CZ20012908A3 - Analogy (1R, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-1-methanolu - Google Patents

Description

Vynález se týká skupiny nových analogů (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-metanolu, způsobu jejich výroby a farmaceutického prostředku s jejich obsahem.

Dosavadní stav techniky

Retroviry tvoří podskupinu virů RNA, u nichž v případě replikace musí nejprve dojít k reversní transkripci RNA jejich genomu do DNA (transkripce obvykle popisuje syntézu RNA z DNA). Jakmile je dosaženo formy DNA, je možno začlenit genom viru do genomu hostitelské buňky a pak již je možno využít pro replikaci aparátu buněk hostitele pro transkripci a translaci. Pak již je virová DNA prakticky nerozeznatelná od DNA hostitele a v tomto stavu může virus přežívat v buňkách.

Jeden z typů retrovirů, virus HIV byl opakovaně reprodukovatelně izolován z nemocných získaným syndromem imunodeficience, AIDS nebo z nemocných s příznaky, kreré často předcházejí tomuto syndromu. AIDS je imunosupresivní nebo imunodestruktivní onemocnění, které predisponuje zasažené pacienty k podlehnutí běžné infekci. Charakteristicky je AIDS spojen s progresivním úbytkem T-buněk, zvláště pomocné podskupiny těchto buněk, která nese povrchové markéry CD4. HIV je citopathický virus, který přednostně infikuje a ničí T-buňky, nesoucí markér CD4 a nyní se běžně uznává, že HIV je příčinou • ·

vzniku AIDS. Další klinické stavy, jako syndrom, příbuzný AIDS, ARC, progresivní generalizovaná lymfadenopatie PGL, Kaposiho sarkom, thrombocytopenická purpura, neurologické stavy, spojené s AIDS, jako demence, roztroušená skleróza nebo tropická paraparéza a také stavy, při nichž je možno prokázat protilátky proti HIV nebo přímo virus HIV včetně těchto stanovení u nemocných bez příznaků, je rovněž možno léčit příslušnou protivirovou léčbou.

Dalšími viry RNA, které jsou příčinou stále závažnějších zdravotních problémů v mezinárodnm měřítku jsou viry, které vyvolávají hepatitidu, odlišnou od typu A i od typu B. Nejméně 80 % chronických případů takové hepatitidy, zejména po transfuzích, je nyní vyvoláno virem, který byl identifikován jako virus hepatitidy C, přičemž tento virus je pravděpodobně příčinou všech případů hepatitidy po transfuzích tam, kde jsou krevní produkty vyšetřovány na přítomnost viru hepatitidy B. Přibližně polovina případů akutní infekce hepatitidou C se v průběhu několika měsíců samovolně upraví, zbývající polovina však přechází do chronického stavu a v řadě těchto případů vzniká potenciální nebezpečí cirhózy a jaterních zhoubných nádorů. Struktura viru hepatitidy C, zejména jeho genomu již byla objasněna a virus byl charakterizován jako RNA s jednoduchým řetězcem, podobným flavivirům.

Virus hepatitidy B, HBV je DNA malých rozměrů, virus je infekční pro člověka. Náleží do skupiny blízce příbuzných virů, označovaných jako hepadnaviry. Tyto viry selektivně infikují savce nebo ptáky, například kachny. Poslední poznatky, týkající se mechanismu replikace genomu hepadnavirů prokazují důležitost reversní • · • · transkripce meziproduktu RNA, takže logickým chemotherapeutickým cílem bude pravděpodobně reversní transkriptáza. HBV je pathogen s celosvětovým významem. Virus je etiologicky spojen s primárním karcinomem jaterních buněk a pravděpodobně způsobuje celosvětově 80 % těchto zhoubných nádorů. Klinické projevy infekce HBV jsou například bolest hlavy, horečka, únava, nausea, zvracení, nechuť k jídlu a bolest břicha. Replikace viru je obvykle řízena imunitní odpovědí, přičemž u lidí trvá úprava tohoto stavu týdny nebo měsíce, avšak při závažnější infekci může vznikat chronické jaterní onemocnění, tak jak bylo uvedeno svrchu.

V US 4916224 jsou popsány 2', 3' -dideoxy-2', 3'didehydronukleosidy s uhlíkovým kruhem a jejich použití při léčení infekce HIV. V mezinárodní patentové přihlášce WO 96/29336 se popisují maskované monofosfáty nukleosidů a jejich analogy pro léčení infekce HIV. Publikace Wang a další, Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters 8, str. 1585-1588, 1998 uvádí syntézu 2', 3'-didehydro-2',3'dideoxyadenosinu s L-uhlíkovým kruhem a použití této látky k léčení infekce HIV.

Nyní bylo zjištěno, že některé fosforamidáty (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-1-metanolu je možno použít k léčení virových infekcí, zvláště hepatitidy B a retrovirových infekcí, zvláště HIV. Sloučeniny, které jsou předmětem vynálezu mají další farmakokinetické vlastnosti, v jejichž důsledku jde o látky, vhodné k léčebnému použití.

• ·

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoří analogy (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-metanolu obecného vzorce I

c=o (l) kde

R¹ znamená atom vodíku, C6-C14aryl nebo heteroaryl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny Cl-C6alkoxyskupina, nitroskupina, atom halogenu, aminoskupina, hydroxyskupina, karboxylátová skupina a její estery, karboxyalkyl, -CONHR⁶ a -CONR⁶R⁷, kde R^s a R⁷, stejné nebo odlišné se nezávisle volí ze skupiny Cl-C8alkyl, C1-C8 alkylaryl nebo C6-C14aryl,

R² a R³ se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku,

Cl-C8alkyl, C3-C8cykloalkyl, C2-C8alkenyl, C5-C8cykloalkenyl nebo C6-C14aryl nebo aralkyl, přičemž každý z Cl-C8alkylových, C3-C8cykloalkylových,

C2-C8alkenylových, C5-C8cykloalkenylových, • · · · · ·· • · · · · ·· • · ····· ♦ · • · · · ·· popřípadě zbytků je substituentů ze skupiny

C6-C14arylových nebo aralkylových substituován 1 nebo větším počtem

Cl-C8alkyl, atom halogenu, hydroxyskupina, alkoxyskupina, aminoskupina, aminoalkyl, aminodialkyl, -SH, thioalkyl, heterocyklický zbytek, karboxylátová skupina a její estery, karboxyalkyl, -CONHR⁶ a -CONR⁶R⁷, kde R⁶ a R⁷, stejné nebo odlišné se nezávisle volí ze skupiny Cl-C8alkyl, C1-C8 alkylaryl nebo C6-C14aryl, nebo R² a R³ společně tvoří 3 až 8-členný kruh, R⁴ znamená -OR⁸, -NR⁸R⁹ nebo -SR⁸, kde R⁸ a R⁹ stejné nebo odlišné se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, Cl-C8alkyl, C3-C8cykloalkyl, C2-C8alkenyl, C5-C8cykloalkenyl, aralkyl, heteroaryl nebo C6-C14aryl, přičemž každý z Cl-C8alkylových, C3-C8cykloalkylových, C2-C8alkenylových, C5-C8cykloalkenylových, C6-C14arylových, heteroarylových nebo aralkylových zbytků je popřípadě substituován 1 nebo větším počtem substituentů ze skupiny Cl-C8alkyl, atom halogenu, hydroxyskupina, alkoxyskupina, aminoskupina, aminoalkyl, aminodialkyl, -SH, thioalkyl, heterocyklický zbytek, karboxylátová skupina a její estery, karboxyalkyl, -CONHR⁶ a -CONR⁶R⁷, kde R⁶ a R⁷, stejné nebo odlišné se nezávisle volí ze skupiny

Cl-C8alkyl, C1-C8 alkylaryl nebo C6-C14aryl,

R⁵ znamená atom vodíku, Cl-C8alkyl nebo C6-C14aryl nebo

R² a R⁵ společně tvoří 5 nebo 6-členný kruh nebo R³ a R⁵ společně tvoří 6 nebo 6-členný kruh, nebo farmaceuticky přijatelné deriváty těchto látek.

Vynález se tedy týká sloučenin obecného vzorce I,

kde

R¹ znamená atom vodíku, C6-C14aryl nebo heteroaryl·, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny Cl-C6alkoxyskupina, nitroskupina, atom halogenu, aminoskupina, hydroxyskupina, karboxylátová skupina a její estery, karboxyalkyl, -CONHR⁶ a -CONR^SR⁷, kde R° a R⁷, stejné nebo odlišné se nezávisle volí ze skupiny Cl-C8alkyl, C1-C8 alkylaryl nebo C6-C14aryl,

R² a R³ se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, Cl-C8alkyl, C3-C8cykloalkyl, C2-C8alkenyl, C5-C8cykloalkenyl nebo C6-C14aryl nebo aralkyl, přičemž každý z Cl-C8alkylových, C3-C8cykloalkylových, C2-C8alkenylových, C5-C8cykloalkenylových, C6-C14arylových nebo aralkylových zbytků je popřípadě substituován 1 nebo větším počtem substituentů ze skupiny Cl-C8alkyl, atom halogenu, hydroxyskupina, alkoxyskupina, aminoskupina, aminoalkyl, aminodialkyl, -SH, thioalkyl, heterocyklický zbytek, karboxylátová skupina a její estery, karboxyalkyl, -CONHR⁶ a -CONR^SR⁷, kde R^s a R⁷, stejné nebo odlišné se nezávisle volí ze skupiny Cl-C8alkyl, C1-C8 alkylaryl nebo C6-C14aryl, nebo R² a R³ společně tvoří 3 až 8-členný kruh,

• ·

R⁴ znamená -OR⁸, -NR⁸R⁹ nebo -SR⁸, kde R⁸ a R⁹ stejné nebo odlišné se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, Cl-C8alkyl, C3-C8cykloalkyl, C2-C8alkenyl, C5-C8cykloalkenyl, aralkyl, heteroaryl nebo C6-C14aryl, přičemž každý z Cl-C8alkylových, C3-C8cykloalkylových, C2-C8alkenylových, C5-C8cykloalkenylových, C6-C14arylových, heteroarylových nebo aralkylových zbytků je popřípadě substituován 1 nebo větším počtem substituentu ze skupiny Cl-C8alkyl, atom halogenu, hydroxyskupina, alkoxyskupina, aminoskupina, aminoalkyl, aminodialkyl, -SH, thioalkyl, heterocyklický zbytek, karboxylátová skupina a její estery, karboxyalkyl, -CONHR⁵ a -CONR⁶R⁷, kde R⁶ a R⁷, stejné nebo odlišné se nezávisle volí ze skupiny

Cl-C8alkyl, C1-C8 alkylaryl nebo C6-C14aryl,

R⁵ znamená atom vodíku, Cl-C8alkyl nebo C6-C14aryl nebo

R² a R⁵ společně tvoří 5 nebo 6-členný kruh nebo

R³ a R⁵ společně tvoří 6 nebo 6-členný kruh, nebo farmaceuticky přijatelných derivátů těchto látek.

Podle jednoho z provedení vynálezu tvoří podstatu vynálezu sloučeniny obecného vzorce II

(II) • · kde

R¹ znamená atom vodíku, C6-C14aryl nebo heteroaryl, popřípadě substituovaný jedním nebo větším počtem substituentů ze skupiny Cl-C6alkoxyskupina, nitroskupina, atom halogenu, aminoskupina, karboxylátová skupina a hydroxyskupina,

R² a R³ se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, Cl-C6alkyl, C3-C8cykloalkyl, C6-C14aryl nebo aralkyl, R⁴ znamená -OR¹⁰, -NHR¹⁰, nebo -SR¹⁰, kde R¹⁰ znamená atom vodíku, Cl-C6alkyl, C3-C8cykloalkyl nebo aralkyl, nebo -NHR¹¹, kde R¹¹ znamená Cl-C6alkyl, aralkyl nebo C6-C14aryl, jakož i farmaceuticky přijatelné deriváty těchto látek.

Podle dalšího provedení vynálezu tvoří podstatu vynálezu také sloučeniny obecného vzorce III nh₂

(HO kde R¹² znamená skupinu

\ O \ li

Oýp—(0H)₂ /n • · · · kde n znamená O, 1 nebo 2, přičemž skupina R¹² je popřípadě substituována C6-C14arylovou skupinou.

Analogy podle vynálezu zahrnují diastereomery, které se od sebe liší absolutní konfigurací na atomu fosforu. Diastereomery mohou být přítomny ve formě jediného isomeru nebo jako směs diastereomerů.

Pod pojmem „alkyl se rozumí nasycený alifatický uhlovodíkový zbytek s přímým nebo rozvětveným řetězcem, obsahujícím uvedený počet uhlíkových atomů nebo tam, kde počet není uveden, s výhodou 1 až 10 a zvláště 1 až 8 atomů uhlíku. Jako příklady alkylových zbytků je možno uvést methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sek.butyl, terc.butyl, pentyl, isoamyl, n-hexyl a podobně.

Alkenylový zbytek jako takový nebo v kombinaci s jakýmkoliv jiným zbytkem znamená mono- nebo polynenasycený alifatický uhlovodíkový zbytek s přímým nebo rozvětveným řetězcem, obsahující uvedený počet atomů uhlíku nebo v případě, že tento počet není uveden, s výhodou 2 až 10 a zvláště 2 až 6 atomů uhlíku. Jako příklady alkenylových zbytků je možno uvést ethenyl, propenyl, isopropenyl, butenyl, isobutenyl, pentenyl, hexenyl, hexadienyl a podobně.

Alkoxyskupina znamená alkyletherový zbytek s alkylovou skupinou, tak jak byla definována svrchu. Jako příklady těchto zbytků je možno uvést methoxyskupinu, ethoxyskupinu, n-propoxyskupinu, isopropoxyskupinu, • · · ·

I n-butoxyskupinu, isobutoxyskupinu, sek.butoxyskupinu, terč.butoxyskupinu a podobně, přičemž zvláště výhodným zbytkem je methoxyskupina.

Atomem halogenu může být v průběhu přihlášky atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu.

Arylovým zbytkem je uhlíkový aromatický zbytek, jako fenyl nebo naftyl, obsahující uvedený počet uhlíkových atomů, s výhodou 6 až 14 atomů uhlíku, zvláště 6 až 10 atomů uhlíku, přičemž tento zbytek je popřípadě substituován jedním nebo větším počtem substituentů ze skupiny Cl-C6alkoxyskupina, například methoxyskupina, nitroskupina, atom halogenu, například chloru, aminoskupina, zbytek karboxylátu a hydroxyskupina. Jako příklady arylových zbytků lze uvést fenyl, naftyl, indenyl, indanyl, azulenyl, fluorenyl, anthracenyl a podobně.

Heterocyklický zbytek jako takový nebo v kombinaci s jiným zbytkem znamená stabilní 3 až 7-členný monocyklický heterocyklický zbytek nebo 8 až 11-členný bicyklický heterocyklický zbytek, nasycený nebo nenasycený, v případě monocyklického zbytku popřípadě kondenzovaný s benzenovým kruhem. Každý heterocyklický zbytek obsahuje jeden nebo větší počet atomů uhlíku a 1 až 4 heteroatomy ze skupiny atom dusíku, kyslíku a síry. V případě atomu dusíku a síry se pod tímto pojmem rozumí i jakékoliv oxidované formy dusíku a síry a kvarternizovaná forma dusíku. Heterocyklický zbytek může být vázán jakýmkoliv atomem uhlíku nebo heteroatomem v kruhu, pokud vzniká stálá struktura. Výhodné heterocyklické zbytky zahrnují monocyklické zbytky, obsahující 5 až 7 členů a heterocyklické bicyklické zbytky s 8 až 10 atomy v kruhu. Jako příklad těchto skupin je možno uvést imidazolyl, imidazolínoyl, imidazolidinyl, chinolyl, isochinolyl, indolyl, indazolyl, indazolinolyl, perhydropyridazyl, pyridazyl, pyridyl, pyrrolyl, pyrrolinyl, pyrrolidinyl, pyrazolyl, pyrazinyl, chinoxolyl, piperidinyl, pyranyl, pyrazolinyl, piperazinyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, morfolínyl, thiamorfolinyl, furyl, thienyl, triazolyl, thiazolyl, karbolinyl, tetrazolyl, thiazolidinyl, benzofuranoyl, thiamorfolinylsulfon, oxazolyl, benzoxazolyl, oxopiperidinyl, oxopyrrolidinyl, oxoazepinyl, azepinyl, isoxozolyl, isothiazolyl, furazanyl, tetrahydropyranyl, tetrahydrofuranyl, thiazolyl, thiadiazolyl, dioxolyl, dioxinyl, oxathiolyl, benzodioxolyl, dithiolyl, thiofenyl, tetrahydrothiofenyl, sulfolanyl, dioxanyl, dioxolanyl, tetrahydrofurodihydrofuranyl, tetrahydropyranodihydrofuranyl, dihydropyranyl, tetrahydrofurofuranyl a tetrahydropyranofuranyl.

Farmaceuticky přijatelným derivátem se rozumí v průběhu přihlášky jakákoliv farmaceuticky přijatelný sůl, ester, sůl esteru nebo jiný derivát uvedených látek, který po podání příjemci uvolní přímo nebo nepřímo analog podle vynálezu nebo jeho účinný metabolit nebo zbytek. Zvláště výhodnými deriváty a prekursory jsou takové látky, které zvyšují biologickou dostupnost analogů podle vynálezu po jejich podání u savců, například tak, že se po perorálním podání sloučenina snadněji vstřebává do krevního oběhu, nebo takové deriváty, které usnadní přesun požadovaného analogu do určitého biologického prostředí, například do mozku nebo do lymfatického systému.

• · · · • ·

Sloučeniny obecných vzorců I, II a III a jejich farmaceuticky přijatelné deriváty budou v průběhu přihlášky uváděny jako sloučeniny podle vynálezu.

V následující tabulce I jsou shrnuty výhodné látky obecných vzorců I a II.

Tabulka 1.

