CZ17599A3 - Formulace hovězí vakciny proti dýchacím nemocem hovězího dobytka - Google Patents

Formulace hovězí vakciny proti dýchacím nemocem hovězího dobytka Download PDF

Info

Publication number
CZ17599A3
CZ17599A3 CZ99175A CZ17599A CZ17599A3 CZ 17599 A3 CZ17599 A3 CZ 17599A3 CZ 99175 A CZ99175 A CZ 99175A CZ 17599 A CZ17599 A CZ 17599A CZ 17599 A3 CZ17599 A3 CZ 17599A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
vaccine
bovine
plasmid
virus
genes
Prior art date
Application number
CZ99175A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ298898B6 (cs
Inventor
Jean-Christophe Audonnet
Annabelle Bouchardon
Philippe Baudu
Michel Riviere
Original Assignee
Merial
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merial filed Critical Merial
Publication of CZ17599A3 publication Critical patent/CZ17599A3/cs
Publication of CZ298898B6 publication Critical patent/CZ298898B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A61K2039/552—Veterinary vaccine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16722—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18511—Pneumovirus, e.g. human respiratory syncytial virus
    • C12N2760/18522—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18511—Pneumovirus, e.g. human respiratory syncytial virus
    • C12N2760/18534—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18611—Respirovirus, e.g. Bovine, human parainfluenza 1,3
    • C12N2760/18622—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18611—Respirovirus, e.g. Bovine, human parainfluenza 1,3
    • C12N2760/18634—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/24011—Flaviviridae
    • C12N2770/24311—Pestivirus, e.g. bovine viral diarrhea virus
    • C12N2770/24322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/24011—Flaviviridae
    • C12N2770/24311—Pestivirus, e.g. bovine viral diarrhea virus
    • C12N2770/24334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/813—Viral vaccine for bovine species, e.g. cattle

