CZ206998A3 - Použití retinoidních sloučenin s RAR alfa receptorovou specifickou nebo selektivní aktivitou - Google Patents

Použití retinoidních sloučenin s RAR alfa receptorovou specifickou nebo selektivní aktivitou Download PDF

Info

Publication number
CZ206998A3
CZ206998A3 CZ982069A CZ206998A CZ206998A3 CZ 206998 A3 CZ206998 A3 CZ 206998A3 CZ 982069 A CZ982069 A CZ 982069A CZ 206998 A CZ206998 A CZ 206998A CZ 206998 A3 CZ206998 A3 CZ 206998A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
compound
rar
group
formula
alkyl
Prior art date
Application number
CZ982069A
Other languages
English (en)
Inventor
Ming Teng
Tien T. Duong
Roshantha A. Chandraratna
Original Assignee
Vision Pharmaceuticals L. P.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Vision Pharmaceuticals L. P. filed Critical Vision Pharmaceuticals L. P.
Publication of CZ206998A3 publication Critical patent/CZ206998A3/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
    • A61K31/203—Retinoic acids ; Salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/10—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N25/00—Investigating or analyzing materials by the use of thermal means
    • G01N25/20—Investigating or analyzing materials by the use of thermal means by investigating the development of heat, i.e. calorimetry, e.g. by measuring specific heat, by measuring thermal conductivity
    • G01N25/48—Investigating or analyzing materials by the use of thermal means by investigating the development of heat, i.e. calorimetry, e.g. by measuring specific heat, by measuring thermal conductivity on solution, sorption, or a chemical reaction not involving combustion or catalytic oxidation
    • G01N25/4846—Investigating or analyzing materials by the use of thermal means by investigating the development of heat, i.e. calorimetry, e.g. by measuring specific heat, by measuring thermal conductivity on solution, sorption, or a chemical reaction not involving combustion or catalytic oxidation for a motionless, e.g. solid sample
    • G01N25/4866—Investigating or analyzing materials by the use of thermal means by investigating the development of heat, i.e. calorimetry, e.g. by measuring specific heat, by measuring thermal conductivity on solution, sorption, or a chemical reaction not involving combustion or catalytic oxidation for a motionless, e.g. solid sample by using a differential method

