CZ292712B6

CZ292712B6 - Farmaceutická kompozice pro léčbu hyperplaze prostaty

Info

Publication number: CZ292712B6
Application number: CZ19931933A
Authority: CZ
Inventors: Glenn J. Gormley; Elizabeth Stoner
Original assignee: Merck & Co., Inc.
Priority date: 1991-03-20
Filing date: 1992-03-19
Publication date: 2003-12-17
Also published as: WO1992016213A1; EP0576603A1; JPH06506227A; AU1751492A; SG80530A1; HUT66273A; NO933327D0; US5753641A; SK284381B6; NO933327L; US6046183A; IL101243A0; RO113613B1; CZ193393A3; IE920879A1; NO305635B1; CA2104793A1; IL101243A; AU666846B2; BG61798B1

Abstract

Farmaceutická kompozice pro léčbu benigní hyperplaze prostaty s obsahem terapeuticky účinného množství inhibitoru 5.alfa.-reduktázy, přičemž inhibitor 5.alfa.-reduktázy je 17-.beta.-substituovaný 4-azasteroid obecného vzorce I nebo 17-.beta.-substituovaný 4-azasteroid obecného vzorce II nebo 17.beta.-acyl-3-karboxy-androst-3,5-dien obecného vzorce III nebo farmaceuticky vhodné soli a estery těchto sloučenin v kombinaci s blokátorem .alfa..sub.1.n.-adrenergního receptoru zvoleného ze skupiny obsahující terazosin, doxazosin, prazosin, bunazosin, indoramid, alfuzosin spolu s farmaceuticky vhodným nosičem.ŕ

Description

Vynález se týká farmaceutické kompozice pro léčbu benigní hyperplaze prostaty s obsahem účinných složek tj. inhibitoru 5a-reduktázy v kombinaci sblokátorem cti adrenergního receptorů.

Dosavadní stav techniky

Benigní hyperplaze prostaty postihuje značný počet mužů v pozdějším věku. Léčba obvykle doposud vyžaduje chirurgický zásah v pokročilém stadiu za účelem odstranění přetrvávajících potíží.

Nežádoucí růst prostaty ovlivňuje testosteron, který je vylučován varlaty a nadledvinkami. V obvodových orgánech včetně jater, kůže a prostaty však může docházet k určité konverzi 5a-reduktázy na dihydrotestosteron. Tato látka se převážně váže jádrem na buňky prostaty, což znamená, že spíše dihydrotestosteron než testosteron je primárním androgenem, který růst prostaty ovlivňuje. Inhibice 5a-reduktázy tedy může vést k přerušení tvorby dihydrotestosteronu a v důsledku toho k regresi růstu prostaty.

Finasterin, 17P(N-terc-butyl)karbamoyl-4-aza-5a-androst-l-en-3-on byl vyvinut jako sloučenina, která inhibuje 5a-reduktázu a vykazuje pozitivní účinky na benigní hyperplazi prostaty. Finasterid je 4-azesteroid a kompetitivní inhibitor enzymu. Nevykazuje afinitu vůči receptorů androgenu a lze tedy očekávat, že nebude bránit vazbě a působení testosteronu ve tkáních jako je sval a vyvolávat nežádoucí feminizující charakteristiky.

Typické inhibitory 4-azasteroid 5a-reduktázy byly vyvinuty společností Měrek Corp.-viz patent US 4 377 584 a 4 220 735 Rasmusson a kol., patent US 4 845 104 Carlin a kol., patent US 4 760 071 Rasmusson a kol., který popisuje finasterid - 17p-(N-terc-butyl)karbamoyI-4aza-5a-androst-l-en-3-on, známý pod ochrannou známkou Proscar, patent US 4 732 897 Cainellia a kol., patent US 4 859 681 Rasmusson a kol. a zveřejněné dokumenty EPO 0 155 076, EPO 0 004 949 a EPO 0 314 189.

Dále jsou jako inhibitory 5a-reduktázy známy 17β substituované 4-azasteroidy, které vyvinula společnost SmithKline Beechem popsané např. v patentech US 4 882 319, 4 910 226, 4 888 336, 4 937 237,4 970 205 a 5 026 882.

Jestliže dojde ke zvrácení procesu vedoucího ke zbytnění prostaty, pak v důsledku léčby někdy mizí i další nepříjemné doprovodné příznaky jako tlak na močový měchýř a další související potíže. V některých případech však omezení rychlosti růstu prostaty nevede k odstranění nebo zmírnění dalších příznaků onemocnění.

Tehdy je zapotřebí uplatnit kombinovanou léčbu, která povede jak k odstranění skutečné příčiny hyperplaze prostaty, tak i ke zmírnění nebo i vyloučení zmíněných dalších příznaků onemocnění.

Dalšími účinnými látkami užívanými pro léčení benigní hyperplaze prostaty jsou blokátory ccj adrenergních receptorů, které obecně působí jako antihypertenzní agens blokováním vazebných míst α-adrenergních receptorů. Jejich účinek spočívá v relaxaci hladké tkáně močového měchýře, která působí na smrštění fibroblasních tkání v případě, že jsou stimulovány noradrenalinem a vedou ke snížení rychlosti toku moče.

-1 CZ 292712 B6

Příklady blokátorů α-adrenergních receptorů jsou např. tarazosin-l-(4-amino-6,7-dimethoxy2-chinazolinyl)-4-[(tetrahydro-2-feranyl)karbonyl]piperazin vyvinutý společností AbbotHytrin a chráněný německým patentem č. 2 646 186 a patent US 4 026 894, doxazosin-l-(4amino-6,7-dimethoxy-2-chinazolinyl)-4-[(2,3-dihydro-l,4,benzodioxin-2-yl)karbonyl]5 piperazin, vyvinutý společností Pfizer-Cardura a chráněný německým patentem č. 1 847 623 a patent US 4 188 390, dále prazosin-l-(4-amino-6,7-dimethoxy-2-chinazolinyl)-4-(2furanylkarbonyl)piperazin vyvinutý společností Pfízer minipres a chráněný britským patentem 1 156 973 a patentem US 3 511 836, bunazosin-l-(4-amino-6,7-dimethoxy-2-chinazolinyl)hexahydro-4—(l-oxobutyl)-lH-l,4-diazepin, vyvinutý společností Sandoz-Detantol a chráněný 10 patent US 3 920 636, dále indoramin-l-[l-[2-(lH-indol-3-yl)ethyl]-4-piperidinyl]benzamid, vyvinutý společností Baratol-Wyeth a chráněný patentem US 3 527 761, a alfuzosin-N[3-[(4amino-6,7-dimethoxy-2-chinazolinyl)methylamino]propyl]tetrahydro-2-furankarboxamid, vyvinutý společností Synthelabs a chráněný německým patentem 2 904 445 a patentem US 4 315 997.

Pro řešení vynálezeckého úkolu tj. vytvoření farmaceutické kompozice pro léčbu benigní hyperplaze prostaty byla zvolena kombinace inhibitoru 5a-reduktázy a blokátorem aj adrenergního receptorů.

Podstata vynálezu

Vynálezem je farmaceutická kompozice pro léčbu benigní hyperplaze prostaty s obsahem terapeuticky účinného množství inhibitoru 5a-reduktázy, vyznačená tím, že inhibitor 5a25 reduktázy je 17-P-substituovaný 4-azesteroid obecného vzorce I,

kde vytečkovaná linie představuje dvojnou vazbu, je-li přítomna, a

R¹ a R³ jsou nezávisle vodík, methyl nebo ethyl;

R² je uhlovodíkový zbytek, zvolený z lineárního nebo rozvětveného řetězce alkylu, cykloalkylu nebo arylalkylu o 1 až 12 atomech uhlíku či monocyklického arylu volitelně obsahující jeden nižší substituent alkylu o 1 až 2 atomech uhlíku a/nebo jeden či více halogenových substituentů;

R⁴ je vodík nebo methyl;

R⁵ je vodík nebo methyl v pozici beta;

R⁶ je vodík nebo methyl v pozici alfa nebo beta

-2CZ 292712 B6 a farmaceuticky vhodné soli nebo estery těchto látek v kombinaci s blokátorem aj-adrenergního receptorů zvoleného ze skupiny obsahující terazosin, doxazosin, prazosin, bunazosin, indoramin, alfuzosin spolu s farmaceuticky vhodným nosičem.

Reprezentativní sloučeniny podle vynálezu jsou zejména tyto:

17p-(N-terc-amylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17|3-(N-terc-hexylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on p-(N-terc-buty lkarbamoy l)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on [3-(N-izobuty lkarbamoy l)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on

17[3-(N-terc-oktylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on [3-(N-okty lkarbamoy 1) )-4-aza-5a-androst-l-en-3-on β-(Ν-1,1 -diethy lbuty lkarbamoyl)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on

17P-(N-neopentylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17[3-(N-2-adamantylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p~(N-l-adamantylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on |3-(N-2-norbomylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on β-(Ν-1 -norbomy lkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-1 -en-3-on

17[3-(N-fenylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on 17|3-(N-benzylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on 17(3-(N-terc-amylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on 17|3-(N-terc-hexylcarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on |3-(N-terc-butylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on [3-(N-izobutylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-í-en-3-on 17P~(N-terc-oktylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-]-en—3-on β-(Ν-1,1,3,3-tetramethylbutylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17P-(N-oktylkarbamoyl)-4~aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on β-(Ν-1,1-diethy lbuty lkarbamoyl)-4-aza-4~methyl-5a-androst-l -en-3-on |3-(N-neopentylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on β-(Ν-1 -adamantylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l -en-3-on (3-(N-l-adamantylkarbamoyl)-4-methyl-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17[3-(N-l-adamantylkarbainoyl)-4-methyl-4-aza-5a-androst-3-on 17|3-(N-l-adamantylmethylkarbamoyl)-4-aza-4-aza-5a.-androst-l-en-3-on (3-(N-2-adamantylkarbamoyl)-4—aza-5 a-androstan-3-on p-(N-methy l-N-2-adamanty lkarbamoyl)-4-methy l-4-aza-5 a-androstan-3-on (3-(N-2-adamantylkarbamoyl)-4-methyl-4-aza-5a-androstan-3-on

3~(N-2-adamanty lkarbamoy l)-4-methyl-4-aza-5a-androst-l-en-3-on [3-(N-methyl-N-adamanty lkarbamoy l)-4-methyl-4-aza-androst-l -en-3-on [3-(N-(3-methy 1)-1 -adamantyl-karbamoyl)-4-aza-4-methyl-5 a-androst- l-en-3-on p-(N-exo-2-norbomanylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on [3-(N-exo-2-norbomanylkarbamoyl)-4-aza-5 a-androst-1 -en-3-on p-(N-2-adamantylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(N-methyl-N-2-adamantylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-3-on p-(N-2-adamantylkarbamoyl)-4-methyl-4-aza-5 a-androst-3-opn 17|3-(N-methyl-N-adamantylkarbamoyl)-4-methyl-4-aza-androst-l-en-3-on.

Dále je vynálezem farmaceutická kompozice pro léčbu benigní hyperplaze prostaty s obsahem terapeuticky účinného množství inhibitoru 5a-reduktázy, vyznačená tím, že inhibitor 5a-reduktázy je 17-fJ-substituovaný 4-azesteroid obecného vzorce II,

-3CZ 292712

B6

αο, kde vytečkovaná linie představuje dvojnou vazbu, je-li přítomna a

R⁷ je zvoleno z vodíku, methylu nebo ethylu a

R^sjea) monovalentní uhlovodíkový zbytek zvolený z lineárního nebo rozvětveného řetězce alkylu nebo cykloalkylu o 1 - 12 atomech uhlíku, které mohou být substituovány jednou C1-C4 alkylovou skupinou nebo halogenem;

b) arylalkylový zbytek zvolený z benzylu nebo fenethylu;

c) monocyklický aromatický zbytek, který může být substituován skupinami

1) -OH, -OCj-C., alkyl, C]-C₄ alkyl, -(CH₂)_m OH, -(CH₂)_n COOH, kde m je 1-4, n je 1-3 za předpokladu, že C1-C4 alkyl je přítomen pouze tehdy, když je přítomen jeden z výše uváděných zbytků obsahujících kyslík;

2) -SH, SC1-C4 alkyl, -SOC1-C4 alkyl, -SO₂Ci-C₄ alkyl, -SO₂N(C!-C4 alkyl)₂, C1-C4 alkyl-(CH₂)_m SH, -S-(CH₂)_n-O COCH₃, kde m je 1-4, n je 1-3, za předpokladu, že C1-C4 alkyl je přítomen pouze tehdy, když je přítomen jeden z výše uvedených zbytků obsahujících síru;

3) skupina N(R¹²), kde R¹² je nezávisle H nebo C1-C4 alkyl, při čemž monoarylový kruh může být ještě dále substituován C1-C4 alkylem a

d) heterocyklický zbytek zvolený z 2- nebo 4-pyridylu, 2-pyrrolylu, 2-furylu nebo thienylu;

při čemž R⁹, R¹⁰, Rⁿ jsou každý zvolen z vodíku a methylu a farmaceuticky vhodné soli těchto látek v kombinaci s blokátorem aj-adrenergního receptorů zvoleného ze skupiny obsahující terazosin, doxazosin, prazosin, bunazosin, indoramin, alfuzosin spolu s farmaceuticky vhodným nosičem.

Reprezentativní sloučeniny podle vynálezu jsou zejména tyto:

β-ýfeny lkarbony l)-4-aza-4-methyl-5 α-androst-1 -en-3-on 17|3-(2-tolylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on 17P~(3-tolylkarbonyl)-4-aza-4—methyI-5a-androst-l-en-3-on β—-(4—toly lkarbonyl)-4-aza-4-methy 1-5 α-androst-1 -en-3-on

17fJ-(2-bromfenylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(2-chlorfenylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(2,6-dichlorfenylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17fJ-(2,6-dibromfenylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17(3-(xylylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on β-fterc-buty lkarbony l)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on β-( izobuty lkarbony l)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on

P~(n-oktyl karbony l)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on β-( 1,1 -duethylbuty lkarbony 1 )-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on

17P~(neopentylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on β-íterc-amy lkarbony)-4-aza-4-5 α-androst-1 -en-3-on

17P-(cyklopentylkarbonyl)-4-aza-4-5a-androst-l-en-3-on

17P-(benzylkarbony])-4-aza-5ct-androst-l-en-3-on

P~(2-pyridy lkarbony l)-4-aza-5 a-androst-1 -en-3-on

P~(4-pyridylkarbony l)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on

17p-(2-pyrrolylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

P~(4-pyridy lkarbony l)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on [3-(2-pyrrolylkarbony l)-4-aza-5 a-androst-1 -en-3-on p-(2-thieny lkarbony I )-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on

17^2-adamantylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on β-ffenylkarbony l)-4-aza-5 a-androst-1 -en-3-on

17p-(2-tolylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(3-tolylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(2-bromfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p-(2-chlorfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on [3-(2,6-dichlorfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(2,6-dibromfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on β-fxy ly lkarbony l)-4-aza-5a-androst-l -en-3-on

17[3-(fenylethyl)karbonyl-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p-(4-dimethylaminofeny lkarbony l)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17[3-(3-dimethylaminofenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17P-(3,4-diethylaminofenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on β-(3,5-dimethyl-4-diethylaminofenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p-(4-N-methylaminomethylfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(2-N-ethylamino-4-ethylfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on p-(4-feny lbenzoyl)-4-aza-5 a-androst-1 -en-3-on

17p-(3-fenylbenzoyl) )-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17(3-(4-bifenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on p-(3-bifenyl)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on β-( 1-nafty l)-4-aza-5 a-androst-1 -en-3-on (3-(2-naftyl)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on β-( l-fenanthryl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(2-fenanthryl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p-(l-bifenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(9-anthracyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17[3-(4-thienylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p-(3-thioenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p-(4-inethylthioenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on [3-(4-methy lsulfiny lfenylkarbonyl)-4—aza-5 a-androst-1 -en-3-on

17β—(4—methylsulfeny lkarbony l)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p-(3-methylsulfinylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p-(4-N,N-dimethylaminosulfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p-(2-ethyl-4-methyIthienylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17[3-(4-thioethylfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p~(4-acetoxymethylthienylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

-5CZ 292712 B6

17|3-(2-methyl^4-methylthienylkarbonyl)-4—aza—4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(2-methyl—4-methylsulfinylfenylkarbonyl)-4-aza—4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17p-(2-izopropyl-4-methylsulfenylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on p-(4-methylthienylkarbonyl}-4-aza-4-methyl-5a-androst-3-on

1Ί |3-(4-methylsulfinylfenylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-3-on

17p~-(4-methylsulfofenylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-3-on [3-(4-hydroxyfenyl)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on

P-(3-hydroxyfeny l)-4-aza-5 α-androst-1-en-3-on

17P-(3,4-dihydroxyfenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(3,5-dimethyl-4-hydroxyfenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(4-hydroxymethylfenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

P-(2-hydroxymethylfeny lkarbony l)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on [3-(4-methoxyfeny l)-4-aza-5a-androst-1 -en-3-on

17p-(4-hydroxyfenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on |3-(3-hydroxyfenyl)-4-aza-5a-androst-1 -en-3-on

173~(3,4-dihydroxyfenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p-(3,5-dimethyl-4-hydroxyfenyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17[3-(4-hydroxymethylfenyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(2-hydroxyethylfenylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17β-(4—methoxyfenyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17(3-(4-karboxymethylfenyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on a

17p-(4-karboxyfenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on a dále odpovídající sloučeniny, kde substituent 4 vodíku je nahrazen v každé z uvedených sloučenin skupinou methyl nebo ethyl. . x

Do rozsahu vynálezu rovněž spadá farmaceutická kompozice pro léčbu benigní hyperplaz^-x prostaty s obsahem terapeuticky účinného množství inhibitoru 5a-reduktázy, vyznačená tím, že»., inhibitor 5a-reduktázyje 17P-acyl-3-karboxy-androst-3,5-dien obecného vzorce III ? *

kde R¹³ je a) Ci~C₆ lineární nebo rozvětvený alkyl; C₃-C]₂ cykloalkyl, který může být substituován C]-C₄ alkoxyskupinou nebo C]-C₄ lineárním nebo rozvětveným alkylem; C6-Ci₂ aryl nebo Ct-Cb arylalkyl, který lze substituovat jednou ze skupin -OH, OQ-C4 alkyl, Ci-C₄ alkyl,-(CH^OH, -(CH₂)_nCOOH, kde m je 1-4, n je 1-3;

b) Cj-C₄ lineární nebo rozvětvený alkyl, C₃-Ci₂ cykloalkyl, který může být substituován Ci-C₄ alkoxy nebo C]-C₄ lineárním nebo rozvětveným alkylem; C₆-C_]2 aryl nebo Ct-C]₃ arylalkyl, který může být substituován jednou ze skupin: -OH, -OC!-C₄, alkyl, C_t-C₄ alkyl, -(CH₂)_m OH, -(CH₂)_nCOOH, kde m je 1 = 4, a je 1 = 3 a R¹⁴ je zvoleno z COOH, SO₃H, PO(OH)₂, PH(O)OH nebo farmaceuticky vhodné soli a estery těchto sloučenin v kombinaci s blokátorem aj

-6CZ 292712 B6 adrenergního receptorů zvoleného ze skupiny obsahující terazosin, doxazosin, prazosin, bunazosin, indoramil, alfuzosin spolu s farmaceuticky vhodným nosičem.

Zahrnuty jsou zejména tyto reprezentativní sloučeniny:

17p-(4-hydroxyfenylkarbonyl)-androst-3,5-dien-3-karboxylová kyselina

17[3-benzoyl-androst-3,5-dien-3-karboxylová kyselina 17(3-cyklohexylkarbonyl-androst-3,5-dien-3-karboxylová kyselina 17|3-izobutylkarbonyl-androst-3,5-dien-3-karboxylová kyselina 17[3-(4-hydroxymethylfenylkarbamoyl)-androst-3,5-dien-3-karboxylová kyselina (3-(4-methoxyfenylkarbonyl)-androst-3,5-dien-3-karboxylová kysel ina p-(4-karboxymethylfenylkarbonyl)~androst-3,5-dien-3-karboxylová kyselina 17P-terc-butyl-androst-3,5-dien-17p-karboxamid-3-karboxylová kyselina 17p-fenyl-androst-3,5-dien-l 7[3-karboxamid-3-karboxylová kyselina 17P~l-adamantyl-androst-3,5-dien-l 7p-karboxamid-3-karboxylová kyselina 17 [3-2-adamantyl-androst-3,5-dien-l 7 |3-karboxamid-3-karboxylová kyselina nebo z farmaceuticky vhodných solí a esterů těchto sloučenin.

Všechny sloučeniny spadají do rozsahu vynálezu nebo jejich farmaceuticky vhodné soli a estery v kombinaci s blokátorem aj-adrenergního receptorů zvoleného ze skupiny obsahující terazosin, doxazosin, prazosin, bunazosin, indoramin, alfuzosin spolu s farmaceuticky vhodným nosičem mohou být použity pro farmaceutické kompozice k léčbě benigní hyperplaze prostaty.