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Vynález se týká farmaceutického prostředku vakciny umožňující vakcinaci hovězího dobytka, zvláště proti nemocem dýchacího ústrojí. Týká se také příslušného způsobu vakcinace.
Dosavadní stav techniky
Veškerý hovězí dobytek je nositelem potenciálně patogenních virů a bakterií ve velmi různé míře.
Viry se mohou rozmnožovat při oslabení specifické imunity a při narušení dýchacích cest. V takovém případě jsou viry obsaženy v exkretech a mohou tedy nakazit ostatní zvířata.
Z virů, které přicházejí v úvahu, se příkladně uvádějí zvláště parachřipkový virus typu 3 (PI-3) s mírnou choroboplodností, virus dýchacích cest specificky dobytčí (RSV) a hovězí virový opar (BHV) nazývaný též nakažlivá hovězí rinotracheita (IBR) se zvýšenou choroboplodností.
Jiným obzvláště významným virem pro jeho imunodepresivní působení a zhoubné účinky na reprodukci je virus onemocnění sliznic nebo hovězí nakažlivý virus (BVDV).
Tyto viry se projevují obvykle v první fázi horečkou s chřipkovými příznaky a s dýchacími potížemi a s průjmovými potížemi (diaré) v případě BVD. Tato fáze může být doprovázena fází sekundární s výskytem zánětu průdušek vázaným na bakteriální infekci, zejména Pasteurella, která může vést k úhynu. Tento jev je vyvolán obzvláště následným potlačením imunity vůči infekci BVD nebo makrofágové infekcí PI-3. Mohou se vyskytnout i další příznaky, jako zmetání způsobované BVD a BHV.
Jeví se tudíž jako nutnost poskytnout účinnou prevenci proti hlavním virům působícím dýchací onemocnění hovězího dobytka.
Již v minulosti se navrhovalo spojení vakcin proti některým virům působícím dýchací onemocnění hovězího dobytka.
Dosud vyvinuté úsilí se týkalo neaktivovaných vakcin nebo živých vakcin, případně směsí těchto vakcin. Jejich zavedení naráží na problémy vztahu účinnosti a stability. Ve skutečnosti jde o zajištění vztahu mezi různou účinností vakcin se zřetelem na různé použité antigeny nebo se zřetelem na samotné formulace jmenovitě v případech, kde se kombinují neaktivované vakciny s živými vakcinami. Je také zřejmý problém konzervace takových kombinovaných vakcin a rovněž problém jejich neškodnosti zejména ve spojení s pomocnými prostředky. Obecně jsou takové vakciny velmi drahé.
Podle patentových spisů číslo W0-A-90/11092, WO-A-93/19183, WO-A-94/21797 a WO-A-95/2O66O se používá nedávno vyvinuté techniky polynukleotidních vakcin. Tvrdí se, že vakciny používají plasmidu schopného exprese antigenu začleněného do plasmidu v hostitelských buňkách. Navrhují se všechny cesty podávání (například intraperitoneální, intravenosní, intramuskulární, transkutánní, intradermická a sliznicový). Použít lze rovněž různých vakcinačních prostředků, jako ADN uložených na povrchu částic zlata a určených k proniknutí do kůže zvířete (Tang a kol., Nátuře 356, str. 152 až 154, 1992) a injektáž tekutin umožňujících proniknutí do kůže, svalů, tukových tkání a tkání děložních (Furth a kol. Analytical Biochemistry 205, str. 365 až 368, 1992).
Polynukleotidové vakciny mohou vyžívat stejně dobře jak
ADN jako takové, tak ADN formulované například na bázi liposomů nebo kationických lipidů.
G.J.M. Cox navrhl polynukleotidní vakcinaci proti viru hovězího oparu typu 1 (J. Virology sv. 67. číslo 9 str. 5664 [ i
až 5667, září 1993). Rovněž byly popsány zejména plasmidy in- - 1 tegrující geny gl (gB), glll (gC) a glV (gD). í
J.E. Crowe (Vaccine, sv. 13, č. 4, str. 415-421, 1995) podává obecný přehled různých způsobů vakcinace proti syncya proti parachřipkovému viru typu 3. soubor nabízených možností současnými ái ní mu Tento dýchacímu viru přehled udává technikami vakcinace a jednoduše předpokládá, že technologie polynukleotidní imunizace imunizace vůči RSV a PI-3.
by mohla být užitečná ve strategii V tomto přehledu však není popsána žádná konstrukce plasmidu, ani výsledky protivirové vakcinace hovězího dobytka.
Vynález se také týká formulace několikaúčinné vakciny umožňující zajištění vakcinace proti určitému počtu patogenních virů uplatňujících se jmenovitě v dýchací patologii hovězího dobytka a rovněž zajištění účinné vakcinace proti této chorobě.
Vynález se dále týká formulace vakciny spojující různé účinnosti a všechna požadovaná kriteria kompatibility a stability účinnosti. Vynález dále týká formulace vakciny umožňující spojení různých účinností v jednom nosiči.
Vynález dále týká formulace vakciny snadno a levně vyrobitelné.
Vynález dále týká formulace vakciny a způsob vakcinace hovězího dobytka, která umožní získat multiúčinnou ochranu s vysokou účinností a dlouhodobě působící a zároveň neškodnou a bez vedlejších účinků.
Podstata vynálezu
Formulace hovězí vakciny proti dýchacím nemocem hovězího dobytka spočívá podle vynálezu v tom, že obsahuje alespoň tři účinné po iynuk1eotidové vakciny, z nichž každá zahrnuje integrující plasmid k expresi in vivo v hostitelských buňkách, gen účinný na respirační nemoci hovězího dobytka, přičemž jsou tyto účinnosti voleny ze souboru zahrnujícího virus oparu hovězího dobytka, syncitiální respirační virus hovězího dobytka, virus onemocnění sliznic a parachřipkový virus typu 3, přičemž plasmidy mají pro každou účinnost jeden nebo několik genů volených ze souboru zahrnujícího gB a gD pro virus hovězího oparu, F a G pro syncitiální respirační virus hovězího dobytka, E2, C + E2 a El + E2 pro virus onemocnění sliznic, HN a F pro parachřipkový virus typu 3.
Za účinnost se zde považuje alespoň jeden antigen zajištující ochranu proti uvažovanému patogennímu viru, přičemž účinnost může zahrnovat jakožto subúčinnost jeden nebo několik přírodních nebo modifikovaných genů jednoho nebo několika kmenů uvažované choroby.
Za gen patogenního činidla se považuje nejenom úplný gen, ale také různé nukleotidní sekvence včetně fragmentů zachovávajících schopnost k vyvolání ochranné odezvy. Význam genu zahrnuje nukleotidové sekvence ekvivalentní se sekvencemi podrobně popsanými v příkladech, tedy různé sekvence, avšak kódující stejný protein. Zahrnuje také nukleotidové sekvence ostatních uvažovaných patogenních kmenů, zaručující příčnou ochranu nebo ochranu specifickou kmenu nebo skupiny kmenu. Zahrnuje také nukleotidové sekvence, které byly modifikovány k usnadnění exprese in vivo u hostitelského zvířete avšak kódující stejný protein.
S výhodou zahrnuje vakcinový prostředek podle vynálezu g
I i
i čtyři účinnost i. I
Pokud jde o kódujícím gB a gD v plasmidu. Případně, ho nebo druhého z t účinnost BHV, dává se přednost dvěma genům různých plasmidech nebo v jednom a tomtéž avšak méně výhodně, je možno použít jednoěchto genů.
Pro účinnost RSV se používá s výhodou dvou genů G a F, začleněných do dvou různých plasmidů nebo do jednoho a téhož plasmidu. Případně, avšak méně výhodně, je možno použít genu F samotného.
Pro účinnost BVD se používá s výhodou genu avšak méně výhodně, je možno použít plasmidu a E2 společně a skupinu tvořenou C, El a E2.
E2. Případně, kódujícího El
Pro účinnost PI-3 se používá s výhodou skupiny dvou genů HN a F v různých plasmidech nebo v jednom a téhože plasmidu. Použít lze také jediného genu HN.
Výhodná formulace vakciny podle vynálezu zahrnuje a zaručuje expresi genů gB a gD ve BHV, G a F v REV, E2 v BVD a HN a F v PI-3.
Formulace vakciny podle vynálezu může být ve formě dávky o objemu 0,1 až 10 ml a zejména 1 až 5 ml.
Dávka obvykle zahrnuje 10 ng až 1 mg, s výhodou 100 ng až
500 gg a výhodněji také 1 gg až 250 gg podle typu plasmidu.
S výhodou se používá prostých plasmidů jednoduše včleněných do vakcinačního nosiče, kterým je obecně například fyziologický roztok (0,9% roztok chloridu sodného), ultračistá voda a pufr TE. Lze ostatně použít všechny formy polynukleotidové vakciny popsané ve stavu techniky.
Každý plasmid obsahuje promotor schopný zajistit expresi genu začleněného v závislostí v hostitelských buňkách. Obecně je to eukaryotový silný promotor a zejména vyspělý promotor cytomegaloviru CMV-IE, lidského nebo myšího nebo případně jiného původu, jako krysího, prasečího, morčatového.
Obecněji by mohl být promotor bud virového nebo buněčného původu. Jako virový promotor kromě CMV-IE je možno uvést vyspělý nebo opožděný promotor viru SV4O nebo promotor LTR viru Rousova sarkomu. Může to také být promotor viru, jehož původcem je gen, například promotor genu.
Jako buněčný promotor se uvádí promotor genu cytokosterního, jako je například promotor desminu (Bolmont a kol. Journal of Submicroscopic Cytology and Pathology, 22, str. 117 až 122 1990 a Zhenlin a kol., Gene 78, str. 243 až 254 1989) nebo ještě promotor aktinu.
