CS200944B1 - Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-647 - Google Patents

Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-647 Download PDF

Info

Publication number
CS200944B1
CS200944B1 CS889178A CS889178A CS200944B1 CS 200944 B1 CS200944 B1 CS 200944B1 CS 889178 A CS889178 A CS 889178A CS 889178 A CS889178 A CS 889178A CS 200944 B1 CS200944 B1 CS 200944B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
strain
penicillium chrysogenum
soil
fermentation
apk
Prior art date
Application number
CS889178A
Other languages
English (en)
Inventor
Karel Zeleny
Vlasta Matelova
Karel Culik
Original Assignee
Karel Zeleny
Vlasta Matelova
Karel Culik
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Karel Zeleny, Vlasta Matelova, Karel Culik filed Critical Karel Zeleny
Priority to CS889178A priority Critical patent/CS200944B1/cs
Publication of CS200944B1 publication Critical patent/CS200944B1/cs

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

Vynález se týká kmene mikroorganismu Penicillium chrysogenum UV XXVII/74 produkujícího ve zvýšené míře penicilín V,G a 6-aminopenicilinovou kyselinu (6-APK). Předností kmene je, že nemá specifické požadavky na zdroj uhlíku.
Tento kmen byl získán z kmene Penicillium chrysogenum evidenčního čísla 2/170 řadou opakovaných mutagenních zásahů - nitrosomethylurea, N-methyl-N-nítrosoquanidin, UV-světlo, parafluorophenylalanin - a následných pravidelně zařazovaných pasivních selekcí.
Xzoláty po mutagenních zásazích a z pasivních selekcí byly hodnoceny podle následujícího schématu:
izolovaná kolonie na Petriho misce t' šikmý agar vegetativní inokulum 4* vlastní fermentace
Vegetativní inukulum bylo připravováno submersně v 500 ml varných baňkách se 60 ml inokulační půdy, která obsahovala základní živiny, tj. zdroj uhlíku (sacharóza), dusíku (kukuřičný extrakt v kombinaci s anorganickým zdrojem dusíku) a sole. Vegetativní
200 944
200 944 — 2 — baňky byly zaočkovány kličkou spor za šikmého agaru a inkubovány na rotačním třepaoím stroji 48 hodin·
Takto připraveným vegetativním inokulem byly očkovány fermentační baňky o obsahu 500 ml, objem půdy 40 ml· Zdrojem uhlíku byla saoharóza přidávaná ve formě draže, zdrojem dusíku byla sojová mouka, půda dále obsahuje prekursor, křídu a zdroj síry·
Příprava vegetativního inokula i vlastní fermentace probíhá na rotačních třepaoíoh strojích při 230 obrátkáoh/min·, výstřednost 25 mm, při teplotě 25 °C.
Izoláty jsou několikráte hodnoceny před a po lyofilizaol, která slouží dlouhodobému uchovávání kultur*
Takovýmto hodnotícím systémem byl získán kmen, na který je uplatňován patentový nárok·
Produkční srovnání kmene UV XXVII/74 e kontrolním kmenem CCM F-558 (UV XII/46).
Fermentační postup pro biosyntázu penicilinu V»
Kontrolní kmen UV XII/46 a kmen UV XXVII/74 byly fermentovány v 500 ml varných baňkách se 40 ml fermentační půdy značené CBS na rotačním třepaoím stroji s 230 obr./ min., výstřeností 25 mm, což odpovídá přenosu 0,81 ml kyslíku/ml/hod· Zaočkování je provedeno 10% obj. vegetativního inokula. Složení ferment. půdy CBS (v % hmot·):
sojová mouka 6,0
saoharóza 0,75
saoharóza v dávkách 13,75
fenoxyoctová kys. 0,67
uhličitan vápenatý 0,9
thiosíran sodný 0,8
20% roztok hydrorydu sodného 0,2 % obj.
Všechny ingredienoie se rozpustí ve vaříoí vodě a po dvou hodinách stání je zkon-
trolováno pH, eventuálně je upraveno na 8,0. Po sterilizaci bývá 7,5 až 7,7· -Doba ste-
rilizaoe je 20 minut při 120 °o.
Saoharóza se dávkuje ve formě dražé sterilizovaného gama zářením podle schématu:
přidávaná látka v % hmot. 24 48 Hod lny 72 96 192 Celkově množství
