CZ23098A3

CZ23098A3 - (R)-5-brom-N-(1-ethyl-4-methylhexahydro-1H-1,4-diazepin-6-yl)-2-methoxy-6-methylamino-3-pyridinkarboxyamid, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek jej obsahující

Info

Publication number: CZ23098A3
Application number: CZ98230A
Authority: CZ
Inventors: Shiro Kato; Yoshimi Hirokawa; Toshiya Morie; Hiroshi Harada; Naoyuki Yoshida
Original assignee: Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority date: 1995-07-28
Filing date: 1996-07-23
Publication date: 1998-06-17
Also published as: BR9609691A; MX9800620A; AU700635B2; DE69612753T2; IL122753A; HK1018049A1; CA2228056A1; RU2156248C2; IL122753A0; SK282044B6; EP0855397A1; WO1997005129A1; CN1096459C; PL184073B1; GR3036089T3; TR199800165T1; ATE201021T1; NO980333L; NO980333D0; AU6471796A

Description

Japonská zveřejněná patentová přihláška (KOKAI), KOKAI č. 92959/1993 široce popisuje třídu sloučenin reprezentovaných obecným vzorcem A

[kde R-j· a R₂ jsou stejné nebo různé a každé označuje atom vodíku nižší alkylovou nebo substituovanou nižší alkylovou skupinu atd.,

R₃ může být stejné nebo různé a každé označuje atom vodíku nebo nižší alkylovou skupinu atd,

Rg může být stejné nebo různé a každé obsahuje atom vodíku, atom halogenu, nižší alkoxylovou skupinu,

• · · ·

aminoskupínu, mono- nebo di-substituovanou aminoskupinu atd.,

Het znamená monocyklickou heteroarylovou nebo dicyklickou heteroarylovou skupinu jinou než je ΙΗ-indazolylová skupina, q znamená 0, 1 nebo 2, s znamená 1, 2 nebo 3,

B znamená -CXNRg(CH2)_r- atd., kde Rg znamená atom vodíku nebo nižší alkylovou skupinu atd.,

X znamená atom kyslíku nebo atom síry a r znamená 0,

1, 2 nebo 3, m znamená 1, 2, 3 nebo 4, a n znamená 1, 2 nebo 3] , a také popisuje, že Het může znamenat pyridyl.

Jediná specifická sloučenina ve které Het je 3-pyridylová skupina a která je popsána v popisu je sloučenina z příkladu 37 je reprezentována vzorcem uvedeným dále

CH₃

N.

CONH

Tato sloučenina příkladu 37 se liší ve struktuře od sloučeniny podle předkládaného vynálezu která je vyjádřena dále uvedeným vzorcem I. V dříve jmenované sloučenině je 3-pyridylová skupina nesubstituovaná a 4-poloha hexahydro-lH-1,4-diazepinu je substituovaná methylovou skupinou.

Uvedená listina KOKAI dále uvádí, že sloučeniny • · · · · · • · · · · · · » « ····· _ τ _ · ·*·· · · ··· ··

Ί ······· · ·· «··· ·· «« ·· #· ·· obecného vzorce A jsou antagonisty receptoru serotoninu S₃(5-HT₃) a jsou užitečné pro léčbu a profylaxi anorexie, nauzey, zvracení, přesycení a pod., doprovázející akutní a chronickou gastritidu a takové nemoci, jako jsou gastrický a duodenální vřed nebo nauzea nebo zvracení vyskytující se při podávání protirakovinových činidel, radiaktivního ozařování a kinetóza. Listina nicméně neuvádí o jejich antagonistické účinnosti na receptor dopaminu D₂.

Dále, WO93/08186 popisuje skupinu sloučenin reprezentovaných obecným vzorcem B uvedeným dále

(B) [kde R-l znamená alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, cykloalkoxy se 3 až 8 atomy uhlíku nebo cykloalkylalkoxyskupinu se 3 až 8 atomy uhlíku v cykloalkylu a 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylu; R₂znamená vodík, halogen, alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo aminoskupinu, která může být substituována 1 nebo 2 alkylovými skupinami s 1 až 6 atomy uhlíku; R₃ znamená vodík, halogen nebo alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku; L znamená 0 nebo NH; a Z znamená diazacyklický nebo azadicyklický postranní řetězec], přičemž uvedené sloučeniny jsou užitečné pro terapeutické nebo profylaktické léčení bolesti, emézy, poruch centrálního nervového systému a gastrointestinálních poruch, jako antagonisty 5-HT₃.

Uvedená WO93/08186 uvádí jako jeden z adekvátních příkladů di-azacyklického postranního řetězce Z, EP-A-358903 patřící do patentové rodiny shora uvedené patentové přihlášky

4 • 4 · *

- 4 KOKAI č. 92959/93, ale neobsahuje žádné specifické údaje o sloučenině mající di-azacyklický postranní řetězec, který je zahrnut obecným vzorcem A shora. Tak WO93/08186 v žádném případě nenavrhuje sloučeninu podle předkládaného vynálezu.

Na druhé straně, domperidon [chemický název: 5-chlor1-[1-[3-(2,3-dihydro-2-oxo-lH-benzimidazol-l-yl)propyl]-4piperidinyl]-1,3-dihydro-2H-benzimidazol-2-on, viz například Měrek Index, 11. vydání 3412 (1989], který je antagonistickým činidlem vůči receptoru dopaminu D je účinný ke zmírnění zvracení doprovázející různé problémy zažívacího systému a které doprovázejí syndrom nachlazení kojenců, ale vykazuje pouze nedostatečný účinek na emézy vyskytující se po podání protirakovinových činidel, jako je cisplatina.

Nedávno, jako léčivo, které může selektivně a silně inhibovat zvracení ke kterému dochází při podání protirakovinových činidel, bylo vyvinuto činidlo, které působí jako antagonist receptoru serotoninu a současně taková antiemetická činidla, jako je hydrochlorid granisetronu [chemický název: hydrochlorid endo-l-methyl-N(9-methyl-9-azabicyklo[3.3.1]non-3-yl)-lH-indazol-3karboxamidu; viz například Měrek Index, 12 vydání, 4443 (1989)], hydrochlorid ondansetronu [chemický název: hydrochlorid 1,2,3,9-tetrahydro-9-methyl-3-[(2-methyl-1Himidazol-l-yl)methyl]-4H-karbazol-4-onu; viz například Měrek Index, 11. vydání, 6802 (1989)] a hydrochlorid azasetronu [chemický název: hydrochlorid (±)-N-l-azabicyklo[2.2.2]okt-3yl-6-chlor-3,4-dihydro-4-methyl-3-oxo-2H-l,4-benzoxazin-8karboxamidu; viz například Drugs of the Future, 18(3), 206-211 (1983)] a která jsou klinicky používaná. Nicméně klinické použití těchto antagonistů receptoru serotoninu S₃ je omezené při zvracení ke kterému dochází při podávání protirakovinových činidel. Uvádí se o nich, že vykazují nedostatečný účinek na opožděné zvracení.

