CS235167B1 - Substituované 4,9-dihydro-3-methyi-4-oxo-lH-pyrazglo( 3,4-b Jchinoliny a způsob jejich výroby - Google Patents

Abstract

Vynález se týká substituovaných 4,9-dihydro-3-methyl-4-oxo-lH-pyrazolo (3,4-b J chinolinů obecného vzorce I CHj (I) kde R* 1 i R2 značí atom vodíku, nebo R1 i R2 značí methylskupinu, nebo R1 je methylskupina a R2 je ethoxykarbonylmethylskupina nebo karboxymethylskupina, a způsobu jejich přípravy. Tyto nové, dosud nepopsané látky vykazují protivirovou aktivitu proti viru chřipky A -Hongkong a proti viru encefalomyokarditidy u myší.

Description

Vynález se týká substituovaných 4,9-dihydro-3-methyl-4-oxo-lH-pyrazolo (3,4-b J chinolinů obecného vzorce I

CHj (I) kde R^{* 1} i R² značí atom vodíku, nebo R¹ i R² značí methylskupinu, nebo R¹ je methylskupina a R² je ethoxykarbonylmethylskupina nebo karboxymethylskupina, a způsobu jejich přípravy.

Tyto nové, dosud nepopsané látky vykazují protivirovou aktivitu proti viru chřipky A -Hongkong a proti viru encefalomyokarditidy u myší.

Vynález se týká substituovaných 4,9-dihydro-3-methyl-4-oxo-lH-pyrazolo[ 3,4 bjchinolinů obecného vzorce I

kde R¹ i R² značí atom vodíku, nebo R¹ i R² značí methylskupinu nebo- R¹ je methylskupina a R² je ethoxykarbonylmethylskupina nebo 'karboxymethylskupina.

Tyto nové, dosud nepopsané látky vykazují protivirovou aktivitu proti viru A2-Hongkong a proti viru encefalomyokarditidy (EMC) u myší.

Sloučeninu obecného vzorce I, kde R¹ i R² je atom vodíku, lze podle vynálezu připravit cyklizací o sobě známé kyseliny 3-anilino-5-methyl-4-pyrazolkarboxylové (Crenshaw R. R., Luke M. G., Siminoff P.: J. Med. Chem. 19, 262 (1976) kyselinou polyfosiorečnou při teplotě 80 °C až 150 °C, výhodně při teplotě 90 °C.

Sloučeninu obecného vzorce I, kde R¹ i R² je ,methylskupima, lze připravit podle vynálezu alkyllací sodné soli o sobě známého

4,9-dihydro-l,3-dimethyl-4-oxo-lH-pyrazolo[ 3,4-b [ chinolinů [Stein R. G., Biel J. H.: J. Med. Chem. 13, 153 (1973)J, methyljodideim v dimethylformamidu při teplotě 0 °C až 30° Celsia, výhodně při teplotě 20 °C.

Sloučeninu obecného vzorce I, kde R¹ je methylskupina a R² je karboxymethylskupina, lze připravit alkalickým zmýdelněním sloučeniny obecného vzorce I, kde R¹ je methylskupina a R² je ethoxykarbonylmethylskupina. Zmýdelnění se provádí vodněmethanolickým roztokem hydroxidu sodného· při teplotě 0 °C až 30 ^CC, výhodně při teplotě 20 °C.

Sloučeninu obecného vzorce I, kde R¹ je methylskupina· a R² je ethoxýkaribonylmethylskupina·, lze připravit podle vynálezu alkylací 4,9-dihydro-l,3-dimethyl-4-oxo-lH-pyrazolo [ 3,4-b ] chinolinů bromoctanem ethylnatým v acetonu za přítomnosti uhličitanu draselného a jodidu draselného za varu pod zpětným chladičem.

Uvedené sloučeniny podle vynálezu patří mezi skupinu látek s protivirovými účinky. U uvedených sloučenin byly tyto účinky zjišťovány a hodnoceny proti viru chřipky A2-Hongkong a proti viru encefalomyokarditidy (EMC) u myší.

