CZ207498A3 - Laktonové deriváty androstanových sloučenin - Google Patents

Description

Laktonové deriváty androstanových sloučenin

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká nových protizánětlivých a antialergických sloučenin androstanové řady a způsobu jejich výroby. Předkládaný vynález se také týká farmaceutických prostředků obsahujících sloučeniny a jejich terapeutického použití, zvláště pro léčení protizánětlivých a alergických stavů.

Dosavadní stav techniky

Glukokortikosteroidy, které mají protizánětlivé vlastnosti, jsou známy a široce používány pro léčení zánětlivých poruch nebo onemocnění, jako je astma a zánět nosní sliznice. Obecně však mohou glukokortikosteroidy po podání nevýhodně působit nežádoucí systémové účinky. WO94/13690, WO94/14834, WO92/13873 a

WO92/13872 všechny popisují glukokortikosteroidy, které mají údajně protizánětlivý účinek spojený se sníženým systémovým účinkem.

Předkládaný vynález poskytuje novou skupinu sloučenin s užitečným protizánětlivým účinkem při malém nebo žádném systémovém účinku. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu tedy

2o představují bezpečnější alternativu k těm známým glukokortikoidům, které mají nevhodný profil vedlejších účinků.

Podstata vynálezu

Podle jednoho hlediska vynálezu se poskytuje sloučenina vzorce (I)

Ř_s a její solváty, kde Ri znamená O, S nebo NH;

R₂ jednotlivě znamená 0C(=0)Ci-6 alkyl;

R₃ jednotlivě znamená atom vodíku, methyl (který může být buď v konfiguraci a nebo β) nebo methylen; nebo R₂ a R₃ spolu znamenají

-O R«

C / \

-O Rt kde R₆ a R₇ jsou stejné nebo různé a každý znamená atom vodíku nebo alkyl;

R₄ a R₅ jsou stejné nebo různé a každý znamená atom vodíku 20 nebo halogenu; a znamená jednoduchou nebo dvojnou vazbu.

Ve výše uvedených definicích znamená termín „alkyl“ jako skupina nebo část skupiny alkylovou skupinu s přímým řetězcem, nebo kde je to možné alkylovou skupinu s větveným řetězcem.

Například může znamenat Ci.₄ alkylovou funkční skupinu jako methyl, ethyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl a t-butyl.

• · ·

Solváty mohou být například hydráty.

Dále uváděné odkazy na sloučeniny podle vynálezu zahrnují jak sloučeniny vzorce (I), tak i jejich solváty, zvláště farmaceuticky přijatelné solváty. Bude zřejmé, že vynález zahrnuje ve svém rámci všechny stereoizomery sloučenin vzorce (1) a jejich směsi.

Je zřejmé, že sloučeniny vzorce (I) obsahují konkrétně asymetrické centrum v místě připojení laktonové skupiny. Vynález tedy ve svém rámci zahrnuje jak diastereoizomery v tomto asymetrickém centru, tak i jejich směsi.

V rámci vynálezu jsou také zahrnuty diastereomery a jejich směsi na asymetrickém centru, které se vytvoří jestliže R₂ a R₃ spolu znamenají a R₆ a R₇ jsou různé.

Ri může být navázán na atomy uhlíku alfa, beta nebo gama laktonové skupiny α β ale sloučeniny vzorce (I), ve kterých Ri je navázán na atom alfa jsou obecně výhodné.

Výhodnou skupinou sloučenin podle vynálezu jsou sloučeniny vzorce (l), ve kterých Ri znamená atom kyslíku nebo síry zvláště síry.

Další výhodnou skupinou sloučenin podle vynálezu jsou sloučeniny vzorce (l), ve kterých R₂ jednotlivě znamená 0C(=0)Ci-6

alkyi, výhodněji OC(=O)C-i-₃ alkyl, zvláště OC(=O)ethyl. Sloučeniny v této skupině, ve kterých R₃ znamená methyl, jsou obecně výhodné.

Další výhodnou skupinou sloučenin jsou sloučeniny vzorce (I), ve kterých R₂ a R₃ spolu znamenají

Λ

A —o r₇ kde R₆ a R₇ jsou stejné nebo různé a každý znamená atom vodíku nebo alkyl, zvláště atom vodíku nebo Cv₃ alkyl, zvláště atom vodíku, methyl nebo n-propyl.

Sloučeniny vzorce (I), ve kterých R₄ a R₅, které mohou být stejné nebo různé, znamenají každý atom vodíku, fluoru nebo chloru, zvláště atom vodíku nebo atom fluoru jsou výhodné. Zvláště výhodné jsou sloučeniny, ve kterých R₄ a R₅ jsou oba atomy fluoru.

Zvláště výhodnou skupinou sloučenin podle předkládaného vynálezu jsou sloučeniny vzorce (I), kde R! znamená S; R₂ znamená OC(=O)C-i_6 alkyl, zvláště 00(=0)(7.3 alkyl, zvláště OC(=O)ethyl; R₃ je methyl; R₄ a R₅, které mohou být stejné nebo různé, znamenají každý atom vodíku nebo fluoru, zvláště fluoru, a znamená jednoduchou nebo dvojnou vazbu.

Další zvláště výhodnou skupinou sloučenin podle vynálezu jsou sloučeniny vzorce (l), kde R! je S; R₂ a R₃ spolu znamenají kde R₆ a R₇ jsou stejné nebo různé a každý znamená atom vodíku nebo alkyl, zvláště atom vodíku nebo Ci-₃ alkyl, zvláště atom vodíku, methyl nebo n-propyl; R₄ a R₅, které mohou být stejné nebo různé, znamenají každý atom vodíku nebo fluoru, zvláště fluoru;

• · · · · · · a---znamená jednoduchou nebo dvojnou vazbu. R-izomery sloučenin v této skupině, ve kterých R₆ a R₇ jsou různé, jsou výhodné.

Je třeba rozumět, že předkládaný vynález pokrývá všechny kombinace skupin a výhodných skupin uvedených výše.

Sloučeniny vzorce (I) zahrnují:

S-(2-oxo-tetrahydro-furan-3-yl)ester kyseliny 17a-butyryloxy6a,9a-difluor-1 ip-hydroxy-16a-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17pkarbothioové;

S-(2-oxo-tetrahydro-furan-3-yl)ester kyseliny 17a-acetyloxy10 6a,9a-difluor-113-hydroxy-16a-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17pkarbothioové;

S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 9a-fluor-11 βhydroxy-16p-methyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4-dien-17βkarbothioové;

S-(5-oxo-tetrahydro-furan-2-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11βhydroxy-16a-methyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4-dien-17βkarbothioové;

S-(2-oxo-tetrahydro-furan-4-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11 βhydroxy-16a-methyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4^ίβη-17β20 karbothioové;

(2-oxo-tetrahydro-furan-3-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11βhydroxy-16a-methyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4^ίθη-17βkarboxylové;

(2-oxo-tetrahydro-furan-5-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11β25 hydroxy-16a-methyi-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4-dien-17βkarboxylové;

S-(2-oxo-tetrahydro-furan-5-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11βhydroxy-16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17βkarbothioové;

S-(2-oxo-tetrahydro-furan-3-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11β5 hydroxy-16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androst-4-en-17βkarbothioové;

N-(2-oxo-tetrahydro-furan-3-yl)amid kyseliny 6a,9a-difluor-11βhydroxy-16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17βkarboxylové;

ío (2-oxo-tetrahydro-furan-3-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11βhydroxy-16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17βkarboxylové;

S-(2-oxo-tetrahydro-furan-3-yl)ester kyseliny 16a, 17abutylidendioxy-11 β-hydroxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17p15 karbothioové;

S-(2-oxo-tetrahydro-furan-3-yl)ester kyseliny 16a,17a-(Rbutylidendioxy)-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-3-oxo-androsta-1,4-dien17p-karbothioové;

(2-oxo-tetrahydro-furan-3-yl)ester kyseliny 16a, 17a2o butylidendioxy-11 β-hydroxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β^8ή3<^Ιονέ;

N-(2-oxo-tetrahydro-furan-3-yl)amid kyseliny 16a,17a-(Rbutylidendioxy)-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-3-oxo-androst-4-en-17βkarboxylové;

N-(2-oxo-tetrahydro-furan-4-yl)amid kyseliny 6a,9a-difluor-11 β25 hydroxy-16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17βkarboxylové;

(5-oxo-tetrahydro-furan-2-yl)ester kyseliny 16a,17a-(Rbutylidendioxy)-6a,9a-difluor-113-hydroxy-3-oxo-androst-4-en-17βkarbothioové;

a jejich solváty.

Výhodnými sloučeninami vzorce (I) jsou:

S-(2-oxo-tetrahydro-furan-3-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11 βhydroxy-16a-methyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4-dien-17pkarbothioové;

S-(2-oxo-tetrahydro-furan-3-yi)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11 βίο hydroxy-16a-methyi-3-oxo-17a-propionyloxy-androst-4-en-'^karbothioové;

S-(2-oxo-tetrahydro-furan-3-yi)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11 βhydroxy-16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17βkarbothioové;

S-(2-oxo-tetrahydro-furan-3-yl)ester kyseliny 16a,17a-(Rbutylidendioxy)-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-3-oxo-androst-4-en-17βkarbothioové;

a jejich solváty.

Je zřejmé, že každá z uvedených sloučenin vzorce (I) zahrnuje

2o jednotlivé diastereoizomery R a S na asymetrickém centru v bodě připojení laktonové skupiny stejně jako jejich směsi. Dále bude zřejmé, že sloučeniny vzorce (I) mohou zahrnovat jednotlivé diastereoizomery R a S v asymetrickém centru vytvořeném v případě, když R₂ a R₃ spolu znamenají

··· · • · ·· « kde R₆ a R₇ jsou různé, stejně jako jejich směsi. Jednotlivé diastereoizomery R a S izolované tak, aby byly v podstatě prosté jiného diastereoizomeru, tj. čisté, a jejich směsi jsou rovněž zahrnuty v rámci předkládaného vynálezu. Jednotlivý R nebo S diastereoizomer izolovaný tak, aby byl v podstatě prostý druhého diastereoizomeru, tj. čistý bude s výhodou izolován tak, že je přítomno méně než 10 %, s výhodou méně než 1 % a zvláště méně než 0,1 % druhého diastereoizomeru.

Sloučeniny vzorce (I) mají potenciálně prospěšné protizánětlivé ío nebo antialergické účinky, zvláště po místním podání, což je ukázáno například jejich schopností vázat se na receptor pro glukokortikoidy a vyvolat odezvu prostřednictvím tohoto receptorů. Sloučeniny vzorce (I) jsou proto užitečné při léčení zánětlivých a/nebo alergických poruch. Sloučeniny vzorce (I) mají dále výhodu v tom, že vyvolávají malé nebo žádné systémové účinky. Proto mohou představovat sloučeniny podle vynálezu bezpečnější alternativu ke známým protizánětlivým glukokortikoidům, které mají špatný profil vedlejších účinků.

Příklady onemocnění, u kterých jsou použitelné sloučeniny

2o podle vynálezu jsou kožní onemocnění, jako je ekzém, lupénka, alergická dermatitida, neurodermatitida, svědivé stavy a reakce přecitlivělosti; zánětlivé stavy nosohltanu nebo plic jako je astma (včetně alergeny indukované astmatické reakce), rýma (včetně senné rýmy), nosní polypy, chronické obstruktivní plicní onemocnění, intersticiální plicní onemocnění a fibróza; zánětlivé stavy tračníku, jako je ulcerativní kolitida a Crohnova nemoc; a autoimunitní onemocnění jako je revmatoidní artritida.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být také použity při léčení spojivek a zánětů spojivek.

3o Odborníkům v oboru bude zřejmé, že odkazy na léčení se budou týkat prevence i léčení uvedených stavů.

• · • ·

Jak je uvedeno výše, sloučeniny vzorce (I) jsou použitelné v humánní nebo veterinární medicíně, zvláště jako protizánětlivé a antialergické prostředky.

Jako další hledisko vynálezu se tedy poskytuje sloučenina 5 vzorce (I) nebo její fyziologicky přijatelný solvát pro použití v humánní nebo veterinární medicíně, zvláště při léčení pacientů trpících zánětlivými a/nebo alergickými stavy. Podle dalšího hlediska vynálezu se poskytuje použití sloučeniny vzorce (I) nebo jejího fyziologicky přijatelného solvátu pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení pacientů trpících zánětlivými a/nebo alergickými stavy. V dalším alternativním hledisku se poskytuje způsob léčení člověka nebo zvířete trpícího zánětlivým a/nebo alergickým stavem, který zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny vzorce (I) nebo jejího fyziologicky přijatelného solvátu uvedenému člověku nebo zvířeti.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být upraveny pro podávání jakýmkoliv běžným způsobem a vynález také zahrnuje ve svém rámci farmaceutické prostředky obsahující sloučeninu vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelný solvát v případě potřeby ve směsi s jedním nebo více fyziologicky přijatelnými ředivy nebo nosiči.

2o Dále se poskytuje způsob výroby těchto farmaceutických prostředků, který zahrnuje míšení složek.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být například upraveny pro orální, bukální, sublingvální, parenterální, lokální nebo rektální podávání, zvláště pro lokální podávání. Lokální podávání jak se zde

2s používá zahrnuje podávání insuflací nebo inhalací. Příklady různých typů prostředků pro lokální podávání zahrnují masti, roztoky, krémy, gely, pěny, prostředky pro dodávání transdermální náplastí, prášky, spreje, aerosoly, kapsle nebo balené dávky pro použití v inhalátorech nebo insuflátorech nebo kapky (např. oční nebo nosní kapky), roztoky/suspenze pro rozprašování, čípky, pesary, žvýkatelné nebo • · polykatelné tablety (např. pro léčení aftózních vředů, nebo lipozomy nebo mikrozapouzdřené prostředky.

Masti, krémy a gely mohou být například vytvořeny s vodnou nebo olejovou bází s přídavkem vodného zahušťujícího a/nebo gelujícího prostředku a/nebo rozpouštědel. Tyto báze mohou tedy například obsahovat vodu a/nebo olej jako je tekutý parafín nebo rostlinný olej, jako je arašídový olej nebo ricinový olej, nebo rozpouštědlo jako je polyethylenglykol. Zahušťující prostředky a gelující prostředky, které mohou být použity podle povahy základu zahrnují měkký parafin, stearan hlinitý, cetostearylalkohol, polyethylenglykoly, tuk z ovčí vlny, včelí vosk, karboxypolymethylenové a celulózové deriváty a/nebo monostearát glycerolu a/nebo neiontové emulgační prostředky.

Tekutiny k omývání mohou být vytvořeny s vodným nebo olejovým základem a budou obecně obsahovat jeden nebo více emulgačních prostředků, stabilizačních prostředků, dispergačních prostředků, suspendujících prostředků nebo zahušťujících prostředků.

Prášky pro externí aplikaci mohou být formulovány za pomoci jakéhokoli vhodného práškového základu, například talku, laktózy

2o nebo škrobu. Kapky mohou být vytvořeny s vodnou nebo nevodnou bází a mohou obsahovat také jeden nebo více dispergujících prostředků, solubilizujících prostředků, suspendujících prostředků nebo ochranných látek.

Prostředky ve formě spreje mohou být například formulovány jako vodné roztoky nebo suspenze nebo jako aerosoly dodávané z tlakových balení, jako je inhalátor s odměřovanou dávkou, s použitím vhodného zkapalněného hnacího prostředku. Aerosolové prostředky vhodné pro inhalaci mohou být buď ve formě suspenze nebo roztoku a mohou obecně obsahovat sloučeninu vzorce (I) a vhodný hnací prostředek, jako je fluorovaný uhlovodík nebo chlorovaný a fluorovaný uhlovodík obsahující vodík nebo jejich směsi, ·· ·· • · · · • * ·· » · · · « • 9 9 ♦

99

99 · · · • · · · ♦ 9 ··· • · · «· ··

99 • 9 9 · • · ··

99· 9 · • · · *· zvláště hydrofluoroalkany, zejména 1,1,1,2-tetrafluorethan, 1,1,1,2,3,3,3-heptafluor-n-propan nebo jejich směsi. Aerosolová směs může popřípadě obsahovat další pomocné látky dobře známé v oboru jako jsou povrchově aktivní látky, například kyselina olejová nebo lecitin a pomocná rozpouštědla, například ethanoi.

S výhodou mohou být prostředky podle vynálezu pufrovány přídavkem vhodných pufračních prostředků.

Kapsle nebo balené dávky (cartridges) pro použití v inhalátoru nebo insuflátoru jako například z želatiny mohou být vytvořeny tak, že io obsahují práškovou směs pro inhalaci sloučeniny podle vynálezu a vhodný práškový základ, jako je laktóza nebo škrob. Každá kapsle nebo balená dávka může obvykle obsahovat mezi 20 pg a 10 mg sloučeniny vzorce (I). Alternativně může být sloučenina podle vynálezu přítomna bez pomocných látek jako je laktóza.

Podíl aktivní sloučeniny vzorce (I) v prostředcích pro místní podávání podle vynálezu závisí na přesném typu připravovaného prostředku a bude obecně v rozmezí od 0,001 do 10 % hmotnostních. Obecně však bude pro většinu typů prostředků použitý podíl s výhodou v rozmezí od 0,005 do 1 % a s výhodou 0,01 až 0,5 %

2o hmotnostních. U prášků pro inhalaci nebo insuflaci budou však použité podíly v rozmezí od 0,1 do 5 %.

