CZ293113B6 - Peptidový derivát - Google Patents
Peptidový derivát Download PDFInfo
- Publication number
- CZ293113B6 CZ293113B6 CZ19961834A CZ183496A CZ293113B6 CZ 293113 B6 CZ293113 B6 CZ 293113B6 CZ 19961834 A CZ19961834 A CZ 19961834A CZ 183496 A CZ183496 A CZ 183496A CZ 293113 B6 CZ293113 B6 CZ 293113B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- phe
- 2nal
- lys
- ala
- aib
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 111
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 claims abstract description 42
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 claims abstract description 42
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 claims abstract description 42
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 claims abstract description 16
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 14
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims abstract 3
- -1 3- (4-imidazolyl) propionyl Chemical group 0.000 claims description 121
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 11
- NMILGIZTAZXMTM-UHFFFAOYSA-N 4-propylmorpholine Chemical compound CCCN1CCOCC1 NMILGIZTAZXMTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 10
- 125000000094 2-phenylethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 8
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 7
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 7
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 7
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 206010056438 Growth hormone deficiency Diseases 0.000 claims description 6
- WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N benzylamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1 WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N butan-1-amine Chemical compound CCCCN HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 6
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 6
- DPBLXKKOBLCELK-UHFFFAOYSA-N pentan-1-amine Chemical compound CCCCCN DPBLXKKOBLCELK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N propylamine Chemical compound CCCN WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 5
- JPZXHKDZASGCLU-GFCCVEGCSA-N 3-(2-Naphthyl)-D-Alanine Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC=C21 JPZXHKDZASGCLU-GFCCVEGCSA-N 0.000 claims description 4
- JJMDCOVWQOJGCB-UHFFFAOYSA-N 5-aminopentanoic acid Chemical compound [NH3+]CCCCC([O-])=O JJMDCOVWQOJGCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 claims description 4
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 4
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 4
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims description 4
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 claims description 4
- BMVXCPBXGZKUPN-UHFFFAOYSA-N 1-hexanamine Chemical compound CCCCCCN BMVXCPBXGZKUPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoisobutyric acid Chemical compound CC(C)(N)C(O)=O FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000006479 2-pyridyl methyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C(=N1)C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- WTKYBFQVZPCGAO-LURJTMIESA-N (2s)-2-(pyridin-3-ylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1=CC=CN=C1 WTKYBFQVZPCGAO-LURJTMIESA-N 0.000 claims description 2
- KGSVNOLLROCJQM-UHFFFAOYSA-N 2-(benzylamino)acetic acid Chemical compound OC(=O)CNCC1=CC=CC=C1 KGSVNOLLROCJQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- WTOFYLAWDLQMBZ-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-3-thiophen-2-ylpropanoate Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=CS1 WTOFYLAWDLQMBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- MWIRQVRILGQXFA-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropan-1-imine Chemical compound CC(C)C=N MWIRQVRILGQXFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- JTTHKOPSMAVJFE-VIFPVBQESA-N L-homophenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC1=CC=CC=C1 JTTHKOPSMAVJFE-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 2
- 125000003647 acryloyl group Chemical group O=C([*])C([H])=C([H])[H] 0.000 claims 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 229940100684 pentylamine Drugs 0.000 claims 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 abstract description 18
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 14
- 125000006295 amino methylene group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])* 0.000 abstract description 2
- 150000008574 D-amino acids Chemical group 0.000 abstract 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 abstract 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 abstract 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 abstract 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 25
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 21
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 18
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 17
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 description 11
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 10
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 10
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 9
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 8
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 8
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 7
- 125000001501 propionyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 6
- 238000002821 scintillation proximity assay Methods 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 239000000095 Growth Hormone-Releasing Hormone Substances 0.000 description 5
- 102100022831 Somatoliberin Human genes 0.000 description 5
- 101710142969 Somatoliberin Proteins 0.000 description 5
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- UMRUUWFGLGNQLI-QFIPXVFZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-6-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]hexanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCCCNC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 UMRUUWFGLGNQLI-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 4
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 4
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101000868151 Rattus norvegicus Somatotropin Proteins 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 4
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 4
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 4
- QWXZOFZKSQXPDC-NSHDSACASA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 QWXZOFZKSQXPDC-NSHDSACASA-N 0.000 description 3
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 3
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 3
- 231100000001 growth retardation Toxicity 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000005932 reductive alkylation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- XXMYDXUIZKNHDT-QNGWXLTQSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-(1-tritylimidazol-4-yl)propanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C(N=C1)=CN1C(C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 XXMYDXUIZKNHDT-QNGWXLTQSA-N 0.000 description 2
- DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 1,1-ethanedithiol Chemical compound CC(S)S DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NOGFHTGYPKWWRX-UHFFFAOYSA-N 2,2,6,6-tetramethyloxan-4-one Chemical compound CC1(C)CC(=O)CC(C)(C)O1 NOGFHTGYPKWWRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IZHVBANLECCAGF-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-3-(octadecanoyloxy)propyl octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC IZHVBANLECCAGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 2
- 208000014311 Cushing syndrome Diseases 0.000 description 2
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 2
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 2
- 208000020221 Short stature Diseases 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 2
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- VHRGRCVQAFMJIZ-UHFFFAOYSA-N cadaverine Chemical compound NCCCCCN VHRGRCVQAFMJIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 2
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000008098 formaldehyde solution Substances 0.000 description 2
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 2
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M lithium bromide Chemical compound [Li+].[Br-] AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000001788 mono and diglycerides of fatty acids Substances 0.000 description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 2
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 2
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 2
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 2
- 210000001764 somatotrope Anatomy 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N thioanisole Chemical compound CSC1=CC=CC=C1 HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002992 thymic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 2
- MGHMWKZOLAAOTD-XMMPIXPASA-N (2r)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound C12=CC=CC=C2C2=CC=CC=C2C1COC(=O)N[C@@H](C(=O)O)CC1=CNC2=CC=CC=C12 MGHMWKZOLAAOTD-XMMPIXPASA-N 0.000 description 1
- SJVFAHZPLIXNDH-JOCHJYFZSA-N (2r)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-phenylpropanoic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C1=CC=CC=C1 SJVFAHZPLIXNDH-JOCHJYFZSA-N 0.000 description 1
- ZYJPUMXJBDHSIF-LLVKDONJSA-N (2r)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ZYJPUMXJBDHSIF-LLVKDONJSA-N 0.000 description 1
- NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N (2s)-2,6-diaminohexanoic acid;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 1
- IEAOAWZLUGOPJX-INIZCTEOSA-N (2s)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-[1-(phenylmethoxymethyl)imidazol-4-yl]propanoic acid Chemical compound C1=NC(C[C@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)=CN1COCC1=CC=CC=C1 IEAOAWZLUGOPJX-INIZCTEOSA-N 0.000 description 1
- QVHJQCGUWFKTSE-YFKPBYRVSA-N (2s)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)OC(C)(C)C QVHJQCGUWFKTSE-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- VIYKYVYAKVNDPS-HKGPVOKGSA-N (2s)-2-azanyl-3-[3,4-bis(oxidanyl)phenyl]propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 VIYKYVYAKVNDPS-HKGPVOKGSA-N 0.000 description 1
- HFPVZPNLMJDJFB-LBPRGKRZSA-N (3s)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]-3,4-dihydro-1h-isoquinoline-3-carboxylic acid Chemical compound C1=CC=C2C[C@@H](C(O)=O)N(C(=O)OC(C)(C)C)CC2=C1 HFPVZPNLMJDJFB-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- BWKMGYQJPOAASG-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylic acid Chemical compound C1=CC=C2CNC(C(=O)O)CC2=C1 BWKMGYQJPOAASG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihydroxypropan-2-yl formate Chemical class OCC(CO)OC=O LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPLYIIABJBTHPJ-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethyl-4-oxoazetidine-1-sulfonyl chloride Chemical compound CC1(C)CC(=O)N1S(Cl)(=O)=O CPLYIIABJBTHPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 2,4-diaminobutyric acid Chemical compound NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IDQXZLKEWHBPCA-UHFFFAOYSA-N 2-ethyl-1-methylpyrrolidine Chemical compound CCC1CCCN1C IDQXZLKEWHBPCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 2-methylphenol;3-methylphenol;4-methylphenol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1.CC1=CC=CC(O)=C1.CC1=CC=CC=C1O QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KVCQTKNUUQOELD-UHFFFAOYSA-N 4-amino-n-[1-(3-chloro-2-fluoroanilino)-6-methylisoquinolin-5-yl]thieno[3,2-d]pyrimidine-7-carboxamide Chemical compound N=1C=CC2=C(NC(=O)C=3C4=NC=NC(N)=C4SC=3)C(C)=CC=C2C=1NC1=CC=CC(Cl)=C1F KVCQTKNUUQOELD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 229910002012 Aerosil® Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 208000034657 Convalescence Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 206010013883 Dwarfism Diseases 0.000 description 1
- OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N Ethane Chemical compound CC OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001362 Fetal Growth Retardation Diseases 0.000 description 1
- 206010070531 Foetal growth restriction Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 102000051325 Glucagon Human genes 0.000 description 1
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 1
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 241001622557 Hesperia Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037171 Hypercorticoidism Diseases 0.000 description 1
- 206010060378 Hyperinsulinaemia Diseases 0.000 description 1
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 1
- 108090001117 Insulin-Like Growth Factor II Proteins 0.000 description 1
- 102000048143 Insulin-Like Growth Factor II Human genes 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 101100248652 Mus musculus Rinl gene Proteins 0.000 description 1
- 229940121948 Muscarinic receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000000713 Nesidioblastosis Diseases 0.000 description 1
- 206010029748 Noonan syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 208000004286 Osteochondrodysplasias Diseases 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 241000156302 Porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus Species 0.000 description 1
- 201000010769 Prader-Willi syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010072610 Skeletal dysplasia Diseases 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000013275 Somatomedins Human genes 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 101710162629 Trypsin inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 208000026928 Turner syndrome Diseases 0.000 description 1
- GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N Vasopressin Natural products N1C(=O)C(CC=2C=C(O)C=CC=2)NC(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1CC1=CC=CC=C1 GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002852 Vasopressins Human genes 0.000 description 1
- 108010004977 Vasopressins Proteins 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 102000030621 adenylate cyclase Human genes 0.000 description 1
- 108060000200 adenylate cyclase Proteins 0.000 description 1
- 201000005255 adrenal gland hyperfunction Diseases 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000005210 alkyl ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N argipressin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N1)=O)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)C1=CC=CC=C1 KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 238000006480 benzoylation reaction Methods 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000010072 bone remodeling Effects 0.000 description 1
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000012461 cellulose resin Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 239000008119 colloidal silica Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229930003836 cresol Natural products 0.000 description 1
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 208000030941 fetal growth restriction Diseases 0.000 description 1
- 239000007888 film coating Substances 0.000 description 1
- 238000009501 film coating Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- HYBBIBNJHNGZAN-UHFFFAOYSA-N furfural Chemical compound O=CC1=CC=CO1 HYBBIBNJHNGZAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 1
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229940074045 glyceryl distearate Drugs 0.000 description 1
- 229940075507 glyceryl monostearate Drugs 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N hydrazine monohydrate Substances O.NN IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 230000003451 hyperinsulinaemic effect Effects 0.000 description 1
- 201000008980 hyperinsulinism Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- ULWOJODHECIZAU-UHFFFAOYSA-N n,n-diethylpropan-2-amine Chemical compound CCN(CC)C(C)C ULWOJODHECIZAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000001151 other effect Effects 0.000 description 1
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000007030 peptide scission Effects 0.000 description 1
- 239000008024 pharmaceutical diluent Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004987 plasma desorption mass spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000004014 plasticizer Substances 0.000 description 1
- 229920000056 polyoxyethylene ether Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 230000017363 positive regulation of growth Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 201000009395 primary hyperaldosteronism Diseases 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 230000000541 pulsatile effect Effects 0.000 description 1
- 108700029318 rat female Proteins 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 1
- 230000026267 regulation of growth Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 230000037393 skin firmness Effects 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000008279 sol Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000013222 sprague-dawley male rat Methods 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- FLNPXQTYSYZWIR-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 2-(aminomethyl)-6-formylbenzoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)C1=C(CN)C=CC=C1C=O FLNPXQTYSYZWIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000012049 topical pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 229960003726 vasopressin Drugs 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 210000002268 wool Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1024—Tetrapeptides with the first amino acid being heterocyclic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/10—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Virology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Popsány jsou syntetické peptidy se zvýšenou rezistencí vůči enzymatické proteolytické degradaci, která je způsobena přítomností sousedních D-aminokyselin v peptidické sekvenci, případně substitucí amidické vazby (-CO-NH-), např. aminomethylenem (-CH.sub.2.n.-NH-) a/nebo modifikováním N- nebo C- konce peptidu. Peptidické deriváty stimulují uvolňování růstového hormonu z hypofýzy. Farmaceutický prostředek obsahující jako účinnou složku peptidové deriváty nebo jejich farmaceuticky přijatelnou sůl.ŕ
Description
Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká nových peptidických derivátů, přípravků, které je obsahují, a jejich použití při léčbě zdravotních poruch vyplývajících z nedostatku růstového hormonu.
