CZ20021887A3 - Farmaceutické kompozice a jejich pouľití při antitrombotické terapii - Google Patents

Description

Oblast techniky

Předložený vynález se týká farmaceutické kompozice obsahující antagonístu receptorů P2T a další antitrombotické činidlo a jejich použití při léčení a prevenci trombózy.

Dosavadní stav techniky

Rostoucí porozumění mechanismům trombózy a intervencí vede k polyfarmakologickému antitrombitickému přístupu využívajícímu příslušné kombinace protidestičkových, antikoagulačních a fibrinolytických činidel. Příklady používaných antitrombotických sloučenin zahrnují protidestičková činidla, jako je aspirin, klopidogrel, tiklopidin, antagonisté GPIIb/IIIa; antikoagulancia, jako jsou inhibitory trombinu, warfarin, heparin a hepariny s nízkou molekulovou hmotností; a fibrinolytická činidla včetně streptokinázy, aktivátoru tkáňového plasminogenu (tPA) a tenekteplázy, výčet tím však není omezen.

Většina pacientů s akutním infarktem myokardu je v současnosti léčena za použití buď trombolytického činidla nebo intervenčního zákroku pomocí perkutánní koronární angioplastiky (PTCA). Bylo ukázáno, že použití obou těchto způsobů vede ke zvýšení počtu pacientů, u kterých se do 90 minut dosáhne přijatelné průchodnosti koronární arterie, přičemž čím lepší je průtok v postižené koronární arterii, tím lepší je přežití.

-2 Avšak i nejúčinnější trombolytická činidla s pomocným léčením aspirinem nebo heparinem jsou pouze mírně účinná při dosahování průchodnosti koronární arterie s normálním průtokem krve /hodnoceno jako TIMI stupeň 3) asi v 50 % případů. Kromě toho v akutní situaci, kdy bezprostřední účinek je výrazný, ponechávají pomalu působící činidla okénko, ve kterém pacient není před trombózou chráněn. Například klopidogrel inhibuje agregaci destiček indukovanou ADP a jako dřívější analog, tiklopidin, vykazuje klinickou účinnost při arteriální trombóze. Obě činidla však vykazují neúplnou, pomalu se rozvíjející inhibici odpovědi na ADP, což jsou vlastnosti, které jsou na hony vzdáleny ideální akutní terapii, jako je prevence uzávěru stentu, ačkoliv zvyšující se používání náložové dávky představuje současný pokrok.

Další nevýhodou existujících antitrombotických činidel a jejich kombinací je skutečnost, že dosud nebylo dosaženo optimálního poměru farmakodynamické riziko:přínos (antitrombotický účinek:hemostatický účinek).

Existuje tedy potřeba účinnější antitrombotické terapie.

Nedávno bylo ukázáno, že antagonisté receptoru P₂t (rovněž známého jako P2Y_adp nebo P2T_ac) poskytují významná zlepšení ve srovnání s antitrombotickými činidly. Receptor P_2T jo primárně účasten zprostředkování agregace/aktivace destiček a jde o receptor spojený s G-proteinem. Farmakologické vlastnosti tohoto receptoru jsou popsány například v odkazech Humphries a kol., Br. J. Pharmacology, 113, 1057 až 1063 (1994) a Fagura a kol., Br.

J. Pharmacology, 124, 157 až 164 (1998).

-3 .* ··. • · · ♦ • · · • · · • · · ·· ····

Mezinárodní patentové přihlášky WO 92/17488 a WO 94/18216 popisují nové antagonisty receptoru P_2T včetně sloučenin obecného vzorce (I) (viz dále). Sloučenina Ά (sloučenina obecného vzorce (I), kde Ri je 3,3,3-trifluorpropyl a R₂ je 2-(methylthio)ethyl) je popsána ve WO 94/18216. Sloučenina B (sloučenina obecného vzorce (I), kde Ri je propyl a R₂ je atom vodíku) je popsána ve WO 92/17488.

Jak sloučenina A, tak sloučenina B mohou být použity při jakémkoli stavu, kterého se účastní aktivace nebo agregace destiček. Tyto sloučeniny mohou tedy působit jako antitrombotická činidla a jsou užitečné při léčení nebo profylaxi nestabilní angíny, tromboembolické mrtvice a periferní cévní choroby. Mohou také být použity při léčení a profylaxi následků trombotíckých komplikaci po angioplastice, trombolýze, endarterektomíí, vložení koronárního a cévního štěpu, ledvinné dialýze a kardiopulmonárním bypassu. Kromě toho mohou být použity při léčení a profylaxi diseminované intravaskulární koagulace, hlubokožilní trombózy, preeklampsie, záchraně tkání po chirurgickém nebo nehodovém traumatu, vaskulitidě, arteritidě, trombocytémii, ischémii a migréně.

