CN1965929A - 一种治疗糖尿病药物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种治疗糖尿病药物(商品名称：金芪降糖片)的制备方法，将现有技术工艺黄连粉碎成细粉改为乙醇提取、纯化；黄芪将现有技术工艺50％乙醇提取三次，时间4、2、2小时改为75％乙醇提取二次，时间2、2小时；金银花将现有技术工艺总量1/6粉碎，5/6水温浸改为全部水温浸、醇沉改进工艺使该药服用剂量由每次7－10片缩减为每次2－3片，提高了患者用药的顺应性。

Description

一种治疗糖尿病药物的制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗糖尿病的药物，特别是涉及一种以植物中草药为原料制成的治疗糖尿病的片剂的制备方法。

背景技术

糖尿病的药物，目前有专利授权公告日2000.5.17，授权公CN1052419C“一种治疗糖尿病的中草药物”其以黄连、黄芪、金银花、连翹、山药为组方原料和主要成分。公开日2001.12.12，公开号CN1325723A“治疗糖尿病的中草药物及其制备方法”其以黄连、黄芪、金银花、西洋参、天花粉、生地黄、珍珠为组方原料和主要成分。《云南中医中药杂志》1999.20(1)记载文章<金芪降糖片治疗II型糖尿病临床疗效评价>未公开配方及《湖北中医杂志》1993.15(2)记载文章《白虎金黄饮治疗糖尿病34例》其以生石膏、知母、黄连、山药、花粉、沙参、生地、金银花、黄芪、黄精、枸杞、麦冬、蒲公英为组方原料和主要成分汤剂。

糖尿病的片剂的制备方法，目前有专利公告日：2005.01.05，公告号：CN1559549，申请号：200410018739.1，“一种治疗糖尿病的药物及其制备方法”公开了以黄连、黄芪、金银花为组方原料制备(商品名称：金芪降糖片)片剂的方法。但是，该药服用剂量较大，每次7-10片，患者服用很不方便。为此，需要进行缩小剂量、提高产品质量标准的的研究，满足患者的要求。

发明内容

本发明所要解决问题是：在充分调研的基础上，对该药(商品名称：金芪降糖片)进行了改进工艺、缩小剂量、提高产品质量标准的研究。

为了达到上述发明目的我们对该药进行了改进工艺、缩小剂量、提高产品质量标准的研究。

1.剂型选择及规格的确定依据

因该项研究是工艺改进，所以剂型未变，仍为片剂。但规格有改变，根据试验结果及原服用生药量计算，片重为0.56g。

2.制备工艺及研究内容

2.1现工艺与原工艺的比较

现工艺与原工艺的主要不同之处见下表。

项目	现有技术工艺	本发明工艺
			制得该药物有效成分的原料组成	黄连10.3重量份黄芪15.4重量份金银花61.8重量份	黄连10.3重量份黄芪15.4重量份  金银花61.8重量份
黄连	粉碎	50％乙醇提取、纯化
			黄芪	50％乙醇提取三次，时间4、2、2小时	75％乙醇提取二次，时间2、2小时
金银花	总量1/6粉碎，5/6水温浸	全部水温浸、醇沉
			服用剂量	7-10片	2-3片

2.2制备工艺参数及确定依据

2.2.1提取工艺

黄连具有清热燥湿，泻火解毒功效。用于湿热，消渴等。为处方中君药。据文献报道，其有效成分小檗碱有明显降血糖作用。采用正交试验法，以小檗碱含量为主要考察指标，优选最佳提取工艺条件。根据小檗碱的理化特性，将醇提物进行纯化处理。为使纯化条件合理，进行比较试验，即：醇提物稀释剂水与1％醋酸的比较；酸处理PH值的选择；酸处理增加盐析的试验；酸性沉淀物用碱与水洗调节PH值的比较试验；根据试验结果，确定黄连最佳提取纯化工艺。

