JPH05310799A - ムチンの精製方法 - Google Patents
ムチンの精製方法Info
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- JPH05310799A JPH05310799A JP4117076A JP11707692A JPH05310799A JP H05310799 A JPH05310799 A JP H05310799A JP 4117076 A JP4117076 A JP 4117076A JP 11707692 A JP11707692 A JP 11707692A JP H05310799 A JPH05310799 A JP H05310799A
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- mucin
- salivary gland
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 哺乳動物の唾液腺から得られた粗ムチンを限
外濾過することを特徴とするムチンの精製方法。 【効果】 限外濾過により、従来方法に比べて，分子量
１０万以上のムチンが高度に濃縮・精製できると同時に
脱塩もなされる。
外濾過することを特徴とするムチンの精製方法。 【効果】 限外濾過により、従来方法に比べて，分子量
１０万以上のムチンが高度に濃縮・精製できると同時に
脱塩もなされる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、哺乳動物の唾液腺から
得られた粗ムチンを精製する方法に関する。
得られた粗ムチンを精製する方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】唾液腺ムチンは、哺乳動物、例えば、ウ
シ、ウマ、ブタ、ヒツジ等の唾液腺、すなわち舌下腺、
顎下腺および耳下腺等で合成、分泌される糖蛋白質であ
って、動物の種類によって固有の粘稠性をもち、シアル
酸を大量に含む分子量約１０万〜１００万の巨大分子で
ある。
シ、ウマ、ブタ、ヒツジ等の唾液腺、すなわち舌下腺、
顎下腺および耳下腺等で合成、分泌される糖蛋白質であ
って、動物の種類によって固有の粘稠性をもち、シアル
酸を大量に含む分子量約１０万〜１００万の巨大分子で
ある。
【０００３】ムチンは、優れた保湿作用及び乳化作用を
有し、また、人体に対する安全性も高いことが知られて
いる。近年、これらのムチンの特性に着目し、化粧品、
医薬品等（特に皮膚外用剤）の保湿剤として、また食
品、化粧品、医薬品、医薬部外品、トイレタリー等の各
種産業分野において、乳化剤としての利用の研究が進め
られている。
有し、また、人体に対する安全性も高いことが知られて
いる。近年、これらのムチンの特性に着目し、化粧品、
医薬品等（特に皮膚外用剤）の保湿剤として、また食
品、化粧品、医薬品、医薬部外品、トイレタリー等の各
種産業分野において、乳化剤としての利用の研究が進め
られている。
【０００４】唾液腺ムチンの分離・精製方法について
は、主としてウシ、ヒツジおよびブタの顎下腺を材料と
して現在まで詳細な検討が行なわれており、一般的に以
下の方法が広く用いられてきた。
は、主としてウシ、ヒツジおよびブタの顎下腺を材料と
して現在まで詳細な検討が行なわれており、一般的に以
下の方法が広く用いられてきた。
【０００５】脂肪や結合組織を除去した顎下腺をホモジ
ナイズした後、適当な溶媒（水、０．１Ｍ ＮａＣｌ、
０．０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）など）を２〜３
倍量加えて中性に保ちながら、５〜１０時間撹拌、抽出
する。抽出液を数層のガーゼを通して不溶物を除き、濾
液を１０，０００×ｇ，２０分遠心すると透明な液が得
られる。ガーゼ上の残渣を同様に数回抽出に付し、全抽
出液を混合し精製する。精製は、前記抽出液を酸性（ｐ
Ｈ３〜２．５）に調整するとムチンが他の蛋白質と結合
沈殿する性質を利用するムチンクロット法、硫安分画に
よる方法、Ｂａ2+やＣａ2+の存在下でのアルコール分別
による方法、セタブロン（セチルトリメチルアンモニウ
ムブロマイド）やＣＰＣ（セチルピリジニウムクロライ
ド）などの四級アミンの陽性界面活性剤を使用する沈殿
法などにより行われ、最終的には、透析等の手段が採ら
れていた。
ナイズした後、適当な溶媒（水、０．１Ｍ ＮａＣｌ、
０．０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）など）を２〜３
倍量加えて中性に保ちながら、５〜１０時間撹拌、抽出
する。抽出液を数層のガーゼを通して不溶物を除き、濾
液を１０，０００×ｇ，２０分遠心すると透明な液が得
られる。ガーゼ上の残渣を同様に数回抽出に付し、全抽
出液を混合し精製する。精製は、前記抽出液を酸性（ｐ
Ｈ３〜２．５）に調整するとムチンが他の蛋白質と結合
沈殿する性質を利用するムチンクロット法、硫安分画に
よる方法、Ｂａ2+やＣａ2+の存在下でのアルコール分別
による方法、セタブロン（セチルトリメチルアンモニウ
ムブロマイド）やＣＰＣ（セチルピリジニウムクロライ
ド）などの四級アミンの陽性界面活性剤を使用する沈殿
法などにより行われ、最終的には、透析等の手段が採ら
れていた。
【０００６】現在、上記精製方法のうち、セタブロンや
ＣＰＣを用いる沈殿法（以下、セタブロン法と呼ぶ。）
が最も有効と認められている。
ＣＰＣを用いる沈殿法（以下、セタブロン法と呼ぶ。）
が最も有効と認められている。
【０００７】セタブロン法によれば、顎下腺の抽出液に
セタブロンの５〜１０％溶液を滴下すると、シアル酸を
含むムチンは、セタブロンとの複合体を形成し沈殿す
る。沈殿を高濃度の中性塩、たとえば、５０％（ｗ／
ｖ）のＣａＣｌ2 溶液に溶解し、アルコール分別を行う
と、５０〜６０％の濃度でムチンは沈殿する。沈殿した
ムチンを遠心して集めて透析後凍結乾燥し、ムチン脱水
末を得る。
セタブロンの５〜１０％溶液を滴下すると、シアル酸を
含むムチンは、セタブロンとの複合体を形成し沈殿す
る。沈殿を高濃度の中性塩、たとえば、５０％（ｗ／
ｖ）のＣａＣｌ2 溶液に溶解し、アルコール分別を行う
と、５０〜６０％の濃度でムチンは沈殿する。沈殿した
ムチンを遠心して集めて透析後凍結乾燥し、ムチン脱水
末を得る。
【０００８】ムチンの収量は、顎下腺の生重量の０．２
〜０．５％であり、得られたムチンは電気泳動や超遠心
法では単一の成分であった。
〜０．５％であり、得られたムチンは電気泳動や超遠心
法では単一の成分であった。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上記の
従来方法で得られたムチンは、その後の免疫反応に基づ
く分析方法によれば単一成分ではなく、分子量１０万以
下のムチンの断片等をも含むものである（Ａｒｃｈ．Ｂ
ｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．，１２４；４１（１９
６８））。
従来方法で得られたムチンは、その後の免疫反応に基づ
く分析方法によれば単一成分ではなく、分子量１０万以
下のムチンの断片等をも含むものである（Ａｒｃｈ．Ｂ
ｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．，１２４；４１（１９
６８））。
【００１０】また、従来方法では、脱塩工程（透析）及
び濃縮工程（減圧濃縮）に多くの時間を要していた。
び濃縮工程（減圧濃縮）に多くの時間を要していた。
【００１１】本発明は、分子量１０万以下のムチン断片
を除去することにより純度の高いムチンを一工程で且つ
短時間で得ることができる唾液腺ムチンの精製方法を提
供することを目的とする。
を除去することにより純度の高いムチンを一工程で且つ
短時間で得ることができる唾液腺ムチンの精製方法を提
供することを目的とする。
【００１２】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記目的
を達成するため、鋭意研究を重ねた結果、従来、ムチン
のような高粘度で不溶物（繊維状のもの）を含むものは
限外濾過による精製には適さないと考えられていたが、
唾液腺ムチンの精製を限外濾過により行ったところ、実
用上濾過膜の目詰りの問題もなく、分子量１０万以下の
ムチン断片や不純物が除去され、所望の分子量１０万以
上のムチンが効率よく得られることを見出し、本発明を
完成した。
を達成するため、鋭意研究を重ねた結果、従来、ムチン
のような高粘度で不溶物（繊維状のもの）を含むものは
限外濾過による精製には適さないと考えられていたが、
唾液腺ムチンの精製を限外濾過により行ったところ、実
用上濾過膜の目詰りの問題もなく、分子量１０万以下の
ムチン断片や不純物が除去され、所望の分子量１０万以
上のムチンが効率よく得られることを見出し、本発明を
完成した。
【００１３】従って、本発明は、従来方法により哺乳動
物の唾液腺から得られたムチン（これを粗ムチンと呼
ぶ。）を限外濾過することを特徴とするムチンの精製方
法を要旨とする。
物の唾液腺から得られたムチン（これを粗ムチンと呼
ぶ。）を限外濾過することを特徴とするムチンの精製方
法を要旨とする。
【００１４】本発明の好ましい態様によれば、粗ムチン
を限外濾過に付する前に精密濾過に付することにより、
より精製されたムチンを得ることができる。
を限外濾過に付する前に精密濾過に付することにより、
より精製されたムチンを得ることができる。
【００１５】以下、本発明について詳述する。
【００１６】本発明でいう粗ムチンには前記従来技術の
方法又はそれ以外の適用可能な方法により分離された全
ての唾液腺ムチンを含む。
方法又はそれ以外の適用可能な方法により分離された全
ての唾液腺ムチンを含む。
【００１７】限外濾過とは、透析用半透膜やゲル膜を用
いる濾過によって懸濁物質を分散媒より分離する操作を
いう。透析用半透膜を用いる限外濾過法は、液体に分散
して存在する各種化合物が、膜の通過孔の大きさに応じ
て濾別されるものである。また、ゲル膜を用いる限外濾
過法では、膜に接した各種化合物の水溶液に圧力をかけ
ることにより，溶媒の水はゲル膜中に多量に保持されて
いる水分子と交換して拡散し、最終的には膜外に流出す
る。この際、溶媒中に存在する低分子化合物も水ととも
にゲル膜中に拡散し、濾過されて膜外に出るが、粒子の
大きい高分子化合物は、ゲル膜中での拡散速度が低分子
化合物に比べて非常に小さく、事実上ほとんど濾過され
ず、結果として低分子化合物と高分子化合物の濾別が行
われる。また、ゲル膜には、平板状のものと、チューブ
状のものがある。限外濾過は蛋白質などの溶液を非常に
温和な条件で濃縮するのに適した方法である。
いる濾過によって懸濁物質を分散媒より分離する操作を
いう。透析用半透膜を用いる限外濾過法は、液体に分散
して存在する各種化合物が、膜の通過孔の大きさに応じ
て濾別されるものである。また、ゲル膜を用いる限外濾
過法では、膜に接した各種化合物の水溶液に圧力をかけ
ることにより，溶媒の水はゲル膜中に多量に保持されて
いる水分子と交換して拡散し、最終的には膜外に流出す
る。この際、溶媒中に存在する低分子化合物も水ととも
にゲル膜中に拡散し、濾過されて膜外に出るが、粒子の
大きい高分子化合物は、ゲル膜中での拡散速度が低分子
化合物に比べて非常に小さく、事実上ほとんど濾過され
ず、結果として低分子化合物と高分子化合物の濾別が行
われる。また、ゲル膜には、平板状のものと、チューブ
状のものがある。限外濾過は蛋白質などの溶液を非常に
温和な条件で濃縮するのに適した方法である。
【００１８】本発明で用いる限外濾過は、いわゆるゲル
膜を用いる限外濾過である。用いるゲル膜は分子量１０
万前後で物質を分離することができるものであれば平板
状のものでも、チューブ状のものでもよい。本発明で用
いることができる平板状のゲル膜としては、ＹＭ１００
（アミコン社製）等が挙げられる。チューブ状のゲル膜
としては、Ｈ１Ｐ１００、Ｈ１０Ｐ１００、Ｈ１０Ｘ１
００（以上アミコン社製），ＳＭ１４６６９（ザルトリ
ウス社製），ペリコンＰＴＨＫ（ミリポア社製）等が挙
げられる。
膜を用いる限外濾過である。用いるゲル膜は分子量１０
万前後で物質を分離することができるものであれば平板
状のものでも、チューブ状のものでもよい。本発明で用
いることができる平板状のゲル膜としては、ＹＭ１００
（アミコン社製）等が挙げられる。チューブ状のゲル膜
としては、Ｈ１Ｐ１００、Ｈ１０Ｐ１００、Ｈ１０Ｘ１
００（以上アミコン社製），ＳＭ１４６６９（ザルトリ
ウス社製），ペリコンＰＴＨＫ（ミリポア社製）等が挙
げられる。
【００１９】加える圧力は通常０．５〜７ｋｇ／ｃ
ｍ2 、好ましくは１〜３ｋｇ／ｃｍ2 の範囲である。流
量は、通常１〜１０リットル／ｍｉｎ、好ましくは２〜
５リットル／ｍｉｎである。
ｍ2 、好ましくは１〜３ｋｇ／ｃｍ2 の範囲である。流
量は、通常１〜１０リットル／ｍｉｎ、好ましくは２〜
５リットル／ｍｉｎである。
【００２０】濾過される粗ムチンの溶液の濃度は、通常
０．０５〜１％であり、好ましくは０．１〜０．４％で
ある。
０．０５〜１％であり、好ましくは０．１〜０．４％で
ある。
【００２１】本発明で使用しうる限外濾過装置として
は、アミコン社製ダイアフローホローファイバーシステ
ムＤＣ３０型、その他、ダウ社、ミリポア社、ザルトリ
ウス社、旭化成工業、バイオエンジニアリング社製のも
のが挙げられる。
は、アミコン社製ダイアフローホローファイバーシステ
ムＤＣ３０型、その他、ダウ社、ミリポア社、ザルトリ
ウス社、旭化成工業、バイオエンジニアリング社製のも
のが挙げられる。
【００２２】本発明において，限外濾過前に必要に応じ
て行われる精密濾過とは、懸濁物質を高精度に捕捉する
清澄濾過を意味し，具体的にはセルロース誘導体やポリ
アミド，ナイロンなどの合成高分子を用いて微細な０．
２〜８μｍのオーダーのメッシュをもった多層膜（メン
ブレンフィルター）を成形し，それを用いて溶液を清澄
する操作をいう。なお，精密濾過を行う前には前濾過と
称し，セライトのような濾過助剤を用いた濾過，あるい
は粗いメッシュのフィルターを用いた濾過などの処理で
精密濾過膜の寿命を延ばすことは常套手段である。
て行われる精密濾過とは、懸濁物質を高精度に捕捉する
清澄濾過を意味し，具体的にはセルロース誘導体やポリ
アミド，ナイロンなどの合成高分子を用いて微細な０．
２〜８μｍのオーダーのメッシュをもった多層膜（メン
ブレンフィルター）を成形し，それを用いて溶液を清澄
する操作をいう。なお，精密濾過を行う前には前濾過と
称し，セライトのような濾過助剤を用いた濾過，あるい
は粗いメッシュのフィルターを用いた濾過などの処理で
精密濾過膜の寿命を延ばすことは常套手段である。
【００２３】精密濾過を行う場合、本発明で用いること
のできるフィルターの穴径は、通常０．２〜８．０μ
ｍ、好ましくは０．４５〜１．２μｍである。従って、
本発明で使用しうるフィルターは、ウルチポアＮ66ＮＮ
ＸＺＰ（ポール社製），ＣＷＳＣ０１ＴＰ３（ミリポア
社製），ＳＭ５２３２４０６Ｄ１ＰＨ（ザルトリウス社
製）等である。精密濾過装置としては、ポール社、ミリ
ポア社、ザルトリウス社製のものが挙げられる。
のできるフィルターの穴径は、通常０．２〜８．０μ
ｍ、好ましくは０．４５〜１．２μｍである。従って、
本発明で使用しうるフィルターは、ウルチポアＮ66ＮＮ
ＸＺＰ（ポール社製），ＣＷＳＣ０１ＴＰ３（ミリポア
社製），ＳＭ５２３２４０６Ｄ１ＰＨ（ザルトリウス社
製）等である。精密濾過装置としては、ポール社、ミリ
ポア社、ザルトリウス社製のものが挙げられる。
【００２４】精密濾過を行う場合、粗ムチンの濃度を
０．１〜０．４％（ｗ／ｖ）に希釈するのが好ましい。
０．１〜０．４％（ｗ／ｖ）に希釈するのが好ましい。
【００２５】限外濾過に先だって精密濾過を行うことに
より、より効率よく、分子量１０万以上のムチンを精製
・濃縮できる。
より、より効率よく、分子量１０万以上のムチンを精製
・濃縮できる。
【００２６】尚、精密濾過を行わない場合には、チュー
ブ状のゲル膜を用いる限外濾過では、目づまりを起こす
ことがあるので、平板状のゲル膜を用いる方が好まし
い。
ブ状のゲル膜を用いる限外濾過では、目づまりを起こす
ことがあるので、平板状のゲル膜を用いる方が好まし
い。
【００２７】
実施例１ （ａ）顎下腺ムチンの分離（粗ムチンの分離） ウシの新鮮な顎下腺から結合組織、脂肪組織を除き、細
切にしたもの１００ｋｇに１５００リットルの０．１Ｍ
塩化ナトリウム水溶液を加え、冷却装置付き抽出機中
で、５〜１０℃で３時間撹拌する。続いてこれを目の粗
い網で大きい不溶物を除き、振り切り遠心分離する。分
離液に撹拌しながら酢酸を滴下し、ｐＨ４．６に調整
し、沈殿を生成させる。これを濾過し、その濾液に１０
％（Ｗ／Ｖ）塩化セチルピリジニウム（ＣＰＣ）水溶液
を滴下して沈殿を生成させる。滴下は沈殿が生じなくな
るまで続ける。この沈殿を回収し、５０％（Ｗ／Ｖ）塩
化カルシウム水溶液を加えて撹拌する。この液にエタノ
ールを加え、エタノール濃度６０〜７５％（ｖ／ｖ）の
範囲で沈殿するものを回収する。これに適当量のエタノ
ールを加えて脱ＣＰＣ及び脱水し、エタノール沈殿物
（粗ムチン）を得た。
切にしたもの１００ｋｇに１５００リットルの０．１Ｍ
塩化ナトリウム水溶液を加え、冷却装置付き抽出機中
で、５〜１０℃で３時間撹拌する。続いてこれを目の粗
い網で大きい不溶物を除き、振り切り遠心分離する。分
離液に撹拌しながら酢酸を滴下し、ｐＨ４．６に調整
し、沈殿を生成させる。これを濾過し、その濾液に１０
％（Ｗ／Ｖ）塩化セチルピリジニウム（ＣＰＣ）水溶液
を滴下して沈殿を生成させる。滴下は沈殿が生じなくな
るまで続ける。この沈殿を回収し、５０％（Ｗ／Ｖ）塩
化カルシウム水溶液を加えて撹拌する。この液にエタノ
ールを加え、エタノール濃度６０〜７５％（ｖ／ｖ）の
範囲で沈殿するものを回収する。これに適当量のエタノ
ールを加えて脱ＣＰＣ及び脱水し、エタノール沈殿物
（粗ムチン）を得た。
【００２８】尚、粗ムチンに含まれる無機質不純物を強
熱残分として測定したところ、２４．７％であった。
熱残分として測定したところ、２４．７％であった。
【００２９】（ｂ）顎下腺ムチンの精製 上記粗ムチン（顎下腺１００ｋｇ相当量）に２００リッ
トルの水を加えて溶解し、不溶物を粗濾過した。このと
きのムチン濃度は０．２％であった。次いで、精密濾過
装置（ポール社製、穴径１．２〜０．４５μｍのフィル
ター使用）を用いて不溶物を除去する。このときのムチ
ン濃度は０．１％であった。また、精密濾過に要した時
間は約３時間であった。次いで、限外濾過装置（アミコ
ン社製ダイアフローホローファイバーシステムＤＣ３０
型、カートリッジＨ１０Ｐ１００使用）を用いて分子量
１０万以下のものを排除した。限外濾過時の圧力は、
１．８ｋｇ／ｃｍ2 であり、流量は７リットル／ｍｉｎ
であった。また、限外濾過に要した時間は約１時間であ
った。不溶物を１１，０００×ｇ、２０分間遠心分離
後、凍結乾燥し、顎下腺ムチン（ＢＳＭ）５５０ｇを得
た。
トルの水を加えて溶解し、不溶物を粗濾過した。このと
きのムチン濃度は０．２％であった。次いで、精密濾過
装置（ポール社製、穴径１．２〜０．４５μｍのフィル
ター使用）を用いて不溶物を除去する。このときのムチ
ン濃度は０．１％であった。また、精密濾過に要した時
間は約３時間であった。次いで、限外濾過装置（アミコ
ン社製ダイアフローホローファイバーシステムＤＣ３０
型、カートリッジＨ１０Ｐ１００使用）を用いて分子量
１０万以下のものを排除した。限外濾過時の圧力は、
１．８ｋｇ／ｃｍ2 であり、流量は７リットル／ｍｉｎ
であった。また、限外濾過に要した時間は約１時間であ
った。不溶物を１１，０００×ｇ、２０分間遠心分離
後、凍結乾燥し、顎下腺ムチン（ＢＳＭ）５５０ｇを得
た。
【００３０】得られたＢＳＭのシアル酸（Ｓ）含量は
０．６９％、蛋白質（Ｐ）含量は０．６７％であり、Ｓ
／Ｐ比は１．０３であった。また、分子量分布は１０万
以上が９９．５％、１０万以下が０．５％であった。
尚、強熱残分は０．１７％であった。
０．６９％、蛋白質（Ｐ）含量は０．６７％であり、Ｓ
／Ｐ比は１．０３であった。また、分子量分布は１０万
以上が９９．５％、１０万以下が０．５％であった。
尚、強熱残分は０．１７％であった。
【００３１】実施例２ 実施例１の（ａ）と同様に操作して得た粗ムチン（顎下
腺１ｋｇ相当量）に２リットルの水を加えて溶解した。
このときのムチン濃度は０．５％であった。次いで、限
外濾過装置（アミコン社製ダイアフロー セル型、メン
ブレン１０ＹＭ１００使用）を用いて分子量１０万以下
のものを排除した。限外濾過時の圧力は２ｋｇ／ｃｍ2
であり、流量は４ｍｌ／ｍｉｎであった。また、限外濾
過に要した時間は約１時間であった。不溶物を１１，０
００×ｇ、２０分間遠心分離後、凍結乾燥し、ＢＳＭ５
ｇを得た。
腺１ｋｇ相当量）に２リットルの水を加えて溶解した。
このときのムチン濃度は０．５％であった。次いで、限
外濾過装置（アミコン社製ダイアフロー セル型、メン
ブレン１０ＹＭ１００使用）を用いて分子量１０万以下
のものを排除した。限外濾過時の圧力は２ｋｇ／ｃｍ2
であり、流量は４ｍｌ／ｍｉｎであった。また、限外濾
過に要した時間は約１時間であった。不溶物を１１，０
００×ｇ、２０分間遠心分離後、凍結乾燥し、ＢＳＭ５
ｇを得た。
【００３２】得られたＢＳＭのシアル酸（Ｓ）含量は
０．６５％、蛋白質（Ｐ）含量は０．６４％であり、Ｓ
／Ｐ比は１．０２であった。また、分子量分布は１０万
以上が９０．１％、１０万以下が９．９％であった。
０．６５％、蛋白質（Ｐ）含量は０．６４％であり、Ｓ
／Ｐ比は１．０２であった。また、分子量分布は１０万
以上が９０．１％、１０万以下が９．９％であった。
【００３３】比較例 実施例１の（ａ）と同様に操作して得た粗ムチン（顎下
腺１００ｋｇ相当量）に少量の水を加えて溶解し、セロ
ハンチューブに詰めて流水に対して４日間透析・脱塩し
た。内液を濾過後、凍結乾燥し、ＢＳＭ ５００ｇを得
た。
腺１００ｋｇ相当量）に少量の水を加えて溶解し、セロ
ハンチューブに詰めて流水に対して４日間透析・脱塩し
た。内液を濾過後、凍結乾燥し、ＢＳＭ ５００ｇを得
た。
【００３４】得られたＢＳＭのシアル酸（Ｓ）含量は
０．６５％、蛋白質（Ｐ）含量は０．６７％であり、Ｓ
／Ｐ比は０．９７であった。また、分子量分布は１０万
以上が７１．４％、１０万以下が２８．６％であった。
尚、強熱残分は０．２８％であった。
０．６５％、蛋白質（Ｐ）含量は０．６７％であり、Ｓ
／Ｐ比は０．９７であった。また、分子量分布は１０万
以上が７１．４％、１０万以下が２８．６％であった。
尚、強熱残分は０．２８％であった。
【００３５】
【発明の効果】上記実施例及び比較例のデータから明ら
かなように、本発明の方法によれば、分子量１０万以下
のムチン断片含量が少なく、従来方法に比べ、分子量１
０万以上のムチンが高度に濃縮精製されることがわか
る。
かなように、本発明の方法によれば、分子量１０万以下
のムチン断片含量が少なく、従来方法に比べ、分子量１
０万以上のムチンが高度に濃縮精製されることがわか
る。
【００３６】また、無機質不純物も少なく、限外濾過に
より、分子量１０万前後での物質の分離と同時に脱塩・
濃縮もなされるという利点もある。
より、分子量１０万前後での物質の分離と同時に脱塩・
濃縮もなされるという利点もある。
【００３７】更に、粗ムチンの精製に要する時間は、本
発明の限外濾過によれば、従来の方法に比べて、はるか
に短時間である。
発明の限外濾過によれば、従来の方法に比べて、はるか
に短時間である。
Claims (4)
- 【請求項１】 哺乳動物の唾液腺から得られた粗ムチン
を限外濾過することを特徴とするムチンの精製方法。 - 【請求項２】 限外濾過の前に精密濾過を行う請求項１
に記載の方法。 - 【請求項３】 粗ムチンが顎下腺から得られたムチンで
ある請求項１に記載の方法。 - 【請求項４】 出発物質である粗ムチンが、哺乳動物の
唾液腺の溶媒抽出、遠心分離または濾過、上清のｐＨ調
整、濾過、セチルピリジニウムクロライド（ＣＰＣ）ま
たはセチルトリメチルアンモニウムブロマイド（セタブ
ロン）による沈殿、塩化カルシウム等による溶解、エタ
ノールによる沈殿、遠心分離または濾過の操作を順次行
うことにより得られた固体をさらにエタノール洗浄する
ことにより得られたものである請求項１または２に記載
の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4117076A JPH05310799A (ja) | 1992-05-11 | 1992-05-11 | ムチンの精製方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4117076A JPH05310799A (ja) | 1992-05-11 | 1992-05-11 | ムチンの精製方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05310799A true JPH05310799A (ja) | 1993-11-22 |
Family
ID=14702814
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4117076A Pending JPH05310799A (ja) | 1992-05-11 | 1992-05-11 | ムチンの精製方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH05310799A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998048767A1 (fr) * | 1997-04-28 | 1998-11-05 | Teikoku Hormone Mfg. Co., Ltd. | Humectant, preparation cosmetique et produit medicinal contenant cet humectant |
| US7829679B2 (en) | 2005-08-12 | 2010-11-09 | Riken | Mucin-type glycoprotein and use thereof |
| EP3967701A1 (en) * | 2020-09-15 | 2022-03-16 | Technische Universität München | A method of isolating mucin based on filtration steps |
| US11306128B2 (en) * | 2018-12-21 | 2022-04-19 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Methods of purifying Mucin |
-
1992
- 1992-05-11 JP JP4117076A patent/JPH05310799A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998048767A1 (fr) * | 1997-04-28 | 1998-11-05 | Teikoku Hormone Mfg. Co., Ltd. | Humectant, preparation cosmetique et produit medicinal contenant cet humectant |
| US7829679B2 (en) | 2005-08-12 | 2010-11-09 | Riken | Mucin-type glycoprotein and use thereof |
| US11306128B2 (en) * | 2018-12-21 | 2022-04-19 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Methods of purifying Mucin |
| EP3967701A1 (en) * | 2020-09-15 | 2022-03-16 | Technische Universität München | A method of isolating mucin based on filtration steps |
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Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20011220 |