CS208735B2 - Method of making the pure heparine - Google Patents

Method of making the pure heparine Download PDF

Info

Publication number
CS208735B2
CS208735B2 CS777263A CS726377A CS208735B2 CS 208735 B2 CS208735 B2 CS 208735B2 CS 777263 A CS777263 A CS 777263A CS 726377 A CS726377 A CS 726377A CS 208735 B2 CS208735 B2 CS 208735B2
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
heparin
solution
pharmacopoeia
water
units
Prior art date
Application number
CS777263A
Other languages
English (en)
Inventor
Hans-Joerg Vidic
Original Assignee
Schering Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Schering Ag filed Critical Schering Ag
Publication of CS208735B2 publication Critical patent/CS208735B2/cs

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C08ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08BPOLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0075Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)

Description

Vynález se týká způsobu výroby heparinu ze solného roztoku, který vzniká solením zpracovávaných zvířecích střev.
Heparin již dlouho slouží v meddcině jako přírodní antikoagulační prostředek, který je jako dříve nepostradatelný i v moddirní medicíně.a je stále ve velkém rozsahu používán.
V posledních letech byla poznána řada způsobů, které všechny měly za cíl izolovat účinnou látku hepiarin šetrným způsobem ze zvířecích tkání heparin obdsíOhijících, jako z plic, jater a v novější době především ze střevního slizu vepřů, hovězího dobytka a ovcí (britský patent 754· 885, DE patentový spis 1 228 241 , US patent 3 058 884, DE patentový spis 1 253 868). Tyto suroviny jsou nevýhodné tím, že mají omezenou schopnost skladování, jelikož se snadno kazí. Skladovat,elnost se sice · může prodloužžt zmrazováním, to však vedle technických nákladů vede i ke značnému vzrůstu výdajů. Při zpracování jsou jak provozní zaměětnanni, tak také okolní obyvatelstao nezřídka postaveni před nepříeemné problémy způsobené zápachem.
V německém patentovém spise 1 253 868 se popisuje získávání heparinu několika . shrnutými obvyklými · způsoby. Podle toho se zvířecí tkán v počátečním stupni uvede do · styku s horkým vodným roztokem soli a heparin se vyluhuje z buněk. Heparinový podíl v tomto prostředí je zvlLáSb medý.
Nyní bylo nalezeno, že solný roztok vznikající na jatkách a při čištění střev od slizu obsahuje heparin. Tento solný roztok vzniká, když se zvířecí střeva zbavená střevního slizu prosypávaaí za účelem konzervace a odvodnění pevnou kuchyňskou solí. Je proto s přihlédnutím k DE patenoovému spisu 1 253 868 možno vyloženě překvapivě konstatovat, že
2QQ135 solný roztok vznikající při pouhém nasolení zvířecích střev obsahuje větší množství heparinu. Nemohlo se také očekávat, že tento heparin je přítomen téměř zcela bez chemicky příbuzných vedlejších produktů, takže solný roztok, který byl dosud znám jako otížný odpadní produkt, představuje surovinový zdroj heparinu.
Vzhledem ke zcela nepatrnému množství nečistot je možno zpracování na surový heparin provádět zvlášť šetrně a tím odpadají nákladné izolační methody, známé u dosavadního stavu techniky (viz US patent 3 451 996 a britský patent 1 221 784). Dosáhne se nakonec kvality heparinu, které se zdaleka nedosahuje u heparinových přípravků získatelných na trhu. Surový heparin izolovaný známými pracovními postupy ze solných roztoků po solení střev podle vynálezu se získává již v takové čistotě, že následující čištění vede к heparinu s hodně přes 200 jednotek podle zkoušky předepsané US lékopisem/mg.
Heparinové přípravky žískatelné dosud v obchodě mají zpravidla kvalitu heparinu 150 jednotk/mg podle zkoušky předepsané US lékopisem,v několika málo případech i 155 jednotek/mg. Přitom se jako jednotka/mg podle US lékopisu rozumí specifická aktivita, která vyplývá ze zkoušky podle US lékopisu, kterou se měří potlačení tvorby klčků konzervované ovčí plazmy. 1 jednotka podle US lékopisu odpovídá 1,1 mezinárodní jednotky.
Poněvadž hodnoty aktivity heparinových přípravků nacházejících se v obchodě jsou přes početná výrobní zlepšení stále neuspokojující, předpisuje například US lékopis, že heparinové přípravky (ze střevního slizu) musí obsahovat nejméně 140 jednotek podle US lékopisu. Pouze v laboratoři izoloval L. W. Kananagh a L. B. Jaques [Arzneimittelfoschung (Drug Res.) 2£, č. 12, 1942 (1974)] heparin opakovanou krystalizací jako barnatou sůl s maximálně 175 jednotkami/mg podle US lékopisu.
Použitím solného roztoku získaného po nasolení střev podle vynálezu jako suroviny se izoluje heparin v technickém měřítku, v takové čistotě, že je jako téměř bezbarvá substance. Surový heparin získávány dodnes z jiných surovin se naproti tomu musí nejdříve odbarvovat nákladnými a na ztráty bohatými postupy.
Solný roztok je mimo to skladovatelná surovina, téměř bez zápachu, která i při dlouhém skladování zůstává bez újmy na kvalitě. Tím odpadají chemické a jiné konzervační metody.
