CN206892111U - 检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条 - Google Patents

检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条 Download PDF

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梁国栋
卢苗蕊
杜会坡
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王常亮
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Abstract

本实用新型公开了一种检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条,包括:吸附层,包括依次连接的样品吸附纤维层、金标纤维层、纤维素膜层和吸水材料层,样品吸附纤维层限定了用于接触待检测样品的测试端,吸水材料层限定了远离待检测样品的手持端;检测印迹线,印制在纤维素膜层上,检测印迹线包含鸭坦布苏病毒抗原液;对照印迹线,设置在纤维素膜层上且与检测印迹线间隔排列,对照印迹线包含羊或兔抗鸭坦布苏病毒IgG溶液;其中,金标纤维层上有与检测印迹线对应的以胶体金标记的抗鸭坦布苏病毒或胶体金标记的重组鸭坦布苏病毒E蛋白抗原液。本装置检测特异性强,敏感性高;操作简便,快速;结果显示直观、准确;减少了投资和检测成本;应用范围广,便于普遍推广应用。

Description

检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条
技术领域
本实用新型属于一种检测鸭坦布苏病毒抗体的器具,涉及一种检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条。
背景技术
鸭坦布苏病毒病是由鸭坦布苏病毒(duck tembusu virus,DTV)引起的鸭的一种传染病,主要引起蛋鸭及种鸭产蛋率严重下降甚至停产、共济失调,卵巢出血、发炎的现象。本病最早于2010年4月在我国东南部部分省份的一些鸭场发生,并迅速蔓延至我国各主要养鸭地区,而且鸡和鹅也能感染DTV发病,并出现腹泻、采食及产蛋量下降及神经症状,给我国养禽业造成了严重的经济损失。
快速检测鸭坦布苏病毒抗体,不仅可以评价疫苗免疫效果,而且可以辅助临床诊断,是有效控制鸭坦布苏病毒感染的前提。目前检测鸭坦布苏病毒抗体的方法主要有血清中和实验、IFA和ELISA等方法。然而,血清中和实验、IFA和ELISA检测技术操作复杂,需要昂贵的仪器设备、过程较长、耗时费力,需要特定仪器设备和专业技术人员操作,很难在基层普及,不能满足生产一线或疫病现场的快速检测需要。因此,亟待有一种快速检测鸭坦布苏病毒抗体的设备及技术。
实用新型内容
本实用新型的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷,并提供至少后面将说明的优点。
本实用新型设计还有一个目的是提供一种检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条。
为此,本实用新型提供的技术方案为:
一种检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条,包括:
吸附层,其包括依次连接的样品吸附纤维层、金标纤维层、纤维素膜层和吸水材料层,所述样品吸附纤维层限定了用于接触待检测样品的测试端,所述吸水材料层限定了远离待检测样品的手持端;
检测印迹线,其印制在所述纤维素膜层上,所述检测印迹线包含鸭坦布苏病毒抗原液;
对照印迹线,其也设置在所述纤维素膜层上且与所述检测印迹线间隔排列,所述对照印迹线包含羊或兔抗鸭坦布苏病毒IgG溶液;
其中,所述金标纤维层上有与所述检测印迹线对应的以胶体金标记的抗鸭坦布苏病毒或胶体金标记的重组鸭坦布苏病毒E蛋白抗原液。
优选的是,所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,在所述吸附纤维层、金标纤维层及吸水材料层上端面分别敷设保护膜,且在所述吸附纤维层上端面保护膜上设置样品标记线,所述样品标记线与所述吸附纤维层和所述金标纤维层交界处之间的水平距离为0.3~0.7cm。
优选的是,所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,所述检测印迹线靠近于所述吸附层的测试端设置在所述纤维素膜层上。
优选的是,所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条,还包括:
支撑层,所述吸附层固定在所述支撑层的上表面。
优选的是,所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,所述支撑层由不吸水的硬质塑胶片或硬纸条制成。
优选的是,所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,所述吸附纤维层由玻璃棉、尼龙纤维或聚酯纤维制成。
优选的是,所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,所述吸水材料层由吸水纸制成。
