CZ294538B6 - Substituční deriváty N6-benzyladenosinu, způsob jejich přípravy, jejich použití pro přípravu léčiv, kosmetických přípravků a růstových regulátorů, farmaceutické přípravky, kosmetické přípravky a růstové regulátory tyto sloučeniny obsahující - Google Patents

Substituční deriváty N6-benzyladenosinu, způsob jejich přípravy, jejich použití pro přípravu léčiv, kosmetických přípravků a růstových regulátorů, farmaceutické přípravky, kosmetické přípravky a růstové regulátory tyto sloučeniny obsahující Download PDF

Info

Publication number
CZ294538B6
CZ294538B6 CZ20024273A CZ20024273A CZ294538B6 CZ 294538 B6 CZ294538 B6 CZ 294538B6 CZ 20024273 A CZ20024273 A CZ 20024273A CZ 20024273 A CZ20024273 A CZ 20024273A CZ 294538 B6 CZ294538 B6 CZ 294538B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
purine riboside
hydroxy
amino
methyl
methylmercapto
Prior art date
Application number
CZ20024273A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ20024273A3 (en
Inventor
Karel Mgr. Dr. Doležal
Igor Dr. Popa
Marek Rndr. Zatloukal
René Mgr. Lenobel
Dana Ing. Hradecká
Bořivoj Vojtěšek
Stjepan Uldrijan
Petr Mlejnek
Stefaan Dr. Werbrouck
Miroslav Prof. Ing. Csc. Strnad
Original Assignee
Ústav Experimentální Botaniky Akademie Vědčeské Re
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ústav Experimentální Botaniky Akademie Vědčeské Re filed Critical Ústav Experimentální Botaniky Akademie Vědčeské Re
Priority to CZ20024273A priority Critical patent/CZ294538B6/cs
Priority to AU2003294608A priority patent/AU2003294608A1/en
Priority to PCT/CZ2003/000078 priority patent/WO2004058791A2/en
Priority to US10/540,993 priority patent/US8119614B2/en
Priority to EP03785482.5A priority patent/EP1575973B1/en
Publication of CZ20024273A3 publication Critical patent/CZ20024273A3/cs
Publication of CZ294538B6 publication Critical patent/CZ294538B6/cs
Priority to ZA200506074A priority patent/ZA200506074B/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
    • A61K8/606—Nucleosides; Nucleotides; Nucleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Substituční deriváty N.sup.6.n.-benzyladenosinu, které mají protinádorové, mitotické, imunosupresivní a antisenescenční účinky pro rostlinné, živočišné i lidské buňky a způsob přípravy těchto derivátů. Použití těchto derivátů pro výrobu léčiv, v biotechnologiích, v kosmetickém průmyslu a v zemědělství.ŕ

