UA120089U - Спосіб отримання цитохрому-с - Google Patents
Спосіб отримання цитохрому-с Download PDFInfo
- Publication number
- UA120089U UA120089U UAU201703386U UAU201703386U UA120089U UA 120089 U UA120089 U UA 120089U UA U201703386 U UAU201703386 U UA U201703386U UA U201703386 U UAU201703386 U UA U201703386U UA 120089 U UA120089 U UA 120089U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- solution
- cytochrome
- temperature
- ammonium sulfate
- purification
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 21
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims abstract description 21
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 16
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 10
- TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L barium sulfate Chemical compound [Ba+2].[O-]S([O-])(=O)=O TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 8
- RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L barium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ba+2] RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 7
- 229910001863 barium hydroxide Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims abstract description 6
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims abstract description 5
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 claims abstract description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims abstract description 3
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 claims description 11
- 108010052832 Cytochromes Proteins 0.000 claims description 11
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 10
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 6
- 102100030497 Cytochrome c Human genes 0.000 abstract 1
- 108010075031 Cytochromes c Proteins 0.000 abstract 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 abstract 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 48
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 6
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 6
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 5
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 5
- YKYOUMDCQGMQQO-UHFFFAOYSA-L cadmium dichloride Chemical compound Cl[Cd]Cl YKYOUMDCQGMQQO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 4
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 4
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 4
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 3
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- WDIHJSXYQDMJHN-UHFFFAOYSA-L barium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ba+2] WDIHJSXYQDMJHN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910001626 barium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- -1 cytochrome-C Chemical class 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- UQSXHKLRYXJYBZ-UHFFFAOYSA-N iron oxide Inorganic materials [Fe]=O UQSXHKLRYXJYBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- NDLPOXTZKUMGOV-UHFFFAOYSA-N oxo(oxoferriooxy)iron hydrate Chemical compound O.O=[Fe]O[Fe]=O NDLPOXTZKUMGOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N Fe3+ Chemical compound [Fe+3] VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 230000003113 alkalizing effect Effects 0.000 description 1
- XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N ammonia nh3 Chemical compound N.N XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000141 anti-hypoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Спосіб отримання цитохрому-С шляхом екстрагування подрібненого серцевого м’язу ВРХ розчином сульфату амонію з подальшим підкисленням сірчаною кислотою та підлужуванням гідроокисом барію до рН 8,5±0,05, осадження баластних білків та сульфату барію і подальшим відновленням з отриманого розчину цитохрому-С та його очищенням. При цьому здійснюють додаткове очищення отриманого розчину цитохрому-С шляхом видалення іонів сульфату амонію заморожуванням та ліофілізацією у вакуумі.
Description
Корисна модель відноситься до біотехнології отримання біологічно активних з'єднань, саме цитохрому-С, що може бути використаний в фармацевтичній промисловості та медицині для виготовлення антигіпоксичних лікарських засобів для нормалізації тканинного дихання, а також у науково-дослідницькій роботі.
Відомий спосіб отримання цитохрому-С, що включає екстрагування подрібненого серцевого м'яза ссавців водним розчином сульфатів, підлужування, очищення на іонообмінних смолах з наступним виділенням цільового продукту, що відрізняється тим, що, з метою поліпшення якості цільового продукту, екстракцію проводять 0,25-0,75 96 розчином сульфату амонію, потім підкислюють сірчаною кислотою при рн 4-5 і підлужують гідроокисом барію до рН 8-9 (Патент
України Мо 1110).
Недоліками відомого способу є невисокий ступінь очищення цільового продукту, так як заявлені в свідоцтві етапи очищення цитохрому-С є недостатніми для очищення продукту від іонів сульфату амонію, яким проводять осадження, це викликає необхідність в додаткових способах очищення продукту.
Також відомий спосіб отримання цитохрому-С, що включає знежирення сердець свиней, великої рогатої худоби або коней. Підготовлену сировину подрібнюють з отриманням фаршу, потім екстрагують 2,595 розчином трихлороцтової кислоти при температурі 10-157С і рН 3,9-4 2.
Відокремлюють екстракт і здійснюють його сорбцію на катіоніті, урівноваженому дистильованою водою. Після завершення сорбції катіонів промивають дистильованою водою і аміачно- амонійний буферним розчином. Потім проводять елюцію цитохрому С з катіоніту розчином сульфату амонію з наступним очищенням його діафільтрацією до повного видалення іонів сульфату амонію і концентрування цитохрому С ультрафільтрацією (Патент РФ Мо 2528061).
Даний спосіб обраний в якості прототипу.
