CZ20031619A3

CZ20031619A3 - Deriváty 4-(bifenylkarbonylamino)piperidinu jako inhibitory MTP

Info

Publication number: CZ20031619A3
Application number: CZ20031619A
Authority: CZ
Inventors: Alyx-Caroline Guevel; Didier Festal; Francois Collonges; Daniel Guerrier; Olivier Chevreuil
Original assignee: Merck Patent Gmbh
Priority date: 2000-11-23
Filing date: 2001-10-25
Publication date: 2003-09-17
Also published as: CA2429326A1; RU2003117458A; PE20020595A1; NO20032315L; AU2002221745A1; IL155986A0; BR0115520A; WO2002042291A1; JP2004514676A; AR031499A1; PL365939A1; FR2816940A1; NO20032315D0; CN1476445A; HUP0400819A2; EP1335912A1; MXPA03004540A; US20040034028A1; SK7362003A3; KR20030060954A

Description

Oblast techniky

Vynález se týká derivátů 4-(bifenylkarbonylamino)piperidinu jako inhibitorů MTP, farmaceutických prostředků, které tyto deriváty obsahují a jejich použití v medicíně.

Dosavadní stav techniky

Mikrosomální triglyceridový transferový protein CMTP) je transferový protein umístěný v retikulu hepatocytů a enterocytů, který katalýzuje sestavu biomolekul, které transportují triglyceridy, apo Β 1ipoproteiny.

Označení apo B znamená apoprotein 48 vnitřností a apoprotein 100 jater.

Mutace v MTP nebo v B apoproteinu se projevují u lidí velmi nízkou hladinou nebo dokonce nepřítomností apo B lipoproteinů. Lipoproteiny, obsahující apo B (chylomikrony, lipoproteiny velmi nízké hustoty - Věry Lov Density Lipoproteins) a jejich metabolická rezidua (chylomicronové zbytky, Low Density Lipoproteins) se považují za hlavní rizikový faktor ve vývoji aterosklerózy, hlavní příčinu úmrtí v průmyslových zemích. Pozoruje se u lidí, kteří jsou heterozygotní pro tyto mutace, hladiny snížené v průměru na polovinu jsou spojeny s nízkým kardiovaskulárním rizikem (C.J. Glueck, P.S. Gartside, M.J., Mellies P.M., Steiner, Trans, ftssoc. ftm. Physicians 90, str. 184, 1977). To naznačuje, že modulace sekrecí triglyceridem bohatých lipoproteinů pomocí antagonistů MTP a/nebo sekrecí apo B, by mohla být užitečná při léčení aterosklerózy a siřeji pathologií vyznačujících se nárůstem apo B lipopro0 0

0 9

0 9 0 teinů.

Molekuly, které inhibují MTP a/nebo sekreci apo B, by tudíž mohly být užitečné pro léčení hypertriglyceridaemií, hypercholesterolaemií a dyslipidaemií spojených s diabetem a také pro prevenci a léčení obezity.

Inhibitory MTP již byly v oboru popsány. Z nich zaslouží zmínku deriváty piperidinu popsané v kanadském patentovém spise číslo 2 091102 a také sloučeniny popsané v evropském patentovém spise číslo EP 643 057 CBRISTOL-MEYERS SQUIBB), které odpovídají jedné z následujících struktur:

A R3

__R1

B R5

X

R⁶

Popisují se sloučeniny obecného vzorce B, kde zvláště znamena

R¹ skupinu alkylovou, alkenylovou, alkinylovou, arylovou, heteroarylovou, arylaiky1ovou Ckde a1kýlový podíl obsahuje alespoň dva atomy uhlíku), diarylalkylovou, arylalkenylovou, diarylalkenylovou, arylalkinylovou, diarylalkinylovou, diarylalkylarylovou, heteroarylalkylovou (kde alkylový podíl obsahuje alespoň dva atomy uhlíku), cykloalkylo3 • · • · · · • · · · • · · · · vou nebo cykloalkylalkylovou (kde alkylový podíl obsahuje alespoň dva atomy uhlíku), přičemž je každá z těchto skupin popříadě substituována, nebo R³· znamená skupinu obecného vzorce

nebo znamená R³ skupinu obecného vzorce -(CH₂)_p-/\ kde znamená ρ 1 až 8, R³⁷ a R¹⁸ vždy na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu alkylovou, alkenylovou, arylovou, arylaikylovou, heteroarylovou, heteroarylaikylovou, cykloalkylovou nebo cykloalkylaikylovou, přičemž alespoň jeden R³⁷ a R³⁸ má jiný význam než atom vodíku, nebo R³ znamená skupinu obecného vzorce □20

19—< „ >321 kde znamená

R³⁹ skupinu arylovou nebo heteroarylovou,

R²° skupinu arylovou nebo heteroarylovou a

R²³ atom vodíku, skupinu alkylovou, arylovou, alkylarylovou, arylaikylovou, aryloxyskupinu, arylalkoxyskupinu, skupinu heteroarylovou, heteroarylaikylovou, heteroaryl alkoxyskupinu, cykloalkylovou, cykloalkylalkylovou nebo cykloalkylalkoxyskupinu,

R⁵ skupinu alkylovou obsahující alespoň dva atomy unlfku, alkenylovou, a1kinylovou, arylovou, heteroary1ovou, arylaiky lovou, heteroarylaikylovou, cykloalkylovou, cykloalkyl• *

alkylovou, po1ycyk1óa1kylovou, polycykloalkylaikylovou, cykloalkenylovou, cykloalkenylaikylovou, polycykloalkenylovou, polycykloalkenylaikylovou nebo heteroarylkarbonylovou, přičemž všechny substituenty R⁵ a R⁶ jsou popřípadě substituovány a pokud znamená R⁵ skupinu methylovou, neznamená R⁶ atom vodíku a pokud znamená R⁵ skupinu fenylovou, obsahuje fenylovy cyklus s výhodou hydrofobní substituent, jako je skupina alkylová, helogenalkylová, ax”y lová, aryloxyskupina nebo skupina arylalkylová a R⁶ znamená atom vodíku nebo skupinu alkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkenylovou s 1 až 4 atomy uhlíku.

Definice vymezená v evropském patentovém spise číslo EP 643057 zahrnuje množinu sloučenin, jejichž aktivita není doložena a zůstává sporná.

Ve skutečnosti podle většiny příkladů znamená R¹ jeden nebo dva karbocyklické arylové cykly a znamená například popřípadě substituovanou fenylovou skupinu; popřípadě substituovanou fenylaikylovou skupinu; alkylovou skupinu; 3,3-bis<fenyl)propylovou skupinu; 5,5-bisCfenyl)-2-pentenylovou skupinu; nebo 5,5-bis(fenylpěntylovou skupinu. Pouze několik příkladů objasňuje substituenty R¹ ve významu heterocyklické skupiny. Avšak žádné příklady nedokládají sloučeniny jako podle vynálezu.

Shora uvedený obecný vzorec B nezahrnuje sloučeniny, ve kterých R¹ znamená skupinu arylmethylovou nebo heteroarylmethylovou. Při výzkumu týkajících se inhibice MTP se však zjistila neúčinnost sloučeniny obecného vzorce

• ·· ·

kde znamená R¹ skupinu 4-imidazolylmethylovou, 2-indolyImethylovou, 3-imdolylmethylovou, 2-benzofurylmethylovou, 2-benzothienylmethylovou nebo vzorce

Naproti tomu se podle vynálezu s překvapením zjistilo, že rodina sloučenin, které jsou velmi podobné těmto neaktivním sloučeninám, vykazuje obzvláště účinnou inhibici MTP a také vynikající inhibici sekrece B apoproteinů (apo B).

Ve srovnání se sloučeninami, které vyvinula společnost BRISTOL-ME¥ERS SQUIBB, jsou sloučeniny podle vynálezu také charakterizovány trvalostí působení, což podporuje jejich potenciální výhodu se zřetelem na mechanizmus toxicity Chepatická steatóza).

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu jsou zvláště sloučeniny obecného vzorce I

—CH₂—Het (I) kde znamená

Z skupinu bifenylovou popřípadě substituovanou v poloze 2', 3' , 4', .5* a 6' jedním nebo několika substituenty ze souboru zahrnujícího skupinu trihalogenmethýlovou a triha1ogenmethoxyskup i nu,

Het skupinu chinolylovou, chinoxalylovou nebo pyridylovou popřípadě substituovanou jedním nebo několika substituenty ze souboru zahrnujícího atom halogenu, kyanoskupinu, nit- 6 • · • 44 roskupinu, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, arylovou se 6 až 12 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu hydroxylovou, thioalkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, karboxylovou a a1koxykarbony1ovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v a1koxypodí1u, a jejich farmaceuticky přijatelné soli, hydráty, solváty a stereo i somery.

Shora uvedených sloučenin se vynález zvláště týká.

Farmaceuticky přijatelnými solemi se míní soli s kyselinami minerálními nebo organickými, jako jsou hydrochlorid, hydrobroraid, sulfát, hydrogensulfát, dihydrogenfosfát, citrát, maleát, fumarát, 2-naftalensulfonát a para-toluensulfonát.

Soli, které vhodně usnadňují separaci nebo krystalizací sloučenin obecného vzore I, jako soli kyseliny pikrové, štavelové nebo opticky aktivních kyselin, například kyseliny vinné, dibenzoylvinné, mandlové nebo kafrsulfonové, jsou rovněž nové a spadají do rozsahu vynálezu jakožto meziprodukty sloučenin podle vynálezu.

Hydráty jsou míněny například hemihydráty, monohydráty nebo dihydráty, solváty jsou míněny například adiční sloučeniny s alkoholem například s methanolem nebo s ethanolem.

Výrazem alkyl se zde vždy míní lineární nebo rozvětvená uhlovodíková skupina obsahující s výhodou 1 až 6 atomů uhlíku a výhodněji 1 až 4 atomy uhlíku. Příkladně se uvádějí zvláště skupina methylová, ethylová, propylová, isopropylová, butylová, terc-butylová, isobutylová, pentylová a hexylová skupina.

Výrazem alkoxy se zde vždy míní alkylová skupina, shora definovaná, vázaná prostřednictvím atomu kyslíku. Příkladně se uvádějí zvláště methoxyskupina, ethoxyskupina, isopropyloxyskupina, butoxyskupina a hexyloxyskupina.

Výrazem halogen se zde vždy míní atom bromu, chloru, jodu nebo fluoru, přičemž je výhodným atom fluoru.

Výrazem aryl se zde vždy míní monocyklická nebo polycyklická aromatická uhlovídková skupina obsahující 6 až 18, s výhodou 6 až 10 atomů uhlíku. Podle příkladů je to zvláště skupina fenylová.

S výhodou znamená Z skupinu 4’-trifluormethyl-2-bifenylΟνου nebo 4’-trifluormethoxy-2-bifenylovou.

Jakožto výhodné významy skupiny Het se uvádějí skupina 2-pyridylová, 3-pyridylová. 2-chinolylová, 2-chinoxalylová a 4-chinolylová skupina, přičemž je pyridylový, chinolylový a chinoxalylový cyklus popřípadě substituovaný.

S výhodou pokud znamená Z skupinu 2-bifenylovou, znamená Het skupinu 2-chinolylovou nebo 6-fluor-2-ehinolylovou, přičemž právě tyto dva významy jsou výrazně výhodné.

Podobně pokud Z znamená skupinu 4'-trifluormethoxy-2-bifenylovou, znamená Het s výhodou popřípadě substituovanou skupinu 3-pyridylovou, popřípadě substituovanou skupinu 2-chinolylovou, popřípadě substituovanou skupinu 4-chinolylovou nebo skupinu 2-pyridylovou substituovanou alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, zvláště skupinou methylovou.

Kromě toho jestliže znamená Het skupinu pyridylovou, je tato pyridylová skupina s výhodou popřípadě substituovaná jedním nebo několika substituenty ze souboru zahrnujícího skupinu methylovou, atom halogenu a methoxyskupinu.

