přibližně 50 miligramů) v methanolu (10 mililitrů), přičemž tento přídavek byl proveden za míchání a pod atmosférou argonu. Takto získaný roztok byl potom hydrogenován za atmosférického tlaku po dobu 2 hodin. Po zfiltrování přes vrstvu celitu (chráněná značka), při kterém byl odstraněn katalyzátor, byl získán produkt, ze kterého bylo odstraněno použité rozpouštědlo za sníženého tlaku
| a tímto způsobem byla připravena bílá | pevná látka, která | ||
| byla usušena | za vysokého | vakua. | |
| Výtěžek : 204,1 miligramu | (92 %). | ||
| Teplota tání | : 197 - 200 | °c, | |
| Analýza pro | C15H15N3°3 | ||
| vypočteno : | 63,16 % C | 5,26 % H | 14,73 % N |
| nalezeno : | 62,95 % C | 5,30 % H | 14,39 % N |
| vmax : | 3472,55, | 3374,96, 3348,97, 3283,31, | |
| 1613,91, |
δΗ : 3,94 (3H, s, CO2CH3), 5,87 (2H, s, NH2),
6,54 (2H, s, NH2), 6,68 - 3,73 (2H, d),
6,73 - 6,76 (1H, ΐ), 7,42 - 7,47 (1H, d),
7,78 - 7,82 (2H, d), 9,4 (1H, s, NH) , m/z (El) : 285 (M+), 267, 235, 207, 120, 92.
(b) Druhý stupeň - postup přípravy acetátové soli methylesteru kyseliny 2-(4’-aminofenyl)-1-Hbenzimidazol-4-karboxylové.
Při této přípravě bylo použito standardního postupu B, viz výše, přičemž podle tohoto provedení byl methylester kyseliny 2-amino-3-N-(4’-aminobenzoyl)aminobenzoové (použito
186,5 miligramu, což je 0,654 mmolu) zpracováván horkým roztokem ledové kyseliny octové (8 mililitrů) po dobu 30 minut, přičemž po rekrystalizaci ze směsi benzínu (40/60) a ethylesteru kyseliny octové byla získána požadovaná titulní
Výtěžek tání :
pro
Analýza vypočteno : nalezeno vmax :
1607,56,
62,39% C
62,60% C
3450,66,
1253,80,
| δΗ : | 2,02 | (3H, s, | CH3CO2H), 4,08 | (3H, s, C02CH3) |
| 5,81 | (2H, s, | nh2) , | 6,75 - 6,80 (2H, d, J=8,6), | |
| 7,32 | - 7,40 | (1H, t) | , 7,83 - 7,86 | (1H, d), |
| 7,93 | -7,97 | (1H, d) | , 8,08 - 8,13 | (2H, d, J=8,6), |
| 11,9 | (1H, s) | , 12,1 | (1H, br s) , |
m/z (El) : 267 (M+- CH3C02H), 235, 207, 92, 60.
(c) Třetí stupeň - postup přípravy 2-(4’-aminofenyl)-1Hbenzimidazol-4-karboxamidu (NU1103).
Při této přípravy bylo použito standardního postupu C, viz výše, přičemž podle tohoto provedení byla acetátová sůl methylesteru kyseliny 1(4’-aminofenyl)-l-H-benzimidazol-4karboxylové (v množství 113 miligramů, což je 0,346 mmolu) zpracovávána kapalným amoniakem za tlaku a po dobu 24 hodin. Požadovaná čistá titulní sloučenina byla izolována od surového materiálu zpracováním v chromatografické koloně, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi dichlormethan a methanolu v poměru 90 : 10.
Výtěžek : 21,4 miligramu (25 %). Teplota tání : 237 - 240 °C, δΗ : 5,90 2(H, s, NH2), 6,79 - 6,83 (2H, d, J=8,3),
7,31 - 7,39 (1H, t), 7,71 - 7,75 (1H, d), 7,84 (1H, s, NH) , 7,88 - 7,92 (1H, d), 8,00 - 8,04 (2H, d, J=8,3),
9,5 - 9,6 (1H, br s, NH), 13,0 (1H, br s, NH).
Test na PARP inhibiční účinnost
Sloučeniny podle předmětného vynálezu, zejména sloučeniny uvedené v předchozích příkladech, byly testovány in vit no na účinnost týkající se PARP inhibice, přičemž při těchto testech byly použity následující látky a postupy.
V principu byl použitý PARP test založen na aktivaci endogeni PARP (jak bude ještě podrobně vysvětleno dále) v buňkách obsahujících exogenní [22P]-NAD+ zavedený do těchto buněk suspendováním těchto buněk v roztoku [22P]-NAD+, ve kterých bylo dosaženo permeability ve fázi počátečního předběžného zpracování. Takto vzniklou póly(ADP-ribózu), která byla potom syntetizována uvedeným enzymem, je možno vysrážet trichloroctovou kyselinou (TCA) a potom změřit množství inkorporované radioaktivně značené 22p, například za použití scintilačního měřiče, čímž se zjistí míra účinnosti PARP za určitých podmínek použitých v tomto experimentu. Opakováním tohoto experimentu, při kterém se použije stejných podmínek, prováděným v přítomnosti každé testované sloučeniny je potom možno snížení enzymové aktivity, což představuje inhibiční účinek
-2 O této testované sloučeniny, odhadnout ze snížení [ p], jestliže k němu dojde, ve vysrážené póly(ADP-ribóze) účinkem TCA.
Výsledky tohoto testu je možno vyjádřit jako procentuální inhibici nebo snížení aktivity pro jednu nebo více rozdílných koncentrací každé testované sloučeniny, nebo je možno tento výsledek vyjádřit jako koncentraci testované sloučeniny, která sníží enzymovou aktivitu o 50 %, to znamená jako IC^q hodnotu. To tedy znamená, že je možno tímto způsobem získat řadu porovnatelných hodnot inhibiční účinnosti pro celou škálu rozdílných testovaných sloučenin.
Prakticky se tento postup prováděl tak, že byly jako zdroj PARP enzymu použity buňky leukémie L1210 odebrané od myší, které byly předtím zpracovány na permeabilní buňky na α y exogenní [ p]NAD vystavením působení hypotonického pufru a šoku chladem. Ve výhodném provedení této metody, u kterého bylo zjištěno, že je možno dosáhnout přesných a reprodukovatelných výsledků, bylo definované množství malého syntetického oligonukleotidu, zejména je možno uvést jednotlivý řetězec oligonukleotidu, který má palindromickou sekvenci CGGAATTCCG, zavedeno do buněčné suspenze pro aktivování PARP enzymu. Tato oligonukleotidová sekvence se na sobě stočí dozadu a vytvoří dvouřetězcovou molekulu s jediným tupým koncem, přičemž tato struktura představuje efektivní substrát pro aktivování PARP. Jeho vlastnosti jako účinného aktivátoru uvedeného enzymu bylo potvrzeno na provedených testech.
• 9 · · 9 * 9 · 9 9 9 9«
9 9 9 9 Λ999
9999 99 9999 99··
Zvolený experimentální protokol, podle kterého byl syntetický oligonukleotid, který byl popsán výše, zaveden do specifického aktivátoru PARP, rozlišoval mezi PARP a dalšími mono-ADP-ribosyltransferázami v buňkách. Z výše uvedeného vyplývá, že zavedení těchto syntetických oligonukleotidů způsobovalo pětinásobnou až šestinásobnou stimulaci inkorporované radioaktivně značené části, a tuto skutečnost je možno přisoudit pouze PARP aktivitě.
Další detaily provádění tohoto testu jsou uvedeny v dalším popisu.
Použité materiály.
Mezi použité materiály patří následující látky :
DTT (dithiothreitol) :
Tato látka byla připravena jako 100 mM roztok (15,4 miligramů/mililitr) (použit jako antioxidační činidlo), přičemž tento roztok byl rozdělen na 500 μΐ alikvotní podíly a tyto podíly byly uchovávány při teplotě -20 °C.
Hypotonický pufr :
mM Hepes
4,5 % Dextran
4,5 mM MgCl2) (214 mg/100 ml) (4,5 g/100 ml) (92 mg/100 ml).
Výše uvedené složky byly rozpuštěny v asi 80 mililitrech destilované vody, načež byla hodnota pH upravena na 7,8 (za pomoci NaOH/HCl), přičemž objem roztoku byl potom upraven na 100 mililitrů destilovanou vodou a tento roztok byl potom uchováván v lednici. DTT byl přidáván na koncentraci 5 mM těsně (50 μΐ/rnililitr).
Isotonický pufr :
mM Hepes
130 mM KC1 % Dextran mM EGTA
2,3 mM MgCl2
225 mM sacharóza před samotným použitím (1,9 g/200 ml) (1,94 g/200 ml) (8 g/200 ml) (152 mg/200 ml) (94 mg/200 ml) (15,39 g/200 ml)
Výše uvedené složky byly rozpuštěny v přibližně 150 mililitrech destilované vody, hodnota pH byla upravena na 7,8 (za pomoci NaOH/HCl), takto získaný roztok byl upraven na objem 200 mililitrů přídavkem destilované vody a uchováván v lednici. DTT byl přidáván na koncentraci
21,5 mM těsně před samotným použitím (25 μΐ/mililitr).