Aerosolové prostředky jsou s výhodou uspořádány tak, že každá odměřená dávka nebo „vystříknutí“ aerosolu obsahuje 20 pg až 2000 pg, s výhodou přibližně 20 pg až 500 pg sloučeniny vzorce (I).

Podávání může probíhat jednou za den nebo několikrát denně, například 2, 3, 4 nebo 8 x, při podání pokaždé například 1, 2 nebo 3 dávek. Celková denní dávka u aerosolu bude v rozmezí 100 pg až 10 mg, s výhodou 200 pg až 2000 pg. Celková denní dávka a odměřená dávka podávaná v kapslích a balených dávkách v inhalátoru nebo insuflátoru bude obecně dvojnásobná než dávka použitá u aerosolových prostředků.

• · • · • ·

- 12 Místní prostředky mohou být podávány v jedné nebo více aplikacích za den na postiženou oblast; s výhodou mohou být použity přes oblasti kůže krycí obvazy. Trvalé nebo prodloužené podávání může být dosaženo adhezívním zásobním systémem.

Pro vnitřní podávání mohou být sestaveny prostředky podle vynálezu obvyklým způsobem pro orální, parenterální nebo rektální podávání. Prostředky pro orální podávání zahrnují sirupy, elixíry, prášky, granule, tablety a kapsle, které typicky obsahují běžné pomocné látky, jako jsou vazné prostředky, plniva, kluzné látky, rozvolňovadla, smáčedla, suspendující prostředky, emulgační prostředky, ochranné látky, pufrační soli, ochucovací prostředky, barviva a/nebo sladidla podle potřeby. Výhodné jsou však dávkovači formy uváděné níže.

Výhodné formy prostředků pro vnitřní podávání jsou jednotkové dávkovači formy, tj. tablety a kapsle. Tyto jednotkové dávkovači formy obsahují od 0,1 mg do 20 mg, s výhodou od 2,5 do 10 mg sloučenin podle vynálezu.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být obecně podávány vnitřně v případech, kde je indikována systémová terapie adrenokortikoidy.

2o Obecně mohou prostředky pro vnitřní podávání obsahovat od

0,05 do 10 % aktivní složky v závislosti na typu použitého preparátu. Denní dávka může kolísat od 0,1 mg do 60 mg, například 5 až 30 mg v závislosti na léčeném stavu a trvání požadovaného léčení. Výhodné mohou být prostředky se zpomaleným uvolňováním nebo enterosolventní prostředky, zvláště pro léčení zánětlivých poruch tračníku.

Farmaceutické prostředky podle vynálezu mohou být také používány v kombinaci s dalším terapeuticky účinným prostředkem, například agonistou β₂ adrenoreceptoru nebo antihistaminikem nebo

3o antialergickým prostředkem. Vynález tedy poskytuje jako další hledisko kombinaci obsahující sloučeninu vzorce (I) nebo její • ·

- 13 fyziologicky přijatelný solvát spolu s dalším terapeuticky účinným prostředkem, například agonistou β₂ adrenoreceptoru, antihistaminikem nebo antialergickým prostředkem.

Výše uvedená kombinace může být výhodně pro použití ve s formě farmaceutického prostředku a farmaceutické prostředky tedy obsahují kombinaci jak bylo definováno výše spolu s farmaceuticky přijatelným diluentem nebo nosičem jako další hledisko vynálezu.

Jednotlivé sloučeniny takových kombinací mohou být podávány buď postupně nebo současně v oddělených nebo spojených farmaceutických prostředcích. Vhodné dávky známých terapeutických prostředků budou odborníkům v oboru zřejmé.

Sloučeniny vzorce (l) a jejich solváty mohou být vyrobeny dále popsanými způsoby, které představují další hledisko vynálezu.

Podle prvního způsobu (A) může být tedy sloučenina vzorce (!) 15 připravena smísením sloučeniny vzorce (II)

kde R₂, R₃, R4, R5 a ’⁼~⁼~- jsou jak definováno výše pro sloučeninu (!) a X znamená skupinu OH nebo její aktivovaný derivát jako je triazol nebo směsný anhydríd, se sloučeninou vzorce (III)

(lil) a jejími solemi, kde • · • · • ·

- 14 • · ·· · · · · • · · · · ·· · · i*..* • ··· · · · · · ·.

. . ......... ··· · !

• ·· · * * -* .. ..

·· ·· ·· ·· ·· ··

Z znamená skupinu OH, NH₂ nebo SH.

Sloučeniny vzorce (II), kde X znamená OH, mohou být aktivovány aktivačním činidlem jako je triazol, například 1-hydroxybenztriazol a karbodiimid jako je 1-(3-dimethylamino-propyl)-3-ethyl5 karbodiimid hydrochlorid v polárním rozpouštědle jako je dimethylformamid, pohodlně při zvýšené teplotě například přibližně 100 °C a v inertní atmosféře jako je dusík apod. za vytvoření aktivovaného derivátu sloučeniny vzorce (II), jako je triazolový derivát,

(kde R₂, R_3i R₄, R_s a — jsou jak definovány výše).

Aktivovaný derivát, který může být v případě potřeby izolován, reaguje se sloučeninou vzorce (III), kde Z znamená NH₂, SH nebo OH, za vytvoření požadované sloučeniny vzorce (I).

Bude zřejmé, že vazebná reakce může probíhat v jednom kroku bez izolace aktivovaného derivátu, jestliže je při aktivaci přítomna nebo po aktivaci přidána sloučenina vzorce (III). Alternativně může být aktivovaný derivát izolován a potom postupně smísen se sloučeninou vzorce (III) za vytvoření požadované sloučeniny vzorce (I).

Oba způsoby jsou zahrnuty do rámce předkládaného vynálezu.

Sloučeniny vzorce (I) mohou být také vyrobeny výše uvedeným způsobem (A) reakcí sloučeniny vzorce (II), kde X znamená OH se sloučeninou vzorce (III), kde Z znamená SH, OH nebo NH₂ přes meziprodukt směsného anhydridu, například směsného fosfátového • · · ·

anhydridu, jako je sloučenina vzorce (V), jak byla popsána v Kertesz a Marx, Journal of Organic Chemistry, 1986, 51, 2315-2328.

Sloučenina vzorce (II), kde X znamená OH, může být aktivována aktivačním činidlem jako je diethylchlorfosfát v přítomnosti báze jako 5 je terciární amin, například triethylamin, a ve vhodném rozpouštědle jako je chlorované rozpouštědlo, například dichlormethan, za vytvoření aktivovaného derivátu sloučeniny vzorce (II), například diethylfosfátového směsného anhydridu vzorce (V)

(kde R₂, R_3i R₄ a R₅ a jsou jak definovány výše).

Aktivovaný derivát, který může být v případě potřeby izolován, reaguje se sloučeninou vzorce (III), kde Z znamená SH, OH nebo NH₂ za vytvoření požadované sloučeniny vzorce (I).

Odborníkům v oboru bude zřejmé, že vazebná reakce může probíhat bez izolace aktivovaného derivátu, jestliže je v průběhu reakce přítomna nebo po aktivaci přidána sloučenina (III). Alternativně může být aktivovaný derivát izolován a potom smísen se sloučeninou vzorce (III) za vytvoření požadované sloučeniny vzorce (I).

Oba způsoby jsou zahrnuty do rámce předkládaného vynálezu.

Sloučeniny vzorce (I), kde R₁ znamená O nebo S mohou být vyrobeny také druhým způsobem (B), ve kterém jsou sloučeniny vzorce (II), kde R₂, R₃, R₄, R₅ a jakdefinováno výše a X znamená • ·

OH nebo SH nebo jejich odpovídající soli uvedeny do styku se sloučeninou vzorce (VI) nebo vzorce (VII)

(VI) omezil), kde Q znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu Q'ako je Cl, Br, OSO₂A, kde A je například CH₃₎ CF_3l p-CH₃C₆H₄) standardními metodami.

Výše popsaný obecný postup (B) používající sloučeniny vzorce 10 (VI) může být použit pro výrobu sloučenin vzorce (I), ve kterých R! je připojen na atomy uhlíku alfa, beta nebo gama laktonové skupiny. Sloučeniny vzorce (I), kde R; znamená O nebo S mohou být připraveny výše uvedeným způsobem (B) alkylací sloučeniny vzorce (II), kde X znamená OH nebo SH, se sloučeninou vzorce (VI), kde Q znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu s použitím způsobů známých v oboru nebo po úpravě těchto postupů.

Tak například sloučenina vzorce (I), kde R, znamená O může být vyrobena alkylací sloučeniny vzorce (II), kde X znamená OH pohodlně ve formě vhodné soli (jako je sůl s alkalickým kovem, např.

2o sůl sodná nebo kvarterní amonná sůl) se sloučeninou vzorce (VI), kde Q znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu, s výhodou chlor, brom nebo mesylát. Alkylační reakce se s výhodou provádí v přítomnosti rozpouštědla, s výhodou polárního rozpouštědla za inertních podmínek, například v dusíku apod. při teplotách mezi přibližně O °C až 100 °C. Vhodnými polárními rozpouštědly mohou být aceton, dimethylformamid, dimethylacetamid, dimethylsulfoxid, dichlormethan nebo chloroform.

Podobně sloučeniny vzorce (I), kde Ri znamená S mohou být připraveny výše popsaným způsobem (B) alkylací sloučeniny vzorce

3o (II), kde X znamená SH sloučeninou vzorce (VI), kde Q znamená • ·

- 17 • · · · · · • · · · · · · • · · · · · • · · · · · · · · • · · · · · •· «· ·· ·· vhodnou odštěpitelnou skupinu, úpravou metod popsaných v Phillipps a další, Journal of Medicinal Chemistry, 1994, 37, 3717-3729. Sloučenina vzorce (I), kde R! znamená S může být tedy připravena alkylací odpovídající sloučeniny vzorce (II), kde X znamená SH pohodlně ve formě vhodné soli (jako je sůl s alkalickým kovem např. sodíkem nebo kvarterní amoniová sůl) se sloučeninou vzorce (VI), kde Z znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu jak se popisuje výše pro podobné alkylační reakce.

Alternativně mohou být sloučeniny vzorce (I), kde Ri znamená O io nebo S, připraveny výše uvedeným způsobem (B) alkylací sloučeniny vzorce (II), kde X znamená OH nebo SH se sloučeninou vzorce (VI), kde Q znamená OH za Mitsunobuvých podmínek s použitím trifenylfosfinu a dialkylazodikarboxylátu, nebo Vilsmeierovou metodologií, jak se popisuje v Barrett a Procopiou v Journal of the

Chemical Society, Chemical Communications, 1995, 1403-1404.

Sloučenina vzorce (I), kde Ri znamená S a je navázán na atom uhlíku beta laktonové skupiny může být také vyrobena reakcí odpovídající sloučeniny vzorce (II), kde X znamená SH se sloučeninou vzorce (VII). Například Michaelovou adicí sloučeniny (II) se sloučeninou vzorce (VII) v přítomnosti báze jako je uhličitan draselný a ve vhodném rozpouštědle jako je dimethylformamid.

Sloučeniny vzorce (I) mohou být také vyrobeny z dalších sloučenin vzorce (I) s použitím běžných interkonverzních postupů jako je transacetalizace, epimerizace nebo esterifikace. Způsob výroby sloučeniny vzorce (I) vnitřní konverzí další sloučeniny vzorce (I) (způsob C) tvoří tedy další hledisko předkládaného vynálezu.

Sloučeniny vzorce (I), které mají jednoduchou vazbu 1,2 mohou být připraveny částečnou redukcí odpovídající 1,2-dvojné vazby sloučeniny běžnými způsoby. Tak například hydrogenací odpovídající

3o sloučeniny vzorce (I) nebo meziproduktu použitého pro výrobu sloučeniny vzorce (I) s použitím paladiového katalyzátoru, s výhodou • ·

- 18 ve vhodném rozpouštědle jako například ethylacetát nebo s výhodou použitím chloridu tris(trifenylfosfin)rhodného (známého jako Wilkinsonúv katalyzátor), pohodlně ve vhodném rozpouštědle jako je toluen, ethylacetát nebo ethanol.

Odborníkům v oboru bude zřejmé, že při výrobě sloučenin vzorce (I) může být žádoucí použití chráněných derivátů použitých meziproduktů. Výše uvedený postup může tedy vyžadovat odstranění ochranných skupin jako mezikrok nebo konečný krok po získání požadované sloučeniny. Podle dalšího způsobu (D) může být tedy sloučenina vzorce (I) připravena reakcí chráněného derivátu sloučeniny vzorce (l) za odstranění přítomné ochranné skupiny nebo skupin, která tvoří další hledisko předkládaného vynálezu.

Navázání a odstranění funkčních skupin je možno uskutečnit běžnými způsoby. Tak např. hydroxylové skupiny mohou být chráněny s použitím jakékoliv běžné hydroxylové ochranné skupiny, například jak se popisuje v Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J. F. W. McOmie (Plenům Press, 1973) nebo Protective Groups in Organic Synthesis by Theodora W. Green (John Wiley a Sons, 1991 ).

Příklady vhodných hydroxylových ochranných skupin zahrnují

2o skupiny zvolené z alkylu (například t-butyl nebo methoxymethyl), aralkylu (např. benzyl, difenylmethyl nebo trifenylmethyl), heterocyklických skupin jako je tetrahydropyranyl, acylu (např. acetyl nebo benzoyl) a silylových skupin jako je trialkylsilyl (např. tbutyldimethylsilyl). Hydroxylové ochranné skupiny mohou být odstraněny běžnými způsoby. Tak například alkylová, silylová, acylová a heterocyklická skupina může být odstraněna solvolýzou, např. hydrolýzou za kyselých nebo bázických podmínek. Podobně je možno solvolýzou, například hydrolýzou za kyselých podmínek odstranit aralkylové skupiny jako je trifenylmethyl. Aralkylové skupiny

3o jako je benzyl mohou být odštěpeny hydrogenolýzou v přítomnosti katalyzátoru ušlechtilého kovu, jako je paladium na aktivním uhlí.

• ·

- 19 Sloučeniny vzorců (II), (III), (IV), (V), (VI) a (VII) jsou buď sloučeniny obecně známé nebo mohou být připraveny způsoby analogickými se způsoby popsanými v oboru pro výrobu známých sloučenin vzorce (II), (III), (IV), (V), (VI) a (VII) nebo mohou být 5 připraveny tam popisovanými způsoby. Nové sloučeniny vzorců (II), (III), (IV), (V), (VI) tedy tvoří další hledisko předkládaného vynálezu.

Například sloučeniny vzorce (II), kde X znamená OH, mohou být připraveny oxidací vhodného 21-hydroxy-20-ketopregnanu vzorce (Vlil)

(kde R₂, R3, R₄, Rs a - - - jsou jak definovány výše s použitím například metod popsaných v Kertesz a Marx, Journal of Organic Chemistry, 1986, 51, 2315-2328.

Sloučeniny vzorce (Vlil) jsou komerčně dostupné, například fluocinolonacetonid, budesonid a triamcinolonacetonid jsou dostupné od firmy Sigma-Aldrich, nebo mohou být připraveny z komerčně dostupných sloučenin vzorce (Vlil), například transacetalizací popsanou v EP0262108 a parciální redukcí dvojné vazby 1,2 tam uvedenými postupy. Alternativně mohou být sloučeniny vzorce (Vlil) připraveny z komerčně dostupných 17a-hydroxylových derivátů sloučenin vzorce (Vlil), například betametazonu, flumetazonu, prednisolonu, beclometazonu a dexametazonu dostupných od firmy Sigma-Aldrich, esterifikací 17a-hydroxylové skupiny způsobem

popsaným v Gardi a další, Tetrahedron Letters, 1961, 448. Nové sloučeniny vzorce (Vlil) jsou ještě dalším hlediskem předkládaného vynálezu.

Sloučeniny vzorce (II), kde X znamená SH, mohou být vyrobeny použitím nebo přizpůsobením známých metod, například použitím metod popsaných v Phillipps a další, Journal of Medicinal Chemistry, 1994, 37, 3717-3729.

Sloučeniny vzorce (III), (VI) a (VII) jsou komerčně dostupné u firmy Sigma-Aldrich nebo mohou být snadno vyrobeny použitím nebo ío úpravou známých způsobů. Například sloučeniny vzorce (III), kde Z znamená SH, mohou být připraveny metodami popsanými v G. Fuchs v Ark-Kemi, 1966, 26, 111 a 1968, 29, 379; sloučeniny vzorce (III) kde Z je β-amino mohou být vyrobeny metodami popsanými v G. J. McGarvey a další, Tetrahedron Letters, 1983, 24, 2733; chirální a-OH sloučeniny vzorce (III) mohou být vyrobeny způsoby popsanými v Kenne a další, J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, 1988, 1183; a a-chloro sloučenina vzorce (VI) metodami popsanými v P. Four a další, J. Org. Chem. 1981, 46, 4439.

Jednotlivé izomery vzorce (I) v bodě připojení laktonové skupiny

2o mohou být buď připraveny z výchozích materiálů s požadovanou stereochemií nebo epimerizací, rozlišovací frakční krystalizací nebo chromatografií (například dělení HPLC) ve vhodném stupni při syntéze požadovaných sloučenin vzorce (I) za použití běžných způsobů.