Description

Substituční deriváty N6-benzyladenosinu, způsob jejich přípravy, jejich použití pro přípravu léčiv, kosmetických přípravků a růstových regulátorů, farmaceutické přípravky, kosmetické přípravky a růstové regulátory tyto sloučeniny obsahující
Oblast techniky
Vynález se týká nových substitučních derivátů N6-benzyladenosinu, které mají protinádorové, mitotické, imunosupresivní a antisenescenční účinky pro rostlinné, živočišné i lidské buňky, způsobů přípravy těchto derivátů a jejich použití jako léčiva, farmaceutické kompozice, které tyto deriváty obsahují jako účinnou látku a použití těchto derivátů pro výrobu léčiv, v biotechnologiích, v kosmetickém průmyslu a v zemědělství.
Dosavadní stav techniky
Cytokininy jsou chemicky charakterizovatelné jako N6-substituované deriváty adeninu. Současná nomenklatura založená na systému navrženém Lethamem (Platna 181: 361-364, 1974) a Lethamem a Palním (Ann. Rev. Plant. Physiol. 34: 163-197, 1983) byla původně navržena pro zeatin (Z) a izopentenyladenin (iP). Konjugace purinového kruhu bývá označována číslem polohy substituentu, tak jak je znázorněno v přehledu pro iP.
BAP
Z
Ve výše uvedeném přehledu chemických vzorců základních cytokininových bází značí iP - N6-(A2-izopentenyl)adenin, Z - Zraws-zeatin, DHZ - dihydroazetin, BAP - 6-benzylaminopurin, oT - or/fto-topolin, mT - /weta-topolin.
- 1 CZ 294538 B6
Cytokininy lze rozdělit v závislosti na povaze N6-postranního řetězce na dvě skupiny: izoprenoidní a aromatické. Izoprenoidní jsou reprezentovány cytokininy odvozenými od následujících bází: N6-(A2-izopentenyl)adenin, dihydrozeatin a zeatin. Mezi aromatické cytokininy patří 6-benzylaminopurin, meta- a or/Ao-topolin a jejich metabolity.
V případě izoprenoidních cytokininů hraje významnou roli konjugace, zahrnující modifikace purinového jádra a N6-postranního řetězce. Hlavními formami cytokininových konjugátů v rostlinách jsou 9-ribosidy, 9-ribotidy, 3-, 7-, 9- a O-glukosidy, O-xylosidy, 9-ribosylglukosidy, O-acetyl a O-allyl deriváty a rovněž konjugáty cytokininů s alaninem (viz. detaily Mok, D. W. S., Mok, M. C.: Cytokinins: Chemistry, Activity and Function. CRC Press, Boča Raton, London, Tokyo 1994).
Zatímco volné báze představují aktivní formy cytokininů (Laloue a Pethe, In: Wareing, P.F. (ed.): Plant Growth Substances 1982. Pp. 185-195. Academie Press, London 1982), jejich ribosidyjsou důležitými transportními formami v xylému a dominantními formami v rostlinných pletivech. Centrálními sloučeninami v metabolizmu cytokininů jsou ribosid-5-monofosfáty (Laloue et al. FEBS Let. 46: 45-50, 1974; Physiol. Veg. 13: 781-796, 1975; Plant Physiol. 59: 478^183, 1977; In: Guem, J., Péaud-Lenoěl, C., (eds.): Metabolism and Molecular Activities of Cytokinins. Pp. 80-96. Springer-Verlag, Berlin 1981; Mok et al., J. Plant Physiol. 130: 423-431, 1987), které zůstávají akumulovány v buňkách i proti vysokému koncentračnímu gradientu, a to díky nepropustnosti buněčných membrán pro tyto metabolity (Laloue et al., 1974, 1975, Laloue a Pethe In: Wareing, P. F. (ed.): Plant Growth Substances 1982. Pp. 185-195. Academie Press, London 1982.).
Cytokininy plní v rostlinách velmi rozmanité funkce, a to od buněčného dělení, prodlužování a diferenciace, až k tvorbě květů a plodů. Ruší dormanci semen, potlačují apikální dominanci a stimulují růst postranních pupenů, zpomalují stárnutí buněk, zvyšují odolnost proti stresům, ovlivňují permeabilitu buněčných membrán a vyvolávají akumulaci metabolitů v místě jejich aplikace (Letham a Palni 1983 - Ann. Rev. Plant. Physiol. 34: 163-197, 1983, Mok, D. W. S., Mok, M. C.: Cytokinins: Chemistry, Activity and Function. CRC Press, Boča Raton, London, Tokyo 1994).
Vzhledem ktomu, že se veškeré organizmy na Zemi evolučně vyvíjely společně po mnoho desítek miliónů let, je předpokládatelné, že pro látky rostlinného původu, jakými cytokininy zaručeně jsou, si příroda nalezla mnoho regulačních vazeb k živočichům, a tedy i k člověku. Látky cytokininové povahy proto zřejmě ovlivňují značné množství molekulárních mechanizmů v živočišných i lidských buňkách. Nedávno bylo zjištěno, že N6-substituované adenosiny a jejich deriváty mohou být základem pro vývoj nových generací léčiv s protinádorovými, antiinflamatorními, imunosupresivními, antivirálními a dalšími, medicínsky významnými účinky.
Cílem tohoto vynálezu je proto poskytnout protinádorové, imunosupresivní, růstově regulační, morfogeneticky aktivní a antisenescenční dusíkaté heterocyklické sloučeniny derivátů na bázi C2- - a na fenylu substituovaného 6-benzylaminopurin ribosidu s vysokou selektivitou a terapeutickým indexem účinnosti, tj. sloučeniny, které jsou málo toxické a přitom vysoce účinné.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu jsou substituční deriváty N-benzyladenosinu obecného vzorce I
-2CZ 294538 B6
(I), ve kterých
R2 znamená atom vodíku, hydroxy, halogen, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, methylmerkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl nebo karbamoyl skupinu, a n znamená 2. až 6. uhlíkový atom fenylu substituovaný jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující R1 kde
R1 znamená atom vodíku, hydroxy, halogen, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, methylmerkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (Rj-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl nebo karbamoyl alkyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, substituovaný cykloalkyl, cykloalkyl-(R)-> aryl-(R)-, hetero-(R)-, heteroaryl-(R)-, heterocykloalkyl-(R)- nebo Rl'-X, ve které
X znamená NH-, -N(C]-C6-alkyl)-, skupinu -O- nebo skupinu -S- a
Rl' znamená atom vodíku, alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, acyl, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, cykloalkyl, substituovaný cykloalkyl, aryl, substituovaný aryl, heterocyklus heteroaryl, substituovaný heteroaryl, aryl-(R)-, heterocykloalkyl, substituovaný heterocykloalkyl, heteroaryl-(R)-, hetero-(R)-, cykloalkyl-(R)- a heterocykloalkyl-(R)Výše uvedené dosud nevymezené generické skupiny mají významy uvedené v následující legendě, přičemž halogen znamená atom halogenu vybraný ze skupiny zahrnující atom fluoru, atom bromu, atom chloru a atom jodu, alkyl znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, alkenyl znamená
-3CZ 294538 B6 přímou nebo rozvětvenou alkeňylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, alkynyl znamená přímou nebo rozvětvenou alkynylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, substituovaný alkyl znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnují hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupina, přičemž uvedené generické substituované skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, substituovaný alkenyl znamená přímou nebo rozvětvenou alkeňylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)sulfo, (R)-sulfonamino, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituované skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, substituovaný alkynyl znamená přímou nebo rozvětvenou alkynylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)sulfo, (R)-sulfonamino, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituované skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, (R)-oxy znamená skupinu -ORa, ve které Ra znamená alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, aryl, substituovaný aryl, aryl-(R)-, substituovaný arylalkyl, cykloalkyl, substituovaný cykloalkyl, heterocyklylalkyl nebo substituovaný heterocykloalkyl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, (R)-merkapto znamená skupinu -SRb, ve které Rb znamená alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, aryl, substituovaný aryl, aryl-(R)-, substituovaný arylalkyl, cykloalkyl, substituovaný cykloalkyl, heterocyklylalkyl nebo substituovaný heterocykloalkyl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, (R)-sulfo znamená -SO2Rc, ve které Rc znamená atom vodíku H, přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkeňylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkinylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů,
-4CZ 294538 B6 přímou nebo rozvětvenou alkylovou, alkenylovou nebo alkinylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty zvoleným ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituované skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, (R)-sulfonamido znamená -NHSO2R<i, kde Rd znamená atom vodíku H, přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkenylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkinylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkylovou, alkenylovou nebo alkinylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituované skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, acyl znamená skupinu —C(O)Re, ve které Re znamená atom vodíku, alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, aryl, substituovaný aryl, aryl-(R)-, substituovaný arylalkyl, cykloalkyl, substituovaný cykloalkyl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, aryloxy znamená skupinu -OAr, ve které Ar znamená aryl, substituovaný aryl, heteroaryl nebo substituovaný heteroaryl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, (R)-amino znamená skupinu NRfR'g, ve které Rf a R'g nezávisle jeden na druhém znamenají atom vodíku, alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, aryl, substituovaný aryl, heteroaryl nebo substituovaný heteroaryl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, substituovaný karbamoyl znamená skupinu -C(O)NRhR'i, ve které Rh a R', nezávisle jeden na druhém znamenají atom vodíku, alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, aryl, substituovaný aryl, heteroaryl nebo substituovaný heteroaryl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, (R)-oxykarbonyl znamená skupinu -C(O)ORj, ve které Rj znamená atom vodíku, alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, aryl, substituovaný aryl, heteroaryl nebo
-5CZ 294538 B6 substituovaný heteroaryl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, acylamino znamená skupinu -NHCORk, ve které Rk znamená atom vodíku, alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, aryl, substituovaný aryl, heteroaryl nebo substituovaný heteroaryl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, aryl znamená aromatickou karbocyklickou skupinu obsahující 6 až 18 uhlíkových atomů a tvořenou alespoň jedním aromatickým kruhem jako fenyl nebo bifenyl nebo násobně kondenzovanými kruhy, z nichž alespoň jeden kruh je aromatický jako 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, naftyl, antryl nebo fenantryl, substituovaný aryl znamená aromatickou karbocyklickou skupinu obsahující 6 až 18 uhlíkových atomů a tvořenou alespoň jedním aromatickým kruhem jako fenyl nebo bifenyl nebo násobně kondenzovanými kruhy, z nichž alespoň jeden kruh je aromatický jako 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, naftyl, antryl nebo fenantryl a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, heterocyklus znamená heterocyklickou skupinu obsahující 4 až 9 uhlíkových atomů a alespoň jeden heteroatom ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry a atom dusíku, heteroaryl znamená heterocyklickou skupinu obsahující 4 až 9 uhlíkových atomů a alespoň jeden heteroatom ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry a atom dusíku, z nichž alespoň jeden kruh je aromatický, substituovaný heteroaryl znamená heterocyklickou skupinu obsahující 4 až 9 uhlíkových atomů a alespoň jeden heteroatom ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry a atom dusíku, z nichž alespoň jeden kruh je aromatický, a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, aryl-(R)- znamená skupinu -R]-Ar, kde Ar znamená arylovou skupinu a R| znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkenylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkynylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů,
-6CZ 294538 B6 aromatickou karbocyklickou skupinu obsahující 6 až 18 uhlíkových atomů a tvořenou alespoň jedním aromatickým kruhem jako fenyl nebo bifenyl nebo násobně kondenzovanými kruhy, z nichž alespoň jeden kruh je aromatický jako 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, naftyl, antryl nebo fenantryl a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, hetero-(R)- znamená skupinu -Rm-L, ve které Rm znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkenylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkynylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkylovou, alkenylovou nebo alkynylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, a L znamená heterocyklickou skupinu obsahující 4 až 9 uhlíkových atomů a alespoň jeden heteroatom ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry a atom dusíku a případně substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, heteroaryl-(R)- znamená skupinu -Rn-G, ve které Rn znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkenylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkynylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkylovou, alkenylovou nebo alkynylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, a G znamená heterocyklickou skupinu obsahující 4 až 9 uhlíkových atomů a alespoň jeden heteroatom ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry a atom dusíku, přičemž alespoň jeden heterocyklický kruh této skupiny je aromatickým kruhem, která může být případně substituována jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino,
-7CZ 294538 B6 hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (Rý-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, cykloalkyl znamená monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů, substituovaný cykloalkyl znamená monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, heterocykloalkyl znamená monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů, v jejíž cyklické struktuře je alespoň jeden atom uhlíku nahrazen heteroatomem ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry, atom dusíku nebo atom fosforu, substituovaný heterocykloalkyl znamená monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů, v jejíž cyklické struktuře je alespoň jeden atom uhlíku nahrazen heteroatomem ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry, atom dusíku nebo atom fosforu, a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, cykloalkyl-(R)- znamená skupinu -Ro-J, ve které R*, znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkenylovou skupinu obsahující 2 až 6uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkynylovou skupinu obsahující 2 až 6uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkylovou, alkenylovou nebo alkynylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, a J znamená monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů, nebo
-8CZ 294538 B6 monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, a a heterocykloalkyl-(R)- znamená skupinu -RPV, ve které Rp znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkenylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkynylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkylovou, alkenylovou nebo alkynylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, a V znamená monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů, v jejíž cyklické struktuře je alespoň jeden atom uhlíku nahrazen heteroatomem ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry, atom dusíku nebo atomem fosforu, monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů, v jejíž cyklické struktuře je alespoň jeden atom uhlíku nahrazen heteroatomem ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry, atom dusíku nebo atomem fosforu, a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, a jejich farmaceuticky využitelné soli s alkalickými kovy, amoniakem či aminy, ve formě racemátů nebo opticky aktivních izomerů, jakož i jejich adičních solí s kyselinami.
Mimořádně výhodnými sloučeninami podle vynálezu jsou substituční deriváty N6-benzyladenosinu ze skupiny zahrnující: 6-(2-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(3brombenzylamino)purin ribosid, 6-(4-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(2-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-jodbenzylamino)purin ribosid, 6—(2— chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-acetylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-acetylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-acetylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-karboxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-karboxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-acetoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-acetoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-acetoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(3-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(4-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(2-sulfobenzylamino)purin ribosid, 6-(3-sulfobenzylamino)purin ribosid, 6-(4-sulfobenzylamino)purin ribosid, 6-(2-kyanobenzylamino)purin ribosid, 6-(3-kyanobenzylamino)purin ribosid, 6-(4-kyanobenzylamino)purin ribosid, 6-(5--nitro-2-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-methylbenzylamino)purin ribosid,
-9CZ 294538 B6
6-(4-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-methylaminobenzylamino)purin ribosid, 6-(2methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hexylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hexyloxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-formylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3formylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-formylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-ethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-ethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-ethoxybenzylaniino)purin ribosid, 6-(4-ethylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-pentylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4pentyloxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-fenoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-fenylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-propylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-propyloxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-oktylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-oktyloxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4ethyloxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-diacetoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-diacetoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5-diarninobenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dibrombenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dibrom-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4—dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,4,5-tetrafluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-3,6-difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(5-chlor-2-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,4-trifluorbenzyiamino)purin ribosid, 6-(2,3,5-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,5-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4,5-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,6-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-chlor-2,6-difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-6-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5-difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(5-fluor-2-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(4-fluor-2-(trifluorinethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-5-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-(difluormethoxy)benzylaniino)purin ribosid, 6-(3-(difluonnethoxy)benzylamino)purin ribosid, 6-(4-(difluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(3-fluor-4(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-fluor-4-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-(trifluormethylthio)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-fluor-3-(trifluonnethylthio)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-6-fluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(6chlor-2-fluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-chlor-2-fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(3-chlor-2-fluor-6-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6(2,3-difluor-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-difluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-fluor-6-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(3-chlor-2,6-difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-(trifluormethylthio)benzylamino)purin ribosid, 6-(3-fluor-4-methyl benzylamino)purin ribosid, 6-(4-fluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(5-fluor-2methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-3,6-difluorbenzyIamino)purin ribosid, 6-(4(trifluormethylthio)benzylamino)purin ribosid, 6-(3-fluor-5-(trifluorinethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor—4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-(trifluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 6-(3-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(4-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(4-chlor-3-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(4-fluor-3-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6(3,5-bis(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(3-(trifluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 6-(4-(trifluormethoxy)benzylainino)purin ribosid, 6-(4-(trifluonnethyl)benzylammo)purin ribosid, 6-(4-diethylaminobenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-ethylendioxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6(2,4-dimethoxybenzyIamino)purin ribosid, 6-(2,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-2-methoxy
-10CZ 294538 B6 benzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-
5- methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid,
6- (4-hydroxy-2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2hydroxy-3,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-4,5-dimethoxybenzylammo)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-4,6dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-5,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-4,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-4,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-2,4-dimethoxybenzylamino)puriti ribosid, 6-(3-hydroxy-
2.5- dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-2,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxy-2,3-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxy-2,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxy-2,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4hydroxy-3,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxy-3,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dihydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dihydroxy-5methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6(2,4-dihydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4-dihydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5dihydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5-dihydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6(2,6-dihydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dihydroxy-2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dihydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dihydroxy-2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dihydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dihydroxy-6-methoxybenzytamino)purin ribosid, 6-(2,3,4-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,5-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4,5-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3,4,5-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2hydroxy-3,4,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-4,5,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,4-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,6-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,4-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4,5-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,6-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-4chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-5-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2hydroxy-6-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-4-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-5-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-6-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-4-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-5-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-6-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-5-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-6-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2hydroxy-5-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-6-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dihydroxy-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dihydroxy-5-chlorbenzylammo)purin ribosid, 6-(2,5-dihydroxy-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-4chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-4-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6dihydroxy—4-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-
3.5- dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3,5-dibrombenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3,5-dijodbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3,5-difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(4,5-dimethoxy-2-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dimethyl^fhydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dimethyl-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6
- 11 CZ 294538 B6 (2-fluor-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-fluor-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dinitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dinitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(2methyl-5-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(3-methyl-4-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6(3,4-dijod-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-chlor-3,5-dinitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-4-fluorbenzylainino)purin ribosid, 6-(3-chlor-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-6-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-chlor-2-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-chlor-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(5-chlor-2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-4-fluorbenzyIamino)purin ribosid, 6-(4-chlormethylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-5-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-6-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(4-chlor-3-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(5-chlor-2-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(3-brom-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dibrom-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-brom-4methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-brommethylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-butoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-t-butoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-/t-butyl/benzylamino)purin ribosid, 6-(4-t-butyl-2,6-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-aminobenzylamino)purin ribosid, 6-(3-aminobenzylainino)purin ribosid, 6-(4-aminobenzylamino)purin ribosid, 6-(2-amino-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-amino-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-amino-5-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-ammo-6-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-amino-2-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-amino-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-amino-5-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-amino-6-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-diamino-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-diamino-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-amino-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-amino-5-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(5-amino-2-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-amino-3nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(4-amino-3-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(4-benzyloxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-acetylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-acetylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,5-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,5-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,6-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,4-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,5-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,6-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5,6-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(4-brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-acetylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-acetylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-acetylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-karboxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(4-karboxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-acetoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-acetoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-acetoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor,