该提取工艺是经过正交试验优选出来的；纯化所用的酸碱法是提取小檗碱较常用的方法，操作中较易掌握，用PH精密试纸测定药液PH值，简单、易行；所以该工艺设计合理、简单、适用性强。

黄芪具有补气固表，利尿托毒等功效。用于内热消渴，糖尿病等。据文献报道，黄芪主要活性成分为多糖、黄芪甲苷及黄酮类等，具有调节血糖、促进胰岛素和C肽的分泌等作用。采用正交试验法，以黄芪甲苷含量为主要考察指标，优选最佳提取工艺条件。

与原工艺相比：现工艺黄芪甲苷含量高，提取时间短，浸膏收率低。

金银花具有清热解毒功效，含绿原酸、黄酮等成分。因金银花花瓣薄，成分易浸出，所以采用水温浸法提取。为减少服用量，金银花全部进行提取。在原工艺的基础上，对浸膏进行了醇沉处理。采用正交试验法，以绿原酸含量为主要考察指标，优选金银花最佳提取工艺。

金银花约占处方比例70％，其浸膏量对服用剂量影响亦较大。所以，经过正交试验的优选，现工艺比原工艺的浸膏收率明显降低，绿原酸含量也较高。

2.2.2制剂成型

通过制剂处方前研究，对金芪降糖片全浸膏粉的主要特性进行了分析，确定制剂研究的重点是选择流动性强、可压性好的药用辅料，解决片剂崩解问题。参照文献报道，选用微晶纤维素、预胶化淀粉、交联羧甲基纤维素等五种辅料进行多种试验。首先通过制粒方法试验，确定制粒方法；通过片剂成型辅料筛选试验，确定片剂成型的辅料种类及用量；经过崩解剂种类、用量筛选及包衣试验，确定崩解剂种类及用量；根据试验结果，确定制剂处方。

与原工艺相比，现工艺制粒方法简单，片剂崩解时间短。解决了原工艺生产时经常出现的崩解时间过长的问题。

2.2.3中试

按照黄连、黄芪、金银花优选提取工艺及制剂工艺在符合GMP要求的生产车间进行三批中试。试验规模为58倍处方量。试验结果(平均)：浸膏收率：黄连11.0％；黄芪12.0％；金银花14.0％；各浸膏收率相对稳定。主要指标成分提取转移率：黄连中小檗碱65.2％；黄芪中黄芪甲苷8204％；金银花中绿原酸57.1％；均可达到50％以上。根据该药中有效成分性质确定浓缩干燥温度，温度应控制在80℃以下，其中金银花提取浓缩温度应不超过70℃。成品率：94.6％。根据三批中试结果，结合原服用剂量，计算现服用量，并折合片重及片数。计算结果：服用剂量缩减为一次2-3片，片重0.56g。三批成品经检验各项指标均符合有关规定。

中试结论：该工艺合理、可行、比较稳定。

3.质量研究及质量标准

3.1原料、辅料质量标准

原辅料质量标准按照中国药典2000年版执行。薄膜衣料标准见资料(5-3)附件。对黄连、黄芪原料采用药典法与HPLC法(成品标准)测定含量的结果进行了比较，结果HPLC法的测定结果误差小。

3.2中间体质量标准

为保证成品质量，根据中试结果，结合原料的不同含量分别制定了黄连、黄芪、金银花浸膏的相对密度、收率及含量限度。

3.3成品质量标准

3.3.1鉴别

以盐酸小檗碱、绿原酸、黄芪对照药材及黄芪甲苷为对照，对成品做薄层层析鉴别试验，并与原工艺产品的薄层色谱进行比较，结果各主要检测成分基本一致。

3.3.2检查

重金属检测按照中国药典2000年版一部附录检查。结果：三批中试样品中铅含量≤5ppm，砷含量＜2ppm，符合常规标准，故未纳入常规检查标准中。

3.3.3含量测定

用高效液相色谱法对成品中黄连、黄芪的有效成分盐酸小檗碱及甲苷进行含量测定。

黄连  原质量标准中已有盐酸小檗碱含量测定，因原标准中黄连是以生药粉直接入药，改工艺后，根据黄连中小檗碱的提取纯化转移率对其含量限度做了调整，根据三批小试及中试样品测定结果，制定含量限度：每片含量不得少于12mg。