Jelikož ve stejném plasmidu je obsaženo několik genů, mohou být obsaženy ve stejné transkripční jednotce nebo ve dvou různých jednotkách.
Kombinace různých účinností vakciny podle vynálezu se mohou provádět s výhodou smísením polynukleotidních plasmidů exprimujících antigen nebo antigeny každé účinnosti, nebo lze rovněž předběžně nechat exprimovat několikaúčinnostní antigeny stejným plasmidem.
Vynález se také týká formulací jednoúčinnostních vakcin obsahujících jeden nebo několik plasmidů kódujících jeden nebo několik genů, shora popsaných, jednoho ze zvolených virů ze souboru zahrnujícího BRSV, BVD a PI-3. Oproti jejich jednoúčinnostnímu charakteru mohou tyto formulace zaujmout shora uvedené charakteristiky, pokud jde například o volbu genů, jejich kombinaci, složení plasmidů, objemů dávky a dávek.
Formulace jednoúčinnostní vakciny mohou být využity (i) k přípravě formulace víceúčinnostních vakcin jak shora popsáno, (ii) individuálně proti příslušné patologii, (iii) spojením s vakcinou jiného typu (živé nebo inaktivované, rekombinantní, podjednotkové) proti jiné patologii nebo (iv) se zřetelem na shora popsanou vakcinu.
Vynález se také týká použití různých plasmidů podle vynálezu k výrobě vakciny určené k vakcinaci prvně vakcinovaného hovězího dobytka alespoň první klasickou vakcinou typu dosavadního stavu techniky volenou jmenovitě ze souboru zahrnujícího dřívější živou vakcinu, dřívější inaktivovanou vakcinu podjednotkovou vakcinu, rekombinantní vakcinu, přičemž první vakcina obsahuje nebo může exprimovat alespoň jeden kódovaný antigen alespoň jedním plasmidem nebo alespoň jedním antigenem zajištujícím křížovou ochranu.
Výražně má polynukleotidová vakcina účinek, který se dá vyjádřit zesílením imunitní odezvy a založení dlouhodobé imunity.
Obecně vakciny první vakcinace mohou být voleny z obchodně dostupných vakcin od výrobců veterinárních vakcin.
Vynález se týká také vakcinačního kitu obsahujícího vakcinu první vakcinace jak dále popsáno a formulaci vakciny podle vynálezu pro porovnání. Pojednává také o formulaci vakciny podle vynálezu doprovázené poznámkou o použití této formulace jako porovnání se shora popsanou primo-vakcinací.
Vynález se týká také způsobu vakcinace hovězího dobytka proti respiračním chorobám s podáváním formulace účinné vakciny shora popsané. Tento způsob vakcinace zahrnuje podávání jedné nebo několika dávek formulace vakciny, přičemž mohou být tyto dávky podávány postupně v krátkých časových intervalech a/nebo postupně v okamžicích navzájem vzdálených.
Formulace vakciny podle vynálezu mohou být podávány v rámci tohoto způsobu vakcinace různými cestami podání, známými ze stavu techniky pro polynukleotidové vakcinace a známými technikami vakcinace.
Vynález se týká také způsobu vakcinace spočívajícího v provádění primo-vakci nace, jak dále popsáno, a s formulací vakciny podle vynálezu.
Při jednom výhodném způsobu podle vynálezu se podává zvířeti napřed účinná dávka vakciny klasického typu, jmenovitě neaktivované, živé, utlumené nebo rekombinantní, nebo také vakciny podjednotkové k zajištění primo-vakcinace a s výhodou s prodlením 2 až 6 týdnů se zajistí podání víceúčinnostni nebo monoúčinnostní podle vynálezu.
Vynález zahrnuje také způsob přípravy formulace vakciny podle tohoto popisu.
Vynález objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení pomocí přiložených obrázků.
Seznam obrázků
Obr. 1: Plasmid pVR1012
Obr. 2: Sekvence genu BHV-1 ST gB
Obr. 3: Konstrukce plasmidu pPB156
Obr. 4: Plasmid pABO87
Obr. 5: Plasmid pABOll
Obr. 6: Plasmid pABO12
Obr. 7: Plasmid pABO58
Obr. 8: Plasmid pABO59
Obr. 9: Plasmid pABO6O
Obr. 10: Plasmid pAB071 Obr. 11: Plasmid pABO72
Seznam sekvencí
SEQ ID •v c. 1: sekvence genu BHV-1 gB (kmen ST
SEQ ID č. 2: ol igonukleotid PB234
SEQ ID č. 3: oligonukleotid PB235
SEQ ID č. 4: ol igonukleotid AB162
SEQ ID č. 5 : ol igonukleotid AB163
SEQ ID č. 6: o 1 igonukleotid ABO26
SEQ ID č. 7: ol igonukleotid ABO27
SEQ ID č. 8: o 1 igonukleotid ABO28
SEQ ID č. 9: oligonukleotid ABO29
SEQ ID č. 10: ol igonukleotid AB110
SEQ ID č. 11: oiigonukleotid AB111
SEQ ID č. 12: ol igonukleotid AB114
SEQ ID č. 13: oligonukleotid AB115
SEQ ID č. 14: ol igonukleotid AB116
SEQ ID č. 15: oligonukleotid AB117
SEQ ID č. 16: ol igonukleotid AB130
SEQ ID č. 17: ol igonukleotid AB131
SEQ ID č. 18: oligonukleotid AB132
SEQ ID č. 19: ol igonukleotid AB133
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Kultivace virů
Viry se pěstují v buněčném systému využitém až do získání cytopathického jevu. Buněčné systémy k použití pro každý virus jsou pracovníkům v oboru dobře známy. Stručně řečeno, buňky citlivé na použitý virus, pěstované v minimálně potřebném prostředí Eagle (prostředí MEM) nebo v jiném vhodném prost10 ředí, se očkují studovaným virovým kmenem za použití jednonásobku infekce. Infikované buňky se tedy inkubují při teplotě 37 °C po dobu potřebnou k výskytu úplného cytopathického jevu (nejméně 36 hodin).
Pří klad 2
Extrakce virových genomických ADN
Po kultivaci, supernatant a lýzované buňky se shromáždí a celá virová suspense se odstředí při 1OOO g během 10 minut při teplotě +4 °C k vyloučení buněčných úlomků. Pak se virové částice podrobí ultraodstředění při 400000 g po dobu jedné hodiny při teplotě + 4 °C. Sraženina se vyjme do minimálního množství pufru (Tris 10 mM, EDTA 1 mM). Tato koncentrovaná virová suspense se zpracuje proteinázou K (100 gg/ml konečný) v přítomnosti dodecylsulfátu sodného (SDS) (0,5% konečný) během dvou hodin při teplotě 37 “C. Virová ADN se pak extrahuje směsí fenol/chloroform a pak se vysráží se dvěma objemy absolutního ethanolu. Nechá se stát přes noc při teplotě -20 °C, ADN se odstředí při 10000 g během 15 minut při teplotě + 4 C. Sraženina ADN se suší a vyjme se do minimálního množství sterilní ultračisté vody. Digeruje se s restrikčními enzymy.
Příklad 3
Izolování genomických virových ARN
Virus na ARN se čistí způsoby dobře známými pro pracovníky v oboru. Genonmické virové ARN se pak izolují za použití extrakční techniky thiokyanát guanidinu/fenol-chloroform, kterou popsal P. Chomczynski a N. Sacchi (Anal.Biochem. 162, str. 156 až 159, 1987).
Příklad 4
Technika molekulární biologie
Všechny konstrukce plasmidů se uskutečnily standardní technikou molekulární biologie kterou popsal J. Sambrook a kol. (Molecular Cloning: A Laboratora Manual, 2. vydání, nakladatel Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor,
New York 1989). Všechny restrikční fragmenty pro tento vynález byly izolovány pomocí kitu Geneclean (BI0101 lne. La Jolla, CA).
Příklad 5
Technika RT-PCR
Specifické oligonukleotidy (nesoucí na koncích 5' restrikční místa k usnadnění vnějšího klonování zesílených fragmentů) byly syntetizovány tak, že pokrývají úplně kódované oblasti genů před zesílením (viz specifické příklady). Transkripční inversní reakce (RT) a zesílení řetězce polymerázou (PCR) se uskutečnily standardními technikami (J.Sambrook a kol. (Molecular Cloning: A Laboratora Manual, 2. vydání, nakladatel Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor,
New York 1989). Každá reakce RT-PCR byla provedena dvojicí specifických zesilovačů a při použití matrice ARN genomického virového extraktu. Zesílené komplementární ADN byly vyjmuty do isoamylové směsi fenol/chloroform/alkohol (25:24:1) před digerováním restrickčními enzymy.
Příklad 6
Plasmid bVR1012
Plasmid bVR1012 obr. 1) byl získán podle Vical lne. San
Diego, CA, USA. Konstrukci popsal J. Hartokka a kol. (Human
Gene Therapy, 7, str. 1205 až 1217, 1996).
Příklad 7
Konstrukce plasmidu pPB156 (gen BHV-lgB)
Genomická ADN viru hovězího oparu BHV (kmen DT) (LeungTack P, a kol. Virology 199, str. 409 až 421, 1994), připravená technikou popsanou v příkladu 2 se digeřuje BamHl. Po vyčištění se klonuje fragment BamHI-BamHI 18 kpb do vektoru pBR322 předběžně digerovaného BamHl za získání plasmidu pIBR4-BamHI (221pb). Plasmid plBR-4-BamHI se pak digeřuje Sa/1 k uvolnění fragmentu Sall-Sall 6,6 kpb obsahujícího gen kódující glykoprotein gB BHV-1 (obr. č. 2^a SEQ ID č.l). Tento fragment byl klonován ve vektoru pBR322, předběžně digerovaného Sa/1 pro získání plasmidu plBR-6,6-Sal1 (10,9 kpb). Plasmid plBR-6,6-Sal1 se digeřuje Nhel a Bgl/II k uvolnění fragmentu Nhel-BglII 2676 pb obsahujícího gen kódující glykoprotein gB viru oparu hovězího dobytka (BHV-1) (fragment A).
Reakce PCR se uskuteční genomickou ADN viru oparu hovězího dobytka (BHV-1) (kmen ST) a s následujícími oligonukleotidy: PB234 (30 mer)(SEQ ID č.2) ''TTGTCGACATGGCCGCTCGCGGCGGTGCTG 3 '