-12CZ 294538 B6 brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-sulfobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-sulfobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(4-sulfobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-kyanobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-kyanobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-kyanobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(5-nitro-2-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-methylaminobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hexylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hexyloxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-formylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-formylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-formylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-ethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-ethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-ethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-ethylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(4-pentylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-pentyloxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-fenoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-fenylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-propylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4propyloxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-oktylbenzylamino)purin ribosid, 2-(4-oktyloxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-ethyloxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-diacetoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-diacetoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-diaminobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-dibrombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(3,5-dibrom-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2,6-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor,
-13 CZ 294538 B6 brom, methyl nebo methylmeřkapto)-6-(3,5-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,4,5-tetrafluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-
3,6-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(5-chlor-2-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,4-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,5-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2,4,5-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4,5-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,6-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-chlor-2,6-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2-chlor-6-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-difluorbenzylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(5-fluor-2-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-fluor-2-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-5-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-(difluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-(difluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-(difluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-fluor-4-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-fluor-4-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-(trifluormethylthio)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-fluor-3-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-6-fluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(6-chlor-2-fluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-chlor-2fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-chlor-2-fluor-6-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-difluor-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-difluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-fluor-6-(trifluonnethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-chlor-2,6-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6~(3-(trifluormethylthio)benzylarnino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-fluor-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-fluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(5-fluor2-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-3,6-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-(trifluormethylthio)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(ammo, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methyl
-14CZ 294538 B6 merkapto)-6-(2-chlor-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-(trifluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 6—(3—(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-(trifluonnethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-chlor-3-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-fluor-3-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-bis(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-(trifluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-(trifluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-diethylaminobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(3,4-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-ethylendioxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-5methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-4methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxy-2methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxy-6methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-
3,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-4,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-4,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2
- 15CZ 294538 B6 hydroxy-5,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-4,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-4,6dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-2,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-2,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3hydroxy-2,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4--hydroxy-2,3-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxy-2,5dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxy-2,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxy-3,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4hydroxy-3,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-dihydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-dihydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)urin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4-dihydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4dihydroxy-5-methoxybenzyíamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-dihydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-dihydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo meťhylmerkapto)-6-(2,6dihydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-A-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dihydroxy-2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dihydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-dihydroxy-2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-dihydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,4-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4,5-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4,5-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3,4,5-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3,4,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-4,5,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2,4,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,4-trihydroxybenzyÍamino)purín ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4,6-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,4-trihydroxybenzylaminojpurin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methyl
-16CZ 294538 B6 merkapto)-6-(3,4,5-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4,6-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2hydroxy-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-5-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-6-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-4-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-5-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-6-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2-hydroxy-3-brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-4-brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-5-brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-6brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto}-6-(2-hydroxy-3-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-5fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-6-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-4methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-5-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-6-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-dihydroxy-4chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-dihydroxy-5--chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-dihydroxy-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-4chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-4-brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-4-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-3chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-3-brombenzyiamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-3-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-<iihydroxy-3fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-3,5-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-3,5-dibrombenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy3,5-dijodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-3,5-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4,5-dimethoxy-2-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4dimethylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dimethyl4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo
-17CZ 294538 B6 methylmerkapto)-6-(3,5-dimethyl-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-fluor-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-fluor-4methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dinitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-dinitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-methyl-5-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-methyl-4nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dijod-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-chlor-3,5dinitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-chlor-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-6-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(3-chlor-2-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-chlor-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(5-chlor-2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-4fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-chlormethylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-5-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-6-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(4-chlor-3-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(5-chlor-2-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-brom-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-dibrom-4hydroxybenzylamino)purin, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-brom-4-methoxybenzylamino)purin, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-brommethylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-butoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-butoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(4-/t-butyl/benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-t-butyl-2,6-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-aminobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-aminobenzyiamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(4-aminobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-amino-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-amino-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-amino-5-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2amino-6-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-amino-2-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-amino-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-amino-5-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6--(3-amino-6-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-diamino-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-diamino-4-chlor
-18CZ 294538 B6 benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-amino-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-amino-5-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(5-amino-2-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-amino-3-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-amino-3-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-benzyloxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-acetylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-acetylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4,5-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4,5-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4,6-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto}-6(2,3,4-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,5-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,6-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5,6-trichlorbenzylamino)purin ribosid.
Výchozím materiálem pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I je 6-chlorpurin ribosid připravený z hypoxanthinu chlorací pomocí POCI3 (Davoll and Blowy, J. Am. Chem. Soc. 73:2936 (1957))) anebo je komerčně dostupný (Sigma, Aldrich, Fluka, atd.).
Dalším výchozím materiálem pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I je 6-brompurin ribosid, který je možné buď připravit z adeninu, nebo hypoxanthinu reakcí s n-pentyl nitritem v tribrommethanu, nebo je komerčně dostupný. Výchozím materiálem pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I je také 6-fluorpurin ribosid, který lze připravit z 6-chlorpurin ribosidu reakcí s triethylaminem za vzniku kvartemí amoniové soli, která pak reakcí s tetrabutylammonium trifenyldifluorsilikátem v dimethylformamidu může být konvertována na 6-fluorpurin ribosid (Gurvich et al., Nucleos. Nucleot. 18: 2327 (1999)).
Dalším výchozím materiálem pro přípravu sloučenin obecného vzorce I jsou substituované benzylaminy. Ty, které obsahují jednu nebo více hydroxylových skupin, nejsou komerčně dostupné a mohou být připraveny demethylací příslušných methoxyderivátů pomocí 48% HBr v atmosféře dusíku N2.
Předmětem vynálezu je rovněž způsob přípravy substitučních derivátů N6-benzyladenosinu obecného vzorce I, ve kterém Ri a R2 mají výše uvedené významy a jehož podstata spočívá v tom, že se v jednom přístupu dusíkatý heterocyklický derivát obecného vzorce I, ve kterém R3 znamená atom chloru nebo bromu nebo fluoru nebo skupinu methylthio a ve kterém R2 má výše uvedený význam, nukleofilně substituuje v poloze 6 za účelem převedení atomu chloru, bromu nebo fluoru v poloze 6 za některý jiný z významů obecného substituentu Rj uvedených výše za vzniku derivátu obecného vzorce I.
Pro jejich přípravu lze s výhodou využít příslušné 2-chlor, 2-hydroxy, 2-amino, 2-methylmerkapto deriváty 6-chlorpurin ribosidu (Nair and Young, Synthesis 6: 450 (1986); Nair and Fasbender, Tetrahedron 49: 2169 (1993)).
Předmětem vynálezu jsou rovněž substituční deriváty FÍ-benzyladenosinu obecného vzorce I pro použití jako léčiva.
Předmětem vynálezu jsou rovněž substituční deriváty N6-benzyladenosinu obecného vzorce I pro použití jako růstové regulátory rostlin, savců, mikroorganizmů, kvasinek a hub.
-19CZ 294538 B6
Předmětem vynálezu jsou rovněž substituční deriváty bí-benzyladenosinu obecného vzorce I pro použití jako kosmetické přípravky.
Předložený vynález rovněž zahrnuje farmaceutické, kosmetické a tkáňové přípravky obsahující sloučeninu obecného vzorce I či farmaceuticky přijatelnou sůl takovéto sloučeniny včetně farmaceutického nosiče.
Předmětem vynálezu je rovněž použití sloučeniny obecného vzorce I při přípravě afinitních adsorpčních nosičů, imobilizovaných enzymů pro kontrolu výrobních procesů, reagencií pro imunodetekci, diagnostických vzorků, 14C, 3H, avidinem a biotinem značených sloučenin a oligonukleotidů.
Dále je předmětem vynálezu použití dusíkaté heterocyklické sloučeniny na bázi substitučního derivátu N6-benzyladenosinu obecného vzorce I nebo farmaceuticky přijatelných solí takovéto sloučeniny včetně farmaceutického nosiče pro přípravu farmaceutické kompozice použitelné jako mitotikum či antimitotikum, zejména při léčení nádorových onemocnění, při psoriáze, revmatické artritis, lupusu, diabetů I typu, roztroušené skleróze, restenóze, polycystickému onemocnění ledvin, host graft disease a dny, parasitozách způsobených houbami anebo prvky, Alzheimerově chorobě, anebo jako antineurogenerativního léčiva, anebo k supresi immunostimulace.
Předmětem vynálezu je rovněž použití dusíkaté heterocyklické sloučeniny na bázi substitučního derivátu N6-benzyladenosinu obecného vzorce I jako kosmetického přípravku pro zpomalení senescence savčích pokožkových buněk, jako keratinocytů či fíbroblastů.
Předmětem vynálezu je rovněž použití dusíkaté heterocyklické sloučeniny na bázi substitučního derivátu N6-benzyladenosinu obecného vzorce I jako růstového regulátoru v tkáňových kulturách ke stimulaci proliferace a morfogeneze.
Předmětem vynálezu je rovněž použití dusíkaté heterocyklické sloučeniny na bázi substitučního derivátu N6-benzyladenosinu obecného vzorce I pro výrobu přípravků používaných ke klonování rostlinných i savčích zárodečných buněk a embryí, s výhodou oocytů.
Předmětem vynálezu je konečně použití dusíkaté heterocyklické sloučeniny na bázi substitučního derivátu N6-benzyladenosinu obecného vzorce I pro výrobu léčiva na potlačení imunostimulace například arthritis nebo při potlačení odmítnutí transplantovaných orgánů u savců.
Terapeutická aplikace
Vhodné cesty pro aplikaci jsou orální, rektální, vazální místní (zahrnující okulámí, bukální a sublinguáiní), vaginální a parenterální (zahrnující subkutánní, intramuskulámí, intravitreózní, nitrožilní, intradermální, intrathekální a epidurální). Preferovaný způsob podání závisí na stavu pacienta, toxicitě sloučeniny a místě infekce, kromě ostatních ohledů známých klinikovi.
Terapeutický přípravek obsahuje od 1 do 95 % aktivní látky, přičemž jednorázové dávky obsahují přednostně od 20 do 90 % aktivní látky a při způsobech aplikace, které nejsou jednorázové, obsahují přednostně od 5 do 20 % aktivní látky. Jednotkové dávkové formy jsou například potahované tablety, tablety, ampule, lahvičky, čípky nebo tobolky. Jiné formy aplikace jsou například masti, krémy, pasty, pěny, tinktury, rtěnky, kapky, spreje, disperze atd. Příkladem jsou tobolky obsahující od 0,05g do l,0g aktivní látky.
Farmaceutické přípravky tohoto vynálezu jsou připravovány známým způsobem, například běžným mícháním, granulací, potahováním, rozpouštěcími nebo lyofilizačními procesy.
Přednostně jsou používány roztoky aktivních látek a dále také suspenze nebo disperze, obzvláště izotonické vodné roztoky, suspenze a disperze, které mohou být připraveny před použitím,
-20CZ 294538 B6 například v případě lyofílizovatelných preparátů obsahujících aktivní látku samotnou nebo s nosičem jako je mannitol. Farmaceutické přípravky mohou být sterilizovány anebo obsahují látky neutrální povahy, například konverzační přípravky, stabilizátory, zvlhčovadla anebo emulgátory, rozpouštěcí činidla, soli pro regulaci osmotického tlaku anebo pufry. Jsou připravovány známým způsobem, například běžným rozpouštěním nebo lyofílizací. Zmíněné roztoky nebo suspenze mohou obsahovat látky zvyšující viskozitu, jako například sodnou sůl karboxymethylcelulózu, dextran, polyvinylpyrrolidon nebo želatinu.
Olejové suspenze obsahují jako olejovou složku rostlinné, syntetické nebo semisyntetické oleje obvyklé pro injekční účely. Oleje, které zde mohou být zmíněny, jsou obzvláště kapalné estery mastných kyselin, které obsahují jako kyselou složku mastnou kyselinu s dlouhým řetězcem majícím 8-22, s výhodou pak 12-22 uhlíkových atomů, například kyselinu laurovou, tridekanovou, myristovou, pentadekanovou, palmitovou, margarovou, stearovou, arachidonovou a behenovou, nebo odpovídající nenasycené kyseliny, například kyselinu olejovou, alaidikovou, eurikovou, brasidovou a linoleovou, případně s přídavkem antioxidantů, například vitaminu E, β-karotenu nebo 3,5-di-terc-butyl-4-hydroxytoluenu. Alkoholová složka těchto esterů mastných kyselin nemá více než 6 uhlíkových atomů a je mono- nebo polyhydrická, například mono-, dinebo trihydrické alkoholy jako methanol, ethanol, propanol, butanol nebo pentanol a jejich izomery, ale hlavně glykol a glycerol. Estery mastných kyselin jsou s výhodou například ethyl oleát, izopropyl myristát, izopropyl palmitát, „Labrafíl M 2375“ (polyoxyethylen glycerol trioleát, Gattefoseé, Paříž), „Labrafíl M 1944 CS“ (nenasycené polyglykolované glyceridy připravené alkoholýzou oleje z meruňkových jader a složený z glyceridů a esterů polyethylen glykolu; Gattefoseé, Paříž), „Labrasol“ (nasycené polyglykolované glyceridy připravené alkoholýzou TCM a složené z glyceridů a esterů polyethylen glykolu; Gattefoseé, Paříž), „Miglyol 812“ (triglycerid nasycených mastných kyselin s délkou řetězce Cg až C]2 od Hůls AG, Německo) a zvláště rostlinné oleje jako bavlníkový olej, mandlový olej, olivový olej, ricinový olej, sezamový olej, sójový olej a olej z podzemnice olejné.
Příprava injekčního přípravku se provádí za sterilních podmínek obvyklým způsobem, například plněním do ampulí nebo lahviček a uzavíráním obalů.
Farmaceutické přípravky například pro orální použití se mohou získat smícháním aktivní látky s jedním nebo více tuhými nosiči, případnou granulací výsledné směsi, a pokud je to požadováno zpracováním směsi nebo granulí do tablet nebo potahovaných tablet přídavkem dalších neutrálních látek.
Vhodné nosiče jsou obzvláště plnidla jako cukry, například laktóza, sacharóza, mannitol nebo sorbitol, celulózové preparáty anebo fosforečnany vápníku, s výhodou fosforečnan vápenatý nebo hydrogenfosforečnan vápenatý, dále pojivá jako škroby, s výhodou kukuřičný, pšeničný, lýžový nebo bramborový škrob, methylcelulóza, hydroxypropylmethylcelulóza, sodná sůl karboxymethylcelulózy a polyvinylpyrrolidin, a pokud požadováno desintegrátory jako výše zmíněné škroby a dále karboxymethylový škrob, zesítěný polyvinylpyrrolidin, alginová kyselina a její soli, s výhodou alginát sodný. Další neutrální látky jsou regulátory toku a lubrikanty, s výhodou kyselina salicylová, talek, kyselina stearová a její soli jako stearát hořečnatý nebo vápenatý, polyethylen glykol nebo jeho deriváty.
Jádra potahovaných tablet mohou být vybavena vhodnými potahy, které mohou být odolné vůči žaludeční šťávě, přičemž používané potahy jsou mezi jinými koncentrované roztoky cukrů, které mohou obsahovat arabskou gumu, talek, polyvinylpyrrolidin, polyethylen glykol a nebo oxid titaničitý, dále potahovací loztoky ve vhodných organických rozpouštědlech nebo směsích rozpouštědel, či pro přípravu potahů odolných vůči žaludeční šťávě roztoky vhodných celulózových preparátů jako acetylcelulózaftalát nebo hydroxypropylmethylcelulózaftalát. Barviva nebo pigmenty jsou přimíchávána do tablet nebo potahovaných tablet například pro identifikaci nebo charakterizaci různých dávek účinné složky.
-21 CZ 294538 B6
Farmaceutické přípravky které mohou být užívány orálně jsou také tvrdé tobolky ze želatiny nebo měkké uzavřené tobolky ze želatiny a změkčovadla jako glycerol nebo sorbitol. Tvrdé tobolky mohou obsahovat aktivní látku ve formě granulí, smíchanou například s plnidly jako je kukuřičný škrob, pojivý nebo lubrikanty jako talek nebo stearát hořeČnatý, a se stabilizátory. V měkkých tobolkách je aktivní látka přednostně rozpuštěna nebo suspendována ve vhodných kapalných látkách neutrální povahy jako mazací tuk, parafínový olej nebo kapalný polyethylen glykol či estery mastných kyselin a ethylen nebo propylen glykolu, přičemž je také možno přidat stabilizátory a detergenty například typu esterů polyethylen sorbitanových mastných kyselin.
Ostatní formy orálního podávání jsou například sirupy připravované běžným způsobem, které obsahují aktivní složku například v suspendované formě a v koncentraci okolo 5 až 20 %, přednostně okolo 10 % nebo podobné koncentrace, která umožňuje vhodnou individuální dávku, například když je měřeno 5 nebo 10 ml. Ostatní formy jsou například práškové nebo kapalné koncentráty pro přípravu koktejlů, například v mléce. Takovéto koncentráty mohou být také baleny v množství odpovídajícím jednotkové dávce.
Farmaceutické přípravky, které mohou být používány rektálně, jsou například čípky, které obsahují kombinaci aktivní látky se základem. Vhodné základy jsou například přírodní nebo syntetické triglyceridy, parafínové uhlovodíky, polyethylen glykoly nebo vyšší alkoholy.
Přípravky vhodné pro parenterální podání jsou vodné roztoky aktivní složky ve formě rozpustné ve vodě, například ve vodě rozpustná sůl nebo vodná injekční suspenze, která obsahuje látky zvyšující viskozitu, například sodnou sůl karboxymethylcelulózy, sorbitol nebo dextran, a stabilizátory tam kde je to vhodné. Aktivní látky může býttaké přítomna ve formě lyofilizátu společně s neutrálními látkami kde je to vhodné a může být rozpuštěna před parenterální aplikací přidáním vhodných rozpouštědel. Roztoky které jsou použity pro parenterální aplikaci, mohou být použity například pro infúzní roztoky. Preferovaná konzervovadla jsou s výhodou antioxidanty jako kyselina askorbová, nebo mikrobicidy kyselina sorbová či benzoová.
Masti jsou emulze oleje ve vodě, které obsahují ne více než 70 %, ale přednostně 20 až 50 % vody nebo vodné fáze. Tukovou fázi tvoří uhlovodíky, například vazelína, parafínový olej nebo tvrdé parafíny, které přednostně obsahují vhodné hydroxysloučeniny jako mastné alkoholy a jejich estery, například cetyl alkohol, nebo alkoholy lanolinu, s výhodou lanolin pro zlepšení kapacity pro vázání vody. Emulgátory jsou odpovídající lipofílní sloučeniny jako sorbitanové estery mastných kyselin (Spaný), s výhodou sorbitan oleát nebo sorbitan izostearát. Aditiva k vodné fázi jsou například smáčedla jako polyalkoholy, například glycerol, propylen glykol, sorbitol a polyethylen glykol, nebo konzervační prostředky či příjemně vonící látky.
Mastné masti jsou nevodné a obsahují jako bázi hlavně uhlovodíky, například parafín, vazelínu nebo parafínový olej, a dále přírodní nebo semisyntetické tuky, například hydrogenované kokosové triglyceridy mastných kyselin nebo hydrogenované oleje, například hydrogenovaný ricínový olej nebo z podzemnice olejně, a dále částečné glycerolové estery mastných kyselin, například glycerol mono- a distearát. Dále obsahují například mastné alkoholy, emulgátory a aditiva zmíněná v souvislosti s mastmi, která zvyšují příjem vody.
Krémy jsou emulze oleje ve vodě, které obsahují více než 50 % vody. Používané olejové báze jsou mastné alkoholy, například izopropyl myristát, lanolin, včelí vosk, nebo uhlovodíky, s výhodou vazelína (petrolátum) a parafínový olej. Emulgátory jsou povrchově aktivní sloučeniny s převážně hydrofílními vlastnostmi, jako jsou odpovídající neiontové emulgátory, například estery mastných kyselin polyalkoholů nebo jejich ethylenoxy adukty, například polyglycerických mastných kyselin (Tween), dále polyoxyethylenové estery mastných alkoholů nebo polyoxyethylenové estery mastných kyselin, nebo odpovídající iontové emulgátory, jako alkalické soli sulfátů mastných alkoholů, s výhodou laurylsulfát sodný, cetylsulfát sodný nebo stearylsulfát sodný, které jsou obvykle používány v přítomnosti mastných alkoholů, například cetyl stearyl alkoholu nebo stearyl alkoholu. Aditiva k vodné fázi jsou mimo jiné činidla, která chrání krémy
-22CZ 294538 B6 před vyschnutím, například polyalkoholy jako glycerol, sorbitol, propylen glykol a polyethylen glykol, a dále konzervační činidla a příjemně vonící látky.
Pasty jsou krémy nebo masti obsahující práškové složky absorbující sekreci jako jsou oxidy kovů, například oxidy titanu nebo oxid zinečnatý, a dále talek či silikáty hliníku, které mají za úkol vázat přítomnou vlhkost nebo sekreci.
Pěny jsou aplikovány z tlakových nádob a jsou to kapalné emulze oleje ve vodě v aerosolové formě, přičemž jako hnací plyny jsou používány halogenované uhlovodíky, jako chlor-fluor nižší alkany, například dichlorfluormethan a dichlortetrafluorethan, nebo přednostně nehalogenované plynné uhlovodíky, vzduch, N2O či oxid uhličitý. Používané olejové fáze jsou stejné jako pro masti a také jsou používána aditiva tam zmíněná.