Dosavadní stav techniky
Růstový hormon je hormon stimulující růst všech tkání schopných růstu. Růstový hormon má řadu účinků na metabolické procesy, např. stimuluje proteosyntézu a mobilizaci mastných kyselin a přepíná energetický metabolismus mezi metabolismy uhlovodíků a tuků. Nedostatek růstového hormonu může způsobovat řadu těžkých zdravotních poruch, např. trpaslictví.
Růstový hormon je uvolňován hypoíýzou. Jeho uvolňování podléhá přísnému řízení hormony a neurotransmitery, přímou i nepřímou cestou. Uvolňování růstového hormonu je stimulováno faktorem stimulujícím uvolňování růstového hormonu (growth hormone releasing hormone - GHRH) a inhibováno somatostatinem. Oba tyto faktory jsou vylučovány hypotalamem, jejich účinek je primárně zprostředkováván specifickými receptoiy hypofýzy. Byly popsány i další sloučeniny stimulující uvolňování růstového hormonu z hypofýzy. Například arginin, L-3,4dihydroxyfenylalanin (L-Dopa), glukagon, vasopresin, PACAP (peptid aktivující hypofyzámí adenylylcyklázu), antagonisté muskarinového receptorů a syntetický hexapeptid GHRP (peptid stimulující uvolňování růstového hormonu), který působí na uvolňování endogenního růstového hormonu buď přímým působením na hypofyzu, nebo působením na uvolňování GHRH a/nebo somatostatinu z hypotalamu.
Při poruchách nebo zdravotních stavech, které vyžadují zvýšené hladiny růstového hormonu, proteinová podstata růstového hormonu vylučuje jakékoli jiné podávání než parenterální. Ani jiné přímo působící přirozené sekrety, např. GHRH a PACAP nelze jako delší polypeptidy podávat perorálně.
Již dříve bylo navrženo použití kratších peptidů, které by u savců zvyšovaly hladiny růstového hormonu, např. EP 18 072, EP 82 864, WO 89/07110, WO 89/01711, WO 89/10933, WO 88/9780, WO 82/02272, WO 91/18016, WO 92/01711 a WO 93/04081.
Složení peptidů stimulujících uvolňování růstového hormonu nebo jejich derivátů je důležité z hlediska jejich schopnosti uvolňovat růstový hormon i z hlediska jejich biologické dostupnosti. Předmětem předkládaného vynálezu jsou proto peptidy, které stimulují uvolňování růstového hormonu a které mají výhodnější vlastnosti, než dosud známé peptidy tohoto typu.
Podstata vynálezu:
Vynález se týká peptidových derivátů vybraných z následujících sloučenin:
H~Ala-Hisv|/(CH2NH)D~-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
H-Ala-Ala-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
H-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-(4-Imidazolyl)propionyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2) H-D-Lys-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
H-5Apent-his-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
-1 CZ 293113 B6
H-IKAla-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
H-5Apent-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (n-Propyl)-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-Ala-3Pya-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-Ala-Phe(4-NH2)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-D-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (2-<4-Imidazolyl)acetyl>D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-(4-Imidazolyl)akiyloyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-Aminofenylacetyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (4-Aminofenylacetyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-Aminokrotonoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (4-Piperidino-karboxyl)-D-2Nal-I>-Phe-Lys-NH2 H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH2 (H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)hexan 6-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)hexylamin 5-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)pentylamin Η-Α13-Ηί8-ϋ-2Ν31-Ι)-ΡΗβψ(€Η2ΝΗ)Εγ8-ΝΗ2 H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-OH (2SHH-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)-6-aminohexanol (2-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)ethyl)benzen
2- (H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)etoylamin 4-((H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)methyl)benzylamin H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Lys(mantosyl)-NH2 H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Phe-NH2 H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-D-Phe-NH2 H-Ala-His-D-Phe-D-Phe-Lys-NH2 H-Ala-His-D-Trp-D-Phe-Lys-NH2 H-His-D-2Nal-D-Trp-Lys-NH2 H-Ala-His-D-lNal-D-Phe-Lys-NH2 H-Ala-Phe-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Lys(maltosyl)-NH2 (2R)-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH)-3-fenylpropylamm H-Ala-N-Me-(2-aminobeiizoyl)-D-Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-Metoylaminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe--Lys-NH2 (4-Aminoniethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-His-Ala-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 4-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)butylamm
3- (H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)propylamin (3-Dimethylaminomethylbenzoyl)-D-2NaI-I>-Phe-Lys-NH2 (3-Amino-3-methylbutanoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-Aminomethylbenzoyl)iy(CH2NH)D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
-2CZ 293113 B6 (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-hPhe-Lys-NH2 (3-Amino-3-methylbutanoyI)-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-Ammomethylbenzoyl)-D-2Nal-N-Bzl-Gly-Lys-NH2 (2S)J3-aminomethylbenzoyl^(CH2NH)I)-2Nal-D-Phe-NH)-6-aminohexanol (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-3Pyal-Lys-NH2 (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe(4-F)-Lys-NH2 (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe(4-OMe)-Lys-NH2 (2-Aminomethylfenylacetyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (2-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 2-(H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-NH)-(4-pyridyl)ethan H-Aib-Phe-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 2-(H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-NH)-(l-methyl-2-pyrrolidinyl)ethan 2-(H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-NH)-(4-pyridyl)ethan H-Aib-Hisv(CH2NH)-D-2Nal-D-Phe-Lys-OH (3-Ammomethylbenzoyl)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2 H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Gly-NH2 H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Ala-NH2 H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Om-NH2 (5-Aminomethylthienyl-2-karbonyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-D-Lys-NH2 H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Dab-NH2 Η-ΑίΙ>-ΗΪ8-Ε)-2Ν31-Ο-ΡΗ6ψ(€Η2ΝΗ)-Εγ3-ΝΗ2 H-Aib-His-D-Me-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-N-Me-Lys-NH2 (3-Aminomethylthienyl-2-karbonyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2 H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-N(Me)2 (3R)-Piperidinkarbonyl-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3S)-Piperidinkarbonyl-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-Aminomethylbenzoyl)-D-lNal-D-Phe-Lys-NH2 H-Aib-his-D-2Nal-D-Trp-Lys-NH2 (Furfuryl)-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (2-Pyridylmethyl)-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-Aib-(3-aminomethylbenzoyl)-I>-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-Aib-3-Pyal-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3S)-Piperidinkarbonyl-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3R)-Piperidinkarbonyl-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (2-(H-Aib-his-D-Nal-NH)-ethyl)benzen N,N-di(2R-Hydroxypropyl)-(3-aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (2R-Hydroxypropyl)-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-Απιϊηοηΐ6ΐΗγΛβηζογ1)-Ε)-2Ν3ΐ-Ι)-ΡΗβψ(€Η2ΝΗ)-Εγ8-ΝΗ2 (3-Aminomethylbenzoyl)-N-Me-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
-3CZ 293113 B6 (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-N-Me-Lys-NH2
H-D-Thr-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
H-Aib-His-D-2Nal-N-(fenethyl)-Gly-Lys-NH2 (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-N-(fenethyl)-Gly-Lys-NH2 H-Hyp-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-(fenethyl)-Gly-Lys-NH2
H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2
H-Aib-His-D-2Nal-D-Phei|;(CH2N(Me))-Lys-NH2
3-(H-Aib-His-D-2Nal-Me-D-Phe-NH)morfolinopropan
2- (H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(l-methyl-2-pyrrolidinyl)ethan (3R)-Piperidinkarbonyl-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2
3- ((Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)morfolinopropan 2-(H-Aib-His-N-Me-E)-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(l-methyl-2-pyrrolidinyl)ethan 2-((3R)-Piperidinkarbonyl-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(l-methyl-2-pynOlidinyl)ethan)
2- ((3-Ammomethylbenzoyl)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(l-methyl-2-pyrrolidinyl)ethan
3- (H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)morfolinopropan 3-((3R)-Piperidinkarbonyl-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)morfolinopropan 3-((3-Aminomethylbenzoyl)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)morfolinopropan
H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Hyp-NH2 2-((3-Aminomethylbenzoyl)-I>-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(l-methyl-2-pyrrolidinyl)ethan 2-((3R)-Piperidinkarbonyl-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(l-methyl-2-pyrroIidinyl)ethan
Zkratky:
| D-2Nal | D-2-naftylalanin | |
| 5Apant | kys. 5-aminopentanová | |
| 3Pyal | = | 3-pyridylalanin |
| Aib | = | kys. H.-aminoisomáselná = Kys. iminoizobutanová |
| Thial | = | thienylalanin |
| hPhe | = | homo-fenylalanin |
| N-Bzl-Gly | = | N-benzylglycin |
| 4-F | = | 4-Fluor |
| 4-OMe | = | 4-methoxy |
| Om | - | omitin |
| Dab | = | kys. 2,4-diaminomáselná |
| Hyp | = | hydroxyprolin |
| Tic | = | 1,2,3,4-tetrahydroisochinolin-3-karboxylová kys. |
Uvedené sloučeniny lze připravit běžnými postupy syntézy peptidů v roztoku i na pevné fázi. Syntézu na pevné fázi lze například provést podle Stewart and Young, Solid, Phase Peptide Synthesis, Td. Ed., Rockford, Illinois, USA, 1976. Syntézu u roztoku lze například provést podle Bodansky et al., Peptide Synthesis, 2(d.,Ed, New York, New York, USA, 1976.
Aminometylenovou substituci amidické vazby lze provést podle Y. Sasaki and D. H. Coy, Peptides 8(1), 1987, pp. 119-121. Peptidické deriváty obsahující amino skupinu derivatizovanou mono- nebo di-hexapyranózou lze připravit Amidoriho přesmykem podle R Albert et al., Life
-4CZ 293113 B6
Sciences 53, 1993, pp 517-525. Vhodnými mono- nebo di-hexapyranózami jsou např. glukóza, galaktóza, maltóza, laktóza nebo celobióza.
Deriváty používané jako výchozí látky pro syntézu jsou komerčně dostupné, nebo, pokud jsou k dispozici vhodné chránící skupiny a výchozí materiály, lze tyto deriváty připravit podle známých postupů syntézy a zavádění chránících skupin.
Farmaceuticky přijatelné adiční soli kyselin s uvedenými peptidovými deriváty jsou látky připravené reakcí peptidů s anorganickými nebo organickými kyselinami, jako jsou např. kys. chlorovodíková, bromovodíková, sírová, octová, fosforečná, mléčná, maleinová, fialová, citrónová, glutanová, glukonová, metansulfonová, salicylová, jantarová, tartarová, toluensulfonová, trifluoroctová, amidosulfonová a fumarová.
Předkládaný vynález rovněž zahrnuje farmaceutické přípravky obsahující jako aktivní složku uvedený peptidový derivát nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl, a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.
Farmaceutické přípravky obsahující sloučeninu předkládaného vynálezu lze připravit běžnými postupy jako je např. uvedeno v práci Remingtonů Pharmaceutical Sciences, 1985. Přípravky jsou připravovány v obvyklých lékových formách, tj. jako kapsle, tablety, aerosoly, roztoky, suspenze nebo jako přípravky pro povrchovou aplikaci.
Jako farmaceutický nosič nebo ředidlo lze použít běžný pevný nebo kapalný nosič. Příkladem pevných nosičů jsou laktóza, terra alba, sacharóza, cyklodextrin, talek, želatina, agar, pektin, arabská guma, magnézium stearát, kys. stearová nebo Cl-6 alkylethery celulózy. Příkladem kapalných nosičů jsou sirup, arašídový olej, olivový olej, fosfolipidy, mastné kyseliny, aminy mastných kyselin, polyoxyetylen a voda.
Podobně nosič nebo ředidlo mohou zahrnovat libovolné látky vedoucí k protrahovanému uvolňování léčiva, známé v příslušné oblasti techniky. Jde o látky jako glyceryl- monostearát, nebo glyceryldistearát, které lze použít samotné nebo ve směsi s voskem.
Pokud je pro perorální podávání použit pevný nosič, lze přípravek tabletovat, uzavřít jako prášek nebo granule do tvrdých želatinových kapslí, nebo použit formu troche nebo pastilek. Množství pevného nosiče je proměnlivé, ale nejčastěji se pohybuje v rozmezí 25 mg až 1 g.
