CS214432B1 - Sposob přípravy celobiozy - Google Patents

Abstract

Vynález sa týká spSsobu přípravy celobiózy z vysladených repných rezkov enzymatickou hydrolýzou. Podstata vynálezu spočívá v tom, že repné rezky po uvolnění L-arabinozy, pektínu, ligninu sa hydrolyzujú enzymaticky za katalýzy celulolytiokým enzýraovým komplexom z huby Trichoderma viričLe po dobu 6 až 24 hodin pri 40 až 60 °C, pričom sa z reakčnej zme3i D-glukoza odstráni skvasením pivovarskými kvasinkami a celobióza sa po deionizáoii na ionoraeničoch krystalizuje z etylalkoholu.

Description

214 432 1

Vynález sa týká spásobu přípravy celobiozy z vysladených repných rezkov enzymatic-kou hydrolýzou. V rámci štúdia komplexného využitia repných rezkov ea vyrieéil sposob přípravy ce-lobiozy, ktorá je na domácom ako i na zahraničnom trhu velmi hledaná, využijúc to, že povhodnej úpravě sú repné rezky ideálnym subatrátom pre enzymatická hydrolýzu za použitiasurového enzýmu Trichoderma viride. V literatúre je popásaných nlekolko postupov přípravy celobiozy chemickou cestousynteticky alebo acetolýzou celulózy, kde ako medziprodukt vzniká oktaacetát celobiozy,ktorý sa podrobí deacetyláoii. K, Hess, H, Priese; Annalen, 456, 49 /1927/, P. Klein; Z. Agnew. Ohem. 25, 1409, /1922/; A.P.N. Prauchimont; Ber. 12,1941,/1897/, sa zaoberalireakčnými podmienkami přípravy oktaacetátu celobiozy, kde skúmali rožne poměry anhydridukyseliny octovej sírovej k celulóze, reakčnej teploty ako aj doby reakcie. Z. H. Skraup;Ber. 32, 2413, /1899/, G. Zemplen; Ber. 59, 1258, /1926/, C.C, Spencer; Cellulosechemie,10, 6l, /1929/, sledovali izoláciu vzniklého medziproduktu, jeho deacetyláciu použitímrázných metanolátov kovov, ako aj kryštalizáciu celobiozy z reakčnej zmesi pomocou ráz-ných rozpúšťadiel. B. Helferich, H. Bredereck; Ber. 64, 2411, /1931/, připravili v ma-lých množstvách oktaacetát celobiozy syntézou 2,3,4,6, tetra-o-acetyl-ei-B-glukopyrano-zylbromidu s metyl 2,3,6 tri-o-acetyl-/3-D-glukopyranozidom. V, E. Gilbert, P. Smith, M. Stacey; J. Chem. Soc. 622, /1946/ uskutočnili syntézu 2,3,4,6-tetra-o-acetyl-ot-D--glukopyranozylbromidu a sodná sol* 1,2,3,6-tetra-o-acetyl-/J-D-glukopyranózy v 30 % vý- v f tažku oktaacetátu celobiozy. Příprava celobiozy acetolýzou z celulózy ako aj syntézou 2,3,4,6 tetra-o-acetyl-_o<-D-glukopyranozylbromidu s metyl 2,3,6 tri-o-acetyl-β-D-glukopyranozidom, resp.sodnou soťou 1,2,3,6 tetra-o-acetyl-/í-D-glukopyranózou je obtiažna preto, že sa připra-vuje cez medziprodukt oktaacetát celobiozy co si vyžaduje viao stupňová syntézu.

Navrhovaný sposob přípravy celobiozy pomocou enzýmu Trichoderma viride je v porov-naní s uvedenými metodami přípravy podstatné jednoduchší.

Podstata vynálezu spočívá v tom, že repné rezky po uvolnění L-arabinózy, pektínu,ligninu sa hydrolyzujú enzymaticky za katalýzy celulolytickým enzýmovým komplexom z hubyTrichoderma viride po dobu 6 až 24 hodin pri 40 až 60 °C a z reakčnej zmesi kde vznikávedla celobiozy D-glukoza ako vedrajší produkt, ktorý sa odstráni skvasením pivovarskými,kvasinkami, celobióza sa po deionizácii na ionomeničoch krystalizuje z etylalkoholu. Výhodou navrhovaného spásobu přípravy celobiozy je»umožňuje použit netradičná odpadnú surovinu repné rezky, ktoré vznikajú pri výrobě cukru; 0 v poskytuje metodu přípravy, ktorá nahrádza viacstupnovú syntézu; poskytuje metodu, ktorá nahrádza chemický postup přípravy biochemickým postupom. Příklad Připravila sa 2%-né suspenzia substrátu v enzýmovom roztoku a přidalo sa 0,02 % % azidu sodného a kultivačné médium sa upravilo na pH 4,5. Inkubáoia prebiehala za miešania

Claims (1)

1. 2 214 432 6 hodin pri 50 °C. Centrifugáciou pri 5000 otáčok/min. po dobu 10 minút sa odstránilsupernatant od substrátu a supernatant sa inaktivoval pri 0,12 MPa 20 minút. Z inakti-vovaněho roztoku sa odstránila D-glukóza přidáním pivovarských kvasiniak /3 % suspenzia/inkubáciou 24 hodin pri laboratorně;) teplote. Centrifugáciou pri 5000 otáčok/min. po do-bu 10 minút sa roztok oddělil od kvasiniek a prelial oez ionomeniče katex Wofatit KPS100-200 mesh v H+ formě a aaex SBW 100-200 mesh v OH” formě. Roztok sa odfarbil aktívnymuhlím a zahustil na sirup. Kryštalizácia sa uskutočnila z etanolu v pomere 1 s 3. Vytazokcelobiozy o t.t. 230-238 °C, ρθ» + 35° /0 5 % HgO/ činil 41 %. Vynález má rozsiahle použitie pri štúdiu v biochemických procesoch živej hmoty a vpraktickom živote, napr. v kozmetike, medicíně a potravinárskom priemysle. P R E D ií E T VYNÁLEZU Sposob přípravy celobiozy je vyznačený tým, že repné rezky po uvolnění L-arabinozy,pektínu a ligninu sa hydrolyzujú enzymaticky za katalýzy surovým celulolytickým enzýraomz huby Trichoderma viride pri teplote 40 až 60 °C po dobu 6 až 24 hodin za uvolnenia ce-lobiózy a D-glukózy, pričom D-glukóza sa odstráni skvasením pivovarskými kvasinkami a podeionizácii na ionomeničoch sa kryštalizáciou z etanolu získá chromatograficky čistá ce-lobióza.