Příklad	R’	R2	R3	R4	R5
2	Ph	H	Me	OMe	H
3	Ph	H	Me	OEt	H
4	Ph	Me	H	OMe	H
5	Ph	H	Me	OCHzPh	H
6	Ph	H	CHaPh	OMe	H
7	Ph	H	CHaPh	OEt	H
8	H	H	CHzPh	OH	H
9	Ph	Me	Me	OMe	H
10	Ph	H	CH2Ph(4-0-t-Bu)	OMe	H
11	Ph	H	Me	O-i-Pr	H
12	Ph	H	Me	O-t-Bu	H
13	Ph	H	Me	OCH2-t-Bu	H
14	Ph	H	Me	OCH^	H
15	Ph	H	CH2CHMe2	OMe	H
16	Ph	H	CH2Ph(4-0Me)	OMe	H
17	Ph	CHzPh	H	OMe	H

Příklad	R1	R2	R3	R4	R5
18	Ph	CHaCHMez	H	OMe	H
19	Ph	oí	H	OMe	H
20	Ph	o?	H	OMe	H
21	Ph	CHMea	H	OMe	H
22	Ph	CHsCOzMe	H	OMe	H
23	Ph	H	R3/Rs = (CH2)3	OMe	-
24	Ph	H	CH(Me)Et	OMe	H
25	Ph	H	n-Pr	OMe	H
25	Ph	H	CH2Ph	O-i-Pr	H
27	Ph	H	CH2Ph	O-t-Bu	H
28	Ph	H	CH2Ph	OCHz-t-Bu	. H
29	Ph	H	CH2Ph	OCH2Ph	H
30	(2-C02Me)Ph	H	Me	OMe	H
31	(4-PhC0CH=CH)Ph	H	Me	OMe	H
32	Ph	H	H	OMe	H
33	Ph	H	i-Pr	OMe	H
34	Ph.	H	CHzCHzSMe	OMe	H
35	Ph	Me	Me	OEt	H
36	Ph	Me	Me	O-i-Pr	H
37	Ph	Me	Me	0CH2-t-Bu	H
38	Ph	-	R2/R3 = (CH2)4	OMe	H
39	Ph	-	R2/R3 = (CH2)s	OMe	H
40	Ph	H	CHzCOzMe	OMe	H
41	(4-CI)Ph	H	Me	OMe	H
42	H	Me	H	NHMe	H

• · · · · · • ·

Z výhodných sloučenin podle vynálezu je možno uvész následující látky:

(IR, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O- (fenylmethoxy-L-alaninyl) fosforamidát, (IR, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylethoxy-L-alaninyl) fosforamidát, (IR, cis) - 4- (6-amino-9H-purin-9-yl) -2-cyklopenten-l-methanol-O- (fenylmethoxy-D-alaninyl) fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl) -2-cyklopenten-l-methanol-O- (fenylbenzyloxy-L-alaninyl) fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O- (fenylmethoxy-L-fenylalaninyl) fosforamidát, (lR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl) -2-cyklopenten-l-methanol-O- (fenylethoxy-L-fenylalaninyl) fosforamidát, disodná sůl (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O- (L-fenylalaninyl) fosforamidátu, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylmethoxy-α,a-dimethylglycinyl)fosforamidát, (IR, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-[fenylmethoxy-(0-terc.butyltyrosinyl)]fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0- (fenylisopropoxy-L-alaninyl) fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0- (fenylterc.butoxy) -L-alaninyl) fosforamidát, (IR, cis)-4-{6-amino-9H-purin-9-yl) -2-cyklopenten-l-methano1-0-[fenyl(2,2-dimethylpropoxy)-L-alaninyl)fosforamidát, (IR, cis)- 4-(6-amino-9H-purir.-9-yl) -2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylcyklopropylmethoxy-L-alaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl) -2-cyklopenten-l15

-methanol-O-(fenylmethoxy-L-leucinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-[fenylmethoxy-L-(0-methyltyrosinyl)]fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylmethoxy-D-fenylalaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylmethoxy-D-leucinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylmethoxy-D-tryptofanyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylmethoxy-D-tryptofanyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylmethoxy-D-valinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenyldimethoxy-D-aspartyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylmethoxy-L-prolinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-1-methanol-0-(fenylmethoxy-L-isoleucinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylmethoxy-L-norvalin)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylisopropoxy-L-fenylalaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methano1-0-(fenylterč.butoxy-L-fenylalaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-[fenyl(2,2-dimethylpropoxy)-L-fenylalaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylbenzyloxy-L-fenylalaninyl)fosforamidát, • · (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-[(2-karbomethoxy)fenymethoxy-L-alaninyl]fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-[4-(3-oxo-3-fenylpropenylfenylmethoxy-L-alaninyl]fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylmethoxyglycinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylmethoxy-L-valinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-[fenyl(methoxy)-L-methionyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylethoxy-α,a-dimethylglycinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylisopropoxy-α,a-dimethylglycinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-[fenyl(2,2-dimethylpropoxy)-a,a-dimethylglycinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenymethoxycyklopentanglycinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenymethoxycyklohexanglycinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenydimethoxy-L-aspartyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-[(4-chlor)fenymethoxy-L-alaninyl)fosforamidát, sodná sůl (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-[L-(N• · • ·

-methyl) amino) alaninyl] fosforamidátu, a farmaceuticky přijatelné deriváty těchto látek.

V dalším provedení se vynález týká sloučeniny obecného vzorce II, v němž R¹ znamená atom vodíku nebo Cl-C14aryl, R² znamená Cl-C6alkyl nebo aralkyl, R³ znamená atom vodíku, Cl-C6alkyl nebo aralkyl a R⁴ znamená -OR¹⁰, kde R¹⁰ znamená Cl-C6alkyl nebo C3-C8cykloalkyl.

Ve výhodném provedení se vynález týká sloučenin obecného vzorce II, v němž R znamená C6-C14aryl, R znamená methyl, R³ znamená atom vodíku a R⁴ znamená -OR¹⁰, kde R¹⁰ znamená methyl nebo ethyl. S výhodou jde o sloučeniny, v nichž R¹ znamená fenyl.

V dalším provedení se vynález týká sloučenin obecného vzorce II, v němž R¹ znamená atom vodíku.

Podle dalšího provedení se vynález týká sloučenin obecného vzorce I a II, v nichž R² a R³ neznamenají současně atomy vodíku.

V případě, že R² a R³ mají odlišný význam, je výhodná L-konfigurace přírodně se vyskytujících aminokyselin.

Výhodnými sloučeninami podle vynálezu jsou následující látky:

(IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O- (fenylmethoxy-L-alaninyl)fosforamidát, (IR, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-1-methanol-O-(fenylethoxy-L-alaninyl)fosforamidát, (IR, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l• · • · * · · · · ···· ···· · · * * · ’ ♦ · • ··· ·····» « ♦ · 18 · ...·»··· ······· · · · · ♦· · ·

-methanol-O- (fenylmethoxy-D-alaninyl) fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylbenzyloxy-L-alaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl) -2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylmethoxy-L-fenylalaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylethoxy-L-fenylalaninyl)fosforamidát, disodná sůl (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(L-fenylalaninyl)fosforamidátu, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-1-methanol-O-(fenylmethoxy-α,a-dimethylglycinyl)fosforamidát, a farmaceuticky přijatelné deriváty těchto látek.

Farmaceuticky přijatelné soli sloučenin podle vynálezu zahrnují soli, vytvořené na bazické nebo kyselé části molekuly. Soli na bazické části mohou být vytvořeny s organickými karboxylovými kyselinami, jako jsou kyselina octová, mléčná, vinná, jablečná, isethinová, laktobionová a jantarová, je však možno použít také organické sulfonové kyseliny, jako jsou kyselina methansulfonová, ethansulfonová, benzensulfonová a p-toluensulfonová a také anorganické kyseliny, jako jsou kyselina chlorovodíková, sírová, fosforečná a sulfamová. Soli v kyselé části molekuly je možno vytvořit pomocí příslušné baze, například alkalického kovu, jako sodíku, kovu alkalických zemin jako hořčíku nebo vápníku, může také jít o amonné a amoniové soli.

Výhodné estery sloučenin podle vynálezu je možno nezávisle volit z následujících skupin: (1) estery karboxylových kyselin, získané esterifikací hydroxyskupiny, v nichž má karboxylová kyselina přímý • · · · nebo rozvětvený alkylový řetězec a jde tedy například o acetyl, n-propyl, terc.butyl nebo n-butyl, dále může být řetězcem kyseliny alkoxyalkyl, jako methoxymethyl, aralkyl, jako benzyl, aryloxyalkyl, jako fenoxymethyl, aryl, jako fenyl, popřípadě substituovaný například atomem halogenu, Cl-C4alkylovou skupinou, Cl-C4alkoxyskupinou nebo aminoskupinou, (2) sulfonátové estery, například alkyl- nebo aralkylsulfonylestery, například methansulfonyl, (3) estery s aminokyselinami, obsahující například L-valyl nebo isoleucyl, (4) fosfonátové estery a (5) mono-, di- nebo trifosfátové estery. Fosfátové estery mohou být dále esterifikovány, například Cl-C20alkoholem nebo jeho reaktivním derivátem, nebo 2,3-diC6-C24alylglycerolem.

Ve svrchu uvedených esterech, není-li výslovně uvedeno jinak, mohou alkylové zbytky s výhodou obsahovat 1 až 18 atomů uhlíku, zvláště 1 až 6 atomů uhlíku a zvláště výhodně 1 až 4 atomy uhlíku. Cykloalkylová skupiny v těchto esterech s výhodou obsahují 3 až 6 atomů uhlíku. Arylové skupiny těchto esterů jsou s výhodou fenolové skupiny.

Estery typu karboxylátů mohou zahrnovat alkylestery, cykloalkylestery, aralkylestery a arylestery.

Sloučeniny obecného vzorce I a II je možno připravit modifikací postupů, které byly popsány v publikaci Biochem. Biophys. Res. Commun. 225: 363-369, 1997.

Součást podstaty vynálezu tvoří také způsob výroby sloučenin obecného vzorce I, který spočívá v tom, že se nechá reagovat sloučenina vzorce IV

(IV) se sloučeninou obecného vzorce VI

M) kde jednotlivé obecné symboly mají význam, uvedený u vzorce I.

Reakci je možno uskutečnit v pyridinu, ve směsi pyridinu a tetrahydrofuranu nebo v acetonitrilu v přítomnosti terč.butylmagnesiumchloridu, jak je popsáno ve svrchu uvedené publikaci. Meziprodukty obecného vzorce VI je možno připravit způsobem podle mezinárodní přihlášky WO 96/29336 nebo podle publikací McGuigan a další, J. Med. Chem., 1996, 39, 1748-1753, a McGuigan a další, Antiviral Res., 1997, 35, 195-204.

Sloučeniny vzorce IV je možno připravit způsobem podle příkladu 1, uvedeného dále v příkladové části nebo jakýmkoliv jiným známým způsobem.

Sloučeniny obecného vzorce II je možno připravit tak, že se nechá reagovat sloučenina vzorce IV

NH₂

se sloučeninou obecného· vzorce V

kde obecné symboly máji význam, uvedený u vzorce Ir.

Reakci je možno uskutečnit v pyridinu, ve směsi pyridinu a tetrahydrofuranu nebo v acetonitrilu v přítomnosti terč.butylmagnesiumchloridu, jak je popsáno ve svrchu uvedené publikaci. Meziprodukty obecného vzorce VI je možno připravit způsobem podle mezinárodní přihlášky WO 96/29336 nebo podle publikací McGuigan a další, J. Med. Chem., 1996, 39, 1748-1753, a McGuigan a další, Antiviral Res., 1997, 35, 195-204.

O-monofosfátové sloučeniny vzorce III je možno připravit tak, že se na sloučeninu vzorce IV působí příslušným fosforylačním činidlem, například fosforylchloridem podle publikace M. Yoshikawa, T. Kato a T. Takenishi, Bulletin Chem. Soc. Japan, 1969, 42, 3505. Odpovídající O-di- a O-trifosfáty je možno připravit způsobem podle publikace N. C. Mishra a A. D. Broom, J. Chem. Soc. Chem. Commun., 1991, 1276 nebo způsobem, popsaným v publikacích „Nucleotide Analogs, K. H. Sheit, John Wiley and Sons, New York 1980, str. 211-215, a D. E. Hoard a D. G. Ott, J. Amer, Chem. Soc. 1965, 87, 1785.

Sloučeniny obecného vzorce III je také možno připravit jakýmkoliv známým způsobem.

Rozdělení izomerů je možno uskutečnit známými postupy, například vysokotlakou kapalinovou chromatografii při použití chirálních sloupců, zvláště při použití kapalného oxidu uhličitého jako mobilní fáze, nebo krystalizací solí s chirálními kyselinami nebo bázemi.

Fosfátové isomery je možno od sebe oddělit chromatografii při použití superkritické kapaliny, • R

například na sloupci Chiralpak AS použitím 25% methanolu v oxidu uhličitém jako elučního činidla při rychlosti průtoku 2 ml/min, teplotě 40 °C a tlaku 21 MPa.

Sloučeniny podle vynálezu je možno použít k léčebným účelům, zvláště k léčení a profylaxi retrovirových infekcí a infekcí virem hepatitidy B.

Vynález se tedy týká také sloučenin podle vynálezu pro výrobu farmaceutického prostředku, určeného k léčení nebo profylaxi virových infekcí, zvláště retrovirových infekcí, například v případě infekce HIV a také při infekcích virem hepatitidy B.

Příkladem retrovirových infekcí, které je možno léčit nebo jimž je možno předcházet podáváním sloučenin podle vynálezu, jsou retrovirové infekce u člověka, například infekce virem lidské imunodeficience HIV, HIV-1, HIV-2, a infekce lidským lymfotropním virem pro T-buňky, HTLV, například HTLV-I nebo HTLV-II. Sloučeniny podle vynálezu jsou zvláště vhodné k léčení AIDS a příbuzných klinických stavů, například komplexů ARC, progresivní generalizované lymfadenopatie PGL, Kaposiho sarkomu, neurologických poruch, spojených s AIDS, jako jsou roztroušená skleróza, tropická paraparéza a demence, je možno ovlivnit také případy, při nichž je možno prokázat protilátky proti HIV, virus HIV a thrombocytopenickou purpuru.

Sloučeniny podle vynálezu jsou zvláště vhodné pro ovlivnění asymptomatických infekcí, vyvolaných retroviry nebo spojených s těmito viry.

··· · φ *

Sloučeniny podle vynálezu je možno použít také v kombinaci s dalšími účinnými látkami, určenými pro léčení svrchu uvedených infekcí nebo stavů. Může jít o látky, které jsou účinné při léčení virových infekcí nebo příbuzných stavů, jako inhibitory reverzní transkriptázy, z této skupiny látek je možno uvést například zidovudin nebo abacavir, (lalfa,2beta,3alfa)-9-[2,3bis(hydroxymethyl)cyklobutyl]guanin, označovaný také jako (-)BHCG nebo SQ-34514, dále oxetanocin-G, chemicky [3,4bis-(hydroxymethyl)-2-oxetanosyl]guanin, acyklické nukleosidy, jako acyclovir, valaciclovir, famciclovir, ganciclovir nebo penciclovir, dále fosfonáty acyklických nukleosidů, jako jsou (S)-1-(3-hydroxy-2fosfonylmethoxypropyl)cytosin, HPMPC nebo PMEA nebo PMPA, inhibitory reduktázy ribonukleotidu, jako jsou hydroxymočovina, 2-acetylpyridin-5-[(2chloranilino)thiokarbonyl]thiokarbonohydrazo, použít je možno také jiné 2', 3'-dideoxynukleosidy, jako 2',3'dideoxycytidin, 2',3'-dideoxyadenosin, 2',3'~ dideoxyinosin, 3'-deoxy-2',3'-didehydrothimidin, d4T, inhibitory proteázy, jako saquinavir, indinavir, ritonavir, nelfinavir, amprenavir, analogy oxathiolannukleosidů, jako lamivudin, cis-l-(2(hydroxymethyl)-1,3-oxathiolan-5-yl)-5-fluorocytosin FTC, 3' -deoxy-3' -fluorothymidin, 5-chloro-2',3'-dideoxy-3' fluorouridin, ribavirin, 9-[4-hydroxy-2(hydroxymethyl)but-l-yl]-guanin, H2G, inhibitory tat, jako 7-chloro-5-(2-pyrryl)-3H-1,4-benzodiazepin-2-(H)on, Ro5-3335, 7-chloro-l,3-dihydro-5-(lH-pyrrol-2-yl)-3H-1,4benzodiazepin-2-amin, Ro24-7429, interferony, jako alfainterferon, inhibitory vylučování ledvinami, jako probenecid, inhibitory transportu nukleosidů, jako dipyridamol, pentoxifyllin, N-acetylcystein NAC, procystein, alfa-trichosanthin, kyselina fosfonomravenči a také imunomodulační látky, jako interleukin II nebo thymosin, faktory, stimulující tvorbu kolonií granulocytů a makrofágů, erythropoetin, rozpustný CD₄ a geneticky konstruované deriváty této látky nebo inhibitory reverzní transkriptázy nenukleosidové povahy, NNRTI, jako nevirapin, BI-RG-587, lovirid, alfa-APA a delavuridin BHAP, kyselina fosfonomravenči a 1, 4-dihydro-2H-3,1benzoxazin-2-ony z této skupiny, například (-)-6-chloro4-cyklopropylethinyl-4-trifluormethyl-l, 4-dihydro-2H-3,1benzoxazin-2-on, L-743,726 nebo DMP-266) a chinoxalinové deriváty ze skupiny NNRTI, jako isopropyl (2S)-7-fluoro3, 4-dihydro-2-ethyl-3-oxo-l (2H) -chinoxalinkarboxylát HBY1293. Složky takových kombinací je možno podávat současně, a to odděleně nebo ve společném farmaceutickém prostředku, nebo také následně tak, aby bylo možno dosáhnout kombinovaného účinku.

Důležité je zajistit přísun sloučenin obecného vzorce II do buněk. Zvláště výhodné jsou sloučeniny vzorce III, v nichž R¹² a n mají svrchu uvedený význam.

