CS229894B1 - Analog vasopresinu a způsob jeho výroby - Google Patents

Abstract

Vynález se týká analogu vasopresinu chemického vzorce I i-------------------------------------- « Cys-D-Phe(Et)-Phe-Gln-Aan-Cys-Pro-Lya- -Gly-NH, 2 (I) kde věechny chirální aminokyseliny máji konfiguraci L s výjimkou p-etylfenylalaninu /Phe(Et)/, který má konfiguraci D. Tento analog se vyznačuje tím, že má inhibičnl účinek vůči presorické aktivitě vasopresinu. Podstata způsobu výroby nového analogu vasopresinu spočívá v tom, že se z lineárního peptidu viorce II R2 R3 R4 r'-éys-D-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-Lya-Gly-NHg (Π) odstraní chránící skupiny a vzniklá disulfhydrylová látka se oxiduje za vzniku disulfldové vazby.

Description

Předmětem vynálezu je analog vasopresinu s inhlblčním účinkem a způsob jeho výroby.

Analogy neurohypofysérních hormonů, která jsou schopny inhlbovat vlastní aktivity přírodních hormonů, mohou nalézt uplatnění v lékařské praxi.

Již dříve bylo zji Stěno (AO 226 923), že zavedení hydrofobní aminokyseliny konfigurace D do polohy 2 analogů oxytocinu vede k získání inhibitorů oxytocinu. Dosud byla ověřena možnost zavedení alkylovaného tyrosinu konfigurace D do polohy 2 molekuly vasoprealnu, které je modifikované v polohách 1 a 4 (Manning M., Olma A., Kile W. A., Kolodzlejczyk A. 11., Seto J., Sawyer W. H.: J. Med. Chem. 25. 45 /1982/). Nyní bylo zjiStěno, že i pouhá substituce molekuly lysin-vesopresinu D-p-etyl-fenylalaninem v poloze 2 vede k získání analogu s inhlblčním působením na aktivitu vesopreslnu při testu na kryse in vivo pAg = 7,05; pAg je záporný dekadický logaritmus koncentrace analogu vzorce I, vedoucí ke snížení biologického účinku vasopresinu /krevní tlak u despinalizované krysy) na 50 % původní odpovědi.

(I) kde všechny chirální aminokyseliny mají konfiguraci L s výjimkou p-etylfeAyleleninu (Phe(Bt)/, který mé konfiguraci D.

Podstatou způsobu výroby nového analogu vasopresinu vzorce I podle vynálezu je, že se z lineárního peptldu vzorce II

(II) i 2 A odstraní chránící skupiny R , R, R^J a R* a vzniklé sulfhydrylová látka ee oxiduje za vzniku disulfidová vazby.

Způsob výroby se dále objasňuje v příkladu provedení.

Příklad

Látka vzorce II N-henzyloxykarbonyl-S-benzylcysteinyl-D-p-etylfenylelanin-řenylalanyl-glutaminyl-esparaginyl-S-benzyleysteinyl-prolyl-N⁶ -p^toluensulfonyllysyl-glycinamid (100 mg), připravená postupnou výstavbou v roztoku, byla redukována sodíkem v kapalném amoniaku (40 ml) do vzniku modrého zabarvení stálého 60 sekund. Poté byla barva odstraněna přidáním kyseliny octové a roztok byl lyořilizovén.

Odparek byl rozpuštěn v 0,1 M-HC1 (10 ml), zředěn vodou na objem 200 ml, pH bylo upraveno na hodnotu 7 a po přidání roztoku K₃Fe(CN)g do trvale žlutého zabarvení byle teto hodnota pH udržována za míchání 1 h. Roztok byl poté nanesen na kolonu karboxylátového katexu, sloupec byl promyt 0,05% kyselinou octovou a produkt byl eluován 50% kyselinou octovou.

Po lyoflllzaci byl produkt rozpuštěn ve vodě (10 ml) s nanesen na kolonu slllkagelu modifikoveného oktadecylovýml řetěze! (rozměry kolony 50 x 0,9 cm). Sluce byla provedena směsí 40% metanolu a 60% kyseliny trifluoroctová (0,1% vpdná kyselina). Příslušné frakce byly lyofilizovény. Sistota produktu nyle ověřena chrometograflí na tenké vrstvě (4 systémy), kapalinovou chromatograflí a papírovou elektroforézou (2 pufry o různém pH).

Aminokyselinové analýza: Lys 1,07, Asp 1,03, Gin 0,92, Pro 0,94, Gly 1,04, Cys 1,84, Phe 1,06, Phe(Et) 0,92.

Claims (2)

1. PfiEDMÉT VYNÁLEZU

   1. Analog vasopresinu vzorce I

   Cys-D-Phe(Et)-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-Lys-Gly-NH^ kde všechny chirální aminokyseliny mají konfiguraci L s výjimkou p-etylfenylalaninu /Phe(Et)/, který má konfiguraci D.
2. 2. Způsob výroby nováho analogu vasopresinu vzorce I podle bodu 1, vyznačený tím, že se z lineárního peptidu vzorce II

   H² R³ R⁴ i I I I

   R'-Cya-D-Phe(Et)-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-Lys-Gly-NHg (II)

   1 2 A odstraní chránící skupiny R , R , Re Re vzniklé disulfhydrylové látka se oxiduje za vzniku disulfidová vazby.