CS202096B2 - Method of preparing analogues of somatostatine - Google Patents
Method of preparing analogues of somatostatine Download PDFInfo
- Publication number
- CS202096B2 CS202096B2 CS782580A CS258078A CS202096B2 CS 202096 B2 CS202096 B2 CS 202096B2 CS 782580 A CS782580 A CS 782580A CS 258078 A CS258078 A CS 258078A CS 202096 B2 CS202096 B2 CS 202096B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- group
- phe
- acid
- groups
- lys
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 15
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical class C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 title claims 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 19
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims abstract description 5
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 claims description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 6
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 abstract description 6
- 210000004211 gastric acid Anatomy 0.000 abstract description 3
- 230000010243 gut motility Effects 0.000 abstract 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 50
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 26
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 26
- -1 amino- Chemical class 0.000 description 24
- 239000011347 resin Chemical group 0.000 description 19
- 229920005989 resin Chemical group 0.000 description 19
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 15
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 13
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 13
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 12
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 12
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 12
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 11
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 11
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 10
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 10
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 10
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 9
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 8
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- KZSNJWFQEVHDMF-SCSAIBSYSA-N D-valine Chemical compound CC(C)[C@@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WTEOIRVLGSZEPR-UHFFFAOYSA-N boron trifluoride Chemical compound FB(F)F WTEOIRVLGSZEPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethanethiol Chemical compound CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 5
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 5
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 5
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 4
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XVOYSCVBGLVSOL-UHFFFAOYSA-N cysteic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CS(O)(=O)=O XVOYSCVBGLVSOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000027119 gastric acid secretion Effects 0.000 description 4
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 4
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 4
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 4
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 4
- 229910015900 BF3 Inorganic materials 0.000 description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 3
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 3
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000013020 final formulation Substances 0.000 description 3
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 3
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical class CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102400000921 Gastrin Human genes 0.000 description 2
- 108010052343 Gastrins Proteins 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N chembl413654 Chemical compound C([C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 2
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 2
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-N thioglycolic acid Chemical compound OC(=O)CS CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- IMRYETFJNLKUHK-UHFFFAOYSA-N traseolide Chemical compound CC1=C(C(C)=O)C=C2C(C(C)C)C(C)C(C)(C)C2=C1 IMRYETFJNLKUHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 125000006273 (C1-C3) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- JVSFQJZRHXAUGT-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethylpropanoyl chloride Chemical compound CC(C)(C)C(Cl)=O JVSFQJZRHXAUGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YVOOPGWEIRIUOX-UHFFFAOYSA-N 2-azanyl-3-sulfanyl-propanoic acid Chemical compound SCC(N)C(O)=O.SCC(N)C(O)=O YVOOPGWEIRIUOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WTUCTMYLCMVYEX-UHFFFAOYSA-N 4,4,4-trifluorobutanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(F)(F)F WTUCTMYLCMVYEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000599 Acromegaly Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800001982 Cholecystokinin Proteins 0.000 description 1
- 102100025841 Cholecystokinin Human genes 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 206010016717 Fistula Diseases 0.000 description 1
- 102400000321 Glucagon Human genes 0.000 description 1
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000297179 Syringa vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000004338 Syringa vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000000218 acetic acid group Chemical class C(C)(=O)* 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 150000008043 acidic salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 125000005076 adamantyloxycarbonyl group Chemical group C12(CC3CC(CC(C1)C3)C2)OC(=O)* 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 235000015241 bacon Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229940077388 benzenesulfonate Drugs 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M benzenesulfonate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 1
- YSMHTFWPDRJCMN-UHFFFAOYSA-N butan-2-yl carbonochloridate Chemical compound CCC(C)OC(Cl)=O YSMHTFWPDRJCMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000004744 butyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical class [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- FZFAMSAMCHXGEF-UHFFFAOYSA-N chloro formate Chemical compound ClOC=O FZFAMSAMCHXGEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940107137 cholecystokinin Drugs 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003113 cycloheptyloxy group Chemical group C1(CCCCCC1)O* 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000002183 duodenal effect Effects 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- DNORZUSMZSZZKU-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-[5-(4-chlorophenyl)pentyl]oxirane-2-carboxylate Chemical compound C=1C=C(Cl)C=CC=1CCCCCC1(C(=O)OCC)CO1 DNORZUSMZSZZKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 230000003890 fistula Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 1
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 1
- 125000006277 halobenzyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229910000042 hydrogen bromide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- JCCNYMKQOSZNPW-UHFFFAOYSA-N loratadine Chemical compound C1CN(C(=O)OCC)CCC1=C1C2=NC=CC=C2CCC2=CC(Cl)=CC=C21 JCCNYMKQOSZNPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000017066 negative regulation of growth Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000006503 p-nitrobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1[N+]([O-])=O)C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- AHWALFGBDFAJAI-UHFFFAOYSA-N phenyl carbonochloridate Chemical compound ClC(=O)OC1=CC=CC=C1 AHWALFGBDFAJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 125000001501 propionyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 210000001187 pylorus Anatomy 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 125000004149 thio group Chemical group *S* 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 125000003944 tolyl group Chemical group 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 125000000430 tryptophan group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/655—Somatostatins
- C07K14/6555—Somatostatins at least 1 amino acid in D-form
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/16—Somatostatin; related peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/28—Bound to a nonpeptide drug, nonpeptide label, nonpeptide carrier, or a nonpeptide resin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu přípravy tetradekapeptidu vzorce I i-------------------.---———)
D-Val-Gly-L-Cys-L-Lys-L-Asn-L-Phe-L-Phe-L-Trp-L-Lys-L-Thr-L-Phe-L-Thr-LSSerLL-yys-OH (I) a jeho ·farmaceuticky vhodných edičních solí s kyselinami. Vynález se týká_ též intermediárních sloučenin připravených při syntéze tohoto tetradekapeptidu
SommtooSaain · (rovněž · známý jako inhibiční faktor uvolňování sommaotropinu) je tetra— dekapeptid vzorce r
L·-A].a—GLy—L—CýS—d^í^s—L^Asn-L-ρ’ha—^—pha-L-Trp—d-lyš-Thr—Pha—LřThr~L-Sar—Cy^s^-^0H.
Tento tetradekapeptid byl izolován z extraktů . hypothalmu ovcí a zjistilo se, že . je účinný při ínhibici sekrece růstového hormonu, rovněž známého jako sornmaotropin, viz P. Brazeau, W. Vale, R. Burgus, N. Ling, M. Butcher, J. River a R. GuíHemin, · Science, _179. 77 (1973)·
Kromě toho patent USA č. 904 594 uvádí přírodní sommatosatin a generickou třídu jirých sloučenin s didekapeptidovou sekvencí odppoíddjící polohám 3 až 14 přírodního hormonu.
Sloučenina účelně označoval jako D-Ala* 1 * * * * * * * —somataftatin byla kromě toto popsána v práci Perland a dalš^ Mo^e^ar and C^loLar Endoorinology, 4 79 až 88 (197<э). D-Ala1—somato statin ačkoli je strukturně · steroo^omerem ^i^rocLnilho. ^Мэ1-^^0^ latinu,· je přibližná polovičně účinný ve srovnání _ s přírothiím sommaostatinem při in vivo ínhibici sekrece žalu— ·_<_ ' deční_kyseliny. Sloučenina podle vynálezu, D-Val1—stmaaotSatin, se liší od. D-Ala1—somatostatinu subssitucí dvou vodíkových atomů m^e^l^^Llskupiňa^i.. Při úvahách o potenciální feuma202096
20209.6 kologické účinnosti D-Val'-somatostatinu, by se mělo dojít к závěru, že jeho účinnost by měla být . p.odotoá jato činnost --Ala'-tsmaaostat* i.nu. Teorettoty by tedy bylo možno předpok^daty že D-VaP-somatoototin bude méně účinný než pMrotoí ^ιήο^ jako to vivo tohibitor tekrece žaludeční kysaltoy. --Vall-ssmatosSatto má věak účinnost poněkud vySS! než je účinnost porodního hormonu. Tento výs].edek ukazuje, že činnost nebylo možno předpokládat na základě srovnání se strukturně podobnými známými sloučeninami.