Sloučeniny podle vynálezu je možno v průběhu léčení podávat jakýmkoliv vhodným způsobem, například perorálně, rektálně, nosní slíznicí, místně včetně podání ústní sliznicí a pod jazyk, vaginálně a parenterálně, například podkožně, nitrosvalově, nitrožilně nebo intradermálně. Výhodný způsob podání se bude měnit v závislosti na léčeném onemocnění, na celkovém stavu a věku nemocného a na zvolené účinné látce.

Množství účinné látky bude záviset také na celé řadě faktorů, například na závažnosti léčeného onemocněni a na

·« ····	··	·· ·· *·
		ř 1
		»	• « »
• · ·	«	t-	• · ti ·
f ·	4	• ··	·· ·· *·

celkovém stavu nemocného, vhodnou dávku musí vždy určit ošetřující lékař nebo veterinární lékař. Obecně lze uvést, že účinné dávky sloučeniny obecného vzorce I se budou pohybovat v rozmezí 0,01 až 200 mg/kg tělesné hmotnosti za den, výhodné rozmezí je 1 až 100 mg/kg hmotnosti za den.

Požadovaná dávka bude obvykle podána jednou denně nebo ve dvou, třech, čtyřech nebo větším počtu dílčích dávek, podávaných v příslušných intervalech v průběhu dne. Tyto dílčí dávky mohou být podávány ve formě lékové formy obsahující jednotlivou dávku v rozmezí 0,5 až 2000 mg, s výhodou 5, 25, 50, 150, 200 nebo 250 mg.

Součást podstaty vynálezu tvoří také farmaceutické balení, které obsahuje alespoň jednu účinnou složku ze skupiny sloučenin obecného vzorce I, II a III a informaci, obsahující směrnice pro použiti obsažené účinné látky.

Zásadně je možné podávat účinnou látku podle vynálezu jako takovou, výhodné je však podání ve formě farmaceutického prostředku. Součást podstaty vynálezu proto tvoří také farmaceutický prostředek, který jako svou účinnou složku obsahuje sloučeninu obecného vzorce I, II nebo III nebo farmaceuticky přijatelný derivát této látky spolu s farmaceutickým nosičem.

Farmaceutický prostředek podle vynálezu obsahuje alespoň jednu svrchu udefinovanou účinnou látku spolu s jedním nebo větším počtem nosičů nebo pomocných látek a popřípadě spolu s dalšími účinnými látkami. Každý nosič musí být „přijatelný v tom smyslu, že musí být ·· ···· ·· ·· ·· ·· φ « φ f α β> · R · φ ΦΦ· e ·'« · »·*«···*·>· ' » 4 4 4' * ·* ···· »·· ·♦ ♦· ·· ·· kompatibilní s ostatními složkami prostředku a nesmí být škodlivý pro příjemce. Zásadně může jít o farmaceutický prostředek, určený pro podání perorální, rektální, podání nosní sliznicí, místní podání včetně podání ústní sliznicí a podání pod jazyk, vaginální podání nebo parenterální podání včetně podkožního, nitrosvalového, nitrožilního a intradermálního podání.

Farmaceutické prostředky budou mít obvykle tvar lékové formy, připravené obvyklým způsobem. Obvykle se postupuje tak, že se účinná složka smísí s nosičem, který je tvořen jednou nebo větším počtem složek. Nosič může být kapalný nebo může jít o jemně práškovou pevnou látku. Směs účinné látky a pevného nosiče je v případě potřeby možno zpracovat na požadovaný tvar.

Farmaceutický prostředek podle vynálezu, vhodný pro perorální podání, může být rozdělen na jednotlivé dávky, obsažené například v kapslích, tabletách, sáčcích, oplatkách nebo může jít o granule, výhodné jsou například tablety, které je možno polknout, dispergovat nebo žvýkat a z nichž každá obsahuje předem určené množství účinné látky. Může jít také o prášky a granuláty, o roztoky nebo suspenze ve vodné nebo nevodné kapalině nebo také o emulze typu olej ve vodě nebo voda v oleji. Může jít také o mazání nebo pastu.

Tablety je možno připravit slisováním nebo odléváním s případným použitím pomocných složek. Lisované tablety se připravují v tabletovacím stroji slisováním směsi účinné látky, pojivá, kluzné látky, inertních ředidel, konzervačních prostředků, povrchově aktivních látek nebo dispergačních činidel. Odlévané tablety je možno připravit odlitím směsi práškové účinné látky a inertní kapaliny ve vhodném zařízení. Tablety je možno opatřit dělicí rýhou nebo povlékat, například tak, aby bylo možno zajistit řízené nebo zpomalené uvolnění účinné látky.

Tablety je také možno opatřit enterosolventním povlakem.

Prostředky, určené pro místní podání do úst zahrnují tablety, určené pro podání pod jazyk a obsahující účinnou látku v ochuceném základu, obvykle jde o sacharózu a akaciovou nebo tragakanthovou gumu, dále může jít o pastilky, které obsahují účinnou látku v inertním základu, jako je želatina nebo glycerol nebo sacharóza a akaciová guma, použitelné jsou také ústní vody, které obsahují účinnou složku ve vhodném kapalném nosiči.

Sloučeniny pro rektální podání mohou mít formu čípků a je možno je připravit s použitím vhodného základu, například kakaového másla nebo salicylátu.

Prostředky pro podání do pochvy mohou mít formu pesarů, tamponů, krémů, gelů, past, pěn nebo spreyeů, které kromě účinné látky obsahuje nosiče, běžně užívané v oboru.

Prostředky, vhodné pro parenterální podání zahrnují vodné nebo nevodné isotonické sterilní injekční roztoky, které mohou obsahovat antioxidační látky, pufry, bakteriostatické látky a různé další rozpuštěné látky, nebo může jít o sterilní suspenze ve vodném nebo nevodném prostředí, které mohou obsahovat suspenzní činidla a zahušťovadla. Tyto prostředky mohou být uloženy po jednotlivých dávkách například do ampulí nebo po větším počtu dávek do lahviček a mohou být skladovány • · · · lyofilizované formě, takže před použitím je nutno přidat pouze sterilní kapalný nosič, například vodu pro injekční podání. Injekční roztoky a suspenze je také možno připravit ze sterilních prášků, granulátů nebo tablet, tak jak byly popsány svrchu.

Účinná složka může být také uložena do prostředku podle vynálezu v tak jemně práškové formě, že částice účinné látky mají průměr několika nanometrů.

Výhodné prostředky pro jednotlivé podání jsou takové prostředky, které obsahují denní dávku účinné látky nebo dílčí dávku, tak jak bylo uvedeno svrchu.

Je zřejmé, že kromě svrchu uvedených složek může farmaceutický prostředek obsahovat ještě další složky, obvyklé ve farmaceutických prostředcích tohoto typu, například v případě perorálního podání látky pro úpravu chuti nebo látky, zakrývající chuť účinné látky.

Vynález se rovněž týká farmaceutického balení, určeného pro léčení virových infekcí. Tato balení obvykle obsahují dávky sloučenin obecného vzorce I, II nebo III nebo mohou obsahovat ještě další účinné látky. Balení může například obsahovat jednu nebo větší počet tablet, kapslí, gelových kapslí nebo jiných forem s obsahem sloučeniny obecného vzorce I nebo II ve svrchu uvedených dávkách. Mimo to může farmaceutické balení obsahovat tištěnou informaci, zejména pro současné podávání většího počtu účinných látek.

P_ř_í_k_l_a_d_y___Β_2_2_ϊ_θ_^_®_2_ί___Y_2_2_É_1_®_2_2

3ο

Následující, dále popsané Příklady, jsou uváděny jen pro demonstraci vynálezu, a nejsou chápány tak, že by jakýmkoliv způsobem limitovaly patentové nároky vynálezu.

Příklad 1 )

Příprava ( 1R,,cis )-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- cyklopenten-1- methanolu

Stupeň a)

Příprava (1S,4R)- terč.- butyl-3-oxo-2-azabicyklo-/2.2,1/-hept-5-en-2-karboxylátu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 54,565 gj( 0,500 ml), (+)-2- azabicyklo-/2.2.1./-hept-5-en-3-onu, (Chirosciance,. Cambridge, Anglie), ve 350,0 ml, vysušeného tetrahydrofuranu, bylo za stálého míchání postupně přidáno 114,87 g, ( 0,510 mol ) ,di-terc.-butylkarbonátu, ( 9^,0 %ní produkt; Aldrich ), a 600,0 mg,, 4- dimethylaminopyridinu, a výsledná reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 2,0 hodin.

Poté bylo rozpouštědlo za sníženého tlaku odpařeno, a zbytek,_: ve formě oranžově zbarvené, pevné látky, byl překrystalizován ze směsi toluen- hexany, a bylo získáno 95,72 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené, krystalické látky, ve výtěžku 91,0 %,

Teplota tání : 85,0 - 86,0 °CJ ¹H-NMR_r ( (uDOl^íC spektra nukleární magnetické rezonance ) delta, 1,50, ( s., 9H ), 2,.24,. ( patrný AB k.,, J = 8,40 Hz, 2H )„ 3,39,, ( š.3«, 1H ), 4,96, ( m., 1H ), 6,66_r ( m.,. 1H),

6,89,, ( nu, 1H ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorae ^c11^Hl5^NO3f

Vypočteno :

Naleženo ::

O 63,14,. H 7,21, N 6,69, % 0' 63,20, H 7,26, N 6,65, %

Stupeň

Příprava ( 1S,cis)- terč.- butyl-N-/ 4-( hydroxymethyl)-2- cyklopenten-1-yl/- karbamátu

Ku intenzivně míchánému roztoku, připravenému rozpuštěním 21,96 g, ( 0,580 mol ), tetrahydroboritanu sodného, ( 99,0 % ní produkt* Aldrich), ve 100,0 ml, vody, byl přidán během 10,0.minut roztok, připravený rozpuštěním 95,50 g, ( 0,456 mol), ( 1S,4R)- terc.-butyl-3-oxo-2-az8bicyklo-/2.2.1./- hept-5-en-karboxylátu, ( získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně!- a), ve směsi, získané smícháním 500,0 ml, tetrahydrofuranu, a 50,0 ml, vody, a teplota vzniklé reakční směsi, byla udržována po dobu 2,0 hodin nižší než 35,0 °C.

Poté, po ochlazení směsi na teplotu nižší než 25,0 C, bylo přidáno během 10,0 minut 50,0 ml, koncentrované kyseliny chlorovodíkové,a poté bylo přidáno ku rozpuštěné pievné látce 100,0 ml, vody, a vzniklý roztok byl extrahován 4x, vždy se 300,0 ml, toluenu.

• · • ·

Po oddělení organické e vodné fáze, byly spojené organické extrakty promyty se 200,0 ml, směsi, získané smícháním nasyceného roztoku síranu sodného, a nasyceného roztoku uhličitanu sodného, ( v poměru 9,0 : 1,0). a poté byly vysušeny se síranem sodným.

Po odpaření rozpouštědel za sníženého tisku, byl získán zbytek ve formě bezbarvé látky, sirupovitého charakteru, který byl překrystalizován za míchání ze 200,0 ml, hexanů.

Bylo získáno 87,16 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené látky, práškovítého charakteru, ve výtěžku 90,0 %,

Teplota tání : 72,0 - 73,0 °CJ ¹ H-NMR, ( DMSO-dg)’· delta, 6,78, ( d., J - 7,60 Hz, 1H ), 5,80,a 5,60, ( oba m., 2H ), 4,58,. ( t., J = 5,25, _{2H 4>45> (} 3,35, ( m., překrytý s vodou), 2,60, ( m., 1H ), 2,30, ( m., IH ),

1,38,, ( s.„ 9H ), 1,20, ( m., 1H ).

Optická otáčivost :

+2,80°,/ alfa/589²⁰; c = 5,00; methanol

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce ^C11^H19^NO3 ^::

Vypočteno :: C 61,95, H 8,98, N 6,57, %

Nalezeno C 61,87, H 8,97, N 6,55, % • * · · • · • · · · • · · · · ·· • · · · * ·· « ** • v· • · · ·

Stupeň c)

Příprava ( 1R,cis)-4-amino-2- cyklopenten-1-methanolu. hydrochloridu

Směs, připravená smícháním 10,66 g, ( 50,0 mmol), (1S, cis)- terč.- butyl-N-/ 4-( hvdroxymethyl)-2- cyklopenten-1yl/- karbamátu, ( získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně b), a 25,0 ml, absolutního ethanolu, byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem, s 5,0 ml, (60,0 mmol), koncentrované kyseliny chlorovodíkové, po dobu 2,50 hodiny.

Po odpaření těkavých složek, bvla získána žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě bíle zbarvené, pevn4 látky.

Hmotnostní spektrometrie,(ES): 114,0,( M+1)J ^H-NMR, ( DMSO-dg):

delt8, 7,90,. ( m., 3H ), 6,03 a 5,75, ( ob8 m., 2H ), 4,11, ( m., 1H ), 3,41, ( d., J =5,40 Hz, 2H ), 2,80, ( m., 1H ), 2,36, ( m., 1H ), 1,40, ( m., 1H ),

V nadpise uvedená sloučenina, ( ve formě pevné látky), byla použita bezprostředně v následujícím Stupni d).

Stupeň d)

Příprava ( 1R,cis)-4-/( 5-amino-6-chlor-4-pyrimidinyl)-amino/-2- cyklopenten-1- methanolu • i

Roztok, připravený rozpuštěním ( + )-( 1R,cis)-4-amino-2- cyklopenten-1-methanolu. hydrochloridu, ( získaného deblokací 10,66 g, ( 50,00 mmol)J ( + )-( lS,cis)-terc.- butyl_N-/4-( hydroxymethyl)-2- cyklopenten-1-yl/- karbamátu, jak je popsáno v rámci předcházejícího, výše uvedeného Stupně c), dále 16,40 g, ( 0,100 mol)J 5-emino-4,6- dichlorpyrimidinu, ( Aldrich), a 15,20 g, ( 0,150 mol), triethylaminu, ve 25,0 ml, 1-butenolu, byl zahříván za refluxu pod zpětným chladičem, v atmosféře dusíku, po dobu 18,0 hodin.

Poté, po odstranění těkavých složek z reakční směsi za sníženého tlaku, byl zbytek, ve formě pevné látky, chromatograf ován na silikagelu, za použití směsi 5,0 % methanol - chloroform, jako elučního činidla.

Bylo získáno 10,80 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě žlutě zbarvené látky, sklovitého charakteru, ze které byla po krystalizací z ethylacetátu, získána žádaná, v nedpise uvedená sloučenina, ve formě bíle zbarvených jehliček.

Teplota tání :: 144,0 - 146,0 °CJ ¹H-NMR_r ( DMSO-dg):: delta, 7,75, ( s., 1H ), 6,76, ( d., J = 6,80 Hz, 1H ), 5,93, a 5,82, ( oba m., 2H ), 5,11, ( m., 3H ), 4,66, ( t., J 5,30 Hz,. 1H ), 3,40, ( š.t., J = 6,10 Hz, 2H ), 2,75, ( m., 1H )_r 2,,20, ( m.,. 1H ), 1,38, ( m., 1H ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce ^C1O^H13^N4^{C10 :}

Vypočteno : C 49,90, H 5,44, N 23,28, %

Nalezeno : C 49,92, H 5,57, N 23,10, %

35Stupeň e)

Příprava ( 1R,cis-)-4-( 6-chlor-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1- methanolu

Směs, připravená smícháním 9,63 g,. ( 40,0 mmol), (1H,. cis)-4-/( 5-amino-6-chlor-4-pyrimidinyl)-amino/- 2- cyklopenten- 1- methanolu, ( získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně d), dále 150,0 ml, triethylformiáttr^_; s 14,0 ml,, koncentrované kyseliny chlorovodíkové, byla míchána po dobu 3,0 hodin.

Poté, co byly těkavé složky z reakční směsi odpařeny, byl zbytek ve formě pevné látky vytřepán mezi 300,0 ml, chloroformu, a 100,0 ml, nasyceného vodného roztoku uhličitanu sodného, a po oddělení organické a vodné fáze, byla vodná vrstva extrahována 2x vždy se 100,0 ml, chloroformu.

Spojené chloroformové extrakty byly vysušeny se síranem sodným. Po odstranění těkavých složek za sníženého tlaku byl zbytek ve formě žlutě zbarvené látky sklovitého charakteru chromatografován na silikageůu, za použití ethylacetátú, jako elučního činidla.

Bylo získáno 7,55 g,. žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve výtěžku 74,0 %.

Teplota tání : 121,0 - 124,0 °c;

¹H-NMR_ř ( DMSO-dg):

delta, 8,81, ( s., 1H ), 8,64, ( s., 1H ), 6,24 s 6,21, (oba m., 2H ), 5,75, ( m., 1H ), 4,75_r ( t., J = 5,40 Hz, 1H ), 3,34, ( m., 2H ), 2,95, ( m., 1H ), 2,75, ( m., 1H ), 1,75, ( m., 1H ).

• · · • ·

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce

C^H^GIO :

Vypočteno :: Nelezeno

G 52,70, H 4,42, N 22,35, Cl U,U, %

C 52,81, H 4,46, N 22,31, Cl 14,22, %

Stupeň f)

Příprava ( 1R_rcis)- 4- ( 6- amino-9H- purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1- methanolu

V 50,0 ml,. tekutého amoniaku byly míchány v Parrově nádobě, při teplotě 25,0 °C, po dobu 18,0 hodin, 2,00 g, ( 1R, cis)-4-( 6- chlor-9H- purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1- methanolu, ( získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně e).

Po odpaření těkavých složek, a krystalizaci pevného zbytku ze směsi methanol : acetonitril, bylo získáno 1,61 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvených prizmat, ve výtěžku 87,0 %,

Teplota tání : 195,0 - 200,0 °C*, ¹H-NMR_r ( DMSO-dg):

delta, 8,15, ( s., 1H ), 8,06, ( g., 1H ), 7,21, ( š.g., 6,15 a 5,95,, ( oba m.., 2H ), 5,61 „ ( m., 1H ), 4,76, ( t., J = 5,40 Hz, 1H ), 3,48, ( t., J = 5,50 Hz, 2H ), 2,92, ( m.,lH ), 2,71, ( nu, 1H ), 1,67, ( nu, 1H ).