NAD :
NAD byl uchováván jako pevná látka ve formě předem zvážených alikvotních podílů při teplotě -20 °C. Z těchto podílů byly připraveny roztoky o koncentraci přibližně 6 mM (4 až 4,5 miligramu/mililitr) těsně před provedením testu, přičemž molarita byla stanovena změřením optické hustoty (O.D.) při 260 nm. Zásobní roztoky byly potom zředěny vodou tak, aby byla dosažena koncentrace 600 μΜ, načež bylo přidáno malé množství p značeného NAD (to znamená 2 až 5 μΐ/mililitr).
Oligonukleotid :
Použit byl oligonukleotid, který měl palindromickou sekvenci CGGAATTCCG, který byl syntetizován běžným způsobem metodami běžně známými z dosavadního stavu techniky, načež ♦ · ·· ·♦ ·♦ ·* ·· » · ♦ · « · · · · « · <
• · ♦ · · · · 9 99 9 99
9 9 9 9 9 9 99
9999 99 9999 9999 byl tento oligonukleotid vakuové vysušen a uchováván ve formě pelet v mrazáku. Před použitím byla tato látka upravena na koncentraci 200 gg/mililitr v 10 mM Tris/HCl, o hodnotě pH 7,8, s tím, že každá peleta byla úplně rozpuštěna v 50 mililitrech pufru. Takto získaný roztok byl potom zahříván na teplotu 60 °C na vodní lázni po dobu 15 minut, načež byl tento roztok ponechán pomalu ochladit, aby bylo zajištěno správné opětovné zpevnění. Po přidání 9,5 mililitru pufru byla zjištěna koncentrace změřením optické hustoty zředěného vzorku při 260 nm. Zásobní roztok byl potom zředěn na koncentraci 200 gg/mililitr a tento roztok byl potom uchováván ve formě 500 gl alikvotních podílů v mrazáku, připraven k okamžitému použití.
TCA :
Roztoky TCA (trichloroctové kyseliny) byly připraveny ve dvou koncentracích, a sice 10 % TCA + 10 % difosforečnan sodný, a 1 % TCA + 1 % difosforečnan sodný.
Buňky :
Buňky L1210, které byly použity jako zdroj PARP enzymu, byly uchovávány v následující formě : suspenze kultury v RPMI médiu + 10 % fetálního bovinního séra + glutamin a antibiotika (penicilín a streptomycin). Rovněž byly přidány HEPES a hydrogenuhličitan sodný, přičemž tyto buňky byly naočkovány 100 mililitry až 200 mililitry média, takže bylo dosaženo koncentrace přibližně 8 x 10^/mililitr v okamžiku provádění testu.
Použitá metoda :
Testované sloučeniny byly obvyklým způsobem připraveny jako koncentrované roztoky v DMSO (dimethylsulfoxid). Rozpustnost těchto sloučenin byla zjištěna tak, že byl podíl a··· 4 ♦ · · 4 4 44
4 4 4 4 4 4*4
4 4 44 4 4 * «44*4
444 44*444 •4 4444 4* 444» «44»
DMSO roztoku přidán k podílu isotonického pufru v takových požadovaných konečných podílech, které byly použity k provedení testu, a po určitém intervalu byl tento roztok prozkoumán pod mikroskopem ke zj ištěni známek tvorby krystalků.
Požadované množství buněk, zjištěné vyhodnocením na hemocytometru, bylo podrobeno odstředění (při 1500 otáčkách za minutu v odstředivce Europa , model 24M, přičemž odstřeďování bylo prováděno po dobu 5 minut), načež byl supernatant odstraněn a získané pelety byly potom opětně suspendovány ve 20 mililitrech slaného roztoku pufrovaného fosfátem prostého CA a Mg iontů (Dulbecova modifikace A, používaná zkratka Dul A), což bylo provedeno při teplotě 4 °C, načež bylo provedeno opětné odstřeďování při 1500 otáčkách za minutu při teplotě 4 °C. Potom byl opět odstraněn supernatant, buňky byly znovu suspendovány o koncentraci 3 x 10 buněk/mililitr v ledově chladném hypotonickém pufru a potom byly ponechány po dobu 30 minut na ledu. Potom bylo přidáno devět objemů ledově chladného isotonického pufru, přičemž tyto buňky, které byly nyní ve stavu, kdy byly permeabilní na exogenní NAD+, byly potom použity v intervalu další hodiny k provedení vlastního testu. Permeabilizace těchto buněk byla v této fázi zjištěna přidáním zásobních alikvotních podílů buněk do stejného objemu tryptanové modře, ponecháním v klidu po dobu 5 minut a vyhodnocením na hemocytometru. Buňky, které byly zpracovány tak, že byly permeabilní, zachycovaly tryptanovou modř a jevili se jako zbarvené.
Test byl potom proveden tak, že bylo použito běžné soupravy plastikových trubic o objemu 15 mililitrů s kónickým dnem, které byly uloženy v lázni s protřepávanou ·· ·· ·· ♦· ·· ·9 · ♦ · ♦ · · · · φ φ · *· · · ♦ · · · · · • · « · · · · · · · · · · • · · · · · · « « ·· *··· ·* ·»·« ·· ·· vodou o teplotě 26 °C, což je optimální teplota pro tento enzym. V obvyklém provedení tohoto testu bylo použito oligonukleotidového roztoku o koncentraci 5 gg/mililitr a roztoku obsahuj ícího testovanou sloučeninu v DMSO o koncentraci 2 %, a tento test byl proveden čtyřikrát, přičemž při provádění tohoto testu bylo do každé testovací trubice přidáno 5 gl oligonukleotidového roztoku, 50 gl o o roztoku obsahujícího 600 gm NAD + [a p]-NAD, 8 gl roztoku obsahujícího testovanou sloučeninu a DMSO a 37 gl vody. Před zahájením experimentu byl tento koktejl předběžně zahříván po dobu 7 minut při teplotě 26 ”C, a stejně tak to bylo provedeno s buněčnou suspenzí. Reakce byla potom nastartována přídavkem 300 gl buněčné suspenze. Tato reakce byla potom zastavena přídavkem 2 mililitrů ledově chladného 10 % TCA + 10 % roztoku difosforečnanu sodného.
Kromě toho co j iž bylo uvedeno bylo obvykle použito šest testovacích trubic jako porovnávací pokusy (slepé testy), přičemž tyto testovací trubice obsahovaly stejné složky jako bylo uvedeno výše, ovšem před přidáním buněčné suspenze, byl přidán roztok TCA k zamezení průběhu jakékoliv reakce. Tímto způsobem bylo provedeno korigováni na veškeré nespecifické vazby označeného materiálu na použitý filtr (viz dále).
Po přidání buněčné suspenze v určitých časových intervalech do každé z testovacích trubic byl do každé testovací trubice přidán roztok obsahující 10 % TCA + 10 % difosforečnanu sodného o teplotě 4 °C, což bylo provedeno přesně 5 minut po přídavku buněčné suspenze do této testovací trubice. V dalším postupu, po ponechání těchto trubic na ledu po dobu minimálně jedné hodiny, byly obsahy jednotlivých trubic zfiltrovány za pomoci oddělených ·· 99
Φ · Φ Φ filtračních nálevek za použití odsávací filtrační aparatury a GF/C filtračních prvků (hrubá strana směrem nahoru) zvlhčených 10 % TCA. Po zfiltrování obsahu každé trubice a opláchnutí filtrů, což bylo provedeno několikrát roztokem 1 % TCA + 1 % difosforečnanu sodného, byly tyto filtry opatrným způsobem odstraněny a usušeny a potom byly umístěny do jednotlivých scintilačnich zkumavek. Kromě toho byly použity čtyři další scintilační zkumavky, které byly použity jako referenční standardy a tyto zkumavky obsahovaly 10 μΐ
-2 O roztoku 600 μΜ NAD + [ p]-NAD, přičemž do každé zkumavky bylo přidáno 10 mililitrů scintilačního činidla. Vyhodnocování bylo potom prováděno po dobu 2 minut na
O 9 β-počítači ke zjištění přítomného p, a tímto způsobem bylo stanoveno množství přítomné póly(ADP-ribózy) a aktivita PARP enzymu.
Výsledky in vitro PARP inhibičních testů.
Kromě provedení PARP enzymového testu, při kterém bylo použito shora uvedené standardní metody, a testována byla celá řada sloučenin připravených podle předmětného vynálezu, byly rovněž provedeny porovnávací testy, při kterých byla výše uvedená standardní metoda použita na určité benzamidové sloučeniny, konkrétně benzamid, 3-hydroxybenzamid a 3-methoxybenzamid, o kterých je známo, že projevují určitý PARP inhibiční účinek. V následující tabulce, která je uvedena na konci popisné části, je v tabulkové formě uveden přehled některých příkladných sloučenin, které spadají do rozsahu předmětného vynálezu a/nebo představuj i všeobecně známé sloučeniny, které byly testovány shora popsanou metodou, a rovněž jsou zde uvedeny výsledky PARP inhibičních testů získané při provádění jednoho nebo více jiných testovacích experimentů, přičemž tyto výsledky jsou ·· ·· ·· ♦· «· ·· • · · · 9 9 9 · 9 9 99 • 9 9 9 9 9 9 999
9 9 9 9 9 999999· • · · 9 9 9 9 99
9999 99 9999 9999 vyjádřeny buďto jako procentuální inhibice při koncentraci μΜ nebo, což je obvyklejší, jako hodnoty IC^q, pro testované sloučeniny při použití výše popsané testovací metody.