Struktura biologicky účinného tetradekapeptidu vzorce I definovaného shora (a jeho_netoxických adičních solí) se liší od tsma1ostatinu a přísluěrých solí přítomností D-vaiinového zbytku v poloze I místo-L-alnitoové ho zbytku. Účelně je tetradekapeptid vzorce I označován jako D-Val' -snmatontatii.
Vynález se tedy týká způsobu přípravy sloučeniny vzorce I
H-D-Va^Gty-L-Cys-L-Lys-L-Asn-L-Phe-L-Phe-L-Trp-L-Lys-L^hr-L-Phe-L-^ir-L-Ser-L-Cys-OH (I) a jejích farmaceuticky vhodných netoxických adičních solí s kyselinami a meziproduktů obecného vzorce II
R-D-Vaa-Gly-L-Cys(Rj )-L-Lys(Rg)-L-Asn-L-Phe-L-Phe-L-Trp(Rj )-L-Lys(R2)-L-Thr(R3 bL-Phe-L-ThrR j-L-Ser (R^-L-CysCR, )-X (II) kde
R představuje vodík nebo · ochrannou skupinu alfa-minstkupiny,
R| představuje vodík nebo ochrannou skupinu thistkupiny, Rg představuje vodík nebo ochrannou skupinu epsílon-iminoskupiny, i každý ze symbolů
R3 a R^ představuje vodík nebo ochrannou skupinu hydroxyskupiny,
Rj představuje vodík nebo formylskupinu a
X představuje hydroxyskupinu nebo skupinu vzorce pryskyřice
-O-CH kde pryskyyicí je polystyren, s tou podmínkou, že když
X představuje hydroxyskupinu, každý ze symbolů R, Rp Rg, R3> R^ a Rj představuje vodík a když X představuje zbytek vzorce pryskyřice každý ze symbolů
R, R, Rg, R3 a R^ je odlišný od vodíku.
Nový tetradekapeptid vzorce I,
D-Val-Gly-L-Ctys-L-Lys-L-Asn-L-Phe-L-Phe-L-Trp-L-Lys-L-Thr-L-Phe-L-Thr-L-Ser-L-Cys-OH (!) se připravuje reakcí odppoídajícího tet.radekapept.idu obecného vzorce III . H-LD-Val-Gly-L-Cys-L-Lys-L-Asn-L-Phe-L-Phe-L-Trp-L-Lys-L-Thr-^L-^I^h^e-^L-^Thi^-^I^-^S^ír-LL4^2S--^H (III) s oxidačním činidlem. Touto reakcí se převedou dvě sulíhydrylové skupiny na disulfidový . můstek.
Jako farmaceuticky vhodné netoxické adiční soli s kyselinami přicházejí v úvahu adiční soli s organickými a anorganickými kyseliními, například soli odvozené od kyseliny chlorovodíkové, sírové, sulfonových kyselin, kyseliny vinné, fumarové, bromovodíkové, .glykolové, citrónové, maleinové, fosforečné, jantarové, octové, dusičné, benzoové, askorbové, p-toluensulfonové, benzensulfonové, naftalensulfonové a propionové. Přednostními adičními . solemi s kyselinami jsou acetáty. ScLí-čni soli s kyselinami se připravují běžnými způsoby.
Jako příklady intermediámích sloučenin obecného vzorce II
R-D-Val-Gly-L-Uys(IR)-L-Lys(R2)-L-Ssn-L-PheLL-Phe-LL -Trp(Rj )-L-Lys (R^-L-ThrR bL-Phe-L-ThrR )-L. -Ser^-L-Cys^-X .(II) kterým se dává přednost, lze uvést sloučeninu vzorce III,
H-D-Vaa-Gly-L-Cys-L-Lys-L-Asn-L~Phe-L-Phe-L-Trp-L-Lys-L-Thr-L-Phe-L-Thr-L-SeL-L-CyL-OH(III) a sloučeninu vzorce'
N- C^O-C-L^^-al-L^l·lsL^-(]M^]^(^y^s-^:^-(C^z(^-l·-L^ys-^:^-^Aí^]^-L·L -Phe-L-Phe-LЧFor)Trp-L-(CBz-C)LLys-L-(Bzl)TJlhrLLLPhe-L- (Bzl^lw-L-tezl^er-L- (PMB)Cys---CH2pryskyřice
Shora uvedené vzorce definující intermediální sloučeniny, zahrnují též sloučeniny, obalující ochranné skupiny amino-, hydroxy- a thio-(sulfUydryl)-skupin. Ochranné skupiny musí mt vlastnosti splňující dvě hlediska. Jednak musí ochranné skupiny zabraňovat tomu, aby reaktivní seskupení příoomné v určité mooekule podlehlo reakci během·vystavení molekuly podmínkám, které by jinak měly za následek zánik tohoto reaktivního seskupení. Ochranná skupina však musí mít na druhé straně takovou povahu, aby ji bylo možno snadno oddtěpit za současné regenerace půvoťdií reaktivní . skupiny, a to za tEkových podmínek, které by neměly nežádoucí vliv na jiné části mooekuLy. Skupiny vhodné k těmto účelům, tj. k ochraně . amino-, hydroxy- a ' thioskupiny, jsou odborníkovi dobře známé. Popisu těchto ochranných skupin a jejich použití byly věnovány celé svazky. Jedním z nich je práce Protective Groups in -rgonic ChhΠlíiSrs, red. ‘ J. F. W. Pc—ume, tyd., Plením Press, New York, 1973.
Ve shora, uvedených vzorcích definujících intexraediární sloučeniny představuje R bučí alfa-mini cký vodík, nebo ochrannou skupinu alfa-minoskupiny. Ochranné skupiny aminoskupiny jsou dobře známé všem odbornílrfta v chemii . peptidů a mnohé · z nich'jsou uvedeny ve shora citované McCOnieovš práci v .kapitole 2, .jejímž autorem je J. W. Bartoň. Jako ilustrativní příklady takových ochranných skupin lze uvést benzyloxykarboinrl·’, p-chlorbenzyloxykarboinl·, p-brombenzzlooxyarbornl-, t-chltrbezyyltxykarbtlzУ., 2,6-šichlorbenzyltxyУarboιnУL, 2,4-dichlorbenzyloxkarbonyl-, o-brombenzyloxykarbonyl-, p-methoDxrbenzyloíxkeabonyl·-, p-nitrobenzyloxykiarbonyl-, terc.Outk-oxkkarboyk--(BOC), t-ímkLoχykarbonnУ-, 2-(p-Oifezylylie8oprnpyloxykarbonyl-(BpOC), admilZyloэQУ:Уlbbtzl-, i sopropyloχУ£arboInrl-, cyklopentyltxykarbbinl, cy ^0116^10^1^^0^1-, cykloheptylox/karboinl-, t^fen^m!!^--^!!^) a p-toluensuLfonylskupinu. Přednostní ochrannou skupinou alfa-minoskupiny ve významu R je terc.butyloxykarboinylskupina.