Description

Retinoidní sloučeniny, které působí specificky ’ nébo selektivně na RAR.aifa. receptorové podtypy přednostně před RARb a RARt retinoidními receptorovými podtypy, mají požadované f & * * farmaceutické vlastnosti spojené s retinoidy, • - = a jsou zvláště vhodné pro výrobu léčiva pro léčení tumorů, například akutní monocytové leukémie, krčního karcinomu, myelomu, karcinomů vaječníků a karcinomů hlavy a krku, bez toho, že by měly jeden nebo více nežádoucích vedlejších účinků retinoidů, jako jsou například vyvolání ztráty hmotnosti, mukokutánní toxicita, podráždění kůže a teratogenita.
CZ 2069-98 A3
Ύ\ί
Použití retinoidních sloučenin s RARa receptorovou specifickou nebo selektivní aktivitou
Oblast techniky
Tento vynález se týká použití sloučenin, které mají specifickou nebo selektivní agonistickou aktivitu pro RAR„ retinoidní receptory, pro výrobu léčiva k léčbě nemocí
I nebo stavů, které jsou citlivé na léčbu těmito retinoidy. Zvláště je tento vynález zaměřen na užití činidel specifických nebo selektivních pro RARa receptory pro léčbu
á.
< tumorů.
Dosavadní stav techniky
Sloučeniny, které mají retinoidům podobnou aktivitu jsou dobře známy v oblasti techniky, a jsou popsány v početných patentech Spojených států amerických a jiných patentech a ve vědeckých publikacích. V oblasti techniky je obecně známo a přijato, že retinoidům podobná aktivita je užitečná pro ošetřování zvířat savčích druhů, včetně člověka, pro léčbu nebo zmírnění symptomů nebo stavů početných nemocí nebo stavů. Jinými slovy, v oblasti techniky je obecně přijato, že farmaceutické komposity s retinoidům podobnou sloučeninou nebo sloučeninami jako aktivní složkou jsou užitečné jako regulátory buněčné proliferace a diferenciace, a zvláště jako činidla pro léčbu kožních nemocí, zahrnujíce aktiniové keratózy, arsenové keratózy, zánětlivé nebo nezánětlivé akné, lupénku, šupinatost kůže a jiné keratinizační a hyperproliferativní poruchy kůže, ekzém, atopickou dermatitidu, Darriersovu nemoc, lišel plochý, prevenci f nebo zvrat glukokortikoidního poškození (steroidní atrofie), jako topické antimikrobiální, jako kožní antipigmentační činidla a pro léčbu a zvrat účinků věku a světelného poškození na kůži. Retinoidní sloučeniny jsou také užitečné pro prevenci a léčbu rakovinných a předrakovinných stavů, zahrnujíce premaligní a maligní hyperproliferativní nemoci jako například rakovinu prsu, kůže, prostaty, hrdla, dělohy, tračníku, měchýře, jícnu, žaludku, plic, hrtanu, ústní dutiny, krevního a lymfatického systému, metaplasii, dysplasii, neoplasii, leukoplasii a papilom mukózních membrán a při léčbě Kaposiho sarkomu. Navíc, retinoidní sloučeniny mohou být použity jako činidla pro léčbu nemocí oka, zahrnujíce, bez omezení, proliferativní vitreoretinopatii (PVR), odloučení sítnice, suché oko a jiná onemocnění rohovky, stejně jako v léčbě a prevenci různých kardiovaskulárních chorob, zahrnujíce, bez omezení, choroby spojené s metabolismem lipidů jako například dyslipidémii, prevenci postangioplastické restenosy a jako činidlo pro zvýšení úrovně cirkulujícího tkáňového aktivátoru plasminogenu (TPA). Jiná použití pro retinoidní sloučeniny zahrnují prevenci a léčbu stavů a nemocí spojených s lidským papilloma virem (HPV), zahrnujíce bradavice a genitální bradavice, různé zánětlivé choroby jako například fibrózu plic, j zánět kyčelníku, zánět tlustého střeva a Krohnovu chorobu, neurodegenerativní choroby jako například Alzheimerovu nemoc, Parkinsonovu nemoc a mrtvici, ( nesprávnou funkci hypofýzy, zahrnujíce nedostatečnou produkci růstového hormonu, modulaci apoptózy, zahrnujíce jak indukci apoptózy, tak inhibici apoptózy aktivované Tbuňkami, obnovení růstu vlasů, zahrnujíce kombinované terapie s těmito sloučeninami a s jinými agens jako například MinoxidilR, nemoci spojené s imunitním systémem, zahrnujíce užití těchto sloučenin jako imunosupresiv a imunostimulátorů, zmírnění odvržení orgánových transplantátů a usnadnění léčení ran, včetně zmírnění chelózy.
Patent Spojených států č. 4, 740, 519 (Shroot a kol.), 4, 826, 969 (Maignan a kol.), 4, 326, 055 (Loeliger a kol.), 5, 130, 335 (Chandraratna a kol.), 5, 037, 825 (Klaus a kol.), 5, 231, 113 (Chandraratna a kol.), 5, 324, 840 (Chandraratna), 5, 344, 959 (Chandraratna), 5, 130, 335 (Chandraratna a kol.), publikované evropské patentové přihlášky č. 0 170 105 (Shudo), 0 176 034 A (Wuest a kol.), 0 350 846 A (Klaus a kol.), 0 176 032 A (Frickel a kol.), 0 176 033 A (Frickel a kol.), 0 253 302 A (Klaus a kol.), 0 303 915 A (Bryce a kol.), UK patentová přihláška Velké Británie 2190378 A (Klaus a kok), německá patentová přihláška č. DE 3715955 A1 (Klaus a kol.), DE 3602473 ’ A1 (Wuest a kol.), a články J. Amer. Acad. Derm. 15: 756-764 (1986) (Sporn a kol.),
Chem. Pharm. Bull. 33: 404-407 (1985) (Shudo a kol.), J. Med. Chem. 1988 31, 21826 _ 2192 (Kagechika a kol.), Chemistry and Biology of Synthetic Retinoids CRC Press lne.
1990 str. 334-335, 354 (Dawson a kol.), popisují nebo se týkají sloučenin , které zahrnují tetrahydronaftylový zbytek a mají retinoidům podobnou nebo příbuznou biologickou aktivitu.
Patenty Spojených států č. 4,980,369, 5,006,550, 5,015,658, 5,045,551, 5,089,509, 5,134,159, 5,162,546, 5,234,926, 5,248,777, 5, 264,578, 5, 272,156, 5,278,318, 5,324,744, 5, 346,895, 5,346,915, 5,348,972, 5,348,975, 5,380,877, 5,399,561, 5,407,937, (přiřknuté stejnému postupníku jako tato přihláška) a patenty a publikace tam citované, popisují nebo se týkají chromanu, thiochromanu a derivátů • ·· ·
1,2,3,4-tetrahydrochinolinu, které mají retinoidům podobnou biologickou aktivitu.
Patent Spojených států č. 4,723,028 (Shudo), publikovaná evropská patentová přihláška č. 0 170 105 (Shudo), německá patentová přihláška č. DE 3524199 A1 (Shudo), PCT WO 91/16051 (Spada a kol.), PCT WO 85/04652 (Polus) a J. Med. Chem. 1988 31, 2182-2192 (Kagechika a kol.), popisují nebo se týkají arylových a heteroaryiových nebo diarylových substituovaných olefinů nebo amidů s retinoidům podobnou nebo příbuznou biologickou aktivitou.
Patenty Spojených států č. 4,992,468, 5,013,744, 5,068,252, 5,175,185, 5,202,471, 5,264,456, 5,324,840, 5,326,898, 5,349,105, 5,391,753, 5,414,007 a 5,434,173 (postoupené stejnému nabyvateli jako tato přihláška) a patenty a publikace tam citované, popisují nebo se týkají sloučenin, které mají retinoidům podobnou biologickou aktivitu a strukturu, kde fenyl a heteroaryl nebo fenyl a druhá fenylová skupina je spojena s olefinovou nebo acetylenovou vazbou. Dále, přihlášky společně očekávající vyřízení a v nedávné době vydané patenty, postoupené stejnému nabyvateli jako tato přihláška, jsou zaměřeny na další sloučeniny s retinoidům podobnou aktivitou.
V současné době je obecnou znalostí v oblasti techniky, že u savců (a jiných organismů) existují dva hlavní typy retinoidových receptorů. Tyto dva hlavní typy neboli rodiny receptorů jsou označovány RARs a RXRs. V rámci každého typu existují podtypy; v RAR rodině jsou subtypy označovány RARa, RARpa RARr, v RXR rodině jsou subtypy označovány RXRa, RXRP a RXRr . V oblasti techniky bylo také zjištěno, že distribuce dvou hlavních typů retinoidových receptorů, a několika podtypů není v různých tkáních a orgánech savčích organismů jednotná.
Je také známo v oblasti techniky, že použití retinoidům podobných sloučenin pro léčbu různých chorob a stavů není bez problémů nebo vedlejších účinků. Vedlejší účinky při úrovních terapeutické dávky zahrnují bolest hlavy, teratogenitu, mukokutánní toxicitu, toxicitu pro kosterní svalstvo, dyslipidémie, podráždění kůže, hepatotoxicitu, atd. Tyto vedlejší účinky omezují přijatelnost a použitelnost retinoidů pro léčbu nemoci. Stále probíhá výzkum v oblasti techniky pro stanovení, která z rodin RAR nebo RXR a v rámci každé rodiny, který nebo které z podtypů zodpovídají za zprostředkování určitých terapeutických účinků, a který typ nebo které podtypy jsou zodpovědné za zprostředkování jednoho nebo více nežádoucích vedlejších účinků. Tudíž, mezi sloučeninami schopnými vazby na retinoidové receptory, je specifita nebo selektivita pro jeden z hlavních typů nebo rodin, a dokonce specifita nebo selektivita pro jeden nebo více podtypů v rámci rodiny receptorů, považována za požadovanou farmakologickou vlastnost. Taková selektivita nebo specifita je užitečná jako výzkumný nástroj pro odhalení rolí několika receptorových typů a podtypů při zprostředkování různých účinků retinoidů v biologických systémech, a také jako pomůcka pro navrhování retinoidových léčiv se specifickými léčebnými účinky a/nebo s omezenými ' vedlejšími účinky a toxicitou. Spolu s těmito řádky popisuje patent Spojených států č.
5,324,840 třídu sloučenin, ve kterých je retinoidům podobná aktivita doprovázena
I*
4. sníženou kožní toxicitou a sníženými teratogenními účinky. Patent Spojených států č.
5,399,586 popisuje užití sloučenin s RXR retinoidní receptorovou agonistickou aktivitou pro léčbu savců postižených tumory. Patent Spojených států č. 5,455,265 popisuje metody léčby savců sloučeninami s agonistickou aktivitou na RXR receptorech. Publikovaná PCT přihláška č. WO 93/11755 je také zaměřena na použití sloučenin, které jsou selektivními RXR receptorovými agonisty.
Vynález poskytuje způsoby léčby tumorů sloučeninami, které jsou specifické nebo selektivní k RARa receptorům.
Podstata vynálezu
Bylo zjištěno, podle vynálezu, že sloučeniny podobné retinoidům, které působí selektivně, nebo ještě výhodněji specificky na podtypy RARa receptorů přednostně před podtypy RARP a RARr receptorů, mají požadované farmaceutické vlastnosti spojené s retinoidy, a jsou zvláště vhodné pro léčbu tumorů, jako například akutní monocytové leukémie, krčního karcinomu, myelomu, karcinomů vaječníků a karcinomů hlavy a krku, aniž by měly jeden nebo více nežádoucích vedlejších účinků retinoidů, jako například vyvolání ztráty hmotnosti, mukokutánní toxicitu, podráždění kůže a teratogenitu.
Tudíž, vynález se týká užití RARa specifických nebo selektivních retinoidních sloučenin pro léčbu chorob nebo stavů, které reagují na léčbu těmito sloučeninami, a zvláště na léčbu tumorů, primární akutní monocytové leukémie, krčního karcinomu, myelomu, karcinomů vaječníků a karcinomů hlavy a krku RARa specifickými nebo selektivními retinoidními sloučeninami. Podle vynálezu jsou také RARa selektivní sloučeniny zvláště výhodně užívány pro léčbu proliferativní vitreoretinopatie (PVR) a k věku se vztahující makulární degenerace (AMD).
···· ··· a
Pro účely tohoto popisu je sloučenina považována za RAR« specifickou nebo selektivní, jestliže při transaktivačním důkazu (popsán níže) sloučenina transaktivuje RAR„ receptory při významně nižší koncentraci než RARP a RARr receptory. Místo měření transaktivace je proveditelné měření navazování sloučeniny postupně ke třem RAR receptorovým podtypům. Data o vazbě vyjádřená v Kd číslech získaných ve vazebném stanovení (popsán níže) také udávají schopnost sloučeniny působit specificky nebo selektivně na RAR„ receptory přednostně před RARP a RARr receptory. Sloučenina je považována za RARa specifickou nebo selektivní pro účely tohoto vynálezu, jestliže Kd číslo pro její vazbu na RARa receptory je přibližně 500 krát menší než Kd pro její afinitu k RARP a RARr receptorům.
Přehled obrázků na výkresech
Obrázek 1 je graf ukazující výsledky stanovení RPMI 8226 buněčné kultury provedeného s all-trans retinovou kyselinou (ATRA) a dvěmi RARa selektivními sloučeninami podle vynálezu.
Obrázek 2 je další graf ukazující výsledky stanovení AML 193 buněčné kultury provedeného se dvěmi RARa selektivními sloučeninami podle vynálezu, a se dvěmi sloučeninami, které nejsou RAR„ selektivní.
Obrázek 3 je další graf ukazující výsledky stanovení AML 193 buněčné kultury provedeného se třemi RARa selektivními sloučeninami podle vynálezu a s all-trans retinovou kyselinou (ATRA).
Obrázek 4 je graf ukazující proliferaci vaječníkových tumorových buněk při stanovení buněčné kultury (EDR stanovení) za přítomnosti měnící se koncentrace sloučeniny 2 podle vynálezu.
Obrázek 5 je graf ukazující proliferaci RPE buněk za přítomnosti all-trans retinové kyseliny nebo sloučeniny 42 v kultivačním médiu.
Obrázek 6 je graf ukazující hmotnost skupiny pokusných krys, kterým byly podávány po 3 dny měnící se dávky RAR„ selektivní sloučeniny podle vynálezu.
Obrázek 7 je sloupcový graf ukazující hmotnost skupiny pokusných krys na konci 4 denní periody, ve které byly krysám po dobu 3 dnů podávány měnící se dávky sloučeniny 18 podle vynálezu.
Obrázek 8 je graf ukazující hmotnost morčat, která byla podrobena působení • · ··♦· • · · · • · ··· • · · • ·· měnících se dávek sloučeniny 42 po dobu 15 dnů.
Příklady provedení vynálezu
Obecná provedení
Charakteristika týkající se chemických sloučenin použitých ve vynálezu.
Termín alkyl se vztahuje na kteroukoli a pokrývá všechny skupiny, které jsou známy jako normální alkyl, alkyl s rozvětveným řetězcem a cykloalkyl. Termín alkenyl se vztahuje a pokrývá skupiny normálních alkenylů, alkenylů s rozvětveným řetězcem a cykloalkenylů s jedním nebo několika nenasycenými místy. Podobně, termín alkinyl se vztahuje a pokrývá skupiny normálních alkinylů a alkinylů s rozvětveným řetězcem s jednou nebo více trojnými vazbami.
Nižší alkyl označuje výše definovanou širokou definici alkylových skupin s 1 až 6 uhlíky v případě normálního nižšího alkylu, a jako vhodný pro 3 až 6 uhlíkaté nižší skupiny s rozvětveným řetězcem a cykloalkylové skupiny. Nižší alkenyl je definován podobně, 2 až 6 uhlíků pro normální nižší alkenylové skupiny, a 3 až 6 uhlíků pro nižší rozvětvené a cyklo- alkenylové skupiny. Nižší alkinyl je také definován podobně, 2 až 6 uhlíků pro normální nižší alkinylové skupiny, a 4 až 6 uhlíků pro rozvětvené nižší alkinylové skupiny.
Termín “ester“, jak je užit zde, se vztahuje a pokrývá jakoukoli sloučeninu spadající do definice toho termínu, jak je užíván v klasifikaci organické chemie. Zahrnuje organické a anorganické estery. Kde B v obecném vzorci výhodnějších sloučenin užitých v tomto vynálezu je -COOH, pokrývá tento termín produkty odvozené — od reakce této funkce s alkoholy nebo thioalkoholy, s výhodou s alifatickými alkoholy s 1-6 uhlíky. Kde ester je odvozen od sloučenin, kde B je -CH2OH, pokrývá tento termín sloučeniny odvozené od organických kyselin schopných tvorby esterů včetně kyselin založených na fosforu a kyselin založených na síře, nebo sloučeniny vzorce CH2OCORh, kde Rn je jakákoli substituovaná nebo nesubstituovaná alifatická, aromatická, heteroaromatická nebo alifatická aromatická skupina, s výhodou s 1-6 uhlíky v alifatických částech.
Pokud není v této přihlášce uvedeno jinak, výhodnější estery jsou odvozeny od nasycených alifatických alkoholů nebo kyselin o deseti nebo méně uhlíkových atomech •4 ·44· nebo cyklických nebo nasycených alifatických cyklických alkoholů nebo kyselin o 5 až 10 uhlíkových atomech. Zvláště výhodné alifatické estery jsou ty, jež jsou odvozeny od kyselin nebo alkoholů nižších alkylů. Dále jsou výhodné fenyl nebo nižší alkylfenyl estery.
Amidy mají význam klasifikačně se shodující s tímto termínem v organické chemii. V tomto případě zahrnuje nesubstituované amidy a všechny alifatické a aromatické mono- a di- substituované amidy. Pokud není v přihlášce uvedeno jinak, výhodnější amidy jsou mono- a di- substituované amidy odvozené od nasycených alifatických zbytků o deseti nebo méně uhlíkových atomech nebo cyklické nebo nasycené alifatické cyklické zbytky o 5 až 10 uhlíkových atomech. Zvláště výhodné jsou amidy odvozené od substituovaných nebo nesubstituovaných nižších alkyl aminů. Výhodné jsou také mono- a disubstituované amidy odvozené od substituovaných a nesubstituovaných fenyl nebo nižších alkylfenyl aminů. Nesubstituované amidy jsou také výhodné.
Acetaly a ketaly zahrnují uhlovodíkové zbytky vzorce CK, kde K je (-OR)2. Zde, R je nižší alkyl. Také, K může být -OR7O-, kde R7je nižší alkyl o 2-5 uhlíkových atomech, s přímým řetězcem nebo rozvětvený.
Farmaceuticky přijatelná sůl může být připravena pro jakoukoli sloučeninu použitou ve vynálezu s funkcí schopnou tvorby takové soli, například kyselou funkcí. Farmaceuticky přijatelná sůl je jakákoli sůl, která uchovává aktivitu původní sloučeniny a nepředává žádný rušivý nebo nepříznivý účinek subjektu, kterému je podána a v souvislosti, ve které je podána. Farmaceuticky přijatelné soli mohou být odvozeny od organických nebo anorganických zásad. Sůl může být mono nebo polyvalentní ion. Zvláště zajímavé jsou anorganické ionty, sodný, draselný, vápenatý a hóřečnatý. Organické soli mohou být utvořeny s aminy, zvláště amonné soli jako například mono-, di- a trialkyl aminy a ethanol aminy. Soli mohou být také tvořeny s kofeinem, tromethaminem a podobnými molekulami. Kde je dusík v podstatě bazický tak, že je schopen tvořit soli přídavkem kyseliny, tyto mohou být tvořeny s jakýmikoli anorganickými nebo organickými kyselinami nebo alkylujícím činidlem jako například methyljodidem. Výhodné soli jsou ty, které jsou tvořeny š anorganickými kyselinami jako například chlorovodíkovou kyselinou, kyselinou sírovou nebo kyselinou fosforečnou. Může být také použita kterákoli z počtu jednoduchých organických kyselin jako například jedno-, dvoj- a trojsytná kyselina. ,
Některé ze sloučenin použitých ve vynálezu mohou mít trans a cis (E a Z)
isomery. Navíc, sloučeniny použité ve vynálezu mohou obsahovat jedno nebo více chirálních center a tudíž mohou existovat v enantiomerní a diastereomerní formě. Pole působnosti vynálezu je určeno k pokrytí použití všech těchto isomerů jako takových, stejně jako směsí cis a trans isomerů, směsí diastereomerů a stejně jako racemických směsí enantiomerů (optických isomerů).
Popis sloučenin s výhodou používaných ve způsobech podle vynálezu
Retinoidní sloučeniny používané ve způsobech léčby podle vynálezu jsou specifické nebo selektivní pro RAR„ receptory. Že je sloučenina specifická nebo selektivní pro RAR„ receptory, může být zjištěno transaktivačními stanoveními popsanými níže, kde RAR„ specifická nebo selektivní sloučenina transaktivuje RARa receptory při významně nižších koncentracích než RARP nebo RARr receptory. Při vazebném stanovení, kde je měřena schopnost sloučeniny vázat se na tento podtyp receptoru, se sloučenina, která je považována za RAR„ specifickou nebo selektivní pro účely vynálezu, váže nejméně 500 krát silněji k RAR„ receptorům než k RARP nebo RARr receptorům. Eventuálně, sloučenina je považována za RAR„ specifickou nebo selektivní, jestliže při vazebném stanovení je jeho hodnota Kd přibližně v 101 až 5 X 102 nanomolárním rozmezí a hodnota Kd pro RARP nebo RARr receptory je větší než 1000 nanomolární. Tato druhá možnost je indikována jako 0,00 v níže poskytnutých tabulkách, kde jsou ilustrována vazebná data (hodnoty Kd) pro jisté ukázkové sloučeniny podle vynálezu.
Příklady RAR(I selektivních sloučenin, které jsou s výhodou používány podle vynálezu, jsou ilustrovány vzorcem 1 a vzorcem 2,
Vzorec 1
Vzorec 2 • · ·· kde Xi je O nebo Xi je [CíR^h, kde n je celé číslo mezi 0 a 2;
R4 je nezávisle H nebo alkyl o 1 až 6 uhlících;
R2 je nezávisle vodík, nebo nižší alkyl o 1 až 6 uhlících;
R3 je vodík, nižší alkyl o 1 až 6 uhlících nebo F; m je celé číslo hodnoty 0 - 5; o je celé číslo hodnoty 0-4; p je celé číslo hodnoty 0-2; r je celé číslo hodnoty 0-2;
X2 je fenylová nebo naftylová skupina, nebo heteroaryl vybraný ze skupiny skládající se z pyridylu, thienylu, furylu, pyridazinylu, pyrimidinylu, pyrazinylu, thiazolylu, oxazolylu, imidazolylu a pyrrazolylu, uvedené skupiny fenyl, naftyl a heteroaryl jsou volitelně substituované jednou nebo dvěmi R2 skupinami;
W4 je substituent vybraný nezávisle ze skupiny skládající se z F, Br, Cl, I, fluoro substituovaného Ci_6 alkylu, NO2, a OH, s výhradami, že:
(i) když je sloučenina podle vzorce 1 a Z je O, pak součet p a r je nejméně 1 a Wi není fluoro skupina v posici 3 tetrahydronaftalenového kruhu;
(ii) když je sloučenina podle vzorce 1 a r je nula a p je 1 a W1 je OH, pak OH skupina je umístěna a k L skupině;
W2 je substituent vybraný nezávisle ze skupiny skládající se z F, Br, Cl, I, fluoro substituovaného Ci-e alkylu, NO2, a OH;
W3 je substituent vybraný nezávisle ze skupiny skládající se z F, Br, Cl, I, C^ alkylu, fluoro substituovaného C^ alkylu, NO2, a OH s výhradou, že když je sloučenina podle vzorce 2 a X2 je CH a r je 0, pak p není 0 a nejméně jedna W3 skupina není alkyl;
L je-(C=Z)-NH-nebo-NH-(C=Z)Z je O nebo S, a
B je COOH nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, COOR8, CONR9R10, -CH2OH, CHzÓRn, CH2OCORh, CHO, CH(OR12)2i CHORDO, -COR7, CR7(ORi2)2, CR7ORi3O, kde R7 je alkylová, cykloalkylová nebo alkenylová skupina obsahující 1 až 5 uhlíků, R8 je alkylová skupina o 1 až 10 uhlících nebo trimethylsilylalkyl, kde alkyl alkylová skupina má 1 až 10 uhlíků, nebo cykloalkylová skupina o 5 až 10 uhlících, nebo R8 je fenyl nebo nižší alkylfenyl, R9 a R10 nezávisle jsou vodík, alkylová skupina o 1 až 10
·· ·· • · · · • · ·· uhlících, nebo cykloalkylová skupina o 5-10 uhlících, nebo fenyl nebo nižší alkylfenyl, Rn je nižší alkyl, fenyl nebo nižší alkylfenyl, R12 je nižší alkyl, a R13 je dvojvazný alkylový zbytek o 2-5 uhlících.
S odkazem na symbol Xi ve vzorci 1, ve způsobech podle vynálezu jsou výhodnější ty sloučeniny, kde Xi je [CíR^Jn a n je 1(tetrahydronaftalenové deriváty) a také kde Xi je O (chromanové deriváty). S odkazem na symbol X2 ve vzorci 2, stejně jsou preferovány sloučeniny, kde X2 je CH nebo N. Když X2 je CH, pak benzenový kruh je s výhodou 1,3,5 substituovaný s L skupinou obsazující posici 1 a W3 a/nebo R2 skupinami obsazujícími 3 a 5 posice. Když symbol X2 je N, pak je pyridinový kruh s výhodou 2, 4, 6 substituovaný s L skupinou obsazující posici 4 a W3 a/nebo R2 skupinami obsazujícími 2 a 6 posice.
R4 skupiny ve vzorci 1 jsou s výhodou H nebo CH3. R3 skupina ve vzorci 1 je s výhodou H. Skupina B výhodnějších sloučenin podle vynálezu je COOH nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, COOR8 nebo CONR9R10, kde R8, Rg a R10 jsou definovány výše.
Toto upozornění se týká skupin W4 a W2 ve vzorci 1, tyto skupiny jsou, obecně řečeno, elektrony přitahující skupiny, které se nacházejí ve sloučeninách, podle vynálezu jak v aromatické části kondenzovaného cyklického systému, nebo jako substituent arylové nebo heteroarylové skupiny Y. S výhodou je W2 skupina přítomna v Y skupině, a W4 je také přítomna v aromatické části kondenzovaného cyklického systému. Když je Z skupina S (thioamidy), W1 nebo W2 skupina nemusí být nezbytně přítomná ve sloučeninách podle vynálezu ve shodě se vzorcem 1, ačkoli s výhodou nejméně jedna ze skupin nebo W2 je nicméně přítomna. V arylovém nebo heteroarylovém Y zbytku ve sloučeninách vzorce 1 a stejně tak vzorce 2, je W2 skupina *=-=s výhodou umístěna v posici sousední k B skupině; s výhodou je B skupina v para poloze fenylového cyklu vzhledem k “amidovému“ zbytku, a tudíž W2 skupina je s výhodou v meta poloze vzhledem k amidovému zbytku. Tam, kde je W4 skupina přítomna v aromatické části kondensovaného cyklického systému sloučenin vzorce 1, obsazuje s výhodou polohu 8 chromanového jádra se Z=C-NH- skupinou obsazující polohu 6. V tetrahydronaftalenových sloučeninách vzorce 1, je skupina Z=C-NH- s výhodou v poloze 2, a Wi skupina je s výhodou v poloze 4. Nicméně, když Wi skupina ve sloučeninách vzorce 1 je OH, pak OH je s výhodou v poloze 3
·· ·«·· • ··· • 1 • « » ·«· tetrahydronaftalenového kruhu.
Výhodné W·, aW2 skupiny jsou F, NO2, Br, I, CF3, CIN3) a OH. Přítomnost jednoho nebo dvou fluoro substituentů v Y skupině (W2) je zvláště výhodná. Když je Y skupinou fenyl, fluoro substituenty jsou s výhodou v ortho a ortho' polohách vzhledem k B skupině, která je s výhodou COOH nebo COOR8.
Tato poznámka se týká W3 skupiny ve vzorci 2, tato skupina je, obecně řečeno, také elektrony přitahující skupinou nebo alkyiovou skupinou, specifičtěji výhodnými W3 skupinami jsou F, NO2, Br, I, CF3, N3 a OH. Eventuálně, ve fenylovém nebo pyridylovém kruhu (ukázáno ve vzorci 2 jako substituent “(W3)p“) je W3 alkylová skupina, s výhodou alkyl s rozvětveným řetězcem, jako například terciární butyl, a p je s výhodou 2.
Tato poznámka se týká symbolu Y ve vzorci 1 a stejně tak vzorci 2, sloučeniny použité s výhodou ve způsobech podle vynálezu jsou ty, kde Y je fenyl, pyridyl, 2thiazolyl, thienyl, nebo furyl, výhodněji fenyl. Pokud jde o substituce na Y (fenyl) a Y (pyridyl) skupinách, výhodné jsou sloučeniny, kde je fenylová skupina 1,4 (para) substituovaná L a B skupinami, a kde pyridinový kruh je 2,5 substituovaný L a B skupinami. (Substituce v polohách 2,5 v nomenklatuře “pyridinu“ odpovídá substituci v poloze 6 nomenklatury “nikotinové kyseliny“.) Ve výhodných sloučeninách podle vynálezu není žádný volitelný Ri substituent (jiný než H) na Y skupině.
L skupina ve vzorci 1 a vzorci 2 je s výhodou -(C=Z)-NH-, a Z je s výhodou O. Jinými slovy, výhodné jsou karbamoylové nebo amidové sloučeniny podle vynálezu, kde -NH- zbytek je navázán na Y skupinu.
Sloučeniny, které jsou současně nejvýhodněji používány ve způsobech léčby podle vynálezu, jsou ukázány níže v tabulce 1 s odkazem na vzorce 3 a 4 a v tabulce s . od kazem na vzorec 5.
4*
Vzorec 3
4*44 • « 9 44 ·· 4 4 4 4 • « «44 4 4 4 4 44 » 4 Μ · 4 <······
4 · 44 444
444 444 «44 «4 «4
Vzorec 5
• ·
Tabulka 1 Sloučenina
Tabulka 2
Sloučenina # x2 W8 W9 w10 rV
41 N H F H Et
42 N H F H H
43 N H H H Et
44 N H H H H
45 CH H F H Et
46 CH H F H H
47 CH OH F H Et
48 CH OH F H H
49 N H F F Me
50 N H F F H
51 CH H F F Me
52 CH H F F H
53 N H no2 H Me
54 N H no2 H H
Způsoby podávání
RARa specifické a selektivní sloučeniny použité ve způsobech podle vynálezu mohou být podávány systematicky nebo místně, v závislosti na takových zřetelech jako stavu, který má být léčen, potřebě místně specifické léčby, množství léčiva, které má být podáváno, a řadě dalších zřetelů.
Při léčbě dermatóz, bude obecně výhodné podávat léčivo místně, ačkoli v určitých případech jako například při léčbě silné cystické akné nebo lupénky může být používáno také orální podávání. Může být používána jakákoli běžná topická formulace jako například roztok, suspenze, gel, mast, nebo rozpustná mast a podobně. Příprava takových topických formulací je dobře popsána v oblasti techniky farmaceutických formulací jak je znázorněno příklady, například, Remington's Pharmaceutical Science, vydání 17., Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania. Pro místní aplikaci mohou být tyto sloučeniny také podávány jako prášek nebo sprej, zvláště ve formě aerosolu. Jestliže má být léčivo podáváno systematicky, může být zpracováno jako prášek, dražé, tableta nebo podobně nebo jako sirup nebo tinktura vhodná pro ústní podávání. Pro intravenózní nebo intraperitoneální podávání bude sloučenina připravena jako roztok nebo suspenze schopná být podávána injekčně. V jistých případech může být užitečné formulovat tyto sloučeniny injekčně. V jistých případech může být užitečné formulovat tyto sloučeniny ve formě čípku nebo jako složení s prodlouženým uvolňováním pro ukládání pod kůži nebo intramuskulární injekci.
Jiné medikamenty mohou být přidávány k takové topické formulaci pro takové druhotné účely jako léčbu kožní suchosti; poskytnutí ochrany proti světlu; jiné medikamenty pro léčbu dermatóz; medikamenty pro prevenci infekce, omezení podráždění, zánětu a podobně.
