CN200986549Y

CN200986549Y - 多种呼吸道病毒联合检测装置

Info

Publication number: CN200986549Y
Application number: CN 200620148437
Authority: CN
Inventors: 万积成
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2006-10-27
Filing date: 2006-10-27
Publication date: 2007-12-05
Anticipated expiration: 2016-10-27

Abstract

本实用新型为一种多种呼吸道病毒联合检测装置，是由检测板和胶体金试纸两部分组成；检测板包括板身和板盖；板身正面有结果显示窗和指示检测对象的标签，同时印刷有检测人员信息登记栏和结果判断说明，板身内部设置有与胶体金试纸对应的凹槽，胶体金试纸通过凹槽固定于板身内部。胶体金试纸由底板、吸水板、硝酸纤维素膜、单克隆抗体金标垫、样品吸液层、MAX线组成。本实用新型为一项高度集成、可以方便、快速、可移动的，同时检测多种呼吸道传染病的检测装置。

Description

多种呼吸道病毒联合检测装置

技术领域

本实用新型涉及一种可移动的、方便实用的呼吸道病毒现场快速筛选检测装置。

背景技术

2003年严重急性呼吸道综合症(SARS)流行爆发，使得人们对呼吸道病毒感染有了非常深刻的印象，切实体会到呼吸道病毒对人类健康危害的严重性。目前已证明，95％的急性上呼吸道疾病和大部分下呼吸道疾病是由细菌外的病原引起，其中以呼吸道病毒最常见。呼吸道病毒包括流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、冠状病毒等。

流感病毒抗原性复杂，根据其核心蛋白抗原性不同分为甲、乙、丙三型，根据其表面抗原血凝素(H)和神经氨酸酶(N)的不同，同型病毒又分若干亚型，各型之间无交叉免疫。由于各型病毒之间无交叉免疫，可多次感染，反复发病。流行性感冒是世界上最猖獗的传染病，曾多次席卷全球，给人类带来巨大灾难。仅仅在1957年的一次流感大传播中，全世界共有15亿人发病，数以万计的老人和小孩被折磨致死。

禽流感是由正粘病毒科的A型流感病毒引起的禽类病毒性传染病，主要引起鸡、鸭、鹅、火鸡、鸽子等禽类发病，如果由禽类传染给人，发病后死亡率高达60％。

副流感病毒是引起上呼吸道感染的常见病毒，多通过空气、飞沫传播，潜伏期为2～6天。成人感染后会引起咽炎，儿童感染后不仅会引起上呼吸道症状，而且还会引起支气管炎和肺炎。

呼吸道合胞病毒较副流感病毒稍小，为RNA病毒，对乙醚敏感，无血球凝集性，在人上皮组织培养形成特有的合胞，病毒在胞浆内增殖，可见胞浆内包涵体。合胞病毒只有一个血清型。2005年6月29日到7月1日间，吉林省洮南市第十中学共有223名学生出现不明原因发热、咽喉肿痛、头疼等症状，其中207名学生进入当地医院进行隔离治疗。根据吉林省疾病预防控制中心检测结果，确定第十中学患病学生感染的是呼吸道合胞病毒。如果在刚发现病情的时候能够快速的做出正确的诊断，疾病就能够得到对症的治疗疫情也会得到及时的控制。

腺病毒是一群分布十分广泛的DNA病毒。能引起人类呼吸道、胃肠道、泌尿系统及眼的疾病。腺病毒颗粒直径60～90nm，没有囊膜，20面体立体对称。基底具有毒素样活性，能引起细胞病变，并使细胞从生长处脱落。病毒在咽、结膜尤其是小肠上皮细胞内增殖，偶尔波及其他脏器，隐性感染常见。

冠状病毒的名称来源于在电子显微镜下此类病毒呈现出有一个花冠状外围的形态。SARS的病毒是冠状病毒的一个变种，它具有极强的传染力和致命性。这个病在半年左右的时间内，传播到全世界二十多个国家，成为了世界卫生组织(WTO)和多个国家开始全力着手研究、预防和寻找治疗方法的新型传染病。

目前，检测以上呼吸道感染主要病毒，目前国内外多采用病毒分离、间接免疫荧光法、酶联免疫吸附法、多重逆转录聚合酶链反应、PCR及核酸杂交等多种检测手段。病毒分离法耗时太长且成本较高；间接免疫荧光法需要昂贵的荧光显微镜且标本不易保存；PCR方法不能区别有感染毒力的病毒和死病毒；酶联免疫吸附法制成试剂盒需冷藏，运输不便，同时上述方法需专业人员操作。

正是因为现有检测方法的落后，因此开发出使用方便，检测灵敏，价格低廉的检测产品是当务之急。本实用新型致力于检测方法的改进，应用胶体金技术，使检测更方便，结果更准确。