Podstata vynálezu

Původci předloženého vynálezu překvapivě nalezli, že podání kombinace antagonisty receptoru P₂t nebo jeho farmaceuticky přijatelného derivátu a dalšího antitrombotíckého činidla nebo jeho farmaceuticky přijatelného derivátu poskytuje významné zlepšení ve srovnání s jinými antitrombotickými terapiemi.

• · · • ·· ·· ··

I ♦ · ' receptoru P2T nebo a dalšího antiΛ ·* ·*.

-4 - · * * ϊ • · .

• · · • · · • 4 ····

Kombinované podání antagonisty jeho farmaceuticky přijatelného derivátu trombotického činidla nebo jeho farmaceuticky přijatelného derivátu může tudíž být použito při léčení a prevenci trombózy, obzvláště při léčení trombotických komplikaci aterosklerotícké choroby a při jejím ovlivňování.

Podle prvního aspektu předloženého vynálezu je poskytnut kit součástí zahrnující:

a) antagonistu receptoru P2T nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát (složka a) a

b) další antitrombotické činidlo nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát (složka b) , kde složky a) a b) jsou každá poskytnuta ve formě (která může být shodná nebo rozdílná) , která je vhodná pro podání ve vzájemném spojení.

Farmaceuticky přijatelné deriváty antagonisty receptoru P₂? a dalšího antitrombotického činidla zahrnují soli (např. farmaceuticky přijatelné netoxické organické nebo anorganické adiční soli s kyselinou (jako jsou soli kyseliny chlorovodíkové, bromovodíkové, dusičné, sírové nebo octové), solváty a solváty solí.

Pokud je předložen více než 1 prostředek obsahující složku a) nebo složku b), například k poskytnut opakovaného podání dávky, mohou takové prostředky být stejné nebo mohou být rozdílné pokud jde o dávku, chemické složení a/nebo fyzickou formu.

• ·

-5 Výhodně je antagonistou receptoru P2T sloučenina obecného vzorce (I)

ve kterém buď Ri je 3,3,3-trifluorpropyl a R₂ je 2-(methylthio)ethyl nebo

R_x je propyl a R₂ je atom vodíku nebo její farmaceuticky přijatelný derivát.

Výhodněji je antagonistou receptoru P₂t sloučenina A (kde Ri je 3,3,3-trifluorpropyl a R₂ je 2-(methylthio) ethyl, jak je popsána ve WO 94/18216).

Výhodně je složka b) zvolena z protidestičkových činidel, antikoagulačních činidel, fibrinolytických činidel a jakékoli jejich kombinace.

Výhodněji je složka b) zvolena ze skupiny sestávající z aspirinu, klopidogrelu, tiklopidinu, antagonistů GPIIb/IIIa; přímých inhibitorů trombinu, prekurzorů léčiv přímých inhibitorů trombinu, warfarinu, heparinu, heparinů s nízkou molekulovou hmotností, streptokinázy, aktivátoru tkáňového plasminogenu (tPA),

-6 • ·

• ♦ • ·

tenekteplázy a jakékoli jejich kombinace. Příklady přímých inhibitorů trombinu zahrnují melagatran (WO 94/29336). Prekurzory léčiva melagatranu zahrnují prekurzory léčiva popsané ve WO 97/23499 a obzvláště zahrnují příklad 17 této přihlášky vynálezu. Příklad 17 dokumentu WO 97/23499, což je EtO2C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH, kde Cgl je cyklohexylglycin, Aze je (S)-azetidin-2-karbonyl a Pab je para-amidinobenzylamino a skupina OH nahrazuje jeden z atomů vodíku v amidinoskupině Pab.

V souladu s vynálezem antagonista receptoru Ρ₂τγ další antitrombotické činidlo a derivát kterékoli z těchto látek mohou být podány orálně, intravenózně, subkutánně, bukálně, rektálně, dermálně, nasálně, tracheálně, bronchiálně, topicky nebo inhalačně do plic. Výhodnými způsoby dodání jsou způsoby systémové. Pro antagonisty receptoru P₂t a jeho deriváty jsou výhodnými způsoby podání způsoby parenterální, výhodněji intravenózní. Pro další antitrombotická činidla a jejich deriváty jsou výhodnými způsoby podání způsoby orální nebo, v případě nefrakcionovaného heparinu nebo heparinů s nízkou molekulovou hmotností, jistých přímých inhibitorů trombinu a fibrínolytických činidel, intravenózní nebo subkutánní.

Sekvence, ve které prostředky obsahující antagonisty receptoru PaT a další antitrombotické činidlo mohou být podány (tj. zda a kdy sekvenční, oddělené a/nebo souběžné podání proběhne) může být určeno lékařem nebo odborníkem v oboru. Například sekvence může záviset na mnoha faktorech, jako zda kdykoli v průběhu kůry nebo času léčení jeden nebo druhý z prostředků nemůže být osobě ze zvláštních důvodů podán (např. osoba je v bezvědomí a není tedy schopna užívat orální prostředek).