优选的是,所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,所述金标纤维层由玻璃棉、尼龙纤维或聚酯纤维制成。
优选的是,所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,所述支撑层由测试端向手持端的厚度逐渐增加,且所述支撑层的上表面与水平方向之间形成夹角;
所述支撑层的下表面上设置有一凹槽,所述凹槽的底部设置有多个彼此平行的凸起,相邻的凸起之间形成凹陷,所述凸起沿所述支撑层的宽度方向设置,所述凹槽的两侧与所述支撑层之间形成有间隙,所述凹槽内还设置有一支架,所述支架呈T型,且所述支架的两端可移动地设置在所述间隙内,以使所述支架沿所述凸起和凹陷滑动。
优选的是,所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,所述检测印迹线和所述对照印迹线的形状排列为“‖”、“//”、“++”、“┴┴”、“┬┬”、“├├”中的任意一种。
本实用新型至少包括以下有益效果:
(1)检测特异性强,敏感性高。本实用新型提供的试纸条以胶体金标记鸭坦布苏病毒或胶体金标记重组鸭坦布苏病毒E蛋白为基础制备而成,金标病毒蛋白中金颗粒与病毒蛋白分子之间无共价键形成,二者通过异性电荷间的范德华力相结合,胶体金标对病毒蛋白的特异性和亲和力影响很小,且具有较高的印迹率。
(2)操作简便,快速。本实用新型的试纸条在使用时无需附加任何其它仪器和试剂,只要将其测试端插入待检样品液中30秒左右,5分钟左右即可判定检测结果。且在支撑板的下表面设置有支架,支架沿凹槽内的多个凸起和凹陷之间滑动,可根据需要将支架固定于凹陷内,以将试纸条固定住,这样不需要操作者在测试过程中一直手持该装置,提高了检测效率,可一人同时检测多个样品。同时,将支撑板设置有越来越
(3)结果显示直观、准确。本实用新型的试纸条以显示棕红色的检测印迹和对照印迹作为检测的阳性和阴性印迹,即在纤维素膜上显示两条棕红色印迹,表示在被检测样品中有病毒抗体检出,结果为阳性;在纤维素膜上只显示一条棕红色对照印迹C,表示在被检测样品液中未检出病毒抗体,结果为阴性。结果判定直观、准确,简单明了,不易出现假阴性和假阳性误判。
(4)减少投资和检测成本。本实用新型的试纸条在使用时,不需另配其它仪器、设备和试剂,节省大量仪器、设备和附加试剂费用;专业和非专业人士均可随时随地进行现场检测,无需支付专家诊断检查费或送样品去诊断室的路费,节省检测成本,检测费用低。
(5)应用范围广,便于普遍推广应用。本实用新型提供的试纸条操作简单,成“一步式”或“傻瓜式”,而且方便携带和保存,能满足不同层次人员的需要,包括专业化验、海关检疫、卫生防疫、质量监测、畜产品加工、集约化养殖到个体养殖等,具有广阔的市场前景和较好的经济、社会效益。
(6)本实用新型根据ELISA的基本原理,用免疫层析试纸检测病毒抗体,利用微孔滤膜的渗滤浓缩和毛细管作用,将抗原-抗体反应由ELISA的传统液相环境转到固相滤膜上快速进行,并采用胶体金印迹代替酶印迹,凭肉眼直接观察胶体金的显色状况,即时获得检测结果,因此该方法比ELISA等血清学方法更为简便、快速。
本实用新型的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现,部分还将通过对本实用新型的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
附图说明
图1为本实用新型所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条的剖面示意图;
图2为本实用新型所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条的俯视示意图。
具体实施方式
下面结合附图对本实用新型做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解,本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
如图1和2所示,本实用新型提供一种检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条,包括:
吸附层,其包括依次连接的样品吸附纤维层、金标纤维层、纤维素膜层和吸水材料层,所述样品吸附纤维层限定了用于接触待检测样品的测试端,所述吸水材料层限定了远离待检测样品的手持端;
检测印迹线,其印制在所述纤维素膜层上,所述检测印迹线包含鸭坦布苏病毒抗原液;
对照印迹线,其也设置在所述纤维素膜层上且与所述检测印迹线间隔排列,所述对照印迹线包含羊或兔抗鸭坦布苏病毒IgG溶液;
其中,所述金标纤维层上有与所述检测印迹线对应的以胶体金标记的抗鸭坦布苏病毒或胶体金标记的重组鸭坦布苏病毒E蛋白抗原液。
在本实用新型的其中一个实施例中,作为优选,该检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,在所述吸附纤维层、金标纤维层及吸水材料层上端面分别敷设保护膜,且在所述吸附纤维层上端面保护膜上设置样品标记线,所述样品标记线与所述吸附纤维层和所述金标纤维层交界处之间的水平距离为0.3~0.7cm。
