CS268806B2 - Quick diagnostic aid for blood-group determination and method of its preparation - Google Patents

Description

Vynález se týká rychlé diagnostické pomůcky pro zjištění krevní skupiny a způsobu její přípravy.

Zjišťování krevních skupin je jedním z běžných, nikoli však jednoduchých úkonů zdravotnické služby, podléhajících přísným předpisům. Existuje celá řada případů, jako například katastrofální situace nebo války, kdy je nutno provést vysoký počet zjištění krevních skupin bez možnosti použití laboratorního vybavení, sterilních pomůcek, nástrojů a podobně. V některých zemích bylo vyvinuto několik rychlých diagnostických pomůcek, použitelných v takových situacích, jakož i pro rychlé zjištění krevní skupiny na lůžku nemocného. Společný princip těchto diagnostických pomůcek spočívá v tom, že pro zjištění krevní skupiny potřebná séra jsou ve vysušeném stavu uložena na speciální papírové podložce, nasáknuté impregnančními činidly.

Takovými rychlými diagnostickými pomůckami jsou například suché reagencie souprava OBO-D a karta Eldon CDE, nebo Serafol připravený Biotestovými diagnostiky, jakož i lůžkové ABO.

Použití těchto suchých diagnostik je sice rychlé a jednoduché, ale jejich zjevnou nevýhodou je, Že jsou použitelné jen na jedno zjištění krevní skupiny.

Záměrem vynálezu je vyvinutí nové rychlé diagnostické pomůcky pro zjištění krevní skupiny, jejíž použití by bylo jednoduché a spolehlivé a která by byla skladovatelná poměrně dlouhou dobu a způsob její přípravy.

U rychlé diagnostické pomůcky pro zjištění krevní skupiny, sestávající z reagencií aut i-A, anti-B, anti-AB a volitelně z reagencií anti-D, anti-C a anti-E, připevněných na nosiči spočívá podstata vynálezu v tom, že nosičem je hliníková fólie pasivovaná elektrolytem při teplotě 9 °C.

Podstata způsobu přípravy uvedené rychlé diagnostické pomůcky pro zjištění krevní skupiny, podle něhož se reagencie anti-A, anti-B, anti-AB a volitelně reagencie anti-D, anti-C a anti-E nakapávají do prohlubní v nosiči, spočívá v tom, že se reagencie v prohlubních hliníkové fólie fixují vakuovým vysušením ve dvou stupních.

První stupeň vakuového vysušení se provádí při tlaku 13,5 až 41 kPa a při teplotě v rozmezí 15 až 25 °C a druhý stupeň při tlaku v rozmezí 14 až 7 Pa a při teplotě v rózΟβ2ί 30 až 30 °C.

Rychlá diagnostická pomůcka podle vynálezu a způsobu přípravy spočívá v tom, že hliníková fólie odstraňuje jako nosič reagencií jakoukoli impregnaci, speciální povlak nebo izolační vrstvu. Nanesení reagencií a zjištění krevní skupiny jsou usnadněny prohlubněmi provedenými ve fólii. Adheze reagencií na povrchu prohlubní v hliníkové fólii je stabilní. Reagencie jsou rozpustné v kapce čisté vody a rozpouštějí se okamžitě. Reakci na hliníkové fólii je možno snadno sledovat. Reagencie AB umožňuje omezení chyb a zajišťuje spolehlivost zjištění krevní skupiny. Zjištění krevní skupiny hliníkovou fólií a způsobem její přípravy je stejně přesné jako v laboratorních podmínkách. V důsledku vysokého součinitele přestupu tepla hliníkovou fólií je možno obsah vody snížit na minimum vysušením ve vakuu a takto připravená diagnostická pomůcka může být skladována i při teplotě místnosti beze změny jakosti 2 až 5 let.

Jako nosič rychlé fólie diagnostické pomůcky podle vynálezu se použije hliníková fólie o tloušťce 0,25 až 0,5 mm. V této fólii se lisováním provedou prohlubně o průměru 10 až 30 mm a hloubce 0,3 až 0,6 mm. Počet takto provedených prohlubní v hliníkové fólii je závislý na požadovaném počtu reagencií, která mají být na nosič naneseny. Pro zkušební vzorek se provede jedna prohlubeň navíc. Vylisovaná fólie, zastřižená na přiměřenou velikost, pasivovaná elektrolytem při teplotě 90 °C, to jest ponořena do lázně hydroxidu draselného nebo jiného elektrolytu, o teplotě 90 °C, s následným dostatečným opláchnutím teplou a studenou vodou a nakonec alkoholem.

Pro rychlou diagnostickou pomůcku podle vynálezu se použijí reagencie anti-A, anti-B a anti-AB, náležející к hlavním krevním skupinám, případně i reagencie anti-D, anti-C

CS 268 806 B2 a anti-E náležející к systému Rh. Reagencie na hliníkové folii se vysuší dvoustupňovým vakuovým vysoušením· Toto vysoušení se provádí v lyofilizačním zařízení (stroji) nebo ve vakuovém sušicím zařízení. První krok vysoušení se provádí při tlaku v rozmezí 13,5 až 41 kPa, přednostně při tlaku 27 kPa a při teplotě v rozmezí 15 25 °C, přednostně při teplotě 20 °C· Druhý krok vysoušení se provádí při tlaku 7 v rozmezí 14 až 7 Pa a při teplotě v rozmezí 30 až 50 °C· Doba úplné vysušovací periody trvá při tom asi 3 až 5 hodin·

Při použití diagnostické pomůcky se reagencie každá jednotlivě rozpustná kapkou čisté vody a zkušební vzorek krve se nakápne do označené prohlubně v hliníkové fólii· Zjištění krevní skupiny může být přitom provedeno s použitím vzorku krve odebraného z polštářku prstu, nebo pocházejícího z krevní sraženiny nebo z protikoagulačního činidla obsahující krev* Zkušební vzorek se uvede do styku s reagenciemi na hliníkové fólii s použitím vhodné pomůcky, účelně vmícháním polystyrénovými tyčinkami přibalenými к diagnostické soupravě· Hliníková fólie se pak několikrát nakloní, pak se položí na rovnou plochu a po 3 minutách se vyhodnotí.

Vynález bude v dalším textu blíže objasněn s použitím příkladu Jeho realizace·

Příklad přípravy nosné hliníkové fólie.

Při použití reagencií anti-A, anti-B, anti-AB a anti-D se vylisováním do hliníkové fólie o tiouSžce 0,25 až 0,5 mm provede pět prohlubní. Hloubka těchto prohlubní Je 0,3 až 0,6 mm· čtyři prohlubně mají při tom průměr 15 mm, pátá je větší - například o průměru 30 mm· Po vylisování prohlubní a zastřižení hliníkové fólie na přiměřenou velikost se fólie ponoří na dobu 3 minut do roztoku hydroxidu draselného popřípadě jiného elektrolytu o teplotě 90 °C a pak se dostatečně opláchne teplou a studenou vodou a nakonec alkoholem·

Do tří menších prohlubní v připravené a povrchově zpracované hliníkové fólii se пекаре po 0,03 ml reagencií anti-A, anti-B a anti-AB. Čtvrtá menší prohlubeň se ponechá prázdná pro vkápnutí vzorku krve. Do větší prohlubně se nakape 0,03 ml reagencie anti-D a dále 0,05 ml aktivního roztoku papinu· К systému Rh náležející reagencie mohou být případně naneseny na druhou fólii·

Pak se fólie vloží do lyofilizačního zařízení a podrobí se dvoustupňovému vakuovému vysušení· V prvním kroku sušení se použije mírné vakuum v rozmezí 13>5 až 41 Pa a nízká teplota v rozmezí 15 až 25 °C a ve druhém kroku sušení se použije vysoké vakuum v rozmezí 14 až 7 Pa a vyšší teplota v rozmezí 30 až 50 °C· Při použití této metody se substance vysuší při relativně nízké teplotě i bez jejího zmrazení, čímž je možno předejít změně struktury proteinu a doprovodnému snížení aktivity a důsledkům zmrazení·

Takto připravená diagnostická pomůcka se společně s polystyrénovými tyčinkami zabalí do hliníkového fóliového sáčku a vzduchotěsně uzavře.

Claims (3)

1. Rychlá diagnostická pomůcka pro zjištění krevní skupiny, sestávající z reagencií anti-A, anti-B, anti-AB a volitelně z reagencií anti-D, anti-C a anti-E fixovaných na nosiči, vyznačující se tím, že nosičem je hliníková fólie pasivovaná elektrolytem při teplotě 90 °C.

2· Způsob přípravy rychlé diagnostické pomůcky pro zjištění krevní skupiny podle bodu 1, podle něhož se reagencie anti-A, anti-B, anti-AB a volitelně reagencie anti-D, anti-C a anti-E nakapávají do prohlubní v nosiči, vyznačující se tím, že se reagencie v prohlubních hliníkové fólie fixují vakuovým vysušením ve dvou stupních.

3· Způsob podle bodu 2, vyznačující se tím, že se první stupeň vakuového vysoušení provádí při tlaku 13,5 až 41 kPa a při teplotě v rozmezí 15 až 25 °C a druhý stupeň při tlaku 14 až 7 Pa a při teplotě v rozmezí 10 až 50 °C.