• ·

-7 . · · » · * ·· ····

Jednotlivé prostředky obsahující složku a) a/nebo složku b) mohou být podány sekvenčně, odděleně a/nebo souběžně během léčení relevantního stavu, kterýžto stav může být akutní nebo chronický. Výhodně se oba prostředky podají (případně opakovaně) dostatečně blízko sebe v čase, protože to může pro pacienta mít výhodný účinek, který je větší, během léčení relevantního stavu, než když se tyto dva prostředky podají (případně opakovaně) samotné, za nepřítomnosti druhého prostředku, během stejné léčebné kůry. Rozhodnutí, zda kombinace poskytuje větší přínos pokud jde o průběh léčení určitého stavu a po jeho dobu, bude záviset na stavu, který má být léčen nebo jemuž má být zabráněno, ale odborník v oboru jej může provést rutinně.

Alternativně jeden nebo druhý z dvousložkového prostředku mohou být podány (případně opakovaně) před, po a/nebo současně s podáním druhé složky. Individuální dávky antagonisty receptoru P₂t a dalšího antitrombotíckého činidla mohou být použity během 48 hodin (např. 24 hodin) po sobě.

Při terapeutickém léčení savců, a obzvláště člověka, antagonista receptoru P₂t, další antitrombotické činidlo a jejich deriváty mohou být podány samotné, ale obecně budou podány jako farmaceutický prostředek ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem, které musí být zvoleny s řádným ohledem na zamýšlenou cestu podání a standardní farmaceutickou praxi.

V souladu s tímto vynálezem může kit částí být použit v lékařství při léčení, vhodně při léčení trombózy. Léčením trombózy bude odborník v oboru rozumět léčení a • · ··

• · prevenci trombotických komplikací aterosklerotické choroby a zásahů do ní, jako je fibrinolýza, endarterektomie nebo perkutánní transluminální koronární revaskularizace (PTCR) včetně perkutánní transluminální koronární angioplastiky (PTCA) s použitím stentu nebo bez použití stentu, výčet tím však není omezen. Trombotické komplikace aterosklerotické choroby zahrnují akutní koronární syndrom (zahrnující akutní infarkt myokardu se zvýšením ST nebo bez něj a nestabilní angínu) a trombotickou mrtvici, výčet tím však není omezen.

Dalším aspekt tohoto vynálezu poskytuje způsob léčení trombózy (například trombotických komplikací aterosklerotické choroby a zásahů do ní, jako je fibrinolýza, endarterektomie nebo perkutánní transluminální koronární revaskularizace (PTCR) včetně perkutánní transluminální koronární angioplastiky (PTCA) s použitím stentu nebo bez použití stentu, výčet tím však není omezen), který zahrnuje použití křtu součástí pro podání terapeuticky účinného množství antagonisty receptoru P2T a dalšího antitrombotického činidla osobě trpící takovou poruchou nebo mající k ní sklon.

K zamezí pochybností zahrnuje pojem „léčení terapeutické a/nebo profylaktické léčení.

Výhodně se složka a) podává parenterálně před zákrokem a složka b) se podává orálně po tomto zákroku.

Podle dalšího aspektu tohoto vynálezu je poskytnut způsob výroby kitu součástí jak je zde definován, který zahrnuje spojení složky a) se složkou b), čímž se dosáhne vhodnosti těchto dvou složek pro podání ve • · • ·

-9 ·· ···· > · · .

I · · ' »« »· .♦ ♦··<

vzájemném spojení. Vzájemným spojením obou složek původci zamýšlejí to, že složky a) a b) mohou být:

i) baleny, předloženy a zakoupeny jako oddělené prostředky, které se následně použijí ve spojení v kombinační terapii nebo ii) baleny a předloženy společně jako oddělené složky kombinačního balíčku pro použití ve vzájemné souvislosti v kombinační terapii.

Předložený vynález ještě dále poskytuje kit součástí obsahující:

1) složky a) a b) jak jsou zde definovány spolu s

2) pokyny k použití složek ve vzájemné souvislosti.

Tento vynález dále poskytuje použití antagonisty receptoru P2T nebo jeho farmaceuticky přijatelného derivátu k výrobě kitu součástí pro léčení trombózy.

Složky a) a b) jak jsou zde popsány mohou také být formulovány společně jako kombinovaný prostředek (tj. předloženy jako jediný prostředek obsahující antagonistu receptoru P2T a další antitrombotické činidlo).

Další aspekt tohoto vynálezu tedy poskytuje farmaceutický prostředek obsahující:

a) antagonistu receptoru P2T nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát a

b) další antitrombotické činidlo nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát

-10• 4 * ·· ··· • 4 4 · • ♦ · • · · · ·

4« ····

· ·

•4 4444 ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem.

