CZ236994A3 - Monoclonal antibody against receptor for human interferon, hybridoma cell, pharmaceutical preparation, the use of the monoclonal antibody for the preparation of the pharmaceutical and process for preparing such antibody - Google Patents
Monoclonal antibody against receptor for human interferon, hybridoma cell, pharmaceutical preparation, the use of the monoclonal antibody for the preparation of the pharmaceutical and process for preparing such antibody Download PDFInfo
- Publication number
- CZ236994A3 CZ236994A3 CZ942369A CZ236994A CZ236994A3 CZ 236994 A3 CZ236994 A3 CZ 236994A3 CZ 942369 A CZ942369 A CZ 942369A CZ 236994 A CZ236994 A CZ 236994A CZ 236994 A3 CZ236994 A3 CZ 236994A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- ifn
- human
- cells
- type
- monoclonal antibody
- Prior art date
Links
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 title claims description 15
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 10
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 title abstract description 28
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 title abstract description 28
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 title abstract description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 3
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 title 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 94
- 102000001617 Interferon Receptors Human genes 0.000 claims description 49
- 108010054267 Interferon Receptors Proteins 0.000 claims description 49
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 41
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 41
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 24
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 16
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 claims description 15
- 102000002227 Interferon Type I Human genes 0.000 claims description 13
- 108010014726 Interferon Type I Proteins 0.000 claims description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 13
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 claims description 11
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 claims description 11
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 9
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 claims description 8
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 7
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 6
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 claims description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 6
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 6
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 5
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 claims description 5
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 4
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 claims description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 3
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 claims description 2
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 2
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000008014 pharmaceutical binder Substances 0.000 claims description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 2
- 101000599940 Homo sapiens Interferon gamma Proteins 0.000 claims 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 claims 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 claims 1
- 102000043557 human IFNG Human genes 0.000 claims 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 claims 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 abstract description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 19
- 101000959820 Homo sapiens Interferon alpha-1/13 Proteins 0.000 description 16
- 102100040019 Interferon alpha-1/13 Human genes 0.000 description 16
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 13
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 12
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 12
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 12
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 11
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 10
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 8
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 7
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 7
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 7
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 6
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 6
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 5
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 4
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 4
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 3
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 3
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 3
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 3
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 3
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 3
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 3
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000002832 anti-viral assay Methods 0.000 description 3
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 3
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 3
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 3
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 3
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 3
- 208000032467 Aplastic anaemia Diseases 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 102000018251 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Human genes 0.000 description 2
- 108010091358 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 108010086140 Interferon alpha-beta Receptor Proteins 0.000 description 2
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 2
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 2
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 2
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 2
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 2
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 description 2
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000036762 Acute promyelocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000999354 Bos taurus Interferon alpha-H Proteins 0.000 description 1
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 101000852865 Homo sapiens Interferon alpha/beta receptor 2 Proteins 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 108010078049 Interferon alpha-2 Proteins 0.000 description 1
- 102100039350 Interferon alpha-7 Human genes 0.000 description 1
- 102000007438 Interferon alpha-beta Receptor Human genes 0.000 description 1
- 102100026720 Interferon beta Human genes 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 108091008109 Pseudogenes Proteins 0.000 description 1
- 102000057361 Pseudogenes Human genes 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 108091058545 Secretory proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000040739 Secretory proteins Human genes 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108020005038 Terminator Codon Proteins 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- 206010046306 Upper respiratory tract infection Diseases 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000000670 adrenergic alpha-2 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 102000012740 beta Adrenergic Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010079452 beta Adrenergic Receptors Proteins 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000019771 cognition Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000009266 disease activity Effects 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000009454 functional inhibition Effects 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229960000789 guanidine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 102000052179 human IFNAR2 Human genes 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 108091008685 nuclear receptors type I Proteins 0.000 description 1
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 210000003024 peritoneal macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004153 renaturation Methods 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 208000020029 respiratory tract infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000013390 scatchard method Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 208000002491 severe combined immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/715—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
- C07K14/7156—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons for interferons [IFN]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/715—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2866—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Virology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
Vynález se týká monoklonální protilátky proti receptoru lidského interferonu třídy I, která rozpoznává jeho extracelulární oblast (doménu) a je schopna neutralizovat jeho biologický účinek. Vynález se zabývá také diagnostickým využitím popsané protilátky.
Dosavadní stav techniky
Interferony (IFN) tvoří skupinu sekrečních bílkovin, které vykazují široké spektrum biologických aktivit a jsou charkterizovány schopností indukovat u buněk obratlovců antivirový stav (I. Gresser a M.G. Tovey, Biochem. Biophys. Acta 516, 231, 1978). Rozeznávají se tři antigenní třídy IFN: alfa (a), beta (β) a gama. IFNa a ΙΓΝβ jsou společně známy jako interferon typu I, IFN-I.
Lidský interferon přirozeného typu I obsahuje 12 nebo více blízce příbuzných bílkovin, kódovaných odlišnými geny s vysokým stupněm strukturní homologie (Weissmann a Weber, Prog. Nucl. Acid. Res. Mol. Biol. 33 , 251, 1986).
Lokus (místo) lidského IFNa obsahuje dvě podskupiny. První se skládá ze 14 nealelických genů a 4 pseudogenů o alespoň 80% homologii. Druhá podskupina, all nebo omega (οσ) , obsahuje 5 pseudogenů a 1 funkční gen, který je z 70% homologní s geny IFNa (Weissmann a Weber 1986).
Jednotlivé podtypy IFNa mají odlišné specifické aktivity, ale přísluší jim stejné biologické spektrum (Streuli se spoluautory, PNAS-USA 78., 2848, 1981) a mají stejný buněčný receptor (M.Agnet se spoluautory, Interferon 5, str. 1-22, nakl. I. Gresser, Academie Press,
Londýn 1983).
Interferon β (IFNp) je kódován jedním genem, který je přibližně z 50% homologní s geny IFNa.
Na buněčném povrchu se interferon β váže na stejný receptor jako podtypy interferonu a.
Interferon gama (IFN gama) je rovněž kódován jednou genovou předlohou, která je slabě homologní s geny IFNa a ΙΓΝβ. Receptor IFN gama se odlišuje od receptorů interferonů a a β.
Pro potřeby tohoto vynálezu bude interferonový receptor tříd a a β označen jako IFN-R. Představuje receptor přirozeného typu I. Skupina bílkovin, tvořících přirozený interferon a, bude označena jako IFN a a IFN typu I (IFN-I) bude souhrnně představovat přirozené interferony a, w a β.
Kromě toho, že je interferon silným protivirovým činidlem, existuje významný důkaz, nasvědčující tomu, že mnoho charakteristických příznaků akutních virových «
onemocnění, jako například infekcí horních cest dýchacích, vyvolává nadprodukce interferonu a. Dále bylo prokázáno, že interferon a přispívá k patogenesi některých chronických virových onemocnění pokusných zvířat a dostupné důkazy naznačují, že stejně je tomu i v případě některých lidských chronických virových onemocnění, jako jsou nemoci vyvolané viry spalniček.