Při posuzování dosažených výsledků je možno považovat známé PARP inhibitory, to znamená benzamid, 3-aminobenzamid a 3-methoxybenzamid, jako referenční sloučeniny. I když se dosažené výsledky poněkud liší, obecně j je možno uvést, že sloučeniny podle předmětného vynálezu, které byly testovány, vykazovaly relativně vysoký stupeň inhibiční účinnosti. Zejména jsou v tomto směru benzimidazolkarboxamidy, které jsou označeny referenčními značkami NU1064, NU1066, NU1086, a zejména sloučeniny označené NU1070, NU1076, NU1077, NU1085, NU1090, NU1091, NU1092, NU1093 a NU1098, přičemž z těchto sloučenin vykazovaly sloučeniny pod označením NU1091 a NU1092 výjimečně dobré výsledky pokud se týče inhibiční účinnosti.
Další studie na biologickou aktivitu.
Podle těchto metod byly opět použity kultury buněčných linií leukémie L1210 odebrané od myší, přičemž byly provedeny experimenty na inhibici růstu za účelem zjištění cytostatických účinků sloučenin podle předmětného vynálezu a kromě toho byly provedeny testy na klonogenní přežívání ke zjištění cytotoxicity, zejména ve vztahu na použití sloučenin podle předmětného vynálezu ve spojení s cytotoxickými činidly poškozujícími DNA, jako jsou například cytotoxická protinádorová léčiva nebo gama ozařování. Poškozování DNA a účinek PARP inhibitorů na proces tvoření rozrušeného DNA řetězce a jeho opravy byl rovněž zjišťován pomocí testu na poruchu DNA řetězce
a monitorování alkalické eluce, přičemž bylo použito metod všeobecně známých a publikovaných.
Při testu na inhibování růstu byly v obvyklém provedení L1210 buňky naočkovány v koncentraci 1 x 104/mililitr do 24 jímkových multiplat, přičemž tento test byl uskutečněn ve troj ím provedení, načež byly po 24 hodinách přidány sloučeniny nebo testovaná léčiva ve zvolených kombinacích a koncentracích. V tomto časovém okamžiku byla jedna sestava vzorků (zdvojený pokus) vyhodnocena pomocí Coulterova počítače (Νθ) a po 48 hodinách byly vyhodnoceny zbývající vzorky (N^). Tímto způsobem mohla být odhadnuta procentuální (%) inhibice růstu v případě vzorků ošetřených léčivou látkou. V případě experimentů s kombinacemi látek, kdy byla zkoumána možnost synergických účinků na růst buněk nebo klonogenicita, byla jako kontrolní hodnota vzata pevná koncentrace cytotoxického vzorku léčiva, to znamená temozolomidu (TM).
Příklady testů na cytotoxicitu in vitro.
Podle jednoho z příkladných provedení testu na cytotoxicitu in vitro bylo použito sloučeniny NU1064 (což je 2-methylbenzimidazol-4-karboxamid), přičemž podle tohoto postupu byly myší leukemické buňky L1210 postupně inkubovány zvyšující se koncentrací výše uvedené sloučeniny NU1064 v přítomnosti nebo v nepřítomnosti 100 μΜ methylačního činidla, temozolomidu, v konečné koncentraci DMSO 1 %, přičemž tento postup byl prováděn v intervalu 24 hodin při teplotě 36 °C. Tyto buňky byly potom peletovány, načež byly opětně suspendovány v čerstvém médiu, potom byly sečteny a naočkovány k utvoření kolonií v 0,15 % agaróze v médiu neobsahujícím léčivou látku. Po jednom týdnu byly kolonie • · • · · · životaschopných buněk označeny MTT (1 mililitr
0,5 mg/mililitr) a sečteny. Účinnost na plotně v případě kontrolních vzorků (89 %) a temozolomidu samotného (32 %) byla normalizována na 100 % přežívajících buněk a účinnost na plotně v případě buněk ošetřených NU1064 byla vyjádřena jako procento těchto hodnot.
V případě použití samotné sloučeniny NU1064 nastává určité mírné snížení přežití buněk (relativní účinnost na plotně při koncentraci 100 μΜ a 200 μΜ sloučeniny NU1064 = 72 %, respektive 54 %), ovšem značného zvýšení temozolomidové cytotoxicity se zvyšujícími se koncentracemi sloučeniny NU1064 (relativní účinnost na plotně při koncentraci 100 μΜ a 200 μΜ sloučeniny NU1064 = 28 %, respektive 2 %) naznačuje na určité podporování temozolomidové cytotoxicity souvisící se zvyšující se koncentrací sloučeniny NU1064. Tyto výsledky jsou ilustrovány na přiloženém obr. 1.
Při jiných testech na klonogenní přežívání byly obvyklým způsobem buňky L1210 vystaveny působení různých koncentrací TM ± pevné koncentrace PARP inhibitoru po stanovený časový interval 16 hodin, přičemž předtím byly spočítány a naočkovány formace kolonií v 0,12 až 0,15 % agaróze v médiu neobsahujícím léčivo. Po 7 až 10 dnech byly kolonie označeny 0,5 mg/ml MTT a sečteny vizuálně na mřížkovém boxu. Tímto způsobem bylo možno znázornit křivky na přežívání a stanovit hodnotu DEF-^θ, přičemž tato hodnota DEF^q je definována jako poměr koncentrace TM, při které je dosaženo snížení přežití na 10 %, dělené koncentrací TM, při které je dosaženo snížení přežiti na 10 % v přítomnosti stanovené koncentrace PARP inhibitoru.
• · ·
Pří dalším testu na klonogenní přežití je možno k poškození buněk použít ozařování gama paprsky. V obvyklém provedení tohoto testu se buňky L1210 (3 mililitry, 4 x 10 /mililitr v plastických nádobkách) ozáří při teplotě 4 ”C různými dávkami gama záření v přítomnosti nebo v nepřítomnosti sloučeniny, která je testována, a konečné koncentrace 2 % DMSO. Tyto buňky se potom inkubují při teplotě 37 °C po dobu 2 hodin za kontinuální přítomnosti nebo nepřítomnosti PARP inhibitoru, načež se naočkují za účelem tvorby kolonií.
Oprava potenciálního lethálního poškození (PLD) nastává v případě, kdy jsou buňky udržovány ve stacionární fázi po iniciování PLD, načež se ponechá proběhnout buněčné dělení. Při dalším typickém experimentu na testování potenciálních PARP inhibitorů, se buňky L1210 s PLD způsobeným gama zářením ponechaj í opravit v přítomnosti nebo nepřítomnosti testované sloučeniny následujícím způsobem : L1210 buňky se udržují v kultivačním prostředí dokud se nedosáhne stacionární fáze (> 10^ buněk/mililitr). Potom se provede zředění na 1,5 x 10^/mililitr v kondicionováném médiu z kultury ze stacionární fáze za účelem zabránění buněčného dělení. Vzorky buněk o objemu 2 mililitry ve dvoj ím provedení v plastických nádobkách byly potom uchovávány na ledu, těsně před a okamžitě po ozáření provedeném gama paprsky 8 Gray. Potom se přidá 1 mililitr koncové koncentrace testované sloučeniny (3x) v kondicionovaném médiu ze stacionární kultury tak, aby se dosáhlo vhodných koncových koncentrací (to znamená 10° buněk/mililitr v 1 % DMSO ± testované sloučeniny) a potom se tyto buňky inkubují při teplotě 37 °C po dobu 0, 2 a 4 hodiny, načež se provede opětné suspendování v médiu neobsahujícím léčivo a naočkování za účelem tvorby kolonií.
• ·
Vhodnou kontrolu pro stanovení relativního přežití buněk mohou poskytnout neozářené kultury stacionární fáze inkubované při teplotě 37 °C po dobu 0, 2 nebo 4 hodiny obsahující 1 % DMSO ± stejné množství testované sloučeniny. V nepřítomnosti PARP inhibitoru se přežívání buněk obvykle zvyšuje s pokračujícím časem. Například je možno uvést, že v případě jedné řady prováděných experimentů, v případě, kdy bylo provedeno naočkování bezprostředně po ozáření (bez opravy) přežilo pouze asi 0,2 % buněk, ovšem po 4 hodinách opravné periody se toto množství zvýšilo na 0,7 %. Účinné PARP inhibitory blokují tuto opravu a tím snižují rychlost přežiti.
Pokud se týče testu na poškození DNA řetězce, což bylo zmiňováno v předchozím textu, obvykle se tento postup provádí tak, že se vzorky buněk L1210 inkubují po určitý časový interval, jako například po dobu 1 hodiny, určitou stanovenou koncentrací, jako například 150 μΜ, temozolomidu a kromě kontrolních vzorků se testování provádí v přítomnosti zvyšuj ících se koncentrací testovaných PARP inhibitorů. Čím je účinnější inhibitor, tím se dosáhne větší rychlosti alkalické eluce (měřítko míry rozrušení řetězce) v porovnání se samotným temozolomidem.