Inhibitor 5a-reduktázy a cq-adrenergní receptor může být spojen v jedné lékové formě vhodné pro orální nebo parenterální podávání. Tablety, kapsle nebo tobolky jsou zejména vhodné jak formy pro orální podávání léčiva. Tyto kompozice podle vynálezu jsou ovšem upraveny konvenčními farmaceutickými excipienty, tj. např. sprej ovanou sušenou laktózou a stearátem horečnatým do tablet nebo kapslí pro orální podávání léčiva. Jedna nebo více aktivních látek samy o sobě nebo včetně přídavných aktivních složek mohou být zpracovány do tablet nebo dražé a smíchány s tuhými, práškovitými nosnými látkami jako je citrát sodný, uhličitan vápenatý nebo dikalciumfosfát a s vazebnými prostředky jako polyvinylpyrolidon-, deriváty želatiny nebo celulózy, při čemž je možno přidat mazné látky jako je stearát hořečnatý, laurylsulfát sodný, karbowax nebo polyethylenglykol. Samozřejmě je možné přidat látky pro zlepšení chuti v případě, že jsou léčiva podávána orálně.

Jako další lékové formy je možno užívat podlouhlé kapsle např. z tvrdé želatiny, zrovna tak jako zatavené kapsle z měkké želatiny obsahující změkčovadlo nebo plastifikátor, např. glycerin. Podlouhlé kapsle obsahují aktivní látku, a to s výhodou ve formě granulátu, např. ve směsích s plnidly jako je laktóza, sacharóza, mannitol, škroby, a to bramborový škrob nebo amylopektin, deriváty celulózy nebo vysoce dispergované kyseliny křemičité. U měkkých želatinových kapslí je aktivní látka s výhodou rozpuštěna nebo suspendována ve vhodné kapalině jako je rostlinný olej nebo kapalný polyethylen.

Aktivní složky léčiv užívané podle vynálezu mohou být rovněž zpracovány podle konvenční techniky do kompozic, které se uvolňují po další dobu, takže je možno aplikovat léčivo jednou denně nebo i za delší dobu.

Namísto orálního podávání lze rovněž připravit roztok aktivních látek např. v sezamovém nebo olivovém oleji pro parenterální podávání.

Aby bylo možno určit účinek farmaceutické kompozice při léčbě, provádí se měření testosteronu, acidfosfatázy a objemu prostaty. Nižší koncentrace dihydrotestosteronu a prostatické acid

-7CZ 292712 B6 fosfatázy, jakož i redukce objemu prostaty jsou příznaky úspěšného léčení. Koncentraci výše uváděných složek v plazmě je možno měřit standardními, odborníkům známými metodami, jak publikovali např. R. Neri a M. Monahan v Invest Urology (1972), svazek 10, str. 132-130 a E. Mischlay a D. L. Loriaux v Z. Kliň. Chem. Kliň Biochem (1972), svazek 4, str. 164.

Objem prostaty se měří při rektálním vyšetření a/nebo transrektální ultrasonografii. Objektivní hodnocení účinku léčby zmíněnou farmaceutickou kompozicí je rovněž možno měřit fyzikálními, odborníkům dobře známými metodami, a to pomocí magnetické nukleární rezonance, zrovna tak jako fyzickým vyšetřením.

Klinické zkoušky účinku kombinace např. fínasteridu a terazosinu vykazují dokonce ještě větší účinek, pokud jde o úlevu nemocných od symptomů benigní hyperplaze prostaty, ve srovnání s případy, kdy by se používala pouze jedna účinná látka.

Z podnětu přihlašovatele byla provedena rozsáhlá klinická studie v několika zemích s dvojitým slepým pokusem za účelem průzkumu dlouhodobého účinku (24 až 48 týdnů) souběžné terapie finasteridem spolu s indoraminem (alfuzhosinem) prazosinem a dále finasteridem spolu s placebem nahrazujícími indoramin (alfuzosin) prazosin zaměřená na symptomy onemocnění a maxima průtoku moče u pacientů s benigní hyperplazí prostaty. Vstupní kriteria byla tato:

Studie probíhala po dobu 52 týdnů, z čehož byl po dva týdny prováděn screening, po dva týdny bylo podáváno placebo a dvakrát po dobu 24 týdnů byla prováděna léčba s dvojitým slepým pokusem. Vstupní kritéria byla tato:

klinická diagnóza benigní hyperplaze prostaty založená na symptomech obstrukce moči a palpitace zvětšené prostaty pomocí digitálního rektálního vyšetření; maximální průtok moči byl menší nebo rovný než 4 ml/sec a menší nebo rovný než 15 ml/sec; celkové skóre symptomů bylo<_ menší nebo rovné 12.

’ί,.-Λ·*·

Pacienti se symptomy benigní hyperplaze prostaty byli zcela náhodně rozděleni do jedné ze třech léčebných skupin:

skupina IA: perioda I finasterid + alfa blokátor perioda II finasterid + placebo skupina IB: perioda 1 +II: finasterid + a-blokátor skupina 2: perioda I + II: finasterid + placebo náhradou za blokátor

Dávka fínasteridu činila 5 mg denně a dávky blokátoru byly tyto:

indoramin: 20 mg 2 x denně alfuzosin: 2,5 mg 3 x denně prazosin: 2 mg 2 x denně bylo docíleno těchto výsledků:

až 48 týdnů společné léčby finasteridem spolu s blokátorem indoraminem nebo prazosinem vedlo k lepší účinnosti vzhledem k celkovému skóre symptomů a maximálnímu průtoku moči v porovnání se společnou léčbou finasteridem a placebem, která probíhala po stejně dlouhou dobu. Stejný trend je možno pozorovat při léčbě finasteridem spolu s alfuzosinem, i když 50 porovnání účinků fínasteridu s alfuzosinem s účinky fínasteridu s placebem nevykázalo podstatný rozdíl.

Další studie nebyla prováděna společností Měrek Corp. Tato studie probíhala vBronxu, USA u můžu ve věku od 51 do 86 let po dobu 2-14 měsíců pod dohledem Dr. J. M. Vapneka

-8CZ 292712 B6 a Dr. G. Galea. Výsledky prokázaly, že kombinovaná terapie terazosinu a finasteridu vykázala velké zlepšení symptomů oproti monoterapii s finasteridem.

Kooperativní studie pod vedením Dr. Donalda Urbana a kolektivu prováděla společnost U.S. Veterans Administration spolu se společností Měrek Corp. Týkala se léčby 50 mužů ve věku od 45 do 80 let. Ve skupinách, které byly podrobeny kombinované léčbě, měla nej lepší výsledky v průtoku moči skupina léčená finasteridem spolu s terazosinem.

Výše uvedené klinické údaje jako výsledek provedených studií dostatečně prokazují synergický účinek farmaceutické kompozice při léčbě benigní hyperplaze prostaty dle vynálezu ve srovnání s léčbou prováděnou pouze jednou účinnou látkou.

Dále se uvádějí příklady přípravy výše uvedených sloučenin.

Příklady provedení

Část 1

Příklad 1

Methyl-1 -oxo-4-aza-5 α-androst-1 -en-17 β-karboxy lát

Suspenze 83,7 g methyl 3-oxo-4-aza-5a-androstan-17-karboxylátu a 126,5 g benzenselenového anhydridu v 2,09 1 chlorbenzenu se zahřívá při refluxu po dobu 2 h. Zpětný chladič se přepne na destilační nástavec a směs se pomalu po dobu 2 h destiluje za účelem odstranění vody, která se během reakce vytvořila; Roztok se odpaří, residuum za mokračiní 19.8 g. Residuum jako roztok v dichlormethanu a promyje roztokem nasyceného NaCO₃ a roztokem nasyceného NaCl, vysuší a odpaří, výtěžek je 172,4 g. Materiál se chromatografuje na 2,56 kg silikagelu, při čemž se nejprve eluuje dichlormethanem (5 I) a poté směsi 4:1 dichlormethanacetonu. Výtěžek 53,4 g vymyje, po propláchnutí diethylesterem se vysuší, konečný výtěžek je 49,5 g sloučeniny o teplotě tání mezi 278 až 280 °C. Podobně se konvertují další sloučeniny a jejich odpovídající nenasycené deriváty:

Ia R = CONHC (CH₃)₃ 252-254 °C

Ib = CONHC(CH₃)₂CH₂C)CH₃)₃ + Ramusson Johnston a Arth - patent US 4 377 584 - 22.3. 1983

-9CZ 292712 B6

Příklad 2

Methyl 4-methyl-3-oxo-4-aza-5a-androst-l-en-l 7[3-karboxyiát

Suspenze 25 g produktu z příkladu 1 a 2,25 g hydridu sodného v 500 ml suchého dimethylformamidu se míchá v dusíkové atmosféře po 15 min. 15 ml methyljodidu se přidává po kapkách a směs se míchá 30 min při teplotě místnosti. Dalších 5 ml methyljodidu se přidá a směs se zahřívá na 50 °C po 2 h. Po zchlazení se směs rozředí vodou na objem 2 1. Tuhá látka se separuje - výtěžek je 25,4 g sloučeniny o teplotě tání 159 až 161 °C.

Podobně se konvertují i další sloučeniny na jejich odpovídající 4-methylderiváty:

2a R = CONHC(CH₃)₂CH₂C(CH₃)₃androsten

2b CONHC (CH₃)₃ A-l-androsten

2c CONHC(CH₃)₂CH₂ C(CH₃)₃A-l-androsten

148 až 150 °C

153 až 155 °C

168 až 170 °C

Příklad 3

S-(2-pyridyl)-4-methyl-3-oxo-4—aza-5a-androst-l-en-17p-thiokarboxylát

Suspenze 25 g produktu z příkladu 3 v 123 ml methanu se smíchá s roztokem 12,5 g KOH v 12,5 ml vody. Po refluxu po dobu 4 h se roztok okyselí 6 NHC1 a poté se rozředí vodou. Surová kyselina se separuje, vysuší-23,32 g sloučeniny o teplotě tání 300 °C.

g suché, surové kyseliny, 36,45 g trifenylfosfinu a 30,4 g 2,2'-dipyridyldisulfidu se suspenduje v 138 ml toluenu a míchá se po 3 h při teplotě místnosti; reakční směs se chromatografuje v koloně s náplní 4,5 kg silikagelu a eluuje se směsí 9:1 ethylacetátu s acetonem, výtěžek je 20,4 sloučeniny po teplotě tání 218 až 220 °C.

Po dalším eluování acetonem se získá 5,2 g methanolového vedlejšího produktu, S-(2-pyridyl)la-methoxy-4-methyl-3-oxo-4-aza-5a-androstan-17p-thiokarboxylát o teplotě tání 221 až 223 °C.

3A. Podobným způsobem se produkt z příkladu 1 konvertuje na S-(2-pyridyl)-3-oxo-4-aza5a-androst-l-en-17p~thiokarboxylát o teplotě 230 až 232 °C.

3B. Analogickým způsobem se methyl 3-oxo-4-aza-5a-androstan 17-karboxylát konvertuje na S-(2-pyridyI)3-oxo-4-aza-5a-androstan-17[3-thiokarboxylát o teplotě tání 232 až 234 °C.

-10CZ 292712 B6

Příklad 4

M-t-butyl 4-methyl-3-oxo-4-aza-5a-androst-l-en-l 7[3-karboxamid

Bezvodý t-butylamin se přidá k suspenzi 2,5 g pyridyl-thioesteru z příkladu 3 do 70 ml tetrahydrofuranu. Po 60 min se výsledný roztok odpaří a residuum se chromatografuje na 125 g silikagelu. Eluce směsí 20:1 ethylacetátu-dichlormethanu dává 1,5 g produktu o teplotě tání 152 až 154 °C.

Když se postup opakuje za použití vodného aminu, jakož i vhodného pyridylthioesteru, připraví se tyto produkty:

4b: N-terc-butyl 3-oxo-4-aza-5a-androstan-17[3-karboxamid, teplota tání 275 až 276 °C,

4c: N-(2,4,4-tri methyl-2-pentyl)-4-methyl-3-oxo-4-aza-5α-androst-1 -en-17β-karboxamid teplota tání 168 až 170 °C.

Příklad 5

4-oxo-3,5-sekoetian-3,20-diová kyselina

K roztoku 200 g 3-oxo-4-etien-17[3-ové kyseliny v 3,5 1 t-butanolu při 80 °C se přidá roztok 198,4 g uhličitanu sodného v 474 ml vody. Roztok 948,5 g jodistanu sodného o teplotě 65 °C a 6,95 g permanganátu v 3,5 1 vody se smíchá a reakční směs se udržuje na 80 °C. Poté se směs se při refluxu zahřívá po dobu 1 h. Přes noc se směs při teplotě místnosti nechá ustát. Poté se anorganické soli odstraní filtrací a koláč se promyje 225 ml vody. 5% roztok vodného bisulfitu sodného se přidá za účelem redukce jodu. T-butanol se odstraní za redukovaného tlaku a vodné residuum se okyselí koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou. Separovaná pryskyřice se extrahuje dichlormethanem a promyje se 5% vodným bisulfitem sodným, roztokem nasyceného chloridu sodného, poté se vysuší a koncentruje na ne zcela bílé residuum - výtěžek 214 g. Po suspenzi residua v éteru a rozředění hexanem se získá 152 g krystalického materiálu o teplotě tání 189 až 192 °C.

Příklad 5B

4-oxo-4-aza-5-etien-20-ová kyselina

Suspenze 64,7 g kyseliny diové ze stupně 5 v 350 ml ethylenglykolu se uvede do reakce s 80 ml kapalného amoniaku. Výsledný roztok se ohřívá o 3 °C za min až na 180 °C a udržuje se na této teplotě po dobu 15 min. Po zchlazení se přidá 1 1 vody a směs se okyselí 10% kyselinou chlorovodíkovou na pH 1,5. Produkt se vyjme a promyje vodou, nechá uschnout na vzduchu, výtěžek je 57,5 g sloučeniny o teplotě tání 310 °C.

Příklad 5C

3-oxo-4-aza-5a-etian-20-ová kyselina

Roztok 136 g 5-kyseliny z příkladu 5B v 16,32 ml kyseliny octové se hydrogenuje při 60 °C za přítomnosti platinového katalyzátoru (z 16,32 g PtO₂) při přetlaku 0,243 MPa po 3 h; katalyzátor se vyjme a roztok se zkoncentruje na 128,2 g surového produktu, který se promyje 3 1 vody, odfiltruje a nechá usušit na vzduchu - výtěžek 125 g bílé tuhé hmoty o teplotě tání 310 °C.

-11 CZ 292712 B6

Tuto sloučeninu lze rovněž připravit zmýdelněním methyl 3-oxo-4-aza-5a-androstan-17[3karboxylátu v 7% methanolovém hydroxidu draselném a následným okyselením.

Příklad 5D

N-(2,4,4-trimethyl-2-pentyl)-3-oxo-4-aza-5a-androstan-l 7 β-karboxymid

Roztok 5,0 g produktu z příkladu 5C, 3,35 g dícyklohexylkarbodiimidu a 3,18 g 1-hydroxy10 benztriazolu v 500 ml dichlormethanu se míchá při teplotě místnosti přes noc. Tuhá látka se separuje filtrací a na filtrát se pak působí 2,4,4-trimethyl-2-pentylaminem (t-oktylamin). Roztok se nechá ustát při teplotě místnosti po 64 h. Malé množství tuhé látky se vyjme a roztok se promyje 10% vodným hydroxidem sodným, poté vodou, 10% kyselinou chlorovodíkovou a nasyceným chloridem sodný, poté vodou, 10% kyselinou chlorovodíkovou a nasyceným chloridem 15 sodným. Po osušení a koncentraci se surový produkt eluuje na 240 g silikagelu směsi 3:7 acetondichlormethan a získá se 5,5 g sloučeniny o teplotě tání 250 až 251 °C.

Příklad 5E

Příklad 5D se opakuje s využitím t-butylaminu namísto 2,2,4-trimethyl-2-pentylaminu; získá se N-terc-butyl-3-oxo-4-aza-5a-androst-17p-karboxamid o teplotě tání 274 až 276 °C.

Příklad 6

Syntéza 17β (N-l-adamantyl-karbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

100 mg 17-methylesteru z příkladu 1 suspenduje v 3,0 tetrahydrofuranu (vysušeného přes 30 molekulární síto 3A) a přidá se 183,0 mg 1-adamantanaminu. Suspenze se ochladí na 5-10 °C, přidá se 590 μΐ 2,0 M roztoku EtMgBr v tetrahydrofuranu. Výsledná směs se míchá po dobu 10 min, refluxuje se 1 až 2 h v dusíkové atmosféře. Směs se ochladí na 0 °C a dále se chladí nasyceným roztokem NH₄C1. Organická vrstva se separuje a vodná vrstva se extrahuje třemi objemy CH2CI2.

Organické vrstvy se zkombinují, promyjí se dvakrát vodou, dvakrát nasyceným chloridem sodným a vysuší se nad MgSO₄, odfiltrují a odpaří do sucha ve vakuu. Po krystalizaci z EtOAc se získá 75,0 mg sloučeniny, rekrystalizace zMeOH a vysušení při 110°C po 2h/0,l mm dává výsledný produkt o teplotě tání 305 až 306 °C. Molekulární hmotnost M+ = 451, vypočítaná 451.

Kalkulace pro C29H12N2O2

C 77,28; H 9,40; N 6,21

Nalezeno C 76,84; H 9,73; N 5,93

Příklad 7

Syntéze 17P(N-2-adamantyl-karbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

Podle výše uvedeného všeobecného způsobu v příkladu 6 se postupuje s užitím 2-adamantaminu připraveného vodnou neutralizací hydrochloridu, extrakcí a izolací EtOAc namísto 1-adamantaminu; refluxuje spíše 7 h než 1 až 2 h; výsledná sloučenina má teplotu tání 284 až 285 °C.

-12CZ 292712 B6

Příklad 8

Syntéza 17p(N-l-adamantylkarbamoyl)—4-aza-5a-androstan-3-onu

100,0 mg derivátu adamantylu připraveného podle postupu z příkladu 6 se rozpustí v 5,0 ml suchého tetrahydrofuranu. Přidá se 300 mg 5% Pd/C a směs se hydrogenuje po 6 h při teplotě místnosti za přetlaku 40 psig. Směs se profiltruje celitem, koláč se promyje třikrát tetrahydrofuranem a rozpouštědlo se odpaří pod vakuem; získá se 97,0 mg surové žádané sloučeniny. Nukleární magnetická rezonance prokázala nepřítomnost olefmů. Surový materiál se přemístí do kolony na 15,0 g silikagelu a eluuje se směsí 1:1 CH2CI2 - aceton.

Sebrané frakce byly podrobeny chromatografii na tenké vrstvě a výtěžek byl 77,98 mg. Nukleární magnetická rezonance byla v dokonalé shodě s navrženou strukturou. Po rekrystalizaci z EtOAc byl výtěžek 65,59 mg výše uvedeného produktu o teplotě tání 323 až 342 °C.

Kalkulace pro C29H44O2N21/d H₂O

C 76,18; H 9,81; A 6,13

Nalezeno: C 75,91; H 9,97; A 6,06

Příklad 9

Syntéza 17p(N-l-adamantylkarbamoyl)-4-methyl-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

K 120 mg thiopyridylesteru z příkladu 3 suspendovaných v 20 ml suchém tetrahydrofuranu se přidá 175,0 mg 1-adamantaminu v dusíkové atmosféře. Reakce se provádí při teplotě místnosti po 16 h v dusíkové atmosféře. Reakce se monitoruje chromatografií na tenké vrstvě silikagelu za využití směsi 1:1 aceton-hexan. Produkt se separuje chromatografií na tenké vrstvě 20 cm x 20 cm, 100 pm silikagelové desce a eluuje se směsí 1:1 aceton-hexan.

Produkt krystalizuje z ethylacetátu; získá se 50,0 mg čistého materiálu o teplotě tání 202 až 205 °C.

Molekulární hmotnost (FAB) prokázaná 465, kalkulovaná 465. Rekrystalizace dává 19,14 mg výše uvedené sloučeniny o teplotě tání 202 až 202,5 °C.

Kalkulace pro C30H44N2O2.H2O

C 74,64; H 9,60; A 5,80

Nalezeno: C 74,32; H 9,47; A 5,89

Příklad 10

Hydrolýza methyl-3-oxo-4-aza-5a-androstan-l 7|3-karboxylátu

17f$-androstan karboxylát jako výchozí materiál z příkladu 1 byl hydrolyzován 7% KOH v izopropanolu nebo vodném methanolu, poté okyselen na Πβ-karboxylovou kyselinu použitou v příkladu 11.

-13CL 292712 B6

Příklad 11

N-(l-adamantyl)-3-oxo-4-aza-5a-androstan-17P-karboxamid

Roztok 5,0 g produktu z příkladu 10, 3,35 g dicyklohexylkarbodiimidu a 3,18 g 1-hydroxybenztriazolu v 500 ml dichlormethanu se míchá přes noc při teplotě místnosti. Filtrací se separuje tuhá látka a na filtrát se působí 1-adamantaminem. Roztok se nechá ustát při teplotě místnosti po 64 h, poté se zfíltruje a promyje postupně 10% kyselinou chlorovodíkovou a nasyceným vodným chloridem sodným. Po usušení na MgSO₄ se provede filtrace a koncentrace. Surový produkt se 10 eluuje na 240 g silikagelu směsí 3:7 acetondichlormethan; získá se 5,5 g sloučeniny o teplotě tání 323 až 324 °C.

Příklad 12

Syntéza benztriazol-l-yl-3-oxo—4-methyl-4-aza-5a-androstan-17[3-karboxylátu

Suspenze 83,7 g methyl-3-oxo-4-methyM-aza-5a-androstan-17p-karboxylátu (viz Rasmusson a kol. J. Med. Chem. 29, 2298-2315, 1986) byla hydrolyzována 7% KOH ve 20 vodném methanolu, poté okyselena na výslednou 17[3-karboxylovou kyselinu.