在本实用新型的其中一个实施例中,作为优选,该检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,所述检测印迹线靠近于所述吸附层的测试端设置在所述纤维素膜层上。
在本实用新型的其中一个实施例中,作为优选,该检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,还包括:
支撑层,所述吸附层固定在所述支撑层的上表面。
在本实用新型的其中一个实施例中,作为优选,该检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,所述支撑层由不吸水的硬质塑胶片或硬纸条制成。
在本实用新型的其中一个实施例中,作为优选,该检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,所述吸附纤维层由玻璃棉、尼龙纤维或聚酯纤维制成。
在本实用新型的其中一个实施例中,作为优选,该检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,所述吸水材料层由吸水纸制成。
在本实用新型的其中一个实施例中,作为优选,该检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,所述金标纤维层由玻璃棉、尼龙纤维或聚酯纤维制成。
在本实用新型的其中一个实施例中,作为优选,该检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,所述支撑层由测试端向手持端的的厚度逐渐增加,且所述支撑层的上表面与水平方向之间形成夹角;
所述支撑层的下表面上设置有一凹槽,所述凹槽的底部设置有多个彼此平行的凸起,相邻的凸起之间形成凹陷,所述凸起沿所述支撑层的宽度方向设置,所述凹槽的两侧与所述支撑层之间形成有间隙,所述凹槽内还设置有一支架,所述支架呈T型,且所述支架的两端可移动地设置在所述间隙内,以使所述支架沿所述凸起和凹陷滑动。
在本实用新型的其中一个实施例中,作为优选,该检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条中,所述检测印迹线和所述对照印迹线的形状排列为“‖”、“//”、“++”、“┴┴”、“┬┬”、“├├”中的任意一种。
为使本领域技术人员更好地理解本申请,现提供如下实施例进行说明。
如图1和2所示,图中1为以塑胶薄片条制成的支撑层,2为以玻璃棉制成的样品吸附纤维层,3为附着有胶体金标记的鸭坦布苏病毒或胶体金标记的重组鸭坦布苏病毒E蛋白的玻璃棉制成的金标纤维层,4为硝酸纤维素膜制成的纤维素膜层,5为由吸水滤纸制成的吸水材料层,将编号2、3、4、5各层依次粘贴在支撑层1上,彼此拼接的交界处纤维互相交叉渗透。在纤维素膜层4上,以纯化的鸭坦布苏病毒抗原液标记检测印迹6,代号T,以羊或兔抗鸭坦布苏病毒IgG溶液标记对照印迹7,代号C;检测印迹与对照印迹的排列形式为“||”。如图2所示,8-1为覆盖在样品吸附纤维层2和金标纤维层3上面的测试端的白色保护膜,在样品吸附纤维层2和金标纤维层3交界处对应的白色保护膜上偏向于样品吸附纤维层2一侧0.5cm处印有印迹线9,印迹线的右端印有箭头及MAX字样,位于手柄端的吸水材料层5上覆盖有其它颜色例如黄色保护膜8-2。
(2)所述试纸条的检测操作方法
a检测样品液的制备:无菌取被检动物的血液,并分离血清,以生理盐水作1:200倍的稀释血清,得到待测样品;
b检测操作:将该试纸条测试端插入待检测样品中,插入深度不超过印迹线,约30秒后取出试纸条,水平放置约1-5分钟,同时观察结果。
c结果判断:如果在试纸条的纤维素膜上只显示出一条棕红色对照印迹C,表示测检结果呈阴性,说明在被检样品液中未检测出鸭坦布苏病毒抗体;如果试纸条上的纤维素膜出现棕红色的对照印迹C和检测印迹T,表示检测结果呈阳性,即在待检样品中检出鸭坦布苏病毒抗体;如果纤维素膜上没有任何棕红色印迹显示,则表明试纸条已失效或操作有误。
(3)上述试纸条的检测原理:
当试纸条测试端即吸附纤维层插入待检测样品溶液后,待检溶液通过层析作用带动待检鸭坦布苏病毒抗体及金标纤维膜中的金标抗原一起向纤维素膜扩散,并最终渗入手柄端的吸水材料层中,扩散过程中待检病毒抗体可与该病毒抗体相对应的金标病毒或金标重组蛋白E相结合,进而与纤维素膜上检测印迹中的病毒结合,从而显示出棕红色的检测印迹 T;而对照印迹中的羊或兔抗鸭坦布苏病毒IgG则可与金标鸭坦布苏病毒或金标重组鸭坦布苏病毒E蛋白结合,形成棕红色对照印迹C。如果待检样品液中没有DTV抗体,试纸条只显示出一条棕红色对照印迹C;如果纤维素膜上没有任何棕红色印迹显示,则表明试纸条已失效或操作失误。
这里说明的模块数量和处理规模是用来简化本实用新型的说明的。对本实用新型的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条的应用、修改和变化对本领域的技术人员来说是显而易见的。
尽管本实用新型的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本实用新型的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本实用新型并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。