Tinktury a roztoky obvykle obsahují vodně-etanolickou bázi, ke které jsou přimíchány zvlhčovadla pro snížení odpařování jako jsou polyalkoholy, například glycerol, glykoly a polyethylen glykol, dále promazávadla jako estery mastných kyselin a nižších polyethylen glykolů, tj. lipofílní látky rozpustné ve vodné směsi nahrazující tukové látky odstraněné z kůže ethanolem, a pokud je to nutné i ostatní neutrální látky a aditiva.
Tento vynález dále poskytuje veterinární přípravky obsahující nejméně jednu aktivní složku společně s veterinárním nosičem. Veterinární nosiče jsou materiály pro aplikaci přípravku a mohou to být látky pevné, kapalné nebo plynné, které jsou inertní nebo přijatelné ve veterinární medicíně a jsou kompatibilní s aktivní složkou. Tyto veterinární přípravky mohou být podávány orálně, parenterálně nebo jakoukoli jinou požadovanou cestou.
Vynález se také vztahuje na procesy nebo metody pro léčení nemocí zmíněných výše. Látky mohou být podávány profylakticky nebo terapeuticky jako takové nebo ve formě farmaceutických přípravků, přednostně v množství které je efektivní proti zmíněným nemocem, přičemž u teplokrevných živočichů, například člověka, vyžadujícího takovéto ošetření je látka používána zejména ve formě farmaceutického přípravku. Na tělesnou hmotnost okolo 70 kg je aplikována denní dávka látky okolo 0,1 až 50 g, s výhodou 0,5 až 10 g.
V dalším jsou nové sloučeniny obecného vzorce I a způsoby jejich přípravy a použití osvětleny na příkladech, aniž se tím jakkoliv omezují.
Přehled obrázků na výkresech
Na obr. 1 je znázorněna indukce proteinu p21WAF_1 v buňkách MCF-7 působením rozdílných koncentrací 2OH3MeOBAPR v řádu jednotek pmol na litr kultivačního média.
Na obr. 2 je znázorněna indukce p21WAF_1 v buňkách MCF-7 v rozmezí 6 až 24 hodin po přídavku 2OH3MeOBAPR (6-(2-hydroxy-3-methoxybenzylamino) purin ribosid) v 1 μΜ koncentraci.
Na obr. 3 je znázorněna inhibice růstu nádorových buněčných linií CEM (A) and HL60 (B) novými cytokininy. Cytotoxicita byla stanovena pomocí testu Calcein AM. Aktivita je vyjádřena v procentech maximální aktivity (v nepřítomnosti inhibitoru). ZR: zeatin ribosid; oTR: orřAo-topolin ribosid; 3F-BAPR: 6-(3-fluorbenzylamino)purin ribosid; 3C1-4F-BAPR: 6-(3-chlor-4-fluorbenzylamino)purin ribosid; 2OH3MeOBAPR: 6-(2--hydroxy-3-methoxybenzylamino) purin ribosid.
Na obr. 4 je znázorněna inhibice proliferace buněk HL-60 indukovaná 2OH3MeOBAPR. K exponenciálně rostoucím buňkám byl přidán 2OH3MeOBAPR v koncentraci 2.5μΜ (plné kroužky), 5μΜ (prázdné čtverce, 10μΜ (plné čtverce), 20μΜ (prázdné trojúhelníky), 40μΜ (plné
-23CZ 294538 B6 trojúhelníky) a 60μΜ (prázdné šestiúhelníky). Buňky kultivované ve standardním médiu bez 2OH3MeOBAPR sloužily jako kontrola (prázdné kroužky).
Na obr. 5 je znázorněna indukce apoptózy 2OH3MeOBAPR u buněk HL-60. K exponenciálně rostoucím buňkám byl přidán 2OH3MeOBAPR v uvedených koncentracích. Po 24 h inkubaci byl sledován výskyt apoptotických buněk vzhledem k morfologii jader. Buňky kultivované ve standardním médiu bez 2OH3MeOBAPR sloužily jako kontrola.
Obr. 6 znázorňuje vliv 2OH3MeOBAPR na morfologii jader u buněk HL-60. Jádra buněk kultivovaných za standardních podmínek v médiu bez 2OH3MeOBAPR a), jádra buněk kultivovaných v médiu s přídavkem 5 μΜ 2OH3MeOBAPR po dobu 24 hodin b).
Obr. 7 znázorňuje vliv 2OH3MeOBAPR na integritu jaderné DNA u buněk HL-60. M-standardy molekulové hmotnosti. Pozice 1- DNA izolovaná z buněk kultivovaných v médiu bez iPA. Pozice 2-6 DNA izolovaná z buněk kultivovaných v médiu s přídavkem 5,10, 20, 40 a 60 μΜ 2OH3MeOBAPR po dobu 24 h.
Na obr. 8 je znázorněn vliv 2OH3MeOBAPR (6-(2-hydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid) na buněčný cyklus. Buňky byly kultivovány a) ve standardním v médiu bez 2OH3MeOBAPR (kontrola), b) v médiu obsahujícím 5 μΜ 2OH3MeOBAPR po dobu 24 h před analýzou pomocí průtokové cytometrie.
Na obr. 9 je znázorněn vliv 2OH3MeOBAPR na aktivaci kaspázových proteáz. Buňky kultivované ve standardním médiu bez 2OH3MeOBAPR (bílé sloupce), buňky kultivované v médiu obsahujícím 20 μΜ 2OH3MeOBAPR (černé sloupce). Relativní hydrolýza substrátu pro kaspázu-9 Ac-LEHD-AFC a) a kaspázu-3 Ac-DEVD-AMC b).
Obr. 10 znázorňuje vliv kaspázového inhibitoru Z-VAD-FMK na viabilitu buněk HL-60 kultivovaných v přítomnosti iPA. K exponenciálně rostoucím buňkám byl přidán 20 μΜ 2OH3MeOBAPR (bílé sloupce) a 20 μΜ 2OH3MeOBAPR v kombinaci s 50μΜ Z-VAD-FMK (černé sloupce) a buňky byly kultivovány 72 h. V průběhu inkubace byla stanovována viabilita buněk pomocí kombinovaného barvení FDA/PI.
Na obr. 11 je znázorněn vliv inhibitoru adenosin kinázy 4-amino-3-jod-ip-D-ribofuranosylpyrazolo[3,4-d]-pyrimidinu (AIRPP), na viabilitu buněk HL-60 kultivovaných v přítomnosti iPA. K exponenciálně rostoucím buňkám byl přidán 20 μΜ 2OH3MeOBAPR (bílé sloupce) a 20 μΜ 2OH3MeOBAPR v kombinaci s 1 μΜ AIRPP (černé sloupce) a buňky byly kultivovány 72 h. V průběhu inkubace byla stanovována viabilita buněk pomocí kombinovaného barvení FDA/PI.
Obr. 12 znázorňuje vliv nových cytokininů na retenci chlorofylu v extirpovaných listových segmentech pšenice. Prezentované hodnoty jsou vyjádřeny v % výchozího obsahu chlorofylu v čerstvých listech před inkubací s cytokininy. Přerušovaná čára představuje kontrolní měření bez přítomnosti cytokininů, tj. 57,7 ± 0,9.
Na obr. 13 je znázorněn vliv nových cytokininů na růst cytokinin-dependentního kalusu tabáku. Přímka-·- představuje kontrolní měření bez přítomnosti cytokininů, tj. 2,5± 0,3 g.
Na obr. 14 je znázorněn vliv nových cytokininů na syntézu betacyaninu v kotyledonámích/hypokotylárních explantátech Amaranthus caudatus. Prezentované hodnoty představují rozdíly v jednotkách O.D. mezi absorbancí při 537 a 620 nm.
Obr. 15 ukazuje relativní počet explantátů s alespoň jedním hnědým listem v závislosti na čase (: BAP, ·: mT, ▲: mMeOBAPR).
-24CZ 294538 B6
Obr. 16 ukazuje relativní počet uhynulých explantátů v závislosti na čase (: BA, ·: mT, ▲: mMeOBAPR).
Na obr. 17 je znázorněn vlevo: uhynulý explantát Rosa hybrida na médiu obsahujícím BAP; vpravo: zdravý explantát Rosa hybrida na médiu s mMeOBAPR po 121 dnech kultivace.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1 mmol 6-chlorpurin ribosidu byly rozpuštěny v 15 ml butanolu a byly přidány 4 mmol 2,3,6—trifluorbenzylaminu a 5 mmol triethylaminu. Roztok byl zahříván na 90 °C po dobu 4 hodin. Po ochlazení byl surový produkt odfiltrován a rekrystalován vethanolu. T.t. 196 °C. TLC: chloroform-methanol-amoniak (90:9:0,1). Výtěžek 92 %.
Tabulka 1
Látky připravené způsobem podle příkladu 1
Substituent Elementární analýza Vypočteno/nalezeno
%C %H %N ES-MS [M+íT] Teplota tání (°C)
2-fluorbenzylamino 54,4/54,1 4,8/4,8 18,7/18,4 376 191-192
3 -fluorbenzylamino 54,4/53,9 4,8/4,7 18,7/18,2 376 153-154
4-fluorbenzylamino 54,4/54,3 4,8/4,8 18,7/18,3 376 177-178
2-chlorbenzylamino 52,1/52,0 4,6/4,7 17,9/17,5 392 183-184
3-chlorbenzyIamino 52,1/51,9 4,6/4,6 17,9/17,3 392 164-165
4-chlorbenzylamino 52,1/51,8 4,6/4,5 17,9/17,1 392 181-182
2-brombenzylamino 46,8/46,3 4,16/4,1 16,05/15,5 436 180-181
-25 CZ 294538 B6
3 - bro mbenzylamino 46,8/47,8 4,16/4,5 16,05/15,6 436 173-174
4-brombenzy 1 ami no 46,8/46,9 4,16/4,3 16,05/15,4 436 175-176
3-jodobenzylamino 41,0/41,4 2,8/2,8 20,0/19,5 484 184-185
2-methylbenzylamino 58,2/57,88 5,7/5,5 18,86/18,3 372 174-175
3-meťhylbenzylamino 58,2/57,9 5,7/5,44 18,86/18,2 372 162-163
4-methylbenzylamino 58,2/58,5 5,7/5,9 18,86/18,3 372 164-166
2-methoxybenzylamino 55,8/54,95 5,46/5,2 18,1/17,73 388 164-166
3 -mcthoxybenzylamino 55,8/55,5 5,46/5,7 18,1/17,96 388 162-163
4-methoxybenzylamino 55,8/55,33 5,46/5,2 18,1/17,7 388 154-156
2,4-dichlorbenzylamino 47,9/47,98 4,0/4,03 16,4/15,9 426 205-206
3,4-d ichlorbenzylamino 47,9/47,3 4,0/4,3 16,4/16,12 426 194-195
2,3-dihydroxybenzylamino 52,4/52,1 4,9/5,0 18,0/18,2 390 184-186
3,5-dihydroxybenzylamino 52,4/52,2. 4,9/5,2 18,0/17,6 390 187-188
2-hydroxy-3- meťhoxybenzylamino 53,6/54,0 5,2/5,4 17,4/17,1 404 208-209
3-hydroxy-4- methoxybenzylamino 53,6/53,1 5,2/5,6 17,4/17,0 404 218-219
2,3 -dimetho x y benzy lamino 54,7/54,8 5,6/5,5 16,8/16,4 418 177-179
2,4-dimelhoxybenzylamino 54,7/54,3 5,6/5,7 16,8/16,3 418 208-210
3,4-dimethoxybcnzy lamino 54,7/54,45 5,6/5,5 16,8/16,3 418 156-157
3,5-dimethoxybenzyiamino 54,67/54,7 5,6/5,5 16,8/16,4 418 174-175
4-hydroxy-3,5- dimethoxybenzylamino 52,6/52,5 5,3/5,2 16,2/16,3 434 200-201
2,4-difluorbenzylamino 51,9/51,4 4,4/4,3 17,8/17,7 394 171-172
3,5-diíluorbenzylamino 51,9/51,2 4,4/4,3 17,8/17,6 394 178-178
2,3,4-trifluorbenzylamino 49,6/49,1 3,9/3,7 17,0/16,8 412 192-193
2,4, 5-trifluorbenzy I ami no 49,6/49,0 3,9/3,8 17,0/16,4 412 175-176
2,3,6-tri Cl uorbenzylamino 49,6/49,0 3,9/3,7 17,0/16,4 412 195-196
3-chlor-4-fluorbenzylamino 49,8/49,2 4,2/4,1 17,1/16,8 411 148-149
Příklad 2 mmol 6-chlorpurin ribosidu byly rozpuštěny v 15 ml butanolu a byly přidány 4 mmol
2-hydroxy-3-methoxybenzylaminu a 5 mmol diizopropylethylaminu. Roztok byl zahříván na
-26CZ 294538 B6 °C po dobu 18 hodin. Po ochlazení byl surový produkt odfiltrován a rekrystalován v ethanolu. T.t. 209 °C. TLC: chloroform-methanol-amoniak (90:9:0,1). Výtěžek 92 %.
Tabulka 2
Látky připravené způsobem podle příkladu 2
Substituční Elementární analýza Vypočteno/nalezeno
%C %H %N ES-MS [M+H+] Teplota tání (°C)
2-methoxybenzylamino 55,8/55,5 5,5/5,7 18,1/18,3 388 165-166
3 -methoxy benzylamino 55,8/55,5 5,46/5,7 18,1/17,96 388 163-164
4-melhoxybenzylamino 55,8/55,33 5,46/5,2 18,1/17,7 388 156-157
2,3 -dimethoxybenzylamino 54,7/54,5 5,6/5,7 16,8/17,0 418 178-179
2,4-dimeťhoxybcnzylamino 54,7/54,4 5,6/5,7 16,8/16,9 418 209-210
3,4-dimethoxybenzylamino 54,7/54,5 5,6/5,5 16,8/16,3 418 157-158
3,5-dimethoxybcnzylamino 54,7/54,7 5,6/5,5 16,8/16,4 418 176-177
2-hydroxy-3methoxybenzylamino 53,6/53,3 5,2/5,3 17,4/17,6 404 209-211
3-hydroxy-4methoxybenzylamino 53,6/53,3 5,2/5,4 17,4/17,6 404 219-220
4-hydroxy-3,5dimethoxybenzylamino 52,6/52,4 5,375,4 16,2/16,3 434 202-203
Příklad 3 mmol 6-fluorpurin ribosidu byly rozpuštěny v 15 ml izopropanolu a bylo přidáno 8 mmol 15 2,3-dihydroxybenzylaminu hydrobromidu a 10 mmol triethylaminu. Roztok byl zahříván na °C po dobu 6 hodin. Po ochlazení byl surový produkt odfiltrován a rekrystalován v ethanolu. T.t. 196 °C. TLC: chloroform-methanol-amoniak (90:9:0,1). Výtěžek 89 %.
-27CZ 294538 B6
Tabulka 3
Látky připravené způsobem podle příkladu 3
Substituent Elementární analýza Vypočteno/nalezcno
%C %H %A ES-MS [M+H+]
2,3-dihydroxybenzylajmino 52,4/52,2 4,9/5.0 18,0/18,2 390
3,5-dihydroxybenzylamino 52,4/52,2 4,9/5,0 18,0/17,8 390
2-hydroxy-3-methoxybenzylamino 53,6/53,9 5,2/5,3 17,4/17,2 404
3 -hydroxy-4-methoxybenzylamino 53,6/53,3 5,2/5,4 17,4/17,2 404
2,3-dimelhoxybenzylamino 54,7/54,8 5,6/5,5 16,8/16,6 418
2,4-di mcthoxybenzyl ami no 54,7/54,3 5,6/5,7 16,8/16,5 418
3,4-dimelhoxybcnzylamino 54,7/54,5 5,6/5,5 16,8/16,5 418
3.5-dimethoxybenzylamino 54,7/54,7 5,6/5,5 16,8/16,6 418
4-hydroxy-3,5-dimcthoxybenzylamino 52,6/52,3 5,3/5,2 16,2/16,4 434
Příklad 4 ío 2-chlor-6-(3-methoxybenzylamino)purin ribosid mmol 2,6-dichlorpurin ribosidu byly rozpuštěny v 15 ml butanolu a byly přidány 4 mmol 3-methoxybenzylaminu a 5mmol triethylaminu. Roztok byl zahříván na 90 °C po dobu 4 hodin. Po ochlazení byl surový produkt odfiltrován a rekrystalován v ethanolu. TLC: chloroform15 methanol-amoniak (90:9:1). Výtěžek 85 %.
-28CZ 294538 B6
Tabulka 4
Látky připravené způsobem podle příkladu 4
Substituent (R2=C1) Elementární analýza vypočteno/nalezeno
%C %H %A ES-MS [M+H+]
2-methylbenzylamino 53,3/52,8 5,0/5,2 17,3/17,6 406
3-methylbenzylamino 53,3/52,7 5,0/5,3 17,3/17,8 406
4-methylbenzylamino 53,3/52,9 5,0/5,2 17,3/17,6 406
2-methoxybenzylamino 51,2/50,6 4,8/5,0 16,6/16,9 422
3 -methoxybenzylamino 51,2/50,9 4,8/4,9 16,6/17,0 422
4-methoxybenzylamino 51,2/50,7 4,8/5,0 16,6/16,9 422
2,3-dimethoxybenzylamino 50,5/50,0 4,9/4,7 15,5/15,8 452
2,4-dimethoxybenzylamino 50,5/50,2 4,9/4,9 15,5/15,6 452
3,4 -dimethoxybenzylamino 50,5/49,7 4,9/4,5 15,5/16,1 452
3,5-dimcthoxybenzylamino 50,5/50,2 4,9/4,7 15,5/15,8 452
Příklad 5 ío 2-amino-6-(2-methoxybenzylamino)purin ribosid mmol 2-amino-6-chlorpurinu ribosidu byly rozpuštěny v 15 ml butanolu a byly přidány mmol 3-methoxybenzylaminu a 5 mmol triethylaminu. Roztok byl zahříván na 90 °C po dobu hodin. Po ochlazení byl surový produkt odfiltrován a rekrystalován v ethanolu. TLC:
chloroform-methanol-amoniak (90:9:1). Výtěžek 86 %.
-29CZ 294538 B6
Tabulka 5
Látky připravené způsobem podle příkladu 5
Substituent (R2=NH2) Elementární analýza Vypočteno/nalezeno
%C %H %A ES-MS [M+H+l
2-methylbenzylamino 56,0/55,4 5,7/5,9 16,6/16,9 387
3-methylbenzylamino 56,0/55,6 5,7/5,7 16,6/16,9 387
4-methylbenzylamino 56,0/55,6 5,7/5,8 16,6/16,7 387
2-methoxybenzylamino 53,7/53,1 5,5/5,7 20,9/21,2 403
3-methoxybenzylamino 53,7/53,2 5,5/5,7 20,9/21,3 403
4-methoxybenzylamino 53,7/53,3 5,5/5,6 20,9/21,2 403
2,3-dimethoxybenzylamino 52,8/52,4 5,6/5,7 19,4/19,6 403
2,4-dimethoxybenzylamino 52,8/52,5 5,6/5,7 19,4/19,6 433
3,4-dimethoxybenzylamino 52,8/52,0 5,6/6,0 19,4/19,9 433
3,5-dimethoxybenzylamino 52,8/52,1 5,6/5,9 19,4/19,9 433
Příklad 6
Inhibice senescence živočišných buněk
V tomto příkladě, lidské diploidní fíbroblasty (HCA buňky s rozdílnou úrovní pasážování: pasáž 25 - označení HCA25; pasáž 45 - označení HCA45; pasáž 80 - označení HCA80) byly použity pro studium β-galaktosidázové aktivity. Médium použité pro kultivaci buněk bylo odstraněno, buňky byly promyty 2-krát PBS a fixovány ve 2 až 3 ml fixačního činidla skládajícího se ze 2% formaldehydu a 0,2% glutaraldehydu v PBS. Buňky byly inkubovány při pokojové teplotě po dobu 5 min. a poté 2-krát promyty PBS. Buňky byly pak inkubovány při 37 °C (bez CO2) po dobu 1 až 16 hodin ve 2 až 3 ml roztoku obsahujícího ferrokyanid draselný (5 mM), ferrokyanid draselný (5 mM), MgCl2 (2 mM), X-gal (5-brom-4-chlor-3-indolyl-[3-D-galaktopyranosid) (1 mg/ml), v citrát/fosfátovém pufru, pH 6.0) Po této inkubační periodě byl buňky pozorovány mikroskopicky za účelem zjištění senescenčních buněk anebo měření intenzity zabarvení při 415 nm spektrofotometricky pomocí readeru Multiscam MCC (Labsystems) (pozitivně senescentní buňky). V těchto experimentech byly označeny pouze senescenční buňky, a to díky účinku β-galaktosidázy na substrát.
-30CZ 294538 B6
Tabulka 6
Vliv nových sloučenin na počet senescenčních buněk v kultuře lidských fibroblastů
SUBSTITUENT SENESCENTNÍ BUŇKY (%)
R6 HCA25 HCA45 HCA80
KONTROLA 3 5 38
Kinetin 3 5 25
3-chloranilino 4 4 27
Anilino 4 5 25
3-chlor-5-ammoanilino 4 5 23
4-bromanilino 5 5 21
4-chloranilino 4 6 25
3-arnino-4-chloranilino 3 5 24
2-methoxybenzylamino 4 4 16
3-methoxybenzylamino 5 6 12
2,3-dimethoxybenzylamino 4 5 18
2-methoxy-3 -chlorbenzylamino 4 5 18
2-fluorbenzylamino 4 4 15
3 - fluor benzylamino 3 5 13
3 -arnino-4-chlorbenzylamino 4 6 22
2,3-diamino-4-chlorbenzylamino 3 4 19
Jak je ukázáno v tabulce 6 se vzrůstajícím počtem pasáží vzrůstala hladina zabarvení po přidání substrátu pro β-glukosidázu. U nejstarších kultur bylo možné pozorovat pouze modře zabarvené buňky, jejichž barva se nacházela v rozmezí od jasně modré po matně modrou. N6-substituované deriváty adenosinu byly velmi účinné při zpomalování senescence buněk po 80 pasáži. V případě dlouhodobější kultivace byly schopny přežít až o 40 % delší dobu oproti buňkám kontrolním.
Příklad 7
2-methylthio-6-(3-methylbenzylamino)purin ribosid
2-Methylthioxanthin (65 g) byl převrstven oxychloridem fosforečným (975 ml) a N,N-diethylanilinem (97,5 ml). Směs byla refluxována 1,5 h za stálého míchání. Veškerý nadbytek oxychloridu fosforečného byl odpařen pod vakuem (vakuová odparka, vodní vývěva) a zbytek smíchán s ledem (1,75 kg) v 101 nádobě (bez dalšího chlazení). Směs byla ještě 10 min. míchána (dokončení hydrolýzy oxychloridu) a následně extrahována ethyl-acetátem (4 x 2.5 1). Spojené extrakty byly promyty vodou (3 x 1 1) a vysušeny. Surový produkt byl rekrystalizován z ethanolu a vysušen do konstantní hmotnosti nad oxidem fosforečným. Výtěžek 23,6 g (33 %). UV čistota
-31 CZ 294538 B6
%. HPLC (25 x 0,4 cm ODS. Od 0 do 30 % acetonitrilu. 1 ml/min. 30 min) tR 26,8 min. Čistota 92 %. TLC (chloroform/methanol 9/1) Rf 0.80
2- Methylthio-6-chlorpurin (4 g, vysušen do konstantní hmotnosti nad oxidem fosforečným) byl smíchán s β-D-ribofuranózou 1,2,3,5-tetra acetátem (6,4 g) při teplotě 145 až 150 °C v parafínové lázni. Bylo přidáno asi 100 mg jodu a směs sušena pod vodní vývěvou asi 30 min. Černý zbytek byl rozpuštěn v chloroformu, zfíltrován a nanesen ve lOOml směsi ethyl acetát/toluen (1:4) na kolonu naplněnou 2 x 400 g silikagelu ve 2 1 20% ethyl acetátu v toluenu. Kolona byla následně eluována 30% ethyl acetátem v toluenu. Složení frakcí bylo monitorováno pomocí TLC io v mobilní fázi ethyl acetát/toluen 1/2 (výchozí látka Rf = 0,06, produkt 0,25). Hlavní produkt (71%), β-izomer, byl zcela separován od a izomeru a dalších nečistot. Hnědý sirup byl vysušen pod vakuem a rozpuštěn v suchém methanolu, ochlazen a deacetylován přes noc v 1000 ml bezvodého methanolu nasyceného čpavkem. Směs byla odpařena na rotační vakuové odparce a produkt byl rekrystalizován v horké vodě za vzniku žlutých krystalů a vysušen do konstantní 15 hmotnosti nad P2O5. Výtěžek 4,95 g (18,6 %). T.t. 187 až 198 °C. HPLC čistota (25cm ODS 0 - 30 % acetonitrilu) = 91 %.
3,3 g (lOmmol) 2-methylthio-6-chlorpurin-|3-D-ribofuranosidu bylo přidáno do směsi
3- methylbenzylaminu v butanolu (100 ml) obsahujícího triethylamin (7,8 ml) a směs byla 20 refluxována 2 hodiny. Butanol byl odpařen za zisku bílého produktu, který byl následně resus- pendován ve vodě (50 ml). pH suspenze bylo adjustováno na 8 až 8,5 pomocí 2 M NaOH a uchováváno přes noc při 4 °C. Pevný produkt byl odfiltrován a rekrystalizován z horkého ethanolu za vzniku bílého produktu, který byl následně vysušen nad P2O5 do konstantní hmotnosti. Výtěžek 3,1 g (81,4 %). HPLC čistota 98.6 %.
Tabulka 7
Látky připravené způsobem podle příkladu 7
Substituent (R2=methylthio) Elementární analýza Vypočteno/nalezeno
%C %H %A ES-MS [M+Ff]
2-methylbenzylamino 58,9/58,2 5,3/5,6 24,5/24,8 286
3-methylbenzylamino 58,9/58,4 5,3/5,6 24,5/24,8 286
4-methylbenzylamino 58,9/58,1 5,3/5,9 24,5/25,0 286
2-methoxybenzylamino 55,8/55,0 5,0/5,4 23,2/23,8 302
3-methoxybenzylamino 55,8/55,5 5,0/5,1 23,2/23,3 302
4-methoxybenzylamino 55,8/55,3 5,0/5,3 23,2/23,6 302
Příklad 8
Indukce proteinu p21WAF~’, přirozeného inhibitoru cyklin-dependentních kináz, působením cytokininů v buněčné linii karcinomu prsu MCF-7 - molekulární mechanizmus účinku.
Změny hladiny proteinu p21WAF1 v závislosti na koncentraci 6-(2-hydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosidu (20H3MeOBAPR)
Na buňky MCF-7 kultivované při 37 °C v atmosféře s 5% CO2 v médiu D-MEM s přídavkem 10% fetálního telecího séra působily koncentrace 20H3MeOBAPR v rozmezí 0-100 μΜ. 20H3MeOBAPR byl do média přidáván ze lOOmM zásobního roztoku v DMSO. Po 12 hodinách byly buňky sklizeny seškrabáním do média, centrifugovány (1000 rpm, 4 °C, 5 min), 2x promyty
-32CZ 294538 B6 ledovým PBS a následně opět centrifugovány. Následovala lyže buněk lx CSB (nanášení pufr pro SDS-PAGE, tj. elektroforézu proteinů v polyakrylamidovém gelu za přítomnosti SDS). Proteiny v lyzátu byly separovány SDS-PAGE a přeneseny na nitrocelulózovou membránu. Membrána byla zablokována roztokem 5% odtučněného mléka + 0,1% Tween 20 v PBS. Hladina proteinů p21WAF_1 a aktin (jako kontrola nanášeného množství proteinu) byla sledována imunochemicky pomocí komerčně dostupných specifických monoklonálních protilátek Anti-WAFl (Ab-1, Calbiochem) a Anti-Actin (Cloně AC-40, Sigma-Aldrich). Pro detekci navázaných protilátek byla použita králičí sekundární protilátka značená peroxidázou (RAM-Px, DAKO) s následnou chemiluminiscencí (ECL, Amersham-Pharmacia). Účinné indukce proteinu p21WAF_1 je v buňkách MCF-7 dosaženo působením koncentrací 20H3MeOBAPR v řádu jednotek pmol na litr kultivačního média (Obr. 1).
Změny hladiny proteinu p21WAF_1 v závislosti na době inkubace s 20H3MeOBAPR
Buňky MCF-7 byly inkubovány v přítomnosti 1 μΜ 20H3MeOBAPR. V různých časových intervalech od podání 20H3MeOBAPR byly buňky sklizeny a lyžovány. Následná SDS-PAGE a imunodetekce umožnila stanovení změn hladiny proteinu p21WAF_1 v závislosti na délce inkubace v přítomnosti 20H3MeOBAPR. Kultivace buněk, jejich sklizení, lyže a detekce proteinů p2iWAF-> a aktin v lyzátech probíhala obdobně jako v bodě 1. K účinné indukci p21WAF”‘ v buňkách MCF-7 dochází v rozmezí 6 až 24 hodin po přídavku 20H3MeOBAPR v 1 μΜ koncentraci (Obr. 2).
Příklad 9
In vitro cytotoxická aktivita novách derivátů
Jedním z parametrů používaných jako základ pro cytotoxickou analýzu je metabolická aktivita životaschopných buněk. Například mikrotitrační analýza, kde se používá Calcein AM, je dnes rozšířena jako metoda kvantifikace buněčné proliferace a cytotoxicity. Tento test je využíván v programech pro screening léků a pro testy chemosensitivity. Testem se rozpoznají pouze životaschopné buňky. Množství zredukovaného Calceinu AM odpovídá počtu životaschopných buněk v kultuře.
Lidská T-lymfoblastická leukemická buněčná linie CEM, promyelocytámíHL-60 a monocytámí U937 leukemie, buněčné linie prsního karcinomu MCF-7, buňky cervikálního karcinomu HELA, myší fibroblasty NIH3T3, lidská erythroleukemie K562, buňky G361 lidského maligního melanomu byly použity pro rutinní screening sloučenin. Buňky byly udržovány vNunc/Coming 80 cm2 plastikových lahvích a pěstovány v médiu pro buněčné kultury (DMEM obsahující 5 g/1 glukózy, 2mM glutaminu, 100 U/ml penicilinu, 100 pg/ml streptomycinu, 10 % fetálního telecího séra a hydrogenuhličitan sodný), sloučeniny byly připraveny postupem podle předloženého vynálezu.
Buněčné suspenze byly připraveny a naředěny podle typu buněk a podle očekávané konečné hustoty buněk (104 buněk na jamku na základě charakteristik buněčného růstu), pipetovalo se 80 μΐ buněčné suspenze na 96-jamkové mikrotitrační destičky. Inokuláty byly stabilizovány 24 hodinovou preinkubací při 37 °C v atmosféře CO2. Jednotlivé koncentrace testovaných látek byly přidány v čase nula jako 20 μΐ alikvotní podíl do jamek mikrotitračních destiček. Obvykle se sloučeniny ředily do šesti koncentrací v čtyřnásobné ředicí řadě. Při rutinním testování byla nej vyšší koncentrace v jamce 166,7 μΜ, změny této koncentrace závisí na dané látce. Všechny koncentrace byly testovány v dubletu. Inkubace buněk s testovanými deriváty trvala 72 hodin při 37 °C, 100% vlhkosti a v atmosféře CO2. Na konci inkubační periody byly buňky analyzovány po přidání roztoku Calceinu AM (Molecular Probes) a inkubace probíhala další 1 hodinu. Fluorescence (FD) byla měřena pomocí Labsystem FIA readeru Fluoroskan Ascent (Microsystems). Přežití nádorových buněk (The tumor cell survival-TCS) bylo spočítáno podle následujícího VZtahu. GI50 (FDjamka s derivátem/FDkontrolní jamka) 100 /0. Hodnota GI50, která odpOVlda
-33 CZ 294538 B6 koncentraci látky, kdy je usmrceno 50 % nádorových buněk, byla vypočtena ze získaných dávkových křivek (Obr. 3).
Pro vyhodnocení protinádorové aktivity byla testována toxicita nových derivátů na panelech obsahujících buněčné linie rozdílného histogenetického a druhového původu (Tab. 8). Ukázalo se, že pro všechny testované nádorové linie bylo působení nových sloučenin, zatímco nemaligní buněčné linie, tzn. NIH3T3 fíbroblasty a normální lidské lymfocyty, byly vůči tomuto působení rezistentní. Účinné deriváty zabily nádorové buňky při koncentracích blízkých 0,1 až 50 μΜ.
Tabulka 8
Cytotoxicita N6-substituovaných derivátů adenosinu pro různé nádorové buňky
Použitá buněčná linie / IC 50 (pmol/L)
Substituent v poloze N6-adenosinu HOS K-562 MCF7 NIH-3T3 G-361 CEM HL60
Adenosin >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7
ZR >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7
2-hydroxybenzylamino 2,8 88 11,4 43,2 >166,7 0,7 0,42
3-hydroxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 51,9 23,7
4-hydroxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 39,7 9,5
2-methoxybenzylamino 21,2 11,2 >166,7 >166,7 >166,7 3,2 2,3
3-methoxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 7,6 4,9
4-methoxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 114,9 >166,7 >166,7
2-chlorbenzylamino >166,7 64 >166,7 >166,7 14,5 1,5
3-chlorbenzylamino >166,7 30,4 >166,7 >166,7 1,6 0,75
4-chlorbenzylamino >166,7 16,1 >166,7 >166,7 6,5 5,3
2-fluorbenzylamino >166,7 33,2 >166,7 4,5 3,2
3-fluorbenzylamino >166,7 7 16,6 >166,7 15,7 4 0,92
4-fluorbenzylamino 20 6,4 14 >166,7 1,5 0,86
2-methylbenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 14 3,3
3-methylbenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 19,1 6,4
4-methylbenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7
2-brombenzylamino >166,7 10 >166,7 >166,7 12,3 6,6
3-brombenzylamino >166,7 19,7 >166,7 >166,7 5 8
4-brombenzylamino >166,7 68,2 >166,7 >166,7 20,6 47,4
2,4-dimethoxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 39
2-chlor-4-fluorbenzylamino >166,7 11,7 >166,7 >166,7 20,9 9
3-chlor-4-fluorbenzylamino >166,7 4,1 >166,7 >166,7 3,4 3,5
2,3-dimethoxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 109
2,4-dichloroxybenzylamino >166,7 85,7 >166,7 >166,7 86,7 96,3
2,4-difluoroxybenzylamino >166,7 7,4 >166,7 >166,7 7,1 3,4
2,3,4-triíluoroxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 58,2 13
3,4-dichloroxybenzylamino >166,7 6,5 88,8 >166,7 3 1,1
3,5-difluoroxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 24,5 9,1
3,5-dimethoxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 18,8
2,3,6-trifluoroxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 13
2-hydroxy-3-methoxybenzylamino >166,7 19,2 27 >166,7 148,1 0,3 0,15
3-hydroxy-4—methoxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7
2-hydroxy-5-methoxybenzylamino >166,7 15,4 21 >166,7 102,3 0,2 0,1
2-hydroxy-3-chlorbenzylamino >166,7 10,7 15 >166,7 128,5 0,3 0,1
R2=C1, Substituent v N6-poloze
2-hydroxybenzylamino 2,5 75 10,5 35,1 >166,7 0,56 0,38
3-hydroxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 47,8 15,9
4-hydroxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 39,7 9,5
2-methoxybenzylamino 15,3 14,5 >166,7 >166,7 >166,7 2,7 1,5
3-methoxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 6,5 4,1
4-methoxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 105,4 >166,7 >166,7
2-chlorbenzylamino >166,7 61 >166,7 >166,7 8,5 1,2
3-chlorbenzylamino >166,7 28 >166,7 >166,7 1,1 6,0
4-chlorbenzylamino >166,7 15 >166,7 >166,7 5,8 5,0
2-fluorbenzylamino >166,7 30 >166,7 4,2 2,5
-34CZ 294538 B6
Pokračování tabulky 8
Použitá buněčná linie / IC 50 (pmol/L)
R2=CI, Substituent v N6-poloze HOS K-562 MCF7 NIH-3T3 G-361 CEM HL60
3-fluorbenzylamino >166,7 5,3 16 >166,7 16 3 0,9
4-fluorbenzylamino 19 5,8 12 >166,7 1,5 0,7
2-hydroxy-3-methoxybenzylamino >166,7 17 23 >166,7 140 0,2 0,1
2-hydroxy-3-chlorbenzylamino >166,7 10 14 >166,7 118 0,2 0,1
R2=NH2, Substituent v N6-poloze
2-methoxybenzylamino 27,8 34,9 >166,7 >166,7 >166,7 12,8 7,8
3-methoxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 13,8 8,9
2-chlorbenzylamino >166,7 78 >166,7 >166,7 24,7 10,3
3-chlorbenzylamino >166,7 43 >166,7 >166,7 10,2 5,8
2-fluorbenzylamino >166,7 45 >166,7 14,5 8,7
3-fluorbenzylamino >166,7 12 36 >166,7 21 21 3,4
4-fluorbenzylamino 43 13 25 >166,7 12,1 2,9
R2=SCHs, Substituent v N6-poloze
2-methoxybenzylamino 34,3 34,8 >166,7 >166,7 >166,7 11,5 10,2
3-methoxybenzylamino >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 >166,7 16,5 8,8
2-chlorbenzylamino >166,7 78 >166,7 >166,7 14,6 7,4
3-chlorbenzylamino >166,7 35 >166,7 >166,7 13,2 6,1
2-fluorbenzylamino >166,7 42 >166,7 9,7 11,4
3-fluorbenzylamino >166,7 7,9 31 >166,7 28 8,5 5,2
Příklad 10
Nové sloučeniny indukují apoptózu nádorových buněk
Pro analýzu mechanizmu indukované cytotoxicity nových sloučenin je důležité odlišit apoptózu od druhé hlavní formy buněčné smrti, nekrózy. Zaprvé, na úrovni tkáně apoptóza produkuje malý nebo žádný zánět, protože okolní buňky, zvláště makrofágy, spíše než že jsou uvolněny do extracelulámí tekutiny, pohltí jednotlivé části buňky. Naproti tomu při nekrózeje buněčný obsah uvolněn do extracelulámí tekutiny, což způsobuje zánět. Za druhé, na buněčné úrovni vykazují apoptoické buňky smršťování a blebbing (puchýřkování) cytoplazmy, zachování struktury buněčných organel včetně mitochondrií, kondenzaci chromatinu, fragmentaci jádra a tvorbu apoptoických tělísek, ačkoli ne všechny jsou vidět u všech typů buněk. Za třetí, na molekulární úrovni hraje významnou roli v indukci apoptózy řada biochemických procesů. Většina z nich však není dobře pochopena a mají za následek aktivaci proteáz a nukleáz, které nakonec ničí klíčové biologické makromolekuly - proteiny a DNA.
Kultivace buněk. Suspenze lidských leukemíckých buněk, linie HL-60 byla kultivována v médiu RPMI-1640 doplněném 10% telecím fetálním sérem a antibiotiky v atmosféře 5 %
CO2 při 37 °C. Počet buněk je stanoven pomocí hemocytometru. Buňky byly získány z ECACC.