Kyselina byla ihned konvertována na benzotriazyl-l-yl-3-oxo-4-methyl-4-aza-5a-androstan 17[3-karboxylát, jak popsáno v příkladu 13. Aktivovaný ester (derivát benzotriazolu) byl vyčištěn chromatografií na tenké vrstvě (4 desky 20 cm x 20 cm x 20 xm x 1000 pm silikagel) a eluován 25 směs 4:96 (MeOH-CHCh). Izolovaný produkt byl promyt éterem, výsledná sloučenina byl aktivní ester o teplotě tání 198 až 200 °C za rozpadu.

Příklad 13

Syntéza 17β-(Ν-1 -adamantylkarbamoyl)-4-methyl-4-aza-4a-androstan-3-onu

100,0 mg 4-methyl-4-aza-benzotriazolderivátu připraveného podle popisu v příkladu 12 bylo rozpuštěno v 20,0 ml CH₂C1₂. Za účelem vyčištění roztoku se přidá 127 mg 1-adamantaminu. 35 Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře.

Krystalizace z EtOAc po zfíltrování roztoku Teflon Acrodisc CR poskytla 26,32 mg dané sloučeniny o teplotě tání 210 až 217 °C. Produkt byl dále vyčištěn na 1,0 g silikagelové koloně (EM silikagel) směsí 1:1 aceton-hexan jako eluentem, po rekiystalizaci v ethylacetátu byl 40 výtěžek 21,75 mg bílých jehliček shora uvedené sloučeniny o teplotě tání 203 až 205 °C.

Kalkulace pro C₃oH4₆N₂0₂.1,5 H₂O

C 73,58; H 9,68; N 5,62

Nalezeno C 73,15; H 9,30; N 5,67

Příklad 14

Diastereomerická syntéza 17p(N-oxo-2-norbomanyl-karbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-350 onu

100,0 mg odpovídajícího 4—H thiopyridylesteru z příkladu 3 připraveného podle tohoto postupu, ale s využitím 4-H methylesteru, který byl produktem z příkladu I (viz Rasmusson a kol., J. Med. Chem. svazek 29, str. 2298-2315, 1986), byl rozpouštěn v 3,0 ml suchého tetrahydrofuran

-14CZ 292712 B6 v dusíkové atmosféře. Za účelem vyčištění roztoku se přidá 477 μΐ (+) racemického exo-2aminonorbomanu. Reakce probíhá 16 h při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře. Reakční směs byla vypařena do sucha ve vakuu. Residuum bylo rozpuštěno v chloroformu. Organická vrstva byl promyta 2,5 N kyselinou chlorovodíkovou třikrát, třikrát vodou, třikrát nasyceným roztokem NaCl, vysušena na MgSO₄, zfiltrována a odpařena do such ve vakuu; výtěžek je 56,3 mg racemické diastereomerické směsi.

Surový produkt byl chromatografován na tenké vrstvě (2 desky, 20 cm x 20 cm x 500 pm silikagelu) a eluován směsí 70:30 CHCl₃:aceton; výtěžek je 43,4 mg sloučeniny. Rekrystalizace z EtOAc dává 30 mg sloučeniny o teplotě tání 245 až 245,9 °C.

Nukleární magnetická rezonance (CDC1₃) potvrdila výše uvedenou strukturu.

FAB hmotnostní spektrum kalkulováno pro C26H₃8O2N₂:m/e 411, nalezeno 411.

Kalkulace pro C26H₃8O₂N₂. H₂O

C 72,82; H 9,40; N 6,58

Nalezeno. C 73,21; H 9,20; A 6,25

Příklad 15

Syntéza 17p(N-l-adamantylmethylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

200,0 mg 4-h thiopyridyl aza steroidu podle příkladu 14 suspenduje v 2,0 ml suchého tetrahydrofuranu.

K suspenzi se přidá 400 μΐ 1-aminomethylenadamantanu injekční stříkačkou při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře. Po několika minutách vznikne čirý žlutý roztok, po 1/2 h dojde k vysrážení. Reakce probíhá přes noc v dusíkové atmosféře. Rozředí se CH2CI2, promyje 10% NaOH dvakrát a vodou dvakrát, následuje dvakrát promytí 10% kyselinou chlorovodíkovou, dvakrát vodou a dvakrát nasyceným roztokem NaCl.

Organická vrstva se usuší nad MgSO₄, zfiltruje se, zkoncentruje ve vakuu; nukleární magnetická rezonance potvrzuje žádanou sloučeninu. Z EtOAc rekrystalizuje 149,0 mg sloučeniny o teplotě tání 255 až 257 °C za rozpadu.

FAB hmotnostní spektrum, kalkulováno m/e 464 + 1 = 465

Nalezeno: 465

Příklad 16

Syntéza 17P(N-2-adamantylkarbamoyl)-4-aza-5a-androstan-3-onu

Směs 1,09 g 17p-(N-2-adamantylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-(onu (viz příklad 10, 150 ml ethanolu a 1,0 g 30% pd/c byla přes noc hydrogenována za třepání pod přetlakem 0,306 MPa. Suspenze byla odfiltrována za účelem odstranění katalyzátoru a vysušena za vzniku šedého residua, které byl podrobeno chromatografii na koloně naplněné 200 ml silikagelu směsí 40:60 aceton - methylenchlorid jako eluentem; výtěžek sestával z 1,0 g tuhé látky o teplotě tání 294 až 296 °C.

-15CZ 292712 B6

Kalkulace pro C₂₉H44N₂O₂.0,2 H₂O

C 76,33; H 9,80; Ň 6,14

Nalezeno C 76,23; H 9,86; N 5,92

Spektrální hmotnostní analýza s ionizací nárazem elektronů prokázala molekulární hmotnost 452.

Příklad 17

Syntéza 17P(N-2-adamantylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-onu

Suspenze 500 mg v 17β(N-2-adamantylkarbamoyl)-4-aza-5α-androst-l-en-3-onu připravená podle příkladu 16, 10 ml na sítu usušeného DMF, 140 mg NaH se zahřívají a míchají při teplotě 70 °C pod dusíkovou atmosférou po 18 h. Po vychlazení na teplotu místnosti se přidá 0,4 ml methyljodidu po kapkách za stálého míchání, pokračuje se po 3 h za teploty 50 °C. Reakční směs se pak zchladí na teplotu místnosti, následuje přidání 15 ml vody. Směs se extrahuje třikrát 20 ml CH₂C1₂. Organické vrstvy se zkombinují, promyjí solankou, vysuší a odpaří do sucha tak, že výsledkem bylo bílé krystalické residuum. Po rekrystalizaci z ethylacetátu-CH₂Cl₂, byla konečným výtěžkem bílá, tuhá látka o teplotě tání 246 až 248 °C,

Kalkulace pro C₃oH4₄N₂0₂.0,3 H₂O

C 76,65; H 9,56; N 5,95

Nalezeno C 76,50; H 9,75; N 5,84

Hmotnostní spektrometrie prokázala molekulovou hmotnost 464.

Příklad 18 ϊ *

Syntéza 17 P~-(N-2-adamantylkarbamoyl)-3-oxo-4-methyl-4-aza-5a-androstanu

17p-(N-2-adamantylkarbamoyl)-4-methyl-4-aza-androstan-l-en-3-on (300 mg), připravený podle postupu v příkladu 17 se vloží do 25 ml absolutního ethanolu s 300 mg 30% Pd/C hydrogenačního katalyzátoru. Suspenze se ustála přes noc za přetlaku 0,243 MPa. Poté se suspenze zfiltruje a filtrát se odpaří do sucha. Resiudum rekrystalizuje z horkého ethylacetátu a výtěžek je bílá tuhá látka o teplotě tání 113 až 115 °C.

Kalkulace pro C₃₂H₅ON₂O₃ - 55 EtOAc

C 75,24; H 9,86; N 5,48

Nalezeno: C 75,07; H 9,52; N 5,28

Hmotnostní spektrometrie určila molekulární hmotnost 466 pro nesolvatovanou molekulu.

Příklad 19

Syntéza 17P-(N-methyl-N-2-adamantyl)karbamoyl-4-methyl-4-aza-androst-l-en-3-on

5,0 g 17p-(N-23-adamantyl)karbamoyl-4-aza-androst-l-en-3-on a 1,5 g hydridu sodného v 100 ml suchého tetrahydrofuranu se míchá pod suchým dusíkem po 3 h při 40 °C. Reakce se zchladí na teplotu místnosti, poté se přidává 4 ml methyljodidu po kapkách a směs se nechá stát při teplotě místnosti 1 h. Směs se ochladí v ledové lázni a přidá se velký přebytek vody cca 250 ml. Vodná směs se třikrát extrahuje 100 ml CH₂C1₂, organické extrakty se zkombinují, promyjí vodou, solankou a poté odpaří do sucha. Surový produkt se eluoval na HPLC chromato

-16CZ 292712 B6 grafické koloně (Si gel) směsí 10:1 aceton-C^Ch, docílilo se dvou píků s retenčními časy 3 CV(B) a 3,8 CV(A). Pík A se analyzoval jako 4-methyláza produktu z příkladu 15. Druhý produkt B byl analyzován jako 4-methyláza-17p-(N-methyl-N-2-adamantyl/karbamoyl analog, tj. daná sloučenina o teplotě tání 163 až 165 °C.

Kalkulováno pro C31H46N2O2

C 77,77; H 9,68; N 5,85

Nalezeno C 77,29; H 9,79; N 5,77

Hmotnostní spektrometrie prokázala molekulovou hmotnost 478.

Příklad 20

Syntéza 17 pHN-methy l-N-2-adamantylkarbamoy l)-4-aza-4-methy l-androstan-3-onu

Surová reakční směs z příkladu 19 (4,6 g) se rozpustí v 20 ml ethanolu spolu s 1,0 g 30% Pd/c se hydrogenuje za přetlaku 40-45 psig při teplotě místnosti přes noc. Směs se odfiltruje a residuum se promyje ethanolem. Ethanolový roztok se odpaří do sucha. Rekiystalizací z CHiCh/diethyléter/hexan se získá 800 mg čisté sloučeniny monomethylandrostanu z příkladu 16 o teplotě tání 113 až 115 °C. Druhá a třetí dávka se kombinuje s matečným louhem a poté se podrobí chromatografii HPLC jako v příkladu 17; výsledkem je dimethylovaný produkt o teplotě tání 180 až 182 °C.

Kalkulace pro C31H48N2O2

C 77,45; H 10,06; N 5,83

Nalezeno: C 77,26; H 9,87; N 5,82

Hmotnostní spektrometrie prokázala molekulovou hmotnost 480.

Příklad 21

H-terc-butyl androst-3,5-dien-17p-karboxamid-3-karboxylová kyselina

a) N-terc-butyl androst-3,5-dien-3-bromo-17p-karboxamidu

Do roztoku kyseliny oxalové (0,0011 mol, 0,1 g) a oxalylbromidu (0,211 ml, 3 ml) v 15 ml na sítu usušeném toluenu se přidává po dobu jedné hodiny 1 g (0,003 mol) androst-4-en-3-on17p-karboxylové kyseliny. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti po 2 h, poté se koncentruje ve vakuu. Přebytečný oxalylbromid se odstraní azeotropickou destilací toluenem. Výsledný hnědý olej se znovu rozpustí v toluenu, ochladí se na 0 °C, poté se po kapkách přidá 10 ml tercbutylaminu (7,0 g) v 30 ml toluenu po 15 min. Jakmile se přídavek dokončí, reakční směs se míchá 15 min při 0 °C, poté se udržuje při -20 °C po 18 h. Reakční směs se pak ohřeje na teplotu místnosti a míchá se při 25 °C po 1 h. Těkavé látky se odstraní ve vakuu. Residuum se rozdělí na chloroform/vodu, vrstvy se spolu potřepou a separují; poté se vodná fáze dvakrát zpětně extrahuje chloroformem. Zkombinované organické extrakty se promyjí dvakrát vodou a poté se vysuší bezvodým síranem hořečnatým. Surový produkt se vyčistí chromatografii na silikagelu, získá se 1,06 žádané sloučeniny ve formě bílé tuhé látky.

b) N-terc-butyl-androst-3,5-dien-l 7P-karboxamid-3-karboxylová kyselina

K roztoku N-terc-butyl androst-3,5-dien-3-bromo-17^-karboxamidu (0,5 g, 0,00115 mol) v 5 ml tetrahydrofuranu, ochlazeném na -78 °C (lázeň suchý led/aceton) pod argonem, se po

-17CZ 292712 B6 kapkách přidá 1,5 ml (0,00375 mol) 2,5 M roztoku a—butyllithia v hexanu. Reakční směs se při této teplotě míchá po 1 h, poté se probublává kysličníkem uhličitým po 45 min ve věži s koncentrovanou kyselinou sírovou. Reakční směs se pak nechá ohřát na teplotu místnosti a poté se rozředí vodou, vodným roztokem HC1 a chloroformem. Vrstvy se spolu protřepou a separují, 5 vodná fáze se zpětně dvakrát extrahuje chloroformem. Kombinované organické extrakty se dvakrát promyjí vodou a jednou solankou, poté se vysuší bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědla se odstraní za redukovaného tlaku, získá se 0,6 g surové tuhé látky. Tento materiál se rozmíchá na kaši s hexanem a izoluje se bílá tuhá látka - 0,43 g. Žádaná sloučenina se rekrystalizuje z acetonitrilu, má teplotu tání 247 až 250 °C.

Část 2

Příklad 1

Methyl 3-oxo-4-aza-5a-androst-l-en-l 7|3-karboxylát

Suspenze 83,7 g methyl-3-oxo-aza-5a-androstan-karboxylátu (Rasmusson Johnston and Arth, patent US 4 377 584, 22.3. 1983) a 126,5 g benzenselenového anhydridu v 2,09 1 chlorobenzenu 20 se ohřívá při refluxu po 2 h. Zpětný chladič se přepne na destilační hlavu, směs se pomalu destiluje po 2 h za účelem odstranění vody. Po odpaření roztoku se získá 198 g residua za mokra. Residuum jako roztok v dichlormethanu se promyje roztokem nasyceného vodného NaHCO₃a nasyceným roztokem NaCl, poté se vysuší a odpaří na 172,4 g. Poté se chromatografuje na 2,56 g silikagelu, přičemž se eluuje dichlormethanem (5 1) a poté směsí 4:1 dichlormethan25 aceton. Žádaný produkt se promyje diethyléterem a vysuší se na 49,5 g žádané sloučeniny o teplotě tání 278 až 280 °C.

Příklad 2

S-(2-pyridyl)-3-oxo-4-aza-5a-androst-l-en-l 7 β-thiokarboxylát

Suspenze 25,0 g produktu z příkladu 1 se zmýdelňuje 12,5 KOH v 150,0 ml CH₃OH-H₂O v poměru 5:1 za refluxu po 4h v dusíkaté atmosféře. Směs se ochladí na 25 °C a okyselí na 35 pH < 2. Postupně se přidává 175 ml vody za míchání, vytvoří se krystalická sraženina, která se promyje vodou.

Po vysušení se získá 25 g sloučeniny o teplotě tání 313 až 315 °C.

Surová suchá kyselina (23,0 g) se suspenduje v 210 ml toluenu a k suspenzi se přidá trifenylfosfin (56,0 g) a 2,2 dipyridyldisulfid (48,3 g); směs se míchá přes noc v dusíkové atmosféře. Reakční směs se přemístí do kolony se silikagelem (1,3 g) a eluuje směsí 1:1 aceton- CH₂C1₂. Žádaný thioester byl pomalu eluován; po promytí éterem se získá 26,8 g sloučeniny o teplotě tání 232 až 235 °C.

- 18CZ 292712 B6

Příklad 3

22-methy l-4-aza-21 -nor-5 α-chol-1 -en-3,20-dion

K roztoku 7,2 g S-(2-pyridyl)-3-oxo-4-aza-5a-androst-l-en-17[3-thiokarboxylátu v 288 ml tetrahydrofuranu se přidá při -78 °C 33,6 ml 1,3M S-butylmagneziumchloridu. Po 30 min při -78 °C se nechá roztok ohřát na teplotu místnosti a působí se na něj roztokem nasyceného vodného NaCl. Produkt se extrahuje v dichlormethanu a promyje se nasyceným vodným roztokem NaCl a 10% vodným roztokem NaOH, poté se vysuší a zkoncentruje. Residuum se io eluuje na 430 g silikagelu směsí 9:1 dichlormethan-aceton, získá se 4,5 g žádaného produktu o teplotě tání 246 až 249 °C.

Když se postup opakuje za využití dále uvedených reagencií, získají se produkty:

výchozí materiál	reagencie	produkt
2-(2-pyridyl)2-oxo-4-aza- 5a-androst-l-en-l 7βί1ιϊοkarboxylát	2-pyrrolyl magnézium chlorid	17 B-(2-pyrroly 1-karbonyl)- 4-aza-5a-androst-l-en-3-on teplota tání 294 až 296 °C
S-(2-pyridyl)3-oxo-4methyl-5a-androst-l-en17 β-thiokarboxylát	sec-butyl magnézium chlorid	4,22-dimethy l-4-aza-21 nor-5 α-chlo-1 -en-3,2 0-dien teplota tání 134 až 136 °C
S-(2-pyridyl)3-oxo-4methy l-4-aza-5a-androst-1 en-17β-thiokarboxylát	2-pyrrolyl magnézium chlorid	4-methyl-l 7 β-(2-ργπ·ο1γ1karbonyl)-4-aza-5a-androstl-en-3-on teplota tání 234 až 238 °C
S-(2-pyridyl)3-oxo-4-aza- 5 α-androst-en-17 β-thiokarboxylát 15	izobutyl magnézium chlorid	23-methyl-4-aza-21-nor5a-cholan-3,20-dion teplota tání 220 až 222 °C

-19CZ 292712 B6

Příklad 4

22-methy l-4-aza-21 -nor-5 α-chol-1 -en-3,20-d ion

alternativní způsob

Roztok 21 g 22-methyl-4-aza-21-nor-5a-cholan-3,20 dionu a 29,49 g benzenselenového anhydridu v 552 ml chlorbenzenu se refluxuje za separace vody po 4 h. Směs se zkoncentruje a residuum se znovu rozpustí v dichlormethanu. Po promytí 10% vodným hydroxidem sodným, 10% kyselinou chlorovodíkovou a nasyceným vodným chloridem sodným se roztok vysuší a zkoncentruje na 45 g žlutého residua. Residuum se chromatografuje na 1,55 kg silikagelu ío v dichlormethanu a eluuje se ethylacetátem; získá se 10,0 g žádané sloučeniny o teplotě tání 248 až 251 °C.

Když se postup opakuje za využití 23-methyl-4-aza-21-nor-5a-cholan-3,20-dionu jako výchozího materiálu, získá se 23-methyl-4-aza-21-nor-5a-chol-l-en-3,20-dion o teplotě tání 15 283 až 286 °C.

Příklad 5

17[3-(fenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

K míchané suspenzi 43 g S-(2-pyridyl)-3-oxo-4-aza-5a-androst-l-en-17P-thiokarboxylát v 500 ml bezvodého tetrahydrofuranu se při -78 °C přidá roztok tetrahydrofuranu z 157 ml 2N fenylmagneziumchloridu po 60 min. Po míchání při teplotě -78 °C se směs ohřeje na -30 °C, 25 přidá se 10% kyselina chlorovodíková a teplota se udržuje pod -20 °C. Po ohřevu na 0 °C se směs rozředí 2000 ml vody a extrahuje se 4000 ml dichlormethanu po částech. Organická vrstva se následně promyje vodou, 1 N hydroxidem sodným, vodou a nasyceným chloridem sodným.

Usuší se na MgSO₄; po koncentraci se získá 37,5 g surového produktu. Rekrystalizace ze směsi dichlormethan/ethylacetát pak dává žádaný produkt o teplotě tání 290 až 291 °C -30,4 g - 77 % 30 výtěžek.

Kalkulace C 77,48; H 8,26; N 3,61 nalezeno C 77,16; H 8,19; N 3,56

Příklad 6

17P-4-fluorofenylkarbonyl-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

Opakuje se postup z příkladu 5 s výjimkou užití p-fluorofenylmagneziumbromidu jako Grignardova činidla; získá se uvedená sloučenina o teplotě tání 315 až 315,5 °C.

-20CZ 292712 B6

Příklad 7

17[3-(cyklohexylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

K suspenzi 34,8 g thiopyridylesteru z příkladu 2 v 700 ml bezvodého tetrahydrofuranu se přidává při -65 °C 130 ml 2M éterového roztoku cyklohexylmagneziumchloridu po 20 min. Po míchání při -70 °C po 60 min se roztok ohřeje a poté se míchá při teplotě -10 °C po 60 min. Směs se rozředí 500 ml dichlormethanu a poté se po kapkách dále přidává dichlor-methan, fáze se separují a organická vrstva se následně promyje vodou, IN hydroxidem sodným, vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného. Organický roztok byl odbarven aktivním uhlím, zfiltrován a koncentrován na residuum, které krystalizovalo z ethylacetátu; výtěžek 28,2 g sloučeniny o teplotě tání 271,5 až 277 °C.

