CZ227899A3

CZ227899A3 - Steroidy substituované v poloze 11, způsob jejich přípravy, jejich použití jako léčiv a farmaceutické kompozice, jež je obsahují

Info

Publication number: CZ227899A3
Application number: CZ992278A
Authority: CZ
Inventors: Yamina Bouali; François Nique; Jean-Georges Teutsch; De Velde Patrick Van
Original assignee: Hoechst Marion Roussel
Priority date: 1996-12-23
Filing date: 1997-12-22
Publication date: 1999-09-15
Also published as: US6207657B1; US20020198374A1; UA54483C2; JP2001507010A; EP0946585A1; DK0946585T3; FR2757519B1; US6541464B2; BR9714433A; HRP970711A2; JP4376319B2; NO993125L; WO1998028324A1; AU726350B2; US6482813B1; HRP970711B1; AP9901567A0; EP0946585B1; NO993125D0; AU5667898A

Description

(57) Anotace:

Steroidní sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém n = 2,3, buď Ri a R2 = H, /Ci-4/alkyl, nebo Ri a R2 tvoří s dusíkem heterocyklickou sloučeninu, X = OH případně esterifikované, Y = /Ci-4/alkyl a jejich adiční soli, způsoby jejich přípravy a farmaceutické kompozice, jež je obsahují.

<^CH2>n

I

CZ 2278-99 A3

Steroidy substituované v poloze jejich použití jako léčiv a far obsahují

J..L / ZpÚSOb J .aceutické ko;

ich přípravy, ozice^jsž je

Oblast techniky

Předložený vynález se týká steroidních sloučenin substituovaných v poloze 11, způsobu jejich přípravy, jejich použití jako léčiv a farmaceutických kompozic jež je obsahují.

Dosavadní stav techniky •Osteoporóza je patologický.jev, který'.je charakterizován kvantitativní a kvalitativní redukcí kostní hmoty, což vede k vertebrálním nebo periferním zlomeninám spontánně nebo vlivem minimálních traumat. Ačkoli má tato nemoc mnoho.faktorů ve svém původu, menopauza u žen tvoři dominující faktor při úbytku kosti nebo osteopenii.

Tato osteopenie se manifestuje řídnutím a přeměnou architektury pórovité kosti následkem čehož vzrůstá lámavost skeletu a riziko zlomenin. Kostní úbytky vzrůstají značně po menopauze vlivem potlačení funkce vaječníků a dosahují 3 až 5 % za rok před zpomalením po stáří 55 let.

Pro terapeutické účely může být postmenopauzní normo nální deficience kompenzována nahrazovací hormonální terapií, kde estrogen hraje hlavní roli při zachovávání kostní hmoty.

Ale dlouhodobá estrogenoterapie je někdy doprovázena nežádoučími účinky na genitální ústrojí (endomeatriální hyperplasie, prsní tumory ...), které tvoří hlavní nevýhodu a omezují její použití.

• ·

Je tudíž vhodné nalézt sloučeniny jiné ne diol, které mají disociovanou estrogcnní aktivitu, genní aktivitu na kostní úrovni, přičemž nemají žá pouze malou endometriální hyperplasní aktivitu ani rou proliteraeni aktivitu.

popisuje aktivitu ·· · · • · · • · · estratotiž estrodnou. nebo prsní tumaPatentová přihláška FR 2640977 A (29.červenec 1990) steroidy, které mají antiastrogenní a/nebo estrogenní

Tyto molekuly se liší od molekul v naší přihlášce vynálezu v tom, že jsou substituovány alkinylovou skupinou nebo nejsou substituovány v poloze 17 alfa.

Publikace Steroids (Lu Jin a j., sv. 60, č. 3, srpen 1925, 512-513) také zveřejňuje analog nesubstituovaný v poloze 17 alfa (RU39411), který má smíšenou estrogenní/antiestrogenní aktivitu, inhibuja růst í-ICF-7 prsních tumorových buněk a je tudíž užitečný při léčení rakoviny prsu.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorcE'1

• · · • · · «♦ ·· ve kterém celé číslo rovná 2 nebo 3, buň R_n ^a· ^a2 í^^anti^ck® nebo rozdílné,představují atom vodíku nobo alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nebo R^ a tvoří společně s atomem dusíku, .ke kterému jsou vázány, aromatický nebo nearomatický, nasycený nebo nenasycený, monocyklický nebo polycyklický heterocykl s 5 aš .15 členy, případně obsahující 1 až 3 další heteroatomy zvolené z kyslíku, síry a dusíku, substituovaný nebo nesubstituovaný,

X představuje případně esterMifikovanou hydroxylovou skupinu a

Y představuje alkylovou skupinu obsahující 1 aš 4 atomy ^uhlfku y substituovanou nebo nesubstituovanou, stejně jako jejich adiční soli s farmaceuticky akceptovatelnými kyselinami.

Alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku je míněn methyl, ethyl, propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, terč.butyl.

Když Y představuje substituovanou alkylovou skupinu, je tato alkylová skupina zejména substituována' jedním neabo více halogenovými atomy.

Výhodně Y může představovat trifluormethylovou skupinu.

