CS76091A3 - Gp75 as a tumorous vaccine for melanoma - Google Patents

Gp75 as a tumorous vaccine for melanoma Download PDF

Info

Publication number
CS76091A3
CS76091A3 CS91760A CS76091A CS76091A3 CS 76091 A3 CS76091 A3 CS 76091A3 CS 91760 A CS91760 A CS 91760A CS 76091 A CS76091 A CS 76091A CS 76091 A3 CS76091 A3 CS 76091A3
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
vaccine
amino acid
subject
nucleic acid
acid sequence
Prior art date
Application number
CS91760A
Other languages
English (en)
Inventor
Alan N Houghton
Original Assignee
Sloan Kettering Inst Cancer
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=23976841&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CS76091(A3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Sloan Kettering Inst Cancer filed Critical Sloan Kettering Inst Cancer
Publication of CS76091A3 publication Critical patent/CS76091A3/cs
Publication of CZ290278B6 publication Critical patent/CZ290278B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y110/00—Oxidoreductases acting on diphenols and related substances as donors (1.10)
    • C12Y110/03—Oxidoreductases acting on diphenols and related substances as donors (1.10) with an oxygen as acceptor (1.10.3)
    • C12Y110/03001—Catechol oxidase (1.10.3.1), i.e. tyrosinase
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0055—Oxidoreductases (1.) acting on diphenols and related substances as donors (1.10)
    • C12N9/0057—Oxidoreductases (1.) acting on diphenols and related substances as donors (1.10) with oxygen as acceptor (1.10.3)
    • C12N9/0059—Catechol oxidase (1.10.3.1), i.e. tyrosinase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0071—Oxidoreductases (1.) acting on paired donors with incorporation of molecular oxygen (1.14)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y114/00—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14)
    • C12Y114/16—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14) with reduced pteridine as one donor, and incorporation of one atom of oxygen (1.14.16)
    • C12Y114/16002—Tyrosine 3-monooxygenase (1.14.16.2)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y114/00—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14)
    • C12Y114/18—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14) with another compound as one donor, and incorporation of one atom of oxygen (1.14.18)
    • C12Y114/18001—Tyrosinase (1.14.18.1)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