.Optická otáčivost : +4,5Ο°,/81Γθ/589^θϊ c = 0,50, methanol ).

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce ^11^13^5θ *

Vypočteno : Nalezeno :

C 57,13,. H 5,67, N 30,28, %

C 57,25, H 5,67, N 30,33, %

Příklad 2)

Příprava ( 1R_rcis)- 4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2-cyklopenten-1- methano-0-( fenyl-methoxy-L-alaninyl)- fosfamidu

Ku směsi, připravené za míchání smícháním 925,0 mgj ( 1R,cis)-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1-methanolu, ( získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Příkladu 1), Stupeň f), se 100,0 ml, vysušeného pyridinu, bylo přidáno 4,30 mlj 1M roztoku terc.-butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu, ( Aldrich), a po uplynutí 15 minut, ještě roztok, získaný rozpuštěním 2,22 g, ( 8,00 mmol ), fenyl-( me thoxy-alaninyl)- chlorfosfátu, ( připraveného postupem, popsaným v odborném časopise J.Med.Chem., 36, 10481052, /1993/,. autor McGuigan C. ae sp. ), v 10,0 ml, tetrahydrofuranu.

Po uplynutí 24,0 hodin, bylo ku reakční směsi přidáno ještě 4,40 ml, terc.-butylmagnesiumchloridu, a 2,22 g, feny l-(methoxy-L-alaninyl)- chlorfosfátu, 8 vzniklá reakční směs byl8 míchána po dobu 24,0 hodin.

Po odstranění těkavých složek, bvl zbytek ve formě pevné látky gumovitého charakteru, vytřepán, mezi 200,0 ml, chloroformu, a 50,0 ml, vody. Po oddělení organické 8 vodné fáze, bvl chloroformový extrakt vysušen se síranem sodným, a poté byl zahuštěn.

• ·

Zbytek, (ve formě bezbarvé látky sklovitého charakteru), byl chromátografován na silikagelu, ze použití směsi 5,0 % methanol - chloroform, jako elučního činidla.

Methenolický roztok byl poté odpařen, a bylo získáno 1,02 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené látky, pěnovité^o charakteru, ve výtěžku 54,0 %,

Hmotnostní spektrometrie s vysokou rozlišovací schopností u sloučeniny dle sumárního vzorce ^C21^H26^N6°5^{P :}

Vypočteno :: 473, 1702, ( M+H) ⁺ , ( m/z)J

Nelezeno : 473,'T?07, ( Μ+Η) ⁺ , ( πι/ζ)ζ ¹H-NMR,( CDCl^):

delta, 8,39,, ( s., 1H ), 8,04_r á 7,99, ( oba s., 1H ), 7,20, ( nu, 5H ), 6,50, ( nu, 1H ), 6,20, ( nu, 1H ),. 6,00, ( m.,

1H ), 5,79,. ( nu, 1H ), 4,30 - 3,95,. ( nu, 3H ), 3,74 a

3,71, ( oba s., 3H ), 3,25, ( nu, 1H ), 2,95, ( nu, 1H ),

1,80, ( nu,. 1H ), 1,38.e 1,37, ( oba d., každý J = 7,00 Hz,

3H);

³¹P-NMR,( CDCl^)::

3,12, 2,80;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce

C₂₁H₂₅N₆O₅P. 0,19 CH₃OH; 0,35 H₂0 ::

Vypočteno t: Nelezeno :

C 52,49,

C 52,51,

H 5,50, N 17,73, %

H 5,40, N 17,35, %

• ·

P ř í k 1 a d 3)

Příprava (1R,cis)-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1-methanol-0-( fenyl-ethoxy-L-alaninyl)- fosfátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci předcházejícího Příkladu 2), byl reagován (1H,cis)-4-( 6- amino- 9Hpurin-9-yl)- 2- cyklopenten- 1 - methanol, ( získaný v rámci výše popsaného Příkladu 2), s fenylu (/ethoxy-1-alaninyl)chlorfosfátem, ( připraveným postupem popsaným v odborném časopise J.Med.Chem., 36, 1048 - 1053,/1993/, autor McGuigan C. se sp.).

V nadpise uvedená sloučenina byla eluováne se směsí 5,0 % methanol - chloroform. Po odpaření methanoliského roztoku, byla získána žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě bíle zbarvené, pevné látky, pěnovítého charakteru.

Hmotnostní spektrometrie s vysokou rozlišovací schopností sumárního vzorce u sloučeniny dle

Vypočteno : Nalezeno

487, 1859, ( M+H)⁺, ( m/z);

487, 1841, ( M+H)⁺, (m/z);

¹H-NMR„ ( DMSO-dg):

delta,	8,16, (	s., 1H	), 8,05,a 8,0	1, ( oba	s.,	celkem 1H
7,36,	( m., 2H	), 7,24	, ( š.s., 2H	), 7,19,	( m.	, 3H ),
6,13,	( m., 1H	), 6,02	, ( m., 2H ),	5,63, <	W. · j	1H ), 4,03
( m.,	pžekrývající k.,	J = 7,00 Hz,	4H ), 3,	77,	( m., 1H )
3,15,	( m., 1H	), 2,75	, ( m., 1H ),	1,70, (	Úl* |	1H ), 1,21
( d.,	J = 7,10	Hz, 3H	), 1,14, a 1,	12, ( oba		J = 7,00
celkem	l 3H ).

³¹P-NMR,( DMSO-d₆):

4,23, 3,88 J

Příklad 4)

Příprava (1R,, cis )-4-( 6- emino-9H- purin-2-yl)- 2- cyklopenten-1- methanol -O- / fenyl-( methoxy)- D- elaninyl) fosfamidu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 2), bylo reagováno 200,0 mg, ( 0,860 mmol), (1R, cis)- 4-( 6-emino- 9H- purin-9-yl) - 2 - C”klopenten-1- methanolu, ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 1), Stupeň f), s fenyl( methoxy-D-alsninyl)- chlorfosfátem, ( připraveným postupem popsaným v odborném časopise J.Med.Chem.,36, 1048 - 1052, / 1993/, autor McGuigen C. se sp. ).

V nadpise uvedená sloučenina byla eluována se směsí 5,0 % methanol - chloroform. Po odpaření methanolického roztoku bylo získáno 290,0 mg, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené, pevné látky, pěnovitého charakteru, ve výtěžku 71,0 %, ¹H-NMR, ( DMSO-dg):.

delta	, 8,13,	r (	s..	, 1H ):	, 8,02
7,36,.	( m.,	1H	),'	7,34,	( m.,
( m.,	1H ),	6,0	2,	( m.,	2H ),
2H ),	3,80,	( m	•,	1H ),	3,57,
2,72,	( m.,	1H	),	1,68,	( m.,

a 8,01 „ ( oba s.,. celkem 1H),

1H ), 7,19,	( m.,	5H ),	6,13,
5,63,, ( m.,	1H ),	4,10,	( m.,
( s., 3H ),	3,12,	( m.,	1H ),
1H ), 1,20,	( m.,	3H ).

³¹P-NMR,. ( DMSO-dg):·

3,96, 3,625;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce ^c ₂1^H25^N6°3· °’^{48 H}2° ^::

Vypočteno :: Nalezeno ::

C 52,43,. H 5,.44,. N 17,47, %

C 52,43, H 5,43,, N 17,43,. %

Příklad 5)

Příprava (1R_r cis)- 4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten- 1- methanol- 0- ( fenyl-( benzyloxy)-D-alaninyl )fosfamidu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 2), bylo reagováno 200,0 mg, ( 0,860 mmol), ( 1H_r cis )-4-( 6amino-9H- purin>9-yl)- 2- cyklopenten- 1- methanolu, ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 1), Stupeň f), s fenyl( benzyloxy-L-alaninyl)- chlorfosfátem, ( připraveným postupem popsaným v odborném časopise J.Med.Chem., 36, 1048 - 1o52, / 1993/. autor McGuigen C. se sp. ).

V nadpise uvedená, žádaná sloučenina, byla eluována se směsí 5,0 % methanol - chloroform. Po odpaření methanaliokáho roztoku, bylo získáno 270,0 mg, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené, pevné látky, pěnovitého charakteru.

¹H-NMR, ( DMSO-dg):

delta, 8,13,, ( s., 1H ),.8,01^8^7,985, ( oba s,, celkem 1H),

7,20 - 7,40, ( m., 12H ), 6,02, ( m., 3H ), 5,59, ( m., 1H), ,5,06, ( m., 2H ), 4,03, ( m., 2H ), 3,83, ( m.,_: 1H ), 3,05, • » * ·

( m., 1H ), 2,65, ( m., 1H ), 1,62, ( m., 1H ), 1,22,( d., J = 7,00 Hz, 3H ).

³¹P-NMR, ( DMSO-dg):

4,00, 3,55-,

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce

C27H29N6°5P·	0,47	H20 r
Vypočteno :	C	58,22,	H	5,42„	N	15,09,	%
Nelezeno ::	C	58,22,.	H	5,44,,	N	14,84,	%

Příklad 6)

Příprava (1R_r cis)- 4-( 6- emino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1- methenol-O- / fenyl-( methoxy)- L- fenylelaninyl)fosfamidu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 2), bylo reagováno 500,0 mg, ( 2,16 mmol),. ( 1R, cis)- 4- ( 6-emino-9H-purin-9-yl)~ 2~ cyklopenten-1- methanolu, ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 1), Stupeň f), s fenyl-( methoxy-L- fenylalaninyl)- chlorfosfátem, ( připraveným postupem popsaným v odborném časopise J.Med.Chem.,36, 1048 - 1052_r / 1993/. autor McGuigan C, se sp. ).

V nadpise uvedená sloučenina byla eluována se směsí 5,0 % methanol - chloroform. Po odpaření methanolického roztoku , bylo získáno 500,0 mg, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené, pevné látky, pěnovitého charakteru, ve výtěžku 42,0 %.

• · ¹H-NMR, ( DMSO -dg):

delta, 8,14 a 8,13, ( oba a., celkem 1H ), 8,01 a 7,985, ( oba s., celkem 1H ), 7,20 - 7,40,. ( m., 5H ), 6,95 7,05, ( m., 5H ), 7,00 a 6,98, ( oba š.s.„ celkem 2H ), 6,10„ ( m., 1H ), 5,975, ( m., 2H ), 5,58,. ( m„, 1H ), 3,55 - 4,00,, ( m.,, 3H ), 3,57, ( s., 3H ), 2,95, ( m., 2H ),270, ( m., 2H ), 1,55, ( m., 1H ), ³¹P-NMR„ ( DMSO-dg):

3,605,, 3,25;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce ^C27^H29^N6°5^P· 0,38 H₂0. 0,16 CH-^CN:

Vypočteno : Nelezeno

C 58,39, H 5,42,. N· 15,35, % 058,39, H 5,41, N 15,36, %

Příklad 7)

Příprava (1R„ cis)- 4-( 5-amino-9H-purin~9-yl)- 2- cyklopenten-1-methanol-0-/ fenyl-( ethoxyJJ- L- fenylalaninyl )foafamidu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 2), bylo reagováno 150,0 mg, ( 0,27 mmol), ( 1R, cis)- 4-( 6-amino- 9H- purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1- methanolu, ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 1), Stupeň f), s fenyl( methpxy-L- fenylalaninyl)- chlorfoafátem, ( připraveným postupem popsaným v odborném časopise J.Med.Chem., 36, 1048 -

1052,. /1993/, autor McGuigan C, se sp. )..

V nadpise uvedená sloučenina byla eluována se eměsí 5,0 % methanol - chloroform. Po odpaření methanolického roztoku bylo získáno 120,0 mg,, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené, pevné látky, pěnovitého charakteru, ve výtěžku 80,0 %.

¹ H-NMR,, ( CDCl^):

delta, 8,38,, ( oba s., 1H ), 7,83, ( oba s., 1H ), 7,00 7,30, ( m., 10 H ), 6,25, ( široký s., 2H ), 6,10, ( m._r 1H ), 5,92, ( m., 1H ), 5,70, ( m., 1H ),'3,70 - 4,30, ( m., 5H ), 2,60 - 3,20, ( m., 5H ), 1,60,, ( m., 1H ), 1,17,( oba t., 3H ).

³¹P-NMR,( CDG1₃):

delta, 3,86*.

Hmotnostní spektrometrie sloučeniny dle sumárního vzorce ^C28^H31^N6°5^P

Vypočteno:	563,00,. ( M+H)\(m/z);
^slezeno :	563,00, ( M+H)+,(m/z);

Analytické hodnocení sloučeniny dle °28^Η31^Ν6^Ο5^Ρ· ^{2/3 H}2° ^:

Vypočteno :: C 58,53» H 5,67,

Nalezeno : C 58,77,- H 5,51» sumárního vzorce

N. 14,63» %

N 14,65, %

Příklad 8)

Příprava ( 1R,cis )-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1- methenol-O- ( L- fenylaleninyl)-foa3amidu. dvojsodné sole

Do roztoku, připraveného smícháním 2,0 ml, triethylaminu, a 2,0 ml, deionizované vody, bylo nasuspendováno 0,060 g_r ( 0,11 mmol), (1R, cis)- 4-( 6-amino-9H-pu rin-9-yl)- 2- cyklopenten-1-methanol-0-( / fenyl-( methyl)- L- fenylalaninyl)- fosfamidu, a vzniklá reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18,0 hodin.

Po odstranění těkavých složek ze směsi odstředivým odpařením za vakua, byl vzniklý zbytek rozpuštěn ve 20,0 ml, vody, a poté byl 2x extrahován vždy s 20,0 ml, dichlormethanu, poté byl přečištěn chromatografii na měniči eniontů^ ( anex), ( Sep-Pak vac 35 cc( vázané klastry), Accell^v Plus QMA patrona^ Waters Co., P/N WAT 054725)( HCO^ formě), za použití 1,0 litru vodného hydrogenuhličitan amonného pufru ( 0-0,5 gradient).

Poté, co byly příslušné frakce spojeny, byly těkavé složky odstraněny odstředivým odpařením za vakua, byl- získán' zbytek, který byl 2x rozpuštěn v deionizované vodě, a opět odpařen odstředivým postupem ze vakua, a. byle získána žádaná, v nadpise uvedená sloučenině, ve formě emonné sole, která byla rozpuštěna v deionizované vodě, e zpracována porno(n ) (p ) cí patrony Sep-Pak^ Vac 20 cc Accell ^zPlus CM ( Waters Co., P/N Wat 054675) ( Na forma), za použití deionizované vody.

Po následné lyofilizsci ( vymražení) příslušných frakcí bylo získáno 35,0 mg, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě dvojsodné sole. 3,2 hydrátu, ve formě bíle zbarvené, pevné látky, ve výtěžku 51_r0 %.

¹H-NMR_r ( D₂0):

• β

delta, 8,02, ( 3., 1Η ), 7,96, ( a., 1Η ), 6,98 - 7,.10, ( m., 3H ), 6,84 - 6,92,. ( m., 2H ), 6,14 - 6,20, ( m., 1H ), 5,88 - 5,90,, ( m., 1H ), 5,42 - 5,50,, ( m., 1H ), 4,40 - 5,00,( š. m., 3H + HOD )„ 3,58 - 3,66, ( m., 1H ), 3,36 - 3,48, ( m., 2H ), 2,,94 - 3,06,. ( š.m., 1H), 2,64 - 2,78, ( m., 1H ), 2,40 ( d., J = 6,60 Hz, 2H ),. 1,54 - 1,64, ( m., 1H )» ³¹P-NMR,. ( D₂0 :

7,80-,

Hmotnostní spektrometrie,(ES): 457,0,(MH⁺)_f(m/e)\

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce

C_2OH₂₁NfcNfe₂O₅P. 3,2 H₂0:

Vypočteno :: C 42,89, H 4,93, N 15,01, %

Nalezeno r C 42,92, H 4,58, N 14,70, %

Příklad 9)

Příprava (1R,,cia)- 4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1-methanol-0-/£enyl-( methoxy)-alfa,θΙΓθ, dimethylglyčiny 1)- fosfamidu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 2), bylo reagováno 200,0 mg, (0,86 mmol), (1R,cís)- 4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cvklopenten-1-methanolu, ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 1, Stupeň f), s fenyl-( methoxy-alfa ,alfa- alaninyl)-chlořfQŠfát.em, ( připraveným postupem, popsaným v odborném časopise J.Med.Chem., 36, 1048 -

1052,/1993/, autor McGuigan Θ', se sp, )_r

V nadpise uvedená sloučenina byla eluováne se směsí 5,0 % methanol - chloroform,Po odpaření methanlického roztoku bylo získáno 200,0 mg, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené pevné látky, pěnovitého charakteru, ve výtěžku 48,0 %, ¹H-NMR, ( DMSO-dg):

delta	, 8,15, (	s,, 1H ),	8,03 a 8,01	, ( oba s., celkem	1H	)
7,10	- 7,40, (	m., 7H ),	6,10, ( m.,	1H ), 6,00, ( m.,	1H	)
5,89,	( m., 1H	), 5,625,	( m., 1H ),	4,08, ( m., 2H ),	3,	55
( s.,	3H ), 3,	12, ( m.,	1H ),, 2,74,,	( m,, 1H ), 1,70, (	í m	•»
1H ),	1,35, (	m., 6H ).

³¹P-NMR,. ( DMSO-d^):

2,43, 2,395

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce ^C22^H27^N6°5^P· ^{0,53 H}2⁰· ^{0,03 CH}3^C>

Vypočteno C 53,29,. H 5,71, N 16,99, %

Nelezeno :: C 53,29,. H 5,67, N 16,99, %

Pro přípravu sloučenin, uvedených dále v rámci Příkladů

10-41, byly použity následující obecné postupy :

Standardní postup pro přípravu chlorfosfátu

Ku roztoku, fenyldichlorfosfátu,( 1,0 ml), byl přidán za stálého míchání, po kapkách vysušený triethylsmin, ( 2,0 mol), ve 40,0 ml, vysušeného dichlormethanu, e při teplotě minus 78,0 °C, v atmosféře dusíku,, esterová sůl příslušné aminokyseliny, ( 1,0 mol), ve 40,0 ml, vysušeného dichlormethanu.