Léčba dermatóz nebo jakýchkoli jiných indikací známých nebo objevených jako přístupné léčbě sloučeninami typu kyseliny retinové bude ovlivněna podáváním terapeuticky účinné dávky jedné nebo více sloučenin podle vynálezu. Terapeutická koncentrace bude ta koncentrace, která ovlivní omezení konkrétního stavu, nebo zdrží jeho šíření. V jistých situacích může být sloučenina potenciálně používána při profylaktickém způsobu zabránění náporu konkrétního stavu.
Užitečná terapeutická nebo profylaktická koncentrace se bude měnit od stavu ke stavu a v jistých podmínkách se může měnit se závažností stavu, který je léčen, a s vnímavostí pacienta k léčbě. Tudíž, žádná jednotlivá koncentrace nebude jednotně platná, nýbrž bude vyžadovat modifikaci v závislosti na zvláštnostech Choroby, která má být léčena. K takovým koncentracím se může dospět rutinními experimenty. Nicméně, předpokládá se, že při léčbě, například akné, nebo podobných dermatóz, bude formulace obsahující mezi 0,01 a 1,0 miligramů na mililitr formulace představovat terapeuticky účinnou koncentraci pro veškerou aplikaci. Při systematickém podávání množství mezi 0,01 a 5 mg na kg tělesné hmotnosti na den by se mělo očekávat ovlivnění terapeutického výsledku při léčbě mnoha chorob, pro které jsou tyto sloučeniny platné.
Při léčbě tumorů se předpokládá, že dávka přibližně 0,5 až 5 mg na kg tělesné hmotnosti na den představuje terapeutickou dávku. Eventuálně, jak se často provádí při terapii zhoubných nádorů, je pacientovi poskytnuta výchozí dávka 1 mg na kg tělesné hmotnosti na den, a poté je dávka zvyšována dokud není dosaženo maximální tolerované dávky.
• ·· ·
Stanovení RAR(1 receptorové selektivní biologické aktivity a jejího významu při omezování vedlejších účinků a toxicity
Jak je zmíněno v úvodní části této patentové přihlášky, existují u savců (a jiných organismů) dva hlavní typy receptorů kyseliny retinové (RAR a RXR). V rámci každého typu jsou podtypy (RAR„, RARP, RARr, RXRa, RXRp a RXRr), jejichž distribuce není v různých tkáních a orgánech savčích organismů jednotná. Selektivní vazba pouze jednoho nebo dvou podtypů retinoidních receptorů v rámci jedné rodiny retinoidních receptorů může dát vzniknout prospěšným farmakologickým vlastnostem z důvodů měnící se distribuce podtypů v několika savčích tkáních nebo orgánech. Z výše shrnutých důvodů, vazba kteréhokoli nebo všech z retinoidních receptorů, stejně jako specifická nebo selektivní aktivita u kteréhokoli z receptorových podtypů jsou všechny považovány za požadované farmakologické vlastnosti.
Ve světle předchozího dosavadní stav techniky vyvinul metody stanovení pro testování agonistické aktivity sloučenin u RARa, RARP, RARr, RXRa, RXRP a RXRr receptorových podtypů. Například, transaktivační stanovení chimérických receptorů, které testuje agonistickou aktivitu u RARa, RARP, RARr a RXRa receptorových podtypů, a které je založeno na práci publikované P. L. Feignerem a M. Holmem (1989) Focus, 11 2, je popsáno detailně v U.S. patentu č. 5,455,265. Upřesnění Patentu Spojených států č. 5,455,265 je úmyslně začleněno zde tímto odkazem.
Transaktivační stanovení holoreceptorů a stanovení vazby ligandu, která měří schopnost sloučenin vázat se k několika podtypům retinoidních receptorů, jsou popsána v publikované PCT přihlášce č. WO WO93/11755 (zvláště na str. 30-33 a 3741) publikované 24. června 1993, jejíž specifikace je také začleněna zde odkazem. Popis stanovení vazby ligandu je také poskytnuto níže.
Vazebné stanovení
Všechna vazebná stanovení jsou prováděna podobným způsobem. Všech šest receptorových typů bylo odvozeno od uvedeného receptorového typu (RAR α, β, Γ a RXR α, β a Γ) exprimovaného v Baculoviru. Zásobní roztoky všech sloučenin byly připraveny jako 10 mM ethanolické roztoky a postupná ředění prováděná do 1: 1 DMSO; ethanolu. Pufry pro stanovení se skládaly z následujícího pro stanovení všech šesti receptorů: 8% glycerol, 120 mM KCI, 8 mM Tris, 5 mM CHAPS, 4 mM DTT a 0,24 • ·· · ··· mM PMSF, pH - 7,4 při teplotě místnosti.
Vazebná stanovení všech receptorů byla prováděna stejným způsobem. Konečný objem při stanovení byl 250 μΙ a obsahoval 10-40 μρ extrakčního proteinu v závislosti na stanovovaném receptorů souběžně s 5 nM [3H] all-trans retinovou kyselinou nebo 10 nM (3Hj 9-cis retinovou kyselinou a měnícími se koncentracemi soutěžícího ligandu při koncentracích, které byly v rozmezí od 0 - 10'5 M. Stanovení byla naformátována pro 96 jamkový mikrozkumavkový systém. Inkubace byly prováděny při 4 °C dokud nebylo dosaženo rovnováhy. Nespecifická vazba byla definována jako vazba zachovaná za přítomnosti 1000 nM isomeru příslušné neznačené retinové kyseliny. Na konci inkubační periody bylo přidáno 50 μΙ 6,25 % hydroxyapatitu v příslušném promývacím pufru. Promývací pufr se skládal z 100 mM KCI, 10 mM Trisu a buď 5 mM CHAPS (RXR α, β, Γ) nebo 0,5 % Tritonu X-100 (RAR a, β, Γ). Směs byla rozmíchána a inkubována 10 minut při 4 °C, zcentrifugována a supernatant byl odstraněn. Hydroxyapatit byl promyt ještě třikrát příslušným promývacím pufrem. Komplex receptor-ligand byl adsorbován na hydroxyapatit. Množství komplexu receptor-ligand bylo stanoveno čítáním kapalné scintilace hydroxyapatitového peletu.
Po korekci na nespecifickou vazbu byly stanoveny hodnoty IC50· Hodnota IC50 j© definována jako koncentrace kompetujícího ligandu nutná pro snížení specifické vazby z 50 %. Hodnota IC50 byla stanovena graficky z dvojitě logaritmického výnosu dat. Hodnoty Kd byly stanoveny užitím Cheng-Prussofovy rovnice pro hodnoty IC50, koncentraci značeného ligandu a Kd pro neznačený ligand.
Výsledky stanovení vazby ligandu jsou vyjádřeny v hodnotách Kd. (Viz Cheng a kol. Biochemical Pharmacology sv. 22, str. 3099-3108, úmyslně začleněno tímto odkazem.)
-—«· -Tabulka 3 ukazuje výsledky .stanovení vazby ligandu pro jisté vzorové sloučeniny podle vynálezu.
• · • · · ·· · · · · · • · ··· · · · · ·· *· · · · ······ • · · · · · · ·· ··· ··· ··· ·· ··
Tabulka 3
Stanovení vazby ligandu
Sloučenina č. Kd (nanomolární)
RARa RARp RART RXRa RXRp RXRf
2 1.90 480.0 0.00 0.00 0.00 0.00
4 1.3 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
6 3.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
1O 24.0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
12 14.0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
14 52.0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
16 51.0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
18 16.0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
20 57.0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.0 0
22 15 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
24 7.5 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
26 245.0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
28 162.0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
30 <3.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
32 2.30 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
34 9.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
42 14.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
44 19.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
46 26.0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
48 77.0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
50 62.0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
52 87.0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
54 94.0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
TTNPB1 72 5 36
0,00 indikuje hodnoty větší než 1000 nM (nanomolární).
1 TTNPB je retinoid dobře známý v oblasti techniky (4-(E)-2-(5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8tetramethylnaftalen-2-yl)propen-1-yl)benzoová kyselina, která není RARa selektivní.
Jak je možno vidět z předchozích dat, sloučeniny použité v souladu s vynálezem
I · · · · • · • ··· se specificky nebo selektivně vážou na RAR„ retinoidní receptory. Bylo zjištěno ve shodě s vynálezem, že tento zvláštní typ selektivity umožňuje sloučeninám zachovat užitečné vlastnosti typu retinoidú, zatímco omezuje vedlejší účinky a toxicitu. Specifičtěji, níže jsou popsána jistá stanovení buněčných kultur in vitro, v nichž je demonstrována schopnost RAR„ specifických nebo selektivních sloučenin významně inhibovat růst rakovinných buněk.
«
Stanovení linií rakovinných buněk «
• Materiály a způsoby
Hormony
All-trans retinová kyselina (t-RA) (Sigma Chemicals Co., St. Louis, MO) byla skladována při -70 °C. Před každým experimentem byla sloučenina rozpuštěna ve 100 % ethanolu na 1 mM a zředěna v kultivačním médiu bezprostředně před použitím. Všechny experimenty byly prováděny při tlumeném světle. Kontroly byly stanovovány za užití stejné koncentrace ethanolu jako bylo předesláno na experimentálních miskách a tato koncentrace rozpouštědla neměla žádný vliv při žádném stanovení.
Buňky a buněčná kultura
Buněčné linie, RPMI 8226, ME-180 a AML-193 byly získány od American Type Culture Collection (ATCC, Rockville, MD). RPMI 8226 je klon lidských hematopoetických buněk získaný z periferní krve pacienta s mnohočetným myelomem. Buňky se podobají lymfoblastoidním buňkám jiných buněčných linií lidských lymfocytů a * vylučují a lehké řetězce imunoglobulinu. RPMI-8226 buňky rostou v RPMI médiu (Gibco) doplněném 10 % fetálním hovězím sérem, glutaminem a antibiotiky. Buňky byly ·' - . uchovávány jako suspenzní kultury rostlé při 37 °C ve zvlhčené atmosféře 5 % CO2 ve vzduchu. Buňky byly zředěny na koncentraci 1 X105 /ml dvakrát týdně.
ME-180 je linie lidských buněk kožního karcinomu pocházející z hrdla. Tumor byl karcinomem velmi agresivních šupinatých buněk s nepravidelnými buněčnými shluky a s žádnou významnou keratinizací. Buňky ME-180 byly kultivovány a uchovávány v McCoyově 5a médiu (Gibco), doplněném 10% fetálním hovězím sérem, glutaminem a antibiotiky. Buňky byly uchovávány jako jednovrstvé kultury vyrostlé při 37°C ve zvlhčené atmosféře s 5% CO2 ve vzduchu. Buňky byly zředěny na koncentraci 1 X 105 ···· /ml dvakrát týdně.
AML-193 byl vytvořen z blastických buněk klasifikovaných jako M5 akutní monocytová leukémie. Růstový faktor, granulocytový kolonie stimulující faktor (GMCSF) byl požadován pro vytvoření této buněčné linie a růstové faktory jsou nezbytné pro její nepřetržitou proliferaci v chemicky definovaném médiu. AML-193 buňky byly kultivovány a uchovávány v Iscovově modifikovaném Dulbeccově médiu doplněném 10 % fetálním hovězím sérem, glutaminem a antibiotiky s 5 μg/ml insulinu (Sigma Chemical Co.) a 2 ng/ml rh GM-CSF (R a D systémy). Buňky byly naředěny na koncentraci 3 X 105 /ml dvakrát týdně.
Inkorporace 3H-thvmidinu
Způsob používaný pro stanovení inkorporace radioaktivně značeného thymidinu byl převzat z postupu,který popsal Shrivastav a spol. RPMI-8226 buňky byly vysety do 96 jamkové mikrotitrační destičky (Costar) s kulatým dnem při hustotě 1000 buněk/jamku. Do odpovídajících jamek byly testované retinoidní sloučeniny přidávány ve výsledných koncentracích indikovaných pro konečný objem 150 μΙ/jamku. Destičky byly inkubovány 96 hodin při 37 °C ve zvlhčené atmosféře 5 % CO2 ve vzduchu. Následně bylo 1 pCi [5'-3H]-thymidinu (Amersham, U.K., specifická aktivita 43 Ci/mmol) v 25 μΙ kultivačního média přidáno do každé jamky a buňky byly inkubovány dalších 6 hodin. Kultury byly dále zpracovány, jak je popsáno níže.
ME-180 buňky, sklizené trypsinizací byly vysety na 96 jamkovou mikrotitrační destičku s plochým dnem (Costar) při hustotě 2000 buněk/jamku. S kulturami bylo dále nakládáno, jak je popsáno výše pro RPMI 8226 s následujícími výjimkami. Po inkubaci s thymidinem byl supernatant pečlivě odstraněn, a buňky byly promyty 0,5 mM roztokem thymidinu ve fosfátem pufrovaném fysioiogickém roztoku. Na ME-180 buňky bylo krátce působeno 50 μΙ 2,5% trypsinu pro vypuzení buněk z destičky.
AML-193 buňky byly vysety na 96 jamkovou mikrotitrační destičku s kulatým dnem (Costar) při hustotě 1000 buněk/jamku. Do odpovídajících jamek byly přidávány testované retinoidní sloučeniny při konečných koncentracích uvedených pro 150 μΙ/jamku. Destičky byly inkubovány po 96 hodin při 37 °C ve zvlhčené atmosféře 5% CO2 ve vzduchu. Následně bylo 1 pCi [5'-3H]-thymidinu (Amersham, U.K., specifická aktivita 43 Ci/mmol) v 25 μΙ kultivačního média přidáno do každé jamky a buňky byly
inkubovány dalších 6 hodin.
Buněčné linie byly zpracovány následovně: buněčná DNA byla vysrážena 10% trichloroctovou kyselinou na filtrační plachetku se skleněnými vlákny za užití mnohojamkového buněčného sklízeče SKATRON (Skatron Instruments, Sterling VA). Radioaktivita začleněná do DNA, jako přímé měření růstu buněk, byla změřena čítáním kapalné scintilace. Čísla zastupují průměrné rozpady za minutu začleněného thimidinu z trojích jamek ± SEM.
Graf na obrázku 1 přiložených výkresů ukazuje, že při výše popsaném stanovení RPMI 8226 buněčné (maligní myelomové) kultury, sloučeniny 4 a 12 (dvě ukázkové sloučeniny použité ve shodě s vynálezem) inhibovaly růst těchto maligních buněk, v podstatě stejně jako srovnávací sloučenina, all-trans retinová kyselina (ATRA). Graf na obrázku 1 také demonstruje, že zatímco v rozmezí nízkých koncentrací (10‘12 až přibližně 10'9) all-trans retinová kyselina (ATRA) vlastně usnadňuje růst těchto buněk, RARa selektivní sloučeniny 4 a 12 podle vynálezu nestimulují, ale spíše již při těchto nízkých koncentracích inhibují růst těchto maligních buněk.
Graf na obrázku 2 ukazuje, že při výše popsaném stanovení AML 193 (akutní monocytová leukémie) buněčné kultury, sloučeniny 22 a 42 podle vynálezu inhibovaly růst těchto maligních buněk. Dvě další sloučeniny, pro které jsou data také ukázána v tomto grafu, jsou označeny AGN 193090 a AGN 193459. (AGN číslo je libovolné označovací číslo používané společným nabyvatelem tohoto vynálezu.) Sloučeniny AGN 193090 a AGN 193459 nejsou RARa selektivní. Tyto sloučeniny, podle pořadí, jsou 4-[(8-kyano-5,6-dihydro-5,5-dimethylnaft-2-yl)ethinyl]benzoová kyselina a 4-[(5,6dihydro-5,5-dimethylnaft-7(6H)-8-(1-2,2-dimethylpropyliden)naft-2-yl)ethinyl]benzoová kyselina, a jejich Kd hodnoty pro RARa, RARP a RARr receptory jsou 109, 34, 77 a 6, 2, 7, podle pořadí. Graf na obrázku 2 demonstruje, že RAR(1 selektivní nebo specifické sloučeniny inhibují růst maligních buněk při nízkých koncentracích, kde všeobecné agonistické sloučeniny AGN 193090 a AGN 193459 neinhibují, ale při těchto nízkých koncentracích dokonce stimulují růst těchto buněk.
Obrázek 3 je další graf ukazující výsledky stanovení AML-193 buněčné kultury, kde byly testovány sloučeniny 4, 12 a 18 podle vynálezu, a all-trans retinová kyseliny (ATRA). Data ukazují, že RARa selektivní sloučeniny snižují buněčnou proliferaci při nízkých koncentracích, zatímco ATRA při stejné nízké koncentraci spíše podporuje
• · ·· • · · • ·· buněčnou proliferaci.
V další linii stanovení je testován účinek retinoidních sloučenin proti buňkám získaným z pevných tumorů pacientů. Toto EDR stanovení je popsáno níže takto:
Biopsie čerstvě resektovaného pevného tumoru byly přijaty 24 hodin po chirurgickém zákroku. Druhy byly zpracovány pro stanovení po uchování části tumoru pro uložení do parafinu a histopatologické potvrzení životaschopnosti vzorku a tkáňovou diagnózu. Zbývající vzorek byl rozdělen na malé fragmenty za pomoci sterilních nůžek. Malé tkáňové fragmenty byly vystaveny působení kolagenázy a DNAázy po dobu 2 hodin za míchání CO2 inkubátorem, aby došlo k uvolnění tumorových buněk z trámčiny vazivové tkáně. Výsledná buněčná suspenze byla promyta, a počty buněk byly stanoveny z cytospinového preparátu. Tumorové buňky byly rozsuspendovány na 40 000 buněk na ml v 0,3 % agaróze v RMPI 1640 doplněném 15% FCS, glutaminem a antibiotiky, a 0,5 ml bylo zaočkováno do každé jamky 24 jamkové destičky přes 0,5 ml vrstvu 0,5% agarózy. Tyto kultivační podmínky zabraňují přilnavosti buněk, a tudíž umožňují proliferaci jen transformovaným buňkám. Navíc, buňky rostou do trojrozměrných sféroidů, rekapitulujíce jejich morfologii in vivo.
Retinoidní léčiva byla přidávána 24 hodin po vysetí, aby byla zabezpečena reekvilibrace vzorku na růstové prostředí po otřesech transportu a zpracování. Buňky rostly po dobu čtyř dnů za přítomnosti léčiva, s 3H-thymidinem (5 μΟϊ/πηΙ) přidaným 48 hodin před sklizením, aby bylo zabezpečeno náležité značení proliferujících buněk. Po zkapalnění agarosové buněčné suspenze při 90 °C, byly buňky sklizeny na filtrech ze skleněných vláken, které byly čítány v 5 ml scintilační kapaliny za užití kapalného scintilačního čítače Beckman 6500.
Výsledky jsou předloženy jako podíl kontrolní proliferace buněk nevystavených ^chemickému působení. Pokusné skupiny byly prováděny dvojmo nebo trojmo, zatímco kontroly byly prováděny čtyřnásobně.
Graf na obrázku 4 ukazuje vliv sloučeniny 2 na vaječníkové tumory získané ze 4 pacientek, a demonstruje, že sloučeniny inhibují proliferaci těchto tumorových buněk koncentračně závislým způsobem.
Kvalifikovaný odborník vyrozumí, že schopnost RARa selektivních sloučenin významně inhibovat růst maligních buněk ve výše popsaných stanoveních je známkou, že tyto sloučeniny mohou být podávány s prospěšným účinkem na savce nesoucí tumor (včetně lidí) pro léčbu tumorů, zvláště akutní monocytové leukémie, krčního • · · ·· ·· · · · · • · ··· · ♦ · · ·· • · · · · · · ··· · · ··· · · ··· ·· ··· · ·'· ··· ·· ·· karcinomu, myelomu, karcinomů vaječníků a karcinomů hlavy a krku.
Bylo také zjištěno podle vynálezu, že proliferace buněk pigmentového epitelu sítnice je inhibována RARa selektivními sloučeninami. Jakožto prostředí je významné, že po odloučení sítnice se sítnicový pigmentový epitel (RPE) stává dediferencovaným, proliferuje a putuje do podsítnicového prostoru (Campochiaro a spol., Invest. Opthal &
Vis. Sci. 32:65-72 (1991)). Takové procesy mají tudíž dopad na úspěch procedury znovupřipojení sítnice. RAR agonisté jako například all-trans retinová kyselina (ATRA) jeví antiproliferativní účinek na růstovou rychlost primárních lidských RPE kultur (Campochiaro a spol., tamtéž) a ukázalo se, že snižují výskyt odloučení sítnice po chirurgickém zákroku znovupřipojení sítnice při studiu člověka (Fekrat a spol., Opthalmology 102:412-418 (1994)).
Graf na obrázku 5 ukazuje koncentračně závislý inhibiční efekt all-trans retinové kyseliny (ATRA) a sloučeniny 42 na proliferaci RPE v postupu stanovení, který je popsán níže.
Analýza primárních RPE kultur
Primární kultury lidského sítnicového pigmentového epitelu (RPE) byly získány z očí, jak bylo popsáno dříve, (Campochiaro a spol., Invest. Opthal & Vis. Sci. 32:65-72 (1991)). 5 X 104 buněk bylo vyseto do 16-mm jamek 24-jamkových vícejamkových destiček v Dulbeccově modifikovaném Eagleově médiu (DMEM Gibco) obsahujícím 10% fetální hovězí sérum (FBS). Buňky byly podrobeny působení ethanolu samotného (kontrola), ATRA (10'1° až W6 M) v ethanolu, a sloučeniny 42 (10'1° až W6 M) v ethanolu. Buňky byly vyživovány čerstvým médiem obsahujícím odpovídající koncentrace těchto sloučenin každé dva dny po dobu celkově šestidenního působení.
Buňky byly odstraněny z destiček prostřednictvím působení trypsinu a počet buněk byl spočítán elektronickým počitadlem buněk. Jak je vidět na obrázku 5, jak působení ATRA tak sloučeniny 42 na primární RPE buňky vedlo k dávkově závislému poklesu v proliferaci RPE buněk.
. Vliv místního podávání RARa selektivních retinoidních sloučenin podle vynálezu pokusným bezsrstým myším byl také vyhodnocen stanovením topického kožního podráždění, za užití RARa selektivní sloučeniny 18 podle vynálezu. Obzvláště bylo kožní podráždění měřeno na semikvantitativní škále denním subjektivním zhodnocením ·· ···· • · • ··· odlupování kůže a oděrek. Jednotlivé číslo, faktor topického podráždění, shrnuje podráždění kůže vyvolané u živočicha během chodu experimentu. Faktor topického podráždění se vypočte následovně. Faktor topického podráždění je algebraický součet sdruženého faktoru odlupování a sdruženého faktoru oděrek. Sdružené faktory jsou v rozmezí od 0-9 a 0-8 pro odlupování a oděrky, podle pořadí, a berou v úvahu maximální závažnost, čas nástupu, a průměrnou závažnost pozorovaných odlupování a oděrek.
Závažnost odlupování je hodnocena na 5-bodové stupnici a závažnost oděrek je hodnocena na 4-bodové stupnici, s vyššími hodnotami odrážejícími vyšší závažnost. Složka maximální závažnosti sdružených faktorů by byla hodnota nejvyšší denní závažnosti udělená danému živočichovi v průběhu chodu pozorování.
úženého faktoru, je faktor pohybující se v
Faktor času nástupu
1 2
Pro složku časového nástupu rozmezí 0 až 4 udán následovně:
Čas do objevení odlupování nebo oděrek závažnosti 2 nebo vyšší (dny)
6-7
3-4
1-2
Složka průměrné závažnosti sdruženého faktoru je součet denních faktorů odlupování nebo oděrek dělený počtem dnů pozorování. První den působení není započítáván, jelikož léčebná sloučenina neměla příležitost mít účinek v čase prvního vystavení účinkům.
K vypočtení sdružených faktorů odlupování a oděrek, jsou sečteny faktory průměrné závažnosti a času nástupu a děleny 2. Výsledek je přidán k faktoru maximální závažnosti. Sdružené faktory odlupování a oděrek jsou poté sečteny, čímž dostaneme celkový faktor topického podráždění. Každý živočich obdrží faktor topického podráždění, a hodnoty jsou vyjádřeny jako průměr ± SD jednotlivých faktorů skupiny živočichů. Hodnoty jsou zaokrouhleny na nejbližší celé číslo.
• · ··« · • · · • · ··· • · ·
Takto, samice bezsrstých myší [Crl:SKH1-hrBR] (8-12 týdnů staré, n=4) byly podrobeny místně po dobu 5 po sobě následujících dnů působení sloučeniny 18 v dávkách vyjádřených v nanomol/25 g, což je zvláště dáno v tabulce 4. Působení byla aplikována na hřbetní kůži v celkovém objemu 4 ml/kg (-0,1 ml). Myši byly pozorovány denně a počítány faktory pro odlupování a oděrky až do 3 dnů po posledním působení, t.j. 8.dne, včetně.
Tabulka 4
Osmidenní topické stanovení sloučeniny 18 u bezsrstých myší
Dávka Úmrtnost (ze čtyř) Tělesná hmotnost % přírůstku nebo (ztráty) Faktor odlupování Faktor oděrek Sdružený faktor
100 0 8±7 0 1 1 ±1
1000 0 4±1 1 1 2±0
TTNPB
0,9 0 5±2 5 3 8±2
2,7 0 (4 ±3) 6 3 9 ±2
9 0 (11 ±3) 7 5 11 ±:
- Tato data ukazují, že RARa selektivní sloučenina nezpůsobuje zdánlivě žádné kožní podráždění a žádný úbytek hmotnosti až do 1000 nmol/25 g v testovém modelu. Pro srovnání by mělo být zmíněno, že retinoidní sloučenina dobře známá v oblasti techniky 4-(E)-2-(5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethylnaftalen-2-yl)propen-1-yl) benzoová kyselina (TTNPB), která není RARa selektivní, způsobuje vážnější kožní podráždění při výše zmíněném testu, jak je ukázáno v předcházející tabulce.
Další důležitá výhoda podávání RARa selektivních retinoidních sloučenin savci spočívá ve významně snížené teratogenní síle RARa selektivních sloučenin ve ·· ···· * · « · ·* 99 ·· · · · · • · · · ··
9 9 9 9 9 9 999 9 9
9 9 9 9 9 9 9
999 999 999 99 99 srovnání s mnoha jinými retinoidy, jak bylo změřeno biostanovením potlačení chondrogenese. Toto stanovení se provádí následovně:
Vysokohustotní plošky kultur mesenchymových buněk končetinových základů jsou používány ke srovnání schopnosti různých koncentrací testovaných léčiv potlačit chondrogenní diferenciaci jako biostanovení. Předkončetinové základy myších embryí 12. den březosti (54 ± 2 somity) jsou disociovány v roztoku trypsin- EDTA, a výsledná suspenze jednotlivých buněk je vyseta jako 20-μΙ plošky (200 000 buněk/plošku) na plastické kultivační misky. Retinoid v koncentracích od 0,3 ng/ml do 3 μg/ml (1 nM-10 μΜ) je přidáván do kultivačního média (Eagleovo MEM + 10% fetální hovězí sérum, GIBCO) 24 hodin po počátečním vysetí. Kontrolní kultury přijaly jen vehikulum (ethanol, koncentrace < 1% objemu); retinová kyselina je používána jako pozitivní kontrola v další sadě kultur.
Kultivace jsou ukončeny 96 hodin po vysetí, v kterémžto čase je odstraněno médium a buňky jsou fixovány 1 hodinu v 10% formalínu obsahujícím 0,5% chlorid cetyJpyridinia: Kultury jsou propláchnuty v kyselině octové a barveny po dobu 1 hodiny v 0,5% roztoku ftalocyaninové modři při pH 1,0, rozlišeny v 3% kyselině octové, a poté dehydrovány v ethanolu a obodovány na chondrogenesi pod mikroskopem. Nepřítomnost nebo snížení počtu chrupavčitých uzlíků v obarvených kulturách ve srovnání s kontrolními kulturami jsou brány jako míra potlačení chondrogenese. Počet chrupavčitých uzlíků obarvených v celé plošce, průměrný počet uzlíků, a směrodatné odchylky jsou vypočteny pro čtyři replikativní kultury na jedno zpracování. Střední koncentrace způsobující 50% inhibici chondrogenese ve srovnání s kontrolami (IC5o) je vypočtena proložením logaritmické křivky dávkově závislými daty. Hodnoty IC50 jsou vyjádřeny v jednotkách nanogramy na mililitr (ng/ml). Hodnota IC50 vyšší koncentrace v tomto stanovení značí nižší teratogenitu. Tabulka 5 uvádí výsledky získané v tomto stanovení pro sloučeniny 10, 18, a 42 podle vynálezu, stejně jako pro srovnání s alltrans retinovou kyselinou (ATRA) a 4-(E)-2-(5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8tetramethylnaftalen-2-yl)propen-1 -yl)benzoovou kyselinou (TTNPB).
• ·
Sloučenina IC50 (ng/ml)
10 250
18 220
42 65
ATRA 55
TTNPB 0,01
Jak je možno vidět, použité sloučeniny podle vynálezu jsou méně teratogenní než all-trans retinová kyselina a významně (o řádovou hodnotu 104) méně teratogenní než sloučenina dřívějšího stavu techniky TTNPB.
Hmotnostní úbytek nebo přírůstek, který pokusná zvířata prodělala po podání retinoidních sloučenin, je jiným testem toxicity léčiva, s významným hmotnostním úbytkem při relativně nízkých dávkách indikujícím významný toxický vedlejší účinek retinoidu. V jednom experimentu byla skupina 5 krys podrobena působení měnících se dávek (podávaných v kukuřičném oleji) testovaného retinoidu po dobu 3 dní. Krysy byly utraceny 24 hodin po poslední dávce. Graf na obrázku 6 ukazuje průměrnou hmotnost každé skupiny krys podrobených působení denní dávky 10, 30, a 90 μπηοΙ/kg/den sloučeniny 42, stejně jako průměrnou hmotnost skupiny kontrolních krys, kterým nebyl podáván retinoid. Jak je možno vidět, RARa selektivní sloučenina 42 nezpůsobuje vlastně žádný hmotnostní úbytek ve srovnání s kontrolou s výjimkou velmi vysoké dávky (90 pmol/kg/den). Graf na obrázku 7 ukazuje hmotnost krys čtvrtý den (24 hodin po posledním podání retinoidu) v podobném testu s měnícími se dávkami sloučeniny 18, s nulovou dávkou indikující kontrolu. Jak je možno vidět, tento RAR„ selektivní retinoid nezpůsobuje vlastně žádný hmotnostní úbytek, dokonce ani při vysoké dávce 90 pmol/kg/den. Je pozoruhodné, že v podobných testech TTNPB, která se váže ke • · všem třem RAR receptorovým podtypům (viz tabulka 3), způsobuje velmi významný hmotnostní úbytek. V tomto experimentu zahrnujícím krysy podrobené působení sloučeniny 42, nebyla pozorována významná mukokutánní toxicita.
V jiném experimentu byly tři týdny starým samcům morčat Hartleyových intraperitoneálně implantovány osmotické pumpy obsahující 20 % DMSO / 80 polyethylenglykol (vehikulum) nebo sloučeninu 42 v koncentracích 4,4; 13,3 nebo 40 mg/ml ve vehikulu. Na základě počátečních tělesných hmotností a známé rychlosti pumpování byiy odhadnuty přibližné dávky sloučeniny 42 - 0, 2, 6, a 18 mg/kg/den. Tělesné hmotnosti a klinická pozorování byly zaznamenávány při nejmenším každý druhý den po dobu 14 dní po implantaci. Morčata byla po 14 dnech utracena a pumpy byly zkoumány z hlediska možného poškození. Graf na obrázku 8 ukazuje hmotnost živočichů zahrnutých v tomto experimentu v průběhu 15 dnů. Jak je možno vidět z grafu, nižší a střední dávky RARa selektivní retinoidní sloučeniny (sloučenina 42) nezpůsobovaly žádný nebo jen statisticky nevýznamný pokles hmotnostního přírůstku vzhledem ke kontrolním zvířatům. Významný pokles hmotnostního přírůstku byl pozorován jen při vysoké dávce (18 mg/kg/den) sloučeniny 42. Co je důležité, při ťo.mto experimentu nebyly pozorovány žádné známky mukokutánní toxicity při jakékoli dávce sloučeniny 42. Předchozí, zjevně snížená mukokutánní toxicita pozorovaná byla -li zvířata podrobena působení RARa selektivních sloučenin podle vynálezu, je významnou výhodou, protože mukokutánní toxicita je hlavní a nejmrzutější vedlejší účinek či toxicita retinoidů u lidských pacientů.