saoharóza 1,25 2,5 3,75 3,75 2,5 13,75
Složení fermentační půdy LS^MQD (v % hmot.):
sojová mouka 6,0
laktóza 10,0
saoharóza v dávkáoh 3,74
f^oxyootová kyselina 0,67
200 9
- 3 thiosíran sočný sojový olej
20% roztok hydroxydu sodného
0,6 % čpavková voda
0,8
0,1 % obj.(baňku
0,2 % obj.
0,1 % obj, přidáno ve 168, hodině
Půda je připravována shodně (192 hod.) a z 50% roztoku (24.
je dávkována ve formě dražé s půdou GNSt Sacharoza a 48* hod,) následovně:
přidávaná látka Hodiny Celkové množství v % hmot. 24 48 192
sacharoza 0,62 0,62 ' 2,5 3,74
Složení fermentační půdy 16 ( v % hmot)»
pharmamedia 7,9
laktóza 14,0
sacharoza v dávkách 3,74
fenoxyoctová kyselina 0,75 + 0,2 přidáno z 10% sodné soli v 96* hodině
uhličitan vápenatý 0,9
thiosíran sodný 0,8
sojový olej 0,1 % obj./baňku
20 % roztok hydroxydu
sodného 0,2 % obj.
0,6 % čpavková voda 0,1 % obj. přidáno ve 168, hodině
kyselý fosforečnan
draselný 0,067 %
Půda je připravována shodně s půdou CNS, Sacharoza je přidávána shodně s půdou LS^MOD.
Permentační postup pro biosyntézu penicilinu 6*
Permentační postupy pro biosyntézu penicilinu G jsou shodné s postupy pro penicilín V, liSí se pouze v tom, že fermentační půdy neobsahují fenoxyootovau kyselinu jako prekursor, ale šednou sůl fenylootove kyseliny, která je dávkována v průběhu fermentace ve formě dražé nebo z 5% roztoku následovně (uvedeno v % hmot).
Permentační půda 24 48 Hodiny Celkové množství %
72 96 120
CHS 0,19 0,19 0,19 0,095 0,665
LS.jMOD 0,19 0,19 0,19 0,095 0,085 0,75
16 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,95
Permentační postupy pro biosyntézu 6—APK,
200 844
Fermentační postupy pro blosyntézu 6-APK jsou shodné s postupy pro blosyntézu penicilinů, liší se v tom, So fermentační půdy neobsahují žádný prskursor.
Fermentaoe probíhají při teplotě 25 °c 11 dnů, vzorky pro stanovení účinnosti jsou odebírány v 9·, 10 a 1f. dni fermentaoe. Stanovení se provády hydroxamátovou metodou s příslušnými standarty. Obsah vzniklých produktů byl sledován ohromatografloky, zejména vznikajíoí vedlejší penioiliny při 6-APK, detekce byla provedena biologicky.
Produkční srovnání.
kmen fermentační půda* produkt* produkoe J/ul obsah příal. produktu %
UV ZXX/46 CNS 0 18000 99
V 19500 98
6-APK 8000 85
IS1M0D V 16500 98
6-APK 9500 90
16 0 17000 99
V 18000 98
UV ZZVII/74 CNS 0 20000 99
V 22000 98
6-APK 10000 85
LS1MCE V 19500 98
6-APK 12500 90
16 G 23000 99
V 24500 98
Zvýšení produkce kmene UV ZZVII/74 je na saoharózové půdě pro 0 1 V penicilín cca 10 %, pro 6-APK 30 %, na laktózovýoh půdáoh je zvýšení produkoe podstatné výraznější, ooa o 30 $ a to z toho důvodu, Se u kontrolního kmene UV ZIX/46 dochází na laktózovýoh půdáoh ke snížení produkoe.
Morfologie kmene* Kmen UV XX7XI/74, tj. Penioillium ohxysogenum CCM P 647 tvoří při monosporiokém rozsevu naqporulační půdé typu glycerin melasa kolonie velikosti 11 mm během 10 až 14 dnů.
Na okraji kolonií tvoří radiální vrásy ne vyšší než 1 um s kruhovitým válem uprostřed v průměru 7 um a vysokým 2 mm. Na okraji jo nízká bílá zóna. Kolonie mají ellpsoldní až kulovitý tvar o rozměru 4 až 5 f» x 3 až 4 pi, při mikroskopických sledováních jsou bezbarvé. Kultura dobře sporuluje na růsuýoh typech sporulačníoh půd, barva vysporulované kultury je sytě zelená, po delší době kultivaoe ěednouoí.
Kmen UV ZZVII/74 je vysoce stabilní, neztráoí produkční sohopnost pasášováním na
- 5 200 944 pevných půdách do IV. generace.
Kmen Penicillium chrysogenum, označený jako UV XXVII/74 byl uložen v £s. sbírce mikroorganismů (Czechoslovak Collection of Microorganismus),Universita J.E.Purkyně, Brno, tř. Obránců míru 10, pod číslem