Vzniklá reakční směs byla poté, co byla pomalu vytemperována na teplotu místnosti, míchána přes noc. Po odstranění rozpouštědla za sníženého tlaku, byl vzniklý surový zbytek nasuspendován do vysušeného dieth.yletheru, nebo tetrahydrofuranu, a poté byl v atmosféře dusíku žfiltrován.

Po následném odstranění rozpouštědla za sníženého tlaku, byl získán surový produkt, ve formě látky olejovité konzistence .

Všechny surové chlorfosfáty byly použity v následujících kuplovacích reakcích ve formě roztoků ve vysušeném tetrahydrofuranu, nebo ve wsušeném acetonitrilu.

Standardní postup 1),. pro přípravu fosfamidu

Ku suspenzi, připravené v atmosféře dusíku nasuspendováním 200,0 mg, ( 0,87 mmol), (1R,cis )-4-( 6-amino-9H-purin-9• · · ·

yl)- 2- cyklopenten-1- methanolu, v 15,0 ml, bezvodého ecetonitrilu, byl přidán roztok, získaný rozpuštěním 1M t-butylmagnesiumchloridu, v 1,73 ml, ( 1,74 mmol), tetrahydrofuranu.

Po uplynutí 15 minut, byl přidán po kapkách, během 1,0 minuty, roztok chlorfosfátu, ( 2,61 mmol), v 15,0 ml, acetonitrilu, a vzniklá reakční směs byla míchána po dobu 4,0 hodin.

Po následném odstranění těkavých složek za vakua byl vzniklý produkt přečištěn sloupcovou chromatografii na oxidu křemičitém, za použití směsi 4,0 - 5,0 % methanolu, v chloroformu, nebo dichlormethanu·

Standardní postup 2)pro přípravu fosfamidu

Ku suspenzi, připravené v atmosféře dusíku nasuspendováním 200,0 mg, ( 0,87 mmol), (1R,cis)-4-( 6-amino-9H-yl)- 2cyklopenten- 1- methanolu, v 15,0 ml, bezvodého tetrahydrofuranu, byl přidán roztok, získaný rozpuštěním 1M butylmegnesiumchloridu, v 1,73 ml, ( 1,74 mmol), tetrahydrofuranu.

Po uplynutí 15 minut, byl přidán po kapkách, během 1,0 minuty, roztok chlorfosfátu, ( 2,61 mmol), v 15,0 ml, acetonitrilu, a vzniklá reakční směs byla míchána po dobu 4,0 hodin.

Po následném odstranění těkavých složek za vakua byl vzniklý produkt přečištěn sloupcovou chromatografii ns oxidu křemičitém, za použití směsi 4,0 - 5,0 % methanolu, v chloroformu, nebo dichlormethanu.

*·· • · t ·· • · · *· • · · · » · · * · ·♦ ·· · · »· ·»

Standardní postup 3)» pro přípravu fosfamidu

Ku suspenzi,, připravené v 8tmosfeře dusíku nasuspendováním 200,0 mg_r ( 0,87 mmol),, (1R,cis)-4-( 6-amino-9H-purin-9yl)- 2- cyklopenten-1-methanolu, v 15,0 ml, bezvodého pyridinu, byl přidán roztok, získaný rozpuštěním 1M t- butylmagnesiumchloridu, v 1,73 ml, ( 1,74 mmol), tetrahydrofuranu.

Po uplynutí 15 minut, byl přidán po kapkách, během 1,0 minuty, roztok chlorfosfátu, ( 2,61 mmol), v 15,0 ml, acetonitrilu, a vzniklá reakčni směs byla míchána po dobu 4,0 hodin.

Po následném odstranění těkavých složek Z8 vskue byl vzniklý produkt přečištěn sloupcovou chromatografii ne oxidu křemičitém, ze použití směsi 4,0 - 5,0 % methenolu, v chloroformu, nebo dichlormethanu.

Příklad 10)

Příprava (1R,,cis)- 4- ( 6-emino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1- meth8nol-0-/ fenyl-methoxy-L-( 0- terč.- butyltyrosinyl)-fosfamidu

Anelogickou synthesou dle stenderdního postupu 1), popseného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru, ve výtěžku 60,0 %.

³¹P-NMR:

3,98, 4,04;

• ·

¹H-NMR :

1,32,	( 9H,	s. ),	1,64,	(	1H,	m.	),	2,83,	( 1H,	m. ),	2,	95,
( 2H,	,	3,08,	( 1H,	m.	- ),	3,	6b	3,66,	( 3H,	s. ),	4,	07,
( 4H,	m. ),	5,73,	( 1H,	m<	• ),	5,	94,	( 1H,	m * ),	6,11,	( 1	Η,·
m. ),	6,39,-	( 2H,	š. s.	),	6,88,	( 2H, d.,	>, 6,	98, (	2H,	d.
7,16,.	( 2H,	m. ),	7,29,	(	3H,	m.	),·	7,84,	7,88,	( 1H,	s.	),
8,37,	8,38,	( 1H,	s * ) ·

Hmotnostní spektrometrie,(ES+) sloučeniny dle sumárního vzorce C-^H^yN^O^NaP

Vypočteno Nalezeno :

643, 2410,. (MH⁺),( m/z);

643, 2405, (MH⁺), (m/z);

Příklad 11)

Příprava ( 1R, cis)- 4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-l-methanol-0-( fenyl-isopropoxy-L-818ninyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovítého charakteru, ve výtěžku 89,0 ³¹P-NMR :

3,97,. 4,20;

1 J4,	( 6H,	m. ),	1,31,	( 3H,	m. ),	1,63,	( 1H, m.	),	2,	79
( 1H,	m. ),	3,12,	( 1H,	m. ),	4,05,,	( 3H,	m. ), 4,	92„	(	1H
m. ),	5,66,	( 1H,	m. ),,	5,87,	( 1H,	m. ),	6,08,, (	1H,	m.	)
6,22,,	( 2H,	Š . 3 .	), 7,06	, ( 2H, m.	), 7,19	, < 3H,	m. '	*,	7,'
7,82,	( 1H,	S. ) ,	8,29,	( 1H,	s. )♦

Hmotnostní spektrometrie,(ES+) sloučeniny dle sumárního vzorce ^23^29^6θ5^^{8Ρ :}

Vypočteno : ^slezeno :

523, 1835, (MH⁺), (m/z);

523, 1832, (Mh⁺), (m/z);

Příklad 12)

Příprava (1R,cis )-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten—1— methanol-0-( fenyl- terc.-butoxy-L-alaninyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovítého charakteru, ve výtěžku 59,0 %, ³¹P-NMR ::

4,10, 4,27;

’η-ΝΜΕ ::

1,24, ( 3H, m. ), 1,35, ( 9H,_; s. ), 1,54, ( 1H, m. ), 2,79, ·· ··· « ( 1H, m. ), 3,13, ( 1H, m. ), 3,80, ( 1H,. m. ), 4,09, ( 3H, m. ), 5,66, ( 1H, m. ),, 5,87, ( 1H,, m. ), 6,08, ( 1H, m. )_r 6,22, ( 2H,. š.s. )_ř 7,15, ( 5H,. m. ),. 7,78,. 7,82_ř ( 1H, s. ),

8,29,. ( 1H, s. ).

Hmotnostní spektrometrie,(ES+), sloučeniny dle sumárního vzorce ^24^1¾%^⁸^

Vypočteno : 537, 1991, ( MH⁺), (m/z);

Nalezeno :: 537, 2001, ( MH ), (m/z);

Příklad 13)

Příprava ( 1R_rcis)- 4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2-cyklopenten-1-methanol-0- / fenyl-( 2.2t dimethylpropoxy)- L-elaninyl)fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru, ve výtěžku 66,0 %.

³¹P-NMR ::

3,89,. 4,18;

¹H-NMR :

0,94, ( 9H,, d. ), 1,41, ( 3H, m. ), 1,73, ( 1H, m. ), 2,89, ( 1H, m. ), 3,23, ( 1H, m. ), 3,83, ( 2H, m. ), 4,14, ( 4H, •· ···· ·· «

··*· β φ » ·β Ρ » ··· · ' · a · · * c « * f »♦ a · 4«

·.·· ··· ·· «· ·· • ta

m. ), 5,77,. ( 1H, m. ), 5,98, ( 1H, m. ), 6,20, ( 3H, m. ), 7,18, ( 2H, nu ), 7,32, ( 3H, m. ), 7,88, 7,94, ( 1H, s. ), 8,38, ( 1H,, g. ).

Hmotnostní spektrometrie,(ES+), sloučeniny dle sumárního vzorce θ25^33^6θ5^^β^ ^:

Vypočteno :: 551 , 2148, (MH⁺),(m/z)J

Nalezeno :: 551 , 2145, (MA⁺),(m/z);

Příklad 14)

Příprava (1R,cis)- 4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1- methanol-0-( fenyl-cvklopropylmethoxy-L-alaninyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádané, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru, ve výtěžku 59,CD

0,14,	( 2H,	m. ),	0,45,	( 2H,	m. ),	o,	99,	(	1H,	m. ),	l,28r
( 3H,	m. ),	1,61,	( 1H,	m. ),	2,76,	(	1H,	m.	),	3,10,	( 1H,
nu ),	3,84,	( 2H,	m. ),	4,06,	( 2H,	m.	),	4,	.50,	( 1H,	m. ),
5,64,	( 1H,	m. ),	5,85,	( 1H,	m. ),	6,	06,	(	1H,	m, ),	6,42,
( 2H,	š.s.	), 7,13	, ( 5H, m.	), 7,77		7,8C		( 1H, s.	), 8,27,
( 1H,	s.) ·

a. ···· ·♦	··	··	··
• » · *·	• ·	* r	•
• · · · · <	s	>
• · · · *	• · * ·	*
• · · ·			6
	··	··	··

Hmotnostní spektrometrie,(ES ), sloučeniny dle sumárního vzorce C.

4^ 2 9^6 °5

Vypočteno s Nalezeno :

535. 1835, (MH⁺), (m/z);

535. 1834, (MH⁺), (m/z);

Příklad) 15)

Příprava (1R,cis )-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1- methano1-0-( fenyl-methoxy-L-leucinyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výš, byla izolována, žádaná v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené-látky, pěnovítého charakteru, ve výtěžku 79,0 %.

³¹P-NMR

4,14, 4,37;

¹H-NMR :

0,78,	( 6H„	m. ),	1,39,	( 2H,	m. )	1,58,	(	2H,	m. ),	2,77
( 1H,:	m. ),	3,10,-	( 1H,	m. ),	3,56,.	3,59„	(	3H,	s. ),	4,02
( 4H,	m. ),	5,65,	( 1H,	m. ),	5,86,	( 1H,	m.	1,	6,00,	( 1H
m. ),	6 >26,	( 2H,	š.s.	), 7,06	>, ( 2H	), m.	>,	7,21	, ( 3H	), m.
7,77,	7,84r	( 1H,	3. ) ,	8,28,	( 1H,	s.).

Hmotnostní spektrometrie.(ES⁺), sloučeniny dle sumárního vzorce C24H₃^NgO^NaP :

• · • ·

Vypočteno : ^slezeno :

537, 1991, (MH⁺), (m/z);

537, 2000, (MH⁺), (m/z);

Příklad 16)

Příprava (1R,cis )-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1-methanol-0-/ fenyl-methoxy-L-( O-methylt.yrosinyl)/- fosfamidu

Analogickou synthesou, dle stendarního postupu 1), popsaného výše, byla izolována v nadpise uvedená, žádaná sloučenina, ve formě křehké, bíle rakteru, ve zbarvené látky, pěnovitého ch8výtěžku 89,0 % ³¹P-NMR ;

¹H-NMR :

1,62,	( 1H,	m. ),	2,81,	( 1H,	m. ),	2,93,	(	2H,	m.	),	3,12
( 1H,	m. ),	3,64,	3,68,	( 3H,	s. ),	3,74,	(	3H,		),	4,09
( 3H,	m. ),	4,47,	( 1H,	m. ),	5,73,	( 1H,	m,	> ,	5,	94,	( 1H
m. ),	6,11,	( 1H,	m. ),	6,43,	( 2H,	š. s. '	*,	6,75,	( 2H, d.
6,98„	( 2H,	d. ),	7,16,	( 3H,	m. ),	7,27,	(	2H,	m.	),	7,83
7,85r	( 1H,	s. ),	8,36,	8,37,	( 1H,	3. ) .

•4 4444

Příklad 17)

Příprava ( 1R,cis)- 4-( 6- amino-9H-purin-9-yl)- 2-cyklopenten-1-methanol-0-( fenyl-methoxy-D-fenylalaninyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována v nadpise uvedená, žádaná sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovítého charekteru, ve výtěžku 24,0 %, ³¹P-NMR :

3,92, 4,04-, ¹H-NMR:

1,70,	( 1H,	m. ),	2,80,	(	1H,	m. ),	3,10,	(	1H,	m. ),	3,20,
( 1H,	m. ),	3,70,	( 3H,	d.	- ),	4,10,	( 2H,	m.	),	4,60,	( 1H,
k. ),	5,70,.	( 1H,	m. ),	5,	.90,	( 1H,	m. ),	6,	1°,	( 1H,	m. ),
6,50,	( 2H,	d.,),	7,20,	(	10H,	m. ),	, 7,85,	, <	1H,	» ·,	), 8,40,
( 1H,	d.).

Příklad 18)

Příprava (1R„cis)- ( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cvklopenten-1-methanol-0-( fenyl-methoxy-D-leucinyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována v nadpise uvedená, žádaná sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovítého charakteru, ve výtěžku 28,0 %.

• · • · • · · ·

P-NMR :

4,27, 4,36-, ¹H-NMR :

0,80, ( 6H, m. ), 1,50, ( 2H, m. ), 5,90, ( 1H, m. ), 6,05, ( 1H, m. ), 6,55, ( 2H, s. ), 7,20, ( 5H, m. ), 7,80, ( 1H, d. ), 8,23, ( 1H, d. ).

Příklad 19)

Příprava (1R,, cis)- 4- ( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1-ipethanol-O-í feny1-methoxy-D-tryptofenyl)- fosfamidu, ( směs diastereoizomerů )

Analogickou aynthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla eluóvána ze sloupce se silikagelem, za použití směsi 5,0% meth81onu v dichlormethanu, ( v poměru 1,15 : 1,0 ), a izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, jako směs izomerů o vysokém a nízkém R^, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovítého charakteru, ve výtěžku 23,0 %.

³¹P-NMR:

4,.13,,4,23. ;

¹H-NMR:

1,50„	(	1H,.	m. ),	2,65,	( 1H,.	m. ),	3,20,.	( 2H,	m. ) ,	> 3,62
( 3H,	d.	- ),	3,95,	( 2H,	m. ),	4,35,	( 1H,	m. ),	5,67,	, ( 1H
m. ),	5,	>90,	( 1H,	m. ),	6,00,	( 1H,	m. ),	6,40,	(2H,	a. ),
7,20,,	(	9H,	m. ),	7,50,	( 1H,	d. ),	7,73/	( 1H, ;	9. ) ,	8,35,
( 1H,	s,	- ),	9,05,.	( 1H,	a.).

Příklad 20)

Příprava (1R,cis)-4-( 6-8mino-9H-purin-9~yl)-2- cvklopenten-1-methanol-0-( fenvl-methoxy-D-tryptofanyl)- fosfamidu, ( jednotlivý diastereoizomer )

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byly eluovány ze sloupce se silikagelem, za použití směsi 5,0 % methanolu v dichlormethenu, počáteční frakce, obsahující čistý izomer o vyšším Rf ze směsi, popsané výše v předcházejícím, Příkladě 19), jak bylo zjištěno spektry η 1 nukleární magnetické rezonance,( ^J P-NMR), který byl izolován ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru, ve výtěžku 34,0 %, ³¹P-NMR:

4,02 ;

¹H-NMR :

1,50, ( 1H, m. ), 2,70, ( 1H, m. ), 3,20, ( 2H, m. ), 3,60, ( 3H, d. ), 4,0, ( 2H, m. ), 4,30, ( 1H, m. ), 5,70, ( 1H, m.), 5,85, ( 1H, m. ), 6,0, ( 1H, m. ), 7,30, ( 9H, m. ), 7,50, (1H, d. ), 7,80, ( 1H, a. ), 8,40, ( 1H, a. ), 9,20, ( 1H, a. ).

Příklad 21)

Příprava (lR_ycis)-4-( 6-8mino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten -1-methanol-O-C fenyl—.—methoxy-D-jralinyl· ) -fosfoamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru, ve výtěžku 26,0%.

CO ³¹P-NMR :

4,76, 4,85;

¹H-NMR:

0,90,	( 6H,	m. ),	1,80,	(	1H,	m. ),	2,10,	( 1H,	m. ),	3,	>25
( 1H,	m. ),	3,70,	( 3H,	d.		3,90,	( 1H,	m. ),	4,20,	(	2H
m. ),	5,80,	( 1H,.	m. ),	6,	o,	( 1H,	m. ),	6,30,	( 2H,	s.
7,25,	( 5H,	m. ),	7,90,	(	1H,	d. ),	8,40,	( 1H,	s. ).

Příklad 22)

Příprava (1R.cis )-4-( 6-8mino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1-methanol-0-( fenyl-dimethoxy-D-aspartyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučeninja, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru, ve výtěžku 28,0 %.

³¹P-NMR :

3,79, 4,24;

¹H-NMR :

1,70»	( 1H,	m. ),	2,80,	(	3H,	m. ),	3,10,	(	1H,	m. ),	3,60
( 3H,	d. ),	3,70,	( 3H,	d<	7	4,10,	( 2H,	m.	• ),	4,40,	( 1H
m. ),	5,50,	( 1H,	m. ),	5j	,90,	( 1H,	m. ),	6,	JO,	( 1H,	m. )
6,30,	( 2H,	s. ),	7,15,	(	5H,	m. ),	7,80,	(	1H,	d. ),	8,30
( 1H,	d. ).