Viabilita buněk. Buňky jsou barveny kombinací fluorescein diacetátu (FDA, 2pg/ml) a propidium jodidu (PI, 10 pg/ml) přímo v růstovém médiu. Rozlišování živých a mrtvých buněk se provádí pomocí fluorescenčního mikroskopu (Mlejnek and Kolman. Chem. Biol. Interact. 1999, 117: 219-239).
Morfologická analýza buněčných jader. Buňky jsou promyty v PBS a pak fixovány ve směsi methanol/kyselina octová (3:1) při -20 °C po dobu 12 hodin. Fixované buňky jsou nakapány na podložní sklíčka a barveny Hoechst 33342 (2 pg/ml) v PBS/glycerol (v/v 70:30). Morfologie buněčných jader je pozorována pod fluorescenčním mikroskopem Olympus BX60, (Mlejnek and Kuglík 2000).
-35CZ 294538 B6
Analýza buněčného cyklu. Buňky jsou promyty v PBS a pak fixovány v 70% ethanolu při -20 °C přes noc. Fixované buňky jsou promyty v PBS, a pak barveny v roztoku PBS obsahujícího propidium jodid PI (20 pg/ml) a RNase A (100 pg/ml) po dobu 30 min při teplotě místnosti. Obarvené buňky jsou dále analyzovány průtokovou cytometrií (FACScan, Becton Dickinson), (Mlejnek and Kolman 1999).
Měření integrity jaderné DNA. Vzorky buněk jsou promyty v PBS a pak lyžovány v pufru (50 mM Tris/ HC1, pH = 8,0, 10 mM EDTA, 0,5% sarkosinátu sodném, 0,5 mg/ml proteinázy K a 0,2 mg/ml RNAáza A) po dobu 12 hodin při 37 °C. DNA extrakty jsou pak analyzovány standardní agarózovou elektroforézou (Mlejnek and Kuglik. J. Cell. Biochem. 2000, 77: 6-17).
Měření obsahu nukleotidů pomocí HPLC. Asi 107 buněk je sedimentováno centrifugací (2500 ot/min, 3 min. při lab. teplotě). Sedimenty jsou extrahovány 5% HC1O4 po dobu 15 min. při 4 °C. Buněčné extrakty jsou neutralizovány přídavkem 2 M K2CO3. Alikvoty extraktů jsou naneseny na kolonu pBONDAPAK C]8 (250 x 4 mm, 5 pm) a nukleotidy jsou eluovány za izokratických podmínek: mobilní fáze - 0,1 M NaH2PO4, pH = 6,4, 5mM tetrabutylamonium fosfát + 10% acetonitril, průtok - 0,4ml/min. Kvantitativní analýza byla provedena pomocí externího standardu ATP, iPA a iPA monofosfátu (Mlejnek, and Kuglik. J. Cell. Biochem. 2000, 77: 6-17).
Měření aktivit kaspázových proteůz. Buňky jsou promyty v PBS a pak lyžovány v kaspázovém extrakčním pufru [50 mM HEPES/NaOH, pH 7,4 1 mM EDTA, 0,2% Chaps, 5 mM dithiothreitol, a směs inhibitorů proteáz (Roche)] po dobu 15 min. při 4 °C. Lyzáty jsou odstředěny (30 000 x g při 4 °C po dobu 30 min.). Supematant je možno ihned použit pro měření nebo uschovat při -80 °C. Měření aktivit se provádí se syntetickými fluorescenčními substráty. Aktivita kaspázy-I a 3 byly měřeny se substráty Ac-YVAD-AMC a Ac-DEVD-AMC při 380/445 nm v reakčním pufru (25 mM PIPES/KOH, 2 mM EGTA, 2 mM MgCl2, and 5 mM DTT, pH 7,3). Aktivita kaspázy-9 pak se substrátem Ac-LEHD-AFC při 400/500 nm ve stejném reakčním pufru, avšak při pH = 6,6 (Mlejnek. J. Cell. Biochem. 2001, 83: 678-689).
Výsledky
6-(2-hydroxy-3-methoxybenzyl)amino-purin ribosid (20H3MeOBAPR) a další příbuzné cytokininové deriváty zpomaluje buněčnou proliferaci (Obr. 4) a indukuje buněčnou smrt u buněk HL-60, jež nese typické morfologické a biochemické znaky apoptózy (Obr. 5-7). Analýza buněčného cyklu ukazuje, že 20H3MeOBAPR neinhibuje buněčný cyklus v některém z kontrolních bodů, ale více méně nespecificky (Obr. 8). Působení 20H3MeOBAPR indukuje aktivaci kaspázových proteáz, zejména kaspázu-9 a -3 (Obr. 9). Inhibicí kaspázových proteáz nelze zabránit buněčné smrti. Nespecifický kaspázový inhibitor Z-VAD-FMK potlačuje morfologické i biochemické apoptotické znaky, avšak neinhibuje buněčnou smrt jako takovou (Obr. 10). 20H3MeOBAPR není toxické pro buňky sám o sobě, toxické jsou pouze jako fosforylované deriváty. Inhibitory adenosin kinázy, které zabrání intracelulámí konverzi 20H3MeOBAPR na 20H3MeOBAPR monofosfát úplně potlačí nástup apoptózy včetně všech jejích morfologických i biochemických znaků (Obr. 11).
Příklad 11
Imunosupresivní aktivita
Jedním z důležitých parametrů specifické buněčné imunity je odezva lymfocytů na antigeny nebo polyklonální mitogeny. Většina normálních savčích periferních lymfocytů je v klidové fázi buněčného cyklu. Antigeny i nespecifické polyklonální mitogeny mají schopnost aktivovat lymfatické buňky, což je doprovázeno dramatickými změnami ve vnitrobuněčném metabolizmu (mitochondriální aktivita, proteinová syntéza, syntéza nukleových kyselin, formování blastů a
-36CZ 294538 B6 buněčné proliferace). Sloučeniny, které jsou schopné selektivně inhibovat proliferaci lymfocytů, jsou potenciálními imunosupresivy. Pro měření proliferační odpovědi lymfocytů bylo vyvinuto množství in vitro analýz. Nejběžněji používanou metodou je inkorporace 3H-thymidinu.
Během buněčné proliferace dochází nejprve k replikaci DNA, poté je buňka rozdělena na dvě dceřiné buňky. Tento úzký vztah mezi buněčným zdvojením a DNA syntézou poskytuje možnost pro vyhodnocení intenzity buněčné proliferace. Jestliže jsou značené DNA prekurzory přidány do buněčné kultury, dělící se buňky inkorporují značené nukleotidy do své DNA. Tyto testy obvykle vyžadují použití radioaktivně značených nukleotidů, konkrétně tritiovaný thymidin ([3H]-TdR). Množství [3H]-TdR inkorporované do buněčné DNA je kvantifikováno pomocí scintilačního počítače.
Lidská heparinizovaná periferní krev byla získaná od zdravých dobrovolníků punkcí z kubitální žíly. Krev byla naředěna v PBS (1:3) a mononukleámí buňky byly odseparovány centrifugací ve Ficoll-Hypaque hustotním gradientu (Pharmacia, 1,077 g/ml) při 2200 g po dobu 30 minut. Při následující centrifugací byly lymfocyty promývány v PBS, poté resuspendovány v buněčném kultivačním médiu (RPMI 1640, 2mM glutamin, 100 U/ml penicilín, 100 pg/ml streptomycin, 10 % fetální telecí sérum a hydrogenuhličitan sodný).
Buňky byly naředěny na cílovou hustotu 1.100.100 buněk/ml a byly pipetovány (180 μΐ) do 96-ti jamkových mikrotitračních destiček. Testované látky byly přidány k buněčným suspenzím ve čtyřkovém ředění v 20 μΐ alikvotech/jamku v čase nula. Obvykle byly testované sloučeniny vyhodnocovány v šesti koncentracích s nejvyšší testovanou koncentrací 266,7 μΜ. Jednotlivé koncentrace derivátů byly testovány v dubletu. Lymfocyty ve všech jamkách s výjimkou nestimulovaných kontrol byly aktivovány přidáním 50 μΐ konkanavalinu A (25 pg/ml). Buněčné suspenze byly dále inkubovány 72 hodin při 37 °C a při 100% vlhkosti v atmosféře 5% CO2. Na konci inkubace byly buňky analyzovány pomocí ^HJ-TdR:
Buňky byly inkubovány s 0,5 pCi (20 μΐ zásobního roztoku 500 pCi/ml) na jamku po dobu 6 hodin při 37 °C a 5% CO2. V dalším kroku byl použit automatizovaný buněčný hervestor pro lýzu buněk ve vodě a adsorpci DNA na filtr ze skleněných vláken o velikosti mikrotitračního panelu. DNA s inkorporovaným [3H]-TdR je zadržena na filtru, přičemž neinkorporovaný materiál filtrem prochází. Filtry byly usušeny při teplotě místnosti přes noc, uzavřeny v plastikových sáčcích s 10 až 12 ml scintilační tekutiny. Množství [3H]-TdR přítomné na každém filtru bylo stanoveno scintilačním počítači. Efektivní imunosupresivní dávka (ED) byla spočítána podle následujícího vzorce: ED (CCPMjamka stest. derivátem / prumema CCPNLontrolní jamka) x 100 %. Hodnota ED50, což je koncentrace látky inhibující proliferaci 50 % lymfocytů, byla spočítána z dávkových křivek.
Pro vyhodnocení imunosupresivní aktivity nových sloučenin byla analyzována jejich schopnost inhibovat polyklonálním mitogenem stimulovanou proliferaci normálních lidských lymfocytů (Tab. 9). Uvedené výsledky ukazují, že tyto sloučeniny mají minimální vliv na inkorporaci 3H-thymidinu v klidových (nestimulovaných) lymfocytech, nicméně účinně inhibují proliferaci mitogenem aktivovaných lymfocytů. Efektivní imunosupresivní dávka nových derivátů za in vitro podmínek byla v rozmezí 10 až 40 μΜ.
-37CZ 294538 B6
Tabulka 9
Imunosupresivní aktivity nových sloučenin
SUBSTITUENT V POLOZE N6 ADENOSINU Lidské lymfocyty ED5o (μΜ)
2-hydroxybenzylamino 4,8
3-hydroxybenzylamino 10,7
2-fluorbenzylamino 5,6
3-fluorbenzylamino 7,1
4-fluorbenzylamino 9,4
2-methylbenzylamino 5,8
3-methylbenzylamino 6,5
3,4-dihydroxybenzylamino 8,3
2-hydroxy-3-chlorbenzylamino 2,1
2-hydroxy-3-methoxybenzylamino 1,4
2-hydroxy-4-methoxybenzylamino 1,5
2-chlorbenzylamino 8,4
3-chlorbenzylamino 2,5
4-chlorbenzylamino 3,9
Příklad 12
Antisenescenční aktivity nových látek při testování v senescenčním biotestu na segmentech listů pšenice
Semena ozimé pšenice Triticum aestivum cv. Hereward byly promyty pod tekoucí vodou po 24 h a poté vysety do vermikulity nasyceného Knopovým živným roztokem. Nádoby se semeny byly umístěny do klimatizované růstové komory s 16/8 hodinovou světelnou periodou (světelná intenzita 50 mmol.m_2.s_1) a teplotou 15 °C. Po 7 dnech měly semenáčky vyvinutá první praporcový list a druhý list začínal prorůstat. Z prvních listů vždy od 5 rostlin byly odebrány vrcholové sekce dlouhé přibližně 35 mm, které byly zkráceny tak aby jejich váha byla přesně 100 mg. Bazální konce těchto 5 listových segmentů byly umístěny do jamek mikrotitračních polystyrénových destiček obsahujících 150 ml roztoku testovaného derivátu. Destičky byly umístěny do plastického boxu vystlaného filtračním papírem, který byl nasycen vodou za účelem maximální vzdušné vlhkosti. Po 96 hodinách inkubace ve tmě při 25 °C byly listové sekce vyjmuty a chlorofyl extrahován v 5 ml 80% ethanolu zahřátím při 80 °C po dobu 10 min. Objem vzorku byl poté doplněn na 5 ml přidáním 80% ethanolu. Absorbance extraktů byla měřena při 665 nm. Jako kontroly byly měřeny rovněž chlorofylové extrakty z listů a listových vrcholů inkubované v deionizované vodě. Vypočtené hodnoty jsou průměrem z 5 opakování a celý experiment byl zopakován minimálně 2-krát. Výsledky těchto experimentů byly vyneseny ve formě grafů závislosti obsahu chlorofylu v senescenčních listech v závislosti na koncentraci (viz Obr. 12). V každém experimentu byla použita jako kontrolní látka 6-benzylaminopurin ribosid, který je znám velmi vysokou cytokininovou aktivitou. Testované cytokininy byly rozpuštěny v dimethylsulfoxidu (DMSO) a zásobní roztok doplněn vodou na 10 3 M. Tento zásobní roztok byl dále ředěn testovacím médiem v koncentračním rozsahu 10“8 až 1(Γ4 M. Finální koncentrace DMSO v médiu nepřevýšila 0,2 % a v této koncentraci neovlivňovala biologickou aktivitu testu.
Ze získaných dat (obr. 12) byla vypočítána maximální účinná koncentrace testované látky a její relativní účinnost v této koncentraci (Tab. 10). 10*4 M koncentrace BAPR byla postulována jako 100 % biologické aktivity.
-38CZ 294538 B6
Tabulka 10
Účinek nových cytokinů na retenci chlorofylu v extirpovaných listových segmentech pšenice. Hodnoty v tabulce jsou vyjádřeny v % výchozího obsahu chlorofylu v čerstvých listech před inkubací.
Substituent N6 Maximální účinná koncentrace (mol.r1) účinnost (%) [10 mol.r1 BAPR= 100%]
2-fluorbenzylamino 10 118±19
3-fluorbenzylamino ío 220±16
4-fluorbenzylamino 10 148±2
2-chlorbenzylamino 10 119±9
3-chlorbenzylamino 72±8
4-chlorbenzylamino 10 104±6
2-brombenzylamino 10 86±19
3-brombenzylamino 10 89±10
4-brombenzylamino 10 76±11
3-jodobenzylamino 10 98±4
2-methylbenzylamino ió 142±6
3-methylbenzylmino lir4 143±9
4-methylbenzylmino lir4 55±5
2-methoxybenzylamino 10 198±12
3-methoxybenzylamino 10 209±8
4-methoxybenzylamino 10 110±9
2,4-dichlorbenzylamino 10 5±1
3,4-dichlorbenzylamino 10 151±29
2,3-dimethoxybenzylamino 10 106±17
3,4-dimethoxybenzylamino 10 47±6
3-chlor-4-fluorbenzylamino 10 156±10
3,5-difluorbenzylamino 10 195±14
2,4-difluorbenzylamino 10 171±8
2,3,4-trifluorbenzylamino 10 144±12
2,3,6-trifluorbenzylamino 10 133±14
2-hydroxy-3-methoxybenzylamino 10 30±8
3-hydroxy-4-methoxybenzylamino 10 22±5
Vyvinuté látky mají velmi silné antisenescenční účinky. Některé z nich vyvolávají až 200% nárůst obsahu chlorofylu v extirpovaných listech pšenice oproti kontrole.
Příklad 13
Stimulační vliv nových látek na buněčné dělení rostlinných buněk
Stimulační vliv nově připravených derivátů byl testován v kalusovém biotestu za použití cytokinin-dependentního kalusu tabáku. Tento cytokinin-dependentní tabákový kalus Nicotiana tabacum L. cv. Wisconsins 38 byl udržován při 25 °C na modifikovaném médiu MurashigeSkoog obsahujícím na 1 litr: 4pmol kys. nikotinové, 2,4 pmol pyridoxin hydrochloridu, 1,2 pmol thiaminu, 26,6 μιηοΐ glycinu, 1,37 μηιοί glutaminu, 1,8 μιηοΙ myoinositolu, 30 g sacharózy, 8 g agaru, 5,37 μηιοί α-naftyloctové kyseliny a 0,5 μηιοί 6-benzylaminopurin ribosidu. Subkultivace probíhala každé 3 týdny. Čtrnáct dní před započetím biotestu byl kalus přenesen na médium bez 6-benzylaminopurin ribosidu. Stimulační růstová aktivita byla stanovena na základě nárůstu čerstvé hmoty kalusu po 4 týdnech kultivace. Pět replikantů bylo připraveno pro každou
-39CZ 294538 B6 testovanou koncentraci a daný test byl opakován minimálně 2-krát. V každém experimentu bylo použito jako kontrolní látky 6-benzylaminopurin ribosidu, který je znám velmi vysokou cytokininovou aktivitou. Testované cytokininy byly rozpuštěny v dimethylsulfoxidu (DMSO) a zásobní roztok doplněn vodou na ΙΟ-3 M. Tento zásobní roztok byl dále ředěn testovacím médiem v koncentračním rozsahu 10~8 až 10~4 M. Finální koncentrace DMSO v médiu nepřevýšila 0,2 % a v této koncentraci neovlivňovala biologickou aktivitu testu. Stimulační aktivita byla vypočtena z růstových křivek závislosti čerstvé hmoty kalusu na koncentraci, jejichž příklady jsou znázorněny na obr. 6.
Ze získaných dat (obr. 13) byla opět vypočítána maximální účinná koncentrace testované látky a její relativní účinnost v této koncentraci (Tab. 11). 10“5 M koncentrace BAPR byla postulována jako 100 % biologické aktivity.
Tabulka 11
Vliv nových cytokininů na růst cytokinin-dependentního tabákového kalusu Nicotiana tabacum L. cv. Wisconsins 38
Substituent N6 Maximální účinná koncentrace(mol.r‘) Účinnost (%)[ 10“5 molr1 BAPR= 100%]
2-fluorbenzylamino 10^ 100±9
3-fluorbenzylamino 10~5 91±6
4-fluorbenzylamino nr5 100±6
2-chlorbenzylamino ΠΓ5 93±4
3-chlorbenzylamino 10~5 96±5
4-chlorbenzylamino 46±14
2-brombenzylamino 10’Ď 100±4
3-brombenzylamino 106 82±11
4-brombenzylamino Ϊ04 15±11
3-j odobenzylamino 10^ 47±12
2-methylbenzylmino Ϊ045 98±4
3-methylbenzylmino nř5 90±2
4-methylbenzylmino 10-6 95±6
2-methoxybenzylamino 10~5 108±l
3-methoxybenzylamino 10*6 92±1
4-methoxybenzylamino 10-6 2±2
2,3-dimethoxybenzylamino 10’6 5±2
3-chlor-4-fluorbenzylamino 106 87±4
2-chlor-4-fluorbenzylamino 10’5 98±4
3,5-difluorbenzylamino 104* 95±3
2,3,6-trifluorbenzylamino 10’5 92±2
2,4,5-trifluorbenzylamino nr5 95±3
Příklad 14
Testování nových cytokininů v amarantovém biotestu
Pro studium cytokininové aktivity byl rovněž použit „amarantový“ biotest (Biddington a Thomas, Planta 11:183-186, 1973) v následující modifikaci. Semena Amaranthus caudatusvax. Atropurpurea byla povrchově sterilizována 10% N-chlorbenzensulfoamidem (w/v) po dobu 10 min a poté promyta 5-krát deionizovanou vodou. Semena byla rozmístěna v 15 cm Petriho miskách s filtračním papírem saturovaným destilovanou vodou. Po 72 hodinách kultivace při 25 °C ve tmě byly ze semenáčků odstraněny kořeny. Tyto explantáty obsahující 2 kotyledony a hypokotyl byly
-40CZ 294538 B6 umístněny do 5 cm Petriho misek on 2 vrstvy filtračního papíru nasyceného 1 ml inkubačního média obsahujícího 10 pmol Na2HPC>4-KH2PO4, pH 6,8, 5 pmol tyrosinu a testovaný cytokinin. Na misku bylo umístěno 20 explantátů. Veškeré manipulace byly prováděny pod zeleným světlem v temné komoře. Po 48 hodinách inkubace při 25 °C ve tmě byl betacyanin extrahován cestou zmražení explantátů v 3,33 μΜ kyselině octové. Koncentrace betacyaninu byla stanovena porovnáním absorbancí při 537 a 620 nm a vypočtena pomocí vzorce ΔΑ = Α537η]η - A62onm· Hodnoty byly vyneseny do grafů závislosti ΔΑ na koncentraci (Obr. 7). Pět replikátů bylo připraveno pro každou testovanou koncentraci a daný test byl opakován minimálně 2-krát. V každém experimentu byla použita jako kontrolní látka 6-benzylaminopurin ribosid, který je znám velmi vysokou cytokininovou aktivitou. Testované cytokininy byly rozpuštěny v dimethylsulfoxidu (DMSO) a zásobní roztok doplněn vodou na 10“3 M. Tento zásobní roztok byl dále ředěn testovacím médiem v koncentračním rozsahu 1(T8 až 10^* M. Finální koncentrace DMSO v médiu nepřevýšila 0,2 % a v této koncentraci neovlivňovala biologickou aktivitu testu.
Ze získaných dat (obr. 14) byla vypočítána maximální účinná koncentrace testované látky a její relativní účinnost v této koncentraci (Tab. 12). 105 M koncentrace BAPR byla postulována jako 100 % biologické aktivity.
Tabulka 12
Vliv nových cytokininů na obsah betacyaninu v explantátech kotyledonů/hypokotylů Amaranthus caudatus.
Substituent N6 Maximální účinná koncentrace (mol.r1) Účinnost (%) [ΚΓ’ιηοΙ.Γ1 BAPR= 100%l
1. 2-fluorbenzylamino 10^* 96±2
2. 3-fluorbenzylamino nr5 92±6
3. 4-fluorbenzylamino 10’3 71±4
4. 2-chlorbenzylamino Hr5 113±7
5. 3-chlorbenzylamino 10~3 139±12
6. 4-chlorbenzylamino 10'3 35±9
7. 2-brombenzylamino HT4 147±7
8. 3-brombenzylamino 104 151±16
9. 4-brombenzylamino 10’5 30±8
10. 3-jodbenzylamino 10’3 102±18
11. 2-methylbenzylamino ΗΓ5 105±14
12. 3-methylbenzylamino 10~3 103±16
13. 4-methylbenzylamino 10’3 32±7
14. 2-methoxybenzylamino 1(F3 86±4
15. 3-methoxybenzylamino 10* 98±10
16. 4-methoxybenzylamino 1(F* 17±8
17. 3-nitrobenzylamino 10“4 66±7
18. 4-nitrobenzylamino 10-4 25±3
19. 2,4-dichlorbenzylamino 10-4 3±2
20. 3,4-dichlorbenzylamino 10·4 68±10
21. 2,3-dimethoxybenzylamino 10-4 21±7
22. 2,4-dimethoxybenzylamino 10~4 3±3
23. 3,4-dimethoxybenzylamino 10^* 2±1
24. 3,4-dihydroxybenzylamino 10“4 8±3
25. 2,4-difluorbenzylamino 10~4 88±7
26. 3,5-difluorbenzy lamino 10“4 88±1
27. 2,3,6-trifluorbenzylamino 10^ 94±1
28. 3-chlor-4-fluorbenzylamino 10“4 82±5
29. 2-hydroxy-3-methoxybenzylamino 10“4 18±5
30. 3-hydroxy-4-methoxybenzylamino ΠΓ4 0
31. 2-chlor-4-fluorbenzylamino Tór4 115±1
32. 2,4,5-trifluorbenzylamino 10^ 120±l
-41 CZ 294538 B6
Příklad 15
Účinky testovaných látek na in vitro a post vitro množení a zakořeňování růže {Rosa multiflora).
Úlohou tohoto experimentu bylo otestovat zda nové látky jsou prakticky využitelné v tkáňových kulturách. Byl studován index množení a post vitro účinky. Růže {Rosa hybrida) byly pěstovány v 350ml nádobách se šroubovacím polykarbonátovým uzávěrem. Každá nádoba obsahovala ío 100 ml autoklávovaného kultivačního média (120 °C, 20 min.). Rostliny byly kultivovány při teplotě 23 ± 2 °C a světelné periodě 16 hodin při 40 pmol m~2 s~' PAR. Základní médium (MBR) obsahovalo makro-, mikro-prvky a vitamíny podle Murashigeho a Skooga (1962), 95 μΜ NaFeEDTA, 555 μΜ myo-inositolu, 111 mM sacharózy, 1,332 mM glycinu, 684 μΜ L-glutaminu and 7g/l agaru. Toto médium bylo doplňováno 10 μΜ testované látky. 6-benzyl15 aminopurin ribosid (BAPR) byl používán jako standard, kontrolní médium neobsahovalo žádný cytokinin. Po uplynutí 8 týdnů byl stanoven přírůstek nových prýtů na jeden explantát, stejně jako počet kořenů na jeden explantát a celková délka kořenů na jeden explantát. Po odstranění kořenů byly explantáty (skupiny prýtů) přeneseny do rašeliny. Po čtyřech týdnech aklimatizace byl znovu stanoven počet kořenů a jejich celková délka najeden explantát.
Podle předpokladu, rostliny pěstované na médiu neobsahujícím cytokininy neměly téměř žádné nové prýty. Původní explantáty vyrostly v kvalitní jednotlivé výhony, velmi dobře zakořeňující (Tab. 13). Explantáty rostoucí na BAPR se vyznačovaly vysokým indexem množení (velkým množstvím nových prýtů) a velmi špatným zakořeňováním (Tab. 13). Všechny testované nové 25 látky, deriváty BAPR, indukovaly tvorbu nových výhonů a zakořeňovaly výrazně lépe než BAPR (Tab. 13).
Tabulka 13
Účinek testovaných látek, cytokininů, na in vitro a post vitro množení a zakořeňování růže {Rosa multiflora).
Substituent In vitro Ex vitro
Počet nových prýtů na jeden explantát Počet květů najeden explantát Počet kořenů na jeden explantát Celková délka kořene na jeden explantát (cm) Počet kořenů na jeden explantát Celková délka kořene na jeden explantát (cm)
Kontrola 0,2 0,03 0,8 1,2 4,6 17,1
BAPR’ 3,8 0,00 0,0 0,0 0,6 1,1
2-methoxybenzylamino 1,4 0,17 0,0 0,0 1,6 4,8
3-methoxybenzylamino 5,6 0,00 0,0 0,0 1,4 3,5
* BAPR = 6-benzylaminopurin ribosid
Příklad 16
Inhibice senescence in vitro pěstovaných explantátů Rosa hybrida.
Problémem tkáňových kultur růží jsou časté příznaky senescence explantátů. Listy začínají hnědnout a po několika týdnech všechny explantáty v nádobě hynou. Symptomy nastupují dříve, jestliže je nádoba vzduchotěsně uzavřena, například plastikovou fólií. To ukazuje na důležitou úlohu ethylenu v tomto procesu. Cytokininy aplikované do kultivačního média indukují tvorbu 45 ethylenu, je proto užitečné testovat nové látky cytokininové povahy také v tomto systému. Růže
Rosa hybrida 'Pailin' byla pěstována v 350ml nádobě se šroubovacím polykarbonátovým
-42CZ 294538 B6 uzávěrem. Každá nádoba obsahovala 100 ml autoklávového kultivačního média (120 °C, 20 min.). Rostliny byly kultivovány při teplotě 23 ± 2 °C a světelné periodě 16 hodin při 40 μΜ πΓ2 s“' PAR. Základní médium (MBR) obsahovalo makro-, mikro-prvky a vitamíny podle Murashigeho a Skooga (1962), 36,7 mg/1 NaFeEDTA, 50 mg/1 NaFeEDDHA, lOOmg/1 μΜ myo-inositolu, 30 g/1 sacharózy, 100 mg/1 glycinu, 50 mg/1 kalcium pantothenatu, 100 mg/1 L-glutaminu a 7 g/1 agaru. Toto médium bylo doplňováno 10 μΜ testované látky. 6-benzylaminopurin ribosid (BAPR) byl používán jako standard, kontrolní médium neobsahovalo žádný cytokinin. Příznaky stárnutí explantátů byly studovány po šesti týdnech kultivace (obr. 17). Bylo zaznamenáváno objevení prvního hnědého listu a den úhynu celého explantátů.
Výsledky jsou ukázány na obr. 15 a 16. Relativní počet uhynulých explantátů na médiu s BAPR odpovídá sigmoidní křivce, což naznačuje že jeho vliv na senescenci je zesílen autokatalýzou, pravděpodobně ethylenem. Při použití médií s 6-(3-hydroxybenzylamino)purinem (mT) a 6-(3-methoxybenzylamino)purin ribosidem (3MeOBAPR) byla situace výrazně lepší (obr. 8). Nej lepší testovanou látkou byl bezesporu 3MeOBAPR; ještě 121 den kultivace byly živé téměř všechny explantáty. I když ani na médiu s 3MeOBAPR nebylo možné zabránit zhnědnutí některých listů, tyto rostliny mohou být přesto bez problémů použity pro další subkultivaci. Užití 3MeOBAPR je statisticky významným vylepšením při mikropropagaciRosa hybrida.
Příklad 17
Polní pokusy - ošetření porostů pšenice jarní testovanými látkami
Porosty (v posledních 4 letech) pšenice jarní jsou vysévány v řepařském výrobním typu na pokusném pozemku České zemědělské univerzity (ČZU) výsevkem 400 klíčívých zrn na lm2 do naorané a uválené zeminy obsahující podle agrochemických rozborů provedených na Katedře pedologie ČZU 116,1 mg/kg P, 228,3 mg/kg K, a 211,8 mg/kg Mg. Odstup orby a setí zpravidla 3 až 4 dny, jen za nepříznivého počasí větší. Předplodinou je řepka. Příprava půdy se dělá klasicky smykem a branami po zasetí se válí. Charakter ročníků, průměrné měsíční teploty a srážky jsou v tabulce 14.
-43 CZ 294538 B6
Tabulka 14
Charakteristika ročníků-teplotní průměr a srážkový úhrn v zájmové oblasti
[Ročník 1997 1998 1999 2000 2001
| teploty srážky teploty srážky teploty Srážky teploty Srážky teploty srážky
Leden -3,2 20,3 2,2 8,37 0,64 8,7 -1,5 22 1,8 22,3
Únor 3,3 18,7 5 12,8 3,47 18,9 3,1 22 -2,3 31,9
Bfezen 6,8 23,7 5,4 18,4 3,24 30,6 3,9 26 3,2 11,9
Duben 9,7 29,3 4,6 15 9,88 11.7 10,5 41 10,6 16,5
Květen «,7 15,2 11 >4 5,2 13,6 25,4 15,4 54 163 66,1
Červen 12.3 70,5 15,4 37 16,7 101,2 17,5 63 16,6 97,7
Červenec 17,1 108,9 18,5 79,8 17,4 67,4 15,8 69 17,1 102,3
Srpen 18.7 60,5 19,7 58,4 17,8 22,5 18,8 64 17,6 56,7
ζω 13 41,5 13,8 67,1 15,2 68,8 13,7 42 11,5 68
Říjen 6,5 34,1 9,6 37,4 8,54 86.4 10.6 35 8.3 48,6
Listopad 2,7 28,2 5,7 41,2 0,54 23,4 2,5 29 1 50,2
Prosinec 1,2 46,1 2,4 27,8 -0,55 8,1 0,4 26 3,6 33,9
PrůmSr úhrn 8,07 497 9,5 408,47 8,9 473,1 9,2 471 8,8 606.1 ί
Charakteristika počasí ve vegetační sezonč
Ročník 1997 1998 1999 2000 2001
teploty srážky teploty srážky teploty Srážky teploty Srážky teploty srážky 1
Duben 9,7 29,3 4,6 15 9,88 11,7 10,5 41 10,6 16,5 |
Kvčten 8,7 15,2 11,4 5.2 13,6 25.4 15.4 54 16,3 66,1
Červen 12,3 70,5 15,4 37 16.7 101,2 17,5 63 16,6 97,7
Červenec 17,1 108,9 18,5 79,8 17,4 67,4 15,8 69 17,1 102,3
průměr úhrn 12 223,9 12,5 137 14,4 205.7 14.8 227 8,8 282,6
Od vzejití v 14 denních intervalech jsou sledovány délky rostlin, listová plocha, sušina, vývin vegetačního vrcholu - základu budoucího klasu, a počet odnoží, po ošetření i obsah chlorofylu v listech. Z těchto primárních údajů se počítají hodnoty, obvyklé v produkční fyziologii například io pokryvnost listoví LAI, fotosyntetický potenciál LAD, odnožovací potenciál OP. Pokusy s ošetřením porostů pšenice jarní Sandry na poli v maloparcelkách (velikost 10m2n=4 opakování) se dělají postřikem látek (cytokininů) dávkou 1 litr roztoku o koncentraci 1 mol. 10-6 v přechodu fází sloupkování-metání (49 DC). Navážka dodaného přípravku z laboratoře se rozpouští v horké destilované vodě v objemu 1 litr. Poté se objem doplní na dvojnásobek 15 a aplikuje na 4x 10 m2, protože aplikace objemu 1 litru roztoku na ploše 40m2 je technicky v polních podmínkách na již poměrně vzrostlý, vyspělý porost, neproveditelná.
Po aplikaci se během 6 dní od ošetření stanovuje aktivita enzymu glutamátkinázy. Tento enzym byl vybrán protože z jeho změn lze soudit na optimalizaci pohybu látek (živin z kořenů, asimilátů 20 od zdrojů vzniku do sinku, obecně do zásobních orgánů, v případě obilnin do obilek), na respiraci, přenosy energie-adenosintrifosfátu, ukládání látek, a procesy růstu a vývinu, i na metabolizmus prolinu, o němž je z literatury známo, že hraje významnou roli v adaptačních reakcích vůči stresu (nevhodné stanoviště, sucho, zasolení, chlad aj.), i v regulaci potenciální a reálné produktivity (omezení redukce počtu založených zrn v klasu). Enzym glutamátkináza, katalyzuje přemě25 nu glutamátu na γ glutamylfosfát, což je první chemická reakce při syntéze prolinu z glutamátu.
Tak je enzym glutamátkináza jako nezbytný prekurzor dalších metabolických pochodů v rostlině i ukazatelem inhibice stresu. Stanovuje se spektrofotometricky obměnou hydroxamátové metody dle Vašákové (1980). K analýze se připravují standardní metodou acetonové prášky, které se vyextrahují 0,05mol.l draselnofosfátovým pufrem pH = 7,2 a odstředí. Tak se získají supematan30 ty z nichž se krystalickým síranem amonným vysolí frakce glutamátkinázy, načež se amonné
-44CZ 294538 B6 ionty odstraní dialýzou a aktivita glutamátkinázy stanoví spektrofotometricky. Zvýšená akumulace prolinu stresem odpovídá „zpětnou vazbou“ inhibičnímu působení na enzym glutamátkinázu.
Posklizňový rozbor, hodnotící délky klasu a počet zrn v klasu se dělal na 30 rostlinách od varianty ošetření, výnos z plochy lm2 a HTS se stanovil v 8 opakováních, z nichž se dělal přepočet na hektarový výnos.
Tabulka 15
Posklizňový rozbor a aktivita glutamátkinázy (GK) po ošetření vybranými cytokininy (BAP - 6benzylaminopurin, BAPR- 6-benzylaminopurin ribosid, 3C1BAPR - 6-(3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 3BrBAPR - 6-(3-brombenzylamino)purin ribosid, 3,4C1BAPR - 6-(3,4-dichlorbenzylamino)purin ribosid).
HTS (%) Σ klasů/m2 (%) Výnos (%) Σ zm/klas (%) GK%
Kontrola 100,0 100,0 100,0 100,0 100,0
BAP 102,0 101,1 115,4 111,9 108,2
BAPR 103,8 102,7 121,9 114,3 154,1
3C1 BAPR 108,3 100,5 128,88 119,1 124,7
3Br BAPR 101,5 104,9 131,8 123,8 116,6
3,4 Cl BAPR 101,5 99,7 113,3 111,9 114,2
Příklad 18
Suché tobolky
5000 tobolek, každá obsahující jako aktivní složku 0,25 g jedné ze sloučenin o vzorci I, II a III zmíněných v předcházejících nebo následujících příkladech, se připraví následujícím postupem:
Složení
Aktivní složka 1250g
Talek 180g
Pšeničný škrob 120g
Magnézium stearát 80g
Laktóza 20g
Postup přípravy: Rozetřené látky jsou protlačeny přes síto s velikostí ok 0,6 mm. Dávka 0,33 g směsi je přenesena do želatinové tobolky pomocí přístroje na plnění tobolek.
Příklad 19
Měkké tobolky
5000 měkkých želatinových tobolek, každá z nich obsahující jako aktivní složku 0,05 g jedné z látek o vzorci I, II a III zmíněných v předcházejících nebo následujících Příkladech, se připraví následujícím postupem:
Složení
Aktivní složka 250 g
Lauroglykol 2 litry
-45 CZ 294538 B6
Postup přípravy: Prášková aktivní látka je suspendována v Lauroglykolu® (propylenglykol laurát, Gattefoseé S. A., Saint Priest, Francie) a rozetřena ve vlhkém pulverizátoru na velikost částic asi 1 až 3 mm. Dávka o velikosti 0,419 g směsi je potom přenesena do měkkých želatinových tobolek pomocí přístroje na plnění tobolek.
Příklad 20
Měkké tobolky
5000 měkkých želatinových tobolek, každá z nich obsahující jako aktivní složku 0,05 g jedné ze sloučenin o vzorci I, II a III zmíněných v předcházejících nebo následujících Příkladech, se připraví následujícím postupem:
Složení
Aktivní složka 250 g
PEG 400 1 litr
Tween 80 1 litr
Postup přípravy: Prášková aktivní složka je suspendována v PEG 400 (polyethylen glykol o Mr mezi 380 a 420, Sigma, Fluka, Aldrich, USA) a Tween® 80 (polyoxyethylen sorbitan monolaurát, Atlas Chem. Ind., Inc., USA, dodává Sigma, Fluka, Aldrich, USA) a rozetřena ve vlhkém pulverizátoru na částice o velikosti 1 až 3 mm. Dávka o velikosti 0,43 g směsi je potom přenesena do měkkých želatinových tobolek pomocí přístroje na plnění tobolek.
PATENTOVÉ NÁROKY