Syntetické způsoby pro přípravu výhodných příkladů RARg selektivních sloučenin podle vynálezu
Obecná struktura sloučenin, které jsou s výhodou používány ve způsobech léčby . podle vynálezu jsou ukázány výše ve vzorci 1a vzorci 2. Tyto sloučeniny mohou být vyrobeny zde ilustrovanými syntetickými chemickými cestami. Syntetický chemik bez váhání ocení, že zde vyložené podmínky jsou specifická provedení, která mohou být zevšeobecněna na kteroukoli a všechny sloučeniny vyznačené těmito vzorci.
Všeobecně vzato, způsob přípravy sloučenin s výhodou používaných v těchto způsobech podle vynálezu ve shodě se vzorcem 1 zahrnuje tvorbu amidu reakcí sloučeniny o obecném vzorci 6 se sloučeninou o obecném vzorci 7, nebo reakcí sloučeniny o obecném vzorci 6a se sloučeninou o obecném vzorci 7a. Podobně, • · způsob přípravy sloučenin ve shodě se vzorcem 2 zahrnuje tvorbu amidu reakcí sloučeniny o obecném vzorci 8 se sloučeninou o obecném vzorci 7, nebo reakcí sloučeniny o obecném vzorci 8a se sloučeninou o obecném vzorci 7a.
Sloučenina o vzorci 6 je kyselina nebo “aktivovaná forma“ karboxylové kyseliny navázaná k aromatické části tetrahydronaftalenového, (Xi = [C(Ri)2]n a n je 1), dihydroindenového ([C(Ri)2]n kde n je 0) nebo chromanového (X! je 0) jádra. Karboxylová kyselina nebo její “aktivovaná forma“ je navázána do polohy 2 nebo 3 tetrahydronaftalenu, a do poiohy 6 nebo 7 chromanových zbytků. U sloučenin podle vynálezu s výhodou používaných je navázání do polohy 2 tetrahydronaftalenu a do polohy 6 chromanu.
Termín “aktivovaná forma“ karboxylové kyseliny by měl být chápán v tomto ohledu jako takový derivát karboxylové kyseliny, který je schopný tvořit amid, reaguje -li s primárním amidem o vzorci 7. V případě “opačných amidů“ je aktivovaná forma karboxylové kyseliny derivát (vzorec 7a), který je schopný tvořit amid, reaguje -li s primárním aminem o vzorci 6a. Tento, všeobecně vzato, označuje takové deriváty karboxylové kyseliny, které jsou běžně známy a užívány v oblasti techniky k tvorbě amidových vazeb s aminem. Příklady vhodných forem nebo derivátů pro tento účel jsou chloridy kyselin, bromidy kyselin, a estery karboxylové kyseliny, zvláště aktivované estery, kde alkoholový zbytek esteru tvoří dobře odstupující skupinu. V současnosti nejvýhodnější činidla podle vzorce 6 (nebo vzorce 7a) jsou chloridy kyselin (X3 je Cl). Chloridy kyselin o vzorci 6 (nebo o vzorci 7a) mohou být také připraveny tradičními metodami z odpovídajících esterů (X3 je například ethyl) hydrolýzou a působením thionylchloridem (SO2CI). Chloridy kyselin o vzorci 6 (nebo o vzorci 7a) mohou být také připraveny přímým podrobením karboxylových kyselin působení thionylchloridem, kde karboxylová kyselina, spíše než její ester, je dostupná komerčně nebo známým syntetickým postupem. Chloridy kyselin o vzorci 6 (nebo o vzorci 7a) typicky reagují s aminem o vzorci 7 (nebo o vzorci 6a) v inertním rozpouštědle, jako například v dichlormethanu, za přítomnosti akceptoru kyselin, jako například pyridinu.
Karboxylové kyseliny samotné ve shodě se vzorcem 6 (nebo vzorcem 7a) jsou také vhodné pro tvorbu amidu, jestliže reagují s aminem, katalyzátorem (4dimethylaminopyridin) za přítomnosti dehydratujícího činidla, jako například dicyklohexylkarbodiimidu (DCC) nebo výhodněji 1-(3-dimethylaminopropyl)-3ethylkarbodiimid hydrochloridu (EDC).
• ·
Karboxylové kyseliny nebo odpovídající estery o vzorci 6 jsou, všeobecně vzato, připraveny, jak je popsáno v chemické vědecké nebo patentové literatuře a literární postupy pro jejich přípravu mohou být modifikovány , jestliže je to nezbytné, takovými chemickými reakcemi nebo postupy, které jsou samy o sobě známy v oblasti techniky. Například, všeobecně vzato, 2,2, 4,4 a/nebo 2,2,4,4-substituovaný chroman 6karboxylových a chroman 7-karboxylových kyselin jsou dostupné ve shodě s naukou patentů Spojených států č. 5,006,550, 5,314,159, 5,324,744, a 5,348,975, jejichž specifikace jsou přímo začleněny zde tímto odkazem. 5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2karboxylové kyseliny jsou, všeobecně vzato, dostupné ve shodě s naukou patentu Spojených států č. 5,130,335, jehož specifikace je přímo začleněna zde tímto odkazem.
Předcházející obecný popis reakcí, které vedou k tvorbě amidů o vzorci 1 je také, všeobecně vzato, použitelný pro tvorbu amidů o vzorci 2. Reagenty, které jsou používány ve shodě s obecnými principy pro tvorbu amidových sloučenin o vzorci 2 uvedenými výše jsou: aktivované formy karboxylových sloučenin ukázané ve vzorci 8 a ve vzorci 7a, a aminy o vzorci 7 a o vzorci 8a.
Vzorec 6a
Vzorec 7a • ·· ·
Vzorec 8
Vzorec 8a
Karboxylové kyseliny nebo jim odpovídající estery o vzorci 8 jsou, všeobecně vzato, připraveny, jak je popsáno v chemické vědecké nebo patentové literatuře, a literární postupy pro jejich přípravu mohou být modifikovány, jestliže je to nezbytné, takovými chemickými reakcemi nebo postupy, které jsou samy o sobe známy v oblasti techniky.
Reakční schéma 1
• ·
Sloučenina E
Sloučenina F
Sloučenina C
Sloučenina G • ·
Reakční schéma 2
«*·***, ·· **· SynAesii 1572, S140 sloučenina H
Sloučenina M
Sloučenina N • · · • · ··· ·
Reakční schéma 2 (pokračování)
.COjH
1) soa2
2) CH3OH,TEA ch2ci2
Br
Reakční schémata 1 a 2 poskytují příklady pro syntézu derivátů 5,6,7,8tetrahydro-5,5,8,8-tetramethylnaftalen-2-karboxylové kyseliny, které jsou v šíři rozsahu • ·
B ··*· • · • ··· vzorce 6 a které reagují s aminem o vzorci 7 za poskytnutí (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8tetramethylnaftalen-2-yl)karbamoylových derivátů v rozsahu vzorce 1. Tudíž, jak je ukázáno v reakčním schématu 1, ethyl-5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethylnaftalen-2karboxylát (sloučenina A) je nitrován za poskytnutí odpovídající 3-nitro sloučeniny (sloučenina B). Nitro skupina sloučeniny B je redukována za poskytnutí odpovídající 3amino skupiny (sloučenina C), která je popsána v publikaci Lehmann a spol. Cancer Research, 1991, 51, 4804. Ethyl-5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-3aminonaftalen-2-karboxylát (sloučenina C) je brómován za získání odpovídajícího 4bromo derivátu (sloučenina D), který je konvertován působením isoamylnitritu a redukcí H3PO2 na ethyl-5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-4-bromnaftalen-2-karboxylát (sloučenina E). Zmýdelnění sloučeniny E poskytuje 5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8tetramethyl-4-bromnafta!en-2-karboxylovou kyselinu (sloučenina F), která je používána jako reagent podle vzorce 6. Ethyl-5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-3aminonaftalen-2-karboxylát (sloučenina C) je také diazotována a ponechána reagovat s HBF4 za poskytnutí 5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-3-fluornaftalen-karboxylátu (sloučenina G), který slouží jak sama. o sobě, tak po zmýdelnění. jako činidlo, podle vzorce 6.
5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-hydroxynaftalen (sloučenina H, dostupná podle publikace Krause Synthesis 1972 140), je výchozí látka v příkladu ukázaném v reakčním schématu 2. Sloučenina H je brómována za poskytnutí odpovídající 3-bromo sloučeniny (sloučenina I), která je poté chráněna na hydroxylové skupině reakcí s methoxymethyl chloridem (MOMCI) za poskytnutí 5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8tetramethyl-3-methoxymethoxy-2-bromnaftalenu (sloučenina J). Sloučenina J se ponechá reagovat s terč.buthyllithiem a oxidem uhličitým za poskytnutí odpovídající . karboxylové kyseliny (sloučenina K), ze které je chránící methoxymethylová skupina odstraněna kyselinou za vzniku 5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2hydroxynaftalen-3-karboxylové kyseliny (sloučenina L). Sloučenina L je brómována za poskytnutí 5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-1-brom-2-hydroxynaftalen-3karboxylové kyseliny (sloučenina M). Sloučenina L a sloučenina M slouží jako reagenty podle vzorce 6. Hydroxy skupina sloučeniny M je chráněna pro další přeměny methoxymethyl chloridem (MOMCI) za přítomnosti zásady, poskytujíce 5,6,7,8tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-1-brom-2-methoxymethoxynaftalen-3-karboxylovou kyselinu (sloučenina N).
Reakční schéma 3
····
002¾¾
Sloučenina O
Sloučenina X
HO
Reakční schéma 4 několik kroků
sloučenina Y
• · · · * · ··
1) tBuLi/THF/-78°C
2) δξ *
Br sloučenina B1
Shroot, B.
U. S, Patent 5,059,621 • ···· • · • ··#
Reakční schémata 3, 4 a 5 poskytují příklady pro syntézu derivátů 2,2,4,4 a 4,4substituovaných chroman-6-karboxylových kyselin, které mohou sloužit jako reagenty podle vzorce 6 pro syntézu karbamoylových (amidových) sloučenin v rozsahu působnosti vynálezu. Tudíž, nyní s odvoláním na reakční schéma 3, 2,2,4,4tetramethylchroman-6-karboxylová kyselina (sloučenina O, viz U.S.patent č. 5,006,550) je brómována bromem v kyselině octové za poskytnutí odpovídajícího 8-bromo derivátu (sloučenina P). Sloučenina P je převedena na chlorid kyseliny působením thionylchloridu, a výsledný chlorid kyseliny je vhodný pro reakci s aminem o vzorci 3 poskytuje tak karbamoylové (amidové) sloučeniny podle vynálezu. Chlorid kyseliny je také ponechán reagovat s alkoholem (methanolem) v přítomnosti zásady za poskytnutí odpovídajícího esteru, methyl-2,2,4,4-tetramethyl-8-bromchroman-6-karboxylátu (sloučenina R). Funkční skupina bromu sloučeniny R je převedena na funkční skupinu trifluormethyl působením trifluoracetátu sodného v přítomnosti katalyzátoru jodidu měďného a 1-methyl-2-pyrrolidinonu (NMP), a karboxylátová esterová skupina je zmýdelněna za poskytnutí 2,2,4,4-tetramethyl-8-trifluormethylchroman-6-karboxylové kyseliny (sloučenina S). Sloučenina S je v rámci vzorce 6 a je vhodná sama o sobě nebo jako chlorid kyseliny nebo v jiné “aktivované“ formě k reakci s aminy o vzorci 7 za poskytnutí karbamoylových (amidových) sloučenin podle vynálezu. 2,2,4,4tetramethylchroman-6-karboxylová kyselina (sloučenina O) je také převedena na methylester (sloučenina T), který je poté nitrován za poskytnutí 2,2,4,4-tetramethyl-8nitrochroman-6-karboxylové kyseliny (sloučenina V), dalšího reagentu v rámci vzorce 6. Navíc, v příkladu dále ukázaném v reakčním schématu 3, 2,2,4,4tetramethylchroman-6-karboxylová kyselina (sloučenina O) je převedena na ethylester a poté nitrována za poskytnutí ethyl-2,2,4,4-tetramethyl-8-nitrochroman-6-karboxylátu (sloučenina W). Dále, sloučenina O reaguje s ICI za poskytnutí 2,2,4,4-tetramethyl-8jodchroman-6-karboxylové kyseliny (sloučenina X).
Ve shodě s příkladem ukázaným v reakčním schématu 4, 2-methylfenol je podroben sledu reakcí obsaženému v patentu Spojených států č. 5,045,551 (začleněný zde tímto odkazem) za poskytnutí 2,2,4,4,8-pentamethylchromanu (sloučenina Y). Sloučenina Y je brómována bromem v kyselině octové za získání 2,2,4,4,8pentamethyl-6-bromchromanu (sloučenina Z), který reaguje s terc.butyllithiem a poté s oxidem uhličitým za získání 2,2,4,4,8-pentamethylchroman-6-karboxylové kyseliny (sloučenina Ai).
·« ···· • · · • · ··· ·· · · ·· ·· • · · · • · ··
Reakční schéma 5 ilustruje syntézu 4,4-dimethyl-8-bromchroman-6-karboxylové kyseliny (sloučenina Βή) bromací 4,4-dimethylchroman-6-karboxylové kyseliny, která je dostupná ve shodě s naukou patentu Spojených států č. 5,059,621, jejíž specifikace je začleněna zde tímto odkazem. 2,2,4,4,8-pentamethylchroman-6-karboxylová kyselina (sloučenina A4) a 4,4-dimethyl-8-bromchroman-6-karboxylová kyselina (sloučenina Bi) slouží jako reagenty, buď samy o sobě, nebo jako odpovídající chloridy kyselin (nebo jiné “aktivované“ formy), podle vzorce 6 pro syntézu karbamoylových (amidových) sloučenin podle vynálezu.
Nyní se zpětným odvoláním na reakci mezi činidlem o vzorci 6 s aminosloučeninou o vzorci 7, je zmíněno, že aminosloučeniny jsou, všeobecně vzato, dostupné ve shodě s dosavadním stavem techniky, jak je popsána ve vědecké a patentové literatuře. Specifičtěji, aminosloučeniny o vzorci 7 mohou být připraveny, jak je popsáno ve vědecké a patentové literatuře, nebo ze známých sloučenin podle literatury, takovými, chemickými reakcemi nebo přeměnami, které patří mezi odborné znalosti praktického chemika. Reakční schéma 6 ilustruje příklady pro přípravu aminosloučenin o vzorci 7 (kde Y je fenyl) z komerčně dostupných výchozích látek (Aldrich Chemical Company, nebo Research Plus, lne.). Znázorněné sloučeniny o vzorci 7 jsou používány pro syntézu několika výhodných sloučenin použitých ve způsobech podle vynálezu.
9 ··· · «·
Reakční schéma 6
··· ·· *·
1) NagC^Pr. HOAc, H2SO4.90°C
2) SOCli *“
3) EtOH/Py, CB.C1·»
4) ¾ Pd/C
1) Nai&iCb. HOAc. H1SO4,90°C
2) SOa2
3) EtOH/Py. CH2C12
4) H2, Pd/C
1) Na^CftOr. HOAc, H2SO4.90°C
2) SOCI·, *“
3) EtOHŽPy. CH-,Cl->
4) H->, Pd/C
H2N
COaCjHs
H2N co2h
1)SOC12_
2) MeOH/TEA/CHxClj
Cl
sloučenina F1
EDC, DMAP
EtOH
DSOCU
2) CH3ÓH/Py
3) NaN3/CH3CN
4) H,, Pd/C
sloučenina H1 « · • ··· • · « · ® · 9 it 999
99 9999 • · · 9 99 • 9 9 999 9 9
9 9 9 9
9,99 999 99 99
Tudíž, ve shodě s reakčním schématem 6, 3-nitro-6-methylfluorbenzen (Aldrich) je podroben oxidaci, přeměně výsledné karboxylové kyseliny na chlorid kyseliny a poté ethylester, následované redukcí nitro skupiny za poskytnutí ethyl-2-fluor-4aminobenzoátu (sloučenina Ci). 3-Nitro-6-methylbrombenzen (Aldrich) a 3-nitro-6methylchlorbenzen (Aldrich) jsou podrobeny v podstatě stejnému sledu reakcí za poskytnutí ethyl-2-brom-4-aminobenzoátu (sloučenina D4) a ethyl-2-chlor-4aminobenzoátu (sloučenina E^. 2-Nitro-4-aminobenzoová kyselina (Research Plus) je převedena na její methylester (sloučenina F4) přes odpovídající chlorid kyseliny. 2,3,5,6-Tetrafluor-4-aminobenzoová kyselina (Aldrich) je esterifikována působením ethanolu v přítomnosti 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid hydrochloridu (EDC) a 4-dimethylaminopyridinu v CH2CI2 za získání ethyl-2,3,5,6-tetrafluor-4aminobenzoátu (sloučenina G1). 2,4,6-Trifluorbenzoová kyselina (Aldrich) je převedena na methylester přes chlorid kyseliny, a atom 4-fluoru je odstraněn reakcí s azidem sodným, následovanou hydrogenací, za poskytnutí methyl-2,6-difluor-4-aminobenzoátu (sloučenina H1). Sloučeniny C1, D1, E1, F1t G1 a H-ι slouží jako aminové reagenty podle vzorce 7. Další příklady reagentů podle vzorce 7 jsou nitro, fluor, chlor, brom a trifluormethyl deriváty amino substituovaných heteroaryl karboxylových kyselin, nebo jejich nižších alkyl esterů, jako například ethyl-2-amino-4-chlorpyridin-2-karboxylát, ethyl-5-amino-3-chlorpyridin-5-karboxylát, a 3,4-dibrom-5-aminothiofen-2-karboxylová kyselina. Poslední uvedené příklady mohou být připraveny příslušnou chlorací nebo bromací 2-aminopyridin-5-karboxylové kyseliny nebo jejího esteru, 3-aminopyridin-6karboxylové kyseliny nebo jejího esteru (popsány v WO 93/06086) a 2-aminothiofen-5karboxylové kyseliny (popsáno v PCT/US92/06485).
Reakce mezi sloučeninami o vzorci 6 a vzorci 7 nebo mezi sloučeninami o vzorci 6a a 7a, popsané výše, zahrnují aktuální syntézy karbamoylových (amidových) sloučenin podle vynálezu. Četné příklady této reakce jsou podrobně popsány níže v experimentální části. Karbamoylové (amidové) sloučeniny podle vynálezu mohou být převedeny na thiokarbamoylové (thioamidové) sloučeniny podle vynálezu, kde s odkazem na vzorec 1, Z je S, reakcí karbamoylové (amidové) sloučeniny s 2,4-bis(4methoxyfenyl)-1,3-dithia-2,4-difosfetan-2,4-disulfidem (Lawessonovo činidlo). Tato reakce je znázorněna v reakčním schématu 7 pro dva specifické příklady pro sloučeniny použité ve způsobech podle vynálezu.
Reakční schéma 7
V reakčním schématu 7 je jedna z výchozích látek ethyl-4-[5',6',7\8'-t©trahydro5',5',8',8'-tetramethylnaftalen-2-yl)karbamoyl]benzoát (sloučenina h) získávána podle publikace Kagechika a spol., J. Med. Chem. 1988 31, 2182-2192. Jiná výchozí látka, ethyl-2-fluor-4-[5 ',6', 7', 8 '-tetrahydro-5', 5', 8', 8 '-tetramethylnaftalen-2yl)karbamoyl]benzoát (sloučenina 1), je získávána podle vynálezu.
Reakční schéma 8
EDC.DMAP
Ethyl 4-aaúoo-2-flttOTo beuzoat sloučenina
sloučenina LI
Reakční schéma 9
sloučenina 32
Reakční schéma 10
sloučenina 13
Reakční schémata 8, 9 a 10 uvádí příklady pro přípravu karbamoylových (amidových) sloučenin podle vynálezu, nejprve pomocí couplingové reakce sloučeniny o vzorci 6 se sloučeninou o vzorci 7, následované jednou nebo více reakcemi provedenými na karbamoylové (amidové) sloučenině, která byla nejprve získána přímo v couplingové reakci. Tudíž, jak je ukázáno v reakčním schématu 8, 5,6,7,8-tetrahydro5,5,8,8-tetramethyl-3-metboxymethoxynaftalen-2-karboxylová kyselina (sloučenina K) je spojena s ethyl-4-amino-2-fluorbenzoátem (sloučenina CJ v CH2CI2 za přítomnosti 1(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid hydrochloridu (EDC) a dimethylaminopyridinu (DMAP) za získání ethyl-2-fluor-4-[5',6',7',8'-tetrahydro5',5',8',8'-tetramethyl-2'-methoxymethoxynaftalen-3'-yl)karbamoyl]benzoát (sloučenina Ki). Methoxymethylová chránící skupina je odstraněna ze sloučeniny Ki působením thiofenolu a etherického fluoridu boritého, které vede k ethyl-2-fluor-4[5',6',7',8'-tetrahydro-5',5',8',8'-tetramethyl-2'-hydroxynaftalen-3'yl)karbamoyl]benzoátu (sloučenina 5). Hydroxylová funkční skupina sloučeniny 5 je převedena na n-hexylether působením hexyljodidu za přítomnosti slabé zásady.
Ve shodě s reakčním schématem 9, 5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-1brom-2-methoxymethoxynaftalen-3-karboxylová kyselina (sloučenina N) je spojena s methyl-4-amino-2,6-difluorbenzoátem (sloučenina HJ v CH2CI2 rozpouštědle za přítomnosti ethylkarbodiimid hydrochloridu (EDC) a DMAP za poskytnutí methyl-2,6difluor-4-[(5',6',7'>8'-tetrahydro-5',5',8',8'-tetramethyl-1 '-brom-2'methoxymethoxynaftalen-3'-yl)karbamoyl]benzoátu (sloučenina M^, ze kterého esterifikující methylová skupina a methoxymethylová chránící skupina jsou odstraněny působením zásady nebo kýseliny, za poskytnutí 2,6-difluor-4-[(5',6',7',8'-tetrahydro5',5',8',8'-tetramethyl-1 '-brom-2'-hydroxynaftalen-3'-yl)karbamoyl]benzoové kyseliny (sloučenina 32).
Reakční schéma 10 uvádí příklad převedení 2,2,4,4-tetramethyl-8-nitrochroman6-karboxylové kyseliny (sloučenina V) na odpovídající chlorid kyseliny působením thionylchloridu, následovaným couplingem s ethyl-4-amino-2-fluorbenzoátem (sloučenina Ci) a hydrogenací za poskytnutí ethyl-2-fluor-4-[(2',2',4',4'-tetramethyl-8'amino-6'-chromanyl)karbamoyl]benzoátu (sloučenina NJ. Sloučenina Ni je převedena na odpovídající 8-azido sloučeninu, ethyl-2-fluor-4-[(2',2',4',4'-tetramethyl-8'-azido-6'chromanyl)karbamoyl]benzoát (sloučenina 13) působením isoamyl nitrátu a NaN3.
• · • ·
Reakční schéma 11 Rk /Rl (Ra)m (Ra)o'zvv:
(W)p
NaN3 aceton vzorec 6
•s e
Reakční schéma 11 znázorňuje syntézu primárních aminosloučenin o vzorci 6a z chloridů kyselin (X3 = Cl) nebo jiných forem aktivovaných kyselin o vzorci 6, kde primární amin o vzorci 6a není dostupný publikovaným literárním postupem. Tudíž, v podstatě ve shodě s krokem Curtiova přesmyku, chlorid kyseliny o vzorci 6 reaguje s azidem sodným v acetonu za poskytnutí azido sloučeniny o vzorci 9. Azid o vzorci 9 je zahříván v polárním vysokovroucím rozpouštědle, jako například v terč. butanolu, za poskytnutí meziproduktu isokyanátu vzorce 10, který je hydrolyzován za poskytnutí sloučeniny o vzorci 6a.
• ·
Reakční schéma 12
l)EtOHyBjSO4r
DBnU/COa
Sogawara, $; Ishikawa, N, Kogyo Kagvtu Zasshi 1970.73.972-979
Michael Rcuman eí al J. Med. Chán.
sloučenina Tj
1995, Jí, 2531-2540
Reakční schéma 12 znázorňuje příklady pro přípravu sloučenin o vzorci 7a, kde takové sloučeniny nejsou komerčně nebo pomocí publikovaného literárního postupu dostupné. Tudíž, jakožto příklad 2,5-difluor-4-brombenzoové kyseliny (dostupná literárním postupem Sugawary a spol. Kogyo Kaguku Zasshi 1970, 73, 972-979) je nejprve esterifikována působením ethylalkoholu a kyseliny za poskytnutí odpovídajícího esteru, a poté reaguje s butyllithiem následovaným oxidem uhličitým za získání monoesteru 2,5-difluortereftalové kyseliny (sloučenina Ti). Podobný sled reakcí provedený na 2,3,5,6-difluor-4-benzoové kyselině (dostupná literárním postupem podle Reumana a spol. J. Med. Chem. 1995, 38, 2531-2540) poskytuje monoester 2,3,5,6tetrafluortereftalové kyseliny (sloučenina Ví). Právě znázorněný reakční sled může být, všeobecně vzato, využit pro syntézu všech sloučenin o vzorci 7a s takovou modifikací, která se stane snadno zřejmou kvalifikovanému odborníkovi, kde takové sloučeniny nejsou dostupné známým literárním postupem.
Reakční schéma 13 poskytuje příklad pro přípravu 2,6-diterc.butylisonikotinové • · kyseliny (sloučenina C3), která je reagentem podle vzorce 8 pro přípravu několika výhodných sloučenin podle vynálezu. Tudíž, 2,6,-diterc.butyl-4-methylpyridin (dostupný komerčně od Aldrich Chemical Co.) reaguje s N-bromsukcinimidem a benzoylperoxidem za poskytnutí 4-brommethyl-2,6-diterc.butylpyridinu (sloučenina A3). Sloučenina A3 reaguje se zásadou (hydroxid sodný) za poskytnutí odpovídající hydroxymethylové sloučeniny (sloučenina B3), která je poté oxidována při Jonesově oxidační reakci za získání 2,6-diterc.butylisonikotinové kyseliny (sloučenina C3).
Reakční schéma 13
sloučenina DJ
sloučenina E-j
• · • ·· ·
Další příklad sloučeniny, která slouží jako činidlo pro přípravu karbamoylových (amidových) sloučenin podle vynálezu je poskytnut v reakčním schématu 13. 2,4Diterc.butylfenol (Aldrich) je brómován v ledové kyselině octové za poskytnutí 2-brom4,6-diterc.butylfenolu (sloučenina D3), který poté reaguje s methoxymethyl chloridem (MOMCI) za získání O-methoxymethyl-2-brom-4,6-diterc.butylfenolu (sloučenina E3). Na sloučeninu E3 je působeno terc.butyllithiem následovaným oxidem uhličitým za poskytnutí O-methoxymethyl-3,5-diterc.butylsalicylové kyseliny (sloučenina F3). Sloučenina F3 je činidlo, které se liší od sloučenin obecně zahrnutých ve vzorci 8 jen v tom, že hydroxylová funkční skupina této sloučeniny je chráněna methoxymethylovou (MOM) skupinou. Nicméně, methoxymethylová chránící skupina je odstraněna po vytvoření karbamoylové (amidové) vazby, jak je znázorněno příkladem v reakčním schématu 14. Reakce aromatické bromo sloučeniny (například sloučeniny D3) s terc.butyllithiem následovaným oxidem uhličitým je výhodný způsob pro přípravu několika aromatických karboxylových kyselin podle vzorce 8 a vzorce 7a, popsaných v této přihlášce.
Primární aminosloučeniny o vzorci 8a, které nejsou dostupné komerčně nebo publikovaným literárním postupem, mohou být vyrobeny z chloridů kyselin (Xs = Cl) nebo jiných forem aktivovaných kyselin o vzorci 8 v podstatě ve shodě s kroky Curtiova přesmyku, v analogii k reakčním krokům popsaným výše v souvislosti s reakčním schématem 11.
• ·
Reakční schéma 14
2) Ethyl 4^mino-2-flnoro benzoat (sloučenina Cjý sloučenina C.
2) F^yl pyridin sloučenina C,
Bul'
COzH
2) Ethyl 4.»mino-2-fiuoio benzoat {sloučenina Q. )
Stí Pyridin CH;Ch ·*·
sloučenina F j
Ethyl 4-amino-2-flnoto benzoat ( sloučenina Cj_ J Pyridin CHjClj
DSOCfe nsoci2
l)SOCh
EDC.DMAP .COjEt sloučenina Gj
sloučenina 45
sloučenina thiofenol
BFj.OEk
tBu • · · ·
Reakční schéma 14 znázorňuje příklady pro tvorbu karbamoylových (amidových) sloučenin podle vzorce 2 reakcí činidla o vzorci 8 s činidlem o vzorci 7. Tudíž, 2,652 • · ··· · • · · • · ··· ·· ··
diterc.butylisonikotinová kyselina (sloučenina C3) reaguje s thionylchloridem (SOCI2) za poskytnutí meziproduktu chloridu kyseliny, který pak reaguje s ethyl-2-fluor-4aminobenzoátem (sloučenina CO za přítomnosti akceptoru kyseliny (pyridin) za poskytnutí ethyl-2-fluor-4-[(2',6'-diterc.butylpyrid-4'-yl)karbamoyl]benzoátu (sloučenina 41). Jako další příklad, 3,5-diterc.butylbenzoová kyselina (dostupná literárním postupem podle Kagechika a spol., J. Med. Chem. 1988, 31, 2182, začleněným zde tímto odkazem) reaguje s thionylchloridem, následně s ethyl-2-fluor-4-aminobenzoátem (sloučenina CO za poskytnutí ethyl-2-fluor-4-[(3',5'-diterc.butylfenyl) karba moyljbenzoátu (sloučenina 45). Ještě další příklad, O-methoxymethyl-3,5diterc.butylsalicylová kyselina (sloučenina F3) reaguje s ethyl-2-fluor-4aminobenzoátem (sloučenina CO za přítomnosti 4-dimethylaminopyridinu (DMAP) katalyzátoru a 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid hydrochloridem (EDC) za získání ethyl-2-fluor-4-[(2'-methoxymethyl-3',5'-diterc.butylfenyl) karbamoyljbenzoátu (sloučenina G3). Methoxymethylová chránící skupina je odstraněna ze sloučeniny G3 působením etherického fluoridu boritého a thiofenolu za poskytnutí ethyl-2-fluor-4-[(2'hydroxy-3',5'-diterc.butylfenyl) karbamoyljbenzoátu (sloučenina 47).
V ještě dalším příkladu ukázaném v reakčním schématu 14, 2,6diterc.butylisonikotinová kyselina (sloučenina C3) reaguje s thionyldichloridem (SOCI2), výsledný meziprodukt chlorid kyseliny reaguje s methyl-2,6-difluor-4~aminobenzoátem (sloučenina HJ, následuje zmýdelnění esterové skupiny za poskytnutí 2,6-difluor-4[(2',6'-díterc.butylpyrid-4'-yl)karbamoyl]benzoové kyseliny (sloučenina 50). 3,5Diterc.butylbenzoová kyselina je podrobena stejnému sledu reakcí za poskytnutí 2,6difluor-4-[(3',5'-diterc.butylfenyl)karbamoyl]benzoové kyseliny (sloučenina 52).
Další příklad, ukázaný v reakčním schématu 14, 2,6-diterc.butylisonikotinová , kyselina (sloučenina C3). podstupuje reakci s thionyldichloridem (SOCI2), následovanou reakcí s methyl-2-nitro-4-aminobenzoátem (sloučenina F^ a zmýdelněním esterové funkční skupiny za získání 2-nitro-4-[(2',6'-diterc.butylpyrid-4'-yl)karbamoyl]benzoové kyseliny (sloučenina 54).
Početné další reakce vhodné pro přípravu sloučenin podle vynálezu, a pro přeměnu sloučenin o vzorci 1 a/nebo o vzorci 2 na ještě další sloučeniny, které mohou být použity ve způsobech léčby podle vynálezu, a také pro přípravu činidel o vzorci 6, vzorci 7, vzorci 8, vzorci 6a, vzorci 7a a vzorci 8a, se stanou snadno zřejmými kvalifikovaným odborníkům ve světle tohoto zveřejnění. V tomto ohledu je věnována
pozornost následující obecné syntetické metodologii, použitelné pro přeměnu sloučenin o vzorci 1 a/nebo o vzorci 2 na další homology a/nebo deriváty, a také pro přípravu činidel o vzorci 6, vzorci 7, a vzorci 8, (stejně jako 6a, 7a a 8a).
Karboxylové kyseliny jsou typicky esterifikovány refluxováním kyseliny v roztoku vhodného alkoholu za přítomnosti kyselého katalyzátoru, jako například chlorovodíku nebo thionylchloridu. Eventuálně může být karboxylová kyselina kondenzována s vhodným alkoholem za přítomnosti dicyklohexylkarbodiimidu a dimethylaminopyridinu. Ester je znovuzískán a purifikován obvyklými prostředky. Acetaly a ketaly jsou snadno vyrobeny metodou popsanou v March, “Advanced Organic Chemistry“, 2. vydání, McGraw-Hill Book Company, str. 810). Alkoholy, aldehydy a ketony mohou být všechny chráněny tvorbou etherů a esterů, respektive acetalů nebo ketalů známými metodami jako například metodami popsanými v McOmíe, Plenům Publishing Press, 1973 a Protecting Groups, ed. Greene, John Wiley & Sons, 1981.