Tak bude například zřejmé, že syntéza používající racemické směsi sloučenin vzorce (III) nebo (VI) poskytne sloučeniny vzorce (I) ve formě směsi diastereoizomerů, které potom mohou být rozděleny. Alternativně mohou být jednotlivé diastereoizomery připraveny použitím sloučenin vzorce (III) nebo (IV) v enantiomericky čisté formě.

Podobně sloučeniny vzorce (I) kde R₂ a R₃ spolu znamenají ·

kde R₆ a R₇ jsou rozdílné, mohou existovat v diastereoizomerních formách R a S. Syntéza těchto sloučenin může být stereospecifická za poskytnutí jednotlivých diastereoizomeru. Tsk například R-diastereoizomer sloučeniny vzorce (I), kde R_s znamená atom vodíku a R₇ znamená n-propyl, může být pohodlně připraveny transacetalizací odpovídajícího 16a, 17a-izopropylidendioxyderivátu ío s butyraldehydem v přítomnosti kyselého katalyzátoru jako je kyselina chloristá, jak se popisuje v EP 0262108. Transacetalizační reakce může být provedena v mezistupni po zavedení laktonové skupiny.

Solváty (například hydráty) sloučeniny vzorce (I) mohou být vytvořeny v průběhu zpracováni v některém z výše uvedených kroků.

Sloučeniny vzorce (I) mohou být tedy izolovány ve spojení s molekulami rozpouštědla krystalizací z nebo odpařením z vhodného rozpouštědla za vytvoření odpovídajících solvátů.

Vynález ilustrují následující příklady, které však jakýmkoli způsobem vynález neomezují.

Příklady provedeni vynálezu

Obecné údaje

Teploty tání byly stanoveny na Koflerově bloku a jsou nekorigované. Spektra ¹H NMR byla zaznamenávána při 250 nebo

400 MHz a chemické posuny jsou vyjádřeny v ppm vzhledem k tetramethylsilanu. Pro popis multiplicity signálů se používají následující zkratky: s (singlet), d (dublet), t (triplet), q (kvartet), m (multiplet), dd (dublet z dubletú), dt (dublet z tripletů) a b (široký). MS(TSP+ve) a MS(ES+ve) označují měření hmotnostního spektra • ·

v pozitivním modu s použitím technik termického rozprašování nebo elektrického rozprašování. HRMS (ES+ve) označuje elektrorozprašované hmotnostní spektrum v pozitivním modu s vysokým rozlišením. TLC (chromatografie na tenké vrstvě) byla prováděna na deskách Merck Kieselgel 60 F₂s₄ a kolonová chromatografie byla prováděna na materiálu Merck Kieselgel 60 (Art. 7734 nebo 9385). PLC (preparativní vrstvová chromatografie byla prováděna na deskách Whatman silica. Preparativní HPLC (kapalná chromatografie s vysokou účinností) byla prováděna na systému io Gilson Medical Electronics systém s použitím stacionární fáze uvedené v příkladu. DMF se používá jako zkratka pro bezvodý N,Ndimethylformamid. Organické roztoky byly sušeny nad bezvodým síranem hořečnatým.

Kde byly připraveny směsi izomerů v důsledku přítomnosti asymetrického centra v laktonové skupině, je možnost rozdělení těchto izomerů běžnou chromatografií na oxidu křemičitém a přiřazení označení izomerů A a B v pořadí eluce z kolony.

Meziprodukt 1

Kyselina 6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l 6g-methyl-3-oxo-17apropionvloxv-androst-4-en-173-karboxylová

Kyselina 6a,9a-dif luor-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxo-17apropionyloxy-androst-1,4-dien-17p-karboxylová (1,36 g, 3 mmol) byla přidána k roztoku Wilkinsonova katalyzátoru (150 mg) v ethylacetátu (100 ml) a výsledný roztok byl míchán v atmosféře vodíku až do ukončení hydrogenace. Postup reakce byl sledován HPLC. Roztok byl potom extrahován nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (4 x 50 ml) a spojené vodné vrstvy byly promyty ethylacetátem (75 ml) před okyselením vodné vrstvy na pH 1

3o koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou. Roztok byl potom • ·

-23 ·· ·· » · · ’ » · ·· • · · · 4 • · « • · · · extrahován ethylacetátem (75 ml) a extrakt sušen a odpařen za získání v názvu uvedené sloučeniny jako pevné látky (1,14 g, 84 %): teplota tání 216-218 °C; MS (TSP+ve) m/z 455 [MH]*; NMR δ (DMSO d₆) obsahuje 12,50 (1H, bs), 5,80 (1 H, s), 5,60 a 5,40 (1H, 2m), 5,13 s (1H, m), 3,18 (1H, m), 2,34 (2H, q, J 8 Hz),1,48 (3H, s),1,00 (6H, s a t,

J 8 Hz), 0,85 (3H, d, J 9 Hz).

Meziprodukt 2

Kyselina 6g,9a-difluor-11 β-hydroxy-l 6g-methyl-3-oxo-17aio propionvloxy-androst-4-en-17B-karbothioová S-(anhydrid kyseliny

N,N-dimethvlkarbamové)

Triethylamin (378 μΙ, 2,72 mmol) byl přidán k suspenzi kyseliny

6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxo-17a-propionyloxyandrost-4-en-17p-karboxylové (Meziprodukt 1, 825 mg, 1,81 mmol) v suchém dichlormethanu (12 ml) pod dusíkem. Byl získán čirý roztok a potom byl v jedné dávce přidán Ν,Ν-dimethylthiokarbamoylchlorid (669 mg, 5,43 mmol), roztok byl míchán při pokojové teplotě a postup reakce byl sledován HPLC. Při ukončení reakce byla směs zředěna ethylacetátem (50 ml) a postupně promyta 1M kyselinou chlorovodíkovou (30 ml), 5 % roztokem hydrogenuhličitanu sodného (30 ml) a roztokem soli (30 ml) před sušením a odpařením za získání surového produktu jako pěny. Ten byl čištěn preparativní chromatografií na vrstvě silikagelu s elucí směsí dichlormethandiethylether (5:2) a byla získána v názvu uvedená sloučenina jako krystalická pevná látka (507 mg, 58 %): teplota tání 189-191 °C; IR Vmax (KBr) 3363, 1750, 1722, 1669, 1651 cm'¹; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 6,13 (1H, s), 5,20 a 5,35 (1H, 2m), 4,37 (1H, m), 3,33 (1H, m), 3,08 a 3,16 (6H, 2s), 2,42 (2H, q, J 7 Hz),1,51 (3H, s),1,14-1,20 (6H, s a t, J 7 Hz), 0,98 (3H, d, J 7 Hz). Nalezeno: C, 59,53; H, 7,11;

N, 2,40; S, 5,69. C₂7H₃7F₂NO₆S teoreticky C, 59,87; H, 6,89; N, 2,59; S, 5,92%).

• · ·· ·· • · · · • · ·· • · · · ·' ·

-24Meziprodukt 3

Kyselina 6g.9g-difluor-1 IB-hydroxv-iea-methvI-S-oxo-iygpropionvIoxv-androsM-en-iyB-karbothioová

Směs kyseliny 6a,9a-difluor-1ip-hydroxy-16a-methyl-3-oxo17a-propionyloxy-androst-4-en-17p-karbothioové S-(anhydridu kyseliny Ν,Ν-dimethylkarbamové) (Meziprodukt 2, 490 mg, 0,905 mmol) v diethylaminu (5 ml) byla zahřívána pod zpětným chladičem v atmosféře dusíku. Postup reakce byl sledován analýzou TLC a po io ukončení reakce byla reakční směs vlita do ledové směsi 3,5M kyseliny chlorovodíkové (60 ml) a ethylacetátu (40 ml).Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (30 ml) a extrahována 5 % roztokem uhličitanu sodného (3 x 20 ml). Kombinované bázické extrakty byly potom převrstveny ethylacetátem (40 ml) a pH bylo nastaveno 6M kyselinou chlorovodíkovou na 1. Organické fáze byly odděleny, sušeny a odpařeny za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny jako pevné látky (190 mg, 45 %): teplota tání 147-151 °C; MS (TSP+ve) miz 471 [MHf; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 6,13 (1H, s), 5,38 a 5,19 (1H, 2m), 4,40 (1H, m), 3,28 (1H, m), 2,43 (2H, q, J 7 Hz), 1,52 (3H, s),1,17 (3H, t, J 7 Hz) 1,13 (3H, s), 0,99 (3H, d, J 7 Hz).

Meziprodukt 4

2-oxo-tetrahydrofuran-3R-vl ester kyseliny methansulfonové

K míchanému roztoku (R)-3-hydroxy-2-oxo-tetrahydrofuranu (400 mg, 3,92 mmol) a triethylaminu (601 μΙ, 4,31 mmol) v bezvodém dichlormethanu (15 ml) při 0 °C v atmosféře dusíku byl přidán methansulfonylchlorid (334 μΙ, 4,31 mmol). Získaná směs byla míchána při 0 °C 0,25 h a při 21 °C 2,5 h. Byly přidány další podíly triethylaminu (109 μΙ, 0,78 mmol) a methansulfonylchloridu (61 μΙ,

0,78 mmol) a směs byla míchána 1,5 h. Reakční směs byla vlita do

-25vody (20 ml) a oddělená vodná vrstva byla extrahována dichlormethanem (20 ml). Spojené organické vrstvy byly promyty nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a nasyceným roztokem soli (20 ml) a potom byly sušeny nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku za získání žlutého zbytku, který byl čištěn bleskovou chromatografií na koloně silikagelu s použitím směsi ethylacetátcyklohexan (3:2) jako eluentu. Odstraněním rozpouštědla z příslušných frakcí za sníženého tlaku byla získána v názvu uvedená io sloučenina jako bílá krystalická pevná látka (214 mg, 30 %): teplota tání 69 - 72 °C; MS (TSP+ve) m/z 198 (M+NH₄)‘; IR v_max (KBr) 1774, 1363cm'¹; NMR 5 (CDCI₃) 5,33 (1H, t, J 9 Hz), 4,53 (1H, dt, J 9 a

3,5 Hz), 4,43-4,28 (1H, m), 3,30 (3H, s), 2,88-2,72 (1H, m), 2,66-2,47 (1H, m). (Nalezeno: C, 33,53; H, 4,16; S,17,35. C₅H₈O5S.0,05H₂O teoreticky C, 33,17; H, 4,51; S,17,71 %).

Meziprodukt 5

2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl ester kyseliny methansulfonové

Methansulfonylchlorid (1,67 ml, 21,56 mmol) byl přidán

2o k míchanému roztoku (S)-3-hydroxy-2-oxo-tetrahydrofuranu (2 g, 19,6 mmol), 4-N,N-dimethylaminopyridinu (240 mg, 1,96 mmol) a diizopropylethylaminu (3,76 ml, 21,56 mmol) v suchém dichlormethanu (20 ml), pod dusíkem při - 40 °C. Směs byla míchána 30 min a potom ponechána ohřát na pokojovou teplotu, potom byla promyta 2M roztokem kyseliny chlorovodíkové (50 ml), sušena a odpařena až do získání pevného zbytku. Surový produkt byl čištěn bleskovou chromatografií na silikagelu s elucí směsí ethylacetátcyklohexan (1:1). Rozetření s diethyletherem a sušení ve vakuu poskytlo v názvu uvedenou sloučeninu jako krystalickou bílou pevnou látku (2,23 g, 63 %): teplota tání 70 - 75 °C; NMR δ (CDCI₃) 5,33 (1H,

-26 t, J 8 Hz), 4,53 (1H, dt, J 9 a 2 Hz), 4,34 (1H, dt, J 10 a 6 Hz), 3,28 (3H, s), 2,86-2,72 (1H, m), 2,65-2,47 (1H, m).

Meziprodukt 6

Kyselina 16a, 17a-(R-butylidendioxv)-6a,9a-difluor-116-hydroxy-3oxo-androst-4-en-176-karbothioová S-(N,N-anhydrid kyseliny dimethylkarbamové

Triethylamin (550 μΙ, 3,94 mmol) byl přidán k suspenzi kyseliny 16a, 17a-(R-butylidendioxy)-6a,9a-difluor-113-hydroxy-3-oxo-androstio 4-en-17p-karboxylové (1,345 g, 2,96 mmol) v suchém dichlormethanu (20 ml) pod dusíkem. V jedné části byl přidán do získaného čirého roztoku N,N-dimethylthiokarbamoylchlorid (1,11 g, 9 mmol) a roztok byl míchán při pokojové teplotě a postup reakce byl sledován HPLC. Po ukončení byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (50 ml) a postupně promyt 2M kyselinou chlorovodíkovou (30 ml), 5 % roztokem hydrogenuhličitanu sodného (30 ml) a roztokem soli (30 ml) před sušením a odpařením za poskytnutí surového produktu jako pěny. Ten byl čištěn chromatografií na koloně silikagelu s elucí směsí aceton-dichlormethan (1:9) za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny jako pěny (840 mg, 52 %): MS (ES+ve) m/z 542 (MH)⁺; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 6,15 (1H, s), 5,37 a 5,18 (1H, 2m), 4,86 (1H, d, J 5 Hz), 4,78 (1H, t, J 4 Hz), 4,40 (1H, m), 3,14 a 3,09 (6H, 2s), 1,52 (3H, s), 1,04 (3H, s), 0,96 (3H, d, J 7 Hz).

-27 ·· • ·· ··· · • ··

Meziprodukt 7

Kyselina 16a.17a-(R-butvlidendioxy)-6a,9a-difluor-11 B-hydroxy-3oxo-androst-4-en-17B-karboxylová

Směs kyseliny 16a,17a-(R-butylidendioxy)-6a,9a-difluor-1135 hydroxy-3-oxo-androst-4-en-173-karbothioové S-(N,N-anhydridu kyseliny dimethylkarbamové (Meziprodukt 6; 830 mg, 1,53 mmol) v diethylaminu (8 ml) byla zahřívána pod zpětným chladičem v atmosféře dusíku. Postup reakce byl sledován analýzou TLC a při ukončení byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku io a zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (50 ml) a okyselené 2M kyselině chlorovodíkové (40 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (30 ml) a extrahována roztokem 5 % uhličitanu draselného (5 x 20 ml). Spojené bázické extrakty byly potom rozděleny na vrstvy ethylacetátem (40 ml) a pH bylo 6M kyselinou chlorovodíkovou nastaveno na 1. Organická fáze byla oddělena, sušena a odpařena za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny jako pěny (103 mg, 14 %): MS (ES-ve) m/z 469 [M-H]’; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 6,15 (1H, s), 5,38 a 5,18 (1H, 2m), 4,9-4,7 (2H, m), 4,40 (1H, m),1,52 (3H, s),1,03 (3H, s), 0,96 (3H, t, J 7 Hz).

Příklad 1

S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yr)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11 βhydroxv-16a-methvl-3-oxo-17a-propionvloxy-androsta-1,4-dien-17Bkarbothioové

Práškový bezvodý uhličitan draselný (76 mg, 0,55 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 6a,9a-difluor-113-hydroxy-16amethyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4-dien-17p-karbothioové (258 mg, 0,55 mmol) v suchém DMF (4 ml). Směs byla míchána pod dusíkem a potom ochlazena v ledu. Potom byl přidán cc-brom-γ30 butyrolakton (56 μΙ, 0,68 mmol) a směs byla míchána až do ukončení

-28 ·· ··

reakce za monitorování TLC. Roztok byl rozdělen mezi vodu (25 ml) a ethylacetát (25 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (2x25 ml), sušena a odpařena dosucha. Surový produkt byl čištěn bleskovou chromatografií na koloně silikagelu s použitím nejdříve etheru a nakonec ethylacetátu jako eluentu za izolace izomeru A v názvu uvedené sloučeniny jako krystalické pevné látky. (120 mg,

39,5 %): teplota tání 237 - 238 °C; MS (TSP+ve) m/z 553 [MHf; IR v_max (KBr) 1768, 1739, 1671, 1633 cm'¹,· NMR δ (CDCI₃) obsahuje 7,17 (1H, d, J 10 Hz), 6,42 (1H, bs), 6,38 (1H, d, J 10 Hz), 5,49 a 5,39 (1H, io 2m), 4,50-4,10 (4H, m), 3,31 (1H, m), 2,36 (2H, q, J 7,5 Hz), 1,53 (3H, s), 1,15 (3H, s), 1,13 (3H, t, J 7,5 Hz), 0,99 (3H, d, J 6,25 Hz). (Nalezeno: C, 60,72; H, 6,39; S, 5,58. C₂₈H₃₄F₂O₇S teoreticky C, 60,85; H, 6,30; S, 5,80 %) a izomeru B v názvu uvedené sloučeniny jako krystalické pevné látky (116 mg, 38,2 %): teplota tání 220 15 222 °C; MS (TSP+ve) m/z 553 [MHf; IR v_max (KBr) 1769, 1740, 1678,

1633 cm'¹; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 7,16 (1H, d, J 10 Hz), 6,43 (1H, bs), 6,38 (1H, d, J 10 Hz), 5,49 a 5,39 (1H, 2m), 4,62-4,32 (3H, m), 4,06 (1H, m), 3,32 (1H, m), 1,53 (3H, s), 1,12 (6H, m), 0,98 (3H, d, J

6,25 Hz). (Nalezeno: C, 60,96; H, 6,28; S, 5,70. C₂₈H₃₄F₂O₇S

2o teoreticky C, 60,85; H, 6,20; S, 5,80 %).