®75 Jako nádorová vakcina pro ->
Oblast vynálezu. - · ——J
Tynález se týká GE 75 Jako nádorové vakeiny pro melanom.
Oblast techniky -
Molekulární identifikace imunogenních determinantů lids-kých rakovinných, buněk poskytuje základ pro pochopení imunit-ní odezvy na rakovinu. U lidských melanomových buněk dosáhlydvě třídy antigenů zvláštní pozornosti při poznání imunity: 1/ jednotné antigeny exprimované pouze autologními melanomo-vými buňkami /Old. I.J./1981/ Cancer immunology: The searchfor specifity. G.H.A. Clowes Memoriál Lecture. Cancer Res. 41:361^ Carey T.E., T.Takahashi, L.A.Resnik, H.E.Oettgen a'L.«T. Old /1976/. Cell surface antigens of human malignantmelanoma.i.Mixed hemadsorption assay for humoral immunity tocultured autologous melanoma cells. Eroc0Natl.Acad.Sci. USA,73:32.78^ Reál E.I.M.J.Mattes, A.R. Houghton* H.F. Oettgen,K.O.LIoyd a L.d.Old /1984/· Class 1 /Unique/ antigens of hu-man melanoma. Identification of a 90 000 dalton cell surfaceglycoprotein by autologous antibody.J.Exp.Med 160:1219/ a2/rozdílné antigeny normálně, exprimované buňkami melanocyto-vé linie /Houghton A.H., M.C. laormina, E.Ikeda, T.Watanabe,H.E-»Oettgen a L.J.Old.1980.Serological survey of normál humansfor natural antibody to cell surface antigens of melanoma.Eroe.Hatl.Acad.ScI.USA.77:4260^ Houghton A.R., M.Eisinger,A.P.Albino, J.G.Caírncross a I.J.Old /1982/.Surface anti-gens of melanoeytes and melanomas. Markers of melanocytedifferentiation and melanoma subsets. J.Exp.Med.156:1755řHoughton A.H., E.I.Real, L.J.Davis, C.Cardon-Cardo a L.J.
Old /1987/· Fhenotypic heterogeneíty of melanoma: Relationto the differentiation program of melanoma cells. J.Exp.Med.164:812/. Rozdílné antigeny melanocytů byly definovány jejich z- vztahem, k jiným'.'dobře definovaným, fenotypovým. rysům expri-movaným během, melanocytové diferenciace. /Houghton A.H.,K.Eisinger, Ajř.Albino, J.G‘.Cairncross aL.J.OId /1982/Surface antigens of melaňocytea and. melanomas. Markers ofmelanocyte differentiation and meLanowa subsets. d.Exp.
Med. 156:1755;: Houghton A.N., P.k.Real, L.J.Lavis, C.Car-don-Cardo a L.J.Old /1987/· Phenotypic heterogeneity ofmelanoma: Relation to the differentiation of melanoma cells.•l.Exp .Med. 164:612/, nejzřetelnější jsou. syatémy pigmento-vého melanimu v melanosomech. klinická pozorování potvrdila, že imunitní odezva mí-řená proti antigenům exprimovaným normálními pigmentovýmibuňkami může samozřejmě ovlivňovat metastázový melanom.Specificky, vitiligo a hypopigmentace u pacientů s melano-mem byly spojeny s dobrou prognozou /Nordlund J.«T., J.M.Kirkwood, B.M.Porget, G.Milton, U.R.Albert a A.B.lerner/1983/. Vitiligo in patients with metastatic melanoma:a goodprognosia sign.J.Am.Aead.Dermatol.9:689; Bystryn J.C., B.RigeL R.J. Eriedman a A.Kopf /1987/· Erognostic signifi-canee of hypopigmentation in malignant melanoma.Arch.Derma-tol. 123:1055·/ Z- tohoto hlediska mohou být melanosomál-n£ protilátky rozpoznávány imunitním systémem, foto bylodemonstrováno imunoprecipitaci gp75 antigenu z autologníchmelanomových. buněk sérovými IgG protilátkami pacienta smetastatickým melanomem /Mattes J.M., T.M.Thomson, L.J»
Old a K.O.Lloyd /1983/. A pigmentation-associated, differen-tiation antigen of human melanoma defined by a precipita-ting antibody in human sérum. Int.d.Cancer. 32:717/· gP75antigen je melanosomální polypeptid, který je nejbohatšímglykoproteinem syntetizovaným pigmentovými melanocyty amelanomy. /Tai T^M.Eisinger, S.Ogata a K.O.Lloyd /1983/.Glycoproteins as differentiation markers in human malig^nant melanoma and melanocytes. Cancer Res. 45:2773; nepub- ~3~ plikovaná pozorování/. Epidermální meíanocyty, benignípigmentované léze a primární a metastázové melanomyexprí-mují gp75, ale Jiné buněčné typy ne /Thomson 3Γ.Κ., F.X.Reál, S. Hurakami, C.Gardon-Cardo, L.J.Old a A.N.Houghton/1988 /, Differentiatiou antigens of melanocytes and me-laríóma ťAnálysis of melanosome and cell surface markers ofhuman pigmented cella with monoclonal antibodies.J.Invest.Dermatol. 90í459/· předloženém vynálezu je doloženo,že pg75 cDNA má přibližně ,90% identitu s aminokyselino-vými a nukleotidovými sekvencemi odvozenými od myšího ge-nu, znázorněnými u _b /hnědého/ lukusu. Hnědý lokus jemísto, které determinuje barvu povlaku a ovlivňuje typsyntetizovaného melaninu, naznačující, že gp75 může regerŽ.ovat nebo ovlivňovat typ syntetizovaného melaninu.
Skutečnost, že igG protilátky v seru pacienta s meta-statickým melanomem byly užity pro imunoprecipitaci Í^g75demonstruje, že imunologická tolerance vůči gp75 mohla býtpřerušena. Yynález proto poskytuje expresní vektory, obsa-hující gp75 cDNA pro použití jako vakciny proti melanomú,kde aminokyselinové sekvence peptidů byly stanoveny z gp75polypeptidu, který byl izolován a čištěn myší monoklonálníprotilátkou TA99 a kde cDNA klony byly izolovány screenin-gem oligo nukleotidy na bázi peptidových sekvencí»
Podstata vynálezu Předložený vynález poskytuje izolovanou molekulu nuk-leové kyseliny, jejíž sekvence kóduje aminokyselinovou sek-venci gp75 nebo její fragment. Předložený vynález dále poskytuje izolovanou cDNAmolekulu gp75 molekuly nukleové kyseliny jakož i izolovanoumolekulu cDNA fragmentu gp75 molekuly nukleové kyseliny,mající nukleotidovou sekvencí uvedenou v tabulce II a ami- nokyselinovou sekvenci od ní odvozenou.
Vynález, také poskytuje vakciny pro stimulaci: nebozvýšení produkce protilátek směřujících přoti gp75 u sub-jektu, kterému je vakcina podávána.
Vynález dále poskytuje způsob stimulace nebo zvýšeníprodukce protilátek směrovaných proti gp75 v subjektu. Způ-sob zahrnuje podání vakciny podle vynálezu v dávce účinnépro stimulaci nebo zvýšení produkce protilátek příslušné-mu. subjektu.
Vynález, dále poskytuje způsoby léčení, prevence nebozpožďování recidivy rakoviny. Způsoby zahrnují podání vak-ciny podle vynálezu, v dávce účinné pro léčení, prevenci ne-bo zpoždění recidivy rakoviny příslušnému subjektu.
Popis obrázku
Obr.1. imunoprecipitace a analýza složení peptidu proteinů
zjištěná mAb TA99 a AU šerem. A. Jednorozměrná SDS-PAGB imu-1P F noprecipitátů z -T-značených lyzátů SK-MEIr19 pomocí mAb TA99 /dráha 1/. normálního lidského sera /dráha 2/ aAU sera z 1/75 /dráha 5/ a z 10/76 /dráha 4/. B. Pruhy od-povídající gp75 nebo gp75 ošetřenému Endo H /částečně de-glykosylovaný/ byly vyříznuty z SDS-polyakrylamidového gelua složení peptidu bylo analyzováno limitujícím štěpenímproteázou S.aureus V8 na SDS-PAGE, -, gp75ř + » gp75 částeč-ně deglykosylovaný Endo H. Autoradiografická expozice byla2 dny pro TA99 a 5 dnů pro AU peptidy. -5- . .Předloženy vynález, poskytuje Izolovanou molekulu,nukleové kyseliny* jejíž! sekvence kóduje aminokyselino-vou sekvenci, pro gp75 nebo Jeho fragment.