Claims (1)

  1. PŘEDMĚT VYNÁLEZU
    Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-647, produkující penicilín V, G a 6-aminopenicilánovou kyselinu.
CS889178A 1978-12-27 1978-12-27 Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-647 CS200944B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS889178A CS200944B1 (cs) 1978-12-27 1978-12-27 Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-647

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS889178A CS200944B1 (cs) 1978-12-27 1978-12-27 Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-647

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS200944B1 true CS200944B1 (cs) 1980-10-31

Family

ID=5440109

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS889178A CS200944B1 (cs) 1978-12-27 1978-12-27 Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-647

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS200944B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA1338185C (en) Glycosidase inhibitor salbostatin, process for its preparation, and its use
CN1123837A (zh) 菌蕈栽培技术
US4161520A (en) Method of treating hypertension
CA1283074C (en) In vitro method for producing infective bacterial spores and spore-containing insecticidal compositions
CN113293110B (zh) 一种抗菌脂肽类化合物的制备方法
CS200944B1 (cs) Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-647
CN1928075B (zh) 产生阿维菌素b组分的菌株及其利用
CS206930B1 (cs) Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-648
CS212149B1 (cs) Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-679
US4918100A (en) CL-1957B antibiotic compound and its production
UMEZAWA et al. Isolation of streptomycin from a pink variant of S. griseus
CZ281824B6 (cs) Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM 8157
CS220217B1 (cs) Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-713
CS234589B1 (cs) Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-753
SU859441A1 (ru) Способ получени лимонной кислоты
RU2035514C1 (ru) Штамм гриба penicillium chrysogenum - продуцент бензилпенициллина и феноксиметилпенициллина
SK55696A3 (en) Highly productive strain of penicillium chrysogenum microorganism
SK55596A3 (en) Highly productive strain of penicillium chrysogenum microorganism
CS218514B1 (cs) Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-720
CZ77994A3 (en) INDUSTRIAL PRODUCTION STRAIN OF CLAVICEPS PURPUREA /Fr/Tul. MICROORGANISMS
CZ287623B6 (cs) Nový průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps paspali
CS250889B1 (en) Tribe streptomyces aureofaciens ccm 382% producing chlorotetracycline and resistant against phagus infection
SK147694A3 (en) Strain of penicillium vermiculatum ccm 8194 microorganism and preparation method of macrolide antibiotic of vermiculine
CS235447B1 (cs) Kmen mikroorganismu Peniciliium chrysogenum CCM F-747
CS267066B1 (en) Strain of microorganism streptomyces aureofacines ccm 3948