发明内容

本实用新型针对上述存在的一些问题，提供了多种呼吸道病毒联合检测装置，为一项高度集成、可以方便、快速、可移动的，同时检测多种呼吸道传染病的检测装置。

为解决上述技术问题，本实用新型是通过以下技术方案实现的：

本实用新型由检测板和胶体金试纸两部分组成。检测板又包括板身和板盖两部分。检测板由硬度适中的材料制成，板身正面有结果显示窗、指示检测对象的标签、检测人员信息登记栏和结果判断说明，板身内部设置有与试纸条对应的凹槽，凹槽数量为2～5，对应的胶体金试纸即为2～5条；板身和板盖通过卡扣方式连接。

胶体金试纸通过凹槽固定于板身内部，由底板、吸水板、标签、硝酸纤维素膜、单克隆抗体金标垫、样品吸液层、MAX线组成，底板中部为硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜上有一条试验线和一条多克隆抗体控制线，底板一端端头为吸水板，另一端端头为样品吸液层，硝酸纤维素膜两端分别与吸水板和单克隆抗体金标垫相互交叠连接，在单克隆抗体金标垫上压有样品吸液层。

胶体金试纸的样品吸液层由三层材料叠加组成，依次为10～25g/m²无纺布层、玻璃纤维层、10～25g/m²无纺布层，上述物质均需经过表面活性剂缓冲液浸泡处理，干燥后备用，上述装置除有毛细管作用原理外，还有虹吸作用原理，大大加快吸水移动速度。

试纸的样品吸液层暴露于板身之外，当板身和板盖通过卡扣方式连接上时，样品吸液层被封闭在板盖之内。胶体金试纸的硝酸纤维素膜与板身的结果显示窗对应。

此检测装置中胶体金试纸利用双抗夹心原理制成，试验线和单克隆抗体金标垫可由呼吸道病毒，包括流感(禽流感)、副流感、呼吸道合胞病毒、腺病毒、冠状病毒(SARS冠状病毒)等筛选出的配对抗体包被及标记，控制线是由羊抗鼠多克隆抗体包被制成。可以根据调节金标垫和试验线包被物的成分，选择性检测流感(禽流感)、副流感、呼吸道合胞病毒、腺病毒、冠状病毒(SARS冠状病毒)中的两种或多种。

把本装置样品吸液层放入待测样本中(液面不得超过MAX线)，由于毛细管作用样品将沿着试纸条向吸水板移动，当移动至单克隆抗体金标垫时，样品中相应抗原与单克隆抗体金标探针发生特异结合，当移动至试验线时，样品中相应抗原又与试验线中的单克隆抗体相结合，因此其胶体金滞留于试验线上，试验线处显示红色为阳性；相反如果待测样本中没有某种呼吸道病毒，单克隆抗体金标探针就不会与试验线上的单克隆抗体发生特异结合，没有胶体金滞留，即仅有一条红色控制线为阴性，这就是双抗夹心法原理。根据此原理，两条线为阳性，一条线为阴性得出判断。

方案中，当移动至羊抗鼠多克隆抗体控制线时，无论样品中有无相应呼吸道病毒，标记的金标探针都会与已设定好的羊抗鼠多克隆抗体结合滞留，使控制线显示红色。因此控制线无色带产生则代表操作有误，检测时样品液面超过MAX线或试纸已经过期。

由于采用上述技术方案，本发明所提供的多种呼吸道病毒联合检测装置具有这样的有益效果，即方便快速、可移动、便于呼吸道病毒的现场筛查工作，且特异性强，灵敏度高，无须专门技术人员操作，而且结果易读。

附图说明

图1为本实用新型的外观图。

图2为本实用新型的剖视图。

图3为胶体金试纸的外观图。

图4为胶体金试纸的分解图。

图5为胶体金试纸的阴性结果图。

图6为胶体金试纸的阳性结果图。

1.检测板，2.板身，3.板盖，4.信息登记栏，5.结果判断说明，6.标签，7.结果显示窗，8.胶体金试纸，9.底板，10.吸水板，11.硝酸纤维素膜，12.单克隆抗体金标垫，13.样品吸液层14.试验线，15.控制线，16.MAX线，17.凹槽。

具体实施例

图1详细表示了本实用新型的外观图，从图中可以看出本实用新型由检测板(1)和胶体金试纸(8)两部分组成。

(一)检测板

由图1可见，检测板(1)包括板身(2)和板盖(3)两部分。板身正面有结果显示窗(7)和指示检测对象的标签(6)，同时印刷有检测人员信息登记栏(4)和结果判断说明(5)。板身(2)内部设置有与试纸条对应的凹槽(17)。板身(2)和板盖(3)通过卡扣方式连接。

(二)胶体金快速检测试纸

图4为试纸的分解图，由图可见胶体金试纸(8)固定于板身(2)内部，是由底板(9)、吸水板(10)、标签(6)、硝酸纤维素膜(11)、单克隆抗体金标垫(12)、样品吸液层(13)、MAX线(16)组成，底板(9)中部为硝酸纤维素膜(11)，硝酸纤维素膜(11)上有一条试验线(14)和一条多克隆抗体控制线(15)，底板一端端头为吸水板(10)，另一端端头为样品吸液层(13)，硝酸纤维素膜(11)两端分别与吸水板(10)和单克隆抗体金标垫(12)相互交叠连接，在单克隆抗体金标垫(12)上压有样品吸液层(13)，标签(6)贴于吸水板(10)端。