Výhodně je složkou a) sloučeniny obecného vzorce (I) jak je definovaná výše nebo její farmaceuticky přijatelný derivát. Výhodně je složka b) zvolena z protidestičkových činidel, antikoagulačních činidel, fibrinolytických činidel a jakékoli jejich kombinace. Výhodněji je složka b) zvolena z aspirinu, klopidogrelu, tiklopidinu, antagonistů GPIIb/IIIa; přímých inhibitorů trombinu, prekurzorů léčiv přímých inhibitorů trombinu, warfarinu, heparinu, heparinů s nízkou molekulovou hmotností, aktivátoru tkáňového plasminogenu (tPA), tenekteplázy a jakékoli jejich kombinace.

Předložený vynález poskytuje farmaceutický prostředek obsahující:

c) antagonistů receptoru Pžt nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát a

d) další antitrombotické činidlo nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem pro použití při léčení v lékařství, vhodně při léčení trombózy.

Tento vynález dále poskytuje způsob léčení trombózy, který zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství farmaceutického prostředku obsahujícího:

e) antagonistů receptoru P2t nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát a

-11 • · · • · · ·· ···· • · ♦· • · · • · · • *

·« ····

f) další antitrombotické přijatelný derivát činidlo nebo jeho farmaceuticky ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem osobě trpící takovou poruchou nebo mající k ní sklon.

V dalším aspektu předloženého vynálezu je poskytnut způsob přípravy farmaceutického prostředku, který zahrnuje míšení antagonisty receptoru P₂t s dalším antitrombotickým činidlem.

Tento vynález dále poskytuje použití farmaceutického prostředku jak je zde výše definován pro výrobu léčiva pro léčení trombózy.

Další aspekt tohoto vynálezu zahrnuje použití:

a) farmaceutického prostředku obsahujícího antagonistu receptoru P₂t nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem a

b) farmaceutického prostředku obsahujícího další antitrombotické činidlo nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem v terapii, vhodně při léčení trombózy.

Další aspekt tohoto vynálezu poskytuje způsob léčení trombózy, který zahrnuje podávání:

-12 a) farmaceutického prostředku obsahujícího antagonistu receptoru P_2T nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem a

b) farmaceutického prostředku obsahujícího další antitrombotické činidlo nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem a osobě trpící takovou poruchou nebo mající k ní sklon.

V dalším aspektu předloženého vynálezu je poskytnuto použití antagonisty receptoru P_2T nebo jeho farmaceuticky přijatelného derivátu pro výrobu léčiva pro použití v kombinací s dalším antitrombotickým činidlem při léčení trombózy. Výhodně je antagonistou receptoru P_2T sloučenina obecného vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelný derivát.

Vhodné prostředky pro podávání antagonisty receptoru P₂t jsou v oboru známy a zahrnují prostředky známé z WO 92/17488 a WO 94/18216.

Vhodné prostředky pro podávání dalšího antitrombotického činidla jsou popsány v literatuře, například pokud je dalším antitrombotickým činidlem melagatran nebo prekurzor léčiva melagatranu, zahrnují vhodné prostředky prostředky popsané mezi jinými ve WO 94/29336, WO 96/14084, WO 96/16671, WO 97/23499, WO 97/39770, WO 97/45138,

WO 98/16252, WO 99/27912, WO 99/27913, WO 00/13672 a ve WO 00/12043. Jinak může přípravu vhodných prostředků provést odborník v oboru za použití obvyklých technik.

• 4 receptoru Ρ2Ί7 dalšího derivátů mohou být

-13 Vhodné dávky antagonísty antitrombotického činidla a jejich stanoveny lékařem nebo jiným odborníkem v oboru a budou záviset na závažnosti stavu a na léčené osobě, stejně jako na sloučenině (sloučeninách), která je použita (které jsou použity). Příslušné dávky jsou diskutovány v dokumentech dosavadního stavu techniky popisujících antagonísty receptoru P₂t a další antitrombotická činidla, které jsou uvedeny zde výše.

V případě sloučeniny obecného vzorce (I) zahrnují vhodné dávky aktivní sloučeniny při terapeutickém a/nebo profylaktickém léčení savčích, obzvláště lidských, pacientů takové dávky, které poskytují střední plasmatickou koncentrací až do 5 pmol/litr, například v rozmezí od 0,001 do 5 gmol/litr během léčení relevantního stavu. Při jakékoli události bude lékař nebo odborník v oboru schopen určit skutečnou dávku, která bude nej vhodnější pro jednotlivou osobu, což bude se pravděpodobně lišit v závislosti na stavu, který má být léčen, stejně jako na věku, hmotnosti, pohlaví a odpovědi jednotlivé osoby, která má být léčena. Výše uvedené dávky jsou příklady průměrného případu. Mohou samozřejmě existovat individuální případy, kde mají přednost vyšší nebo nižší dávková rozmezí, přičemž i ta spadají do rozsahu tohoto vynálezu.