PB235 (21 mer) (SEQ ID č.3) 'GCAGGGCAGCGGCTAGCGCGG3 k izolování partie 5' genu kódujícího glykoprotein gB BHV-1.
Po vyčištění, se produkt PCR 153 ob digeřuje Sal/I a Nhel k izolování fragmentu Sall-Nhel 145 pb (fragment B).
Fragmenty A á B se vážou spolu s vektorem pVR1012 (příklad 6), předběžně digerovaným Sall a BamHl, k dodání plasmidu pPB156 (7691 pb) (obr. č. 3).
Příklad 8:
Konstrukce plasmidu pABO87 (gen BHV-1 gD)
Provádí se reakce PCR s genomickou ADN viru oparu hovězího dobytka (BHV-1) (kmen ST) (P.Leung-Tack a kol. Virology,
199, str. 409 až 421, 1994) připravenou způsobem popsaným
I
I s
v příkladu 2 a s následujícími oligonukleotidy:
AB162 (31 mer) (SEQ ID č.4)
5'AAACTGCAGATGCAAGGGCCGACATTGGCCG3'
AB163 (27 mer) (SEQ ID č. 5)
5'ATCTTGTACCATATGACCGTGGCGTTG3' k zesílení části 5' kódujícího glykoprotein gD viru oparu hovězího dobytka (BHV-1) (Č. přístupu sekvence GenBank=L2636O) ve formě fragmentu PCR 448 pb. Po vyčištění se fragment digeruje Pstl a Ndel k izolování fragmentu Pstl-Ndel 317 pb (fragment A) .
Plasmid pBNHVOOl (P. Leung-Tack P a kol. Virology 199, str.
μ
409 až 421, 1994) se digeruje Ndel a Styl k uvolnění fragmentu h
942 pb obsahujícího část 3' genu kódujícího glykoprotein gD t
BHV-1 (fragment B). Fragmenty A a B se vážou spolu s vektorem |
PVR1012 (příklad 6) předběžně digerovaným Pstl a Xbal, k dodání plasmidu pABO87 (6134 pb) (obr. 4).
Příklad 9:
Konstrukce plasmidu pABOll (gen BRSV F)
Provádí se reakce RT-PCR, popsaná v příkladu 5, s genomickou ARN syncytiálního respiračního viru hovězího dobytka (BRSV) (kmen 391-2) (R. Lerch a kol. Virology 181, str. 118 až 131 1991), připravenou jak uvedeno v příkladu 3 a s následujícími oligonukleotidy:
ABO26 (33 mer) (SEQ ID č.6)
5'AAAACTGCAGGGATGGCGGCAACAGCCATGAGG3'
ABO27 (31 mer) (SEQ ID č. 7)
5'CGCGGATCCTCATTTACTAAAGGAAAGATTG3' k izolování genu kódujícího glykoprotein fuze F (BRSV F) ve formě fragmentu PCR 1734 pb. Po vyčištění se fragment digeruje Pstl a BamHI k izolování fragmentu Pstl-BamHl 1717 pb. Tento fragment se váže s vektorem pVR1012 (příklad 6) předběžně digerovaným Pstl a BamHI, k získání plasmidu pABOll (6587 pb) (obr. č. 5).
Příklad 10:
Konstrukce plasmidu pAB012 (gen BRSV G)
Provádí se reakce RT-PCR popsaná v příkladu 5 s genomickou ARN syncytiá1 ní ho respiračního viru hovězího dobytka (BRSV) (kmen 391-2) (R. Lerch a kol. Virology 64, str. 5559 až 5569, 1990), připravenou jak uvedeno v příkladu 3 a s následujícími oligonukleotidy:
ÁBO 28 (32 mer) (SEQ ID č. 8)
5'AAAACTGCAGATGTCCAACCATACCCATCATC3'
ABO29 (35 mer) (SEQ ID č.9)
5'CGCGGATCCCTAGATCTGTGAGTTGATTGATTTG3' k izolování genu kódujícího protein G (BRSV G) ve formě fragmentu PCR 780 pb. Po vyčištění se fragment digeruje Pstl a BamHl k izolování fragmentu Pstl-BamHI 763 pb. Tento fragment se váže s vektorem pVR1012 (příklad 6) předběžně digerovaným Pstl a BamHl, k získání plasmidu pAB012 (5634 pb) (obr. č. 6).
Příklad 11:
Konstrukce plasmidu pABO58 (gen BRSV C)
Právádí se reakce RT-PCR popsaná v příkladu 5 s genomickou ARN průjmového viru hovězího dobytka (BVDV) (kmen Osloss) (L. De Moerlooze a kol., J.Gen.Virol. 74, str. 1433 až 1438, 1993) připravenou jak uvedeno v příkladu 3 a s následujícími oligonukleotidy:
AB110 (35 mer) (SEQ ID č. 10)
5'AAAACTGCAGATGTCCGACACAAAAGCAGAAGGGG3'
AB111 (47 mer) (SEQ ID č.ll)
5'CGCGGATCCTCAATAAAAATCATTCCCACTGCGACTTGAAACAAAAC3' k zesílení fragmentu 342 pb obsahujícího gen kódující protein kapsidu C viru BVDV. Po vyčištění se fragment digeruje Pstl a
BamHl pro získání fragmentu Pstl-BamHI 324 pb. Tento fragment se váže s vektorem pVR1012 (příklad 6) předběžně digerovaným
Pstl a BamHl k získání plasmidu pABO58 (5183 pb) (obr. č. 7).
i
Příklad 12:
Konstrukce plasmidu pABO59 (gen BVDV El)
Provádí se reakce RT-PCR, popsaná v příkladu 5, s genomickou ARN průjmového viru hovězího dobytka (BVDV) (kmen 1
Osloss) (L. De Moerlooze a kol., J. Gen. Virol. 74, str. 1433 . j až 1438, 1993) a s následujícími oligonukleotidy: 0
AB114 (32 mer) (SEQ ID č. 12) ί
5'ACGCGTCGACATGAAGAAACTAGAGAAAGCCC 3' (
AB115 (33 mer) (SEQ ID č.13) ''CGCGGATCCTCAGCCGGGTTTGCAAACTGGGAG3 ' j k izolování sekvence kódující protein El viru BVDV ve formě j fragmentu PCR 1381 pb. Po vyčištění se fragment digeruje Sall jí a BamHl k získání fragmentu Sall-BamHl 1367 pb. Tento fragment se váže s vektorem pVR1012 (příklad 6) předběžně digerovaným Sall a BamHl k získání plasmidu pABO59 (6246 pb) (obr. č. 8).
Příklad 13:
Konstrukce plasmidu pABO6O (gen BVDV E2)
Provádí se reakce RT-PCR, popsaná v příkladu 5, s genomickou ARN průjmového viru hovězího dobytka (BVDV) (kmen Osloss) (L. De Moerlooze a kol., J. Gen. Virol. 74, str. 1433 až 1438, 1993) a s následujícími oligonukleotidy:
AB116 (36 mer) (SEQ ID č. 14) Š
5'ACGCGTCGACATGACGACTACTGCATTCCTGGTATG3' Ϊ
AB117 (33 mer) (SEQ ID č. 15)
5'CGCGGATCCTCATTGACGTCCCGAGGTCATTTG3' k izolování sekvence kódující protein E2 viru BVDV ve formě fragmentu PCR 1252 pb. Po vyčištění se fragment digeruje Sall a BamHl k získání fragmentu Sall-BamHl 1238 pb. Tento fragment se váže s vektorem pVR1012 (příklad 6) předběžně digerovaným Pall a BamHl, k získání plasmidu pABO6O (6107 pb) (obr. č. 9).
Příklad 14:
Konstrukce plasmidu pABO71 (gen BPIV HN)
Provádí se reakce RT-PCR, popsaná v příkladu 5, s genomickou ARN viru parachřipky hovězího dobytka typu 3 (PI3=BPIV) a s následujícími oligonukleotidy:
AB130 (33 mer) (SEQ ID ě. 16) 'TTTGTCGACATGGAATATTGGAAACACACAAAC3
AB131 (33 mer) (SEQ ID č.17)
5'TTTGGATCCTTAGCTGCAGTTTTTCGGAACTTC3' k izolování genu kódujícího glykoprotein' NH BPIV (sekvence genu HN, který uložil H. Shibuta v roce 1987 číslo dostupnosti sekvence GenBank = Y00115) ve formě fragmentu PCR 1737 pb. Po vyčištění se fragment digeruje Sáli a BamHI k získání fragmentu Sall-BamHI 1725 pb. Tento fragment se váže s vektorem PVR1O12 (příklad 6) předběžně digerovaným Sáli a BamHI, k získání plasmidu pAB071 (6593 pb) (obr. č.10).
Příklad 15:
Konstrukce plasmidu pABO72 (gen BPIV F)
Provádí se reakce RT-PCR, popsaná v příkladu 5, s genomickou ARN viru parachřipky hovězího dobytka typu 3 (PI3=BPIV) a s následujícími oligonukleotidy:
AB132 (30 mer) (SEQ ID č. 18)
5'TTTGTCGACATGATCATCACAAACACAATC3 '
AB133 (30 mer) (SEQ ID č.19)
5'TTTGGATCCTCATTGTCTACTTGTTAGTAC 3' k izolování genu kódujícího protein F viru BPIV (sekvence genu F, který uložil H. Shibuta v roce 1987 číslo dostupnosti sekvence GenBank = Y00115) ve formě fragmentu PCR 1641 pb. Po vyčištění se fragment digeruje Sáli a BamHI k získání fragmentu Sall-BamHI 1629 pb. Tento fragment se váže s vektorem pVR1012 (příklad 6) předběžně digerovaným Sáli a BamHI, k získání plasmidu pABO72 (6497 pb) (obr. č.ll).
Příklad 16:
Příprava a čištění plasmidů
K přípravě plasmidů, určených k vakcinaci zvířat, je možno použít veškeré techniky dovolující získat suspensi vyčištěných plasmidů převážně ve formě supersvinuté. Tyto techniky jsou pracovníkům v oboru dobře známé. Používá se hlavně způsobu alkalické lyse následované dvojím následným ultraodstředěním za využití gradientu chloridu česného v přítomnosti bromidu ethidia (Sambrook a kol., Molecular Cloning: A Laboratory Manual,
2. vydání Cold Spring Harbor Laboratory; Cold Spring Harbor, New York, 1989). Připomínají se též světové patentových spisy WO 95/21250 a WO 96/02658, které popisují způsoby průmyslové výroby plasmidů použitelných k vakcinaci. Pro potřeby výroby vakcin (příklad 17), jsou vyčištěné plasmidy resuspendovány způsobem k získání vysoké koncentrace (> 2 mg/ml) vhodné k uskladnění. Za tímto účelem se plasmidy resuspenduji bud v ultračisté vodě nebo v pufru TE (Tris-HCl 10 mM; EDTA 1 mM, hodnota pH 8,0).
Příklad 17:
Výroba asociovaných vakcin
Různé plasmidy, potřebné k výrobě asociovaných vakciny, jsou směsi pocházející z jejich koncentrovaných roztoků (příklad 16) . Směsi se získají tak, aby konečná koncentrace každého plasmidu odpovídala účinné dávce každého plasmidu. Použitelné roztoky k nastavení konečné koncentrace vakciny mohou být 9% roztoky chloridu sodného nebo pufru PBS. Zvláštní formulace, jako jsou liposomy, kationtové lipidy, mohou též připadat v úvahu k výrobě vakcin.
Příklad 18:
Vakcinace hovězího dobytka
Hovězí dobytek se vakcinuje dávkami 100 gg, 250 gg nebo 500 gg na plasmid. Injektuje se jehlou intramuskulárně bud do hýždového svalu, nebo do oblasti krčních svalů. Dávky vakciny se podávají v objemech 1 až 5 ml.
Průmyslová využitelnost
Vakciny pro ošetřování hovězího dobytka napadeného různým virovým onemocněním a k prevenci takových onemocnění.