Příklad 8

Sloučenina z příkladu 7 byla připravena rovněž tímto postupem:

Ke směsi 150 g methyl-3-oxo—4-aza-5a-androst-l-en-17p-karboxylátu v 2800 ml bezvodého tetrahydrofuranu se za míchání přidává při teplotě nižší než 0 °C 678 ml 2 N éterového roztoku cyklohexylmagneziumchloridu. Tento roztok se refluxuje po 6 h. Reakční směs ochlazená na méně než 10 °C se okyselí 10% roztokem HC1 a extrahuje se dichlormethanem. Organická vrstva se následně promyje vodou, nasyceným NaHCO₃. Poté se vysuší na MgSO₄ a odpaří: získá se 163 g surového cyklohexylketonu. Rekrystalizace z dichlormethanu/ethylacetátu dává 131 g čistého materiálu o teplotě tání 269 až 270 °C.

Kalkulace C 77,37; H 9,74; N 3,61

Nalezeno C 77,37; H 10,13; N 3,61

Příklad 9

17(3-(cyklopentylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

Když se opakuje postup podle příkladu 7 nebo 8 za využití cyklopentylmagneziumchloridu, získá se sloučenina o teplotě tání 272 až 273 °C.

Kalkulace C 75,25; H 9,60; N 3,66

Nalezeno C 74,89; H 9,54; N 3,78

Příklad 10

17p-(cyklobutylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

Když se opakuje postup z příkladu Ί nebo 8 za využití cyklobutylmagneziumchloridu, získá se výše uváděná sloučenina o teplotě tání 288 až 289 °C.

Kalkulace C 77,71; H 9,36; N 3,94 Nalezeno C 78,06; H 9,61 ;N 3,87

-21 CZ 292712 B6

Příklad 11

Syntéza 17|3-(4-fenylbenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

K suspenzi 258,0 mg suchých aktivovaných magnéziových třísek v 5,0 ml suchého tetrahydrofuranu se přidá 932,0 mg 4-brombifenylu v 5,0 ml suchého tetrahydrofuranu v dusíkové atmosféře. Reakce probíhá v ultrazvukové lázni při rozmezí teplot od 24 až 30 °C. K dobře promíchané směsi se přidá po kapkách 1,2-dichlormethan v dusíkové atmosféře. Poté reakce probíhala po 1 až 1,5 h při 28 °C/Ň₂. Koncentrace Grignardova činidla byla 4,0 mmol v 10,0 ml 10 suchého tetrahydrofuranu.

Steroid z příkladu 2 (205,0 mg, 0,5 mmol thiopyridylester) byl suspendován v 2,0 ml suchého tetrahydrofuranu, ochlazen na -80 °C a 3,80 ml výše uváděného Grignardova činidla bylo injekční stříkačkou přidáváno do steroidní suspenze po dobu 5 až 10 hodin v dusíkové atmosféře. 15 Roztok byl rozředěn 10,0 ml methylenchloridu a poté ochlazen nasyceným vodným roztokem

NH4CI na pH 4. Organické vrstvy se separují, promyjí třikrát vodou, třikrát nasyceným chloridem sodným, usuší nad MgSO4, zfiltrují a vysuší ve vakuu; výtěžek byl 156,2 mg surového produktu. Po krystalizaci z EtOAc se získá 98,58 mg sloučeniny o teplotě tání 290,5 °C.

Kalkulace pro C₃₁H₃₅NO₂

C 82,08; H 7,78; N 3,09

Nalezeno C 81,84; H 8,01; N 3,06

FAB kalkulace pro C₃iH₃₅NO₂ 453, nalezeno 453.

Příklad 12

17|3-(3-fenylbenzoyl)-4-aza-5a-androst-1 -en-3-on

K suspenzi 258,0 m suchých aktivovaných magnéziových třísek v 8,0 ml suchého tetrahydrofuranu se přidá 932,0 mg 3-brombifenylu v 2,0 ml suchého tetrahydrofuranu v dusíkové atmosféře. Reakce probíhá v ultrazvukové lázni při teplotě 24 až 30 °C. K dobře promíchané směsi se po kapkách přidává 30 ml 1,2 dibromethanu v dusíkové atmosféře. Koncentrace 35 Grignardova činidla byla 4 mmol v 10,0 ml suchého tetrahydrofuranu.

Steroid z příkladu 2 v množství 205,0 mg (0,5 mmol) suspenduje v 2,0 ml suchého tetrahydrofuranu, ochladí se na -80 °C, 3,80 ml výše připraveného Grignardova činidla se přidává injekční stříkačkou ke steroidní suspenzi po 5 až 10 min v dusíkové atmosféře; reakce přibíhá 1 h 40 při -80 °C/N₂ a poté při -10 °C po další hodinu v dusíkové atmosféře. Roztok se rozředí 10,0 ml methylenchloridu a ochladí nasyceným vodným roztokem NH4CI na pH 4. Organické vrstvy se separují, promyjí třikrát vodou, třikrát nasyceným chloridem sodným, vysuší nad MgSO4, zfiltrují a odpaří ve vakuu. Po krystalizaci z ethylacetátu se získá 122,84 mg sloučeniny. Materiál byl vyčištěn chromatografií na 20,0 g silikagelu směsí 70:30 CHCl₃-aceton; výtěžek sloučeniny 45 byl 117, mg o teplotě tání 184 až 185 °C.

Kalkulace C 82,02; H 7,78; N 3,09

Nalezeno C 82,28; H 8,04; N 2,98

FAB kalkulace pro C₃₁H₃₅NO₂: 435, nalezeno 435.

-22CZ 292712 B6

Příklad 13

Syntéza 17[3-(4-methylsulfínylbenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

K suspenzi 250,0 suchých aktivovaných magnéziových třísek v 8,0 ml suchého tetrahydrofuranu se přidá 812,0 mg p-bromfenylmethylsulfídu v 3,0 ml suchého tetrahydrofuranu v dusíkové atmosféře. Reakce probíhá v ultrazvukové lázni při teplotách od 24 až 30 °C. K dobře promíchané směsi se po kapkách přidá 40 pm l,2dibromethanu v dusíkové atmosféře a reakce dále probíhá 1 až 1 1/2 h při 29 °C. Koncentrace Grignardova činidla byla 4,0 mmol v 10 ml suchého tetrahydrofuranu.

Steroid z příkladu 2, tj. pyridylthioester, 205 mg byl suspendován v 2,0 ml suchého tetrahydrofuranu, ochlazen na -80 °C a výše připravované Grignardovo činidlo se přidávalo injekční stříkačkou k steroidní suspenzi po 5 až 10 min v dusíkové atmosféře, reakce probíhala po 1 h při -80 °C, poté při -10 °C do dusíkové atmosféře. Roztok byl rozředěn 10,0 ml methylenchloridem a ochlazen nasyceným vodným roztokem NH4CI na pH 4. Poté se organické vrstvy separují, promyjí třikrát vodou, třikrát nasyceným chloridem sodným, vysuší se nad MgSO₄, zfíltrují se a odpaří ve vakuu; výtěžek činí 105,0 mg surového produktu.

Surový produkt byl chromatografován na TLC (jedna deska 20 cm x 20 cm x 20 cm x 1000 pm silikagelu) eluovaného směsí 80:20 CH2CI2 - aceton; získá se 66,0 mg sloučeniny. Krystalizace z EtOAc dává 45,0 mg sloučeniny o teplotě tání 286 až 287 °C.

Kalkulace pro C26H33NO2S- 424, nalezeno 424.

Příklad 14

Syntéza 17[3-(4-methylsulfinylbenzoyl) a (4-methylsulfonylbenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en3-onu

A. Oxidace

19,91 mg methylthio produktu z příkladu 13 se rozpustí v 2,5 ml CH2CI2, vychladí se na 0-(-2) °C a na směs se působí roztokem 9,6 mg m-chloroperbenzoové kyseliny v 1,0 ml CH2CI2 po 4 min. Po míchání 1 h při 0-(-2) °C se reakce rozředí 10 ml CH2CI2. Vrstvy se následně promývají 2,5% NaHCO₃, H₂O a nasycenými roztoky NaCl; organická vrstva se usuší nad MgSO₄ přes noc, zfiltruje a odpaří ve vakuu, výtěžek je 17 mg produktu. Krystalizace z EtOAc dává 11,8 mg sloučeniny ve formě tuhé látky o teplotě tání 313 až 313,5 °C.

Kalkulace pro C26H33NO3S . 1/4 H₂O

C 70,31; H 7,60; N 3,15

Nalezeno C 70,47; H 7,70; N 3,00

FAB pro C26H33NO3S kalkulace 440, nalezeno 440.

Sulfon % odpovídajícího sulfonu 17β-(4—methylsulfonylbenzoyljderivátu bylo izolováno chromatografícky z reakce jako vedlejší produkt. Rekrystalizace z EtOAc poskytla tuhou látku o teplotě tání 279 až 279,5 °C. Molekulární hmotnost FAB je 456, kalkulace 456.

Kalkulace pro C26H33NO4S . 0,25 H₂O

C 67,87; H 7,28; N 3,04

Nalezeno C 67,96; H 6,72; N 2,95

-23CZ 292712 B6

Příklad 15

Syntéza 17(3-(4-acetoxymethylthiobenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

165 μΐ trifluoracetanhydridu bylo rozpuštěno v 780 μΐ acetanhydridu a udržováno 5 h při teplotě místnosti.

ίο K 300 μΐ výše uvedeného roztoku směsi anhydridů se za míchání přidává 34,15 mg čistého sulfoxidu z příkladu 14. Po několika minutách se přidává 54,0 μΐ 2,6-lutidinu a reakce se nechá ustát při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře po 17 h.

Za redukovaného tlaku se odstraní tekuté anhydridy a residuum se extrahuje čtyřikrát CHCI3. 15 Tyto extrakty se promyjí postupně zředěnou kyselinou chlorovodíkovou, 5% roztokem NaHCO₃ třikrát, vodou třikrát a poté nasyceným roztokem NaCl; residuum se vysuší na MgSO4, zfiltruje a roztok se odpaří do sucha ve vakuu - výtěžek 42,1 mg surového produktu.

Surový produkt ze stupně A se chromatografií na silikagelu vyčistí směsí 95.5 CHCh-aceton, 20 krystalizace z EtOAc vznikne 17,8 mg tuhé látky výše uvedené sloučeniny o teplotě tání 235 až 236 °C.

Kalkulace pro C28H35O4NS . 1/4 H₂O

C 68,57; H 7,40; N 2,86

Nalezeno C 69,02; H 7,39; N 2,73

Kalkulace FAB pro C28H35O4NS 482, nalezeno 482

Nukleární magnetická rezonance byla v souladu s uvedenou strukturou produktu.

Příklad 16

Syntéza 17P(4-merkaptobenzoyl)~4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

40,0 mg acetoxymethylthio derivátu z příkladu 15 se suspenduje v 3,0 ml izopropanolu. Reakční směs se několikrát propláchne dusíkem a ve vakuu a systém se udržuje po dusíkovou atmosférou. Ke směsi se přidá 40,0 mg K₂CO₃ v 2,00 ml vody (zbavené kyslíku) injekční stříkačkou a teplotou reakční směsi se zvyšuje až na 80 °C za mírného refluxu a nepatrného vakua 10 min, poté 40 pod dusíkovou atmosférou po 1 h. Reakční směs se promění v čirý žlutý roztok, teplota se upraví na teplotu místnosti, ochladí na 0 až 5 °C a pod dusíkovou atmosférou se působí 2,5 N kyselinou chlorovodíkovou. Reakční směs se extrahuje čtyřikrát CH₂C1₂. Organická vrstva se promyje čtyřikrát vodou, třikrát nasyceným roztokem s soli a usuší se na MgSO4. Po filtraci a odpaření do sucha byl výtěžek 36,9 mg surového produktu. Ten se rozpustí v 2,0 ml CHC1₃, zfiltruje přes 45 teflon (Acrodics CR), vyčistí preparativní kapalnou chromatografií na silikagelu a eluuje směsí

60:40 CH₂Cl₂-aceton. Po krystalizaci z EtOAc se získá 20,7 mg sloučeniny o teplotě tání 285 až 286 °C.

Kalkulace pro C25H31O2NS . 1/2 H₂O

C 72,19; H 7,69; N 3,24

Nalezeno C 71,82; H 7,46; N 3,26

FAB kalkulováno pro C25H31O2NS 410, nalezeno 410.

-24CZ 292712 B6

Příklad 17

Syntéza 17(3-(4-dimethylaminobenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

K suspenzi 291,0 mg suchých aktivovaných magnéziových třísek v 8,0 ml suchého tetrahydrofuranu se přidává 800,0 mg 4-brom-N,N-dimethylanilinu v 2,0 ml suchého tetrahydrofuranu v dusíkové atmosféře. Reakce probíhá v ultrazvukové lázni při teplotě od 24 až 30 °C. K dobře promíchané směsi se po kapkách přidá 30 ml 1,2-dibromethanu v dusíkové atmosféře. Reakce probíhá 1 až 1,5 h při 28 °C v dusíkové atmosféře. Koncentrace Grignardova činidla byla 4,0 mmol v 10,0 ml suchého tetrahydrofuranu.

Steroid z příkladu 2 (205 mg pyridylthioesteru) se suspenduje v 2,0 ml suchého tetrahydrofuranu, ochladí na -80 °C, 3,8 ml (3 ekvivalenty) výše uváděného Grignardova činidla se přidá injekční stříkačkou ke steroidní suspenzi během 5 až 10 min v dusíkové atmosféře. Reakce probíhá 1 h při teplotě -80 °C v dusíkové atmosféře, poté další hodinu při teplotě -10 °C rovněž v dusíkové atmosféře. Roztok se rozředí 10,0 ml methylenchloridu a zchladí nasyceným vodným roztokem NH4CI na pH 4. Organické vrstvy se separují, promyjí třikrát vodou, třikrát nasyceným chloridem sodným, usuší na MgSO4, zfiltrují a odpaří ve vakuu do sucha; výtěžek je 151,3 mg surového produktu. Krystalizace z ethylacetátu dává 124,5 mg výše uváděné sloučeniny o teplotě tání 268,55 až 269 °C.

FAB kalkulace pro C27H36N2O2 421, nalezeno 421.

Nukleární magnetická rezonance (proton v CDCI3) potvrdila uváděnou strukturu.

Příklad 18

Všeobecný postup přípravy chráněných sil derivátů

1,0 mol fenolu nebo jeho derivátu nebo 1 mol alkoholu se uvede do reakce s 1,5 1 suchého methylenchloridu. K čirému roztoku se přidá 3,0 mol imidazolu v dusíkové atmosféře. Čirý roztok se ochladí na 0 °C v dusíkové atmosféře a 2,0 mol terc-butyldimethylchlorosilanu v 300,0 ml suchého methylenchloridu a přidá po kapkách při 0 °C v dusíkové atmosféře, poté dojde k vysrážení. Ledová lázeň se odstraní a reakce se nechá probíhat přes noc při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře. Poté se směs zfiltruje, koláč se promyje studeným roztokem CH2CI2 a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu; získá se surový produkt, který se vyčistí filtrací na koloně se silikagelem (1 g surového produktu na 100 g silikagelu s užitím CH2CI2 jako eluantu). Tento postup poskytuje cca 99 % čistého silyl derivátu fenolů a alkoholů.

Příklad 19

Syntéza 17β—(4—hydroxybenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

A. Grignardova reakce

K suspenzi 1,22 g suchých aktivovaných magnéziových třísek v 20,0 ml suchého tetrahydrofuranu se přidává 5,6 g l-brom-4-(terc-butyl dimethyl siloxybenzenu (připraveného zpbromofenolu podle výše uváděného všeobecného postupu) v 10,0 ml tetrahydrofuranu v dusíkové atmosféře. Reakce probíhá v ultrazvukové lázni při teplotě 24 až 30 °C. K dobře promíchané směsi se po kapkách přidává 150 μΐ 1,2 dibromethanu v dusíkové atmosféře. Reakce probíhá 1 až

1,5 h. Koncentrace Grignardova činidla byla 19,5 mmol v 30,0 ml suchého tetrahydrofuranu.

-25CZ 292712 B6

Steroid z příkladu 2 (1,02 g, 2,49 mmol) se suspenduje v 20,0 ml suchého tetrahydrofuranu, ochladí se na -80 °C, výše uvedené Grignardovo činidlo (11,5 ml) se přidává injekční stříkačkou ke steroidní suspenzi během 5-10 min v dusíkové atmosféře. Reakce probíhá 1 h při teplotě -80 °C, poté při -10 °C další hodinu v dusíkové atmosféře. Reakční směs se rozředí 10,01 ml 5 methylechloridu a upraví nasyceným vodným roztokem HN₄C1 na pH 4. Organické vrstvy se separují, třikrát promyjí vodou, třikrát nasyceným chloridem sodným, vysuší nad MgSO₄, zfiltrují a odpaří ve vakuu za žlutou tuhou látku. Po krystalizaci z ethylacetátu se získá 607 mg produktu o teplotě tání 248 až 249 °C.

Kalkulace pro C31H45O3NSÍ

C 73,32; H 8,93; N 2,75

Nalezeno C 73,27; H 8,99; N 2,75

FAB: nalezeno 408, kalkulováno 508.

B. Desilylace

1,3 produktu ze stupně a se rozpustí v 20,0 ml suchého tetrahydrofuranu. Po ochlazeni na -5 °C se přidá 437 μΐ ledové kyseliny octové v dusíkové atmosféře. Ke studenému roztoku při -5 °C se 20 injekční stříkačkou přidá 3,0 ml tetra-n-butyl-ammoniumfluoridu po kapkách v dusíkové atmosféře. Za míchání probíhá reakce po 1 až 1,5 h při teplotě od 0 °C do -5 °C rovněž v dusíkové atmosféře. Poté se reakční směs nalije do dvouvrstvé směsi nasyceného roztoku ethylacetátu/hydrogenuhličitanu sodného při °C. Vodná vrstva se separuje a dále extrahuje EtOAc třikrát a CH2CI2 rovněž třikrát.

Organické vrstvy se zkombinují, promyjí třikrát vodou, poté nasyceným roztokem chloridu sodného a usuší nad MgSO₄, zfiltrují a odpaří do sucha ve vakuu. Surový produkt krystalizuje z ethylacetátu, výtěžek 977,9 mg. Rekiystalizace z methanolu dává 842,3 mg sloučeniny o teplotě tání 296 až 297 °C.

Kalkulace pro C25H31NO3. 1/3 H₂O

C 75,15; H 7,98; N 3,51

Nalezeno C 75,13; H 7,76; N 3,54

Hmotnostní spektrometrie FAB-nalezeno 394, kalkulováno 394.

Příklad 20

17fl-(3,5-dimethyl-4—hydroxybenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

A. Příprava Grignardova činidla

K suspenzi 260,0 mg suchých aktivovaných magnéziových třísek v 6,0 ml suchého tetrahydro45 furanu bylo přidáno 628,0 mg l-brom-3,5-dimethyl-4—terc-butyl-dimethylsiloxy)benzenu (připraveného z 4-brom-2,6-dimethylfenol podle všeobecného postupu výše popsaného) v 4,0 ml tetrahydrofuranu v dusíkové atmosféře. Reakce byla prováděna v ultrazvukové lázni při teplotách od 24 až 30 °C. K dobře promíchané směsi se po kapkách přidá 40 μΐ 1,2 dibromethanu v dusíkové atmosféře, poté reakce probíhá 2 h. Koncentrace Grignardova činidla takto připra50 veného byla 2 mmol v 10,0 ml suchého tetrahydrofuranu.

Steroid z příkladu 2 (205,0 mg, 0,5 mmol) byl suspendován v 3,0 ml suchého tetrahydrofuranu, ochlazena na -80 °C a 7,5 ml (1,50 miliekv.) shora uváděného Grignardova činidla bylo zavedeno injekční stříkačkou do steroidní suspenze po 5-10 min v dusíkové atmosféře, reakce 55 probíhá 1 h při -80 °C při -10 °C další hodinu v dusíkové atmosféře.

-26CZ 292712 B6

Reakční směs se ochladí 1N HC1, rozředí chloroformem, organické vrstvy se zkombinují, promyjí se třikrát vodou, třikrát nasyceným chloridem sodným a vysuší na MgSO₄, zfiltrují a koncentrují ve vakuu. Surové residuum se promyje éterem a výtěžek je 121,7 mg sloučeniny.

Surový produkt byl rozpuštěn ve směsi 70:30 CHCl₃-aceton, zfíltrován teflonem (Acrodisc CR) a vyčištěn preparativní HPLC (Waters-Prep-pak) na silikagelu a eluován směsí 70:30 CHC1₃aceton.

Hlavní složka rekrystalizovala z ethylacetátu, vzniklo 52,0 mg sloučeniny o teplotě tání 245 až

245,5 °C.

Kalkulováno pro C₃₃H4₉O₃NSi

C 73,96; H 9,23; N 2,61

Nalezeno: C 74,06; H 9,33; N 2,64

Hmotnostní spektrometrie FAB -nalezeno 536, kalkulováno 536

B. Deblokování silylderivátů

54,0 mg shora uváděného produktu z příkladu A se rozpustí v 1,3 ml suchého tetrahydrofuranu. Čirý roztok se ochladí na 0 °C a 29 μΐ ledové HOAc a přidá injekční stříkačkou v dusíkové atmosféře. Do výše uváděného roztoku se přidává po kapkách 172 μΐ tetra-n-butylammoniumfluiridu při 0 °C rovněž injekční stříkačkou v dusíkové atmosféře. Reakce se nechá probíhat při 0 °C v dusíkové atmosféře po 1 až 1,5 h. Reakční směs se nalije do směsi ledu/nasyceného roztoku NaHCO₃ a EtOAc. Poté se směs několik minut míchá. Vrstvy se separují a vodná vrstva se extrahuje třikrát EtOAc a třikrát HCL₃.

Po kombinaci organických vrstev a trojnásobném promytí vodou, následuje promytí třikrát nasyceným chloridem sodným, poté vysušení na MgSO₄, filtrace a odpaření do sucha ve vakuu; výtěžek je 52,2 mg.

Z EtOAc produkt krystalizoval a poskytl 22,5 mg sloučeniny o teplotě tání od 305 až 306 °C.

Kalkulováno pro C₂₇H₃₅O₃ a. H₂O

C 73,77; H 8,49; N 3,10

Nalezeno C 73,62; H 7,90; N 3,44

Hmotnostní spektrometrie FAB, kalkulováno 422, nalezeno 422.

Příklad 21

Syntéza 17|3-(4-methoxybenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

A. Grignardova reakce

K suspenzi 258,0 mg suchých aktivovaných magnéziových třísek v 8,0 ml tetrahydrofuranu v dusíkové atmosféře se přidá 748,0 mg p-bromanisolu v 2,0 ml suchého tetrahydrofuranu. Reakce probíhá v ultrazvukové lázni při teplotách od 24 až 30 °C v dusíkové atmosféře. K dobře promíchané směsi se po kapkách přidává 30,9 μΐ 1,2-dibromethanu jako katalyzátoru. Reakce probíhá 1 až 2 h při 28°C. Takto připravené Grignardovo činidlo mělo koncentraci 4 mmol v 10,0 μΐ suchého tetrahydrofuranu.

-27CZ 292712 B6

Steroid z příkladu 2 (205,0 mg - 0,50 mml) se suspenduje v 2,0 ml tetrahydrofuranu, zchladí na -78 °C a výše uvedené Grignardovo činidlo (3,75 ml; 14 miliekv.) se přidává injekční stříkačkou ke steroidní suspenzi po 5 až 10 min v dusíkové atmosféře, poté při -10 °C rovněž v dusíkové atmosféře. Výsledná reakční směs je čirý roztok, který se zchladí na 0 až 5 °C, rozředí chloro5 formem a zchladí 1N HC1. Organické vrstvy se separují, promyjí dvakrát vodou, poté nasyceným roztokem NaCl, vysuší nad MgSO₄, zfiltrují a odpaří ve vakuu. Surový produkt se promyje éterem a vykrystalizuje z EtOAc; výtěžek je 110 mg sloučeniny o teplotě tání 305 až 306 °C. Další vyčištění bylo provedeno chromatografíckou izolací na TLC desce (20 cm x 20 cm x 1000 pm) za využití směsi 70:30 CHCI3- aceton). Rekrystalizace z EtOAc dává 78,56 mg výše 10 uvedené sloučeniny o teplotě tání 305 až 306 °C. Hmotnostní spektrometrie FAB, kalkulováno 408, nalezeno 408

Příklad 22

Syntéza 17 (3-(3-hydroxybenzoyl)—4—aza-5a-androst-l -en-3-onu

A. Příprava Grignardova činidla

K suspenzi 230,0 mg suchých aktivovaných magnéziových třísek v 2,0 ml suchého tetrahydrofuranu se přidá 722,4 mg l-brom-3-terc-butyl dimethyl-solyloxybenzenu (připraveného z 3-bromfenolu podle všeobecného postupu výše popsaného) v 8,0 ml suchého tetrahydrofuranu v dusíkové atmosféře. Reakce probíhá v ultrazvukové lázni při teplotě od 24 až 30 °C v dusíkové atmosféře. K dobře promíchané směsi se po kapkách přidává 20,0 μΐ 1,2-dibromethanu v dusí25 kové atmosféře. Reakce probíhá po 2,5 h při 28 °C v dusíkové atmosféře. Takto připravené Grignardovo činidlo má koncentraci 2,52 mmol v 10,0 ml suchého tetrahydrofuranu.

Steroid z příkladu 2 (205,0 mg - 0,5 mmol) se suspenduje v 2,0 tetrahydrofuranu, zchladí na -78 °C a výše připravené Grignardovo činidlo (6,0 ml - 1,5 miliekv.) se injekční stříkačkou 30 přidává ke steroidní suspenzi po 5 až 10 min v dusíkové atmosféře, poté se další hodinu míchá při teplotě -10 °C v dusíkové atmosféře. Při 0 °C se čirá reakční směs chladí na -5 °C 1 N HC1 po 10 min a poté se rozředí CHCI3. Zkombinované organické vrstvy se promyjí třikrát vodou, třikrát nasyceným NaCl a vysuší se na MgSO₄, zfiltrují se a zkoncentrují ve vakuu; výsledkem je surový produkt, kteiý se vyčistí na silikagelové koloně a eluuje směsí 70:30 CHCl₃-aceton. Žádaný 35 produkt činí 58,0 mg jako silylderivát, 17β—(terc-butyl-dimethylsilyloxybenzoyl)-4-methyl—4— aza-5a-androst-l-en-3-on.

B. Deblokování

57,6 mg výše uvedeného silylderivátu se rozpustí v 3,0 ml suchého tetrahydrofuranu. Roztok se zchladí na 0 °C, injekční stříkačkou se přidá 20 μΐ ledové kyseliny octové. K čistému roztoku se přidává injekční stříkačkou 130 μΐ (n-butyl)₄NF a reakce probíhá po 1 h EtOAc/NaHCO₃s 0 °C. Vodná vrstva se separuje, extrahuje třikrát EtOAc a třikrát chloroformem. Organické vrstvy se zkombinují a promyjí třikrát vodou, třikrát nasyceným roztokem NaCl, vysuší nad MgSO₄, 45 zfiltrují a odpaří ve vakuu tak, že výtěžek je 57,11 mg surového produktu; tento produkt se chromatografuje na tenké vrstvě (jedna deska, 20 cm x 20 cm x 20 pm silikagelu) eluuje směsí 70:30 CHCf-aceton. Výtěžek je 44,5 sloučeniny; po rekrystalizaci z EtOAc 29,30 mg sloučeniny o teplotě tání 279 až 280 °C.

Kalkulace pro Ο₂5Η₃₁ΝΟ3.8H₂O

C 73,60; H 8,06; A 3,43

Nalezeno C 73,26; H 8,22; A 3,28

-28CZ 292712 B6

Hmotnostní spektrometrie FAB, kalkulováno 394, nalezeno 394

Příklad 23

Syntéza 17[3-(4-hydroxymethyl-benzoy!)-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

A. Příprava Grignardova činidla

Ksuspenzi 100,0 mg (4 mmol) suchých aktivovaných magnéziových třísek v 5,0 ml suchého tetrahydrofuranu v dusíkové atmosféře se přidá 753,0 mg (2,5 mmol) l-brom-4-terc-butyl dimethyl silyl oxamethylbenzenu (připraveného z 4-brombenzyl alkoholu podle všeobecného postupu výše popsaného). Reakce probíhá v ultrazvukové lázni při teplotě od 24 až 30 °C v dusíkové atmosféře. K dobře promíchané směsi se přidá 20 μΐ 1,2-dibromethanu v dusíkové atmosféře. Reakce probíhá 2 h při 28 °C v dusíkové atmosféře. Koncentrace připraveného Grignardova činidla je 2,5 mmol v 5,0 ml suchého tetrahydrofuranu.

B. Grignardova reakce

Steroid z příkladu 2 (205,0 mg - 0,5 mml) suspenduje v 2,0 ml tetrahydrofuranu, zchladí se na -78 °C a výše připravené Grignardovo činidlo (3,0 ml, 7,75 miliekv.) se injekční stříkačkou zavádí do steroidní suspenze po 5-10 min v dusíkové atmosféře. Reakce probíhá po 1 h při -80 °C v dusíkové atmosféře, další hodinu při -10 °C v dusíkové atmosféře. Čirý reakční roztok se zchladí nasyceným NH4CI na 0 až 5 °C, poté rozředí CH2CI2. Organické vrstvy se separují a promyjí třikrát vodu, třikrát nasyceným NaCl, vysuší se nad MgSO₄, zfiltrují a odpaří ve vakuu do sucha. Surový produkt krystalizoval z EtOAc na 137,8 mg silyl produktu.

Hmotnostní spektrometrie FAB, kalkulace pro C30H41O3NSÍ: 521,75 Nalezeno 522,0

B. Deblokování

23,67 mg produktu ze stupně B se rozpustí v 0,5 tetrahydrofuranu v 0,5 ml MeOH a zchladí na °C v dusíkové atmosféře. Ke studenému roztoku se přidá 10 μΐ koncentrované kyseliny sírové /98 %/. Reakční směs se míchá po 45 min při 0 °C v dusíkové atmosféře. K chladnému roztoku při 0 °C se pomalu přidává nasycený roztok NaHCO₃, extrahuje se třikrát CHC1₃. Organické vrstvy se třikrát promyjí vodou, třikrát nasyceným NaCl, roztok se vysuší nad MgSO₄, zfíltruje a odpaří do sucha ve vakuu, výtěžek je 10,18 mg. Po chromatografii na tenké vrstvě a elucí směsí 1:1 CHCl₃-aceton krystalizuje surový produkt EtOAc na 6,0 mg produktu o teplotě tání 318 až 320 °C.

Kalkulace pro C₂6H₃₃O3a . 1/3 H₂O

C 75,41; H 7,94; N 3,38

Nalezeno C 75,61; H 7,84; N 3,12

Hmotnostní spektrometrie FAB Kalkulace 408, nalezeno 48

-29CZ 292712 B6

Příklad 24

Syntéza 17[3-(4-karboxybenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

A. Oxidace

90,02 mg produktu z příkladu 23 se rozpustí v 2,63 ml kyseliny octové a k čirému roztoku se přidá 69,0 mg CrO₃ (předem vysušen na P₂O₅ při laboratorní teplotě po dva dny ve vakuu). Po celonočním míchání se reakční roztok rozředí vodou a ponechá přes noc v ledničce. Pak se 10 reakční směs zfiltruje a matečný louh i propraná látka se extrahuje přes noc extrakcí z kapaliny do kapaliny (H₂O-Ét0Ac) za refluxu. Organická vrstva se vysuší nad MgSO₄, zfiltruje a odpaří ve vakuu. Residuum se rozpustí v horkém MeOH, zfiltruje a odpaří ve vakuu, výtěžek je 32,0 mg.

FAB kalkulace pro C₂₆H₃iO₄H 422, nalezeno 422

B. Vyčištění

Výše uvedená volná kyselina byla vyčištěna rozpuštěním produktu v roztoku 1N hydroxidu 20 sodného. Čirý roztok byl třikrát extrahován EtOAc. Vodný zásaditý roztok byl zchlazen a okyselen po kapkách 1 N HC1 na pH 4 za míchání. Reakční směs se nechala stát 1 h při 0 °C. Poté byla filtrována a residuum promyto studenou vodou, vysušeno přes noc při teplotě 100 °C ve vakuu při 0,2 mm tlaku. Výtěžek výše uvedené volné kyseliny je 9,85 mg.

FAB kalkulace pro C₂₅H₃₁O₄a: 422, nalezeno 422

Nukleární magnetická rezonance indikovala produkt jako kyselinu.

C. Sodná sůl výše uvedené kyseliny

4,9 mg výše uvedené kyseliny bylo rozpuštěno v 2,0 ml horkého methanolu. Do čirého roztoku se přidá 11,6 μΐ 1 A NaOH (vod.). Po odpaření methanolu ve vakuu se do roztoku přidá voda a roztok upraví na pH 7,21. Vodný roztok se vysuší mražením, výtěžek je 6,3 mg sodné soli výše uvedené kyseliny.

Příklad 25

Syntéza 17|3-(4-hydroxyethylbenzoyl)-4—aza-5a-androst-l-en-3-onu

A. Grignardovo činidlo

K suspenzi 252 mg suchých aktivovaných Mg třísek v 10,0 ml suchého tetrahydrofuranu se přidá 1,26 mg (4mmol) l-brom-4—terciary-butyl dimethyl siloxyethyl-benzenu (připraveného z 245 (p-bromfenyl)etanolu podle všeobecného postupu výše popsaného). Reakční směs se mocně míchá za využití ultrazvukového vibrátoru v dusíkové atmosféře. K dobře promíchané směsi se přidá 40 μΐ 1,2-dibromethanu jako katalyzátoru. Reakce pak probíhá 3,5 až 4 h v dusíkové atmosféře. Koncentrace připraveného Grignardova činidla byla 4 mmol v 10 ml tetrahydrofuranu.

B. Grignardova reakce

205,0 mg (0,5 mmol) aza-steroidu z příkladu 2 suspenduje v 2,0 ml suchého tetrahydrofuranu v dusíkové atmosféře, zchladí se na -80 °C a výše připravené Grignardovo činidlo (3,75 ml,

1,5 miliekv.) bylo injekční stříkačkou zaváděno do steroidní suspenze po 5 až 10 min v dusíkové 55 atmosféře. Reakce probíhala při -80 °C 1 h v dusíkové atmosféře, poté další hodinu při -10 °C.

-30CZ 292712 B6

Reakční směs se ochladí nasyceným roztokem NH₄ na 0 až 5 °C a rozdělí 10,0 ml CH2CI2. Organické vrstvy se promyjí vodou třikrát, nasyceným roztokem NaCl rovněž třikrát, vysuší se nad MgSO₄, zfíltrují a odpaří ve vakuu do sucha. Surový produkt krystalizuje z EtOAc přes noc; výtěžek je 152,0 mg sloučeniny o teplotě tání 233 až 234 °C.

Kalkulace pro C33H49O3HS1 1/4 H₂O

C 73,55; H 9,18; N 2,59

Nalezeno C 73,45; H 8,94; N 3,21

FAB: Kalkulováno 536, nalezeno 536

C. Desilylace

70,8 mg produktu ze stupně B bylo rozpuštěno v 1,45 ml methanolu a 1,45 ml tetrahydrofuranu. Roztok se zchladí na 0 až 5 °C a 29 μΐ koncentrované H₂OSO₄ se přidává injekční stříkačkou v dusíkové atmosféře. Reakce probíhá 45 min v dusíkové atmosféře. Reakční směs se opatrně zchladí na 0 °C nasyceným roztokem NaHCCh, třikrát extrahuje CH2CI. Organické vrstvy se separují, promyjí vodou třikrát, poté nasyceným roztokem NaCl, vysuší nad MgSO₄, zfíltrují a odpaří ve vakuu; surový produkt činí 43,0 mg. Produkt se vyčistí v koloně se silikagelem aeluuje směsí 1:1 aceton-CFLCh. Izolovaný produkt krystalizuje zbezvodého methanolu, výtěžek je 20,0 mg shora uvedené sloučeniny o teplotě tání 292 až 293 °C.

Kalkulace pro C₂7H3₅O₃a . 1/4 H₂

C 75,31; H 8,25; N 3,25

Nalezeno C 75,49; H 8,29; N 3,45

FAB kalkulace 422, nalezeno 422

Příklad 26

Syntéza 17fJ-(4-karboxymethylbenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

A. Oxidace

13,0 mg produktu z příkladu 25 se rozpustí v 1 ml ledové kyseliny octové. Do čirého roztoku se přidá 10,0 mg CrO₃ (předem usušeného na P2O5 ve vakuu při laboratorní teplotě). Reakce probíhá přes noc při teplotě místnosti, poté při 0 °C po 48 h. Přídavek 7,0 ml vody způsobil, že produkt zkrystalizoval přes noc v ledničce. Po izolaci se produkt promyje studenou vodou a vysuší ve vakuu při 110 °C po 1 mm tlakem.

Vysušený surový produkt se rozpustí v IN hydroxidu sodném, zásaditý roztok se třikrát extrahuje methylenchloridem. Organické vrstvy se separují, vodný zásaditý roztok se zchladí a okyselí

1,5 N HC1. Sraženina se zfiltruje, promyje vodou a usuší při 110 °C ve vakuu při 0,1 mm tlaku. Výtěžek produktu je 7,0 mg.

FAB kalkulace C27H3₃O₄N - 436 - nalezeno 436.

-31 CZ 292712 B6

Příklad 27

Syntéze 17P~(3,4-dihydroxybenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

A. Grignardovo činidlo

K suspenzi 258,5 mg suchých aktivovaných magnéziových třísek v 10,0 ml suchého tetrahydrofuranu se přidá 482 mg 4-brom-l,2-methylendioxybenzenu v dusíkové atmosféře (výchozí materiál je komerčně dostupný od Aldrich Chemical). Reakce probíhá v ultrazvukové vodní lázni při teplotách 24 až 30 °C. K dobře promíchané směsi se přidá 40 μΐ 1,2 dibromethanu jako katalyzátoru v dusíkové atmosféře, reakce probíhá 1,5 až 2 h při 28 °C v dusíkové atmosféře. Koncentrace připraveného Grignardova činidla je 3,75 mmol v 10 ml suchého tetrahydrofuranu.

Steroid z příkladu 2 (410 mg, 1 mmol) suspenduje v 4,0 ml suchého tetrahydrofuranu v dusíkové atmosféře a zchladí se na -80 °C; injekční stříkačkou se přidává 8,0 ml výše připraveného Grignardova činidla (3,04 miliekv.) ke steroidní suspenzi v dusíkové atmosféře po 5 až 10 min. Reakce probíhá 1 h při -80 °C, poté při -10 °C po další hodinu. Reakční směs se rozředí CH₂C1₂a poté zchladí 1 N HC1 na -5 °C.

Organické vrstvy se separují a promyjí třikrát vodou a třikrát nasyceným roztokem NaCl, vysuší se nad MgSO₄, zfiltrují a odpaří ve vakuu do sucha. Vyčištění produktu na 50,0 g silikagelu se využití eluantu 1:1 CH₂Cl₂-aceton; výtěžek 247,0 mg.

FAB prokázáno 422, kalkulováno 422

B. Štěpení methylendioxanové kyseliny

70,0 mg produktu ze stupně A bylo rozpuštěno v 25,0 ml suchého 1,2 dichlormethanu při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře. Roztok se zchladí na -10 °C, po kapkách se přidá 1,03 ml BBr₃(1,0 M roztoku v dichlormethanu) v dusíkové atmosféře. Reakce probíhá při teplotě místnosti po

3,5 až 4 h v dusíkové atmosféře. Poté se reakce ochladí (-10 °C) a po 10 min při 0 °C se působí 10,0 ml methanolu; poté se nechá teplota stoupnout na teplotu místnosti v dusíkové atmosféře. Reakční směs byla ve vakuu odpařena do sucha. Residuum bylo extrahováno třikrát EtOAc. Organické vrstvy se třikrát promyjí vodou, dvakrát nasyceným NaHCO₃ roztokem, třikrát vodou a nakonec nasyceným roztokem NaCl. Organické vrstvy byly vysušeny nad MgSO₄, poté zfíltrovány a koncentrovány ve vakuu. Surový materiál byl chromatografován na 2 silikagelových deskách (20 cm x 20 cm x 20 cm x 250 pm), eluován 1:1 směsí aceton-methylenchlorid. Rekrystalizace z EtOAc dává 5,0 mg výše uvedeného produktu o teplotě tání 222 až 222,5 °C.

Kalkulace pro C₂₅H₃]O₄a . 1/2 H₂O

C 71,78; H 7,66; N 3,25 Nalezeno C 71,71; H 7,71; N 3,33

Kalkulace pro C₂₅H₃iO₄H 410, nalezeno 410.

Příklad 28

Syntéza 17(3-(2-methoxybenzoyl)-4—aza-5a-androst-l-en-3-onu

A. Grignardovo činidlo

K suspenzi 258,0 mg aktivovaných magnéziových třísek v 8,0 ml suchého hydrotetrafuranu se přidá 771,0 mg o-bromanisolu v 2,0 ml suchého tetrahydrofuranu v dusíkové atmosféře. Reakce se provádí v ultrazvukové lázni při teplotě od 24 až 30 °C. K dobře promíchané směsi se přidá

-32CZ 292712 B6 ml 1,2-dibromethanu v dusíkové atmosféře a reakce probíhá po 2 h při 28 °C v dusíkové atmosféře. Koncentrace připraveného Grignardova činidla byla 4 mmol v 10,0 ml suchého tetrahydrofuranu.

Steroid z příkladu 2 (205 mg, 0,5 mmol) suspenduje v 2,0 ml suchého tetrahydrofuranu v dusíkové atmosféře, vychladí se na -79 °C a 4,0 ml výše uvedeného Grignadova činidla (1,6 miliekv.) bylo přidáváno injekční stříkačkou do steroidní suspenze v dusíkové atmosféře během 5 až 10 min. Reakční směs se udržuje po 1 h při -80 °C, poté při 0-2 °C další hodinu v dusíkové atmosféře. Reakční směs se rozředí CH₂C1₂ a zchladí roztokem 1 N HC1 na 0 °C.

Organické vrstvy se zkombinují, třikrát promyjí vodou, třikrát nasyceným roztokem NaCl a vysuší nad MgSO₄. Poté následuje filtrace a odpaření do sucha ve vakuu. Surový materiál vykrystalizuje zEtOAc a výtěžek je 124,5 mg produktu o teplotě 228 až 230 °C. Vyčištění na silikagelové koloně za využití směsi 70:30 CHCl₃-aceton poskytlo 83,0 mg sloučeniny o teplotě tání 241 až 241,5 °C.

Kalkulace pro C₂₆H₃₃O₃H

C 76,91; H 8,19; N 3,45 Nalezeno C 76,36; H 8,26; N 3,35

FAB kalkulace pro C₂₆H₃₃O₃a - 406 nalezeno 406

C. Štěpení methoxy skupiny

12,7 mg (0,03 mmol) produktu ze stupně a bylo rozpuštěno v 5,0 ml suchého methylenchloridu v dusíkové atmosféře. K čirému roztoku při -79 °C v dusíkové atmosféře se po kapkách injekční stříkačkou přidává 50 μΐ 1 mmol/ml BBr₃ v CH₂C1₂. Reakce probíhala přes noc za rychlého míchání v dusíkové atmosféře při teplotě místnosti. Reakční směs byla zchlazena na 0 až 2 °C a přidána voda khydrolýze přebytku BBr₃. Organická fáze byla třikrát promyta rozředěným hydroxidem sodným, třikrát vodu, třikrát zředěnou kyselinou chlorovodíkovou, třikrát vodou, třikrát nasyceným roztokem NaCl a organická vrstva se vysuší na MgSO₄. Poté následuje filtrace a koncentrace ve vakuu do sucha. Surový produkt krystalizuje z EtOAc, výtěžek je 7,0 mg, sloučeniny - 17(3-(2-hydroxymethyl-benzoyl)-4aza-5a-androst-l-en-3-on. FAB pro C₂₅H₃]NO₂- kalkulováno 394, nalezeno 394.

Příklad 29

17[3-(a-hydroxybenzyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

570 mg 17p-benzoyl-4-aza-5a-androst-l-en-3-on (připraveného z thiopyridylesteru podle příkladu 2 a komerčně dostupného fenylmagneziumbromidu, analogicky postupem podle příkladu 5 k přípravě 17-benzoyl derivátu o teplotě tání 295 až 296 °C krystalizovaného z EtOAc) suspenduje v 80 ml bezvodého izopropanolu. K suspenzi se přidá v pěti dávkách 500,0 mg NaBH₄; jakmile se vpraví všechen hydrid, přidá se 20,0 ml suchého tetrahydrofuranu a reakční směs přejde v čirý roztok. Reakce probíhá při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře přes noc. Směs se opatrně zchladí 1 N HC1 a míchá se v dusíkové atmosféře další hodinu při teplotě místnosti. Poté se rozředí vodou a extrahuje třikrát CHC1₃. Organické vrstvy se zkombinují, promyjí se třikrát vodou, třikrát nasyceným roztokem NaCl a vysuší se nad MgSO₄. Následuje filtrace a odpaření do sucha, vznikne 495 mg bílé tuhé látky.

Surový materiál krystalizuje z EtOAc, výtěžek je 349,5 mg. Dále následuje vyčištění na koloně se silikagelem a eluce směsí 70:30 CHCl₃-aceton; vznikne 221 mg sloučeniny o teplotě tání 296 až297°C.

-33CZ 292712 B6

Kalkulace pro C25H33NO2

C 79,17; H 8,78; N 3,70

Nalezeno C 79,24; H 8,85; N 3,48

FAB kalkulace pro C25H33NO2- 380, nalezeno 380

Příklad 30

17|3-hydroxymethyM—aza-5a-androst-l-en-3-on

500,0 mg S-2-pyridyl-3-oxo-4-aza-5a-androst l-en-3-onu (příklad 2) se rozpustí v 40,0 ml suchého tetrahydrofuranu při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře. Roztok byl ochlazen na -78 °C v dusíkové atmosféře a 5,5 ml 1M dibutylaminiumhydridu v tetrahydrofuranu se pomalu 15 přidá injekční stříkačkou k roztoku za rychlého míchání. Reakce probíhá při -76 až -78 °C 0,5 h v dusíkové atmosféře. Teplota byla postupně zvyšována až na teplotu místnosti a reakční směs se udržovala 2,5 h v dusíkové atmosféře. Poté se směs ochladila na 0 až 5 °C 2 N HC1 a rozředila se CHCI3. Organické vrstvy se separují, promyjí se vodou třikrát, poté nasyceným roztokem NaCl a nakonec vysuší nad MgSO₄. Po filtraci a odpaření organické fáze činí surový materiál 20 215,0 mg. Tento produkt byl chromatografován na 20,0 g silikagelové koloně za užití směsi

70:30 CHCh-aceton jako eluantu. Výtěžek činí 126,3 mg sloučeniny o teplotě tání 271 až

271,5 °C.

Kalkulováno pro C19H29O2H - FAB 304, nalezeno 304

Příklad 31 p-formyl-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

Do 100,0 ml suché baňky se vloží 1,3 ml oxalylchloridu (2M v CH2CI2) spolu s 50,0 ml suchého CH2CI2 v dusíkové atmosféře. Výše uvedený roztok byl zchlazen na -78 °C a 338 μΐ dimethylsulfoxidu se přidává po kapkách injekční stříkačkou v dusíkové atmosféře. Při -78 °C v dusíkové atmosféře se směs míchá 30 min a roztok výše připraveného alkoholu z příkladu 15, tj. 17β— 35 hydroxymethyl-aza-5a-androst-l-en-3-onu (256,9 g v 15,0 ml) suchého CH2CI2 v dusíkové atmosféře pomocí injekční stříkačky. Reakce pak probíhá po 1 h při teplotě -78 °C v dusíkové atmosféře. Po hodině se za téže teploty přidá velice rychle 1 ml suchého triethylaminu. Reakční směs se pomalu převede na teplotu místnosti v dusíkové atmosféře za míchání, výsledný žlutý roztok se pak nalije do 50,0 ml studené vody. Organické vrstvy se promyjí nasyceným roztokem 40 NaHCO₃, poté nasyceným roztokem NaCl. Následuje vysušení nad MgSO₄, odpaření rozpouštědla ve vakuu; výtěžek činí 172,4 mg surového produktu. Produkt se chromatografuje na silikagelové koloně a eluuje směsí 70:30 CHC^-aceton. Krystalizací z EtOAc vznikne 37,7 mg sloučeniny o teplotě tání 257 až 259 °C.

Příklad 32

Syntéza diastereoizomerického 17(3-(a-hydroxybenzyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-onu

26,3 g výše připraveného formyl derivátu z příkladu 31 se rozpustí v 7,0 ml suchého tetrahydrofuranu v dusíkové atmosféře. Roztok se ochladí na -78 °C v dusíkové atmosféře a 131 μΐ (0,393 miliekv.) fenylmagneziumbromidu (reagencie Aldrich) v suchém tetrahydrofuranu se po kapkách injekční stříkačkou přidává rovněž v dusíkové atmosféře. Reakce probíhá 1 h v dusíkové atmosféře při -78 °C a poté při teplotě místnosti po další hodinu rovněž v dusíkové atmosféře.

-34CZ 292712 B6

Reakční směs se ochladí na 0 až 5 °C 2,5 N HC1 a rozředí CHC1₃. Organické vrstvy se separují, promyjí třikrát vodou, třikrát nasyceným roztokem NaCl, vysuší se nad MgSO₄. Po filtraci a odpaření ve vakuu do sucha se získá 28,6 mg. Analýza spektra nukleární magnetické rezonance a výšky píku z chromatografie HPLC indikovaly, že produkt je směs 1:1 diastereoizomerů. Surový produkt byl zfiltrován 1 μπι teflonovým filtrem a chromatograficky vyčištěn na Whitman Portisil 10 koloně za využití směsi 70:30 CHCfi-aceton. FAB hmotnostní spektrum indikovalo stejné M+ + 1 pro oba izomery tj. 380 hmotnostních jednotek. Rychleji se eluující izomer o teplotě tání 289 až 289,5 °C krystalizoval z EtOAc a byl chromatograficky upraven.

Kalkulace pro C₂₅H₃₃NO₂. 1/4 H₃O

C 78,39; H 8,81 ;N 3,65

Nalezeno C 78,11; H 8,65; N 3,58

Pomaleji se eluující izomer o teplotě tání 300 až 301 °C dává jednoduchou skvrnu na tenké vrstvě při chromatografii. Rychlejší izomer vykazoval při měření magnetické nukleární rezonance CDC1₃ tyto vlastnosti CH₃ na uhlíku 18 je odstíněn (chemický posun 0,89) ve srovnání s pomalejším izomerem CH₃ na uhlíku 18 (chemický posun 0,69). Benzylový proton na uhlíku 1 vykázal stínící efekty u rychlejšího izomeru (chemický posun 6,81 ve srovnání s chemickým posunem 6,62). Z těchto údajů je zcela zřejmé, že tyto dva izomery se liší svými fyzikálními vlastnostmi.

Část 3

Příklad 1

Příprava 4-(2-(1 l-karboxyundekanoylamino)-fenoxy)butanové kyseliny

Stupeň A: Ethyl 4-(2-nitrofenoxy)butyrát (3)

K míchané směsi 2-nitrofenolu (1,4 g lOmmol) v ethyl-4-brombutyrátu (2,1 g, 1,57 ml, 11 mmol) v 35 ml suchého acetonu se přidá 2g (14,5 mmol) bezvodého mletého uhličitanu draselného. Výsledná barevná směs se zahřeje v dusíkové atmosféře při mírném refluxu až do odstranění barvy způsobené fenolovým anionem a získá se žlutý roztok. Z koncentrace zchlazené a zfiltrované směsi vzniká olej, který po plamenné chromatografii (silikagel, ethylacetát-hexan nebo methylenchlorid jako eluant) dává výtěžek 2,4 g (96 %) výše uváděné sloučeniny (3). Když se namísto 2-nitrofenolu ve výše uváděném příkladu užívají substituované ortho-nitrofenoly, získá se odpovídající substituovaný 2-nitrofenoxybutyrát. Podobně lze připravit odpovídající

2-nitrofenoxyalkanoát, jestliže je ethyl-4-brombutyrát nahrazen jiným haloesterem.

Stupeň B: Ethyl 4-(2-aminofenoxy)butyrát (4)

Roztok sloučeniny 3 (1,27 g, 5,0 mmol) v 15 ml ethylacetátu obsahující 200 mg 5% paladia na uhlíku reaguje ve vodíkové atmosféře (40 psig) při teplotě místnosti až do skončení sorpce vodíku. Po filtrací a koncentraci ve vakuu se získá 1,0+ g (4) jako olejovitá tuhá látka o nízké teplotě tání.

Stupeň C: 12-(izopropylthio)dodekanová kyselina (6)

Směs 12-bromdodekanové kyseliny (5) (0,558 g, 2,0 mmol) izopropylthiolátu sodného (1,1 g, 11,2 mmol) v 1,2 dimethoxyethanu (50 ml) se odvzdušní v dusíkové atmosféře, ohřeje na teplotu lázně 85 °C a na ní se udržuje 72 h. Ochlazená směs se zflltruje, získaná tuhá látka se rozpustí ve vodě a pak znovu zflltruje. Míchaný roztok se okyselí zředěnou kyselinou chlorovodíkovou, nechá ustát, zflltruje, tuhá látka se promyje dobře vodou a vysuší. Výtěžek je sloučenina 6 v množství 0,54 g ve formě bílé tuhé látky.

-35CZ 292712 B6

Když se namísto 12-bromdodekanové kyseliny užily jiné halokyseliny, byla odpovídajícím výsledkem (izopropylthio)kyselina.

Podobným způsobem lze připravit odpovídající (alkylthio)alkanové kyseliny jestliže se namísto izopropylthiolátu sodného ve shora uvedeném příkladu užije jiná merkaptonová sůl.

Reprezentativní kyseliny získané tímto postupem jsou dále uvedeny, aniž je jejich výčet nějak omezen:

3-(izopropylthio)oktanová kyselina

10-(izopropylthio)dekanová kyselina

10-(ethylthio)dekanová kyselina l-(t-butylthio)undekanová kyselina

14-(a-propylthio)tetradenanová kyselina

9-(methylthio)nonanová kyselina

Stupeň D: Ethyl 4-(2-( 12-(izopropylthio)dodekanoyl-amino)-fenoxy)-butyrát (7)

K roztoku (4) (0,25 g, 1,14 mmol) a (6) (0,274 g, 1,0 mmol) v suchém methylenchloridu (10 ml) při teplotě místnosti se přidává 4-dimethylaminopyridin (0,122 g, 1,0 mmol) a v jedné minutě poté dále roztok N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu (0,22 g, 1,06 mml) v methylenchloridu (1 ml), třikrát se promyje methylenchloridem. Po dvou dnech se zfiltrovaná směs zkoncentruje ve vakuu a residuum se chromatografuje na silikagelu a eluuje směsí 15 až 20% ethylacetátu v hexanu.

Získá se produkt (7) (0,22 g) jako olej tuhnoucí po krátké době.

Stupeň E: 4-(2-( 12-(izopropylthio)dodekanoylamino)fenoxy)-butanová kyselina (8)

Na míchaný roztok esteru (7) (0,124 g, 0,258 mml) v methanolu (10 ml) se při teplotě místnosti 30 v dusíkové atmosféře působí 2,5 N roztokem hydroxidu sodného (0,5 ml). Methanol (2x2 ml) byl použit k vyčištění směsi a reakce probíhá, až chromatografická analýza prokáže, že žádný ester nezůstal. Zfiltrovaná směs se ve vakuu zkoncentruje a residuum se smíchá s 10 ml vody. Po ustátí se směs zfiltruje. Koláč je sodná sůl produktu (100 mg); míchaný filtrát se okyselil zředěnou HC1, nechal ustát, zfiltroval, promyl vodou a vysušil; výtěžkem je sloučenina (8) (0,02 g) 35 jako bílá tuhá látka o teplotě tání 82 až 84 °C, která měkne od 66 °C.

Na sloučeninu se působí NAIO₄ jako ve stupni J_a a získá se odpovídající sulfoxid; působením m-chlorobenzoové kyseliny na sloučeninu 5 jako ve stupni Jb povede ke vzniku odpovídajícího sulfonu.

Stupeň F: 4-(2-( 12-(izopropylthio)dodekanoylamino)fenoxy)butyramid (9)

K míchanému roztoku (7) (20 mg, 0,041 mmol) v methanolu (10 ml) se přidá nasycený methanol s amoniakem (5 ml) a zazátkovaná směs se míchá při teplotě místnosti až do doby, kdy tenko45 vrstvá chromatografická analýza neukáže málo nebo žádný zbytek (D). Po koncentraci reakční směsi následuje tenkovrstvá chromatografie (silikagel; 3% methanomethylenchlorid jako eluant); získá se 11 mg sloučeniny (9) jako voskovitá látka.

Stupeň G: Ethyl 4-(2-amino-fenylthio)butyrát (11)

K míchanému odvzdušněnému roztoku 2-aminothiofenolu (10) (1,25 g, 10 mmol) a ethyl-4brombutyrátu (2,14 g, 11 mmol) v 40 ml suchého 1,2-dimethoxyethanu se přidá 8,3 g tuhého bezvodého uhličitanu draselného, směs se třikrát odvzdušňuje v dusíkové atmosféře, míchá při teplotě místnosti až chromatografická analýza indikuje konec reakce. Po koncentraci se residuum

-36CZ 292712 B6 chromatografuje na silikagelu (84 g) za využití směsi 15% ethylacetátu-hexanu jako eluantu; výtěžek 1,8 g (11) jako světlý olej.

Stupeň H: Ethyl 4-(2-( 10-(izopropylthio)dekanoylamino)-fenylthio)butyrát (12)

Když spolu sloučenina (11) a 10-(izopropylthio)dodekanová kyselina reaguje analogicky jako za podmínek v stupni D, získá se sloučenina o výše uvedeném názvu (12).

Stupeň I: 4-(2-( 10-(izopropylthio)dekanoylamino)fenylthio)butanová kyselina (13)

Když sloučenina (12) hydrolyzuje za podmínek uvedených ve stupni E, získá se výše uvedená sloučenina (13).

Stupeň J: 4-(12-(1 l-(ethylsulfinyl)undekanoylamino)fenoxy)butanová kyselina

Když se na estery nebo kyseliny působí jodistanem sodným (stupeň J_a) ve vhodném rozpouštědle (např. aceton - voda), získají se odpovídající sulfoxidy. Působení kyselinou meta-chlorperbenzoovou (stupeň J_b) dává odpovídající sulfony. Např. když ethyl 4-(2-(1 l-(ethylthio)undekanoylamino)fenoxy)butyrát (14) (0,045 g, 0,1 mmol) v acetonu (10 ml) reaguje s jodistanem sodným (0,072 mg, 0,33 mmol) ve vodě (2 ml) při teplotě místnosti, získá se odpovídající sulfoxid 15. Hydrolýza jako ve stupni E pak dává produkt 16, ne zcela bílou tuhou látku. Navíc vede působení na sloučeninu (14) kyselinou meta-chlorperbenzoovou k vytvoření sulfonu (17), který po hydrolýze dává kyselinu (18) za stejných hydrolyzačních podmínek, jak tomu bylo ve stupni E.

Způsob přípravy nových sloučenin podle vynálezu popsaných ve shora uvedeném textu může být dále objasněn na příkladech, které by však neměly být považovány za vyčerpávající a omezující, pokud jde o rozsah vynálezu.

Příklad 1

Syntéza 4-(2-(1 l-karboxyundecyloxy)fenoxy)-butanové kyseliny (7) a O-(ρβώΟΟΟΗ

O--(CH£|_nCOOH

A. Ethyl 4-(2-benzyloxyfenoxy)butyrát (3)

K míchanému roztoku 2-benzyloxyfenol (1) (4,0 g, 20 mmol) a ethyl-brombutyrátu (2) (5,6 g, 28,7 mmol) v suchém acetonu (100 ml) se přidá bezvodý mletý uhličitan draselný (6,0 g, 44 mmol) a výsledná směs se při refluxu zahřívá v dusíkové atmosféře do doby, kdy analýza TLC prokázala nepřítomnost výchozího fenolu. Po chromatografii (silikagel, 15% ethylacetáthexan jako eluent), filtraci a koncentraci směsi se získalo 3,0 g produktu (3) jako čistého oleje.

Když se ethyl 4-brombutyrát nahradí halo-esterem ve výše uvedeném příkladu, získá se odpovídající éter-ester. Je-li pak analogicky výše uváděný fenol nahrazen jinými substituovanými 2benzyloxyfenoly, získá se odpovídající 2-substituované étery. Substituce 2-benzyloxy-nebo 2benzylthio-thiofenolu za 2-benzyloxyfenol dává odpovídající thioéter-ester.

-37i

B. Ethyl 4-(2-hydroxyfenoxy)butyrát (4)

Směs sloučeniny (3) (1,57 g, 5,0 mmol), ethanolu (50 ml), ledové kyseliny octové (7 kapek) 10% palladia a uhlíku (0,7 g) reaguje v dusíkové atmosféře (4 psig) při teplotě místnosti do doby, kdy 5 sorpce vodíku přestane. Koncentrace zfíltrované směsi dává sloučeninu (4) ve formě oleje.

C. Ethyl 4-(2-1 l-(karbomethoxy)undecyloxyfenoxy)butyrát (6)

Když sloučenina (4) (0,244 g, 1,0 mmol) a methyl 12-bromdodekanoát (5) (0,32 g, 1,1 mmol) 10 reaguje s uhličitanem draselným v acetonu jako v příkladu (A), dojde k vytvoření sloučeniny 6 (0,3 g) ve formě bezbarvého oleje.

Když je methyl 12-bromododekanoát nahrazen jinými haloestery ve shora uvedeném příkladu, získá se odpovídající diester.

D. 4-(2-( 11 -karboxyundecyloxy)fenoxy)butanová kyselina (7)

K míchanému roztoku sloučeniny (6) (0,102 g, 0,23 mmol) v methanolu) (4 ml) a vodě (3 kapky) se přidá roztok 2,5 N hydroxidu sodného (0,55 ml 1,37 mm!) po kapkách; výsledná směs se 20 vyčistí dalším methanolem (2 ml). Když TLC analýza (2 % methanol v methylenchloridu

- 10 ml) obsahující ledovou kyselinu octovou (4 kapky) indikovala, že již nezůstal žádný mono-nebo diester, methanol se odstranil ve vakuu, residuum se smíchalo s vodou (10 ml) a roztok se zfíltroval a okyselil 2N kyselinou chlorovodíkovou. Filtrace výsledné sraženiny následovaná promytím vodou a usušením výsledné sloučeniny (7) dává 88 mg bílé tuhé hmoty 25 o teplotě tání 95 °C, roztavení 105 °C (nekorig.; A.O. Spencer Hot Stage)

Kalkulace pro C22H34O6

C 66,98; H 8,69

Nalezeno C 67,32; H 8,45

Sloučeniny (1)-(7) vykazují data z nukleární magnetické rezonance a hmotnostní spektra v souladu s uvedenými molekulárními vzorci.

4-(2-(1 l-karboxyundecyloxy)fenylsulfínyl)butanová kyselina (7B)

Když se na příslušné thioestery např. sloučeninu 7A jako ester nebo kyselinu působí jodistanem sodným ve vhodném rozpouštědle (např. aceton-voda) získají se odpovídající sulfoxidy. Analogicky dává reakce příslušných thioéterů s m-chlorperbenzoovou kyselinou odpovídající sulfony. Např. když 4-(2-(1 l-karboxyundecyloxy)fenylthiobutanová kyselina 7A (0,41 g, 1,0 mmol) 40 v acetonu (25 mmol) reaguje s jodistanem sodným (0,72 g, 3,3 mmol) ve vodě za teploty místnosti, získá se výše uvedený sulfoxid 7B. Když se použije stejného výchozího materiálu v methylenchloridu v reakci s přebytkem m-chlorbenzoové kyseliny, získá se odpovídající sulfon.

Sloučeniny (3)-(16) vykazují data z nukleární magnetické rezonance a hmotnostního spektra v souladu s uvedenými molekulárními strukturami.