K uvedeným testům je možno obecně uvést, že tyto provedené studie plně podporují předpoklad, že PARP inhibiční charakteristiky testovaných sloučenin reflektují schopnost těchto sloučenin potenciovat cytotoxicitu činidel poškozujících DNA, jako jsou určitá cytotoxická protinádorová léčiva a ozařování používané při radioterapii. Vzhledem k výše uvedenému, jestliže se vezmou v úvahu silné PARP inhibiční charakteristiky sloučenin podle předmětného vynálezu, je možno předpokládat, že jsou tyto sloučeniny • · zejména vhodné pro podávání ve spojení s -těmito cytotoxickými léčivy nebo radioterapií za účelem zesílení cytotoxického účinku těchto činidel v průběhu léčby popisované výše.
V následujícím je uvedena tabulka s výsledky farmakologických testů, které byly blíže popsány ve shora uvedeném textu.
| ΦΦ | • · | φφ | φφ | φφ | φ φ | ||||
| • | • | φ φ | • φ | φ · | φ · | φ | • | ||
| • | • | φ | • | φ | φ | φ φ | • · | ||
| • | • | φ | φ φ | φ | φ | φ ··· | φ | • | |
| • | • | φ | φ φ | φ | φ | φ | • | ||
| ·· | ·Φ·Φ | ·· | ···« | • φ | φφ |
| Pomocné označení | Název sloučeniny | Struktura | % inhibice při 10 μΜ nebo hodnota IC50 |
| Ref | benzamid C7H7O Molekulová hmotnost 121,1 | c/ | ICJ0= 12.4 ±3.1 μΜ |
| Ref | 3-hydroxybenzamid C7H7NO2 Molekulová hmotnost 137 | qA., OH | ICJ0 « 8.0 ± 3.5 μΜ (7) |
| Ref | 3 -methoxybenzamid C8H9NO2 Molekulová hmotnost 151 | CÚ·' och3 | 55 |
| NU1064 | 2-methylbenzimidazol4-karboxamid C9H9N3O Molekulová hmotnost 175,38 | OÚ' HN- ch3 | ICJ0= 1.09 ±0.23 μΜ (3) |
| NU 1066 | benzimidazol-4karboxamid C8H7N3O Molekulová hmotnost 161,16 | CC HN—/ | ICJ0= 1.26μΜ IC50= 1.02μΜ |
| NU1067 | benzimidazol-4karboxylová kyselina C8H6N2O2 Molekulová hmotnost 162,14 | QČ HN—7 | Inaktivní |
| NU1070 | 2-fenylbenzimidazol-4- ’ karboxamid C14HUN3O Molekulová hmotnost 237,26 | ? NHa \ N HN—/ | IC50 = 92 nM 1C5O= 103 nM |
| NU 1076 | ; 2-(4-methoxyfenyl)benzimidazol-4karboxamid C,5H13N3O2 Molekulová hmotnost 267,28 | O NHa HN—/ Q och3 | ICJ0.» 59 nM |
| NU 1077 | 2-(4-trifluormethylfenyl)benzimidazol-4karboxamid C15H10N3OF3 Molekulová hmotnost 305,25 | cf3 | ICi0«75nM |
| NU 1085 | 2-(4-hydroxyfenyl)benzimidazol-4karboxamid C,4H„N3O2 Molekulová hmotnost 253,26 | b OH | IC50 = 77 nM |
| NU 1086 | 2-trifluormethylbenzimidazol-4karboxamid C16HI5N3O2 Molekulová hmotnost 281,31 | HNcf3 | ICJ0 = 1.6 μΜ |
| NU 1090 | 2-(4-methoxyfenyl)-Armethylbenzimidazol-4karboxamid c,6h15n3o2 Molekulová hmotnost 281,31 | b Me \ ' Q OCH, | ICJ0-~100nM |
| NU109I | 2-(4-nitrofenyl)benzimidazoI-4karboxamid C14HI0N4O3 Molekulová hmotnost 282,25 | ^X/C0NH2 HN-/ no2 | ICJ0 = 22 nM |
• *
| NU 1092 | 2-(4-kyanofenyl)benzimidazol-4karboxamid C14H10N4O Molekulová hmotnost 262,27 | HN-4 V/ CN | ICJ0 -33 nM |
| NU1093 | 2-(3-trifluormethylfenyl)benzimidazol-4karboxamid C15HI0N3OF3 Molekulová hmotnost 305,25 | ^X^CONH2 Q. HN-Z* | ICjo 76 nM |
| NU1098 | 2-(3-methoxyfenyl)benzimidazol-4karboxamid CI3H,3N3O2 Molekulová hmotnost 267,28 | V/ 00143 | ICJ0 - 130 nM |
| NUUOl | lV-benzoyl-2-(4methoxyfenyl)benzimidazol-4karboxamid C22H,7N3O3 Molekulová hmotnost 371,39 | 0 OM« | ICJ0 - 0.27 μΜ |
| NU1103 | 2-(4-aminofenyl)benzimidazol-4karboxamid c14hI2n4o Molekulová hmotnost 252,27 | g1' \ NHj | ICJ0 -91 nM |
| NU1104 | 2-(2-trifluormethylfenyl)benzimidazol-4karboxamid C15H10N3OF3 Molekulová hmotnost 305,25 | HN-íf.CF, O | Netestováno |
- 68 NUI105
N-karboxybenzyl-2-(4methoxyfenyl)benzimidazol-4karboxamid C23H19N3O4 Molekulová hmotnost 401,42
OCMj • · • · * · φ
Φ ·
Závěr
Předmětný vynálezu j e třeba brát komplexně tak, že zahrnuje jednotlivé nové znaky nebo kombinaci těchto znaků, které jsou popisovány v tomto textu, přičemž hlavní aspekty předmětného vynálezu je možno principiálně, ovšem neomezujícím způsobem, v širších mezích vyjádřit následuj ícím způsobem :
(i) Nové sloučeniny obecného vzorce I, definovaného výše, (ii) Sloučeniny obecného vzorce I se substituenty definovanými ve výše uvedeném textu (včetně forem představujících prekurzory léčiv a solí těchto látek) použitelné pro terapii nebo určené pro použití v lékařství a pro přípravu léčebných přípravků, použitelných například jako PARP inhibitory k podávání v kombinaci s cytotoxickými léčivy nebo s radioterapií k potenciování účinnosti těchto prostředků při léčeni nádorů, (iii) Postup přípravy nových sloučenin obecného vzorce
I, definovaných ve výše uvedeném textu, včetně veškerých nových meziproduktů vzniklých při provádění tohoto postupu, (iv) Farmaceutické prostředky obsahující sloučeninu obecného vzorce I, která byla definována výše, společně s farmaceuticky přijatelnou nosičovou látkou, a (v) Postup přípravy farmaceutického prostředku, definovaného ad (iv) viz výše, to znamená metodami uvedenými výše.
Claims (36)
- PATENTOVÉ NÁROKYJUDr. WoiW n »HA IŽ. HtoM &1. Použití sloučeniny obecného vzorce I pro přípravu prostředku k medicínskému nebo veterinárnímu účelu pro aplikování při terapii k inhibování aktivity enzymu póly(ADP-ribózy)polymerázy neboli PARP, rovněž označované jako ADP-ribosyltransferázy neboli ADPRT, přičemž toto inhibování enzymu tvoří prvek terapeutického léčení, a uvedená sloučenina představující aktivní PARP enzymové inhibiční činidlo je benzimidazol-4-karboxamidovou sloučeninou, která má obecný strukturní vzorec I :nebo je touto sloučeninou farmaceuticky přijatelná sůl této sloučeniny a/nebo je tato sloučenina ve formě prekurzoru léčiva, a uvedený strukturní obecný vzorec I je charakterizován tím, že :R je zvolen ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu (jako například CH2CH2OH), acylovou skupinu (jako je například acetylová skupina nebo benzoylová skupina) nebo případně substituovanou arylovou skupinu (jako je například fenylová ·· ·· ♦ t ♦·9 9 9 9Ί1 skupina) nebo aralkylovou skupinu (jako je například benzylová skupina nebo karboxybenzylová skupina), aR’ je zvolen ze souboru zahrnujícího vodík, alkylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu (jako například CH2CH2OH), acylovou skupinu (jako je například acetylová skupina nebo benzoylová skupina) nebo případně substituovanou arylovou skupinu (jako je například fenylová skupina) nebo aralkylovou skupinu (jako je například benzylová skupina nebo karboxybenzylová skupina).
- 2. Použití sloučeniny podle nároku 1, podle kterého alkylová skupina nebo každá přítomná alkylová skupina, buďto jako taková nebo jako součást alkoxyskupiny nebo jiné skupiny, obsahuje 1 až 6 atomů uhlíku.
- 3. Použití sloučeniny podle nároku 1 nebo 2, podle kterého :R znamená případně substituovanou fenylovou skupinu, která má strukturní obecný vzorec II :(Π) ve kterém :R^ , R2 a R9 jsou každý nezávisle na sobě vybrány ze souboru zahrnujícího atom vodíku, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu, N02, N3, NRgRg (kde R5 a Rg každý jednotlivě a na sobě nezávisle znamenají atom vodíku, alkylovou skupinu nebo alkoxyskupinu), dále NHCOR^ (kde R3 je alkylová skupina9 · nebo arylová skupina), CO2R4 (kde R4 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu), amidovou skupinu (jako například skupinu CONH2), tetrazolovou skupinu, alkylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, skupinu CV3 nebo V (kde V znamená halogen) a skupinu CN.• <» 9 • 9 9 · · ·
- 4. Použití sloučeniny podle nároku 3, podle kteréhoR-^ znamená skupinu jinou než atom vodíku, přičemž tato skupina je v poloze 4’, a R2 a Rg znamenají každý atom vodíku.