Rj představuje bud atom vodíku, nebo sulfhydrylovou skupinu cysteinu nebo ochrannou skupinu sulffcydrylového substituentu. Mnohé tyto ochranné skupiny jsou popsány v Mcíhmeovš· práci citované shora v kapitole 7, jejímiž autory jsou R. G. Hickey, V. R. Rao a W. G.. Rnodes. Jako ilustrativní . příklady těchto ochranných skupin lze uvést p-metho)χbbУzyl-, benzy!-, ρ-tolyl-, .ιμ^Ι^Ι-, acetem-domme!^-, trityl-, ρ-nitrobenzyl-, terc.butyl-, isobutyloxymeehylskupizu a jakékoliv z velkého· počtu triyLOovýcn derivátů. Další příklady lze nalézt například v encyklopedii Houb®n-Weyl, Methodes der Orgunischen Chemie, Synthese von Peptiden, sv. a 15/2, (1974), Stuttgart, NSR. Přednostní ochrannou skupinou sulibydrylskupiny ve významu Rf je p-me thooqfb Bezy i skupina.
Rg představuje bud vodík na epsílon-minoskupině lysinového zbytku, nebo vhodnou ochrannou skupinu epsílon-mintskupiny. Jako ilustrativní.příklady mohou sloužit skupiny uvedené shorajekt Skupiny vhodné pro ochranu · alfa-^miztsУupizy. Jako. typické skupiny vhodné k tomuto účelu lze uvést benzyltxykarbornl, terč. buty lo^ykarbojnl-, terc.amlozxykarbtnyl-, adamany lojyl kaboonl, p-metht:χrbezzylo:χrkarboxyl, p-dhlorbezzyloxykarbojnrl- , p-brtmbbУzyloDχУУlbbtzl-, t-chLorbezyχltxykarboInl-, 2,6-dicnlorbezzylохУсугЬоопУ-, 2J4-dichlorbezzlloχlkarboozlι, ο-.ζ^^ζζ^γΙοτο^γ^οζΙ-, p-nittobezyyloxykyrЬопп1-, isopropyloxykarbornl“, . cyklthexrltxrkyrboinl-, cykloheptyltxykarboinylr- a p-toluensulfonylsyupinu.
Jak bude zřejmé z dalšího popisu, způsob přípravy tetrašeУaptišů obecného vzorce I zahrnuje periodické odštěpování ochranné skupiny alfa-mintskupiny z term tělní 8^1^11ny, příOomné v.peptidovém řetězci. Jediným omezením, pokud se týče totožnosti ochranné skupiny epsílon-lmizoskupizy lysinového zbytku, spočívá tedy v tom, že ochranná skupina musí mít takovou povahu, aby se neodštěpovala za podmínek používaných pro selektivní odštěpování llfa-ιmiztskupizy. .
. Vhodná volba ochranných skupin alfa-imino a epsíloz-rninoskupin je pro běžného odborníka v chemii peptidů snadná, je pouze třeba uvážit relativní snadnost, s jakou lze jednotlivé ochranné skupiny odštěpit. Tak například skupiny jako je 2-(p-bifenylyl)sooptopyloxyУarbonllsУupina (BpOC) a У^У^Уц^^ jsou . velmi labilní a lze je odštěpovat i v přítomnosti slabé kyseliny. Středně silná kyselina, jako kyselina chlorovodíková, trifúuoroctová nebt fluorid boritý v kyselině octové je .zapotřebí prt odštěpení jirých . skupin, jako terc.b^iLyloxyl^í^irbť^r^n^l·, terč. amyo^xlkarbonll, . lšamilZylotylУlbbonll,a p-methoxybezzyltxyУlrbtnylskupiny.
Prt odštěpení jiných ochranných skupin je nutno pouuít ještě silnějších kyselin, . tak například odštěpování benzyloxikarboonl-, haltgenbenzylt:χУcεl?bbozl-э p-nittobeIУyLLtxykar bony!-, cykl·ollkyoxykarbonyl- a isoprtpyloxykarbozylskupiny vyžaduje silně kyselé podmínky, tj. použžtí brtmovodíku, fluorovodíku nebo yrifluoracetátu bromitého v kyselině.' trifluortcttvé. Slmiořyjmё/ že za použítí silnějších kyselin se rovněž odštěpí i všechny labilnější skupiny. Při volbě ochranných skupin .aminoskupin je tedy třeba zaaistit, aby skupina na alfa-mintskupině byla labilnější než ochranná skupina epsíl·on-!mintsУupizy a podmínky odštěpování musí být . selektivní, . aby docházelo jen k odštěpování ochranné skupiny alfa5
-aminoskupiny. - Přednostní kombinaci ochranných skupin vyhovující těmto podmínkám je kombinace o-chlorbenzyloxykarbonyl- nebo'cyklopeityloxykarioiylskupiny ve významu Rg a terc-butyloaykarbonylskupiny jako ochranné skupiny alfa-minoskupiny používané u každě aminokyseliny adované na řetězec polypeptidu.
Skupiny-Rj a Rj představují hydroxylové vodíky,neio ochranné skupiny alkoholické,hydroxyskupiny threoninu a šeřinu. Mnohé takové ochranné skupiny jsou popsány ve.shora citované McOaieově práci, kapitole 3, jejímž autorem je C. B. Reese. Jako typické příklady takových ochranných skupin lze uvést Cj-Cj alkylskupiny, jako mee^l“, ethyl- a terc.butylskupinu, ienz.ylskupinu, suistituovEnou ienzylskupinu, jako je p-m^^^hi^zx^i^i^e^zyyl·, p-nitrvieniyl“^ p-chl.orienzyl- a o-chlvrienzllsktpina, Cj-Cj alkazvylskupiza, jako je ЮгьУ”, acetyl- a propionylskupina. trifeyii ethyl skupinu (tritySskupinu). Když jsou Rj a_ Rj ochranné skupiny, s výhodou se v oiou případech jako tyto skupiny volí ienzylskupiny· Skupina Rj představuje iud vodík, neio formylskupinu a definuje skupinu
tryptoarniového zbytku. Formlskupina slouží jako ochranná skupina. Poožžtí této ochranné skupiny není obiigatorní, a proto Rj může představovat iud vodík (skupina nechráněná na dusíku), neio form/lskupinu (skupina chráněná na dusíku).
Skupina X definuje’povahu karboxylové termin^Lní skupiny tetradekapeptddového řetězce.
Může jí iýt hydroxyskupina,· a v takovém případě - se jedná o volnou karioxlskupinu. Může kromě Xoho znamenat pevný pryskyřicový nosič, ke kterému je teiminální - karioxylová skupina pegtidu vázána v průiěhu jeho syntézy. Ziytek pevné pryskyřice lze znázornit vzorcem pryskyřice
Přioom platí, že vždy, když X představuje hldrvxys·klxpinu, znamená každý ze symbolů p, R- - p-, n,, R- o p- vodík. Když X představuje peVimý pryskyřičný nosič, představuje každý ze symbolů R, Rj, Rg, Rj a R^ vždy ochrannou skupinu.
V popisu je používáno následujících zkratek, z nichž většina jsou zkratky v tomto oboru iěžně zavedené.
Ala - slanin
Asn - asparagin ,
Cys - cystein
Gly - glycin
Lys - lysin
Phe - fen^lalanin ·)
Ser - ·· serin
Thr - i^onin.