Když a íM tvoři spolecne s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, heterocykl, je to zejména mono nebo bicyklický nasycený heterocykl, případně obsahující další hateroatom vybraný z kyslíku a dusíku, jako jsou heterocykly vybrané zí • · • 4 · · • · · ♦ • · · · · · · • · pyrrolyl, imidazolyl, indoly, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, thiazolyl, oxazolyl, furazonyl, pyrazolinyl, thiazolinyl a zejména následující nasycené heterocykly:

—-N

Když je tento heterocykl substituován, je to zejména alkylovou skupinou obsahující 1 aš 4 atomy uhlíku v úrovni atomu dusíku.

Když X je případně esterifikovanou hydroxylovou skupinou, je míněna OCO-alk·, skupina, ve které alk_q je alkylová skupina obsahující 1

-OCOEt skuoina.

itomů uhlíku a výhodně -OCOMe neabo

U edičních solí s farmaceuticky akceptovatelnými kyselinami je adiční solí míněna sůl vytvořená s anorganickou nebo organickou kyselinou nebo aminem. Mohou to být následující kyseliny: chlorovodíková, bromovodíková, dusičná, sírová, fosforečná, octová, mravenčí, propionová, benzoová, jablečná, fumarová, jantarová, vinná, citrónová, štavelová, glyoxylová, aspartová, alkansulfonová jako je methan nebo ethansulfonová, arylsulfonová jako je benzen nebo paratoluensulfonová nebo arylkarboxylové kyseliny.

Zejména jsou předmětem vynálezu sloučeniny vzorace I, který je výše uveden, ve kterém n se rovná 2, stejně jako jejich adiční soli s farmaceuticky akceptovatelnými kyselinami.

• ·

Zejména jsou předmětem vynálezu slou liny vzorce I, který bua R, a R1 z je výše uveden, ve kterém n se rovná 2, identické nebo rozdílné představují alkylovou skupinu obsahující 1 nebo R-, a R_o tvoří vázány piperidino, ,s 4 atomy uhlíku, společně s atomem dusíku, ke kterému jsou pyrrolidino nebo 2-azabicyklo(2,2,l)hept2-yl skupinu, k představuje hydroxylovou skupinu a

Y představuje methylovou nebo ethylovou skupinu.

Zejména js

I stejně jako jejich mi kyselinami, jejich ou předmětem vynálezu sloučeniny vzorce adiční soli s farmaceuticky akceptovatelný jména následují:

11β-[4-J2-(1-piperidinyl)ethoxyjfenyl]-19-nor-17o6-pregna1,3,5(10)-trien-3,17B-diol, cd-mcthyl-llfí-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxyjfenyl]-estra-1,3,5(10)-trian-3,17fi-diol, oC -mothyl-llfí-[4-£2- (diethylamino)ethoxyj fenyl]-estra-1,3,5(10)-3,17B-diol,

17eí-methyl-llfi-[i-[2-(1-pyrrolidinyl)ethoxyjfenyl]-estra-1,3,5 (10) -trien-3, 17fJ-diol,

17cC -methyl-llB-[4-[2-(2-azabicyklo(2,2,l)hept-2-yl)ethoxy]fenyl] -estra-1,3,5(10)-trien-3,17B-diol., llfí-[4-[2-(2-azabicyklo(2,2,1)hept-2-ylJethoxy]fenyl]-19-nor17 oC -pragna-1,3,5(10) -trien-3,17B-diol a oč-(trifluormethyl-llfl- [4- [2- (1-piperidinylJethoxy] fenyl]) estra-1,3,5(10)-trien-3-17B-diol.

0 00 ·· ¹» 0 0 * · · ·

0 0 ·

0 0 · • 900 000 >00 ·00·

Předmětem vynálezu je také způsob přípravy sloučenin obecného vzorce ϊ uvedeného výše, který se vyznačuje tím, Se sloučenina obecného vzorce II ,R<

(II) (CH,

2'n

O ve kterém η, Ε_η a mají dříve uvedený význam, se podrobí působení organokovová sloučeniny obsahující ln aš 4 atomy uhlíku tak, že se vytvoří sloučenina vzorce I, ve které X js hydroxylová skupina a ϊ je alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, a tato sloučenina vzorce I se podrobí, když je třeba, esterifikační reakci 17-OH a/nebo salifikační reakci.

Působeni organokovu na 17-ketoskupinu zajišťuje přístup k produktům vzorce I, kde-X je hydroxylová skupina a Y je alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku.

Organokovová sloučenina odvozená od alkylové skupiny obsahující 1 až 4 atomy uhlíku se vybere ze sloučenin hořčíku vzorce Y-MgHal a lithiových sloučenin vzorce ϊ-Li, ve kterých Y má dříve uvedený význam a Hal představuje atom halogenu.

• ·

Výhodné se isxu-cecnuje v přítomnosti chloridu čeřitého.

Při výhodném postupu provádění způsobu Hal představuje atom chloru,, bromu nebo jodu, výhodně bromu.

K získání sloučenin vzorce I, ve kterých X je hydroxylová skupina a Ya je CP, skupina, se reakce provádí působě-U ~ ním CFnSií-íe-. na 17-keto, načež následuje působení deprotskčního prostředku jako jo tstrabutylaraoniumfluorid.