Claims (11)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY ’ fl
    1. Formulace hovězí vakciny proti dýchacím nemocem hovězího H dobytka, vyznačující se tím, že obsahuje a- „ | lespoň tři účinné polynukleotidové vakciny, z nichž každá za- | hrnuje integrující plasmid k expresi in vivo v hostitelských . I buňkách, gen účinný na respirační nemoci hovězího dobytka, Π přičemž jsou tyto účinnosti voleny ze souboru zahrnujícího virus oparu hovězího dobytka, syncitiální respirační virus hově- jj zího dobytka, virus onemocnění sliznic a parachřipkový virus j typu 3, přičemž plasmidy mají pro každou účinnost jeden nebo p několik genů volených ze souboru zahrnujícího gB a gD pro vi- l rus hovězího oparu, F a G pro syncitiální respirační virus ho- s vězího dobytka, E2, C+ E2 a El + E2 pro virus onemocnění sliz- s nic, HN a F pro parachřipkový virus typu 3.
  2. 2. Formulace hovězí vakciny podle nároku 1,vyznačující se tím, že obsahuje čtyři účinné polynukleotidové vakciny. S
    G [
  3. 3. Formulace hovězí vakciny podle nároku 1 nebo 2, v y - | značující se tím, že obsahuje geny gB a gD viru j oparu hovězího dobytka ve stejném plasmidu nebo v různých
    Iplasmidech.
  4. 4. Formulace hovězí vakciny podle nároku 1 nebo 2, v y značující se tím, že obsahuje geny F a G syncytiálního respiračního viru hovězího dobytka ve stejném plasmidu nebo v různých plasmidech.
    ř
  5. 5. Formulace hovězí vakciny podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že plasmid pro virus sliznicového onemocnění obsahuje gen E2.
  6. 6. Formulace hovězí vakciny podle nároku 1 nebo 2, v y 20 značující se tím, že pro účinnost viru parachripky typu 3 obsahuje gen HN v plasmidu nebo v souboru genů kódujících HN a F v tomtéž plasmidu nebo v plasmidech odlišných
  7. 7. Formulace hovězí vakciny podle nároku 1 až 6.
  8. 8. Formulace hovězí vakciny podle nároku 1 až 7, vyznačující se tím, že obsahuje 10 ng až 1 mg, s výhodou 100 ng až 500 gg, nejvýhodněji 1 gg až 250 gg každého plasmidu.
  9. 9. Použití alespoň jednoho plasmidu podle nároku 1 až 8 k výrobě vakciny k vakcinaci hovězího dobytka primovakcinací první vakcinou volenou ze souboru zahrnujícího plně živou vakcinou, vakcinou zcela inaktivovanou, vakcinou podjednotkovou, rekombinantní vakcinou, přičemž první vakcinou je alespoň jeden antigen kódovaný alespoň jedním plasmidem nebo antigenem k zaručení křížové ochranu.
  10. 10. Vakcinační kit obsahující formulaci vakciny podle nároku 1 až 8 volenou ze souboru zahrnujícího plně živou vakcinu, vakcinu zcela inaktivovanou, vakcinu podjednotkovou, rekombinantní vakcinu, přičemž první vakcinou je antigen kódovaný polynukleotidovou vakcinou nebo antigen zaručující křížovou ochranu pro podávání při primo-vakcinací a s formulací vakciny.
  11. 11. Formulace hovězí vakciny podle nároku 1 až 8 doprovázená poznámkou poukazující na to, že je tato formulace použitelná s odvoláním na prvnmí vakcinaci volenou ze skupiny zahrnující plně živou vakcinu, vakcinu zcela inaktivovanou, vakcinu pod-jednotkovou, rekombinantní vakcinu první vakcinu obsahující jeden nebo několik antigenů kódovaných jedním nebo několika plasmidy nebo antigeny zaručujícími křížovou ochranu,
CZ0017599A 1996-07-19 1997-07-16 Vakcína obsahující gen bovinního respiracního syncytiálního viru pro vakcinaci skotu proti respiracním nemocem CZ298898B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9609403A FR2751229B1 (fr) 1996-07-19 1996-07-19 Formule de vaccin polynucleotidique notamment contre la pathologie respiratoire des bovins

