CN101879190A - 含有姜黄素的组合物及姜黄素作为制备调节血糖组合物的应用 - Google Patents

Abstract

含有姜黄素的组合物及姜黄素作为制备调节血糖组合物的应用，它涉及一种组合物及其用途。本发明解决了现有药物治疗糖尿病服用周期长、易引起毒副作用的问题。本发明含有姜黄素的组合物含有三价铬和姜黄素。本发明的组合物用于调节血糖。本发明含有姜黄素的组合物用于治疗糖尿病给药1周后即有降糖效果，经过7周的治疗，便有效地控制了血糖的上升，治疗周期短，采用本发明含有姜黄素的组合物用于治疗糖尿病无毒副作用。

Description

含有姜黄素的组合物及姜黄素作为制备调节血糖组合物的应用

技术领域

本发明涉及一种组合物及其用途。

背景技术

目前针对糖尿病的治疗主要有饮食疗法、运动疗法和药物疗法。饮食疗法和运动疗法起效慢。药物疗法主要采用中药、胰岛素、口服降糖药对糖尿病进行治疗，在市场上销售的治疗糖尿病的药物主要有双胍类、磺脲类、葡萄糖苷酶抑制剂、噻唑烷二酮类、IV酶抑制剂，这些药物在一定程度上都对人体造成不同程度上损害，如胃肠道不良反应、低血糖、心脏缺血等。目前，市场上销售的辅助降血糖产品，多为苦瓜粉、苦瓜提取物、蜂胶等成分，单独使用时为了达到降糖效果服用剂量都比较大，糖尿病病因复杂，病人体质、疾病史、以及并发症也并不相同，降糖后，糖尿病并发症无法同时得到改善，药物治疗糖尿病服用周期长、服用剂量大、组方单一，易引起人体产生不同程度毒副作用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是为了解决现有药物治疗糖尿病服用周期长、易引起毒副作用的问题，提供了一种含有姜黄素的组合物及姜黄素作为制备调节血糖组合物的应用。

本发明含有姜黄素的组合物含有三价铬和姜黄素，三价铬为0.001～0.1重量份，姜黄素为100～400重量份；其中所述三价铬由铬酵母、吡啶甲酸铬、烟酸铬及三氯化铬中的一种或其中几种组成。

本发明含有姜黄素的组合物还含有蜂胶和/或灵芝多糖，其中蜂胶为100～400重量份，灵芝多糖为10～100重量份。本发明姜黄素作为制备调节血糖组合物的应用，用于制备调节血糖组合物。

本发明含有姜黄素的组合物用于治疗糖尿病给药1周后即有降糖效果，经过7周的治疗，便有效地控制了血糖的上升，治疗周期短，采用本发明含有姜黄素的组合物用于治疗糖尿病无毒副作用。

本发明含有姜黄素的组合物可以促进TNF-α诱导的胰岛素抵抗能够刺激3T3-L1脂肪细胞的胰岛素摄取葡萄糖，能够促进脂肪细胞对葡萄糖的摄取，改善胰岛素抵抗；含有姜黄素的组合物可通过调节游离脂肪酸(FFA)代谢相关酶蛋白的表达促进游离脂肪酸(FFA)在骨骼肌内氧化代谢，加速游离脂肪酸(FFA)在细胞内清除，进而改善由于高游离脂肪酸(FFA)导致的胰岛素抵抗和脂毒性，从而治疗2型糖尿病；含有姜黄素的组合物能够增加胰岛素敏感性，改善2型糖尿病病人的胰岛分泌功能。本发明含有姜黄素的组合物有较为显著的降低血糖的作用。本发明中的姜黄素与吡啶甲酸铬有协同作用。

