CN101339193B - 附红细胞体病快速诊断试纸条 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种附红细胞体病快速诊断试纸条，包括底层的支撑层、中间层的吸附层和外层的保护层，吸附层固定在支撑层上，吸附层从测试端依次为纤维层、吸附金标二抗纤维层或金标抗原纤维层、纤维素膜层及吸水材料层；在所述的纤维素膜层上设有人或一种动物附红细胞体特异性纯化抗原液印制的检测印迹，用羊抗兔IgG或兔抗羊IgG溶液印制的对照印迹，或用兔(羊)抗人或其他动物附红细胞体抗原的IgG溶液印制的对照印迹，检测印迹和对照印迹依次排列。本发明试纸条检测特异性和敏感性较高，可检测到2纳克的相应抗体蛋白，并且操作简便、快速，结果显示直观、准确，诊断费用较低，特别适合现场快速诊断人或动物附红细胞体病。

Description

附红细胞体病快速诊断试纸条

一、技术领域：

本发明涉及一种人兽共患传染病的诊断器具，特别是涉及一种附红细胞体病快速诊断试纸条。

二、背景技术：

附红细胞体病(eperythrozoonosis)是由附红细胞体(Eperythrozoon)寄生于人畜红细胞表面、血浆及骨髓所引起的一种人兽共患病，一般呈隐性感染，急性发病时主要表现为贫血、黄疸、发热、淋巴结肿大等症状。附红细胞体寄生的宿主有鼠类、猪、牛、绵羊、山羊、狗、猫、兔、鸟类、马、驴、骡、骆驼和人等。畜禽中以猪和羊附红细胞体的致病力较强。目前，人畜附红细胞体病广泛存在于世界各地。自1981年以来，该病在我国许多省份传播与流行，造成了巨大的经济损失。至今，还没有该病的疫苗在生产或临床中应用。

根据临床症状可做出初步诊断，最后确诊该病有赖于实验室检查。目前实验室检查该病的常用方法有：(1)临床中多以鲜血压滴玻片或血液涂片染色后直接镜检血浆中和红细胞上的附红细胞体，该法准确性和敏感性均较低；(2)用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中的特异抗体，如间接ELISA、Dot-ELISA、PPA-ELISA等。ELISA比镜检法简便、快速、特异、敏感，但不便于普遍推广应用，尤其不适合基层人员现场应用。因为ELISA仍需要酶标仪和试剂，需经过较多的操作步骤和检测经验，不便于基层人员实时在线检测。因此，迫切需要研发一种比ELISA更简便、快速而实用的附红细胞体病快速诊断方法。

三、发明内容：

本发明要解决的技术问题：为了克服现有技术的缺陷，提供一种特异性强、敏感性高，并且快速、简便而实用的附红细胞体病快速诊断试纸条。

本发明的技术方案：

一种附红细胞体病快速诊断试纸条，包括底层的支撑层、中间层的吸附层和外层的保护层，吸附层固定在支撑层上，吸附层从测试端依次为样品吸附纤维层、金标二抗或抗原纤维层、纤维素膜层及吸水材料层，在所述的纤维素膜层上设有人或一种动物附红细胞体特异性纯化抗原液印制的检测印迹，用羊抗兔或兔抗羊IgG溶液印制的对照印迹，该对照印迹对应于吸附金标二抗纤维层；或者用兔或羊抗一种其他动物附红细胞体抗原的IgG溶液印制的对照印迹，该对照印迹对应于吸附金标抗原纤维层；所述的检测印迹和对照印迹依次排列。

所述的金标二抗纤维层吸附有胶体金标记的兔或羊抗人，或一种除兔或羊外的其他动物IgG的抗体液；所述的金标抗原纤维层吸附有胶体金标记的人或一种除兔、羊外的其他动物附红细胞体特异性纯化抗原液。