Interferony a jsou také molekulami se silným imunoregulačním účinkem, které stimulují aktivaci polyklo3 nálních B-buněk, zvyšují cytotoxicitu buněk NK (přirozených zabíječů, natural killers), inhibují funkce T-buněk a ovlivňují expresi antigenů třídy 1 hlavního histokompatibilního komplexu (MHC), z nichž všechny se účastní indukce autoimunitní reakce a reakce odvržení štěpu. Abnormální produkce interferonu α je spojena s množstvím autoimunitních a zánětlivých onemocnění včetně systémového lupus erythematodes (SLE), diabetů typu I, lupenky, revmatoidní arthritidy, roztroušené sklerózy, Behpetovy choroby, aplastické anemie, syndromu získané imunitní nedostatečnosti (AIDS) a postižení těžkou kombinovanou imunitní nedostatečností. Přítomnost interferonu α v séru pacientů se systémovým lupus e. je ve vzájemném vztahu jak s klinickými, tak i s humorálními příznaky zvýšené aktivity onemocnění. Také produkce interferonu α u HlV-positivních subjektů s vysokou pravděpodobností naznačuje rozvoj onemocnění.
Po podání interferonu α bylo popsáno aktivování uvedených nemocí u pacientů s lupenkou a roztroušenou sklerózou a indukce syndromu, podobného SLE u pacientů, u nichž se zatím autoimunitní onemocnění neprojevilo. Dále bylo prokázáno, že interferon α indukuje glomerulonefritidu u normálních myší a urychluje nástupu spontáního autoimunitního onemocnění u myší typu NZB/W.
Interferon α je rovněž produkován během onemocnění, způsobeného reakcí štěpu vůči hostiteli (GVHD, graft-versus -host disease), souběžně se zvýšením aktivity buněk NK, charakteristickým pro systémové onemocnění GVHD. Interferon α je hlavním modulátorem cytotoxicity buněk NK a bylo prokázáno, že podání interferonu α zvyšuje intestinální následky GVDH u normálních myší.
Cílem tohoto vynálezu je poskytnutí nových antagonistů, působících proti biologickým účinkům lidského interferonu typu I. Měly by být používány k terapeutickým účelům, včetně profylaktických, v takových případech, při nichž je abnormálně produkován IFN I (IFNa/β) a tato abnormální produkce je spojena s patologickými příznaky. Antagonistů by mělo být využíváno také k diagnostice různých onemocnění nebo ke studiu rozvoje podobných chorob.
Pro definování takových antagonistů autoři vynálezu brali v úvahu skutečnost, že lidský přirozený IFN typu I ve skutečnosti tvoří směs interferonů (podtypů), a skutečnost, že složení této asociace různých podtypů interferonů kolísá jak kvantitativně, tak i kvalitativně.
Některé přírodní interferony, jako jsou ty, vylučované Namalwovými buňkami (Namalwův interferon) nebo leukocyty (leukocytární interferon), byly studovány detailně (N.B. Finter a K.H. Fautes, Interferon 2, str. 65-79, I. Gresser Editor Academie Press, 1980 a K. Cantell se spoluautory, Interferon 1, str. 2-25, I. Gresser Editor Academie Press, 1979) a autoři vynálezu je použili k definování interferonů přirozeného typu I.
V některých patologických případech, jako je AIDS, byly popsány interferony, vykazující některé zvláštní vlastnosti (O.T. Preble se spoluautory, Annals of New York Academy of Sciences, str. 65-75). Popsaný interferon, který se účastní patologických stavů jako je AIDS, se však váže na stejný receptor, jako byl popsán výše.
Jedním aspektem vynálezu je poskytnutí antagonisty interferonů typu I, který by byl schopen inhibovat nebo neutralizovat, do stanovené výše, biologické účinky lidského IFN-I, tj . v podmínkách in vivo neutralisovat směs podtypů a, Pa omega.
V souhlase s tím autoři definovali protilátky, zejména monoklonální protilátky, které mají schopnost být
- '5 antagonisty vůči IFN-I. Tyto protilátky jsou zaměřeny proti receptoru lidského IFN-I.
Vynález se dále zabývá využitím monoklonálních protilátek k přípravě farmaceutických prostředků, vhodných k léčbě příznaků, které jsou spojeny s abnormální produkcí IFN-I . Tyto monoklonální protilátky jsou rovněž vhodné pro přípravu diagnostických reakčních činidel.
Podstata vynálezu
Monoklonální protilátka podle tohoto vynálezu je namířena proti receptoru lidského interferonu typu I (IFN-R) a je charakterizována následujícími vlastnostmi:
rozeznává extracelulární doménu lidského IFN-R, a je schopna neutralisovat biologické účinky lidského
IFN-I.
Schopnost neutralisace biologických účinků IFN-I může být vyjádřena jako funkce kapacity monoklonální protilátky neutralisovat protivirovou aktivitu IFN-I. Takový test je příslušný k určení, zda stanovovaná protilátka spadá do rozsahu vynálezu, i když je zřejmé, že biologické účinky IFN-I se neomezují jen na jeho protivirové působení. Detailní postupy, umožňující provést podobný test protivirové aktivity, jsou uvedeny v Příkladech. Testovanými buňkami mohou být s výhodou Daudiho buňky, jejichž afinita k IFN-I je dobře známa. Hlavní kroky takového testu by se skládaly z:
inkubace předem danné koncentrace lidských buněk, citlivých vůči lidskému IFN-I, s lidským interferonem typu I v přítomnosti předem určené koncentrace monoklonálních protilátek, které mají být stanoveny, po dostatečnou dobu k umožnění tvorby komplexu mezi monoklonálními protilátkami a IFN-R lidských buněk a/nebo mezi IFN-I a IFN-R lidských buněk;
infikace inkubovaných buněk určeným virem v předem dané koncentraci, promytí buněk, resuspendování buněk v kultivačním médiu, inkubace po dostatečnou dobu, umožňující replikaci viru;
lysování buněk;
změření buněčné replikace nebo změření inhibice cytopathického účinku.
Schopnost monoklonálních protilátek podle vynálezu neutralisovat biologcké účinky lidského IFN-I může být modulována jako funkce dávky použitých antibiotik. V souhlase s tím je možné dosáhnout 100% nebo částečné inhibice biologických účinků.
Podle jiného vyjádření předkládaného vynálezu mohou být monoklonální protilátky vůči receptoru lidského IFN-I dále charakterizovány tím, že jsou schopné inhibovat vazbu lidského IFN-I na lidský receptor tohoto interferonu, IFN-R.
Monoklonální protilátky, schopné rozpoznat extracelulární doménu lidského IFN-R a schopné inhibovat vazbu lidského IFN-I na jeho receptor, mohou být získány v následujících krocích:
preinkubací předem určené koncentrace vyčištěných monoklonálních protilátek nebo supernatantu z hybridomové kultury, který obsahuje testované monoklonální protilátky, s lidskými buňkami, schopnými uchovávat IFN-R;
přidáním označeného lidského IFN-I v předem určené koncentraci, k preinkubovanému, výše uvedenému médiu?
inkubací média, obsahujícího lidské buňky, monoklonální protilátky a označený IFN-I po dobu., dostačující k dosažení rovnováhy mezi monoklonálními protilátkami na jedné straně a IFN-I na straně druhé, s buněčným IFN-R;
promytím buněk;
stanovením tvorby vazebného komplexu mezi lidskými buňkami a označeným IFN-I na základě vyčíslení množství navázaného označeného IFN-I;
Některé z monoklonálních protilátek podle vynálezu jsou také schopny neutralisovat antiproliferativní účinky lidského IFN-I. Tato vlastnost může být rovněž testována pomocí Daudiho buněk v následujících krocích:
ponecháním buněk růst za přítomnosti lidského IFN-I a předem určené koncentrace mAb;
spočítáním buněk ke stanovení inhibice antiproliferativního účinku lidského IFN-I.