Předmětem vynálezu je tedy použití solného roztoku vzniklého nasolením střev jako zdroje suroviny pro výrobu heparinu, jakož i způsob izolace zvlášt čistého heparinu ze solných roztoků zvířecí tkáně známým způsobem, vyznačený tím, že se jako výchozí materiál používá solný roztok vzniklý solením střev.
Příklad 1
К roztoku 600 litrů solného roztoku vzniklého solením střev se v 1 500 litrové míchačce, při teplotě místnosti, za míchání přidá během půl hodiny 600 litrů methanolu. Míchá se ještě půl hodiny, načež se směs nechá asi hodinu stát.
Zakalený podíl se děkantuje do druhé nádoby a vypadlý solný koláč se odstraní. Získaná suspenze se nechá dva dny stát. Pak se znovu dekantuje a sraženina se izoluje odstředěním. Po usušení ve vakuu se získá 1,68 kg produktu, který má 11 jednotek podle US lékopisu/mg. Ještě 60 % tvoří kuchyňská sůl.
%
Příklad 2
Podobně britskému patentu 754 885 se 3 litry solného roztoku za míchání okyselí kyselinou octovou na pH 3,1 až 3,2 (asi 50 ml). Po několika hodinách se dekantuje a zbytek se odstředí. Sraženina se odstraní a spojené roztoky se neutralizují louhem sodným. Nyní se z§ míchání pomalu přidá stejná objem methanolu. Po 45 minutách se oddekímtuje vypadlá kuchyňská sůl. Tato suspenze se nechá několik hodin stát, dekantuje se a zbytek se odsSředí. Sraženina se suší ve vakuu. Získá se 3,76 g s 23 jednotkami podle US lékopisu/mg. '
Přiklad3 litry solného roztoku se zředí 14 lity vody. Potom se přidá 50 g křemeliny, jakož i roztok 7 g benzethoniumchloridu (= Hyamin 1622, Rohm a Haas) ve 100 ml vody. Po několika hodinách se deklamuje a zbytek se odsaje. Po proyytí vodou se jeStl vlhké sraženina třikrát extrahuje vždy 200 ml 2 molárního roztoku kuchyňské soli, postupem popsaným v DE patentním spise 1 228 241. Spojené extrakty se ysrážejí 2 objemovými díly methanolu. Izolovaná a usušená sraženina váží 560 mg a má naivitu 163 ' jednotek podle US lékopisu/mg.
Přikládá litry solného roztoku se za míchání okysseí kyselinou octovou na pH 3,1 až 3,2. Po tёkoliOa hodinách se deklamuje a zbytek se odss^edí: Spojené roztoky se zředí vodou na objem 15,5 litru a přidá se 40 g křeme^ny, jakož i 7 g blnzetloniumchloridu (Hyamin 1622) ve 100 ml vody.
Po nlkd^a hodinách se sraženina izoluje, jak popsáno v příkladu 3, a dále se zpracuje.
Nakonec se obdrží 796 mg se 105 jednotkami podle US lékopisu/mg.
Příklad 5 ? • 4 . .
•7 litry solného roztoku se zředí 13 litry vody (srovn. DE patentový spis 1 156 938). Potom se kyselinou octovou okyseU (asi 50 ml) na pH 3,2. Po nlkd^a hodinách se usadí sraženina, která po dekianaci čirého podílu se odstředí. Po usušení se získá 16,6 g surového ^parinu s 5,5 jednotkami podle US lékopisu/mg.
Příklad 6 limů solného roztoku se zředí 50 litry vody. Roztok se prosává f:Lt^t^lm přes i^onoměnnčový sloupec o průměru 26 mm a délce 380 mm (asi 3 1/D. Použije se středně bazická mmkkoporézní atiotomёničová p^skyme v Cl-íorm1 (Lewatit CA 9249). Mohou se pouuít i jiné anionoměničové pryskyřice, jako například Dowex X-1 , popsaný v DE patentovém spise 1 253 868.
Potom se pryskyřice ze sloupce o^j^t^:ra^í, dvakrát se promyje 500 ml 0,9 mooárního roztoku soH a při 40 °C se 5 todin eluuje 40.0 ml 2 molárního roztoku ^ch^s^ sooi.
Tento roztok se sráží 1,5 objemovými díly meehsainlu. Izolovaná a usušená sraženina váží 1,5 g a má 152 jednotek podle US lékopisu/mg.
Příklad 7
A.ikvotní část surového ^parinu z příkladu 1 , ^pp^ís^^ 425 000 jednotek podle US lékopisu, popřípadě 38,65 g, se třikrát extrahuje vždy 200 ml Svoumolárnílo roztoku ^^y^^ soli, přieemž se vždy ludinu mícM při 60 °C. Spojené extráty se zředí vodou, až roztok obsahuje asi 0,9 Ml chloridových iontů. Nyní, se přidá 200 ml anionoměxn.ěe (Lewaatt CA 9249) v chloridové foíml a hodinu se míchá. Potom se odsaje a promývá se asi 200 ml 0,9 omámího roztoku kuchyňské
Ionoměnič se pak pSt hodin míchá s dvoummoárním roztokem kuchyňské soU při 40 °C, pak se odsaje a znovu promývá Svoumolártím roztokem kuchyňské so!i. EluaČní roztok se s^c^ojí s pro208735 ývacím roztokem a sráží se 1 ,5násobým objemem methanolu. Sraženina se odstředí, promyje se nejdříve asi 50 ml voda-methanol (1 + 1,5 objemového dílu), potom ca 50 ml methanolu a suší se.
Získá se 1,91 g Na-heppainátu s 202 jednotkami podle US lékopisu pro mg.
Příklad 8 g heparinátu sodného, získaného podle příkladu 7, s asi 200 jednotkami podle US lékopisu pro mg, se rozpustí ve 200 ml dvovumolárního roztoku kuchyňské sooi. Roztok se proseje na nuči a zbytek se promyje nejprve 30 ml dvourmoárního ·roztoku kuchyňské soli a potom asi 250 ml · vody úplně zbavené sooi. Spojené roztoky · se vodou· úplně zbavenou soli upraví na chloriddovou mooaaitu 0,9. Čištění se pak opaUkuj-e s liteem Lewaattu CA 9249 analogicky příkladu 7.
Spojený eluační a proývací roztok se dále zpracuje, jak uvedeno výše. Po prommtí a usušení sraženiny se získá 11,1 g hepaainátu sodného, který má aktivitu 254 jednotek podle US lékopisu pro mg.