所述的支撑层用不吸水的硬质塑胶条或硬纸条制成；所述的测试端的样品吸附纤维层用玻璃纤维棉、尼龙纤维膜或聚酯纤维膜制成。

所述的纤维素膜层用硝酸纤维素膜、纯纤维素膜、羧化纤维素膜或聚偏二氟乙烯膜制成；所述的吸水材料层用吸水纸制成。

所述检测印迹和对照印迹的依次排列组合为直线式、斜线式或实心圆点，即为“‖”、“∥”、“\\”、“＝”、“+”、 “··”或

所述的其他动物是指可感染附红细胞体的动物，包括羊、兔、鼠类、猪、牛、狗、猫、鸟类、鸡、马、驴、骡或骆驼。

所述的保护层为保护膜，该保护膜固定覆盖在测试端吸附纤维层、金标二抗或抗原纤维层及吸水材料层上，在测试端吸附纤维层与金标抗体或抗原纤维层交界处对应的保护膜上印制有样品标记线，该标记线偏向测试端纤维层一侧0.5cm处。

本发明的积极有益效果：

(1)检测特异性强。该快速诊断试纸条以胶体金标记兔(羊)抗人或其他动物IgG溶液，或人(动物)附红细胞体特异纯化抗原溶液为基础制备而成，金标物中金颗粒与抗体或抗原分子之间无共价键形成，二者通过异性电荷间的范德华力相结合，胶体金对这些抗体或抗原的特异性和结合力影响很小，且具有较高的标记率。因此，该诊断试纸条具有较高的特异性和敏感性，可检测到2纳克的相应抗体蛋白。

(2)操作简便，快速。使用本发明试纸条时无需附加任何其它仪器和试剂，只需将测试端插入待检血清中30秒左右，然后在5分钟左右即可判定检测结果。

(3)结果显示直观、准确。本发明诊断试纸条以显示棕红色的检测印迹线和对照印迹线作为检测的阳性和阴性标记，即在纤维素膜上只显示一条(个)棕红色对照印迹，表示该病抗体在被检血清中未检出；在纤维素膜上显示一条(个)棕红色对照印迹和一条(个)棕红色检测印迹，则表示在被检血清中检出了该病的抗体，检测结果呈阳性；如果纤维素膜上没有任何棕红色印迹显示，则表明试纸条已失效或操作有误。结果判定直观、准确，简单明了，不易出现假阴性和假阳性的误判。

(4)减少投资和检测成本。使用该试纸条，不需另配其它仪器、设备和试剂，节省大量仪器、设备和附加试剂费用；一条试纸一次可以一步检测出该病抗体，而且专业和非专业人士均可随时随地进行实时在线检测，无需支付专家诊断检查费或送样品去诊断室的路费，节省检测成本，检测费用低。

(5)应用范围广，便于推广应用。本发明试纸条操作简单成“一步式”或“傻瓜式”，而且方便携带和保存，能满足不同层次人员的需要，包括专业化验、海关检疫、卫生防疫、质量监测、医学临床、集约化养殖到个体养殖等，具有广阔的市场前景和较大的经济、社会效益。

四、附图说明：

图1为附红细胞体病快速诊断试纸条的正视结构示意图；

图2为附红细胞体病快速诊断试纸条的俯视结构示意图。

图中：1为支撑层，2为样品吸附纤维层，3为吸附有胶体金标记的抗体纤维层或抗原纤维层，4为纤维素膜层，5为吸水材料层，6为检测印迹，7为对照印迹，8-1为测试端保护膜，9为标记线，8-2手柄端保护膜。

五、具体实施方式：

以下实施例仅是为了进一步说明本发明，并不限制本发明的具体内容。

要制成该快速诊断试纸条，需制备人或动物附红细胞体特异性纯化抗原，兔(羊)抗人或其他动物IgG的抗体，羊抗兔或兔抗羊IgG的抗体，以及兔(羊)抗人或其他动物附红细胞体抗原的IgG溶液，用于制备金标抗体或抗原纤维垫、检测印迹和对照印迹。

1.兔(羊)抗人或其他动物IgG的制备

以饱和硫酸铵法提取人或动物血清IgG，取1份人或动物的血清加2份PBS溶液(pH7.2)混匀，加等体积饱和硫酸铵液混匀，置4℃冰箱2h，4℃、10000r/min离心15min，弃上清液；以适量PBS溶液(pH7.2)溶解沉淀，加饱和硫酸铵液至其终浓度为33％，置4℃冰箱2h，4℃、10000r/min离心15min，弃上清液，以少量PBS溶液(pH7.2)溶解沉淀，置4℃冰箱内用PBS溶液(pH7.2)过夜透析，换液2～3次，4℃、10000r/min离心15min，收集上清液，以紫外分光光度计测定其蛋白浓度。以50μg～100μg IgG/kg体重经皮下或肌肉注射健康家兔或羊3～4次，末次免疫20天后，静脉采血，以ELISA测定其血清抗体效价在1：2000以上，心脏采血或颈动脉放血，收集其高免血清。以上述饱和硫酸铵法提取兔(羊)抗人或其他动物的IgG，用于制备该快速检测试纸条的金标抗体纤维垫。

2.羊抗兔或兔抗羊IgG，以及兔(羊)抗人或其他动物附红细胞体抗原的IgG的制备

以上述具体实施方式1的方法提取兔或羊的IgG，并制备羊抗兔的IgG或兔抗羊的IgG，再用上述具体实施方式1的方法制备兔(羊)抗人或其他动物附红细胞体抗原的IgG，具体步骤不再重述。

3.人或动物附红细胞体特异纯化抗原的制备

3.1从临床自然感染病例的血液中提取并制备附红细胞体抗原

选择有明显贫血症状的人或动物(如猪、绵羊、牛等)，无菌采取其抗凝血，制作鲜血压滴标本和血液涂片，姬姆萨染色，显微镜检查，确定附红细胞体感染率在90％以上，并记录其感染率。静脉无菌采取阳性人或动物的抗凝血，以1500r/min离心15min，弃掉上清液和中间的白细胞层，将剩余的红细胞用pH7.2PBS洗涤3次，每次以1500r/min离心10min，最后加入等量阿氏液悬浮，4℃冰箱保存备用，得到附红细胞体阳性的红细胞。以同样方法制备附红细胞体阴性的人或同种动物的正常红细胞。

用RPMI-1640基础培养液，添加40％的灭活犊牛血清配成完全培养液。在96孔培养板中，每孔添加完全培养液120μL，感染附红细胞体的红细胞泥20μL，使完全培养液与阳性红细胞泥的比例为7:1；在5％CO2培养箱中37℃下培养。每隔12～24h收集每孔培养物，留下少量感染红细胞悬液，再加入正常红细胞和完全培养液至200μL混匀，按原代培养条件进行培养，使其继续感染增殖。收集的孔内感染红细胞，以1500r/min离心5min，收集其上清液；将上清液在4℃条件下20000r/min离心30min，收集沉淀；沉淀物用PBS液悬浮后，以20000r/min离心30min，反复洗涤3次，再次收集沉淀物即为附红细胞体。将最终收集的附红细胞体置-20℃冰箱中反复冻融、超声波粉碎处理3次后，以2000r/min离心10min，收集上清液，即为附红细胞体粗抗原。粗抗原经Sephadex G-200柱层析，用0.01mol/L PH7.0的PBS洗脱，以0.5ml/min的流速，每管自动收集1ml，用紫外分光光度计测出蛋白收集峰。将与附红细胞体阳性血清有反应的蛋白峰液收集，透析浓缩后作为人或动物附红细胞体特异纯化抗原备用。

猪附红细胞体特异纯化抗原的制备也可用水浴法。即取阳性猪抗凝血，如上述用pH7.2PBS洗涤3次，红细胞泥中加少许pH7.2PBS液，置水浴锅中脱离3～5min，4000r/min离心30min取上清液，上清液以20000r/min离心20min，收集沉淀即为附红细胞体。该附红细胞体用pH6.4PBS液洗涤3次，20000r/min离心20min，收集沉淀，加少许pH6.4PBS液，再如上述方法冻融、粉碎等处理，最后获得猪附红细胞体特异纯化抗原。