Claims (11)

1. Substituční deriváty N6-benzyladenosinu obecného vzorce I (I), ve kterém
R2 znamená atom vodíku, hydroxy, halogen, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, methylmerkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (Rý-sulfo, (R)-sulfonamido, acyl
-46CZ 294538 B6 amino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl nebo karbamoyl skupinu, a n znamená 2. až 6. uhlíkový atom fenylu substituovaný jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující R1 kde
R1 znamená atom vodíku, hydroxy, halogen, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, methylmerkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl nebo karbamoyl alkyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, substituovaný cykloalkyl, cykloalkyl-(R)-, aryl-(R)-, hetero-(R)-, heteroaryl-(R)-, heterocykloalkyl-(R)- nebo Rl'-X, ve které
X znamená NH-, -N(Ci-C6-alkyl)-, skupinu -O- nebo skupinu -S- a
Rl' znamená atom vodíku, alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, acyl, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, cykloalkyl, substituovaný cykloalkyl, aryl, substituovaný aryl, heterocyklus heteroaryl, substituovaný heteroaryl, aryl-(R)-, heterocykloalkyl, substituovaný heterocykloalkyl, heteroaryl-(R)-, hetero-(R)-, cykloalkyl-(R)- a heterocykloalkyl-(R)-, přičemž halogen znamená atom halogenu vybraný ze skupiny zahrnující atom fluoru, atom bromu, atom chloru a atom jodu, alkyl znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, alkenyl znamená přímou nebo rozvětvenou alkenylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, alkynyl znamená přímou nebo rozvětvenou alkynylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, substituovaný alkyl znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnují hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupina, přičemž uvedené generické substituované skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, substituovaný alkenyl znamená přímou nebo rozvětvenou alkenylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)sulfo, (Rj-sulfonamino, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituované skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě,
-47CZ 294538 B6 substituovaný alkynyl znamená přímou nebo rozvětvenou alkynylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)sulfo, (R)-sulfonamino, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)~ oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituované skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, (R)-oxy znamená skupinu -ORa, ve které Ra znamená alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, aryl, substituovaný aryl, aryl-(R)-, substituovaný arylalkyl, cykloalkyl, substituovaný cykloalkyl, heterocyklylalkyl nebo substituovaný heterocykloalkyl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, (R)-merkapto znamená skupinu -SRb, ve které Rb znamená alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, aryl, substituovaný aryl, aryl-(R)-, substituovaný arylalkyl, cykloalkyl, substituovaný cykloalkyl, heterocyklylalkyl nebo substituovaný heterocykloalkyl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, (R)-sulfo znamená -SO^, ve které Rc znamená atom vodíku H, přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkenylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkinylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkylovou, alkenylovou nebo alkinylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty zvoleným ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituované skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, (R)-sulfonamido znamená -NHSO2R<i, kde R<j znamená atom vodíku H, přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkenylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkinylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkylovou, alkenylovou nebo alkinylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituované skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě,
-48CZ 294538 B6 acyl znamená skupinu —C(O)Re, ve které Re znamená atom vodíku, alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, aryl, substituovaný aryl, aryl-(R)-, substituovaný arylalkyl, cykloalkyl, substituovaný cykloalkyl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, aryloxy znamená skupinu -OAr, ve které Ar znamená aryl, substituovaný aryl, heteroaryl nebo substituovaný heteroaryl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, (R)-amino znamená skupinu NRfR'g, ve které Rf a R'g nezávisle jeden na druhém znamenají atom vodíku, alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, aryl, substituovaný aryl, heteroaryl nebo substituovaný heteroaryl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, substituovaný karbamoyl znamená skupinu -C(O)NRhR'j, ve které Rh a R\ nezávisle jeden na druhém znamenají atom vodíku, alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, aryl, substituovaný aryl, heteroaryl nebo substituovaný heteroaryl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, (R)-oxykarbonyl znamená skupinu -C(O)ORj, ve které Rj znamená atom vodíku, alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, aryl, substituovaný aryl, heteroaryl nebo substituovaný heteroaryl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, acylamino znamená skupinu -NHCORk, ve které Rk znamená atom vodíku, alkyl, alkenyl, alkynyl, substituovaný alkyl, substituovaný alkenyl, substituovaný alkynyl, aryl, substituovaný aryl, heteroaryl nebo substituovaný heteroaryl, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, aryl znamená aromatickou karbocyklickou skupinu obsahující 6 až 18 uhlíkových atomů a tvořenou alespoň jedním aromatickým kruhem jako fenyl nebo bifenyl nebo násobně kondenzovanými kruhy, z nichž alespoň jeden kruh je aromatický jako 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, naftyl, antryl nebo fenantryl, substituovaný aryl znamená aromatickou karbocyklickou skupinu obsahující 6 až 18 uhlíkových atomů a tvořenou alespoň jedním aromatickým kruhem jako fenyl nebo bifenyl nebo násobně kondenzovanými kruhy, z nichž alespoň jeden kruh je aromatický jako 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, naftyl, antryl nebo fenantryl a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino,
-49CZ 294538 B6 dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, heterocyklus znamená heterocyklickou skupinu obsahující 4 až 9 uhlíkových atomů a alespoň jeden heteroatom ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry a atom dusíku, heteroaryl znamená heterocyklickou skupinu obsahující 4 až 9 uhlíkových atomů a alespoň jeden heteroatom ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry a atom dusíku, z nichž alespoň jeden kruh je aromatický, substituovaný heteroaryl znamená heterocyklickou skupinu obsahující 4 až 9 uhlíkových atomů a alespoň jeden heteroatom ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry a atom dusíku, z nichž alespoň jeden kruh je aromatický, a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, aryl-(R)- znamená skupinu -R]-Ar, kde Ar znamená arylovou skupinu a R] znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkeňylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkynylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, aromatickou karbocyklickou skupinu obsahující 6 až 18 uhlíkových atomů a tvořenou alespoň jedním aromatickým kruhem jako fenyl nebo bifenyl nebo násobně kondenzovanými kruhy, z nichž alespoň jeden kruh je aromatický jako 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, naftyl, antryl nebo fenantryl a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, hetero-(R)- znamená skupinu -Rm-L, ve které Rm znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkeňylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkynylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkylovou, alkeňylovou nebo alkynylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě,
-50CZ 294538 B6 a L znamená heterocyklickou skupinu obsahující 4 až 9 uhlíkových atomů a alespoň jeden heteroatom ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry a atom dusíku a případně substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, heteroaryl-(R)- znamená skupinu -Rn-G, ve které Rn znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkenylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkynylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkylovou, alkenylovou nebo alkynylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, a G znamená heterocyklickou skupinu obsahující 4 až 9 uhlíkových atomů a alespoň jeden heteroatom ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry a atom dusíku, přičemž alespoň jeden heterocyklický kruh této skupiny je aromatickým kruhem, která může být případně substituována jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, cykloalkyl znamená monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů, substituovaný cykloalkyl znamená monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, heterocykloalkyl znamená monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů, v jejíž cyklické struktuře je alespoň jeden atom uhlíku nahrazen heteroatomem ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry, atom dusíku nebo atom fosforu, substituovaný heterocykloalkyl znamená
-51 CZ 294538 B6 monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů, v jejíž cyklické struktuře je alespoň jeden atom uhlíku nahrazen heteroatomem ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry, atom dusíku nebo atom fosforu, a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R}-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, cykloalkyl-(R)- znamená skupinu -Ro-J, ve které Ro znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkenylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkynylovou skupinu obsahující 2 až 6uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkylovou, alkenylovou nebo alkynylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, a J znamená monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů, nebo monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (Rý-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, a a heterocykloalkyl-(R)- znamená skupinu -RPV, ve které Rp znamená přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkenylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkynylovou skupinu obsahující 2 až 6 uhlíkových atomů, přímou nebo rozvětvenou alkylovou, alkenylovou nebo alkynylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (R)-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, a V znamená monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů, v jejíž cyklické struktuře je alespoň jeden atom uhlíku nahrazen heteroatomem ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry, atom dusíku nebo atomem fosforu,
-52CZ 294538 B6 monocyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů, v jejíž cyklické struktuře je alespoň jeden atom uhlíku nahrazen heteroatomem ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry, atom dusíku nebo atomem fosforu, a substituovanou jedním až pěti substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, amino, hydrazo, merkapto, (Rý-oxykarbonyl, kyano, nitro, substituovaný karbamoyl, (R)-sulfo, (R)-sulfonamido, acylamino, acyloxy, (R)-amino, dialkylamino, alkylmerkapto, (R)-oxy, cykloalkyl a karbamoyl skupinu, přičemž uvedené generické substituentové skupiny mají významy, které jsou identické s definicemi odpovídajících skupin uvedenými v této legendě, a jejich farmaceuticky využitelné soli s alkalickými kovy, amoniakem či aminy, ve formě racemátů nebo opticky aktivních izomerů, jakož i jejich adičních solí s kyselinami.
2. Substituční deriváty N6-benzyladenosinu podle nároku 1 vybrané ze skupiny zahrnující 6-(2-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(3-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(4-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(2-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-acetylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-acetylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-acetylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-karboxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4karboxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-acetoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-acetoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-acetoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(3-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(4-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(2sulfobenzylamino)purin ribosid, 6-(3-sulfobenzylamino)purin ribosid, 6-(4-sulfobenzylamino)purin ribosid, 6-(2-kyanobenzylamino)purin ribosid, 6-(3-kyanobenzylamino)purin ribosid, 6(4-kyanobenzylamino)purin ribosid, 6-(5-nitro-2-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-methylaminobenzylamino)purin ribosid, 6-(2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hexylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hexyloxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-formylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-formylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-formylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-ethoxybenzylamino)purin ribosid, 6(3-ethoxybenzylamino)pUrin ribosid, 6-(4-ethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-ethylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-pentylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-pentyloxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-fenoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-fenylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4propylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-propyloxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-oktylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-oktyloxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-ethyloxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-diacetoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-diacetoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5-diaminobenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dobrombenzylamino)purin ribosid, 6(3,5-dibrom-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6(2,4-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,4,5-tetrafluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-3,6difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(5-chlor-2-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,4trifluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,5-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,5-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4,5-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,6-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-chlor-2,6-difluorbenzyIamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-6-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4-difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5-difluorbenzyIamino)purin ribosid, 6-(3,5-difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(5-fluor-2-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(4-fluor-2-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-5-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-(difluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 6-(3(difluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 6-(4-(difluormethoxy)benzylamino)purin ribosid,
-53 CZ 294538 B6
6-(2-fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(3-fluor-4-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-fluor-4-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-(trifluormethylthio)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-fluor-3-(trifluormethylthio)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor”6-fluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(6-chlor-2-fluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-chlor-2-fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6(3-chlor-2-fluor-6-(trifluormethyl)benzylaniino)purin ribosid, 6-(2,3-difluor-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-difluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-fluor-6-Ťtrifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(3-chlor-2,6-difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3(trifluormethylthio)benzylamino)purin ribosid, 6-(3-fluor-4-methyl benzylamino)purin ribosid, 6-(4-fluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(5-fluor-2-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-3,6-difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-(trifluormethylthio)benzylamino)purin ribosid, 6-(3-fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-(trifluonnethoxy)benzylamino)purin ribosid, 6-(3-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(2-trifluormethyl)benzylamiiio)purin ribosid, 6-(4-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(4-chlor-3-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6(4-fluor-3-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-bis(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(3-(trifluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 6-(4-(trifluonnethoxy)benzylamino)purin ribosid, 6-(4-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 6-(4-diethylaminobenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-ethylendioxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-4methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2hydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxy-2methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4hydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxy-6-methoxybenzylamino)puriii ribosid, 6-(2-hydroxy-3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2hydroxy-4,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-4,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-5,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-4,5dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-4,6-dimethoxybenzylaniino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-2,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-2,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-hydroxy-2,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxy2,3-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxy-2,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxy-2,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxy-3,5-«limethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-hydroxy-3,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3dihydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dihydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4-dihydroxy-3methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4-dihydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6(2,4-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5-dihydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5-dihydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-5methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dihydroxy-2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6(3,4-dihydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dihydroxy-2-methoxybenzylainino)purin ribosid, 6-(3,5dihydroxy—4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,4-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,5-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4,5-triniethoxybenzyl
-54CZ 294538 B6 amino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3,4,5-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy3,4,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-4,5,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,4-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,6-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,4-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4,5-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,6-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-5-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-6-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-4-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-5-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-6jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3-brombenzylainino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy4-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-5-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(2hydroxy-6-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3-fluorbenzylamino)purm ribosid, 6-(2-hydroxy-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-5-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-6-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-5-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-hydroxy-6-methylbenzylaniino)purin ribosid, 6-(2,3dihydroxy-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dihydroxy-5-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5-dihydroxy-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-4-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6dihydroxy-4-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3-brombenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3-jodbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-
3,5-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3,5-dibrombenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3,5-dijodbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dihydroxy-3,5-difluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(4,5-dimethoxy-2-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-dimethyl-4hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dimethyl-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6(2-fluor-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-fluor-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3,4-dinitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dinitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(2methyl-5-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(3-methyl-4-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6(3,4-dij od-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-chlor-3,5-dinitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-chlor-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-6-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-chlor-2-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-chlor-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(5-chlor-2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-chlormethylbenzylainino)purin ribosid, 6-(2-chlor-5-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(2-chlor-6-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(4-chlor-3nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(5-chlor-2-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(3-brom-4hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3,5-dibrom-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 6—(3— brom-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-brommethylbenzylamino)purin ribosid, 6-(4butoxybenzylamino)purin ribosid, 6-(4-t-butoxybenzylamino)purin ribosid, 6—(4—/t— butyl/benzylamino)purin ribosid, 6-(4-t-butyl-2,6-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2aminobenzylamino)purin ribosid, 6-(3-aminobenzylamino)purin ribosid, 6-(4-aminobenzylamino)purin ribosid, 6-(2-amino-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-amino-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-amino-5-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-amino-6chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-amino-2-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-amino-4chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-amino-5-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(3-amino-6chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6-diamino-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,6diamino-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(4-amino-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 6(4-amino-5-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(5-amino-2-methylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2-amino-3-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(4-amino-3-nitrobenzylamino)purin ribosid, 6-(4-benzyloxybenzylamino)purin ribosid, 6-(3-acetylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2acetylbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,5-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,5-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,4,6-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,4-trichlorbenzyl
-55 CZ 294538 B6 amino)purin ribosid, 6-(2,3,5-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,6-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,5,6-trichlorbenzylainino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2-brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-acetylbenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-acetylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(4-acetylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-karboxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-karboxybenzylamino)purin ribosid, 6-(2-acetoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-acetoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-acetoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-sulfobenzylamino)purin ribosid, 2-(ainino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-sulfobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-sulfobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-kyanobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3kyanobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-kyanobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(5-nitro-2-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-methylbenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-methylaminobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4hexylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hexyloxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-formylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-formylbenzylamino)purin ribosid, 2
-56CZ 294538 B6 (amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-formylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2-ethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-ethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-ethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-ethylbenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-pentylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(4-pentyloxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-fenoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-fenylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-propylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-propyloxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4oktylbenzylamino)purin ribosid, 2-(4-oktyloxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-ethyloxybenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-diacetoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(3,5-diacetoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-diaminobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-dibrombenzylamino)purin ribosid, 2~(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-dibrom-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2,3-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)“6-(3,5-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,4,5-tetrafluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-3,6-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(5-chlor-2-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,4-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,5-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4,5-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4,5trifluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,6-trifluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-chlor-2,6-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-6-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2,6-difluorbenzylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(5-fluor-2-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-fluor-2-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-5(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-(difluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-(difluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 2
-57CZ 294538 B6 (amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-(difluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-fluor-4-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-fluor-4(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-(trifluormethylthio)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-fluor-3-(trifluormethyl)benzylamÍno)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-6fluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(6-chlor-2-fluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-chlor-2-fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-chlor-2-fluor-6-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-difluor-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-{amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6difluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-fluor-6-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-chlor-2,6-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3(trifluormethylthio)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-fluor-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-fluor-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(5-fluor-2methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-3,6-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-(trifluormethylthio)benzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto}-6-(2-chlor-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-(trifluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 6-(3-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-chlor-3-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-fluor-3-(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-bis(trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid,
2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-(trifluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-(trifluormethoxy)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-{trifluormethyl)benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-diethylaminobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto}-6-(3,4-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-ethylendioxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo
-58CZ 294538 B6 methylmerkapto)-6-(3,5-<limethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-4methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-2methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-6methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxy-2-methoxybenzylamino)purm ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxy-5methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-
3.5- dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-4,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2hydroxy-4,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-5,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-4,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-4,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-2,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-
2.5- dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-hydroxy-2,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxy-2,3-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4hydroxy-2,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxy-2,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxy-3,5-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-hydroxy-3,6-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-dihydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3dihydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4-dihydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4-dihydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5dihydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-dihydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino,
-59CZ 294538 B6 hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-3-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6dihydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dihydroxy-2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dihydroxy-5-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-dihydroxy-2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5dihydroxy-4-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-dihydroxy-6-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,4-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2,4,5-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4,5-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3,4,5trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3,4,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-4,5,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2,4,6-trimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,4-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4,6-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,4-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4,5-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4,6-trihydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2-hydroxy-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-5-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-6-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-4-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-5-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-6-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2-hydroxy-3-brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto}-6-(2-hydroxy-4-brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-5-brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-6brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-5-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-6-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-3-methylbenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methyl
-60CZ 294538 B6 merkapto)-6-(2-hydroxy-5-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-hydroxy-6-methylbenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-dihydroxy-4chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-dihydroxy-5-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5-dihydroxy-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6dihydroxy-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-4-brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-4-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2,6-dihydroxy-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-3-brombenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-3-jodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(2,6-dihydroxy-3-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-3,5-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-3,5dibrombenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-3,5-dijodbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dihydroxy-3,5-difluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4,5dimethoxy-2-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-dimethyl-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-dimethyl-4hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-fluor-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-fluor-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dinitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(3,5-dinitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-methyl-5-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-methyl-4-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,4-dijod-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-3,4-dimethoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-chlor-3,5-dinitrobenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-chlor-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-6-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-chlor-2-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(3-chlor-4-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(5-chlor-2-methoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-4-fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-4fluorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-chlormethylbenzylamino)purin ribosid, 2-{amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-5-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino,
-61 CZ 294538 B6 hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-chlor-6-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-chlor-
3- nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(5-chlor-2-nitroben2ylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-brom-4-hydroxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3,5-dibrom-4-hydroxybenzylamino)purin, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-brom-
4- methoxybenzylamino)purin, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-brommethylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-butoxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-butoxybenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-/t-butyl/benzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(4-t-butyl-2,6-dimethylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-aminobenzylammo)purin ribosid, 2-( amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-aminobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-aminobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-amino-3chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-amino-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-amino-5-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-amino-6-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(3-amino-2-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-amino-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-amino-5-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-amino-6chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-diamino-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,6-diamino-4-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-amino-3-chlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6(4-amino-5-dichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(5-amino-2-methylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-amino-3-nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-amino-3nitrobenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(4-benzyloxybenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(3-acetylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2-acetylbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4,5-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4,5trichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,4,6-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,4-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 6-(2,3,5trichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,3,6-trichlorbenzylamino)purin ribosid, 2-(amino, hydroxy, chlor, fluor, brom, methyl nebo methylmerkapto)-6-(2,5,6-trichlorbenzylamino)purin ribosid.
3. Způsob přípravy substitučního derivátu N6-benzyladenosinu podle nároku 1 nebo 2 obecného vzorce I, ve kterém Rl a R2 mají stejné významy jako v nároku 1, vyznačený tím, že se 6-chlor, brom, fluor nebo methylthio derivát obecného vzorce I nukleofilně substituuje v poloze 6 za účelem převedení atomu chloru, fluoru nebo bromu v poloze 6 za některý jiný z významů obecného substituentu v poloze N6 za vzniku derivátu obecného vzorce I.
-62CZ 294538 B6
4. Substituční deriváty N6-benzyladenosinu podle nároků 1 nebo 2 obecného vzorce I pro použití jako léčiva.
5. Substituční deriváty N6-benzyladenosinu podle nároků 1 nebo 2 obecného vzorce I pro 5 použití jako růstové regulátory rostlin, savců, mikroorganizmů, kvasinek a hub.
6. Substituční deriváty N6-benzyladenosinu podle nároků 1 nebo 2 obecného vzorce I pro použití jako kosmetické přípravky.
10 7. Farmaceutické, kosmetické a tkáňové přípravky, v y z n a č u j í c í se t í m , že obsahují substituční derivát N6-benzyladenosinu obecného vzorce I podle nároků 1 nebo 2 či farmaceuticky přijatelnou sůl takovéhoto substitučního derivátu N6-benzyladenosinu včetně farmaceutického nosiče.
15 8. Použití substitučních derivátů N6-benzyladenosinu podle nároků 1 nebo 2 obecného vzorce I při přípravě afinitních adsorpčních nosičů, imobilizovaných enzymů pro kontrolu výrobních procesů, reagencií pro imunodetekci, diagnostických vzorků, 14C, 3H, avidinem a biotinem značených sloučenin a oligonukleotidů.
20 9. Použití substitučního derivátu N6-benzyladenosinu podle nároků 1 nebo 2 obecného vzorce I nebo farmaceuticky přijatelných solí takovéto sloučeniny včetně farmaceutického nosiče pro přípravu farmaceutické kompozice použitelné jako mitotikum či antimitotikum, zejména při léčení nádorových onemocnění, při psoriáze, revmatické artritis, lupusu, diabetů I typu, roztroušené skleróze, restenóze, polycystickému onemocnění ledvin, host grafit disease a dny, parasito25 zách způsobených houbami anebo prvoky, Alzheimerově chorobě, anebo jako antineurogenerativního léčiva, anebo k supresi immunostimulace, anebo k léčení proliferačních onemocnění kůže.
10. Substituční deriváty N6-benzyladenosinu podle nároků 1 nebo 2 obecného vzorce I pro 30 použití jako růstového regulátoru v zemědělství, zejména pro zvýšení výnosu a kvality zemědělských produktů.
11. Substituční deriváty N6-benzyladenosinu podle nároků 1 nebo 2 obecného vzorce I pro použití jako kosmetického přípravku pro zpomalení senescence savčích pokožkových buněk,
35 jako keratinocytů či fíbroblastů.
12. Substituční deriváty N6-benzyladenosinu podle nároků 1 nebo 2 obecného vzorce I pro použití jako růstového regulátoru v tkáňových kulturách ke stimulaci proliferace a morfogeneze.
40
13. Použití substitučních derivátů N^-benzyladenosinu podle nároků 1 nebo 2 obecného vzorce I pro výrobu přípravků používaných ke klonování rostlinných i savčích zárodečných buněk a embryí, s výhodou oocytů.
14. Použití substitučních derivátů N6-benzyladenosinu podle nároků 1 nebo 2 obecného vzorce I
45 pro výrobu léčiva na potlačení imunostimulace například arthritis nebo při potlačení odmítnutí transplantovaných orgánů u savců.
CZ20024273A 2002-12-30 2002-12-30 Substituční deriváty N6-benzyladenosinu, způsob jejich přípravy, jejich použití pro přípravu léčiv, kosmetických přípravků a růstových regulátorů, farmaceutické přípravky, kosmetické přípravky a růstové regulátory tyto sloučeniny obsahující CZ294538B6 (cs)