·· 9994

Následující sloučeniny obecného vzorce I jsou obzvláště výhodnél-(3-pyrtdylmethy11-4-t(4 -trifluormethyl-2-bifenylIkarbonylaittino]píperidin (sloučenina A-ll, l-(3-pyridylmethy1)-4-[(4 -trifluormethyl-2-bifenylIkarbonylamino]piperidinfumarát (sloučenina A-21, l-(3-pyridylmethyl1-4-t(4 -trifluormethyl-2-bifenylIkarbonylamino]piperidinmaleát (sloučenina A-31, l-(3-pyridylmethyl1-4-t(4 -trifluormethyl-2-bifenylIkarbonylamino]piperidinhydrochlorid (sloučenina A-41.

l-[(6-methy1-2-pyridyllmethyl]-4-[(4 -trifluormethyl-2-bifeny11karbonylamino3piperidin (sloučenina A-51, l-(2-pyridylmethyl1-4-t(4 -trifluorraethyl-2-bifenyllkarbonylamino]piperidin (sloučenina Α-61»

1-t(2-methyl-3-pyridyllmethyl1-4-t(4 -trifluormethyl-2-bifeny11karbonylamino]piperidin (sloučenina A-71, l-(2-chinolylmethyl1-4-t(4 -trifluormethyl-2-bifenylIkarbonylamino]piperidin (sloučenina A-81, l-(4-chinolylmethyl1-4-t(4 -trifluormethyl-2-bifenylIkarbonylamino]piperidin (sloučenina A-91,

1-t(6-methoxy-2-chinoly1lmethyl]-4-t(4 -trifluormethyl-2-bifenyl1karbonylamino]piperidin (sloučenina Α-101»

1-t(6-fluoiO-2-chinoly1lmethyl]-4-t(4 -trifluormethyl-2-bifenyl1karbonylamino]piperidin (sloučenina A-lll, l-C3-pyridylmethyl5-4-t(4 -trifluormethoxy-2-bifenylIkarbonylamino]piperidin (sloučenina B-ll,

1-t (6-f luoro-2-chinolyl lmethyl ] -4-[ (2-bif enyl 1karbonylamino3 piperidin (sloučenina B-21,

1-t(6-fluoro-2-chinoly1lmethyl]-4-t(4 -trifluormethyl-2-bifenylIkarbonylamino]piperidinfumarát (sloučenina A-121,

1-t(6-fluoro-2-chinoly1lmethyl1-4-t(4 -trifluormethyl-2-bifeny11karbonylamino]piperidinmaleát (sloučenina A-131,

1-t(6-fluoro-2-chinolyllmethyl]-4-t(4 -trifluormethyl-2-bifenyl1karbonylamino]piperidinhydrochlorid (sloučenina A-141, φφ « φ φ · φ φ • φ φ φ φ * φφφ* φ φ · φ φ • φ φ φ φφ φφ φ

t « φ φ φφ φφφ φ φ · φ « φ φφ «·

1-(2-ch i nolylmethy 1)-4-1(4 - tr i f 1 uormethy 1 -2-b i f eny 1) karbony 1 amino]piperidlnhydrochlorid (sloučenina A-15),

1-1(4-chinolyl)methyl]-4-1(4 -trifluormethyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidlnhydrochlorid (sloučenina A-16),

1-1(6-fluoro-2-chinolyl)methyl]-4-1(4 -trifluonmethoxy-2-bifeny1)karbonylamino]piperidin (sloučenina B-3),

1-1(6-methoxy-2-chinoly1)methyl]-4-1(4 -trifluormethoy-2-bifeny1)karbonylamino]piperidin (sloučenina B-4),

1-1(4-chinolyl)methyl]-4-1(4 -trifluormethoxy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidin (sloučenina B-5),

1-1(2-chinoxalyl)methyl]-4-1(4 -trifluormethyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidin (sloučenina A-17),

1-1(2-chinolyl)methyl]-4-1(2-bifenyl)karbonylamino]piperidin (sloučenina B-6),

1-1(6-methy1-2-pyridyl)methyl]-4-1(2-bifenyl)karbonylamino]piperidin (sloučenina B-7),

1-1(2-chinolyl)methyl]-4-1(4 -trifluormethoxy-2-bifeny1)karbonylamino]piperidin (sloučenina B-8),

1-1(2-methyl-3-pyridy1)methyl]-4-1(4 -trifluormethoxy-2-bifenyl)karbonylamino!piperidin (sloučenina B-9),

1-1(6-methy1-2-pyridyl)methyl]-4-1(4 -trifluormethoxy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidin (sloučenina B-10), nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, hydráty, solváty nebo stereoisomery.

Sloučeniny podle vynálezu se mohou snadno připravovat jedním z následujících způsobů:

Způsob A

První způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I spočívá podle vynálezu v tom, že se nechává reagovat amin obecného vzorce II

I · · · · · · • · · · · · • · · · · * · · » · · · · · ·

Η· >Ν—\l~CH₂—Het (II j kde Het má význam uvedený u obecného vzorce I, s karboxylovou kyselinou obecného vzorce III

Z - CO· - OH (III) kde Z má význam uvedený u obecného vzorce I nebo s aktivovaným derivátem karboxylové kyseliny obecného vzorce III, takže dojde ke kopulaci aminu obecného vzorce II s karboxylovou kyselinou obecného vzorce III nebo s jejím derivátem.

Výrazem kopulace*' se zde míní vytváření odpovídající amidové vazby.

Kopulace se provádí za obdobných podmínek, jako je popsáno v literatuře pro syntézu peptidů.

Aktivovaným derivátem karboxylové kyseliny obecného vzorce III je sloučenina, která má místo karboxylové skupiny -COOH reaktivnější skupinu například -CO-T, kde znamená T atom halogenu (a zvláště atom chloruj, skupinu azidovou, imidazolidovou, p-nitrofenoxyskupinu, skupinu 1-benzotriazolovou, N-O-sukcinimidovou, acyloxyskupinu (například pivaloyloxyskupinu), alkoxykarbonyloxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxypod í1u, d i a1ky1-0—urei dos kup inu nebo d i cyk1oa1ky1-O-urei doskupinu.

Pokud se používá sloučenin obecného vzorce III ve formě své volné karboxylové kyseliny, provádí se reakce v přítomnosti kopulačního činidla, například karbodiimidu, popřípadě v přítomnosti aktivačního činidla například hydroxybenzotriazolu nebo hydroxysukcinimidu11

Jakožto příkladná kopulační činidla se uvádějí dicykloalky1karbodiiroidy, dialkylkarbodiimidy a karbodiimidy, které jsou rouzpustné ve vodném prostředí a zvláště dicyklohexylkarbodi imid, diisopropylkarbodiimid a <3-dimethylaminopropy1)-3-ethylkarbodi imid.

Výhodnými jsou reakční podmínky, které zahrnují použití ekvimolárních množství sloučenin, které reagují v inertních rozpouštědlech.

Jakožto příklady inertních rozpouštědel se uvádějí zvláště popřípadě halogenované alifatické nebo aromatické uhlovodíky, například hexan, heptan, toluen, benzen, xylen, dichlormethan, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen nebo dichlorbenzen.

S výhodou se reakční teplota udržuje v rozmezí teploty okolí <15 až 35 C) až teploty zpětného toku rozpouštědla, o

zvláště reakční teplota v rozmezí 15 až 60 C a ještě lépe o

v rozmezí 20 až 40 C.

Při provádění způsobu v přítomnosti karbodiimidu se toto reakční činidlo může zavádět ve formě soli do reakční směsi a například ve formě hydrochloridu- V takovém případě se doporučuje zavádět zároveň zásadu do reakčního prostředí. Vhodnými zásadami, kterých se může použít, jsou například pyridin, 4-dimethylaminopyridin <4-DMAP), 2,6-di-terc-butylpyridin, 1,8-diazabieyklotS.4.03undee-7-en <DBU), 1,5-diazabicykloC4.3.03 non-5-en <DBN) a 1,4-diazabicyklo[2.2.23 oktan CDABCO) nebo tr i ethy1end i am i n.

Podle zvláště výhodného způsobu provedení vynálezu se amin obecného vzorce II nechává reagovat s kyselinou obecného vzorce III v přítomnosti <3-dimethy1aminopropy1)-3-ethylkarbodii e» midu v dichlormethanu za teploty okolí <15 až 35 O.

·· ····· ·· ·

Pracovníci v oboru jsou schopni snadno připravit aminy obecného vzorce II o sobě známými způsoby.

Aminy obecného vzorce II se mohou například získat prováděním reakcí podle schéma 1

Schéma 1

Het—COH + . CF₃—CO

IV >-NH -O

U redukční činidlo cf₃CO—NH—( N—

CH₂—Het dz^1-' nh₂ —CH₂—Het

H

V prvním stupni se nechává regovat 2,2,2-trifluor-N-[4-piperidy11acetamid s aldehydem obecného vzorce IV

Het - COH CIV) kde Het má význam uvedený u obecného vzorce I, v inertním rozpouštědle s výhodou v halogenovaném alifatickém nebo aromatickém uhlovodíku, jak shora uvedeno Cs výhodou v halogenovaném alifatickém uhlovodíku například v dichlorethanu), v přítomnosti redukčního činidla, kterého se může používat pro redukční aminaci. Vhodnými jsou redukční činidla, která selektivně redukují iminoskupiny v přítomnosti alkehydové a amidové skupiny.

• · · · · · * • · · · · · · ·· · · ···· • · · · · ·· ··

Takovými redukčními činidly jsou s výhodou triacyloxyborhydrid alkalického kovu, zvláště triacyloxyborhydrid alkalického kovu například triacyloxyborhydrid sodný.

Jinými redukčními činidly, kterých je možno použít jsou kyanoborhydrid sodný nebo vodík.

S výhodou se reakce provádí při teplotě v rozmezí O až 60 C, výhodněji při teplotě v rozmezí 10 až 40 C například e

při teplotě okolí (15 až 35 C).

Sloučeniny obecného vzorce VI se mohou získat reakcí sloučenin obecného vzorce V

se sloučeninou obecného vzorce VIII

Het - CH₂ - Hal (VIII) kde Het má shora uvedený význam a Hal znamená atom halogenu, například chloru, bromu nebo jodu, v přítomnosti minerální zásady nebo organické zásady.

Povaha zásady a reakční podmínky se mohou snadno stanovit pracovníky v oboru a odpovídají níže uvedeným podmnínkách v případě způsobu C pro reakci sloučeniny obecného vzorce VIII se sloučeninou obecného vzorce VII.

Pokud je atom halogenu ve sloučenině obecného vzorce VIII jiný než atom jodu, může být výhodné přidávat do reakčního prostředí jodid alkalického kovu (například jodid draselný) k urychlení reakce.

Ve druhém stupni se amidová skupina sloučeniny obecného • 9 · ·· ·· ·· · • · · · ··· · a ·· · · 9 9 9 · 9 9 vzorce VI převádí na odpovídající aminoskupinu. K tomuto účelu mohou pracovníci v oboru použít jakýkoliv známý způsob. Mohou zvláště použít redukční nebo hydrolyzační reakce.

Amidová skupina sloučeniny obecného vzorce VI se zbavuje elektronů zvláště elektron stahující trifluormethylovou skupinou. Tak se může snižovat působení poměrně slabého redukčního činidla, například borhydridu alkalického kovu (například natři umbor hydří duj nebo 1ithiumaluminiumhdridu nebo systému BH₃ /BF₃ Et₂ O Reakce se obecně provádí v přítomnoti inertního rozpouštědla etherového typu, například alkyletherů (a zvláště dlethyletheru nebo diIsopropyletheru), cyklických etherů Cnapříklad tetrahydrofuranu nebo dioxanu), dimethoxyethanu nebo diethy1englýko1d i methy1etheru.