Kyseliny a soli odvozené od sloučenin o vzorci 1 a vzorci 2 jsou snadno získatelné z odpovídajících esterů. Zásadité zmýdelnění se zásadou alkalického kovu poskytne kyselinu. Například, ester může být rozpuštěn v polárním rozpouštědle, například alkanolu, výhodně pod inertní atmosférou při pokojové teplotě, s přibližně tří molárním přebytkem zásady, například hydroxidu draselného nebo lithného. Roztok je míchán po dosti dlouhý časový úsek, mezi 15 a 20 hodinami, ochlazen, okyselen a hydrolyzát znovuzískán obvyklými prostředky.
Amid (ve vzorci 1 nebo 2 je B CONRgRw) může být vytvořen příslušným amidačním prostředkem známým v oblasti techniky z odpovídajících esterů nebo karboxylových kyselin. Jeden způsob, jak připravit takové sloučeniny, je převést kyselinu na chlorid kyseliny a pak působit na tuto sloučeninu hydroxidem amonným nebo příslušným aminem.
Alkoholy jsou vyráběny převedením odpovídajících kyselin na chlorid kyseliny thionylchloridem nebo jiným prostředkem (J. March, “Advanced Organic Chemistry“, 2. vydání, McGraw-Hill Book Company), pak redukcí chloridu kyseliny tetrahydroboritanem sodným (March, tamtéž, str. 1124), která dává odpovídající alkoholy. Eventuálně mohou být estery redukovány tetrahydridohlinitanem lithným při nižších teplotách. Alkylace těchto alkoholů příslušnými alkyl halogenidy za podmínek Williamsonovy reakce (March, tamtéž, str. 357) dává odpovídající ethery. Tyto alkoholy mohou být převedeny na estery jejich reakcí s příslušnými kyselinami za přítomnosti ·· ···· • · · ,· · · · · • · · · kyselých katalyzátorů nebo dicyklohexylkarbodiimidu a dimethylaminopyridinu.
Aldehydy mohou být připraveny z odpovídajících primárních alkoholů za užití mírných oxidačních činidel jako například dichromanu pyridinia v dichlormethanu (Corey, E.J., Schmidt, G., Tet.Lett., 399, 1979), nebo dimethylsulfoxidu/oxalylchloridu v dichlormethanu (Omura, K., Swern, D., Tetrahedron, 1978, 34, 1651).
Ketony mohou být připraveny z příslušných aldehydů působením alkyl Grignardova činidla nebo podobného činidla na aldehyd s následnou oxidací. a
Acetaly nebo ketaly mohou být připraveny z odpovídajícího aldehydu nebo ketonu metodou popsanou v March, tamtéž, str. 810.
Příklady provedení vynálezu
Ethyl-4-amino-2-fluorbenzoát (sloučenina C7)
Ke směsi 2-fluor-4-nitrotoluenu (1,0 g, 6,4 mmol, Aldrich) a Na2Cr2O7 (2,74 g, 8,4 mmol) v 13,7 ml HOAc bylo pomalu přidáno 6,83 ml H2SO4. Tato směs byla pomalu zahřívána na 90 °C 1 hod za získání nazelenalého heterogenního roztoku. Směs byla ochlazena na pokojovou teplotu a zředěna ethylacetátem. pH roztoku bylo upraveno na 4 pomocí NaOH (aq.). Směs byla extrahována dalším ethylacetátem. Organická vrstva byla promyta NaHCO3 (nasyc.), pak solankou a sušena nad Na2SO4. Po zfiltrování byl roztok zakoncentrován do sucha a pak rozpuštěn v 6 ml SOCI2, a zahříván při 80 °C 1 hod. Nadbytek SOCI2 byl odstraněn za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn v 5 ml CH2CI2, 2 ml EtOH a 2 ml pyridinu. Směs byla míchána při pokojové teplotě 2 hod a zakoncentrována do sučha. Ethyl-2-fluor-4-nitrobenzoát byl získán jako bílá pevná látka po kolonové chromatografií zbytku s ethylacetátem/hexanem (1/9). Tato pevná látka byla pak rozpuštěna v 10 ml ethylacetátu, a Pd/C (50 mg) bylo přidáno. Hydrogenace s vodíkovým balónem převedla ethyl-2-fluor-4-nitrobenzoát na titulní sloučeninu.
1H NMR δ 7,77 (t, J = 8,4 Hz, 1 H), 6,41 (dd, Ji = 8,6, J2 = 2,2 Hz, 1 H), 6,33 (dd,
Ji = 13,0, J2 = 2,2 Hz, 1 H), 4,33 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 4,3 (b, 2 H), 1,37 (t, J = 7,1 Hz, 3 H).
Methyl-4-amino-2,6-difluorbenzoát (sloučenina H1) ' / ·
Roztok trifluorbenzoové kyseliny (150 mg, 0,85 mmol, Aldrich) v 0,5 ml SOCI2 byl
zahříván pod zpětným chladičem 2 hod. Reakční směs byla ochlazena na pokojovou teplotu, a nadbytek SOCI2 byl odstraněn za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn v 1 ml pyridinu a 0,2 ml methanolu. Po 30 min. míchání při pokojové teplotě bylo rozpouštědlo odstraněno a zbytek byl purifikován kolonovou chromatografií (ethylacetát/hexan 1/10) za získání methyltrifluorbenzoátu jako bezbarvého oleje. Tento olej byl pak rozpuštěn v 1 ml CH3CN, pak byl přidán roztok NaN3 (100 mg, 1,54 mmol) v 0,5 ml vody. Reakční směs byla refluxována 2 dny. Sůl byla zfiltrována a zbývající roztok byl zakoncentrován na olej. Tento olej byl pak rozpuštěn v 1 ml methanolu, s následným přidáním katalytického množství Pd/C (10%, w/w). Reakční směs byla hydrogenována pod vodíkovým balonem 12 hod. Katalyzátor byl odstraněn a roztok byl zakoncentrován na olej. Po kolonové chromatografií (ethylacetát/hexan 1/3), titulní produkt byl získán jako bezbarvé krystaly.
1H NMR δ 6,17 (d, J = 10,44 Hz, 2 H), 4,2 (b, 2 H), 3,87 (s, 3 H).
8-brom-2.2,4,4-tetramethvl-6-chromanová kyselina (sloučeninaP)
K roztoku 2,2,4,4-tetramethyl-6-chromanové kyseliny (200 mg, 0,85 mmol) v 0,5 ml AcOH byl přidán Br2 (0,07 ml, 1,28 mmol). Výsledný tmavě oranžový roztok byl míchán při pokojové teplotě přes noc. Nadbytek bromu byl odstraněn za sníženého tlaku. Pak byl roztok nalit do 5 ml vody a extrahován s ethylacetátem (3X3 ml). Spojené ethylacetátové vrstvy byly dále promyty NaHCO3 (nasyc.), solankou a sušeny nad MgSO4. Po zakoncentrován i, byl zbytek purifikován kolonovou chromatografií (silikagel, ethylacetát/hexan 1/3) za poskytnutí požadovaného produktu (170 mg, jako bílá pevná látka.).
1H NMR δ 8,11 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 8,00 (d,· J = 2,2 Hz, 1 H), 1,90 (s, 2 H), 1,43 (s, _J6 H), 1,39 (s, 6 H).
8-iod-2.2.4,4-tetramethyl-6-chromanová kyselina (sloučenina X)
K roztoku 2,2,4,4-tetramethyl-6-chromanové kyseliny ( 66 mg, 0,28 mmol) v 0,8 ml
AcOH byl přidán ICI (0,07 ml, 1,4 mmol). Výsledný barevný roztok byl míchán při pokojové teplotě přes noc. Následoval stejný postup jako pro syntézu 8-brom-2,2,4,4tetramethyl-6-chromanové kyseliny (sloučenina P), reakce dala titulní sloučeninu (107 mg) jako bílou pevnou látku.
• ·· 1H NMR δ 8,35 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 8,03 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 1,87 (s, 2 H), 1,43 (s, 6 H), 1,38 (s, 6 H).
2,2,4,4-tetramethvl-8-trifluormethvlchroman-6-ová kyselina (sloučenina S)
Roztok 8-brom-2,2,4,4-tetramethyl-6-chromanové kyseliny (sloučenina R, 150 mg,
0,48 mmol) v 1 ml SOCI2 byl refluxován 2 hod. Po ochlazení na pokojovou teplotu byl nadbytek SOCI2 odstraněn za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn v 1 ml pyridinu a 0,2 ml methanolu. Směs byla míchána při pokojové teplotě 30 min. Rozpouštědlo bylo odstraněno a zbytek se nechal projít kolonou (silikagel, ethylacetát/hexan 1/10) za získání methyl-8-brom-2,2,4,4-tetramethyl-6-chromanoátu (158 mg) jako bezbarvého oleje. K roztoku tohoto methylesteru ve 3 ml N-methylpyrrolidonu (NMP) byl přidán NaCO2CF3 (502 mg, 3,7 mmol) a Cul (350 mg, 1,84 mmol). Výsledná směs byla zahřívána na 175 °C (teplota lázně) po 2 hod. Výsledná směs byla ochlazena na ^pokojovou teplotu a nalita do ledové vody. Produkt byl extrahován do ethylacetátu (3 X 3 ml). Spojené organické vrstvy byly sušeny a zakoncentrovány do sucha. Surová látka byla purifikována kolonovou chromatografií (ethylacetát/chloroform 1/10) za získání titulní sloučeniny jako bezbarvého oleje (120 mg). Tato byla hydrolyzována za standardních podmínek za získání titulní sloučeniny.
1H NMR δ 8,21 (d, J = 2,1 Hz, 1 H), 8,17 (d, J = 2,1 Hz, 1 H), 1,92 (s, 2 H), 1,41 (s, 12 H).
Ethyl-8-nitro-2,2.4.4-tetramethyl-6-chromanoát (sloučenina W)
Ethyl-2,2,4,4-tetramethyl-6-chromanoát (150 mg, 0,57 mmol) byl pomalu přidáván k 0,3 ml koncentrované H2SO4 při 0 °C. K této směsi bylo velmi pomalu přidáváno 0,03 ml HNO3. Reakční směs byla míchána při 0 °C 30 min a nalita do ledové vody. Produkt byl extrahován do 5 ml ethylacetátu, promyt NaHCO3 (nasyc.), solankou a sušen nad MgSO4. Po zakoncentrování byl produkt purifikován kolonovou chromatografií (ethylacetát/hexan 1/10) za poskytnutí 74 mg světle žlutého oleje.
1H NMR δ 8,24 (d, J = 2,1 Hz, 1 H), 8,17 (d, J = 2,1 Hz, 1 H), 4,38 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 1,95 (s, 2 H), 1,43 (s, 6 H), 1,42 (s, 6 H), 1,40 (t, J = 7,1 Hz, 3 H).
2-oxo-4,4,8-trimethylchroman (sloučenina PO ·♦·· • · • *·· • · · ·· ·· ··· · · • · · ·· *·
V 500 ml baňky s kulatým dnem byl NaH (1,66 g, 60% suspense v oleji, 0,046 mol) promyt suchým hexanem. Pak byl přidán suchý THF (22 ml) a následně o-kresol (5 g, 0,046 mol) v 10 ml suchého THF. Reakční směs byla míchána při 0 °C 30 min s následným přidáním 3,3-dimethylakryloyl chloridu v 10 ml THF. Výsledná bílá kaše byla míchána při pokojové teplotě 12 hod, pak pomalu ochlazena vodou. Směs byla extrahována ethylacetátem. Organická vrstva byla promyta solankou, vodou a sušena nad MgSO4. Po filtraci a odstranění rozpouštědla byl získán žlutý olej (10,44 g). Tento olej byl pak rozpuštěn v 50 ml suchého CH2CI2, a byl vpraven do roztoku AICI3 (10,8 g, 0,069 mmol) v 10 ml CH2CI2. Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě 12 hod. Pak byla opatrně přidána voda s ledem a organická vrstva byla oddělena, a promyta NaHCO3 (nasyc.), solankou, vodou a nakonec sušena nad MgSO4. Po odstranění sušidla a rozpouštědla byl zbytek purifikován kolonovou chromatografii (silikagel, ethylacetát/hexan 1/9) za poskytnutí titulní sloučeniny (4,408 g) jako oleje.
1H NMR δ 7,1 (m, 3 H), 2,62 (s, 2 H), 2,33 (s, 3 H), 1,36 (s, 6 H).
2,4-D i methy l-4-( 2 '-hydroxy-3 '-methylfenyl )pentan-2-ol (sloučen i na Ri)
K roztoku 2-oxo-4,4,8-trimethylchromanu (sloučenina P^ 2,20 g, 11,5 mmol) ve 40 ml suchého diethyletheru byl přidán methylmagnesium bromid (12,67 ml, 38 mmol, 3 M roztok v THF). Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě 12 hod, pak byl přiléván NH4CI (nasyc.) dokud se nerozpustila všechna sraženina. Směs byla extrahována diethyletherem a spojené organické vrstvy byly odděleny a promyty solankou, vodou a sušeny nad MgSO4. Po filtraci a odstranění rozpouštědla byla získána titulní sloučenina jako žlutohnědá pevná látka (2,215 g).
1H NMR δ 7,16 (d, J = 7,88 Hz, 1 H), 7,00 (d, J = 6,72 Hz, 1 H), 6,81 (t, J = 7,6 Hz, -1 H), 5,89 (b, 1 H), 2,21 (s, 3 H), 2,17 (s, 2 H), 1,48 (s, 6 H), 1,10 (s, 6 H).
2.2.4.418-pentamethvl-6-bromchroman (sloučenina Z)
Roztok 2,4-dimethyl-4-(2'-hydroxy-3'-methylfenyl)pentan-2-olu (sloučenina R^ 2,215 g, 9,98 mmol) ve 30 ml 15% H2SO4 byl zahříván na 110 °C. Po ochlazení na pokojovou teplotu byla reakční směs extrahována diethyletherem. Organická vrstva byla promyta NaHCO3 (nasyc.), solankou a vodou. Po filtraci a odstranění rozpouštědla se zbytek nechal projít kolonou (silikagel, čistý hexan) za získání titulní sloučeniny jako čirého oleje (1,636 g). Tento olej byl rozpuštěn v 1,5 ml HOAc, pak byl přidán Br2 • · ·Λ<· • * · • · ··· • · * • · · <« ··« • ·· ·· · * « · • · · ·· 9 9 *«· a · • · · · • ··· ·· ·* (0,4113 ml, 7,98 mmol). Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě 12 hod. Rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku a ke zbytku byl přidán ethylacetát, a výsledná směs byla promyta NaHCO3 (nasyc.), solankou, vodou a sušena nad MgSO4. Po filtraci a odstranění rozpouštědla se zbytek nechal projít kolonou (silikagel, čistý hexan) za získání titulní sloučeniny jako bílé pevné látky (2,227 g).
__1H NMR δ 7,21 (s, 1 H), 7,06 (s, 1 H), 2,14 (s, 3 H), 1/9 (s, 2 H), 1,32 js, 6 H)^ : 1,31 (s, 6 H).
' 2.2.4.4.8-pentamethvl-6-chromanová kyselina (sloučenina AJ
K roztoku 2,2,4,4,8-pentamethyl-6-bromchromanu (sloučenina Z) (1,2 g, 4,24 mmol) v 18 ml suchého THF při -78 °C pod plynným argonem bylo pomalu přidáváno 5,48 ml t-BuLi (1,7 M v hexanu, 9,33 mmol). Reakční směs byla míchána při -78 °C 1 hod. Pak byl roztok probubláván CO2 po dobu 1 hod. Po odstranění přítoku CO2 byla reakční směs byla směs míchána po další hodinu při -78 °C. Pak byla přidána 10% HCI. Po ohřátí na pokojovou teplotu byla reakční směs extrahována ethylacetátem. Organická , vrstva byla dále promyta solankou a sušena nad Na2SO4. Po zakoncentrování byl zbytek purifikován kolonovou chromatografií (ethylacetát/hexan 5/95) za poskytnutí titulní sloučeniny jako bílé pevné látky (774 mg).
1H NMR δ 7,96 (s, 1 H), 7,75 (s, 1 H), 2,23 (s, 3 H), 1,88 (s, 2 H), 1,39 (s, 6 H).
8-Brom-4,4-dimethyl-6-chromanová kyselina (sloučenina ΒΊ)
Za užití stejného postupu jako pro syntézu 8-brom-2,2,4,4-tetramethyl-6* chromanové kyseliny (sloučenina P), ale za užití 4,4-dimethylchromanové kyseliny (100 mg, 0,49 mmol), byla získána titulní sloučenina jako bílá pevná látka.
' 1H NMR δ 8,10 (d, J = 2,1 Hz, 1 H), 7,98 (d, J = 2,1 Hz, 1 H), 4,39 (t, J = 5,44 Hz,
H), 1,89 (t, J = 5,4 Hz, 1 H), 1,38 (s, 6 H).
Ethvl-2-amino-1-brom-5,5.8,8-tetrahvdro-5.5,8,8-tetramethvlnaftalen-3-karboxvlát (sloučenina D)
K roztoku ethyl’5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-3-aminonaftalen-2karboxylátu (sloučenina C, 58 mg, 0,21 mmol) v 2 ml HOAc byl přidán Br2 (0,02 ml, 0,42 mmol). Oranžový roztok byl míchán při pokojové teplotě 2 dny. Nadbytek Br2 a HOAc byly odstraněny za sníženého tlaku a zbytek se nechal projít kolonou (silikagel, ethylacetát/hexan 1/10) za poskytnutí titulní sloučeniny jako světle oranžového oleje (59 mg, 79,5%).
1H NMR δ 7,90 (s, 1 H), 6,41 (b, 2 H), 4,36 (q, J = 7,2 Hz, 2 H), 1,70 (m, 4 H), 1,58 (s, 6 H), 1,40 t, J = 7,2 Hz, 3 H), 1,28 (s, 6 H).
Ethvl-5,6,7,8-tetrahvdro-5,5,8,8-tetramethyl-4-bromnaftalen-2-karboxylát (sloučenina E) Ethyi-2-amino-1-brom-5,5,8,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethylnaftalen-3-karboxylát (sloučenina D, 59 mg, 0,17 mmol) byl rozpuštěn v 2 ml EtOH při 0 °C. K tomuto roztoku byl přidán 1 ml trifluoroctové kyseliny a 1 ml isoamylnitritu. Reakční směs byla míchána při 0 °C 30min., pak byla přidána H3PO2 (0,325 ml, 3,14 mmol). Reakční směsi bylo ponechána vřít při pokojové teplotě a míchat se 12 hod. Byl přidán NaHCO3 (nasyc.) a reakční směs byla extrahována ethylacetátem, sušena nad MgSO4, zfiltrována a zakoncentrována za získání oleje. Produkt byl purifikován kolonovou chromatografií (silikagel, ethylacetát/hexan 1/10) za získání titulní sloučeniny jako bezbarvého oleje.
1H NMR δ 8,02 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,95 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 4,35 (q, J = 7,1 Hz, 2
H), 1,71 (m, 4 H), 1,56 (s, 6 H), 1,38 (t, J = 7,1 Hz, 3 H), 1,31 (s, 6 H).
EthvI-S.ej.S-tetrahydro-S.S.S.S-tetramethyl-S-fluornaftalen^-vl-karboxvlát (sloučenina G)
Do ethyl-5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-3-aminonaftalen-2-karboxylátu (sloučenina C, 150 mg, 0,55 mmol) v ledové lázni bylo přidáno 0,24 ml HBF4 (48% roztok ve vodě), a následně roztok NaNO2 (81 mg, 1,16 mmol) v 1 ml vody. Kaše byla ponechána v ledničce 3 dny. Reakční směs byla následně promyta ethylacetátem až TLC neukazovala žádnou UV viditelnou skvrnu na startovní linii.
„ Ethylacetátová vrstvaabyla sušena s MgSO4 a roztok byl zakoncentrován na olej. Olej byl dále rozpuštěn v 1 ml toluenu a směs byla zahřívána pod zpětným chladičem 2 hod. Po ochlazení reakční směsi na teplotu místnosti bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl nechán projít kolonou (silikagel, ethylacetát/hexan 1/10) za získání titulní sloučeniny jako oleje.
1H NMR δ 7,85 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,04 (d, J = 12,3 Hz, 1 H), 4,38 (q, J = 7,1 Hz,
H), 1,69 (s, 4 H), 1,38 (t, J = 7,1 Hz, 3 H), 1,30 (s, 6 H), 1,28 (s, 6 H).
2-Brom-3-hydroxy-5.5,8,8-tetrahvdro-5,5,8,8-tetramethylnaftalen (sloučenina I) • ·
Užitím stejného postupu jako pro syntézu 8-brom-2,2,4,4-tetramethyl-6chromanové kyseliny (sloučenina P), ale za užití 2-hydroxy-5,5,8,8-tetrahydro-5,5,8,8tetramethyltetralinu (700 mg, 3,43 mmol) a Br2 (0,177 ml, 3,43 mmol) v 1,5 ml HOAc, byla Získána titulní sloučenina jako bílá pevná látka (747 mg).
1H NMR δ 7,36 (s, 1 H), 6,96 (s, 2 H), 5,32 (b, 1 H), 1,66 (s, 4 H), 1,25 (s, 12 H).
5,6.7,8-tetrahvdro-5,5.8,8-tetramethvl-3-methoxvmethoxy-2-bromnaftalen (sloučenina J)
K roztoku 2-brom-3-hydroxy-5,5,8,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethylnaftalenu (sloučenina I, 600 mg, 2,12 mmol) a katalytického množství Bu4NBr v 20 ml suchého CH2CI2 při 0 °C byl přidán diisopropylethylamin (1,138 ml, 12,75 mmol), s následujícím přidáním methoxymethylchloridu (0,484 ml, 6,39 mmol). Reakční směs byla zahřívána při 45 °C 12 hod. Reakční směs byla promyta 10% roztokem kyseliny citrónové, pak NaHCO3 (nasyc.), solankou a sušena nad MgSO4. po filtraci a odstranění rozpouštědla byl zbytek purifikován kolonovou chromatografií (ethylacetát/hexan 1/9) za poskytnutí titulní sloučeniny (722 mg) jako bílé pevné látky.
1H NMR δ 7,43 (s, 1 H), 7,06 (s, 1 H), 5,21 (s, 2 H), 3,54 (s, 3 H), 1,66 (s, 4 H), 1,26(s, 6H), 1,25 (s, 6 H).
3-Methoxvmethoxy-5,5,8.8-tetramethvl-5,6.7,8-tetrahvdronaftalen-2-vl-karboxylová kyselina (sloučenina K)
Užitím stejného postupu jako pro syntézu 2,2,4,4,8-pentamethyl-6-chromanové kyseliny (sloučenina Ai), ale za užití 5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-3-methoxymethoxy2-bromnaftalenu (sloučenina J, 722 mg, 2,21 mmol) a 2,86 ml t-BuLi (4,87 mmol, 1,7 M roztok v hexanu), byla získána titulní sloučenina jako bílá pevná látka (143 mg).
1H NMR δ 8,12 (s, 1 H), 7,19 (s, 1 H), 5,40 (s, 2 H), 3,58 (s, 3 H), 1,70 (s, 4 H), 1,30 (s, 12 H).
Ethvl-2-fluor-4-í(5',6'.7,.8'-tetrahydro-5'.5'.8',8,-tetramethvlnaftalen-2'vDkarbamovIlbenzoát (sloučenina 1)
K 5,5,8,8-tetramethyl-5,6,7,8-tetrahydro-2-naftoové kyselině (46 mg, 0,2 mmol) byl přidán 1 ml thionylchloridu. Tato směs byla refluxována 2 hod. Nadbytek thionylchloridu byl odstraněn za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn v 2 ml CH2CI2. K tomuto • · roztoku byl přidán ethyl-4-amino-2-fluorbenzoát (sloučenina Ci, 37 mg, 0,2 mmol) a následně 0,5 ml pyridinu. Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě 4 hod a byla zakoncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl puntíkován kolonovou chromatografií (ethylacetát/hexan 1/10) za získání titulní sloučeniny jako bílé pevné látky.
1H NMR δ 8,06 (b, 1 H), 7,93 (t, J = 8,4 Hz, 1 H), 7,85 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,78 (dd, J1 = 2,0 Hz, J2 = 12,9 Hz, 1 H), 7,55 (dd, J1 = 2,0 Hz, J2 = 8,2 Hz, 1 H), 7,40 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,32 (dd, J, = 2,02 Hz, J2 = 8,8 Hz, 1 H), 4,38 (q, J = 7,2 Hz, 2 H), 1,71 (s, 4 H), 1,40 (t, J = 7,2 Hz), 1,32 (s, 6 H), 1,30 (s, 6 H).
EthvI^-fluoM-rfShe^hS^-tetrahydro^-brom-S^SýS^S^tetramethvInaftalen-^'vDkarbamovnbenzoát (sloučenina 3)
Užitím stejného postupu jako pro syntézu ethyl-2-fluor-4-[(5',6',7',8'-tetrahydro5',5',8',8'-tetramethylnaftalen-2'-yl)karbamoyl]benzoátu (sloučenina 1), ale za užití 5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-4-bromnaftalen-2-karboxylové kyseliny (sloučenina F), byla získána titulní sloučenina jako bílá pevná látka.
1H NMR δ 8,30 (b, 1 H), 7,92 (t, J = 8,4 Hz, 1 H), 7,84 (d, J = 2,1 Hz, 1 H), 7,81 (d, J = 2,1 Hz, 1 H), 7,74 (dd, J4 = 2,1 Hz, J2 = 12,8 Hz, 1 H), 7,35 (dd, J1 = 2,0 Hz, J2 = 8,4 Hz, 1 H), 4,36 (q, J = 7,2 Hz, 2 H), 1,67 (m, 4 H), 1,55 (s, 6 H), 1,39 (t, J = 7,2 Hz, 3 H), 1,31 (s, 6 H).
Ethvl-2-fluor-4-f(3'-methoxvmethoxv-5'.6'.7',8'-tetrahydro-5'.5',8',8'tetramethvlnaftalen-2'-yl)karbamoyllberizoát (sloučenina K-i)
Užitím stejného postupu jako pro syntézu ethyl-2-fluor-4-[(3'-methoxymethoxy~4'.brom-5',6',7',8'-tetrahydrQ-5',5',8',8'-tetramethylnaftalen-2'-yl)karbamoyl]benzoátu (sloučenina Si), ale za užití 3-methoxymethoxy-5,5,8,8-tetramethyl-5,6,7,8tetrahydronaftalen-2-yl-karboxylové kyseliny (sloučenina K, 143 mg, 0,49 mmol) a 4amino-2-fluorbenzoátu (sloučenina Ci, 98,5 mg, 0,54 mmol), byla získána titulní sloučenina jako bílá pevná látka.
1H NMR δ 10,1 (b, 1 H), 8,20 (s, 1 H), 7,93 (t, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,83 (d, J = 13,4 Hz, 1 H), 7,29 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 5,41 (s, 2 H), 4,39 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 3,59 (s, 3 H), 1,70 (s, 4 H), 1,31 (s, 12 H), 1,26 (t, J = 7,1 Hz, 3 H).
• ·
Ethvl-2-fluor-4-í(3'-hvdroxv-5'.6'.7'.8'-tetrahydro-5'.5,.8',8'-tetramethvl-2naftalenyOkarbamovnbenzoát (sloučenina 5)
K roztoku ethyl-2-fluor-4-[(3'-methoxymethoxy-5',6',7',8'-tetrahydro-5',5',8',8'tetramethylnaftalen-2'-yl)karbamoyl]benzoátu (sloučenina 50,7 mg, 0,11 mmol) v 2 ml CH2CI2 byl přidán thiofenol (0,061 ml, 0,55 mmol). Reakční směs byla míchána při 0 °C 5 min., pak byl přidán BF3.Et2O (0,027 ml, 0,22 mmol). Reakční směs byla míchána při 0 °C 2 hod, pak byl přidán NaHCO3 (nasyc.). Organická vrstva byla oddělena a promyta solankou, vodou a sušena nad MgSO4. Po zfiltrování a odstranění rozpouštědla se nechal zbytek projít přes kolonu (silikagel, ethylacetát/hexan 1/3) za získání titulní sloučeniny jako bílé pevné látky (44,2 mg).
1H NMR δ 8,61 (b, 1 H), 7,94 (t, J = 8,42 Hz, 1 H), 7,71 (dd, J = 10,8; 2,0 Hz, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,35 (dd, J = 6,4; 2,0 Hz, 1 H), 6,96 (s, 1 H), 4,39 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 1,69 (s, 4 H), 1,40 (t, J = 7,1 Hz, 3 H), 1,29 (s, 6 H), 1,27 (s, 6 H).
Ethvl-2-fluor-4-F(4,.4'-dimethvl-8'-bromchroman-6,-vl)karbamovnbenzoát (sloučenina 7)
K 4,4-dimethyl-8-brom-6-chromanové kyselině (sloučenina B1, 139 mg, 0,485 mmol) v 10 ml baňce s kulatým dnem byl přidán SOCb (1 ml, velký nadbytek). Výsledný roztok byl zahříván při 90 °C 2 hod a byl ponechán zchládnout na teplotu místnosti. Nadbytek SOCI2 byl odpařen za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn v CH2CI2 (3 ml). Byl přidán ethyl-4-amino-2-fluorbenzoát (sloučenina Ci, 90 mg, 0,49 mmol) a následně pyridin (0,5 ml, velký nadbytek). Reakční směs byla míchána přes noc a pak zakoncentrována do sucha. Zbytek byl puntíkován kolonovou chromatografií s ethylacetátem/hexanem (1/5) za poskytnutí titulní sloučeniny jako bílé pevné látky (190 mg).
1H NMR δ 7,95 (t, J = 8,31 Hz, 1 H), 7,88 (b, 1 H), 7,83 (d, J = 2,2, 1 H), 7,80 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 7,75 (dd, J = 12,89; 2,0 Hz, 1 H), 7,30 (dd, J = 8,55; 2,0 Hz, 1 H), 4,37 (m, 5 H), 1,89 (t, J = 5,49 Hz, 2 H), 1,40 (t, J = 7,1 Hz, 3 H), 1,39 (s, 6 H).
Ethvl-2-fluor-4-f(2',2',4',4y-tetramethvl-8,-bromchroman-6'-vl)karbamovl1benzoát (sloučenina 9)
Užitím stejného postupu jako pro ethyl-2-fluor-4-[(4',4'-dimethyl-8'-bromchroman6'-yl)karbamoyl]benzoát (sloučenina 7), ale za užití 2,2,4,4-tetramethyl-8-brom-6chromanové kyseliny (sloučenina P, 70 mg, 0,22 mmol) a ethyl-4-amino-2·»··«· * · ·· ·· • · · ·· ·· · · · • · ··· · · · · ♦· • · · · · · · ··· · • · · · · · · ·· ··· ··· ··· ·· ·« fluorbenzoátu (sloučenina Cb 38 mg, 0,22 mmol), byla získána titulní sloučenina ve formě bílé pevné látky (80 mg, 76%).
1H NMR δ 8,25 (b, 1 H), 7,92 (t, J = 8,4 Hz, 1 H), 7,83 (s, 2 H), 7,74 (dd, Jj = 2,0 Hz, J2 = 13,0 Hz, 1 H), 7,34 (dd, J, = 2,0, J2 = 8,7 Hz, 1 H), 4,37 (q, J = 7,1 Hz, 2 H),
1,88 (s, 2 H), 1,41 (s, 6 H), 1,39 (t, J = 7,1 Hz, 3 H), 1,37 (s, 6 H).
Ethvl-2-fluor-4-í(2',2'.4',4'-tetramethyl-8'-trifluormethylchroman-6'vDkarbamoyllbenzoát (sloučenina 11)
Užitím stejného postupu jako pro ethyl-2-fluor-4-[(4',4’-dimethyl-8'-bromchroman6'-yl)karbamoyl]benzoát (sloučenina 7), ale za užití 2,2,4,4-tetramethyl-8-trifluormethyl6-chromanové kyseliny (sloučenina S, 57 mg, 0,19 mmol) a ethyl-4-amino-2fluorbenzoátu (sloučenina Ci, 35 mg, 0,19 mmol), byla získána titulní sloučenina jako bílá pevná látka.
1H NMR δ 8,06 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 7,99 (b, 1 H), 7,95 (t, J = 8,55 Hz, 1 H), 7,81 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 7,76 (dd, J = 12,8; 2,1 Hz, 1 H), 7,33 (dd, J = 8,55; 1,9 Hz, 1 H), 4,37 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 1,93 (s, 2 H), 1,41 (s, 12 H), 1,40 (t, J = 7,2 Hz, 3 H).
Ethvl-2-fluor-4-í(2',2\4',4,-tetramethvl-8r-aminochroman-6y-yl)karbamovnbenzoát (sloučenina NJ
Užitím 8-nitro-2,2,4,4-tetramethylchroman-6-karboxylové kyseliny (sloučenina V) a následujícího stejného postupu jako pro syntézu ethyl-2-fluor-4-[(4',4'-dimethyl-8'bromchroman-6'-yl)karbamoyl]benzoátu (sloučenina 7), byl získán ethyl-2-fluor-4[(2',2',4',4'-tetramethyl-8'-nitrochroman-6'-yl)karbamqyl]benzoát jako bílá pevná látka. Tato sloučenina (50 mg, 0,12 mmol) byla rozpuštěna v 2 ml methanolu. Do roztoku bylo přidáno katalytické množství Pd/C a roztok byl.uchováván pod H2 atmosférou (vodíkový balon) přes noc. Katalyzátor byl odstraněn filtrací a rozpouštědlo bylo odpařeno za získání titulní sloučeniny jako bílé pevné látky.
1H NMR δ 7,93 (t, J = 8,43 Hz, 1 H), 7,90 (b, 1 H), 7,73 (dd, J = 12,9; 2,0 Hz, 1 H), 7,29 (dd, J = 8,43; 1,96 Hz, 1 H), 7,23 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 7,01 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 4,35 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 1,88 (s, 2 H), 1,39 (s, 6 H), 1,38 (t, J = 7,1 Hz, 3 H), 1,37 (s, 6 H).
Ethvl-2-fluor-4-f(2',2',4',4'-tetramethyl-8'-azidochroman-6'-yl)karbamovnbenzoát • · · • ·· ·· (sloučenina 13)
K roztoku ethyl-2-fluor-4-[(2',2',4',4'-tetramethyl-8'-aminochroman-6'-yl)karbamoyljbenzoátu (sloučenina 1% 32 mg, 0,077 mmol) v 3 ml EtOH bylo přidáno 0,5 ml trifluoroctové kyseliny (TFA) a 0,5 ml isoamylnitritu při 0 °C. Reakční směs byla míchána 2 hod, když byl přidán roztok NaN3 (5 mg) v 0,2 ml vody. Reakční směsi bylo umožněno zahřát se na pokojovou lepJotu a byla míchána přes noc. Rozpouštědlo bylo \ odstraněno a .zbytek byl purifikován kolonovou chromatografií (siíikagel, ethylacetát/hexan 1/10) za získání titulní sloučeniny jako bezbarvého oleje.
1H NMR δ 8,0 (b, 1 H), 7,94 (t, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,73 (d, J = 12,1 Hz, 1 H), 7,64 (s,
H), 7,31 (dd, J = 8,5; 2,0 Hz, 1 H), 7,21 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 4,37 (q, J = 7,1 Hz, 2 H),
1,90 (s, 2 H), 1,39 (t, J = 7,1 Hz, 3 H), 1,45 (s, 6 H), 1,40 (s, 6 H).
MethvI^.G-difluoM-ífZ^ý^^Metramethyl-SMrifluormethvIchroman-e'vDkarbamovllbenzoát (sloučenina 15)
Užitím stejného postupu jako pro ethyl-2-fluor-4-[(4',4'-dimethyl-8'-bromchroman6'-yl)karbamoyl]benzoát (sloučenina 7), ale za užití 2,2,4,4-tetramethyl-8trifluormethylchromanové kyseliny (sloučenina S, 11,2 mg, 0,037 mmol) a methyl-4amino-2,6-difluorbenzoátu (sloučenina Hi, 6,6 mg, 0,035 mmol), byla získána titulní sloučenina ve formě bílých krystalů.
1H NMR δ 8,21 (b, 1 H), 8,05 (s, 1 H), 7,82 (s, 1 H), 7,36 (d, J = 10,20 Hz, 1 H),
3,93 (s, 3 H), 1,92 (s, 2 H), 1,40 (s, 12 H).
Ethvl-2-fluor-4-[(2',2',4',4'-tetramethyl-8'-iodchroman-6'-vl)karbamoyl1benzoát (sloučenina 17) = Užitím stejného postupu jako pro ethyl-2-fluor-4-[(4',4'-dimethyl-8'-bromchroman- s
6'-yl)karbamoyl]benzoát (sloučenina 7), ale za užití 2,2,4,4-tetramethyl-8jodchromanové kyseliny (sloučenina X, 81 mg, 0,25 mmol) a ethyl-4-amino-2fluorbenzoátu (sloučenina Ci, 55 mg, 0,30 nrimol), byla získána titulní sloučenina jako bílá pevná látka.
1H NMR δ 8,05 (b, 1 H), 8,01 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 7,94 (t, J = 8,4 Hz, 1 H), 7,86 (d,
J = 2,2 Hz, 1 H), 7,75 (dd, J = 12,88; 2,1 Hz, 1 H), 7,33 (dd, J = 8,8; 2,1 Hz, 1 H), 4,37 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 1,89 (s, 2 H), 1,42 (s, 6 H), 1,38 (s, 6 H).
• ··♦
Ethvl-2-fluor-4-f(2'.2'.4'.4',8,-pentamethvlchroman-6^-vl)karbamovnbenzoát (sloučenina 19)
Užitím stejného postupu jako pro ethyl-2-fluor-4-[(4',4'-dimethyl-8'-bromchroman6'-yl)karbamoyl]benzoát (sloučenina 7), ale za užití 2,2,4,4,8-pentamethyl-6chromanové kyseliny (sloučenina A1( 92 mg, 0,37 mmol) a ethyl-4-amino-2fluorbenzoátu (sloučenina Ci, 75 mg, 0,41 mmol), byla získána titulní sloučenina jako bílá pevná látka (100 mg).