Priority Applications (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ20024273A CZ294538B6 (cs) 2002-12-30 2002-12-30 Substituční deriváty N6-benzyladenosinu, způsob jejich přípravy, jejich použití pro přípravu léčiv, kosmetických přípravků a růstových regulátorů, farmaceutické přípravky, kosmetické přípravky a růstové regulátory tyto sloučeniny obsahující
AU2003294608A AU2003294608A1 (en) 2002-12-30 2003-12-29 Substitution derivatives of n6-benzyladenosine, methods of their preparation, their use for preparation of drugs, cosmetic preparations and growth regulators, pharmaceutical preparations, cosmetic preparations and growth regulators containing these compounds
PCT/CZ2003/000078 WO2004058791A2 (en) 2002-12-30 2003-12-29 Substitution derivatives of n6-benzyladenosine, methods of their preparation, their use for preparation of drugs, cosmetic preparations and growth regulators, pharmaceutical preparations, cosmetic preparations and growth regulators containing these compounds
US10/540,993 US8119614B2 (en) 2002-12-30 2003-12-29 Substitution derivatives of N6-benzyladenosine, methods of their preparation, their use for preparation of drugs, cosmetic preparations and growth regulators, pharmaceutical preparations, cosmetic preparations and growth regulators containing these compounds
EP03785482.5A EP1575973B1 (en) 2002-12-30 2003-12-29 Substitution derivatives of n sp 6 sp -benzyladenosine, methods of their preparation, their use for preparation of drugs, cosmetic preparations and growth regulators, pharmaceutical preparations, cosmetic preparations and growth regulators containing these compounds
ZA200506074A ZA200506074B (en) 2002-12-30 2005-07-28 Substitution derivatives of N6-benzyladenosine, methods of their preparation, their use for preperation of drugs, cosmetic preparations and growth regulators, pharmaceutical preparations, cosmetic preparations and growth regulators containing these compounds