Příklad 2

S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-vl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11 βhydroxy-16a-methyl-3-oxo-17g-propionyloxy-androsta-1,4-dien-17B25 karbothioové

Způsob 1

Trifenylfosfin (168 mg, 0,64 mmol) byl přidán k roztoku diizopropylazodikarboxylátu (0,126 ml, 0,64 mmol) v tetrahydrofuranu (3 ml) míchaném při 0 °C pod dusíkem. Po vytvoření žluté sraženiny so byl přidán roztok kyseliny 6a,9a-difluor-1 ip-hydroxy-16a-methyl-3-29 -

oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4-dien-17p-karbothioové (200 mg, 0,43 mmol) a (R)-a-hydroxy-y-butyrolaktonu (65 mg, 0,64 mmol) v tetrahydrofuranu (3 ml) a postup reakce byl sledován analýzou TLC. Po ukončení bylo rozpouštědlo odstraněno a zbytek byl absorbován přímo na silikagel a čištěn bleskovou chromatografií na koloně s elucí diethyletherem. V názvu uvedená sloučenina byla izolována jako bílá krystalická pevná látka (149 mg, 63 %): teplota tání 236 - 238 °C; analytická a spektroskopická data byla identická s daty získanými dříve pro izomer A podle příkladu 1.

Způsob 2

K 2-oxo-tetrahydrofuran-3R-yl esteru kyseliny metansulfonové (Meziprodukt 4, 93 mg, 0,52 mmol) byl přidán roztok sodné soli kyseliny 6a,9a-difluor-113-hydroxy-16a-methyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4-dien-17p-karbothioové (253 mg, 0,52 mmol) v DMF (3 ml) a směs byla míchána 2,5 hod při 20 °C pod dusíkem. Průběh reakce byl sledován analýzou TLC. Po ukončení reakce byla směs zředěna ethylacetátem a vlita do vody. Organický roztok byl promyt hydrogenuhličitanem sodným, 2M kyselinou chlorovodíkovou, roztokem soli, sušen a odpařen dosucha za získání v názvu uvedené sloučeniny (246 mg, 86 %): teplota tání 237 - 238 °C; spektroskopická data byla identická s daty získanými pro izomer A z příkladu 1.

Příklad 3

S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3R-yl)ester kyseliny 6a,9ct-difluor-11 βhvdroxy-16a-methyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4-dien-17Bkarbothioové

Trifenylfosfin (168 mg, 0,64 mmol) byl přidán k roztoku diizopropylazodikarboxylátu (0,126 ml, 0,64 mmol) v tetrahydrofuranu (3 ml) a míchán při 0 °C pod dusíkem. Po vytvoření žluté sraženiny byl

- 30 přidán roztok kyseliny 6a,9a-difluor-113-hydroxy-16a-methyl-3-oxo17a-propionyloxy-androsta-1,4-dien-17p-karbothioové (200 mg, 0,43 mmol) a (S)-a-hydroxy-y-butyrolaktonu (65 mg, 0,64 mmol) v tetrahydrofuranu (3 ml) a postup reakce byl sledován analýzou TLC.

Po ukončení bylo odstraněno rozpouštědlo a zbytek byl absorbován přímo na silikagel a čištěn bleskovou chromatografii na koloně s elucí diethyletherem. V názvu uvedená sloučenina byla izolována jako bílá krystalická pevná látka (143 mg, 61 %): teplota tání 219 - 222 °C; analytická a spektroskopická data byla identická s daty získanými pro ío izomer B z příkladu 1.

Příklad 4

S-(2-oxo-tetrahvdrofuran-3-yl)ester kyseliny 6a.9a-difluor-11Bhydroxy-16a-methyl-3-oxo-17a-propionvloxy-androsta-4-en-17615 karbothioové

Práškový bezvodý uhličitan draselný (102 mg, 0,735 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 6a,9a-difluor-1 ip-hydroxy-16amethyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androst-4-en-17p-karbothioové (Meziprodukt 3, 346 mg, 0,735 mmol) v suchém DMF (5 ml). Směs byla míchána pod dusíkem a potom ochlazena v ledu. Potom byl přidán a-brom-y-butyrolakton (70 pl, 0,85 mmol) a směs byla míchána až do ukončení reakce a monitorována TLC. Roztok byl rozdělen mezi vodu (25 ml) a ethylacetát (25 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (2 x 25 ml), sušena a odpařena dosucha. Surový produkt byl čištěn bleskovou chromatografii na koloně silikagelu s použitím nejdříve etheru a potom ethylacetátu jako eluentu za izolace izomeru A v názvu uvedené sloučeniny jako krystalické pevné látky. (85 mg, 20 %): teplota tání 244 - 246 °C; MS (TSP+ve) m/z 572 [MNH4)⁺; IR vmax (KBr) 1773, 1742 cm'¹; NMR δ (CDCI3) obsahuje 6,14 (1H, s), 5,37 a 5,18 (1H, 2m), 4,52 (1H, m), 4,43-4,28 (2H, m), 4,18

-31 ·· *· ► · · « I · ·· í · · « ·* ·· ·· *· » · · ·

I · · · • · ··· • · · ·» ·· ·· ·· • · * · • · «« ·«· · · • * · ·· ·· (1H, m), 3,33 (1H, m), 2,75 (1H, m), 2,40 (2H, q, J 7 Hz),1,52 (3H, s), 1,13 (3H, t, J 7 Hz), 1,12 (3H, s), 1,01 (3H, d, J 7 Hz) (Nalezeno: C, 60,33; H, 6,74; S, 5,70, C₂₈H₃₆F₂O₇S teoreticky C, 60,63; H, 6,54; S, 5,78 %) izomer B v názvu uvedené sloučeniny jako krystalická pevná látka (80 mg, 20 %): teplota tání 195 - 197 °C; MS (TSP+ve) m/z 572 [MNH₄f; IR v_max (KBr) 1770, 1747cm’¹; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 6,07 (1H, s), 5,30 a 5,11 (1H, 2m), 4,49 (1H, m), 4,37-4,24 (2H, m) 3,96 (1H, m), 3,36 (1H, m), 2,64 (1H, m), 2,34 (2H, q, J 7 Hz), 1,44 (3H, s),1,08 (3H, t, J 7 Hz),1,04 (3H, s), 0,93 (3H, d, J 7 Hz) (Nalezeno: C, 60,34; H, 6,60; S, 5,63. C₂₈H36F₂O₇S teoreticky C, 60,63; H, 6,54; S, 5,78 %).

Příklad 5

S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-vl)ester kyseliny 17a-butyryloxv-6a.9adifluor-11 B-hvdroxv-16a-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-178karbothioové

Práškový bezvodý uhličitan draselný (59 mg, 0,43 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 17a-butyryloxy-6a,9a-difluor11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17p-karbothioové (206 mg, 0,43 mmol) v suchém DMF (3 ml). Směs byla míchána pod dusíkem a potom ochlazena v ledu. Potom byl přidán a-brom-γbutyrolakton (46 μΙ, 0,53 mmol) a směs byla míchána až do ukončení reakce za monitorování TLC. Roztok byl rozdělen mezi vodu (25 ml) a ethylacetát (25 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (2x25 ml), sušena a odpařena dosucha. Surový produkt byl čištěn preparativní chromatografií na vrstvě silikagelu s elucí směsí chloroform-ethylacetát (2:1), za získání izomeru A v názvu uvedené sloučeniny jako krystalické pevné látky: (30,7 mg, 13 %) teplota tání 143 - 145 °C, MS (TSP+ve) m/z 567 [MH]⁺; IR vmax (KBr) 1772, 1741, 1669, 1629.cm*¹; NMR δ (CDCI3) obsahuje 7,14 (1H, d, J 10 Hz), 6,42

-32·· • · · • ·· · · • · · ·· ·· • · · · • · · · • · · ··· • · · ·· ·· » 9 9 9 » · ·· • · · • · · ·· €· (1H, s), 6,39 (1H, d, J 10 Hz), 5,49 a 5,29 (1H, 2m), 4,50 (1H, m), 4,39 (2H, m), 4,31 (1H, m), 4,13 (1H, m), 3,32 (1H, m), 2,75 (1H, m),1,54 (3H, s), 1,16 (3H, s), 1,00 (3H, d, J 6,25 Hz), 0,95 (3H, t, J 7,25 Hz); (Nalezeno: C, 60,87; H, 6,40; S, 5,42. C29H36FO7S. 0,4 H₂O teoreticky

C, 60,70; H, 6,46; S, 5,59 %) a izomer B v názvu uvedené sloučeniny jako krystalická pevná látka (46 mg, 19 %): teplota tání 164 - 166 °C; MS (TSP+ve) m/z 567 [MH]⁺; IR vmax (KBr) 1771, 1743, 1668, 1630 cm’¹; NMR δ (CDCI3) obsahuje 7,14 (1H, d, J 10 Hz), 6,43 (1H, s), 6,39 (1H, d, J 10 Hz), 8,49 a 5,30 (1H, 2m), 4,55 (1H, m), 4,39 (2H, m),

4,09 (1H, m), 3,31 (1H, m), 2,70 (1H, m), 1,53 (3H, s), 1,14 (3H, s),

0,95 (6H, d, J 6,25 Hz a t, J 7,25 Hz); HRMS (ES+ve) nalezeno 567,2200, [MH)⁺. C₂9H₃7F₂O₇S teoreticky 567,2205.

Příklad 6

S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-vl)ester kyseliny 17a-acetyloxv-6g.9adif luor-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17βkarbothioové

Práškový bezvodý uhličitan draselný (55 mg, 0,40 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 17a-acetyloxy-6a,9a-dífluor20 11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-173-karbothioové (181 mg, 0,40 mmol) v suchém DMF (3 ml). Směs byla míchána pod dusíkem a potom ochlazena v ledu. Potom byl přidán a-brom-γbutyrolakton (43 μΙ, 0,50 mmol) a směs byla míchána až do ukončení reakce za monitorování TLC. Roztok byl rozdělen mezi vodu (25 ml) a ethylacetát (25 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (2x25 ml), sušena a odpařena dosucha. Surový produkt byl čištěn preparativní chromatografií na vrstvě silikagelu s elucí směsí chloroform:cyklohexan:ethanol (10:10:1), za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny izomer A jako krystalické pevné látky (74 mg,

34 %): teplota tání 253 - 255 °C. MS (TSP+ve) m/z 539 (MH]⁺; IR v_max • · · · · · ·

- 33 (KBr) 1766, 1750, 1669, 1631 cm’¹, NMR δ (CDCI₃) obsahuje 7,13 (1H, d, J 10 Hz), 6,43 (1H, s), 6,38 (1H, d, J 10 Hz), 5,49 a 5,28 (1H, 2m),

4,50 (1H, m), 4,37 (2H, m), 4,13 (1H, m), 3,30 (1H, m), 2,74 (1H, m), 2,06 (3H, s), 1,54 (3H, s), 1,18 (3H, s), 1,00 (3H, d, J 7 Hz).

(Nalezeno: C, 58,81; H, 5,88; S, 5,78. C27H32F2O7S, 0,7 H₂O teoreticky C, 58,83; H, 6,11; S, 5,82 % a v názvu uvedené sloučeniny izomer B jako krystalické pevné látky (74 mg, 34 %): teplota tání 258 - 260 °C; MS (TSP+ve) m/z 539 [MH]⁺; IR vmax(KBr) 1772, 1752,1668,1630 cm’¹; NMR δ (CDCI3) obsahuje 7,13 (1H, d, J 10 Hz), 6,43 (1H, bs), 6,39 (1H, d, J 10 Hz), 5,49 a 5,29 (1H, 2m), 4,56 (1H, m), 4,40 (2H, m),

4,10 (1H, m), 3,70 (1H, m), 3,31 (1H, m), 2,10 (3H, s), 1,55 (3H s),1,15 (3H, s) 1,00 (3H, d, J 7 Hz). (Nalezeno: C, 58,76; H, 5,77; S, 5,71. C27H₃₂F₂O₇S 0,7 H₂O teoreticky C, 58,83; H, 6,11; S, 5,82 %)

Příklad 7

S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-vl)ester kyseliny 9g-fluor-11 β-hvdroxy166-methyl-3-oxo-17a-propionvloxy-androsta-1,4-dien-173karbothioové

Práškový bezvodý uhličitan draselný(76 mg, 0,55 mmol) byl přidán k roztoku kyseliny 9a-fluor-113-hydroxy-16p-methyl-3-oxo-17apropionyloxy-androsta-1,4-dien-17p-karbothioové (352 mg, 0,75 mmol) v suchém DMF (7 ml). Směs byla míchána pod dusíkem a potom ochlazena v ledu. Potom byl přidán a-brom-y-butyrolakton (78 μΙ, 0,94 mmol) a směs byla míchána až do ukončení za monitorování

TLC. Roztok byl rozdělen mezi vodu (25 ml) a ethylacetát (25 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (2x25 ml), sušena a odpařena dosucha. Surový produkt byl čištěn bleskovou chromatografií na silikagelu s použitím nejdříve etheru a potom ethylacetátu jako eluentu za izolace v názvu uvedené sloučeniny izomeru A jako krystalické pevné látky (124 mg, 30 %): MS (TSP+ve) • · ·

-34m/z 535 [MHf; HRMS (ES+ve) nalezeno: 535,2169 [MHf, C₂₉H₃₆FO₇S teoreticky 535,2164; IR v_max (nujol) 34,43, 1772, 1742, 1716, 1663, 1621, 1605 cm'¹; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 7,22 (1H, d, J 10 Hz), 6,36 (1H, d, J 10 Hz), 6,14 (1H, bs), 4,49-4,28 (4H, m), 2,80 (1H, m), 2,37 s (2H, q, J 7,5 Hz), 1,56 (3H, s), 1,42 (3H, d, J 6,25 Hz), 1,14 (3H, t, J

7,5 Hz), 1,06 (3H, s). (Nalezeno: C, 61,90; H, 6,69; S, 5,83.

C₂₈H₃₅FO₇S. 0,45 H₂O teoreticky C, 61,97; H, 6,67; S, 5,91 %) a izomeru B v názvu uvedené sloučeniny jako krystalické pevné látky (156 mg, 37 %): MS (TSP+ve) m/z 535 [MHf; HRMS (ES+ve) io nalezeno: 535,2165 [MHf. C₂₉H₃₆FO7S teoreticky 535,2164; IR v_max (nujol) 3461, 1771, 1743, 1707, 1658, 1614 cm'¹; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 7,22 (1H, d, J 10 Hz), 6,35 (1H, d, J 10 Hz), 6,13 (1H, bs), 4,61 (1H, m), 4,42 (1H, m), 4,34 (1H, m), 3,69 (1H, m), 2,82 (1H, m), 2,37 (2H, q, J 7,5 Hz), 1,55 (3H, s), 1,38 (3H, d, J 6,25 Hz), 1,15 (3H, t, J 7,5 Hz), 1,01 (3H, s). (Nalezeno: C, 61,51; H, 6,72; S, 5,61.

C₂₈H₃₅FO₇S, 0,6 H₂0 teoreticky C, 61,34; H, 6,71; S, 5,85 %)

Příklad 8

S-(5-oxo-tetrahydrofuran-2-yl)ester kyseliny 6a.9a-difluor-11B20 hvdroxv-16a-methvl-3-oxo-17a-propionyloxv-androsta-1,4-dien-17gkarbothioové

Práškový bezvodý uhličitan draselný (76 mg, 0,55 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 6a,9cc-difluor-113-hydroxy-16amethyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4-dien-17p-karbothioové (258 mg, 0,55 mmol) v suchém DMF (5 ml). Směs byla míchána pod dusíkem a ochlazena v ledu. Potom byl přidán y-chlor-y-butyrolakton (69 μ|, 0,69 mmol) a směs byla míchána až do ukončení reakce za monitorování TLC. Roztok byl rozdělen mezi vodu (25 ml) a ethylacetát (25 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou

3o (2x25 ml), sušena a odpařena dosucha. Surový produkt byl čištěn • · • · • ·

- 35 preparativní chromatografií na vrstvě silikagelu, s elucí chloroformcyklohexan-ethanol (20:20:1), za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny izomer A jako krystalické pevné látky (50 mg, 16 %): teplota tání 152 °C; MS (TSP+ve) m/z 553 [MHf; IR v_max (KBr) 3459,

1791, 1742, 1704, 1667, 1631 cm'¹; NMR δ (DMSO d₆) obsahuje 7,13 (1H, d, J 10 Hz), 6,44 (1H, s), 6,39 (1H, d, J 10 Hz), 6,28 (1H, m), 5,48 a 5,28 (1H, 2m), 4,41 (1H, m), 3,41 (1H, m), 2,38 (2H, q, J 7 Hz), 1,52 (3H, s), 1,14 (3H, t, J 7 Hz), 1,14 (3H, s), 1,01 (3H, d, J 7 Hz); HRMS (ES+ve) nalezeno: 553,6446 [MHf, C28H35F2O7S teoreticky 553,6445, a izomeru B v názvu uvedené sloučeniny jako krystalické pevné látky (34 mg, 10 %): teplota tání 210-213 °C; MS (TSP+ve) m/z 553 [MHf; IR v_max (KBr) 1787, 1743, 1669, 1632 cm'¹; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 7,13 (1H, d, J 10 Hz), 6,44 (1H, d, J 10 Hz), 6,38 (1H, s), 6,24 (1H, m)

5,48 a 5,28 (1H, 2m), 4,40 (1H, m), 3,32 (1H, m), 2,36 (2H, q, J 7 Hz),

1,52 (3H, s), 1,16 (3H, m), 1,12 (3H, t, J 7 Hz), 1,02 (3H, d, J 7 Hz);

HRMS (ES+ve) nalezeno 553,6445 [MHf, C28H35F2O7S teoreticky 553,6445.