附图说明

图1是具体实施方式一中含有姜黄素的组合物对2型糖尿病大鼠血糖水平的影响图，^*表示与模型对照组相比具有显著差异；图2是具体实施方式一中含有姜黄素的组合物对TNF-α诱导胰岛素抵抗刺激3T3-L1脂肪细胞的胰岛素摄取葡萄糖的影响图；图中1表示对照组，2表示加入JNK抑制剂Sp600125和肿瘤坏死因子α(TNF-α)组，3表示TNF-α组，4表示TNF-α和含有姜黄素的组合物含量5μmol/L组，5表示含有姜黄素的组合物含量10μmol/L组，6表示含有姜黄素的组合物含量20μmol/L组，7表示含有姜黄素的组合物含量50μmol/L组，^**表示与模型对照组相比具有显著差异，Δ表示与TNF-α组相比具有显著差异；图3是具体实施方式一中CD36的凝胶电泳图；图4是具体实施方式一中含有姜黄素的组合物治疗对2型糖尿病大鼠骨骼肌CD36表达的影响图，^*表示与模型对照组相比具有显著差异，P＜0.05图5是具体实施方式一中CPT-1的凝胶电泳图；图6是具体实施方式一中含有姜黄素的组合物治疗对2型糖尿病大鼠骨骼肌CPT-1表达的影响图，^*表示与模型对照组相比具有显著差异，其中P＜0.05图7是具体实施方式一中含有姜黄素的组合物治疗前后各组大鼠胰岛素水平比较图，■表示含有姜黄素的组合物治疗前大鼠胰岛素水平，■表示含有姜黄素的组合物治疗后大鼠胰岛素水平；图8是具体实施方式一中含有姜黄素的组合物对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞TNF-a的mRNA的影响图，图中1表示对照组，2表示模型组，3表示含有姜黄素的组合物低剂量组(含有姜黄素的组合物加入量5μmol/L)，4表示含有姜黄素的组合物中剂量组(含有姜黄素的组合物加入量10μmol/L)，5表示含有姜黄素的组合物高剂量组(含有姜黄素的组合物加入量20μmol/L)；图9是具体实施方式一中的含有姜黄素的组合物对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞陪养上清液的TNF-a蛋白水平的影响图，图中1表示对照组，2表示模型组，3表示含有姜黄素的组合物低剂量组(含有姜黄素的组合物加入量5μmol/L)，4表示含有姜黄素的组合物中剂量组(含有姜黄素的组合物加入量10μmol/L)，5表示含有姜黄素的组合物高剂量组(含有姜黄素的组合物加入量20μmol/L)；图10是具体实施方式一中的含有姜黄素的组合物对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞IL-6的mRNA影响图，图中1表示对照组，2表示模型组，3表示含有姜黄素的组合物低剂量组(含有姜黄素的组合物加入量5μmol/L)，4表示含有姜黄素的组合物中剂量组(含有姜黄素的组合物加入量10μmol/L)，5表示含有姜黄素的组合物高剂量组(含有姜黄素的组合物加入量20μmol/L)；图11是具体实施方式一中的含有姜黄素的组合物对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞陪养上清液IL-6的蛋白水平的影响，图中1表示对照组，2表示模型组，3表示含有姜黄素的组合物低剂量组(含有姜黄素的组合物加入量5μmol/L)，4表示含有姜黄素的组合物中剂量组(含有姜黄素的组合物加入量10μmol/L)，5表示含有姜黄素的组合物高剂量组(含有姜黄素的组合物加入量20μmol/L)；图12是具体实施六中治疗后各组2型糖尿病大鼠血糖水平比较图，^*表示与模型对照组相比，其中P＜0.05，图中

表示对照组大鼠血糖水平曲线，

表示模型组2型糖尿病大鼠血糖水平曲线，

表示吡啶甲酸铬组2型糖尿病大鼠血糖水平曲线，

表示姜黄素组2型糖尿病大鼠血糖水平曲线，

表示复方组2型糖尿病大鼠血糖水平曲线；图13是具体实施六中各组大鼠葡萄糖耐受血糖水平比较图，^*表示与模型对照组相比，其中P＜0.05，图中

表示灌胃前各组大鼠葡萄糖耐受血糖水平比较图，■表示灌胃后各组大鼠葡萄糖耐受血糖水平比较图。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式中含有姜黄素的组合物由三价铬和姜黄素组成，三价铬为0.001～0.1重量份，姜黄素为100～400重量份；其中所述三价铬由铬酵母、吡啶甲酸铬、烟酸铬及三氯化铬中的一种或其中几种组成。

本实施方式将含有姜黄素的组合物用于以下药效学试验：

(一)受试对象

患有2型糖尿病的大鼠、正常大鼠。所用大鼠购于北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号为SCXK(京)2007-0001。

(二)试验方法

将正常大鼠组成对照组(10只)，将患有2型糖尿病的大鼠分成糖尿病模型组(10只)、低剂量组(10只)、中剂量组(10只)、高剂量组(10只)，其中低、中、高剂量组分别按照大鼠每千克体重给予25mg、50mg、100mg的含有姜黄素的组合物治疗45天。

(三)结果

1、含有姜黄素的组合物具有降血糖作用

由图1可以看出含有姜黄素的组合物治疗组(低、中、高剂量组)的空腹血糖与糖尿病模型对照组相比差异显著，P＜0.05，可见含有姜黄素的组合物治疗组空腹血糖有明显降低，说明含有姜黄素的组合物有较为显著的降低血糖的作用。