Vynález se také týká způsobu přípravy sloučenin obecného vzorce I vymezeného dříve, s Y představujícím alkylovou skupinu obsahující od 2 do 4 atomů uhlíku, který jo vyznačen tím, že sloučenina obecného vzorce III <^RRo (III)

Wn

R. a R,

J. z mají dříve uvedené významy a ve kterém Y' představuje alkenylovou nebo alkinylovou skupinu obsahující ve kterem až uhlíku, se podrobí působení redukčního prostředku dvojné vazby nebo trojné vazby tak, že se získají sloučeniny vzorce I, ve kterých X je hydroxylová skupina a Y je alkylová skupina obsahující 1 až 4 atom uhlíku, přičemž tato sloučenina vzorce I se podrobí, když je třeba, esterifikační reakci • 9 ···· 9999 ·· · ·

9 99«

9 9

99 ·* > 9 · ·

I 9 9 9

999 999 ·

99

17-OH a/nebo salifikační reakci.

Reakce úplné redukce ss povadl působením vodíku v přítomnosti katalyzátoru jako je palladium na uhlíku nebo rhodiového katalyzátoru jako js-Uilkinsonova reagencie.·

Esterifikační a salifikační reakce ss provádějí obvyklými způsoby známými odborníkům v oboru.

Sloučeniny obecného vzorce I stejně jako jejich farmaceuticky akceptovatelné adiční soli s kyselinami mají estrogenní aktivitu, antiestrogenní aktivitu a antiproliferační aktivitu.

lía tomto základě mohou být sloučeniny vzorce I použity při léčení poruch spojených s hypofolikulinismem, například amenorheu, dismenorheu, opakované potraty, premenstruační poruchy, při léčení určitých -na·estrogenu závislých stavů jako jsou adanomy nebo karacinomy prostaty, karcinomy prsu a jejich metastázy nebo při léčení benigních tumorů prsu, jako antiuterctrofikum, stejně jako při nahrazovací terapii v menopauze nebo parimenopauze.

Symptomy a důsledky spojené s menopauzou jsou přesněji: návaly horka, poceni, atrofie a suchost vagíny, urinární symptomy a dlouhodobě pokles kostní hmoty a zvýšené riziko zlomenin, stejně jako ztráta kardiovaskulární ochrany poskytované esfrogeny.

Zejména sloučeniny vzorce Σ stejně jako jejich farmaceuticky akceptovatelné adiční soli s kyselinami mohou být takto použity při prevenci nebo léčení osteoporózy.

Sloučeniny vzorce I, stej akceptovateln jako jejich farmaceuticky adiční soli s kyselinami mohou být také použity • 0 · ···· 0000 ·· » 0 · » · 000

Β 0 0 <

· ·· • 0 » 0 0

I · ·

0 0 při prevenci nebo léčení osteoporózy u lidí.

Mohou být také použity při prevenci nebo léčení sekundární, osteoporózy (například s kortizony spojené osteoporózy, spojené s imobilizaci).

Sloučeniny vzorce I, stejně jako jejich farmaceuticky akceptovatelné adiční soli s kyselinami mají zejména disociovanou estrogenní aktivitu.

Disociovaná estrogenní aktivita znamená estrogenní aktivitu v kosti, která vykazuje jen minimální aktivitu v uteru a tak nevede k endomatriální proliferaci (aktivitu dostatek ně nízkou oproti aktivitě estradiolu).

Dále sloučeniny podle vynálezu poskytují následující vyhoay:

Vykazují antiestrogenní aktivitu v prsu. Ka rozdíl od estradiolu nestimulují růst lidských prsních tumorových buněk a mohou dokonce inhibovat jejich růst. Sloučeniny podle vynálezu jsou tudíž zvlást výhodné pro léčení menopauzy u žen při riziku rakoviny prsu (rodinná dispozice), která jsou tudíž vyloučeny z nahrazovací terapie estradiolem. l-íohou být také použity při léčení rakovin prsu.

vedou ke snížení hladiny sérového cholesterolu na hladinu ekvivalentní' hladině vyvolané estradiolem. Takto posilují kardiovaskulární ochranu.

Konečně sloučeniny podle vynálezu nevykazují estrogenní aktivitu v uteru a tak se nevyžaduje, aby byly podávány ve spojení s progestoraimetickou sloučeninou.

♦ 9

- 10 • · • 999 • 9 1 • · 1 » ·* • 9 99 > 9 9 1 » 9 9 1

999 991

1

99

Vynález se tudíž týká sloučenin obecného vzorce I stejně jako jejich farmaceuticky akceptovatelných adičních solí s kyselinami» jako léčiv.

Vynálezu se zejména týká sloučenin vzorce I stejně jako jejich farmaceuticky akceptovatelných adičních solí s kyselinami» jako léčiv pro prevenci nebo léčeni'osteoporózy.

Vynález se týká zejména sloučenůin obecného vzorce I stejně jako jejich farmaceuticky akceptovatelných adičních solí skyselinami, jako léčiv určených pro prevenci nebo léčení osteoporózy» která vykazují malou nebo žádnou estr.ogenní aktivitu na uterus.

Konečně se vynález stýká zejména sloučenin obecného vzorce I» stejně jako jejich farmaceuticky akceptovatelných adičních solí s kyselinami» jako .léčiv· určených.pro prevenci nebo léčení osteoporózy u Sen s rizikem prsních· tumorů.