- 5. Použití sloučeniny podle některého z předchozích nároků, podle kterého :R’ znamená případně substituovanou fenylovou skupinu, která má obecný strukturní vzorec III : (ΠΙ) ve kterém :Ry, Rg a R10 jsou každý nezávisle vybrán ze souboru zahrnujícího atom vodíku, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu, N02, N3, NRgRg (kde Rg a Rg každý jednotlivě a na sobě nezávisle znamenají atom vodíku, alkylovou skupinu nebo alkoxyskupinu), dále NHCOR3 (kde R3 je alkylová skupina nebo arylová skupina), C02R4 (kde R4 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu), amidovou skupinu (jako například skupinu CONH2), tetrazolovou skupinu, alkylovou skupinu, hydroxalkylovou skupinu, skupinu CV3 nebo V (kde V znamená • φ halogen) a skupinu CN.
- 6. Použití sloučeniny podle nároku 5, podle kterého R-y znamená skupinu jinou než atom vodíku, přičemž tato skupina je v poloze 4’, a Rg a R-^θ znamenají každý atom vodíku.
- 7. Použití sloučeniny podle nároku 1, podle kterého R znamená skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího methylovou skupinu, ethylovou skupinu, n-propylovou skupinu, i-propylovou skupinu, n-butylovou skupinu, t-butylovou skupinu a cyklohexylovou skupinu.
- 8. Použití sloučeniny podle nároku 1, podle kterého R’ znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu a R znamená fenylovou skupinu nebo benzylovou skupinu, které obsahují přinejmenším jeden substituent na benzenovém kruhu, přičemž tento substituent je vybrán ze souboru zahrnujícího hydroxyskupinu, alkoxyskupinu, N02, Ng, NRgRg (kde Rg a Rg každý jednotlivě a na sobě nezávisle znamenají atom vodíku, alkylovou skupinu nebo alkoxyskupinu), dále NHCORg (kde Rg je alkylová skupina nebo arylová skupina), CO2R4 (kde R4 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu), amidovou skupinu (jako například skupinu CONH2), tetrazolovou skupinu, alkylovou skupinu, hydroxalkylovou skupinu, skupinu CVg nebo V (kde V znamená halogen) a skupinu CN.
- 9. Použití sloučeniny podle nároku 1, podle kterého je uvedená sloučenina vybrána ze souboru zahrnujícího :(a) 2-methylbenzimidazol-4-karboxamid, (b) benzimidazol-4-karboxamid, (c) 2-fenylbenzimidazol-4-karboxamid, • · (d) 2-(4’-methoxyfenyl)benzimidazol-4-karboxamid, (e) 2-(4’-trifluormethylfenyl)benzimidazol-4karboxamid, (f) 2-(4’-hydroxyfenyl)benzimidazol-4-karboxamid, (g) 2-trifluormethylbenzimidazol-4-karboxamid, (h) 2-(4’-methoxyfenyl)-N-methylbenzimidazol-4karboxamid, (i) 2-(4’-nitrofenyl)benzimidazol-4-karboxamid, (j) 2-(4’-kyanofenyl)benzimidazol-4-karboxamid, (k) 2-(3’-trifluormethylfenyl)benzimidazol-4karboxamid, (l) 2-(3’-methoxyfenyl)benzimidazol-4-karboxamid, (m) 2-(4’-methoxyfenyl)-l-N-benzoylbenzimidazol-4karboxamid, (n) 2-(4’-aminofenyl)benzimidazol-4-karboxamid, (o) 2-(2’-trifluormethylfenyl)benzimidazol-4karboxamid, a (p) N-karboxybenzyl-2-(4’-methoxyfenyl)benzimidazol4-karboxamid.
- 10. Použití sloučeniny podle některého z předchozích nároků, podle kterého je uvedená sloučenina ve formě prekurzoru léčiva, která má jako substituent skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího fosfátovou skupinu, karbamátovou skupinu nebo aminokyselinovou skupinu.
- 11. Použiti sloučeniny podle nároku 10, podle kterého forma prekurzoru léčiva je fosfátový derivát sloučeniny výše uvedeného obecného strukturního vzorce I.
- 12. Použití sloučeniny podle nároku 11, podle kterého je tato sloučenina ve formě fosfátového prekurzoru léčiva představujícího ve vodě rozpustnou fosfátovou amonnou sůl • · nebo fosfátovou sůl alkalického kovu odvozenou od sloučeniny obecného strukturního vzorce I, která má přinejmenším jednu hydroxylovou skupinu jako substituent.
- 13. Použití sloučeniny podle nároku 12, podle kterého sloučenina uvedeného obecného strukturního vzorce I, od kterého je odvozen fosfátový prekurzor léčiva, má hydroxylovou skupinu jako substituent, která zreagovala s dibenzylfosfonátem.
- 14. Benzimidazolová sloučenina obecného strukturního vzorce I :(I) nebo farmaceuticky přijatelná sůl odvozená od této sloučeniny a/nebo forma prekurzoru léčiva této sloučeniny, charakterizovaná tím, že v tomto obecném strukturním vzorci I :R je zvolen ze souboru zahrnujícího vodík, alkylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu (jako například CH2CH2OH), acylovou skupinu (jako je například acetylová skupina nebo benzoylová skupina) nebo případně substituovanou arylovou skupinu (jako je například fenylová skupina) nebo aralkylovou skupinu (jako je například benzylová skupina nebo karboxybenzylová skupina), s tou podmínkou, že R neznamená4’-methansulfonyloxy-2’-methoxyfenylovou skupinu, aR’ je zvolen ze souboru zahrnuj ícího vodík, alkylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu (jako například CH2CH2OH), acylovou skupinu (jako je například acetylová skupina nebo benzoylová skupina) nebo případně substituovanou arylovou skupinu (jako je například fenylová skupina), pro použití v terapii jako účinné farmaceutické látky.
- 15. Sloučenina obecného strukturního vzorce I :nebo farmaceuticky přijatelná sůl odvozená od této sloučeniny, ve kterém :R je zvolen ze souboru zahrnujícího vodík, alkylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu (jako například CH2CH2OH), acylovou skupinu (jako je například acetylová skupina nebo benzoylová skupina) nebo případně substituovanou arylovou skupinu (jako je například fenylová skupina) nebo případně substituovanou aralkylovou skupinu (jako je například benzylová skupina nebo karboxybenzylová ·· • · · · • · · · skupina), aR’ je zvolen ze souboru zahrnujícího vodík, alkylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu (jako například CH2CH2OH), acylovou skupinu (jako je například acetylová skupina nebo benzoylová skupina) nebo případně substituovanou arylovou skupinu (jako je například fenylová skupina), s tou podmínkou, že R neznamená4’-methansulfonyloxy-2’-methoxyfenylovou skupinu,
- 16. Sloučenina podle nároku 10 nebo 11, ve které alkylová skupina nebo každá přítomná alkylová skupina, buďto jako taková nebo jako součást alkoxyskupiny nebo jiné skupiny, obsahuje 1 až 6 atomů uhlíku.
- 17. Sloučenina podle nároku 14, 15 nebo 16, ve které :R znamená případně substituovanou fenylovou skupinu, která má strukturní obecný vzorec II :(Π) ve kterém :R-£, R2 a Rg jsou každý nezávisle na sobě vybrány ze souboru zahrnujícího atom vodíku, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu, N02, N3, NR^Rg (kde R5 a Rg každý jednotlivě a na sobě nezávisle znamenají atom vodíku, alkylovou skupinu nebo alkoxyskupinu), dále NHCOR3 (kde R3 je alkylová skupina nebo arylová skupina), CO2R4 (kde R4 znamená atom vodíku • 9 •9 · • 9 9 · nebo alkylovou skupinu), amidovou skupinu (jako například skupinu CONH2), tetrazolovou skupinu, alkylovou skupinu, hydroxalkylovou skupinu, skupinu CVg nebo V (kde V znamená halogen) a skupinu CN.• 999 99999 9 ·99·
- 18. Sloučenina podle nároku 17, ve které R^ znamená skupinu jinou než atom vodíku, přičemž tato skupina je v poloze 4’, a R2 a Rg znamenají každý atom vodíku.
- 19. Sloučenina podle některého z nároků 14 až 18, ve které :R’ znamená případně substituovanou fenylovou skupinu, která má obecný strukturní vzorec III : (III) ve kterém :r7, r8 a R10 jsou každý nezávisle vybrán ze souboru zahrnujícího atom vodíku, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu, N02, Νβ, NRgRg (kde Rg a Rg každý jednotlivě a na sobě nezávisle znamenají atom vodíku, alkylovou skupinu nebo alkoxyskupinu), dále NHCORg (kde Rg je alkylová skupina nebo arylová skupina), CO2R4 (kde R4 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu), amidovou skupinu (jako například skupinu CONH2), tetrazolovou skupinu, alkylovou skupinu, hydroxalkylovou skupinu, skupinu CVg nebo V (kde V znamená halogen) a skupinu CN.