Pokud se použije borhydridu alkalického kovu, může reakční prostředí obsahovat také protické ropzpouštědlo, jako je alkanol a zvláště alkanol s 1 až 6 atomy uhlíku (například methanol, ethanol, propanol, isopropanol, butanol, isobutanol, nebo terc-butanol), ethylenglykol, cyklický alkohol (mapříklad cyk1ohexano1) nebo methylcellosolve.

Podle výhodného provedení vynálezu je žádoucí přidávat alkohol do reakčního prostředí, jako je methanol, ethanol, propanol, isopropanol, butanol, isobutanol, terc-butanol, diethylenglykol nebo cyklohexanol.

Reakční teplota je zpravidla v rozmezí 15 C až teplota zpětného toku použitého rozpouštědla, s výhodou v rozmezí 15

O o až 120 C například v rozmezí 20 až 115 C.

Pracovníci v oboru mohou však také použít hydrolýzu amidoskupiny v zásaditém prostředí působením zásady. Jakožto vhod15 • ·· · · ·* · · ···· • ••fr · · · frfr · • fr · · frfr·· · · ·

né zásady se zvláště uvádějí hydroxid sodný a draselný, zvláště hydroxid sodný.

V takovém případě se hydrolýza s výhodou provádí v polárním protickém prostředí, například v alkoholovém prostředí. Výhodnými rozpouštědly jsou alkanoly s 1 až 4 atomy uhlíku, zvláště methanol a především ethanol.

Rozpouštědlem mflže však být také ether shora uvedený a především dimethoxyethan.

Hydrolýza se s výhodou provádí při teplotě v rozmezí 10 o

až 100 C a volba teploty závisí na síle použité zásady.

V případě hydroxidu sodného nebo draselného je teplota při hydrolýze v rozmezí 15 až 60 C obecně dostatečná, výhodo nější je však teplota v rozmezí 30 až 45 C.

Zpfisob B

Druhý způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I spočívá podle vynálezu v tom, že se nechává reagovat aldehyd obecného vzorce IV

Het - COH CIV) kde Het má význam uvedený u obecného vzorce I, s piperidinem substituovaným v poloze 4 obecného vzorce VII

Z—CO—NH-(. \lH \_f CVII) kde Z má význam uvedený u obecného vzorce I, v přítomnosti redukčního činidla, které je vhodné k redukci iminoskupiny.

Podmínky této reakce jsou stejné, jako jsou popsány v případě reakce aldehydu obecného vzorce IV s píperidinem obecného vzorce V.

Výhodným redukčním činidlem je triacy1oxyborhydrid alkalického kovu, přičemž zvláště výhodným triacyloxyborhydridem alkalického kovu je natriumtriacyloxyborhydrid CNaBHC0Ac>3)Tato reakce se s výhodou provádí v polárním aprotickém rozpouštědle. S výhodou jsou takovým rozpouštědlem Halogeované aromatické nebo alifatické uhlovodíky. Příkladně se při tomto způsobu může použít rozpouštědel ze souboru zahrnujícího halogenbenzen, halogentoluen, halogenxylen, dichlormethan, tetrachlormethan, dichlorethan, nebo dichlormethan. Halogenované alifatické uhlovodíky jsou pro tento účel obzvláště vhodné. To platí především pro dichlorethan.

S výhodou se reakční teplota udržuje v rozmezí teploty O o o až 40 C, především v rozmezí 15 až 35 C.

Pracovníci v oboru snadno připraví sloučeniny obecného vzorce VII z obchodně dostupných sloučenin o sobě známými způsoby.

Zvláště v případě sloučenin obecného vzorce VII, kde znamená Z skupinu 2-bifenylovou nebo 2-bifenylovou substituovanou trifluormethylovou skupinou, mohou pracovníci v oboru využívat podmínek popsaných ve světovém patentovém spise číslo VO 96/26205.

V případě sloučenin obecného vzorce VII, kde znamená Z skupinu 2-bifenylovou substituovanou trifluormethoxyskupinou mohou pracovníci v oboru využívat podnětů vyplývajících z následujícího schéma 2= • 9 · · 9 9 9 . · 9 9 9 99*9 • 99 99 99 99

9· 9 9

Schéma 2

Vila kde znamená Bn skupinu benzylovou a hal atom halogenu.

Skupina 2-bifenylová subst ituovaná trifluormethoxyskupinou, připravená ve stupni (i) reakcí derivátu boru obecného vzorce XI

CF₃O

CXI) se sloučeninou obecného vzorce IX v přítomnosti vhodného katalyzátoru jako palladiaCO) například PdCPPh3)-3 a v přítomnosti, zásady, jako je minerální zásada, například uhličitan alkalického kovu, jako uhličitan sodnýho.

Vhodným rozpouštědlem, kterého se používá, je například směs etheru a protického rozpouštědla.

• ·· ** ·· ·· 4994 • 4 4 4 4 4 4 4 4 9

4 4 4 4 444 4 4 4

4 4 9 9 4 4 9 9 4 9

944 44 4 4 ·· 4 9 44

Vhodnými ethery jsou shora definované ethery (s výhodou dioxan) a dimethoxyethan a jejich směsi.

Jakožto výhodné alkoholy se uvádějí alkanoly s 1 až 6 atomy uhlíku, shora uvedené, například ethanol.

Výhodnými používanými rozpouštědly jaou například směs dimethoxyethanu, dioxanu a ethanolu.

S výhodou se reakční teplota udržuje v rozmezí teploty 40 až 150 C, především v rozmezí 70 až 100 C, například v rozmezí 80 až 90 C.

Ve stupni Ci i) se provádí debenzylace endocyklického atomu dusíku piperidinu. Tato reakce se provádí pro pracovníky v oboru o sobě známým způsobem (například katalytickou hydrogenací) a zvláště za podmínek popsaných ve světovém patentovém spise číslo W0 96/26205.

Sloučeniny obecného vzorce IV jsou obchodními produkty nebo se mohou snadno připravit pracovníky v oboru z obchodně dostupných sloučenin.

Varianta způsobu je založena zvláště na přípravě aldehydu obecného vzorce IV s odpovídajícím esterem obecného vzorce XII

Het - CO -0 - Y (XII) kde znamená Y popřípadě substituovanou uhlovodíkovou skupinu, s výhodou alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku a Het má shora uvedený význam, působením vhodného redukčního činidla. Ester obecného vzorce XII se redukuje v prvním stupni na odpovídající alkohol obecného vzorce XIII

Het - CH2

OH (XIII) kde Het má význam uvedený u obecného vzorce I, přidáním vhodného redukčního činidla. Ve druhém stupni se získaný alkohol obecného vzorce XIII oxidufe působením poměrně slabého oxidačního činidla, například oxidu manganičitého.

Jiným řešením je přímá oxidace odpovídající sloučeniny obecného vzorce XIV

Het - CH₃ (XIV) kde Het má význam uvedený u obecného vzorce I, za získání aldehydu obecného vzorce IV například působením oxidu seleničitého.

Způsob C

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou připravovat reakcí halogenidu obecného vzorce VIII

Het - CH2 - Hal (VIII) kde Het má význam uvedený u obecného vzorce I, a Hal znamená atom halogenu, s piperidinem obecného vzorce VII

Z—CO—NH

I-^IH (VII) kde Z má význam uvedený u obecného vzorce I, v přítomnosti zásady.

Reakce se s výhodou provádí v silně polárním aprotickém rozpouštědle, jako je nitril (například acetonitril nebo isobutyronitri 1) nebo amid (například formámid, dimethylformámid, dimethylacetamid, N-methy1-2-pyrrolidinon nebo hexamethylfosforylamid), přičemž dimethy1formámid je obzvláště výhodným rozpouštěd1em.

• ·· »* *· • ♦ · · · * · ♦ ♦ · · · ··· ·· ···· • · · • « · • · · ·· ·* ··· ·· 9· ««

Při této reakci se uvažuje o použití organické zásady, jako je například pyridin, 4-dimethylaminopyridin, 2,6-di-terc-butylpyridin, 1,8-diazabicykloE5.4.0]undec-7-en CDBU), 1,5-di-azabicyklo[4.3.01non-5-en CDBN) nebo 1,4-diazabicyklo[2.2.2]oktan CDftBCO) nebo triethy1endiamin.

Podle výhodného provedení se používá minerální zásady, jako je například hydroxid sodný, hydroxid draselný, hydrogenuhličitan sodný, uhličitan sodný, hydrogenuhličitan draselný, nebo uhličitan draselný, přičemž uhličitan draselný je zvláště výhodný.

Pokud Hal neznamená atom jodu, je žádoucí přidávat do reakčního prostředí jodid alkalického kovu, například jodid draselný, za účelem katalýzy reakce piperidinu obecného vzorce VII s halogenidem obecného vzorce VIII.

S výhodou se reakční teplota udržuje v rozmezí teploty 50 o o až 120 C, především v rozmezí &□ až 100 C.

Sloučeniny obecného vzorce VIII jsou buď obchodně dostupné nebo je pracovníci v oboru snadno připraví.

Ve sloučenině obecného vzorce VIII znamená Hal s výhodou atom bromu nebo chloru a zvláště atom bromu Pokud je sloučeninou obecného vzorce VITI brómovaný derivát, může se tento derivát připravovat volnou radikálovou bromací působením bromačního činidla za podmínek volných radikálů .

Tyto podmínky zahrnují zvláště přidání do reakčního prostředí iniciátoru volných radikálů, které se mohou aktivovat tepelně nebo fotochemicky ozářením ultrafialovými paprsky.

· 0 · 0 0* · · ····

0 0 · ♦ · * 0 0 0 .00 0 0 000· 0 0 0

040 00 440 0 0

0 · 0 · 0 · 0000 00« 00 00 00 00 04

Jakožto příklady iniciátorů se uvádějí zvláště azosloučeni ny, peroxidy a peroxyestery. Jakožto azosloučeniny se uvádějí příkladně 1,1’ -azobisí isobutyro'nitri 1 nebo ftIBN, l,l’-azobis(sek-pentylnitri 1) a 1,1'-azobisCcyklohexankarbonitri 1).

Jakožto příklady peroxidů se uvádějí benzoylperoxid, acetylperoxid, 1aury1peroxid, kumylperoxid a terc-butylperoxid.

Jakožto příklady peroxyesterů se uvádějí zvláštní terc-butyl peroxyacetát a terc-butylperoxybenzoát.

Jakožto příklady volných radikálových bromačních činidel se uvádějí brom a N-bromsukcinimid (NBS). Pokud se použije jako bromačního činidla NBS, používá se s výhodou polárního aprotického rozpouštědla a ještě výhodněji tetrachlormethanu.

Způsob D

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou také připravovat reakcí halogenidů obecného vzorce XV

kde Hal znamená atom halogenu, s výhodou atom bromu a Het má význam uvedený u obecného vzorce I, s derivátem boru obecného vzorce XI cf₃o.

(OHh (XI) v přítomnosti vhodného katalyzátoru, jako je palladium(O) například Pd(PPh3)4 a v přítomnosti minerální zásady, jako je • *· ·· fr* ·· ···· • «•«••fr frfr · • frfr frfr ··· fr · · frfr ··· «· frfr· · · • · « ···· frfr·· • frfr frfr frfr frfr frfr frfr uhličitan alkalického kovu.

Reakce se provádí za podmínek, které jsou popsány shora pro reakci sloučeniny obecného vzorce IX s derivátem boru obecného vzorce XI podle způsobu B.

Sloučeniny obecného vzorce XV se mohou připravit jednoduše kopulací aminu obecného vzorce II

H₂N—\ —CH₂—Het

Cli) kde Het má význam uvedený u becného vzorce XVI obecného vzorce I, s kyselinou o-

kde Hal znamená atom halogenu vátém.

nebo s jejím aktivovaným deriTento zpfisob se mflže provádět za obdobných podmínek jako shora popsaná kopulace aminu obecného vzorce II s kyselinou obecného vzorce III (způsob A).