Trp - tryptofan
Val - valin
DCC · - NlN-dicyklohexylkariodiimid
JMF , - N,N-dimethylfomiamid
BOC - terc.iutyloxykarionyl
RMB _ p-methoxyienzyl . CBzOC - o-chlorbenzyloxykarlonll
CPOC - cyklopentyloxykarionll
Bzl - benzyl
For - ťoímyL
BpOC - 2-(p-biferylyl)ioopoopy0o7ykarbonyl .
I když volba konkrétních ochranných skupin, · kterých se má použít při přípravě sloučenin obecného vzorce I je v rozsahu zkušeností odborníka v syntéze peptidů, je samoořejné, že.sekvence reakcí, které musejí být provedeny, ovlivňuje volbu konkrétních ochranných skupin. Jinými slovy zvolená ochranná skupina musí být stálá jak · vůči použitý reckčním složkám, · tak za podmínek·následujících reakčních stupňů. Tak například, · jak jií bylo v určitém rozsahu uvedeno, musí zůstat konkrétně použitá ochranná skupina netknuta za podmínek použitých při odštěpování ochranné skupiny aLfa-minoskupiny terminálního· zbytku aminolkryeliny peptidového fragmentu· při přípravě pro kondenzaci následujícího aminokyselinového fragmentu na peptidový řetězec. Je rovněž důležité zvoUt jsko ochrannou skupinu takovou skupinu, která zůstane netknuta během budování peptidového řetězce a kterou Lze snadno odštěpit po skončení syntézy požadovaného tetradekapeptidového produktu. Všechny ^^^сУ^ру jsou však v rozsahu zkušenooltí odborníka v tomto oboru. Jak je ze shora uvedené diskuse zřejmé, mohou ee tetradekapeptidy obecného vzorce I připravovat syntézou v pevné fázi. Tato syntéza spočívá v postupném· budování peptidového řetězce počínaje na terminálním uhlíkovém konci peptidu. Většinou se postupuje tak,·že se nejprve cystein váže prostřednictvím své · karboxylová funkční skupiny k pryskyřici, reakcí cysteinu s chráněnou aminoskupinou a chráněnou sulfhydrylovož skupinou s chlormethylovanou nebo hydrox^Deti^lovanou orřskyřicí. Příprava hydro^^etuplované pryskyřice je popsána v práci Bodnnszky a další, Chem. Ind. (Loníýn), J§, . 1597 až 1589 (1966). CihLormethylovaná pryskyřice je obchodně dostupná (Lab Systéme, lne., San Mateo, Cd-iforata, USA).
Ρϋ provádění vazebné reakce karboxylové funkční skupiny cysteinu a pryskyřice se nejprve chráněný cystein převede na česnou sůl. Tato sůl se pak nechá reagovat s prysk^icí způsobem popsaným v práci B. F. Gisin, Helv. Chim. Acta, ·56« 1476 · (1973)·· Alternativně se může cystein vázat k prysk^y-ici· tak, že se · jehozkarboxylová funkční · skupina nejprve běžným způsobem aktivuje. Tak například se může nechat cystein reagovat s prysl^i·^ v přítomnoasi sloučeniny karboxysУžpinu, jako je Ν,N*-iicyУlshexylУarbodiieid (DCC).
Po navázání volné karboxyskupiny cysteinu na pryskyřičný nosič se začne postupně budóvat peptidový řetězec, postupnou kondenzací jednotlivých aeinolkřilin·k N-terminální části peptidového řetězce. Přitom je tedy zapotřebí v každém stupni odštěpPt ochrannou Skupinu alf z aeinoOyřslinř v tenninální části peptidového fragmentu a pak se připojí k volnému a · reaktivnímu N-konci' terminální aminolkyeliny' následníci · aminokyselinový zbytek. Oddtěpování ochranné skupiny alfa-minoskžpinř se může provádět v pííooínosti kyseliny, jako kyseliny bromovoodkové, chlorovodíkové, trifuuo routové, o-tolženižlfonové, benzensúliOnoot, · naftalensuffonové a octové za vzniku odpe^ova^ící adiční soli produktu s kyselinou.
Jinou metodou odštěpování ochranné skupiny aeinoθкup'inř je působení fluoridem boriým. Tak například působením iiethyLethepátž fluoridu boritého v ledové kyselině, octové se fragment peptidu s · chráněnou aminoskupinou převede na kommlex s fluoridem boritým, který · se pak převede na volný' peptidový . fragment působením zásady, · jako vodného hř<aгoégθeuUlLčitanž · draselného. Může se použžt kterékoli z těchto metod za předpokladu, že se jí dosáhne odštěpení ochranné skupiny N-terminální aLfa-minlsУžoiny bez porušení jakýclhkli dalších ochranných skupin přítomných v peptidovém řetězci. S ohledem na tento požadavek se přednostně odštěpuje N-terminální ochranná skupina ·za ooužítí kyseliny trilžloroctoot. Obvykle se štěpení provádí při teplotě od asi 0‘ °C do asi teploty místnoosi.
Po odštěpení ochranné skupiny v N-terminální poloze je získaný produkt obvykle ve formě adiční soli s kyselinou, které bylo použito pro · odštěpování ochranné skupiny.·Tento prodkt se pak může převést na sloučeninu s volnou aminoskupinou působením ·slabé zásady, ty pícky terciárního' aminu, jako pyridinu nebo tríehyylminu.
Nyní je řetězec peptidu připraven pro reakci s následující aminoOkselinou. Reakce s aminookselinou ee může provádět kteroukooi z několika známých technik. Pro připojování následnicí ' aminookseeiny k N-konci řetězce peptidu se používá aminookyseiny, která má' volnou karboxyekupinu, ale která má vhodně chráněnou alfa-minoskupinu a všechny .. ostatní popřípadě příoomné reaktivní skupiny. Aninooysseinu je .pro reakci s N-koncem řetězce peptidu třeba aktivovat. Jedním ze způsobů aktivace, kterého lze při syntéze pouužt, je. převedení aminokyseliny na směsný anJhylrid. Eřioom se volná karboxylová funkční . skupina αminoSksslUny . aktivuje reakcí s jinou kyselinou, typicky s derivátem kyseliny uh.ičité ve formě chloridu kyseliny. Jako příklady takových chloridů kyselin, kterých lze použít pro tvorbu směsných anhydridů, lze uvést ittylchlsrfsrmiát, fen^^lch:Lorformií^t, sek.butylchlorformiát, isobutylchlorformiát a pivaloylchlorid. ,
Jirým způsobem aktivace karboxylová funkční skupiny aminoOyssliny pro kondenzaci s řetězcem peptidu, je převedení aminookysliny na reaktivní esterový derivát. Jako . příkaaytakových reaktivních esterů lze uvést 2,4,5-trictlorfioylistir, pentachlorfi]oySester, p^j^iti^ofen^^^i^í^ter, ester vzniklý z 1-hkdroxxbbnnooriazolu a ester vzniklý z N-hydrooxrsiuccinimidu. Jiným způsobem připojování C-terminální části αminoOkselioy k peptidovému fragmentu je způsob, při kterém se kondenzace provádí v příoomnoti alespoň ekvimmoárního mnoství NN-dicyklohexylkarbodiimidu (DCC). Posledně uvedeného způsobu se . přednostně používá při přípravě tetradekapeptiiu obecného vzorce II, kde X představuje skupinu vzorce —O—CH.
