CS268806B2

CS268806B2 - Quick diagnostic aid for blood-group determination and method of its preparation

Info

Publication number: CS268806B2
Application number: CS858383A
Authority: CS
Inventors: Jozsef Dr Zsidai; Rozalia Bankuti; Istvan Masek; Gizella Veszely; Jozsef Szokol
Original assignee: Humam Oltoanyagtermelo Es Kuta
Priority date: 1984-11-23
Filing date: 1985-11-20
Publication date: 1990-04-11
Also published as: BE903684A; RU1830143C; DE3541355A1; HUT39516A; ATA339285A; HU192513B; RO92914B; NL8503186A; GB2167856A; FR2573873B1; CS838385A2; YU45749B; GB8528364D0; CH664833A5; RO92914A; AT390845B; GB2167856B; LU86173A1; YU182085A; BG46009A3

Abstract

The invention relates to a quick-diagnostic tool for blood-grouping and a process for the preparation thereof. The diagnostic tool of the invention consists of anti-A, anti-B, anti-AB and optionally anti-D, anti-C and anti-E reagents which are fixed in the hollows formed on a surface-treated aluminum sheet. The quick- diagnostic tool is prepared by dropping the above-mentioned reagents into the hollows of the surface- treated aluminum sheet and fixing onto the sheet by a two-step vacuum drying.

Description

Vynález se týká rychlé diagnostické pomůcky pro zjištění krevní skupiny a způsobu její přípravy.The invention relates to a rapid diagnostic device for detecting a blood group and to a method for its preparation.

Zjišťování krevních skupin je jedním z běžných, nikoli však jednoduchých úkonů zdravotnické služby, podléhajících přísným předpisům. Existuje celá řada případů, jako například katastrofální situace nebo války, kdy je nutno provést vysoký počet zjištění krevních skupin bez možnosti použití laboratorního vybavení, sterilních pomůcek, nástrojů a podobně. V některých zemích bylo vyvinuto několik rychlých diagnostických pomůcek, použitelných v takových situacích, jakož i pro rychlé zjištění krevní skupiny na lůžku nemocného. Společný princip těchto diagnostických pomůcek spočívá v tom, že pro zjištění krevní skupiny potřebná séra jsou ve vysušeném stavu uložena na speciální papírové podložce, nasáknuté impregnančními činidly.Blood group detection is one of the routine, but not simple, acts of health service, subject to strict regulations. There are a number of cases, such as catastrophic situations or wars, where a high number of blood group findings need to be made without the use of laboratory equipment, sterile aids, instruments, and the like. In some countries, several rapid diagnostic aids have been developed for use in such situations, as well as for rapid detection of the blood group in the patient's bed. The common principle of these diagnostic aids is that, in order to detect the blood group, the sera required are stored in a dry state on a special paper pad soaked with impregnating agents.

Takovými rychlými diagnostickými pomůckami jsou například suché reagencie souprava OBO-D a karta Eldon CDE, nebo Serafol připravený Biotestovými diagnostiky, jakož i lůžkové ABO.Such rapid diagnostic aids are, for example, the OBO-D dry reagent kit and the Eldon CDE card, or the Serafol prepared by Biotest Diagnostics, as well as the ABO bedside.

Použití těchto suchých diagnostik je sice rychlé a jednoduché, ale jejich zjevnou nevýhodou je, Že jsou použitelné jen na jedno zjištění krevní skupiny.While these dry diagnostics are quick and easy to use, their obvious disadvantage is that they are applicable to only one blood group finding.

Záměrem vynálezu je vyvinutí nové rychlé diagnostické pomůcky pro zjištění krevní skupiny, jejíž použití by bylo jednoduché a spolehlivé a která by byla skladovatelná poměrně dlouhou dobu a způsob její přípravy.SUMMARY OF THE INVENTION It is an object of the present invention to provide a new rapid diagnostic device for detecting a blood group which is simple and reliable to use and which can be stored for a relatively long time and a method for its preparation.

U rychlé diagnostické pomůcky pro zjištění krevní skupiny, sestávající z reagencií aut i-A, anti-B, anti-AB a volitelně z reagencií anti-D, anti-C a anti-E, připevněných na nosiči spočívá podstata vynálezu v tom, že nosičem je hliníková fólie pasivovaná elektrolytem při teplotě 9 °C.In a rapid blood group diagnostic aid consisting of iA, anti-B, anti-AB reagent reagents, and optionally, carrier-mounted anti-D, anti-C and anti-E reagents, the carrier is electrolyte passivated aluminum foil at 9 ° C.

Podstata způsobu přípravy uvedené rychlé diagnostické pomůcky pro zjištění krevní skupiny, podle něhož se reagencie anti-A, anti-B, anti-AB a volitelně reagencie anti-D, anti-C a anti-E nakapávají do prohlubní v nosiči, spočívá v tom, že se reagencie v prohlubních hliníkové fólie fixují vakuovým vysušením ve dvou stupních.The essence of the method of preparing said rapid blood group diagnostic device, according to which the anti-A, anti-B, anti-AB reagents and optionally the anti-D, anti-C and anti-E reagents are dropped into the wells of the carrier, 2. The method according to claim 1, wherein the reagents in the aluminum foil depressions are fixed in two stages by vacuum drying.

První stupeň vakuového vysušení se provádí při tlaku 13,5 až 41 kPa a při teplotě v rozmezí 15 až 25 °C a druhý stupeň při tlaku v rozmezí 14 až 7 Pa a při teplotě v rózΟβ2ί 30 až 30 °C.The first stage of vacuum drying is carried out at a pressure of 13.5 to 41 kPa and at a temperature in the range of 15 to 25 ° C, and a second stage at a pressure in the range of 14 to 7 Pa and at a temperature of 30-30 ° C.

Rychlá diagnostická pomůcka podle vynálezu a způsobu přípravy spočívá v tom, že hliníková fólie odstraňuje jako nosič reagencií jakoukoli impregnaci, speciální povlak nebo izolační vrstvu. Nanesení reagencií a zjištění krevní skupiny jsou usnadněny prohlubněmi provedenými ve fólii. Adheze reagencií na povrchu prohlubní v hliníkové fólii je stabilní. Reagencie jsou rozpustné v kapce čisté vody a rozpouštějí se okamžitě. Reakci na hliníkové fólii je možno snadno sledovat. Reagencie AB umožňuje omezení chyb a zajišťuje spolehlivost zjištění krevní skupiny. Zjištění krevní skupiny hliníkovou fólií a způsobem její přípravy je stejně přesné jako v laboratorních podmínkách. V důsledku vysokého součinitele přestupu tepla hliníkovou fólií je možno obsah vody snížit na minimum vysušením ve vakuu a takto připravená diagnostická pomůcka může být skladována i při teplotě místnosti beze změny jakosti 2 až 5 let.The rapid diagnostic aid according to the invention and the method of preparation consists in removing the aluminum foil as a reagent carrier from any impregnation, special coating or insulating layer. The deposition of reagents and blood group detection are facilitated by depressions in the foil. The adhesion of the reagents on the surface of the depressions in the aluminum foil is stable. The reagents are soluble in a drop of pure water and dissolve immediately. The reaction on the aluminum foil is easy to follow. The AB reagent allows error reduction and ensures the reliability of blood group detection. Detection of blood group by aluminum foil and its method of preparation is as accurate as in laboratory conditions. Due to the high heat transfer coefficient of the aluminum foil, the water content can be reduced to a minimum by drying under vacuum, and the diagnostic aid thus prepared can be stored at room temperature without changing the quality for 2 to 5 years.

Jako nosič rychlé fólie diagnostické pomůcky podle vynálezu se použije hliníková fólie o tloušťce 0,25 až 0,5 mm. V této fólii se lisováním provedou prohlubně o průměru 10 až 30 mm a hloubce 0,3 až 0,6 mm. Počet takto provedených prohlubní v hliníkové fólii je závislý na požadovaném počtu reagencií, která mají být na nosič naneseny. Pro zkušební vzorek se provede jedna prohlubeň navíc. Vylisovaná fólie, zastřižená na přiměřenou velikost, pasivovaná elektrolytem při teplotě 90 °C, to jest ponořena do lázně hydroxidu draselného nebo jiného elektrolytu, o teplotě 90 °C, s následným dostatečným opláchnutím teplou a studenou vodou a nakonec alkoholem.An aluminum foil having a thickness of 0.25 to 0.5 mm is used as the carrier of the rapid film of the diagnostic device according to the invention. Depressions of 10 to 30 mm in diameter and 0.3 to 0.6 mm in depth are pressed in this film. The number of depressions thus made in the aluminum foil is dependent on the number of reagents required to be deposited on the support. One additional recess shall be made for the test sample. The molded film, cut to an appropriate size, passivated with an electrolyte at 90 ° C, i.e., immersed in a 90 ° C potassium hydroxide or other electrolyte bath, followed by sufficient rinsing with hot and cold water and finally with alcohol.

Pro rychlou diagnostickou pomůcku podle vynálezu se použijí reagencie anti-A, anti-B a anti-AB, náležející к hlavním krevním skupinám, případně i reagencie anti-D, anti-CAnti-A, anti-B and anti-AB reagents belonging to the main blood groups and possibly also anti-D, anti-C reagents are used for the rapid diagnostic aid according to the invention.

CS 268 806 B2 a anti-E náležející к systému Rh. Reagencie na hliníkové folii se vysuší dvoustupňovým vakuovým vysoušením· Toto vysoušení se provádí v lyofilizačním zařízení (stroji) nebo ve vakuovém sušicím zařízení. První krok vysoušení se provádí při tlaku v rozmezí 13,5 až 41 kPa, přednostně při tlaku 27 kPa a při teplotě v rozmezí 15 25 °C, přednostně při teplotě 20 °C· Druhý krok vysoušení se provádí při tlaku 7 v rozmezí 14 až 7 Pa a při teplotě v rozmezí 30 až 50 °C· Doba úplné vysušovací periody trvá při tom asi 3 až 5 hodin·CS 268 806 B2 and anti-E belonging to the Rh system. The aluminum foil reagents are dried by a two-stage vacuum drying process. This drying is carried out in a lyophilizer (machine) or in a vacuum dryer. The first drying step is carried out at a pressure of from 13.5 to 41 kPa, preferably at a pressure of 27 kPa and at a temperature of from 15 to 25 ° C, preferably at a temperature of 20 ° C. 7 Pa and at a temperature between 30 and 50 ° C · The complete drying period lasts about 3 to 5 hours ·

Při použití diagnostické pomůcky se reagencie každá jednotlivě rozpustná kapkou čisté vody a zkušební vzorek krve se nakápne do označené prohlubně v hliníkové fólii· Zjištění krevní skupiny může být přitom provedeno s použitím vzorku krve odebraného z polštářku prstu, nebo pocházejícího z krevní sraženiny nebo z protikoagulačního činidla obsahující krev* Zkušební vzorek se uvede do styku s reagenciemi na hliníkové fólii s použitím vhodné pomůcky, účelně vmícháním polystyrénovými tyčinkami přibalenými к diagnostické soupravě· Hliníková fólie se pak několikrát nakloní, pak se položí na rovnou plochu a po 3 minutách se vyhodnotí.When using a diagnostic aid, the reagents are each individually soluble with a drop of clean water and the test blood sample is dropped into a marked well in an aluminum foil. Blood group detection can be performed using a blood sample taken from a finger pad or containing the blood * The test sample is contacted with the reagents on the aluminum foil using a suitable aid, preferably by mixing the polystyrene rods packaged with the diagnostic kit.

Vynález bude v dalším textu blíže objasněn s použitím příkladu Jeho realizace·The invention will be explained in more detail below using an example of its implementation.

Příklad přípravy nosné hliníkové fólie.Example of aluminum foil support.

Při použití reagencií anti-A, anti-B, anti-AB a anti-D se vylisováním do hliníkové fólie o tiouSžce 0,25 až 0,5 mm provede pět prohlubní. Hloubka těchto prohlubní Je 0,3 až 0,6 mm· čtyři prohlubně mají při tom průměr 15 mm, pátá je větší - například o průměru 30 mm· Po vylisování prohlubní a zastřižení hliníkové fólie na přiměřenou velikost se fólie ponoří na dobu 3 minut do roztoku hydroxidu draselného popřípadě jiného elektrolytu o teplotě 90 °C a pak se dostatečně opláchne teplou a studenou vodou a nakonec alkoholem·When using anti-A, anti-B, anti-AB and anti-D reagents, five depressions are made by extrusion into an aluminum foil 0.25-0.5 mm thick. The depth of these depressions is 0.3 to 0.6 mm · four depressions have a diameter of 15 mm, the fifth is larger - for example 30 mm diameter · After pressing depressions and cutting the aluminum foil to a suitable size, the foil is immersed for 3 minutes in solution of potassium hydroxide or another electrolyte at 90 ° C and then rinsed sufficiently with warm and cold water and finally with alcohol ·

Do tří menších prohlubní v připravené a povrchově zpracované hliníkové fólii se пекаре po 0,03 ml reagencií anti-A, anti-B a anti-AB. Čtvrtá menší prohlubeň se ponechá prázdná pro vkápnutí vzorku krve. Do větší prohlubně se nakape 0,03 ml reagencie anti-D a dále 0,05 ml aktivního roztoku papinu· К systému Rh náležející reagencie mohou být případně naneseny na druhou fólii·0.03 ml of anti-A, anti-B, and anti-AB reagents are baked into three smaller wells in the prepared and coated aluminum foil. The fourth smaller depression is left blank to drip the blood sample. 0.03 ml of anti-D reagent and 0.05 ml of active paprika solution are dripped into a larger well · The reagents of the Rh system may optionally be applied to a second film ·

Pak se fólie vloží do lyofilizačního zařízení a podrobí se dvoustupňovému vakuovému vysušení· V prvním kroku sušení se použije mírné vakuum v rozmezí 13>5 až 41 Pa a nízká teplota v rozmezí 15 až 25 °C a ve druhém kroku sušení se použije vysoké vakuum v rozmezí 14 až 7 Pa a vyšší teplota v rozmezí 30 až 50 °C· Při použití této metody se substance vysuší při relativně nízké teplotě i bez jejího zmrazení, čímž je možno předejít změně struktury proteinu a doprovodnému snížení aktivity a důsledkům zmrazení·The film is then placed in a lyophilizer and subjected to a two-stage vacuum drying. In the first drying step, a slight vacuum is used in the range of 13> 5 to 41 Pa and a low temperature in the range of 15-25 ° C; range 14 to 7 Pa and higher temperature range 30 to 50 ° C · Using this method, the substance is dried at a relatively low temperature even without freezing, thus avoiding a change in the protein structure and a concomitant decrease in the activity and consequences of freezing ·

Takto připravená diagnostická pomůcka se společně s polystyrénovými tyčinkami zabalí do hliníkového fóliového sáčku a vzduchotěsně uzavře.The diagnostic aid thus prepared is packed together with polystyrene rods in an aluminum foil bag and sealed airtight.

Claims

A rapid diagnostic device for detecting a blood group, consisting of anti-A, anti-B, anti-AB reagents and optionally, carrier-fixed anti-D, anti-C and anti-E reagents, characterized in that the carrier is a electrolyte passivated aluminum foil at 90 ° C.

· A method for preparing a rapid blood group diagnostic device according to item 1, wherein the anti-A, anti-B, anti-AB reagents and optionally the anti-D, anti-C and anti-E reagents are dropped into the wells of the carrier, characterized in that the reagents in the aluminum foil recesses are fixed in two stages by vacuum drying.

Process according to Claim 2, characterized in that the first stage of vacuum drying is carried out at a pressure of 13.5 to 41 kPa and at a temperature of 15 to 25 ° C and a second stage at a pressure of 14 to 7 Pa and at a temperature of 10 to 50 ° C.