Aktivovanými deriváty kyseliny obecného vzorce XVI jsou sloučeniny mající místo karboxylové skupiny -COOH reaktivnější skupinu, například -CO-T, kde T má význam definovaný shora při způsobu A.

Vynález se také týká meziproduktů obecného vzorce II a VI ,H₂—^Het

Cil)

CFj—CO

Η,—Het • φ φφ • · · φ φφφφ • · φφφφ φ φ φ • · · φ φ φ φ* φ φ φ φ φφ φφ φ · φ φ • Φ φφ (VI) kde Het má význam uvedený u obecného vzorce I.

Zásada obecného vzorce I se může převádět s kyselinou na adiční sfil s kyselinou, například reakcí ekvivalentního množství zásady a kyseliny v inertním rozpouštědle, jako je ethanol a následným odpařením rozpouštědla. Vhodnými pro tuto reakci jsou kyseliny, které poskytují fyziologicky přijatelné soli. Jakožto anorganických kyselin se mflže použít například kyseliny sírové, dusičné, halogenovodíkové, například chlorovodíkové nebo bromovodíkové, kyselin fosforečných, jako kyseliny ortofosforečné, kyseliny sulfaminové, dále organických kyselin zvláště alifatických, alicyklických, aralifatických, aromatických nebo heterocyklických monosystných nebo polysytných karboxylových, sulfonových a sírových kyselin, jako jsou například kyselina mravenčí, octová, propionová, pivalová, diethyloctová, malonová, jantarová, pimelová, fumarová, maleinová, mléčná, vinná, jablečná, citrónová, glukonová, askorbová, nikotinová, isoni kotinová, methansulfonová nebo ethansulfonová, ethand i su 1 f onová, 2-hydroxyet. hansu lf onová, benzensu 1 f onová, p-toluensulfonová, naftalenmonosulfonová a nafta1endisulfonová a laurylsírová kyselina. Soli s fyziologicky nepřijatelnými kyselinami, například pikráty, se mohou používat pro izolaci a/nebo čištění sloučenin obecného vzorce I.

Na druhé straně mohou být sloučeniny převáděny na odpovídající kovové soli, zejména soli alkalických kovfl nebo soli kovfl alkalických zemin, nebo na odpovídající amoniové soli použitím zásad (například hydroxidu nebo uhličitanu sodného nebo draselného). Použít se dá přijatelných organických zásad, jako je například ethanolamin.

Vynález se dále týká farmaceutických prostředků obsahují24

*· ·9 • · · • 9 999 • · • ·

cích jednu nebo několik sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu v kombinaci s jedním nebo s několika excipienty.

Tyto sloučeniny se mohou podávat orálně ve formě tablet okamžitě vstřebáváteIných nebo s řízeným vstřebáváním, gelových kapslí nebo granulí, intravenózně ve formě vstřikovatelných roztoků, transdermálně ve formě adhezních transdermálních prostředků nebo lokálně ve formě roztoků, krémů nebo gelů

Pevné prostředky pro orální podání se připravují přidáním účinné látky a plnidla a popřípadě pojidla, rozptylovacího činidla, mazadla, barviva, nebo ochucovacího činidla a tvarováním směsi k získání tablet, povlečených tablet, granulí, prášků nebo kaps1í.

Jakožto příklady plnidei se uvádějí laktóza, kukuřičný škrob, sacharóza, glukóza, sorbitol, krystalická celulóza a οχιό křemičitý, jakožto příklady pojidel se uvádějí polyCvinylalkoho.1), póly (viny lether) , ethy lcelulóza, methylcelulóza, akacia, tragakant, želatina, šelak, hydroxypropylcelulóza, hydroxypropylmethylcelulóza, citrát vápenatý, dextrin a pektin. Jakožto příklady mazadel se uvádějí stearát hořečnatý, mastek, polyethylenglykol, oxid křemičitý a ztužené rostlinné oleje. Jakožto příklady barviv se uvádějí barviva připouštěná pro medicinální produkty. Jakožto příklady ochucovacích činidel se uvádějí kakaový prášek, máta v rostlinné formě, aromatický prášek, máta ve formě oleje, borneol a prášková skořice. Tablety nebo granule se mohou samozřejmě vhodně povlékat například cukrem nebo želatinou.

Vstřikovátelná forma, obsahující jako účinnou látku sloučeninu podle vynálezu, se připravuje popřípadě míšením sloučeniny s regulátorem hodnoty pH, s pufrem, s činidlem suspenzačním, solubi 1 izačním, stabilizačním, upravujícím tonicit-u a/nebo konzervačním a převáděním směsi na formu pro intrave25 •4 ·· ·« 44 ·««»

44444 44 4

4 4 444 444 ·· 444 4 4444

44* «4 44 «4 44 4« nózní, subkutánní nebo intramuskulární vstřikování o sobě známými způsoby. Vstřikovatelná forma se popřípadě může lyo.fi lizovat, o sobě známým způsobem.

Jakožto příklady suspenzačních činidel se uvádějí methylcelulóza, polysorbát 80, hydroxyethylcelulóza, akácia, práškový tragakant, natriumkarboxymethy1celulóza a polyethoxylováný sorb 1 tanmono 1 aurát..

Jakožto příklady solubi1izačních činidel se uvádějí ricinový olej ztužený polyoxyethylenem, polysorbát. 80, nikotinamid, polyethoxylováný sorbitanmono1aurát a ethylester mastných kyselin ricinového oleje.

Jakožto příklady stabilizátorů se uvádějí siřičitan sodný, metasiřičit-an sodný a ether a jakožto příklady činidel konzervačních methy1-p-hydroxybenzoát, ethyl-p-hydroxybenzoát, kyselina sorbová, fenol, kresol a chlorkresol.

Sloučeniny obecného vzorce I a farmaceutické prostředky podle vynálezu jsou užitečné jakožto inhibitory mikrosomálního triglyceridového transferového proteinu CMTP). Mohou se používat k ošetřování hypercholesterolaemie, hypertriglyceridaemie, hyper1ipidaemie, pankreatitidy, hyperglykaemie, obezity, aterosklerózy a dyslipidaemie spojených s diabetem.

Vynález se proto také týká použití sloučenin nebo farmaceutických prostředků podle vynálezu pro přípravu medicinálního produktu, který inhibuje mikrosomální triglyceridový transferový protein.

Sloučeniny podle vynálezu také umožňují inhibici sekrece B apoproteinů Čapo B).

Sloučeniny podle vynálezu také umožňují inhibici sekrece • ·· «· ·· ·· ·««· ·* · · · · · « · · • · · « · ··· · · · φφ · · · φ· φ·φ · · ··· ···· · · <· · ··· »· ·· ·· ·· ··

1ipoproteinů s velmi nízkou hustotou (VLDL). Denonstrace inhibice sekrece VLDL umožňuje doložit aktivitu in vivo sloučenin podle vynálezu.

Aktivita in vivo sloučenin podle vynálezu se může doložit jednoduše na kryscáh Vistar podle následujícího protokolu. Hepatieké VLDL sekrece se měří blokováním odbourávání VLDL s IV injekcí Tritonu (Tyloxapol) v dávce 400 mg/kg po dvou dnech půstu. Hodnocení sekrece VLDL se provádí stanovením akumulace triglyceridů a cholesterolu v krevním oběhu po dobu pěti hodin. Sloučeniny podle vynálezu snižují tuto hepatřekou sekrec i VLDL.

Dva protokoly pro demonstraci inhibice MTP a inhibice sekrece apo B jsou uvedeny v příkladech provedení vynálezu.

Vynález objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení.

Nukleárními magnetickými rezonančními spektry jsou protonová spektra pořizovaná při 300 MHz a za teploty okolí- Chemické posuny se vyjadřují v ppm a v každém případě se týkají signálu deuterovaného rozpouštědla (chloroform při 7,25 ppm nebo dimethylsulfoxid při 2,5 ppm).

Signály se popisují těmito zkratkami: s = singlet, d = dublet, t = triplet, dd = dublet dubletů, dt = dublet tripletů, td = triplet dubletů, m = multiplet.

Hmotová spektra se získají za použití zařízení LC/MS Platform-LC (společnosti Waters/Micromass) v pozitivním elektrosprejovém způsobu s napětím 20 voltů. MS udává hodnoty hmotové spektrometrie. NMR udává hodnoty nukleární magnetické rezonance .

• 0 • 00 • 0 0 · «0« • · · · 0 « 0 0 0 • 0 00

0000

0 · • 00 • 0 ·

0 »0

Příklady provedení vynálezu

Př í prava 1 l-Benzyl-4-[(4 -trifluormethoxy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidin

Roztok 7,86 g <38,2 mmol) 4-trifluormethoxyfenylborité kyseliny ve směsi 15 ml dimethoxyethanu a 40 ml dioxanu se přidá do směsi, kterou tvoří 13,0 g <34,9 mmol) N-<l-benzyl-4-piperidyl)-2-brombenzamidu, 15 ml dimethoxyethanu, 120 ml dioxanu, 5 ml absolutního ethanolu, 30 ml vodného 2M roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 1,04 g Pd<PPh3>4- Výsledná směs se udržuje 6,5 hodiny na teplotě 85 C v prostředí dusíku, nechá se stát při teplotě místnosti <15 hodin), načež se ohřívá dalších pět hodin. Po vychladnutí a přidání 100 ml ethylacetátu a 50 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného se přidá 100 ml vody a 100 ml ethylacetátu. Po oddělení fází usazením se vodná fáze reextrahuje 100 ml ethylacetátu. Spojené organické fáze se promyjí 100 ml nasyceného roztoku chloridu sodného. První vodná fáze se reextrahuje 100 ml dichlormethanu- Spojené organické fáze se vysuší síranem sodným, zflitrují se a zkoncentrují se, čímž se získá světle béžová pevná látka, která se disperguje v diisopropyletheru. Získá se 12,8 g <87 % teorie) špinavě bílé pevné látky.

NMR: <DMS0-d&) S<ppm)=l,23 <2H,m), 1,51 <2H,m),l,91 <2H,m),

2,62 <2H,m), 3,38 <2H,s), 3,56 <lH,m), 7,10 až 7,65 <13H,m),

7,98 <lH,m).

Příprava 2

4-[<4 -Trifluormethoxy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidin

Směs 6,2 g <13,4 mmol) sloučeniny, získané v přípravě 1, ve

· <49 ·· • · • ··« · 4 • 9 · • 9 44 ml methanolu, 30 ml absolutního ethanolu, 16 ml eyklohexenu a 2,1 g 20¾ hydroxidu palladnatého v prostředí dusíku se udržuje na teplotě zpětného toku. Pokud není reakce ukončena po čtyřech hodinách, přidá se dalších 16 ml cyklohexenu a 2,1 g 20¾ hydroxidu palladnatého a směs se zahřívá dalších šest hodin. Po zfiltrování přes cellit a zkoncentrování se získá pevná látka, která se vyjme do isopropyletheru a získá se 3,6 g (72 % teorie) šedo-bílé pevné látky, která odpovídá titulní sloučenině.

NMR: (DMSO-ds) 6(ppm):l,08 (2H,m), 1,48 (2H,m),2,41 (2H,m),

2,82 (2H,m), 3,30 (1H, široké s, zaměněné trifluoroctovou kyselinou), 3,60 (lH,m), 7,33 až 7,60 (8H,m), 8,01 (lH,m).

Příklad 1

Příprava 1-(3-pyridylmethy1)-4-[(4 -trifluormethyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidin (sloučenina fl-1)

Stupen a

2,2,2-Trifluor-N-[1-(3-pyridlmethy1)-4-piperidy11acetamid

Přidá se 31,4 g (0,144 mol) triacetoxyborhydridu sodného v proudu dusíku do roztoku 19,6 (0,1 mol) 2,2,2-trifluor-N-[4-piperidyllacetamidu a 10,9 g (0,1 mol) 3-formylpyridinu ve 470 ml dichlormethanu a směs se míchá 3 dny při teplotě místnosti. Výsledná směs se zpracuje nasyceným roztokem hydrogenuhl ičitanu sodného a fáze se oddělí usazením. Organická fáze se promyje 2x nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší se síranem sodným a odpaří se. Získá se pevná látka, která se disperguje v diisopropy1etheru, čímž se získá 19,1 g (67 ¾ teorie) bílé pevné látky odpovídající titulní sloučenině o teplotě tání 1287 C.

NMR: (CDCI3) 6(ppm):l,55 (2H,m), 1,96 (2H,m),2,15 (2H,m),

2,82 (2H,m), 3,50 (2H,s), 3,85 (lH,m), 6,39 (1H,široké s),

• φ φ • φφφφ • · φφφ • · φ φ φ φ φ φ · · φφ φφ

ΦΦ ···· φ φ φ φφφ

7,24 (lH,m), 7,62 (lH,m), 8,38 až 8,63 (2H,m).

Stupeň b

1-(3-Pyr i dylmethy1>-4-am i nop i per i d i n

20,8 g (0,53 mol) borhydridu sodného se přidá do roztoku 19 g (0,066 mol) 2,2,2-trifluor-N-[l-(3-pyridylmethyl)-4-piperidyl]aeetamidu v 640 ml dioxanu a 64 ml absolutního ethanolu a výsledná směs se udržuje v prostředí dusíku 10,5 hodiny na teplotě zpětného toku. Po zkoncentrování a vyjmutí zbytku do vody, se směs extrahuje dichlormethanem- Organická fáze se vysuší síranem sodným a zkoncentruje se, čímž se získá 11,2 g (88 % teorie) oleje, kterého se použije bez čištění v dalším stupni.

NMR: (CDCI3) 6(ppm):l,29 (2H,m), 1,70 (2H,m), 1,96 (2H,m), 2,00 až 2,45 (2H,široké s), 2,58 (lH,m), 2,71 (2H,m), 3,40 (2H,s), 7,19 (lH,ra), 7,57 (lH,m), 8,30 až 8,60 (2H,m).

Stupeň c l-(3-pyridylmethy1)-4-[(4 -trifluormethyl-2-bifenyl)karbony1am i no]p i per i d i n

Roztok 2,7 g (0,01 mol) 2-karboxy-4 -trifluormethylbifenylové kyseliny ve 30 ml dichlormethanu se přidá do roztoku 2 g (0,00108 mol) sloučeniny získané ve stupni b), 1,23 g (0,01 mol) 4-DMAP a 1,99 g (0,00102 mol) (3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidhydrochloridu v 50 ml dichlormethanu. Tato směs se míchá 120 hodin v prostředí dusíku při teplotě okolí. Po zředění dichlormethanem a promytí vodou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou se organická fáze vysuší síranem sodným a zkoncentruje se, čímž se získá olej, který se čistí chromatografií na oxidu křemičitém (eluováni směsí 4,5/ 4,5/1 ethylacetát/dichlormethan/methanol. Získá se 2,85 (65 %

teorie) bílé pevné látky.

Příklad 2

Příprava l-(2-ehinolylmethy1)-4-[(4 -trifluormethy1-2-hifenyl) karbonylamino]piperidinu (sloučenina A-8)

V proudu dusíku se přidá 0,78 g (0,0036 mol) triacetoxyborhydridu sodného do roztoku 0,87 g (0,0025 mol) 4-[(4 -trifluormethyl-2-bifenyl)karhonylamino]piperidinu a 0,405 g (0,0025 mol) 2-formylchinolinu v 15 ml 1,2-dichlorethanu a směs se míchá 18 hodin při teplotě okolí. Výsledná směs se zředí dichlormethanem a přidá se 40 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného- Organická fáze se vysuší síranem sodným, odpaří se k suchu a zbytek se vyjme do diisopropyletheru, čímž se získá izolováním sraženiny 1 g titulní sloučeniny (v podobě bílé pevné látky) ve výtěžku 83%. Teplota tání je 210 °C.

Příklad 3

Příprava l-(6-fluor-2-chinolylmethy1)-4-((4 -trifluormethyl2-hifenyl)karbonylamino]piperidinu (sloučenina A-ll)

Směs 0,5 g (0,00143 mol) 4-((4 -trifluor-2-bifenyl)karbonylamino3piperidinu, 0,39 g (0,00286 mol) uhličitanu draselného a 0,1 g jodidu draselného ve 25 ml DMF se udržuje 30 minut na teplotě 80 C.

Po vychladnutí na teplotu okolí se přidá 0,00214 mol 2-brommethy1-6-fluorchinolinu. Směs se udržuje 8 hodin na teplotě 80 C. Po zkoncentrování, promytí vodou a extrakci dichlormethanem se organická fáze vysuší síranem sodným. Po zfiltrování a koncentraci se získá titulní sloučenina v surové formě a vyjme se do diisopropyletheru k vyčištění. Získá se

····· ·· ·· · · ··

0,16 g titulní sloučeniny.

Sloučeniny v tabulkách I á II se připraví provedením některého způsobu popsaného v předchozích příkladech ze vhodných výchozích reakčnxch činidel.

V tabulce I je ve sloupci I je číslo sloučeniny, ve sloupci II význam symbolu Het, ve sloupci III teplota tání a/ nebo MS a ve sloupci IV hodnoty NMR δ Cppm). V tabulce II je ve sloupci I je číslo sloučeniny, ve sloupci II význam symbolu Het, ve sloupci III význam symbolu T¹, ve sloupci IV teplota tání a ve sloupci V hodnoty NMR δ Cppm).

Tabulka I

N-CH₂—-Het

I	II	III	IV
A-1 LR 19370	3-pyridyl	160’C MS; M + 1 = 440	(DMSO-de) 1,32 (2H, m); 1,58 (2H, m); 1.99 (2H, m); 2,61 (2H, m); 3,43 (2H, s); 3.58 (1H, m); 7.27 (2H, m); 7,437,60 (6H, m); 7,75 (2H, d, J = 8,19 Hz); 8.15 (1H, m); 8,49 (2H, m)
A-2 LR 20826 (fumarate)	3-pyridyl		(DMSO-d_e) 1.28 (2H, m); 1 58 (2H, m); 2,07 (2H, m); 2.65 (2H, m); 3,48 (2H, s); 3.60 (1H, m); 6,62 (2H, s); 7,307,60 (7H, m); 7,60-7,80 (3H, m); 8,058,30 (1H, m); 8,30-8,60 (2H, m)
A-3 LR 20825	3-pyridyl		(DMSO-de) 1,49 (2H, m); 1,81 (2H, m); 2,70-3,75 (4H, m); 3,83 (1H, m); 4,18

-.

(maleát')			(2H, s); 6,05 (2H, s); 7,35-7,65 (7H, m); 7,65-7,95 (3H, m); 8,25-8,50 (1H, m); 8,50-8,80 (2H, m)
A-4 LR 20831 (hydrochloridi)	3-pyridyl		(DMSO-de) 1.60-1.95 (4H, m); 2,823,25 (2H, m); 3.25-3.50 (2H, m); 3.81 (1H, m); 4,42 (2H, s); 7,35-7,65 (feH. m); 7,65-8,00 (3H, m); 8,40-8,70 (2H. m); 8,80-9,15 (2H, m); 11,38 (1H, 2s, brc .)
A-5 LR 20294	6-methyl-2- pyridyl	170’C	(DMSO-de) 1,30 (2H. m); 1,58 (2K. m) ; ς.00 (2H, m); 2,42 (3H, s); 2,66 (2H, m) ; 3,46 (2H, s) ; 3,60 (1H, m); 7,16 (2H, m) ; 7,42-7,64 (7H, m); 7,75 (2H, d, J= 7,91 Hz); 8,14 (1H, d, J= 7.86 Hz)
A-6 LR 19278	2-pyridyl	156°C MS : M + 1 = 440	(DMSO-de) 1.30 (2H, m); 1,58 (2H, m); 2,02 (2H, m); 2,66 (2H, m); 3,40-3,80 (1H, m + 2H, s); 7,24 (1H, m); 7,257.60 (7H, m); 7,70-7,80 (3H, m); 8,14 (1H, d, J = 7.84 Hz); 8,46 (1H, m)
A-7 LR 20547	2-methyl-3- pyridyl		(DMSO-d₆) 1.27 (2H, m); 1.57 (2H, m); 2,00 (2H. m); 2,46 (3H, s); 2,5-2.6 (2H. m) ; 3,32 (2H, s) ; 3.57 (1H, m) ; 7,15 (1H, m); 7,35-7,65 (7H, m); 7,76 (2H, d. J = 8.2 Hz); 8,12 (1H, d, J = 7,88 Hz) ; 8 31 <1H, m)
A-8 LR 19621	2-<chinolyl	210°C	(DMSO-d_e) 1,35 (2H, m) ;1,59 (2H, m); 2.06 (2H, m) ; 2,69 (2H, m) ; 3,59.(1H, m); 3.70 (2H, s); 7.40-7.80 (11H, m); 7,95 (2H, m) ; 8.16 (1H. m); 8,30 (1H, m)

A-9 LR 19622	4-chinolyl	216°C	(DMSO-de) 1.31 (2H, m); 1,60 (2H, m); 2,10 (2H, m) ; 2.73 (2H, m); 3,62 (1H, m) ; 3.87 (2H, s) ; 7,35-7,65 (8H, m) ; 7.74 (3H, m); 8.02 (1H, d, J = 8,18 Hz); 8.14 (1H, d, J= 7,67 Hz) ; 8 25 (1H. d, J= 8,05 Hz); 8,82 (1H, d, J = 6,34 Hz)
A-10 LR 20304	6-methoxy- 2-chinolyl		(CDCIa) 1,16 (2H, m) ; 1 65 (2H, m) ; 2,19 (2H, m); 2,59 (2H, m) ; 3,70 (2H, s) ; 3,84 (1H, m); 3,91 (3H, s); 5,09 (2H, d, J= 2.72 Hz); 7,04 (1H, d, J= 2,72 Hz) ; 7.25-7.55 (7H, m); 7.65 (3H, m); 7.95 (2&, m)
A-11 LR 20368	6-fluoro-2- chinolyl		(CDCIa) 1,15 (2H, m) ; 1,65 (2H, m) ; 2.20 (2H. m); 2,75 (2H, m); 3,71 (2H, s) ; 3,85 (1H, m) ; 5,09 (1H, m); 7,30-7,60 (8H, m); 7_r65 (3H, m); 8.,04 (2H, m)
A-12 LR 20919 (fumarat')	6-fluoro-2- chinolyl		(DMSO-de) 1.,38 (2H, m); 1£4 (2H, m); 2,32 (2H, m); 2,81 (2H, m); 3,65 (1H. m); 3,85 (2H, s); 6,62 (2H, s); 7,357,85 (11H. m); 8,00-8,10 (1H, m); 8,108,30 (1H, m); 8.30-8,45 (1H, m)
A-13	6-fluoro-2-	-	(DMSO-de) 1,65 (2H, m); 1,9 (2H, m);

• ·· · · · · •· · · · · · · • · · · · · · · • · · * · · · • · · · · · • · · · · ·· ··

LR 20918 (maleat )	chinoly1		2,95-3,55 (4H, m); 3,88 (1H, m); 4,55 (2H, m); 6,09 (2H, s); 7,40-8,00 (11H, m); 8,05-8.20 (1H, m); 8,35-8,70 (2H, m)
A-14 LR 20917 (hydrochloride)	6-fluoro-2- quinolyl		(DMSO-d₆) 1.)60-2.10 (4H, m); 3,003,55 (4H, m); 3,89 (1H. m); 4.58 (2H, s); 7,25-8.00 (11H, m); 8,00-8,20 (1H, m); 8,35-8,65 (2H, m)
A-15 LR 20420 (hydrochloridi.)	2-chinolyl		(DMSO-d_e) 1,51-1.89 (4H, mj ; 3,14- 3 56 (4H, m); 3,9< (1H, m); 4 60 (2H, s) ; 7.45-7,69 (6H, m); 7,69-7,85 (5H, m); 8.06 (2H, m) ; 8,5 (2H, m) ; 10,50 (1H, br. ‘. s)
A-16 LR 20421 (hydrochlorid -')	4-chinolyl	MS: M+1 + 490.4	(DMSO-d_e) 1.60-1.90 (4H, m) ; 3.003.42 (4H, m); $.81 (1H, m); 4 92 (2H, s) ; 7,42-7.58 (6H, m); 7,72 (2H, m); 7,88 (1H, m) ; 8,02 (1H, m) ; 8,31 (2H, m) ; 8,57 (2H, m) ; 9.21 (1H, m) ; 10,9011,35 (1H, brr s)
A-17 LR 21017	2-chinolyl	204’C	(CDCI₃) 1,18 (2H, m) ; 1,68 (2H, m) ; 2,23 (2H, m); 2,62 (2H, m); 3 78 {2B, s) ; 3,84 (1H, m) ; 5,11 (1H, broad d, J = 8.05 Hz) ; 7,31-7,40 (1H, m) ; 7 40-7,60 (4H, m) ; 7,60-7,80 (5H, m) ; 7,98-8,18 (2H, m); 8,92 (1H, s)

Tabulka II

I	ΪΙ	ΪΙΙ	IV	v
B-1 LR 20795	3-pyridyl	-4'-OCF₃		(DMSO-de) 1,05-1,35 (2H, m); 1,401,65 (2H, m); 1,90-2,15 (2H, m); g.552 85 (2H, m); 3,57 (1H, m + 2H, broad s); 7,25-7/5 (11H, m); 8,.40-8,55 (2H, m)._c
B-2 LR 20879	6-fluoro-2- chinolyl	H		(CDCI₃) 1,10 (2H, m); 1,51 (2H, m); 2.18 (2H, m); 2,57 (2H, m); 3,70 (2H, s); 3,80 (1H, m); 7,30-7.60 (12H, m); 7,71 (1H, d, J = 1,52 Hz); 7,95-8,15 (2H, m)
B-3	6-fluoro-2-	-4'-OCF₃	-	(DMSO-d₆) 1,25 (2H, m); 1,54 (2H, m);

-*

LR 21000	chinolyl			2,06 (2H, m); 2,67 (2H, m ); 3.59 (1H, m); 3,68 (2H, s); 7.32-7,55 (8H, m); 7,55-7.70 (2H, m); 7,70-7 (1H, m); 7,95-8,10 (2H, m); 8,31 (1H, m)
B-4 LR 21045	6-methoxy- 2-quinolyl	-4'-OCF₃		(CDCI3) 1.11 (2H, m); 1,65 (2H, m); 2,18 (2H, m); 2,62 (2H, m); 3_;70 (2H, s); 3,83 (1H, m); 3 91 (3H, s); 5.04 (1H, brt : d, J = 8.30 Hz); 7.04 (1H, m); 7.20-7,55 (9H, m) 7,64 (ÍH, m); 7,88-8^07 (2H, m)
B-5 LR 21032	4-quinolyl	-4-OCF3		(CDCI3) 1,90 (2H, m); 1,65 (2H, m); 2.17 (2H, m); 2,63 (2H, m); 3,83 (1H, m + 2H, s); 7,20-7,60 (10H, m); 7,60-7,80 (2H, m); 8,11 (2H, m); 8,83 (1H, m)
Β·6 LR 21118	2-ehinolyl	H		(DMSO-de) 1,33 (2H, m); 1,.58 (2H, m); 2,08 (2H, m) ; 2,71 (2H, m) ; 3,59 (1H, m) ; 3.70 (2H, s) ; 7,20-7,66 (11H, m) I 7,66-7,75 (1H, m) ; 7,75-8,12 (3H, m) ; 8,20-8,40 (1H, m)
B-7 LF 21089	6-methy>-2- pyridyl	H		(CDCl₃) 1,06 (2H, m) ; 1,62 (2H, m) ; 2,11Í2H, rn) ; 2,42-2,77 (2H, m + 3H, s) ; 3,51 (2H, s) ; 3,79 (1H, m); 5,04 (1H, brc_ . d, J = 7.84 Hz); 6,96-7,20 (2H, m) ; 7,32-7.65 (9H, m); 7,65-7,85 (1H. m)
B-8 LR 21085	2-quinolyl	-4’-OCF₃	165°C	(DMSO-d_e) 1,32 (2H, m); 1,53 (2H, m); 2,07 (2H, m) ; 2,68 (2H, m) ; 3,55 (1H, m) ; 3,69 (2H, s) ; 7,33-7,65 (10H, m) ; 7,65-7,83 (1H, m) ; 7,83-8.,10 (3H, m) ; 8.31 (1H,d,J = 8.46 Hz)

B-9 LR 21115	2-methyl-3- pyridyl	-4'-OCF₃		(DMSO-d_e) 1.25 (2H, m); 1,52 (2H, m); 1,99 (2H, m); 2,45 (3H, s); 2,60 (2H, m) ; 3<37 (2H, s) ; 3,56 (1H, m) ; 7,00-7,25 (1H. m) ; 7,25-7,65 (9H, m) ; 7,85-8,15 (1H,m); 8,15-8,40 (1H, m)
B-10 LR 21119	6-methyl-2- pyridyl	-4'-OCF₃		(CDCI3) 1.10 (2H, m) ; 1,59 (2H, m) ; 2,13 (2H, m); 2.51 (3H, s); 2,60 (2H, m) ; 3,53 (2H, s); 3,80 (1H, m); 5,03 (1H, bn . d, J = 8,03 Hz); 6,95-7,05 (1H, m) ; 7,05-7,20 (1H, m); 7,20-7,30 (2H, m); 7,30-7,40 (1H, m) ; 7,40-7,60 (5H, m); 7,60-7,70 (1H, m)

Příklad 4

Příprava 1 (2 chinolylmethyl)-4-[(4 -trif luor.methoxy-2—bifenyl )karbony lam i no] pí per idi nu (sloučenina B-8)

V pioudu dusíku se přidá 0,31 g (1,4 mmol) triacetoxybor— hydridu sodného do roztoku 0,36 g (1,0 mmol) 4-[(4 '-trif1uormethoxy~2-bifeny1)karbonylamino]piperidinu (sloučeniny získané v přípravě 2) a 0,16 g (1,0 mmol) 2-chinolinkarboxaldehydu v 10 ml 1,2-dichlorethanu a směs se míchá šest dní pří teplotě

okolí. Výsledná směs se zředí dichlormethanem a promyje se nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Po vysušení organické fáze síranem sodným a odpaření se získá pevná látka, která se čistí chromatografií na oxidu křemičitém (eluování směsí 9,5/9,5/1 ethylacetát/dichlormethan/methanol). Hlavní frakce se disperguje v diisopropyletheru, čímž se získá 0,2 g (40 % teorie) titulní sloučeniny v podobě bílé pevné látky.

Příklad 5

Příprava 1-t(6-methoxy-2-chinolyl)methyll-4-[(4 -trifluormethoxy-2-bifeny1)karbonylamino]piperidinu (sloučenina B-4)

Směs 0,41 g (1,1 mmol) sloučeniny získané v Přípravě 2, 0,24 g (1,7 mmol) uhličitanu draselného a 0,1 g jodidu draselného ve 20 ml dimethylformámidu se míchá jednu hodinu při teplotě okolí. Přidá se 0,29 g (1,1 mmol) 2.-bromomethy 1 -6-methoo xychinolinu. Směs se udržuje sedm hodin na teplotě 80 C a nechá stát přes víkend- Po zkoncentrování, promytí vodou a extrakci ethyletherem se organická fáze vysuší síranem sodným. Po filtraci, a zkoncentrování se získá 0,5 g surového produktu, který se čistí chromatografií na oxidu křemičitém (eluování směsí 98/2 dichlormethan/methanol). Hlavní frakce se disperguje v diisopropyletheru, čímž se získá 0,31 g (53 % teorie) bílé pevné látky odpovídající titulní sloučenině.

Příklad 6

Příprava l-[3-pyridylmethyl]-4-[(4 -trif luormetlioxy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidinu (sloučenina B-l)

Směs 0,30 g (0,79 mmol) l-[3-pyridylmethyll-4-[(2-bromfenylkarbonylamino]piperidinu, 0,75 ml dimethoxyethanu, 3,7 ml dioxanu, 0,12 ml ethanolu, 0,75 ml vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, 0,026 g Pd(PPh₃>4 a 0,18 g (0,87 mmol) 4-tri-fluormethoxyfenylborité kyseliny se udržuje 13,5 hodiny

-» • fr ·· frfr frfr fr · · • · · · · · · • frfr frfr frfr frfr na teplotě 80 C v prostředí dusíku. Po vychladnutí a přidání ethylacetátu se přidá nasycený roztok chloridu sodného a směs se nechá stát přes noc. Po filtraci a oddělení fáze ustátím se organická fáze suší síranem sodným, zfiltruje se a zkoncentruje na olej, který se čistí chromatografií na oxidu křemičitém (eluování směsí 4,5/4,5/1 ethylacetát/dichlormethan/methanol!. Získá se 0,15 g (41 % teorie! pevné látky, která odpovídá titulní sloučenině. >

Příklad 7

Příprava l-[<6-fluor-2-chinolyl!methyl]-4-[(2-bifenyl1karbony1 amino]piperidinu (sloučenina B-2!

Stupeň a

Příprava l-[ (6-fluor-2-chinoly1!methyl]-4-[trifluormethylkarbony 1 am i no ] p i per i d i nu

Směs 12,1 g (61 mmol! 4-trifluoracetamidopiperidinu, 17 g (122 mmol! uhličitanu draselného a 1,2 g jodidu draselného ve 300 ml dimethylformámidu se udržuje pfil hodiny na teplotě 80 o

C. Po vychladnutí na teplotu okolí se přidá roztok 18,1 g (75 mmol! 2-brommethyl-6-fluorochinolinu v 75 ml dimethylformamio du. Směs se udržuje dvě hodiny na teplotě 80 C a pak se míchá přes noc při teplotě okolí, znovu se zahřívá po dobu šesti hodin a míchá se při teplotě okolí přes víkend- Reakční směs se vlije do 500 ml ledově studené vody a 500 ml dichlormethanu. Po oddělení fází usazením a extrakci dichlormethanem se organické fáze promyjí vodou a vysuší se síranem sodným. Po filtraci a zkoncentrování se získá surový produkt, který se čistí filtrací přes oxid křemičitý (eluční činidlo: 10/1 trichlormethan/methanol!. Jako hlavní frakce se získá 15,3 g (71 % teorie! béžové zbarvené pevné látky odpovídající titulní sloučenině .

-.

• Φ · · · · · · · · · · φφφφφ ·· · φφ φφφφφ ·· φ

NMR: <CDC1₃) S(ppm): 1,49 až 1,72 (2H,m), 1,97 <2H,m), 2,31 (2H,m), 2,88 (2H,m), 3,81 (2H,s), 3,88 (lH,m), 6,12 (lH,m zaměnitelné), 7,31 až 7,53 (2H,m), 7,58 <lH,d, J=8,44 Hz), 7,96 až 8,15 (2H,m).