Příklad 23)

Příprava (IR,cis)-4-( 6- amino-9H-purin-9-yl)- 2-cyklopenten-1- methanol-O-( fenyl-methoxy-L-prolinyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovítého charakteru, ve výtěžku 19,0 %, ³¹P-NMR :

2,89, 3,04;

¹H-NMR :

1,68 - 2,19, ( 5H, š.m. ), 2,94, ( 1H, m. ), 3,32, ( 2H, m.),

3,42, ( 1H, m. ), 3,61, 3,74, ( 3H, s. ), 4,12, 4,30, ( m.,5

H ), 5,70, ( 2H, š.s. ), 5,81, ( 1H, m. ), 5,98, ( 1H, m. ), 6,19, 6,25, ( 1H, m. ), 7,21, ( 2H, m. ), 7,35, ( 3H, m.),

7,88, 8,02,, ( 1H, s. ), 8,43, ( 1H, s.).

Příklad 24)

Příprava (1R,cis)- 4- ( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1-meth8nol-0-( fenyl-methoxy-L-isoleucinyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byle izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovítého charakteru, ve výtěžku 45,0 %, ³¹P-NMR :

4,55, 4,72;

¹H-NMR :

0,92,	( 6H,	m. ),	1,16,	( 1H,	m. ),	1,42,	( 1H,	m. ),	1,77,
( 2H,	m. ),	2,99,	( 1H,	m. ),	3,22,	( 1H,	m. ),	3,62,3	,66,
( 3H,	s. ),	3,84,	( 2H,	m. ),	4,22,	( 2H,	m. ),	5,74,	( 1H,
m. ),	5,99,	( 3H,	m. ),	6,17,	( 1H,	m. ),	7 1 1	( 2H),	7,29
( 3H,	m. ),	7,86,	7,92,	( 1H,	s · ),	8,36,	( 1H,	s. ).

Příklad 25)

Příprava (1R_řcis)-4-( 6-emino-9H-purin-9-yl)- 2-cyklopenten-1- methanol-0-( fpnyl“methoxy-L-norvelinyl)- fosfemidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byle izolováno žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovítého charakteru, ve výtěžku 73,0 %.

G3 ♦ · ³¹P-NMR ::

4,10, 4,35;

¹H-NMR :

0,88,	(	3H,	t., J	= 8,40 )	, 1	,32, (	2H, m.		), 1,71, (	3H, 1
2,9Í„	(	1Hr	m. ),	3,-20,	(	1H,	m. ),	3,65,.	3	,68, ( 3H,	s. )
3,87,	(	1H,	m. ),	4,03,	(	2H,	m. ),	4,19,	(	1H, m. ),	5,74
( 1H,	m<	, ),	5,93,	( 1H,	m.		6,05,	( 2H,	š	.s. ), 6,13	, (
m. ),	7,	J4,	( 2H,	m. ),	7,	28,	( 3H,	m. ),	7	,83, 7,90,	( 1H
θ,34,	(	1H,	s. ),

Příklad 26)

Příprava (1R„cis)-4-( 6-amino-9H~purin-9-yl)- 2- cvklopenten-1-methanol-0-( fenyl-i- propoxy-L-fenylalaninyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená slou-

Čenin8, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovítého charakteru, ve výtěžku 76,0 %,
31p-nmr 3,97; 1H-NMR :	• •

1,20,. ( 6H, m. ), 1,66, ( 1H, m. ), 2,82, ( 1H, m. ),2,98, ( 2H, m. ), 3,11,. ( 1H, m. ), 3,79 - 4,06, ( 4H, š.m. ), 5,72, ( 1H, m. ), 5,96, ( 1H, m. ),. 6,08,, ( 3H, m. ), 7,23, ( WH,m .)

7,87, ( 1H, s. ), 8,34, ( 1H,s.

Příklad 27)

Příprava (1R, cis )-4-( 6-amino-9H-purin-9-vl)-2-cvklopenten-1- methanol-0-( fenyl- terč.- butoxy-L-fenylalaninyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovítého charakteru, ve výtěžku 51,0 %.

³¹P-NMR ::

4,14,, 4,O9J_: ¹H-NMR

',3’,	í,34„	( 9H,	s. ),	1,56,	(	1H,	m. ),	2,75,	( 1H,	m. ),
2,90,	( 2H,	m. ), 3,20,	( 1H,	m.	),	3,94,	( 4H,	m. ),	5,63,
( 1H,	m. ),	5,86,	( 1H,	m. ),	6,	02,	( 3H,	m. ),	7,13,	( 10H
m. ),	7,73,.	( 1H, s. ),	8,29,	(	1H,	s. ).

Příklad 28)

Příprava (1R,cis)- 4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1- methanol-0-/ fenyl-(2,2- dimethylpeopoxy)- L- fenvlaleninyl/- fosf8midu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovítého charakteru, ve výtěžku 23,0 • · · ·

³¹P-NMR :

3,94,. 3,99-, ¹H-NMR :

0,85,	0,92,	(	9H,	s. ),	1,62,	( 1H,	m.	• ),	2,80,	(	1H	, m. ),
3,03,..	( 2H,.	m.	),	3,20,	( 1H,	m. ),	3i	>79,	( 3H,	m.	)	, 4,02,
( 2H,	m. ),	4,	29,	( 1H,	m. ),	5,73,.	(	1H,	m. ),	5,	92	, ( 1H,
m. ),	6,02,	(	2H,	ě.s.	), 6,09	', < Ή,	m.	), 7,18		(	10H, m.),
7,81,	7,83,	(	1H,	a. ),	8.36,	8,37,	(		a. ),

Příklad 29)

Příprava (1R,cis)-4-( 5-amino-9H- purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1-methanol-0-( f engrl-benzyloxy-L-fenylalaninyl)- fosfamidu

Analogickou syntheaou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovítého charakteru,. ve výtěžku 53,0 ³¹P-NMR ::

3,8$„ 3,90;

¹H-NMR :

1,56„	(	1H„	m.	),	2,81,	( 1H,	m. ),	3,02,	(	3H, m. ), 3	,92,
( 3H,	m ·	),	4,	27,	( 1H,	m. ),	5,11,	( 2H,	m.	), 5,69, (	IR,
m. ),	5,	85,	(	1H,	m. ),	6,03,	( 3H,	š.s.	),	6,94, ( 2H,	m.),
7,13,	(	13H,	m		7,77r	7,78,	7 „80,	( 1H,	a.	), 8,34,(	1H, a.k

• · · ·

GG

Příklad 30)

Příprava (1R,cis)- 4- ( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1-meth8nol-0- /( 2-karbomethoxy )-feny1-methoxy-L- slaniny1/fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 3), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru·. ve výtěžku 39,0 ³¹P-NMR :

3,95, 4,05;

¹H-NMR :

1,	>28,.	( 6H,	m. ),	1,69,	( 1H,	m. ),	2,	80,	(	1H,	m. ),	3	,15
(	1H,	m. ),	3,52,	3,60,	( 3H,	a. ),	4,	18,	(	5H,	m. ),	5	,70
(	1H,	m. ),	5,88,	( 1H,	m. ),	7,16,	(	1H,	m.	),	7,44,	(	2H
m.	• ),	7,80,	( 1H,	m. ),	7,87,	7,92,	(	1H,	a.	• ),	8,28,<	(	1H,

Hmotnostní spektrometrie,(E/I):

Vypočteno : 567, 1733*,

Nalezeno

567, 1722;

Příklad 31)

Příprava (1R,.cis)- 4- ( 6- amino-9H~purin-9-yl)- 2- cyklopenten- 1- methanol-0-/4-( 3-oxo-3-fenylpropenylf enyl-methoxy-Lalaninyl/- fosfamidu

Analogickou synthesou,. dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovítého charakteru, ve výtěžku 74,0 %.

³¹P-NMR :

3,68, 3,97;

¹H-NMR :

1,40,	( 3H,	m. ),	1,78, (	1H,	m. ), 2,93, (	1H,	m. ), 3,25,
( 1H,	š.s.	), 3,75	,· < 3H,	s.	), 4,27,. ( 3H,	m.	), 5,78, ( 1H,
m. ),	6,10,	( 1H,	m. ), 6,	J9,	( 1H, m. ), 7,	.25,	( 1H, m. ),
7,32,.	( 2H,	m. ),	7,58, (	4H,	m. ), 7,90, (	1H,	s. ), 8,05,
( 2H,	3. ) ,	8,50,	( 1H, s.	, ).

Hmotnostní spektrometrie,(El):

Vypočteno :

625. 1940;

Nelezeno

625. 1956;

Příklad 32)

Příprava (1R,cis)-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1-methanol-0-( fenyl-methoxy-glycinyl)- fosfamidu * · · ·

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru, ve výtěžku 38,0 ³¹P-NMR :

4,51·, ¹H-NMR :

1,72,	(	1H,	m. ),	2,82,	(	1H,	m. ),	3,20,	( 1H,	m. ),	3,70
( 3H,.	s.	>,	4,00,	( 2H,	m.	),	4,20,	( 2H,	m. ),	5,68,	( 1H
m. ),	5,	90ř	( 1H,	m. ),		15,	( 1H,	m. ),	7,20,	( 5H,	m. )
7,99,.	(	1H,	s · ),	8,31,	(	1H,	3. ) .

Hmotnostní spektrometrie,(El):

Vypočteno :

Nalezeno :

481. 1365;

481, 1373;

Příklad 33)

Příprava ( IR,cis)-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2-c.yklopenten-1-me thanol-0-( fenyl-methoxy-L-valinyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1, popsaného výše,, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru, ve výtěžku 86,0 %.

³¹P-NMR :

4,64, 4,84;

¹H-NMR :

0,83,	( 6H,	m. ),	1,65,	( 1H,	m. ),	1,95,	( 1H,	m. ),	2,82
( 1H,	m. ),	3,.15,	( 1H,	m. ),	3,60,	3,65,	( 3H,	s. ),	3,78
( 1H,	m. ),	4,11r	( 2H,	m. ),	5,68,	( 1H,	m. ),	5,89,	( 1H
m. ),	6,12,	( 1H,	m. ),	7,10,	( 2H,	m. ),	7,22,,	( 3H,	m. )
7,84,	7,92,.	( 1H,	s. ),.	8,29,.	( 1H,	a. ).

Hmotnostní spektrometrie, (El):

Vypočteno : 523. 1835;

Nalezeno ::

523. 1855;

Příklad 34)

Příprava (1R,cis )-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cvklopenten-1-meth8nol-0-( fenyl-methoxy-L-methioninyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou,. dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru,, ve výtěžku 96,,0 ³¹P-NMR :

3,T9. 4,.19/

¹H-NMR ::

1,70,	(	1H,	m. ),	1,85,	( 2H,	m. ),	1,97,	( 3H,	s · ),	2,39
( 2H,	t.	• ),	2,81,	( 1H,	m. )„	3,15,	( 1H,	m. ),	3,64,	3,67
( 3H,	s.	• ),	3,91,	( 1H,	m. ),	4,13,	( 2H,	m. ),	5,68,	( 1H
m. ),	5,	,89,	( 1H,	m. ),	6,12,	( 1H,	m. ),	7,12,	( 2H,	m· )
7,28,,	(	3H,	m. ),	7,90,	8,00,	( 1H,	s» ),	8,29,	( 1H,	3. )

Hmotnostní spektrometrie.(E/I):

Výpočténoí::

Nelezeno ::

555, 1555;

555, 1567-,

Příklad 35)

Příprava (1R,cis)- 4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)-2- cvklopenten-1- methanol-0-( fenol-ethoxy-alfa,alfa- dimethylglycinyl) fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru, ve výtěžku 91,0 %.

³¹P-NMR :

2,51;

¹H-NMR

1,30,, ( 3H, t. ), 1,57, ( 6H, m. ), 1,73, ( 1H, m. ), 2,88, »**·

( 1H,.	m. ),	3,	22,	( 1H,	m.	),	4,	J9,	( 4H,	m. ),	5i	»74,	( 1H
m. ),	5,95,	(	1H,	m, ),	6,	19,	(	1H,	m. ),	7,23,	(	5H,	m. )
7,92,	7,96ř	(	1H,	s. ),	8,	35,	(	1H,	s. )»

Příklad 36)

Příprava (1R,cis )-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)-2- cyklopenten-1-me thanol-O-( feny1-isopropoxy-alfa,alfa- dimethylglycinvl)fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovítého charakteru,. ve výtěžku 21,0 %, ³¹P-NMR ::

2,56-, ¹H-NMR ::

1,30,	(	6H,	m. ),	1,58,	( 6H,	m. ),	1,78,	(	1H,	m.	, ), 2.	»90
( 1H,	m<		3,24,	( 1H,	m. ),	4,08,	( 1H,	m<	. ),	4,	,20, (	2H
m. ),	5j	,07,	( 1H,	m. ),	5,65,	( 2H,	š.s.	),	6,00,	( 1H,	m.
6,20„	(	1H,	m. ),	7,26,	( 5H,.	m. ),	7,83,	7,	»89,	(	1H, s,	, )
8,43,	(	1Hr	s. ).

Příklad 37)

Příprava (1R_rcis)-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1- methanol-O-/ fenyl-( 2,2- dimethylpropoxy- álfa,alfa- dimethylglycinyl/- fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 2), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru,. ve výtěžku 38,0 %, ³¹P-NMR :

2,42,, 2,-44;

¹H-NMR ::

0,99,.	( 9H,	s. ),	1,61,	( 6H,	d.d. '	),	1,74	, < 1H,	m.	),	2,90,
( 1H,	m. ),	3,23,	( 1H,	m. ),	3,86,	(	2H,	s. ), 4	,20,	(	2H,
m. ),	5,78,	( 1H,.	m, ),	6,00,	( 1H,	m.	),	6,20, (	1H,	m.	),
7,28,.	( 5H,	m. ),	7,86,	7,92,	( 1H,	s.	),	8,40,. (	1H,	s.	).

t

Příklad 38)

Příprava (1R,cis)-4-(6-8mino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1- methanol-0-( fenyl-methoxy-cvklopentanglycinyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru, ve výtěžku 54,0 %, « ♦ ³¹P-NMR :

2,94-, ¹H-NMR ;;

1,67,	( 1H,	m.	),	2,04,	( 8H,	m.	),	2,91,	( 1H,	m. ),	3,24
( 1H,	m. ),	3,	75 „	( 3H,	s. ),	4,	25,	( 2H,	m. ),	5,80,	( 1H
m. ),	6,02,	(	1H,	m. ),	6,22,	(	1H,	m. ),	7,25,	( 5H,	m. )
7,90,.	8,00,.	(	1H,	s. ),	8,45,	(	1H,.	s. ) ·

Hmotnostní spektrometrie,(El):

Vypočteno :

535, 1835;

Nelezeno

535, 1816;

Příklad 39)

Příprava (1R,cis )-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1-methanol-O-C fenyl-methoxy-cyklohex8nglycinyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovitého charakteru, ve výtěžku 44,0 %, ³¹P-NMR ::

2,88;

«· ··· · • * • · ··	• •	·· * * • · ·	<·· ·· » » «. «
« · ·	•	. « » « ·	® · f
» ·	t	L »·	• » · ·
···· ···		• 4 *·	• Λ * ·

¹H-NMR ::

1,64,	( 10H,	, m. ), 1	,71	, ( 1H,	m	• \	> 2,85.	, ( 1H,	, m, ).	, 3,20,
( 1H,	m. ),	3	,7b- (	3H,	s. ),	4,	19,	( 2H,	m. ),	5,76,	( 1H,
m, ),	5,98,	(	1H, m.	b	6,17,	(	1H,	m. ),	7,25,	( 5H,	m. ),
7,85,	7,95,	(	1H, s.	b	8,42,	(	1H,	s. ).

Hmotnostní spektrometrie,(El):

Vypočteno : Nalezeno :

549· 1991;

549, 2008;

Příklad 40)

Příprava (1R,cis)- 4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- c^klopenten -1- methanol-0-( fenyl-dimethoxy-L-aspertyl)- fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 2), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená slou čenina, ve formě křehké, bíle rakteru, ve výtěžku 34,0 %·

3¹P-NMR :

3,78, 4,38;

¹H-NMR :

l, 74, ( 1H, m. ), 2,85, ( 1H, ( 2H, s. ), 3,65, ( 3H, s. ),

m. ), 4,26, ( 2H, m. ), 5,71, zbarvené látky, pěnovitého cháni. ), 3,22, ( 1H, m. ), 3,50,

3,75, ( 3H, s. ), 4,13, ( 1H, ( 1H, m. ), 5,92, ( 1H, m. ),

6,23, ( 1H, m. ), 7,16,. ( 5H, m. ), 8,00, ( 1H, nu ), 8,13, 8,21, ( 1H, 3r ).

Příklad 41)

Příprava (1R,cis )-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cvklopenten-1-methanol-O-/( 4- chlorfenyl)-methoxy-L-alaninyl/~ fosfamidu

Analogickou synthesou, dle standardního postupu 1), popsaného výše, byla izolována žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě křehké, bíle zbarvené látky, pěnovítého charakteru, ve výtěžku 28,0 ³¹P-NMR :

3,88, 4,16;

¹H-NMR, ( CDC1₃):

1,30,	( 3H,	m. ),	1,70,	(	1H,	m. ),	2,90,	( 1H,	nu ),	3,20
( 1H,	m. ),	3,70,	( 3H,	d.	),	4,20,	( 2H,	m. ),	5,70,	( 1H
m. ),	6,00,	( 1H,	m. ),	6,	20,	( 1H,	m. ),	7,30,	( 4H,	m. )
7,95,.	( 1H,	d. ),	8,40,	(	1H,	d. ).

Příklad 42)

Příprava (1R,cis)-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2-cyklopenten-1-methenol-0-(L-( methylamino)-alaninyl)- fosfamidu • · · * • · • ·

Do 2,0 ml, roztoku 40,0 %ního methylaminu, bvlo nasuspendováno 60,0 mg, ( 0,127 mmol), (1R,cis)-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1-methanol-0-/ fenyl-( methoxy/-Lalaninyl/- fosfamidu, ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 2), á vzniklá reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 4,0 hodin.