Jedna z vlastností monoklonální protilátky podle vynálezu spočívá v její schopnosti rozpoznat extracelulární doménu receptorů lidského IFN. Tato schopnost monoklonální protilátky může být testována na lidských buňkách, nesoucích přirozený lidský receptor, ale i pomocí extracelulárních domén rekombinantního IFN-R, který je vytvořen na prokaryontní buňce, například E. coli, nebo pomocí rekombinantního IFN-R, který je vytvořen na eukaryotní buňce jako je savčí buňka, např. buňka CHO.
Tento receptor ovšem může vykazovat rozdílné vlastnosti, závisející na tom, je-li vytvářen prokaryontní nebo eukaryontní buňkou a tedy i tím, zda dochází k post-translačnímu dozrávání nebo ne. Autoři zajímavě prokázali, že příslušné testy ke stanoveni kapacity monoklonální protilátky podle vynálezu, tj. schopnosti rozpoznat buněčný IFN-R, mohou být provedeny s rekombinantním receptorem, vytvořeném na savčí buňce. Takový rekombinantní receptor má, objektivně zjištěno, stejné vlastnosti, týkající se jeho rozpoznávací schopnosti, jako receptor buněčný.
Monoklonální protilátky podle vynálezu mohou být připraveny proti různým formám receptoru, včetně kompletního receptoru, konkrétní domény anebo peptidu s charakteristickou aminokyselinovou sekvencí receptoru, znázorněného na obrázku 3.
Monoklonální protilátky podle vynálezu lze například připravit vůči rozpustné formě receptoru. Vodou rozpustný polypeptid, odpovídající rozpustné formě INF-R,je znázorněn na obrázku 2. Podle předkládaného vynálezu odpovídá rozpustná forma IFN-R peptidu nebo polypeptidu, schopného pohybovat se v tělním oběhu.
Jiné monoklonální protilátky podle vynálezu mohou být rovněž připraveny vůči peptidu, obsaženému v extracelulární doméně receptoru, uvedenému na obrázku 2. Výhodné uspořádání peptidu odpovídá například sekvenci aminokyselin, zahrnující aminokyseliny 1 až 229. Podle jiné podoby vynálezu mohou být protilátky připraveny vůči polypeptidu, modifikovanému náhradou jedné nebo více aminokyselin, za předpokladu, že protilátky, zacílené vůči nepozměněné extracelulární doméně IFN-R, rozpoznají modidifikovaný polypeptid nebo peptid.
Přednost se dává takovým monoklonálním protilátkám podle vynálezu, které jsou typu IgGl.
Mezi protilátkami podle vynálezu je protilátka, schopná inhibovat vazbu IFN-I na jeho receptor, charakterizována především tím, že v podmínkách in vitro inhibuje vazbu lidského IFN na lidský buněčný IFN-R, pokud je společně inkubován s buňkami, které jsou vhodným prostředím pro lidský IFN-R (hu-IFN-R), v koncentraci protilátek rovné 100 μ9/ιη1 nebo nižší, s výhodou rovné 50 iig/ml nebo nižší, lépe pak nižší než 20 μ9/ιη1 a nejlépe v rozmezí od 0,5 do 2 μ9/ηι1.
Autoři vynálezu ukázali, že vysoce afinitní vazebná kapacita monoklonální protilátky nedostačuje k zaručení toho, že tato protilátka bude schopná inhibovat vazebnou aktivitu lidského IFN-I na IFN-R. Nicméně vysoce afinitní vazebná kapacita monoklonální protilátky je nezbytná k dalšímu zkoumání schopnosti protilátky inhibovat navázání IFN-I na jeho buněčný receptor.
Jiná monoklonální protilátka je charakterizována tím, že neutralisuje v podmínkách in vitro antiproliferativní účinek lidského IFN-I na buňky s vysokou citlivostí vůči tomuto lidskému IFN-I, například Daudiho buňky, a to v koncentraci v rozmezí od 1 do 10 μ9/ιη1.
Podle jiného tělesného vyjádření vynálezu je monoklonální protilátka také charakterizována tím, že v podmínkách in vitro neutralisuje antiproliferativní účinek lidského IFN na buňky se špatnou citlivostí vůči lidskému IFN, například buněk Ly28, a to v koncentraci od 50 do 100 μ9/πι1.
Zvláštní skupina monoklonálních protilátek podle vynálezu je charakterisována tím, že neutralisuje protivirovou aktivitu lidského IFN-I vůči buňkám vysoce citlivým vzhledem k tomuto lidskému IFN-I, například Daudiho buňkám, v koncentraci od 1 do 50 μ9/ιη1, lépe od 1 do μ9/ιη1, jednotek, 69/19.
a to při koncentraci IFN-I v rozmezí od 1 do 1000 vztahujících se k mezinárodnímu standardu MRC
S výhodou je monoklonální protilátka podle vynálezu taková, že se tyto protilátky nevážou na lidský receptor pro IFN gama.
Zvláštní protilátkou, vyhovující požadavkům vynálezu, je protilátka, zacílená vůči epitopu aminokyselinové sekvence, zahrnující aminokyseliny 27 až 427 extracelulární domény lidského IFN-R, znázorněného na obrázku 2.
Zvláště zajímavou protilátkou, vyhovující požadavkům vynálezu, je protilátka, označená jako 64G12 pod číslem 92022605, která byla 26. 2. 1992 uložena v ECACC (Evropském souboru živočišných buněčných kultur v Porton Down Salisbury, Wiltshire SP4 056, UK).
Tyto protilátky mohou být připraveny běžnými metodami, které zahrnují přípravu buněk hybridomu spojením myelomových buněk a slezinných buněk zvířete, které bylo předem imunisováno peptidovým antigenem za podmínky, že antigen, vůči kterému vznikají protilátky, je tvořen extracelulární doménou IFN-R nebo jakýmkoli polypeptidem či peptidem této domény.
Hybridomy jsou sestrojeny podle popisu postupu Kohlera a Milsteina (Nátuře 256, 495-497, 1974). Hybridomy jsou například odvozeny ze splynutí (fúze) slezinných buněk, dříve popsaných u myší typu NS1 (BalbC) HGPRT jako myelomové buňky.
Druhý postup výroby monoklonálních protilátek podle vynálezu spočívá v provedení fúze krevních B-buněk, imortalisovaných virem Epsteina/Barrové, a lidských
B-lymfocytů, předem uvedených do kontaktu s extracelulární doménou nebo její částí na rece_ptoru IFN-R, vůči němuž mají být vytvořeny monoklonální protilátky. B-buňky, předem uvedené do kontaktu s extracelulární doménou nebo její částí na receptoru IFN-R, vůči němuž mají být vytvořeny monoklonální protilátky, mohou být získány z kultury pěstované v podmínkách in vitro, která se dostala do styku s antigenem, přičemž získání B-buněk, pokrytých těmito antigeny, předcházel jeden nebo více cyklů stimulace.
Vynález se tedy týká lidských protilátek, získaných provedením výše popsaného postupu, které mají výše definované vlastnosti.
Vynález rovněž usiluje o poskytnutí monoklonálních protilátek, charakterizovaných tím, že variabilní nebo komplementární determinantní oblasti jejich těžkých nebo lehkých řetězců jsou naroubovány na základní kostru nebo konstantní oblasti lidské protilátky.
Vynález dále poskytuje prostředek, který má antagonistické vlastnosti vůči biologickým účinkům lidského IFN-I, charakterizovaný tím, že obsahuje výše definované monoklonální protilátky.
Vynález současně poskytuje farmaceutický prostředek, charakterizovaný tím, že obsahuje výše definované monoklonální protilátky spolu s vhodným farmaceutickým pojivém (vehikulem).
definované léčbě nebo spojených s
Vynález se také zaměřuje na použití výše monoklonální protilátky pro výrobu léku k profylaxi patologických stavů nebo příznaků, nadprodukcí interferonu typu I, IFN-I.
V souhlasu s prvním příkladem mohou být protilátky použity ve farmaceutickém prostředku k léčbě odvržení cizorodého štěpu.
Podle jiného příkladu jsou protilátky podle vynálezu používány jako aktivní složka ve farmaucetickém prostředku pro léčbu autoimunitních a zánětlivých onemocnění. K takovým onemocněním patří systémový lupus erythematodes, diabetes typu 1, lupenka, revmatoidní arthritida, roztroušená skleróza, Beh^etova choroba, aplastická anemie, syndrom získaného selhání imunity (AIDS) a onemocnění těžkým kombinovaným selháním imunity.
Pomocí protilátek podle vynálezu je možné léčit také akutní virová onemocnění. Jako příklad lze uvést infekce horních cest dýchacích a chronické virové infekce, způsobené například virem spalniček.
Protilátek podle vynálezu je možné využít rovněž k diagnose in vitro za přítomnosti receptoru nebo buněk lidského IFN-I.
Další podrobnosti a údaje budou zřejmé z popisu příkladů a z obrázků.
Příklady provedeni vynálezu
POPIS OBRÁZKŮ
Obrázek 1: vazba monoklonálních protilátek 34F10 a 64G12, značených isotopem 125I, na:
- A) Daudiho buňky
- B) buňky Ly28
Ve stručnosti, 106 buněk bylo inkubováno 2 hodiny při
4°C v přítomnosti různého množství značených protilátek, rozpuštěných v médiu RPMI, které obsahovalo 10% fetální telecí sérum (FCS). Poté byly buňky čtyřnásobně promyty v RPMI s 1% FCS a spočítána navázaná radioaktivita. Nespecifická vazba byla měřena pomocí inkubace se stonásobným přebytkem neoznačených protilátek a odečtena od celkové radioaktivity.
Obrázek 2: Sekvence nukleotidů a odpovídajících aminokyselin extracelulární domény lidského IFN-R
Monoklonální protilátky byly vytvořeny vůči rekombinantním rozpustným formám receptorů lidského interferonu alfa-beta (IFN-R), syntetisovaného buď prokaryontními buňkami (E. coli), nebo savčím buněčným systémem (buňky Cos). Tyto rozpustné formy vycházely ze sekvence DNA, znázorněné na obrázku 2.
Obrázek 3: Sekvence nukleotidů a odpovídajících aminokyselin lidského IFN-R.
PŘÍKLADY
Příklad 1
Synthesa rozpustných receptorů Synthesa v E. coli.
Fragment DNA, obsahující sekvenci, která kóduje extracelulární doménu (aminokyseliny 27 až 427) lidského IFN-R (obrázek 2), do něhož byla zvláštní sekvence, histidylu, zavedena právě před klonován v expresních vektorech kódující pět' zbytků terminační kodón, byl pKK233-2. Tento fragment byl vytvořen pomocí polymerasové
- IM řetězové reakce (Polymerase Chain Reaction, PCR) a vzniklé plasmidy byly sekvenovány, aby se potvrdilo, že do kostry byla vložena jak Shine-Délgarnova sekvence, tak i vhodná sekvence kódující receptor.
Polyhistidylový zbytek (ocas), vložený do rekombinantní bílkoviny, jí poskytuje možnost rychlého čištění pomocí afinitní chromatografie na nosiči chelatovaného niklu (NTA sloupci), jak bylo dříve popsáno (E. Hochuli se spoluautory, Bio/technology 1321-1325, 1988).
Plasmid byl zaveden do E. coli bílkoviny byla indukována přidáním média (pKK233-2, tac promotor).
druhu JMIo5 a syntesa IPTG do kultivačního
Bílkoviny byly extrahovány 2 bakteriálního peletu (sraženiny) a rozpustný receptor byl vyčištěn do homogenity pomocí afinitní chromatografie, která bude popsána dále. Tímto postupem byla získána bílkovina, pohybyjící se ve dvou pruzích, odpovídajících přibližně 50 kDaltonům (kDa) za redukčních podmínek a ve třech pruzích za neredukujících podmínek. Maximální koncentrace bílkoviny, získané různými postupy, činila přibližně 20 μg/ml.
N-koncová sekvence dvou bílkovin, detegovaných gelovou elektroforesou, ukázala, že obě bílkoviny jsou očekávaným fragmentem receptoru.
Synthesa a vyčištění neglykosylovaného rozpustného receptoru:
bakteriální kultura (250 ml) indukce IPTG (3hod) (isopropylthiogalaktosid) buněčný pelet (sraženina)
6M hydrochlorid guanidinu pH 8 odstředění sloupec NTA: promytí pH 8 - 8M močovinou pH 6,3 8M močovinou pH 5,9 8M močovinou vymytí pH 4, 8M močovinou renaturační naředění, dialysa vůči 0,1 M Trisu, pH 9 dialysa PBS (pufrovaný fysiologický roztok)
Za použití stejné techniky PCR byl rovněž konstruován expresní vektor, kódující aminokyselinovou sekvenci 1 až 427 receptoru IF-R s přídavnými 5-histidylovými zbytky na C-konci, vložený do expresního vektoru pXMT-3. Přesná sekvence nukleotidů vložené části byla opět potvrzena.
Vzniklý plasmid byl elektroporačně vložen do buněk Cos 7 pro krátkodobou expresi a rekombinantní bílkovina byla vyčištěna do homogenity afinitní chromatografii a následně iontově výměnnou chromatografii na nosiči mono-Q (Pharmacia), jak bude uvedeno dále.
Vyčištění rozpustného IFN-R z buněk Cos7 preparativni elektroporace buněk Cos médium, neobsahující sérum supernatanty, odebrané po 48, 72 a 96 hodinách zahuštění sloupec NTA promývání PBS vymytí 0,1 M NaOAc pH 5,5 neutralisace zahuštění, 30 000 odděleno mono-Q (0-0,5 M NaCl)
Toto vyčištění poskytlo bílkovinu o velikosti 76 kDa, jejíž N-koncová sekvence odpovídá předpokládané sekvenci receptoru s jistou heterogenitou v úpravě úvodní sekvence.
Příklad 2
Výroba monoklonálních protilátek vůči receptoru interferonu typu I
1) Výroba monoklonálních protilátek
Myši byly imunisovány injikací rekombinantního rozpustného interferonového receptoru (r sIFN-R), získaného z E. coli nebo ze supernatantu kultury buněk Cos7. Vyčištěná bílkovina v kompletním Freundově adjuvans byla myším nejprve aplikována intraperitoneálně (do dutiny břišní) i subkutáné (podkožně). Následně byly jednou týdně intraperitoneálně aplikovány vyčištěné bílkoviny, naředěné pufrovaným fysiologickým roztokem. Při každém podání bylo použito 10 μg rekombinantních bílkovin.
Po čtvrté aplikaci byla odebrána krev a pomocí technik ELISA a Western blot byla testována přítomnost specifických sérových protilátek vůči rekombinantnímu receptoru. Nej silněji reagující zvířate byla pak stimulována podáním lC^g antigenu, z nějž polovina byla injikována intravenosně (do žíly) a polovina intraperitoneálně.
2) Fúze buněk
Čtyři dny po stimulaci byly odebrány slezinné buňky imunizovaného zvířete a spojeny s NS1 (myšími) (Balbc) HGPRT myelomovými buňkami podle metody, popsané S. Fazekasem a spoluautory (J. Immunol. Methods 35 , 1-32, 1980). Ve stručnosti, 5xl07 slezinných buněk bylo spojeno s 3x107 myelomových buněk v 1 ml roztoku polyethylenglykolu a přeneseno do pěti mikrotitračních destiček s 96 jamkami na vyživovací vrstvu peritoneálních makrofágů v médiu HAT (obsahuje hypoxanthin, aminoprotein a thymidin). Tento postup byl opakován čtyřikrát, neboř z jedné imunisované myši se získalo 20xl07 slezinných buněk. Testování ke zjištění specifických hybridomů bylo provedeny poté, kdy se v kultivačních jamkách objevily prokazatelné široké kolonie.
Při testování byla přítomnost specifických protilátek stanovována přímou metodou ELISA:
a) Destičky ELISA byly přes noc při teplotě 4’C pokryty sIFN-R (rozpustnými receptory), naředěnými PBS, u nichž došlo k expresi vyčištěnými buňkami E. coli nebo Cos7. Destičky pokryté BSA (hovězí sérový albumin) byly využity 1c detekci nespecifické vazby,
b) Destičky byly saturovány (nasyceny) inkubací s 3% BSA v PBS po dobu 1 hodiny a při 37°C,
c) Destičky byly po 4 hodiny inkubovány při teplotě místnosti se supernatanty hybridomů, naředěnými v poměru 1:4 roztokem PBS a 0,05% Tween 20,
d) Navázané protilátky byly detegovány dvoustupňovým postupem, zahrnujícím nejprve inkubaci s kozím, anti-myším biotinylovaným imunoglobulinem a následně s komplexem streptavidinu a křenové peroxidasy (obojí od firmy Amersham a zředěno 1/1000 v roztoku PBS-0,05% Tween 20).
Positivní hybridomy, vylučující protilátky, byly pasážovány (přeneseny) na destičky s 24 jamkami na vyživovací vrstvu slezinných buněk a jejich radioaktivita byla opět zjištěna pomocí metod ELISA a Western-blot.
3) Identifikace reaktivity k receptoru přirozeného interferonu typu 1
Reaktivita monoklonálních protilátek (mAb), rozeznávajících rekombinantní sIFN-R, byla testována vůči přirozenému receptoru třídy 1, umístěnému na povrchu Daudiho buněk, pomocí membránové imunofluorescence. Ve stručnosti, 5 χ 105 Daudiho buněk bylo inkubováno ve 100 μΐ supernatantu z kultury zvolených hybridomů po dobu 30 minut a při 4°C. Pak byly buňky čtyřnásobně promyty v médiu RPMI, obsahujícím 1% BSA a dále po 30 minut inkubovány při 4’C se zředěnými kozími anti-myšími protilátkami F(ab')2, značenými FITC (isothiokyanátem fluoresceinu). Buňky byly po promytí nakonec analysovány průtokovou cytometrií. U jedné z 35 testovaných protilátek, vytvářených vůči rekombinantnímu receptoru E. coli a 5 ze 6 testovaných protilátek, vytvářených vůči COS rekombinantnímu receptoru, byla nalezena schopnost rozpoznat přirozený receptor na Daudiho buňkách.
Klonování těchto hybridomů bylo provedeno pomocí limitujícího ředění. Jednotlivé isotypy protilátek mAB byly stanoveny metodou ELISA za použití isotypově specifických protilátek. U všech šesti protilátek mAb byl prokázán typ IgGl s lehkými řetězci kapa (X). Souhrn reaktivity těchto šesti mAb je uveden v Tabulce 1.
Monoklonální protilátky byly vyčištěny z kultivačního supernatantu chromatografií bílkoviny G.
Tabulka 1:
Reaktivita monoklonálních protilátek anti IFN-R
| reaktivita vůči rekombinantnímu receptoru | reaktivita vůči * buněčnému receptoru | ||
| E.coli | COS | ||
| ELISA Western ELISA | Western | imunofluorescence | |
| 34F10 | + + + | + | + |
| 64G12 | + + + | + | + |
| 63F6 | |||
| 64G2 | - + | + | + |
| 64D10 | slabě | ||
| 65D8 |
měřeno na Daudiho buňkách
Příklad 3
Inhibice vazby interferonu na lidské buněčné linie
Inhibice vazby interferonu na lidské buňky byla stanovena následovně. 10 buněk bylo preinkubováno 30 minut při 4’C s různě naředěnými kultivačními supernatanty hybridomů nebo s čištěnými mAb nebo se samotným médiem. IFN-a8 nebo IFN-a2 byl přidán v koncentraci 100 pM a buňky byly inkubovány další 2 hodiny při 4°C. Inkubace probíhaly v médiu RPMI, obsahujícím 20 mM HEPES o pH 7,4 a 10% fetální telecí sérum (FCS). Buňky byuly nakonec čtyřnásobně promyty v roztoku RPMI - 1% FCS a spočítány ke stanovení navázané radioaktivity.
Protilátka mAb, vylučovaná linií hybridomů 64G12 (později nazvaná mAb 64G12), prokázala při tomto stanovení schopnost inhibovat vazbu značeného IFN na buňky v závislosti na dávce. 50% inhibice vazby na Daudiho buňky (buněčná linie Burkittova lymfomu, Klein se spoluautory, Cancer Research 28., 1300-1310, 1968) bylo dosaženo při koncentraci mAB 0,4 ng/ml. Stejné inhibice bylo dosaženo u buněk K562 (buňky chronické myelogenni leukemie, Lozzio a Lozzio, Cell 45, 321-334, 1975), ale 50% inhibice byla získána i při koncentraci 11 ng/ml u buněk HL60 (buňky promyelocytové leukemie, S.J. Collins se spoluautory, Nátuře 279, 347-349, 1977) a 60 ng/ml U buněk Ly28 (G. Klein se spoluautory, Int. J. Cancer 10, 44-57, 1972).
Tabulka 2:
Inhibice vazby značeného IFN-a2 na různé buněčné typy účinkem mAb 64G12
| buněčné linie | koncentrace mAb, poskytující 50% inhibici sledované vazby |
| Daudi | 0,04 μg/ml |
| K562 | |
| HL60 | 11,0 μg/ml |
| Ly28 | 60,0 μg/ml |
Rozdíl v koncentraci mAb, při níž je dosaženo 50% inhibice vazby IFN, byl zjištován na základě přímé vazby protilátek mAb 64G12 a 34F10, značených isotopem 125I, na stejné buněčné linie a výsledky byly vyhodnoceny metodou podle Scatcharda. V rozmezí koncentrací od 0,1 do 1,5 μg/ml byla pozorována vysoce afinitní vazba mAb 34F10 (=il0nM) na všechny buněčné linie, zatímco vysoce afinitní vazba mAb 64G12 byla zjištěna pouze vzhledem k Daudiho buňkám a K562 buňkám (Obrázek 1).
Příklad 4
Inhibice funkce interferonu typu 1
Funkční inhibice interferonu typu 1 vyčištěnými protilátkami mAb 64G12 byla prokázána na Daudiho buňkách v protivirovém stanovení, ke kterému byly použity buď rekombinantní IFN-a2, IFN-β a IFN omega, nebo vyčištěné interferony z buněk Namalwa či leukocytů, a v antiproliferativním stanovení s rekombinantním IFN-a2.