Stupeň b

Příprava l-[ (6-f luor-2-chlnoly1 )inethyl] -4-aminopiperidinu

Přikape se 100 ml IN hydroxidu sodného během pfll hodiny do 24,8 g (69 mmol) sloučeniny získané ve stupni a) ve 140 ml aonoglyme. Po mírné exotermické reakci se směs míchá dvě hodiny při teplotě okolí, koncentruje se a vyjme se do 100 1 vody a 100 ml ethyletheru. Vodná fáze se vyjme do 3x100 ml ethyletheru. Etherové organické fáze se vysuší síranem sodným, zfiltrují se a zkoncentrují na tmavě hnědou kapalinu Ll. Vodná fáze se reextrahuje 3x100 ml dichlormethanu. Spojené organické fáze se vysuší síranem sodným, zfiltrují a zkoncentrují se na tmavě hnědou kapalinu L2. Alkalické tekutiny se zpracují 100 ml 30% roztoku hydroxidu sodného. Po extrakci dichlormethanem, vysušení organické fáze síranem, filtraci a odpaření se získá tmavě hnědá kapalina L3. Všechny tři frakce, Ll, L2 a L3 se spojí rozpuštěním v dichlormethanu, vysuší se síranem sodným, zfiltrují se a zkoncentrují na produkt, který se čistí filtrací přes oxid křeničitý (eluční činidlo: 2/1 trichlormethan/ methanol). Jako hlavní frakce se získá 15,5 g (86 % teorie) červenooranžového oleje odpovídajícího titulní sloučenině.

NMR: (CDCI3) S(ppm): 1,30 až 1,60 (4Il,m), 1,79 (2H,m), 2,17 (2H,m), 2,68 (lH,m) 2,85 <2H,m zaměnitelné), 3,74 (2H,s), 7,32 až 7,53 (2H,n), 7,61 (lH,d, J=9,71 Hz), 7,97 až 8,14 (2H,m).

Stupeň c

Příprava 1-1(6~fluor-2-chinoly1)methyll-4-[(2-bifenyl)karbonylamino]piperidinu (sloučenina B-2)

-.

φφ • φ φ φ φφ Φφ φ φ φ φ φφφφ « φ · φφ φφ φφ φ φ φφφφ ♦ φ φ φφφ φ φ · φ φ φ φ φφ φφ

Stejným způsobem jako podle příkladu 1 stupeň c) as výchozí sloučeninou získanou ve stupni b) a s 2-karboxybifenylem se získá titulní sloučenina.

Příklad 8

Příprava l-[C2-chinolyl)methyl]-4-[C2-bifenyl)karbonylamino]piperidinu Csloučenina B-6)

V proudu dusíku se přidá 0,39 g Cl,7 mmol) triacetoxyborhydridu sodného do roztoku 0,36 g Cl,3 mmol) 4-[C2-bifeny1)karbonylamino]piperidinu a 0,22 g Cl,4 mmol) 2-formylchinolinu v 15 ml 1,2-dichlorethanu a směs se míchá čtyři dny při teplotě okolí. Výsledná směs se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje se dichlormethanem. Po vysušení organické fáze síranem sodným a odpaření se získá pevná látka, která se čistí chromatografií na oxidu křemičitém Celuování směsí 4,5/4,5/1 ethylacetát/dichlormethan/methanol). Hlavní frakce se disperguje v diisopropy1etheru, čímž se získá 0,2 g C27 % teorie) titulní sloučeniny.

Příklad 8a

Shora popsanými způsoby se připravují sloučeniny uvedené v následující tabulce.

V tabulce je ve sloupci I uvedena struktura sloučeniny, ve sloupci II teplota tání a/nebo hodnota MS, ve sloupci III NMR S Cppm) ave sloupci IV číslo příkladu, podle kterého je sloučenina připravena.

• · ♦

»Μ

I	II ’	III	IV
x\xyp kJ* Br		(DMSO-d6) 1.35 (2Η, m); (2Η, m); 2.1 (2Η, m); 2.65 m); 3.50 (2H,s); 3.60 (1H, 7.45-7.65 (m, 6H), 7.8 (2H, 8.0 (1H, m); 8.20 (1H, m); Í1H. m): 8.65 Í1H.	2
		(CDCI3) 1.20 (2H, m); 1.75 m); 2.20 (2H, m); 2.65 (2H, 3.50 (2H,s); 3.95 (1H,m); (1H. m);7.35(1H, m); 7.45 m); 7.50-7.70 (m, 5H); 7.70Í3H. ml:8.35í1H.	* . >2
	MS: Μ+1 = 459,2		1 . 2
Λ ϊι,ΌΎ/·'		(DMSO-d6) 1,50 (2H, m); (2H, m); 2,20-^.40 (2H. m); (2H, m); 3.70-3,90 (3H, m); Í3H. s): 7.^z5O-8.4O (12H.	... 4
		(CDC13) 1.15 (2H, m); 1.65 m); 2.15 (^H, m); 2.50-2.65 m); 3.65 (2H, s); 3.80 (1H, < 5.05 (1H, m); 7,30-7,65 11H): 7.85 M n m): 7,95 (1ř	1 . : .2

• φφ φφ Φ· φφ φ φ φ φ φ φφφ φ. φ φφφ φφφ φφ φφ φφ

ó u	S-OXOv H \| 0'	< 2Q2.°C	(CDCI3) 1,15 (2H, m); 1,60 m); 2,20 (2H, m); 2,60 (2H, 3.60-3,85 (3H, m); ζ.05 (1H, 7,30-7.75 (9H, m); 8,10 (1H 8,20 (1H, m); 8.35 (1H, m); (1H.m)	. 2
o ό	1/5X0,		(CDCI3) 1,10 (2H, m); 1,60 m); 2,15 (2H, m); 2,55 (2H, 3,65 (2H, s); 3.75 (1H. m); (1H,m);7,30 (1H,m);7,35(9H, m); 7,75 (1H, m); 7,85Í2H. ml	k .,..3
F^. r' r	Α^ΰ	X Cl	0	173’Q	(CDCI3) 1.30 (2H, m); 1.80 m); 2,30 (2H, m); 2,70 (2H, 3,80 (2H, s); 3,90 (1H, m); (1H, m); 7,30 (1H, m); 7,35(10H,m);8,0 (1H,m); 8,15 m)	, 2
dimethanesutfonáti;		0	135- 13fi“G	(DMSO-d6) 1.60-2.15 (4H, 2,45 {6H, s); 3,20-3,80 (4H, 4,15 (1H,m); 4.80 (2H, m); 7,75 (6H, m); 7,85 (2H, m); (2H, m); 8,30 (2H, m); 8.55 πϋ: 9,15 (1Ks): 11Í1H.
F. r v-	) ° o
r	H u		XJ
malsak	1] ^H			116- 118T

a sloučenina l-[6-karboxy-3-pyridylmethyl]-4-[C4’-trifluormethoxy-2-bife ny1)karbony1amino]piperidin♦9 99 9· · 9 9 «9 · * 9*9*9 ·* 9

9999

9 9 9*9 · 9*9 9

999 99 *9 99 9« >9

Příklad 9

Analýza inhibice aktivity MTP

Podle následujícího protokolu se analysuje inhibice působení mikrosomalního triglyceridového transferového proteinu CMTP).

Inhibice aktivity MTP sloučeninou se může kvantifikovat pozorováním inhibice transferu značeného triglyceridu z donorové částice k akceptorové částici v přítomnosti MTP- Způsob přípravy MTP je založen na způsobu, který popsal Wetterau a Zilversmit CBiochem. Biophys. Acta 875, str. 610, 1986). Odebere se několik gramů jater zlatého křečka a několikrát se pokropí 250 mM cukrovým roztokem při teplotě 0 C. Všechny následující kroky se provádějí při teplotě 4 C. 50% homogenát 250 mM sacharózy se připraví v teflonovém mlýně a odstřeďuje o

se 10 minut při 10 000 g při teplotě 4 C. Supernatant se odo střeďuje při 105 000 g 75 minut při teplotě 4 C. Supernatant se odstraní a odebere se mikrosomalní peleta ve 3 ml (na gram výchozích jater) 150 mM hodnota pH 8,0 Tris/HCl- Uloží se 1 o

ml alikvotního podílu při teplotě -80 C až do použití.

Po roztáni se přidá frakce mikrosomů Cl ml), 12 ml zmražených pufrů 50 mM Tris/HCl, 50 mM KC1, 5 mM MgCl2, pH 7,4 a 1,2 ml deoxycholátu CO,54% ve vodě). Po 30-minutové inkubaci o

při teplotě 4 C za mírného míchání se suspenze odstřeďuje 75 minut při 105 000 x g. Supernatant, obsahující rozpustný MTP, se dialyzuje proti pufru 150 mM Tris/HCl, 40 mM NaCl, 1 mM EDTA, 0,02 % azidu sodného, pH 7,4 C5x 1 litr během dvou až tří dnů). MTP se uloží při teplotě 4 C, je stálý po dobu nejméně 30 dní a použije se ho jako v testu.

Donorové částice Cliposomy) se připraví z 208 μΐ L-fosfatidylcholinu při 10 mg/ml v chloroformu a 480 μϊ [3H]trioleinu při 0,5 mCl/ml v toluenu. Po míchání se roztok odpaří v pro• 9 ··♦·

	·♦	99	9«
• 9	•	• 9	9	9
• 9	9	9 9	• 99	9
• ·	•	• ·	• 9	*
··	• 9	99	• 9

• < • ♦ 1 ·* ·· středí dusíku, vnese se do pufru 6 ml 50 mM Tris/HCl, 50 mM KC1, 5 mM MgCl2. pH 7,4 a inkubuje se v ultrazvukové lázni 30 o

minut při teplotě okolí. Liposomy se uloží při teplotě 4 Ca před každým použitím se znova ultrazvukují.

Akceptorové částice se biotinylují lipoproteiny o nízké hustotě (biot-LDL). Tyto částice jsou obchodním produktem společnosti Amersham.

Reakční směs se připraví jako nezpracované půldůlkové bílé destičky (Corning Costar) přidáním v tomto pořadí: 5 pl 50 mM HEPES, 150 mM NaCl, 0,1¾ (hmotnost/objem) BSA, 0,05 % (hmotnost/objem) azid sodný, pufr pH 7,4, 5 pl liposomfl, 5 pl biot-LDL, 5 pl DMSO testovaných produktů, 5 pl MTP. Po 18- až 24o

-hodinové inkubaci při teplotě 37 C se reakce ukončí přidáním 100 pl Amershamových kuliček SPA (Scinti1lation Proximity Assay) kopulovaných na steptavidin a radioaktivita se načítá čítačem Top Count (Packard) alespoň za jednu hodinu. Inhibice transferu triglyceridů sloučeninou se projeví snížením přenesené radioaktivity. Procento inhibice pro danou sloučeninu se stanoví vůči kontrolám, které neobsahují žádné sloučeniny v reakční směsi.

Výsledky jsou vyjádřeny v IC50, což je koncentrace, která vykazuje 50¾ inhibici MTP. Tyto výsledky jsou shrnuty v tabulce III pro několik reprezentačních sloučenin podle vynálezu

Tabulka III

Sloučenina

IC50 (nM)

A-5

A-7

A-8 ·♦ • 9 9

9 999

9 9 9

99

Příklad 10

Analysa sekrece apo B v lidské buněčné linii Hep G2

Aktivita sloučenin podle vynálezu se může vyhodnocovat měřením inhibice vylučování apo B v buňkách Hep G2.

Buněk Hep G2 (ECACC-číslo 85011430) se použije jako modelu ve studii hepatické sekrece lipoproteinů in vitro (Dixon J. a Ginsberg H. , J. Lipid. Res. 34, str. 167 až 179, 1993).

Buňky Hep G2 se kultivují 24 hodin v Dulbecco modifikovaném prostředí Eagle obsahujícím 10 % zárodečného telecího séra (DMEM a FCS-Gibco) v 96-důlkavých destičkách v prostředí 5% oxidu uhličitého (přibližně 70% slinutí).

Testované sloučeniny se rozpustí při 2 nebo 10 mM v dimethylsulfoxidu (DMSO). Připraví se odstupňovaná zředění ¢1=3=16) v DMSO a přidají se ¢1=200 Robot Multimek Beckman) do kultivačního prostředí (200 μΐ) a inkubují se 24 hodin v různých důlcích obsahujících buňky Hep G2.

Supernatant ze 24 hodinové kultury zředěný 1 = 5 (fosátem pufrovaná solanka= PBS obsahujícím 1 % albuminu hovězího séra) se testuje sendvičovým způsobem ELISA, který je specifický pro lidské apo B.

Výsledky jsou vyjádřeny v ICso, což je koncentrace, která dovolí 50% inhibici sekrece apo B v buňkách Hep G2. Tyto výsledky jsou shrnuty do tabulky IV pro tři reprezentativní sloučeniny podle vynálezu.

• φ* -»φ » φ φφφ φφφ φφφ φφφ φφ *♦ φφ • φ φ φ φ φφφ φ φ φ φ φ φ φ φ φφ φφ • φφφ φ

φ φ · φ φ φ φ- φ • · φ ·

Tabulka IV
Sloučenina	IC50 CnM)
ft-5	3
fl-7	74
fl-8	2
Průmyslová	využitelnost

Deriváty 4-Cblfenylkarbonylamino)piperidinu jakožto inhibitory mikrosomálního triglyceridového transferového proteinu a jakožto jako inhibitory sekrece apoproteinu B pro výrobu farmaceutických prostředků pro ošetřování například hypercholesterolaemie, hypertriglyceridaemie, hyperlipidaemie, pankreatitidy, hyperglykaemie, obezity, aterosklerózy a dyslipidaemie spojených s diabetem.

,:

• Φ

1.

vzorce I

· • 99 9 9 • 9 9 9

9 9 9

99

9-9

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

99 9999 • 9 • · • 9

9 9 9

Derivát 4-<bifenylkarbonylamino)piperidinu obecného

Z—CO-NH

N-CH₂-Het

Cl) kde znamená

Z skupinu bifenylovou popřípadě substituovanou v poloze 2', 3' , 4’ , 5’ a 6’ jedním nebo několika substituenty ze souboru zahrnujícího skupinu trihalogenmethylovou a triha1ogenmethoxyskup inu,

Het skupinu chinolylovou, chinoxalylovou nebo pyridylovou popřípadě substituovanou jedním nebo několika substituenty ze souboru zahrnujícího atom halogenu, kyanoskupinu, nitroskupinu, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, arylovou se 6 až 12 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu hydroxylovou, thioalkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, karboxylovou a alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v a1koxypodí1u, a jejich farmaceuticky přijatelné soli, hydráty, solváty a stereoisomery.
2. Derivát 4-Cbifeny1karbonylamino)piperidinu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde znamená Z popřípadě substituovanou 2-bifenylovou skupinu a ostatní symboly mají v nároku 1 uvedený význam.
3. Derivát 4-Cbifenylkarbonylamino)piperidinu podle nároku 1 nebo 2 obecného vzorce I, kde znamená Z skupinu 4’-trifluormethyl-2-bifenylovou nebo 4’-trifluormethoxy-2-bifenylovou a ostatní symboly mají v nároku 1 uvedený význam.

4 4 44 4 4 4· 4 44 ♦ 4 4» 4 • 444 • • 4 4 4 4 • 4 4 4 4 4 • 4 4 4 4 4 4> 4 ·· 44 44 44 44 • 4
4. Derivát 4-Cbifenylkarbonylaminolpiperidinu podle nároku 1 až 3 obecného vzorce I, kde znamená Het skupinu 3-pyridylovou, 2-pyridylovou, 2-chinolylovou, 2-chinoxalylovou nebo 4-chinolylovou, přičemž je pyridylový, chinolylový a chinoxalylový cyklus popřípadě substituovaný a ostatní symboly mají v nároku 1 až 3 uvedený význam.
5. Derivát 4-Cbifenylkarbonylaminolpiperldinu podle nároku 4 obecného vzorce I, kde pyridylový cyklus je popřípadě substituovaný jednou nebo několika substituenty ze souboru zahrnujícího methylovou skupinu, atom halogenu a methoxyskupinu a ostatní symboly mají v nároku 4 uvedený význam.
6. Derivát 4-Cbifeny1karbonylaminolpiperidinu podle nároku 1 až 5 obecného vzorce I ze souboru zahrnujícího

1-C3-pyridyImethyl1-4-[C4 -trifluormethy1-2-bifeny11karbony1amino]piperidin, l-(3-pyridyImethyl1-4-[C4 -trifluormethy1-2-bifeny11karbony1am i no]p i per i d i nf umarát, l-C3-pyridyImethyl1-4-[(4 -trifluormethy1-2-bifeny1Ikarbony1amino] piper idinmaleát.,

1-(3-pyridyImethyll-4-[<4 -trifluormethy1-2-bifeny1Ikarbonylamino]piperidinhydrochlorid, l-[ (6-met.hyl-2-pyridy 1 Imethyl] -4-C (4 -trif luormethy 1 -2-bifeny 11karbony1am i no]p i per idin, l-C2-pyr.idyImethyl 1 -4-C <4 -trif luormethy 1 -2-bifeny 1)karbony 1 am i no]p i per idin, l-[C2-methyl-3-pyridylImethyl3-4-C C4 -trifluormethy1-2-bifeny 1)karbony1am i no]piper idin, l-C2-chinolylmethyl1-4-C(4 -trifluormethy1-2-bifeny1Ikarbonylam i no]p i per idin, l-C4-chinolylmethy11-4-C <4 -trifluormethy1-2-bifeny1Ikarbonylam i no]p i per idin,

• 9 9· • • 9· • 99 9 • 9» 9 9 • · • • 9 ··· • • * • · • • • • 9 9 • • 9 • 9 • 9 99 9 9 99 99

1 —[(6-methoxy-2-chinoly1)methyll-4-[(4 -trifluormethyl-2-bife nyl)karbonylamino!piperidin,

1-t(6-fluoro-2-chinolyl)methyl]-4-t(4 -trifluormethyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidin,

1-t3-pyridylmethy1)-4-[(4 -trifluormethoxy-2-bifeny1)karbonyl amino]piperidin, l-[ (6-fluoro-2-chinolyl )met-hyl] -4-t (2-bif eny 1)karbonylamino] piperidin,

1—[(6-fluoro-2-ehinolyl)methyl]-4-t(4 -trifluormethy1-2-bifeny1)karbonylamino]piperidinfumarát,

1-t(6-fluoro-2-chinolyl)methyl]-4-t(4 -trifluormethyl-2-bifeny1)karbonylamino]piperidinmaleát,

1-t(6-f1uoro-2-chinoly1)methy1]-4-[(4 -trifluormethy1-2-bifenyl)karbonylamino]piperidinhydrochlorid, l-(2-ehinolylmethy.l )-4-t (4 -trif luormethy 1-2-bif enyl )karbonyl am i no]p i per i d i nhydroch1or i d,

1-t(4-chinolyl)methyll-4-t(4 -trifluormethy1-2-bifenyl)karbony1am i no]p i per i d i nhydroch1or i d,

1-t(6-fluoro-2-chinoly1)methyl]-4-t(4 -trifluormethoxy-2-bife nyl)karbonylamino]piperidin,

1-t(6-methoxy-2-chinoly1)methyll-4-t(4 -trifluormethoy-2-bife nyl)karbony1am i no]p i per i d i η,

1-t(4-chinolyl)methyl]-4-t(4 -trifluormethoxy-2-bifenyl)karbo ny1am i no]p i per i d i η,

1-t(2-chinoxaly1)methyl3-4-t(4 -trifluormethyl-2-bifeny1)karbony 1am i no]p i per i d i η,

1-t(2-chinoly1)methy1]-4-t(2-bifeny1)karbonylamino]piperidin, 1-t(6-methy1-2-pyridyl)methy13-4-t(2-bifeny1)karbonylamino]p i per i d i η,

1-t(2-ehtnoly1)methy13-4-t(4 -trifluormethoxy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidin,

1-t(2-methyl-3-pyridyl)methyl]-4-t(4 -trifluormethoxy-2-bifeny1)karbonylamino]piperidin,

1-1(6-methy1-2-pyridyl)methyl]-4-t(4 -trifluormethoxy-2-bifeny1)karbony1am i no]ρ1per i d i π, •0 «»*«

- 49 - * ·· **o 0 · · · «00 ·«· «00 00 «· «0 0 0« 0 « 0 0. 0 000 0 0 0

0 00 0 < 00 0

00 «0 0# 0« a jejich farmaceuticky přijatelné soli, hydráty, solváty nebo stereoisomery.
7. Způsob přípravy derivátu 4-(bifenylkarbonylamino)piperidinu podle nároku 1 obecného vzorce I, vyznačuj íc í se tím, že se nechává reagovat amin obecného vzorce II h₂n

CH₂-Het (II) kde Het má význam uvedený v nároku 1, s karboxylovou kyselinou obecného vzorce III

Z - CO - OH Clil) kde Z má význam uvedený v nároku 1 nebo s aktivovaným derivátem karboxylové kyseliny obecného vzorce III.
8. Způsob přípravy derivátu 4-(bifeny1karbonylamino)piperidinu podle nároku 1 obecného vzorce I, vyznaču j íc í se tím, že se nechává reagovat aldehyd obecného vzorce IV

Het - COH (IV) uvedený u obecného vzorce I, s aminem obec-( \h

CVII)

7—CO—NH kde Het má význam ného vzorce VII kde Z má význam uvedený u obecného vzorce I v přítomnosti redukčního činidla.
9. Způsob podle nároku 1,vyznačující se tím, že se jako redukčního čindila používá triacyloxyborhydridu alkalického kovu.
10. Zpfisob přípravy derivátu 4-(bifenylkarbonylamino!piperidinu podle nároku 1 obecného vzorce I, vyznaču j íc í set i m, že se nechává reagovat halogenid obecného vzorce

VII

Het - CH₂ - Hal (VIII!

49 -&1 · fr · • fr frfr frfr • · · · frfr · • fr. « ··· · · fr * · * · . · · · · ·· · • frfr ·· frfr frfr frfr ·« fr· frfrfrfr kde Het má význam uvedený u obecného vzorce I, s aminem obecného vzorce VII (VII!

Z—CO—N

H-/NH kde Z má význam uvedený u obecného vzorce I.
11. Sloučenina obecného vzorce II ₂ν-/~Λ -( ^Η2^Ν“γ^~ΟΗ₂-Ηβί (II!

kde Het má v nároku 1 u obecného vzorce I uvedený význam.
12. Sloučenina obecného vzorce VI

CF₃—-CO—NH

OCHz-Het (VI!

kde Het má v nároku 1 u obecného vzorce I uvedený význam.
13. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jednu sloučeninu podle kteréhokoliv nároku 1 až 6 popřípadě v kombinaci s jedním nebo s několika excipienty.
14. Farmaceutický prostředek podle nároku 13 pro použití jako inhibitor mikrosomálního triglyceridového transferového proteinu MTP.
15. Farmaceutický prostředek podle nároku 13 pro použití jako inhibitor sekrece apoproteinu B.

49 ···♦ ·« • · · »·· ·· • 4 · · «· ·· • · · • 4 ·

4 4 4

4 4 4 4 ·· ··
16. Farmaceutický prostředek podle nároku 13 až 15 k použití pro ošetřování hypercholesterolaemie, hypertriglyceridaemie, hyperlipidaeraie, pankreatitidy, hyperglykaemie, obezity, aterosklerózy a dyslipidaemie spojených s diabetem.
17. Sloučenina podle nároku 1 až 6 nebo farmaceutický piostředek podle nároku 13 až 16 pro přípravu medicinálního prostředku, který inhibuje mikrosomální ti-iglycer idový transferový protein.
18. Sloučenina podle nároku 1 až 6 nebo farmaceutický prostředek podle nároku 13 až 16 pro přípravu medicinálního prostředku, který inhibuje sekreci apoproteinu B.
19. Sloučenina podle nároku 1 až 6 nebo farmaceutický prostředek podle nároku 13 až 16 k příprava medicinálního středku pro ošetřování hypercholesterolaemie, hypertriglyceridaemie, hyper1ipidaemie, pankreatitidy, hyperglykaemie, obezity, aterosklerózy a dys1ipidaemie spojených s diabetem.