- 20. Sloučenina podle nároku 19, ve které Ry znamená skupinu jinou než atom vodíku, přičemž tato skupina je v poloze 4’, a Rg a R-^θ znamenají každý atom vodíku.
- 21. Sloučenina podle nároku 14 nebo 15, ve kteréR znamená skupinu vybranou ze souboru zahrnuj ícího methylovou skupinu, ethylovou skupinu, n-propylovou skupinu, i-propylovou skupinu, n-butylovou skupinu, t-butylovou skupinu a cyklohexylovou skupinu.
- 22. Sloučenina podle nároku 14 nebo 15, ve které R’ znamená atom vodíku a R znamená fenylovou skupinu nebo benzylovou skupinu, které obsahují přinejmenším jeden substituent na benzenovém kruhu, přičemž tento substituent je vybrán ze souboru zahrnujícího hydroxyskupinu, alkoxyskupinu, N02, Ng, NRgRg (kde Rg a Rg každý jednotlivě a na sobě nezávisle znamenají atom vodíku, alkylovou skupinu nebo alkoxyskupinu), dále NHCORg (kde R3 je alkylová skupina nebo arylová skupina), CO2R4 (kde R4 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu), amidovou skupinu (jako například skupinu CONH2), tetrazolovou skupinu, alkylovou skupinu, hydroxalkylovou skupinu, skupinu CV3 nebo V (kde V znamená halogen) a skupinu CN.
- 23. Sloučenina podle nároku 14 nebo 15, přičemž touto sloučeninou je jedna sloučenina vybraná ze souboru zahrnuj ícího :(a) 2-methylbenzimidazol-4-karboxamíd, (b) benzimidazol-4-karboxamid, (c) 2-(4’-methoxyfenyl)benzimidazol-4-karboxamid, (d) 2-(4’-trifluormethylfenyl)benzimidazol-4karboxamíd, (e) 2-(4’-hydroxyfenyl)benzimidazol-4-karboxamid, (f ) 2-trifluormethylbenzimidazol-4-karboxamid, (g) 2-(4’-methoxyfenyl)-N-methylbenzimidazol-4karboxamid, (h) 2-(4’-nitrofenyl)benzimidazol-4-karboxamid, (i) 2-(4’-kyanofenyl)benzimidazol-4-karboxamid, ( j ) 2-(3’-trifluormethylfenyl)benzimidazol-4karboxamid, (k) 2-(3’-methoxyfenyl)benzimidazol-4-karboxamid, (l) 2-(4’-methoxyfenyl)-l-N-benzoylbenzimidazol-4karboxamid, (m) 2-(4’-aminofenyl)benzimidazol-4-karboxamid, (n) 2-(2’-trifluormethylfenyl)benzimidazol-4karboxamid, a (o) N-karboxybenzyl-2-(4’-methoxyfenyl)benzimidazol4-karboxamid.
- 24. Sloučenina podle některého z nároků 14 až 23, přičemž tato sloučenina je vhodná pro perorální nebo intravenózni terapeutické podávání a tato sloučenina je ve formě prekurzoru léčiva, která má jako substituent skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího fosfátovou skupinu, karbamátovou skupinu nebo aminokyselinovou skupinu.
- 25. Sloučenina podle nároku 24, kde forma prekurzoru léčiva je fosfátový derivát sloučeniny výše uvedeného obecného strukturního vzorce I.
- 26. Sloučenina podle nároku 25, přičemž tato sloučenina ve formě fosfátového prekurzoru léčiva představujícího ve vodě rozpustnou fosfátovou amonnou sůl nebo fosfátovou sůl alkalického kovu odvozenou od sloučeniny obecného strukturního vzorce I, která má přinejmenším jednu hydroxylovou skupinu jako substituent.
- 27. Sloučenina podle nároku 26, přičemž sloučenina uvedeného obecného strukturního vzorce I, od kterého j e odvozen fosfátový prekurzor léčiva, má hydroxylovou skupinu jako substituent, která zreagovala s dibenzylfosfonátem.
- 28. Způsob přípravy sloučeniny podle nároku 17, vyznačující se tím, že zahrnuje stupně reakce alkylesteru kyseliny 2,3-diaminobenzoové s chloridem arylkyseliny, zpracování získaného produktu kyselinou octovou při zvýšené teplotě k dosažení tvorby benzimidazolového kruhu a reakce s kapalným amoniakem za vzniku amidového derivátu.
- 29. Sloučenina podle některého z nároků 14 až 27 pro použití v terapii jako aktivního PARP-inhibičního činidla.
- 30. Použití sloučeniny podle některého z nároků 14 až 27 pro přípravu prostředku k medicínskému nebo veterinárnímu účelu pro aplikování při terapeutickém léčení savců.
- 31. Farmaceutický prostředek nebo kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle nároku 29 v jednotkové dávkové formě určené pro podávání savcům přispívající k léčení současně s PARP-inhibičním činidlem v průběhu terapie.
- 32. Farmaceutický prostředek nebo kompozice pro medicínské účely, vyznačující se tím, že obsahuje účinné PARP-inhibiční množství sloučeniny definované v některém z nároků 14 až 27 společně s farmaceuticky přijatelnou nosičovou látkou.
- 33. Farmaceutický prostředek nebo kompozice podle nároku 31 nebo 32, vyznačující se tím, že je určený pro použití ve spojení s cytotoxickými činidly nebo radioterapií při protinádorové terapii.
- 34. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje účinné PARP inhibiční množství sloučeniny podle nároku 29 ve směsi s terapeuticky vhodným a účinným množstvím cytotoxického léčiva pro použití při protinádorové terapii.
- 35. Způsob terapeutického léčení prováděného u savců, je kterých inhibování aktivity PARP enzymu je považováno za přispívající k léčení vyznačující se tím, že tento postup zahrnuje podávání těmto samcům účinného PARP-inhibičního množství sloučeniny podle některého z nároků 14 až 27.
- 36. Způsob podle nároku 35, vyznačující se tím, že se provádí ve spojení s podáváním cytotoxického léčiva nebo radioterapií poškozující DNA v průběhu protinádorové terapie.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GBGB9515843.2A GB9515843D0 (en) | 1995-08-02 | 1995-08-02 | Benzimidazole compounds |
| GBGB9611245.3A GB9611245D0 (en) | 1996-05-30 | 1996-05-30 | Benzimidazole compounds |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ30398A3 true CZ30398A3 (cs) | 1998-06-17 |
Family
ID=26307504
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ98303A CZ30398A3 (cs) | 1995-08-02 | 1996-07-30 | Benzimidazolové sloučeniny, farmaceutický prostředek obsahující tyto sloučeniny a použití těchto sloučenin jako chemoterapeutických činidel |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6100283A (cs) |
| EP (1) | EP0841924B1 (cs) |
| JP (1) | JPH11510154A (cs) |
| KR (1) | KR100447539B1 (cs) |
| CN (1) | CN1159007C (cs) |
| AP (1) | AP866A (cs) |
| AT (1) | ATE225173T1 (cs) |
| AU (1) | AU714873B2 (cs) |
| BR (1) | BR9610051A (cs) |
| CA (1) | CA2225465A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ30398A3 (cs) |
| DE (1) | DE69624115T2 (cs) |
| DK (1) | DK0841924T3 (cs) |
| EA (1) | EA000999B1 (cs) |
| ES (1) | ES2183004T3 (cs) |
| HU (1) | HUP9901092A3 (cs) |
| IL (1) | IL123147A (cs) |
| MX (1) | MX9800927A (cs) |
| NO (1) | NO317033B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ313713A (cs) |
| OA (1) | OA10661A (cs) |
| PL (1) | PL324869A1 (cs) |
| PT (1) | PT841924E (cs) |
| SK (1) | SK13598A3 (cs) |
| TR (1) | TR199800127T1 (cs) |
| WO (1) | WO1997004771A1 (cs) |
Families Citing this family (76)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2776291B1 (fr) * | 1998-03-18 | 2000-06-16 | Pf Medicament | Nouveaux derives bis-benzamides, leur procede de fabrication, les compositions pharmaceutiques les contenant et leur utilisation comme medicament |
| US6919366B2 (en) * | 1998-05-22 | 2005-07-19 | Avanir Pharmaceuticals | Benzimidazole derivatives as modulators of IgE |
| US6911462B2 (en) * | 1998-05-22 | 2005-06-28 | Avanir Pharmaceuticals | Benzimidazole compounds for regulating IgE |
| UA65635C2 (uk) * | 1998-09-03 | 2004-04-15 | Н-Гене Кутато Кфт. | НЕНАСИЧЕНІ ПОХІДНІ ГІДРОКСИМОВОЇ КИСЛОТИ, ЩО МАЮТЬ ВЛАСТИВОСТІ ІНГІБІТОРІВ NAD<sup>+</sup>-ADP-РИБОЗИЛТРАНСФЕРАЗИ |
| SK5952001A3 (en) * | 1998-11-03 | 2001-12-03 | Basf Ag | Substituted 2-phenylbenzimidazoles, the production thereof and their use |