1H NMR δ 8,31 (b, 1 H), 7,90 (t, J = 8,24 Hz, 1 H), 7,76 (dd, J = 14,29; 1,7 Hz, 1 H), 7,74 (s, 1 H), 7,43 (s, 1 H), 7,35 (dd, J = 8,67; 1,7 Hz, 1 H), 4,32 (q, J = 7,1 HZ, 2 H), 2,18 (s, 3 H), 1,84 (s, 2 H), 1,38 (t, J = 7,1 Hz, 3 H), 1,35 (s, 6 H), 1,34 (s, 6 H).
Ethvl-4-f(5'.6'.7',8'-tetr3hvdro-5',5',8',8'-tetramethvl-2naftalenvRthiokarbamovllbenzoát (sloučenina 21)
K roztoku ethyl-4-[(5',6',7',8'-tetrahydro-5',5',8',8'-tetramethylnaftalen-2yl)karbamoyl]benzoátu (sloučenina h, 61 mg, 0,16 mmol) v 2 ml bezvodého benzenu bylo přidáno Lawessonovo činidlo (45 mg, 0,112 mmol). Výsledný žlutý roztok byl refluxován pod N2 2 hod. Rozpouštědlo bylo odstraněno a zbytek byl purifikován kolonovou chromatografií (silikagel, ethylacetát/hexan 1/5) za získání titulní sloučeniny jako žluté pevné látky (55 mg, 87%).
1H NMR δ 9,04 (b, 1 H), 8,11 (d, J = 8,70 Hz, 2 H), 7,85 (b, 2 H), 7,75 (b, 1 H), 7,55 (dd, J = 8,2; 1,9 Hz, 1 H), 7,36 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 4,38 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 1,71 (s, 4 H), 1,40 (t, J = 7,1 Hz, 3 H), 1,30 (s, 12 H).
Ethyl-É-fluor-Á-KS^ey.S^tetrahvdro-S^S^S^S^tetramethylnaftalen-É'vDthiokarbamoyllbenzoát (sloučenina 23)
Užitím stejného postupu jako pro syntézu ethyl-4-[(5',6',7\8'-tetrahydro5',5',8',8'-tetramethyl-2-naftalenyl)thiokarbamoyl]benzoátu (sloučenina 21), ale za užití ethyl-2-fluor-4-[5',6',7',8'-tetrahydro-5',5',8',8'-tetramethylnaftalen-2'yl)karbamoyl]benzoátu (sloučenina 1, 167 mg, 0,42 mmol) v 8 ml benzenu a Lawessonova činidla (220 mg, 0,544 mmol), byla získána titulní sloučenina jako světle žlutá pevná látka (127,5 mg).
1H NMR δ 9,30 (b, 1 H), 8,05 (b, 1 H), 7,95 (t, J = 8,37 Hz, 1 H), 7,77 (d, J = 1,89 HZ, 1 H), 7,53 (dd, J = 8,24; 2,1 HZ, 1 H), 7,49 (b, 1 H), 7,35 (d, J = 8,24 Hz, 1 H), 4,33 • « · · « • · · • · ··!
·· ·· (q, J = 7,1 Hz, 1 H), 1,71 (s, 4 H), 1,32 (s, 6 H), 1,30 (s, 6 H).
3-Hvdroxv-5,5.8.8-tetramethvl-5,6.7.8-tetrahydronaftalen-2-vl karboxylová kyselina (sloučenina L)
K roztoku 2-brom-3-methoxymethoxy-5,5,8,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl naftalenu (sloučenina J, 722 mg, 2,2 mmol) v 10 ml suchého THF při -78 °C pod argonem bylo pomalu přidáváno 2,86 ml t-BuLi (1,7 IVI v hexanu, 4,8 mmol). Reakční směs byla míchána při -78 °C 1 H. Pak byl roztok 1 hod probubláván CO2. Po odstranění přívodu CO2 byla reakční směs míchána další hodinu při -78 °C. Pak bylo přidáno 10% HCI. Po zahřátí na pokojovou teplotu byla reakční směs nechána přes noc a pak extrahována ethylacetátem. Organická vrstva byla promyta solankou a sušena nad Na2SO4. Po zakoncentrování byl zbytek purifikován kolonovou chromatografií (ethylacetát/hexan 1/3) za poskytnutí titulní sloučeniny jako bílé pevné látky.
1H NMR δ 7,85 (s, 1 H), 6,93 (s, 1 H), 1,68 (s, 4 H), 1,28 (s, 12 H).
4-Brom-3-hvdroxy-5.5,8.8-tetramethvl-5,6.7.8-tetrahvdronaftalen-2-vl karboxylová kyselina (sloučenina M)
3-Hydroxy-5,5,8,8-tetramethyl-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-yl karboxylová kyselina (sloučenina L, 155 mg, 0,62 mmol) byla rozpuštěna v 1 ml HOAc. K tomuto roztoku byl přidán Br2 (0,033 ml, 0,62 mmol). Reakční směs byla ponechána při pokojové teplotě přes noc. Reakční směs byla probublávána proudem vzduchu pro odstranění nezreagovaného Br2. Zbývající pevná látka byla rozpuštěna v malém množství THF a purifikována kolonovou chromatografií (ethylacetát/hexan 1/1) za poskytnutí požadovaného produktu jako krémově zbarvené pevné látky.
_ 1H NMR δ 7,91 (s, 1 H), 1,75 (m, 2 H), 1,64 (m, 2 H), 1,62 (s, 6 H), 1,30 (s, 6 H).
4-Brom-3-methoxymethoxv-5,5.8.8-tetramethvl-5'6.7.8-tetrahvdronaftalen-2-yl karboxylová kyselina (sloučenina N)
K roztoku 4-brom-3-hydroxy-5,5,8,8-tetramethyl-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-yl karboxylové kyseliny (sloučenina M, 233 mg, 0,71 mmol) v 6 ml CH2CI2 byl přidán chlormethylmethylether (0,162 ml, 2,1 mmol), diisopropylethylamin (0,764 ml, 4,2 mmol) a katalytické množství tetrabutylamonium bromidu. Reakční směs byla zahřívána na 45 °C 2 hod. Reakční směs byla zakoncentrována a zbytek byl purifikován kolonovou
chromatografií (ethylacetát/hexan 1/9) za poskytnutí methoxymethylesteru titulní sloučeniny jako bílé pevné látky (200 mg). Tato bílá pevná látka byla dále rozpuštěna v 20 ml EtOH. Byl přidán vodný roztok NaOH (0,5 ml, 1 M). Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě přes noc. EtOH byl odstraněn a ke zbytku byly přidány 2 ml ethylacetátu a 3 ml vody. Tato směs byla velmi pomalu okyselována 10% HCI na pH = 7. Ethylacetátová vrstva byla oddělena a promyta solankou, sušena nad Na2SO4- Po zfiltrování sušícího činidla a odstranění rozpouštědla poskytla reakce titulní sloučeninu jako bílou pevnou látku (155 mg).
1H NMR δ 7,99 (s, 1 H), 5,20 (s, 2 H), 3,66 (s, 3 H), 1,74 (m, 2 H), 1,67 (m, 2 H), 1,60(s, 6H), 1,32 (s, 6 H).
Ethvl-2-fluor-4-í(3,-methoxvmethoxv-4'-brom-5',6,,7'.8,-tetrahvdro-5'.5',8,.8,tetramethylnaftalen-2'-yl)karbamovnbenzoát (sloučenina Si)
K roztoku 4-brom-3-methoxymethoxy-5,5,8,8-tetramethyl-5,6,7,8-tetrahydro naftalen-2-yl karboxylové kyseliny (sloučenina N, 80 mg, 0,22 mmol) v 4 ml ΟΗ2ΟΙ2 byl přidán DMAP (60 mg, 0,26 mmol), ethyl-2-fluor-4-aminobenzoát (sloučenina C1t 43 mg, 0,24 mmol) a EDC (50 mg, 0,26 mmol). Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě přes noc a pak zahuštěna do sucha. Zbytek byl purifikován kolonovou chromatografií (ethylacetát/hexan 1/3) za poskytnutí titulní sloučeniny jako čirého oleje (45 mg).
1H NMR δ 9,92 (b, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 7,94 (t, J = 8,4 Hz, 1 H), 7,81 (dd, J = 12,9; 1,9 Hz, 1 H), 7,35 (dd, J = 8,5; 1,8 Hz, 1 H), 5,20 (s, 2 H), 4,39 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 3,61 (s, 3 H), 1,74 (m, 2 H), 1,64 (m, 2 H), 1,60 (s, 6 H), 1,40 (t, J = 7,1 Hz, 3 H),
1,34 (s, 6 H).
Meth yl-2,6-difluor-4-í (3 '-methoxvmethoxy-4 '-brom-56 \ 78 '-tetrahydro-5588 'tetramethvlnaftalen-2'-vl)karbamoyllbenzoát (sloučenina MJ
Užitím stejného postupu jako pro syntézu sloučeniny ethyl-2-fluor-4-[(3'methoxymethoxy-4'-brom-5',6',7',8'-tetrahydro-5',5',8',8'-tetramethylnaftalen-2'yl)karbamoyl]benzoátu (sloučenina S1), ale za užití 4-brom-3-methoxymethoxy-5,5,8,8tetramethyl-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-2-yl karboxylové kyseliny (sloučenina N, 80 mg, 0,22 mmol), DMAP (60 mg, 0,26 mmol), methyl-2,6-difluor-4-aminobenzoátu (sloučenina H1, 52 mg, 0,24 mmol) a EDC (50 mg, 0,26 mmol), byla získána titulní sloučenina jako čirý olej.
1H NMR δ 10,01 (b, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 7,42 (d, J = 10,0 Hz, 2 H), 5,2 (s, 2 H), 3,95 (s, 3 H), 3,63 (s, 3 H), 1,75 (m, 2 H), 1,65 (m, 2 H), 1,61 (s, 6 H), 1,35 (s, 6 H).
4-Brommethvl-2,6-diterc.butylpyridin (sloučenina A3)
Ke směsi 2,6-di-t-butyl-4-methylpyridinu (Aldrich, 2,0 g, 9,73 mmol) v 25 ml suchého CCI4 byl přidán benzoylperoxid (24 mg, 0,097 mmol) a NBS (1,9 g, 10,7 mmol). Reakční směs byla refluxována 16 hodin. Po jejím ochlazení na pokojovou teplotu bylo vakuově odstraněno rozpouštědlo a zbytek byl purifikován kolonovou chromatografií (silikagel, hexan) za získání oleje (1,957 g), který obsahoval 82% požadovaného produktu a 18% výchozí látky. 1H NMR δ 7,09 (s, 2 H), 4,39 (s, 2 H),
1,35 (s, 18 H).
4-Hvdroxymethvl-2,6-diterc.butylpyridin (sloučenina B3)
Heterogenní roztok 4-brommethyl-2,6-diterc.butylpyridinu (sloučenina A3, 1,743 g,
82% čistota) v 20 ml 12% NaOH ve vodě a 10 ml 1,4-dioxanu bylo refluxováno 12 hodin. Roztok se spontánně rozdělil na dvě vrstvy, zatímco se ochlazoval na pokojovou teplotu. Horní vrstva byla oddělena a byl přidán ethylacetát. Tato organická vrstva byla pak promyta solankou, vodou a sušena s MgSO4. požadovaný produkt byl purifikován kolonovou chromatografií (ethylacetát/hexan 1/9) za získání bílé pevné látky. 1H NMR δ 7,09 (s, 2 H), 4,67 (d, J = 4,4 Hz, 2 H), 2,3 (b, 1 H), 1,36 (s, 18 H).
2,6-Diterc.butvlisonikotinová kyselina (sloučenina C3)
Joneovo činidlo bylo přidáváno po kapkách k roztoku 4-hydroxymethyl-2,6=^diterc,butylpyridinu (sloučenina B3, 302 mg, 1,37 mmol) v 5 ml acetonu dokud roztok nezměnil zbarvení ze světle žlutého na oranžové (bylo spotřebováno 55 kapek Joneova činidla). Po 5 minutách byly k reakční směsi přidány 2 ml isopropanolu, a vytvořila se zelená sraženina Cr3+ soli. Sraženina byla odstraněna filtrací a roztok byl naředěn ethylacetátem, pak promyt solankou, vodou a sušen s MgSO4. Po zfiltrování bylo odstraněno rozpouštědlo za získání požadovaného produktu jako bílé pevné látky (227 mg). 1H NMR δ 7,71 (s, 2 H), 1,34 (s, 18 H).
<4 ··
2-Brom-4,6-diterc.butylfenol (sloučenina D3)
K roztoku 2,4-di-t-butylfenolu (Aldrich, 2,0 g, 9,7 mmol) v 2 ml HOAc byl přidán Br2 (0,5 ml, 9,7 mmol). Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě 12 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku a zbytek byl purifikován kolonovou chromatografií (ethylacetát/hexan 1/20) za poskytnutí požadovaného produktu (2,54 g) jako bílé pevné látky. 1H NMR δ 7,33 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 1,41 (s, 9 H), 1,29 (s, 9H).
O-methoxvmethvl-2-brom-4,6-diterc.butylfenol (sloučenina E3)
K roztoku 2-brom-4,6-diterc.butylfenolu (sloučenina D3, 2,54 g, 8,88 mmol) a katalytického množství Bu4NI v 20 ml suchého CH2CI2 při 0 °C byl přidán diisopropylethylamin (9,51 ml, 53 mmol), a následným přidáním methoxymethylchloridu (2,02 ml, 26,6 mmol). Reakční směs byla zahřívána na 45 °C 12 hodin. Reakční směs byla pak promyta 10% kyselinou citrónovou, pak NaHCO3 (nasyc.), solankou, a sušena s MgSO4. Po filtraci a odstranění rozpouštědla za sníženého tlaku byl zbytek purifikován kolonovou chromatografií (čistý hexan) za poskytnutí titulní sloučeniny (2,79 g) jako bezbarvého oleje.
1H NMR δ 7,40 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,30 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 5,22 (s, 2 H), 3,70 (s,3H), 1,43 (s, 9 H), 1,29 (s, 9 H).
O-methoxvmethvl-3'.5'-diterc.butvlsalicvlová kyselina (sloučenina F3)
K roztoku O-methoxymethyl-2-brom-4,6-diterc.butylfenolu (sloučenina E3, 2,79 g,
8,5 mmol) v 30 ml suchého THF při -78 °C pod Ar bylo přidáno 11 ml t-BuLi (1,7 M v hexanu, 18,7 mmol). Tato směs byla míchána při -78 °C 1 hodinu. Pak byl roztok probubláván při -78 °C 1 hodinu CO2 (g). Po odstranění přívodu CO2 byla reakční směs míchána další hodinu při -78 °C. Pak bylo přidáno 10% HCI a směs byla ponechána ohřát se na teplotu místnosti a extrahována ethylacetátem. Organická vrstva byla promyta solankou a sušena s Na2SO4. Po zakoncentrování byl zbytek purifikován kolonovou chromatografií (ethylacetát/hexan 1/1) za poskytnutí titulní sloučeniny jako bílé pevné látky (492 mg).
1H NMR δ 7,75 (d, J = 2,81, 1 H), 7,60 (d, J = 2,8 Hz, 1 H), 5,07 (s, 2 H), 3,62 (s, 3 H), 1,33 (s, 9H), 1,26 (s, 9 H).
Ethvl-2-fluor-4-í(2'.6'-diterc.butvlpvrid-4'-vl)karbamovnbenzoát (sloučenina 41)
Roztok 2,6-diterc.butylisonikotinové kyseliny (sloučenina C3, 47,3 mg, 0,20 mmol) v 2 ml SOCI2 byl zahříván pod zpětným chladičem 2 hodiny. Přebytek SOCI2 byl vakuově odstraněn a zbytek byl rozpuštěn v 2 ml suchého CH2CI2, a byly přidány ethyl2-fluor-4-aminobenzoát (sloučenina Ci, 40,2 mg, 0,22 mmol) a pyridin (0,0835 ml, 0,69 mmol). Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě 12 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno a zbytek byl purifikován kolonovou chromatografií (ethylacetát/hexan 1/9) za poskytnutí titulní sloučeniny (71,2 mg) ve formě bílých krystalů.
1H NMR δ 8,56 (b, 1 H), 7,91 (t, J = 8,36 HZ, 1 H), 7,53 (dd, J = 12,82; 2,0 Hz, 1 H), 7,39 (dd, J = 8,7; 2,0 Hz, 1 H), 4,33 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 1,37 (t, J = 7,1 Hz, 3 H),
1,35 (s, 18 H).
Ethvl-4-f(2',6r-diterc.butylpvrid-4'-vl)karbamovnbenzoát (sloučenina 43)
Užitím stejného postupu jako pro syntézu ethyl-2-fluor-4-[(2',6'-diterc.butylpyrid4'-yl)karbamoyl]benzoátu (sloučenina 41), ale za užití 2,6-diterc.butylisonikotinové kyseliny (sloučenina C3, 101 mg, 0,43 mmol) a ethyl-4-aminobenzoátu (78 mg, 0,47 mmol), byla získána titulní sloučenina jako bílá pevná látka (135 mg).
1H NMR δ 8,43 (b, 1 H), 8,02 (d, J = 8,7 Hz, 2 H), 7,75 (d, J = 8,7 Hz, 2 H), 7,48 (s, 2 H), 4,33 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 1,38 (t, J = 7,1 Hz, 3 H), 1,35 (s, 18 H).
Ethyl-2-fluor-4-[(3',5'-diterc.butvlfenvl)karbamovnbenzoát (sloučenina 45)
Užitím stejného postupu jako pro syntézu ethyl-2-fluor-4-[(2',6'-diterc.butylpyrid4'-yl)karbamoyl]benzoátu (sloučenina 41), ale za užití 3,5-diterc.butylbenzoové kyseliny (60 mg, 0,26 mmol, dostupná literárním postupem, viz Kagechika a spol., J. Med. Chem. 1988 31, 2182 - 2192), a ethyl-2-fluor-4-aminobenzoátu (sloučenina C1, 51,5 mg, 0,28 mmol), byla získána titulní sloučenina jako bílá pevná látka (66 mg).
1H NMR δ 8,21 (b, 1 H), 7,93 (t, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,79 (dd, J = 12,8; 2,0 Hz, 1 H), 7,67 (d, J = 1,8 Hz, 2 H), 7,65 (t, J = 1,7 Hz, 1 H), 7,35 (dd, J = 8,7; 2,1 Hz, 1 H), 4,36 (q, J = 7,2 Hz, 2 H), 1,39 (t, J = 7,2 Hz, 3 H), 1,36 (s, Í8 H).
Ethvl-2-fluor-4-f(2'-methoxvmethvl-3',5,-diterc.butvlfenyl)karbamoyl1benzoát (sloučenina G3)
Ke směsi O-methoxymethyl-3',5'-diterc.butylsalicylové kyseliny (sloučenina F3, ·· ···· • · · • · · ·· ·· ·· • · · · • · ·· ·· · · · • · · • · 9 9
150 mg, 0,51 mmol), 4-dimethylaminopyridinu (142 mg, 0,61 mmol) a ethyl-2-flUor-4aminobenzoátu (sloučenina Ci, 102 mg, 0,56 mmol) v 5 ml suchého CH2CI2 byl přidán 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid hydrochlorid (117 mg, 0,61 mmol). Reakční směs byla míchána za pokojové teploty 12 hodin. Rozpouštědlo bylo vakuově odpařeno a zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu, pak promyt solankou, vodou a sušen s MgSO4. Po zfiltrování bylo odstraněno rozpouštědlo a zbytek byl purifikován kolonovou chromatografií (ethylacetát/hexan 1/3) za získání titulní sloučeniny (58 mg).
1H NMR δ 8,97 (b, 1 H), 7,94 (t, J = 8,37 Hz, 1 H), 7,78 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 7,61 (d, J = 13,0 Hz, 1 H), 7,56 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 7,35 (d, J = 8,7 Hz, 1 H), 5,00 (s, 2 H), 3,53 (s, 3 H), 4,38 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 1,47 (s, 9 H), 1,39 (t, J = 7,2 Hz, 3 H), 1,33 (s, 9 H).
Ethvl-2-fluor-4-[(2,-hvdroxv-375'-diterc.butvlfenyl)karbamovnbenzoát (sloučenina 47)
K roztoku ethyl-2-fluor-4-[(2'-methoxymethyl-3',5'-diterc.butylfenyl) karbamoyl] benzoátu.(sloučenina G3, 34 mg, 0,07 mmol) v 1 ml THF bylo přidáno 10 kapek HOAc. Reakční směs byla zahřívána do refluxu 12 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno a byl přidán ethylacetát. Roztok byl promyt NaHCO3 (nasyc.), solankou, vodou a sušen s MgSO4. Rozpouštědlo bylo vakuově odstraněno za získání oleje. Olej byl ponechán působení atmosféry 12 hodin, během nichž se tvořily krystaly. Krystaly byly sesbírány a několikrát promyty hexanem za poskytnutí titulní sloučeniny jako bílé pevné látky (13,5 mg).
1H NMR δ 10,73 (s, 1 H), 7,98 (d, J = 2,56 Hz, 1 H), 7,88 (b, 1 H), 7,75 (t, J = 8,26 Hz, 1 H), 7,60 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,32 (dd, J = 12,3; 2,0 Hz, 1 H), 7,02 (dd, J = 8,6; 2,0 Hz, 1 H), 4,35 (q, J = 7,2 Hz, 2 H), 1,39 (s, 9 H), 1,37 (t, J = 7,2 Hz, 3 H), 1,5 (s, 9 H)2,6-Difluor-4-[(2'.6'-diterc.butvlpyrid-4'-yl)karbamovnbenzoová kyselina (sloučen i na 50)
K 2,6-di-t-butylisonikotinové kyselině (sloučenina C3, 20 mg, 0,085 mmol) byl přidán 1 ml SOCI2. .Směs byla zahřívána pod zpětným chladičem 2 hodiny. Po ochlazení na pokojovou teplotu byl odstraněn přebytek SOCI2 a zbytek byl rozpuštěn v 2 ml CH2CI2. K tomuto roztoku byl přidán methyl-2,6-difluor-4-aminobenzoát (sloučenina H1( 16 mg, 0,085 mmol) a triethylamin (0,015 ml, 0,1 mmol). Reakční směs ·· ··* ·· ··· · • · • 4 « byla udržována při pokojové teplotě 2 hodiny a pak byla zahuštěna do sucha. Zbytek byl purifikován kolonovou chromatografií (ethylacetát/hexan 1/10) za poskytnutí methylesteru titulní sloučeniny. Tento byl zmýdelněn podle obecného postupu (viz níže) za získání titulní sloučeniny jako bezbarvé pevné látky. 1H NMR δ 7,44 (s, 2 H), 7,40 (d, J = 11,8 Hz, 2 H), 1,37 (s, 18 H).
2,6-Difluor-4-f(3',5'-diterc.butylfenvl)karbamovnbenzoová kyselina (sloučenina 52)
Užitím stejného postupu jako pro syntézu 2,6-difluor-4-[(2',6'-diterc.butylpyrid-4'yl)karbamoyl]benzoové kyseliny (sloučenina 50), ale za užití 3,5-diterc.butylbenzoové kyseliny (37 mg, 0,16 mmol) a methyl-2,6-difluor-4-aminobenzoátu (sloučenina Hb 29 mg, 0,16 mmol), byla získána titulní sloučenina ve formě bezbarvých krystalů.
1H NMR δ 7,92 (b, 1 H), 7,60 (m, 3 H), 7,42 (d, J = 10,0 Hz, 2 H), 1,38 (s, 18 H).
2-Nitro-4-í(2',6'-diterc.butylpyrid-4'-ylIkarbamoyllbenzoová kyselina (sloučenina 54)
Užitím stejného postupu jako pro přípravu 2,6-difluor-4-[(2',6'-diterc.butylpyrid-4'yl)karbamoyl]benzoové kyseliny (sloučenina 50), ale za užití 2,6diterc.butylisonikotinové kyseliny (40 mg, 0,17 mmol) a methyl-2-nitro-4-aminobenzoátu (sloučenina Fi, 33 mg, 0,17 mmol), byla získána titulní sloučenina jako světle žlutý olej.
1H NMR δ (aceton-d6) 10,25 (b, 1 H), 8,32 (s, 1 H), 7,97 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,93 (b, 1 H), 7,70 (s, 2 H), 1,36 (s, 18 H).
Methyl^-nitrcM-fH^-brom-Sýeý/ýS^tetrahvdro-SlSýSýST-tetramethvInaftalen^'vDkarbamoylIbenzoát (sloučenina 25)
Užitím stejného postupu jako pro syntézu sloučeniny 1, ale za užití sloučeniny F a sloučeniny Fi , byl získán požadovaný produkt jako bílá pevná látka.
1H NMR δ 9,24 (b, 1 H), 9,23 (d, J = 1,8 Hz, 1 H), 7,92 (dd, J = 8,4; 2,4 Hz, 1 H), 7,87 (d, J = 2,1 Hz, 1 H), 7,84 (d, J = 2,1 Hz, 1 H), 7,80 (d, J = 8,7 Hz, 1 H), 3,91 (s, 3 H), 1,75 (m, 2 H), 1,65 (m, 2 H), 1,58 (s, 3 H), 1,33 (s, 3 H).
Obecný způsob syntézy derivátů kyseliny benzoové hydrolýzou odpovídajících methyl nebo ethyl-esterů
K roztoku esteru (3,0 mmol) v 20 ml EtOH bylo přidáno 5 ml 1 M NaOH ve vodě.
·· ··· ·· ·· ···· • · ··· · · · · ·· • · « 1« '· ·····♦· ·· · · '· · · · ·· ··· ··· ··· ·· ··
Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě přes noc a zneutralizována 10% HCI na pH = 5. Alkohol byl odstraněn odpařením a vodná vrstva byla extrahována ethylacetátem (3 X 10 ml). Spojené ethylacetátové vrstvy byly promyty NaHCO3 (nasyc.), solankou a sušeny s MgSO4. Po zakoncentrování byla získána požadovaná kyselina, která může být překrystalována v ethylacetátu nebo v acetonitrilu.
2-Fluor-4-[(5',6',7',8'-tetrahydro-5',5'.8',8'-tetramethvlnaftalen-2'vOkarbamovllbenzoová kyselina (sloučenina 2) 1H NMR δ (aceton-De) 9,86 (b, 1 H), 7,95 (m, 3 H), 7,75 (dd, J = 7,9; 2,2 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,5; 1,6 Hz, 1 H), 7,50 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 1,73 (s, 4 H), 1,32 (s, 6 H), 1,30 (s, 6H).
2-Fluor-4-f(4'-brom-5'.6'.7',8'-tetrahydro-5',5'.8'.8'-tetramethylnaftalén-2'vQkarbamovnbenzoová kyselina (sloučenina 4) 1H NMR δ (aceton- D6) 9,97 (b, 1 H), 8,04 (d, J = 1,89 Hz, 1 H), 8,01 (d, J = 1,90 Hz, 1 H), 7,95 (t, J = 8,55 Hz, 1 H), 7,90 (dd, J = 12,28; 2,0 Hz, 1 H), 7,59 (dd, J = 8,67;
I, 50 Hz, 1 H), 1,76 (m, 4 H), 1,58 (s, 6 H), 1,35 (s, 6 H).
2-Fluor-4-f(3'-hvdroxv-5'.6',7',8'-tetrahvdro-5',5',8',8'-tetramethylnaftalen-2'vDkarbamovllbenzoová kyselina (sloučenina 6) 1H NMR (aceton- D6) δ 11,3 (b, 1 H), 10,2 (b, 1 H), 7,94 (m, 2 H), 7,85 (dd, J =
II, 4; 1,95 Hz, 1 H), 7,53 (dd, J = 6,59; 2,08 Hz, 1 H), 6,94 (s, 1 H), 2,85 (b, 1 H), 1,70 (s, 4 H), 1,29 (s, 6 H), 1,28 (s, 12 H).
.2-Fluor-4-f(8'-brom-4'.4'-dimethylchroman-6^yl)karbamovnbenzoová kyselina (sloučenina 8) 1H NMR (aceton- d6) δ 9,87 (b, 1 H), 8,04 (d, J = 2,1 Hz, 1 H), 8,03 (d, J = 2,1 Hz,
H), 7,94 (t, J = 8,66 Hz, 1 H), 7,91 (dd, J = 13,8; 2,0 Hz, 1 H), 7,57 (dd, J = 8,6; 2,0 HZ, 1 H), 4,37 (t, J = 5,44 HZ, 2 H), 1,92 (t, J = 5,44 Hz, 2 H), 1,40 (s, 6 H).
2-Fluor-4-[(2'.2'14'.4'-tetramethvl-8'-bromchroman-6'-yl)karbamovnbenzoová kyselina (sloučenina 10) ·· ·· ···· ··· ···· · · · · • · ··· · · ♦ · ·· • · · · · ’ · · · · · · · • · · · · ··· ·· ··· ··· ··· ·· ·· 1H NMR δ (aceton- d6) 9,87 (b, 1 H), 8,06 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 8,04 (d, J = 2,1 Hz,
H), 7,94 (t, J = 8,54 Hz, 1 H), 7,91 (dd, J = 14,0; 2,0 Hz, 1 H), 7,59 (dd, J = 8,5; 2,3 Hz, 1 H), 1,96 (s, 2 H), 1,42 (s, 6 H), 1,41 (s, 6 H).
2-Fluor-4-r(2'.2'.4'.4'-tetramethvl-8'-trifluormethvlchroman-6'-vl)karbamovnbenzoová kyselina (sloučenina 12) 1H NMR (aceton- d6) δ 10,02 (b, 1 H), 8,31 (s, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 7,92 (m, 2 H),
7.56 (d, J = 7,69 Hz, 1 H), 2,00 (s, 2 H), 1,44 (s, 6 H), 1,41 (s, 6 H).
2-Fluor-4-[(2'.2',4',4'-tetramethvl-8'-azidochroman-6'-vl)karbamoyl1benzoová kyselina (sloučenina 14) 1H NMR δ 8,03 (t, J = 8,4 Hz, 1 H), 7,87 (b, 1 H), 7,79 (dd, J = 13; 2,0 Hz, 1 H),
7,64 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 7,32 (dd, J = 8,66; 1,9 Hz, 1 H), 7,22 (d, J = 2,1 Hz, 1 H), 1,91 (s, 2 H), 1,45(3,6 H), 1,41 (s, 6 H).
2.6-Difluor-4-f(2',2\4,.4'-tetramethyl-8>-trifluormethvlchroman-6'yDkarbamovllbenzoová kyselina (sloučenina 16) 1H NMR (aceton- d6) δ 8,30 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 8,06 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 7,59 (d,
J = 10,32 Hz, 2 H), 1,954 (s, 2 H), 1,44 (s, 6 H), 1,41 (s, 6 H).
2-Fluor-4-[(2'.2,,4,.4'-tetramethvl-8'-iodchroman-6'-yl)karbamovnbenzoová kyselina (sloučenina 18) 1H NMR δ (aceton- d6) 10,0 (b, 1 H), 8,24 (s, 1 H), 8,07 (s, 1 H), 7,94 (m, 2 H),
7.57 (d, J = 8,67 Hz, 1 H), 1,95 (s, 2 H), 1,41 (s, 12 H).
2-Fluor-4-í(2',2'.4'.4\8'-pentamethvlchroman-6'-vl)karbamovl1benzoová kyselina (sloučenina 20) 1H NMR δ (aceton- d6) 9,77 (b, 1 H), 7,90 (m, 3 H), 7,65 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,56 (dd, J = 8,61; 2,0 Hz, 1 H), 2,19 (s, 3 H), 1,90 (s, 2 H), 1,38 (s, 6 H), 1,37 (s, 6 H).
4-[(5,.6',7,,8,-tetrahvdro-5',5',8,,8'-tetramethvlnaftalen-2'-vl)thiokarbamoyl1benzoová kyselina (sloučenina 22) • 9 1H NMR δ 9,08 (b, 1 H), 8,17 (d, J = 8,61 Hz, 2 H), 7,95 (b, 2 H), 7,77 (b, 1 H),
7,57 (dd, J = 8,1; 2,1 Hz, 1 H), 7,37 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 1,72 (s, 4 H), 1,32 (s, 6 H), 1,31 (s, 6 H).
2-Fluor-4-í(5',6',7,,8'-tetrahvdro-5',5'.8'.8,-tetramethvlnaftalen-2'vDthiokarbamovnbenzoová kyselina (sloučenina 24) 1H NMR δ (aceton- d6) 11,1 (b, 1 H), 8,27 (b, J = 13,2 Hz, 1 H), 8,02 (t, J = 8,3 Hz,
H), 7,89 (s, 1 H), 7,86 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,41 (d, J = 8,37 Hz, 1 H), 1,72 (s, 4 H), 1,30 (s, 12 H).
2-Fluor-4-[(3'-hvdroxv-4'-brom-5'.6'.7',8'-tetrahvdro-5',5'.8'.8'-tetramethvlnaftalen-2'vDkarbamovHbenzoová kyselina (sloučenina 30)
K roztoku ethyl-2-fluor-4-[(3'-methoxymethoxy-4'-brom-5',6',7',8'-tetrahydro5',5',8',8'-tetramethylnaftalen-2'-yl)karbamoyl]benzoátu (sloučenina Si, 45 mg, 0,084 mmol) v 1 ml EtOH byl přidáni ml vodného roztoku NaOH (1 M). Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě přes noc a okyselena na pH = 1 pomocí 10% HCI. EtOH, byl odstraněn a k roztoku byl přidán ethylacetát a více vody. Organická vrstva byla oddělena a promyta NaHCO3, solankou, a sušena s MgSO4. Po filtraci a zakoncentrování reakce poskytla 2-fluor-4-[(3'-methoxymethoxy-4'-brom-5'!6',7 ,8'tetrahydro-5',5',8',8'-tetramethylnaftalen-2'-yl) karbamoyljbenzoovou kyselinu jako bílou pevnou látku. Methoxymethylová skupina byla odstraněna rozpuštěním bílé pevné látky v 2 ml MeOH a 3 kapkách HCI (konc.). Po míchání přes noc byla reakční směs zahuštěna do sucha. Zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla oddělena, promyta NaHCO3, solankou a sušena s MgSO4. Po filtraci a zakoncentrování byla zbývající pevná látka purifikována v , mikrokoloně s ethylacetátem/hexanem (1/1) za získání titulní sloučeniny jako bílé pevné látky (5,0 mg).
1H NMR δ (aceton-d6) 10,19 (b, 1 H), 8,01 (s, 1 H), 7,96 (t, J = 8,6 Hz, 1 H), 7,76 (dd, J = 11,2; 2,0 Hz, 1 H), 7,54 (dd, J = 8,8; 2,0 Hz, 1 H), 1,75 (m, 2 H), 1,65 (m, 2 H), 1,61 (s, 6 H), 1,32 (s, 6 H).
2,6-Difluor-4-[(3 '-hydroxy-4 '-brom-5 ',678 '-tetrahydro-5 757878 '-tetramethvlnaftalen2-yDkarbamoyllbenzoová kyselina (sloučenina 32) ·« ·«►· • · · • · · · ·
Ί6
Užitím stejného postupu jako pro syntézu 2-fluor-4-[(3'-hydroxy-4'-brom5 ',6', 7 ',8 '-tetrahydro-5', 5 ',8', 8 '-tetramethylnaftalen-2 '-yl)karbamoyl]benzoové kyseliny (sloučenina 30) byla získána titulní sloučenina jako bílá pevná látka.
1H NMR δ (aceton-d6) 10,23 (b, 1 H), 8,01 (s, 1 H), 7,52 (d, J = 10,2 Hz, 2 H), 4,8 (b, 1 H), 1,75 (m, 2 H), 1,65 (m, 2 H), 1,60 (s, 6 H), 1,31 (s, 6 H).
2,6-Difluor-4-í(5',6',7',8'-tetrahvdro-5',5',8',8'-tetramethylnaftalen-2'yPkarbamoyllbenzoová kyselina (sloučenina 34)
K 5,5,8,8-tetramethyl-5,6,7,8-tetrahydro-2-naftoové kyselině (43 mg, 0,19 mmol) byl přidán 1 ml thionylchloridu. Tato směs byla refluxována 2 hod. Přebytek thionylchloridu byl odstraněn za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn v 2 ml CH2CI2. K tomuto roztoku byl přidán methyl-4-amino-2,6-difluorbenzoát (sloučenina Hi, 7 mg, .0,2 mmol) a následně 0,5 ml pyridinu. Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě 4 hod a byla zakoncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl purifikován kolonovou chromatografií (ethylacetát/hexan 1/5) za získání methylesteru požadovaného produktu jako bezbarvého oleje.
1H NMR δ 8,11 (d, J = 1,9 HZ, 1 H), 8,05 (b, 1 H), 7,86 (dd, J = 6,2; 2,2 Hz, 7,41 (m, 3 H), 3,93 (s, 3 H), 1,69 (s, 4 H), 1,29 (s, 6 H), 1,28 (s, 6 H). Tento bezbarvý olej byl hydrolyzován na požadovaný produkt pomocí NaOH/H2O/EtOH podle obecného způsobu.
1H NMR δ (aceton-d6) 9,74 (b, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,70 (d, J = 6,8 Hz, 1 H), 7,43 (d, J = 8,4 Hz, 3 H), 1,71 (s, 4 H), 1,29 (s, 6 H), 1,28 (s, 6 H).
2-Nitro-4-í(4'-brom-5',6'.7',8'-tetrahvdro-5'.5',8',8'-tetramethvlnaftalen-2'-yDkarbamovllbenzoová kyselina (sloučenina 26) 1H NMR δ (aceton-d6): 10,16 (b, 1 H), 8,42 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,09 (dd, J = 8,6; 2,1 Hz, 1 H), 8,06 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 8,04 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 7,93 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 1,75 (m, 2 H), 1,65 (m, 2 H), 1,57 (s, 3 H), 1,34 (s, 3 H).
2-Fluor-4-[(2'16'-diterc.butvlpyrid-4'-vl)karbamovl1benzoová kyselina (sloučenina 42) 1H NMR δ (CDsOD) 7,92 (t, J = 8,36 Hz, 1 H), 7,82 (dd, J = 12,82; 2,0 Hz, 1 H), 7,63 (s, 2H), 7,55 (dd, J = 8,7, 2,1 Hz, 1 H), 1,39 (s, 18 H).
• · ·»·· * · • · · ·· ·· • · ··· · ·
A · · « * · • · · · · ·· ··· ··· *·* • 9 *· • « » · • · ·· ··· ♦ » • · 9 <
4-[(2,,6'-díterc.butvlpyrid-4'-vl)karbamoyl1benzoová kyselina (sloučenina 44) 1H NMR δ (CD3OD) 8,02 (d, J = 8,85 Hz, 2 H), 7,85 (d, J = 8,85 Hz, 2 H), 7,63 (s,
2H), 1,40 (s, 18 H).
2-f I uor-4-[ (3', 5 '-d iterc. buty I )fenylkarbamoy llbenzoová kysel i na (sloučenina 46) 1H NMR δ (CDsOD) 7,92 (t, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,80 (dd, J = 12,8; 2,0 Hz, 1 H), 7,79 (d, J = 1,8 Hz, 2H), 7,69 (t, J=1,7 Hz, 1H), 7,57 (dd, J = 8,7; 2,1 Hz, 1H), 1,37 (s, 18 H).
2-Fluor-4-f(2'-hydroxv-3',5,-diterc.butyl)fenylkarbamovnbenzoová kyselina (sloučenina 48) 1H NMR δ (aceton-d6) 12,3 (b, 1 H), 10,07 (b, 1 H), 7,98 (t, J = 8,48 Hz, 1 H), 7,80 (m, 2 H), 7,58 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,56 (dd, J = 8,8; 2,0 Hz, 1 H), 1,44 (s, 9 H), 1,31 (s, 9 H).
T>\l * ·· · ··