Farmaceutický prostředek podle tohoto vynálezu může, a obvykle skutečně bude, obsahovat různé další složky známé v oboru, například konzervancia, stabilizátory, činidla regulující viskozitu, emulgátory nebo pufrovací činidla. Farmaceutický prostředek podle tohoto vynálezu tedy bude obvykle obsahovat celkové množství • »

-14a) antagonisty receptoru P₂t a

b) dalšího antitrombotického činidla (aktivních složek) v rozmezí od 0,05 do 99 % hmotnostních, výhodněji v rozmezí od 0,10 do 70 % hmotnostních a ještě výhodněji v rozmezí od 0,10 do 50 % hmotnostních, všechna procenta hmotnostní jsou vztažena k celkovému prostředku.

Příklady provedení vynálezu

Tento vynález je ilustrován, žádným způsobem však omezen, následujícími příklady, ať už za využití sloučeniny A (sloučenina obecného vzorce (I), kde R_x je 3,3,3-trifluorpropyl a R₂ je 2-(methylthio)ethyl) nebo, v příkladu 3, sloučeniny B (sloučenina obecného vzorce (I), kde Ri je propyl a R₂ je atom vodíku, syntetizované v AstraZeneca R & D, Charnwood, Humpries a kol., Br. J. Pharmacol., 115, 1110 až 1116 (1995)).

Příklad 1

Model psí koronární trombózy - sloučenina A a aspirin/heparin

Sloučenina A se použije v kombinací s aspirinem a nefrakcionovaným heparinem v modelu psí koronární trombózy k určení, zda přidání antagonisty receptoru P_2T k těmto standardním protidestičkovým a antikoagulačním činidlům může zlepšit průchodnost koronární arterie po trombolýze tPA. Všechna zvířata se ošetří jak aspirinem v dávce 325 mg, tak nefrakcionovaným heparinem v dávce 80 jedn./kg, pak 17 jedn./kg za hodinu. Testovaná skupina (n = 10) se léčí sloučeninou A (4 qg/kg za minutu i.v.) od doby 10 minut

-15 • · ·· • · · · · · · • · ···· ·· 9 9

9 99 9 před tPA do konce protokolu (2 hodiny po reperfuzi). Skupina ošetřovaná placetem (n = 10) dostává pouze infuzi roztoku chloridu sodného i.v. od doby 10 minut před tPA do konce protokolu (2 hodiny po reperfuzi).

Výsledky experimentů jsou uvedeny v tabulkách 1 a

2.

Průtok krve koronárními arteriemi po úspěšné trombolýze pomocí tPA se významně lépe udržuje ve skupině zvířat dostávajících sloučeninu A vedle aspirinu a heparinu, než ve skupině, které dostává roztok chloridu sodného, aspirin a heparin (tabulka 1).

Tabulka 1

Účinky na koronární trombolýzu pomocí tPA

Roztok chloParametr ridu sodného Sloučenina A

Základní průtok

krve (ml/min)	65,3 + 7,5	62,3 + 8,5 ns
Čas do uzávěru (min)	55,5 + 14,0	62,3 + 14,7 ns
Míra reperfuze	100 %	100 % ns
Doba k dosažení
obnovy průtoku (min)	21,5 + 2,9	20 + 6,1 ns
Trvání obnovení
průtoku (min)	75,0 + 39,9	119,7 + 0,7*
Cyklická průtoková
variace	50 %	0 %*
Reokluze	60 %	0 %*

*P <0,05

-16·· ·« *· • ·· · · ·· · • · ·· · ·

Významně se rovněž u zvířat dostávajících sloučeninu Ά snížila velikost infarktu (P <0,05). Tyto výsledky naznačují, že se dosáhne významného dalšího klinického přínosu, když se kombinuje antagonista P₂t s fibrinolytickým činidlem a standardní protidestičkovou a antikoagulační terapií.

Tabulka 2

Snížení velikosti infarktu

Roztok chloridu sodného Sloučenina A

Ohrožená oblast (cm²) 48,7 + 6,9

Velikost infarktu (cm²) 9,3 + 4,4

49,9+8,4 Ns

4,7 + 4,7 P = 0,034

Příklad 2

Lidská krev in vitro - sloučenina A a klopidogrel

Sloučenina A (500 nM konečná koncentrace) se přidá ke krvi zdravých lidských dobrovolníků, kterým se podává klopidogrel (Sanofi-Winthrop, 75 mg za den po dobu 11 dní). Agregace destiček indukovaná ADP (+/- sloučenina A) se měří za použití impedanční agregometrie celé krve.

Klopidogrel samotný vede k pomalu se vyvíjející neúplné inhibici odpovědi na ADP (tabulka 3). In vitro přidaná sloučenina A navodí úplnou nebo téměř úplnou

-17inhibici odpovědi na nízké až střední koncentrace ADP (až do 30 μΜ) jak před, tak během podávání klopidogrelu (data pro ADP 10 μΜ jsou uvedena v tabulce 3), zatímco podstatná inhibice odpovědi na nejvyšší použitou koncentraci ADP (300 μΜ) vyžaduje kombinaci jak sloučenina A, tak klopidogrelu.

Tabulka 3

Účinek orálního klopidogrelu (75 mg za den) na agregaci destiček indukovanou ADP (10 a 300 μΜ) měřenou v krvi zdravých lidských dobrovolníků ex vivo (+/- sloučenina A (500 nM) přidaná in vitro)

Trvání podávání klopido-	Agregace (ohmy) (střední hodnota + směrodatná
odchyl-ka, r výj imek	i = 7 nebo 8	kromě označených
grelu	ADP 10 μΜ		ADP 300 μΜ
(dny)	bez sloučeniny A	se sloučeninou A	bez sloučeniny A	se sloučeninou A
0	14,9+1,9	0,5+0,7	neměřeno	6, 5 + 3,4
1	13,8+2,3	0,4+0,7	neměřeno	4,2+2,6
2	11,8+3,4	0,4 + 0,6	neměřeno	2,9+2,3
3	10,2+4,5	0,6+0,7	13,9(n = 11	2,7+2,1
11	8,2+4,4	0,6+0,8	ll,4+5,2(n = 3)	2,8+2,8

Příklad 3

Exprese P-selektinu na povrchu membrány destiček hraje důležitou roli při tvorbě konjugátu destička-leukocyt a existují narůstající důkazy o tom, že takové interakce « ·· • · · · · · · · · · ·· ···· »· «· ·· ···· hrají důležitou roli jak při akutní trombóze, tak při zánětlivé etiologii progresivní aterosklerózy. Účinek antagonisty receptoru P_2T (sloučenina B) na expresi P-selektinu na destičkách navozenou ADP (10 μΜ) se zkoumá na lidských promytých destičkách. Účinek sloučeniny B (10 nM) se srovná s účinkem antagonisty GPIIb/IIIa, GR144053 (10 μΜ, Foster a kol., Thromb. Haemostat., 69(6), 559 (1993), syntetizovaného v AstraZeneca, Charnwood). Tyto koncentrace jsou 4- (sloučenina B) a 600-násobně (GR144053) vyšší než příslušné hodnoty IC50 pto inhibici agregace destiček navozené ADP v tomto systému. Výsledky jsou shrnuty v tabulce 4.

Tabulka 4

Účinek sloučeniny B a GR144053 samotných nebo v kombinaci na expresi P-selektinu na destičkách navozenou ADP (10 μΜ) na lidských promytých destičkách

Stavy Exprese P-selektinu (% pozitivních buněk)

Střední hodnota + směrodatná odchylka (n = 3)

Kontrola +GR144053 (10 μΜ) +sloučenina B (10 nM) +GR144053 (10 μΜ)+sloučenina B (10 nM)

13,1+3,3

17,7+1,7

4,9+2,6 7,5+1,6

Antagonista receptoru P_2T v koncentraci konsistentní se známými účinky na agregaci destiček navozenou ADP podstatným způsobem inhibuje expresi P-selektinu • · • ·

-19• · ·· • · · · t ♦ * • · · • · · • · · · · · navozenou ADP za nepřítomnosti nebo v přítomnosti antagonisty GPIIb/IIIa. Naproti tomu antagonista GPIIb/IIIa samotný nemá žádný účinek na expresi P-selektinu v koncentraci významně přesahující koncentraci, která úplně inhibuje agregaci destiček. Tyto výsledky naznačují potenciál pro kombinační terapii antagonistou GPIIb/IIIa a antagonistou receptoru P_2T, kde široké spektrum antiagregačního účinku prvně uvedené třídy je doplněno dodatečný účinkem posledně uvedené třídy na aspekty aktivace destiček, jako je prozánětlivá exprese P-selektinu.

Zkratky

ADP = adenosindifosfát antagonista GPIIb/IIIa = antagonista glykoproteinu Ilb/IIIa PTCR = perkutánní transluminální koronární revaskularizace PTCA = perkutánní transluminální koronární angioplastika TIMI = trombolýza při infarktu myokardu tPA = aktivátor tkáňového plasminogenu

Claims (39)

1. NÁROKY

   1. Kit součástí, vyznačující se tím, že zahrnuje:

   a) antagonistu receptoru P_2T nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát (složka a) a

   b) další antitrombotické činidlo nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát (složka b), kde složky a) a b) jsou každá poskytnuta ve formě (která může být shodná nebo rozdílná), která je vhodná pro podání ve vzájemném spojení.
2. 2. Kit součástí podle nároku 1, vyznačující se tím, že složkou a) je sloučenina obecného vzorce (I):

   OH OH ve kterém buď Ri je 3,3,3-trifluorpropyl a R₂ je 2-(methylthio)ethyl nebo

   Ri je propyl a R₂ je atom vodíku nebo její farmaceuticky přijatelný derivát.

   • · ·* • · · · • · ·

   -21 • · ·· • ·· « · · · · · · ··· ·· ···· ·· ♦· ·· ····
3. 3. Kit součástí podle nároku 1 nebo 2, vyznačuj íc í se t i m, že antitrombotické činidlo je zvoleno z protidestíčkových činidel, antikoagulačních činidel, fibrinolytických činidel a jakékoli jejich kombinace.
4. 4. Kit součástí podle kteréhokoli z nároků 1 až 3, v yznačující se tím, že antitrombotické činidlo je zvoleno ze skupiny sestávající z aspirinu, klopidogrelu, tiklopidinu, antagonistů GPIIb/IIIa, přímých inhibitorů trombinu, prekurzorů léčiv přímých inhibitorů trombinu, warfarinu, heparinu, heparinů s nízkou molekulovou hmotností, aktivátoru tkáňového plasminogenu, tenekteplázy a jakékoli jejich kombinace.
5. 5. Kit součástí podle kteréhokoli z nároků 1 až 4, v yznačující se tím, že antitrombotickým činidlem je přímý inhibitor trombinu a/nebo prekurzor léčiva přímého inhibitoru trombinu.
6. 6. Kit součástí podle nároku 5, vyznačující se tím, že inhibitorem trombinu je melagatran.
7. 7. Kit součástí podle nároku 5, vyznačující se tím, že prekurzorem léčiva melagatranu je EtC^C-CHa-(R)Cgl-Aze-Pab-OH.
8. 8. Kit součástí podle kteréhokoli z nároků 1 až 7, v yznačující se tím, že složky a) a b) jsou vhodné pro sekvenční, oddělené a/nebo souběžné podání.
9. 9. Kit součástí podle kteréhokoli z nároků 1 až 7 pro použití pro lékařské léčení.

   • · • · • ·

   -22 • · • · ·· · ·
10. 10. Kit součástí podle kteréhokoli z nároků 1 až 7 pro použití při léčení trombózy.
11. 11. Způsob léčení trombózy, vyznačující se tím, že zahrnuje použití kitu podle kteréhokoli z nároků 1 až 7 pro podání terapeuticky účinného množství receptoru P₂t a dalšího antitrombotického činidla osobě trpící takovou poruchou nebo mající k ní sklon.
12. 12. Způsob podle nároku 11, vyznačující se tím, že složka a) se podá parenterálně před chirurgickým zákrokem a složka b) se podá orálně po onom chirurgickém zákroku.
13. 13. Použití antagonisty receptoru P₂t podle kteréhokoli z nároků 1 až 12 nebo jeho farmaceuticky přijatelného derivátu pro výrobu kitu součástí pro léčení trombózy.
14. 14. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že zahrnuje:

    a) antagonistu receptoru P_2T nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát a

    b) další antitrombotické činidlo nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem.
15. 15. Farmaceutický prostředek podle nároku 14, vyznačující se tím, že antagonistou receptoru P₂t je sloučenina obecného vzorce (I) podle nároku 2 nebo její farmaceuticky přijatelný derivát.
16. 16. Farmaceutický prostředek podle nároku 14 nebo 15, vyznačující se tím, že antitrombotické činidlo je zvoleno z protidestičkových činidel, antikoagulačních činidel, fibrinolytických činidel a jakékoli jejich kombinace.
17. 17. Farmaceutický prostředek podle kteréhokoli z nároků 14 až 16, vyznačující se tím, že antitrombotické činidlo je zvoleno ze skupiny sestávající z aspirinu, klopidogrelu, tiklopidinu, antagonistů GPIIb/IIIa, přímých inhibitorů trombinu, prekurzorů léčiv přímých inhibitorů trombinu, warfarinu, heparinu, heparinů s nízkou molekulovou hmotností, aktivátoru tkáňového plasminogenu, tenekteplázy a jakékoli jejich kombinace.
18. 18. Farmaceutický prostředek podle kteréhokoli z nároků 14 až 17, vyznačující se tím, že antitrombotickým činidlem je přímý inhibitor trombinu a/nebo prekurzor léčiva přímého inhibitoru trombinu.
19. 19. Farmaceutický prostředek podle nároku 18, vyznačující se tím, že inhibitorem trombinu je melagatran.
20. 20. Farmaceutický prostředek podle nároku 18, vyznačující se tím, že prekurzorem léčiva melagatranu je EtO₂C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH.
21. 21. Farmaceutický prostředek podle kteréhokoli z nároků 14 až 20 pro použití pro lékařské léčení.