Hodnocení účinnosti proti viru chřipky A2-Hongkong u myší

Byly užity samice bílých myší SPF (Velaz) o hmotnosti 10 až 11 g. Virus byl aplikován myším v lehké etherové narkóze intranasálně. Množství LDso viru bylo stanoveno v samostatném pokuse a bylo vypočítáno podle REEDA a MUENCHA (Reed L. J., Muench H.: Amer. J. Hyg. 27, 493 (1938)). Pro testování protivirové účinnosti byly voleny tři koncentrace viru, lišící se vždy ο· 1 řád. Pro každou konceneraci bylo užito 7 myší. Neléčené myši hynuly na pneumonii podle použité koncentrace viru 3 až 10 dní po infekci. Zkoušené látky byly rozpuštěny v destilované vodě, nerozpustné byly suspendovány pomocí monoesteru kyseliny olejové a tripolyethylenglykolanhydrobisetherem (Tween 80). Zvířatům byly látky aplikovány per os sondou, nebo byly podávány subkutánně do řasy kůže na hřbetu vždy v objemu 0,2 ml. Myši byly léčeny 2x denně po dobu 5 dní (1 den před a 4 dny po infekci). Denní dávky byly 2 x 150 mg/kg. Účinnost byla posuzována podle prodloužení průměrné doby přežití v porovnání s ineléčenou kontrolou.

Po perorálním podání byly účinné sloučeniny obecného vzorce I, kde R¹ je methylskupina a R² je karboxymethylskupina (prodlužuje dobu přežití myší proti '5 LDso viru o 42 % a proti 50 LDso viru o 20 '%) a kde R¹ je methylskupina a R² je ethoxykarbonylmethýlskupina (.prodlužuje dobui přežití myší proti 50· LD50 Viru o 36 °/o).

Hodnoty účinnosti látek obecného vzorce I proti viru chřipky· A2-Hongkong u myší po· subkutánním podání jsou shrnuty v tabulce I a jsou uvedeny v prodloužení průměrné doby přežití v %.

TABULKA I

R¹ R² 0,5 LDso 5 LDso 50 LDso

Η H 72 37 0

CH3 CH2COOC2H5 30 54 7

CH3 CH2COOH — 16 11

CH3 CH3 — 32 48

Hodnocení účinnosti proti viru EMC u myší

Byly užity samice bílých myší SPF (Velaz) o hmotnosti 10 až 11 g. Virus byl myším aplikován subkutánně v objemu 0,2 ml do záhybu kůže zad. Neléčené myši hynuly na koncentraci viru 3 až 7 dní po infekci. Množství viru bylo stanoveno způsobem uvedeným u hodnocení účinnosti proti viru chřipky. Suibkutánní léčba, byla prováděna čtyřmi dávkami po 100 mg/kg vždy 28, 22, hodiny před a 2 hodiny po infekci. Perorální léčba byla provedena 24 hodin před Infekcí jednorázovou dávkou 400 mg/kg. Vyhodnocení účinnosti bylo prováděno stejně jako při hodnocení účinnosti látek proti viru chřipky.

Hodnoty účinnosti látek obecného vzorce I proti viru EMC u myší po subkutámním podání jsou shrnuty v tabulce II a jsou uvedeny v prodloužení průměrné doby přežití v procentech.

TABULKA II

R1	R2	5 LDso	50* LDso
H	H	96	29
CH3	CH3	44	70
CH3	CtLCOOC.iU	52	100
CH3	CHžCOOH	68	164

Jak plyne z uvedených údajů, jsou sloučeniny obecného vzorce I účinné proti viru A2-Hongkong a proti viru EMC. Způsob přípravy sloučenin je jednoduchý a byl proveden způsobem podle vynálezu. Bližší podrobnosti vyplývají z následujících příkladů provedení. Příklady provedení uvedený vynález pouze ilustrují, nikoliv omezují.

Příklad 1

4.9- dihydro-3-methyl-4-oxo-lH-pyrazo'lo(3,4-b] chinolin

Směs 10 g kyseliny 3-anilino-5-metIiyl-4-pyrazolkarboxylové (50 mmolů) a 75 g kyseliny polyfosforcčné o obsahu 85 % kysličníku fosforečného, byla míchána 4 hodiny při teplotě 90 °C. Po přidání 350 ml vody byla reakční směs ochlazena na teplotu 5 °C a při této teplotě míchána 1 hodinu. Vyloučená látka* byla odsáta a promyta vodou. Překrystalování z ethanolu bylo získáno 8,8 g látky* (88 %) o t. t. 333 °C až 336 °C.

Příklad 2

4.9- dihydro-l,3,9-trimeťhyl-4-oxo-lH-pyrazolo [ 3,4-b ] chinolin

K roztoku 2,13 g 4,9-dihydro-l,3-dimethyl-4-oxo-lH-pyrazolo [ 3,4-b ] chinolinu (10 mmolů) ve 25 ml dlmethylformamidu bylo přidáno 0,36 g 80% hydridu sodného (12 mmolů) a směs byla míchána 1 hodinu pod dusíkem při teplotě 20 °C. Potom bylo přikapáno 1,69 g methyljodidu (12 mmolů) a směs byla míchána 5 hodin při teplotě 20° Celsia. Po přidání dalších 1,13 g methyljodidu (8 mmolů) byla směs míchána dailší 2 hodiny. Po* přidání 50 ml vody a po ochlazení byla vyloučená látka odsáta a promyta vodou. Překrystalováním z methanolu bylo získáno 1,77 g látky (77,9 %) o t. t.