Claims (14)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Použití retinoidních sloučenin, které se vážou specificky nebo selektivně na
    RARa retinoidní receptory přednostně před RARP a RARr retinoidními receptory, pro výrobu léčiva pro léčení nebo prevenci nemoci nebo stavu, který je citlivý na léčbu RARa specifickými nebo selektivními agonisty. __
  2. 2. Použití podle nároku 1, kde se RARa specifická nebo selektivní retinoidní sloučenina váže přibližně 500 krát silněji k RARa retinoidním receptorům než k RARfi a RARr retinoidním receptorům.
  3. 3. Použití podle nároku 1, kde nemoc nebo stav je vybrán ze skupiny sestávající z akutní monocytové leukémie, krčního karcinom, myelomu, karcinomů vaječníků a karcinomů hlavy a krku, proliferativní vitreoretinopatie (PVR) a k věku se vztahující makulární degenerace (AMD).
  4. 4. Použití podle nároku 1, kdy dávka RARa specifické nebo selektivní retinoidní sloučeniny je přibližně 0,5 až 5 mg na kg tělesné hmotnosti na den.
  5. 5. Použití podle nároku 1, kde nemoc nebo stav je vybrán ze skupiny sestávající z aktiniové keratózy, arsenové keratózy, zánětlivého nebo nezánětlivého akné, lupénky, šupinatosti kůže, ekzému, atopické dermatitidy, Darriersovy nemoci, lišeje plochého, glukokortikoidního poškození, topické mikrobiální infekce, kožní pigmentace, stařecké nebo světelné poškození kůže, premaligní a maligní hyperproliferativní nemoci, Kaposiho sarkomu, nemoci očí, proliferativní vitreoretinopatie (PVR), odloučení sítnice, suchého oka a jiných chorob rohovky, kardiovaskulárních chorob, dyslipidémie, prevence post-angioplastické restenosy, chorob spojených s lidským papilloma virem(HPV), zánětlivých chorob, neurodegenerativních chorob, nesprávné funkce hypofýzy, nedostatečného růstu vlasů, chorob spojených s imunitním systémem a léčbou zranění.
  6. 6. Použití podle nároku 1, kde RARa specifická nebo selektivní retinoidní sloučenina má obecný vzorec (I) nebo obecný vzorec (II) kde Xi je O nebo Xi je [C(Ri)2]n, kde n je celé číslo mezi 0 a 2;
    Ri je nezávisle H nebo alkyl o 1 až 6 uhlících;
    R2 je nezávisle vodík, nebo nižší alkyl o 1 až 6 uhlících;
    R3 je vodík, nižší alkyl o 1 až 6 uhlících nebo F; m je celé číslo hodnoty Ó až 5; o je celé číslo hodnoty 0 až 4; p je celé číslo, hodnoty 0 až 2; r je celé číslo hodnoty 0 až 2;
    X2jeNneboCH;
    Y je fenylová nebo naftylová skupina, nebo heteroaryl vybraný ze skupiny skládající se z pyridylu, thienylu, furylu, pyridazinylu, pyrimidinylu, pyrazinylu, thiazolylu, oxazolylu, imidazolylu a pyrrazolylu, uvedené skupiny fenyl, naftyl a heteroaryl jsou volitelně substituované jednou nebo dvěma R2 skupinami;
    \Ni je substituent vybraný nezávisle ze skupiny skládající se z F, Br, Cl, I, fluoro substituovaný Ci-C6 alkyl, NO2, a OH, s výhradami, že:
    (i) když je sloučenina podle obecného vzorce (I) a Z je O, pak součet p a r je nejméně 1 a W1 není fluoro skupina v posici 3 tetrahydronaftalenového kruhu;
    (ii) když je sloučenina podle obecného vzorce (I) a r je nula a p je 1 a W1 je OH, pak OH skupina je umístěna v poloze a k L skupině;
    -,-, -W2jA substituent vybraný nezávisle ze skupina skládající se z F, Br, Cl, I, fluoro substituovaného C1.C6 alkylu, NO2, a OH;
    W3 je substituent vybraný nezávisle ze skupiny skládající se z F, Br, Cl, I, Ci-C6 alkylu, fluoro substituovaného C1.C6 alkylu, NO2, a OH s výhradou, že když je sloučenina podle vzorce 2 a X2 je CH a r je 0, pak p není 0 a alespoň jedna W3 skupina není alkyl;
    L je -(C=Z)-NH- nebo -NH-(C=Z)Z je O nebo S, a
    B je COOH nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, COORg, CONR9R10, -CH2OH, CH2OR11, CH2OCOR11, CHO, CH(OR12)2, CHOR13O, -COR7, CR7(OR12)2, CR7ORi3O, kde R7 je alkylová, cykloalkylová nebo alkenylová skupina obsahující 1 až 5 uhlíků, Rg je alkylová skupina o 1 až 10 uhlících nebo trimethylsilylalkyl, kde alkylová skupina má 1 až 10 uhlíků, nebo cykloalkylová skupina o 5 až 10 uhlících, nebo Rg je fenyl nebo nižší alkylfenyl, Rg a R10 nezávisle jsou vodík, alkylová skupina o 1 až 10 uhlících, nebo cykloalkylová skupina o 5 až 10 uhlících, nebo fenyl nebo nižší alkylfenyl, Rn je nižší alkyl, fenyl nebo nižší alkylfenyl, R12 je nižší alkyl, a R-i3 je dvojvazný alkylový zbytek o 2 až 5 uhlících.
  7. 7. Použití podle nároku 6, kde RARa specifická nebo selektivní retinoidní sloučenina je ve shodě s obecným vzorcem (I).
  8. 8. Použití podle nároku 7, kde v obecném vzorci (I) RARa specifické nebo selektivní retinoidní sloučeniny X1 je [C(Ri)2]n a n je 1.
  9. 9. Použití podle nároku 8, kde v obecném vzorci (I) RARa specifické nebo selektivní retinoidní sloučeniny Y je fenyl.
  10. 10. Použití podle nároku 6, kde RAR„ specifická nebo selektivní retinoidní sloučenina je ve shodě s obecným vzorcem (II).
  11. 11. Použití podle nároku 10, kde v obecném vzorci (II) RARa specifické nebo selektivní retinoidní sloučeniny Y je fenyl.
    ^^t-Peužitkretinoidní sloučeniny, která se váže specificky nebo selektivně na RARa retinoidní receptory přednostně před RARP a RARr retinoidními receptory pro výrobu léčiva pro léčení nemoci nebo stavu, který je citlivý k léčbě RARa specifickými nebo selektivními agonisty, přičemž retinoidní sloučenina je specifická nebo selektivní pro RARa retinoidní receptory přednostně před RARp a RARr retinoidními receptory, pokud ve vazebném stanovení je hodnota Kd pro vazbu na RARa receptory přibližně 500 krát nižší než hodnota Kd pro vazbu na RARp a RARr retinoidní receptory.
  12. 13. Použití podle nároku 12, kde nemoc nebo stav je vybrán ze skupiny sestávající z aktiniové keratózy, arsenové keratózy, zánětlivého nebo nezánětlivého akné, lupénky, šupinatosti kůže, ekzému, atopické dermatitidy, Darriersovy nemoci, lišeje plochého, glukokortikoidní poškození, topické mikrobiální infekce, kožní pigmentace, stařeckého nebo světelného poškození kůže, premaligní a maligní hyperproliferativní nemoci, Kaposiho sarkomu, nemoci očí, proliferativní vitreoretinopatie (PVR), odloučení sítnice, suchého oka a jiných chorob rohovky, kardiovaskulární choroby, dyslipidémie, prevence post-angioplastické restenosy, choroby spojené s lidským papilloma virem (HPV), zánětlivé choroby, neurodegenerativní choroby, nesprávné funkce hypofýzy, nedostatečného růstu vlasů, choroby spojené s imunitním systémem a léčbou zranění.
  13. 14. Použití podle nároku 13, nemoc nebo stav je vybrán ze skupiny sestávající z akutní monocytová leukémie, krčního karcinomu, myelomu, karcinomů vaječníků, karcinomů hlavy a krku, proliferativní vitreoretinopatie (PVR) a k věku vztahujícím se makulární degenerace (AMD).
  14. 15. Použití podle nároku 12, kde RAR« specifická nebo selektivní retinoidní sloučenina má obecný vzorec (I) nebo obecný vzorec (II) kde Xi je O nebo Xi je [C(Ri)2]n, kde n je celé číslo mezi 0 a 2;
    Ri je nezávisle H nebo alkyl o 1 až 6 uhlících;
    R2 je nezávisle vodík, nebo nižší alkyl o 1 až 6 uhlících;
    R3 je vodík, nižší alkyl o 1 až 6 uhlících nebo F; m je celé číslo hodnoty 0 až 5; o je celé číslo hodnoty 0 až 4;
    . p je celé číslo hodnoty 0 až 2; r je celé číslo hodnoty 0 až 2;
    X2jeNneboCH;
    Y je fenylová nebo naftylová skupina, nebo heteroaryl vybraný ze skupiny sestávající z pyridylu, thienylu, furylu, pyridazinylu, pyrimidinylu, pyrazinylu, thiazolylu, oxazolylu, imidazolylu a pyrrazolylu, uvedené skupiny fenyl, naftyl a heteroaryl jsou volitelně substituované jednou nebo dvěmi R2 skupinami;
    Wi je substituent vybraný nezávisle ze skupiny skládající se z F, Br, Cl, I, fluoro substituovaný Ci-Ce alkyl, NO2, a OH, s výhradami, že:
    (i) když je sloučenina podle obecného vzorce (I) a Z je O, pak součet p a r je nejméně 1 a Wi není fluoro skupina v posici 3 tetrahydronaftalenového kruhu;
    (ii) když je sloučenina podle obecného vzorce (I) a r je nula a p je 1 a Wi je OH, pak OH skupina je umístěna v pozici a k L skupině;
    . \N2 je substituent vybraný nezávisle ze skupiny sestávající se z F, Br, Cl, I, fluoro substituovaného C-i-Ce alkylu, NO2, a OH;
    W3 je substituent vybraný nezávisle ze skupiny skládající se z F, Br, Cl, I, Ci-C6 alkylu, fluoro substituovaného Ci-C6 alkylu, NO2, a OH s výhradou, že když je sloučenina podle obecného vzorce II a X2 je CH a r je 0, pak p není 0 a alespoň
CZ982069A 1995-12-29 1996-12-16 Použití retinoidních sloučenin s RAR alfa receptorovou specifickou nebo selektivní aktivitou CZ206998A3 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/580,553 US5965606A (en) 1995-12-29 1995-12-29 Methods of treatment with compounds having RAR.sub.α receptor specific or selective activity