| RU2001116581A (ru) * | 1998-11-17 | 2004-02-20 | БАСФ Акциенгезельшафт (DE) | Замещенные 2-фенилбензимидазолы и 2-фенилиндолы, их получение и применение |
| DE19916460B4 (de) * | 1999-04-12 | 2006-12-21 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Substituierte Benzimidazole, deren Herstellung und Anwendung |
| JP3432800B2 (ja) | 1998-11-27 | 2003-08-04 | アボット ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディトゲゼルシャフト | 置換ベンゾイミダゾールおよびそのｐａｒｐ阻害剤としての使用 |
| CN100418967C (zh) * | 1999-01-11 | 2008-09-17 | 阿古龙制药公司 | 聚(adp-核糖)聚合酶的三环抑制剂 |
| FR2788518B1 (fr) * | 1999-01-14 | 2001-03-02 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux carbamates actives stables, leur procede de preparation et leur utilisation pour la preparation d'urees |
| DE19918211A1 (de) | 1999-04-22 | 2000-10-26 | Basf Ag | Cycloalkylsubstituierte Benzimidazole, deren Herstellung und Anwendung |
| DE19920936A1 (de) * | 1999-05-07 | 2000-11-09 | Basf Ag | Heterozyklisch substituierte Benzimidazole, deren Herstellung und Anwendung |
| ECSP003637A (es) * | 1999-08-31 | 2002-03-25 | Agouron Pharma | Inhibidores triciclicos de poli (adp-ribosa) polimerasas |
| WO2001021615A1 (en) * | 1999-09-17 | 2001-03-29 | Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. | Benzimidazole derivatives |
| DE19946289A1 (de) * | 1999-09-28 | 2001-03-29 | Basf Ag | Benzodiazepin-Derivate, deren Herstellung und Anwendung |
| US6759425B2 (en) | 1999-10-21 | 2004-07-06 | Avanir Pharmaceuticals | Benzimidazole compounds for modulating IgE and inhibiting cellular proliferation |
| IT1315267B1 (it) * | 1999-12-23 | 2003-02-03 | Novuspharma Spa | Derivati di 2-(1h-indol-3-il)-2-oxo-acetammidi ad attivita'antitumorale |
| AU2001240542A1 (en) | 2000-02-01 | 2001-08-14 | Basf Aktiengesellschaft | Heterocyclic compounds and their use as parp inhibitors |
| DE10021468A1 (de) * | 2000-05-04 | 2001-11-08 | Basf Ag | Verwendung von PARP-Inhibitoren in kosmetischen Zubereitungen |
| DE10022925A1 (de) | 2000-05-11 | 2001-11-15 | Basf Ag | Substituierte Indole als PARP-Inhibitoren |
| BR0208010A (pt) * | 2001-03-12 | 2004-12-21 | Avanir Pharmaceuticals | Composto de benzimidazol para modulação de ige e inibição de proliferação celular |
| US7072771B2 (en) * | 2001-06-07 | 2006-07-04 | University Of Kentucky Research Foundation | Selective PARP-1 targeting for designing chemo/radio sensitizing agents |
| WO2003020698A2 (en) * | 2001-09-06 | 2003-03-13 | Prochon Biotech Ltd. | Protein tyrosine kinase inhibitors |
| DE10201240A1 (de) * | 2002-01-15 | 2003-07-24 | Bayer Ag | Substituierte Alkyluracile und ihre Verwendung |
| TW200304820A (en) * | 2002-03-25 | 2003-10-16 | Avanir Pharmaceuticals | Use of benzimidazole analogs in the treatment of cell proliferation |
| US20040034078A1 (en) * | 2002-06-14 | 2004-02-19 | Agouron Pharmaceuticals, Inc. | Benzimidazole inhibitors of poly(ADP-ribosyl) polymerase |
| AU2003270426A1 (en) | 2002-09-12 | 2004-04-30 | Avanir Pharmaceuticals | PHENYL-INDOLE COMPOUNDS FOR MODULATING IgE AND INHIBITING CELLULAR PROLIFERATION |
| TWI276631B (en) * | 2002-09-12 | 2007-03-21 | Avanir Pharmaceuticals | Phenyl-aza-benzimidazole compounds for modulating IgE and inhibiting cellular proliferation |
| US7179832B2 (en) * | 2003-01-23 | 2007-02-20 | Crystalgenomics, Inc. | Glycogen synthase kinase 3β inhibitor, composition and process for the preparation thereof |
| DE602004006852D1 (de) * | 2003-04-17 | 2007-07-19 | Janssen Pharmaceutica Nv | 2-phenyl-benzimidazol und 2-phenyl-imidazo-4,5ü-pyridin-derivate als checkpoint-kinase-cds1 (chk2)-hemmer zur behandlung von krebs |
| JP2007501618A (ja) * | 2003-08-08 | 2007-02-01 | アバニール・ファーマシューティカルズ | タンパク質輸送の選択的薬理学的阻害、および関連した、ヒト疾患を治療する方法 |
| TWI375673B (en) | 2005-04-11 | 2012-11-01 | Abbott Lab | 1h-benzimidazole-4-carboxamides substituted with a quaternary carbon at the 2-position are potent parp inhibitors |
| WO2006110683A1 (en) | 2005-04-11 | 2006-10-19 | Abbott Laboratories | 2-substituted-1h-benzimidazole-4-carboxamides are parp inhibitors |
| NZ565654A (en) | 2005-07-18 | 2010-10-29 | Bipar Sciences Inc | Use of iodonitrobenzamide compounds for the treatment of ovarian cancer |
| WO2007054814A1 (en) | 2005-11-14 | 2007-05-18 | Centre National De La Recherche Scientifique - Cnrs | Inhibitors of parp activity and uses thereof |
| EP1966157B1 (en) | 2005-11-15 | 2010-03-24 | Abbott Laboratories | Substituted 1h-benzimidazole-4-carboxamides are potent parp inhibitors |
| EP1976515A2 (en) * | 2006-01-17 | 2008-10-08 | Abbott Laboratories | Combination therapy with parp inhibitors |
| US20080293795A1 (en) * | 2006-01-17 | 2008-11-27 | Abbott Laboratories | Combination therapy with parp inhibitors |
| US20080280867A1 (en) * | 2006-01-17 | 2008-11-13 | Abbott Laboratories | Combination therapy with parp inhibitors |
| US20080146638A1 (en) * | 2006-01-17 | 2008-06-19 | Abbott Laboratories | Combination therapy with parp inhibitors |
| US20090029966A1 (en) * | 2006-01-17 | 2009-01-29 | Abbott Laboratories | Combination therapy with parp inhibitors |
| WO2007113596A1 (en) * | 2006-04-03 | 2007-10-11 | Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti Spa | Amide substituted indazole and benzotriazole derivatives as poly(adp-ribose)polymerase (parp) inhibitors |
| CA2647373C (en) | 2006-05-02 | 2014-03-18 | Abbott Laboratories | Substituted 1h-benzimidazole-4-carboxamides are potent parp inhibitors |
| US20080262062A1 (en) * | 2006-11-20 | 2008-10-23 | Bipar Sciences, Inc. | Method of treating diseases with parp inhibitors |
| AU2007292302A1 (en) * | 2006-09-05 | 2008-03-13 | Bipar Sciences, Inc. | Methods for designing PARP inhibitors and uses thereof |
| CN101522609A (zh) | 2006-09-05 | 2009-09-02 | 彼帕科学公司 | 癌症的治疗 |
| JP2010502731A (ja) | 2006-09-05 | 2010-01-28 | バイパー サイエンシズ，インコーポレイティド | Ｐａｒｐ阻害剤による脂肪酸合成の阻害、及びその治療方法 |
| EA016079B1 (ru) | 2007-01-10 | 2012-01-30 | Институто Ди Ричерке Ди Биолоджиа Молеколаре П. Анджелетти Спа | Амидзамещенные индазолы в качестве ингибиторов поли(adp-рибоза)полимеразы (parp) |
| US8067613B2 (en) | 2007-07-16 | 2011-11-29 | Abbott Laboratories | Benzimidazole poly(ADP ribose)polymerase inhibitors |
| US20090062268A1 (en) * | 2007-08-27 | 2009-03-05 | Lead Therapeutics, Inc. | Novel inhibitors of poly(adp-ribose)polymerase (parp) |
| US20090149417A1 (en) * | 2007-10-19 | 2009-06-11 | Valeria Ossovskaya | Methods and compositions for the treatment of cancer using benzopyrone-type PARP inhibitors |
| US7732491B2 (en) | 2007-11-12 | 2010-06-08 | Bipar Sciences, Inc. | Treatment of breast cancer with a PARP inhibitor alone or in combination with anti-tumor agents |
| NZ586675A (en) | 2008-01-08 | 2012-04-27 | Merck Sharp & Dohme | Pharmaceutically acceptable salts of 2-{ 4-[(3s)-piperidin-3- yl]phenyl} -2h-indazole-7-carboxamide |
| CN101999002A (zh) * | 2008-02-04 | 2011-03-30 | 彼帕科学公司 | 诊断和治疗parp-介导的疾病的方法 |
| WO2010083199A1 (en) | 2009-01-19 | 2010-07-22 | Abbott Laboratories | Benzthiazole inhibitors of poly(adp-ribose)polymerase |
| ES2523503T3 (es) * | 2010-03-04 | 2014-11-26 | Bayer Intellectual Property Gmbh | 2-Amidobencimidazoles sustituidos con fluoroalquilo y su uso para el aumento de la tolerancia al estrés en plantas |
| CN102417483A (zh) * | 2010-09-27 | 2012-04-18 | 中国药科大学 | 作为parp抑制剂的2-苯基-1h-苯并咪唑-4-甲酸酯衍生物 |