Vynález pokrývá farmaceutické směsi obsahující jako aktivní základ alespoň jedno výše uvedené léčivo.

Sloučeniny vzorce I, stejně jako jejich farmaceuticky akceptovatelné adiční soli s kyselinami» se podávají alimentární cestou, nebo parenterálně nebo lokálně, například prekutánně. nohou být předepisovány ve formě prostých nebo povlečených tablet, tobolek, granulí, čípků, pesarů, injektovatelných přípravků, mastí, krámů, gelů, mikrokuliček, implantátů, intravaginálních kroužků, náplastí, sprejů, které ss přípravu obvyklými způsoby.

L-J.

Účinný princip nebo principy v nich mohou být začleněny spolu s excipienty obvykle používanými v těchto farmaceutických kompozicích, jako je talek, arabská guma, laktosa, • 444 ···· • * • · • »·» ·· ··

I · · · » 4 4 · •·4 444

Škrob, stearan hořečnatý, kakaové máslo, vodné nebo navodné vahikuly, mastné látky živočišného nebo rostlinného původu, parafinické deriváty, glykoly, různé smáčí emulgační prostředky-a konzervační látky.

Požadované dávkování se mění podle má být léčena a způsobu podávání, například s 0,5 do 100 mg na den a dospělou osobu, když s ísperqačnx neb;

poruchy, která může měnit od podává orálně.

I a III jsou známými ©dujících patentechs

X «

Sloučeniny obecného vzrcs I sloučeninami, které se popisují v násl EP-3-0097572, FR-B-2S40S77, ΞΡ-Β-30534 kftftft 9··· • · « · k · * k ft · · · k ftft 4 • ftft ' ·· ·· ft· ft · · · • · · · • « · · · ft • ft • ft ftft

Příklady provedení vynálezu

Dále uvedené příklady ilustrují vynález bez jeho omezeni.

Příklad 1

17X? -methyl-llfi- [4- [2- (1-píperidinyl) e thoxy] fenyl] -estr< 1,3,5(10)-trien-3,17B-diol

Dehydratuje se 1,05;

:eCl,.7H₉O za sníženého tlaku oři 140 oak se přidá v inertní atmosféře a oři teolotš místnosti 10,S ml tetrahydrofuranu (tHD), pak p z o hodin se přidá při -7G C 8 micnam po oobu al etherického roztoku methyl o η ,_r lithia 1, Gí-i a míchá se po dobu 30 minut oři -75 “C. Pak této suspenze přidá 2S8 mg 3-hydroxy-llG-[i-[2-(l-piperiáiayl)sthoxy] f chyl] -e-stra-1,3,5 (10 )-trien-17-onu v roztoku vc 3 ml THP/siliporit a míchá se při této teplotě po dobu 1 hodiny.

Po přidání 15 ml nasyceného roztoku chloridu amonná· setatu se směs zfiltruje, promyje, vysuší . i ímž se získá 277 mg očekávanése vyčistí chromatografií .ethylenchlorid SO/mothanol ho a 20 ml ethylacetátu a odpaří za sníženého tlaku, č ho surového produktu. Tento produk na silikovém sloupci, eluuje směsí ra 10/hydroxid amonný 0,5. Získá se 232 mg produktu, krystalizuje ve směsi dichlormethan/isopropylether, získá 180 mg očekávaného čistého produktu.

o„ utery se reíirnz i_ s L. o J_ Z2> kJ

IR (CiíCl^j) -OH s 3602 cm atomacy

1510 cm elková absorpc r a ____ 1

1580 cm

1512 cm

-1 ,

- i:

0 « β

I « · » ♦ · · ♦

I 9 9 « » · 0 I • » ·« t 0 » * · · *

0 0 0 « · 0 · · • 0 • 0 0 0

UMS í	^ř unn _t *W»
ú g 13 X	(s)
1,29	(s)
/5 f 9 o	(m)
A 1
O , X
5,73	(d)

ho 18 £le v 17

O-CH₉-CH_o-N, CH-Ph (H_u)

Á.l z-, f ii i Uil , i i ,

Z “í

Ifj. fenylu v 11 li', E'.- fenylu v 11.

Příklad 2

11B- f4- [2-(l“piperidinyl)ethoxy] fenyl] -Ití-nor-l/eC· -pregna· 1,3,5(10)-trien-3,17B-diol

Pod inertní atmosférou se do roztoku 192 mg 11.0- [i- [2-(-l-piperidinyl) ethoxy] fenyl] -19-nor-17 «^-pregna1,3,5 (10)-tricn-2.0-in-3,17B-diolu v 16 ml ethanolu přidá 20 mg palladia na aktivovaném uhlíku (3,5 S) a míchá se pod tlakem 1660 mbar vodíku po dobu 1 hodiny 45 minut.

Suspenze se zfiltruje a odpaří za sníženého tlaku. Získá se 193 mg surového produktu, který se vyčistí chromatografií na vázaném silikovém sloupci (Lichrosorb R?13), eluuje ss směsí msthanol 90/voda 10. Získá se 137 mg produktu, který se rekrystalizuje ve směsi dichlormethan/isopropylether, čímž se získá 114 g čistého produktu, který byl očekáván.

t.t. = 231 °C.

IR (CHCI,)

-OH aromáty: KIÍR (CDC1

3500 cm -i- celková absorpce

1610 cm \ 1581 cm 1512 cm

-i- 2 kapky C^D^kí) • 4

4444····

4« ·· « 4 · • · ··>

• 4 4 · · • »4 · • 4 »« • 4

4 4 • · * • »·

4 •

• 44 4

0,47	(s)	Ke 18
1,01	(t)	^CH2%
9 ,* Ί 4. f i		-kh₂-u-Ch₂_ _(?iparidin)
2,71		0-CK₉-Cá₂-k
3,9 9	(m)	0-CH_o-CH₉-H, CH-Ph (Π_Ί,
3,43	(dd)
S ,59		H'~, K',-, (fenyl v 11)
ř> / O .2»	(d)	H,_t (kruh A),
5,30	(d)	H-. (kruh A) ,
5, y 5		i-l'_o, H' ~ fenylu v 11 Z o
9,34		3-OH

Příklad 3

11b- [4- [2- [2-Azabicyklo(2,2,1 )hept-2-yl] ethosy] řeny(Q-l'7 06 methyl-estra-l,3-5(10)-trisn~3-17B-áiol

Pracuje se jako v příkladu 1 za použití na začátku

3,70 c? Čokl.. .7ΣΚΟ a 37 ml tetrahydrofuranu v 5,7 ml cthsrickéú z ho roztoku methyllithia (1,5 3}» Do získaní suspenze ochlazené na -73 °C se pomalu přidá 336 mg llř-[4-[2-[2-azabioyklo(2,2,1)hspt-2-yljethoxy1jf enylj-3-hydroxyestra-I,3,5(10)trien17-onu v roztoku 8 ml tetrahydrofuranu, míchá se po dobu 35 minut a pokračuje syntéza jako v příkladu 1. Získá se 874 mg surového produktu. Po chromatografii na silice (eluent t« «£

SH,,OH SO-10-0,7 AcOEt-ISA 88-12) se získá 442 mg očekávaného * Q produktu, t.t. - 153-164 C.

IR (CHCI-) «3 ♦

3502 cm ¹ + celková absorpce 1610 cm^-1, 1581 cm¹, 1512 cm¹

- OK: aromatv:

0,51	( 3 )	he v 13
1,23	(t)	Ms v 17
3,35	až 4,05 0-¾-CIL·	.-K, CH-Ph(L-_u)
5,41		IM,, II.:., kruh h Z L·
0,77		H.j z kruhu A
3,45	- 5,S5	H z fenylu v 11

Příprava 11B- [4-[2-[2-azabicyklo(2,2,1)hept-2 -ylj ethoxyjfenyl]3-hyóroxyestra-l,3,5{10)-trien-17-onu použitého jako startovací sloučena z příkladu 3

Sraíchá se 1,1 g 3-hydroxy-llfi-£4-(jodethoxy)fenyl]astra-1,3,5{10)-trien-17-on v roztoku ve 20 ml tetrahydrofuranu a 1,03 g 2-azabicyklo fž, 2, l]heptah a raíchá sé po dobu· 1,5 hodiny při'refluxňí teplotě pod dusíkovou atmosférou. Odpaří se tetrahydrofuran, zbytek se vyzvěděn v ethylacetátu, přidá se voda, extrahuje ss ethylacetátem, vysuli, odpaří rozpouštědlo a 00 chromatografii přes siliku (eluent CM_oCl_o-CH^0H-nH.,0h 33-10-0,5) se získá 0,37 g očekávaného produktu.

Rf=0, 27 .

17« -niethyl-ΙΙβ- jýi- [2-(1-pyrrolidinyl)ethoxy] f enylJ.ástra-1,3,5(10)-trien-3,173-diol

Pracuje ss jako v příkladu 1 za použití na začátku 3,24 g CeCl-j.Vř^O, 30 ml tetrahydrofuranu, 5,85 ral methyllithia, pak 050 mg 3-hydroxy-113-[·!-[2-{1-pyrrolidinyl) ethoxyj fenyl]-estra-1,3,5(10)-trien-17 -onu v roztoku 8,5 ml tetrahydrofuranu. Po chromatografii přes siliku (eluent: CH^Cl_n-CH,OHΑλ ·· ···· · · ·· •·· 999

9

9 9 ΐϊΗ,ΟΗ 92-8-1/5) se získá S15 g očekávaného produktu t.t. = 155-157 °G.

IR (CHCl_q)

-OH:

aromaty:

NliH (CDCl-J

3603 cm -ί-celková absoroce

-Ί -1 -1

1510 cm 1581 ca , 1512 cm

51	(s)	Me v 18
z! 9 99	(s)	Me v 17 Α — „nn —Λ 7 </ .‘.J f
□ 0	(dd)	ί 12 X. i* H il
40	(d)	a,, kruh A
77	(d)	kruh A
		r- t
49-	6, y t>	H z renyiu v

Příprava 3-hydroxy-llB- [4- [.2- (1-pyrrolidiriyl }ethoxy] fenyl]·estřa-1,3,5(10)-trien-17-on použitý jako výchozí sloučenina' z příkladu 4

Pracuje se jako při přípravě výchozího produktu z přikladu 3 za použití 1,1 g jodstsroidového derivátu ve 20 ml tetrahydrofuranu a 1 ml pyrrolidinu.. Získá se 854 mg očekávaného produktu po chromatografii na silice (aluent: CH„C1,,-CH.-,,QH~ - ,0 z, J

NH_ZOH 92-8-0,2. Rf = 0,29.

Příklad 5

118- pí- [2-(diethylamino)ethoxy]fenylj-17 -methyl-estra-l,3,5(10)-trien-3,17B-diol

Pracuje se jako v příkladu 1 za použití na začátku 3,62 CeCl,.7H_?O, 36 ml tetrahydrofuranu a 6,5 ml methyllithia v etheru (1,6 ml) pak 898 mg 3-hydroxy-llfí-fl-[2-(diethyl00 00 » 0 0 0

I 0 0 0

0 0 0 0 0

0

0 0

- 17 0« 00 »000 0001 amino)ethoxyjfenyl]-estra-1,3,5(10)-trien-17-onu v roztoku v 9 ml tetrahydrofuranu. Po chromatografií přes siliku (eluent: 92-3-0,5) se získá 535 mg očekc váného produktu.

t.t.	= 159
IR (CKCl^)
-OH:
aromaty:
NMR	(CDCl-j
0,47	(s)
1,05	(t)
1,28	(s)
2,65	(m)
3,95	(t)
v, 31	(d)
5,33	(dd)
o, 8 0	(d)
5,55	(p <2. O / >
Příprava 3
1,3,	5(10)-
přík	lad 3
tetrahydro

3502 cm celková absorpce

-1 -1

1610 cm , 1581 cm , 1512 cm (F)

1500 cm (ep)

Me 18 1*1 ( kruh A kruh A

H·^ kruh A H z fenylu v 11 zapracuje se gako-pri priprave výchozího proauxtu pro a použití 1,1 g 'jodsteroidového derivátu ve 20 ml tetrahydrofuranu a 2 ml diethylaminu. Získá ho produktu po chromatograf:

NK^OH 92-8-0,2). Rf - 0,24.

: 898 mg očekáván ho produktu po chromatografií na silice (eluent: CK^Cl^-CH^OHI · · · · · · ·

Příklad oó - (trifluVmethyl) -113- [i- [2-(1-piparidinyl) ethoxyj ťenyl] estra-l,3,5(lG)-trien-3,17B-diol

Po dobu 2 hodin při 120 °C za tlaku 10 až 2 mbar se zahřívá 83 mg tetrabutylamoniumf luoridu (í-íe ,,Νίϊ. 4ΕΜΟ) , pak •d Z se to nechá zchladnout na teplotu místnosti pod inertní atmosférou. Přidá se 237 mg 3-hydroxy-llB-[é-[2-(1-piperidinyl)ethoxyj fenylj-astra-1,3>5(10)-trien-17-onu v roztoku ve 3 ml tetrahydrofuranu , ochladí ss na 4 °C a přidá se 0,3 ml trimethyl(trifluormethyl)silanu, pak se míchá po dobu 2 hodin při táto •teplotě. Přidají se i ml tetrahydrofuranu, míchá se po dobu 3,5 hodiny při teplotě místnosti, přidá se voda, extrahuje se methylenchloridem, promyje vodou, vysuší a odpaří rozpouštědla za sníženého tlaku. Chromatografuja se zbytek přes siláku (sluent: CH_oCl₉-He0H-NH_z0K 9-10-0,1 a získá se 127 mg očekávaného produktu.

IH (CuCl₃) -OH:
aromaty:
KMR	(CDC1,)
0,55	(s)
4,00	(m)
5,37	(dd)
5,41	- 5,93
8,41	(d)
5,77	(d)

3593 c, -i- celková absorpce 1510 cm ^x, 1580 cm 1512 cm

Me 18

O-CH_o-CH_oN, CH-Ph (H₁₁)

Up kruh Λ

H%, ' (fenyl v 11}

H , kruh A 4 kruh A

4444 ·· ···· 44 ·· » · 4 4 4 ····( • · _ 1 Q · ·· ·· ··

Xif Ť · · · · ·

444 444

4 • 4 4 4

Parmakologickc testy

1) Účine,: n?. proliferaci prsních buněk.

Prolifarační aktivita molekul se zkoumá ve srovnání a proliřsraoní aktivitou estradiolu na lidsko prsní buňky mciv kulturo.

k demonstraci agenistichého účinku estradiolu a/nob testovaných molekul se kultivační medium pro udržování buněk (bohatých na růstové faktory a na steroidy) nahradí ochuzeným mediem, postrádá jícím nozi jiným steroidy (Dilčtl doplněni 5 % desteroidizovaného sera a bez fenolové čei-vcnč). Buňky podstupují tomuto ochuzení 2 dny před zahájením testu.

Po 7 dnech kultivace v přítomnosti produktů, které se zkoumají, se proliferacc buněk vyhodnotí zkouškou Dkk.

V každém testu se účinek estradiolu při .10 **θί-ΐ (buněčný růst v přítomnosti estradiolu minus buněčný růst v přítomnosti rozpouštědla) určí lOOSní agonistická aktivita. Aktivita molekul se vyhodnotí ve srovnání s tímto vnitřním standardem. Molekuly zajištující buněčný růst identický buněčnému růstu zjištěnému so samotným rozpouštědlem jsou vyhodnoceny jako “inaktivní, ty, které poskytují buněčný růst menší než buněčný růst získán s rozpouštědlem jsou vyhodnoceny jako inhibiční.

E2	příkl.2	příkl.3
aktivita agonistická	inaktivní	inhibiční

2) Sloučeniny podle vynálezu jsou testovány účinku na kostní hmotu a na aktivitu tvorby lu krysích samic ovariektomizovaných ve věku Zvířata dostávají preventivní ošetření.

k určení jejich a resorpce u mo: 3 měsíců.

• · ·· ·· • · · · · · ···· · · · · • · ·· ··· ··· • · · · · •» · · · ·

32.

Sprague-Dawley samice

250 g až 280 g ········

Zvířata:

Grun kmen pohlaví hmotnost počet zvířat/skupins ³rodU;

stovanv produkt: produkt z příkladu 1

- vehikula: kukuřičný olej, methylcelulosa 0,5'%

- dávky: jedna dávka na testovaný produkt (0,3 mg/kg/den)

- počet podání: jednou/den, 5 dní/týdsn po dobu 4 týdnů

- způsob podání: orálně pro produkty

- objemy: 5 rnl/kg (p.o.)

- doba mezi poslední injekcí a usmrcením: 24 hodin

- počet oddání: 20

- referenční produkt:

17fí~estradiol se podává subkutánně v dávcs toku ve směsi oleje z kukuřičných klíčků (93:1, obj/obj) v objemu 0,2 ml/kg.

0,1 mg/kg/den v rozbenzylalkoholu

Experimentální postup

Zvířata

Studie se or· na rrvs τ ovariekoraizovány ve věku 3 měsíců. Zvířata klimatizované místnosti (teplota 20 °C ·> 2 jsou udržována v °C) se skupinami po 4 v boxech. Zvířata dostávají ad libitum, demineralizovanou vodu a lisovanou potravu (pelety: A0iCR-lQ UAk).

• · · « «

— Zl — »··· · · ··

Cmrurgie

Krysí samice ve věku 3 měsíců, vážící asi 250 g, se ovariektomizují za anestézie pomocí Imalgenu 1000, v dávce 100 mg/kg intraperitoneálnš '(i.p.) a v objemu 1 ml/kg.

Dostávají také Nembutal (3 mg/kg i.p. v objemu 0,3 ml/kg).

Po latsrální incisi ss rozříznou vrstvy kuše a svalu. Excise každého vajěčníku se provede .po podvázání vejcovodu.

SHAí-i kontrolní krysy se anestetizují za stejných podmínek. Po incisi vrstev kůže a svalu se každý vaječník obnaží a pak se nahradí in šitu.

Ošetření

Účinky produktů se určují při preventivním ošetření. Podávají se ihned po ovariektomii. Zvířata se. rozdělí do skupin po 3.

Skupina 1: SlíAIi” kontrolní krysy dostávající vehikulum nebo vehikula

Skupina 2: Ovk kontrolní krysy dostávající vehikulum nebo vehikula

Skupiny X: ”07Κ'' krysy dostávající příslušně stanovené dávky produktu nebo produktů, které mají být testovány.

Vzorky krve

Ka konci 4 týdně (trvání studie) se zvířata usmrtí gilotinou. Séra sdružená po odstředění ss uskladní při teplotě -20 °C. Tuková bilance se vyhotoví ze sérových zkoušek celkového cholesterolu, triglyceridů a fosfolipidů v 500 mikrolitrovém alikvotu séra.

Pokles úrovně sérového cholesterolu se vyjádří procenticky ve vztahu k úrovni zjištěné pro ovariektomizované zvířata dostáOO1 .'LJUlO .

vzorky organu

Po usmrcení zvířat se odstraní následující orgány:

- genitální trakt

Odstraní se dělohy. Ty se zváží. Vzrůst hmotnosti se vyjádří procenticky k hmotnosti dělohy ovariektomizovaných zvířat , která dostávala pouze rozpouštědlo.

“* K O 3 u

Kostní hmota (BKO neboli Bone Minerál Density) sa měří dvojnásobně energetickou X paprskovou .dvoufotonovou .absorpciometrií (DSXA) . Měření se provádějí na kostech po excisi a po odstranění všech měkkých tkání. BKD se měří na celí kosti a na metafýzní oblasti u proximálního konce levé tibie. Tato zóna se definuje jako oblast, která je nejbohatší, pokud jde o kostní trámcinu, a tudíž js nejcitlivější vůči změnám v objemu kosti a kostní minerální hustoty.

Výsledky se vyjádří procenticky při použití

V2O17CC !

EXD testovaného produktu - BXD 07k

OVI

100 • · · · • · · · • ·

	Dávka	OS TIBIE	UTERUS	Cholest.
	mg/kg	hustota %	hmotnost %
E2	Os>il sc	105	359	- 35
Příkl. 1	0,3 po	75	76	- 43
Příkl. 3	0,3 po	46	37	- 40
OVX		0
SHAM		100

Závěry

Sloučeniny podle vynálezu poskytují účinnou kostní ochranu (=75 %), přičemž vykazují minimální uterotrofní aktivitu ve srovnání s aktivitou vyvolanou estradiolem. Navíc se získá významný pokles celkové úrovně cholesterolu.