-38CZ 292712 B6

Příklad 1

Příprava 4-(2-(1 l-karboxyundekanoylamino)-fenoxy)butanové kyseliny

Stupeň A: Ethyl 4-(2-nitrofenoxy)butyrát (3)

K míchanému roztoku 2-nitrofenol (1) (1,4 g, 10 mmol) a ethyl 4-brombutyrátu (2,1 g, 1,57 ml, 11 mmol) v 35 ml suchého acetonu se přidá 2 g, (14,5 mmol) bezvodého, mletého uhličitanu draselného. Výsledná barevná směs se pak zahřívá v dusíkové atmosféře při mírném refluxu až do té doby, kdy barva způsobená fenolovým anionem zmizí a zůstane žlutý roztok. Koncentrace zchlazené a zfiltrované směsi dává olej, který se podrobí plamenné chromatografii (silikagel, ethylacetát-hexan nebo methylenchlorid jako eluant), a získá se 2,4 g (96 % výtěžek) výše uváděné sloučeniny (3) jako olejovité kapaliny.

Stupeň B: Ethyl 4-(2-aminofenoxy)butyrát (4)

Roztok sloučeniny (3) (1,27 g, 5,0 mmol) v 15 ml ethylacetátu s obsahem 200 mg 5% palladia na uhlíku reaguje ve vodíkové atmosféře (40 psig) při teplotě místnosti do doby, kdy sorpce a vodíku přestane. Směs se pak zfiltruje a koncentruje ve vakuu, získá se 1,0+ g (4) jako olejovitá tuhá látka o nízké teplotě tání.

Stupeň C: Dodekanediová kyselina, monomethylester (6)

Diethyldodekanedíoát (5) (34,4 g, 0,12 mol) reaguje s bariumhydroxioktahydrátem (19,2 g, 0,06 mol) v methanolu (240 ml) analogickým postupem, jaký je popsán v Org. Syn., Coll. svazek II, str. 635 a získá se 24,8 g sloučeniny (6) jako bílé tuhé látky.

Stupeň D: Chloridmethylester dodekanediové kyseliny (7)

Směs jednosytné kyseliny (6) (10,0 g 0,041 mol) a thionylchloridu (12,1 ml, 0,166 mol) se refluxuje pět hodin, přebytek thionylchloridu se odstraní ve vakuu a residuální chlorid se několikrát rozpustí v suchém benzenu a zkoncentruje až nezůstane žádný thionylchlorid; získá se 10,8 g sloučeniny (7) jako voskovité tuhé látky.

Stupeň E: Ethyl 4-(2-(1 l-karbomethoxyundekanoylamino)fenoxy)butyrát (8)

K míchanému ledem vychlazenému roztoku (0,89 g, 4, mmol) aminu (4) a vysušenému triethylaminu v suchém éteru (40 ml) se po kapkách přidává po cca 4 min roztok chloridu kyseliny (7) (1,04 g, 4,6 mmol) v 20 ml suchém éteru. Výsledná směs se nechá za chladu ustát po 20 min a poté při teplotě místnosti přes noc. Po odfiltrování triethylaminhydrochloridu se éterový filtrát koncentruje ve vakuu a residuum se chromatografuje na 82 g silikagelové koloně za využití směsi 20% ethylacetát-hexanu jako eluentu, získá se 1,49 g, (85 %) sloučeniny (8) jako voskovité tuhé látky.

Eter-triethylamin ve shora uváděné reakci může být nahrazen methylenchloridpyridinem se stejným výsledkem. Totožnou sloučeninu lze také připravit přímo reakcí kyseliny (6) se stejným aminem za užití obvyklých spojovacích prostředků jako je dicyklohexylkarbodiimid/N,N-dimethylaminopyridin apod.

Stupeň F: 4-(2-(1 l-karboxyundekanoylamino)fenoxy)butanová kyselina (9)

K míchanému roztoku sloučeniny (8) (1,0 g, 2,22 mmol v methanolu (100 ml) se přidá 1 ml vody a poté po kapkách 2,5 N roztoku hydroxidu sodného (4,0 ml). Stěny reakční baňky se opláchnou 10 ml methanolu a směs se míchá v dusíkové atmosféře do doby, kdy analýza neprokáže žádný zbylý mono-nebo diester. Methanol se odstraní ve vakuu, residuum se rozředí 100 ml vody,

-39CZ 292712 B6 smíchá se do roztoku, zfiltruje se (20 ml na oplach) a míchaný filtrát se po kapkách okyselí 2N HC1. Filtrace výsledné sraženiny, pečlivé promytí vodou a vysušení vede k výtěžku 0,87 g (96 %) (9) křídovité tuhé látky. Podle TLC byla sraženina jednosložková (silikagel, eluant 10 ml 2% methanolu v methylenchloridu obsahujícího 4 kapky ledové kyseliny octové) teplota tání 128,5 5 až 130 °C nekorig.

Mikroanalýza - Kalkulace: C 64,84; H 8,16; N 3,44

Nalezeno: C 64,90; H 8,34; N 3,33 to Stupeň G: Ethyl 4-(2-amino-3-methylfenylthio)butyrát (11)

K míchanému odvzdušněnému roztoku v dusíkové atmosféře 2-aminothiofenolu (10) (1,25 g, mmol) a ethyl 4-brombutyrátu (2,14 g, 11 mmol) v 40 ml suchého 1,2-dimethoxyethanu se přidá 8,3 tuhého, mletého bezvodého uhličitanu draselného, výsledná směs se třikrát odvzdušní 15 v dusíkové atmosféře, dále se míchá při teplotě místnosti do doby, kdy analýza TLC prokáže konec reakce. Zfíltrovaná směs se pak zkoncentruje a residuum se podrobí plamenné chromatografii na silikagelu (85 g) za užití směsi 15% ethylacetát-hexan jako eluantu, získá se 1,8 g sloučeniny (11) ve formě světlého oleje.

Stupeň H: 4-(2-(1 l-karboxyundekanoylamino)fenylthio)butanová kyselina (13)

Když se amin (11) acyluje chloridem kyseliny (7) jako je tomu v postupu podle stupně (E) a výsledný diester (ethyl-4-(2-(ll-karbomethoxyundekanoylamino)fenylthio)butyrát (12) se hydrolyzuje ve stupni I jako v postupu (F), získá se výše uvedená sloučenina (13) o teplotě tání 25 113,5 až 115 °C.

Dále uváděné sloučeniny v této sérii byly rovněž připraveny podle shora uváděných postupů:

14) 4-(2-(9-karboxynonanoylamino)fenoxy)butanová kyselina, teplota tání 121,5 až 124,5 °C. 30 15) 4-(2-( 10-karboxynonanoylamino)fenoxy)butanová kyselina, teplota tání 110 až 111,5 °C.

16) 4-(2-( 12-karboxynonanoylamino)fenoxy)butanová kyselina, teplota tání 116 až 119 °C.

17) 4-(2-( 13-karboxynonanoylamino)fenoxy)butanová kyselina, teplota tání 128 až 129,5 °C.

18) 4-(2-( 15-karboxynonanoylamino)fenoxy)butanová kyselina, teplota tání 121 až 125 °C.

19) 4-(2-(1 l-karboxynonanoylamino)fenoxy)valerová kyselina, teplota tání 112 až 113,5 °C.

20) 4—(2-(11 -karboxynonanoylamino)-3-methylfenoxy)butanová kyselina, teplota tání 134,5 až

136,5 °C.

21) 4-(2-(1 l-karboxyundekanoylamino)-4-methylfenoxy)butanová kyselina, teplota tání 99,5 až 100,5 °C.

22) 4-(2-(1 l-karboxyundekanoylamino)-5-methylfenoxy)butanová kyselina, teplota tání 109,5 ažll3°C.

Stupeň J: Benzyl 2-nitrofenyléter (23)

Když 2-nitrofenol (1) reaguje s benzylbromidem za podmínek stupně A, získá se shora uvedený 45 éter (23) ve formě zlatého oleje.

Stupeň K: Benzyl 2-aminofenyléter (24)

Roztok benzyl 2-nitrofenyléter (23) (1,15 g, 5,0 mmol) v ethanolu (25 ml) nasycený bezvodým 50 amoniakem se míchá v dusíkové atmosféře (0,243 MPa) s Raney Nickel (2 g) dotud, kdy TLC analýza indikuje nepřítomnost výchozí nitrosloučeniny. Zfíltrovaná směs se zbaví přebytku amoniaku probubláním bezvodého dusíku. Odstranění ethanolu se provede ve vakuu při teplotě místnosti, získá se 1,9 g výše uvedené sloučeniny (24) jako tmavě zbarvené usazeniny, která bude zase využita v následující reakci. Tuto sloučeninu lze rovněž získat pečlivou redukcí

-40CZ 292712 B6 v ethanolu nebo ethylacetátu za využití palladia na uhlíku jako katalyzátoru, může však dojít k částečnému přeredukování, jestliže reakce není sledována.

Stupeň L: N-trifluoroacetyl 2-benzyloxyanilin (25)

K míchanému roztoku aminu (24) (5,0 mmol) v suchém diethyléteru (30 ml) se přidá bezvodý uhličitan sodný (6,0 g, 57 mmol) a výsledná směs se ochladí v lázni s ledovou vodou. Trifluoracetanhydrid (1,5 ml, 10,6 mmol) se přidává po kapkách k této chladné směsi po 2 min, přičemž se barva mění na žlutavou červeň. Po dvou hodinách se chladicí lázeň odstraní a směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Po filtraci následuje koncentrace ve vakuu a získá se 1,3 g sloučeniny o výše uvedeném názvu (25) ve formě světle usazeniny s červenohnědým zabarvením u krajů.

Stupeň M: N-methyl-2-benzyloxyanilin (27)

Dobře promíchaný roztok sloučeniny (25) (0,295 g, 1,0 mmol), methyljodidu (0,25 ml, 4,0 mmol) a bezvodého acetonu (5,0 ml) se umístí do olejové lázně předem vyhřáté na 59 °C na min. Najednou se přidá práškovitý bezvodý hydroxid draselný (0,225 g, 4,0 mmol) a teplota lázně se zvýší na 65 °C. Lze pozorovat shluky KOH. Po dalších 15 min se reakční směs vyjme z lázně, nechá vychladnout a odstraní se těkavé látky. Methanol (7 ml) se přidá za míchání k residuu N-methyl-N-trifluoroacetyl-2-benzyloxyanilinu (26), poté voda (1 ml) a methanol (2 ml) (pro opláchnutí stran). Po míchání přes noc při teplotě místnosti se methanol odstraní ve vakuu, residuum distribuované mezi éter a vodu se separuje, organická vrstva se promyje další vodou, nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se nad síranem sodným. Z koncentrace zfiltrovaného roztoku éteru se získá výše uvedená sloučenina (27) (0,212 g) jako olej. Nukleární magnetická rezonance, hmotnostní spektrum a TLC chromatografie indikuje malé množství dimethylované sloučeniny.

Stupeň N: N-(l l-(K.arbomethoxy)undekanoyl)-N-methyl-2-benzyloxyanilin (28)

K míchanému, ledově chladnému roztoku sloučeniny (27) (0,21 g, 1,0 mmol) ve vysušeném methylenchloridu (10 ml) obsahujícím bezvodý pyridin (0,3 ml) se přidá sloučenina (7) (0,27 g, 1,03 mmol) rozpuštěná v methylenoxidu (5 ml) po kapkách během 1 min (nějaký methylenoxid se použije na opláchnutí). Po míchání za studená po 10 min se míchá směs při teplotě místnosti do skončení reakce, reakční směs se promyje jednou 1N HCL, vysuší Na₂SO4 a zfiltruje. Po chromatografii (silikagel, 20% ethylacetát-hexan jako eluant) se získá residuum, které je výše uváděnou sloučeninou (28) (0,33 g) ve formě bezbarvého oleje.

Stupeň O: N-(l l-(karbomethoxy)undekanoyl)-N-methyl-2-hydroxyanilin (29)

Roztok sloučeniny (28) (0,11 g, 0,25 mmol) v methanolu (11 ml) obsahující 10% palladium na uhlíku (30 mg) se protřepává za přetlaku 40 psig v dusíkové atmosféře až do doby, kdy podle TLC analýzy nezůstává žádná složka. Zfiltrovaný roztok pak byl zkoncentrován ve vakuu, získá se sloučenina (29), která se ihned využije ve stupni (R).

Stupeň P: Ethyl 4-(2-N-(ll-karboxymethoxyundekanoyl)-N-(methyl)-amino)fenoxybutyrát (30)

K míchaném roztoku sloučeniny (29) (0,897 g, 0,25 mmol) a ethyl 4-brombutyrátu (0,115 ml, 0,80 mmol) vbezvodém acetonu (10 ml) se přidá bezvodý mletý uhličitan draselný (0,45 g, 3,2 mmol) a výsledná směs se za mírného refluxu v dusíkové atmosféře ohřívá po 24 h. Poté se směs ochladí, zfiltruje a zkoncentruje, residuum se podrobí chromatografii (silikagel, 20% ethylacetát-hexan jako eluant), získá se 80 mg výše uvedené sloučeniny (30) ve formě bezbarvého oleje.

-41 CZ 292712 B6

Stupeň Q: 4-(2-N-(l l-karboxyundekanoyl)-N-(methyl)amino-fenoxybutanová kyseliny (31)

Když se sloučenina (30) (0,055 g, 0,118 mmol) hydrolyzuje jako její N-desmethyl analog (stupeň F výše) a výsledný olej získaný po okyselení se extrahuje methylenchloridem, získá se 51 mg výše uvedené sloučeniny (31) jako bezbarvý olej.

Stupeň R: Ethyl 4-(2-(1 l-bromundekanoylamino)fenoxybutyrát (32) ίο K roztoku sloučeniny (4) (2,60 g, 11 mmol) a 11-bromundekanové kyseliny (2,65 g. 10 mmol) vbezvodém methylenchloridu (90 ml) se přidá 4-(dimethylamino)pyridin (1,22 g, 10 mmol) a poté N,N'-dicyklohexylkarbodidimid (2,3 g, 11 mmol) (opláchnou čtyřikrát 5 ml methylenchloridu). Srážení dicyklohexylmočoviny začne během 4 min. Když chromatografícká analýza na tenké vrstvě indikuje, že reakce již proběhla, směs se zfiltruje, filtrát se zkoncentruje ve vakuu a residuum se extrahuje éterem. Kombinované éterové extrakty se promyjí jednou 1N HC1, jednou nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se Na₂CO₄ a zkoncentrují se na residuum, které se promíchá, zfiltruje a zkoncentruje jako s éterem, tak methylenchloridem, až se odstraní všechna dicyklohexylmočovina. Koncentrace finálního roztoku poskytne 2,35 g výše uvedené sloučeniny (32) ve formě oleje, ze kterého se usadí voskovitá tuhá látka.

Pokusy s vyčištěním pomocí chromatografické kolony (silikagel, 20% ethylacetáthexan jako eluant) vedly k nečistému produktu o snížení výtěžku.

Stupeň S: Diethyl 10-(N-((2-(3-karboethoxy)propyloxy)fenyl)karboxamido)decylfosfonátu (33)

Míchaná směs sloučeniny (32) (0,235 g, 0,55 mmol) a triethylfosfát (0,3 ml) se zahřívá na teplotu 180 °C lázně v dusíkové atmosféře po 8 h, poté se zchladí, přebytek triethylfosfátu se odstraní ve vakuu a residuum se podrobí chromatografií (silikagel, ethylacetát jako eluant), získá se 0,13 g, sloučeniny ve formě čirého bezbarvého oleje.

Stupeň T:

Štěpení fosfonátesteru (33) za využití bromtrimethylsilanu (postup zJ. C. S. Chem. Comm. str. 739 (1979) dává sloučeninu 10-(N-((2-(3-karboethoxy)propyloxy)fenyl)karboxamido)35 decylfosfonovou kyselinu (34).

Stupeň U:

Další hydrolýza sloučeniny (34) za použití postupu z příkladu (F) výše uvedeného dává 40 odpovídající dikyselinu, 10-(N-((2-karboxy)propyloxy)fenyl)karboxamido)-decylfosfonovou kyselinu (35).

Stupeň V: 10-(N-((2-(-karboethoxy)propyloxy)fenyl)-karboxamido)dekaneizothiouroniumbromid (36)

Promíchávaný roztok sloučeniny (32) (0,047 g, 0,1 mmol v ethanolu (2 ml) reaguje sthiomočovinou (0,010 g, 0,13 mmol) za stejných podmínek jako v stupni W. Koncentrace reakční směsi dává výše uvedenou sloučeninu (36) (kontaminovanou malým množstvím thiomočoviny), která pomalu tuhne při stání v krystalických kruzích. Poté následuje míchání s vysušeným chlorofor50 mem, filtrace a koncentrace; sloučenina má formu hustého vosku.

-42CZ 292712 B6

Stupeň W: Sodium 10-(N-((2-(3-karboethoxy)propyloxy)-fenyl)karboxamido)dekanethiosulfát (37)

K rozmíchanému roztoku sloučeniny (32) (0,047 g, 0,1 mmol) v ethanolu (2,0 ml) se přidá voda (pomalu 10 kapek), poté thiosulfát sodný (0,035 g, 0,14 mmol) a reakční směs se ohřívá v olejové lázni (teplota lázně cca 90 °C) v dusíkové atmosféře do doby, kdy chromatografícká analýza na tenké vrstvě již neindikuje výchozí bromosloučeninu. Vychlazená směs se pak zkoncentruje odstraněním ethanolu a vody; získá se bílá usazenina. Extrakce této usazeniny chloroformem s následnou filtrací dává 49 mg sloučeniny (37) jako glazury, která časem přechází do voskovité tuhé látky. Sloučenina vykazuje značnou rozpustnost ve vodě.

Oxidace sloučeniny (36) nebo (37) analogickými postupy jako v J.S. Showell a kol. J. Org. Chem. 27 (1962) 2853 nebo C. Ziegler a kol K. Org. Chem. (1951) (621) vede k odpovídající sulfonové kyselině (38).

Stupeň X: Ethyl 4-(2-nitropyrid-3-yloxy)butyrát (40)

Tato sloučenina byla připravena z ethyl 4-bromobutyrátu 2 a 2-nitro-3-pyridinol (39) podle postupu popsaného ve stupni (A). Následuje chromatografie (silikagel, 1,5% methanolmethylenchlorid jako eluant), promytí éterového roztoku získané sloučeniny zředěným hydrouhličitanem sodným je zapotřebí k odstranění stop výchozího fenolu. Sloučenina (40) má výtěžnost 76 % a formu světle žlutého oleje.

Stupeň Y: Ethyl 4-(2-aminopyrid-3-yloxy)butyrát (41)

Tato sloučenina se připraví redukcí sloučeniny (40) postupem podle výše uvedeného stupně (B). Amin (41) má formu voskovité látky.

Stupeň Z: Ethyl 4-(2-(1 l-karbomethoxyundekanoylamino)pyrid-3-yloxy)butyrát (42)

Když sloučenina (41) a sloučenina (7) spolu reagují podle postupu popsaného ve stupni (E), získá se výše uvedená sloučenina (42). Hydrolýza pak poskytne odpovídající dikyselinu (4—(2— 1 l-karbooxyundekanoylamino)pyrid-3-yloxy)butanovou kyselinu (43).

Stupeň AA: N-(l l-karbomethoxyundekanoyl)-2-hydroxyanilin (44)

K míchanému roztoku 2-aminofenolu (20,24 g, 2,2 mmol) v bezvodém methylenchloridu (25 ml) se přidá suchý pyridin (0,666 ml) a směs se ochladí v lázni s ledovou vodou. Roztok sloučeniny (7) (0,525 g, 2,0 mmol) v methylenchloridu (2 ml) se přidává během minuty (dvakrát se provede opláchnutí 1,5 ml methylenchloridu) a směs se nechá v chladu ustát. Po 30 minutách se lázeň odstraní. Poté se míchá směsí přes noc při teplotě místnosti, směs se zfiltruje, rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a residuum se odčerpá, aby se odstranily veškeré stopy pyridinu. Sloučenina (44) se užije v dalším stupni.

Stupeň BB: 4-(2-(1 l-karbomethoxyundekanoylamino)fenoxy)butyronitril (45)

Když sloučenina (44) reaguje s 4-brombutyronitrilem za podmínek obvyklým v stupni (A), získá se sloučenina (45) jako voskovitá tuhá látka. Jestliže reaguje sloučenina (44) s ethyl-4-brombutyrátem jako ve stupni (A), získá se sloučenina (8).

Stupeň CC: 4-(2-(1 l-karbomethoxyundekanoylamino)-fenoxy)butyramid (46)

K míchanému roztoku sloučeniny (45) (11 mg, 0,027 mmol) v methylenchloridu (3 ml) se přidá aktivovaný oxid manganičitý (100 mg) a výsledná suspenze se míchá pod zátkou při teplotě místnosti. Po několika dnech se přidá další methylenchlorid a oxid manganičitý (100 mg)

-43CZ 292712 B6 a reakce se nechá dále probíhat. Tento postup se opakuje ještě jednou. Když TLC analýza prokáže, že ve zfiltrovaném roztoku již není žádný nitril, katalyzátor se promyje novým methylenchloridem a filtrát se zkoncentruje; získá se výše uváděná sloučenina (46) jako voskovitá tuhá látka.

Výše uvedené izolované a vyčištěné sloučeniny vykazují údaje z nukleární magnetické rezonance a hmotnostní spektra, které jsou v souladu s jejich uvedenými chemickými strukturami. Všechny teploty tání byly stanoveny na A.O. Spencer topném bloku a nejsou korigovány.

Příklad 1

17β—benzoyl—androst—3,5—dien—3—karboxylová kyselina

Výše uvedenou sloučeninu připraví reakcí 17P-karboxymethoxy-androst-3,5-dien-chráněné karboxylové kyseliny např. v tetrahydofuranu s fenylmagneziumbromidem za standardních Grignardových podmínek. Získá se výše uvedená sloučenina o teplotě tání od 222 až 225 °C.

Referenční příklad 1

Syntéza 4-(4-izobutylbenzyloxy)-2,3-dimethylbenzaldehydu

Směs 4-hydroxy-2,3-dimethylbenzaldehydu (220 mg), 4-izobutylbenzylbromidu (341 mg), 25 uhličitanu draselného (1,38 g) a ethylmethylketonu (10 ml) se refluxuje po 6 h. Po zchlazení se reakční směs rozředí ethylacetátem, roztok se promyje zředěnou kyselinou chlorovodíkovou, poté vodou, vysuší a odpaří. Residuum se vyčistí na chromatografické koloně na silikagelu (hexan: EtOAc 10:1), získá se výše uvedená sloučenina (383 mg). TLC: Rf 0,48 (hexan: EtOAc 5,1)

NMR: 5 7,64 (1H, d), 7,32 (1H, d), 7,16 (1H, d), 5,12 (2H, s), 2,60 (3H, s), 2,48 (2H, d), 2,24 (3H, s), 1,94-1,80 (1H, m), 0,90 (6H, d)

Referenční příklad 2

Syntéza 4-(4-izobutylbenzyloxy)-2,3-dimethyl-benzoové kyseliny

Roztok aldehydu připraveného v referenčním příkladu 1 (380 mg) v acetonu (5 ml) byl vychlazen ledem. K roztoku se přidá Jonesovo činidlo (2,67 A, 2 ml) po kapkách a nechá se ustát. Roztok se 40 míchá po 1 h při teplotě místnosti. Reakce se zastaví přidáním izopropylalkoholu. Usazené

-44CZ 292712 B6 krystaly se promyjí hexanem, vysuší se a vyčistí na chromatografické koloně se silikagelem (hexan: EtOAc); získá se 328 mg výše uvedené sloučeniny.

TLC: Rf 0,36 (hexan: ETOAc 2:1)

NMR: δ 7,80 (1H, d), 7,33 (1H, d), 7,15 (1H, d), 6,90 (1H, d). 5,09 (2H, s). 2,58 (3H, s), 2,48 (2H, d), 2,26 (3H, s), 0,91 (6H, d)

Referenční příklad 3

Syntéza 4-[2-[-(4-izobutylbenzyloxy)-2,3-dimethylbenzoylamino]fenoxy]ethylesteru butanové kyseliny

Oxylylchlorid (2 ml) se po kapkách přidává k roztoku karboxylové kyseliny připravené v referenčním příkladu 2 (325 mg) v methylenchloridu (2 ml). Roztok byl míchán po 1 h a odpařen. K ledově zchlazené směsi ethyl 4-(2-aminofenoxy)-butanoátu (232 mg), pyridinu (1 ml) a methylenchloridu (15 ml) byl přidán výše uvedený roztok. Směs se míchala 30 min při stejné teplotě a jednu hodinu při teplotě místnosti, reakční roztok se promyl vodou, vysušil a odpařil. Residuum se vyčistilo na chromatografické koloně se silikagelem (hexan: EtOAc: 1). Získalo se 383 mg výše uvedené sloučeniny.

TLC: Rf 0,5 (hexan:EtOAc 3:1)

NMR: δ 8,58-8,48 (1H, m), 8,05 (1H, s), 7,34, d), 7,16 (1H, d, 7,08-6,96 (2H, m), 6,90-6,80 (2H, m), 5,07 (2H, s), 4,14-3,96 (4H, m), 2,49 (2H, d), 2,44 (3H, s), 1,18 (3H, t), 0,91 (6H, d)

Referenční příklad 4

Syntéza 4-[2-[-(4-izobutylbenzyloxy)-2,3-dimethylbenzoylamino]fenoxy]butanové kyseliny

N vodný roztok hydroxidu lithného (3 ml) byl přidán do roztoku esteru připraveného podle referenčního příkladu 3 (380 mg) v dimethoxyethanu (8 ml). Směs se míchala 30 min při 50 °C. Po reakci se roztok neutralizoval zředěnou kyselinou chlorovodíkovou a extrahoval ethylacetátem. Extrakt byl vysušen a odpařen. Získané residuum bylo rekiystalizováno z hexanu. Získalo se 317 mg výše uvedené sloučeniny.

TLC: Rf 0,26 (hexán:EtOAc 1:1), teplota tání 143 °C.

-45CZ 292712 B6

Referenční příklad 5

Podobným postupem jako u referenčního příkladu 1, 2, 3 a 4 byla připravena sloučenina 4-[2[4-(l-(4-izobutylfenyl)ethoxy)-2,3-dimethylbenzoylamino]fenoxy]butanová kyselina o vzorci:

kde R₂ je ve kterém Rf hodnota je 0,37 (hexan:EtOAc 1:1); hmotnostní spektrum vykázalo n/z hodnoty 503,345.

Referenční příklad 6 (-)-4-[2-(4-[l-(4-izobutylfenyl)ethoxy]-2,3-dimethylbenzoylamino]fenoxy]butanová kyselina

Sloučenina připravená podle referenčního příkladu 5 (403 mg) a cinhonidin (2,36 g) byly rozpuštěny v acetonu (70 ml) za ohřevu. Roztok se nechal ustát až do kiystalizace bílých krystalů, které se zfiltrovaly a vyčistily rekrystalizací z acetonu čtyřikrát. Roztok se promyl zředěnou HC1. Olejovitý povlak se promyl vodou, vysušil a odpařil do sucha; výše uvedená sloučenina vykazuje tato fyzikální data : vzhled : bílé krystaly, optický úhel rotace [a]_D 39,6° (c = 1, CHC1₃)

Referenční příklad 7

Sodná sůl (—)—4—[2—(4—[ 1 ~-(4-izobutylfenyl)ethoxy]-2,3-dimethylbenzoylamino]fenoxy]butanové kyseliny

Sloučenina připravená podle referenčního příkladu 6 byla rozpuštěna v methanolu. Molámí ekvivalent vodného roztoku hydroxidu sodného byl přidán a odpařen. Výše uvedená sloučenina vykazuje tato data:

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1) -OH, -OC,-C4 alkyl, Cj-C, alkyl, -ÍCH₂)_m OH. -(CH₂)_n COOH, kde m je 1^1, n je 1-3 za předpokladu, že C1-C4 alkyl je přítomen pouze tehdy, když je přítomen jeden z výše uváděných zbytků obsahujících kyslík;

1. Farmaceutická kompozice pro léčbu benigní hyperplaze prostaty s obsahem terapeuticky účinného množství inhibitoru 5a-reduktázy, vyznačená tím, že inhibitor 5a-reduktázy je 17-[3-substituovaný 4-azasteroid obecného vzorce I, αχ kde vytečkovaná linie představuje dvojnou vazbu, je-li přítomna, a

R¹ a R³ jsou nezávisle vodík, methyl nebo ethyl;

R⁴ je vodík nebo methyl;

R⁵ je vodík nebo methyl v pozici beta;

R⁶ je vodík nebo methyl v pozici alfa nebo beta a farmaceuticky vhodné soli nebo estery těchto látek nebo

17[3-substituovaný 4-azasteroid obecného vzorce II (Π), kde vytečkovaná linie představuje dvojnou vazbu, je-li přítomna a

-47CZ 292712 B6

R⁷ je zvoleno z vodíku, methylu nebo ethylu a

R^sjea) monovalentní uhlovodíkový zbytek zvolený z lineárního nebo rozvětveného řetězce alkylu nebo cykloalkylu o 1 až 12 atomech uhlíku, které mohou být substituovány jednou C1-C4 alkylovou skupinou nebo halogenem;

b) ary laiky lový zbytek zvolený z benzylu nebo fenethylu:

c) monocyklický aromatický zbytek, který může být substituován skupinami

2. Farmaceutická kompozice podle nároku 1, vyznačená tím, že inhibitor 5areduktázy je zvolen ze skupiny sloučenin

17 β-fN-terc-amy lkarbamoyl)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on

17 (3-(N-terc-hexy lkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-1 -en-3-on

17(3-(N-terc-butylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17(3-(N-izobutylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17p~(N-terc-oktylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 [3-(N-oktylkarbamoyl)-4-aza-5 a-androst-1 -en-3-on

17β-(Ν-1, l-diethylbutylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17(3-(N-neopentylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(N-2-adamantylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17(3-(N-l-adamantylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(N-2-norbomylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17p~(N-l-norbomylkarbamoyl)—4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17p-(N-fenylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on 17p-(N-benzylkarbamoyI)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on 17(3-(N-terc-amylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17 P-(N-terc-hexylcarbamoyl)-4-aza-4-methy 1-5 α-androst-1 -en-3-on

17[3-(N-terc-butylkarbamoyl)-4-aza-4-methyI-5a-androst-l-en-3-on 17p-(N-izobutylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on 17(3-(N-terc-oktylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17β-(Ν-1,1,3,3-tetramethylbutylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17p-(N-oktylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17 β-(Ν-1,1 -d iethylbutylkarbamoyl)-4-aza-4-methy 1-5 a-androst-1 -en-3-on 17[3-(N-neopentylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on 17p-(N-l-adamantylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17|3-(N-l-adamantylkarbamoyl)-4-methyl-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17(3-(N-l-adamantylkarbamoyl)-4-methyl-4-aza-5a-androst-3-on 17p-(N-l-adamantylmethylkarbamoyl)-4-aza-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17[3-(N-2-adamantylkarbamoyl)-4—aza-5a-androstan-3-on 17p-(N-methyl-N-2-adamantylkarbamoyl)-4-methyl-4-aza-5a-androstan-3-on

17 β-ζΝ-2-adamanty lkarbamoyl}-4-methyl-4-aza-5 a-androstan-3-on 17|3-(N-2-adamantylkarbamoyl)-4-methyl-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17|3-(N-methyl-N-adamantylkarbamoyl)-4-methyl-4-aza-androst-l-en-3-on 17fHN-(3-methyl)-l-adamantyl-karbamoyl)-4-aza-4-meethyl-5a-androst-l-en-3-on 17p-(N-exo-2-norbomanylkarbamoyl)-4-aza-4-methy]-5a-androst-l-en-3-on

1Ί |3-(N-exo-2-norbomanylkarbamoyl)-4-aza-5 a-androst-1 -en-3-on

17 P-(N-2-adamanty lkarbamoy l)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on

17 P-(N-methyl-N-2-adamantylkarbamoyl)-4-aza-4-methyl-5a-androstan-3-on 17p-(N-2-adamantylkarbamoyl)-4-methyl-4-aza-5a-androst-3-opn

17 P-(N-methyl-N-2-adamanty lkarbamoy l)-4-methy 1-4-aza-androst-l -en-3-on

17 p-(fenylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5 a-androst-1 -en-3-on

17 P-(2-tolylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17p-(3-tolylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

-49CZ 292712 B6 *

* k

J , 17p-(4-tolylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17p-(2-bromfenylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on 173-(2-chlorfenylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on 17|3-(2,6-dichlorfenylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

5 17|3-(2,6-dibroinfenylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17|3-(xylylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on 17fJ-(terc-butylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17[3-(izobutylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 f3-(n-oktylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on io 17 β-( 1,1 -duethylbutylkarbony l)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on

17|3-(neopentylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17 P-(terc-amylkarbony)-4-aza-4-5a-androst-l-en-3-on 17p-(cyklopentylkarbonyl)-4-aza-4-5a-androst-l-en-3-on 1Ί P~(benzylkarbony l)-4-aza-5a-androst-1 -en-3-on

15 17 |3-(2-pyridy lkarbonyl)-4-aza-5 a-androst-1 -en-3-on

17 P~(4-pyridylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17p-(2-pyrrolylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17p-(4-pyridylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17p-(2-pyrrolylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

20 17(3-(2-thienylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 |3-(2-adamantylkarbonyl)-4-aza-5 a-androst-1 -en-3-on

1Ί (3-(fenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17p-(2-tolylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 |3-(3-tolylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

25 17p-(2-bromfenylkarbonyl}-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17p-(2-chlorfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17[3-(2,6-dichlorfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-én-3-on 17|3-(2,6-dibromfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17|3-(xylylkarbonyl}-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

30 17|3-(fenylethyl)karbonyl-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 β-(4—dimethylaminofenylkarbonyl)-4-aza-5 a-androst-1 -en-3-on

17 (3-(3-dimethylaminofenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17|3-(3,4-diethylaminofenylkarbonyl}-4—aza-5a-androst-l-en-3-on 17P-(3,5-dimethyl-4-diethylaminofenylkarbonyl)—4-aza-5a-androst-l-en-3-on

35 17 |3-(4-N-methylaminomethylfenylkarbonyl}-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 p-(2-N-ethylamino-4—ethylfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 P~(4-fenylbenzoyl}-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 fl-(3-fenyIbenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17[3-(4-bifenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

40 17|3-(3-bifenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 β—(l-naftyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p-(2-naftyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17β-( l-fenanthryl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p-(2-fenanthryl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

45 17 β-( l-bifenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 |3-(9-anthracyl)-4-aza-5a-androst-l -en-3-on

17 p-(4-thienylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17[3-(3-thienylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 p-(4-methylthioenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

50 17[3-(4-methylsulfmylfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17(3-(4-methylsulfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

-50CZ 292712 B6

17p-(3-methylsulfinylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 P~(4-N,N-dimethylaminosulfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l -en-3-on

17P-(2-ethyl-4-methylthienylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p-(4-thioethyIfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 P~(4-acetoxymethy lthieny lkarbony l)-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on

17 P~(2-methy 1-4-methy lthieny lkarbonyl)-4-aza-4-methy 1-5 α-androst-1 -en-3-on

17[3-(2-methyl-4-methylsulfinylfenylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17 p-(2-izopropy l-4-methylsulfenylkarbonyl)-4-aza-4-methy 1-5 α-androst-1 -en-3-on 173~(4-methylthienylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-3-on

17 P~(4-methylsulfíny lfenylkarbony l)-4-aza-4-methyl-5 a-androst-3-on

17 P~(4-methy lsulfofenylkarbony l)-4-aza-4-methy 1-5 a-androst-3-on 17[3-(4-hydroxyfenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 P~(3-hydroxyfenyl}-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on

17p~(3,4-dihydroxyfenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p~(3,5-dimethyl-4-hydroxyfenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 p-(4-hydroxymethylfenyl)-4-aza-5a-androst-l -en-3-on 17P-(2-hydroxymethylfenylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17P~(4-methoxyfenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17P-(4-hydroxyfenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17P-(3-hydroxyfenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17p-(3,4-dihydroxyfenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17p~(3,5-dimethyl-4-hydroxyfenyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17 P-(4-hydroxymethylfenyl)-4—aza-4-methy l-5a-androst-1 -en-3-on

17p-(2-hydroxyethylfenylkarbonyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17[3-(4-methoxyfenyl)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l-en-3-on

17 P~(4-karboxymethylfenyI)-4-aza-4-methyl-5a-androst-l -en-3-on a

17p~(4-karboxyfenyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on methy l-3-oxo-4-aza-5 α-androst-1 -en-17 β-karboxy lát methyl 4-methyl-3-oxo-4—aza-5a-androst-l-en-l 7[3-karboxylát

S-(2-pyridyl) 4-methyl-3-oxo-4-aza-5a-androst-l-en-l 7|3-thiokarboxylát

N-t-butyl 4-methyl-3-oxo-4-aza-5a-androst-l-en-l 7p-karboxylát

5-oxo-3,5-secoetian-3,20-diová kyselina

3-oxo-4-aza-5-etien-20-ová kyselina

3-oxo-4-5a-etian-20-ová kyselina

N-(2,4,4-trimethyl-2-ontyl)3-oxo-4-aza-5a-androstan-l 7 β-karboxamid

17P(N-l-adamantylkarbamoyl)-4-aza-5a-androstan-3-on methyl-3-oxo-4—aza-5a-androstan-17[3-karboxylát

N-( 1 -adamantyl)-3-oxo-4-aza-5a-androstan-l Ί β-karboxamid benztriazol-l-yl-3-oxo-4-methyl-4-aza-5α-androstan-17β-karboxylát N-terc-butyl-androst-3,5-dien-l 7p-karboxamid-3-karboxylová kyselina S-(2-pyridyl)-3-oxo-4-aza-5α-androst-l-en-17β-thiokarboxylát 22-methy l-4-aza-21 -nor-5 a-chol-l-en-3,20-dion 17p-fluorofenylkarbonyl-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 3-(cyklohexylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 P-(cyklobutylkarbonyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17p-(4-hydroxybenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17P-(3,5-dimethyl-4-hydroxybenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 p-(4-methoxybenzyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17β-(3-hydroxybenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17β-(4—hydroxymethyl-benzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 P~(4-karboxybenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17β-(4-1^π^6ύ^^6ηζογ1)-4-3Ζ3-5α-3^Γθ5ΐ-1-βη-3-οη

-51CZ 292712 B6

17P-(4-karboxymethylbenzyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17|3-(3,4-dihydroxybenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on 17|3-(2-methoxybenzoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17 β-fa-hydroxybenzy l)-4-aza-5a-androst-1 -en-3-on

5 17 P-hydroxymethyl-4-aza-5a-androst-1 -en-3-on

17 |3-formyl-4-aza-5 α-androst-1 -en-3-on 17P-(a-hydroxybenzyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-on

17β—(4—hydroxyfenylkarbonyl)-androst-3,5-dien-3-karboxylová kyselina

17β—benzoyl—androst—3,5—dien—3—karboxylová kyselina io 17P-cyklohexylkarbonyl-androst-3,5-dien-3-karboxylová kyselina

17β—izobutylkarbonyl—androst—3,5—dien—3—karboxylová kyselina 17p-(4-hydroxymethylfenylkarbamyl)-androst-3,5-dien-3-karboxylová kyselina 17P-(2-hydroxyethylfenylkarbonyl)-androst-3,5-dien-3-karboxylová kyselina 17(3-(4-methoxyfenylkarbonyl)-androst-3,5-dien-3-karboxylová kyselina

15 17 P-(4-karboxymethylfenylkarbony l)-androst-3,5-dien-3-karboxy lová kyselina

N-terc-butyl-androst-3,5-dien-l 7p-karboxamid-3-karboxylová kyselina N-fenyl-androst-3,5-dien-l 7p-karboxamid-3-karboxylová kyselina N-l-adamantyl-androst-3,5-dien-17|3-karboxamid-3-karboxylové kyselina N-2-adamantyl-androst-3,5-dien-17(3-karboxamid-3-karboxylová kyselina nebo z farmaceuticky vhodných solí a esterů těchto sloučenin.

2) -SH, SCj-C₄ alkyl, -SOC1-C4 alkyl, -SOjQ-Cj alkyl, -SO₂N(C!-C₄ alkyl)₂, C]-C₄ alkyl-(CH₂)_m SH, -S-(CH₂)_n-O COCH3, kde m je 1-4, n je 1-3, za předpokladu, že C1-C4 alkyl je přítomen pouze tehdy, když je přítomen jeden z výše uvedených zbytků obsahujících síru;

d) heterocyklický zbytek zvolený z 2- nebo 4-pyridvlu, 2-pyrrolylu, 2-furylu nebo thienylu;

při čemž R⁹, R¹⁰, R¹¹ jsou každý zvolený z vodíku a methylu a farmaceuticky vhodné soli těchto látek nebo

17[3-acyl-3-karboxy-androst-3,5-dien obecného vzorce III kde R¹³ je a) Ci-C₆ lineární nebo rozvětvený alkyl; C₃-Ci₂ cykloalkyl, který může být substituován C1-C4 alkoxyskupinou nebo C1-C4 lineárním nebo rozvětveným alkylem; C₆-Ci₂ aryl nebo C7-C13 arylalkyl, který lze substituovat jednou ze skupin -OH, OC1-C4 alkyl, C1-C4 alkyl, -(CH₂)_mOH, -(CH₂)_nCOOH, kde m je 1-4, n je 1-3;

b) C1-C4 lineární nebo rozvětvený alkyl, C3-Ci₂ cykloalkyl, který může být substituován C1-C4 alkoxy nebo C1-C4 lineárním nebo rozvětveným alkylem; C₆-Ci₂ aryl nebo C7-C13 arylalkyl, který může být substituován jednou ze

-48CZ 292712 B6 skupin: -OH, -OC]-C₄, alkyl, Ci-C₄ alkyl, -(CH2)_m OH, -(CH2)nCOOH, kde mjel=4, ajel=3aR¹⁴je zvoleno z COOH, SO₃H, PO(OH)₂, PH(O)OH nebo farmaceuticky vhodné soli a estery těchto sloučenin v kombinaci s blokátorem ajadrenergního receptorů zvoleného ze skupiny obsahující terazosin, doxazosin, prazosin, bunazosin, indoramil, alfuzosin spolu s farmaceuticky vhodným nosičem.

3. Farmaceutická kompozice podle nároků 1 a 2, vyznačená tím, že inhibitor 5areduktázy je finasterid a blokátor ai adrenergního receptorů je terazosin.