Poté byly tě-kavé složky odstraněny odstředivým odpařením za vakua, a vzniklý zbytek byl rozpuštěn ve 20,0 ml, vody, a poté byl 2x extrahován vždy s 20,0 ml, dichlormethanu, a následně byl přečištěn chromatografii na anexu, za použití patrony Sep-P8k^^R) Vac 35 cc( spřaŽené klastry), Accell^^R^ Plus QMA, ( Waters Co., P/N WAT 054725)( HCO^- forma), za použití vodného amonium hydrogenuhličitanového pufru ( 0 - 0,5M gradient, 1,0 litr ).

Poté, co byl# příslušné frakce spojeny, byly těkavé složky odstraněny odstředivým odpařením za vakua. Vzniklý zbytek byl 2x rozpuštěn v deionizované vodě, a opět odstředivým postupem za vakua zpracován.

Byla získána amonná sůl v nadpise uvedené sloučeniny, která byla rozpuštěna v deionizované vodě, a zpracována za použití patron Sep-Pak^) Vac 20 cc ( spř8Žené klastry) Accell^^ Plus CM , ( Waters Co., P/N WAT 054675), Na⁺ forma), v deionizované vodě.

Lyofilizací ( vymražení), příslušných frakcí, byla získána sodná sůl v? nadpise uvedené, žádané sloučeniny, ve formě bíle zbarvené, pevné látkyí 26,0 mg )_r ve výtěžku 52,0 %, ¹H-NMR, ( D₂0):

delta, 7,92, ( s., 1H ), 7,91, ( s., 1H ), 6,09 - 6,15, ( m.,

1H ), 5,83 - 5,88, ( m., 1H ), 5,30 - 5,40,, ( m., 1H ), 3,62, ( t., J = 5,30., Hz, 1H ), 3,28 - 3,48, ( m., 2H ), 2,92 3,04, ( š.m. , 1H ), 2,58 - 2,71, ( m., 1H ), 2,44 - 2,5l,(m.,

3H ), 1,36 - 1 ,46, ( m., 1H ), 1,01, ( d., J = 6,80 Hz, 3H).

η • · · ·

³¹P-NMR,(D₂O):

6,55;

Hmotnostní spektrometrie,(ES): 394,0, (M-H),(m/e);

Příklad 43)

Příprava (1R,cis )-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)-2- cyklopenten-1- methanol-0-( fenyl)-fosfátu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci předcházejícího Příkladu 42), bvlo připraveno 99,0 mg,( výtěžek 57,0 %), amonné sole v nadpise uvedené, žádané sloučeniny, ve formě hygroskopické, pevné látky, s tím rozdílem, že v reakci byl nehražen oxychlorid fosforéěný s feny1-dichlorfosfátem, a těkavé složky byly odstraněny odpařením za vakua.

^]H-NMR, ( D₂0):

delta, 7,92, ( s.,	1H ),	7,75, ( s., 1H ), 6,82 - 6,92,	( m.,
2H ), 6,62 - 6,76,	( m.,	3H ), 6,08, ( m., 1H ), 5,81 -	5,88,
( m., 1H ),. 5,16 -	5,25,	( m., 1H ), 3,79 - 3,.88,. ( m.,	1H ),
3,61 - 3,72, ( m.,	1H ),	3.2.95 - 3.3.06,. ( š.m. ), 1H)	, 2,42
- 2,58ř ( m., 1H ),	1,18	- 1,30,. ( m., 1H ).

³¹P-NMR,,( D₂0):

-4,56,. ( m., 1P );

Hmotnostní spektrometrie,(ES):

386,0,(M-H),(m/e);

• · ♦ · • ·

YZ

• · · ·

Příklad 44)

Příprava (1R,cis )-4-( 6- amino-9H-purin-9-y1)- 2- cyklopenten-1- methanol-O- monofosfátu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 200,0 mg, ( 0,865 mmol), (1R,cis)-4-( 6- amino-9H-purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1- methanolu, ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 1), ve 2,0 ml, 1,3- dimethyl-3,4,5,6- tetrahydro-2(1H)- pyrimidinonu, bylo přidáno za stálého míchání, a při teplotě 0,0 °C, 0,24 ml, ( 0,26 mmol), oxychloridu fosforečného.

Po uplynutí 1,0 minuty bylo přidáno ku reakční směsi 3,30 ml, ( 3,30 mmol), 1M roztoku hydrogenuhličitenu sodného, a tato reakční směs bvla míchána nejprve při teplotě 0,0 C po dobu 30,0 minut, a poté ještě při teplotě 25,0 °C po dobu 1,0 hodiny.

Poté, po neředění reakční směsi se 125,0 ml,deionizované vody, byla nanesena na chromátografický sloupec s iontoměničem, ( 1,1 x 7,0 cmj Sephadex^í-DEAE A-25 = 2-(diethylamino )(R) ethyl - Sephadex , který byl promyt s 1,0 M amonium hydrogenuhličitanotoým pufrem, a poté byl uveden do rovnováhy s deionizovanou vodou.

V nadpise uvedená sloučenina byla gradientově eluována se 2,0 litry 0 až 0,5M roztokem hvdrogenuhličitanu amonného, 8 příslušné frakce byly spojeny, 8 těkavé složky byly následně odstraněny odpařením za vakua.

Zbytek byl znovu rozpuštěn ve 20,0 ml, deionizované vody, a za vakua byl odpaření celkem 3x )· Po lvofilizaci zbytku z vody, bylo získáno 270,0 mg, monoamoniové sole, monohvdrátu, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve výtěžku 90,0 %.

¹H-NMR, (DO):

delta, 8,10,. ( s., 2H ), 6,14 - 6,20, ( m., 1H ), 5,84 - 5,90, ( m., 1H ),. 5,48 - 5,58, ( m.,. 1H ), 3,71 - 3,86_r ( m., 2H ),

3,02 - 3,14, ( š.m., 1H ), 2,66 - 2,80, ( m., 1H ), 1,56 1,66, ( m., 1H ).

³¹P-NMR,( DgO) :

0,62;

Hmotnostní spektrometrie,(ES“): , 310,0,(M-H),(m/e);

• ·

Příklad 45)

Příprava (1R,cis )-4-( 6-amino-9H~purin-9-yl)- 2- cyklopenten-1-methanol-0- difosfátu

V nadpise uvedená sloučenina, by18 připravena modifikovaným postupem, popsaným v odborném časopise J.Chem.Soc.Chem. Commun., 127&, /1991/,( Broomovs metods, autoři Mighra N.C. a Broom A.D. ).

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 231,0 mg, ( 1,0 mmol), (!R,cis)-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)- 2- cvklopenten-1methanolu, ( získaného v rámci výše popsaného Příkladu 1), ve 5,0 ml, trimethylfosfátu, a vychlazeného na teplotu 0,0 °C, bylo přidáno za stálého míchání 0,27 ml, ( 3,00 mmol), oxychloridu fosforečného, a po uplynutí 3,0 hodin,6yl- přidán; za stálého míchání, k vychlazené reakční směsi ne teplotu 0,0 °C, roztok; získaný rozpuštěním 1,14 g, ( 10,0 mmol ), kyseliny fosforečné, ( 86,0 %ní produkt), a 2,40 ml, ( 10,0 mmol), tri-n-butylaminu, v 15,0 ml, dimethylformamidu, a poté, bezprostředně, Ještě 3,0 ml, tri-n- butylaminu.

Po uplynutí 1,0 minuty bvlo ku reakční směsi přidáno.,

100,0 ml,. 1Mtriethylamonium - hvdrogenuhličitanového pufru, a směs byla míchána dále po dobu 30,0 minut. Poté byla reakční aměa neředěna s 3,0 litry deionizované vody, a byla nanesena na chromatografický sloupec s iontoměničem ( 1,1 x í P )

7,0 cm, Sephadex- -DEAE A-25, ( Aldrich), a poté byla promyta s 1M roztokem hvdrogenuhličitanu amonného, a předem uvedena do rovnováhy s deionizovanou vodou.

V nadpise uvedená sloučenina byla eluována se 4,0 litry ( gradientová eluce) , s 0 až 0,5M roztokem hydrogenuhličitanu saonňéh© s po spojení všech příslušných frakcí, byly těkavé složky za vakua odstraněny.

Po opětovném rozpuštění zbytku ve vodě, a následném odření roztoku, bylo získáno 0,37 mmol amonné sole v nadpise uvedené, žádané sloučeniny, ve výtěžku 37,0 %.

Ultrafialová spektrofotometrie,(UVj O,1M HC1) :

Lambda, max. = 260 nm.

UV čistota, ( detekce při 254 nm), byla zjištěna 100,0 %, při použití analytické vysokovýkonné kapalinové chromatografie, ( HPCL), se silným měničem iontů, ( anex), / Whstman Partisil 5, SAX RAC II, 0,05 M až 0,95 gradient s pufrem fosforečnanu amonného, pH 5,5), 5,0 %ní methanol /· ¹H-NMR, (D₂0):

delta, 8,06, ( s., 1H ), 8,05, ( s., 1H ), 6,13 - 6,21, ( m,,

1H ), 5,82 - 5,88, ( m., 1H ), 5,45 - 5,53,. ( m., 1H ), 3,76 3,90,. ( m., 2H ), 3,02 - 3,16, ( š.m., 1H ), 2,64 - 2,78,( m., řH ),1 ,52 - 1 ,64,. ( m., 1H ).

³¹P-NMR,.( D₂0):

• · · · • ·

-9,90, ( ď:, 1P, J = 20,30 Hz ), -10,84, ( d., 1P, J = 20,30 ).

Hmotnostní spektrometrie,(ES): 390,0,(M-H),(m/e)J

Příklad 46)

Příprava (1R,cis )-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)-2- cyklopenten-1-methanol-0- trifosfátu

Kontinuální elucí sloupce, popsaného v rámci předcházejícího Příkladu 45), a následným odpařením, bvlo získáno 11,40 mmol amonné sole v nadpise uvedené sloučeniny, ve výtěžku 11,4 %.

Ultrafialová spektrofotometrie,( UV* 0,1 M HC1):

Lambda, max. = 260 nm.

UV čistota, ( detekce při 254 nm), byle zjištěna 98,0 %, při použití analytické vysokovýkonné kapalinové chromatografie, ( HPCL ), se silným měničem iontů, ( anex), / Whatman Pertisil 5, SAX RAC II, 0,05 M až 0,95 M gradient s pufrem fosforečnanu amonného, pH 5,5 ), 5,0,%ní methanol/.

¹H-NMR,. (D₂0):

delta, 8,10, ( s., 2H ), 6,18 - 6,23, ( m., 1H ), 5,84 - 5,90, ( m., 1H ), 5,41 - 5,59, ( m., 1H ), 3,82 r 3,98, ( m., 2H ),

3,04 - 3,18, ( š.m., 1H 1, 2,54 - 2,66, ( m., 1H ), 1,52 - 1,64, ( m., 1H ).

η ³¹P-NMR, ( D₂0):

-8,38, ( m., 1P ), 10,85, ( d., 1P, J = 19,30 Hz ), -22,73, ( m.,. 1P ).

Hmotnostní spektrometrie, (ES*):

470,0, (M-H),(m/e);

Příklad 47)

Testování anti-HIV aktivity

Anti-HIV aktivita v MT^ buňkách u sloučenin, uvedených v předloženém vynálezu, bvla testována metodou,, popsanou v odborném časopise J.Virol.Methods, 23, 263 - 276,/1989/, autor Averett D.R.

Aktivita zmíněných sloučenin se pohybovala v rozmezí od I0₅₀ 0,009 do 2,10 _/UM.

Příklad 48)

Testování aktivity vůči viru hepetitidy B

Sloučeniny, uvedené v předloženém vvnálezu, byly testovány na antivirovou aktivitu vůči viru hepstitidy B, dle metody, popsané v odborném časopise Antimicrobial Agents and • ·

Chemotherapy, 37, č.3, str.441 - 447,/1993/, a výsledky jsou publikované v Tabulce, uvedené dále.

Hodnoty sloučenin, uvedených v předloženém vynálezu, demonstrují ve srovnání s příslušným nuklesidovým analogem, t.j. ( 1R,cis)-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl)-2- cyklopenten—1— methanol, zlepšenou, téměř 500x vyšší aktivitu.

Výsledky zkoušek na účinnost proti viru hepatitidy B jsou shrnuty v následující tabulce:

Příklad	IC50 (mM)	Index selektivity
z	0,018	1300
4	0,033	6100
5	0,0075	1250
6	0,0045	2000
7	0,0032	5000
8	0,11	>1800
9	0,002	5000
1	0, 98	>200

Příklad 49

Tablety

Následující prostředky A, B a C ve formě tablet byly připraveny granulací složek za vlhka při použiti roztoku polyvinylpyrrolidonu s následným přidáním stearanu hořečnatého a slisováním.

• · · *

Prostředek A mg/tableta

účinná látka	250
laktóza	210
polyvinylpyrrolidon	15
sodná sůl glykolátu škrobu	20
stearan hořečnatý	5
	500
Prostředek B
	mg/tableta
účinná látka	250
laktóza	150
Avicel PH 101	60
polyvinylpyrrolidon	15
sodná sůl glykolátu škrobu	20
stearan hořečnatý	5
	500
Prostředek C
	mg/tableta
účinná látka	250
laktóza	200
škrob	50
polyvinylpyrrolidon	5
stearan hořečnatý	4
	509
Následující prostředky D a E	byly připraveny přímým
slisováním směsi složek. K tomuto	účelu byla v prostředku
E použita laktóza typu, vhodného	pro přímé slisování

(Dairy Crest-Zeparox).

Prostředek E účinná látka laktóza

Avicel

Prostředek D mg/tableta účinná látka 250 předem gelatinizovaný škrob NF 15 150

400 mg/tableta

250

150

100

500

Prostředek F (s řízeným uvolňováním)

Tento prostředek byl připraven granulací složek za vlhka při použití roztoku polyvinylpyrrolidonu s následným přidáním stearanu hořečnatého a lisováním.

	mg/tablet
účinná látka	500
hydroxypropylmethylcelulóza
(Methocel K4M Prémium)	112
laktóza	53
polyvinylpyrrolidon	28
stearan hořečnatý	7
	700
K uvolnění účinné látky dochází	v průběhu 6

hodin, uvolňování je úplně ukončeno po 12 hodinách.

Přiklad 50

Kapsle

Prostředek A

Kapsle se připraví tak, že se smísí složky svrchu uvedeného prostředku D z přikladu 49 a vzniklá směs se plní do dvoudílných kapslí z tvrdé želatiny. Prostředek B se připraví obdobným způsobem.

Prostředek B mg/kapsle

účinná látka	250
laktóza	143
sodná sůl glykolátu škrobu	25
stearan hořečnatý	2
	420
Prostředek C
	mg/kapsle
účinná látka	250
Macrogel 4000	350

600

Kapsle ve formě prostředku C se připraví tak, že se roztaví Macrogel 4000, v tavenině se disperguje účinná látka a tavenina se plní do dvoudílných kapslí z tvrdé želatiny.

Prostředek D	mg/kapsle
účinná látka	250
lecithin	100
arašídový olej	100
450

Kapsle se připravují tak, že se účinná látka disperguje ve směsi lecithinu a arašídového oleje a vzniklá disperze se plní do kapslí z měkké elastické želatiny.

Prostředek F účinná látka vitamin E TPGS polyethylenglykol 400 propylenglykol mg/kapsle

150,0

400,0

200.5

39.5

790 kg vitaminu E TPGS (Eastman Chemical Co.) se zahřeje na 50 °C až do zkapalnění. Ke kapalnému vitaminu E TPGS se přidá 2,005 kg polyethylenglykolu 400 s nízkým obsahem aldehydu pod 10 ppm (Union Carbide nebo Dow Chemical Co.) s teplotou 50 °C a směs se míchá až do vzniku homogenního roztoku. Výsledný roztok se zahřeje na 65 °C. V roztoku vitaminu E TPGS a PEG 400 se rozpustí 1,5 kg účinné látky. Pak se při teplotě místnosti přidá ještě 0,395 kg propylenglykolu a směs se míchá až do vzniku homogenního roztoku, který se pak zchladí na teplotu 28 až 35 °C. Pak se roztok zbaví plynů. Směs se s výhodou plní do kapslí při teplotě 28 až 35 °C tak, aby každá kapsle obsahovala 150 mg účinné látky bez těkavých • · složek. K plněni se užijí bílé neprůhledné kapsle z měkké želatiny velikosti 12, které se plní v běžném zařízení pro plnění kapslí. Kapsle se suší do stálé vlhkosti 3 až % a tvrdosti 7 - 10 N a uloží se do vhodného obalu.

Prostředek F (kapsle s řízeným uvolňováním)

Následující prostředek ve formě kapsle s řízeným uvolňováním se připraví tak, že se složky a, b a c vytlačují ve vytlačovacím zařízení s následnou sferonizací vytlačeného materiálu a sušením. Usušené pelety se pak opatří membránou d pro řízené uvolňování a plní do dvoudílných kapslí z tvrdé želatiny.

mg/kapsle

(a)	účinná látka	250
(b)	mikrokrystalická celulóza	125
(c)	laktóza	125
(d)	ethylcelulóza	13

513

Příklad 51

Prostředek pro injekční podání

Prostředek A účinná látka 200 mg roztok 0,1 M kyseliny chlorovodíkové nebo

0,1 M hydroxidu sodného do pH 4,0 až 7,0 sterilní voda do 10 ml

Účinná látka se rozpustí ve většině vody s teplotou 35 až 40 °C a pH se upraví na rozmezí 4,0 až 7,0 přidáním kyseliny chlorovodíkové nebo hydroxidu sodného podle

potřeby. Směs se pak doplní vodou na určený objem a zfiltruje přes sterilizační filtr do sterilní lahvičky z tmavého skla s objemem 10 ml, typu 1 a lahvička se uzavře sterilním uzávěrem a dalším ochranným uzávěrem.

Prostředek B účinná látka 125 mg sterilní, bezpyrogenní fosfátový pufr o pH 7 do 25 ml

Příklad 52

Injekční prostředek pro nitrosvalové podání účinná látka

200 mg

benzylalkohol	0,10 g
glycofurol 75 voda pro injekční podání do	1,45 g 3,0 ml

Účinná látka se rozpustí v glycofurolu. Přidá se benzylalkohol a po rozpuštění se doplní voda do 3 ml. Pak se směs zfiltruje přes sterilizační filtr a těsně uzavře do sterilních lékovek z tmavého skla s objemem 3 ml typu 1.