Příklad 9

S-(2-oxo-tetrahydrofuran-4-yl)ester kyseliny 6ct,9a-difluor-11Bhydroxy-16g-methyl-3-oxo-17cc-propionvloxy-androsta-1,4-dien-17βkarbothioové

Práškový bezvodý uhličitan draselný (69 mg, 0,5 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 6a,9a-difluor-113-hydroxy-16a25 methyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4-dien-173-karbothioové (234 mg, 0,5 mmol) v suchém DMF (2,5 ml). Směs byla míchána pod dusíkem a potom ochlazena v ledu. Potom byl přidán 2(5H)-furanon (400 μΙ, 5,63 mmol) a směs byla míchána až do ukončení reakce za monitorování TLC. Roztok byl rozdělen mezi vodu (25 ml) a ethylacetát (25 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou • ·

- 36 (2x25 ml) sušena a odpařena dosucha. Surový produkt byl čištěn preparativní chromatografií na vrstvě silikagelu s použitím ethylacetátu jako eluentu. V názvu uvedená sloučenina byla získána jako krystalická pevná látka (9 mg, 3 %): MS (FAB+ve) m/z 553 [MH)⁺;

IR v_max (KBr) 3474, 1784, 1745, 1667, 1633 cm’¹; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 7,13 (1H, d, J 10 Hz), 6,45 (1H, s), 6,38 (1H, d, J 10 Hz),

5,48 a 5,28 (1H, 2m), 4,80-4,67 (1H, m), 4,41 (1H, m), 4,35-4,2 (2H, m), 3,29 (1H, m), 3,05 (0,5H, dd, J 9 a 4 Hz), 2,98 (0,5H, dd, J 9 a 4 Hz), 2,59 (0,5H, t, J 5 Hz), 2,52 (0,5H, t, J 5 Hz), 2,47 (3H, q, J 8 Hz), io 1,54 (3H, s), 1,05-1,27 (6H, m), 0,97 a 0,98 (3H, 2d, J 8 Hz); HRMS (ES+ve) nalezeno: 553,2083 [MH]⁺, C28H35F2O7S teoreticky 553,2072;

Příklad 10

S-(2-oxo-tetrahvdrofuran-3-yl)ester kyseliny 6ct.9a-difluor-11 β15 hvdroxy-16a-methvl-3-oxo-17a-propionvloxy-androsta-1,4-dien-17βkarbothioové

Práškový bezvodý uhličitan draselný (103 mg, 0,75 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 6a,9a-difluor-1 ip-hydroxy-16amethyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4-dien-173-karboxylové (340 mg, 0,75 mmol) v suchém DMF (7 ml). Směs byla míchána pod dusíkem a potom ochlazena v ledu. Potom byl přidán a-brom-γbutyrolakton (78 μΙ, 0,94 mmol) a směs byla míchána až do ukončení reakce za monitorování TLC. Roztok byl rozdělen mezi vodu (25 ml) a ethylacetát (25 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (2x25 ml) sušena a odpařena dosucha.. Surový produkt byl čištěn preparativní chromatografií na vrstvě silikagelu, s elucí směsí chloroform-cyklohexan-ethanol (20:20:1), za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny izomer A jako krystalické pevné látky (43 mg, 11 %): teplota tání 205 - 206 °C; MS (TSF+ve) m/z 537 [MH]*; IR v_max (KBr) 3443, 1786, 1747, 1669, 1632, 1612 cm'¹; NMR δ (CDCI₃) • · • · • ·

-37obsahuje 7,27 (1H, d, J 10 Hz), 6,29 (1H, d, J 10 Hz), 6,11 (1H, s), 5,68 (1H, m), 5,70 a 5,55 (1H, 2m), 4,33-4,22 (2H, m), 4,16 (1H, m),

3,21 (1H, m), 2,35 (2H, q, J 7 Hz), 1,48 (3H, s), 1,04 (3H, s), 1,00 (3H, t, J 7 Hz), 0,86 (3H, d, J 7 Hz); HRMS (ES+ve) nalezeno: 537,2295 [MHf, C28H35F2O8 teoreticky 537,2294, a izomeru B sloučeniny uvedené v názvu jako krystalické pevné látky (43 mg, 11 %): teplota tání 231 - 233 °C; MS (TSP+ve) m/z 537 [MHf; IR v_max (KBr) 3482, 1789, 1747, 1668, 1630 cm'¹; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 7,13 (1H, d, J 10 Hz), 6,41 (1H, s), 6,39 (1H, d, J 10 Hz), 5,51 a 5,20 (1H, 2m), 5,10 (1H, m), 4,58 (1H, m), 4,46-4,32 (2H, m), 3,30 (1H, m), 2,40 (2H, q, J

Hz), 1,72 (3H, s), 1,55 (3H, s), 1,00 (3H, t, J 7 Hz), 0,96 (3H, d, J 7 Hz); HRMS (ES+ve) nalezeno: 537,2299 [MHf, C28H₃₅F₂O8 teoreticky 537,2297.

Příklad 11 (2-oxo-tetrahydrofuran-5-vl)ester kyseliny 6a,9ct-difluor-11 β-hydroxy16g-methyl-3-oxo-17a-propionyloxv-androsta-1,4-dien-17Bkarboxylové

Práškový bezvodý uhličitan draselný (76 mg, 0,55 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 6a,9a-difluor-113-hydroxy-16amethyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4-dien-173-karboxylové (249 mg, 0,55 mmol) v suchém DMF (5 ml). Směs byla míchána pod dusíkem a ochlazena v ledu. Potom byl přidán γ-chlor-y-butyrolakton (83 μΙ, 0,69 mmol) a směs byla míchána až do ukončení reakce za monitorování TLC. Roztok byl rozdělen mezi vodu (25 ml) a ethylacetát (25 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (2x25 ml), sušena a odpařena dosucha. Surový produkt byl čištěn preparativní chromatografií na vrstvě silikagelu, s elucí směsí chioroform-cyklohexan-ethanol (20:20:1), za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny izomer A jako krystalické pevné látky (62 mg, • · • ·

%): teplota tání 263 - 266 °C; MS (TSP+ve) m/z 537 [MHf; HRMS (ES+ve) nalezeno: 537,5780 [MHf, C28H35F2O8 teoreticky 537,5779; IR v_max (KBr) 3459, 1789, 1733, 1669, 1633 cm'¹; NMR δ (DMSO d₆) obsahuje 7,10 (1H, d, J 10 Hz), 6,69 (1H, m), 6,44 (1H, s), 6,38 (1H, d,

J 10 Hz), 5,48 a 5,28 (1H, 2m), 4,37 (1H, m), 3,33 (1H, m), 2,37 (2H, q, J 7 Hz),1,53 (3H, s), 1,13 (3H, t, J 7 Hz), 1,08 (3H, s), 0,93 (3H, d, J 7 Hz). (Nalezeno: C, 61,77; H, 6,15. C28H34F2O7 0,3 H₂O teoreticky C, 62,05; H, 6,43 %) a v názvu uvedené sloučeniny izomer B jako krystalické pevné látky (48 mg, 16 %): teplota tání 241 - 243 °C; MS (TSP+ve) m/z 537 [MHf; HRMS (ES+ve) nalezeno: 537,5788 [MHf, C28H35F2O8 teoreticky 537,5779; IR v_max (KBr) 3480, 1789, 1747, 1668, 1628 cm’¹; NMR δ (DMSO d₆) obsahuje 7,12 (1H, d, J 10 Hz), 6,58 (1H, m), 6,43 (1H, s), 6,38 (1H, d, J 10 Hz), 5,48 a 5,28 (1H, 2m), 4,39 (1H, m), 3,22 (1H, m), 2,36 (2H, q, J 7 Hz), 1,53 (3H, s), 1,11 (3H, t, J 7 Hz), 1,10 (3H, s), 0,95 (3H, d, J 7 Hz). (Nalezeno: C, 61,69;

H, 6,05. C28H34F2O8 0,4 H₂O teoreticky C, 61,85; H, 6,45 %)

Příklad 12

S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-vl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11 β20 hydroxv-16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17βkarbothioové

Práškový bezvodý uhličitan draselný (44 mg, 0,32 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 6a,9a-difluor-1 Ιβ-hydroxy16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β25 karbothioové (130 mg, 0,286 mmol) v suchém DMF (1,4 ml). Směs byla míchána pod dusíkem a potom ochlazena v ledu. Potom byl přidán a-brom-y-butyrolakton (30 pl, 0,36 mmol) a směs byla míchána do ukončení reakce za monitorování TLC. Roztok byl rozdělen mezi vodu (25 ml) a ethylacetát (25 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (2x25 ml), sušena a odpařena dosucha. Surový • · • · fl ·

- 39 produkt byl čištěn preparativní HPLC s normální fází (Dynamax 60Á C18, 25 cm x 41 mm vnitřní průměr) s elucí 70 - 90 % ethylacetát/heptan při průtoku 45 ml/min s detekcí při 270 nm za poskytnutí izomeru A v názvu uvedené sloučeniny jako krystalické pevné látky (29 mg, 20 %): teplota tání 308 - 312 °C; MS (TSP+ve) m/z 539 (MHf; IR v_max (KBr) 3310, 1778, 1694, 1668,1629 cm'¹; NMR δ (DMSO d6) obsahuje 7,24 (1H, d, J 10 Hz), 6,30 (1H, d, J 10 Hz), 6,12 (1H, s), 5,73 a 5,52 (1H, 2m), 5,58 (1H, bs), 4,88 (1H, m), 4,474,15 (4H, m), 1,49 (3H, s), 1,37 (3H, s), 1,20 (3H, s), 0,90 (3H, s). io (Nalezeno: C, 59,77; H, 6,01. C27H32F2O7S. 0,3 H2O teoreticky C, 59,61; H, 6,04 %) a izomeru B v názvu uvedené sloučeniny jako krystalické pevné látky (43 mg, 29 %): teplota tání 275 - 278 ’C; MS (TSP+ve) m/z 539 [MHf; IR vmax (KBr) 3415, 2928, 1779, 1669, 1633 cm'¹; NMR δ (DMSO ds) obsahuje 7,25 (1H, d, J 10 Hz), 6,30 (1H, d, J 10 Hz), 6,11 (1H, s), 5,73 a 5,54 (1H, 2m), 5,57 (1H, m), 4,89 (1H, m), 4,48-4,16 4H, m), 1,50 (3H, s), 1,35 (3H, s), 1,20 (3H, s), 0,88 (3H, s). (Nalezeno: C, 59,35; H, 6,05. C₂7H₃₂F₂O7S. 0,4 H₂O teoreticky C, 59,42; H, 6,06 %).

Příklad 13

S-(2-oxo-tetrahvdrofuran-5-yl)ester kyseliny 6g,9a-difluor-113hydroxy-16cc.17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17Bkarbothioové

Práškový bezvodý uhličitan draselný (61 mg, 0,44 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 6a,9a-difluor-1 Ιβ-hydroxy16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17βkarbothioové (200 mg, 0,44 mmol) v suchém DMF (5 ml). Směs byla míchána pod dusíkem a potom ochlazena v ledu. Potom byl přidán γchlor-y-butyrolakton (64 mg, 0,53 mmol) v suchém DMF (1 ml) a směs byla míchána až do ukončení reakce za monitorování TLC. Roztok byl

-40 • · · · · • · · · · ··· · ··· · · • · · · rozdělen mezi vodu (25 ml) a ethylacetát (25 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (2x25 ml), sušena a odpařena až do získání pevné látky. Surový produkt byl čištěn bleskovou chromatografií na koloně silikagelu, s elucí směsí cyklohexan-ethylacetát (1:1) za získání izomeru A v názvu uvedené sloučeniny jako krystalické pevné látky (67 mg, 28 %): teplota tání 304 - 307 °C; MS (TSP+ve) m/z 539 [MH)⁺; IR Vmax (KBr) 1784, 1697, 1668, 1630 cm’¹; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 7,14 (1H, d, J 10 Hz), 6,42 (1H, s), 6,39 (1H, d, J 10 Hz),

6,31 (1H, m), 5,50 a 5,30 (1H, 2m), 5,00 (1H, m), 4,42 (1H, m), 1,65 (3H, s), 1,49 (3H, s), 1,37 (3H, s), 1,00 (3H, s). (Nalezeno: C, 59,76; H, 6,13; S, 5,80. C27H₃₂F₂O₇S. 0,2 H₂0 teoreticky C, 59,81; H, 6,02; S, 5,91 %) a izomeru B v názvu uvedené sloučeniny jako krystalické pevné látky (67 mg, 28 %): teplota tání 270 - 273 °C; MS (TSP+ve) m/z 539 [MH)⁺; IR vmax (KBr) 1792, 1700, 1666, 1629 cm'¹; NMR δ (DMSO de) obsahuje 7,26 (1H, d, J 10 Hz), 6,31 (1H, d, J 10 Hz), 6,15 (2H, m), 5,74 a 5,04 (1H, 2m), 5,56 (1H, s), 4,93 (1H, m), 4,20 (1H, m), 1,50 (3H, s), 1,35 (3H, s), 1,14 (3H, s), 0,90 (3H, s). (Nalezeno: C, 59,16; H, 6,01; S, 5,54. C₂₇H₃₂F₂O7S.0,5 H₂O teoreticky C, 59,22; H, 6,07; S, 5,86 %).

Příklad 14

S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11Bhvdroxv-16a,17a-izopropylidendioxv-3-oxo-androst-4-en-17Bkarbothioové

K míchané suspenzi kyseliny 6a,9a-difluor-1ip-hydroxy16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androst-4-en-17p-karbothioové (448 mg, 1,02 mmol) v dichlormethanu (8 ml) byl přidán triethylamin (160 μΙ, 1,15 mmol) a potom diethylchlorfosfát (160 μΙ, 1,11 mmol) a směs byla míchána až do vytvoření meziproduktu směsného anhydridu. Byl přidán roztok sodné soli a-merkapto-y-butyrolaktonu

-41 ···· ···· ···· • · · · « · · ···· ···· · * · · · » · · · · · [připraveného přídavkem hydridu sodného (70 mg 60 % olejové disperze, 1,75 mmol) k roztoku a-merkapto-y-butyrolaktonu (170 mg, 1,44 mmol) v DMF (4 ml)] a reakce byla sledována analýzou TLC. Po ukončení reakce byla směs zředěna ethylacetátem (50 ml) a promyta

1M HCI (2x50 ml), vodou (50 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2x50 ml), vodou (50 ml) a nasyceným roztokem soli (50 ml). Organická vrstva byla potom sušena a koncentrována za získání surového materiálu ve formě gumy. Ta byla čištěna bleskovou chromatografií na koloně silikagelu, s elucí io směsí ethylacetát-cyklohexan (1:1). V názvu uvedená sloučenina izomer A byla izolována jako krystalická pevná látka (60 mg, 11 %): teplota tání 169 - 173 °C; MS (TSP+ve) m/z 541 [MHf; IR v_max (KBr) 3397, 2959, 1780, 1690, 1657 cm'¹; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 6,17 (1H, s), 5,36 a 5,24 (1H, 2m), 5,05 (1H, d, J 5 Hz), 4,49 (1H, t, J 4 Hz),

4,44-4,34 (3H, m), 1,55 (3H, s), 1,51 (3H, s), 1,29 (3H, s), 1,03 (3H,

s). (Nalezeno: C, 58,92; H, 6,03; S, 6,25. C27H34F2O7S 0,4 H₂O teoreticky C, 59,20; H, 6,40; S, 5,85 %) a v názvu uvedená sloučenina izomer B byla izolována jako pěna (79 mg, 14 %): MS (TSP+ve) m/z 541 [MHf; IR v_max (KBr) 3379, 1780, 1691, 1658 cm'¹; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 6,17 (1H, s), 5,36 a 5,24 (1H, 2m), 5,02 (1H, d, J 5 Hz) 4,59 (1H, t, J 4,5 Hz), 4,46-4,25 (2H, m), 3,98 (1H, t, J 10 Hz),1,54 (3H, s),

1,51 (3H, s), 1,32 (3H, s), 0,98 (3H, s). (Nalezeno: C, 59,32; H 6,43; S, 5,96. C27H₃₄F₂O7S. 0,3 H₂0 teoreticky C, 59,39; H, 6,39; S, 5,87 %)

Příklad 15

N-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)amid kyseliny 6g,9g-difluor-11 βhydroxy-16α, 17a-izopropylidendioxv-3-oxo-androsta-1,4-dien-17βkarboxylové

Směs kyseliny 6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l 6a, 17a30 izopropylidendíoxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-^-karboxylové (100 mg,

-420,228 mmol), (S)-a-amino-y-butyrolaktonhydrochloridu (46 mg, 0,202 mmol), 1-hydroxybenztriazolu (31 mg, 0,228 mmol), 0-(1Hbenztriazol-1-yl)-N,N,N'N'-tetramethyluroniumtetrafluorborátu (81 mg, 0,251 mmol) a diizopropylethylaminu (0,04 ml, 0,228 mmol) v DMF (5 ml) byla míchána a zahřívána na 100 °C v atmosféře dusíku až do ukončení reakce za monitorování analýzou TLC. Po ochlazení na pokojovou teplotu byl přidán ethylacetát (20 ml) a kyselina chlorovodíková (2M, 15 ml). Vodná vrstva byla oddělena a extrahována ethylacetátem (20 ml). Spojené organické vrstvy byly io promyty vodou (15 ml) a nasyceným roztokem soli (15 ml), sušeny nad bezvodým síranem hořečnatým a zakoncentrovány za získání surového produktu jako gumy. Ten byl čištěn bleskovou chromatografií na koloně silikagelu s elucí ethylacetátem za získání v názvu uvedené sloučeniny jako krystalické pevné látky (60 mg,

57 %); teplota tání 181-184 °C; MS (TSP+ve) 522 [MHf; IR v_max (KBr)

3320, 1774, 1669, 1633 cm’¹; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 7,18 (1H, d, J 10 Hz), 6,93 (1H, bs), 6,42 (1H, s), 6,38 (1H, d, J 10 Hz), 5,50 a 5,30 (1H, 2m), 5,08 (1H, bs), 4,91 (1H, m), 4,51 (1H, m), 4,33 (2H, m), 2,72 (1H, m), 1,79 (3H, s), 1,35 (3H, s), 1,22 (3H, s), 1,04 (3H, s).