pryskyřice
Po připravení řetězce peptidu s poSadovEným sledem amino0kssiin se.-může výsledný peptid oc^^s^:ra^i.t z pryskyřičného nosiče. To se provádí působením fluorovodíku na tetradekapeptid vázaný k prysk^ici s chráněnými reaktivními skupinami. Působením fluorovodíku se odštěpí peptid od pryskyřice, kromě toho se jím však odštěpí všechny ostatní ochranné skupiny příoomné na reaktivních skupinách peptidového řetězce, stejně tak jako ochranná skupina alfa-minoskupiny terminální aIninoOksei.iny. KdyS se peptid odštěpuje od pryskyřice . za současného odštěpení ochranných skupin působením fluorovodíku, přednostně.se . reakce provádí v přítomiosti anisolu. Zjistilo se, Se přítomnost anisolu inhibuje potenciální alkylaci určitých zbytků aminookysein přítomných v řetězci peptidu. Kromě toho se odštěpování přednostně provádí v přítomnooti ethylmerkaptanu. Ethylmerkaptan slouSí k ochraně iniolového kruhu trypťof nového zbytku . a kromě toho usnadňuje . převedení chráněných cysteinových zbytků do t^olové formy. RovněS v případě, Se R představuje formy lskupinu, usnadňuje příoomnost ethylmerkaptanu. odštěpení formylekupioy fluorovodíkem. ,
Po shora popsaném štěpení se získá jako produkt peptid s přmrným řetězcem obsahujícím 14 zbytků aminookysein. Pro získání konečného.produktu obecného vzorce . I je zapotřebí oxidovat titraiekapeptii β přmným řetězcem za takových podmínek, za . kterých se. eulfhyiralsvá skupiny pří^^oomné v mmlekule po jedné. na kaSdém zbytku cysteinu zo2^í.íi^;^:í za vzniku disulfidového můůtku. Oxidace se může provést tak,.Se se na zředěný roztok lineárního tetradekapeptidu . působí některým z řady . oxidačních činidel, jako je například jód a ^^уео^ draselný. Jako oxidačního činidla lze téS použít vzduchu, přičemS pH směsi se obvykle udrSuje od asi 2,5 do asi 9,0, přednostně od asi 6,2 do asi 7,2. KdyS se jako oxidačního činidla používá vzduchu, bývá koncentrace roztoku peptidu obvykle niSší neS asi 0,4 mg peptidu/ml roztoku a obvykle ass'50 /ug/ml. Sloučeniny obecného vzorce I se mohou podávat teplokeeviým SUesčictů!m, včetně lidem kterýmkooi z těchto způsobů: orálně, sublinguálně, subkutánně, intrímuskulérně, UoI^i^í^^^í^o^Ózně i jinými způsoby. Všechny tyto sloučeniny jsou rovněS účinné, i kdyS ne v.Sdy ve stejné 'míře, jako inhibitory uvolňování růstového hormonu. Tento inhibiční účinek je prospěšný v těch případech, kdy je žádoucí léčit nadměrnou sekreci somatotropinu. Nadměrná sekrece somatotropinu může být spojena s nepříznivými poruchami, jako je juvenilní diabetes a akromegalie. Tyto sloučeniny mají rovněž jiné fyziologické účinky, jako je inhibice sekrece žaludeční kyseliny, užitečná při léčení vředů, inhibice exokrinní sekrece pankreasu, potenciálně užitečná při léčení pankreatitidy a inhibice sekrece inzulínu a glukagonu a snížení pohyblivosti střev, což je užitečné v gastrointestinální radiologii.
Rozmezí dávkování při sublinguálním nebo orálním podávání je přednostně asi 1 mg až asi 100 mg/kg tělesné hmotnosti za den. Dávkování při intravenózním, subkutánním nebo intramuskulárním podávání je v rozmezí od asi 10 xcg do asi 1 mg/kg tělesné hmotnosti za den a přednostně od asi >0 /Mg do asi 100 (4g/kg tělesné hmotnosti za den. Je samozřejmé, že dávkovači rozmezí je ve velké míře závislé na konkrétní léčené poruše a na její prudkosti.
Sloučeniny obecného vzorce I se mohou podávat orálně nebo sublinguálně ve spojení s farmaceutickým nosičem, například ve formě tablet nebo kapslí. Jako fářmaceutických nosičů se · používá běžných inertních ředidel a nosičů, jako například uhličitanu hořečnatého nebo laktózy ve spojení s běžnými desintegračními činidly, například kukuřičným škrobem a alginovou kyselinou a lubrikačními činidly, například stearanem hóřečnatým. Typicky je množství nosiče nebo ředidla v rozmezí od asi 5 do asi 95 %, vztaženo na konečný preparát a přednostně od asi 50 do asi 85 %, vztaženo na konečný preparát. Do konečného preparátu se též mohou přidat vhodné ochucovací přísady zlepšující chuť dávkovačích forem.
Když se mají sloučeniny obecného vzorce I podávat intravenózně, může se jako vhodných nosičů použít například isotonického roztoku chloridu sodného a roztoků fosfátových pufrů.
Následující příklady blíže objasňují přípravu sloučenin obecného vzorce I a meziproduktů. Příklady mají pouze ilustrativní charakter a rozsah vynálezu v žádném směru neomezují.
Příklad
Oxidace na D-Val -somatostatiri
Roztok redukovaného D-Val-somatostatinu (374 ml, teoreticky 175 mg) se zředí 147 ml 0,2 M kyseliny octové a 2 967 ml destilované vody na koncentraci 50 /zg/ml. Přidá se koncentrovaný hydroxid amonný, aby se pH směsi nastavilo na 6,7. Roztok se míchá při teplotě místnosti ve tmě po dobu 64 hodin a pak se zjistí Ellmanovou titrací, že oxidace je skončena.
Směs se za vakua zkoncentruje na objem asi 10 ml a přidá se 10 ml ledové kyseliny octové. Směs se odsolí na sloupci Sephadexu G-25F. Chromátografie se provádí za těchto podmínek:
| rozpouštědlo: | odplyněná 50% kyselina octová, |
| rozměr sloupce: | 50 x 900 mm, |
| teplota: | 26 °C, |
| rychlost toku: objem frakce: | 246 ml/h a 16,4 ml. |
Absorbance při 280 nm každé frakce se vynese oproti pořadí frakce do grafu. Získaná křivka obsahuje dvě velká maxima. První maximum je tvořeno agregovanými formami produktu a druhé maximum tvoří monom^rní produkt. Látka odpovídající druhému maximu se shromáždí [(frakce 49 až 64 (787 až 1 050 ml)] , a roztok se ve tmě lyofilizuje do sucha. Výsledná pevná látka se rozpustí v 15 ml odplyněné 0,2 M kyselině octové a nanese na sloupec Sephadexu G-25F. Chromátografie se provádí za těchto podmínek:
| rozpouštědlo: | odplyněná 0,2 M kyselina octová, |
| rozměry sloupce: | 50 x 1 500 mm, |
| teplota: | 26 °C, |
| rychlost toku: | 475 ml/h a |
| objem frakce: | 16, 6 ml. |
Absorbance při 280 nm každé frakce se vynese do grafu oproti · pořadí frakce. Získaná křivka obsahuje jedno velké maximum. W-sppktroškopie vikkauje', · že · hlavní část maxima je tvořena .produktem. Spoojí se frakce 157 až 172 (od 2 590 , do 2 855 ml eluátu, maximum odpovídá 2 667' ml proteklého eluátu) a ve tmě lyooilizující do sucha. UV-sppkkroskopik ukazuje, že výtěžek je 95 mg požadovaného (výtěžek vztažený na redukovanou formu 54,3 %).