黄芪  以黄芪甲苷作为黄芪的质量控制指标已广为应用。为更好地控制产品质量，参照局颁WS₃-368(Z-038)-2001标准，制定了成品中黄芪甲苷的含量测定方法及含量限度。并做了方法学验证试验。根据三批小试及中试样品测定结果，制定含量限度：每片含量不得少于0.17mg。

金银花  据文献报道，金银花中绿原酸成分不太稳定，易受温度、PH值等多种因素影响，所以成品中未测定绿原酸成分含量。

按上述质量标准检验中试样品三批，其各项结果均符合规定。

质量标准评价  该标准由原料、中间体及成品三部分组成。可控制生产全过程。其中中间体及成品质量标准比原标准有所提高。成品标准由定性、定量二部分组成。其中定性标准对成品中三味药分别做了薄层层析鉴别；定量标准对其中黄连、黄芪中的有效成分小檗碱、黄芪甲苷均控制含量，所以，该质量标准可在一定程度上保证该药的疗效。

3.稳定性考察

考察样品三批，加速稳定性试验六个月，本品的外观、性状、鉴别、含量、崩解、微生物等项指标均无明显改变，符合相关规定。样品采用原包装—铝塑泡罩包装，在考察期间内，该包装能满足保证产品质量的要求。

结论：该产品质量稳定，可长期保存。

4.分析与评价

根据工艺优选、质量控制、稳定性考察等项试验结果，证明该工艺设计合理，原料、生产全过程及成品质量均可控，产品稳定性好。服用剂量由每次7-10片缩减为每次2-3片，提高了患者用药的顺应性。

本发明提供一种治疗糖尿病药物的制备方法，包括制得该药物有效成分的原料组成为：黄连10.3重量份黄芪15.4重量份金银花61.8重量份，所述的药物是片剂，其特征在于黄连加50％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.15～1.20(60℃)的浸膏，加1％醋酸适量，用盐酸调节PH值至1～2，加氯化钠适量，静置12小时，滤过，沉淀加水适量，用20％氢氧化钠调节PH值至6～7，搅拌使溶解，滤过，取沉淀减压干燥粉碎备用；

黄芪加75％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.25～1.30(60℃)的浸膏，减压干燥粉碎备用；

金银花加水温浸二次，每次1小时，合并提取液，滤过，减压浓缩至相对密度为1.17～1.22(60℃)的浸膏，待温度降至40℃时，搅拌下缓慢加入乙醇，使含醇量达70％，静置24小时，滤过，减压浓缩至相对密度为1.22～1.28(60℃)的浸膏，减压干燥粉碎备用；

以黄连、黄芪、金银花浸膏粉7.1份加入2.9份的辅料，制成颗粒，压制成片，包薄膜衣，即得。

所述的治疗糖尿病药物的制备方法，其特征在于所述的辅料是预胶化淀粉1.1份，微晶纤维素1.4份，交联羧甲基纤维素钠0.25份，硬脂酸镁0.15份组成。

本发明的效果：由于将现有技术工艺黄连粉碎成细粉改为乙醇提取、纯化；由于使用醇提，可以将有降糖作用的物质提出，而将淀粉等大量无效物质剔除，因此可以减少服用量。

黄芪将现有技术工艺50％乙醇提取三次，时间4、2、2小时改为75％乙醇提取二次，时间2、2小时；由于降糖物质更多的溶解于乙醇，故提高乙醇浓度，虽然缩短了提取时间，仍然能达到良好的效果。