2o (Nalezeno: C, 60,63; H, 6,59; N, 2,44. C₂₇H₃₃F₂NO7 0,7 H₂O teoreticky C, 60,71; H, 6,49; N, 2,62 %).

Příklad 16

N-(2-oxo-tetrahvdrofuran-3-yl)amid kyseliny 6a.9a-difluor-11 β25 hydroxy-16g, 17a-izopropylidendioxv-3-oxo-androsta-1,4-dien-17βkarboxylové

Směs kyseliny 6a,9a-difluor-1 ip-hydroxy-16a,17aizopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17p-karboxylové (259 mg, 0,591 mmol), (±)a-amino-y-butyrolaktonhydrochloridu (108 mg,

3o 0,591 mmol), 1-hydroxy-benztriazolu (80 mg, 0,591 mmol), 1-(3-43 -

dimethylamino-propyl)-3-ethyl-karbodiimid hydrochloridu (113 mg, 0,591 mmol) a diizopropylethylaminu (0,11 ml, 0,650 mmol) v dimethylformamidu (20 ml) byla míchána a zahřívána na 100 °C v atmosféře dusíku až do ukončení reakce za monitorování analýzou

TLC. Po ochlazení na pokojovou teplotu byl přidán ethylacetát (20 ml) a kyselina chlorovodíková (2M, 5 ml). Vodná vrstva byla oddělena a extrahována ethylacetátem (20 ml). Spojené organické vrstvy byly promyty vodou (15 mi) a nasyceným roztokem soli (15 ml), sušeny nad bezvodým síranem hořečnatým a koncentrovány za získání surového ío produktu jako gumy. Ten byl čištěn preparativní chromatografií na vrstvě silikagelu s elucí směsí ethylacetát;cyklohexan 5:2 za získání S-izomeru v názvu uvedené sloučeniny izomer A jako krystalické pevné látky jak byla získána výše a izomeru R v názvu uvedené sloučeniny izomer B jako krystalické pevné látky (40 mg, 13 %), teplota tání 333 - 336 °C; MS (TSP+ve) 522 [MH]⁺; IR vmax (KBr) 3484, 1775, 1668, 1632 cm’¹ , NMR δ (DMSO d6) obsahuje 8,32 (1H, s), 7,24 (1H, d, J 10 Hz), 6,30 (1H, d, J 10 Hz), 6,10 (1H, s), 5,72 a 5,52 (1H, 2m),

5,52 (1H, bs), 4,95 (1H, m), 4,57 (1H, m), 4,34 (1H, m), 4,20 (1H, m), 2,00 (3H, s), 1,34, (3H, s) 1,17 (3H, s), 0,91 (3H, s). (Nalezeno: C,

62,51; H, 6,61; N, 2,33 %, C₂7H₃₃F₂NO7 teoreticky C, 62,18; H, 6,38;

N, 2,69 %).

Příklad 17 (2-oxo-tetrahydrofuran-3-vl)ester kyseliny 6a,9g-difluor-11 β-hydroxy25 16a,17a-izopropylidendioxv-3-oxo-androsta-1,4-dien-17B-karboxylové

Práškový bezvodý uhličitan draselný (65 mg, 0,47 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 6a,9a-difluor-1 Ιβ-hydroxy16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-karboxylové (205 mg, 0,47 mmol) v suchém DMF (4 ml). Směs byla míchána pod dusíkem a potom ochlazena v ledu. Potom byl přidán g-brom-γ-44butyrolakton (50 μΙ, 0,58 mmol) a směs byla míchána až do ukončení reakce za monitorování TLC. Roztok byl rozdělen mezi vodu (25 ml) a ethylacetát (25 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (2x25 ml) sušena a odpařena dosucha. Surový produkt byl čištěn preparativní chromatografií na vrstvě silikagelu, s elucí směsí chloroform-cyklohexan-ethanol (10:10:1), za poskytnutí izomeru A v názvu uvedené sloučeniny jako krystalické pevné látky (65 mg, 27 %): teplota tání 253 - 255 °C; MS (TSP+ve) m/z 523 [MH]⁺; IR vmax (KBr) 1785, 1732, 1667, 1631 cm'¹; NMR δ (DMSO d6) obsahuje 7,20 ίο (1H, d, J 10 Hz), 6,44 (1H, s), 6,39 (1H, d, J 10 Hz), 5,68 (1H, m), 5,49 a 5,30 (1H, 2m), 5,18 (1H, m), 4,52 (1H, m), 4,37 (2H, m), 2,71 (1H, m), 1,52 (3H, s), 1,42 (3H, s), 1,21 (3H, s), 1,08 (3H, s). (Nalezeno: C, 61,43; H, 6,07. C₂7H₃₂F₂O₈ 0,3 H₂O teoreticky C, 61,43; H, 6,22 %) a izomeru B v názvu uvedené sloučeniny jako krystalické pevné látky (53,2 mg, 22 %): teplota tání 300 - 304 °C; MS (TSP+ve) m/z 523 [MHf; IR v_max (KBr) 1793, 1743, 1666, 1632 cm'¹; NMR δ (DMSO d₆) obsahuje 7,10 (1H, d, J 10 Hz), 6,44 (1H, s), 6,39 (1H, d, J 10 Hz),

5,49 a 5,30 (1H, 2m), 5,38 (1H, m), 5,15 (1H, m), 4,46 (1H, m), 4,39 (2H, m), 2,70 (1H, m), 1,52 (3H, s), 1,42 (3H, s), 1,25 (3H, s), 1,06 (3H, s). (Nalezeno: C, 61,76; H, 6,11. C₂₈H₃₂F₂O₈ teoreticky C, 62,06;

H, 6,17 %).

Příklad 18

S(2-oxo-tetrahvdrofuran-3-yl)ester kyseliny 16a, 17a-butylidendioxv25 11 -6-hydroxv-3-oxo-androsta-1,4-dien-17B-karbothioové

Práškový bezvodý uhličitan draselný (24 mg, 0,175 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 16a,17a-butylidendioxy-11phydroxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-173-karbothioové (69 mg, 0,16 mmol) v suchém DMF (1,5 ml). Směs byla míchána pod dusíkem a ochlazena v ledu. Potom byl přidán a-brom-y-butyrolakton (16,5 μΙ,

0,20 mmol) a směs byla míchána až do ukončení reakce za monitorování TLC. Roztok byl rozdělen mezi vodu (25 ml) a ethylacetát (25 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (2x25 ml), sušena a odpařena dosucha. Surový produkt byl čištěn preparativní HPLC s normální fází (Dynamax 60Á C18, 25 cm x 41 mm vnitřní průměr) s elucí 70 - 90 % ethylacetát/heptan při průtoku 45 ml/min s detekcí při 270 nm a v názvu uvedená sloučenina byla izolována ve formě diastareomerní směsi A jako krystalická pevná látka (23 mg, 28 %): teplota tání 129 - 132 °C; MS (TSP+ve) m/z 517 io [MHf; IR v_max (KBr) 3459, 1775, 1693, 1653, 1618 cm'¹; NMR δ (DMSO d₆) obsahuje 7,30 (1H, d, J 10 Hz), 6,18 (1H, d, J 10 Hz), 5,91 (1H, s), 4,87 (1H, m), 4,65 (2H, m), 4,30 (4H, m), 1,38 (3H, s), 0,97 (6H, m). (Nalezeno: C, 64,34; H, 7,24; S, 5,39. C₂₈H₃₆O7S 0,5 H₂O teoreticky C, 64,26; H, 7,19; S, 5,72 %) a v názvu uvedená sloučenina jako diastereomerní směs B také jako krystalická pevná látka (29 mg, 35 %) teplota tání 149 - 154 °C; MS (TSP+ve) m/z 539 [MHf; IR v_max (KBr) 3468, 1775, 1688, 1654, 1617 cm'¹; NMR δ (DMSO d₆) obsahuje 7,30 (1H, d, J 10 Hz), 6,16 (1H, d, J 10 Hz), 5,90 (1H, s), 4,86 (1H, m), 4,68 (2H, m), 4,30 (4H, m), 1,37 (3H, s), 0,90 (6H, m) (Nalezeno: C,

64,43; H, 7,12; S, 5,78. C₂₈H₃₆O₇S. 0,3 H₂O teoreticky C, 64,42; H,

7,07; S, 6,14 %).

Příklad 19

S(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 16a,17a-(R25 butylidendioxv)-6a,9a-difluor-116-hvdroxy-3-oxo-androst-4-en-17βkarbothioové

K míchané suspenzi kyseliny 16a,17a-(R-butylidendioxy)-6a,9adifluor-113-hydroxy-3-oxo-androst-4-en-173-karboxylové (200 mg, 0,44 mmol) v dichloromethanu (3 ml) byl přidán triethylamin (61 μΙ,

3o 0,44 mmol) a potom diethylchlorfosfát (64 μΙ, 0,44,mmol) a směs byla

-46···· ···· · · · · • · · · * · · ··· · ··· · · ···· ·· · · · · míchána až do vytvoření směsného anhydridu jako meziproduktu. Potom byl přidán roztok sodné soli a-merkapto-y-butyrolaktonu [vyrobený přídavkem hydridu sodného (24 mg 60 % olejové disperze, 0,6 mmol) k roztoku a-merkapto-y-butyrolaktonu (72 mg, 0,6 mmol) v DMF (1,5 ml)] a reakce byla sledována analýzou TLC. Po ukončení reakce byla směs zředěna ethylacetátem (50 ml) a promyta 1M kyselinou chlorovodíkovou (2x50 ml), vodou (50 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2x50 ml), vodou (50 ml) a nasyceným roztokem soli (50 ml). Organická vrstva byla sušena ío a koncentrována za získání surového materiálu jako gumy. Ta byla čištěna preparativní chromatografií na vrstvě silikagelu s elucí směsí ethylacetát-petrolether 40 - 60 (1:1). Po rozetření s diethyletherem byla izolována v názvu uvedená sloučenina jako izomer A ve formě pěny (84,5 mg, 35 %): MS (TSP+ve) m/z 555 [MHf; IR v_max (KBr)

3480, 1777 cm'¹; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 6,15 (1H, s), 5,37 a 5,18 (1H, 2m), 4,85 (1H, d, J 5 Hz), 4,74 (1H, t, J 4 Hz), 4,40 (1H, m), 4,544,22 (3H, m), 1,53 (3H, s), 1,02 (3H, s), 0,96 (3H, t, J 7,5 Hz). Nalezeno: C, 60,91; H, 7,05; S, 5,48. C28H36F2O7S 0,55 Et₂O teoreticky C, 60,92; H, 7,03; S, 8,39 %) a v názvu uvedená sloučenina izomer B jako pěna (68 mg, 31 %): MS (TSP+ve) m/z 555 [MHf; IR v_max (KBr) 3466, 1771 cm'¹; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 6,14 (1H, s), 5,36 a 5,18 (1H, 2m), 4,82 (1H, d, J 5 Hz), 4,77 (1H, t, J 4,5 Hz), 4,35 (4H, m),

1,52 (3H, s), 0,96 (6H, t, s, J 7,5 Hz). (Nalezeno: C, 61,22; H 7,06; S, 5,39. C28H36F2O7S 0,2 C₅H₁₂ teoreticky C, 61,37; H, 6,88; S, 5,59 %).

-47 Příklad 20

S(2-oxo-tetrahvdrofuran-3-vl)ester kyseliny 16a,17a-(Rbutylidendioxy)-6a,9a-difluor-11 B-hydroxv-3-oxo-androst-1,4-dien17B-karbothioové

K suspenzi písku (10 g) v heptanu (12,5 ml) při pokojové teplotě byla přidána kyselina 6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l 6a, 17aizopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-173-karbothioová S-(2oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester (přikladl2, 0,5 g, 0,93 mmol) za důkladného míchání. K této suspenzi byl přidán butanal (0,123 ml, 1,39 mmol) a potom kyselina chloristá (0,320 ml, 3,71 mmol) a suspenze byla míchána při pokojové teplotě až do ukončení reakce jak bylo zjištěno analýzou TLC. Reakční směs a byla ochlazena v ledu před přídavkem 10 % vodného roztoku K₂CO₃ (8 ml), čímž bylo zajištěno, že vnitřní teplota nepřekročila 25 °C. Písek byl oddělen filtrací a promyt heptanem (4x20 ml), vodou (6x20 ml) a potom ethylacetátem (4x40 ml) a spojené ethylacetátové vrstvy byly promyty roztokem soli (20 ml) a sušeny před koncentrací za získání surového produktu jako pevné látky. Materiál byl čištěn chromatografií na silikagelu s elucí směsí ethylacetát-cyklohexan (3:2). V názvu uvedená sloučenina izomer A byla izolována jako krystalická pevná látka (74 mg, 15 %): teplota tání 260 - 264 °C; MS (TSP+ve) m/z 553 [MHf; IR v_max (KBr) 3341, 1774, 1698, 1668, 1629 cm*¹; NMR δ (DMSO d6) obsahuje 7,25 (1H, d, J 10 Hz), 6,30 (1H, d, J 10 Hz), 6,10 (1H, bs), 5,70 a 5,50 (1H, 2m), 5,60 (1H, bs), 4,70 (2H, m), 4,50-4,15 (4H, m), 1,48 (3H, s), 0,95 (3H, s), 0,86 (3H, t, J 7 Hz). (Nalezeno: C, 60,72; H, 6,01; S, 5,51. C28H34F2O7S teoreticky C, 60,86; H, 6,20; S, 5,80 %) a v názvu uvedená sloučenina izomer B rovněž jako krystalická pevná látka (53 mg, 10 %): teplota tání 254 - 257 °C; MS (TSP+ve) m/z 553 [MHf; IR vmax(KBr) 3376, 1776, 1693, 1667, 1623 cm¹; NMR δ (DMSO d6) obsahuje 7,25 (1H, d, J 10 Hz), 6,25 (1H, d, J 10 Hz), 6,10 (1H, bs), 5,70 a 5,55 (1H, 2m), 5,60 (1H, bs),

-48 4,70 (1H, m), 4,50-4,15 (4H, m), 1,47 (3H, s), 0,86 (6H, m). (Nalezeno: C, 60,91; H, 6,09; S, 5,62. C28H34F2O7S teoreticky C, 60,86; H, 6,20; S, 5,80 %).

Příklad 21 (2-oxo-tetrahydrofuran-3-vl)ester kyseliny 16a, 17a-(R-butylidendioxv)11 B-hydroxv-3-oxo-androst-1,4-dien-173-karboxvlové

Práškový bezvodý uhličitan draselný (37 mg, 0,264 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 16a,17a-butylidendioxy-6a,9a10 difluor-11 β-hydroxy-S-oxo-androsta-l ,4-dien-17β-karboxylové (100 mg, 0,24 mmol) v suchém DMF (1,3 ml). Směs byla míchána pod dusíkem a potom ochlazena v ledu. Potom byl přidán a-brom-γbutyrolakton (25 μΙ, 0,30 mmol) a směs byla míchána až do ukončení reakce za monitorování TLC. Roztok byl rozdělen mezi vodu (25 ml) a ethylacetát (25 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (2x25 ml), sušena a odpařena dosucha. Surový produkt byl čištěn preparativní HPLC s reverzní fází (Dynamax 60Á C18, 25 cm x 41 mm vnitřní průměr) s elucí 70 - 90 % MeCN/H₂O při 45 ml/min s detekcí při 230 nm a diastereomerní směs A v názvu uvedené sloučeniny byla izolována jako krystalická pevná látka (41 mg, 34 %): teplota tání 177 - 180 °C; MS (TSP+ve) m/z 501 [MH]⁺; IR vmax (KBr) 3515, 1789, 1738, 1653, 1616 cm’¹; NMR δ (DMSO d6) obsahuje 7,30 (1H, d, J 10 Hz), 6,18 (1H, d, J 10 Hz), 5,91 (1H, s), 5,65 (1H, m), 5,18 (1H, m), 4,86 (2H, m), 4,38 (3H, m), 1,38 (3H, s), 0,93 (3H, s), 0,85 (3H, t, J 7 Hz).