3.2通过感染实验动物，制备附红细胞体抗原

昆明小白鼠或家兔，通过摘除脾或注射地塞米松等方法降低其免疫力，然后以腹腔注射方式感染附红细胞体。成功后，取感染动物的血液，如上述3.1方法制备附红细胞体抗原。

4.金标抗体或抗原玻璃棉的制备

以柠檬酸钠还原法制备金溶胶，即在50～100ml沸腾的0.01～0.05％氯金酸水溶液中加入2～4ml的0.5～2％柠檬酸三钠溶液，获得直径15nm左右的胶体金。以0.1mol/L的K₂CO₃调胶体金pH至8.5～9.5，分别以1:1000～1300的标记比将待标记的兔(羊)抗人或其他动物的纯化IgG、人或动物附红细胞体特异纯化抗原液加入pH8.5～9.5的金溶胶中，标记10min后，加20％PEG10000至终浓度为0.05％，4℃、1500～3000rpm离心20min，除去未结合的胶体金颗粒，4℃、15000rpm离心1h，弃上清液，获初步纯化金标抗体或抗原后，用丙烯葡聚糖S-400柱层析，分离纯化金标蛋白，分别获得胶体金标记的抗体或抗原。将1:100～500稀释的胶体金标记物吸附于精制玻璃棉中，4℃低温真空干燥，制备出金标抗体或抗原玻璃棉。

5.该快速诊断试纸条实施诊断的原理

当该快速诊断试纸条测试端插入待检测血清后，待检血清通过虹吸带动待检附红细胞体病抗体及金标物玻璃棉中的金标抗体或抗原一起向纤维素膜扩散，并最终渗入手柄端吸水纸中，扩散过程中待检附红细胞体病抗体可与相应的金标二抗或抗原相结合，该结合物进而与纤维素膜上的纯化附红细胞体特异抗原检测印迹结合，从而显示出棕红色的检测印迹；而羊(兔)抗兔(羊)IgG则可与金标抗体结合，兔(羊)抗人或其他动物附红细胞体抗原的IgG可与金标抗原结合，形成棕红色对照印迹。如果待检血清中没有附红细胞体病的抗体，试纸条只显示出棕红色对照印迹；血清中含有附红细胞体病的抗体，则与其金标抗体或抗原结合，再与纤维素膜上的附红细胞体纯化抗原检测印迹结合，显示棕红色检测印迹，为阳性标记；如果纤维素膜上没有任何棕红色印迹显示，则表明试纸条已失效或操作有误。

6.该快速检测试纸条的检测操作方法

(1)检测样品的制备：若用动物的血液作为待测样品，无菌取患者的血液，并分离血清，以生理盐水作1:10～50倍稀释成待测血清。

(2)检测操作：将该快速检测试纸条测试端插入待检测血清中，插入深度不超过标记线，约30秒后取出试纸条，水平放置约1～5分钟，同时观察结果。

(3)结果判断：如果在检测试纸条纤维素膜上只显示出棕红色对照印迹，表示检测结果呈阴性，说明在被检血清中未检测出附红细胞体病的抗体；如果检测试纸条上的纤维素膜出现棕红色的对照印迹和检测印迹，表示检测结果呈阳性，即在待检血清中检测出附红细胞体病的抗体；如果纤维素膜上没有任何棕红色印迹显示，则表明试纸条已失效或操作有误。

下面举例说明试纸条的具体结构。

实施例一：参见图1、图2。图中1为支撑层，用塑胶薄片条制成，2为样品测试端的纤维层，用玻璃棉制成，3为吸附有金标抗体的纤维层，该例用吸附有胶体金标记的兔抗人的IgG抗体液的玻璃棉，其制法见上述具体实施方式4中所述的方法制备金标抗体玻璃棉，4为纤维素膜层，本例采用硝酸纤维素膜，5为吸水材料层，用吸水滤纸制成，将编号2、3、4、5各层从左至右依次粘贴在塑胶薄片条1上，彼此之间交界处纤维互相交叉渗透。在硝酸纤维素膜层4上，6为用人附红细胞体特异性纯化抗原溶液印上检测印迹“|”，7为用羊抗兔IgG溶液印上对照印迹“|”，两条印迹排列成平行的印迹带。8-1为覆盖在纤维层2和金标抗体纤维层3上面的测试端白色保护膜，在2和3交界处对应保护膜8-1位置上偏向于玻璃棉2一侧0.5cm处印有标记线9，9的右端印有箭头及max字样，吸水层5(手柄端)上覆盖有其它颜色(如黄色)保护膜8-2。待测血清的制备及检测步骤，同具体实施方式6中的检测操作方法，不再重述。

本例的检测印迹和对照印迹还可制成其他的形式，如直线式、斜线式或实心圆点，并依次排列组合为“∥”、“\\”、“＝”、“+”、 “··”和可选择任意一种排列方式。

实施例二：该快速诊断试纸条结构和实施例一基本相同，不同之处在于：金标抗体的纤维层3，该例用吸附有胶体金标记的兔抗羊的IgG抗体液的玻璃棉，在硝酸纤维素膜层4上，6为用羊附红细胞体特异性纯化抗原溶液印上检测印迹“|”，7为用鸡抗兔IgG溶液印上对照印迹“|”，其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的操作方法，不重述。

实施例三：该快速诊断试纸条结构和实施例一基本相同，不同之处在于：金标抗体的纤维层3，该例用吸附有胶体金标记的兔抗牛的IgG抗体液的玻璃棉，根据上述具体实施方式4中所述的制备方法制备其金标纯化抗体玻璃棉；在硝酸纤维素膜层4上，6为用牛附红细胞体特异性纯化抗原溶液印上检测印迹“|”，7为用羊抗兔的IgG溶液印制的对照印迹“|”。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的操作方法，不重述。

实施例四：该快速诊断试纸条结构和实施例一基本相同，不同之处在于：金标抗体的纤维层3，该例用吸附有胶体金标记的兔抗猪的IgG抗体液的玻璃棉，根据上述具体实施方式4中所述的制备方法制备其金标纯化抗体玻璃棉；在硝酸纤维素膜层4上，6为用猪附红细胞体特异性纯化抗原溶液印上检测印迹“|”，7为用羊抗兔的IgG溶液印制的对照印迹“|”。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的操作方法，不重述。

实施例五：该快速诊断试纸条结构和实施例一基本相同，不同之处在于：金标抗原纤维层3吸附有金标人附红细胞体特异纯化抗原液的纤维层，根据上述具体实施方式4中所述的制备方法制备其金标纯化抗原玻璃棉；在硝酸纤维素膜层4上，6为用人附红细胞体特异性纯化抗原溶液印上检测印迹“|”，7为用兔抗人附红细胞体特异性纯化抗原的IgG溶液印制的直线式对照印迹“|”。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的操作方法，不重述。

实施例六：该快速诊断试纸条结构和实施例一基本相同，不同之处在于：金标抗原纤维层3吸附有金标羊附红细胞体特异纯化抗原液的纤维层，根据上述具体实施方式4中所述的制备方法制备其金标纯化抗原玻璃棉；在硝酸纤维素膜层4上，6为用羊附红细胞体特异性纯化抗原溶液印上检测印迹“|”，7为用兔抗羊附红细胞体特异性纯化抗原的IgG溶液印制的直线式对照印迹“|”。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的操作方法，不重述。

实施例七：该快速检测试纸条结构和实施例一基本相同，不同之处在于：金标抗原纤维层3吸附有金标牛附红细胞体特异纯化抗原液的纤维层，根据上述具体实施方式4中所述的制备方法制备其金标纯化抗原玻璃棉；在硝酸纤维素膜层4上，6为用牛附红细胞体特异性纯化抗原溶液印上检测印迹“|”，7为用兔抗牛附红细胞体特异性纯化抗原的IgG溶液印制的直线式对照印迹“|”。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的操作方法，不重述。

实施例八：该快速检测试纸条结构和实施例一基本相同，不同之处在于：金标抗原纤维层3吸附有金标猪附红细胞体特异纯化抗原液的纤维层，根据上述具体实施方式4中所述的制备方法制备其金标纯化抗原玻璃棉；在硝酸纤维素膜层4上，6为用猪附红细胞体特异性纯化抗原溶液印上检测印迹“|”，7为用兔抗猪附红细胞体特异性纯化抗原的IgG溶液印制的直线式对照印迹“|”。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的操作方法，不重述。

实施例九：该快速诊断试纸条结构和实施例一基本相同，不同之处在于：支撑层1用不吸水的硬纸条制成，测试端纤维层2用尼龙膜，纤维素膜层4采用纯纤维素膜。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的操作方法，不重述。

实施例十：该快速诊断试纸条结构和实施例一基本相同，不同之处在于：测试端吸附纤维层2用聚酯膜，纤维素膜层4采用纯纤维素膜。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的检测操作方法，不重述。

实施例十一：该快速诊断试纸条结构和实施例一基本相同，不同之处在于：测试端吸附纤维层2用聚酯膜，纤维素膜层4采用聚偏二氟乙烯膜(PVDF)。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的检测操作方法，不重述。

实施例十二：该快速诊断试纸条结构和实施例五基本相同，不同之处在于：支撑层1用不吸水的硬纸条制成，测试端纤维层2用尼龙膜，纤维素膜层4采用羧化纤维素膜。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的操作方法，不重述。

实施例十三：该快速诊断试纸条结构和实施例五基本相同，不同之处在于：测试端吸附纤维层2用聚酯膜，纤维素膜层4采用羧化纤维素膜。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的检测操作方法，不重述。

实施例十四：该快速诊断试纸条结构和实施例一或五基本相同，不同之处在于：测试端吸附纤维层2用聚酯膜。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的检测操作方法，不重述。

实施例十五：该快速诊断试纸条结构和实施例一或五基本相同，不同之处在于：支撑层1用不吸水的硬纸条制成，测试端纤维层2用尼龙膜。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的操作方法，不重述。

实施例十六：该快速诊断试纸条结构和实施例一或五基本相同，不同之处在于：支撑层1用不吸水的硬纸条制成，测试端纤维层2用尼龙膜，纤维素膜层4采用聚偏二氟乙烯膜(PVDF)。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的操作方法，不重述。

实施例十七：该快速诊断试纸条结构和实施例一基本相同，不同之处在于：纤维素膜层4采用聚偏二氟乙烯膜(PVDF)。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的操作方法，不重述。

实施例十八：该快速诊断试纸条结构和实施例一基本相同，不同之处在于：纤维素膜层4采用羧化纤维素膜。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的操作方法，不重述。

实施例十九：该快速诊断试纸条结构和实施例一基本相同，不同之处在于：纤维素膜层4采用纯纤维素膜。其它包括检测样品制备、操作方法和结果判定等均同具体实施方式6中的操作方法，不重述。

Claims (7)

1.一种附红细胞体病快速诊断试纸条，包括底层的支撑层、中间层的吸附层和外层的保护层，吸附层固定在支撑层上，吸附层从测试端依次为样品吸附纤维层、金标二抗或抗原纤维层、纤维素膜层及吸水材料层，其特征是：在所述的纤维素膜层上设有人或一种动物附红细胞体特异性纯化抗原液印制的检测印迹，用羊抗兔或兔抗羊IgG溶液印制的对照印迹，该对照印迹对应于吸附金标二抗纤维层；或者用兔或羊抗一种其他动物附红细胞体抗原的IgG溶液印制的对照印迹，该对照印迹对应于吸附金标抗原纤维层；所述的检测印迹和对照印迹依次排列；所述的金标二抗纤维层吸附有胶体金标记的兔或羊抗人，或一种除兔或羊外的其他动物IgG的抗体液；所述的金标抗原纤维层吸附有胶体金标记的人或一种除兔、羊外的其他动物附红细胞体特异性纯化抗原液。

2.根据权利要求1所述的试纸条，其特征是：所述的支撑层用不吸水的硬质塑胶条或硬纸条制成。

3.根据权利要求1所述的试纸条，其特征是：所述的测试端的样品吸附纤维层用玻璃纤维棉、尼龙纤维膜或聚酯纤维膜制成。

4.根据权利要求1所述的试纸条，其特征是：所述的纤维素膜层用硝酸纤维素膜、纯纤维素膜、羧化纤维素膜或聚偏二氟乙烯膜制成；所述的吸水材料层用吸水纸制成。

5.根据权利要求1所述的试纸条，其特征是：所述检测印迹和对照印迹的依次排列组合为直线式、斜线式或实心圆点，即为“||”、“//”、“\\”、“＝”、“+”、“⊥”、 “··”或“·”。

6.根据权利要求1所述的试纸条，其特征是：所述的其他动物是指可感染附红细胞体的动物，包括羊、兔、鼠类、猪、牛、狗、猫、鸟类、鸡、马、驴、骡或骆驼。

7.根据权利要求1所述的试纸条，其特征是：所述的保护层为保护膜，该保护膜固定覆盖在测试端吸附纤维层、金标二抗或抗原纤维层及吸水材料层上，在测试端吸附纤维层与金标抗体或抗原纤维层交界处对应的保护膜上印制有样品标记线，该标记线偏向测试端纤维层一侧0.5cm处。