CZ288219B6

CZ288219B6 - Medicament for prophylaxis or therapy of restenosis

Info

Publication number: CZ288219B6
Application number: CZ19972804A
Authority: CZ
Inventors: Hakan Bergstrand; Knut Pettersson; Christer Westerlund
Original assignee: Astra Ab
Priority date: 1995-03-14
Filing date: 1996-03-12
Publication date: 2001-05-16
Also published as: HUP9801985A3; AU701287B2; WO1996028149A1; BR9607225A; EE03382B1; SK282448B6; IL117465A0; IS4554A; NZ303781A; CZ280497A3; UA42830C2; NO974143D0; EP0814798A1; NO974143L; CN1183718A; IL117465A; HUP9801985A2; PL322328A1; AR002716A1; ZA961749B

Description

Léčivo k profylaxi nebo léčení restenosy

Oblast techniky

Vynález se týká nového použití některých derivátů cystinu. Zejména se tento vynález týká použití těchto derivátů cystinu pro přípravu léčiv působících proti restenose.

Dosavadní stav techniky

Deriváty cystinu, u kteiých se podle tohoto vynálezu zjistilo nové farmakologické použití, jsou známy zWO 91/18594 a EP463 514 tím, že mají immunomodulační účinnost. Obecně však nejsou popsány nebo obecně známy údaje týkající se farmakologických a/nebo terapeutických vlastností těchto sloučenin z hlediska jejich účinků na restenosu.

Ve spojení s vynálezem se používají sloučeniny obecného vzorce I:

COOR³

I s-ch₂-ch-nh-r

I

S-CH₂-CH-NH-CO-R² (I),

COOR³ ve kterém

R znamená vodík, methyl, ethyl, n-propyl nebo skupinu -COR¹, kde R¹ znamená přímý nebo rozvětvený alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku,

R² znamená přímý nebo rozvětvený alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku a

R³ je skupina tvořící ester hydrolyzovatelný v tělesných tekutinách za uvolnění účinné látky ve formě volné kyseliny, nebo jejich fyziologicky vhodná sůl a/nebo jejich stereochemický izomer.

Zejména jsou výhodné sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých R znamená vodík nebo skupinu -CO-R¹, kde R* znamená methyl, ethyl, n-propyl, n-butyl, n-pentyl, n-hexyl, n-heptyl, n-oktyl, n-nonyl, n-decyl, n-undecyl, isopropyl, 1-methylpropyl, 2-methylpropyl, terc.butyl, 3-methylbutyl nebo 2-methylbutyl, R² znamená methyl, ethyl, n-propyl, n-butyl, n-pentyl, n-hexyl, nheptyl, n-oktyl, n-nonyl, n-decyl, n-undecyl, isopropyl, 1-methylpropyl, 2-methylpropyl, terč, butyl, 3-methylbutyl nebo 2-methylbutyl a R³ znamená vodík, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl nebo isobutyl, nebo jejich fyziologicky vhodné soli a/nebo jejich stereochemické izomeiy.

Sloučeniny podle vynálezu se užívají jak ve formě racemátu tak ve formě stereoizomerů. Zvláštní význam mají sloučeniny s L konfigurací, zejména N,N'CH₂diacetyl-L-cystin.

Vynález rovněž zahrnuje sloučeninu podle obecného vzorce I ve formě fyziologicky vhodných solí, jako jsou soli sodné, draselné, amonné, vápenaté nebo hořečnaté. Vynález také zahrnuje soli neesterifikovaných sloučenin s farmaceuticky přijatelnými organickými bázemi, jako je lysin, ethylendiamin, Ν,Ν'-dibenzylethylendiamin, adamantanamin, N-benzyl-2-fenylenthylamin a piperazin.

-1 CZ 288219 B6

Lysin a arginin se mohou použít v D- nebo L-formě. Nejvýhodnější je forma L.

Nejvýhodnější sloučeninou je di-L-lysinium-N,N'-dÍacetyl-L-cystinát (sloučenina A).

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou připravit kterýmkoli způsobem uvedeným v EP 463 514. Soli těchto sloučenin s organickými bázemi lze připravit jakýmkoli známým způsobem nebo způsobem uvedeným v WO 93/11104.

Po mechanickém poškození arterií dochází k rychlému vývoji vnitřní cévní stěny. Nejběžnější takovou komplikací bývá tak zvaná restenosa, ke které dochází po perkutánní transluminální koronární angioplastice (PTCA), tj. odstranění arteriosklerotických lézí působících stenosu v koronárních cévách balónkovým katetrem, avšak podobné komplikace se mohou vyskytnout i následkem jiných postupů a zákroků.

K vývoji restenosy po PTCA dochází u všech pacientů. U asi 1/3 pacientů je však tato komplikace tak výrazná, že za 3 až 6 měsíců tato vyvinutá restenosa vyžaduje další zákrok PTCA nebo chirurgicky provedený by-pass. Z toho vyplývá zřejmá potřeba chemoterapie významně redukující výskyt těchto výrazných restenos.

Výrazným rizikem během angioplastických zákroků je akutní trombosa, a proto se během chirurgických zákroků podává heparin. Ze stejného důvodu se určitou dobu po zákroku obvykle podává aspirin. V současné době tedy není dostupný obecně přijatelný postup léčby dostatečně snižující výskyt restenos. Nicméně podle současně publikovaných výsledků klinických zkoušek se ukazuje, že látka trapedil, působící proti srážení krevních destiček (Maresta a sp., CIrculation 1994; 90: 2710-2715) a látka s hypolipidemickým (a antioxidačním) účinkem, probucol (Setsuda a sp., Clin. Ther. 1993; 15:174-182) mohou alespoň částečně zabránit vývoji restenosy.

Současné možnosti prevence restenosy jsou stále ještě nedostatečné, a mohou také být spojeny s nežádoucími vedlejšími účinky, jako je zvýšené riziko krvácení po léčbě aspirinem a trapedilem.

Neočekávaně bylo zjištěno, že sloučeniny obecného vzorce I nebo jejich fyziologicky vhodná sůl a/nebo jejich stereochemický izomer jsou účinné v pokusných modelech na zvířatech v ovlivnění rozsahu restenosy.

Podstata vynálezu

Předmětem tohoto vynálezu je použití derivátu cysteinu obecného vzorce I:

COOR³

I

S-CHr-CH-NH-R

I

S-CHr-CH-NH-CO-R²

COOR³ (I), ve kterém

R² znamená přímý nebo rozvětvený alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku a

R³ je skupina tvořící ester hydrolyzovatelný v tělesných tekutinách za uvolnění účinné látky ve formě volné kyseliny, nebo jeho fyziologicky vhodné soli a/nebo jeho stereochemického izomeru, pro přípravu léčiva k profylaxi nebo léčení restenosy.

Zejména je významné použití derivátu cysteinu obecného vzorce I, ve kterých R znamená vodík nebo skupinu -CO-R¹, kde R¹ znamená methyl, ethyl, n-propyl, n-butyl, n-pentyl, n-hexyl, nheptyl, n-oktyl, n-nonyl, n-decyl, n-undecyl, isopropyl, 1-methylpropyl, 2-methylpropyl, terc.butyl, 3-methylbutyl nebo 2-methylbutyl, R² znamená methyl, ethyl, n-propyl, n-butyl, npentyl, n-hexyl, n-heptyl, n-oktyl, n-nonyl, n-decyl, n-undecyl, isopropyl, 1-methylpropyl, 2methylpropyl, terc.butyl, 3-methylbutyl nebo 2-methylbutyl a R³ znamená vodík, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl nebo 2-methylpropyl, nebo jeho fyziologicky vhodné soli a/nebo jeho stereochemického izomeru, pro přípravu léčiva k profylaxi nebo léčení restenosy.

Výhodným provedením tohoto vynálezu je použití Ν,Ν'-diacetylcystinu nebo jeho fyziologicky vhodné soli pro přípravu léčiva k profylaxi nebo léčení restenosy.

Obzvláště výhodným provedením tohoto vynálezu je použití di-L-lysinium-N,N'-diacetyl-Lcystinátu pro přípravu léčiva k profylaxi nebo léčení restenosy.

Vynález tedy spočívá v použití sloučenin obecného vzorce I, jejich stereoizomerů (enantiomerů, diastereomerů) a jejich solí. Způsob profylaxe nebo léčení restenosy je založen na použití sloučenin obecného vzorce I, jejich stereoizomerů (enantiomerů, diastereomerů) a jejich solí a spočívá v podávání těchto látek.

Účinky sloučenin na pokusné modely restenosy

Nejobvyklejším používaným modelem restenosy jsou krysí karotidy nebo aorty, které byly dilatovány balónkovými katetry. Krysy se k tomuto účelu anestesuji a chirurgicky se zpřístupní rozdvojení karotidy. Do rozdvojení se zavede balónkový katétr (katétr 2F Fogarty), nafoukne se a pak se vyjme. Tento postup vede k vývoji „neointimy“ jejíž mikroskopický vzhled je podobný jako u restenosy lidí.

Účinné látky se podávají ve formě roztoku v pitné vodě pod dobu 2 až 4 týdnů v dávkách odpovídajích 0,003 až 30 pmol/kg za den.

Velikost plochy neointimy a medie v příčném řezu se hodnotí mikroskopicky 2-4 týdny po obnažení cévy. Na konci studií se krysy fixují perfusí, z karotidy se odeberou vzorky pro mikroskopii a zjistí se plochy na příčném řezu morfometrickými postupy, za použití počítání bodů a/nebo vystřižením a zvážením fotografií, neointimy a medie.

Úvodní studie byly provedeny na krysách Sprague-Dawley. Tvorba neointimy je závislá na dostatečné odezvě na vrstvě medie a úměrná ploše medie, jestliže tato převyšuje určitou hodnotu pozadí. Výsledky jsou proto vyjádřeny jako poměr neointima-medie. Dávky od 0,03 do 3,0 pmol/kg/den mohou redukovat poměr neointima/medie o více než 20 %.

Farmaceutické přípravky

Popsané účinné látky lze pro humánní aplikaci zpracovat do různých lékových forem například tablet, obalených tablet, želatinových tobolek, perorálních roztoků, injekčních roztoků, a aerosolů a suchého prášku pro inhalaci.

Při přípravě tablet, obalených tablet a želatinových tobolek, se účinná látka spojí s farmaceuticky vhodnými nosiči nebo ředidly, jako je například laktosa, škrob, hydrogenfosforečnan vápenatý,

-3CZ 288219 B6 mikrokrystalická celulóza, polyvinylpyrrolidon, želatina, deriváty celulózy, koloidní oxid křemičitý, talek a kyselina stearová nebo její soli.

Pro přípravu perorálních roztoků je vhodnou přísadou voda nebo roztoky sacharosy, glukosy, sorbitolu, fruktosy nebo zylitolu.

Roztoky pro parenterální podání lze připravit ve formě roztoku sloučeniny podle vynálezu ve farmaceuticky vhodném rozpouštědle, výhodně v koncentraci od 0,1 % do 10% hmotnostních. Tyto roztoky mohou rovněž obsahovat stabilizační přísady a/nebo tlumivé přísady a výhodně se rozplňují do dávkových jednotek ve formě ampulí nebo lahviček. Roztoky pro parenterální podání lze také připravit ve formě suchého přípravku, který se ředí vhodným rozpouštědlem podle návodu před použitím.

Látka může také být inhalována z tlakového inhalátoru s dávkovačem, z inhalátoru na suchý prášek, jako je například Turbuhaler^R nebo z inhalátoru na suchý prášek za použití želatinových, plastových nebo jiných tobolek. K upráškované látce pro inhalační terapii lze přidávat netoxické a chemicky inertní látky, například laktosu, trehalosu, mannitol nebo glukosu.

Tlakované aerosoly jsou určeny pro orální nebo nasální inhalaci. Aerosolový systém je obvykle navržen tak, aby jedna aplikovaná dávka obsahovala 10 až 1000 pg, výhodně 20 až 250 pg účinné látky. Nejúčinnější látky se podávají při spodní hranici tohoto dávkového rozmezí. U inhalační terapie se používají mikronizované látky obsahující částice značně menší než 5 pm, které se suspendují ve směsi hnacích látek za pomoci dispergačních činidel jako je sorbitan trioleat, kyselina olejová, lecithin nebo sodná sůl kyseliny dioktylsulfojantarové.

Tyto lékové formy mohou kromě již zmíněných přísad obsahovat konzervační látky, stabilizátory, látky regulující viskozitu, emulgátory, chuťová korigencia, barviva, čichové korigencia, látky regulující tonus, tlumivé roztoky a antioxidanty. Mohou také obsahovat další terapeuticky účinné látky.

Sloučeniny vzorce I se obvykle podávají orálně, rektálně, injekčně nebo inhalačně, ve formě farmaceutických přípravků obsahujících účinnou látku buď jako takovou nebo ve formě farmaceuticky vhodní, netoxické, adiční soli s kyselinou. Léková forma může být ve formě tuhého, polotuhého nebo tekutého přípravku. Účinná látka obvykle tvoří 0,1 až 99 % hmotnosti přípravku, obvykleji mezi 0,5 až 20% hmotnosti u injekčních přípravků a mezi 0,2 až 50 % hmotnosti u přípravků pro orální podání.

Účinná množství sloučenin vzorce I pro profylaxi a léčení restenosy jsou v rozmezí denních dávek 0,5 až 500 mg, výhodně 1 až 100 mg.

Dále jsou uvedeny příklady léčivých přípravků určených k profylaxi a léčení restenosy.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Jedna tableta obsahující 10 mg sloučeniny A:

sloučenina A	10 mg
laktosa	100 mg
bramborový škrob	50 mg
polyvinylpyrrolidon	5 mg
mikrokrystalická celulóza	15 mg
stearan hořečnatý	1 mg

Příklad 2

Jedna přímo slisovaná tableta obsahující 5 mg sloučeniny A:

sloučenina A bezvodá laktóza mikrokrystalická celulóza koloidní oxid křemičitý stearan hořečnatý

5 mg 150 mg 50 mg 1 mg 2 mg

Je-li to žádoucí, mohou být tablety potaženy filmem tvořeným například hydroxypropylmethylcelulózou, hydroxypropylcelulózou nebo dimethylaminoethylmetakrylátovým kopolymerovým esterem kyseliny metakrylové.

Příklad 3

Roztok pro injekci obsahující 1 mg/ml sloučeniny A:

sloučenina A chlorid sodný voda pro injekci

1,0 mg 8,8 mg ad 1 ml

Příklad 4

Orální roztok obsahující 1 mg/ml sloučeniny A:

sloučenina A sorbitol glycerin edetan dvoj sodný konzervační činidlo čichové korigens voda, přečištěná

1,0 mg 150 mg 100 mg 0,5 mg q.s. q.s. ad 1 ml

Příklad 5

Práškový aerosol obsahující 1 mg sloučeniny A v jedné dávce:

Mikronizovanou sloučeninu A lze naplnit do práškového inhalátoru například Turbuhaler^Rs dávkováním 1 mg/dávka.

Příklad 6

Tlakovaný aerosol pro inhalaci.

Aerosolový systém je uspořádán tak, aby jedna podaná dávka obsahovala 0,1 až 1,0 mg.

-5CZ 288219 B6 sloučenina A, mikronizovaná sorbitan trioleát trichlormonofluormethan dichlortetrafluorethan dichlordifluormethan

1,0 % hmotn./hmotn.

0,7 % hmotn./hmotn. 24,4 % hmotnJhmotn.

24.4 % hmotn./hmotn.

49.5 % hmotn./hmotn.

Příklad Ί

Práškový aerosol pro inhalaci čisté látky.

Čistá látka se zpracuje pro inhalaci z Turbuhaleru. Každá jednotlivá dávka obsahuje 0,1 až 1,0 mg.

zpracovaná sloučenina A 0,1 až 1,0 mg

Příklad 8

Práškový aerosol pro inhalaci.

Každá jednotlivá dávka obsahuje 0,1 až 1,0 mg v tobolce.

sloučenina A, mikronizovaná 0,1 -1,0 mg laktóza 50 mg

Příklad 9

Roztok pro nebulizaci.

Tento roztok obsahuje 1,0-10,0 mg/ml a v jedné dávce lze podat 1 až 3 ml roztoku.

sloučenina A voda pro injekci

0,1-10,0 mg ad 1,0 ml

Příklad 10

Tablety. Jedna tableta obsahuje:

sloučenina A 0,1-100 mg kukuřičný škrob 50mg laktóza 150mg polyvidon -7 mg mikrokrystalická celulóza 20mg stearan hořečnatý 2mg

Přikladli

Roztok k orálnímu použití. Jedna dávka objemu 10 ml obsahuje 10-100 mg.

sloučenina A	1-10 mg
sorbitol 70 %	150 mg
glycerol	100 mg
benzoan sodný	1 mg
čichové korigens	q.s.
voda, přečištěná	ad 1,0 ml

Příklad 12

Tablety s řízeným uvolňováním. Jedna tableta obsahuje:

sloučenina A	1-100 mg
parafin speciál	145 mg
laktóza, prášek	50 mg
koloidní oxid křemičitý	5 mg
ethylcelulóza 10 cPas	13 mg
ethanol 99,5 % obj.	85 mg
stearan hořečnatý	2,5 mg

Příklad 13

Granulát s řízeným uvolňováním. Jeden g granulátu obsahuje:

sloučenina A	1-100 mg
ethylcelulózová disperze	10 mg
acetyltributylcitrát	0,5 mg
EudragitL 100-55	55 mg
triethylcitrát	5 mg
talek	30 mg
voda, znovu předestilovaná	350 mg
pelety, neutrální	ad 1000 mg

Příklad 14

Roztok pro injekci. 1 ml jednotlivá dávka obsahuje 1,0 až 10,0 mg.

sloučenina A 1,0-10,0 mg chlorid sodný 8,9-7,7 mg voda pro injekci ad 1,0 ml

Příklad 15

Krém pro topickou aplikaci. 1 g krému obsahuje:

sloučenina A	0,1-1 mg
bílý měkký parafin	75 mg
tekutý parafin	10 mg
Cetostearylalkohol	75 mg
cetomakrogol 1000	20 mg
Metagin	0,8 mg

-7CZ 288219 B6

Propagin 0,2 mg voda, přečištěná ad 1,0 g

Farmakologické zkoušky

Při jednom experimentu se di-L-lysinium-L-cystinát, tedy lysinová sůl aktivní sloučeniny di5 Ν,Ν-L-cysteinu, podává v dávce od 0,03 do 30 gmol/kg tělesné hmotnosti za den krysám kmene Sprague Dawley po balónovém vydutí krční tepny. Dva týdny po vydutí se krysy usmrtí a zjišťují se účinky ošetření. U neošetřených krys je střední plocha intimy 0,156 ±0,042 mm² (střední hodnota ± směrodatná odchylka). U ošetřených krys dochází ke snížení tvorby neointimy v závislosti na dávce (viz obr.). Optimální dávka činí 3,0 pmol/kg tělesné hmotnosti za den, co ío koresponduje s předchozími zkušenostmi s touto sloučeninou na jiných modelech kardiovaskulárního onemocnění. U některých jiných zvířecích modelů, na kterých tyto sloučeniny byly testovány, se projevily znaky vztahu mezi účinkem dávky a dosaženým zvonovitým tvarem. Výsledky přítomného experimentu mohou podpořit toto pojetí (viz obr.).

Na připojeném obrázku je znázorněn průřez plochy krční tepny u krysy po balónovém vydutí při případném ošetření di-N,N’-L-cysteinem. Výsledky jsou vyjádřeny jako procenta z hodnot u neošetřené kontrolní skupiny. Dávka je uváděna v pmol/kg tělesné hmotnosti za den.

Stupeň poškození způsobený balónovým katetrem se může stanovit ze zvýšení průřezu plochy 20 střední vrstvy. Při vážnějším poškození, pokud je způsobeno, nastává větší tvorbě neointimy.

S překvapením bylo nalezeno, že sloučenina je obzvláště účinná při prevenci tvorby neointimy u zvířat s vážnějším poškozením střední vrstvy.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

30 1. Použití derivátu cystinu obecného vzorce I

COOR³

I

S-CHz-CH-NH-R

35 |

S-CH2-CH-NH-CO-R² (I),

I

COOR³

40 ve kterém

R znamená vodík, methyl, ethyl, n-propyl nebo skupinu -COR¹, kde R¹ znamená přímý nebo rozvětvený alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku,

45 R² znamená přímý nebo rozvětvený alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku a

R³ je vodík nebo skupina tvořící ester hydrolyzovatelný v tělesných tekutinách za uvolnění účinné látky ve formě volné kyseliny,

50 nebo jeho fyziologicky vhodné soli a/nebo jeho stereochemického izomeru, pro přípravu léčiva určeného k profylaxi nebo léčení restenosy.

-8CZ 288219 B6
2. Použití derivátu cystinu podle nároku 1, kde v obecném vzorci I R znamená vodík nebo skupinu -CO-R¹, kde R¹ znamená methyl, ethyl, n-propyl, n-butyl, n-pentyl, n-hexyl, n-heptyl, n-oktyl, n-nonyl, n-decyl, n-undecyl, isopropyl, 1-methylpropyl, 2-methylpropyl, terc.butyl,
3methylbutyl nebo 2-methylbutyl, R² znamená methyl, ethyl, n-propyl, n-butyl, n-pentyl, n5 hexyl, n-heptyl, n-oktyl, n-nonyl, n-decyl, n-undecyl, isopropyl, 1-methylpropyl, 2methylpropyl, terč, butyl, 3-methylbutyl nebo 2-methylbutyl a R³ znamená vodík, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl nebo 2-methylpropyl, nebo jeho fyziologicky vhodné soli a/nebo jeho stereochemického izomerů, pro přípravu léčiva určeného k profylaxi nebo léčení restenosy.

10 3. Použití L-izomeru Ν,Ν'-diacetylcystinu nebo jeho fyziologicky přijatelné soli pro přípravu léčiva pro profylaxi nebo léčbu restenosy.
4. Použití di-L-lysinium-N,N'-diacetyl-L-cystinátu pro přípravu léčiva pro profylaxi nebo léčbu restenosy.