Aminokyselinovou sekvencí pro fragment gp75 podlejednoho provedení předloženého vynálezu je asn-thr-val-glu- tyr- ser- asp-pro- thr- gly- lys- tyr- asp-pro- ala- val. T dalším provedení, je aminokyselinovou sekvencí melAphe-val-thr-ala-pro-asp-asn-leu-gly-tyr-thr-tyr-glu. V ještědalším, provedení je aminokyselinovou sekvencí asn-phe-asp-ser- thr- leu-jřleu-ser-pro-asn- ser-vfltl-phe- ser· Předložený vynález dále poákytuje Izolovanou cDNAmolekulu molekuly gp75 nukleové kyseliny jakož i izolova-nou cDNA molekulu fragmentu gp75 molekuly nukleové kyse-liny, mající nukleotidovou sekvenci uvedenou v tabulce TTa od ní odvozené aminokyselinové sekvence. Dále tento vynález poskytuje expresní vefcor, obsahu-jící DNA sekvenci podstatnou pro replikací vektoru spoje-nou s cDNA molekulou molekuly gp75 nukleové kyseliny nebofragmentem adaptovaným pro expresí v hostiteli. Expresnímvektorem může. být virus vakcinia nebo výhodně Imclonevektor .
Tento vynález; také poskytuje vakcinu pro stimulacinebo «výšení tvorby protilátek směrovaných proti gp75v subjektu, kterému je vakcina podávána, obsahující ex-presní vektor, obsahující cDNA molekulu, v účinném množ-ství s přísadou a farmaceuticky přijatelným nosičem. Vý-hodně je subjektem člověk a gp75 je vázán k přísadě. Pří-sadou může být mikrobiální přísada nebo jiné farmaceutické činidla. Dále předlóžený vynález poskytuje vakcinu pro sti-mulaci nebo zvýšení produkce protilátek směrovaných, protigp75 v subjektu, kterému je vakcina p.odávána. Vakcina mů-že obsahovat aminokyseli£ovott sekvenci odvozenou od mole-kuly cDEA molekuly gp75 nukleové kyseliny nebo fragmentunebo množství čištěného gp75 nebo jeho fragmentu účinné-ho pro stimulaci nebo zvýšení produkce protilátky v sub-jektu, účinné množství přísady a farmaceuticky přijatel-ný nosič. Výhodně je subjektem člověk a gp75 je vázánfc přísadě. Přísadou může být mikrobiální přísada nebo jinéfarmaceutické činidlo.
Tento vynález také poskytuje způsob stimulace nebozvýšení produkce protilátek směrovaných proti gp75 v sub-jektu. Způsob zahrnuje podání vakciny podle vynálezu v dáv-ce účinné pro stimulaci nebo zvýšení produkce protiláteksubjektu.
Vynález dále poskytuje, způsob léčený rakoviny u sub-jektu, který je rakovinou, postižen. Způsob zahrnuje podá-ní vakciny podle vynálezu v dávce účinné pro léčení ra-koviny tomuto subjektu.
Vynález dále poskytuje způsob prevence rakoviny vsubjektu postiženém rakovinou, Způsob, zahrnuje podánívakciny podle vynálezu v dávce účinné pro prevenci rako-viny tomuto subjektu. Tento vynález také poskytuje způsobzpoždění recidivy rakoviny v subjektu citlivém k rakovině.Způsob zahrnuje podání vakciny podle vynálezu v dávce ú-činné pro zpoždění recidivy rakoviny tomuto subjektu. “7~
Způsoby Léčení» prevence a zpožďování recidivy rako-viny mohou být směrovány k rakovině? jako je melanom· Vak-činy Jsou vhodné pro prevencí rakoviny jako je melanomu pacientů s vysokým ohrožením recidivou nebo primárnímmelanomem. V těchto metodách může gp75 být navázán na přísadu:».Dále může být subjektu před podáním vyýccíny podáno účinnámnožství cyklofosfamidu.
Materiály a metody:
Tkáňová kultura: Melanomová buněéná linie SK-MEL-19 bylakultivována v PIEM plus 1 % neesenciálních aminokyselin apenicilinu a střeptornycínu, s tím rozdílem, že SerumP 3us10?ú /obJ./obj./ /Hazelton Research Products lne., Lene-xa, KS/ byb nahrazeno fetálním. hovězím sárem /EBS/.
Izolace a čištění gp75: Post-nukleová membráová frakce zmembránové buněčné linie SK-MEL-19 byla izolována homoge-nizací ve 20mMTris/HCl, pH 7,5, 5 mM MgCl,, 2 mM PMSE aodstředěna při 10000 g«. Membrány byly solubilizovány ve20 mM Trls/HCl, pH 7,5» 3K KC1 a 5 mM EDTA a odstředěnypři 100 000 g. Nerozpustná proteinová frakce byla resus-pendována ve 20 mM Tris/HGl, pH 7,5» 0,5% deoxycholátsodný. Detergent-rozpustné proteiny se oddělí odstředěnímpři 100 000 g. Supernatant se dialyzuje proti 20 mM Tris/HCl, pH 7,5, 0,15M NaCl a 2 mM CHAPS a aplikuje na MonoQ /HR 5/5» Pharmacia 1KB Biotechnology lne. Pistacaway,NJ/ kolonu ekvilibrovanou 20 mM Trls/HCl, pR 7,5, 0,15 MNaCl a 2 mM /3- //3-cholamidopropyl/dimethyl-amonÍo/-1-propansulfonátem /CHAPS/ /pufr A/. Navázané proteiny seeluují lineárním gradientem 0-1,0 M NaCl v pufru A. Erak- fr- če jsou zkoušeny na gp75 kompetitivní inhihičá zkouškou.
Erakcer obsahující gp75 byly spojeny, dialyzovány pro-ti Con A kolonovému pudru /10 mři Tris/HCl, pH 7,5, obsahu-jícímu 1 mM CaCl2, 1 mM MnCl^ a 2mM PMSF/ a aplikoványna Con-A Sepharůsovou kolonu. Nenavázané proteiny bylyodstraněny promytím kolonovým pudrem. Proteiny navázanéna Con A byly eluovány 0,25 M Ot -D-methylmannopyranosidemv Con A kolonovém, pudru. Prakce, obshující gp75 byly spo-jeny a dialyzovány proti 10 mM Tris/HCl, pH 7,5, 2 mM CHAPSa 2 mMPMSP /CB/ a aplikovány k myší monoklonální proti-látce /mAB/ TA99 /Thomson T.M., J.M.Mattes, l.Roux, l.J.
Olď a K.O.Iloyd /1985/· Pigmentation-assocíated glycopro-tein of human melanoma and melanocytesxDedinition with amouše^monoclonal antibody.J.Invest.Dermatol. 85:169/ na Addi-Gel 10 adinitní kolonu. Gel byl postupně vymýván vždy 6 mlCB, CB. + 1M NaCl, CB a CB + 2mM CHAPS. Navázaný gp75 bylz kolony eluován O,1M glycinem-HCl, pH 5,1, obsahujícím2mM CHAPS.
Kompetitivní inhibiční zkouška pro gp75i Během čištění bylgp75 monitorován a kvantidikován měřením schopností trakcíinhibovat vazbu 500 ng/ml mAB TA99 k SK-MEIř-19 buňkám dixo-vaným ve směsi methanolxaceton /1 :1 obj./obj./ enzymovouimunozkouškou /EIISA/ /Houghton A.N., H.Brooks, R.J. Cote,M.C.Taormina, H.F. Oettgen a I.J.Old /1985/. Detectíon odceli surdace and intracellular antigens by human monoclonalantibodies: hybrid Cells derived drom lynyhocytes od patientswith malignant melanoma. J.Exp. Med»158:55/.
Imnnoprecipitace, gelová elektrodoréza a mapování peptidů:Jodace na Con A-Sepharose navázané proteinové trakce SK-MEIr-19 metodou chloraminu T a imunoprecipitace s mAB TA99a AU šerem byly provedeny jak je popsáno /Mattes J.M., T.M. -9-
Thomson» L.J.Old. a N.O.lloyd /1985/. A pigmentatfon-ass©~cíated» differentiatioa antigénof human melanoma definedby a. precipitating antibody in human sérum. rnt.J.Canr-cer. 32:717/· Proteiny byly analyzovány elektroforézouna SDS-polyakrylamidovém gelu /SDS-PAGE/ /laemmli U.K./1970/» Gleavage of structural proteins during assemblyof the head of bacteriophage Ϊ4. Nátuře. 227:680/. Proštěpení endoglykosidázou E /Endo E/, byly imunopřecipitá-ty suspendovány v 0,4% SDS, zahřívány na 100 °C po 5 mi-nut a štěpeny 1 mU-Endo E /Genzyme Corporation, Boston, MA/ve 100 mM citrátovém pufru, pH 5,5 18 hodin při 57 °C.Dvourozměrná elektroforéza za použití ampholinů pE 5-7/iKfr-Produkter, Bromma, Švédsko/ byla provedena podle 0*Pa-rrela /0*EarrelP.E /1975/« Eigh resolution two-dimensio-nal electrophoresis of proteins. J.Biol. Chem. 250:4007/.Mapování peptidů bylo provedeno u imunoprecipitovanéhogp75 limitující proteolýzou Y8 proteázou Staphylococcusaureus /Y8 proteáza/ /Boehringer Mannheim Biochemicals.Indianopolis, IN/ v SDS-PAGE podle Clevelanda a spol»/Clevelanď D.W., S.G.Pischer, M.W.Kirschner a U»K. Laemmli/1977/. Peptide mapping. by limiteď proteolysis in sodiumďoďecyl sulfáte and analysis by geL electrophoresis. J.Biol.Chem. 252:1102/.
Sekvenování peptidů: Sekvenování peptidů‘'bylo provedenona zařízení Earvard University Microchemistry. ČištěnýgP75 /12 yug/ elfektroblotovaný na nitroceluloze bylštěpen Y8 proteázou /1:20 hmotn./hmotn./ podle Aebersolda/Áebersolď R.K., J.Leavitt, R.A.Saavedra a L.E.Eooď/1987/. Internal amino acii sequence analysis of proteinsseparated by one- or two- dimensional gel electrophoresisafter in šitu protease digestion on nitrocellulose. Proč.Nati. Acad. Sci. USA 84:6970/ a výsledné peptidy byly se-parovány na Brownlee EP-500 2,1x100 mm C8 koloně při 58 °C. -10- Některé píky z ¥8 proteázového digestu byly spojeny a su-šeny. Kompletní’ redukce a alkylace byla provedena přídav-kem 50 /UÍ 8 H močoviny/0,4 K hydrogenuhličitan amonnýpu£remr pEL 8^0, 5 yUÍ 100 mři dithiothreitolu a zahřívání®na 50 °C 1.5 minut. Vzorek ibyl pak inkubován a 5 yuí 45 mKJodoctové kyseliny po 5 minut při teplotě místností a zře-děn 140 yuL destilované vody. Další štěpení redukovanéa alkylované peptídové frakce trypsinem /1:25 hmotn./hmotn./bylo prováděno přes noc pří 57 °G. Prakce, které byly sek-venovány, byly přímo aplikovány na polybrenem precyklovanéfiltry ze skleněných vláken a sekvenovány na ΑΒί 477A sekve-nátoru proteinů. Aminokyseliny byly odděleny pomocí ABÍ120A online HPIC. Pro každý peptid bylo minimálně provede-no 20 cyklů. Reprodukovatelný výtěžek HPLC za bažných la-boratorních podmínekbyl 95 %. Jsou uváděny aminokyselino-vé sekvence pouze těch. peptidů s nejvyššímí souhlasnýmivýsledky.
Klonování a sekvenování gp75 cDNA: cDNA knihovna byla kon-struována z melanomové buněčné linie SK-MEL-19 a byly pou-žity oligonukleotidové sondy pro izolaci dvou gp75 cDNAklonů podle metod Již popsaných /Bouchard Bo, B.Fuller* S.ViJayasaradhi a A.N.Houghton /1989/· ínductíon of pig-mentation in mouše fibroblasts by expressiou of human tyro-sinase. J.Exp.Med, 169:2029/. Složení oligonukleotíhovýchsond bylo : 5*CíECGAAGG!EGÁAGCCCAGG!£TGTC&GGGGCGGTCACGAACA!ECTC 5'*Dva cDNA klony /1,8 kb a. 2,0 kb/ byla sekvenovány podle me-tody Sangera a spol., /Sanger E., S.Nicklen a A.R.Coulson/1977/. DNA sequencing with chain-terminating inhibitors.
Proč.Nati.Acad.Sci.USA. 74:5463//Stratagena Cloning Sys-tems, La Jolla, CA/. -11- Výsledky a diskuse:
Jak. myši mAB TA99 a AU serunt. pacienta s melanomemsráží?75-kDA: antigen á nuSB přečištuje gp75 antígen sráže-ný AU šerem. /Thomson. T.M.,. J.M.Mattes, L.Roux, I.J.OId ak.O.Iloyd /1985/· Pigmentation-associated glycoprótein of.human melanoma and melanocytes: Definition with a mouše mo-noclonal antibody.J.Invest.Dermatol. 85:169/. ProtožemAb TA99 byl použit pro čištění gp75 z melanomové buněč-né linie SK-MEL-19, je důležité potvrdit, že mAb TA99deteguje pouze gp75 antigen rozpoznávaný AU sérem. V před-cházejících studiích autoři prokázali, že mAb TA99 nerea-goval. s lidskou tyrosinázou, 75-80 kDa glykoprotein Jetaké exprimován v pigmentovaných melanocytech /BouchardΒ», B.Euiler, S.Yijayasaradhi a A.N.Houghton /1989/. In-duction of pigmentation in mouše fibroblasts by expressionof human tyrosínase.J.Exp.Med. 169:2029/. Nicméně z těchtoexperimentů nebylo nalezeno pravidlo, že mAb TA99 křížověreaguje s dalšími polypeptidy exprimovanými SK-MEL-19.
Proteiny imunoprecipítované mAb TA99 a AU sérovouprotilátkou, byly analyzovány jedno- a dvou-rozměrnými SDS-PAGE a. peptidy byly mapovány za použití limitující proteo-lýzy S.aureus Y8 proteázou. Proteiny srážené jak mAb TA99i protilátkami AjíU séra mají shodnou molekulovou hmotnost/75 kDa/, isoelektrický bod /5,5-5,9/ /údaje neuvedeny/ asložení peptidu /obr„1)í, potvrzující, že TA99 a AU sérumrozpoznávají stejné gp75 molekuly. gp75 antigen byl čištěn jkk je popsáno.v materiálecha metodách. Afinita čištěného gp75 byla použita pro sek-venování peptidu. Aminokyselinové sekvence tří vnitřníchpeptidů byly získány proteolytickým Štěpením čištěného gp75Y8 proteázou a trypsinem. Sekvence tří peptidů jaou uvede-ny v tabulce I. Je zde 90% shoda s aminokyselinovými sekven-cemi odvozenými z klonu myší cDNA, pMT4, izolovanými Shi- -12- bahara S, X. Tomita, T.Sakakura, G.Nagar, B.Chaudburi a R„Mul ler-/1986/. Gloning and Expression. of cDNA eneodingmouše tyrosinasa.Nucleic Acid Res. 14:2413/.. Oligonukleo-tidové sondy byly odvozeny z peptidových sekvencí gp75a použity ke screeningu cDNA knihovny konstruované zlidské melanomové linie SK-MED-19· Dva cDNA klony /1,8 kba 2,0 kb/ byly izolovány z cDNA knihovny SK-MED-19. Částeč-né nukleotidové sekvence cDNA klonů /(3? 75-1 a -2/, jedna znich. je uvedena v tabulce H, vykazují 88,6% shodu spRT4 /mezi nukleotidy 649“ 1437 v otevřeném, čtecím, rámečku/»Odvozená aminokyselinová sekvence gp75-1 a “2 vykazuje 93,6%shodu s aminokyselinovou sekvencí odvozenou od pMT4 meziaminokyselinovými zbytky 219"467· Byla zde 55,3% shodamezi cDNA sekvencemi gp75 a lidskou tyrosíházou /Bouchard B.,, B.Fuller, S.Vijayasaradhi a A.N.Hougbton /1989/. ín-duction of pigmentation in mouše iibroblasts by expressionof human tyrosinase» J.Exp.Med. 169:2029/ mezi mukleoti-dy 618-1544 tyrosinázy /data neuvedena/. -13-
Tabulka I
Aminokyselinové sekvence tři peptidů odvozených oď gp75 , Asn-Thr-Val-G.ln-Gly-Tyr- Ser-Aep-Pro-Thr-Gly-Lys-Tyr-Asp-Pro-Ala-Yal 2* Met-Σ he-Yal-Thr-Ala-iro-Aj^ÁJM-Leu-Gly-Tyi^-Kue-Tyr-Glu 5· Asn-P he-Asp- Ser-Thr- Len-Hen- Ser-Pr o- Asn- Ser-Yal-P he- Ser
Polotučná písmena: aminokyselinové zbytky, které jsou odliš-né oď zbytků předpovězených z myší cDNA pMT4 /Shibahara S«, Ϊ. Tomita. leSakakura, C.Nagar, B.Chaudhuri a E.Muller. /1986/.Cloning and expression of cDNA kódující myší tyrosinázn.
Nuclěic Acid Res. 14:2413/· -14-Tabulka 2
Parciální cDNA sekvence gp75
GGACCAGCTTTTCTCACATGGGACAGGTACCACCTCCTGCGTCTGGAGAAAGACATGCAGGAAATGTTGCAAGAGCCTTCTTTCTCCCTTCCTTACTGGAATTTTGCAACGGGGAAAAATGTCTGTGATATCTGCACGGATGACTTGATGGGATCCAGAAGCAACTTTGATTCCACTCTAATAAGCCCAAACTCTGTCTTTTCTCAATGGCGAGTGGTCTGTGACTCCTTGGAAGATTATGATACCCTGGGAACACTTTGTAACAGCACCGAGGATGGGCCAATTAGGAGAAATCCAGCTGGAAATGTGGCCAGACCAATGGTGCAACGTCTTCCTGAACCACAGGATGTCGCTCAGTGCTTGGAAGTTGGTTTATTTGACACGCCTCCTTTTTATTCCAACTCTACAAACAGTTTCCGAAACACAGTGGAAGGTTACAGTGACCCCJ.CGGGAAAGTATGACCCTGCTGTTCGAAGTCTTCACAATTTGGCTCATCTATTCCTGA.- TGGAACAGGGGGACAAACCCATTTGTCTTCCCAAGATCCTATTTTTGTCCTCCTGCACACCTTCACAGATGCAGTCTTTGATGAATGGCTAAGGAGATACAATGCTGATATATCCACATTTCCATTGGAAAATGCCCCTATTGGACATAATAGACAATACAACATGGTGCCATTCTGGCCCCCAGTCACCAACACAGAAATGTTTGTTACTGCTCCAGACAACCTGGGATACACTTATGAA -15- Tésná hómologie mezi lidským. gp75 a vydedukovaným,produktem myšího pNT4 genu, vrhá. určité světlo na možnoustrukturu a funkci gp75. pHT4 klon hyl izolován z myšíchmelanocytových buněk /Shibahára S., X. lomit a. T.Sakakura,C.Nagar.B.Chaudhuri a R.Muller /1986/7. Cloning and expre-ssion of cDNA encoding mouše tyrosinase. Nucleic Acid Res.14:2413/· 0 originální pMT4 cDNA se předpokládalo, že kó-duje myší tyrosinázu, která je mapována u myšího c /bí-lého/ lokusu. Nicméně další dvě studie prokázaly, že pMT4 >se liší od myší tyrosinázy /Yamamoto H., S.Takeuehi, 31.Kudo, E.Makino, A.Nakata, T.Shinoda a T-sTakeuhi /1987/.Cloning ani sequencing of mouše tyrosinase cLNA. Jpn.J.Genetics.62:271 , Muller G., S.Ruppert.E.Schimd a G.Schutz/1988/. Functional ánalysis of alternativěly spliceď tyro-sinase gene transcripts. EMBO /Eur.Mol.Biol.Organ.J./ 7:2723, Jackson i.J./1988'/. cLNA encoding tyrosinase-rela-ted protein maps to the brown locus in mice.Proc.Natl.Acad,Sci.USA.85:4392/. Pravděpodobně je sekvence gp75 odlišnáod sekvence lidské tyrosinázy, ačkoliv je zde omezená sho-da /43,1 %/ mezi gp75 a odvozenou aminokyselinovou sekven-cí lidské tyrosinázy /mezi aminokyselinovými zbytky 208-459/· Funkce gp75 a pMT4 produktu je potvrzena zjištěním,že pMT4 je mapován kb /hnědému/ lokusu myši /Jackson i.ď./1988/. A cLNA encoding tyrosinase-related protein maps tothe brown locus in mice. Proč,Hatl.ACad.Sci.USA 85:4392/,a region that regulates coat color /Silvers W.E./1979/.Comparative genetics of coat colour in mammals. Y The CoatColors in Mice.Springer Verlag, New York 1/. Shoda mezigp75 a dedukovanou aminokyselinovou sekvení pMT4 umožňujeformální identifikaci produktu lidského homologu genu myší-ho hnědého lokusu. Vzhledem k jeho melanosomální lokali-zaci a strukturní podobnosti s tyrosinázou, může gp75 mole-kula regulovat syntézu melaninu a determinuje typ synteti-zovaného melaninu. -16-
X
'í>.
Bylo stanoveno, že melanosomální determinanty adalšr intracelulární antigeny nejsou potenciálními- cílypro Imunoterapii melanomu. Nicméně v poslední době Bylozjištěno, že intracelulárni proteiny mokou být. připravenya prezentovány Jako peptidy k cytotoxickým £ buňkám /CTI/buňkami- poskytujícími antigen /Townsenď A.R.M_ á H.Bodmer/1989/· Antigen recognition by class I-resxricted £ lympho-cytes. Ann.Rev.Immunoi. 7:601/. £oto zjištění otevírá teo-retickou možnost, že I buňka reagující proti melanomu bymohla být řízena proti molekulám exprimovaným v nádoro-vých buňkách· Alternativně, melanosomální komponenty, kte-ré Jsou normálně transportovány mimo melanocyt během ma-turace, by se mohly akumulovat v extracelulárním prosto-ru okolo tumorových buněk, nebo by lokální tkáňová nekrozamohla být uvolnovana a deponována v intracelulárních pro-duktech. Pro podpořeni schopnosti gp75 se radioaktivněznačený TA99 mAb specificky lokalizuje k lidským melano-movým transplantátům v nu/nu. myši /Welt S·, J.M.Matleš,R.Grando, i.M.Thomson, R.W.Leonard, P.B.Zanzonieo, R. E.Bigler, S.leh, H.E.Oettgen a 1.J.Old /1987/»KonoclonaIantibody to an intracellular antigen images human melanomatransplants in nu/nu mice. Proč.Nati.Acad.Sci. USA 84:4200/,což indikuje dostupnost antigenu k protilátce v místechtumoru..
IgG protilátky v AU pacienta s melanomem. rozpoznáva-jí determinanty na gp75> na čemž se podílejí melanomovébuňky a normální melanocyty /Mattes «Γ.Μ., i.M.Thomson, i„J.Óld. a k.O.Lloyd /1985/· A pigmentation-associated, diffe-rentiation antigen of human melanoma defined. by a precipi-tating antibody in human sérum. Int.J.Cancer 52:717/. S izo-lací cDNA klonů, které kóduji gp75, by mohlo být možné stu-dovat strategie pro aktivní imunizaci proti gp75· Jsou zdealespoň dva požadavky na účinnou indukci CTL odezev ke gp75:
I -1? 1u imunitní tolerance ke gp75 musí být přerušena a 2f. SP75 peptidy musí být produkovány á účinně přítomny v hlavních, hlstokompatibilních antigenech melanomových buněk,r Alternativně je možné, že diferenciující antigeny melano- oytů by mohly nést unikátní determinanty. Geny, kódujícíprodukty exprimované normálními melanocyty by mohly býtmutovány nebo přestavena během maligní transformace, ge-nerující nové epitopy pro rozpoznávání CTÍ a protilátek. & tohoto hlediska nejlépe charakterizovaným, jedinečnýmantigenem lidských melanosomových buněk je determinantmelanotransferrinu, 95-97 kDa glykoprotein, exprimovanýmelanocyty a mel^nomovými buňkami /B-eal E.i., M.J.Mattes,A.H.Houghton, H.E.Oettgen, K.O.lloyď a l.H.Old /1984/.
Class 1 /unique/ antigens of human melanoma. Identificationof 90000 dalton cell surface glycoprotein by autologousantibody. J.Exp .Med. ,160:1219; Eurakawa E. S., Eurakawa E.,E.X.Real, l.J.Old a K.O.Lloyd /1989/. A unique antigenic. i épitope of human melanoma is carried on the common melano-ma glycoprotein gp75/p97. J.Exp .Med. 169:585/. Tuto možnosthájí i skutečnost, že genetické změny byly detegovány svysokou četností a rozsahu v genomu lidských melanomovýchbuněk. /Dracopoli, H.G., A.H.Houghton a l.J.Old /1985/.loss of polymorphic restriction fragments in malignant me-lanoma: Implieations for tumor heterogeneity. Rroc.Hatl.Acad.Sci. USA 82:1470; Dracopoli H.C., B.Alhadeff, A.H.Hough-ton a l.J.Old /1987/. loss of heterozygosity at autosomaland x-linked loci during tumor progression, in patient withmelanoma. Cancer Res, 47:3995/.

Claims (11)

  1. 2, Izolovaná molekula nukleové kyseliny, jejíž sekven-ce kóduje, aminokyselinovou sekvenci fragmentu gp75o 3· izolovaná molekula nukleové kyseliny podle nároku2, kde aminokyselinová sekvenee fragmentu gp75. je asn-thr-va 1— g lu- g ly* t yr- s er- <ep- pro-1 hr- g ly- ly s-tyr- a sp- pr o- a lá-vá 1. 4* Izolovaná molekula nukleové kyseliny podle nároku 2,kde aminokyselinová sekvenee fragmentu gp75 je métr-phe-val- thr- ala-pro- asp- asn- leu-gly- tyr- ihaf- tyr-glu. 5* Izolovaná molekula nukleové kyseliny podle nároku2, kde aminokyselinovou sekvenci fragmentu gp75 je asn-p he- a sp- ser- thr- le u- i le u- ser-p r o- a sn- sex- va 1- p he- ser .
  2. 6. Izolovaná molekula cDNA molekuly nukleové kyselinypodle nároku 1. 7· Izolovaná molekula cDNA molekuly nukleové kyseli- ny podle nároku 2, mající sekvenci uvedenou v tabulce H<> t 8· Aminokyselinová sekvence odvozená oď izolované mo- lekuly cDNA podle nároku 7»
  3. 9·- Expresní vektor,, obsahující LNA sekvencí poďstatnou - pro replikaci vektoru spojenou s molekulou cLNA podle ná- * roku. 6 upravenou pro expresí v hostiteli·
  4. 10. Expresní vektor, obsahující LNA sekvencí podstatnoupro replikaci vektoru spojenou s molekulou cLNA podle ná-roku 7, upravenou pro expresi v hostiteli· 11. · Expresní vektor podle nároků 9 nebo 10, kde expres-ním vektorem Je vaccinia virus·
  5. 12. . Expresní vektor podle nároků 9 nebo 10, kde expres-ním vektorem Je Dnelone vektor.
  6. 13. Vakcina pro stimulaci nebo zvýšení produkce proti-látek v subjektu, kterému. Je podávána, směrovaných protigp75, vyznačující se tím, že obsahuje expres-ní vektor podle nároku 9, účinné množství přísady a farma-ceuticky přijatelný nosič.
  7. 14. Vakcina pro stimulaci nebo zvýšení produkce proti-látek směrovaných proti gp75 Y subjektu, kterému Je podá-vána, vyzná čuj í c í se t í m, že obsahuje expres-ní vektor podle nároku. 10, účinné množství přísady a far-maceuticky přijatelný nosič.
  8. 15. Vakcina pro stimulaci nebo zvýšení produkce proti-látek směrovaných proti gp75 v subjektu, kterému Je podává- . na, vyznačující se tím, že obsahuje množství čištěného gp75 nebo Jeho fragmentu, účinné ke stimulaci nebozvýšení produkce protilátky v subjektu, účinné množstvípřísady a farmaceuticky přijatelný nosič. -20-
  9. 16. Vakcina pro stimulaci nebo zvýšení produkce protilá-tek směrovaných proti gp75 v subjektu, kterému je vakcinapodávána, vyznačující se tím, že. obsahujepolypeptid kódovaný aminokyselinovou sekvencí podle nároku 8 účinný pro stimulaci nebo zvýšení produkce protilátky v sub-jektu, účinné množství přísady a farmaceuticky přijatelnýnosič.
  10. 17. Vakcina podle kteréhokoliv z nároků 13, 14, 15 ne-bo 16, kde uvedeným subjektem je člověk.
  11. 18. Vakcina podle kteréhokoliv z nároků 13, 14, 15 nebo16, kde gp75 je vázán na nosič. ΛΛ3Γ90V i λΖ3Τίλ.;·Λ Obdav^n
    O 1
CS1991760A 1990-03-22 1991-03-21 Izolovaná molekula nukleové kyseliny kódující gp75, expresní vektor na její bázi, polypeptid jí kódovaný a vakcína obsahující tento vektor nebo polypeptid CZ290278B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US49743190A 1990-03-22 1990-03-22

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS76091A3 true CS76091A3 (en) 1992-02-19
CZ290278B6 CZ290278B6 (cs) 2002-07-17

Family

ID=23976841

Country Status (20)

Country Link
US (2) US6168946B1 (cs)
EP (2) EP0522078B1 (cs)
JP (2) JP3336006B2 (cs)
AT (1) ATE187493T1 (cs)
AU (1) AU660412B2 (cs)
CA (1) CA2078773C (cs)
CZ (1) CZ290278B6 (cs)
DE (1) DE69131829T2 (cs)
DK (1) DK0522078T3 (cs)
ES (1) ES2141089T3 (cs)
FI (1) FI113786B (cs)
GR (1) GR3032804T3 (cs)
HU (1) HU218416B (cs)
IE (2) IE910820A1 (cs)
NO (1) NO311366B1 (cs)
NZ (1) NZ237532A (cs)
PL (3) PL169168B1 (cs)
PT (1) PT97103B (cs)
SK (1) SK282873B6 (cs)
WO (1) WO1991014775A1 (cs)

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IE910820A1 (en) * 1990-03-22 1991-09-25 Sloan Kettering Inst Cancer Gp75 as a tumor vaccine for melanoma
US7041801B1 (en) * 1995-06-07 2006-05-09 Vanderbilt University Antibodies binding to polypeptides encoded by developmentally-regulated endothelial cell locus-1
US5840839A (en) * 1996-02-09 1998-11-24 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Alternative open reading frame DNA of a normal gene and a novel human cancer antigen encoded therein
US7015312B1 (en) 1996-02-09 2006-03-21 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Antibodies to the protein product encoded by ORF3 of the TRP-1 gene and compositions and kits thereof
US6083703A (en) * 1996-02-09 2000-07-04 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Identification of TRP-2 as a human tumor antigen recognized by cytotoxic T lymphocytes
US7001600B1 (en) 1996-02-09 2006-02-21 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Health And Human Services Identification of TRP-2 as a human tumor antigen recognized by cytotoxic T lymphocytes
AU2001241533A1 (en) * 2000-02-15 2001-08-27 The Regents Of The University Of California A universal vaccine and method for treating cancer employing telomerase reverse transcriptase
US6613534B2 (en) 2001-03-20 2003-09-02 Wake Forest University Health Sciences MAP-2 as a determinant of metastatic potential
US20030113919A1 (en) * 2001-08-17 2003-06-19 Aventis Pasteur, Ltd. Immunogenic targets for melanoma
US20030157720A1 (en) * 2002-02-06 2003-08-21 Expression Technologies Inc. Protein standard for estimating size and mass
RU2287575C1 (ru) * 2005-04-22 2006-11-20 Государственное учреждение Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН КЛЕТОЧНАЯ ЛИНИЯ МЕЛАНОМЫ ЧЕЛОВЕКА mel P, ИСПОЛЬЗУЕМАЯ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ВАКЦИН
RU2287577C1 (ru) * 2005-04-22 2006-11-20 Государственное учреждение Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН КЛЕТОЧНАЯ ЛИНИЯ МЕЛАНОМЫ ЧЕЛОВЕКА mel IL, ИСПОЛЬЗУЕМАЯ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ВАКЦИН
RU2287578C1 (ru) * 2005-04-22 2006-11-20 Государственное учреждение Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН КЛЕТОЧНАЯ ЛИНИЯ МЕЛАНОМЫ ЧЕЛОВЕКА mel Kor, ИСПОЛЬЗУЕМАЯ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ВАКЦИН
JP5213075B2 (ja) 2007-06-15 2013-06-19 ジェネラックス・コーポレイション 腫瘍の画像化および／または処置のための微生物
AU2009222998B2 (en) 2008-03-12 2013-05-23 Imclone Llc Anti-TYRP1 antibodies
RU2373280C1 (ru) * 2008-04-24 2009-11-20 Государственное учреждение Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН КЛЕТОЧНАЯ ЛИНИЯ МЕЛАНОМЫ ЧЕЛОВЕКА mel Gus, ИСПОЛЬЗУЕМАЯ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ВАКЦИН
RU2390556C1 (ru) * 2008-12-26 2010-05-27 Государственное учреждение Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН КЛЕТОЧНАЯ ЛИНИЯ МЕЛАНОМЫ ЧЕЛОВЕКА mel Z, ИСПОЛЬЗУЕМАЯ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ВАКЦИН
RU2402603C1 (ru) * 2009-02-12 2010-10-27 Государственное учреждение Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН КЛЕТОЧНАЯ ЛИНИЯ МЕЛАНОМЫ ЧЕЛОВЕКА mel Me, ИСПОЛЬЗУЕМАЯ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ВАКЦИН

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2504010B1 (fr) * 1981-04-15 1985-10-25 Sanofi Sa Medicaments anticancereux contenant la chaine a de la ricine associee a un anticorps antimelanome et procede pour leur preparation
US4808704A (en) * 1981-09-30 1989-02-28 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Monoclonal antibodies to cell surface antigens of human malignant melanoma
US4806628A (en) * 1982-11-30 1989-02-21 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Monoclonal antibodies against melanocytes
US4591572A (en) * 1983-04-01 1986-05-27 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Pigmentation associated, differentiation antigen of human melanoma and autologous antibody
USH819H (en) * 1984-04-30 1990-09-04 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Energy Palladium-109 labeled anti-melanoma monoclonal antibodies
US4851510A (en) * 1984-11-30 1989-07-25 Wadley Technologies, Inc. Monoclonal antibodies to novel melanoma-associated antigens
US4798790A (en) * 1985-07-18 1989-01-17 Sloan-Kettering Institute Monoclonal antibody specific for a pigmentation associated antigen
US5262177A (en) * 1986-02-07 1993-11-16 Oncogen Recombinant viruses encoding the human melanoma-associated antigen
US5141742A (en) * 1986-02-07 1992-08-25 Oncogen Vaccines against melanoma
US5009995A (en) * 1986-10-27 1991-04-23 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Monoclonal antibodies to melanoma cells
US5059523A (en) * 1988-05-02 1991-10-22 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Cell-surface glycoproteins of human sarcomas
US5009495A (en) * 1989-05-26 1991-04-23 Williams Robert D Hinge for eyeglasses
CA2042064C (en) 1989-08-04 2008-10-21 Susan G. Stuart C-erbb-2 external domain:gp75
IE910820A1 (en) * 1990-03-22 1991-09-25 Sloan Kettering Inst Cancer Gp75 as a tumor vaccine for melanoma
US5262117A (en) * 1990-10-12 1993-11-16 Centro Sviluppo Settori Impiego S.R.L. Process for preparing thermoinsulating and/or structural formed articles and products so obtained
US6180604B1 (en) * 1996-08-21 2001-01-30 Micrologix Biotech Inc. Compositions and methods for treating infections using analogues of indolicidin

Also Published As

Publication number Publication date
HK1014732A1 (en) 1999-09-30
FI924222A0 (fi) 1992-09-21
ES2141089T3 (es) 2000-03-16
FI113786B (fi) 2004-06-15
WO1991014775A1 (en) 1991-10-03
GR3032804T3 (en) 2000-06-30
NO311366B1 (no) 2001-11-19
AU660412B2 (en) 1995-06-29
FI924222L (fi) 1992-09-21
JP3336006B2 (ja) 2002-10-21
AU7690691A (en) 1991-10-21
EP0965640A1 (en) 1999-12-22
CA2078773C (en) 2001-07-03
HU218416B (hu) 2000-08-28
EP0522078B1 (en) 1999-12-08
PL169105B1 (pl) 1996-06-28
NZ237532A (en) 1993-03-26
IE20000918A1 (en) 2001-05-30
CA2078773A1 (en) 1991-09-23
PL169168B1 (pl) 1996-06-28
EP0522078A1 (en) 1993-01-13
DE69131829D1 (de) 2000-01-13
PL289550A1 (en) 1992-07-27
CZ290278B6 (cs) 2002-07-17
NO923659L (no) 1992-11-06
HUT62934A (en) 1993-06-28
DE69131829T2 (de) 2000-06-15
NO923659D0 (no) 1992-09-21
IE910820A1 (en) 1991-09-25
SK282873B6 (sk) 2003-01-09
PT97103A (pt) 1991-12-31
JP2002241314A (ja) 2002-08-28
US6168946B1 (en) 2001-01-02
PL168235B1 (pl) 1996-01-31
PT97103B (pt) 1999-02-26
JPH06501837A (ja) 1994-03-03
ATE187493T1 (de) 1999-12-15
EP0522078A4 (en) 1993-05-26
DK0522078T3 (da) 2000-06-13
US20050037462A1 (en) 2005-02-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Vijayasaradhi et al. The melanoma antigen gp75 is the human homologue of the mouse b (brown) locus gene product.
CS76091A3 (en) Gp75 as a tumorous vaccine for melanoma
US7531629B2 (en) Tumor associated antigen peptides and use of same as anti-tumor vaccines
Nukaya et al. Identification of HLA‐A24 epitope peptides of carcinoembryonic antigen which induce tumor‐reactive cytotoxic T lymphocyte
US7906620B2 (en) Tumor associated antigen, peptides thereof, and use of same as anti-tumor vaccines
Van den Eynde et al. New tumor antigens recognized by T cells
US20230059301A1 (en) Identification of mhc class i phospho-peptide antigens from breast cancer utilizing shla technology and complementary enrichment strategies
Wang et al. Human tumor antigens recognized by T lymphocytes: implications for cancer therapy
JPH11507804A (ja) 癌自己関連抗原特異的ヒト細胞障害性ｔ細胞の産生とその使用
JP2003533181A (ja) ムチン−１誘導抗原および免疫療法におけるその使用
Wang Tumor antigens discovery: perspectives for cancer therapy
Gad et al. MUC1‐derived glycopeptide libraries with improved MHC anchors are strong antigens and prime mouse T cells for proliferative responses to lysates of human breast cancer tissue
Colombo et al. cDNA cloning and Escherichia coli expression of UK114 tumor antigen
Engelhard Direct identification of tumor-associated peptide antigens
AU741558B2 (en) Tgfbeta rii receptor nucleic sequence, coded peptide, and uses
Thurin Characterization and molecular biology of tumor-associated antigens
CA2506684A1 (en) Immunogenic epitopes for fibroblast growth factor 5 (fgf-5) presented by hla-a3 and hla-a2

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20060321