Zatímco léčiva, která jsou účinná na specifické typy zvracení existují, antiemetické činidlo s širokým rozsahem použití, které by silně inhibovalo zvracení zavedené různými ·* ···· • · c · · ·

- 5 příčinami nebylo dosud vyvinuto. Proto je vývoj antiemetického činidla s širokým spektrem účinku žádoucí.

Podstata vynálezu

Při výzkumu silných a selektivních antagonistú receptoru serotoninu S₃ bylo zjištěno, že látka, která vykazuje antagonistickou účinnost vůči receptoru dopaminu D₂ kromě antagonistické účinnosti vůči receptoru serotoninu S₃ by mohla být účinná na zvracení způsobené různými příčinami. Byla připravena řada hexahydro-lH-1,4-diazepinových derivátů se záběrem dodávat antagonistickou účinnost vůči receptoru dopaminu D₂ až antagonistickou účinnost vůči receptoru serotoninu S₃ , kterými jsou hexahydro-lH-1,4-diazepinové deriváty a bylo provedeno jejich zobrazení. Nyní bylo zjištěno, že (R)-5-brom-N-(l-ethyl-4-methylhexahydro-lH-

1,4-diazepin-6-yl)-2-methoxy-6-methylamino-3-pyridinkarboxamid který je vyjádřen vzorcem I uvedeným dále

splňuje tyto požadavky a vykazuje antiemetické účinky v širokém spektru.

Předkládaný vynález se týká (R)-5-brom-N-(l-ethyl-4methylhexahydro-1H-1,4-diazepin-6-yl)-2-methoxy-6-methylamino3-pyridinkarboxamidu vzorce I a jeho fyziologicky přijatelných adičních solí s kyselinou. Vynález se dále týká způsobu přípravy uvedené sloučeniny. Vynález se dále týká • · · · · · • · · · e ·

- 6 meziproduktu pro přípravu uvedené sloučeniny.

Jako fyziologicky přijatelné adiční soli sloučeniny vzorce I s kyselinou se uvádějí například soli s anorganickou kyselinou, jako je hydrochlorid, hydrobromid, hydrojodid, síran a fosforečnan, soli s organickou kyselinou, jako je oxalát, maleát, fumarát, malonát, laktát, malát, citrát, tartarát, benzoát a methansulfonát.

Sloučenina vzorce I a její fyziologicky přijatelné adiční soli s kyselinou mohou být přítomné ve formě hydrátů a/nebo solvátů a tyto hydráty a/nebo solváty jsou rovněž zahrnuty do sloučenin podle předkládaného vynálezu.

Sloučenina podle předkládaného vynálezu se může připravit například reakcí sloučeniny vzorce II dále

nebo jejího reaktivního derivátu se sloučeninou vzorce III dále

Jako reaktivní deriváty sloučeniny vzorce II se uvádějí například nižší alkylestery (zejména methylester), aktivní estery, anhydridy kyseliny, halogenidy kyseliny (zejména chlorid kyseliny) atd. Specifické příklady aktivního

- 7 esteru zahrnují p-nitrofenylester, 2,4,5-trichlorfenylester a N-hydroxysukcinimidester. Jako anhydridy kyseliny se mohou použít jak symetrické anhydridy, tak směsné anhydridy. Specifické příklady směsného anhydridu kyseliny zahrnují anhydridy s alkylchlorformiáty, jako je ethylchlorformiát, isobutylchlorformiát a pod.; anhydridy s aralkylchlorformiáty, jako je benzylchlorformiát; anhydridy s arylchlorformiáty, jako je fenylchlorformiát; anhydridy s alkanovými kyselinami jako je kyselina isovalerová, pivalová apod.

Jestliže se sloučenina vzorce II použije samotná jako výchozí látka, shora uvedená reakce se může provést v přítomnosti kondenzačního činidla, jako je N,N'-dicyklohexylkarbodiimid, l-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimid hydrochlorid, N,N'-karbonyldiimidazol, N,N'-karbonyldisukcinimid, l-ethoxykarbonyl-2-ethoxy-l,2dihydrochinolin, difenylfosforylazid, anhydrid kyseliny propanfosfonové, benzotriazol-l-yloxy-tris(dimethylamino)-. fosfonium.hexafluorfosfát apod.

Reakce sloučeniny vzorce II nebo jejího reaktivního derivátu se sloučeninou vzorce III se provádí v přítomnosti nebo nepřítomnosti rozpouštědla. Příklady vhodných rozpouštědel zahrnují aromatické uhlovodíky, jako je benzen, toluen a xylen; ethery, jako je diethylether, tetrahydrofuran a dioxan; halogenované uhlovodíky, jako je methylenchlorid a chloroform; alkoholy, jako je ethanol a isopropanol; ethylacetát, aceton, acetonitril, dimethylformamid, dimethylsulfoxid, ethylenglykol, voda apod. Tato rozpouštědla mohou být použita jednotlivě nebo v kombinaci. Je-li to nezbytné, reakce se může provést v přítomnosti báze. Příklady vhodné báze zahrnují alkalický hydroxid, jako je hydroxid sodný nebo hydroxid draselný; alkalický uhličitan, jako je uhličitan sodný a uhličitan draselný; alkalický hydrogenuhličitan, jako je hydrogenuhličitan sodný a hydrogenuhličitan draselný; a organické báze, jako je triethylamin, tributylamin, diisopropylethylamin a N-methylmorfolin. Vhodné reakční teploty jsou obvykle v rozsahu -30 °C až 200 °C, výhodně -10 °C až 150 °C.

Sloučenina vzorce III se dodává do reakčního systému obvykle v poměru 1 až 3 moly, výhodně 1 až 1,5 molu na mol sloučeniny vzorce II nebo jejího reaktivního derivátu. Vzhledem k tomu, že je možné ji použít ve větším přebytku, jestliže to je vhodné, může působit také jako báze.

Sloučenina vzorce II, která se použije jako výchozí látka se může připravit například stupni uvedenými ve schématu 1 dále. Specifické podmínky pro každý stupeň jsou uvedeny dále v referenčním příkladu 1.

Schéma 1

li Ί	rr^C00H
F N F Krok !	AX ^{Krok 2}
(IV)	(V)
^<^_X.COOR₁ F^fťT Krok	,x^z''^s_vX^COOR₁ — í x — 3 CH₃NH N F Krok
(VI)	(VII)
ΛΑ ΟΗ₃ΝΗ^>Γ >DCH₃	^Br\_r^₅^COOR
JL JL Krok 5 CHaNH^^N^^OCHa

(Vlil) (IX)

COOH

---->

Krok 6

Ve shora uvedeném vzorci znamená lineární nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.

Sloučenina obecného vzorce III, která se také použije jako výchozí látka je nová sloučenina, která nebyla dosud popsána v dostupné literatuře a může se připravit například přes stupně uvedené ve schématu 2 dále. Specifické podmínky pro každý stupeň jsou uvedeny dále v příkladu 2.