'-řť 22.

• 999 · ♦ 9 · 9 9 ·

9 9 9999 9 99 «

9 · 9 99 99 999 999

9 999» · 9

99999999 99 99 «♦ 99

Ρ Δ ΐ Ξ K ř O V É H Á R O S Ϊ

ve kterém n bua Pj a :

Claims

_tidentické nebo rozdílné, představuji atom vodíku nebo alkylovou skupinu_zobsahující 1 až 4 atomy uhlíku πολ ^Í%1 tvoří spolu s atomem dusíku, ks kterému jsou vázány, aromatický nebo nearomatický, nasycený nebo nenasycený, monocyklický nebo polycyklický heterocykl s 5 až 15 členy, případně obsahující 1 až 3 další heteroatomy zvolené z kyslíku, síry a dusíku», substituovaný nebo nesubstítuovaný, představuje případně esterifikovanou hydroxylovou SX uoinu a

Y představuje alkylovou skupinu obsahující 1 &ž 4 atomy uhlíku, substituovanou nebo nesubstituovanou, stejně jako jejich adiční soli s farmaceuticky akceptovateln ými kyselinami.

• · • 9 9

9 9 9 • »9 9

9 9 · · «* » · · ♦ 9 1 • · 9 I • · ♦ 9 I »999 999· ·· ·· <♦ ♦·
2. Sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, kde n se rovná 2, stejně jako jejich farmaceuticky akceptovatelné adiční soli s kyselinami..

Sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 nebo

2, kde n se rovná 2, y

ťMIZS U>

bud a ^2' které mohou být identické nebo rozdílné, představují alkylovou skupinu^obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nebo R^ a R_? tvoří společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, piperidino, pyrrolidino nebo 2-azabicyklo(2,2,1)hept2-ylovou skupinu, k představuje hydroxylovou skupinu a

Y představuje methylovou nebo ethylovou skupinu, stejně jako jejich farmaceuticky akceptovatelné adiční soli s kyselinami.

4. Sloučeniny obecného-vzorce I podle kteréhokoli z nároků 1 až 3, stejně 'jakojejich farmaceuticky' akceptovatelné adiční soli s kyselinami, kterými jsou

11B-]4-[2—(1-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-19-nor-17 oG -pregna-13,5(10)-trien-3,17B-diol,

17 oč -methyl-llB-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-estra1,3,5(10)-trien-3,17fí-diol,

17 oC -methyl-llB-[4-[2-(diethylamino)ethoxy]fenyl]-estral,3,5(10)-3,17B-diol

17 oó -methyl-116-[4-[2-(1-pyrrolidinyl)ethoxy]fenyl] estra1,3,5(10)-trien-3,17B-diol,

17 oC -methyl-llB-[4-[2-(2-azabicyklo(2,2,1)hept-2-yl)ethoxy] fenyl]-estra-l,3,5(10)-trien-3,17fi-diol,

44 ·« » 4 4 *

1« 44 • · · » • · · · •444 4444

4 4 44 4 * 44 4 444

4 4 4 4 4 4

14 4 4 4 · 4 4

11β-[4-[2-(2-asabicyklo(2,2,1)hept-2-yl)ethoxý] fenyl]-1917 oC -pregna-1,3,5(10)-trien-3,17ř-diol, nor17 eó - (trifluormehyl) -11β- [·!- Í2- (i-piparidinyl ) ethoxy] f eny l] —e s tr u—1, η, o (1U ) — tr re n—3,17 3—ctiol ·

5. Způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I oodl;

nároku 1 vyznačený tím, če sloučenina obecného vzorce II *1 (II) vo ktekrém n, R^ a R.-_; mají význam definovaný v nároku 1, ss podrobí působení organokovové sloučeniny odvozené od alkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlínu/ tak, že se vytvoří sloučeniny vzorce I, kde X je hydroxylová skupina a Y je alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, tato sloučenina vzorce 1 se podrobí, když je třeba,.csterifikační reakci 17-OH a/nebo salifikační reakci.

o. Způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I podle nároku 1 s Y představujícím alkylovou skupinu obsahující 2 až 4 atomy uhlíku, vyznačený tím, že sloučenina obecného vzorce III ve kterém η, a mají dříve uvedený význam a ve kterém v' představuje alkenylovou nebo alkinylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, se podrobí působení redukčního prostředku dvojné vazby noho trojné vazby, aby ss získaly sloučeniny vzorce I, ve kterém X je hydro-xýlová skupina a Y je alkylová skupina obsahující 2 až 4 atomy uhlíku, přičemž tato sloučenina vzorce I ss podrobí, když ja třeba, esterif ikační reakci 17-021 a/nebo salifikační reakci.

7. Sloučeniny obecného vsorca I podle nároku 1 jako léčiva.

8. Sloučeniny obecného vzorce I podle nároků 2, 3 nebo 4 jako léčiva.
3. Sloučeniny obecného vzorce i podle nároku I jako léčiva pro hormonální nahrazovací terapii při menopauze nebo perimenopauze, zejména pro prevenci nebo léčení osteoporózy, které vykazují slabou nebo žádnou estrogenní aktivitu,pokud jde o uterus.

99 9949 • 9 «99 9