    -24·« 99 ·· ·· ·· ♦ · • ·· · · · · · · * · • · » * · ·» · · ·· ·9· ······ * ··· ♦ · 9 · 9 9 9

    99 9999 99 99 99 999
22. 22. Farmaceutický prostředek podle kteréhokoli z nároků 14 až 20 pro použití při léčení trombózy.
23. 23. Použití farmaceutického prostředku podle kteréhokoli z nároků 14 až 20 pro výrobu léčiva pro léčení trombózy.
24. 24. Způsob léčení trombózy, vyznačující se tím, že' zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství farmaceutického prostředku podle kteréhokoli z nároků 14 a 20 osobě trpící takovou poruchou nebo mající k ní sklon.
25. 25. Způsob výroby farmaceutického prostředku podle kteréhokoli z nároků 14 až 20, vyznačující se tím, že zahrnuje míšení antagonisty receptoru P₂t s dalším antitrombotickým činidlem.
26. 26. Použití

    a) farmaceutického prostředku obsahujícího antagonistu receptoru P_2T nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem a

    b) farmaceutického prostředku obsahujícího další antitrombotické činidlo nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem v terapii.
27. 27. Použití

    a) farmaceutického prostředku obsahujícího antagonistu receptoru P₂t nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát • « ······«·· * • · · · · · · ♦ · · ·· ···· ·· ·· ·· ···· ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem a

    b) farmaceutického prostředku obsahujícího další antitrombotické činidlo nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem při léčení trombózy.
28. 28. Použití farmaceutického prostředku podle nároku 26 nebo 27, kde antagonistou receptoru P_2T je sloučenina obecného vzorce (I) podle nároku 2.
29. 29. Způsob léčení trombózy, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání osobě trpící takovým stavem nebo mající k němu sklon:

    a) farmaceutického prostředku obsahujícího antagonistu receptoru P₂t nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem a

    b) farmaceutického prostředku obsahujícího další antitrombotické činidlo nebo jeho farmaceuticky přijatelný derivát ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem.
30. 30. Způsob podle nároku 29, vyznačující se tím, že antagonistou receptoru P_2T je sloučenina obecného vzorce (I) podle nároku 2.
31. 31. Způsob podle nároku 29 nebo 30, vyznačuj íc í se t í m, že antitrombotické činidlo je zvoleno

    -26«· 4 44 44 444 4 · • · · 4 4 · · ···

    44 4444 ·» ·· 4·4· z protidestičkových činidel, antikoagulačních činidel a jakékoli jejich kombinace.
32. 32. Způsob podle kteréhokoli z nároků 29 až 31, vyznačující se tím, že antitrombotické činidlo je zvoleno ze skupiny sestávající z aspirinu, klopidogrelu, tiklopidinu, antagonistů GPIIb/IIIa, přímých inhibitorů trombinu, prekurzorů léčiv přímých inhibitorů trombinu, warfarinu, heparinu, heparinů s nízkou molekulovou hmotností, aktivátoru tkáňového plasminogenu, tenekteplázy a jakékoli jejich kombinace.
33. 33. Způsob podle kteréhokoli z nároků 29 až 32, vyznačující se tím, že antitrombotickým činidlem je přímý inhibitor trombinu a/nebo prekurzor léčiva přímého inhibitoru trombinu.
34. 34. Způsob podle nároku 33, vyznačující se tím, že inhibitorem trombinu je melagatran.
35. 35. Způsob podle nároku 33, vyznačující se tím, že prekurzorem léčiva melagatranu je EtO2C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH.
36. 36. Způsob podle kteréhokoli z nároků 29 až 35, vyznačující se tím, že složka a) je parenterálním prostředkem a složka b) je orálním prostředkem.
37. 37. Způsob podle kteréhokoli z nároků 29 až 36, vyznačující se tím, že složka a) se podá parenterálně před chirurgickým zákrokem a složka b) se podá orálně po onom chirurgickém zákroku.

    -27«· 44

    4 * 4 4

    4 4 4 «k 44

    4 4 4 «

    4 4 «4 • 4 4

    44 4444

    4 4 4 4

    44 44

    44 4 4

    4 4 4 4

    4 4 4

    4 4 4

    4 4 4 «4 4*4 4
38. 38. Použití antagonisty receptoru P2T nebo jeho farmaceuticky přijatelného derivátu pro výrobu léčiva pro použití v kombinaci s dalším antitrombotickým činidlem při léčení trombózy.
39. 39. Použití sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 2 nebo jejího farmaceuticky přijatelného derivátu pro výrobu léčiva pro použití v kombinaci s dalším antitrombotickým činidlem při léčení trombózy.