9 99

- 10 Schéma 2 r₂

ENHCH₃

NH

CH ά

Krok 1

ch₂í z Z^H^pCOOR, H

Krok 2

Krok 4 (XV)

(XIII)

Krok 3

nhch₃

COOR.

nhch₃

Z₂NH^j>COOH

Krok '5

Krok 8

Krok 9 ·· ··· · ·· ·· • · · · · · · « a * • a a a · · a · · <11 · · · · « «···♦·· 11 ····*«· · · · ··♦· aa ·· aa ·· aa

Ve shora uvedeném vzorci Et znamená ethylovou skupinu; Z₁ znamená amino-chránící skupinu, jako je terč.butoxykarbonylová skupina, trifenylmethylová skupina a acetylová skupina; Z2 znamená benzyloxykarbonylovou skupinu, která je případně substituovaná atomem chloru, atomem bromu, methoxyskupinou nebo nitroskupinou; R₂ znamená atom vodíku, atom halogenu, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxyskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku; a má význam uvedený shora.

Sloučenina shora uvedeného vzorce III se může získat jako adiční sůl s kyselinou v závislosti na použitém způsobu v jednotlivých případech. Mohou být uvedeny například dříve uvedené fyziologicky přijatelné adiční soli s kyselinou. Zejména se uvádějí anorganické soli s kyselinou, jako je hydrochlorid, hydrobromid, hydrojodid, síran a fosforečnan; a organické soli s kyselinou, jako je oxalát, maleát, fumarát, malonát, laktát, citrát, tartarát, benzoát a methansulfonát.

Podle shora uvedeného způsobu přípravy sloučeniny vzorce I, konfigurace sloučeniny vzorce III jako jedné z výchozích látek je nedotčena v takto připravené sloučenině vzorce I.

Sloučenina vzorce I, jak je připravena podle shora uvedeného postupu se izoluje a čistí obvyklými technikami, jako je chromatografie, rekrystalizace, přesrážení nebo podobně.

Sloučenina vzorce I a sloučenina vzorce III se mohou získat ve formě volné báze nebo adiční soli s kyselinou v závislosti na použité reakci a použitých reakčních podmínkách. Adiční sůl s kyselinou se může převést na volnou bázi obvyklými způsoby, například zpracováním s bází, jako je alkalický uhličitan a alkalický hydroxid. Volná báze se může převést na adiční sůl s kyselinou zpracováním se žádanou kyselinou obvyklými způsoby.

Výsledky farmakologických zkoušek sloučenin podle vynálezu a dále identifikovaných kontrolních sloučenin

4· 4 4·· • 4 ·· · · 4 ··

4» · 4 ·4··* · · · 4 4 · ····· • · · 44·« · 44 uvedených dále ukazují farmakologické vlastnosti sloučeniny podle vynálezu:

(1) domperidon selektivní antagonist receptoru dopaminu D₂, který se klinicky používá jako antiemetické činidlo nebo činidlo zlepšující gastrointestinální pohyblivost;

(2) hydrochlorid ondansetronu selektivní antagonist receptoru serotoninu S₃, který se klinicky používá jako antiemetikum při podání protirakovinového činidla;

(3) hydrochlorid granisetronu selektivní antagonist receptoru serotoninu S, který se klinicky používá jako antiemetikum při podání protirakovinového činidla;

(4) hydrochlorid metoclopramidu léčivo, které se celosvětově používá jako antiemetické činidlo nebo činidlo zvyšující gastrointestinální pohyblivost [chemický název: monohydrát dihydrochloridu 4-amino-5-chlor-N-[2(diethylamino)ethyl]-2-methoxybenzamidu; viz například Měrek Index, 11. vydání, 6063 (1989)].

Příklady provedení vynálezu

A. Antagonistická účinnost vůči receptoru dopaminu

D₂ a receptoru serotoninu S₂

Zkušební příklad 1

Zkoušky na vazbu na receptor dopaminu D₂ a receptor serotoninu S₃ (in vitro zkouška vazby na receptor)

Zkouška na vazbu receptoru D₂ a serotoninu S₂ se provede podle následujících způsobů které vypracovali I. Creese a kol. [Eur. J. Pharmacol., 46, 337 (1977)] a S. J. Peroutka ·· ··· · a A. Hamík [Eur. J. Pharmacol., 148, 297 (1988)]. Jako vzorky receptoru se použily surové synaptosomní frakce připravené z krysího mozku a jako značené ligandy byly použity [³H] spiperon (D2) a [³H] quipazin (Sg). Pufrový roztok obsahující vzorek receptoru a označený ligand (konečný objem 1 ml) byly inkubovány po předem stanovenou dobu v přítomnosti jedné z testovaných sloučenin při různých úrovních koncentrace a potom byl radioaktivní ligand vázaný na receptor izolován na filtru za použití buněčného harvestru (Brandel Co) a radioaktivita každého filtru se měřila kapalným scintilačním sčítačem ke stanovení celkového množství vazby na receptor. Specificky vázané množství bylo počítáno odečtením nespecificky vázaného množství od celkového vázaného množství, přičemž nespecificky vázané množství se rovná množství vázanému za přítomnosti přebytku neznačeného ligandu, který byl současně měřen. Koncentrace testované sloučeniny, při které byla specifická vazba značeného ligandu inhibována na 50 % (IC50) byla počítána probitovou analýzou. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 1.

Zkušební příklad 2

Inhibiční účinek na Bezold-Jarischův reflex (účinnost proti serotoninu S^)

Tento test byl proveden podle následujícího způsobu Fozarda a kol. [viz Arch. Pharmacology, 326, 36-44 (1984)] . Samci krys Wister o hmotnosti 250 až 350 g byli anestetizováni urethanem (1,5 g/kg intraperitoneálně) a položeny na záda. Elektrokardiogram (svod II) a srdeční frekvence zvířat byly zapsány na oscilografu přes biofyzikální zesilovač a tepová frekvence tachometrem. Po podání 2-methylserotoninu (agonistický 5-HT3) v dávce 10 až 30 jLtg/kg intravenózně byla srdeční frekvence přechodně snížena (Bezold-Jarischův reflex). Pevné množství 2-methylserotoninu bylo podáváno opakovaně v 15 minutových intervalech, dokud ·« ···· • * ·« *· nebylo dosaženo stabilní odezvy a potom byla intravenózně podána testovaná sloučenina, 3 minuty před podáním

2-methylserotoninu. Byla vypočtena rychlost inhibice Bezold-Jarischova reflexu po podání testované sloučeniny a probitovou analýzou byla stanovena účinná dávka, která způsobí 50% inhibici (hodnota ED^q). Výsledky jsou uvedeny v tabulce 1 dále.

Tabulka 1

Testovaná sloučenina	Zkušební příklad 1 IC₅₀ (nM)	Zkušební příklad 2 (^d ₅₀ M9/kg) Inhibice Bezold Jarischova reflexu
^D2	^S3
Slouč. př. 1	11,7	1,0	1,9
domperidon	14	>1000	>10000
hydrochlorid ondansetronu	>100000	4,2	1,1
hydrochlorid granisetronu	>100000	2,0	0,26
hydrochlorid metoclopramidx	i 630 _	880	181

Z výsledků uvedených v tabulce 1 vyplývá, že sloučenina z příkladu 1 vykazuje více než ekvivalentní vazebnou účinnost vůči receptoru dopaminu D₂ k účinnosti domperidonu, který je známým selektivním agonistem receptoru dopaminu D₂ a rovněž silnou vazebnou účinnost vůči receptoru serotoninu S₃, která je lepší než účinnost hydrochloridu ondansetronu a hydrochloridu granisetronu, kteří jsou známými selektivními antagonisty receptoru serotoninu S₃. Rovněž sloučenina podle vynálezu vykazuje vynikající účinek na inhibici Bezold-Jarischova reflexu, který srovnatelný s účinkem hydrochloridu ondansetronu. Jako antiemetické ·* ···· ·« ·*»· ·. ·· ♦♦ ··· ·*·«· ·· ··· ···«

- 1 ζ _ · ···· · · ·*« ··

-U —' * * * * φ · ·* φ · • ΦΦΦ φφ ·· ··*· ·Φ činidlo vykazující vazebnou účinnost jak k receptoru S₃, tak dopaminu D₂, je známý hydrochlorid metoclopramidu. Nicméně jeho vazebná účinnost k těmto dvěma receptorům je slabší než u sloučeniny příkladu 1.

Sloučenina podle vynálezu má silnou antagonistickou účinnost jak k receptoru serotoninu S₃, tak dopaminu D₂ a je velmi slibným antiemetickým činidlem se širokým spektrem inhibice zvracení způsobeným různými důvody.

B. Účinky na zvracení

Zkušební příklad 3

Inhibiční účinek na zvracení vyvolané apomorfinem

Skupina 3 až 4 psů (Beagle, hmotnost 8 až 15 kg) byla použita ke zkouškám inhibičního účinku testovaných sloučenin na zvracení vyvolané apomorfinem. Tato zkouška se obvykle provádí jako zkouška na stanovení blokátoru dopaminu. Testovaná látka rozpuštěná nebo suspendovaná v 0,5% roztoku tragacanthu byla podána orálně každému zvířeti dvě hodiny před subkutánní aplikací hydrochloridu apomorfinu (0,3 mg/kg). Poté bylo počítáno zvracení během jedné hodiny a byl vypočten inhibiční poměr srovnáním s kontrolní skupinou psů bez podání testované látky a probitovou analýzou byla stanovena účinná dávka způsobující inhibici zvracení o 50 % (hodnota ED₅q). Výsledky jsou uvedeny v tabulce 2.

Zkušební příklad 4

Účinek na zvracení vyvolané cisplatinou u fretek

K pokusu se použili samci fretek (Marshall Lab. USA) o hmotnosti 1 kg. Pro intravenózní injekce se implantovala 3 až 4 dny před zkouškou pod anestézí pentobarbitalem kanyla. Každé testované skupině se orálně aplikovala předepsaná dávka

9· ···· ·· ·«·· testované sloučeniny rozpuštěná nebo suspendovaná v 0,5% roztoku tragacanthu a 30 minut poté se aplikovala přes kanylu cisplatina (Sigma) v dávce 10 mg/kg (fyziologický slaný roztok, 3 ml/kg). Poté bylo počítáno zvracení během 3 hodin a byl vypočten inhibiční poměr pro každou testovanou sloučeninu. Probitovou analýzou byla stanovena účinná dávka způsobující inhibici zvracení o 50 % (hodnota ED₅₀). Výsledky jsou uvedeny v tabulce 2.

Zkušební příklad 5

Účinek na zvracení vyvolané cisplatinou u psů

K pokusu na stanovení inhibičního účinku testovaných sloučenin na zvracení vyvolané cisplatinou se použilo 4 až 5 psů (tělesná hmotnost 10 až 12 kg) na skupinu. Každé testované skupině se orálně aplikovala předepsaná dávka testované sloučeniny rozpuštěná nebo suspendovaná v 0,5% roztoku tragacanthu a 30 minut poté se intravenózně aplikovala cisplatina (Sigma) v dávce 3 mg/kg (fyziologický slaný roztok, 3 ml/kg). Poté bylo počítáno zvracení během 5 hodin a byl vypočten inhibiční poměr pro každou testovanou sloučeninu. Probitovou analýzou byla stanovena účinná dávka způsobující inhibici zvracení o 50 % (hodnota ED₅₀). Výsledky jsou uvedeny v tabulce 2 dále.

···· • · · · · ·

Tabulka 2

Testovaná sloučenina	Zkus.příkl. 3 Zvracení vyvolané apomorfinem u psů ED₅₀ mg/kg
sloučenina příkl. 1	0,19
domperidon	0,02
hydrochlorid ondansetronu	>10 _;
hydrochlorid metoclopramidu	0,45

Zkuš.příkl. 4	Zkuš.příkl.5
Zvracení vyvo-	Zvracení vy-
lané cisplati-	lané cispla-
nou u fretek	tinou u psů
ED₅₀ mg/kg	ED₅₀ mg/kg
0,03	0,29
>10	>3
0,1	0,16
0,98	3,96

Z tabulky 2 je zřejmé, že sloučenina z příkladu 1 vykazuje vynikající inhibiční účinek na zvracení vyvolané apomorfinem založený na jejím antagonismu vůči receptoru dopaminu D₂, ačkoliv její účinek není stejný s účinkem domperidonu, který je selektivní antagonist receptoru dopaminu D₂ . Navíc, jako zvlášť: pozorovatelný účinek, sloučenina vykazuje silný inhibiční účinek na zvracení vyvolané cisplatinou založený na jejím antagonismu vůči receptoru serotoninu S₃, který je přibližně stejný jako u hydrochloridu ondansetronu, který je selektivní antagonist receptoru serotoninu 3. Tyto výsledky ukazují, že sloučenina z příkladu 1 vykazuje široké spektrum antiemetického účinku způsobený její vynikající vlastností současně působit jako antagonist receptoru serotoninu S₃ a dopaminu D₂ .

Sloučenina z příkladu 1 dále vykazuje silnější antiemetický účinek než hydrochlorid metoclopramidu, který má ·· ···· ·« ♦··· slabou vazebnou účinnost jak k receptoru serotoninu S₂, tak receptoru dopaminu D₂ . Zejména vykazovaný mnohem silnější inhibiční účinek na zvracení vyvolané cisplatinou ukazuje na podstatný rozdíl v účinku od hydrochloridu metoclopramidu.

C. Účinek na centrální nervový systém

Zkušební příklad 6

Inhibiční účinek na průzkumnou aktivitu

Jako zkušební zvířata byli použiti myší samci (5 na skupinu, STd-ddy kmen, hmotnost 20 až 25 g). Dvě hodiny po orálním podání testované látky rozpuštěné nebo suspendované v 0,5% tragacanthovém roztoku byly myši umístěny do testovacího boxu (23 x 35 x 30 cm) aktivitometru Animex (Farad co.). Průzkumná aktivita každé myši byla počítána následující 3 minuty. Průměrný počet průzkumné aktivity každé skupiny (počet/3 min.) byl porovnán s výsledky kontrolní skupiny a Probitovou analýzou byla spočítána účinnost dávky každé zkoušené sloučeniny (ED₅q), která způsobila 50% inhibici.

Hodnota ED^q sloučeniny z příkladu 1 a hydrochloridu metoclopramidu byla 48,5 mg/kg respektive 22,4 mg/kg, což ukazuje, že sloučenina z příkladu 1 má slabší centrální inhibiční účinek.

Jak vyplývá ze shora uvedených testů, sloučenina vzorce I a její fysiologicky přijatelné adiční soli s kyselinou vykazují vynikající účinky na zvracení založené na její silné antagonistické účinnosti vůči receptoru serotoninu S3 a receptoru dopaminu D₂ a jsou proto užitečné pro léčbu nebo profylaxi různých gastrointestinálních syndromů, které jsou spojeny s různými nemocemi a podáním léčiv, jako činidla proti zvracení se širokým spektrem. Zejména jsou účinné pro léčbu nebo profylaxi nauzey, zvracení, anorexie, přesycení, bolení břicha, pálení žáhy, říhání, se kterými se setkáváme ·· ···· ·· ♦ ···

·♦· · • · • · · · při chronické gastritidě, esopafageálním refluxu, gastrických a duodeálních vředů, gastrické neuróze, gastroptóze, postgastrektomickém syndromu, sklerodormatu, diabetů, při poruchách esofagiální a biliární trubice, dětském periodickém zvracení a infekcích horního dýchacího traktu. Jsou rovněž užitečné pro léčbu a profylaxi například syndromu podráždění střev, zácpě a průjmu nemluvňat. Dále mohou být užitečné pro léčbu a profylaxi nauzey a zvracení vyvolané podáním protirakovinových léčiv nebo levodopa preparátů nebo morfinem, který je narkotickým analgetikem nebo vyvolaných radioaktivním ozařováním. Dále mohou být použity pro léčbu a profylaxi intoxikace aditivním léčivem (morfin, nikotin, amfetamin a pod.) jako antipsychotické nebo anxiolytické činidlo.

Sloučenina vzorce I a fyziologicky přijatelné adiční soli s kyselinou se mohou podávat orálně, parenterálně nebo intrarektálně. Klinické dávky se liší v závislosti na takových faktorech, jako je druh sloučeniny, způsob podání, závažnosti nemoci, věku pacienta apod. Pokud se použije jako antiemetické činidlo, obvyklá dávka je v rozsahu 0,01 až 10 mg/kg/den, výhodně 0,1 až 3 mg/kg/den. Pokud se použije jako antipsychotické činidlo, obvyklá dávka činí 3 až 50 mg/kg/den, výhodně 5 až 30 mg/kg/den.

Při použití sloučeniny vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelných adičních solí s kyselinou pro výše popsané medicinální použití, jsou sloučeniny normálně podávány pacientům ve formě farmaceutických preparátů formulovaných smícháním s nosiči, které jsou obvykle používány v tomto oboru a které nereagují se sloučeninou podle vynálezu a které jsou netoxické při použití. Specifické příklady takových nosičů zahrnují kyselinu citrónovou, kyselinu glutamovou, glycin, laktózu, inozitol, glukózu, manitol, dextran, sorbitol, cyklodextrin, škrob, částečně želatinovaný škrob, sacharózu, methyl p-hydroxybenzoát, propyl p-hydroxybenzoát, hlinitometakřemičitan hořečnatý, synthetický křemičitan hlinitý, krystalickou celulózu, sodnou ·« ···· ·· karboxymethylcelulózu, hydroxypropylováný škrob, vápenatou karboxymethylcelulózu, iontoměničové pryskyřice, methylcelulózu, želatinu, arabskou gumu, pullulan, hydroxypropylcelulózu, nízko substituovanou hydroxypropylcelulózu, hydroxypropylmethylcelulózu, polyvinylpyrrolidon, polyvinylalkohol, kyselinu alginovou, alginát sodný, anhydrid křemičitý, stearát horečnatý, talek, tragacanth, bentonit, veegum, karboxyvinylpolymer, oxid titaničitý, ester mastné kyseliny se sorbitanem, laurylsulfát sodný, glycerin, glyceridy mastných kyselin, čištěný lanolin, glycerolželatinu, polysorbát, macrogol, rostlinný olej, vosk, propylenglykol, ethanol, benzylalkohol, chlorid sodný, hydroxid sodný, kyselinu chlorovodíkovou a vodu.

Farmaceutické preparáty mohou mít formu tablet, kapslí, prášku, sirupu, suspenze, injekce nebo čípku. Tyto preparáty se mohou připravit následujícími známými a konvenčními způsoby. Kapalné preparáty mohou mít také formy, které jsou před použitím rozpuštěné nebo suspendované ve vodě nebo jiném vhodném mediu. Tablety a granule mohou být potaženy dobře známými způsoby.

Tyto preparáty mohou obsahovat nejméně 0,01 %, výhodně 0,1 až 70 % sloučeniny vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelné soli. Preparáty mohou také obsahovat další terapeuticky významné složky.

V následujícím textu je dále vysvětlen předložený vynález s odkazem na referenční příklady a pracovní příklady, což ovšem v žádném případě neznamená, že vynález je omezen těmito příklady. Identifikace připravených látek byla provedena na základě takových dat, jako je elementární analýza, hmotová spektra, IČ spektra a NMR spektra.

V následujících referenčních a pracovních příkladech jsou uvedeny pro zjednodušení následující zkratky:

J: interakční konstanta s: singlet d: dublet t: triplet • · · · · · ·« ··♦♦ m: multiplet šs: široký singlet ee: enantiomerní přebytek

Referenční příklad 1

Příprava 5-brom-2-methoxy-6-methylamino-3-pyridinkarboxylové kyseliny (1) 50 g 2,6-difluorpyridinu se rozpustí v 200 ml tetrahydrofuranu a k roztoku se přidá po kapkách při teplotě -70 °C 326 ml 1,6M n-butyl lithium-tetrahydrofuranového roztoku a směs se míchá 1 hodinu při stejné teplotě. K reakční směsi se přidá postupně 29 g kusového suchého ledu a směs se míchá 30 minut při téže teplotě. Teplota se zvýší na přibližně 5 °C a přidá se 500 ml ledové vody. Reakční směs se promyje dvakrát ethylacetátem a pH vodné vrstvy se upraví pomocí koncentrované kyseliny chlorovodíkové na 3. Vodná vrstva se extrahuje chloroformem. Extrakt se promyje nasycenou slanou vodou, suší se nad síranem horečnatým a rozpouštědlo se koncentruje za sníženého tlaku. Krystalická sraženina se sebere filtrací a rekrystaluje se ze směsi diethylether n-hexan a získá se 63 g 2,6-difluoro-3pyridinkyrboxylové kyseliny (teplota tání 170 až 171 °C).

(2) Směs 63 g shora uvedeného produktu, 700 ml methanolu a 5 ml koncentrované kyseliny sírové se zahřívá pod zpětným chladičem 20 hodin. Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se zbytek zředí ledovou vodou a extrahuje se chloroformem. Extrakt se promyje vodou, suší se nad síranem horečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se zpracuje sloupcovou chromátografií na silikagelu eluováním s chloroformem a čištěním se získá 64 g methyl

2,6-difluor-3-pyridinkarboxylátu jako olej.

(3) K 500 ml ethanolového roztoku obsahujícího 38 g shora uvedeného produktu, se přidá při teplotě -20 °C až -25 °C po kapkách 72 g 20% methylaminového roztoku v ethanolu a • · · · · · směs se míchá při téže teplotě 5 hodin a potom se postupně teplota zvýší na teplotu místnosti. Reakční směs se koncentruje za sníženého tlaku. Ke kondenzátu se přidá ledová voda a sraženina se sebere filtrací, promyje se vodou, suší a rekrystaluje se ze směsi diethylether n-hexan v poměru 2:3. Tak se získá 15,7 g methyl 2-fluor-6-methylamino-3-pyridinkarboxylátu (teplota tání 156 až 159 °C).

(4) K 400 ml methanolového roztoku obsahujícího 15,7 g shora uvedeného produktu se přidá 19,1 g terč.butoxidu draselného a směs se zahřívá pod zpětným chladičem 3 hodiny. Po ochlazení se reakční směs koncentruje za sníženého tlaku a ke zbytku se přidá vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Sraženina se sebere filtrací, promyje se vodou a sušením se získá 16,3 g methyl 2-methoxy-6-methylamino-3-pyridinkarboxylátu (teplota tání 120 až 122 °C, rekrystalováno ze směsi n-hexanu a diethyletheru).

(5) K 70 ml dimethylformamidového roztoku obsahujícího

7,3 g shora uvedeného produktu se přidá 7,0 g N-bromsukcinimidu a směs se zahřívá na teplotu 80 °C po dobu 4 hodin. Potom se k reakční kapalině přidá ledová voda a sraženina se sebere filtrací, promyje se vodou a sušením se získá 9,8 g methyl 5-brom-2-methoxy-6-methylamino-3-pyridinkarboxylátu (teplota tání 136 až 138 °C, rekrystalováno ze směsi n-hexanu a diethyletheru).

(6) Ke 100 ml methanolového roztoku obsahujícího 20 g shora uvedeného produktu se přidá 200 ml vodného roztoku obsahujícího 3,1 g hydroxidu sodného a potom se směs zahřívá 1,5 hodiny pod zpětným chladičem. Po ochlazení se methanol odpaří za sníženého tlaku a zbytek se okyselí koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou. Vysrážená pevná látka se sebere filtrací, promyje se vodou a vysušením se získá 18,9 g předmětného produktu (teplota tání 224 až 225 °C).

¹H-NMR spektrum (DMSO-dg, δ ppm): 2,92 (3H, d, J = 5Hz), 3,88 (3H, s), 7,08 (1H, d, J = 5Hz), 7,98 (1H, s), 12,08 (1H, s).

• · < · · ·

• «4 • · · • · · · • · · · • · · · · ·· ·· • · · · • · · · • · · · · c • · ·

Příklad 1

Příprava difumarátu (R)-5-brom-N~(l-ethyl-4-methylhexahydro1H-1,4-diazepin-6-yl)-2-methoxy-6-methylamino-3pyridinkarboxamidu (1) Kapalná směs 18,0 g 5-brom-2-methoxy-6-methylamino-

3-pyridinkarboxylové kyseliny, 11,7 g N,N'-karbonyldiimidazolu a 50 ml dimethylformamidu se míchá při teplotě místnosti po dobu 8 hodin. K reakční směsi se přidá 13,0 g (R)-6-amino-l~ethyl-4-methylhexahydro-lH-l,4-diazepinu a potom se směs míchá při teplotě místnosti 15 hodin. Reakční směs se koncentruje za sníženého tlaku a přidá se 2N roztok hydroxidu sodného a následuje extrakce chloroformem. Extrakt se promyje vodou, suší se přes bezvodý síran hořečnatý a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Zbytek se zpracuje sloupcovou chromatografií na silikagelu eluováním a čištěním směsí chloroformu a methanolu v poměru 15:1 a rekrystalizací z diethyletheru se získá 19,6 g 1/4 hydrátu (R)-5-brom-N-(l-ethyl-4-methylhexahydro-lH-l,4-diazepin-6-yl)-

2-methoxy-6-methylamino-3-pyridinkarboxamidu (teplota tání 52 až 55 °C).

Tato sloučenina vykazuje retenční čas 23,6 minut ve vysokém výtěžku při HPLC provedené za podmínek specifikovaných dále a má optickou čistotu alespoň 99 % ee. [Podmínky HPLC] kolona HPLC: CHIRALPAK AS (Daicel Chemical Industries) vnitřní průměr: 4,6 mm x 250 mm mobilní fáze: n-hexan - ethanol - diethylamin (940:30:2) průtoková rychlost: 0,8 ml/min.

teplota: 25 °C detekce: UV 254 nm (2) 19 g shora uvedeného produktu se zpracuje kyselinou fumarovou aby se převedl na difumarát a • · · · · · • · · · • · rekrystaluje se z ethanolu a získá se 23 g předmětného produktu (teplota tání 152 až 155 °C).

l-H-NMR spektrum (DMSO-dg, δ ppm) : 1,02 (3H, t, J = 7Hz), 2,43 (3H, s), 2,5 - 3,0 (10H, m), 2,93 (3H, d, J = 5Hz), 3,98 (3H, s), 4,14 (1H, m), 6,60 (4H, s), 6,99 (1H, d, J = 5Hz), 8,09 (1H, s), 8,48 (1H, d, J = 8Hz), 12,80 (2H, ŠS) .

Referenční příklad 2

Příprava difumarátu (S)-5-brom-N-(l-ethyl-4-methylhexahydro1H-1,4-diazepin-6-yl)-2-methoxy-6-methylamino-3-pyridinkarboxamidu (1) Reakce a zpracování v příkladu 1 (1) se opakuje s tím, že (R)-6-amino-l-ethyl-4-methylhexahydro-lH-1,4-diazepin se nahradí (S)-6-amino-l-ethyl-4methylhexahydro-1H-1,4-diazepinem a získá se monohydrát (S)-5-brom-N-(l-ethyl-4-methylhexahydro-lH-l,4-diazepin6-yl)-2-methoxy-6-methylamino-3-pyridinkarboxamidu (teplota tání 67 až 68 °C, rekrystalováno ze směsi diethyletheru a petroletheru).

Uvedená sloučenina vykazuje retenční čas 27,5 minut při HPLC za stejných podmínek jak je uvedeno v příkladu 1 a má optickou čistotu alespoň 99 % ee.

(2) Shora vzniklý produkt se zpracuje kyselinou fumarovou a převede se na difumarát, který se rekrystaluje z ethanolu a získá se předmětný produkt (teplota tání 152 až 155 °C).

Příklad 2

Příprava (R)-6-amino-l-ethyl-4-methylhexahydro-lH-l,4diazepinu (1) Ke směsi 1200 ml chloroformu a 1602 g Ν'-methyl25

N-(3-methylbenzyl)ethylendiaminu se přidá po kapkách za chlazení ledem směs 3500 ml chloroformu a 2180 g di-terc.butyldikarbonátu. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 18 hodin a koncentruje se do sucha za sníženého tlaku. Ke zbytku se přidá toluen a ledová voda, potom po kapkách za chlazení ledem 10% vodná kyselina citrónová tak, aby vnitřní teplota roztoku nepřestoupila 4 °C. Tím se vodná vrstva stane kyselou. Toluenová vrstva se oddělí a extrahuje se vodou. Takto získaná vodná vrstva se spojí s kyselým vodným roztokem a promyje se toluenem. Vodná vrstva se alkalizuje 48% vodným roztokem hydroxidu sodného a znovu se extrahuje toluenem. Extrakt se promyje vodou a nasyceným slaným roztokem a suší se nad bezvodým síranem sodným. Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získá 1860 g Ν'-terč.butoxykarbonyl-N'-methyl-N-(3-methylbenzyl)ethylendiaminu jako olej ovitý produkt.

(2) 50 g shora uvedeného produktu se smíchá s 53 g (S)-2-methoxykarbonyl-l-benzyloxykarbonylaziridinu a směs se míchá při teplotě 80 °C po dobu 20 hodin. Tak se získá surový methyl (R)-2-(benzyloxykarbonyl)amino-3-[N-[2-[Ν'-terč.butoxykarbonyl)-Ν'-methylamino]ethyl]-N-(3-methylbenzyl)]aminopropionát.

(3) Ke shora uvedenému produktu se přidá 750 ml 10% roztoku chlorovodíku v ethanolu a směs se míchá 2 hodiny při teplotě 30 až 40 °C. Nerozpustné materiály se odstraní filtrací, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v 500 ml vody. Vodná vrstva se promyje diethyletherem, neutralizuje se hydrogenuhličitaném sodným a extrahuje se chloroformem. Extrakty se suší nad bezvodým síranem horečnatým a po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získá 79 g surového methyl (R)-2-(benzyloxykarbonyl) amino-3-[N-(2-methylaminoethyl)-N-(3-methylbenzyl)]aminopropionátu. Část produktu se převede do formy odpovídajícího oxalátu, který se rekrystaluje ze směsi ethanolu a diethyletheru a získá se oxalát uvedeného methylesteru (teplota tání 185 až 190 °C).

(4) 39 g shora uvedeného surového methylesteu se rozpustí v 70 ml ethanolu a po kapkách a při teplotě 0 °C až 10 °C se přidá 70 ml vodného 2N roztoku hydroxidu sodného a potom se směs míchá při teplotě místnosti 16 hodin. Ethanol se odpaří za sníženého tlaku a pH vodného roztoku se upraví pomocí koncentrované kyseliny chlorovodíkové na 8 a potom se směs extrahuje chloroformem. Extrakt se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a získá se 36,4 g surové (R)-2 -(benzyloxykarbonyl)amino-3-[N-(2-methylaminoethyl)-N-(3-methylbenzyl)]aminopropionové kyseliny. Část produktu se čistí a získá se krystalický produkt, mající teplotu tání 170 až 175 °C.

(5) K roztoku 36,4 g shora uvedeného surového produktu ve 180 ml methylenchloridu se přidá 18,2 g hydrochloridu l-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidu a směs se míchá při teplotě místnosti 20 hodin. Reakční směs se promyje vodou, suší se nad bezvodým síranem hořečnatým, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rekrystaluje ze směsi diethyletheru a n-hexanu a získá se 22 g (S)-3-(benzyloxykarbonyl)amino-1-methyl-4-(3-methylbenzyl)hexahydro-2-oxo-l,4-diazepinu (teplota tání 70 až 71 °C).

(6) Ke směsi 400 ml methylenchloridu a 40,8 g shora uvedeného produktu se přidá po kapkách 18,0 g 1-chlorethylchlorformiátu a směs se míchá při teplotě místnosti 3 hodiny. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a ke zbytku se přidá 400 ml methanolu a směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny. Methanol se odpaří za sníženého tlaku, ke zbytku se přidá voda a následně se provede promytí diethyletherem. Vodná vrstva se alkalizuje vodným roztokem hydroxidu sodného a extrahuje se chloroformem. Extrakt se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a získá se surový (S)-3-(benzyloxykarbonyl )amino-1-methylhexahydro-2 -oxo-1,4-diazepin.

(7) Ke shora uvedenému produktu se přidá 600 ml methanolu a 21,2 g triethylaminu a dále za chlazení ledem

11,6 g 80% vodného acetaldehydového roztoku a směs se potom

BB ···· ·« ···· ·Β BB ·· · ·« B · · · B • · · · B BBBB _ * · B B · B B BBBB B ' · ♦ ♦ B B B B B B B ···· bb ·· a· »r «· míchá 2 hodiny. Potom se při stejné teplotě přidá po částech 3,97 g borohydridu sodného a směs se míchá 1 hodinu za chlazení ledem a potom dalších 16 hodin při teplotě místnosti. Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se zbytek extrahuje chloroformem. Extrakt se promyje nasyceným slaným vodným roztokem, suší se nad síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se zpracuje sloupcovou chromátografií na silikagelu, eluuje se a čistí směsí chloroformu a methanolu (15:1) a získá se 28 g (S)3 -(benzyloxykarbonyl)amino-5-ethyl-l-methylhexahydro-2-oxo-

1,4-diazepinu jako olej.

(8) K 28 g shora uvedeného produktu se přidá 140 ml

48% vodného roztoku kyseliny bromovodíkové a následuje míchání 2 hodiny při zahřívání na 60 °C. Po ochlazení se reakční směs promyje dvakrát diethyletherem a vodná vrstva se alkalizuje uhličitanem draselným a extrahuje se chloroformem. Extrakt se suší nad bezvodým síranem hořečnatým. Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získá 19 g (S)-3-amino5-ethyl-l-methylhexahydro-2-oxo-l,4-diazepinu jako olejovitý produkt.

(9) K 300 ml tetrahydrofuranového roztoku obsahujícího 23 g shora uvedeného produktu se přidá po kapkách 1000 ml 1M boran-tetrahydrofuranového roztoku a směs se míchá 16 hodin při teplotě místnosti. Potom se přidá za chlazení ledem 500 ml 1N kyseliny chlorovodíkové a směs se zahřívá pod zpětným chladičem 1 hodinu. Po ochlazení směsi se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku a zbytek se promyje dvakrát diethyletherem a vodná vrstva se alkalizuje uhličitanem draselným a extrahuje se chloroformem. Extrakt se suší nad bezvodým síranem hořečnatým. Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získá 19 g předmětného produktu jako olej.

Referenční příklad 3

Příprava (S)-6-amino-l-ethyl-4-methylhexahydro-lH-l,4diazepinu

- 28 Předmětná sloučenina se získá reakcemi a zpracováním které jsou shodné s příkladem 2 (2) až (9) s tím, že (S)-2methoxykarbonyl-l-benzyloxykarbonylaziridin použitý ve stupni (2) se nahradí (R)-2-methoxykarbonyl-l-benzyloxykarbonylaziridinem.

Formulační příklad 1

Příprava tablet (5 mg tableta)

Difumarát (R)-5-brom-N-(l-ethyl-4-methylhexahydro-lH-

1,4-diazepin-6-yl)-2-methoxy-6-methylamino-3- pyridinkarboxamidu 5g

Laktóza 80g

Kukuřičný škrob 30g

Krystalická celulóza 25g

Hydroxypropylcelulóza 3g

Lehký oxid křemičitý0,7 g

Stearát hořečnatý1,3 g

Konvenčním způsobem se shora uvedené složky smísí, granulují se a zpracují na tablety, každá o hmotnosti 145 mg.

Formulační příklad 2

Příprava prášku (1% prášek)

Difumarát (R)-5-brom-N-(l-ethyl-4-methylhexahydro-lH-

1,4-diazepin-6-yl)-2-methoxy-6-methylamino-3- pyridinkarboxamidu 10 g Laktóza 960 g Hydroxypropylcelulóza 25 g Lehký oxid křemičitý 5 g

Konvenčním způsobem se shora uvedené složky smísí a

9» ····

4444 ♦ · · ♦ · * · · · · • · · · · · · ♦ · • · · · · ··'···« · • · · 9 9 · · · ··

9994 ·· 99 99 9 999 zpracují na práškový prostředek.

Formulační příklad 3

Příprava injekce (0,5% injekce)

Difumarát (R)-5-brom-N-(l-ethyl-4-methylhexahydro-lH-

1,4-diazepin-6-yl) -2-methoxy-6-methylamino-3- pyridinkarboxamidu

Sorbitol

Voda pro injekce

Celkem g

100 g vhodné množství

2000 ml

Difumarát (R) -5-brom-N-(l-ethyl-4-methylhexahydro-lH-

1,4-diazepin-6-yl)-2-methoxy-6-methylamino-3-pyridinkarboxamidu a sorbitol se rozpustí v části vody pro injekce a potom se přidá zbytek injekční kapaliny k celkovému množství 2000 ml. Tento roztok se filtruje přes membránový filtr (0,22 μτη) . Filtrát se plní do 2 ml ampulí a sterilizuje se při 121 °C po dobu 2 0 minut.

Průmyslová využitelnost

Jak je uvedeno shora, sloučenina podle předkládaného vynálezu představovaná vzorcem I a její fyziologicky přijatelná adiční soli s kyselinou vykazují vynikající antiemetický účinek založený na jejich silné antagonistické účinnosti vůči receptoru serotoninu a dopaminu D₂ a jsou proto užitečné jako antiemetické činidlo pro léčbu nebo profylaxi různých gastrointestinálních symptomů, které jsou spojeny s různými nemocemi a s podáváním léčiv. Zejména jsou užitečné pro léčbu a profylaxi nauzey, zvracení, anorexie, přesycení, větších abdominálních problémů, bolesti břicha, pálení žáhy, eruktace a pod., které doprovází takové nemoci, jako jsou akutní a chronická gastritida, jícnový reflux, gastrický a duodenální vřed, gastrická neuróza, gastroptóza, gastrektomní syndrom, sklerodermie, diabetes, nemoci jícnového a žlučového kanálku, puerilní periodické zvracení a infekce horního dýchacího traktu. Jsou také užitečné pro léčbu a profylaxi například syndromu dráždivého střeva, zácpy a průjmu u kojenců. Dále se mohou použít pro léčbu nebo profylaxi nauzey nebo zvracení způsobených podáním protirakovinovych činidel nebo preparátů L-Dopa nebo morfinu, který je narkotickým analgetikem nebo v době radioaktivního ozařování. Mohou se také použít jako antipsychotická a anxiolytická činidla.

Claims

1. (R)-5-Brom-N-(l-ethyl-4-methylhexahydro-lH-l,4-diazepin-6- yl)-2-methoxy-6-methylamino-3-pyridinkarboxamid vzorce I nebo jeho fyziologicky přijatelné adiční soli s kyselinou.

2. Způsob přípravy (R)-5-brom-N-(l-ethyl-4-methylhexahydro1H-1,4-diazepin-6-yl)-2-methoxy-6-methylamino-3-pyridinkarboxamidu vzorce I podle nároku 1, vyznačuj ící se t í m, že reaguje sloučenina vzorce II nebo její reaktivní derivát se sloučeninou vzorce III φ· φφφφ φφ φφφφ φφ ·· • φ φ φ φ φ φφφφ φφ φφφ φφφφ

- 32 - · φφφφφφ φφφ φ φ φ · φ φφφφ φφφ φφφφ φ· φφ φφ φφ φφ a je-li to nezbytné, převede se vzniklý produkt ve formě báze na fyziologicky přijatelnou adiční sůl s kyselinou.

3. Léčivo obsahující (R)-5-brom-N-(l-ethyl-4-methylhexahydro1H-1,4-diazepin-6-yl)-2-methoxy-6-methylamino-3-pyridinkarboxamid vzorce I podle nároku 1 nebo jeho fyziologicky přijatelnou adiční sůl s kyselinou.

4. Antiemetické činidlo obsahující (R)-5-brom-N-(l-ethyl-4methylhexahydro-1H-1,4-diazepin-6-yl)-2-methoxy-6-methylamino-

3-pyridinkarboxamid vzorce I podle nároku 1 nebo jeho fyziologicky přijatelnou adiční sůl s kyselinou.

5. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje (R)-5-brom-N-(l-ethyl-4-methylhexahydro1H-1,4-diazepin-6-yl)-2-methoxy-6-methylamino-3-pyridinkarboxamid vzorce I podle nároku 1 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou adiční sůl s kyselinou a nosič pro lékařské přípravky.

6. Způsob léčení nauzey nebo zvracení vyznačuj ící se t í m, že se podá pacientovi trpící nauzeou nebo zvracením účinné množství (R)-5-brom-N-(l-ethyl-4-methylhexahydro-lH-1,4-diazepin-6-yl)-2-methoxy-6-methylamino-3 pyridinkarboxamidu vzorce I podle nároku 1 nebo jeho fyzioloicky přijatelné adiční soli s kyselinou.

7. Použití (R)-5-brom-N-(l-ethyl-4-methylhexahydro-lH-l,4diazepin-6-yl)-2-methoxy-6-methylamino-3-pyridinkarboxamidu vzorce I podle nároku 1 nebo jeho fyziologicky přijatelné adiční soli s kyselinou k léčbě pacientů trpících nauzeou nebo zvracením nebo pro profylaktickou léčbu proti nauzee nabo zvracení.

8. (R)-6-amino-l-ethyl-4-methylhexahydro-lH-l,4-diazepin vzorce III