За відомим способом очищення цільового продукту від іонів сульфату амонію здійснюють шляхом діафільтрації та ультрафільтрації розчину цитохрому-С із застосуванням мембран чи касет з порогом відсікання 5 кДа.
Недоліком відомого способу є значні втрати цільового продукту при проведенні очищення цитохрому-С від іонів сульфату амонію шляхом ультрафільтрації із застосуванням мембран чи касет з порогом відсікання 5 кДа.
Зо В основу корисної моделі поставлено задачу: за рахунок зміни процесу очищення цільового продукту від іонів сульфату амонію отримати продукт з вищим ступенем чистоти та збільшити вихід цитохрому-С.
Поставлена задача вирішується тим, що у способі отримання цитохрому-С шляхом екстрагування подрібненого серцевого м'язу великої рогатої худоби (ВРХ) розчином сульфату амонію з подальшим підкисленням сірчаною кислотою та підлужуванням гідроокисом барію до рН 8,5:40,05, осадження баластних білків та сульфату барію і подальшим відновленням з отриманого розчину цитохрому-С та його очищенням, відповідно до корисної моделі здійснюють додаткове очищення отриманого розчину цитохрому-С шляхом видалення іонів сульфату амонію заморожуванням та ліофілізацією у вакуумі.
Заморожування розчину здійснюють до температури -657"С протягом 12 годин з наступною ліофілізацією при величині вакууму 48-12 тт при температурі 35:543"С не менше 4 годин.
Спосіб отримання цитохрому-С, що заявляється, виконують наступним чином. Перероблені на фарш серця КРОС вносять у реактор з підготовленим розчином амонію сульфату 2 95, вимішують та охолоджують до температури від 27"С до 8"С. Встановлюють рН 5 95 розчином сірчаної кислоти (4,3:0,05), проводять екстракцію цитохрому при постійному перемішуванні у реакторі при температурі від 2"7"С до 8"С. По закінченні екстракції відділяють екстракт від жмиху шляхом центрифугування. В отриманому екстракті проводять осадження баластних білків розчином гідроокису барію при рН (8,5:20,05) та температурі від 2"С до 8"С. Після осадження розчин декантують, проводять відновлення цитохрому-С шляхом додавання калію залізносинеродистого або 0,01 М калію феррицианіду. Очищення цитохрому здійснюють із застосуванням катіоннообмінних колонок, де в якості сорбенту застосовують смоли Амберліт з розміром гранул 0,45-0,5 мм. Проводять спочатку адсорбцію, а потім десорбцію розчину. Після отримання елюату цитохрому проводять очищення, що включає в себе осадження розчином амонію сірчанокислого протягом 12 годин при температурі від 2"7С до 8"С. Відділення баластних білків фільтрацією на воронці Бюхнера, осадження цитохрому при рН (4,220,05) бінарним розчином кадмію хлориду та розчином калію йодиду при температурі від 27"С до 8"С. Отриманий осад відділяють центрифугуванням. Процес осадження повторюють та направляють отриманий розчин на очищення із застосуванням катіонообмінних колонок, де в якості сорбенту застосовують смоли Амберліт з розміром гранул 0,45-0,5 мм. Проводять спочатку адсорбцію, а бо потім десорбцію розчину. Відповідно до технології що заявляється, отриманий розчин цитохрому-С заморожують та ліофілізують у вакуумі. Отриманий ліофілізат цитохрому-С розчиняють в розчині натрію хлориду 9 96 та очищують шляхом проведення діафільтрації та ультрафільтрації розчину крізь касетні мембрани з порогом відсікання 100 КДа та проведенням стерилізуючої фільтрації крізь фільтруючу мембрану 0,22 мкм.
Таким чином якість цільового продукту зростає та підвищується вихід продукту, що є особливо суттєвим при промисловому виробництві цитохрому-С та має вищий ступінь чистоти за рахунок проведення ліофілізації у вакуумі та кінцевої стерилізуючої фільтрації.
При проведенні ліофілізації у вакуумі відбувається видалення іонів сульфату амонію з розчину цитохрому-С, про що свідчать показники якісного визначення наявності сульфатів (при додаванні до розчину цитохрому-С барію хлориду розчин залишається прозорим, що свідчить про відсутність сульфатів) та показник кількісного визначення цитохрому-С, який склав 103,10 90 (при критерії прийнятності 90965).
Ефективність способу підтверджується наступним прикладом:
Приклад 1. 200 кг очищеного від крові жиру та сполучної тканини серцевого м'язу ВРХ подрібнюють та перероблюють на фарш та, при постійному перемішуванні, завантажують в реактор з підготовленим охолодженим до температури 2-87"С розчином 2 95 сульфату амонію в кількості 50 л. Суміш в реакторі перемішують протягом 10-15 хв. при температурі 2-8"С та обертах мішалки 25242 об/хв. Встановлюють рН суміші 4,3-40,05 595 розчином сірчаної кислоти та проводять екстракцію цитохрому-С при температурі 2-8"С протягом 1,5 год. По закінченні екстракції відділяють екстракт від жмиху шляхом центрифугування. Отриманий екстракт збирають в другий реактор та проводять осадження баластних білків шляхом нейтралізації екстракту гідроокисом барію, в кількості З кг, при рН 8,5:0,05 протягом 12-18 годин. При додаванні барію гідроокису в осад випадає сульфат барію та баластні білки, ізоелектрична точка яких нижче 8,5. В отриманому розчині проводять відновлення цитохрому-С шляхом додавання калію залізосинеродистого, в кількості 0,001 кг. Очищення цитохрому здійснюють із застосуванням катіонообмінних колонок, де в якості сорбенту застосовують смоли Амберліт з розміром гранул 0,45-0,5 мм. Проводять спочатку адсорбцію цитохрому-С при рН 8-9, а потім десорбцію розчину, додаванням 15 л розчину 1 М натрію хлориду в 0,02 М натрій-фосфатному
Зо буфері. Для досягнення повної десорбції розчин витримують на колонках протягом 12-18 годин при температурі 2-8"С. Отриманий елюат збирають в скляні ємності та проводять додатковий етап очищення, що полягає в повторному осадженні та очищенні цитохрому-С. Осадження баластних білків проводять додаючи 5,6 кг амонію сірчанокислого при перемішуванні та витримують розчин протягом 12-18 годин при температурі 2-8"С. Відділяють осад фільтруванням на воронці Бюхнера, розчин збирають в скляні ємності та осаджують в ньому цитохром-С бінарним комплексом кадмію хлориду та калію йодиду (в кількості 0,25 л на 7 л розчину) при рН (4,220,05). Витримують протягом 302 хвилин та відділяють утворений осад центрифугуванням при 2500 об/хв. Отриманий осад розчиняють у воді очищеній та встановлюють рН 4,2250,05 5 95 розчином сірчаної кислоти. Процес осадження бінарним комплексом проводять ще раз. Після осад розчиняють в 8 л води очищеної, встановлюють рн 7,5-0,05 3 95 розчином аміаку, для відновлення цитохрому додають 1 г калію залізосинеродистого, перемішують та фільтрують розчин на воронці Бюхнера. Розчин очищують із застосуванням катіонообмінних колонок, де в якості сорбенту застосовують смоли
Амберліт з розміром гранул 0,45-0,5 мм. Проводять спочатку адсорбцію, а потім десорбцію розчину цитохрому-С З 905 розчином аміаку. Відповідно до технології, що заявляється, отриманий розчин цитохрому-С розливають у флакони по 50 мл та поміщують в камеру ліофільної установки. Набирають розрядження (900-100) тВаг та проводять заморожування розчину до температури (-657"С) протягом 12 годин. Після цього починають вакуумування і, при досягненні величини вакууму (48:12) тт, протягом 15-20 годин підвищують температуру у камері до (35:23)"С та витримують при цій температурі не менше 4 годин.
Отриманий ліофілізат збирають в єдину серію та розчиняють в 15 л 995 розчину натрію хлориду, встановлюють рН 6,5-7,0. Розчин піддають діафільтрації та ультрафільтрації крізь мембрани з порогом відсікання 100 КДа та наступній стерилізуючій фільтрації крізь мембрану з розміром пор 0,22 мкм.
Таким чином, при проведенні ліофілізації у вакуумі відбувається видалення іонів сульфату амонію з розчину цитохрому-С, про що свідчать показники якісного визначення наявності сульфатів (при додаванні до розчину цитохрому-С барію хлориду розчин залишається прозорим, що свідчить про відсутність сульфатів) та показник кількісного визначення цитохрому-С, який склав 103,10 95 (при критерії прийнятності 9090). бо Відповідно до технології, що заявляється, ліофілізація розчину полягає в тому, що розчин цитохрому-С розливають у флакони по 50 мл та розміщують в камеру ліофільної установки.
Набирають розрідження (9002100) тВаг та проводять заморожування розчину до температури (-65"С) протягом 12 годин. Після цього починають вакуумування і, при досягненні величини вакууму (48:12) тт, протягом 15-20 годин підвищують температуру у камері до (35:23)"С та витримують при цій температурі не менше 4 годин.
Протягом 12 годин відбувається повне заморожування усього об'єму розчину до температури (-65"С). Температура заморожування вибрана з розрахунку максимального видалення вологи з препарату, а тривалість витримки при заданій температурі вибрана з розрахунку об'єму серії виробництва цитохрому. При проведенні ліофілізації: задане значення температури (35243)"С - температура, що є допустимою для нагрівання препаратів білкової природи не допускаючи порушення білкової структури та водночас дозволяє в повній мірі провести висушування препарату та видалити при іони сульфату амонію, величина вакууму (48412) тТ, в свою чергу, не дозволяє утворюватись волозі при висушуванні, що забезпечує рівномірне та повне висушування. Тривалість витримки при температурі (35:53)"С також обумовлена об'ємом серії виробництва.
Відсутність іонів сульфату амонію визначають контролем за якісним показником, що доводить відсутність сульфатів.
Показник, що підтверджує зменшення втрат продукту при виробництві, є показник втрати маси при висушуванні, що склав 0,02 95 (при критерії прийнятності 0,5 90).
Claims (2)
1. Спосіб отримання цитохрому-С шляхом екстрагування подрібненого серцевого м'яза ВРХ розчином сульфату амонію з подальшим підкисленням сірчаною кислотою та підлужуванням гідроокисом барію до рН 8,5:20,05, осадження баластних білків та сульфату барію і подальшим відновленням з отриманого розчину цитохрому-С та його очищенням, який відрізняється тим, що здійснюють додаткове очищення отриманого розчину цитохрому-С шляхом видалення іонів сульфату амонію заморожуванням та ліофілізацією у вакуумі.
2. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що заморожування розчину здійснюють до Зо температури -657"С протягом 12 годин з наступною ліофілізацією при величині вакууму 48:12 тт при температурі 35:543"С не менше 4 годин.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU201703386U UA120089U (uk) | 2017-04-07 | 2017-04-07 | Спосіб отримання цитохрому-с |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU201703386U UA120089U (uk) | 2017-04-07 | 2017-04-07 | Спосіб отримання цитохрому-с |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA120089U true UA120089U (uk) | 2017-10-25 |
Family
ID=60118525
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAU201703386U UA120089U (uk) | 2017-04-07 | 2017-04-07 | Спосіб отримання цитохрому-с |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA120089U (uk) |
-
2017
- 2017-04-07 UA UAU201703386U patent/UA120089U/uk unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3770720A (en) | Process for the extraction of alkali salts of deoxyribonucleic acid from animal organs | |
| JP2622686B2 (ja) | ｋ−カゼイングリコマクロペプチドの製造法 | |
| CN101089021B (zh) | 从微生物发酵液中分离提取透明质酸的方法 | |
| UA120089U (uk) | Спосіб отримання цитохрому-с | |
| CN110627848A (zh) | 一种去除唾液酸中杂质的方法及其应用 | |
| UA120087U (uk) | Спосіб одержання цитохрому-с | |
| US2797184A (en) | Process for the recovery of heparin | |
| KR102055628B1 (ko) | 돼지 부산물을 이용한 헤파린 나트륨의 제조방법 | |
| CN113980155A (zh) | 一种提取动物肺脏中肝素的方法 | |
| WO2022035334A2 (en) | Method of obtaining aprotinin and product obtained thereby | |
| US3627642A (en) | Lysozyme salts | |
| US3262854A (en) | Method for the recovery of heparin | |
| RU1417244C (ru) | Способ получения вещества, восстанавливающего функцию предстательной железы | |
| RU2128512C1 (ru) | Способ выделения цитохрома с | |
| DE2757377A1 (de) | Verfahren zum stabilisieren, konzentrieren und reinigen von insulin | |
| RU2579313C1 (ru) | Способ получения средства для восстановления функции предстательной железы | |
| RU2745443C1 (ru) | Способ получения средства, обладающего антигипоксической, регенеративной активностью | |
| RU2703108C1 (ru) | Способ получения фармацевтической субстанции гиалуронидазы | |
| UA120088U (uk) | Спосіб виробництва цитохрому-с | |
| RU2749424C1 (ru) | Способ получения лекарственного средства, обладающего антикоагулянтной активностью | |
| CS208735B2 (en) | Method of making the pure heparine | |
| RU2091073C1 (ru) | Способ получения иммуностимулятора | |
| RU2648462C1 (ru) | Мембранный способ получения лекарственного средства на основе пептидов предстательной железы | |
| CN117511910A (zh) | 一种家畜小肠粘膜碱性磷酸酶提取方法 | |
| SU571267A1 (ru) | Способ получени фитогемагглютинина |