金银花将现有技术工艺总量1/6粉碎，5/6水温浸改为全部水温浸、醇沉，由于全部改为水提剔除了很多无效物质，故可以减小服用量。

改进工艺使该药服用剂量由每次7-10片缩减为每次2-3片，提高了患者用药的顺应性。

具体实施方式

实施例1：制备治疗糖尿病的药物(金芪降糖片)

处方：黄连343g  黄芪513g  金银花2058g  预胶化淀粉60g微晶纤维素76g  交联羧甲基纤维素钠13.5g  硬脂酸镁2.5g

制备方法：

1、黄连加50％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.15～1.20(60℃)的浸膏，加1％醋酸适量，用盐酸调节PH值至1～2，加氯化钠适量，静置12小时，滤过，沉淀加水适量，用20％氢氧化钠调节PH值至6～7，搅拌使溶解，滤过，取沉淀减压干燥粉碎备用；

2、黄芪加75％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.25～1.30(60℃)的浸膏，减压干燥粉碎备用；

3、金银花加水温浸二次，每次1小时，合并提取液，滤过，减压浓缩至相对密度为1.17～1.22(60℃)的浸膏，待温度降至40℃时，搅拌下缓慢加入乙醇，使含醇量达70％，静置24小时，滤过，减压浓缩至相对密度为1.22～1.28(60℃)的浸膏，减压干燥粉碎备用。取上述三种粉末，加入辅料适量，制成颗粒，压制成1000片，包薄膜衣，即得金芪降糖片。

实施例2：新工艺治疗糖尿病的药物(商品名称：金芪降糖片)药理毒理试验综述资料：

金芪降糖片目前已广泛应用于临床，具有降糖、降脂、调节免疫等方面的功效。在此基础上，又对原工艺进行了改进提高，对新工艺金芪降糖片进行药效学、毒理学试验研究，证实了新工艺制剂的有效性和安全性，现将试验结果综述如下。

一、药效学研究：

1.新工艺金芪降糖片0.9、1.8、3.6g生药/kg三个剂量组每天对正常大鼠灌胃给药1次，连续7天。结果，各剂量组药物对正常大鼠血糖未见明显变化，与同等剂量的原工艺组作用相同。

2.新工艺金芪降糖片0.9、1.8、3.6g生药/kg三个剂量组，对链脲霉素诱发糖尿病模型动物测定不同给药时间血糖值，结果各给药组动物血糖值在给药4天时，未见明显降低，给药第7天开始，中、高剂量组动物血糖值有明显降低，至第10天各剂量组均显示明显的降糖作用，与模型对照组比较有显著差异。但尚未降到正常水平。

3.新工艺金芪降糖片0.9、1.8、3.6g生药/kg三个剂量组，对四氧嘧啶诱发的糖尿病模型动物测定给药后不同时间血糖值，结果与模型对照组比较，新工艺低剂量组在给药8天内对大鼠血糖未见明显影响，高剂量组于给药后5天开始，血糖值出现显著性下降，作用持续至第8天；中剂量给药组与原工艺金芪降糖片组均在给药8天后血糖值出现显著性下降。新工艺金芪降糖片的降糖作用与原工艺比较前者略优于后者。

4.新工艺金芪降糖片0.9、1.8、3.6g生药/kg三个剂量组，连续给药8天后，测定大鼠口服葡萄糖后血糖值的变化。结果显示，该药物虽对口服葡萄糖后造成的血糖升高统计上无显著性差异，但表现出一定的抑制作用趋势。新工艺与原工艺组作用相近。

5.新工艺金芪降糖片0.9、1.8、3.6g生药/kg三个剂量组，连续给药30天和28天，可以显著性抑制由四氧嘧啶诱发的和由脂肪乳剂诱发的高脂血症模型大鼠总胆固醇的升高，对甘油三脂的升高也显示出一定的抑制作用；1.8、3.6、7.2g生药/kg连续给药7天，可以抑制急性高脂血症小鼠总胆固醇值的升高。

6.新工艺金芪降糖片1.8、3.6g生药/kg、7.2g生药/kg三个剂量组连续给药9天，可以显著降低由氢化可的松导致的胰岛素耐受作用。同等剂量新工艺药物作用与原工艺药物作用相近。

7.新工艺金芪降糖片1.8、3.6、7.2g生药/kg三个剂量组连续给药16天，对胸腺的影响无显著性差异，但可以不同程度增加脾脏和胰腺的重量，这可能与适当调节机体的免疫状况，改善机体降血糖功能有关。

8.新工艺金芪降糖片3.6、7.2g生药/kg两个剂量组连续给药7天，可以显著提高绵羊红细胞诱导的体液免疫，这点与原工艺药物作用相似，表明本品具有一定的体液免疫作用。

综上所述，新工艺金芪降糖片对正常机体血糖无明显影响，短期应用可以轻度降低高血糖模型动物的血糖水平，长期应用可以明显抑制糖尿病模型动物的血糖升高，明显降低高脂动物的胆固醇和甘油三酯水平，改善糖尿病并发的血脂异常，并可以适当增强机体的免疫功能，提高机体的免疫力。新工艺与原工艺比较药效作用未见明显差异。

二毒理学研究

1急性毒性试验

小鼠24小时内一次性灌胃给予最大浓度的新工艺金芪降糖片96.9g生药/kg后，连续观察14天，小鼠体重、毛色状态、运动状况、粪便情况等指标均未见异常，体重增长正常，未出现死亡情况。14天后所有存活动物解剖肉眼观察主要脏器未见明显病理改变。新工艺金芪降糖片灌胃给药最大给药量大于96.9g生药/kg，约相当于人临床拟用剂量的242倍。

2长期毒性试验

(1)13周

1.金芪降糖片经大鼠灌胃给药高剂量组为21.6g生药/kg、中剂量组为10.8g生药/kg、低剂量组为5.4g生药/kg，分别相当于人临床拟日用剂量54、27和13.5倍。三个剂量组连续给药13周，雌雄大鼠一般体征良好，行为活动、排尿、排便、饮水均正常，体重增长及摄食量与对照组比较均无明显差异。

2.金芪降糖片高、中、低三个剂量组雌、雄性大鼠给药13周后尿常规检查中，仅见雄鼠个别动物蛋白质呈阳性反应，高剂量组雄鼠有1例尿隐血呈阳性反应。综合血液学、血液生化学指标分析，此结果并非与药物毒性有关，还待末期检测结果而定。

3.金芪降糖片高、中、低三个剂量组雌、雄性大鼠给药13周血液学检查中仅见雌鼠血红蛋白略有升高，其他指标均与对照组无明显差异。表明该药对试验中期的上述观察指标无影响。

4.金芪降糖片高、中、低三个剂量组雌、雄性大鼠给药13周血液生化学检查中给药组雌、雄性大鼠谷草转氨酶值、雌鼠肌酐值和雄鼠尿素氮值的降低，虽有统计学意义，但均无临床毒理学意义。对雌、雄性鼠血糖值升高和高剂量组的白蛋白值的降低既无量效关系，也无性别关系，故此变化还有待末期检测结果而定。

5.金芪降糖片高、中、低三个剂量组给药13周后，仅见雌鼠中、低剂量组肝脏重量与对照组有差异，但其系数未见有差别，考虑是由动物体重的差异所造成的，与药物的毒性反应无关。其他各组雌雄性动物脏器重量和脏器系数与对照组相比均无明显差异。表明该药对试验中期动物的脏器无影响。

6.病理组织学检查中也未发现与药物有关的毒性反应。

7.综合以上结果，在本实验条件下，大鼠灌胃途径给予金芪降糖片13周后，未发现与药物有关的明显的毒性反应。由于该药正在继续进行给药26周的毒性试验，故待其试验全部结束后，再对其试验结果进行最终的评价。