胶体金试纸制法(以流感病毒为例)：

1.流感病原体培养

2.流感单克隆抗体的制备：用病原体抗原免疫小鼠，提取腹水纯化筛选，在筛选出的杂交瘤细胞株中，获得两株高纯度、配对的流感单克隆抗体细胞株1和2，一株用于试验线包被，一株可用于胶体金标记。

3.胶体金的制备及与流感单克隆抗体1的结合

(1)取双蒸水加适量的氯金酸磁力搅拌加温到80～100℃，加入适量柠檬酸三纳继续加热搅拌至沸腾3～10分钟，冷却后避光保存备用。

(2)把流感单克隆抗体1标记的胶体金液，吸附纤维材料上，干燥后备用。

4.膜的制备：机器制膜，利用电脑控制传动速度，保证每单位膜上包被的抗体量相等。

检测线：流感单克隆抗体2

控制线：羊抗鼠多克隆抗体

5.试纸条按公知技术组合。

6.制得的流感胶体金快速检测试纸被固定在板身内部，配合检测装置进行检测。

同法制得副流感病毒胶体金快速检测试纸、呼吸道合胞病毒胶体金快速检测试纸、腺病毒胶体金快速检测试纸、冠状病毒胶体金快速检测试纸，选择合适品种固定于板身内。根据需要本检测装置可选择性检测上述品种中两种或多种呼吸道传染病病毒。

使用时，拔去板盖，把露出的样品吸液层放入待检样品中(液面不得超过MAX线)，5分钟时观察结果。根据国家颁布的检测标准制订界限值，若检测流感病毒浓度高于界限值，观察窗处出现两条红线为阳性；低于界限值，出现一条红线为阴性；控制线无色带产生代表操作有误，检测时样品液面超过MAX线或试纸已经过期。从而得出判断。由此，本检测装置可一步完成对流感(禽流感)、副流感、呼吸道合胞病毒、腺病毒、冠状病毒(SARS冠状病毒)中任何2种或多种的检测。

Claims

1.多种呼吸道病毒联合检测装置，其特征在于是由检测板(1)和胶体金试纸(8)两部分组成；检测板(1)包括板身(2)和板盖(3)；板身正面有结果显示窗(7)和指示检测对象的标签(6)，同时印刷有检测人员信息登记栏(4)和结果判断说明(5)，板身(2)内部设置有与胶体金试纸(8)对应的凹槽(17)，胶体金试纸(8)通过凹槽(17)固定于板身(2)内部，板身(2)和板盖(3)通过卡扣方式连接。

2.根据权利要求1所述的多种呼吸道病毒联合检测装置，其特征在于胶体金试纸(8)是由底板(9)、吸水板(10)、硝酸纤维素膜(11)、单克隆抗体金标垫(12)、样品吸液层(13)、MAX线(16)组成；底板(9)中部为硝酸纤维素膜(11)，硝酸纤维素膜(11)上有一条试验线(14)和一条多克隆抗体控制线(15)，底板一端端头为吸水板(10)，另一端端头为样品吸液层(13)；硝酸纤维素膜(11)两端分别与吸水板(10)和单克隆抗体金标垫(12)相互交叠连接，在单克隆抗体金标垫(12)上压有样品吸液层(13)。

3.根据权利要求1所述的多种呼吸道病毒联合检测装置，特征在于所述的胶体金试纸(8)通过凹槽(17)固定在板身(2)内部，试纸的样品吸液层(13)暴露于板身(2)之外，当板身(2)和板盖(3)通过卡扣方式连接上时，样品吸液层(13)被封闭在板盖(3)之内。

4.根据权利要求1所述的多种呼吸道病毒联合检测装置，其特征在于所述的凹槽(17)数量为2～5，对应的胶体金试纸(8)数量为2～5条。

5.根据权利要求2所述的多种呼吸道病毒联合检测装置，其特征在于硝酸纤维素膜(11)与板身(2)的结果显示窗(7)对应。

6.根据权利要求2所述的多种呼吸道病毒联合检测装置，其特征在于样品吸液层是由三层材料叠加组成，第一层为无纺布层，规格为10～25g/m²；第二层为玻璃纤维层；第三层为一定规格无纺布层，其规格为10～25g/m²。

7.根据权利要求2所述的多种呼吸道病毒联合检测装置，其特征在于试验线和单克隆抗体金标垫可由呼吸道病毒，包括流感/禽流感、副流感、呼吸道合胞病毒、腺病毒、冠状病毒/SARS冠状病毒筛选出的配对抗体包被及标记。

8.根据权利要求2所述的多种呼吸道病毒联合检测装置，其特征在于控制线是由羊抗鼠多克隆抗体包被制成。