(Nalezeno: C, 66,31; H, 7,30. C^HseOe. 0,4 H₂O teoreticky C, 66,23; H, 7,30 %) a v názvu uvedená sloučenina jako diastereomerní směs B rovněž jako krystalická pevná látka (38 mg, 31 %): teplota tání 128 133 °C; MS (TSP+ve) m/z 501 [MHf; IR v_max (KBr) 3490, 1789, 1738, 1653, 1614 cm·’; NMR δ (DMSO d₆) obsahuje 7,30 (1H, d, J 10 Hz),

6,17 (1 H, d, J 10 Hz), 5,92 (1H, s), 5,60 (1H, m), 4,77 (3H, m), 4,32

-49 • ··· · ··-· · ··· • · · · · · · ··· · ··· · · ···· · · ' · · · · (3H, m), 1,38 (3H, s), 0,95 (3H, s), 0,84 (3H, t, J 7 Hz). (Nalezeno: C, 65,73; H, 7,23. C₂₈H₃₆O₈0,6 H₂O teoreticky C, 65,76; H, 7,33 %).

Příklad 22

N(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)amid kyseliny 16g.17a-(Rbutvlidendioxv)-6a.9a-difluor-116-hvdroxy-3-oxo-androst-4-en-17βkarboxylové

Směs kyseliny 16cc,17a-(R-butylidendioxy)-6a,9a-difluor-11βhydroxy-3-oxo-androst-4-en-17p-karboxylové (0,98 g, 2,16 mmol), (±)io a-amino-y-butyrolakton hydrobromidu (393 mg, 2,16 mmol), 1hydroxybenztriazolu (292 mg, 2,16 mmol), O-(1H-benztriazol-1-yl)N,N,N'N-'tetramethyluronium tetrafluorborátu (692 mg, 2,16 mmol) a diizopropylethylaminu (1,13 ml, 6,48 mmol) v DMF (25 ml) byla míchána a zahřívána při 100 °C v atmosféře dusíku až do ukončení reakce za monitorování TLC Po ochlazení na pokojovou teplotu byl přidán ethylacetát (100 ml) a 2M kyselina chlorovodíková (100 ml). Organická vrstva byla oddělena a extrahována postupně vodou (100 ml), 1M vodným roztokem hydroxidu sodného (100 ml), vodou (100 ml) a nasyceným roztokem soli (100 ml). Organická vrstva byla

2o sušena nad bezvodým síranem hořečnatým a koncentrována za získání surového produktu jako gumy. Ten byl čištěn bleskovou chromatografií na koloně silikagelu s elucí směsí ethylacetát:cyklohexan (1:1) a potom ethylacetát za získání dvou frakcí. Ty byly dále čištěny preparativní HPLC s reverzní fází (Dynamax 60Á C18, 25 cm x 41 mm vnitřní průměr) s elucí 47% MeCN/H₂O při 45 ml/min a detekcí při 230 nm, v obou případech. Méně polární frakce poskytla izomer A v názvu uvedené sloučeniny jako bílou látku (30 mg, 3 %): teplota tání 165 °C; MS (TSP+ve) 538 [MHf ; IR v_max (KBr) 3468, 3407, 3351, 1778, 1663, 1520 cm'¹ ; NMR δ

3o (CDCI₃) obsahuje 6,72 (1H, d, J 8 Hz), 6,14 (1H, s), 5,38 a 5,18 (1H, 2m), 4,98 (1H, d, J 5 Hz), 4,82 (1H, m), 4,67 (1H, t, J 4 Hz), 4,50 (1H,

-50···· · · ♦ * · · · · • · · · · ·· · · · · · • « · · · · · «·· · ···· · ···· ·· · · · · t, J 9 Hz), 4,37 (2H, m), 1,05 (3H, s), 0,95 (3H, t, J 7 Hz). (Nalezeno: C, 63,00; H, 6,75; N, 2,13. C₂8H₃7F₂NO7 teoreticky C, 62,51; H, 6,88; N, 2,60 %). Polárnější frakce byla dále čištěna preparativní TLC s několikanásobnou elucí směsí ethylacetát:cyklohexan (3:1), za získání izomeru B v názvu uvedené sloučeniny jako bílé pevné látky (25 mg, 2 %): teplota tání 155 - 160 °C; MS (TSP+ve) 538 [MHf; IR v_max (KBr) 3382, 1779, 1668, 1516 cm'¹; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 6,98 (1H, d, J 6 Hz), 6,13 (1H, s), 5,37 a 5,18 (1H, 2m), 4,94 (1H, d, J 5 Hz), 4,54 (1H, t, J 4 Hz), 4,53 (1H, t, J 9 Hz), 4,48-4,24 (3H, m), 1,02 ίο (3H, s), 0,94 (3H, t, J 7 Hz). (Nalezeno: C, 60,94; H, 7,15; N, 2,21.

C₂₈H₃₇F₂NO₇ 0,8 H₂0 teoreticky C, 60,92; H, 7,05; N, 2,54 %).

Příklad 23

N(2-oxo-tetrahvdrofuran-4S-yl)amíd kyseliny 6a,9a-difluor-17B15 karboxylové

Směs kyseliny 6a,9a-difluor-1 ip-hydroxy-16a,17aizopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-173-karboxylové (0,5 g,

1,14 mmol), 4S-amino-y-butyrolakton hydrobromidu (207 mg,

1,14 mmol), 1-hydroxybenztriazolu (154 mg, 1,14 mmol), O-(1H2o benztriazol-1-yl)-N,N,N'N-'tetramethyluronium tetrafluorborátu (365 mg, 1,14 mmol) a diizopropylethylaminu (0,6 ml, 3,44 mmol) v DMF (15 ml) byla míchána a zahřívána na 100 °C v atmosféře dusíku až do ukončení reakce za monitorování analýzou TLC. Po ochlazení na pokojovou teplotu byl přidán ethylacetát (100 ml) a 2M kyselina chlorovodíková (100 ml). Organická vrstva byla oddělena a postupně extrahována 1M vodným roztokem hydroxidu sodného (100 ml) a nasyceným roztokem soli (100 ml). Organická vrstva byla sušena nad bezvodým MgSO₄ a koncentrována za získání surového produktu jako gumy. Ta byla čištěna preparativní HPLC s reverzní fází (Dynamax 60Á C18, 25 cm x 41 mm vnitřní průměr) s elucí 40 % MeCN/H₂O při 45 ml/min s detekcí při 230 nm za získání v názvu

- 51 ·· »· • · · • * ·· • · · • · · «· ·· ·· ·· • · · · · · · • · · · / · · • ··«· ···· 1 • · · » · · uvedené sloučeniny (129 mg, 22 %): teplota tání 204 - 206 °C; MS (TSP+ve) 522 [MHf; IR v_max (KBr) 3325, 1778, 1667, 1631, 1527 cm'¹; NMR δ (DMSO d₆) obsahuje 8,44 (1H, d, J 6 Hz), 7,26 (1H, d, J 10 Hz), 6,30 (1H, d, J 10 Hz), 6,11 (1H, s), 5,74 a 5,55 (1H, 2m), 5,46 s (1H, s), 4,95 (1H, d, J 2 Hz), 4,57 (1H, m), 4,48 (1 H, dd, J 8 a 8 Hz),

4,17 (1H, bd), 4,08 (1H, dd, J 9 a 2 Hz), 2,83 (1H, dd, J 17 a 8 Hz),

1,51 (3H, s), 1,34 (3H, s), 1,12 (3H, s), 0,88 (3H, s). (Nalezeno: C,

61,17; H, 6,55; N, 3,35. C₂7H3₃F₂NO₇ 0,3 CH₃CN 0,4 H₂O teoreticky C,

61,27; H, 6,46; N, 3,37 %).

Příklad 24

N(2-oxo-tetrahydrofuran-4R-vl)amid kyseliny 6a,9a-difluor-11Bhydroxy-16a, 17a-izopropylidendioxv-3-oxo-androst-1,4-dien-17βkarboxylové

Směs kyseliny 6a, 9a-dif luor-11 β-hydroxy-l 6a, 17aizopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-karboxylové (0,5 g,

1,14 mmol), 4R-amino-y-butyrolakton hydrobromidu (207 mg,

1,14 mmol), 1-hydroxy-benztriazolu (154 mg, 1,14 mmol), O-(1Hbenztriazol-1-yl)-N,N,N'N'-tetramethyluronium tetrafluorborátu

2o (365 mg, 1,14 mmol) a diizopropylethylaminu (0,6 ml, 3,44 mmol) v DMF (15 ml) byla míchána a zahřívána na 100 °C v atmosféře dusíku do ukončení reakce za monitorování analýzou TLC. Po ochlazení na pokojovou teplotu byl přidán ethylacetát (100 ml) a 2M kyselina chlorovodíková (100 ml). Organická vrstva byla oddělena a postupně extrahována 1M vodným roztokem hydroxidu sodného (100 ml) a nasyceným roztokem soli (100 ml). Organická vrstva byla sušena nad bezvodým MgSO₄ a koncentrována za získání surového produktu jako gumy. Ten byl čištěn bleskovou chromatografií na koloně silikagelu s elucí směsi ethylacetát-cyklohexan (4:1) a dále čištěn preparativní HPLC s reverzní fází (Dynamax 60Á C18, 25 cm x ·» ·· ·· ·· ·· ·· ···· ···· · · · · ···· ···· · · ·· • · · · · · · ··· · ··· · · ···· » · · ···

-5241 mm vnitřní průměr) s elucí 40 % MeCN/H₂O při 45 ml/min s detekcí při 230 nm za získání v názvu uvedené sloučeniny jako bílé pevné látky (99 mg, 17 %): teplota tání 322 °C; MS (TSP+ve) 522 [MHf; IR Vmax (KBr) 3360, 1780, 1768, 1666, 1627, 1534 cm'¹; NMR δ (DMSO s d₆) obsahuje 8,50 (1H, d, J 7 Hz), 7,26 (1H, d, J 10 Hz), 6,30 (1H, dd,

J 10 a 1 Hz), 6,11 (1H, s), 5,73 a 5,54 (1H, 2m), 5,43 (1H, bd, J 1 Hz),

4,95 (1H, d, J 4 Hz), 4,58 (1H, m), 4,43 (1H, dd, J 8 a 8 Hz), 4,37 (1H, bd), 4,03 (1H, dd, J 9 a 4 Hz), 2,83 (1H, dd, J 18 a 9 Hz), 1,50 (3H, s), 1,34 (3H, s), 1,13 (3H, s), 0,88 (3H, s). (Nalezeno: C, 61,46; H, 6,48;

ίο N, 2,76. C27H₃3F₂NO₇ 0,3 H₂O teoreticky C, 61,54; H, 6,43; N, 2,66 %).

Příklad 25

S(2-oxo-tetrahvdrofuran-3S-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-118hvdroxy-16a, 17a-izopropylidendioxv-3-oxo-androst-1,4-dien-17β15 karbothioové

Práškový bezvodý uhličitan draselný (34 mg, 0,32 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 6a,9a-difluor-1 Ιβ-hydroxy16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17βkarbothioové (250 mg, 0,55 mmol) v suchém DMF (10 ml). Směs byla

2o 15 min míchána pod dusíkem. Potom byl přidán 2-oxo-tetrahydrofuran-3R-yl ester kyseliny methansulfonové (Meziprodukt 4, 99 mg, 0,55 mmol) a směs byla míchána 10 min. Roztok byl rozdělen mezi nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a ethylacetát (50 ml), promyt 2M roztokem kyseliny chlorovodíkové (50 ml), sušen a odpařen dosucha. Surový produkt byl čištěn bleskovou chromatografií na silikagelu s elucí směsí ethylacetát-cyklohexan (1:1) a potom ethylacetát-cyklohexan (3:1) za získání v názvu uvedené sloučeniny jako bílé pevné látky (148 mg, 50 %): teplota tání 310 314 °C; MS (ES+ve) m/z 539 [MHf; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 7,14

3o (1H, dd, J 10 a 1 Hz), 6,44 (1H, s), 6,38 (1H, dd, J 10 a 1 Hz), 5,49 a 5,29 (1H, 2m), 5,01 (1H, d, J 4 Hz), 4,58-4,30 (4H, m), 1,53 (3H, s), ·

• · • 9 • · · ·

-531,44 (3H, s), 1,25 (3H, s), 1,02 (3H, s). Tato sloučenina je identická s izomerem A podle příkladu 12.

Příklad 26

S(2-oxo-tetrahvdrofuran-3R-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11ghydroxy-16a, 17a-izopropylidendioxv-3-oxo-androst-1,4-dien-17βkarbothioové

Práškový bezvodý uhličitan draselný (34 mg, 0,32 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 6a,9a-difluor-1ip-hydroxyio 16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17βkarbothioové (250 mg, 0,55 mmol) v suchém DMF (10 ml). Směs byla míchána 30 min pod dusíkem. Potom byl přidán 2-oxotetrahydrofuran-3S-yl ester kyseliny methansulfonové (Meziprodukt 5, 99 mg, 0,55 mmol) a směs byla míchána 15 min. Roztok byl rozdělen mezi nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a ethylacetát (50 ml), promyt 2M roztokem kyseliny chlorovodíkové (50 ml), sušen a odpařen dosucha. Surový produkt byl čištěn bleskovou chromatografií na silikagelu s elucí směsí ethylacetátcyklohexan (1:1) a potom ethylacetát-cyklohexan (3:1) za získání

2o v názvu uvedené sloučeniny jako bílé pevné látky (120 mg, 41 %): teplota tání 284 - 287 °C; MS (ES+ve) m/z 539 [MHf; NMR δ (CDCI₃) obsahuje 7,13 (1H, dd, J 10 a 1 Hz), 6,43 (1H, s), 6,38 (1H, dd, J 10 a 1 Hz), 5,48 a 5,28 (1H, 2m), 4,97 (1H, d, J 4 Hz), 4,60 (1H, dt, J 9 a 3 Hz), 4,45-4,3 (2H, m), 3,91 (1H, t, J 10 Hz), 1,53 (3H, s), 1,45 (3H, s),

1,27 (3H, s), 0,96 (3H, s). Tato sloučenina je identická s izomerem B z příkladu 12.

- 54 • · · · ·· · · · · · • · · · · · ··· · ··· · ·

Příklad 27 (5-oxo-tetrahvdrofuran-2-yl)ester kyseliny 16a.17a-(R-butylidendioxy)6a,9a-difluor-11B-hvdroxv-3-oxo-androst-4-en-178-karbothioové

Práškový uhličitan draselný (29 mg, 0,21 mmol) byl přidán k míchanému roztoku kyseliny 16a,17a-(R-butylidendioxy)-6a,9adifluor-113-hydroxy-3-oxo-androst-4-en-17p-karbothioové (Meziprodukt 7, 100 mg, 0,21 mmol) v suchém DMF (2 ml). Směs byla míchána pod dusíkem, byl přidán y-chlor-y-butyrolakton (42 mg, 0,35 mmol) a směs byla míchána do ukončení reakce za monitorování io TLC. Roztok byl rozdělen mezi vodu (25 ml) a ethylacetát (25 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (2x25 ml), sušena a odpařena za získání gumy. Surový produkt byl čištěn preparativní chromatografií na vrstvě silikagelu, s elucí diethyletherem za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny jako pěny (24 mg, 21 %): MS (ES+ve) m/z 555 [MHf; IR v_max (KBr) 3484, 1790, 1700, 1665 cm'¹; NMR δ (CDCI3) obsahuje 6,24 (0,5H, dd, J 8 a 6 Hz), 6,15 a 6,14 (1H, 2s), 5,86 (0.5H, dd J 5 a 1 Hz), 5,33 a 5,21 (1H, 2m), 4,84 (0,5H, d, J

5,5 Hz), 4,80 (0,5H, t, J 4,5 Hz), 4,78 (0,5H, d, J 5,5 Hz), 4,71 (0,5H, t, J 4,5 Hz), 4,44 a 4,38 (1H, 2m), 1,53 a 1,52 (3H, 2s), 1,00-0,92 (6H,

2o m). Jednotlivé diastereoizomery byly odděleny další preparativní chromatografií na vrstvě silikagelu, s elucí diethyletherem (3 x) za získání izomeru A jako pěny (8 mg, 7 %): MS (ES+ve) m/z 555 [MHf; NMR δ (CDCI3) obsahuje 6,24 (1H, t, J 7 Hz), 6,14 (1H, s), 5,38 a 5,28 (1H, 2m), 4,84 (1 H, d, J 5 Hz), 4,71 (1H, t, J 4,5 Hz), 4,38 (1H, m),

1,52 (3H, s), 0,97 (6H, m), a izomeru B v názvu uvedené sloučeniny jako pěny (5 mg, 4 %): IR v_max (KBr) 3448, 1790, 1713, 1681, 1651 cm'¹; NMR δ (CDCI3) obsahuje 6,15 (1H, s), 5,87 (1H, dd, J 4 a 1 Hz), 5,38 a 5,18 (1H, 2m), 4,79 (2H, m), 4,44 (1H, m), 1,53 (3H, s), 0,98 (6H, m).

• · • · • · · · • · · · • · ♦ · • · · · · • · · • · · ·

Farmakoloqická účinnost

Test in vitro

Farmakologická účinnost byla studována ve funkčním testu in vitro, aby byla ukázána glukokortikoidní aktivita, která obvykle ukazuje na protizánětlivou nebo protialergickou účinnost in vivo.