* Protivirová aktivita
Protivirové stanovení za využití Daudiho buněk bylo provedeno podle popisu (M. Dron a M.G. Tovey7 J. Gen. Virol. 64, 2641-2647, 1983). Buňky (0,5xl0€/ml) byly 24 hodin inkubovány v přítomnosti interferonu a protilátek. Pak bylo 10€ buněk v 1 ml infikováno při 37°C a po dobu 1 hodiny virem vesikulární stomatitidy (VSV), poté trojnásobně promyto, resuspendováno v kultivačním médiu a po 18 hodin inkubováno při 37°C. Pak byly buňky lysovány opakovaným zmražením a rozmražením a replikace viru byla měřena titrací supernatantů k buňkám L929. Dávkově závislá inhibice protivirové aktivity různých podtypů IFN typu I byla prokázána u vyčištěných protilátek mAb 64G12.
Při protivirovém stanovení, prováděném s Wishovými buňkami, byly tyto buňky ještě před infikací virem VSV inkubovány po dobu 24 hodin spolu s různými koncentracemi interferonů a za přítomnosti protilátek mAb. V tomto stanovení bylo prokázáno, že mAb 64G12 úplně blokuje protivirovou aktivitu leukocytárního IFN (50 U/ml), rekombinantního IFN-a2 (50 U/ml) a interferonu ze séra pacientů, trpících AIDS (50, 75 a 150 U/ml).
* Antiproliferativní aktivita
K provedení antiproliferativního stanovení byly Daudiho buňky umístěny v koncentraci 105 buněk na 1 ml do 96 jamkové mikrotitrační destičky za přítomnosti interferonu a vyčištěných inhibujících nebo kontrolních protilátek. Buňky pak byly spočítány po 24, 48 a 72 hodinách na přístroji Coulter Counter a jejich životnost byla ověřena za použití trypanové modře. Vyčištěné protilátky mAb 64G12 vykázaly dávkově závislou inhibici .antiproliferativní aktivity interferonu a2.
Claims (22)
1. Monoklonální protilátka proti receptoru lidského interferonu třídy I (IFN-R), vyznačující se tím, že má následující vlastnosti:
rozpoznává extracelulární doménu lidského IFN-R, a má schopnost neutralizovat biologické vlastnosti lidského interferonu typu I.
2. Monoklonální protilátka proti receptoru lidského IFN-R typu I podle nároku 1, vyznačující se tím, že je schopna inhibovat vazbu lidského patologického interferonu typu I na IFN-R.
3. Monoklonální protilátka podle nároku 1 nebo 2, v yznačující se tím, že ji lze získat z buněk hybridomu, připravených spojením myelomových buněk se slezinými buňkami zvířete, které bylo předem imunisován© rozpustnou formou lidského IFN-R.
4. Monoklonální protilátka podle kteréhokoliv z nároků 1, 2 nebo 3, vyznačující se tím, že rozpoznává místo (epitop) na rozpustné formě lidského buněčného IFN-R nebo na rekombinantním IFN-R.
5. Monoklonální protilátka podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4,vyznačující se tím, že v podmínkách in vitro inhibuje vazbu lidského IFN typu I na lidský buněčný IFN-R při společné inkubaci s buňkami, nesoucími lidský IFN-R, v koncentraci protilátek rovné 100 μg/ml nebo nižší, lépe rovné 50 μg/ml nebo nižší, s výhodou nižší než 20 μg/ml a nejlépe v rozmezí přibližně od 0,5 do 2 μg/ml.
6. Monoklonální protilátka podle kteréhokoliv z nároků
1 až 5,vyznačující se tím, že v podmínkách in vitro neutralisuje antiproliferativní aktivitu lidského interferonu typu I, ovlivňující buňky vysoce citlivé vůči tomuto lidskému IFN typu I, například Daudiho buňky, v rozmezí koncentrace od 1 do 10 μ9/πι1.
7. Monoklonální protilátka podle kteréhokoliv z nároků 1 až 6,vyznačující se tím, že v podmínkách in vitro neutralisuje antiproliferativní aktivitu lidského interferonu typu I, ovlivňující buňky slabě citlivé vůči tomuto lidskému IFN typu I, například buňky Ly28, v rozmezí koncentrace od 50 do 100 μg/ml.
8. Monoklonální protilátka podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7,vyznačující se tím, že se neváže na lidský receptor interferonu gama.
9. Monoklonální protilátka podle kteréhokoliv z nároků 1 až 8,vyznačující se tím, že rozpoznává místo (epitop) v sekvenci aminokyselin 27 až 427 lidského IFN-R.
10. Monoklonální protilátka podle kteréhokoliv z nároků 1 až 9,vyznačující se tím, že v podmínkách in vitro neutralisuje protivirovou aktivitu lidského interferonu typu I, ovlivňující buňky vysoce citlivé vůči tomuto lidskému IFN typu I, například Daudiho buňky, v rozmezí koncentrace od 1 do 10 μg/ml.
11. Monoklonální protilátka podle kteréhokoliv z nároků 1 až 10,vyznačující se tím, že v podmínkách in vitro neutralisuje protivirovou aktivitu lidského interferonu typu I, ovlivňující buňky slabě citlivé vůči tomuto lidskému IFN typu I, například buňky Ly28, v rozmezí koncentrace od 50 do 100 μg/ml.
12. Monoklonální protilátka podle kteréhokoliv z nároků 1 až 11, vyznačující se tím, že jde o protilátku 64G12 uloženou 26. února 1992 v ECACC pod číslem 92022605.
13. Monoklonální protilátka podle kteréhokoliv z nároků 1 až 11, vyznačující se tím, že jde o vyšlechtěnou protilátku, charakterizovanou například tím, že variabilní nebo komplementární determinantní oblasti jejích těžkých nebo lehkých řetězců jsou naroubovány na základní kostru a konstantní oblasti lidské protilátky.
14. Monoklonální protilátka podle kteréhokoliv z nároků 1 až 11, vyznačující se tím, že jde o lidskou protilátku.
15. Monoklonální protilátka podle kteréhokoliv z nároků 1 až 11, vyznačující se tím, že jde o protilátku typu IgGl.
16. Buňka hybridomu, vyznačující se tím, že vytváří monoklonální protilátky podle nároků 1 až 13 .
17. Farmaceutický prostředek, vyznačuj ící se t í m , že má antagonistické vlastnosti vzhledem k IFN typu I a obsahuje monoklonální protilátky podle kteréhokoli z nároků l až 16.
18. Farmaceutický prostředek, vyznačuj ící se tím, že obsahuje monoklonální protilátky podle kteréhokoli z nároků 1 až 17 spolu s vhodným farmaceutickým pojivém (vehikulem).
19. Použití monoklonální protilátky podle'kteréhokoliv z nároků 1 až 17 pro výrobu léčiva, vyznačuj ícíh o se t í m, že je určeno k léčbě nebo profylaxi patolo26 gického stavu, spojeného s proliferativní buněčnou aktivitou a/nebo virovou buněčnou infekcí.
20. Způsob výběru monoklonální protilátky se schopností rozpoznat extracelulární doménu lidského IFN-R a schopné inhibovat vazbu lidského IFN typu I na IFN-R, vyznačující se tím, že je charakterizován následujícími kroky:
preinkubací stanovené koncentrace vyčištěných monoklonálních protilátek podle kteréhokoliv z nároků 1 až 15 nebo kultivačního supernatantu hybridomů, obsahujícího monoklonální protilátky, s lidskými buňkami, nesoucími IFN-R;
- přidáním značeného lidského IFN typu I ve stanovené koncentraci k předem inkubovanému médiu;
inkubací média, obsahujícího lidské buňky, monoklonální protilátky a značený IFN typu I, s buněčným IFN-R po dostatečnou dobu, umožňující vznik rovnováhy mezi monoklonálními protilátkami na jedné straně a IFN typu I na straně druhé;
- promytím buněk;
-stanovením tvorby vazebného komplexu mezi lidskými buňkami a IFN typu I vyčíslením množství navázaného značeného IFN typu I.
21. Způsob výběru monoklonální protilátky se schopností rozpoznat extracelulární doménu lidského IFN-R a schopné neutralisovat antiproliferativní aktivitu IFN typu I vůči lidským buňkám, vyznačující se tím, že je charakterizován následujícími kroky:
umožněním nárůstu buněk v přítomnosti lidského IFN typu I a stanovené koncentrace monoklonálních protilátek podle kteréhokoliv z nároků 1 až 15;
spočtením buněk k prokázání antiproliferativního účinku IFN typu I.
inhibice
22. Způsob výběru monoklonální protilátky se schopností rozpoznat extracelulární doménu lidského IFN-R a schopné neutralisovat protivirové působení přirozeného, patologického nebo nepatologického IFN typu I vůči lidským buňkám, vyznačující se tím, že je charakterizován následujícími kroky:
inkubací buněk s IFN typu I a monoklonálními protilátkami podle kteréhokoli z nároků 1 až 15 ve stanovené koncentraci po dostatečnou dobu, umožňující vytvoření komplexu mezi monoklonálními protilátkami a IFN-R lidských buněk a/nebo mezi IFN typu I a IFN-R lidských buněk;
- infikaci inkubovaných, výše uvedených buněk stanovenou koncentrací viru;
- promytím buněk;
- resuspendováním buněk v kultivačním médiu;
inkubací po dostatečnou dobu k umožnění replikace viru;
- lysováním buněk;
měřením virové replikace či měřením inhibice cytopatického účinku.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP92400902A EP0563487A1 (en) | 1992-03-31 | 1992-03-31 | Monoclonal antibodies against the interferon receptor, with neutralizing activity against type I interferon |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ236994A3 true CZ236994A3 (en) | 1995-02-15 |
Family
ID=8211644
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ942369A CZ236994A3 (en) | 1992-03-31 | 1993-03-30 | Monoclonal antibody against receptor for human interferon, hybridoma cell, pharmaceutical preparation, the use of the monoclonal antibody for the preparation of the pharmaceutical and process for preparing such antibody |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (5) | US5919453A (cs) |
| EP (3) | EP0563487A1 (cs) |
| JP (2) | JP3836500B2 (cs) |
| AT (2) | ATE368055T1 (cs) |
| AU (2) | AU679909B2 (cs) |
| BG (1) | BG99141A (cs) |
| CA (1) | CA2133106C (cs) |
| CZ (1) | CZ236994A3 (cs) |
| DE (2) | DE69332997T2 (cs) |
| DK (2) | DK1329459T3 (cs) |
| ES (2) | ES2199941T3 (cs) |
| FI (1) | FI944509A (cs) |
| HU (1) | HUT69995A (cs) |
| NO (1) | NO943625L (cs) |
| NZ (1) | NZ251343A (cs) |
| PT (2) | PT633931E (cs) |
| RU (1) | RU94045826A (cs) |
| WO (1) | WO1993020187A1 (cs) |
Families Citing this family (32)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0563487A1 (en) * | 1992-03-31 | 1993-10-06 | Laboratoire Europeen De Biotechnologie S.A. | Monoclonal antibodies against the interferon receptor, with neutralizing activity against type I interferon |
| CA2171955A1 (en) * | 1993-09-17 | 1995-03-23 | Michael G. Tovey | Pharmaceutical composition comprising monoclonal antibodies against the interferon receptor, with neutralizing activity against type i interferon |
| IL118096A0 (en) * | 1996-05-01 | 1996-09-12 | Yeda Res & Dev | Antibodies against interferon alpha/beta receptor |
| US6713609B1 (en) | 1996-07-16 | 2004-03-30 | Genentech, Inc. | Monoclonal antibodies to type I interferon receptor |
| CN1068524C (zh) * | 1997-06-23 | 2001-07-18 | 叶庆炜 | 一种治疗顽症牛皮癣的药物 |
| US6376067B1 (en) * | 1998-12-21 | 2002-04-23 | Mitsubishi Polyester Film, Llc | Silicone coated film with back side slip control coating and method of controlling slip of such film |
| GB0001712D0 (en) * | 2000-01-25 | 2000-03-15 | Pharma Pacific Pty Ltd | Therapeutic peptides |
| CN101612402A (zh) * | 2001-01-09 | 2009-12-30 | 贝勒研究院 | 干扰素拮抗剂和Flt3L拮抗剂的用途 |
| AU2007202840B2 (en) * | 2001-01-09 | 2011-07-28 | Baylor Research Institute | Methods for treating autoimmune diseases in a subject and in vitro diagnostic assays |
| US7087726B2 (en) | 2001-02-22 | 2006-08-08 | Genentech, Inc. | Anti-interferon-α antibodies |
| PL1631312T3 (pl) * | 2003-04-23 | 2009-02-27 | Squibb & Sons Llc | Kompozycje i sposoby terapii choroby zapalenia jelit |
| KR100872210B1 (ko) * | 2003-04-23 | 2008-12-05 | 메다렉스, 인코포레이티드 | 인터페론 알파 수용체-1 (ｉｆｎａｒ-1)에 대한 인체화항체 |
| AU2007203559B2 (en) * | 2003-04-23 | 2010-09-02 | E. R. Squibb & Sons, L.L.C. | Compositions and methods for the therapy of inflammatory bowel disease |
| WO2005059106A2 (en) | 2003-12-10 | 2005-06-30 | Medarex, Inc. | Interferon alpha antibodies and their uses |
| EP1789453A2 (en) * | 2004-05-18 | 2007-05-30 | Genentech, Inc. | M13 virus major coat protein variants for c-terminal and bi-terminal display of a heterologous protein |
| PL2662390T3 (pl) | 2004-06-21 | 2017-12-29 | E. R. Squibb & Sons, L.L.C. | Antyciała receptora interferonu alfa I oraz ich zastosowania |
| CN101056654A (zh) * | 2004-10-07 | 2007-10-17 | 苏黎士大学 | 用于预防和治疗银屑病的i型干扰素阻断剂 |
| AU2006213800B2 (en) | 2005-02-10 | 2012-02-09 | Baylor Research Institute | Anti-interferon alpha monoclonal antibodies and methods for use |
| US7888481B2 (en) * | 2005-02-10 | 2011-02-15 | Baylor Research Institute | Anti-interferon alpha monoclonal antibodies and methods for use |
| US20070081995A1 (en) * | 2005-06-22 | 2007-04-12 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for targeting IFNAR2 |
| EP2687232A1 (en) | 2006-12-06 | 2014-01-22 | MedImmune, LLC | Methods of treating systemic lupus erythematosus |
| US8685400B2 (en) * | 2007-07-30 | 2014-04-01 | University Of Miami | Modulating inflammasome activity and inflammation in the central nervous system |
| CA2713981C (en) | 2008-02-08 | 2016-11-01 | Medimmune, Llc | Anti-ifnar1 antibodies with reduced fc ligand affinity |
| EP2279207B1 (en) | 2008-05-07 | 2015-09-09 | Argos Therapeutics, Inc. | Humanized antibodies against human interferon-alpha |
| SG183541A1 (en) * | 2010-03-01 | 2012-10-30 | Alexion Pharma Inc | Methods and compositions for treating degos' disease |
| WO2013134146A1 (en) * | 2012-03-07 | 2013-09-12 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for treating viral infections by blocking type i interferon activity |
| AU2017290389B2 (en) | 2016-07-01 | 2024-09-26 | Resolve Therapeutics, Llc | Optimized binuclease fusions and methods |
| US11136399B2 (en) | 2016-07-14 | 2021-10-05 | Institute Of Biophysics, Chinese Academy Of Sciences | Type I interferon receptor antibody and use thereof |
| AU2018321359B2 (en) | 2017-08-22 | 2023-11-30 | Sanabio, Llc | Soluble interferon receptors and uses thereof |
| CN116333132A (zh) * | 2019-01-31 | 2023-06-27 | 广东旋玉健康生物科技有限公司 | 新型抗ifnar1抗体 |
| EP4393937A1 (en) | 2021-08-26 | 2024-07-03 | Duality Biologics (Suzhou) Co., Ltd. | Steroid compound and conjugate thereof |
| CN115028730B (zh) * | 2022-05-17 | 2022-11-08 | 诺赛联合(北京)生物医学科技有限公司 | 一种成体干细胞衍生的类器官制备方法 |
Family Cites Families (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2953132A (en) | 1955-10-27 | 1960-09-20 | Baxter Laboratories Inc | Parenteral solution equipment |
| US3066671A (en) | 1959-10-27 | 1962-12-04 | Milton J Cohen | Disposable additive container |
| US3608550A (en) | 1969-05-07 | 1971-09-28 | Becton Dickinson Co | Transfer needle assembly |
| BE791340A (fr) | 1972-01-06 | 1973-03-01 | Becton Dickinson Co | Nouveaux procede et appareil de prelevement de culture et d'identification de micro-organismes des humeurs |
| US4024857A (en) | 1974-12-23 | 1977-05-24 | Becton, Dickinson And Company | Micro blood collection device |
| US4300404A (en) | 1977-12-01 | 1981-11-17 | Becton, Dickinson And Company | Liquid specimen container |
| US4116066A (en) | 1977-12-12 | 1978-09-26 | Becton, Dickinson And Company | Specimen sampler cup |
| US5516515A (en) * | 1986-02-05 | 1996-05-14 | Interferon Sciences, Inc. | Separation of alpha interferon receptor proteins and antibodies therefor |
| IL88377A (en) * | 1988-11-14 | 1996-09-12 | Yeda Res & Dev | Cloning and expression of a protein which modulates cellular response to type I interferon |
| US5889151A (en) * | 1989-10-20 | 1999-03-30 | Societe Leb-Tech | Purified human alpha interferon receptor |
| FR2653445B1 (fr) * | 1989-10-20 | 1994-07-29 | Centre Nat Rech Scient | Fragment d'adnc codant pour le gene du recepteur de l'interferon alpha et procede de preparation d'une proteine correspondante. |
| GB8928874D0 (en) * | 1989-12-21 | 1990-02-28 | Celltech Ltd | Humanised antibodies |
| FR2657881A1 (fr) * | 1990-02-05 | 1991-08-09 | Europ Biotechnologie Lab | Nouveaux polypeptides hydrosolubles, sequences d'adn, nouvelles cellules, procede de preparation, applications et compositions renfermant lesdits polypeptides. |
| IL99232A0 (en) * | 1990-08-20 | 1992-07-15 | Univ Columbia | Methods for producing rna viruses from cdna |
| WO1992018626A1 (fr) * | 1991-04-17 | 1992-10-29 | Laboratoire Europeen De Biotechnologie | POLYPEPTIDES HYDROSOLUBLES AYANT UNE HAUTE AFFINITE POUR LES INTERFERONS α ET $g(b) |
| EP0563487A1 (en) * | 1992-03-31 | 1993-10-06 | Laboratoire Europeen De Biotechnologie S.A. | Monoclonal antibodies against the interferon receptor, with neutralizing activity against type I interferon |
| CA2142007C (en) * | 1992-08-11 | 2007-10-30 | Robert Glen Urban | Immunomodulatory peptides |
| ATE173630T1 (de) * | 1992-12-29 | 1998-12-15 | Genentech Inc | Behandlung von entzündlichen darmerkrankungen mit interferon-gamma-inhibitoren |
| ES2186714T3 (es) * | 1994-03-07 | 2003-05-16 | Imperial College | Uso de sustipo simple alpha 8 en la preparacion de medicamentos para el tratamiento de infecciones virales del higado. |
| IL118096A0 (en) * | 1996-05-01 | 1996-09-12 | Yeda Res & Dev | Antibodies against interferon alpha/beta receptor |
-
1992
- 1992-03-31 EP EP92400902A patent/EP0563487A1/en not_active Withdrawn
-
1993
- 1993-03-30 ES ES93907858T patent/ES2199941T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-03-30 CA CA002133106A patent/CA2133106C/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-03-30 AT AT02028948T patent/ATE368055T1/de active
- 1993-03-30 DE DE69332997T patent/DE69332997T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-03-30 HU HU9402823A patent/HUT69995A/hu unknown
- 1993-03-30 PT PT93907858T patent/PT633931E/pt unknown
- 1993-03-30 ES ES02028948T patent/ES2290241T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-03-30 US US08/307,588 patent/US5919453A/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-03-30 DE DE69334158T patent/DE69334158T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-03-30 EP EP02028948A patent/EP1329459B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-03-30 AU AU38907/93A patent/AU679909B2/en not_active Revoked
- 1993-03-30 EP EP93907858A patent/EP0633931B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-03-30 DK DK02028948T patent/DK1329459T3/da active
- 1993-03-30 AT AT93907858T patent/ATE241008T1/de active
- 1993-03-30 CZ CZ942369A patent/CZ236994A3/cs unknown
- 1993-03-30 RU RU94045826/13A patent/RU94045826A/ru unknown
- 1993-03-30 DK DK93907858T patent/DK0633931T3/da active
- 1993-03-30 JP JP51708393A patent/JP3836500B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1993-03-30 PT PT02028948T patent/PT1329459E/pt unknown
- 1993-03-30 WO PCT/EP1993/000770 patent/WO1993020187A1/en active IP Right Grant
- 1993-03-30 NZ NZ251343A patent/NZ251343A/en not_active IP Right Cessation
-
1994
- 1994-09-29 FI FI944509A patent/FI944509A/fi not_active Application Discontinuation
- 1994-09-29 NO NO943625A patent/NO943625L/no unknown
- 1994-10-28 BG BG99141A patent/BG99141A/bg unknown
-
1997
- 1997-05-19 AU AU23496/97A patent/AU706473B2/en not_active Expired
-
1999
- 1999-02-02 US US09/240,675 patent/US6787634B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2004
- 2004-04-14 US US10/824,981 patent/US7179465B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2005
- 2005-10-26 JP JP2005311761A patent/JP2006089494A/ja active Pending
-
2006
- 2006-12-27 US US11/616,564 patent/US7465451B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2008
- 2008-05-09 US US12/118,010 patent/US20080226647A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ236994A3 (en) | Monoclonal antibody against receptor for human interferon, hybridoma cell, pharmaceutical preparation, the use of the monoclonal antibody for the preparation of the pharmaceutical and process for preparing such antibody | |
| JP4308322B2 (ja) | インターフェロンアルファ／ベータ受容体に対する抗体 | |
| WO1994009137A1 (en) | Antibodies against type 2 tumor necrosis factor receptor | |
| JP6742237B2 (ja) | ヒト抗ｉｆｎ−アルファ抗体 | |
| JP3104187B2 (ja) | インターフエロン―ガンマ結合蛋白 | |
| JPH11501283A (ja) | Ｉ型インターフェロンに対する中和活性を有する、インターフェロンレセプターに対するモノクローナル抗体を含んでなる医薬組成物 | |
| FI118084B (fi) | Interferoni-alfa/beta-sitojaproteiini, sen valmistus ja käyttö |