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ20024273A CZ294538B6 (cs) 2002-12-30 2002-12-30 Substituční deriváty N6-benzyladenosinu, způsob jejich přípravy, jejich použití pro přípravu léčiv, kosmetických přípravků a růstových regulátorů, farmaceutické přípravky, kosmetické přípravky a růstové regulátory tyto sloučeniny obsahující

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20024273A3 CZ20024273A3 (en) 2004-08-18
CZ294538B6 true CZ294538B6 (cs) 2005-01-12

Family

ID=32661130

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20024273A CZ294538B6 (cs) 2002-12-30 2002-12-30 Substituční deriváty N6-benzyladenosinu, způsob jejich přípravy, jejich použití pro přípravu léčiv, kosmetických přípravků a růstových regulátorů, farmaceutické přípravky, kosmetické přípravky a růstové regulátory tyto sloučeniny obsahující

Country Status (6)

Country Link
US (1) US8119614B2 (cs)
EP (1) EP1575973B1 (cs)
AU (1) AU2003294608A1 (cs)
CZ (1) CZ294538B6 (cs)
WO (1) WO2004058791A2 (cs)
ZA (1) ZA200506074B (cs)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011134444A2 (en) 2010-04-29 2011-11-03 Univerzita Palackeho V Olomouci Substitution derivatives of n6-benzyladenosine-5´-monophosphate, methods of preparation thereof, use thereof as medicaments, and therapeutic preparation containing these compounds

Families Citing this family (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1699459B1 (en) * 2003-12-29 2007-06-06 Can-Fite Biopharma Ltd. Method for treatment of multiple sclerosis
US20070183995A1 (en) * 2006-02-09 2007-08-09 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Compounds useful as agonists of A2A adenosine receptors, cosmetic compositions with A2A agonists and a method for using the same
US7351434B2 (en) * 2006-04-07 2008-04-01 Academia Sinica Therapeutic Gastrodia extracts
US8129357B2 (en) * 2006-04-07 2012-03-06 Academia Sinica Method of making and using an adenosine analogue
US7893227B2 (en) 2006-12-05 2011-02-22 Lasergen, Inc. 3′-OH unblocked nucleotides and nucleosides base modified with non-cleavable, terminating groups and methods for their use in DNA sequencing
CN102443030B (zh) * 2006-12-05 2015-12-16 激光基因公司 光可断裂的标记核苷酸和核苷与标记的核苷酸和核苷以及其在dna测序中的使用方法
US7897737B2 (en) 2006-12-05 2011-03-01 Lasergen, Inc. 3′-OH unblocked, nucleotides and nucleosides, base modified with photocleavable, terminating groups and methods for their use in DNA sequencing
BRPI0915173B8 (pt) 2008-06-11 2021-05-25 Agilent Technologies Inc compostos de nucleotídeos e nucleosídeos e método de sequenciamento de um ácido nucleico-alvo
US20110237606A1 (en) * 2008-09-26 2011-09-29 Agency Of Science, Technology And Research 3-Deazaneplanocin Derivatives
CZ2009298A3 (cs) * 2009-05-14 2010-11-24 Univerzita Palackého v Olomouci Substituované 6-benzylaminopurin ribosidy, jejich použití a farmaceutický prípravek tyto slouceniny obsahující
CN102482278B (zh) 2009-06-29 2015-04-22 因塞特公司 作为pi3k抑制剂的嘧啶酮类
CZ302618B6 (cs) 2009-09-10 2011-08-03 Univerzita Palackého Cyklobutan-1,1-dikarboxylátokomplexy platiny s deriváty N6-benzyladeninu, zpusoby jejich prípravy a použití techto komplexu jako léciv v protinádorové terapii
EP2498774B1 (en) * 2009-11-13 2017-10-11 Academia Sinica Dual-action compounds targeting adenosine a2a receptor and adenosine transporter for prevention and treatment of neurodegenerative diseases
EP2511283A4 (en) * 2009-12-10 2013-07-03 Inst Materia Medica Cams N6-SUBSTITUTED ADENOSINE DERIVATIVES, N6-SUBSTITUTED ADENINE DERIVATIVES AND THEIR USE
US8759359B2 (en) * 2009-12-18 2014-06-24 Incyte Corporation Substituted heteroaryl fused derivatives as PI3K inhibitors
TW201130842A (en) * 2009-12-18 2011-09-16 Incyte Corp Substituted fused aryl and heteroaryl derivatives as PI3K inhibitors
CA2796311A1 (en) 2010-04-14 2011-10-20 Incyte Corporation Fused derivatives as pi3k.delta. inhibitors
US9062055B2 (en) 2010-06-21 2015-06-23 Incyte Corporation Fused pyrrole derivatives as PI3K inhibitors
EP3660016A1 (en) 2010-12-20 2020-06-03 Incyte Holdings Corporation N-(1-(substituted-phenyl)ethyl)-9h-purin-6-amines as pi3k inhibitors
US9493502B2 (en) 2011-01-26 2016-11-15 Beijing Kbd Pharmaceuticals Co., Ltd. Ribofuranosyl purine compounds, methods for preparing the same and use thereof
CN102617680B (zh) * 2011-02-01 2014-04-02 复旦大学 一种双功能抗血小板聚集药物及其用途
US9108984B2 (en) 2011-03-14 2015-08-18 Incyte Corporation Substituted diamino-pyrimidine and diamino-pyridine derivatives as PI3K inhibitors
US9126948B2 (en) 2011-03-25 2015-09-08 Incyte Holdings Corporation Pyrimidine-4,6-diamine derivatives as PI3K inhibitors
SG10201912484RA (en) 2011-09-02 2020-02-27 Incyte Corp Heterocyclylamines as pi3k inhibitors
CN104024269B (zh) 2011-09-13 2017-05-24 激光基因公司 5‑甲氧基，3’‑oh未阻断，可快速光切割的终止核苷酸以及用于核酸测序的方法
AR090548A1 (es) 2012-04-02 2014-11-19 Incyte Corp Azaheterociclobencilaminas biciclicas como inhibidores de pi3k
CZ306894B6 (cs) 2013-02-08 2017-08-30 Univerzita PalackĂ©ho v Olomouci 2-Substituované-6-biarylmethylamino-9-cyklopentyl-9H-purinové deriváty, jejich použití jako léčiva a farmaceutické přípravky tyto sloučeniny obsahující
WO2014145386A2 (en) * 2013-03-15 2014-09-18 University Of Florida Research Foundation Incorporated Novel allosteric inhibitors of thymidylate synthase
WO2015191677A1 (en) 2014-06-11 2015-12-17 Incyte Corporation Bicyclic heteroarylaminoalkyl phenyl derivatives as pi3k inhibitors
CZ308881B6 (cs) * 2014-12-09 2021-08-04 Univerzita Palackého v Olomouci 6-aryl-9-glykosylpuriny a jejich použití
PH12021551128A1 (en) 2015-02-27 2023-06-14 Incyte Holdings Corp Salts of pi3k inhibitor and processes for their preparation
US9988401B2 (en) 2015-05-11 2018-06-05 Incyte Corporation Crystalline forms of a PI3K inhibitor
US9732097B2 (en) 2015-05-11 2017-08-15 Incyte Corporation Process for the synthesis of a phosphoinositide 3-kinase inhibitor
US10835524B2 (en) 2015-06-24 2020-11-17 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Compositions for the treatment of pancreatic cancer and uses thereof
JP2015172077A (ja) * 2015-06-24 2015-10-01 中国医学科学院葯物研究所 Ｎ６−置換アデノシン誘導体とｎ６−置換アデニン誘導体の鎮静、催眠、抗うつ、抗痙攣、抗てんかん、抗パーキンソン病と認知証予防・治療の用途
CN108329372B (zh) * 2017-01-20 2022-07-26 浙江省亚热带作物研究所 N6-(2-羟乙基)腺苷及其衍生物在制备治疗痛风药物中的应用
CA3101323A1 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Incyte Corporation Dosing regimen for the treatment of pi3k related disorders
WO2022012702A1 (en) 2020-07-13 2022-01-20 Univerzita Palackeho V Olomouci Nitrogen heterocyclic cytokinin derivatives, compositions containing these derivatives and use thereof

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3506643A (en) * 1966-12-09 1970-04-14 Max Thiel N**6-aralkyl-adenosine derivatives
NL6717061A (cs) * 1966-12-21 1968-06-24
DE2007273A1 (de) * 1970-02-18 1971-08-26 Boehnnger Mannheim GmbH, 6800 Mann heim Waldhof N(6) Aralkyl adenosin Derivate und Verfahren zur Herstellung derselben
DE2059922A1 (de) * 1970-12-05 1972-06-15 Boehringer Mannheim Gmbh Neue N(6)-Aralkyl-adenosin-Derivate und Verfahren zur Herstellung derselben
DE2136624A1 (de) * 1971-07-22 1973-02-08 Boehringer Mannheim Gmbh N (6)-substituierte adenosin-derivate und verfahren zur herstellung derselben
US4514405A (en) * 1981-09-17 1985-04-30 Merck Patent Gesellschaft Mit Beschrankter Haftung Use of adenosine derivatives as anticonvulsants
AU659861B2 (en) 1991-09-10 1995-06-01 Sansho Seiyaku Co., Ltd. Preparation for promoting hair growth
AU7331094A (en) * 1993-07-13 1995-02-13 United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services, The A3 adenosine receptor agonists

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011134444A2 (en) 2010-04-29 2011-11-03 Univerzita Palackeho V Olomouci Substitution derivatives of n6-benzyladenosine-5´-monophosphate, methods of preparation thereof, use thereof as medicaments, and therapeutic preparation containing these compounds
CZ303327B6 (cs) * 2010-04-29 2012-08-01 Univerzita Palackého v Olomouci Substitucní deriváty N6-benzyladenosin-5´-monofosfátu, zpusoby jejich prípravy, tyto deriváty pro použití jako léciva a terapeutický prípravek je obsahující

Also Published As

Publication number Publication date
EP1575973A2 (en) 2005-09-21
US20060166925A1 (en) 2006-07-27
WO2004058791A3 (en) 2004-10-28
WO2004058791A2 (en) 2004-07-15
ZA200506074B (en) 2006-05-31
AU2003294608A8 (en) 2004-07-22
CZ20024273A3 (en) 2004-08-18
EP1575973B1 (en) 2017-08-23
AU2003294608A1 (en) 2004-07-22
US8119614B2 (en) 2012-02-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ294538B6 (cs) Substituční deriváty N6-benzyladenosinu, způsob jejich přípravy, jejich použití pro přípravu léčiv, kosmetických přípravků a růstových regulátorů, farmaceutické přípravky, kosmetické přípravky a růstové regulátory tyto sloučeniny obsahující
CZ20012818A3 (cs) Heterocyklické sloučeniny na bázi N6-substituovaného adeninu, způsoby jejich přípravy, jejich použití pro přípravu léčiv, kosmetických přípravků a růstových regulátorů a farmaceutické přípravky, kosmetické přípravky a růstové regulátory tyto sloučeniny obsahující
Oshchepkov et al. Natural and synthetic cytokinins and their applications in biotechnology, agrochemistry and medicine
DE60118521T2 (de) Purin derivate, ihre herstellung und verwendung
JP2005508386A6 (ja) Ｎ６−置換アデニンに基づく複素環状化合物およびその調製方法、ならびに、薬、化粧品、成長調節剤や、上記化合物を含む医薬品、化粧品、成長調節剤の調製のための使用
AU2002363362A1 (en) Heterocyclic compound based on N6-substituted adenine, methods of their preparation, their use for preparation of drugs, cosmetic preparations and growth regulators, pharmaceutical preparations, cosmetic preparations and growth regulators containing these compounds
CZ302225B6 (cs) Substituované 6-anilinopurinové deriváty jako inhibitory cytokinin oxidasy a prípravky obsahující tyto slouceniny
CZ2014908A3 (cs) 6,8-Disubstituované-9-(heterocyklyl)puriny, přípravky obsahující tyto deriváty a jejich použití v kosmetických a medicínských aplikacích
Rothwell et al. Phytokinin activity in some new 6-substituted purines
US20130072506A1 (en) 6,8-disubstituted purine compositions
US9073961B2 (en) Substitution derivatives of N6 -benzyladenosine-5′-monophosphate, methods of preparation thereof, use thereof as medicaments, and therapeutic preparations containing these compounds
NZ538596A (en) Heterocyclic compound based on N6-substituted adenine, methods of their preparation, their use for preparation of cosmetic, cosmetic preparations containing these compounds
US10100077B2 (en) 6-aryl-9-glycosylpurines and use thereof

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20111230