Claims (1)

  1. PŘEDMĚT VYNÁLEZU
    Způsob výroby čistého heparinu, vyznačený tím, že se solné roztoky získané nasolením střev poražených zvířit pevným chloridem sodným při 0 až 30 °C zředí vodou v hmotnostním poměru solný roztok - voda Γ ku 3 až 1 ku 10 a pak se ze zředěného, hepaain obsahujícího roztoku heparin oddděí.
CS777263A 1976-11-12 1977-11-07 Method of making the pure heparine CS208735B2 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE2652272A DE2652272C2 (de) 1976-11-12 1976-11-12 Verfahren zur Herstellung von Heparin

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS208735B2 true CS208735B2 (en) 1981-09-15

Family

ID=5993323

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS777263A CS208735B2 (en) 1976-11-12 1977-11-07 Method of making the pure heparine

Country Status (30)

Country Link
US (1) US4283530A (cs)
JP (1) JPS5844082B2 (cs)
AR (1) AR214759A1 (cs)
AT (1) AT354633B (cs)
AU (1) AU515671B2 (cs)
BE (1) BE860729A (cs)
BG (1) BG28425A3 (cs)
BR (1) BR7707493A (cs)
CA (1) CA1088522A (cs)
CS (1) CS208735B2 (cs)
DD (1) DD134352A5 (cs)
DE (1) DE2652272C2 (cs)
DK (1) DK142059C (cs)
FI (1) FI62104C (cs)
FR (1) FR2370757A1 (cs)
GB (1) GB1592806A (cs)
GR (1) GR65226B (cs)
HU (1) HU174644B (cs)
IE (1) IE47041B1 (cs)
IL (1) IL53254A (cs)
IS (1) IS2410A7 (cs)
IT (1) IT1088965B (cs)
LU (1) LU78488A1 (cs)
NL (1) NL179481C (cs)
PL (1) PL108607B1 (cs)
RO (1) RO78597A (cs)
SE (1) SE432875B (cs)
SU (1) SU1028237A3 (cs)
YU (1) YU260677A (cs)
ZA (1) ZA776753B (cs)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2800943C2 (de) * 1978-01-06 1984-09-27 Schering AG, 1000 Berlin und 4709 Bergkamen Verwendung von Darm-Salzlake zur Gewinnung von reinem Heparin
HU177887B (en) * 1979-03-21 1982-01-28 Richter Gedeon Vegyeszet Process for preparing a raw material containing heparin
DE3265781D1 (en) * 1981-05-21 1985-10-03 Akzo Nv New anti-thromboticum based on polysacharides, method for its preparation and pharmaceutical compositions
WO2016137471A1 (en) * 2015-02-26 2016-09-01 Nantpharma, Llc Method for enhanced heparin quality
RU2612813C1 (ru) * 2015-12-07 2017-03-13 Павел Андреевич Канаев Способ получения гепарина

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2623001A (en) * 1949-04-07 1952-12-23 Bengt E G V Sylven Preparing heparin
DE1156938B (de) * 1957-09-23 1963-11-07 Upjohn Company Eine Ges Nach D Verfahren zur Gewinnung von Heparin
GB872214A (en) * 1957-09-23 1961-07-05 Upjohn Co Extraction process for the recovery of heparin
US3058884A (en) * 1959-09-14 1962-10-16 Abbott Lab Process for purifying heparin
NL301375A (cs) * 1962-12-10
US4119774A (en) * 1976-03-05 1978-10-10 Ab Kabi Heparin purification method

Also Published As

Publication number Publication date
SE7712732L (sv) 1978-05-13
BE860729A (fr) 1978-05-10
NL7711746A (nl) 1978-05-17
SU1028237A3 (ru) 1983-07-07
RO78597A (ro) 1982-06-25
ATA806677A (de) 1979-06-15
DE2652272B1 (de) 1978-05-11
AT354633B (de) 1979-01-25
BR7707493A (pt) 1978-06-20
JPS5844082B2 (ja) 1983-09-30
IE772248L (en) 1978-05-12
DK142059B (da) 1980-08-18
ZA776753B (en) 1978-09-27
PL202036A1 (pl) 1978-07-17
DE2652272C2 (de) 1979-02-15
FR2370757B1 (cs) 1982-03-26
JPS5362816A (en) 1978-06-05
IL53254A0 (en) 1977-12-30
IT1088965B (it) 1985-06-10
BG28425A3 (en) 1980-04-15
NL179481B (nl) 1986-04-16
GB1592806A (en) 1981-07-08
DD134352A5 (de) 1979-02-21
HU174644B (hu) 1980-02-28
SE432875B (sv) 1984-04-30
GR65226B (en) 1980-07-30
DK486177A (da) 1978-05-13
NL179481C (nl) 1986-09-16
AU515671B2 (en) 1981-04-16
PL108607B1 (en) 1980-04-30
AU3026577A (en) 1979-05-10
IE47041B1 (en) 1983-12-14
FI62104C (fi) 1982-11-10
YU260677A (en) 1984-10-31
CA1088522A (en) 1980-10-28
FI773285A7 (fi) 1978-05-13
IS2410A7 (is) 1977-12-07
US4283530A (en) 1981-08-11
FR2370757A1 (fr) 1978-06-09
IL53254A (en) 1980-12-31
LU78488A1 (cs) 1978-03-14
AR214759A1 (es) 1979-07-31
FI62104B (fi) 1982-07-30
DK142059C (da) 1981-01-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US3770720A (en) Process for the extraction of alkali salts of deoxyribonucleic acid from animal organs
US3766167A (en) Orally active anticoagulant
JPS63503067A (ja) 化学的に定義された再現性のあるポリデオキシリボヌクレオチドを得る方法
EP0056025B1 (en) Heme concentrate and method for the preparation thereof
CS208735B2 (en) Method of making the pure heparine
KR820001739B1 (ko) 헤파린의 회수방법
US3342683A (en) Heparin from whale tissue and method of preparing same
FI65073B (fi) Foerfarande foer framstaellning av heparin
KR820000044B1 (ko) 헤파린의 추출방법
US3262854A (en) Method for the recovery of heparin
US3013944A (en) Process for the production of gastrointestinal hormones and hormone concentrate
US3660237A (en) Process for obtaining kallekrein from pancreas or submandibularis glands of pigs
US2194677A (en) Silver animal mucin and process for producing same
US2921000A (en) Thromboplastin
US2099708A (en) Therapeutic product and method of making same
SU738622A1 (ru) Способ получени модифицированного глобина
RU2128512C1 (ru) Способ выделения цитохрома с
KR900007953B1 (ko) 엘라스타제의 정제방법(Elastase의 精製 方法)
US2674560A (en) Preparation of insulin from pancreas glands
EP0352090A2 (en) Method for preparation of nephritogenoside
SU948384A1 (ru) Способ получени средства дл диагностики заболеваний поджелудочной железы
US2211411A (en) Method of isolating and purifying the lactogenic hormone
DE2660052A1 (de) Verfahren zur herstellung von heparin
NO129280B (cs)
UA120089U (uk) Спосіб отримання цитохрому-с