Typická tableta připravená běžným tabletovacím postupem obsahuje:
Jádro:
Účinná složka (jako volná sloučenina nebo její sůl) 100 mg
Koloidní oxid křemičitý (Aerosil) 1,5 mg
Celulóza, mikrokryst. (Avicel) 70 mg
Modifikovaná celulózová pryskyřice (Ac-Di-Sol) 7,5 mg
Magnézium stearát
Potah:
HPMC průměrně 9 mg * Mywacett 9-40 T průměrně 0,9 mg * Acylovaný monoglycerid vhodný jako plastifikátor při potahování filmem.
Pokud je pro podávání léku použit kapalný nosič, lze přípravek připravit jako sirup, emulzi, měkké želatinové kapsle nebo jako sterilní injekční roztoky, tj. vodné nebo ne-vodné kapalné suspenze nebo roztoky.
-5CZ 293113 B6
Přípravek určený na aerosolovou aplikaci do nosu, obsahuje roztok nebo suspenzi peptidového derivátu v kapalném nosiči, nejčastěji ve vodném nosiči. Nosič dále případně obsahuje další přísady jako jsou solubilizační činidla, např. propylenglykol, povrchově aktivní látky, např. soli kyseliny žlučové, nebo ethery polyoxyetylenu s vyššími alkoholy, látky zvyšující absorpci, např. lecithin (fosfatidylcholin) nebo cyklodextrin, nebo konzervační činidla např. parabeny.
Sloučeniny předkládaného vynálezu jsou obsaženy v jednotkové dávkové formě v množství 0,0001 až 100 mg účinné složky spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem.
Vhodné dávkové množství sloučeniny předkládaného vynálezu je 1 až 500 mg/den, např. léčivo podávané lidem obsahuje 100 mg účinné složky na dávku.
Bylo ukázáno, že uvedené peptidové deriváty stimulují uvolňování endogenního růstového hormonu in vivo. Tyto sloučeniny lze proto použít při léčbě stavů, které vyžadují vyšší hladinu hormonu v plazmě, jako např. u lidí trpících deficiencí růstového hormonu, u starších pacientů nebo u hospodářských zvířat.
Předkládaný vynález se dále týká farmaceutických přípravků stimulujících uvolňování růstového hormonu z hypofyzy, přípravků, které jako aktivní složku obsahují uvedený peptidový derivát nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.
Předkládaný vynález se dále týká způsobu stimulace uvolňování růstového hormonu z hypofyzy, který spočívá v podávání účinného množství uvedeného peptidového derivátu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pacientům.
Předkládaný vynález se dále týká použití uvedeného peptidového derivátu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro přípravu léčiva určeného na stimulaci uvolňování růstového hormonu z hypofyzy.
Odborníkům v oboru je dobře známo, že v současné době rozšířené podávání růstového hormonu lidem je velmi mnohostranné. Lze očekávat, že uvedené peptidové deriváty, podávány pro stimulaci uvolňování růstového hormonu z hypofyzy, budou vykazovat podobné účinky a mít podobné využití jako samotný růstový hormon. Použití růstového hormonu lze shrnout do následujících skupin: stimulace uvolňování růstového hormonu ve stáří; prevence vedlejších účinků katabolismu glukokortikoidů; léčba osteoporézy; stimulace imunitního systému; urychlení hojení ran; urychlení reparace fraktur; léčba retardovaného růstu; léčba selhání ledvin nebo nedostatečnosti vyplývající z retardace růstu; léčba fyziologicky krátké postavy zahrnující léčbu dětí s deficiencí růstového hormonu a léčba krátké postavy související s chronickým onemocněním; léčba obezity a retardace růstu souvisejícího s obezitou; léčba retardace růstu souvisejícího s Prader-Williho syndromem a Turnérovým syndromem; urychlení uzdravování a zkrácení hospitalizace pacientů s popáleninami; léčba nitroděložní retardace růstu, kosterní dysplazie, hyperkortisolismu a Cushingova syndromu; indukce pulsatilního uvolňování růstového hormonu; náhrada růstového hormonu u pacientů trpících stresem; léčba osteochondrodysplazie, Noonanova syndromu, schizofrenie, depresí, Alzheimerovy choroby, pomalého hojení ran a psychosociální deprivace; léčba plicní nedostatečnosti a závislosti na ventilátoru; oslabení odpovědí katabolismu proteinů na velké chirurgické zákroky; snížení kachexie a ztráty proteinů v souvislosti s chronickým onemocněním jako je rakovina nebo AIDS; léčba hyperinsulinemie včetně nesidioblastózy, podpůrná léčba při indukci ovulace; stimulace vývoje thymu a prevence snížení činnosti thymu závisle na věku; léčba imunosuprimovaných pacientů; posilování svalů, pohyblivosti; udržování pevnosti pokožky, metabolické homeostáze, ledvinné homeostáze u slabých starších pacientů; stimulace osteoblastů přestavby kostí a růstu chrupavek; stimulace imunitního systému u zvířat žijících ve společenstvech a léčba poruch souvisejících se stárnutím u těchto zvířat; podporování růstu u hospodářských zvířat a stimulace růstu vlny u ovcí.
-6CZ 293113 B6
Doporučené dávky léčiva pro výše uvedená použití závisí na konkrétním použitém peptidovém derivátu, cestě podání a požadované terapii. Obecně lze však pro účinné uvolňování endogenního růstového hormonu doporučit dávkové množství 0,0001 až 100 mg na 1 kg tělesné hmotnosti pacienta denně. Obvykle dávkové formy vhodné pro perorální nebo nosní podávání obsahuje 0,001 až 100 mg, výhodně 0,001 až 50 mg, uvedeného peptidového derivátu ve směsi s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.
Uvedené peptidové deriváty lze podávat ve formě farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou, nebo je-li to žádoucí jako sůl alkalického kovu, kovu alkalické zeminy nebo Cl-6 alkylamonnou sůl. Soli vykazují v průběhu stejnou aktivitu jako volné báze.
Farmaceutické přípravky předkládaného vynálezu mohou vedle uvedeného peptidového derivátu obsahovat ještě další sloučeniny, nebo několik sloučenin s jinými účinky, např. antibiotika nebo jinak farmakologicky účinné látky. Těmito látkami mohou být jiné sekrety, jako GHRP (1 nebo 6), nebo GHRH nebo jeho analog, růstový hormon nebo jeho analog, nebo somatomedin jako je IGF-1 nebo IGF-2.
Jako cestu podávání léčiva lze volit jakoukoliv cestu, která zajistí efektivní transport účinné látky do příslušného nebo požadovaného místa účinku, například podávání léčiva perorálně, do nosu nebo parenterálně, výhodně je podávání perorální.
Uvedené peptidové deriváty lze kromě farmaceutického použití použít jako nástroje pro výzkum regulace uvolňování růstového hormonu in vitro.
Uvedené peptidové deriváty lze rovněž použít in vivo, při hodnocení schopnosti hypofyzy uvolňovat růstový hormon. Například lze sledovat množství růstového hormonu ve vzorcích séra odebraných před a po podání studovaných sloučenin pacientům. Porovnání množství růstového hormonu v jednotlivých vzorcích séra přímo udává schopnost pacientovy hypofyzy uvolňovat růstový hormon.
Uvedené peptidové deriváty lze podávat komerčně významným zvířatům pro zvyšování rychlosti a rozsahu vzrůstu, či pro zvyšování produkce mléka.
Farmakologické postupy
Uvedené peptidové deriváty lze testovat in vitro z hlediska účinnosti a rozsahu účinnosti na uvolňování růstového hormonu v primárních krysích somatotropech.
Primární krysí somatotropy byly připraveny dle Chem et al., Endocrinology 1991, 129, 3337-3342 a Chen et al., Endocrinology, 1989, 124, 2791-2798. Stručně, krysy byly usmrceny dekapitací. Hypofyzy byly rychle odstraněny a natráveny 0,2% kolagenázou a 0,2% hyalurinidázou ve vyváženém Hanksově fyziologickém roztoku. Buňky byly dále resuspendovány vDulbeccově modifikaci eagleova média obsahujícího 0,37 % NaHCO3, 10% koňského séra,
2,5 % fetálního telecího séra, 1 % neesenciálních aminokyselin, 1 % glutaminu a 1 % penicilinu/streptomycinu a adjustovaného na 1,5 x 105 buněk/ml. Takto připravená suspenze byla vnesena po 1 ml do všech jamek 24-ti jamkové destičky a ponechána 2 až 3 dny v klidu před prováděním testů uvolňování hormonu.
V prvém dnu experimentu byly buňky dvakrát promyty výše popsaným médiem obsahujícím 25 mmolT1 HEPES, pH 7,4. Uvolňování růstového hormonu bylo iniciováno přidáním média obsahujícího 25 mmol.l'1 EÍEPES a testovanou sloučeninu. Inkubace byla prováděna 15 minut při 37 °C. Po inkubaci bylo množství růstového hormonu uvolněného do média stanoveno standardním postupem RIA.
-7CZ 293113 B6
Uvedené peptidové deriváty byly testovány in vivo z hlediska jejich účinnosti na uvolňování růstového hormonu na krysích samicích pod pentobarbitalovou narkózou, podle Bercu et al., Endocrinilogy 1991, 129, 2592-2598. Stručně, dospělí krysí samci Sprague-Dawley byli narkotizováni pentobarbitalem 50 mg/kg i.p. Zcela uspaným krysám byla do krční tepny 5 ahugulámí žíly implantována tracheální kanyl a katétr. Po 15 min rekonvalescenci byl odebrán vzorek krve v čase 0. Poté byly intravenózně podány hypofyzámí sekrety a krevní vzorky odebrané zarterie byly na 15 min uloženy k ledu a poté centrifugovány 2 min při 12 000 x g. Sérum bylo dekantováno a množství růstového hormonu stanoveno standardním postupem RIA.
ío Vynález je dále ilustrován několika příklady, které však v žádném směru neomezují jeho rozsah, jak je nárokován.
Zkratky používané v popisu i příkladech představují následující struktury:
-8CZ 293113 B6
Zkratky používané pro nepřirozené aminokyselinové zbytky:
3PyaI
Phe(4OMe)
Phe^NHj)
Phe(4-F)
N-(phenethyI)-Gly
N-Bzl-Gly
Aib
-9CZ 293113 B6
5Apent
Zkratky používané pro substituované peptidické vazby:
-N-MeO
X čh3
Y(CH2NH)
NH
Y(CH2N(Me)) /Cft2 X N
CH3
Zkratky používané pro chránící skupiny:
Sloučeniny připravené v následujících příkladech byly izolovány jako soli kys. trifluroctové /TFA/.
-10CZ 293113 B6
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
H-Ala-His-D-2-naftylalanin-D-Trp-Lys-NH2
Titulní peptid byl syntetizován Fmoc strategií na peptidovém syntetizátoru Applied Biosysterms 431A v 0,22 mmol měřítku podle protokolu FastMoc UV dodaného výrobcem, který zahrnuje syntézu zprostředkovanou HBTu (2-(lH-Benzo-triazol-l-yl)-l,l,3,3-tetrametyluronium hexafluorfosfát) v NMP (N-metylpyrrolidon) v UV monitorování deprotekce chránící skupiny Fmoc. Jako výchozí nosič pro syntézu byl použit 4-((2',4'-dimethoxyfenyl)-(Fmoc-amino)metyl-fenoxy nosič (559 mg) (Novabiochem, Bad Soden, Německo; katalogové číslo: 01-64-0013) o substituční kapacitě 0,39mmol/g. Jako chráněné deriváty aminokyselin byly použity FmocLys(Boc)-OH, Fmoc-D-Trp-OH, Fmoc-2-naftylalanin-OH, Fmoc-His(Trt) a Fmoc-Ala-OH.
Odštěpením peptidů z nosiče (434 mg) bylo provedeno směsí 4 ml TFA (kys. trifluoroctové), 300 mg fenolu, 100 μΐ etandithiolu, 200 μΐ thioanisolu a 200 μΐ vody, za stálého míchání 180 min, při laboratorní teplotě. Směs po štěpení byla zfiltrována a zahuštěna v proudu dusíku na 1 ml. Ze vzniklého oleje byl dietyletherem (45 ml) vysrážen surový peptid a promyt dietyletherem (3 x 50 ml).
Surový peptid byl sušen a purifikován semipreparativní HPLC na koloně 20 x 250 mm s náplní 7 pm C-l 8 silikagelu, po ekvilibraci 15 % CH3CN v 0,05 mol.l1 (NLLESC^ adjustovaným na pH
2,5 4 mol.F1 H2SO4. Surový peptid byl rozpuštěn ve 2 ml 70% CH3CN/0,l% vodná TFA a zředěn vodou na 100 ml. Tento roztok byl rozdělen na dvě stejné části, obě postupně naneseny na chromatografickou kolonu a provedeny dvě separace. Eluce byla prováděna gradientem 15 až 25 % 15 % CH3CN v 0,05 mol.F1 (NHtESO», pH 2,5, při rychlosti 10 ml/min, 47 min, při 40 °C. Frakce obsahující peptid byly spojeny, zředěny třemi objemy vody a naneseny na Sep-Par1* C-l 8 kolonky (cartrige, Waters part.; katalogové číslo: 51910) ekvilibrované 0,1 % TFA. Peptid byl z kolonky SepPakR eluován 70% CH3CN v 0,1 % TFA a zeluátu izolován po zředění vodou lyofilizací. Peptid byl připraven s výtěžkem 19 mg.
Výsledný produkt byl charakterizován analytickým RP-HPLC (retenční čas) a plazmatickou desorpční hmotností spektrometrií (molekulová hmotnost). Hmotnostní spektrum bylo v rámci experimentální chyby (hmotností spektrum ± 0,9 amu) v souladu s očekávanou strukturou.
RP-HPLC analýza byla prováděna UV detekcí při 214 nm na koloně Vydac 218TP54, 4,6x250 mm, s náplní 5 pm C-l8 silikagelu (The Separation Group, Hesperia), při rychlosti eluce 1 ml/min, při 42 °C. Byly použity dva rozdílné programy eluce:
Al: Kolona byla ekvilibrována 5 % CH3CN vpufru 0,1 mol.l’1 (NH4)2SO4 adjustovaným na pH
2,5 4 mol.F1 H2SO4 a eluce provedena gradientem 5 až 60 % CH3CN v uvedeném pufru, 50 min.
Bl: Kolona byla ekvilibrována 5 % CH3CN/0,l % TFA/H2O a eluce proveden gradientem 5 % CH3CN/0,l % TFA/H2O až 60 % CH3CN/0,l % TFA/H2O, 50 min.
RP-HPLC analýzou velučních podmínkách Al a Bl byly zjištěny retenční časy 17,88 min, respektive 20,15 min.
-11 CZ 293113 B6
Příklad 2
H-Ala-His-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-OH
Titulní peptid byl připraven postupem popsaným v příkladu 1, s tím rozdílem, že byl jako nosič použit 450 mg Fmoc-Lys(Boc)-Wang (Novabiochem, Bad Soden, Německo; katalogové číslo 04-12-2014) o substituční kapacitě 0,49mmol/g. Po odštěpení produktu z 560 mg nosiče apurifikaci 1/2 surového produktu postupem popsaným v příkladu 1 bylo získáno 25,9 mg výsledného peptidu.
Výsledný produkt byl charakterizován jako v příkladu 1. RP-HPLC analýzou v elučních podmínkách Al a B1 byly zjištěny retenční časy 18,30 min, respektive 20,15 min.
Příklad 3
5-(H-Ala-His-D-2-naftylalanin-D-Phe-NH)aminopentan
Nosič speptidem, H-Ala-His(Trt)-D-2-naftylalnin-D-Phe-Sasrinový nosič, byl připraven postupem popsaným v příkladu 1, s tím rozdílem, že byl jako výchozí nosič použit 262 mg Sasrinový nosič (nosič funkcionalizovaný 2-methoxy-4-alkoxybenzylalkoholem)(Bachem, Bubendorf, Švýcarsko; katalogové číslo D-1295) o substituční kapacitě 0,96 mmol/g a postup navázání první aminokyseliny k nosiči zahrnoval syntézu katalyzovanou 4-dimetylaminopyridinem vycházející z předem připraveného symetrického anhydridu, následovanou benzoylací zbylých volných -OH skupin nosiče anhydridem kys. benzoové.
Částečně chráněný peptid 5-(H-Ala-His(Trt)-D-2-naftylalanin-D-Phe-NH)aminopentan byl odštěpen z 56 mg H-Ala-His(Trt)-D-2-naftylalanin-D-Phe-Sasrinového nosiče mícháním suspenze nosiče v 0,5 ml 1,5-diaminopentanu při laboratorní teplotě 20 h. Nosič po odštěpení peptidu byl odfiltrován, extrahován 1 ml DMF, filtrát a extrakt spojeny. Ke kapalné fázi byla za stálého míchání pomalu přidána směs 2,5 ml CH3CN a 10 ml 1 mol.l1 HC1 a výsledný roztok zředěn na 50 ml 25% CH3CN; výsledná směs byl ponechána 100 h při 4 °C (odštěpení tritylové chránící skupiny z histidinu). Poté byla směs zředěna vodou na 200 ml a přefiltrována.
Surový peptid byl purifikován semipreparativní HPLC přímým nanesením 1/2 připraveného filtrátu na kolonu, za použití stejných preparačních podmínek jako v příkladu 1. Výtěžek 4,5 mg.
Výsledný produkt byl charakterizován jako v příkladu 1. RP-HPLC analýzou v elučních podmínkách Al a B1 byly zjištěny retenční časy 18,43 min, respektive 20,75 min.
Příklad 4 (2S)-(H-Ala-His-D-2-naftylalanin-D-Phe-NH)-6-aminohexanol
Nosič s peptidem, H-Ala-His(Trt)-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys(Boc)-Sasrinový nosič, byl připraven postupem popsaným v příkladu 3, jako výchozí nosič použit Sasrinový nosič o substituční kapacitě 0,96 mmol/g.
Částečně chráněný peptit (2S)-(H-Ala-His(Trt)-D-2-naftylalanin-D-Phe-NH)-6-aminohexanol byl odštěpen z 200 mg H-Ala-His(Trt)-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys(Boc)-Sasrinového nosiče mícháním suspenze nosiče ve směsi 1,2 THF (tetrahydrofuran), 0,2 ml etanolu, 23 mg, LiBr a 10 mg NaBHt při laboratorní teplotě 20 h. Poté bylo přidáno 200 μΐ vody, 200 μΐ kys. octové a 4 ml etanolu. Nosič po odštěpení peptidu byl odfiltrován, filtrát zředěn 50 ml vody a lyofilizován. Získaný prášek byl štěpen TFA a purifikován postupem uvedeným v příkladu 1.
-12CZ 293113 B6
Kvůli získání dostatečně čistého výsledného produktu byla purifíkace opakována. Celkový výtěžek přípravy byl 5,8 mg.
Výsledný produkt byl charakterizován jako v příkladu 1. RP-HPLC analýzou v elučních podmínkách Al a Bl byly zjištěny retenční časy 17,82 min, respektive 20,02 min.
Příklad 5
H-Ala-Hisv(CH2NH)D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-NH2
Nosič s peptidem, H-D-2-naftylalanin-I>-Phe-Lys(Boc)-nosič, byl připraven postupem popsaným v příkladu 1, na 556 mg 4-((2',4'-dimethoxyfenyl)-(Fmoc-amino)methyl-fenoxy nosiče (Novabiochem AG, Švýcarsko; katalogové číslo: 01-64-0013) o substituční kapacitě 0,34 mmol/g. Jako chráněné deriváty aminokyselin byly použity Fmoc-Lys(Boc)-OH, Fmoc-DPhe-OH a Fmoc-2-naftylalanin-OH.
Skupina -CH2NH-, isostemí peptidická vazba, byla do peptidu zavedena dle Sasaki Y. and Coy, D.H., Peptides 8(1) 119-121, 1987.
Fmoc-His(Trt)-aldehyd byl připraven z 820 mg odpovídajícího Ν,Ο-dimetylhydroxamátu podle Fehrentz, J.-A. and Castro, B., Synthesis 676-678, 1983. Surový aldehyd byl rozpuštěn v 8 ml DMF a rozdělen na dvě části. První část byla přidána k husté suspenzi 610 mg, H-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-nosiče v 10 ml 1% kys. octové v DMF při laboratorní teplotě. Poté bylo rozpuštěno 57 mg NaCNBH3 (85 %) v 1 ml DMF a roztok přidán k suspenzi, míchání pokračovalo dalších 60 min. Poté byl nosič s navázaným peptidem odfiltrován a promyt 1% kys. octovou v DMF. Nosič s peptidem byl znovu suspendován v 10 ml 1% kys. octové v DMF a byla přidána druhá část Fmoc-his(Trt)-aldehydu. Opět bylo rozpuštěno 57 mg NaCNBH3 (85 %) v 1 ml DMF, roztok přidán k suspenzi a míchání pokračovalo při laboratorní teplotě dalších 18 h.
Po kroku redukční alkylace byl nosič s navázaným peptidem odfiltrován a promyt 1 % kys. octovou v DMF. Další prodloužení peptidového řetězce bylo provedeno výše uvedeným postupem s použitím chráněné aminokyseliny Fmoc-Ala-OH.
Výsledný peptid byl odštěpen z 550 mg nosiče a surový produkt byl purifikován semipreparativní HPLC ve stejných preparačních podmínkách jako v příkladu 1.
Výtěžek 11,3 mg.
Výsledný produkt byl charakterizován jako v příkladu 1. RPHPLC analýzou v elučních podmínkách Al a Bl byly zjištěny retenční časy 13,35 min, respektive 17,38 min.
Příklad 6 (n-Propyl)-His-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-NH2 a (n-propyl)r-His-D-2-naftylalanin-DPhe-Lys-NH2
Nosič s peptidem, H-His(Trt)-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys(Boc)- nosič, byl připraven postupem popsaným v příkladu 1, na 4-((2',4'-dimethoxyfenyl)-(Fmoc-amino)metyl-fenoxy nosiči (Novabiochem AG, Švýcarsko; katalogové číslo: 01-64-0013) o substituční kapacitě 0,34 mmol/g. Jako chráněné deriváty aminokyselin byly použity Fmoc-Lys(Boc)-OH, Fmoc-DPhe-OH, Fmoc-2-naftylalanin-OH a Fmoc-His(Trt)-OH.
-13CZ 293113 B6
K husté suspenzi 150 mg H-his(Trt)-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-nosiče v 3,3 ml 1% kys. octové v DMF bylo přidáno 13 μΐ n-propanolu při laboratorní teplotě. Poté byl přidán roztok 16,8 mg NaCNBH3 (85 %) v 0,5 ml DMF a míchání pokračovalo dalších 6 h. Po kroku redukční alkylace byla nosič s navázaným peptidem odfiltrován, promyt DMF a CH2CI a vysušen ve vakuu.
Dva výsledné nosiče s peptidem byly smíchány a z celkového množství 300 mg odštěpena směs nealkylovaného, mono-n-propylovaného a di-n-propylovaného peptidů. Peptidy byly izolovány a purifikovány semipreparativní HPLC ve stejných preparačních podmínkách jako v příkladu 1. Peptidy byly připraveny s výtěžkem 6,54 mg pro (n-propyl)-His-D-2-naftylalanin-D-PheLys-NH2 a 5,59 mg pro (n-propyl)2-His-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-NH2.
Výsledné produkty byly charakterizovány jako v příkladu 1. Pro (n-propyl)-His-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-NH2 byly zjištěny retenční časy v podmínkách Al a B1 16,45 min, respektive 19,92 min.
Příklad 7
H-Ala-Tic-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-NH2
Titulní peptid byl syntetizován na 620 mg 4-metyl BHA nosiče (Bissendorf Biochemiocals, Hannover, Německo, katalogové číslo: RMIS50) o substituční kapacitě 0,72 mmol/g, syntetickou strategií Boc na peptidovém syntetizátoru Aplied Biosystems 430A v 0,5 mmol měřítku s využitím protokolu dodaného výrobcem pro jednotlivé syntetické stupně. Syntetické protokoly využívají syntetický postup z předem připravených symetrických anhydridů v DMF s dobou kondenzace 60 min. Pro navázání N-koncového Ala byla použita dvojnásobná doba kondenzace (2 x 60 min.) Jako chráněné deriváty aminokyselin byly při syntéze použity Boc-Lys(2-chlorZ)-OH, Boc-D-Phe-OH, Boc-D-2-naftylalanin-OH, Boc-Tic-OH a Boc-Ala-OH.
Peptid byl odštěpen z nosiče reakcí s 4,5 ml HF v 500 μΐ kresolu, 75 min, za stálého míchání při 0 °C. HF byl odpařen při 0 °C v proudu dusíku. Peptid byl vysrážen z výsledného oleje obsahujícího i nosič dietyletherem (50 ml), sraženina promyta dietyletherem (2 x 50 ml). Po vysušení byl peptid extrahován 10 ml vody s 4 kapkami kyseliny octové. Extrakt byl zředěn vodou na 100 ml.
Surový peptid byl purifíkován semipreparativní HPLC ve dvou preparačních cyklech z 2 x 18 ml zředěného extraktu, ve stejných podmínkách jako v příkladu 1.
Výtěžek 17,3 mg.
Výsledný produkt byl charakterizován jako v příkladu 1. RP-HPLC analýzou v elučních podmínkách Al a B1 byly zjištěny retenční časy 27,37 min, respektive 29,50 min.
Příklad 8 (2R)-(H-Ala-His-D-2-naftylalanin-NH)-3-fenylpropylamin
Skupina Fmoc byla odštěpena reakcí s 20% piperidinem v NMP, 20 min, z 580 mg, 4-((2',4'-dimethoxyfenyl)-(Fmoc-ammo)methyl-fenoxy-nosiče (Novabiochem AG, Švýcarsko; katalogové číslo: 01-64-0013) o substituční kapacitě 0,43 mmol/g. Nosič byl promyt DMF a CH2CI2 a alkylován Fmoc-D-Ple-aldehydem postupem redukční alkylace popsaným v příkladu 5. Poté byl nosič s peptidem odfiltrován, promyt 1% kys. octovou v DMF a další prodloužení peptidového řetězce bylo provedeno na peptidovém syntetizátoru postupem uvedeným v příkladu 1.
-14CZ 293113 B6
Jako chráněné deriváty aminokyselin byly použity D-2-naftylalanin-0H, Fmoc-His(Trt)-OH a Fmoc-Ala-OH.
Výsledný peptid byl odštěpen z 301 mg nosiče a surový produkt byl purifikován semipreparativní 5 HPLC ve stejných preparačních podmínkách jako v příkladu 1.
Výtěžek 23,92 mg.
Výsledný produkt byl charakterizován jako v příkladu 1. RP-HPLC analýzou v elučních podmínit) kách AI a B1 byly zjištěny retenční časy 19,33 min, respektive 21,77 min.
| Př. č. | Peptid | Připraveno dle Př. č. | RP-HPLC ret. časy pro AI /Př. 1/ | RP-HPLC ret. časy pro B1 ZPř.l/ |
| 9 | H-Ala-His-D-Phe-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 12,53 | 15,43 |
| 10 | H-Ala-Phe-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 28,13 | 29,62 |
| 11 | H-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 18,02 | 20,15 |
| 12 | H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Phe-NH2 | 1 | 28,48 | 29,48 |
| 13 | H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-D-Phe-NH2 | 1 | 26,65 | 27,75 |
| 14 | H-Ala-his-D-2Nal-Phe-Lys-NH2 | 1 | 21,85 | 23,12 |
| 15 | (3-(4-Imidazolyl)propionyl)-D-2Nal-D-Phe- Lys-NH2 | 2 | 20,7 | |
| 16 | (Propionyl)-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 22,2 | 23,77 |
| 17 | H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH2 | 1 | 21,7 | 23,08 |
| 18 | (H-Ala-His—D—2Nal-D—Phe—NH)hexan | 3 | 34,11 | 35,78 |
| 19 | H-Ala-His-D-Trp-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 14,52 | 16,7 |
| 20 | H-Ala-Ala-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 21,97 | 23,23 |
| 21 | ((Propionyl)-His-D-2Nal-D-Phe-NH)hexan | 3 | 37,17 | 39,47 |
| 22 | 6-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)hexylamin | 3 | 19,3 | 21,57 |
| 23 | H-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 15,88 | 18,25 |
| 24 | (5-Aminopentanoyl)-His-D-2Nal-D-Phe-LysNH2 | 1 | 17,8 | 19,98 |
| 25 | H-D-Lys-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 17,07 | 19,62 |
| 26 | H-Ala-His-D-2Nal-D-Tic-Lys-NH2 | 1 | 19,12 | 20,78 |
| 27 | H-D-Lys-Phe-2Nal-D-His-D-Ala-NH2 | 1 | 18,15 | 20,48 |
| 28 | (5-Aminopentanoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 20,67 | 22,45 |
| 29 | H-D-Ala-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 19,57 | 21,53 |
| 30 | (Propionyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 26,7 | 27,92 |
| 31 | H-D-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 17,83 | 20,3 |
| 32 | H-Ala-3-Pyal-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 18,15 | 20,18 |
| 33 | (n-Butyl)-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 6 | 19,55 | - |
| 34 | (n-Octyl)-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 6 | 27,88 | 24,52 |
| 35 | H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe\|/(CH2NH)Lys-NH2 | 5 | 17,97 | 20,83 |
| 36 | (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys- nh2 | 1 | 22,42 | 24,13 |
| 37 | (3-Aminofenylacetyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys- NH2 | 1 | 23,62 | 23,97 |
| 38 | ((4-Imidazolyl)acetyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys- NH2 | 1 | 20,42 | 22,22 |
| 39 | (3-(4-Imidazolyl)alayloyl)-D-2Nal-D-Phe- Lys-NH2 | 1 | 21,25 | 23,32 |
| 40 | (4-Aminofenylacetyl)-D-2Nal-D-Phe-Lysnh2 | 1 | 22,45 | — |
- 15CZ 293113 B6
| 41 | (Trans-4-aminomethylcyklohexanoyl)-D-2NalD-Phe-Lys-NH2 | 1 | 22,07 | 23,67 |
| 42 | 2-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)ethylamin | 3 | 18,6 | 20,25 |
| 43 | (2-(H-Ala-His-D-2Nal-D-PheNH)ethyl)benzen | 3 | 30,18 | 32,18 |
| 44 | 4-((H-Ala-His-D-2Nal-D-PheNH)methyl)benzylamin | 3 | 19,63 | 21,55 |
| 45 | (2R)-(H-Ala-His-D-2Nal-NH)-3fenylpropylamin | 4 | 21,55 | 23,57 |
| 46 | 2-(H-Ala-His-D-2Nal-NH)ethylamin | 3 | 25,52 | — |
| 47 | H-D-Phe-Ala-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 27,82 | 29,43 |
| 48 | H-Ala-D-Phe-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 25,62 | 27,22 |
| 49 | H-Ala-(2-aminobenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lysnh2 | 7 | 26,42 | 24,93 |
| 50 | H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 17,42 | 20,13 |
| 51 | H-Ala-His-D-lNal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 17,55 | 19,8 |
| 52 | H-Tyr-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 19,9 | 21,22 |
| 53 | (Piperidin-4-karbonyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys- NH2 | 1 | 20,4 | 22,32 |
| 54 | H-Ala-Phe(4-NH2)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 19,20 | - |
Příklad 55 ((Propionyl)D-2-naftylalanin-D-Phe-NH)hexan
Nosič s peptidem, (propionyl)D-2-naftylalanin-D-Phe-Sasrinový nosič, byl syntetizován postupem popsaným v příkladu 3 na Sasrinovém nosič o substituční kapacitě 0,96 mmol/g.
105 mg výsledného nosiče bylo amonolyzováno.
Peptid ((propionyl)D-2-naftylalanin-D-Phe-NH)hexan byl odštěpen ze 105 mg (propionyl)D2-naftylalanin-D-Phe-Sasrinového nosiče 20 h mícháním při laboratorní teplotě v 1 ml nhexylaminu. Nosič po štěpení byl odfiltrován a extrahován 1 ml DMF. Filtrát a extrakty byly spojeny a za míchání pomalu přidány k 8 ml 1 mol.l1 kys. chlorovodíkové. Vzniklá sraženina byla rozpuštěna přidáním 70 ml CH3CN a znovu sražena přídavkem 20 ml vody. Sraženina byla odfiltrována, promyta vodou a sušena. Výtěžek 12 mg.
Výsledný produkt byl charakterizován jako v příkladu 1, byla však provedena jen jedna HPLC analýza v podmínkách Bl, použitý gradient 0,1 % TFA/H2O až 90 % CH3CN/0,l % TFA/H2O, během 50 min. Zjištěný retenční čas 35,73 min.
Příklad 56 (3-Metylaminometylbenzoyl)-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-NH2
Nosič s peptidem, (3-aminometylbenzoyl)-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-(Cl-Z)-MBHAnosič, byl syntetizován postupem popsaným v příkladu 7 na MBHA-nosič o substituční kapacitě 0,72 mmol/g.
Výsledný nosič s peptidem byl metylován podle Kaljuste, K. Undén, A. Int. J. peptide Protein, Res. 42, 118-124, 1993. Nosič (300 mg) byl míchán 2 h ve směsi obsahující 8 ml DCM, 150 μΐ DIEA (dietyl-isopropylamin) a 39 mg, 4,4'-dimetoxyditylchloridu (DOD-C1). Poté byl nosič
-16CZ 293113 B6 odfiltrován, promyt DCM a DMF. Nosič s peptidem chráněným DOD skupinou byl dále míchán v 18 ml roztoku 3,7% formaldehydu v DMF, dále bylo přidáno 0,18 ml kys. octové a 180 mg NaCNBH3 a míchání pokračovalo dalších 18 n. Poté byl nosič odfiltrován a promyt DCM a DMF. DOD chránící skupina byla odštěpena reakcí s 2 x 3 DCM/TFA (1:1), reakční doba 5 min + 30 min, nosič promyt DMC a sušen ve vakuu.
Výsledný N-metylovaný peptid byl odštěpen s 370 mg nosiče postupem uvedeným v příkladu 7 a purifíkován a charakterizován jako v příkladu 1. Výtěžek 17,3 mg.
RP-HPLC analýzou velučních podmínkách Al a Bl byly zjištěny retenční časy 22,83 min, respektive 24,60 min.
Příklad 57 (3-Dimetylaminometylbenzoyl)-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-NH2
Nosič s peptidem, (3-aminometylbenzoyl)-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-(Cl-Z)-MBHA nosič, byl syntetizován postupem popsaným v příkladu 7 na MBHA-nosič o substituční kapacitě 0,72 mmol/g.
300 mg výsledného nosiče s peptidem bylo mícháno v 20 ml 1% kys. octové v DMF a 45 μΐ roztoku 3,7% formaldehydu v DMF; dále bylo přidáno 55 mg NaCNBH3 a míchání pokračovalo dalších 18 h. Poté byl nosič odfiltrován a promyt DMF, DCM/MeOH (6:4) a DCM.
Výsledná směs Ν,Ν-dimetylovaných peptidů byla odštěpena z 631 mg výsledného nosiče postupem uvedeným v příkladu 7 a purifikována a charakterizována jako v příkladu 1. Výtěžek 8,58 mg.
RP-HPLC analýzou velučních podmínkách Al a Bl byly zjištěny retenční časy 31,58min, respektive 33,00 min.
Příklad 58 (3-Amino-3-metylbutanoyl)-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-NH2
Nosič s peptidem, H-D-2-nafitylalanin-D-Phe-Lys-(Boc)-Rink nosič byl syntetizován postupem popsaným v příkladu 1 na 2 g 4-((2',4'-dimethoxyfenyl)-(Fmoc-amino)metyl-fenoxynosiče (Rink nosič) (Novabiochem, Bad Soden, Německo; katalogové číslo 01-64-0013) o substituční kapacitě 0,39 mmol/lg.
500 mg výsledného nosiče s peptidem (0,15 mmol) bylo suspendováno v 4 ml DCM/MeOH(l:l). Ke směsi byl přidán trietylamin (42 μΐ, 0,3 mmol) a po ochlazení na 0 °C a stálého míchání 2,2-dimetyl-4-oxo-azetidin-l-sulfonyl-chlorid (31 mg; 0,158 mmol). Míchání pokračovalo ještě 20 min při 0 °C a dalších 90 min při laboratorní teplotě. Poté byl nosič odfiltrován, promyt DCM/MeOH (6:4) a sušen ve vakuu. Surový peptid byl odštěpen z nosiče a purifíkován postupem popsaným v příkladu 1. Výtěžek 41,81 mg.
RP-HPLC analýzou velučních podmínkách Al a Bl byly zjištěny retenční časy 22,35 min, respektive 22,95 min.
-17CZ 293113 B6
Příklad 59 (2S)-((3-Aminometylbenzoyl)\|/(CH2NH)D-2-naftylanin-D-Phe-NH)-6-aminohexanol
Nosič s peptidem, H-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys(Boc)-Sasrinový nosič, byl připraven postupem popsaným v příkladu 3 a 980 mg, Sasrinového nosiče o substituční kapacitě 0,87 mmol/g.
Nosič s peptidem (1,4 g) byl redukčně alkylován Boc-3-aminomethylbenzaldehydem a peptid byl odštěpen z 1,0 g výsledného nosiče. Polovina surové směsi produktu byla purifikována postupem popsaným v příkladu 5. Výtěžek 18,46 mg.
RP-HPLC analýzou velučních podmínkách AI a B1 byly zjištěny retenční časy 14,78 min, respektive 17,40 min.
Příklad 60 (2-Aminometylbenzoyl)-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-NH2
Nosič s peptidem, H-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-(Boc)-Rink nosič, byl syntetizován postupem popsaným v příkladu 1 na 2 g 4-((2',4'-dimethoxyfenyl)-(Fmoc-amino)metyl-fenoxynosiče (Rink nosič) (Novabiochem, Bad Soden, Německo; katalogové číslo 01-64-0013) o substituční kapacitě 0,39 mmol/g.
500 mg výsledného nosiče s peptidem (0,096 mmol) bylo mícháno 18 ve směsi obsahující 10 ml DMF, 54 mg, ftaloyl-2-aminometyl-benzoové kyseliny (0,192 mmol), 182 mg, HBTU (0,480 mmol) a 164 μΐ DIEA (0,96 mmol). Poté byl nosič promyt DMF, DCM/meOH (6:4) a DCM a sušen ve vakuu. (Ftaloyl-2-aminometylbenzoyl)-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys--NH2 byl odštěpen z 290 mg nosiče směsí obsahující 3 ml TFA, 225 mg fenolu, 75 μΐ etandithiolu, 150 μΐ thioanisolu a 150 μΐ vody, za stálého míchání, 180 min. Směs po štěpení byla odfiltrována, nosič promyt 1 ml TFA a filtrát zahuštěn v proudu dusíku na 1 ml. Z výsledného oleje byl surový peptid vysrážen dietyletherem (50 ml) a promyt dietyletherem (3 x 50 ml). Sraženina byla rozpouštěna ve vodě (50 ml) a lyofílizována. Výsledný prášek byl pídí míchán s 0,5 ml hydrátu hydrazinu v 5 ml etanolu, 6 h při 70 °C, pak zředěn vodou (50 ml) a lyofilizován.
Lyofilizát byl rozpuštěn ve směsi obsahující 2 ml kys. octové, 2 ml etanolu a 100 ml vody, a purifíkován postupem popsaným v příkladu 1. Výtěžek 9,43 mg.
RP-HPLC analýzou velučních podmínkách AI a B1 byly zjištěny retenční časy 23,22min, respektive 25,05 min.
Příklad 61
H-Aib-Hisψ(CH2NH)D-2-naftylalanm-D-Phe-Lys-OH
Peptid byl syntetizován postupem popsaným v příkladu 5, s tím rozdílem, že byl použit Sasrinový nosič (1 050 mg) (nosič funkcionalizovaný 2-methoxy-4-alkoxybenzylalkoholem (Bachem, Budendorf, Švýcarsko; katalogové číslo D-1295) o substituční kapacitě 0,87 mmol/g. První aminokyselina byla navázána k nosiči reakcí katalyzovanou 4-dimetylamino-pyridinem vycházející z předem připraveného symetrického anhydridu, zbylé volné -OH skupiny na nosiči byly benzoylovány (anhydridem kys. benzoové). Po odštěpení peptidů z 752 mg nosiče a purifikaci 7/10 surové směsi produktu postupem popsaným v příkladu 1, bylo získáno 36,76 mg výsledného produktu.
-18CZ 293113 B6
Výsledný produkt byl charakterizován jako v příkladu 1. RP-HPLC analýzou velučních podmínkách Al a B1 byly zjištěny retenční časy 13,90 min, respektive 17,42 min.
Příklad 62
H-Aib-His-N-Me-D-2-naftylalnin-D-Phe-Lys-NH2
Nosič speptidem, H-N-Me-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-(Cl-Z)-MBHA-nosič, byl syntetizován postupem popsaným v příkladu 56 na MBHA-nosiči o substituční kapacitě 0,72 mmol/g.
458 mg připraveného nosiče s peptidem bylo dále použito pro syntézu Η-Kyselina aminoizobutanová-His(Bom)-N-Me-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-(Cl-Z)-MBHA-nosiče kondenzací s Boc-His(Bom)-OH a BOC-Aib-OH. N-metylovaný peptid byl odštěpen z 469 mg výsledného nosiče. Polovina surové směsi produktů byla purifikována a charakterizována postupem popsaným v příkladu 7.
Výtěžek 23,5 mg.
RP-HPLC analýzou velučních podmínkách Al a B1 byly zjištěni retenční časy 17,62 min, respektive 19,95 min.
Příklad 63 (Furfuryl)-Aib-His-D-2-nartylalanin-D-Phe-Lys-NH2
Nosič s peptidem, H-Aib-His(Trt)-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys(Boc)-Rink nosič, byl syntetizován postupem popsaným v příkladu 1 a 4-((2',4'-dimethoxyfenyl)-(Fmoc-amino)metylfenoxy-nosiči (Rinl nosič) (Novabiochem, ad Soden, Německo; katalogové číslo 01-64-0013) o substituční kapacitě 0,43 mmol/g. 300 mg výsledného nosiče s peptidem bylo mícháno ve směsi 5 ml 1% kys. octové vDMF a 410 μΐ furan-2-aldehydu. Dále bylo přidáno 231 mg, NaCNBH3 (85 %) po 15 min a po 180 min. Míchání pokračovalo dalších 18 h. Poté byl nosič odfiltrován a promyt DMF, DCM/MeOH (6:4) a DCM.
N-alkylovaný peptid byl odštěpen z 319 mg výsledného nosiče, purifikován a charakterizován postupem uvedeným v příkladu 1. Výtěžek 44,8 mg.
RP-HPLC analýzou velučních podmínkách Al a B1 byly zjištěny retenční časy 19,45 min, respektive 22,23 min.
Příklad 64
N,N-di(2R-Hydroxypropyl)-3-aminometylbenzoyl)-D-2-nafiyIalanin-D-Phe-Lys-NH2
Nosič s peptidem, (3-aminometylbenzoyl)-D-2-naftylalanin-D-Phe-Lys-(Cl-Z)-MBHA nosič, byl syntetizován postupem popsaným v příkladu 7 na 4-metylbenzydiylaminovém nosiči (MBHA) (Bissendorf Biochemicals, Hannover, Německo, katalogové číslo: RMIS50) o substituční kapacitě 0,72 mmol/g.
500 mg výsledného nosiče s peptidem bylo mícháno ve směsi obsahující 12,5 ml 1% kys. octové v DMF a 410 μΐ 2(R)-(tetrahydropyran-2(R,S)-yloxy)propanolu. Dále bylo přidáno 213 mg
-19CZ 293113 B6
NáCNBH3 (85 %) po 5 min. Míchání pokračovalo dalších 18 h. Poté byl nosič odfiltrován a promyt DMF, DCM/MeOH (6:4) a DCM.
Ν,Ν-dialkylovaný peptid byl odštěpen z 490 mg výsledného nosiče, purifikován a charakterizo5 ván postupem popsaným v příkladu 7. Výtěžek 20,72 mg.
RP-HPLC analýzou velučních podmínkách Al a B1 byly zjištěny retenční časy 23,40 min, respektive 25,33 min.
Příklady 65-110
| Př. č. | Peptid | Připraveno dle př. č. | RP-HPLC ret. časy pro Al /př.l/ | RP-HPLC ret. časy pro B1 /př.l/ |
| 65 | H-Ala-N-Me-(2-aminobenzoyl)-D-2Nal-D- Phe-Lys-NH2 | 7 | 24,47 | 26,27 |
| 66 | (4-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lysnh2 | 1 | 22,22 | 23,5 |
| 67 | H-His-Alka-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 19,90 | 21,45 |
| 68 | (2S)-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)-l ,6diaminohexan | 8 | 17,05 | 19,07 |
| 69 | 4-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)butylamin | 3 | 18,65 | 20,08 |
| 70 | 3-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)propylamin | 3 | 18,42 | 19,80 |
| 71 | (3-Aminomethylbenzoyl)-D-hPhe-D-Phe-Lysnh2 | 7 | 20,33 | 21,95 |
| 72 | (3-Aminomethylbenzoyl)\|/(CH2NH)D-2Nal-D- Phe-Lys-NH2 | 5 | 14,17 | 17,23 |
| 73 | (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-hPhe-Lysnh2 | 7 | 25,30 | 26,58 |
| 74 | (3-Amino-3-methylbutanoyl)-His-D-2Nal-D- Phe-Lys-NH2 | 58 | 18,12 | 20,20 |
| 75 | (3-aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-N-Bzl-Gly- Lys-NH2 | 7 | 25,33 | 26,70 |
| 76 | (2S)-((3-Aminoniethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe- NH)-6-aminohexanol | 4 | 22,95 | 24,32 |
| 77 | (3-Amiomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Thial-Lysnh2 | 7 | 22,13 | 23,23 |
| 78 | (2S)-(H-Aib-Hisv(CH2NH)D-2Nal-D-phe- NH)-6-aminohexanol | 58 | 12,83 | 17,27 |
| 79 | (3-aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-3Pyal-Lys- nh2 | 1 | 15,10 | 16,87 |
| 80 | (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe(4-F}Lys-NH2 | 7 | 23,40 | 24,63 |
| 81 | (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe(4OMe)-Lys-NH2 | 7 | 22,50 | 23,90 |
| 82 | 2-(H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-NH)ethan | 3 | 18,30 | 20,47 |
| 83 | H-aib-Phe-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 29,25 | 30,55 |
| 84 | 2-(H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-NH-(l-methyl- 2-pyrrolidinyl)ethan | 3 | 18,70 | 20,80 |
-20CZ 293113 B6
| 85 | 2-(H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-NH-(l-methyl- 2-pyrrolidinyl)ethan | 3 | 19,20 | 20,83 |
| 86 | (3-aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-N-Me-D-Phe- Lys-NH2 | 1 | 26,78 | 27,88 |
| 87 | H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Gly-NH2 | 1 | 20,48 | 22,23 |
| 88 | H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Ala-NH2 | 1 | 21,65 | 23,38 |
| 89 | H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Om-NH2 | 1 | 18,43 | 20,05 |
| 90 | (5-Aminomethylthienyl-2-karbonyl)-D-2Nal-I>- Phe-Lys-NH2 | 1 | 22,32 | 23,65 |
| 91 | H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-D-Lys-NH2 | 1 | 18,50 | 20,00 |
| 92 | H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Dab-NH2 | 1 | 17,75 | 19,48 |
| 93 | H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe\y(CH2NH)Lys--NH2 | 5 | 18,57 | 20,62 |
| 94 | H-Aib-his-D-2Nal-D-Phe-N-Me-Lys-NH2 | 62 | 18,03 | 20,60 |
| 95 | (3-aminomethylthienyl-2-karbonyl)-4-2Nal-D- Phe-Lys-NH2 | 1 | 23,23 | 24,78 |
| 96 | H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 21,78 | 23,53 |
| 97 | H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-N(Me)2 | 3 | 18,70 | 21,07 |
| 98 | (3-Aminomethylbenzoyl)-D-lNal-D-Phe-Lysnh2 | 1 | 22,67 | 24,23 |
| 99 | H-Aib-His-D-2Nal-D-Trp-Lys-NH2 | 1 | 18,17 | 20,40 |
| 100 | (2-Pyridylmethyl)-Aib-His-D-2Nal-D-Phe- Lys-NH2 | 63 | 19,07 | 21,73 |
| 101 | H-Aib-(3-Ammomethylbenzoyl)-D-2Nal-D- Phe-Lys-NH2 | 7 | 23,95 | 25,38 |
| 102 | H-Aib-3Pyal-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 1 | 18,35 | 20,38 |
| 103 | (3R)-Piperidinkarbonyl)-D-2Nal-D-Phe-LysNH2 | 1 | 21,52 | 22,97 |
| 104 | (2-{H-Aib-His-D-2Nal-NH)ethyl)benzen | 3 | 25,55 | 27,85 |
| 105 | (2R-hydroxypropyl)-Aib-His-D-2Nal-D-Phe- Lys-NH2 | 64 | 18,15 | 20,28 |
| 106 | (3-aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D- Phev|/(CH2NH)Lys-NH2= | 5 | 22,00 | 23,95 |
| 107 | (3-aminomethylbenzoyl)-N-Me-D-2Nal-D-Phe- Lys-NH2 | 62 | 23,27 | 24,72 |
| 108 | (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-N- Me-Lys-NH2 | 67 | 22,60 | 23,98 |
| 109 | H-D-Thr-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 7 | 17,75 | 19,83 |
| 110 | H-Hyp-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 | 7 | 17,58 | 19,37 |
Vzorové struktury sloučenin předkládaného vynálezu:
-21 CZ 293113 B6
N,N-Di-(2R-Hydroxypropyl)-(3“aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
3-(4-Imidazolyl)propionyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
H-Ala-3Pyal-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
-22CZ 293113 B6 (Traňs-4-aminomethylcyklohexaiioyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
H-Ala-(2-aminobenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
(3R)-Piperidinkarbonyl-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
-23CZ 293113 B6
H-Ala-N-Me-(2-aminobenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
2-(H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-NH)(l-methyl-2-pyiTolidinyl)ethan
-24CZ 293113 B6 (5-Aminomethylthienyl-2-karbóriyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
(3-Aminomethyl-thienyl-2-karbonyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
(3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-N-(fenethyl)-Gly-Lys-NH2
Příklad 116
Zkoumání účinků různých sekretů růstového hormonu byl věnován test provedený in vitro na 10 krysích hypofyzámích buňkách. Směsné hypofyzální buněčné kultury byly izolovány z předního laloku hypofyzy krysích samců a kultivovány 3 dny. Po promytí byly buňky stimulovány 15 min a v kultivačním médiu stanovováno množství uvolněného růstového hormonu.
Hypofyzámí buňky byly izolovány modifikovaným postupem dle O. Sartor et al., Endocrinology 15 116, 1985, pp. 952-957. Samci krys o hmotnosti 250 g byly dekapitováni a byly odebrány hypofyzy. Neurointermediámí laloky byly odstraněny a zbytek byl suspendován v Grayově médiu doplněném 0,25 % glykózy, dvěma neesenciálními aminokyselinami a 1 % BSA (izolační pufr). Žlázy byly nařezány na malé kousky a přeneseny do nádoby obsahující 3 ml izolačního pufru, 11 mg trypsinu a 1 000 pg DNázy a směs byla inkubována při 37 °C, 35 min, 95 % O2,
-25CZ 293113 B6 ot/min. Fragmenty byly 3 x promyty sedimentací v izolačním pufru a buňky odsáty Pasterovou pipetou. Po dispergování byly buňky přefiltrovány přes nylonový filtr (160 pm) kvůli odstranění neztrávené tkáně. Buňky byly 3 x promyty izolačním pufrem doplněným o trypsinový inhibitor ((0,75 mg/g) a resuspendovány v kultivačním médiu (DMEM doplněný 25 mmol
HEPES, 4 mmol glutaminu, 0,75 % hydrogenuhličitanu sodného, 2,5 % FCS, 3 % koňského séra, nmol T3 a 40 pg/l dexametasonu) při koncentraci 2 x 105 buněk/ml. Buňky byly vneseny do mikrotitračních destiček, 200 μΐ/jamku a kultivovány 3 dny při 37 °C a 8 % CO2.
Po kultivaci byly buňky promyty 2 x stimulačním pufrem (HBSS doplněný 1 % BSA, 0,25 % io D-glukózy a 25 mmol HEPES) a preinkubovány 1 h. Poté byl starý pufr odstraněn a přidán nový stimulační pufr obsahující peptid, destičky byly inkubovány 15 min při 37 °C a 5% CO2.
V odebraném médiu bylo stanoveno množství krysího růstového hormonu scintilačním testem (scintillation proximity assay - SPA), jak je uvedeno dále (SPA, proveden podle US 4 568 649, Hart and Greenwalt, mol, Immunol., 16, 1979, pp. 265-269, nebo Udenfriend et al., Proč. Nati.
Acad. Sci. USA 82, 1985, pp. 8672-8676).
Stanovení krysího růstového hormonu bylo provedeno na Optiplates (96-ti jamkové destičky) vhodné pro přímé počítání na Pckards TopCount (β-scintilační počítadlo).
Provedení testu:
μΐ pufru μΐ vzorku (inkubovaného ve stimulačním pufr) μΐ l25I-rGH (krysí růstový hormon)
50 μΐ králičí anti-rGH μΐ SPA činidla (králičí anti-GH protilátka)
Destičky byly uzavřeny umístěny do třepačky na 30 min, po 10 h inkubace byly ponechány sedimentovat při 10 až 15 °C a proveden odečet.
V SPA, rGH navázaný na králičí anti-GH protilátku (primární protilátka) reaguje s další protilátkou navázanou na fluomikrosféry (SPA Typ Π RIA, Amersham). Veškerý radioizotopicky značený rGH vázaný na primární protilátku se naváže na fluomikrosféry a svítí. Odečet na β-scintilačním počítadle umožní stanovit množství radioizotopicky značeného rGH. Množství radioizotopicky značeného rGH navázaného na fluomikrosféry klesá se zvyšujícím se obsahem rGH ve vzorku.
Průmyslová využitelnost
Předkládaný vynález přináší nové peptidové deriváty, které stimulují uvolňování růstového hormonu. Jsou využitelné při léčbě řady zdravotních poruch souvisejících s nedostatkem růstového hormonu.
Claims (6)
1. Peptidový derivát vybraný ze skupiny zahrnující:
H-Ala-Hisψ(CH2NH)D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-Ala-Ala-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-(4-Imidazolyl)propionyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2) H-D-Lys-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-5Apent-his-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-D-Ala-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-5Apent-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (n-Propyl)-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-Ala-3Pya-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-Ala-Phe(4-NH2)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-D-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (2-(4-Imidazolyl)acetyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3J4-Imidazolyl)akryloyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-Aminofenylacetyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (4-Aminofenylacetyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-Aminokrotonoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (4-Piperidino-karboxyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH2 (H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)hexan 6-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)hexylamin 5-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)pentylamin H-Ala-His-D-2Nal-D-Phev(CH2NH)Lys-NH2 H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-OH (2S)-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)-6-aminohexanol (2-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)ethyl)benzen 2-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)ethylamin 4-((H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)methyl)benzylamin H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Lys(mantosyl)-NH2 H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Phe-NH2 H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-D-Phe-NH2 H-Ala-His-D-Phe-D-Phe-Lys-NH2 H-Ala-His-D-Trp-D-Phe-Lys-NH2 H-His-D-2Nal-D-Trp-Lys-NH2 H-Ala-His-D-lNal-D-Phe-Lys-NH2 H-Ala-Phe-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-Lys(maltosyl)-NH2
-27CZ 293113 B6 (2R)-\H-Ala-His-D-2Nal-D-Phé-Lys-NH)-3-fenylpropylamin
H-Ala-N-Me-(2-aminobenzoyl)-D-Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-MethylaminomethylbenzoyI)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (4-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
5 H-His-Ala-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
4—(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)butylamin
3-(H-Ala-His-D-2Nal-D-Phe-NH)propylamin (3-Dimethylaminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-Amino-3-methylbutanoyl)-D-hPhe-D-Phe-Lys-NH2
10 (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-hPhe-Lys-NH2 (3-Aminomethylbenzoy^(CH2NH)D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-hPhe-Lys-NH2 (3-Amino-3-methylbutanoyl)-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-N-Bzl-Gly-Lys-NH2
15 (2S)-(3-ammomethylbenzoyl)y(CH2NH)D-2Nal-D-Phe-NH)-6-aminohexanol (2S)-(3-aniinomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-NH)-6-aminohexanol (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Thial-Lys-NH2 (2SHH-Aib-HisV(CH2NH)D-2Nal-D-Phe-NH)-6-aininohexanol (3-Aminomethylbenzoyl)-E>-2Nal-D-3Pyal-Lys-NH2
20 (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe(4-F)-Lys-NH2 (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe(4-OMe)-Lys-NH2 (2-Aminomethylfenylacetyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (2-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 2-(H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-NH)-(4-pyridyl)ethan
25 H-Aib-Phe-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
2-(H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-NH)-(l-inethyl-2-pynOlidinyl)ethan 2-(H-Aib-His-E>-2Nal-D-Phe-NH)-(4-pyridyl)ethan Η-ΑίΕ-Ηί5ψ(€Η2ΝΗ)-Β-2Ν31-Β-ΡΗ6-Εγ5-ΟΗ (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2
30 H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Gly-NH2
H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Ala-NH2
H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Orn-NH2 (5-Aminomethylthienyl-2-karbonyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-D-Lys-NH2
35 H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Dab-NH2
H-Aib-His-D-2Nal-D-Phev(CH2NH)-Lys-NH2
H-Aib-His-D-Me-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-N-Me-Lys-NH2 (3-Ammomethylthienyl-2-karbonyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
40 H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2
H-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-N(Me)2 (3R)-PiperidinkarbonyI-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
-28CZ 293113 B6 (3S)-Piperidinkarbonyl-D-2Nal-jD-Phe-Lys-NH2 (3-Aminomethylbehzoyl)-D-lNal-D-Phe-Lys-NH2
H-Aib-his-D-2Nal-D-Trp-Lys-NH2 (Furfuryl)-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
5 (2-Pyridylmethyl)-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
H-Aib-(3-aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
H-Aib-3-Pyal-D-2Nal-D-phe-Lys-NH2 (3S)-Piperidinkarbonyl-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3R)-Piperidinkarbonyl-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
10 (2-(H-Aib-his-D-Nal-NH)-ethyl)benzen
N,N-di(2R-Hydroxypropyl)-(3-aininomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (2R-Hydroxypropyl)-Aib-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2 (3-Aminomethylbenzoyl)-I>-2Nal-D-Phe\p(CH2NH)-Lys--NH2 (3-Aminomethylbenzoyl)-N-Me-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
15 (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-D-Phe-N-Me-Lys-NH2
H-D-Thr-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
H-Aib-His-D-2Nal-N-(fenethyl)-Gly-Lys-NH2 (3-Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-N-(fenethyl)--Gly-Lys-NH2 H-Hyp-His-D-2Nal-D-Phe-Lys-NH2
20 H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-(fenethyl>-Gly-Lys-NH2
H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2
Η-ΑΐΙ>-Ηί3-Ε>-2Νη1-ϋ-ΡΗεψ(εΗ2Ν(Μ6)^3-ΝΗ2
3-(H-Aib-His-D-2Nal-Me-D-Phe-NH)morfolinopropan
2- (H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-( 1 -methyl-2-pyrrolidinyl)ethan
25 (3R)-Piperidinkarbonyl-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2
3- ((Aminomethylbenzoyl)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)morfolinopropan 2-(H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(l-methyl-2-pyiTolidinyl)ethan
2- ((3R)-Piperidinkarbonyl-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(l-methyl-2-pyrrolidinyl)ethan)
30 2-((3-Aminomethylbenzoyl)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(l-niethyl-2-pyrrolidinyl)ethan
3- (H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)morfolinopropan
3-((3R)-Piperidinkarbonyl-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)morfolinopropan
3-((3-Aminomethylbenzoyl)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)morfolinopropan
35 H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Hyp-NH2
2-((3-Aminoinethylbenzoyl)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(l-methyl-2-pyrrolidinyl)ethan
2-((3R)-Piperidinkarbonyl-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(l-methyl-2-pyrrolidmyl)ethan kde:
-29CZ 293113 B6 hPhe
N-Bzl-Gly
4-F
4-OMe
Om Dab Hyp Tic homo-fenylalanin
N-benzylglycin
4-fluor
4-methoxy omitin kys. 2,4-diaminomáselná hydroxyprolin
1,2,3,4-tetrahydroisochinolin-3-karboxylová kys.
2. Farmaceutický přípravek, vyznačující se tím, že jako účinnou složku obsahuje peptidový derivát podle nároku 1 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.
3. Farmaceutický přípravek podle nároku 2, vyznačující se tím, že v jednotkové dávkové formě obsahuje 10 až 200 mg peptidového derivátu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli.
4. Farmaceutický přípravek stimulující uvolňování růstového hormonu z hypofýzy, vyznačující se tím, že jako účinnou složku obsahuje peptidový derivát podle nároku 1 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.
5. Peptidový derivát podle nároku 1 pro použití jako léčivo pro léčení zdravotních poruch vyplývajících z nedostatku růstového hormonu.
6. Použití peptidového derivátu podle nároku 1 nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro přípravu léčiva na stimulaci uvolňování růstového hormonu z hypofýzy.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DK143993A DK143993D0 (cs) | 1993-12-23 | 1993-12-23 | |
| DK12194 | 1994-01-28 | ||
| DK119194 | 1994-10-14 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ183496A3 CZ183496A3 (en) | 1997-02-12 |
| CZ293113B6 true CZ293113B6 (cs) | 2004-02-18 |
Family
ID=27220421
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19961834A CZ293113B6 (cs) | 1993-12-23 | 1994-12-22 | Peptidový derivát |
Country Status (27)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5767085A (cs) |
| EP (1) | EP0736039B1 (cs) |
| JP (1) | JP3181918B2 (cs) |
| KR (1) | KR100354897B1 (cs) |
| CN (1) | CN1052731C (cs) |
| AT (1) | ATE197158T1 (cs) |
| AU (1) | AU689181B2 (cs) |
| BR (1) | BR9408377A (cs) |
| CA (1) | CA2179597A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ293113B6 (cs) |
| DE (1) | DE69426206T2 (cs) |
| DK (1) | DK0736039T3 (cs) |
| ES (1) | ES2153469T3 (cs) |
| FI (1) | FI962584A0 (cs) |
| GR (1) | GR3035150T3 (cs) |
| HU (1) | HU224345B1 (cs) |
| IL (1) | IL112112A (cs) |
| MX (1) | MX9500072A (cs) |
| NO (1) | NO315561B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ277486A (cs) |
| PL (1) | PL181280B1 (cs) |
| PT (1) | PT736039E (cs) |
| RO (1) | RO115635B1 (cs) |
| SG (1) | SG55069A1 (cs) |
| SK (1) | SK281963B6 (cs) |
| UA (1) | UA42747C2 (cs) |
| WO (1) | WO1995017423A1 (cs) |
Families Citing this family (56)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH09505601A (ja) * | 1993-11-24 | 1997-06-03 | メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド | インドリル基含有化合物類および成長ホルモン放出を促進するためのそれらの使用 |
| ATE202785T1 (de) * | 1993-12-23 | 2001-07-15 | Novo Nordisk As | Verbindungen mit wachstumshormon-freisetzenden eigenschaften |
| US20020111461A1 (en) * | 1999-05-21 | 2002-08-15 | Todd C. Somers | Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues |
| US5798337A (en) * | 1994-11-16 | 1998-08-25 | Genentech, Inc. | Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues |
| PL186511B1 (pl) | 1995-01-27 | 2004-01-30 | Novo Nordisk As | Nowe związki peptydowe, kompozycje farmaceutycznedo pobudzania uwalniania hormonu wzrostu i zastosowanie tych związków do wytwarzania leku do pobudzania uwalniania hormonu wzrostu |
| BR9608909A (pt) * | 1995-06-22 | 1999-03-02 | Novo Nordisk As | Composto composição farmacêutica processos para estimular a liberação do hormônio do crescimento da patuitária e aumentar a velocidade e extensão do crescimento dos animais para aumentar a produção de leite ou lã de animais ou para para doenças e uso do composto |
| CA2240186A1 (en) | 1995-12-13 | 1997-06-19 | Merck & Co., Inc. | Assays for growth hormone secretagogue receptors |
| US6531314B1 (en) | 1996-12-10 | 2003-03-11 | Merck & Co., Inc. | Growth hormone secretagogue receptor family |
| GB2308362A (en) * | 1995-12-19 | 1997-06-25 | Lilly Industries Ltd | Pharmaceutical indole derivatives |
| CZ195098A3 (cs) * | 1995-12-22 | 1998-10-14 | Novo Nordisk A/S | Sloučeniny uvolňující růstový hormon |
| US6451970B1 (en) | 1996-02-21 | 2002-09-17 | Novo Nordisk A/S | Peptide derivatives |
| US5919777A (en) * | 1996-04-24 | 1999-07-06 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
| PL329413A1 (en) * | 1996-04-24 | 1999-03-29 | Novo Nordisk As | Chemical compounds exhibiting properties capable to cause growth hormone release |
| US5922770A (en) | 1996-07-22 | 1999-07-13 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
| WO1998008492A1 (en) * | 1996-08-29 | 1998-03-05 | Novo Nordisk A/S | Transdermal delivery of peptides |
| US6420518B1 (en) | 1997-04-04 | 2002-07-16 | Genetech, Inc. | Insulin-like growth factor agonist molecules |
| US6121416A (en) | 1997-04-04 | 2000-09-19 | Genentech, Inc. | Insulin-like growth factor agonist molecules |
| US6127341A (en) * | 1997-06-20 | 2000-10-03 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
| WO1998058950A1 (en) | 1997-06-20 | 1998-12-30 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
| AU766305B2 (en) | 1998-01-16 | 2003-10-16 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
| US6919315B1 (en) | 1998-06-30 | 2005-07-19 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
| US6682908B1 (en) | 1998-07-10 | 2004-01-27 | Merck & Co., Inc. | Mouse growth hormone secretagogue receptor |
| JP2002520011A (ja) | 1998-07-13 | 2002-07-09 | メルク・アンド・カンパニー・インコーポレーテッド | 成長ホルモン分泌促進物質関連受容体および核酸 |
| WO2000009538A2 (en) | 1998-08-10 | 2000-02-24 | Merck & Co., Inc. | Canine growth hormone secretagogue receptor |
| US6696063B1 (en) * | 1998-12-30 | 2004-02-24 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | Treatment of HIV-associated dysmorphia/dysmetabolic syndrome (HADDS) with or without lipodystrophy |
| PT1141014E (pt) | 1999-01-06 | 2005-04-29 | Genentech Inc | Variante mutante do factor de crescimento semelhante a insulina (igf-i) |
| KR100699404B1 (ko) * | 1999-02-18 | 2007-03-23 | 가켄 세야쿠 가부시키가이샤 | 성장 호르몬 분비촉진제로서의 신규 아미드 유도체 |
| AU4911500A (en) * | 1999-06-04 | 2000-12-28 | Novo Nordisk A/S | Compositions for the treatment of the catabolic state of prolonged critical illness |
| EP1282437B1 (en) | 2000-05-16 | 2008-03-19 | Genentech, Inc. | Treatment of cartilage disorders |
| DE60140285D1 (de) | 2000-05-31 | 2009-12-10 | Pfizer Prod Inc | Verwendung von Wachstumshormonsekretagoga zur Förderung der Beweglichkeit des Verdauungstrakts |
| TWI331922B (en) | 2002-08-09 | 2010-10-21 | Ipsen Pharma Sas | Growth hormone releasing peptides |
| KR20060012008A (ko) * | 2003-05-19 | 2006-02-06 | 워너-램버트 캄파니 엘엘씨 | 제어된 입자 크기를 갖는 산화 티타늄을 함유하는 경질젤라틴 캡슐 및 그의 제조방법 |
| US7476653B2 (en) | 2003-06-18 | 2009-01-13 | Tranzyme Pharma, Inc. | Macrocyclic modulators of the ghrelin receptor |
| CA2538342C (en) | 2003-09-12 | 2013-01-08 | Tercica, Inc. | Methods for treatment of insulin-like growth factor-1 (igf-1) deficiency |
| WO2005027913A1 (en) * | 2003-09-19 | 2005-03-31 | Pfizer Products Inc. | Pharmaceutical compositions and methods comprising combinations of 2-alkylidene-19-nor-vitamin d derivatives and a growth hormone secretagogue |
| JP2007531769A (ja) * | 2004-03-30 | 2007-11-08 | サファイア セラピューティクス インコーポレイテッド | 成長ホルモン分泌促進薬を使用したｃ−反応性蛋白質の低減方法 |
| UA87854C2 (en) | 2004-06-07 | 2009-08-25 | Мерк Энд Ко., Инк. | N-(2-benzyl)-2-phenylbutanamides as androgen receptor modulators |
| AU2005272598B2 (en) * | 2004-08-12 | 2011-11-17 | Helsinn Therapeutics (U.S.), Inc. | Method of stimulating the motility of the gastrointestinal system using growth hormone secretagogues |
| CU23558A1 (es) | 2006-02-28 | 2010-07-20 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | Compuestos análogos a los secretagogos peptidicos de la hormona de crecimiento |
| EP2021015A2 (en) * | 2006-04-28 | 2009-02-11 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Ghrelin/growth hormone releasing peptide/growth hormone secretatogue receptor antagonists and uses thereof |
| ES2602789T3 (es) | 2007-02-09 | 2017-02-22 | Ocera Therapeutics, Inc. | Productos intermedios conectores para la síntesis de moduladores macrocíclicos del receptor de la grelina |
| WO2008100448A2 (en) * | 2007-02-13 | 2008-08-21 | Helsinn Therapeutics (U.S.), Inc. | Method of treating cell proliferative disorders using growth hormone secretagogues |
| TWI429436B (zh) * | 2007-04-10 | 2014-03-11 | Helsinn Therapeutics Us Inc | 使用生長激素促泌素治療或預防嘔吐之方法 |
| WO2008134828A2 (en) | 2007-05-04 | 2008-11-13 | Katholieke Universiteit Leuven | Tissue degeneration protection |
| US8466151B2 (en) | 2007-12-26 | 2013-06-18 | Critical Outcome Technologies, Inc. | Compounds and method for treatment of cancer |
| EP2318406B1 (en) | 2008-07-17 | 2016-01-27 | Critical Outcome Technologies, Inc. | Thiosemicarbazone inhibitor compounds and cancer treatment methods |
| UA105657C2 (uk) | 2009-02-27 | 2014-06-10 | Хелсінн Терапьютікс (Ю.Ес.), Інк. | Поліпшені способи лікування мігрені на основі анамореліну |
| US9724381B2 (en) | 2009-05-12 | 2017-08-08 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Methods of inhibiting the ghrelin/growth hormone secretatogue receptor pathway and uses thereof |
| BRPI1012931A2 (pt) * | 2009-06-12 | 2018-01-30 | Helsinn Therapeutics Us Inc | soluções para infusão e injeção de diacetato de ipamorelina |
| WO2011120153A1 (en) | 2010-04-01 | 2011-10-06 | Critical Outcome Technologies Inc. | Compounds and method for treatment of hiv |
| WO2013190520A2 (en) | 2012-06-22 | 2013-12-27 | The General Hospital Corporation | Gh-releasing agents in the treatment of vascular stenosis and associated conditions |
| US9119832B2 (en) | 2014-02-05 | 2015-09-01 | The Regents Of The University Of California | Methods of treating mild brain injury |
| WO2015181676A1 (en) | 2014-05-30 | 2015-12-03 | Pfizer Inc. | Carbonitrile derivatives as selective androgen receptor modulators |
| WO2017075535A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | Oxeia Biopharmaceuticals, Inc. | Methods of treating neurodegenerative conditions |
| EP3601245A1 (en) | 2017-03-28 | 2020-02-05 | The Regents of The University of Michigan | Small molecule dcn1 inhibitors and therapeutic methods using the same |
| WO2023275715A1 (en) | 2021-06-30 | 2023-01-05 | Pfizer Inc. | Metabolites of selective androgen receptor modulators |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4223019A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4223020A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4228156A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4410512A (en) * | 1981-12-28 | 1983-10-18 | Beckman Instruments, Inc. | Combinations having synergistic pituitary growth hormone releasing activity |
| BR8208035A (pt) * | 1981-12-28 | 1983-11-22 | Beckman Instruments Inc | Peptideos sinteticos tendo atividade liberadora de hormonio do crescimento da pituitaria |
| US4803261A (en) * | 1986-06-27 | 1989-02-07 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Method for synthesizing a peptide containing a non-peptide |
| IL98910A0 (en) * | 1990-07-24 | 1992-07-15 | Polygen Holding Corp | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity and pharmaceutical compositions containing them |
| US5663146A (en) * | 1991-08-22 | 1997-09-02 | Administrators Of The Tulane Educational Fund | Polypeptide analogues having growth hormone releasing activity |
| WO1994007519A1 (en) * | 1992-09-25 | 1994-04-14 | Smithkline Beecham Corporation | Growth hormone releasing peptides |
| JPH09505601A (ja) * | 1993-11-24 | 1997-06-03 | メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド | インドリル基含有化合物類および成長ホルモン放出を促進するためのそれらの使用 |
-
1994
- 1994-12-22 IL IL11211294A patent/IL112112A/xx not_active IP Right Cessation
- 1994-12-22 HU HU9501947A patent/HU224345B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1994-12-22 CN CN94194590A patent/CN1052731C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1994-12-22 WO PCT/DK1994/000485 patent/WO1995017423A1/en active IP Right Grant
- 1994-12-22 US US08/448,623 patent/US5767085A/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-12-22 UA UA96062486A patent/UA42747C2/uk unknown
- 1994-12-22 ES ES95903774T patent/ES2153469T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-12-22 EP EP95903774A patent/EP0736039B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-12-22 PL PL94315113A patent/PL181280B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1994-12-22 BR BR9408377A patent/BR9408377A/pt not_active Application Discontinuation
- 1994-12-22 AU AU12724/95A patent/AU689181B2/en not_active Ceased
- 1994-12-22 JP JP51710995A patent/JP3181918B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1994-12-22 SG SG1996004604A patent/SG55069A1/en unknown
- 1994-12-22 AT AT95903774T patent/ATE197158T1/de not_active IP Right Cessation
- 1994-12-22 DE DE69426206T patent/DE69426206T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-12-22 RO RO96-01293A patent/RO115635B1/ro unknown
- 1994-12-22 NZ NZ277486A patent/NZ277486A/en unknown
- 1994-12-22 KR KR1019960703336A patent/KR100354897B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1994-12-22 CA CA002179597A patent/CA2179597A1/en not_active Abandoned
- 1994-12-22 CZ CZ19961834A patent/CZ293113B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-12-22 SK SK820-96A patent/SK281963B6/sk unknown
- 1994-12-22 PT PT95903774T patent/PT736039E/pt unknown
- 1994-12-22 DK DK95903774T patent/DK0736039T3/da active
-
1995
- 1995-01-02 MX MX9500072A patent/MX9500072A/es unknown
-
1996
- 1996-06-20 FI FI962584A patent/FI962584A0/fi not_active IP Right Cessation
- 1996-06-21 NO NO19962665A patent/NO315561B1/no not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-12-27 GR GR20000402838T patent/GR3035150T3/el not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ293113B6 (cs) | Peptidový derivát | |
| JP3759748B2 (ja) | 成長ホルモン放出性を有する化合物 | |
| AU711104B2 (en) | Compounds with growth hormone releasing properties | |
| CN104402989A (zh) | 酰化的glp-1化合物 | |
| US5990084A (en) | Compounds with growth hormone releasing properties | |
| JPH06503090A (ja) | ノナペプチドのボンベシン拮抗薬 | |
| TW438811B (en) | Compounds with growth hormone releasing properties | |
| JP4173541B6 (ja) | 成長ホルモン放出特性を有する化合物 | |
| MXPA97010377A (en) | Compounds with releasing properties of growth hormone |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 19941222 |