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ206998A3 true CZ206998A3 (cs) 1999-04-14

Family

ID=24321568

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ982069A CZ206998A3 (cs) 1995-12-29 1996-12-16 Použití retinoidních sloučenin s RAR alfa receptorovou specifickou nebo selektivní aktivitou

Country Status (16)

Country Link
US (4) US5965606A (cs)
EP (1) EP0869782A2 (cs)
JP (1) JP2000502707A (cs)
KR (1) KR19990076814A (cs)
CN (1) CN1211180A (cs)
AU (1) AU710483B2 (cs)
BR (1) BR9612318A (cs)
CA (1) CA2241758A1 (cs)
CZ (1) CZ206998A3 (cs)
HU (1) HUP0001643A3 (cs)
IL (1) IL125121A0 (cs)
MX (1) MX9805282A (cs)
NZ (1) NZ326155A (cs)
PL (1) PL327627A1 (cs)
RU (1) RU2191009C2 (cs)
WO (1) WO1997024116A2 (cs)

Families Citing this family (77)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5977125A (en) 1994-10-31 1999-11-02 Eisai Co., Ltd. Mono-or polyenic carboxylic acid derivatives
JP3964478B2 (ja) 1995-06-30 2007-08-22 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 ヘテロ環含有カルボン酸誘導体及びそれを含有する医薬
US5965606A (en) * 1995-12-29 1999-10-12 Allergan Sales, Inc. Methods of treatment with compounds having RAR.sub.α receptor specific or selective activity
US20040266715A1 (en) * 1999-03-31 2004-12-30 Wong Liang Fong Neurite regeneration
US20070213290A1 (en) * 1996-10-17 2007-09-13 Kingsman Alan J Neurite regeneration
GB9907461D0 (en) * 1999-03-31 1999-05-26 King S College London Neurite regeneration
WO1999020309A1 (fr) * 1997-10-22 1999-04-29 Eisai Co., Ltd. Agonistes de l'acide retinoique, agents preventifs et therapeutiques des nephrites
US6083973A (en) * 1998-03-09 2000-07-04 Syntex (U.S.A.) Inc. Methods for inhibiting mucin secretion using RAR α selective antagonists
FR2776511B1 (fr) * 1998-03-31 2001-05-11 Galderma Rech Dermatologique Utilisation dans ou pour la preparation d'une composition d'au moins un inhibiteur de l'activite de l'acide retinoique
US6197798B1 (en) 1998-07-21 2001-03-06 Novartis Ag Amino-benzocycloalkane derivatives
US6833373B1 (en) 1998-12-23 2004-12-21 G.D. Searle & Co. Method of using an integrin antagonist and one or more antineoplastic agents as a combination therapy in the treatment of neoplasia
JP3897594B2 (ja) 2000-01-18 2007-03-28 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト ミクロソームトリグリセリド輸送タンパク質およびアポリポタンパク質分泌の阻害剤として有用なカルボキサミド
CA2399399A1 (en) * 2000-03-30 2001-10-11 Oxford Biomedica (Uk) Limited Retinoic acid receptor beta-2, its antagonists, and gene therapy vectors for the treatment of neurological disorders
TWI281911B (en) 2000-04-04 2007-06-01 Allergan Inc Treatment of tumors with RARalpha selective retinoid compounds in combination with other anti-tumor agents
US6369261B1 (en) 2000-08-29 2002-04-09 Allergan Sales, Inc. Compounds having activity as inhibitors of cytochrome P450RAI
US6369225B1 (en) 2000-08-29 2002-04-09 Allergan Sales, Inc. Compounds having activity as inhibitors of cytochrome P450RAI
US6380256B1 (en) * 2000-08-29 2002-04-30 Allergan Sales, Inc. Compounds having activity as inhibitors of cytochrome P450RAI
US6313107B1 (en) 2000-08-29 2001-11-06 Allergan Sales, Inc. Methods of providing and using compounds having activity as inhibitors of cytochrome P450RAI
ATE315558T1 (de) * 2000-08-29 2006-02-15 Allergan Inc Verbindungen mit cytochrom p450ra1 hemmenden aktivität
US6252090B1 (en) 2000-08-29 2001-06-26 Allergan Sales, Inc. Compounds having activity as inhibitors of cytochrome P450RAI
US6387951B1 (en) 2000-08-29 2002-05-14 Allergan Sales, Inc. Compounds having activity as inhibitors of cytochrome P450RAI
EP1935869A1 (en) * 2000-10-02 2008-06-25 F. Hoffmann-La Roche Ag Retinoids for the treatment of emphysema
EP1324970B1 (en) * 2000-10-02 2008-11-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Retinoids for the treatment of emphysema
JP2002131257A (ja) * 2000-10-26 2002-05-09 Nisshinbo Ind Inc 熱伝導率測定方法、測定装置及び断熱材の製造方法
US6843595B2 (en) * 2001-01-26 2005-01-18 Waters Investment Limited Differential scanning calorimeter accounting for heat leakage
US7173134B2 (en) 2001-09-25 2007-02-06 Smithkline Beecham Corporation Selective RXR ligands
US6740676B2 (en) 2002-03-19 2004-05-25 Allergan, Inc. 4-[(8-ethynyl, 8-vinyl or 8-ethynyl-methyl)-6-chromanoyl]-benzoic and 2-[4-[(8-ethynyl, 8-vinyl or 8-ethynyl-methyl)-6-chromanoyl]-phenyl]-acetic acid, their esters and salts having cytochrome p450rai inhibitory activity
DE10227182B4 (de) * 2002-06-18 2013-01-31 Mettler-Toledo Ag Probenhalter für die Differenz-Thermoanalyse
US6620963B1 (en) 2002-09-19 2003-09-16 Allergan, Inc. TRICYCLO[6.2.202,7]DODECA-2(7),3,5-TRIEN-4-CARBONYLAMINO-PHENYL AND TRICYCLO[6.2.202,7]DODECA-2(7),3,5-TRIEN-4-CARBONYLAMINO-HETEROARYL AND RELATED COMPOUNDS HAVING RARα RECEPTOR SELECTIVE BIOLOGICAL ACTIVITY
DE50308077D1 (de) * 2003-10-28 2007-10-11 Mettler Toledo Ag Thermoanalytischer Sensor und Verfahren zu dessen Herstellung
US7077563B2 (en) * 2003-11-19 2006-07-18 General Electric Company Deposition sensor based on differential heat flux measurement
CA2545023A1 (en) 2003-11-25 2005-06-09 Novo Nordisk A/S Novel salicylic anilides
CN100548288C (zh) 2004-03-10 2009-10-14 财团法人乙卯研究所 记忆固定促进剂
EP1717566A1 (de) * 2005-04-25 2006-11-02 Mettler-Toledo AG Thermoanalytischer Sensor
US20070060620A1 (en) * 2005-09-09 2007-03-15 John Sefton Use of RAR retinoid agonists to increase sperm count and sperm mobility in males
PL1937244T3 (pl) 2005-09-30 2019-01-31 Io Therapeutics, Llc Leczenie nowotworu specyficznymi agonistami rxr
GB0605683D0 (en) * 2006-03-21 2006-05-03 Servomex Group Ltd Thermal conductivity sensor
US20080273572A1 (en) * 2006-06-02 2008-11-06 James Madison University Thermal detector for chemical or biological agents
JP4849961B2 (ja) * 2006-06-05 2012-01-11 エスアイアイ・ナノテクノロジー株式会社 熱分析装置
US7470057B2 (en) * 2006-08-24 2008-12-30 Waters Investments Limited Differential scanning calorimeter sensor and method
JP2008089474A (ja) * 2006-10-03 2008-04-17 Rigaku Corp 熱分析装置のセンサユニットおよびその製造方法
FR2925163B1 (fr) * 2007-12-12 2010-02-26 Centre Nat Rech Scient Procede et appareil d'analyse thermique
EP2133690B1 (en) * 2008-06-13 2011-03-09 Mettler-Toledo AG Thermoanalytical instrument with dynamic power compensation
EP2214005B1 (en) 2009-02-03 2019-09-18 Mettler-Toledo GmbH Thermo-Analytical Instrument
US8517600B2 (en) * 2009-10-27 2013-08-27 General Electric Company Deposition sensor based on differential heat transfer resistance
JP5642525B2 (ja) * 2010-02-02 2014-12-17 株式会社日立ハイテクサイエンス 示差走査熱量計
KR101853882B1 (ko) * 2011-01-10 2018-05-02 삼성전자주식회사 생체물질 검사장치 및 그 제어방법
EP2685972A4 (en) * 2011-03-14 2014-08-13 Io Therapeutics Inc TREATMENT OF INFLAMMATION AND AUTOIMMUNE DISORDERS USING RAR ALPHA SELECTIVE AGONISTS
JP6441073B2 (ja) 2011-06-24 2018-12-19 ジーアールアイ バイオ, インコーポレイテッドGRI Bio, Inc. 炎症状態の予防および処置
WO2013019653A1 (en) * 2011-07-29 2013-02-07 Tempero Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods
CN104114171A (zh) 2011-12-13 2014-10-22 Io治疗公司 使用rxr激动剂的自身免疫紊乱的治疗
US10653650B2 (en) 2011-12-13 2020-05-19 Io Therapeutics, Inc. Treatment of diseases by concurrently eliciting remyelination effects and immunomodulatory effects using selective RXR agonists
MX365321B (es) * 2012-06-07 2019-05-29 Los Angeles Childrens Hospital Métodos para el tratamiento de neutropenia mediante agonistas retinoides.
CN106413701A (zh) 2014-02-18 2017-02-15 洛杉矶儿童医院 用于治疗中性粒细胞减少症的组合物和方法
EP2921833B1 (de) * 2014-03-18 2016-12-28 Mettler-Toledo GmbH Thermoanalytischer Sensor und Verfahren zu dessen Herstellung
US9463201B2 (en) 2014-10-19 2016-10-11 M.G. Therapeutics Ltd Compositions and methods for the treatment of meibomian gland dysfunction
DK3229811T3 (da) 2014-12-09 2021-03-08 Gri Bio Inc Forebyggelse og behandling af betændelseslidelser
WO2016144976A1 (en) * 2015-03-09 2016-09-15 Kings College London Combination therapy with rar alpha agonists for enhancing th1 response
BR112017020745A2 (pt) 2015-03-31 2018-07-17 Syros Pharmaceuticals Inc métodos de estratamento de pacientes para tratamento com agonistas de receptor-a de ácido retinoico.
CN113144203A (zh) 2015-09-28 2021-07-23 阿祖拉眼科有限公司 用于增加睑板腺脂质分泌物的含硫醇及二硫化物的药剂
PL3368080T3 (pl) 2015-10-31 2023-09-11 Io Therapeutics, Inc. Leczenie zaburzeń układu nerwowego z zastosowaniem kombinacji agonistów rxr i hormonów tarczycy
ES2898676T3 (es) * 2015-11-25 2022-03-08 Io Therapeutics Inc Agonistas selectivos de rar-alfa resistentes a CYP26 en el tratamiento del cáncer
MX2018010863A (es) 2016-03-10 2019-01-10 Io Therapeutics Inc Tratamiento contra trastornos musculares con combinaciones de agonistas rxr y hormonas tiroideas.
EP4166160A1 (en) 2016-03-10 2023-04-19 IO Therapeutics, Inc. Treatment of autoimmune diseases with combinations of rxr agonists and thyroid hormones
US9868994B2 (en) 2016-04-08 2018-01-16 Syros Pharmaceuticals, Inc. Methods of stratifying patients for treatment with retinoic acid receptor-α agonists
MX2018012250A (es) 2016-04-08 2019-06-24 Syros Pharmaceuticals Inc Agonistas de los receptores de acido retinoico alfa (rara) para el tratamiento de leucemia mieloide aguda (aml) y sindrome mielodisplasico (mds).
CA3019349A1 (en) 2016-04-14 2017-10-19 Azura Ophthalmics Ltd. Selenium disulfide compositions for use in treating meibomian gland dysfunction
CN108078966B (zh) * 2016-11-22 2021-08-17 厦门大学 芳香硝基乙烯类化合物的用途
EP3651764A4 (en) 2017-07-13 2021-09-22 IO Therapeutics, Inc. RETINOID AND REXINOID COMPOUNDS IMMUNOMODULATORS IN COMBINATION WITH IMMUNE MODULATORS FOR CANCER IMMUNOTHERAPY
EP3675843A4 (en) * 2017-08-31 2021-11-03 IO Therapeutics, Inc. RAR-SELECTIVE AGONISTS IN COMBINATION WITH IMMUNE MODULATORS FOR CANCER THERAPY
MX2020003223A (es) 2017-09-20 2020-09-21 Io Therapeutics Inc Tratamiento de enfermedades con ésteres de agonistas de rxr selectivos.
US11474054B2 (en) * 2018-10-22 2022-10-18 Equistar Chemicals, Lp Temperature control apparatuses and methods
US10966950B2 (en) 2019-06-11 2021-04-06 Io Therapeutics, Inc. Use of an RXR agonist in treating HER2+ cancers
WO2020263960A1 (en) * 2019-06-28 2020-12-30 Carl Wagner Compositions comprising a retinoid x receptor (rxr) agonist, a retinoic acid receptor (rar) agonist, or a dual rxr/rar agonist
EP4087655A4 (en) 2020-01-10 2024-02-21 Azura Ophthalmics Ltd INSTRUCTIONS FOR COMPOSITION AND SENSITIVITY
WO2023108012A1 (en) 2021-12-07 2023-06-15 Io Therapeutics, Inc. Use of an rxr agonist and taxanes in treating her2+ cancers
US20230416190A1 (en) * 2022-06-27 2023-12-28 Io Therapeutics, Inc. Synthesis of tetrahydronaphthalenols and uses thereof

Family Cites Families (95)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4067975A (en) * 1975-08-04 1978-01-10 Yu Ruey J Treatment of psoriasis with 6-aminonicotinamide and thionicotinamide
US4085091A (en) 1976-12-16 1978-04-18 E. I. Dupont De Nemours And Company Thermally stable, rigid polyesters from thermally stable, rigid dibasic acids and aromatic dihydroxy compounds
US4111717A (en) * 1977-06-29 1978-09-05 Leeds & Northrup Company Small-size high-performance radiation thermopile
US4326055A (en) 1977-12-22 1982-04-20 Hoffmann-La Roche Inc. Stilbene derivatives
FR2440353A1 (fr) * 1978-11-03 1980-05-30 Science Union & Cie Nouveaux arylethanols, leurs procedes d'obtention et leur emploi comme medicament
EP0047817A3 (de) 1980-08-14 1982-05-26 F. HOFFMANN-LA ROCHE & CO. Aktiengesellschaft Hydrierte Naphthaline, deren Herstellung und Verwendung sowie derartige Naphthaline enthaltende Gemische
CH651034A5 (de) 1982-05-12 1985-08-30 Hoffmann La Roche Chroman-, thiochroman- oder 1,2,3,4-tetrahydrochinolinderivate und ihre verwendung als arzneimittel-wirkstoffe.
DK158947C (da) 1982-07-06 1991-01-21 Hoffmann La Roche Tetrahydronaphthalin-,benzofuran- og benzothiophenderivater, fremstilling og anvendelse deraf samt rodenticid indeholdende saadanne derivater
US4794188A (en) * 1982-12-01 1988-12-27 Usv Pharmaceutical Corporation Certain unsymmetrical quinolinyl ethers having anti-inflammatory and anti-allergic activity
ATE38835T1 (de) 1983-07-05 1988-12-15 Pfizer Karbonsaeure-derivate verwendbar bei der verhuetung der zersetzung von knorpeln.
WO1985000806A1 (en) 1983-08-08 1985-02-28 Sri International Benzonorbornenyl, benzopyranyl and benzothiopyranyl retinoic acid analogues
FR2562539B1 (fr) 1984-04-06 1987-04-17 Chauvin Blache Lab Nouveaux derives de l'acide vinyl-4 benzoique, leur procede de preparation et leurs applications en therapeutique et comme ligands
US4826984A (en) 1984-04-09 1989-05-02 The Board Of Regents For The Oklahoma Agricultural And Mechanical College Acting For And On Behalf Of Oklahoma State University Heteroarotinoid compounds as anticancer agents
JPS60222445A (ja) 1984-04-19 1985-11-07 Yoshitomi Pharmaceut Ind Ltd フタル酸化合物
JPS6122046A (ja) 1984-07-07 1986-01-30 Koichi Shiyudo スチルベン誘導体
DE3580134D1 (de) * 1984-07-07 1990-11-22 Shudo Koichi Prof Dr Chem Benzoesaeurederivate.
LU85544A1 (fr) 1984-09-19 1986-04-03 Cird Derives heterocycliques aromatiques,leur procede de preparation et leur application dans les domaines therapeutique et cosmetique
DE3434946A1 (de) 1984-09-22 1986-04-03 Basf Ag, 6700 Ludwigshafen Diarylacetylene, ihre herstellung und verwendung
DE3434942A1 (de) 1984-09-22 1986-04-03 Basf Ag, 6700 Ludwigshafen Tetralin-derivate, ihre herstellung und verwendung
DE3434947A1 (de) 1984-09-22 1986-04-03 Basf Ag, 6700 Ludwigshafen Isoxazolcarbonsaeure-derivate, ihre herstellung und verwendung
HU194405B (en) * 1985-05-10 1988-01-28 Magyar Optikai Muevek Temperature control system for testing thermic phase transformations
DE3529489A1 (de) * 1985-08-16 1987-02-26 Max Planck Gesellschaft Verfahren und einrichtung zum bestimmen der waermekapazitaet einer probe
IL80270A0 (en) 1985-10-11 1987-01-30 Cird Naphthalene derivatives,their preparation and pharmaceutical compositions containing them
DE3602473A1 (de) 1986-01-28 1987-07-30 Basf Ag Vinylphenolderivate, ihre herstellung und verwendung
LU86351A1 (fr) 1986-03-12 1987-11-11 Oreal Composes benzopyrannyl et benzothiopyrannyl benzoiques,leur procede de preparation et leur utilisation en cosmetique et en medecine humaine et veterinaire
DE3615157A1 (de) 1986-05-05 1987-11-12 Schwabe Willmar Gmbh & Co 5-arylalkyl-4-alkoxy-2(5h)-furanone, zwischenprodukte und verfahren zu ihrer herstellung sowie ihre anwendung als therapeutische wirkstoffe
ZW6587A1 (en) 1986-05-13 1987-12-02 Hoffmann La Roche Tetrahydro naphthanline derivatives
ZW7487A1 (en) 1986-05-23 1987-12-16 Hoffmann La Roche Tetrahydronaphthaline and indane derivatives
ZW10287A1 (en) 1986-07-15 1988-01-13 Hoffmann La Roche Tetrahydronaphthaline and indane derivatives
US4739098A (en) 1986-09-22 1988-04-19 Allergan, Inc. Ethynylphenyl-containing retinoic acid derivatives
NZ222968A (en) 1986-12-24 1990-05-28 Allergan Inc Ethynylheteroaromatic derivatives and medicaments
US4927947A (en) 1986-12-24 1990-05-22 Allergan, Inc. Ethynylheteroaromatic-acids having retinoic acid-like activity
US5089509A (en) 1988-09-15 1992-02-18 Allergan, Inc. Disubstituted acetylenes bearing heteroaromatic and heterobicyclic groups having retinoid like activity
US5234926A (en) 1987-03-20 1993-08-10 Allergan, Inc. Disubstituted acetylenes bearing heteroaromatic and heterobicyclic groups having retinoid like activity
US5264578A (en) 1987-03-20 1993-11-23 Allergan, Inc. Disubstituted acetylenes bearing heterobicyclic groups and heteroaromatic or phenyl groups having retinoid like activity
CA1305480C (en) 1987-03-20 1992-07-21 Roshantha A.S. Chandraratna Disubstituted acetylenes bearing heteroaromatic and heterobicyclic groups having retinoid like activity
US4810804A (en) 1987-03-26 1989-03-07 Allergan, Inc. Acetylenes disubstituted with a phenyl group and a heterobicyclic group having retinoid-like activity
ZA885192B (en) 1987-08-19 1989-04-26 Hoffmann La Roche Pharmaceutical preparations
CA1298309C (en) 1987-11-06 1992-03-31 Michael Klaus Benzocycloheptene derivatives
US5231113A (en) 1988-04-11 1993-07-27 Allergan, Inc. Tetralin esters of phenols or benzoic acids having retinoid like activity
AU618590B2 (en) 1988-04-11 1992-01-02 Allergan, Inc. Tetralin esters of phenols or benzoic acids having retinoid like activity
US4895868A (en) 1988-06-29 1990-01-23 Allergan, Inc. Thiochroman esters of phenols and terephthallates having retinoid-like activity
US5015658A (en) 1988-06-29 1991-05-14 Allergan, Inc. Thiochroman esters of phenols and terephthallates having retinoid-like activity
AU626881B2 (en) * 1988-07-14 1992-08-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Benzofused heterocyclics used as pharmaceuticals
US5068252A (en) 1989-07-26 1991-11-26 Allergan, Inc. Methods of using phenylethenyl compounds having retinoid-like activity
US4992468A (en) 1989-07-26 1991-02-12 Allergan, Inc. Phenylethenyl compounds having retinoid-like activity
US5045551A (en) 1989-09-19 1991-09-03 Allergan, Inc. Acetylenes disubstituted with a heteroaromatic group and a 2-substituted chromanyl, thiochromanyl or 1,2,3,4-tetrahydroquinolinyl group having retinoid-like activity
US5183827A (en) 1989-09-19 1993-02-02 Allergan, Inc. Acetylenes disubstituted with a heteroaromatic group and a 2-substituted chromanyl, thiochromanyl or 1,2,3,4-tetrahydroquinolinyl group having retinoid-like activity
US5248777A (en) 1989-09-19 1993-09-28 Allergan, Inc. Process and intermediates for preparing compounds having a disubstituted acetylene moiety and retinoic acid-like biological activity
US5399561A (en) 1989-09-19 1995-03-21 Allergan, Inc. Acetylenes disubstituted with a phenyl or heteroaryl group and a 2-oxochromanyl, 2-oxothiochromanyl or 2-oxo-1,2,3,4-tetrahydro-quinolinyl group having retinoid-like biological activity
US5162546A (en) 1989-09-19 1992-11-10 Allergan, Inc. Acetylenes disubstituted with a phenyl group and a 2-substituted chromanyl, thiochromanyl or 1,2,3,4-tetrahydroquinolinyl group having retinoid-like activity
US5023341A (en) 1989-09-19 1991-06-11 Allergan, Inc. Compounds having a disubstituted acetylene moiety and retinoic acid-like biological activity
US5053523A (en) 1989-09-19 1991-10-01 Allergan, Inc. Ethynyl-chroman compounds
US5272156A (en) 1989-09-19 1993-12-21 Allergan, Inc. Acetylenes disubstituted with a heteroaromatic group and a 2-substituted 1,2,3,4-tetrahydroquinolinyl group having retinoid-like activity
US4980369A (en) 1989-09-19 1990-12-25 Allergan, Inc. Acetylenes disubstituted with a phenyl group and a 2-substituted chromanyl or thiochromanyl group having retinoid-like activity
US5175185A (en) 1989-12-29 1992-12-29 Allergan, Inc. Acetylenes disubstituted with a heteroaromatic group and a substituted phenyl group having retinoid like activity
US5013744B1 (en) 1989-12-29 1994-09-20 Allegran Inc Acetylenes disubstituted with a pyridinyl group and a substituted phenyl group having retinoid like activity
US5264456A (en) 1989-12-29 1993-11-23 Allergan, Inc. Acetylenes disubstituted with a furyl group and a substituted phenyl group having retinoid like activity
US5006550A (en) 1989-12-29 1991-04-09 Allergan, Inc. Chroman esters of phenols and benzoic acids having retinoid-like activity
US5202471A (en) 1990-02-06 1993-04-13 Allergan, Inc. Alkyl, alkoxy and thioalkoxy substituted diphenyl acetylenes having retinoid like activity
WO1991016051A1 (en) 1990-04-16 1991-10-31 Rhône-Poulenc Rorer International (Holdings) Inc. Styryl-substituted monocyclic and bicyclic heteroaryl compounds which inhibit egf receptor tyrosine kinase
LU87821A1 (fr) 1990-10-12 1992-05-25 Cird Galderma Composes bi-aromatiques,et leur utilisation en medecine humaine et veterinaire et en cosmetique
ES2094350T3 (es) 1991-02-13 1997-01-16 Allergan Inc Cromano y tiocromanos con sustituyentes de feniletinilo en la posicion 7 que tienen actividad biologica de tipo retinoide.
US5134159A (en) 1991-03-26 1992-07-28 Allergan, Inc. 7-chromanyl esters of phenols and benzoic acids having retinoid-like activity
WO1992017471A1 (en) 1991-03-26 1992-10-15 Allergan, Inc. Chromans and thiochromans with heteroarylethynyl substituents at the 7-position having retinoid-like biological activity
FR2676440B1 (fr) * 1991-05-15 1993-07-30 Cird Galderma Nouveaux composes aromatiques derives d'imine, leur procede de preparation et leur utilisation en medecine humaine et veterinaire ainsi qu'en cosmetique.
EP0600028B1 (en) * 1991-08-23 2001-11-07 The Salk Institute For Biological Studies Use of selective ligands for treatment of disease states responsive to steroid or steroid-like hormones
US5326898A (en) 1992-02-11 1994-07-05 Allergan, Inc. Substituted phenylethenyl compounds having retinoid-like biological activity
JP3499553B2 (ja) 1992-02-11 2004-02-23 アラーガン、インコーポレイテッド レチノイド様生物学的活性を有するヘテロアリール置換フェニルエテニル化合物
US5420145A (en) * 1993-03-22 1995-05-30 Koichi Shudo Carboxylic acid derivative
US5324840A (en) 1992-06-11 1994-06-28 Allergan, Inc. Method of treatment with compounds having retinoid-like activity and reduced skin toxicity and lacking teratogenic effects
JPH0672866A (ja) * 1992-07-02 1994-03-15 Chugoku Igakuka Gakuin Yakubutsu Kenkyusho 分化誘導剤
US5288147A (en) * 1992-11-09 1994-02-22 Ta Instruments, Inc. Thermopile differential thermal analysis sensor
US5455265A (en) 1993-02-11 1995-10-03 Allergan, Inc. Method of treatment with compounds having selective agonist-like activity on RXR retinoid receptors
US5399586A (en) 1993-03-11 1995-03-21 Allergan, Inc. Treatment of mammals afflicted with tumors with compounds having RXR retinoid receptor agonist activity
EP0619116A3 (en) * 1993-04-05 1994-11-23 Hoechst Japan Use of synthetic retinoids for osteopathy.
US5344959A (en) 1993-05-18 1994-09-06 Allergan, Inc. Tetrahydronaphthyl and cyclopropyl substituted 1,3-butadienes having retinoid-like activity
US5475022A (en) 1993-10-18 1995-12-12 Allergan, Inc. Phenyl or heteroaryl and tetrahydronaphthyl substituted diene compounds having retinoid like biological activity
WO1995017889A1 (fr) * 1993-12-29 1995-07-06 Kowa Tekuno Sachi Co., Ltd. Composition therapeutique utile pour traiter l'hyperparathyroidie d'un patient en dialyse artificielle
US5470999A (en) 1993-12-30 1995-11-28 Allergan, Inc. Cyclohexene and bicyclic aromatic substituted ethyne compounds having retinoid-like biological activity
US5451605A (en) 1993-12-30 1995-09-19 Allergan, Inc. 1,2-epoxycyclohexanyl and bicyclic aromatic substituted ethyne compounds having retinoid-like biological activity
US5426118A (en) 1993-12-30 1995-06-20 Allergan, Inc. [4-(1,2-epoxycyclohexanyl)but-3-en-1-ynyl]aromatic and heteroaromatic acids and derivatives having retinoid-like biological activity
CA2138000A1 (en) 1994-01-03 1995-07-04 John E. Starrett, Jr. Retinoid-like compounds
US5498755A (en) 1994-08-23 1996-03-12 Chandraratna; Roshantha A. Disubstituted aryl and heteroaryl imines having retinoid-like biological activity
US5489584A (en) 1994-12-29 1996-02-06 Allergan, Inc. Acetylenes disubstituted with a 5-amino or substituted 5-amino substituted tetrahydronaphthyl group and with an aryl or heteroaryl group having retinoid-like biological activity
US5498795A (en) 1994-12-29 1996-03-12 Allergan, Inc. Acetylenes disubstituted with hydroxyaryl and aryl or heteroaryl groups having retinoid-like biological activity
DK0768084T3 (da) * 1995-04-10 2002-10-14 Taiho Pharmaceutical Co Ltd Kræftmetastaseinhibitor
FR2733564B1 (fr) * 1995-04-27 1997-06-20 Peugeot Agencement d'amortissement par laminage d'un fluide et systeme de suspension, notamment de vehicule automobile, equipe d'un tel agencement d'amortissement
US5779363A (en) * 1995-09-27 1998-07-14 The Johns Hopkins University Capillary calorimetric cell and method of manufacturing same
US5965606A (en) * 1995-12-29 1999-10-12 Allergan Sales, Inc. Methods of treatment with compounds having RAR.sub.α receptor specific or selective activity
US5813763A (en) * 1996-10-11 1998-09-29 Microcal Incorporated Ultrasensitive differential microcalorimeter
WO1998020314A2 (en) * 1996-11-01 1998-05-14 Ta Instruments, Inc. Differential scanning calorimeter
US6079873A (en) * 1997-10-20 2000-06-27 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Commerce Micron-scale differential scanning calorimeter on a chip
JPH11160226A (ja) * 1997-12-01 1999-06-18 Mitsubishi Chemical Corp 腐蝕センサーの作成方法
JP3137605B2 (ja) * 1998-07-14 2001-02-26 セイコーインスツルメンツ株式会社 熱流束型示差走査熱量計

Also Published As

Publication number Publication date
US6610744B2 (en) 2003-08-26
BR9612318A (pt) 1999-12-28
RU2191009C2 (ru) 2002-10-20
US20020077360A1 (en) 2002-06-20
HUP0001643A3 (en) 2003-01-28
US20020085615A1 (en) 2002-07-04
AU710483B2 (en) 1999-09-23
WO1997024116A3 (en) 1997-11-13
PL327627A1 (en) 1998-12-21
JP2000502707A (ja) 2000-03-07
MX9805282A (es) 1998-10-31
US5965606A (en) 1999-10-12
KR19990076814A (ko) 1999-10-15
CA2241758A1 (en) 1997-07-10
EP0869782A2 (en) 1998-10-14
IL125121A0 (en) 1999-01-26
US6508585B2 (en) 2003-01-21
HUP0001643A2 (hu) 2001-05-28
AU1345097A (en) 1997-07-28
WO1997024116A2 (en) 1997-07-10
US6534544B1 (en) 2003-03-18
NZ326155A (en) 2000-08-25
CN1211180A (zh) 1999-03-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ206998A3 (cs) Použití retinoidních sloučenin s RAR alfa receptorovou specifickou nebo selektivní aktivitou
JP4112003B2 (ja) レチノイド様生物学的活性を有する、テトラヒドロナフタレン、クロマン、チオクロマンおよび１，２，３，４―テトラヒドロキノリンカルボン酸のアリールまたはヘテロアリールアミド
US6245786B1 (en) Substituted aryl or heteroarylamides having retinoid-like biological activity
US6005007A (en) Retinoids, methods for their production and use

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic