CS366289A2 - Method of stable aqueous suspeoemulsions production - Google Patents

Description

4 - 0Í - (/ •Přoďločený vynález se týká způsobu výroby stabil-ních vodných suspoemulzí obsahujících Primycin, vhodnýchpro výrobu antibakteriálních přípravků, zejména ve forměgelu, masti, pěnového aerosolu nebo jiných farmaceutic-kých přípravků pro lokální aplikaci.

Je známo, že Primycin (chemický název: IS-arabino-syl- 2-n-butyl-3,7,11,15,19,21,23,25,27,37-dekahydroxy- 4,16,32,-34,36-pentamethyltetrakonta-16,32-dien-35-O-lakton-4O-guanidi-niumsulfát) se může používat k ošetřování poranění kožní tká-ně, jakož i v urologii, chirurgii, oftalmologii, gynekologii adermatologii, dále pak při poraněních, ke kterým dochází v do-mácnostech a při popáleninách.

Po dobu jeho použití až do dnešního dne se vůčitomuto přípravku neprojevila rezistence a rovněž nejsou známyŽádné alergické reakce.

Rovněž známé jsou kombinace Primycinu s dalšími antibiotiky (srov. maáarský patentový spis 158 241).

Pritnycin se používá v různých přípravcích. Tak sev maáarském patentovém spisu 173 708 popisují farmaceuticképřípravky, které obsahují heterokoloidní Pritnycin. Nevýhodytěchto přípravků spočívají v nízkém obsahu Primycinu (0,2 až1 %), v případném dráždivém účinku ethanolu, který se používák výrobě heterokoloidního roztoku, na kůži, jakož i v odlupo- vání části naneseného Primycinu z ošetřovaného povrchupo odpaření alkoholu. V maďarském patentovém spisu č. 194 493 se popi-suje základový gel, který obsahuje N-methylpyrrolidona Primycin, jakož i farmaceutické přípravky připravenéz tohoto gelu, jako jsou gely a masti. Úkolem vynálezu je výroba stálého, vodného zákla-dového přípravku, který by byl použitelný sám o sobě akterý by měl vysoký obsah účinné látky, neobsahoval alkohol a vykazoval nízký obsah organických rozpouštědela povrchově aktivních látek a který by byl použitelnýk výrobě nejrůznějších farmaceutických přípravků. Předmětem přndlOŽen-éfeo vynálezu je tudíž způsobvýroby stabilních vodných suspoemulzí obsahujících Pri-mycin, vhodných pro výrobu antibakteriálních přípravků,zejména ve formě gelu, masti, pěnového aerosolu nebo ji-ných farmaceutických přípravků pro lokální aplikaci,který spočívá v tom, že se 0,2 až 5 % hmotnostních, vztaženo na konečný produkt, Primycinu rozpustí nebo suspen-duje při teplotě 90 až 95 °C v 5 až 25 % hmotnostníchpropylenglykolu a získaný roztok nebo suspenze se přiteplotě 55 až 70 °C smísí s 0,5 až 5 % hmotnostnímineionogenních povrchově aktivních látek, až 15 % hmot-nostními dalších pomocných látek a do 100 % hmotnostníchs destilovanou vodou.

Stabilní vodná suspoemulse podle vynálezu se můžeaplikovat sama o sobě nebo ve formě obvyklých farmaceutic-kých nebo farmako-kosmetických přípravků, jako jsou gely,masti, pěnové aerosoly, obvazové látky nebo náplasti. Přípravky podle vynálezu mohou obsahovat vedle Při-mycinu další antibiotika, jako je Sisomycin, Nethylmycin,Doxycyclin, Gentamycin, Norfloxacin, Perfloxacin nebo Oflo-xacin.

Jako neionogenní povrchově aktivní látky lze uvéstethery polyethylenglykolu s laurylalkoholem, cetylalkoholem,stearylalkoholem nebo oleylalkoholem, estery sorbitanu smastnými kyselinami nebo výhodně ethoxylované stearylalko-holy.

Obsah účinné látky v přípravcích podle vynálezu semůže zvýšit použitím Primycinu o velikosti částic pod 10 ^um.

Stabilní vodná suspoemulse podle vynálezu je zvláštěvhodná k výrobě pěnových aerosolů, které se používají košetřování popálenin.

Vlastnosti pěnových aerosolů, jako je a) schopnostvolně a rychle spadnout; b) schopnost zůstat v kyprém stavua zachovat stabilitu; c) schopnost dosahovat určité tvrdosti,se mohou měnit regulací koncentrace neionogenní povrchověaktivní látky, výhodně ethoxylovaného stearylalkoholu (Pola-wax A 31). obsah Polawaxu A 31 hustota pěny stálost pěny 1 % hmotnostní 0,26 1.5 % hmotnostního 0,24 2,0 % hmotnostního 0,22 2.5 % hmotnostního 0,2 3 g/cm 60 min > 3 hodiny g/cnr <60 min } 7 hodin g/cnr <60 min y 12 hodin g/cnr > 24' hodin

Tvrdá pěna, vyrobená ze stabilní vodné suspoemulsepodle vynálezu, ulpívá na povrchu trvale, kryje ránu po dlouhou dobu, zajišťuje okolí prosté bakterií a popřípadě činínadbytečným i používáni obvazových látek.

Jako hnací plyn se může v pěnových aerosolech použí-vat freon, propan-butan, isobutan nebo oxid dusný.

Stálost vodné suspoemulze podle vynálezu se zkoušímikrobiologickým zhodnocením a organolepticky·

Standard (chinoin-Ebrimycin 841201 = 1066 mcg/mg)a účinná látka podle příkladu 2 se rozpustí ve směsi butano-lu, ethanolu a vody v poměru 1:1:2. Získané základní roztokyvykazují koncentraci 4 mcg/ml a používají se k výroběnásledujících zředěných přípravků: standard 4 mcg/ml odměřený objem roztoku podlevynálezu 4 mcg/ml 0,80 ml 0,75 ml 0,75 ml 0,70 ml 0,70 ml 0,65 ml 0,65 ml 0,60 ml 0,60 ml 0,55 ml 0,55 ml - č -

Testovaný mikroorganismus: Streptococcus ATCC 8043 Živná půda: standardní bujón (Difco) Úpravou množství inokula se stanoví transmise 95 %,vztaženo na živnou půdu bez bakterií.

Do každé zkušební nádoby se odměří 10 ml živné půdy,inokulované shora popsaným způsobem.

Inkubace: 37 °C a trvání 3 až 5 hodin.

Počet paralelních měření: 3

Stanovení se provádí v spektrofotometru (Spektro-nom 195) při vlnové délce 570 nm ve 4 cm kyvetě. Výsledkyse vyhodnocují matematickou statistikou.

Na základě mikrobiologických srovnávacích pokusů bylozjištěno, že obsah Primycinu ve vodné suspoemulsi podle vynálezu se mění v rozsahu 5 %·

Organoleptické zkoumání vodné suspoemulse podle vyná-lezu nevykazuje po jednoročním skladování při teplotě 37 °Cžádnou organoleptickou změnu.

Aktivita účinné látky byla testována zjišťovánímhodnot minimální inhibiční koncentrace (MIC). Jako srovnáva-cího vzorku bylo použito na trhu obvyklého gelu Ebrymicinu,obsahujícího Primycin (srov maúarský patentový spis č. 173 708).

Na základě skutečného obsahu Primycinu v gelu Ebrymy- cinu a v lř (% hmotnostní) vodné suspoemulsi, měřeného mikrobiologickým předběžným hodnocením, byla připravenazřeáovací řada o různých koncentracích. Stanovení minimálníinhibiČní koncentrace (MIC) se provádí podle klasickýchmikrobiologických předpisů. Živné prostředí: standardní bujón (Difco)

Inkubace: teplota 37 °C doba 24 hodin

Testované mikroorganismy: Staphylococcus aureus HNCMB 112002

Staphylococcus aureus HNCMB 112003

Staphylococcus aureus HNCMB 110002

Streptococcus faecalis HNCMB 80171Streptococcus pyogenes HNCMB 80001Escherichia coli ENCN3 35033Pseudomcnas aeruginosa HNCN3 17021

Počet paralelních měření: 3 Výsledky testů jsou shrnuty v následujících tabulkách 1 až 6.

Tabulka 1

< κ «___»- «. — *_S

Streptococcus faecalis HNCMB 80171 koncentrace(/Ug/ml)

gel EbrymycinMIC suspoemulze pcdlepříkladu 2 příkladu 12

MIC MIC 0,01 + + + 0,05 + + + 0,1 + + - 0,5 + - - 0,75 + - - pokračování tabulky 1: suspoemulze podle koncentrace gel Ebryaycin přlkladu 2 příkladu 12 (/Ug/ml) MIC MIC MIC 1,0 + - - 1,5 + - - 2,0 + - - 3,0 + - - 5,0 - - - 10,0 - - -

Tabulka 2 O V- —' — —

Streptococcus pyogenis HNCMB 80001 vodné suspoemulze podle koncentrace (/Ug/ml) gel Ebrymycin MIC příkladu 2 MIC příkladu 12 MIC 0,01 + + + 0,05 + + 0,1 - - 0,5 + - - 0,75 + - - 1,0 - - - 1,5 - - - 2,0 - - - 3,0 - - - 5,0 - - - T^a_b_l_k^a 3

Staphylococcua aureus HNCMB 110002 koncentrace(/Ug/ml) gel Ebrymycin MIC suspoemulze podle příkladu 2 MIC příkladu 12MIC 0,01 -+· + 0,05 + + - 0,1 + - - 0,5 + - - 0,75 + - - 1,0 + - - 1,5 - - - 2,0 - - - 3,0 - - - 5,0 # - - T_a ^b^u^ l_k_a 4

Staphylococcua aureus HNCMB 112003 koncentrace(/Ug/ml) gel Ebrymycin MIC vodné suspoemulze podle příkladu 2 MIC příkladu 12 MIC 0,01 + + + 0,05 + + 0,1 + + 0,5 + - «» 0,75 + - - pokračování tabulky 4:

koncentrace gel Ebrymycin(/Ug/ml) MIC 1,0 + 1,5 + 2,0 vodná suspoemulze podlepříkladu 2 příkladu 12

MIC MIC 3,0 5,0

Tabulka 5

Staphylococcus aureus HNCMB koncentrace gel Ebrymycin -ug/ml) MIC 0,01 + 0,05 + 0,1 + 0,5 + 0,75 + 1,0 - 2,0 - 3,0 - 5,0 — 112002 vodná suspoemulze podlepříkladu 2 příkladu 12

MIC MIC + + + + ti - Id -

Tabulka 6 koncentrace(/Ug/ml)

Escherichia coliHNCNB 35033

iHC vodná suspoemulze

Pseudomonas aeruqinosaHNCNB 170021

MIC podle příkladu 12 (MIC) 0,01 + + 0,05 + + 0,1 + - 0,5 + - 0,75 + - 1,0 - - 2,0 - - 3,0 - - 5,0 — Z uvedených výsledků vyplývá, že vodná suspoemulze,která obsahuje 1 % hmotnostní primycinu, vykazuje 10$ zvýšeníbiologického učinku (u testovaných mikroorganismů /koky tvo-řící hnis/) oproti gelu Ebrymycinu. Účinek přípravků podle vynálezu byl testován vůčiklinickému zánětu vemene a srovnáván s účinkem veterinárníhopřípravku Mamycinu (výrobek firmy GERMED, NDR),který obsahu-je biologicky podobnou účinnou látku.

V kravíně se testují zvířata, u kterých byly zjiš-těny příznaky některého typu akutního zánětu vemene.

Po odebrání vzorků se zvířata ošetřují následují-cím způsobem: příslušné čtvrtky vemene se důkladně vydojía potom se zvířata intracystenálně ošetří testovaným pří-pravkem, Jako jednotlivá dávka se aplikuje celý obsah injek-ční stříkačky. Jestliže to klinický stav vemene vyžaduje,opakuje se ošetření denně v intervalu několika dní. Předošetřením a u kontrolních pokusů se za aseptických podmínekodeberou vzorky mléka, u kterých se určí celkový počet mikroorganismů, druh vyskytujících se bakterií a jejich citlivostvůči antibiotikům.

Zvířata se před ošetřením rozdělí na základězávažnosti akutních změn vemene do dvou hlavních skupin(katarální nebo parenchymatosní mastitida) a dále na základězávažnosti příznaků do několika podskupin. Klasifikace seprovádí podle hledisek CSEH (1973), HQRVÁIH (1983) aPYĎRALA (1988), s přizpůsobením na podmínky testu.

Denně se zkoumá jakožto výsledek ošetření změnaklinického stavu. Poslední zkoumání se provádí při kontrol-ním testu 10. až 22. den po posledním ošetření (klinické vy-šetření, mastitest a mikrobiologické vyšetření).

Podle HORVÁTH-a (1982, 1983) se čtvrtky vemenepokládají za vyléčené, když již není možno pozorovat klinic-ké příznaky nebo kvalitativní a kvantitativní změny v mléce, které ukazují na zánět, a když jižMmastitest" sekretu mléčnéžlázy, jakož i mikrobiologické zkoušky vykazují negativní vý-sledek. Léčení se definuje jako zlepšení, jestliže dosud pře-trvává nepatrné zatvrdnutí tkáně a snížení sekrece mléka. Po-zitivní výsledek mastitestu znamená subklinický stav a pozitiv-ní mikrobiologický nález znamená skrytý zánět čtvrtky vemene. V mnoha případech bylo možno pozorovat také dočasné nebo trva-lé vysychání.

Bylo testováno celkem 42 nemocných čtvrtek vemene35 zvířat. Z těchto 32 čtvrtek vemene 28 zvířat bylo katarální-ho charakteru a 10 čtvrtek vemene 7 zvířat bylo parenchymatos-ního charakteru.

Klasifikace testovaných zvířat je uvedena v ta-bulce 7.

Asi 2/3 testovaných zvířat bylo testováno takébakteriologicky. Asi 1/3 čtvrtek vemene s katarální mastiti-dou, které byly testovány před ošetřením také mikrobiologic-ky, vykazovala negativní výsledek. Všechny bakterie izolované při mastitidě mléčnéžlázy různé závažnosti byly představovány grampozitivnímibakteriemi (Streptococcus nebo Staphylococcus). Všechny z 32 čtvrtek vemene 28 zvířat s mastitidou mléčné žlázy různé závažnosti byly vyléčeny (69 %) nebo ales- poň zbaveny příznaků choroby (31 %). K úplnému vyléčení bylo zapotřebí obecně dvou nebo tří ošetření (srov. tabulku 8). U parenchymatosní mastitidy (Mastitis parenchyma-tosa acuta) nebylo ošetření tak úspěšné: z 10 nemocných čtvr-tek vemene 7 zvířat bylo 6 vyléčeno, u 3 bylo prokázáno zlepše-ní stavu, popřípadě se skrytým zánětem nebo subklinicky a v jed-nom případě došlo k vysýchání.

Ze srovnání (srov. Tabulku 8) je možno usuzovat,že ošetření podle vynálezu vede k dokonalejší léčbě a to jakv případě katarální mastitidy, tak i v případě parenchymatosnímastitidy. T__a J3_ujl_kja 7

Klasifikace testovaných zvířat katarální mastitida parenchymatosní mastitida zvíře čtvrtek vemene zvíře čtvrtek vemene přípravek podlepříkladu 12 28 20 4 6 Mamycine 10 12 3 4 celkem 38 32 7 10 ->r-

Tabulka 8 Léčení testovaných zvířat čtvrtky vemene s katarální mastitidou parenchymatosní mastitido' ošetře- vylé- zlepše- ošetře- vyléče- zlepše-no čeno no no no no přípravek podle příkladu 12 20 17 3 6 4 2 100 % 85 % 15 % 100 % 67 % 33 % Mamycine 12 7 5 4* 2 1 100 % 58 % 42 % 100 % 50 % 25 % celkem 32 22 10 10 6 3 x = čtvrtka vemena je vyschlé

Mamycine = benzylpenicilin-K + Streptooycin-sulfát Přípravky podle vynálezu se blíže objasňují pomo-cí následujících příkladů. Tyto příklady však rozsah vynále-zu v žádném směru neomezují. P^ř~í^k_l_a~d 1 Připraví se vodná suspoemulze následujícího složení:

PrimycinpropylenglykolPolawax A 31destilované voda do 0,2 % hmotnostního15 % hmotnostních 1,5 % hmotnostního100 % hmotnostních

Hodnota pH přípravku se upraví na 8 pomocí dihydrátudinatriumhydrogsnfosforečnanu. Příklad Připraví se vodná suspoemulze následujícího slože-

PrimycinpropylenglykolPolawax A 31destilovaná voda 1 % hmotnostní 15 % hmotnostních 2,0 % hmotnostního do 100 % hmotnostních

Hodnota pH přípravu se upraví na 8 pomocí dihydrátu dinatriumhydrogenfosforečnanu. Připraví se vodná suspoemulze následujícího slože-ní :

Primycin 1,5 % hmotnostníhopropylenglykol 25 % hmotnostníchPolawax A 31 2,5 % hmotnostníchdestilovaná voda do 100 % hmotnostních - i? -

Hodnota pH přípravku se upraví na 8 pomocí dihydrátudinatriumhydrogenfosforečnanu. P__ř_í JcJL_aj3 4 Připraví se vodná suspoemulze následujícího slože-ní :

Primycin, mikrokrystalický 5 % hmotnostních propylenglykol 15 % hmotnostních

Polawax A 31 3 % hmotnostní destilovaná voda do 100 % hmotnostních

Hodnota pH přípravku se upraví na 8 pomocí dihydrátudinatriumhydrogenfosforečnanu. Příklad 5 Připraví se pěnový aerosol přípravek podle příkladu 4hnací plyn (freon 12/114 50:50) následujícího složení: 85 ¥ 90 % hmotnostních v Oí 10 p* 15 % hmotnostních Příklad 6 fřipraví se gel následujícího složení: suspoemulze podle příkladu 4Carbopol 934triethanolamin konzervační prostředek (Nipagin-M)destilovaná voda do 50 % hmotnostních 2 % hmotnostní 0,5 % hmotnostníhooť 0,1-/0,2 $ hmotnostního 100 % hmotnostních Příklad 7 -j —-- Připraví se mast následují suspoemulze podle příkladu 4 cetylstearylalkohol glycerol konzervační prostředek (Nipagin-Lí) ího složení: 85 % hmotnostních 10 % hmo-tnostní ch»✓ at 4,8/4,9 % hmotnostního0,1-^0,12 % hmotnostního Příklad 8

Vyrobí se mulová obvazová látka následujícího slože-ní : suspoemulze podle příkladu 4 97,5 % hmotnostního polyvinylpyrrolidon 0,5 % hmotnostního destilovaná voda do 100 % hmotnostních

Tento přípravek se nanáší na sterilní obvazovou lát-ku, která se opatří ochrannou vrstvou. P ř_í k J. a_d 9 Přípravek se nanese na sterilní mulovou obvazovoulátku a poté se látka opatří neprůhledným tenkým a impregno-vaným plátnem s lepivým povrchem. P_ř_ÍJcJL_a_d 10

Vyrobí se vodná suspenze následujícího složení:

Primycin 3 % hmotnostní

Gentamycin 0,2 % hmotnostního propylenglykol 20 % hmotnostních

Polawax A 31 3,5 % hmotnostního destilovaná voda do 100 % hmotnostních

Hodnota pH přípravu se upraví na 8 přidáním dihydrétu dinatriumhydrogenfosforečnanu. P_ř_í_k^l_a_d 11 Připraví se pěnový aerosol následujícího složení:

OAV přípravek podle příkladu 4 80^85 % hmotnostních et*' hnací plyn (propan-butan) 15-f2O % hmotnostních P_ř_íjc_l__a_d 12

Vyrobí se vodná suspenze následujícího složení:

Primycin 4 % hmotnostní Streptomycin-sulfat 2,6 % hmotnostního propylenglykol 16 % hmotnostních Polawax A 31 3,5 % hmotnostního prednisolon 1,0 % hmotnostního destilovaná voda do 100 % hmotnostních

Claims (1)

1. patentové nároky Způsob výroby stabilních vodných suspoemulzíobsahujících Primycin, vhodných pro výrobu antibakte-riálních přípravků, zejména ve formě gelu, masti, pěno-vého aerosolu nebo jiných farmaceutických přípravků prolokální aplikaci, vyznačující se tím, že se 0,2 až 5 %hmotnostních, vztaženo na konečný produkt, Primycinurozpustí nebo suspenduje při teplotě 90 až 95 °C v5 až 25 % hmotnostních propylenglykolu a získaný roztoknebo suspenze se při teplotě 55 až '70 °C smísí s 0,5 až5 % hmotnostními neionogenních povrchově aktivních lá-tek, až 15 % hmotnostními dalších pomocných látek a do