| EP2561759A1 (en) | 2011-08-26 | 2013-02-27 | Bayer Cropscience AG | Fluoroalkyl-substituted 2-amidobenzimidazoles and their effect on plant growth |
| CN103130723B (zh) * | 2011-11-30 | 2015-01-14 | 成都地奥制药集团有限公司 | 一种多聚(adp-核糖)聚合酶抑制剂 |
| CN102627610B (zh) * | 2012-04-11 | 2014-06-25 | 江苏先声药物研究有限公司 | 一类苯并咪唑类衍生物及其应用 |
| EA201590482A1 (ru) | 2012-09-05 | 2015-07-30 | Байер Кропсайенс Аг | Применение замещенных 2-амидобензимидазолов, 2-амидобензоксазолов и 2-амидобензотиазолов или их солей в качестве биологически активных веществ против абиотического стресса растений |
| CN104140426B (zh) * | 2013-05-07 | 2017-02-01 | 上海汇伦生命科技有限公司 | 嘧啶并咪唑类化合物、其药物组合物及其制备方法和用途 |
| CN104230896A (zh) | 2013-06-17 | 2014-12-24 | 上海汇伦生命科技有限公司 | 苯并咪唑-2-哌嗪杂环类化合物、其药物组合物及其制备方法和用途 |
| CN107556288A (zh) * | 2016-07-01 | 2018-01-09 | 山东大学齐鲁医院 | 一种治疗转移性肿瘤的药物化合物 |
| US10874641B2 (en) | 2016-07-28 | 2020-12-29 | Mitobridge, Inc. | Methods of treating acute kidney injury |
| KR20190107656A (ko) | 2016-11-02 | 2019-09-20 | 이뮤노젠 아이엔씨 | 항체-약물 콘주게이트 및 parp 억제제로 병용 치료 |
| CN111989137A (zh) | 2018-01-05 | 2020-11-24 | 赛博克萨1公司 | 用于治疗涉及酸性或缺氧性患病组织的疾病的化合物、组合物和方法 |
| WO2019195658A1 (en) | 2018-04-05 | 2019-10-10 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Sting levels as a biomarker for cancer immunotherapy |
| CA3094235A1 (en) | 2018-04-13 | 2019-10-17 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Her2-targeting antigen binding molecules comprising 4-1bbl |
| CN113330007A (zh) | 2018-10-03 | 2021-08-31 | 特沙诺有限公司 | 尼拉帕利游离碱的晶体形式 |
| EP3996749A1 (en) | 2019-07-10 | 2022-05-18 | Cybrexa 3, Inc. | Peptide conjugates of microtubule-targeting agents as therapeutics |
| AU2020309570A1 (en) | 2019-07-10 | 2022-02-03 | Cybrexa 2, Inc. | Peptide conjugates of cytotoxins as therapeutics |
| US20220305048A1 (en) | 2019-08-26 | 2022-09-29 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Use of heparin to promote type 1 interferon signaling |
| CN111793034B (zh) * | 2020-07-24 | 2021-11-19 | 华中科技大学 | 苯并咪唑盐衍生物与制备抗肿瘤药物的应用 |
| CA3207488A1 (en) | 2021-01-08 | 2022-07-14 | Cybrexa 2, Inc. | Process for preparing a conjugate linking moiety |
| WO2022155172A1 (en) | 2021-01-13 | 2022-07-21 | Cybrexa 3, Inc. | Peptide conjugates of therapeutics |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1087561A (en) * | 1963-02-16 | 1967-10-18 | Fisons Pest Control Ltd | Fluorinated benzimidazoles and compositions containing them |
| DE3346575A1 (de) * | 1983-12-23 | 1985-07-04 | Dr. Karl Thomae Gmbh, 7950 Biberach | Neue benzimidazole, ihre herstellung und diese verbindungen enthaltende arzneimittel |
| DE3522230A1 (de) * | 1985-06-21 | 1987-01-02 | Thomae Gmbh Dr K | Neue 2-arylimidazole, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und verfahren zu ihrer herstellung |
| GB8822483D0 (en) * | 1988-09-24 | 1988-10-26 | Medical Res Council | Developments relating to mas oncogene |
| GB8904174D0 (en) * | 1989-02-23 | 1989-04-05 | British Bio Technology | Compounds |
| IE70593B1 (en) * | 1989-09-29 | 1996-12-11 | Eisai Co Ltd | Biphenylmethane derivative the use of it and pharmacological compositions containing same |
| IL95975A (en) * | 1989-10-24 | 1997-06-10 | Takeda Chemical Industries Ltd | N-benzyl- 2-alkylbenzimidazole derivatives, their production and pharmaceutical compositions containing them |
| CA2093125C (en) * | 1990-10-02 | 2003-12-16 | Warner-Lambert Company | Angiotensin ii antagonists |
| US5216003A (en) * | 1992-01-02 | 1993-06-01 | G. D. Searle & Co. | Diacid-containing benzimidazole compounds for treatment of neurotoxic injury |
| AU675484B2 (en) * | 1993-03-24 | 1997-02-06 | Neurosearch A/S | Benzimidazole compounds, their use and preparation |
| US5824696A (en) * | 1993-09-01 | 1998-10-20 | Smithkline Beecham Corporation | Medicaments |
| US5735973A (en) * | 1993-12-20 | 1998-04-07 | Tamura Kaken Corporation | Printed circuit board surface protective agent |
| US5821258A (en) * | 1994-12-27 | 1998-10-13 | Mitsui Chemicals, Inc. | Phenylbenzimidazole derivatives |
-
1996
- 1996-07-30 WO PCT/GB1996/001832 patent/WO1997004771A1/en not_active Application Discontinuation
- 1996-07-30 BR BR9610051-6A patent/BR9610051A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-07-30 AT AT96925875T patent/ATE225173T1/de not_active IP Right Cessation
- 1996-07-30 JP JP9507360A patent/JPH11510154A/ja not_active Ceased
- 1996-07-30 CZ CZ98303A patent/CZ30398A3/cs unknown
- 1996-07-30 PL PL96324869A patent/PL324869A1/xx unknown
- 1996-07-30 EP EP96925875A patent/EP0841924B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-30 DK DK96925875T patent/DK0841924T3/da active
- 1996-07-30 KR KR10-1998-0700752A patent/KR100447539B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1996-07-30 SK SK135-98A patent/SK13598A3/sk unknown
- 1996-07-30 TR TR1998/00127T patent/TR199800127T1/xx unknown
- 1996-07-30 NZ NZ313713A patent/NZ313713A/en unknown
- 1996-07-30 IL IL12314796A patent/IL123147A/en not_active IP Right Cessation
- 1996-07-30 AU AU66240/96A patent/AU714873B2/en not_active Ceased
- 1996-07-30 EA EA199800184A patent/EA000999B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-07-30 HU HU9901092A patent/HUP9901092A3/hu not_active Application Discontinuation
- 1996-07-30 AP APAP/P/1998/001183A patent/AP866A/en active
- 1996-07-30 ES ES96925875T patent/ES2183004T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-30 PT PT96925875T patent/PT841924E/pt unknown
- 1996-07-30 DE DE69624115T patent/DE69624115T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1996-07-30 CA CA002225465A patent/CA2225465A1/en not_active Abandoned
- 1996-07-31 CN CNB961968818A patent/CN1159007C/zh not_active Expired - Fee Related
-
1998
- 1998-01-30 OA OA9800017A patent/OA10661A/en unknown
- 1998-01-30 NO NO19980414A patent/NO317033B1/no not_active IP Right Cessation
- 1998-02-02 US US09/017,314 patent/US6100283A/en not_active Expired - Fee Related
- 1998-02-02 MX MX9800927A patent/MX9800927A/es not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-06-16 US US09/594,776 patent/US6310082B1/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ30398A3 (cs) | Benzimidazolové sloučeniny, farmaceutický prostředek obsahující tyto sloučeniny a použití těchto sloučenin jako chemoterapeutických činidel | |
| EP0897915B1 (en) | Quinazolinone compounds as chemotherapeutic agents | |
| HU208811B (en) | Process for producton of biaryl-compounds and pharmaceutical compositions comprising them as medical agent | |
| RU2282627C2 (ru) | Кумариновые производные с подавляющей комт активностью | |
| HU193409B (en) | Process for producing 2-square bracket -n-cyclohexyl-4-bracket-oxo-1,2,3,5-tetrahydro-imidazo-square bracket-2,1-b-square bracket closed-quinazolin-7-yl-bracket closed-oxy-alkqne-carboxamidyl-square bracket closed-alkan-acides | |
| CN108409608B (zh) | 芳香氮芥类组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其制备方法和应用 | |
| CN115819349B (zh) | 一种吡唑类化合物及其制备方法和应用 | |
| HK1016085A (en) | Benzimidazole compounds | |
| CA2352592C (en) | Quinazolinone compounds | |
| AU758194B2 (en) | Novel benzimidazoles and benzoxazoles | |
| CN117486813A (zh) | N-二取代苯基丙烯酰胺类化合物及其药物组合物和用途 | |
| CS244698B2 (cs) | Způsob výroby v poloze 9 substituovaných derivátů 4-oxo-4H- -pyrido[1,2-a]-pyrimidinu |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic |