CS267392B1 - Mouse lymphocytar hybridom vu ifn al 6 - Google Patents
Mouse lymphocytar hybridom vu ifn al 6 Download PDFInfo
- Publication number
- CS267392B1 CS267392B1 CS885266A CS526688A CS267392B1 CS 267392 B1 CS267392 B1 CS 267392B1 CS 885266 A CS885266 A CS 885266A CS 526688 A CS526688 A CS 526688A CS 267392 B1 CS267392 B1 CS 267392B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hybridoma
- ifn
- antibody
- interferon alpha
- cells
- Prior art date
Links
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims abstract description 20
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 8
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 8
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 6
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims description 4
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 claims description 4
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 3
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 claims description 3
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 claims 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims 2
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 claims 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 claims 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 claims 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 claims 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 claims 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 claims 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 claims 1
- 230000003322 aneuploid effect Effects 0.000 claims 1
- 208000036878 aneuploidy Diseases 0.000 claims 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 claims 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 claims 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 claims 1
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 claims 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 claims 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 claims 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims 1
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 claims 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 claims 1
- 210000002729 polyribosome Anatomy 0.000 claims 1
- 101150012509 sub gene Proteins 0.000 claims 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 claims 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 abstract description 5
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 abstract description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 abstract description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
(57) Riešenie sa týká myšieho lymfocytárneho hybridómu produkujúceho protilátku voči l’udskému leukocytárnemu acidolabilnému interferónu alfa, uloženého v zbierke hybridómov Virologického ústavu SAV v Bratislavě pod označením VÚ IFN AL6. Monoklonálna protilátka hybridómu VÚ IFN AL6 je vhodná na stanovenie přítomnosti acidolabilného interferónu alfa na základe inhibície jeho biologickej aktivity v interferón-neutralizačných testoch. Monoklonálna protilátka je vhodná aj na přípravu sér Specifických k myšiemu imunoglobuÍínu podtriedy IgG2a. CS 267392 B1 CS267 392B1 1
Vynález sa týká nového hybridómu, t. j. hybridného jednobunkového organizmu, zostrojcného buňkovou fúziou myšej myclómovcj linie NSO a myšej slczinovej lymfoidnej buňky, prodtikiijúcei protilátku proti 1’udskému acido(ahilnému intvifviómi alia.
Doposial’ sa protilátky voči interferónu vyrábajú tak, že je interíerón opakované injikovaný ako antigén pokusným zvieratám, najčastejšie králikom alebo ovciam. Sérum takto imunizovaných zvierat, odobrané po určitej době pósobenia antigénu, slúži ako zdroj protilátok, používaných predovšetkým pre kvantitatívnu alebo kvalitatívnu analýzu antigénu — molekuly interferónu — vo výskume a v imunodiagnostickej praxi. Tento postup, nazývaný konvenčnou imunizáciou, má niekofko nevýhod. V sére imunizovaných zvierat sa nachádza heterogénna zmes protilátok, ktorých spektrum je v každom jednotlivou) organizme rózne a neopakovatelné. Organizmus spravidla vytvoří okrem protilátok voči žiadanému antigénu i protilátky voči nečistotám antigénového preparátu, ktoré je potřebné zo sér odstraňovat vysycovaním. Výrobně šarže konvenčných sér sa preto dajú ťažko Standardizovat a bývajú v širokom rozmedzí kvality. Pre výrobu každej šarže třeba připravit čistý imunizačný antigén a ďalšie antigény na vysýtenie balastných protilátok proti nečistotám.
Uvedené nedostatky vyššie zmieneného a doposial' používaného postupu odpadnú, ak je k dispozícii hybridóm, produkujúci monoklonálnu protilátku proti 1’udskému acidolabilnému interferónu alfa uložený v zbierke hybridómov Virologického ústavu SAV v Bratislavě, Mlýnská dolina 1, pod označením VÚ IFN AL6.
Uvedený hybridóm bol získaný spósobom známým z odbornej literatúry (Kóhler, G., Milstein, C.: Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity. Nátuře, 256, /1975), 495; Gerhard, W.: Fusion of cells in suspension and outgrowth of hybrids in conditioned medium. In: Monoclonal antibodies. Hybrids: A New Dimension in Biologicai Analyses. R. H. Kennet, T. J. McKearn, Κ. B. Bechtol, eds., New York, Plenům Press, /1980/, 370) klonováním súboru hybridných buniek po fúzii myšej myelómovej linie NSO a buniek, získaných zo sleziny myší kmeňa BALB/c, imunizovaných preparátom 1’udského leukocytárneho acidolabilného interferónu alfa. Výhodou hybridómu je, že produkuje homo-
Claims (1)
- PREDMET VY Myší lyinfocytárny hybridóm VÚ IFN AL6, produkujúci monoklonálnu protilátku podtrie- 2 génnu protilátku, tzv. monoklonálnu protilátku, ktorá je schopná specificky reagovať s příslušným interferónom. Hybridóm VÚ IFN AL6 možno kultivovat’ in vitro v médiách vhodných pre živočišné buňky, alebo in vivo v peritoneálnrj dutině myší kmeňa BALB/c. Z konzerv, uchovaných v kvapalnoin dusíku, možno zahájit’ produkciu protilátky bez ďalej imunizácic antigénom. Příklad Pre účel pomnoženia hybridómových buniek in vivo sa aplikovalo 5 χ 106 buniek do peritomeálnej dutiny myší. Pre lepšie uchytenie aplikovaných buniek bola myš 15 dní před prenosom buniek hybridómu premedikovaná parafínovým olejom (0,5 ml intraperitoneálne). Po 20 dňoch rastu hybridómu v peritoneálnej dutině bola myš zabitá a vyprodukovaná ascitická tekutina odobratá. Celkom sa získalo 7 ml ascitickej tekutiny, ktorá obsahovala 8 mg/ml imunoglobulínu. Ascitická tekutina, obsahujúca produkt hybridómu VÚ IFN AL6 Specificky inhibovala antivírusovú a antiproliferatívnu aktivitu 1’udského acidolabilného interferónu alfa. In vitro rastů hybridómy ako polosuspenzná kultúra. Majú tvar (gufatý) a vefkosť charakteristické pre myelómové buňky, obsahujú fúzované buňkové jadrá, sú aneuploidné. Buňky hybridómu VÚ IFN AL6 majú ultraštruktúrny obraz typických myelómových buniek, kde prevažujúcou organelou sú vofné a na membrány viazané polyribozómy. Základným kultivačným médiom je Dulbeccova modifikácia Eaglovho miniinálneho esenciálneho média (Dulbecco, R. a Freeman, C., Virology 8 /1959/, 396). Toto médium, označované ako DMEM, je pre kultiváciu hybridómu doplněné gentamycínom a inaktívovaným koňským sérotn (10%), Elán Cloně, Bratislava. Hybridóm je kultivovaný pri 37 °C — jeho středná generačná doba je přibližné 24 hod. Produkovaná protilátka je monoklonálny imunoglobulín podtriedy IgG2a. Hybridóm VÚ IFN AL6 móže byť priemyslovo využívaný ako zdroj protilátky proti 1’udskému leukocytárnemu acidolabilnému interferónu alfa pri kvantitatívnom alebo kvalitatívnom vyhodnocovaní přítomnosti acidolabilného interferónu alfa vo vyšetrovanom materiáli alebo ako zdroj protilátky jedinej podtriedy (lgG2a) pre přípravu sér Specifických pre uvedenú podtriedu, NÁLEZU dy IgG2a proti 1’udskému acidolabilnému interferónu alfa.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS885266A CS267392B1 (en) | 1988-07-22 | 1988-07-22 | Mouse lymphocytar hybridom vu ifn al 6 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS885266A CS267392B1 (en) | 1988-07-22 | 1988-07-22 | Mouse lymphocytar hybridom vu ifn al 6 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS526688A1 CS526688A1 (en) | 1989-06-13 |
| CS267392B1 true CS267392B1 (en) | 1990-02-12 |
Family
ID=5397229
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS885266A CS267392B1 (en) | 1988-07-22 | 1988-07-22 | Mouse lymphocytar hybridom vu ifn al 6 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS267392B1 (cs) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7087726B2 (en) | 2001-02-22 | 2006-08-08 | Genentech, Inc. | Anti-interferon-α antibodies |
-
1988
- 1988-07-22 CS CS885266A patent/CS267392B1/cs unknown
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7087726B2 (en) | 2001-02-22 | 2006-08-08 | Genentech, Inc. | Anti-interferon-α antibodies |
| US7582445B2 (en) | 2001-02-22 | 2009-09-01 | Genentech, Inc. | Anti-interferon-α antibodies |
| US7910707B2 (en) | 2001-02-22 | 2011-03-22 | Genentech, Inc. | Anti-interferon-α antibodies |
| US8349331B2 (en) | 2001-02-22 | 2013-01-08 | Genentech, Inc. | Anti-interferon-α antibodies |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS526688A1 (en) | 1989-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bossie et al. | IFN-γ enhances secretion of IgG2a from IgG2a-committed LPS-stimulated murine B cells: implications for the role of IFN-γ in class switching | |
| US4472500A (en) | Rat myeloma cell lines | |
| US4468346A (en) | Monoclonal antibodies to porcine immunoglobulins | |
| US4594325A (en) | High fusion frequency fusible lymphoblastoid cell line | |
| US7070960B2 (en) | Method of increasing product expression through solute stress | |
| JPH03236794A (ja) | ヒトモノクローン抗体の製造法 | |
| IE50418B1 (en) | Cell lines,process for preparing them and process for producing antibodies | |
| DE3687884T2 (de) | Monoklonale antikoerper und verfahren zum nachweis von pilzpathogenen. | |
| CS267392B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridom vu ifn al 6 | |
| EP0131878A2 (en) | Process for producing human monoclonal antibodies | |
| CS267393B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn b13 | |
| CS267391B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn g8 | |
| CS267394B1 (cs) | Myší lymfocytámy hybridóm VÚIFN BBA6 | |
| EP0119859A2 (en) | Monoclonal antibodies, processes for their preparation and methods for their use | |
| CA2085089A1 (en) | Immunological detection method | |
| CS270543B1 (cs) | Myši lymfocytáeny hybridóm VU 2-L/5 | |
| CS270544B1 (cs) | Myši lymfocytárny hybridóm VU IIH3 | |
| CS270542B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu cf2 | |
| SU1640158A1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS L, используемый дл получени моноклональных антител к ДНК-зависимой РНК-полимеразе бактериофага Т7. | |
| CS269050B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridome vu vih7 | |
| SU1652339A1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS L - продуцент моноклональных антител к мембранному антигену МYсорLаSма aRGININI | |
| CS272889B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 | |
| CS276567B6 (en) | Murine hybridoma ifna2-n7 producing a monoclonal antibody | |
| SU1685997A1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS.мUSсULUS L. - продуцент моноклональных антител к тиреотропному гормону человека | |
| Scott et al. | Monoclonal antibodies to human red blood cell blood group antigens |