Příklad 53

Sirup

účinná látka	250 mg
roztok sorbitolu	1,50 g
glycerol	2,00 g
benzoát sodný	0,005 g
broskvová příchuť 17.42.3169	0,0125 ml
čištěná voda do	5,00 ml

Účinná látka se rozpustí ve směsi glycerolu a ve většině čištěné vody. Pak se přidá vodný roztok benzoátu sodného a sorbitolový roztok a nakonec příchuť. Směs se doplní na požadovaný objem čištěnou vodou a dobře se promíchá.

Příklad 54

Čípky mg/čípek účinná látka 250 tuhý tuk (Witepsol H15-Dynamit Nobel)________1770

2020

Pětina množství tuhého tuku Witepsol H15 se roztaví v pánvi, opatřené parní manžetou při maximální teplotě 45 °C. Účinná látka se nechá projit sítem s průměrem otvorů 20 mikrometrů a pak se přidá do roztaveného základu za stálého míchání při použití míchadla Silverson, opatřeného hlavou pro střihové namáhání.

V míchání se pokračuje až do dosažení homogenní disperze. Pak se při udržování teploty na 45 °C přidá k suspenzi zbývající množství Witepsolu H15 a směs se dále míchá až do vzniku homogenní směsi. Pak se suspenze nechá projít nerezovým sítem s průměrem otvorů 250 mikrometrů a za stálého míchání se nechá zchladnout na 45 °C. Při teplotě 38 až 40 °C se pak směs plní po podílech 2,02 g do vhodných forem z plastické hmoty s objemem 2 ml. V nich se čípky nechají zchladnout na teplotu místnosti.

Přiklad 55

Pesary mg/pesar účinná látka 250 bezvodá dextróza 380 bramborový škrob 363 stearan hořečnatý 7

1000

Všechny složky se přímo smísí.

Příklad 56

Stabilita v kyselém prostředí

Sloučeniny podle vynálezu byly podrobeny zkouškám na stálost proti hydrolytickému rozkladu v kyselém prostředí zkouškou, která se obvykle užívá k napodobení podmínek v žaludku. Každá ze sloučenin byla inkubována v počáteční koncentraci 0,3 mg/ml ve zředené kyselině chlorovodíkové při pH 1 a při teplotě 37 °C. Vysokotlaká kapalinová chromatografíe HPLC byla provedena v čase t=0 a pak v příslušných intervalech v průběhu 24 hodin. Za těchto podmínek byl poločas sloučeniny z příkladu 7 celkem 76 hodin. Fosforamidáty- 2',3'-dideoxyadenosinu (sloučenina 1093) a 2',3'-didehydro-2',3' -dideoxyadenosinu (sloučenina 1001), popsané v PCT/GB96/00580 a použité jako srovnávací látky byly při pH 1 daleko méně stálé. Sloučenina 1001 byla zcela rozložena v čase kratším než 1 minuta při pH 1 a teplotě 25 °C. Sloučenina 1093 byla zcela rozložena po 13 hodinách při pH 1 a teplotě 25 °C.

Příklad 57

Biologická stabilita • « · ·

Sloučenina z příkladu 1 a srovnávací látky, fosforamidáty 2', 3'-dideoxyadenosinu (sloučenina 1093) a 2', 3'-didehydro-2',3'-dideoxyadenosinu (sloučenina 1001), popsané v PCT/GB96/00580 byly podrobeny zkouškám na stálost proti biologickému rozkladu. Každá ze sloučenin byla inkubována v normální heparinizované lidské plazmě při teplotě 37 °C. Ve zvolených časových intervalech byly ve dvojím provedení odebírány vzorky, které byly zbaveny bílkovin extrakcí acetonitrilem. Pak byla stanovena koncentrace účinné látky pomocí kapalinové chromatografie a hmotového spektra při použití běžných postupů. V následující tabulce jsou uvedeny vypočítané poločasy pro jednotlivé látky.

Sloučenina__________________________poločas (h) příklad 7

1001

1093

4,6

4,2

Je zřejmé, že poločas sloučeniny podle vynálezu v lidské plazmě je více než lOkrát delší než poločas známých látek 1001 a 1093.

Claims (29)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Analogy (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-

   -cyklopenten-l-methanolu obecného vzorce I

   NH,

   R⁴ U) kde

   R¹ znamená atom vodíku, C6-C14aryl nebo heteroaryl, popřípadě substituovaný 1 nebo 2 substituenty ze skupiny Cl-C6alkoxyskupina, nitroskupina, atom halogenu, aminoskupina, hydroxyskupina, karboxylátová skupina a její estery, karboxyalkyl, -CONHR⁵ a -CONPÁR⁷, kde R^s a R⁷, stejné nebo odlišné se nezávisle volí ze skupiny Cl-C8alkyl, C1-C8 alkylaryl nebo C6-C14aryl,

   R² a R³ se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku,

   Cl-C8alkyl, C3-C8cykloalkyl, C2-C8alkenyl, C5-C8cvkloalkenyl nebo C6-C14aryl nebo aralkyl, přičemž každý z Cl-C8alkylových, C3-C8cykloalkylových,

   C2-C8alkenylových, C5-C8cykloalkenylovýcn, C6-C14arylových nebo aralkylových zbytků je popřípadě substituován 1 nebo větším počtem substituentů ze skupiny Cl-C8alkyl, atom halogenu, hydroxyskupina, alkoxyskupina, aminoskupina, aminoalkyl, aminodialkyl, -SH, thioalkyl, heterocyklický zbytek, karboxylátová skupina a její

   9 9 9 99 9 estery, karboxyalkyl, -CONHR⁶ a -CONR⁶R⁷, kde R⁶ a R⁷, stejné nebo odlišné se nezávisle voli ze skupiny Cl-C8alkyl, C1-C8 alkylaryl nebo C6-C14aryl, nebo R² a R³ společně tvoři 3 až 8-členný kruh,

   R⁴ znamená -OR⁸, -NR⁸R⁹ nebo -SR⁸, kde R⁸ a R⁹ stejné nebo odlišné se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, Cl-C8alkyl, C3-C8cykloalkyl, C2-C8alkenyl, C5-C8cykloalkenyl, aralkyl, heteroaryl nebo C6-C14aryl, přičemž každý z Cl-C8alkylových, C3-C8cykloalkylových, C2-C8alkenylových, C5-C8cykloalkenylových, C6-C14arylových, heteroarylových nebo aralkylových zbytků je popřípadě substituován 1 nebo větším počtem substituentů ze skupiny Cl-C8alkyl, atom halogenu, hydroxyskupina, alkoxyskupina, aminoskupina, aminoalkyl, aminodialkyl, -SH, thioalkyl, heterocyklický zbytek, karboxylátová skupina a její estery, karboxyalkyl, -CONHR⁵ a -CONR⁶R⁷, kde R⁵ a R⁷, stejné nebo odlišné se nezávisle volí ze skupiny

   Cl-C8alkyl, C1-C8 alkylaryl nebo Co-C14aryl,

   R⁵ znamená atom vodíku, Cl-C8alkyl nebo C6-C14aryl nebo

   R² a R⁵ společně tvoří 5 nebo 6-členný kruh nebo

   R³ a R⁵ společně tvoří 6 nebo 6-členný kruh, nebo farmaceuticky přijatelné deriváty těchto látek.
2. 2. Analogy podle nároku 1, obecného vzorce II nh₂ • * ·* · kde

   R¹ znamená atom vodíku, C6-C14aryl nebo heteroaryl, popřípadě substituovaný jedním nebo větším počtem substituentů ze skupiny Cl-C6alkoxyskupina, nitroskupina, atom halogenu, aminoskupina, karboxylátová skupina a hydroxyskupína,

   R² a R³ se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, Cl-C6alkyl, C3-C8cykloalkyl, C6-C14aryl nebo aralkyl,

   R⁴ znamená -OR¹⁰, -NHR¹⁰, nebo -SR¹⁰, kde R¹⁰ znamená atom vodíku, Cl-C6alkyl, C3-C8cykloalkyl nebo aralkyl, nebo -NHR¹¹, kde R¹¹ znamená Cl-C6alkyl, aralkyl nebo

   C6-C14aryl, jakož i farmaceuticky přijatelné deriváty těchto látek.
3. 3. Analogy podle nároku 2, obecného vzorce II, v nichž R¹ znamená atom vodíku nebo C6-C14aryl, R² znamená Cl-C6alkyl nebo aralkyl, R³ znamená atom vodíku, Cl-C6alkyl nebo aralkyl a R⁴ znamená -OR¹⁰, kde R¹⁰ znamená Cl-C6alkyl nebo C3-C8cykloalkyl.
4. 4. Analogy podle nároku 2, obecného vzorce II, v nichž R¹ znamená C6-C14aryl, R² znamená methyl, R³ znamená atom vodíku a R⁴ znamená -OR¹⁰, kde R¹⁰ znamená methyl nebo ethyl.

   5. R¹ Analogy podle nároku znamená atom vodíku. 2, obecného vzorce II, v nichž 6. Analogy podle nároku 2, obecného vzorce II, v nichž R¹ znamená C6-C14aryl. 7. Analogy podle nároku 1, obecného vzorce I, v nichž R² a R³ neznamenají současně atomy vodíku.

   • 9
5. 8. Analog podle nároku 2, obecného vzorce II, kterým je (IR,4S)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylethoxy-L-alaninyl)fosfát.
6. 9. Analogy podle nároku 1, obecného vzorce III nh₂ (III) kde

   R^{10 * 12} znamená

   1 nebo kde n znamená 0, popřípadě substituována

   1 9

   2, přičemž skupina R je

   C6-C14arylovým zbytkem.
7. 10. Analogy podle nároku 1, obecného vzorce I ze skupiny (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylmethoxy-L-alaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylethoxy-L-alaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-

   -methanol-O-(fenylmethoxy-D-alaninyl)fosforamidát, (IR, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylbenzyloxy-L-alanínyl) fosforamidát, (IR, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylmethoxy-L-fenylalaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-1-methanol-O-(fenylethoxy-L-fenylalaninyl)fosforamidát, disodná sůl (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(L-fenylalaninyl)fosforamidátu, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylmethoxy-α,a-dimethylglycinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-[fenylmethoxy-(0-terc.butyltyrosinyl)]fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylisopropoxy-L-alaninyl) fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylterc.butoxy)-L-alaninyl)fosforamidát, (lR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-[fenyl(2,2-dimethylpropoxy)-L-alaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylcyklopropylmethoxy-L-alaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylmethoxy-L-leucinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-[fenylmethoxy-L-(0-methyltyrosinyl)]fosforamidát, (IR, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0- (fenylmethoxy-D-fenylalaninyl) fosforamidát, (IR,cis)-4- (6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l

   -methanol-O-(fenylmethoxy-D-leucinyl)fosforamidát, (lR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylmethoxy-D-tryptofanyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylmethoxy-D-tryptofanyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylmethoxy-D-valinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenyldimethoxy-D-aspartyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylmethoxy-L-prolinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-1-methanol-O-(fenylmethoxy-L-isoleucinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylmethoxy-L-norvalin)fosforamidát, (lR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylisopropoxy-L-fenylalaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methano1-0-(fenylterč.butoxy-L-fenylalaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methano1-0-[fenyl(2,2-dimethylpropoxy)-L-fenylalaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylbenzyloxy-L-fenylalaninyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-[(2-karbomethoxy)fenymethoxy-L-alaninyl]fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-1-methanol-0-[4-(3-oxo-3-fenylpropenylfenylmethoxy-L-alaninyl]fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l99 · * ·· ······· · ·

   -methanol-O- (fenylmethoxyglycinyl) fosforamidát, (IR, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O- (fenylmethoxy-L-valinyl) fosforamidát, (IR, cis) -4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O- [fenyl (methoxy) -L-methionyl) fosforamidát, (IR, cis) - 4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylethoxy-α,a-dimethylglycinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylisopropoxy-α,a-dimethylglycinyl)fosforamidát, (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-1-methanol-O-[fenyl (2,2-dimethylpropoxy)-a,a-dimethylglycinyl)fosforamidát, (IR, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O- (fenymethoxycyklopentanglycinyl) fosforamidát, (IR, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O- (fenymethoxycyklohexanglycinyl) fosforamidát, (IR, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenydimethoxy-L-aspartyl)fosforamidát, (IR, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-[(4-chlor)fenymethoxy-L-alaninyl)fosforamidát, sodná sůl (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-[L-(N-methyl)amino)alaninyl]fosforamidátu, a farmaceuticky přijatelné deriváty těchto látek.
8. 11. Analogy podle nároku 10 ze skupiny (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylmethoxy-L-alaninyl)fosforamidát, (IR, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l100

   -methanol-O- (fenylethoxy-L-alaninyl) fosforamidát, (IR, cis)-4 -( 6-amino-9H-purin-9-yl) -2-cyklopenten-l-methanol-O- (fenylmethoxy-D-alaninyl) fosforamidát, (IR, cis) -4- (6-amino-9H-purin-9-yl) -2-cyklopenten-l-methanol-0- (fenylbenzyloxy-L-alaninyl) fosforamidát, (IR, cis) - 4- (6-amino-9H-purin-9-yl) -2-cyklopenten-l-methanol-0- (fenylmethoxy-L-fenylalaninyl) fosforamidát, (lR,cis)-4-( 6-amino-9H-purin-9-yl) -2-cy klopen ten-1-methanol-0- (fenylethoxy-L-fenylalaninyl) fosforamidát, disodná sůl (IR, cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl) -2-cyklopenten-l-methanol-O- (L-fenylalaninyl) fosforamidátu, (IR,cis)-4 -( 6-amino-9H-purin-9-yl) -2-cy klopen ten-1-methanol-0-(fenylmethoxy-α,a-dimethylglycinyl)fosforamidát, a farmaceuticky přijatelné deriváty těchto látek.
9. 12. Analogy podle některého z nároků 1 až 10 ve formě jednotlivých isomerů.
10. 13. Analogy podle některého z nároků 1 až 10 ve formě směsi diastereomerů.
11. 14. Způsob léčení virové infekce u člověka, vyznačující se tím, že se podává účinné protivirové množství analogů obecného vzorce I, II nebo III podle některého z nároků 1 až 13 nebo jejich farmaceuticky přijatelných derivátů.
12. 15. Způsob podle nároku 14,vyznačuj ící se tím, že léčenou infekcí je infekce virem lidské imunodeficience nebo virem hepatitidy B.
13. 16. Způsob léčení infekce virem hepatitidy B u člověka, • ·

    101 vyznačující se tím, že se podává účinné množství (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-O-(fenylethoxy-L-alaninyl)fosfátu nebo (IR,cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-l-methanol-0-(fenylmethoxy~L-fenylalaninyl)fosfátu nebo farmaceuticky přijatelného derivátu těchto látek.
14. 17. Analogy podle některého z nároků 1 až 13, v nichž farmaceuticky přijatelným derivátem je sůl.
15. 18. Farmaceutický prostředek, vyznačuj ící se t i m, že jako svou účinnou složku obsahuje účinné protivirové množství analogů podle nároku 1 až 13, obecného vzorce I, II nebo III nebo jejich farmaceuticky přijatelných derivátů spolu s farmaceutickým nosičem.
16. 19. Farmaceutický prostředek podle nároku 18, vyznačující se tím, že kromě analogů obecného vzorce I, II nebo III obsahuje ještě další protivirovou látku.
17. 20. Farmaceutický prostředek podle nároku 18 nebo 19, vyznačující se tím, že je ve formě tablety nebo kapsle.
18. 21. Farmaceutický prostředek podle nároku 18 nebo 19, vyznačující se tím, že je ve formě roztoku, suspenze nebo sirupu.
19. 22. Použití analogů podle některého z nároků 1 až 13, obecného vzorce I, II nebo III pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení nebo profylaxi virových infekcí.

    102
20. 23. Analogy podle některého z nároků 1 až 13, obecného vzorce I, II nebo III pro použití k léčebným účelům.
21. 24. Způsob přívodu analogů obecného vzorce III kde n znamená 0, 1 nebo 2, přičemž skupina R¹² je popřípadě substituována C6-C14arylovým zbytkem do buněk, vyznačující se tím, že se na buňky působí analogem podle nároku 8 obecného vzorce I nebo II.
22. 25. Farmaceutické balení, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jeden účinný analog podle některého z nároků 1 až 13, obecného vzorce I, II nebo III.
23. 26. Způsob výroby analogů obecného vzorce I podle nároku 1, vyznačující se tím, že se nechá reagovat sloučenina vzorce IV • ·· ·

    103

    NHj se sloučeninou obecného vzorce VI kde R¹ až R⁵ máji význam uvedený u vzorce I.
24. 27. Způsob podle nároku 26, vyznačující se tím, že použitým reakčním rozpouštědlem je pyridin, směs pyridinu a tetrahydrofuranu nebo acetonitril a reakce se provádí v přítomnosti terč.butylmagnesiumchloridu.

    104
25. 28. Způsob výroby analogů obecného vzorce II podle nároku 2, vyznačující se tím, že se nechá reagovat sloučenina vzorce IV se sloučeninou obecného vzorce V

    O

    NH

    R²---C—R³

    C=O

    R⁴ (V) kde R¹ až R⁴ mají význam, uvedený ve vzorci II.
26. 29. Způsob podle nároku 28, vyznačující se tím, že reakčním rozpouštědlem je pyridin, směs pyridinu a tetrahydrofuranu nebo acetonitril a reakce se provádí v přítomnosti terc.butylmagnesiumchloridu.

    • fr ····

    105
27. 30. Způsob výroby analogů obecného vzorce III podle nároku IX, vyznačující se tím, že se na sloučeninu vzorce IV působí příslušným fosforylačním činidlem.
28. 31. Způsob podle nároku 30, vyznačující se tím, že se jako fosforylační činidlo použije fosforylchlorid.
29. 32. Způsob podle některého z nároků 26 až 31, vyznačující se tím, že se produkt získá ve formě jednotlivého isomeru, ve formě směsi diastereomerů nebo ve formě soli.