Claims (8)

1.一种检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条,其特征在于,包括:
吸附层,其包括依次连接的样品吸附纤维层、金标纤维层、纤维素膜层和吸水材料层,所述样品吸附纤维层限定了用于接触待检测样品的测试端,所述吸水材料层限定了远离待检测样品的手持端;
检测印迹线,其印制在所述纤维素膜层上,所述检测印迹线包含鸭坦布苏病毒抗原液;
对照印迹线,其也设置在所述纤维素膜层上且与所述检测印迹线间隔排列,所述对照印迹线包含羊或兔抗鸭坦布苏病毒IgG溶液;
支撑层,所述吸附层固定在所述支撑层的上表面,所述支撑层由测试端向手持端的的厚度逐渐增加,且所述支撑层的上表面与水平方向之间形成夹角;
所述支撑层的下表面上设置有一凹槽,所述凹槽的底部设置有多个彼此平行的凸起,相邻的凸起之间形成凹陷,所述凸起沿所述支撑层的宽度方向设置,所述凹槽的两侧与所述支撑层之间形成有间隙,所述凹槽内还设置有一支架,所述支架呈T型,且所述支架的两端可移动地设置在所述间隙内,以使所述支架沿所述凸起和凹陷滑动;
其中,所述金标纤维层上有与所述检测印迹线对应的以胶体金标记的抗鸭坦布苏病毒或胶体金标记的重组鸭坦布苏病毒E蛋白抗原液。
2.如权利要求1所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条,其特征在于,在所述吸附纤维层、金标纤维层及吸水材料层上端面分别敷设保护膜,且在所述吸附纤维层上端面保护膜上设置样品标记线,所述样品标记线与所述吸附纤维层和所述金标纤维层交界处之间的水平距离为0.3~0.7cm。
3.如权利要求1所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条,其特征在于,所述检测印迹线靠近于所述吸附层的测试端设置在所述纤维素膜层上。
4.如权利要求1所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条,其特征在于,所述支撑层由不吸水的硬质塑胶片或硬纸条制成。
5.如权利要求1所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条,其特征在于,所述吸附纤维层由玻璃棉、尼龙纤维或聚酯纤维制成。
6.如权利要求1所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条,其特征在于,所述吸水材料层由吸水纸制成。
7.如权利要求1所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条,其特征在于,所述金标纤维层由玻璃棉、尼龙纤维或聚酯纤维制成。
8.如权利要求1所述的检测鸭坦布苏病毒抗体的试纸条,其特征在于,所述检测印迹线和所述对照印迹线的形状排列为“‖”、“//”、“++”、“┴┴”、“┬┬”、“├├”中的任意一种。
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CN109061195A (zh) * 2018-09-19 2018-12-21 四川农业大学 一种检测鸭坦布苏病毒e蛋白抗体的胶体金检测卡

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