223,7 °C až 224,8 ³€.

Příklad 3

4,9-dihydro-9-e'thoxykarbonylmethyl-l,3-dimethy 1-4-oxo-lH-pyrazolo [ 3,4-b j chinolin*

K suspenzi 2,13 g 4,9-dihydro-l,3-dimet*hyl-4-oxo-lH-pyrazolo[ (3,4-b]chinolinu (10 mmolů) v 50 ml suchého acetonu bylo přidáno. 1,37 g bezvodého uhličitanu draselného, 0,33 g jodidu draselného a 1,67 g bromoctanu ethylnatého (10mmolů) a směs byla vařena pod zpětným chladičem 6 hodin za míchání. Po přidání 0,84 g bromoctanu ethylnatého (5 mmolů) a 0,69 g uhličitanu draselného byla směs vařena pod zpětným chladičem další 4 hodiny. Chladná reakční směs byla vlita do 200 ml vody, nerozpustný podíl byl odsát a promyt vodou. Krystalizací z acetonu bylo získáno 1,35 g látky (45,1 %) o t. t. 213,2 °C až 215,0 °C. Příklad 4

4,9-dihydro-9-karboxymethyl-l,3-dimethyl-4-oxo-lH-pyrazolo [ 3,4-b ] chinolin

Směs 1,2 g 4,9-dihydro-9-ethoxykarbonylmetliyl-4-oxo-l,3-dimethyl-lH-pyrazolo[3,4-b]chinolinu (4 mmoly), 24 ml methanolu a 16 ml 1,5 M roztoku hydroxidu sodného byla míchána 1 hodinu při teplotě 20 ^CC. Potom byl vzniklý roztok prolit sloupcem silně kyselého katexu převedeného do kyselého cyklu a promytého 50% vodným methylalkoholem (použito 40 g Zerolitu 225 SRC 10). Sloupec byl promýván 50'% vodným methanolem, roztok prošlý sloupcem byl odpařen k suchu a odparek byl překrystalován z methanolu. Bylo získáno* 0,97 gramu látky (89,4 %) o t. t. 218,7 až 220,6° Celsia.

Claims (5)

PŘEDMĚT

1. Substituované 4,9-dihydro-3-imethyl-4-oxo-lH-pyrazolo[3,4-b]chinoliny obecného vzorce I kde R¹ i R² značí atom vodíku, nebo R¹ i R² značí methylskupinu, nebo R¹ je methylskupina a R² je ethoxykarbonylmethylskupina nebo karboxymethylskupina.

2. Způsob přípravy sloučeniny podle bodu 1 vzorce I, kde R¹ i R² je atom vodíku, vyznačující se tím, že se kyselina 3-anilino-5-methyl-4-pyrazolkarboxylová zahřívá s kyselinou polyfosforečnoiu při teplotě 80 “C až 150 °C, výhodně při teplotě 90 °C.

3. Způsob přípravy sloučeniny podle bodu 1 vzorce I, kde R¹ i R² je methylskupina, vynalezu vyznačující se tím, že se sodná sůl 4,9-dihydro-l,3-dimethyl-4-oxo-lH-pyrazolo(3,4-b jchinolimu methylu je methyljodidem v dimethylf ormamidu při teplotě 0 °C až 30° Celsia, s výhodou při teplotě 20 °C.

4. Způsob přípravy sloučeniny podle bodu 1 vzorce I, kde R¹ je methylskupina a R² je ethoixykarbonylmethylskupina, vyznačující se tím, že se 4,9-dihydro-l,3-dimethyl-4-oxo-lH-pyrazolo[3,4-b] chinolin alkyluje bromoctanem ethylnatým v acetonu za přítomnosti bezvodého uhličitanu draselného a jodidu draselného· za varu pod zpětným chladičem.

'5. Způsob přípravy sloučeniny podle bodu 1 vzorce I, kde R¹ je methylskupina a R² je karboxymethylskupina, vyznačující se tím, že se 4,9-dihydro-9-ethoxykarbonylmet'hyl-l,3-dimethyl-4-oxo-lH-pyrazolo[3,4-b]chinolin zmýdelní ve vodně-methanolovém roztoku hydroxidu sodného při teplotě 0 °C až 30 ^rC, výhodně při teplotě 20 ^C'C, a vzniklá sodná sůl se převede na' volnou kyselinu pomocí silně kyselého katexu v kyselém cyklu.

Severografia, n. p., závod 7, Most

Cena 2,40 Kčs