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ17599A3 true CZ17599A3 (cs) 1999-06-16
CZ298898B6 CZ298898B6 (cs) 2008-03-05

Family

ID=9494497

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20070776A CZ298915B6 (cs) 1996-07-19 1997-07-16 Vakcína obsahující gen viru parainfluenzy typu 3 pro vakcinaci skotu proti respiracním nemocem
CZ0017599A CZ298898B6 (cs) 1996-07-19 1997-07-16 Vakcína obsahující gen bovinního respiracního syncytiálního viru pro vakcinaci skotu proti respiracním nemocem

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20070776A CZ298915B6 (cs) 1996-07-19 1997-07-16 Vakcína obsahující gen viru parainfluenzy typu 3 pro vakcinaci skotu proti respiracním nemocem

Country Status (28)

Country Link
US (2) US6376473B1 (cs)
EP (2) EP0912194B1 (cs)
JP (1) JP2000516200A (cs)
AP (1) AP9701044A0 (cs)
AR (1) AR007862A1 (cs)
AT (2) ATE253376T1 (cs)
AU (1) AU734442B2 (cs)
BR (1) BR9710506A (cs)
CA (1) CA2260855C (cs)
CO (1) CO4700306A1 (cs)
CZ (2) CZ298915B6 (cs)
DE (2) DE69734483T2 (cs)
DK (2) DK0912194T3 (cs)
ES (2) ES2254833T3 (cs)
FR (1) FR2751229B1 (cs)
HR (1) HRP970383A2 (cs)
HU (2) HU228353B1 (cs)
ID (1) ID19513A (cs)
IL (2) IL127703A0 (cs)
MA (1) MA24269A1 (cs)
NZ (4) NZ517686A (cs)
PE (1) PE84699A1 (cs)
PL (1) PL190122B1 (cs)
PT (1) PT912194E (cs)
RU (1) RU2305560C2 (cs)
UA (1) UA70914C2 (cs)
WO (1) WO1998003200A2 (cs)
ZA (1) ZA976283B (cs)

Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2751229B1 (fr) * 1996-07-19 1998-11-27 Rhone Merieux Formule de vaccin polynucleotidique notamment contre la pathologie respiratoire des bovins
US20040002472A1 (en) * 2000-01-21 2004-01-01 Audonnet Jean-Christophe Francis Vaccination or immunization using a prime-boost regimen
US6852705B2 (en) * 2000-01-21 2005-02-08 Merial DNA vaccines for farm animals, in particular bovines and porcines
US7078388B2 (en) 2000-01-21 2006-07-18 Merial DNA vaccines for farm animals, in particular bovines and porcines
FR2804028B1 (fr) * 2000-01-21 2004-06-04 Merial Sas Vaccins adn ameliores pour animaux de rente
US7906311B2 (en) 2002-03-20 2011-03-15 Merial Limited Cotton rat lung cells for virus culture
EP2390352A1 (en) 2003-03-18 2011-11-30 Quantum Genetics Ireland Limited Systems and methods for improving protein and milk production of dairy herds
US7468273B2 (en) 2003-05-01 2008-12-23 Meial Limited Canine GHRH gene, polypeptides and methods of use
CA2545886A1 (en) 2003-11-13 2005-06-02 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Methods of characterizing infectious bursal disease virus
MXPA06009452A (es) 2004-02-19 2007-03-15 Univ Alberta Polimorfismos del promotor de leptin y sus usos.
RS51324B (sr) 2005-04-25 2010-12-31 Merial Ltd. Vakcine protiv nipah virusa
US20080241184A1 (en) 2005-08-25 2008-10-02 Jules Maarten Minke Canine influenza vaccines
US7771995B2 (en) 2005-11-14 2010-08-10 Merial Limited Plasmid encoding human BMP-7
EP1951751B1 (en) 2005-11-14 2017-11-01 Merial, Inc. Gene therapy for renal failure
US7862821B2 (en) 2006-06-01 2011-01-04 Merial Limited Recombinant vaccine against bluetongue virus
CA2684923C (en) 2007-05-02 2015-01-06 Merial Limited Dna plasmids having improved expression and stability
US20080274137A1 (en) * 2007-05-02 2008-11-06 Jean Christophe Francis Audonnet DNA plasmids having improved expression and stability
RU2559527C2 (ru) 2008-11-28 2015-08-10 Мериал Лимитед Рекомбинантная вакцина от птичьего гриппа и её применение
CA2757030C (en) 2009-04-03 2019-01-15 Merial Limited Vectors comprising newcastle disease viruses and compositions thereof
JP5933451B2 (ja) 2009-12-28 2016-06-08 メリアル リミテッド 組換えｎｄｖ抗原及びその使用
IN2012DN06589A (cs) 2010-01-19 2015-10-23 Harvard College
US20130197612A1 (en) 2010-02-26 2013-08-01 Jack W. Lasersohn Electromagnetic Radiation Therapy
ES2795148T3 (es) 2010-03-12 2020-11-20 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Vacunas recombinantes contra el virus de la fiebre aftosa y usos de las mismas
CA2809127C (en) 2010-08-31 2019-04-02 Merial Limited Newcastle disease virus vectored herpesvirus vaccines
AR084358A1 (es) * 2010-12-27 2013-05-08 Lilly Co Eli Composiciones y metodos para identificar y diferenciar componentes virales de vacunas multivalentes de la “fiebre de embarque” (complejo de enfermedad respiratoria bovina (brdc))
WO2012090073A2 (en) 2010-12-30 2012-07-05 The Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting chemotherapy sensitivity
AU2012240246A1 (en) 2011-04-04 2013-05-09 Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment with protein kinase inhibitors
EP2694677A2 (en) 2011-04-04 2014-02-12 Netherland Cancer Institute Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment with protein kinase inhibitors
WO2012145577A1 (en) 2011-04-20 2012-10-26 Merial Limited Adjuvanted rabies vaccine with improved viscosity profile
JP6407714B2 (ja) 2011-04-25 2018-10-17 アドヴァンスド バイオサイエンス ラボラトリーズ インコーポレイテッド 短縮型ｈｉｖエンベロープタンパク質（ｅｎｖ）、前記に関連する方法及び組成物
ES2764079T3 (es) 2011-05-27 2020-06-02 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Vacunas genéticas contra el virus Hendra y el virus Nipah
US9669085B2 (en) 2011-06-01 2017-06-06 Merial Inc. Needle-free administration of PRRSV vaccines
WO2013012924A2 (en) 2011-07-18 2013-01-24 President And Fellows Of Harvard College Engineered microbe-targeting molecules and uses thereof
ES2626297T3 (es) 2011-08-12 2017-07-24 Merial, Inc. Preservación asistida por vacío de productos biológicos, en particular de vacunas
WO2013093629A2 (en) 2011-12-20 2013-06-27 Netherlands Cancer Institute Modular vaccines, methods and compositions related thereto
WO2013106558A1 (en) 2012-01-10 2013-07-18 Merial Limited Lipid based adjuvants for dna - plasmid vaccines
WO2013123242A1 (en) 2012-02-14 2013-08-22 Merial Limited Recombinant poxviral vectors expressing both rabies and ox40 proteins, and vaccines made therefrom
EA034564B1 (ru) 2012-02-14 2020-02-20 Мериал, Инк. Ротавирусная субъединичная вакцина, способ ее получения и применение
WO2013138776A1 (en) 2012-03-16 2013-09-19 Merial Limited Novel methods for providing long-term protective immunity against rabies in animals, based upon administration of replication-deficient flavivirus expressing rabies g
US10801039B2 (en) 2012-06-13 2020-10-13 The University Court Of The University Of Glasgow Reassortant BTV and AHSV vaccines
KR102264852B1 (ko) 2012-08-01 2021-06-14 버베리안 노딕 에이/에스 재조합 변형된 백시니아 바이러스 앙카라(ankara) (mva) 호흡기 신시티알 바이러스(rsv) 백신
WO2014164697A1 (en) 2013-03-12 2014-10-09 Merial Limited Reverse genetics schmallenberg virus vaccine compositions, and methods of use thereof
US10551379B2 (en) 2013-03-15 2020-02-04 President And Fellows Of Harvard College Methods and compositions for improving detection and/or capture of a target entity
EP3848044A1 (en) 2013-05-21 2021-07-14 President and Fellows of Harvard College Engineered heme-binding compositions and uses thereof
US10513546B2 (en) 2013-12-18 2019-12-24 President And Fellows Of Harvard College CRP capture/detection of gram positive bacteria
EP3215188A1 (en) 2014-11-03 2017-09-13 Merial, Inc. Methods of using microneedle vaccine formulations to elicit in animals protective immunity against rabies virus
AR105482A1 (es) 2015-06-23 2017-10-11 Merial Inc Vectores virales recombinantes que contienen la proteína menor del virus del síndrome reproductor y respiratorio porcino (prrsv) y sus métodos de elaboración y uso
WO2017024114A1 (en) 2015-08-06 2017-02-09 President And Fellows Of Harvard College Improved microbe-binding molecules and uses thereof
AU2016308630B2 (en) 2015-08-20 2019-09-19 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. FCV recombinant vaccines and uses thereof
PL3355915T3 (pl) 2015-09-29 2024-03-25 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Szczepionki zawierające cząstki wirusopodobne (VLP) parwowirusa psów (CPV) i ich zastosowania
MA49414A (fr) 2015-11-23 2020-04-22 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Protéines de fusion de dmdv et e2 et leurs utilisations
TWI760322B (zh) 2016-01-29 2022-04-11 美商百靈佳殷格翰動物保健美國有限公司 重組腺病毒載體裝載之fmdv疫苗及其用途
CN109021081B (zh) * 2018-08-10 2019-06-04 山东大学 一种牛病毒性腹泻病毒样颗粒及其构建方法与应用