Použitý funkční test byl modifikací metody popsané v T. S. Berger a další, J. of Steroid Biochem. Moiec. Biol. 1992, 41 (3-8), 733 - 738, Interaction of Glucocorticoid analogues with the Human Glucocorticoid Receptor“.

ío Buňky Hela byly stabilně transfekovány detekovatelným reportérovým genem (sekrenovaná placentární alkalická fosfatáza, sPAP) pod řízením promotoru glukokortikoidní odpovědi (LTR viru tumoru myší prsní žlázy, MMTV).

Různé koncentrace standardu (dexametazon) nebo sloučenin podle vynálezu byly inkubovány s transfekovanými buňkami Hela 72 hodin. Na konci inkubace byl přidán substrát pro sPAP (pnitrofenolacetát) a produkt byl měřen spektrofotometricky. Zvýšená absorbance odrážela zvýšenou transkripci sPAP a vynesením křivek koncentrace - odezva mohly být odhadnuty hodnoty ECso·

V tomto testu měly izomery z příkladů 1, 4, 5, 6, 7, 8, 12, 15, 16,

19, 22, 23 a 24 a sloučenina z příkladu 9 hodnoty EC₅o menší než 400 nM.

Hydrolyza v krvi

Všechny izomery/sloučeniny z příkladů byly v lidské plazmě nestabilní, což ukazovalo na jejich očekávaný výhodný profil vedlejších účinků in vivo. Sloučeniny z příkladů 15, 16, 22 a 23 měly poločasy menší než 3 hodiny, zatímco všechny izomery ve zbývajících příkladech měly poločasy menší než 60 minut.

• · · • · · · • ·

-56Testy in vivo (i) Protizánětlivy účinek - inhibice edému ucha krysy

Testované sloučeniny se rozpustí v acetonu a 40 μΙ s obsahem 5 % krotonového oleje se aplikuje na vnitřní povrch obou uší samců 5 krys o hmotnosti 60 až 80 g. Zvířata se usmrtí o šest hodin později a uši se odstraní. Vyříznou se kroužky standardní velikosti (o průměru 0,5 cm), které se zváží. Vypočte se střední hmotnost kroužků a z ní se

vypočte procento inhibice zánětu ucha proti kontrole se samotným krotonovým olejem.
Sloučenina	Dávka	% inhibice
Příklad 2	100 pg	42
Příklad 19 Izomer A	100 pg	54
Příklad 19 Izomer B	100 pg	43
Příklad 16 Izomer B	10 pg	42

(ii) Systémové účinky - potlačení ACTH u krys s andrenalektomií

Samcům krys CD (90 - 120 g) byly v izofluranové anestézii odstraněny nadledvinky a k pitné vodě bylo přidáváno 0,9 % soli.

O čtyři dny později dostala zvířata v 10 hod dopoledne jedinou intratracheální dávku (v izofluranové anestézii) sloučeniny suspendované ve fyziologickém roztoku (s obsahem 0,2 % Tween 80, 0,2 ml). Po čtyřech hodinách byla zvířata usmrcena podáním Euthetalu a intrakardiální punkcí byly odebrány krevní vzorky do

2o heparinizovaných zkumavek. Vzorky se centrifugují (20 min při 100 ot/min při teplotě 4 °C), plazma se odebere a radioimunologicky testuje (RIA) na adrenokortikotropní hormon (ACTH) s použitím kitu DPC RIA s dvojí protilátkou. V každé skupině byla neošetřená zvířata a zvířata, kterým bylo podáno kontrolní vehikulum, by bylo možno • ·

- 57 ·· · • · vypočíst diurnální variaci ACTH a účinky vehikula. Výsledky jsou vypočteny ve vztahu ke standardní křivce RIA a vyjádřeny jako koncentrace ACTH pg/ml plazmy, což dovolí výpočet procentuálního

snížení koncentrace ACTH.
Sloučenina	Dávka	% snížení ACTH
Fluocinolon acetonid	1 pg	49
Fluocinolon acetonid	5 pg	84
Příklad 2	500 pg	0

Výsledky ukazují minimální systémové účinky spojené s těmito deriváty labilními v plazmě.

Farmaceutické prostředky

Následují příklady vhodných formulací prostředků podle vynálezu. Termín „aktivní složka“ se zde používá pro vyjádření sloučeniny podle vynálezu a může jít například o izomery (nebo jejich směs) z příkladů 1, 12 nebo 19.

1. Inhalační tobolky

Mikronizovaná aktivní složka 1,6 % hmotnostních Laktóza BP 98,4 % hmotnostních

Aktivní složka se před smísením s normální laktózou pro tablety 20 ve vysokoenergetickém mixéru mikronizuje běžným způsobem na jemné částice o takové velikosti, aby byla umožněna inhalace v podstatě veškerého léku do plic po podání. Prášková směs se plní do želatinových tobolek na vhodném stroji. Obsah tobolek se podává s použitím inhalátoru pro prášky, jako je inhalátor ROTAHALER™.

• · • · • ·

Alternativně se prášková směs může plnit do blisterů nebo blisterových balení nebo proužků. Obsah blisterových balení nebo proužků se podává s použitím inhalátoru pro prášky, jako je inhalátor DISKHALER™ nebo DISKUS™. [ROTAHALER, DISKHALER a DISKUS jsou obchodní známky skupiny firem Glaxo Wellcome.

2. Aerosolový prostředek (i) Suspenze

Mikronizovaná aktivní složka

1,1,1,2-tetrafluorethan mg/dávka

0,25

74,75 na nádobku mg 11,96 g

Aktivní složka se přímo odváží do otevřené hliníkové nádobky a potom se nalisuje odměřovací ventil. Potom se ventilem do nádobky přidá pod tlakem 1,1,1,2-tetrafluorethan a nádobka se třepe, aby bylo léčivo dispergováno. Výsledný inhalátor obsahuje 0,33 % hmotnostních aktivní složky.

(ii) Roztok	mq/dávka	na nádobku
Mikronizovaná aktivní složka	0,25	40 mg
Ethanol (bezvodý)	7,5	1,2 g
1,1,1,2-tetrafluorethan	67,25	10,76 g

Aktivní složka se rozpustí v ethanolu. Získaný ethanolový roztok aktivní složky se odměří do otevřené hliníkové nádobky a potom se • ·

-59nalisuje odměřovací ventil. Potom se ventilem pod tlakem přidá 1,1,1,2-tetrafluorethan. Výsledný inhalátor obsahuje 0,33 % hmotnostních aktivní složky a 10 % hmotnostních ethanolu.

3. Krém

Mikronizovaná aktivní složka Tekutý parafín Cetostearylalkohol Cetomacrogol 1000 Izopropylmyristát Propylenglykol Kyselina benzoová Fosforečnan sodný Monohydrát kyseliny citrónové Čištěná voda do % hmotnostní

0,2

0,2

0,05

0,05

100

Mikronizovaná aktivní složka se disperguje v části vody obsahující část Cetomacrogolu 1000. Spolu se roztaví kapalný parafín, cetostearylalkohol a izopropylmyristát, ochladí se na 50 až 60 °C

2o a směs se přidá ke zbývající vodě obsahující propylenglykol, kyselinu benzoovou (ochranná látka) a fosforečnan sodný s kyselinou citrónovou (pufrující látky). Získaná olejová fáze se přidá za míchání k suspenzi aktivní složky za chlazení.

Ochrana může být nárokována pro jakýkoliv výše popsaný 25 předmět, tedy sloučeniny (včetně meziproduktů), farmaceutické prostředky, způsoby a popisovaná použití.

Zastupuje:

Claims (2)

1. PATENTOVÉ NÁROKY fiÁi£/jtZo

   1. Sloučeninabzorce^ (I) a její solváty, kde

   Ri znamená O, S nebo NH;

   R₂ jednotlivě znamená OC(=O)C1-6 alkyl;

   R₃ jednotlivě znamená atom vodíku, methyl (který múze být buď v konfiguraci a nebo β) nebo methylen; nebo R₂ a R₃ spolu znamenají

   -°\ Λ /^c\ '

   -O Rt kde R₆ a R₇ jsou stejné nebo různé a každý znamená atom vodíku nebo Ci-e alkyl;

   R₄ a R_g jsou stejné nebo různé a každý znamená atom vodíku nebo halogenu; a znamená jednoduchou nebo dvojnou vazbu.

   • ·

   -61 2. Sloučenina podle nároku 1, kde Ri znamená atom kyslíku nebo síry.

   5 3. Sloučenina podle nároku 2, kde Rí znamená atom síry.

   4. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 3, kde je skupina Ri navázána na atom uhlíku alfa laktonové skupiny.

   io 5. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 4, kde R₂ jednotlivě znamená OC(=O)Ci^ alkyl.

   6. Sloučenina podle nároku 5, kde R₂ znamená 0C(=0)C₁.₃ alkyl.

   is 7. Sloučenina podle nároku 5 nebo 6, kde R₂ znamená 0C(=0) ethyl.

   8. Sloučenina podle některého z nároků 5 až 7, kde R₃ znamená methyl.

   9. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 4, kde R₂ a R₃ znamenají spolu

   Λ /^c\

   -O Rj kde R₆ a R₇ jsou stejné nebo různé a každá znamená atom vodíku nebo alkyl.

   • · • · · · ·

   10. Sloučenina podle nároku 9, kde R₆ a R₇ jsou stejné nebo různé a každá znamená atom vodíku nebo Ci-₃ alkyl.

   5 11. Sloučenina podle nároku 9 nebo 10, kde R₆ a R₇ jsou stejné nebo různé a každá znamená atom vodíku, methyl nebo npropyl.

   12. Sloučenina podle nároku 9 až 11, kde R₆ a R₇ znamenají obě ío methyl.

   13. Sloučenina podle nároku 9 až 11, kde R₆ a R₇ jsou různé a každá znamená atom vodíku nebo n-propyl.

   15 14. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 13, kde R₄ a Rs jsou stejné nebo různé a každá znamená atom vodíku, fluoru nebo chloru.

   15. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 14, kde R₄ a R₅ jsou 2o stejné nebo různé a každá znamená atom vodíku nebo fluoru.

   16. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 15, kde skupiny R₆ a R₇ obě znamenají atom fluoru.

   25 17. Sloučenina podle nároku 1, kde R₁ znamená atom síry; R₂ je

   00(=0)0^6 alkyl; R₃ je methyl; R₄ a R₅ jsou stejné nebo různé a každá znamená atom vodíku nebo fluoru; a - - - znamená jednoduchou nebo dvojnou vazbu.

   • · • · · * 20 * 20

   18. Sloučenina podle nároku 17, kde R₂ znamená OC(=O)ethyl a R₄ a R₅ znamená každá atom fluoru.

   19. Sloučenina podle nároku 1, kde R, znamená atom síry; R₂ a R₃ spolu znamenají kde R₆ a R₇ jsou stejné nebo různé a každá znamená atom vodíku nebo Ci^ alkyl; R₄ a R₅, které mohou být stejné nebo různé, každá znamená atom vodíku nebo fluoru a znamená jednoduchou nebo dvojnou vazbu.

   20. Sloučenina podle nároku 16, kde R_s a R₇ jsou stejné nebo různé a znamenají každá atom vodíku, methyl nebo n-propyl; a R₄ a R₅ znamenají každá atom fluoru.

   21. Sloučeniny, kterými jsou;

   S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 17a-butyryloxy6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxo-androsta-1,4dien-173-karbothioové;

   S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 17a-acetyloxy6a,9a-dlfluor-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxo-androsta-1,4dien-173-karbothioové;

   S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 9a-fluor-11 βhydroxy-163-methyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4dien-173-karbothioové;

   • · • ·

   S-(5-oxo-tetrahydrofuran-2-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-113 hydroxy-16a-methyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4dien-173-karbothioové;

   S-(2-oxo-tetrahydrofuran-4-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11β

   5 hydroxy-16a-methyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4dien-173-karbothioové;

   (2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-113 hydroxy-16a-methyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4dien-173-karboxylové;

   io (2-oxo-tetrahydrofuran-5-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-113 hydroxy-16a-methyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4dien-173-karboxylové;

   S-(2-oxo-tetrahydrofuran-5-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-113 hydroxy-16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien15 17p-karbothioové;

   S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11β hydroxy-16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androst-4-en-17βkarbothioové;

   N-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)amid kyseliny 6a,9a-difluor-113
2. 2o hydroxy-16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien173-karboxylové;

   (2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11β hydroxy-16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien173-karboxylové;

   25 S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 16a, 17a butylidendioxy-113-hydroxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17βkarbothioové;

   • · • · • ·

   - 65 • · ·· • · · · • · · · ·· · ·

   S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 16a,17a-(Rbutylidendioxy)-6a,9a-difluor-11 p-hydroxy-3-oxo-androsta-1,4dien-17p-karbothioové;

   (2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 16a, 17a5 butylidendioxy-11 p-hydroxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17βkarboxylové;

   N-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)amid kyseliny 16a,17a-(Rbutylidendioxy)-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-3-oxo-androst-4-en17βΛ3Γ^οχγΙονέ;

   ίο N-(2-oxo-tetrahydrofuran-4-yl)amid kyseliny 6a,9a-difluor-11βhydroxy-16a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien17β-karboxylové;

   S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11βhydroxy-16a-methyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androst-4-en-17β15 karbothioové;

   (5-oxo-tetrahydrofuran-2-yl)ester kyseliny 16a,17a-(Rbutylidendioxy)-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-3-oxo-androst-4-en^-karbothioové;

   a jejich soiváty.

   22. Sloučenina, kterou je

   S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 6a,9a-difluor-11βhydroxy-16a-methyl-3-oxo-17a-propionyloxy-androsta-1,4dien-17β-karbothioové a její soiváty.

   23. Sloučenina, kterou je S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 6a, 9a-difluor-11 β-hydroxy-l 6a, 17a-izopropylidendioxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-karbothioové a její soiváty.

   • · • · • ·

   -66·· ·· • · · · 4 • · <

   ·· ··

   24. Sloučenina, kterou je S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester kyseliny 16a, 17a-(R-butylidendioxy)-6a,9a-difluor-11 βhydroxy-3-oxo-androst-4-en-17p-karbothioové a její solváty.

   25. Sloučenina vzorce (I) podle některého z nároků 1 až 24 nebo její fyziologicky přijatelný solvát pro použití ve veterinárním nebo humánním lékařství.

   io 26. Použití sloučeniny vzorce (I) podle některého z nároků 1 až 24 nebo jejího fyziologicky přijatelného solvátu pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení zánětlivých a/nebo alergických stavů.

   15 27. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, ž e obsahuje sloučeninu vzorce (I) podle některého z nároků 1 až 24 nebo její fyziologicky přijatelný solvát, v případě potřeby ve směsi spolu s jedním nebo více fyziologicky přijatelnými ředivy nebo nosiči.

   28. Farmaceutický aerosolový prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu vzorce (I) podle některého z nároků 1 až 24 nebo její fyziologicky přijatelný solvát, fluorovaný uhlovodík nebo chlorovaný a fluorovaný

   25 uhlovodík s obsahem vodíku jako hnací prostředek, popřípadě v kombinaci s povrchově aktivní látkou a/nebo pomocným rozpouštědlem.

   29. Kombinace, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu vzorce (I) podle některého z nároků 1 až 24 nebo její fyziologicky přijatelný solvát spolu s další terapeuticky účinnou látkou.

   30. Kombinace podle nároku 29, vyznačující se tím, že jako další terapeuticky účinnou látku obsahuje agonistu p₂-adrenoreceptoru.

   ío 31. Způsob léčení zánětlivého a/nebo alergického stavu zvířete nebo člověka, který zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny vzorce (I) definované v některém z nároků 1 až 24 nebo jejího fyziologicky přijatelného solvátu uvedenému subjektu.

   32. Způsob výroby sloučeniny vzorce (I) podle nároku 1, vyznačující se tím, že zahrnuje

   A) reakci sloučeniny vzorce (II) *3

   2s kde R₂, R₃, R₄, R₅ a jsou jak definováno výše pro sloučeniny (I) a X znamená skupinu OH nebo její aktivovaný derivát, se sloučeninou vzorce (III) (III) a jejími solemi, kde

   Z znamená skupinu OH, NH₂ nebo SH;

   B) pro sloučeniny vzorce (I), kde R₁ znamená atom kyslíku nebo síry, reakci sloučeniny vzorce (II), kde R₂, R₃, R₄, R₅ a jsou jak definováno výše pro sloučeniny vzorce (I) a X znamená OH nebo SH nebo jejích odpovídajících solí, se sloučeninou vzorce (VI) nebo (VII) kde Q znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu, jako je skupina Cl, Br, OSO₂A, kde A je například CH₃, CF₃, pCH₃C₆H₄;

   C) přeměnu sloučeniny (I) na různé sloučeniny vzorce (I); nebo

   D) odstranění ochranných skupin z chráněného derivátu sloučeniny vzorce (I), a v případě potřeby následuje (i) tvorba solvátu nebo (ii) příprava jednotlivého izomeru sloučeniny vzorce (I).

   33. Sloučenina vzorce (I) v podstatě tak, jak se zde popisuje.

   34. Prostředek obsahující sloučeninu vzorce (I) v podstatě tak, jak je zde popsán.

   -6935. Způsob výroby sloučeniny vzorce (I), v podstatě tak, jak je zde popsán.