Část výsledného produktu se rozpustí v 5 ml 50% kyseliny octové a znovu ohromatografuje na sloupci Sephadexu G-25F. 0hrommtoggrfie se provádí za těchto podmínek:
rozpoi^u^^těd^Lo: odplyněná 50% kyselina octová, rozměry sloupce: 25, x , 800 mm,.
teplota: 26 0C, rychlost toku: 53,2 ml/h a...
objem frakce: 8,77 ml.,
Absorbance při 280 nm každé frakce se vynese do grafu oproti pořadí frakce. Získaná křivka obsahuje jedno,velké maximum. UV-spekroskopie ukazuje, že hlavni část maxima je tvóřená produktem. Spoojí se frakce 56 až 60 (488 až 532 m., maximum = ·505 ml) a ve tmě lyofilizují do sucha.
Oppická otáčivost [11^26 = -42,1 (1% kyselina· octová). '
Analýza aminnkkУskin: .
Val 0,98, Gly 1,01, 20ys 1,81,·2Lys 1,99, Asn 0,95, 3Phe 2,94, Trp·0,80, 2Thr 1,91, Ser·0,85.
Shora uvedené výsledky jsou vyjádřeny jako poměry vzhledem k (Gly + Lys)/3 = 1,0. Provádějí se tři 21hodinové hydrolýzy:
1. v příoomiooti dkeeehylsuLfoxidu, aby se cystein oxidoval na cysteovou kyselinu,
2. za pouuití kyseliny thioglykolové, jako akceptoru,
3· bez akceptoru a bez oxidačního činidla.
Všechny uvedené hodnoty jsou průměry z těchto .tří hydrolýz s výjimkou
0ys a Ser - průměr pouze z hydrolýz 1. a 3·
Trp - hodnota pouze z hydrolýzy 2.
Phe - průměr pouze z hydrolýz 2. a 3.
'
D-Val spomattoPQtin byl zkoušen na psechijakožto · činidlo · pro in vivo inhibici sekrece žaludeční kyseliny. Šesti psům s chronickým píštěeem a Heidenhainovým · váčkem se vyvolá sekrece žaludeční kyseliny chlorovodíkové infuzí 0-terminálního·tetrapeptidu gastrinu při dávkování 0,5 ,Α/kg.h. Každý pes slouží sám sobě rovněž pro kontrolu. Při kontrolním pokuse se jeden den podává pouze tetrapeptid. Jiný den se šesti psům podává tetrapeptid a po jedné hodině sekrece kyseliny chlorovodíkové v ustáenném stavu se · 1 hodinu zavádí infuze D-SVal-somatostatinu v dávce 0,75 /^gkg.h. Pokračuje se v odebbrání vzorků žaludeční · kyseliny po dalších 1,5 hodiny při intervalu odběru 15 · minut.
Vzorky se v automatickém titrátoru titrují na pH 7. Meairnmání inhibični účinek D-VaťspommtooSatknu se extrapoluje proti·křivce dávka-odezva sommacosatinu a relativní účinnost analogu vůči účinnoosi sometGatatinu se vyjádří jako % aktivity. D-Vat'spomatcoPatkn inhibuje ustál.enou sekreci žaludeční kyseliny, vyvolanou G-teiminálním tktappeptdkem gastrnnem z·85,1 Λ 6,0 % (standardní střední chyba měřenn). Tento účinek je ekvivalentní účinku 0,935 z«;/k5.h sommaGosatinu. Reeativní aktivita této látky vůči · sommaGosatinu je tedy 125 %.
D-Vel'-somaú^atin byl rovněž ztoušen na při sni^vání jDOtytGi.vooti · střev psů při vědomí. Jako zkušebních zvířat se používá tří psů se zavedenými intralimenárními katery umístěnými v antru, duodenu a pyloru. Tlakové změny v lumeni střeva se zaznammi^víí v zařízení Visicorder za použití mmřičů napětí a miniaturních galvanometrů se světeniým paprskem.
Po ustavení ustáleného stavu se psům infuzí podává intravenózně po dobu 10 minut zkušební sloučenina. ·Zkušební sloučenina zpočátku zvyšuje intraumenární tlak v pyloru a pak ho snižuje, zatímco tlak v duodenu a antru zůstává během zkoušky snížen. Nejnižší účinná dávka nutná pro zvýšení tlaku v pyloru a snížení tlaku v duodenu a antru je nižší než 0,129 —//k/.10 min. Odpooídající hodnota pro samotný somatootatin je 0,129 až 0,25 -A/kg. 10 min.
D-Val1-soaajoosatii byl rovněž zkoušen^ok^ se týče jeho účinku^na · inhibici sekrece pankreasu. Pokus byl prováděn takto: Třem psům, kteří mm;]! jak o^tik‘eаtickou^tak úplnou žaludeční pištěli se Infuzí sekrettou v dávce 2 jednotky/k/.h a cholecystokininu v dávce 0,45 jednotek/k^h vyvolá sekrece oa:ιikreasu a íííúzí tetoa/astrtou v dávce 0,5/*//k/.h vyvolá sekrece žaludeční kyseliny chlorovodíkové. Poté/co je odezva v ustálnném stavu^se každému psu ^tóvá po dobu 1 hodiny D-Vvl1-toaatooSatii v dávce O,753*//k/.h. ·^^j^χ^I^aál^zí inhibtoní·účinek, vyjádřený jako percentuální změna vůči kontrolnímu pokusu pro všechen protein , je -51 %. .
D-Val^somatoototto byl rovněž zkoušen? pokud se týče áči-nnosti, na uvolňování růstového hormonu. Použitý ·postup se prováděl za použití normmáních samců krys Sprt/ue-Dawley o hmotnosti 100 až 120 / (Laboratory Supply Compotiy, IiPiαnapoOit, Indiana). Zkouška je moodfikací metody P. Brazeau, W. Vale a R. Guuileman, Enádorinolo/y, 94, 184 (1974).
Při zkoušce se použije celkem pěti skupin po osmi krysách pro zkoušení každé sloučeniny. Pro stimulaci sekrece růstového hormonu se všem krysám iitrtojriOoiLjáliě podá pe^íobi^irbital sodný. Jedna skupina slouží jako kontrolní a dostává pouze roztok soli. Zvířatům ze dvou skupin se subkutánně podá toaajootojin,t to zvířaům z jedné skupiny v dávce 2 /^j/zvíře a zvířaům z druhé skupiny v dávce 50 >g//vvře. Zvířaům ze zbýv^ících · dvou skupin se subkutánně podá zkoušená sloučenina, a to zvířaům z jedné skupiny v dávce 2 «g/azlte a zvířaům z druhé skupiny v dávce 50/t//víířj. ,
Kooicnirace růstového hormonu v séru se měří 20 minut · po simultánním podání ·peníobe^!taXu sodného a zkoušené sloučeniny. Určí se stupeň inhibice koncentrace růstového hormonu v séru vzhledem' ke kontrolní skupině a relativ^ činnost D-Val --somatostattou vzhledem к samotnému tomаjooSаtiiu.
Při dávce 2 >//krysu ř.nMbuje D-Vvl1-tomajoosatii zvýšení sekrece růstového hormonu o 2 % ve srovnání s kontrolním·pokusem, zatímco tomatooSatii způsobuje 44% inhibici. Při dávce 50 u//krysu D-Vaa1-somatoosatin inhibuje zvýšení sekrece růstového hormonu o 73 % ve srovnání s kontrolním pokusem, zatímco samotný tomatooSatii způsobuje 79% inhibici.
D-ValL-tomajootatii byl rovněž zkou^n na účinnost in vivo” při inhibici sekrece /luka/onu a insulinu po stimulaci L-ala^nem. Běžní ^čistokrevní psi obojího pohlaví se ne^l^t^jjí pres noc oez potravy. Odeberou ·se kontrolní vzorky krve a pak se zahájí ^trave^z^! infúze solného roztoku obsáh^uícího tomajosSatin nebo zkoušenou sloučeninu. Po 30 minutách se navíc intravenózně po dobu 15 · minut ' podává L-alanto. V ^fúzi solného roztoku obsahujícího somato^;01п nebo zkoušenou sloučeninu se pokračuje po dobu.15 minut po skončení podávání L-alaninové tofuze.
InTuze L-alantou způsobeného zvýšení koncentrace /luka/onu a inzulínu v séru,která se vrátí na konn-rolní konncenraci po skončení iní^uze L-alaninu. Tímto postupem se zjistilo, že minimální ^vta D-ValJ-somato-otattou na ííMíící ^uka^nu je 0,06 · až · 0,11 /«g/k//miiu , a pro inhibici inzulínu 0,006 až 0,03 z^/kg/min, zatímco minimální ·dávka tOInatooSatiiu pro inhibici /luka/onu je 0,10 až 0,12>«//k//min a pro inhibici inzuLÍnu 0,03 · až 0,10X4/kg/min.
Claims (2)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZU1. Způsob přípravy analogů somatostatinu vzorce IH-D-Val-Gly-L-cýs-L-Lys-L-Asn-L-Phe-L-Phe-L-Trp-L-Lys-L-Thr-L-Phe-L-Thr-L-Ser-L-cýs-OH (I) a jejich farmaceuticky vhodných netoxických adičních solí s kyselinami, vyznačený tím, Že se odpovídající tetradekapeptid s přímým řetězcem obecného vzorce IIIH-D-Val-Gly-L-Cys-L-Lys-L-Asn-L-Phe-L-Phe-L-Trp-L-Lys-L-Thr-L-Phe-L-Thr-L-Ser-L-Cys-OH (III) nechá reagovat s oxidačním činidlem.
- 2. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se jako oxidačního činidla používá vzduchu.Srveropifi*. n. závod 7. M<Mt
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS796664A CS212246B2 (cs) | 1977-04-21 | 1979-10-02 | Způsob přípravy tetradekapeptidu |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US05/789,472 US4100117A (en) | 1977-04-21 | 1977-04-21 | Somatostatin analogs and intermediates thereto |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS202096B2 true CS202096B2 (en) | 1980-12-31 |
Family
ID=25147748
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS782580A CS202096B2 (en) | 1977-04-21 | 1978-04-21 | Method of preparing analogues of somatostatine |
Country Status (31)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4100117A (cs) |
| JP (1) | JPS53132588A (cs) |
| AR (1) | AR221699A1 (cs) |
| AT (1) | AT361142B (cs) |
| AU (1) | AU519275B2 (cs) |
| BE (1) | BE866117A (cs) |
| BG (1) | BG28703A3 (cs) |
| CA (2) | CA1102315A (cs) |
| CH (1) | CH634039A5 (cs) |
| CS (1) | CS202096B2 (cs) |
| DD (1) | DD135900A5 (cs) |
| DE (1) | DE2816854A1 (cs) |
| DK (1) | DK174278A (cs) |
| ES (2) | ES469005A1 (cs) |
| FI (1) | FI64576C (cs) |
| FR (1) | FR2387941A1 (cs) |
| GB (1) | GB1596328A (cs) |
| GR (1) | GR68945B (cs) |
| HU (1) | HU177435B (cs) |
| IE (1) | IE46868B1 (cs) |
| IL (1) | IL54533A (cs) |
| IT (1) | IT1094462B (cs) |
| NL (1) | NL7804218A (cs) |
| NZ (1) | NZ187009A (cs) |
| PL (2) | PL115827B1 (cs) |
| PT (1) | PT67913B (cs) |
| RO (2) | RO76054A (cs) |
| SE (1) | SE7804397L (cs) |
| SU (2) | SU730295A3 (cs) |
| YU (1) | YU91578A (cs) |
| ZA (1) | ZA782247B (cs) |
Families Citing this family (31)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4202802A (en) * | 1978-10-02 | 1980-05-13 | Eli Lilly And Company | Peptides related to somatostatin |
| US4199501A (en) * | 1978-11-20 | 1980-04-22 | Eli Lilly And Company | Peptides related to somatostatin |
| US4199500A (en) * | 1978-11-20 | 1980-04-22 | Eli Lilly And Company | Peptides related to somatostatin |
| US4428942A (en) | 1982-05-17 | 1984-01-31 | The Salk Institute For Biological Studies | Analogs of somatostatin |
| GB8423431D0 (en) * | 1984-09-17 | 1984-10-24 | Sandoz Ltd | Organic compounds |
| SE8702550D0 (sv) * | 1987-06-18 | 1987-06-18 | Anders Grubb | Cysteinproteashemmare |
| ZA918168B (en) | 1990-10-16 | 1993-04-14 | Takeda Chemical Industries Ltd | Prolonged release preparation and polymers thereof. |
| ES2110573T3 (es) | 1992-08-07 | 1998-02-16 | Takeda Chemical Industries Ltd | Produccion de microcapsulas de farmacos solubles en agua. |
| EP0668073B1 (en) * | 1994-02-21 | 1999-04-14 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Polyester matrix for a pharmaceutical sustained-release preparation |
| US6117455A (en) * | 1994-09-30 | 2000-09-12 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Sustained-release microcapsule of amorphous water-soluble pharmaceutical active agent |
| CA2192782C (en) | 1995-12-15 | 2008-10-14 | Nobuyuki Takechi | Production of microspheres |
| CA2208336A1 (en) * | 1996-06-20 | 1997-12-20 | Hisamitsu Pharmaceuticals Co., Inc. | A device structure for iontophoresis |
| US7169889B1 (en) | 1999-06-19 | 2007-01-30 | Biocon Limited | Insulin prodrugs hydrolyzable in vivo to yield peglylated insulin |
| US6309633B1 (en) | 1999-06-19 | 2001-10-30 | Nobex Corporation | Amphiphilic drug-oligomer conjugates with hydroyzable lipophile components and methods for making and using the same |
| CA2430934C (en) | 2000-12-01 | 2011-06-21 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | A method of producing sustained-release preparations of a bioactive substance using high-pressure gas |
| US7060675B2 (en) * | 2001-02-15 | 2006-06-13 | Nobex Corporation | Methods of treating diabetes mellitus |
| US6867183B2 (en) * | 2001-02-15 | 2005-03-15 | Nobex Corporation | Pharmaceutical compositions of insulin drug-oligomer conjugates and methods of treating diseases therewith |
| US6713452B2 (en) | 2001-06-04 | 2004-03-30 | Nobex Corporation | Mixtures of calcitonin drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
| US6828297B2 (en) | 2001-06-04 | 2004-12-07 | Nobex Corporation | Mixtures of insulin drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
| US6828305B2 (en) * | 2001-06-04 | 2004-12-07 | Nobex Corporation | Mixtures of growth hormone drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
| US6835802B2 (en) * | 2001-06-04 | 2004-12-28 | Nobex Corporation | Methods of synthesizing substantially monodispersed mixtures of polymers having polyethylene glycol moieties |
| US7713932B2 (en) * | 2001-06-04 | 2010-05-11 | Biocon Limited | Calcitonin drug-oligomer conjugates, and uses thereof |
| US6858580B2 (en) * | 2001-06-04 | 2005-02-22 | Nobex Corporation | Mixtures of drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
| US7312192B2 (en) * | 2001-09-07 | 2007-12-25 | Biocon Limited | Insulin polypeptide-oligomer conjugates, proinsulin polypeptide-oligomer conjugates and methods of synthesizing same |
| US7166571B2 (en) * | 2001-09-07 | 2007-01-23 | Biocon Limited | Insulin polypeptide-oligomer conjugates, proinsulin polypeptide-oligomer conjugates and methods of synthesizing same |
| US6913903B2 (en) | 2001-09-07 | 2005-07-05 | Nobex Corporation | Methods of synthesizing insulin polypeptide-oligomer conjugates, and proinsulin polypeptide-oligomer conjugates and methods of synthesizing same |
| US7196059B2 (en) | 2001-09-07 | 2007-03-27 | Biocon Limited | Pharmaceutical compositions of insulin drug-oligomer conjugates and methods of treating diseases therewith |
| WO2003105768A2 (en) * | 2002-06-13 | 2003-12-24 | Nobex Corporation | Methods of reducing hypoglycemic episodes in the treatment of diabetes mellitus |
| PL2626368T3 (pl) * | 2004-07-19 | 2017-06-30 | Biocon Limited | Koniugaty insulina-oligomer, ich formulacje i zastosowania |
| ES2664822T3 (es) | 2007-10-16 | 2018-04-23 | Biocon Limited | Una composición farmacéutica sólida administrable por vía oral y un proceso de la misma |
| JP6224586B2 (ja) | 2012-07-10 | 2017-11-01 | 武田薬品工業株式会社 | 注射用製剤 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2608336A1 (de) * | 1975-03-11 | 1976-09-30 | Sandoz Ag | Neue organische verbindungen, ihre herstellung und verwendung |
| US4372884A (en) * | 1975-08-06 | 1983-02-08 | The Salk Institute For Biological Studies | Pharmaceutically active peptides |
-
1977
- 1977-04-21 US US05/789,472 patent/US4100117A/en not_active Expired - Lifetime
-
1978
- 1978-04-17 GB GB14916/78A patent/GB1596328A/en not_active Expired
- 1978-04-18 SE SE7804397A patent/SE7804397L/xx unknown
- 1978-04-18 AR AR271820A patent/AR221699A1/es active
- 1978-04-18 YU YU00915/78A patent/YU91578A/xx unknown
- 1978-04-18 FI FI781184A patent/FI64576C/fi not_active IP Right Cessation
- 1978-04-18 RO RO7893835A patent/RO76054A/ro unknown
- 1978-04-18 DE DE19782816854 patent/DE2816854A1/de not_active Withdrawn
- 1978-04-18 RO RO78102194A patent/RO81079A/ro unknown
- 1978-04-18 PT PT67913A patent/PT67913B/pt unknown
- 1978-04-18 NZ NZ187009A patent/NZ187009A/xx unknown
- 1978-04-18 JP JP4621378A patent/JPS53132588A/ja active Pending
- 1978-04-18 IL IL54533A patent/IL54533A/xx unknown
- 1978-04-19 GR GR56030A patent/GR68945B/el unknown
- 1978-04-19 BE BE1008847A patent/BE866117A/xx not_active IP Right Cessation
- 1978-04-19 FR FR7811580A patent/FR2387941A1/fr active Granted
- 1978-04-19 AU AU35253/78A patent/AU519275B2/en not_active Expired
- 1978-04-19 CA CA301,500A patent/CA1102315A/en not_active Expired
- 1978-04-19 IE IE765/78A patent/IE46868B1/en unknown
- 1978-04-19 ZA ZA00782247A patent/ZA782247B/xx unknown
- 1978-04-20 DK DK174278A patent/DK174278A/da active IP Right Grant
- 1978-04-20 CH CH425778A patent/CH634039A5/de not_active IP Right Cessation
- 1978-04-20 ES ES469005A patent/ES469005A1/es not_active Expired
- 1978-04-20 NL NL7804218A patent/NL7804218A/xx not_active Application Discontinuation
- 1978-04-20 IT IT22552/78A patent/IT1094462B/it active
- 1978-04-20 AT AT282878A patent/AT361142B/de not_active IP Right Cessation
- 1978-04-20 SU SU782607708A patent/SU730295A3/ru active
- 1978-04-20 HU HU78EI790A patent/HU177435B/hu unknown
- 1978-04-21 CS CS782580A patent/CS202096B2/cs unknown
- 1978-04-21 BG BG039503A patent/BG28703A3/xx unknown
- 1978-04-21 DD DD78204957A patent/DD135900A5/xx unknown
- 1978-04-21 PL PL1978217479A patent/PL115827B1/pl unknown
- 1978-04-21 PL PL1978206280A patent/PL114533B1/pl unknown
-
1979
- 1979-01-05 SU SU792705047A patent/SU904519A3/ru active
- 1979-01-16 ES ES476901A patent/ES476901A1/es not_active Expired
-
1980
- 1980-12-08 CA CA366,345A patent/CA1113928A/en not_active Expired
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CS202096B2 (en) | Method of preparing analogues of somatostatine | |
| AU2022200089B2 (en) | Cyclic peptide tyrosine tyrosine compounds as modulators of Neuropeptide Y receptors | |
| AU662731B2 (en) | Growth hormone releasing factor analogs | |
| EP0395417B1 (en) | Linear somatostatin analogues | |
| US4093574A (en) | Somatostatin analogs and intermediates thereto | |
| RU2627184C2 (ru) | Гликозилированные полипептиды и лекарственные композиции, содержащие данные полипептиды | |
| JP3983806B2 (ja) | ソマトスタチンの環状ペプチド類似体 | |
| EA008837B1 (ru) | Аналоги глюкагоноподобного пептида и их применение | |
| CZ281507B6 (cs) | Syntetické peptidy, biologický aktivní fragment a jejich netoxické soli | |
| PL169498B1 (pl) | Sposób wytwarzania nowych zwiazków polipeptydowych PL PL | |
| KR20130127985A (ko) | 글루코스-의존 인슐린 친화성 펩티드 유사체 | |
| NZ230549A (en) | Linear and cyclic growth hormone releasing factor analogues | |
| US4490364A (en) | CCK Agonists II | |
| EP0215171A2 (en) | Peptides | |
| EP0037516B1 (en) | N-omega substituted derivatives of 1-desamino-vasopressin analogs | |
| EP0225020A2 (en) | Peptides comprising, in sequence, units selected from the amino-acid residues 17 to 24 of ViP | |
| JP2001505580A (ja) | ソマトスタチン類似体 | |
| EP0298732B1 (en) | Therapeutic somatostatin analogues | |
| JPH01129000A (ja) | 環式ペプチド | |
| US4393050A (en) | Analogs of extended N-terminal somatostatin | |
| KR810000692B1 (ko) | 소마토스타틴(Somatostatin) 동족체의 제조방법 | |
| EP0386044B1 (en) | Hypoglycaemic peptides | |
| AU596665B2 (en) | Novel hepta and/or octa-peptides | |
| Yabe et al. | Synthesis and biological activity of somatostatin analogues modified at the tryptophan residue | |
| CS202097B2 (cs) | Způsob přípravy analogů somatostatinu |