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE105334T1 (de) * 1988-04-22 1994-05-15 Upjohn Co Schimaerische glykoproteine enthaltende immunogenische abschnitte von menschlichem parainfluenzavirus typ 3.
IE912586A1 (en) * 1990-07-24 1992-01-29 Uab Research Foundation Bovine respiratory syncytial virus vaccines
GB9200117D0 (en) * 1992-01-06 1992-02-26 Connaught Lab Production of recombinant chimeric proteins for vaccine use
CA2136677A1 (en) * 1993-12-29 1995-06-30 Intervet, Inc. Method of intranasally administering to bovines a trivalent vaccine containing modified live ibrv, pl3v and brsv
EP1170368B1 (en) * 1994-01-27 2010-07-28 University Of Massachusetts Medical Center Immunization by inoculation of dna transcription unit
US5541102A (en) * 1994-09-02 1996-07-30 Board Of Regents, University Of Nebraska-Lincoln Bovine cell line resistant to in vitro infection by bovine viral diarrhea virus and all other known pestiviruses
US6019980A (en) * 1995-06-07 2000-02-01 Connaught Laboratories Limited Nucleic acid respiratory syncytial virus vaccines
US6060457A (en) 1996-06-20 2000-05-09 Universite De Montreal DNA plasmid vaccine for immunization of animals against BVDV
FR2751229B1 (fr) * 1996-07-19 1998-11-27 Rhone Merieux Formule de vaccin polynucleotidique notamment contre la pathologie respiratoire des bovins
JP5566663B2 (ja) * 2009-11-09 2014-08-06 三菱重工業株式会社 多翼遠心ファンおよびそれを用いた空気調和機

Also Published As

Publication number Publication date
CA2260855A1 (en) 1998-01-29
HUP9902791A3 (en) 2000-03-28
AU3773597A (en) 1998-02-10
IL127703A0 (en) 1999-10-28
DK0912194T3 (da) 2004-03-15
EP1382348B1 (fr) 2005-10-26
IL127703A (en) 2006-12-31
DE69725988D1 (de) 2003-12-11
EP0912194B1 (fr) 2003-11-05
JP2000516200A (ja) 2000-12-05
RU2305560C2 (ru) 2007-09-10
DE69725988T2 (de) 2004-11-11
NZ508940A (en) 2002-09-27
AR007862A1 (es) 1999-11-24
FR2751229A1 (fr) 1998-01-23
DE69734483T2 (de) 2006-07-20
PE84699A1 (es) 1999-11-28
ID19513A (id) 1998-07-16
US6376473B1 (en) 2002-04-23
NZ333751A (en) 2001-03-30
ATE307607T1 (de) 2005-11-15
HU225169B1 (en) 2006-07-28
WO1998003200A3 (fr) 1998-02-26
HU0500910D0 (en) 2005-11-28
CZ298915B6 (cs) 2008-03-12
NZ517686A (en) 2003-01-31
AU734442B2 (en) 2001-06-14
DE69734483D1 (de) 2005-12-01
MA24269A1 (fr) 1998-04-01
BR9710506A (pt) 1999-08-17
CZ298898B6 (cs) 2008-03-05
EP1382348A3 (fr) 2004-01-28
PL331236A1 (en) 1999-07-05
WO1998003200A2 (fr) 1998-01-29
HU228353B1 (en) 2013-03-28
EP1382348A2 (fr) 2004-01-21
NZ508939A (en) 2002-04-26
HUP9902791A2 (hu) 1999-12-28
CA2260855C (en) 2012-01-03
ES2210548T3 (es) 2004-07-01
RU2002132831A (ru) 2005-01-20
US20020160018A1 (en) 2002-10-31
AP9701044A0 (en) 1997-07-31
US6818628B2 (en) 2004-11-16
ZA976283B (en) 1999-01-19
PT912194E (pt) 2004-03-31
UA70914C2 (uk) 2004-11-15
DK1382348T3 (da) 2006-03-13
ATE253376T1 (de) 2003-11-15
EP0912194A2 (fr) 1999-05-06
HRP970383A2 (en) 1998-10-31
PL190122B1 (pl) 2005-11-30
ES2254833T3 (es) 2006-06-16
FR2751229B1 (fr) 1998-11-27
CO4700306A1 (es) 1998-12-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ17599A3 (cs) Formulace hovězí vakciny proti dýchacím nemocem hovězího dobytka
KR100620302B1 (ko) 개 질병, 특히 호흡기 및 소화성 질병 치료용폴리뉴클레오티드 백신 제제
CZ17499A3 (cs) Formulace vakciny proti nemocem lichokopytníků jmenovitě koní
CZ15999A3 (cs) Formulace polynukleotidové vakciny koček
US7294338B2 (en) Polynucleotide vaccine formula against canine pathologies, in particular respiratory and digestive pathologies
AU776827B2 (en) Polynucleotide vaccine formula, particularly for treating bovine respiratory disease
AU765539B2 (en) Polynucleotide vaccine formula for treating horse diseases
NZ506427A (en) A canidae vaccine comprising the rabies G gene under the control of the CMV-IE promoter

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MK4A Patent expired

Effective date: 20170716