(2)26周及恢复期

1.一般体征及体重检查：金芪降糖片经大鼠灌胃给药26周，高剂量组为21.6g生药/kg、中剂量组为10.8g生药/kg、低剂量组为5.4g生药/kg，分别相当于人临床拟日用剂量54、27和13.5倍。结果金芪降糖片高、中、低剂量组雌雄大鼠一般体征良好，行为活动、排尿、排便、饮水均正常，体重增长及摄食量与对照组比较均无明显差异。表明该药对上述观察无影响。

2.尿常规检查：在不同给药期进行检测，给药组与对照组均出现有个别动物蛋白质呈阳性反应。考虑为动物本身随年龄增长而出现的自发性变化。

3.血液学检查：给药26周后检测，中、高剂量组雌雄动物的红细胞及血红蛋白值均有升高的趋势，考虑此种变化可能与本品中含有黄芪等成分的药理作用有关。无毒理学意义。

4.血液生化学检查：给药26周后，给药组雌雄性动物的血糖值、白蛋白值、谷丙转胺酶、谷草转胺酶等指标均出现变波动，但这些变化既不存在量效关系，也无性别关系，且其检测数值均在正常范围内，故认为这些变化不具有毒理学意义。但雄鼠中、高剂量组尿素氮值呈现剂量依赖性地升高，雌鼠也表现同样的作用趋势，只是未见肾脏组织有病理性变化。此结果与原工艺金芪降糖片大鼠给药3个月时高剂量组的反应结果一致，二临床应用未见有关肾毒性的报道。尽管如此，仍建议在临床使用时应注意随时检测肾脏功能的变化。

5.脏器重量及脏器系数检查：给药26周，各给药组雌雄性动物脏器重量及脏器系数与对照组相比无明显差异。表明该药对上述观察指标无明显影响。

6.病理组织学观察：肉眼观察各组动物均未见异常；镜下观察动物心、肝、肺、脾、肾、肾上腺、胃、十二指肠、空、回肠、子宫、卵巢、睾丸、附睾、前列腺、大脑、小脑、垂体、胸腺、甲状腺、甲状旁腺均未见明显异常。

7.综合上述各项检测结果表明，在本实验条件下，金芪降糖片大鼠灌胃给药26周低、中剂量组均未见明显的毒性反应，故其无毒反应剂量为10.8g生药/kg，相当于人临床拟用剂量27倍。

Claims (2)

1、一种治疗糖尿病药物的制备方法，包括制得该药物有效成分的原料组成为：黄连10.3重量份  黄芪15.4重量份  金银花61.8重量份，所述的药物是片剂，其特征在于黄连加50％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至60℃时相对密度为1.15～1.20的浸膏，加1％醋酸适量，用盐酸调节PH值至1～2，加氯化钠适量，静置12小时，滤过，沉淀加水适量，用20％氢氧化钠调节PH值至6～7，搅拌使溶解，滤过，取沉淀减压干燥粉碎备用；

黄芪加75％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.25～1.30(60℃)的浸膏，减压干燥粉碎备用；

金银花加水温浸二次，每次1小时，合并提取液，滤过，减压浓缩至相对密度为1.17～1.22(60℃)的浸膏，待温度降至40℃时，搅拌下缓慢加入乙醇，使含醇量达70％，静置24小时，滤过，减压浓缩至相对密度为1.22～1.28(60℃)的浸膏，减压干燥粉碎备用；

以黄连、黄芪、金银花浸膏粉7.1份加入2.9份的辅料，制成颗粒，压制成片，包薄膜衣，即得。

2、根据权利要求1所述的治疗糖尿病药物的制备方法，其特征在于所述的辅料是预胶化淀粉1.1份，微晶纤维素1.4份，交联羧甲基纤维素钠0.25份，硬脂酸镁0.15份组成。