由图2可知含有姜黄素的组合物可以促进TNF-α诱导的胰岛素抵抗能够刺激3T3-L1脂肪细胞的胰岛素摄取葡萄糖，表明含有姜黄素的组合物能够促进脂肪细胞对葡萄糖的摄取，改善胰岛素抵抗。这是因为在C2C12骨骼肌细胞胰岛素抵抗状态时含有姜黄素的组合物能够促进葡萄糖转运因子4(GLUT4)的转位，促进细胞对葡萄糖的摄取，从而改善了胰岛素抵抗。

2、含有姜黄素的组合物有降低游离脂肪酸(FFA)的作用

由图3可知含有姜黄素的组合物可以增加2型糖尿病大鼠骨骼肌CD36的表达，进而促进骨骼肌对游离脂肪酸的摄取；由图5可知含有姜黄素的组合物可以通过增加2型糖尿病大鼠骨骼肌CPT-1的表达，促进游离脂肪酸在线粒体内的氧化。从图3、图4、图5和图6可以看出含有姜黄素的组合物可通过调节游离脂肪酸(FFA)代谢相关酶蛋白的表达促进游离脂肪酸(FFA)在骨骼肌内氧化代谢，加速游离脂肪酸(FFA)在细胞内清除，进而改善由于高游离脂肪酸(FFA)导致的胰岛素抵抗和脂毒性，从而治疗2型糖尿病。该结果与体外C2C12骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型的结果一致，从而证实含有姜黄素的组合物具有降低游离脂肪酸(FFA)的作用，能够改善胰岛素抵抗的作用。

3、含有姜黄素的组合物能够增加胰岛素敏感性，改善2型糖尿病大鼠的胰岛分泌功能。

由图7可知各组糖尿病大鼠经过含有姜黄素的组合物治疗45天后，治疗组血清胰岛素水平明显高于模型对照组，P＜0.05，含有姜黄素的组合物能够增加胰岛素敏感性，改善2型糖尿病大鼠的胰岛分泌功能。

4、姜黄素具有通过抗炎机制改善胰岛素抵抗作用。

由图8～图11的结果表明含有姜黄素的组合物能明显降低软脂酸诱导的胰岛素抵抗的脂肪细胞膜型中的TNF-α及IL-6的表达水平，并呈剂量-依赖效应，证实抗炎是含有姜黄素的组合物改善胰岛素抵抗的一个机制。

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是含有姜黄素的组合物还含有蜂胶和/或灵芝多糖，其中蜂胶为100～400重量份，灵芝多糖为10～100重量份。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二之一不同的是所述含有姜黄素的组合物按照重量份数由0.03～0.08份吡啶甲酸铬、110～300份蜂胶、40～70份灵芝多糖和200～390份姜黄素组成。其它与具体实施方式一或二之一相同。

本实施方式中所述蜂胶中黄酮的质量含量为20％以上。

具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同的是所述含有姜黄素的组合物按照重量份数由0.06份吡啶甲酸铬、200份蜂胶、50份灵芝多糖和150份姜黄素组成。其它与具体实施方式一或三之一相同。

本实施方式中所述蜂胶中黄酮的质量含量为20％以上。

具体实施方式五：本实施方式中姜黄素作为制备调节血糖组合物的应用，用于制备调节血糖组合物。

具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是所述含有姜黄素的组合物按照重量份数由150份姜黄素、0.075份吡啶甲酸铬419.6份微晶纤维素、150份微粉硅胶、30份羧甲淀粉钠、5份硬脂酸镁和45份羟丙甲纤维素组成。

本实施方式将姜黄素、吡啶甲酸铬、含有姜黄素的组合物用于以下药效学试验：

(一)受试对象

患有2型糖尿病的大鼠、正常大鼠。所用大鼠购于北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号为SCXK(京)2007-0001。

(二)试验方法

采用高糖高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病模型，将40只成模大鼠分成模型组、吡啶甲酸铬组、姜黄素组及含有姜黄素的组合物4组，每组10只，另用10只正常大鼠组成对照组，吡啶甲酸铬组按大鼠每千克体重给予200μg/kg.BW吡啶甲酸铬的剂量灌胃，姜黄素组按大鼠每千克体重给予50mg姜黄素的剂量灌胃，含有姜黄素的组合物按大鼠每千克体重给予220mg含有姜黄素的组合物的剂量灌胃，将各组灌胃6周，每周记录体重，监测血糖。各组大鼠均禁食过夜(12小时，不禁水)，待血糖和血浆胰岛素达到稳定状态后，在清醒状态下按1kg体重给予1g50％的葡萄糖溶液的剂量腹腔注射，在注射0、30、60、90和120分钟后从尾静脉采血检测血糖，记录血糖变化情况。

(三)结果

由图12和图13可知各组2型糖尿病大鼠治疗后，结果显示治疗组空腹血糖低于糖尿病模型对照组，降糖效果含有姜黄素的组合物优于姜黄素组和吡啶甲酸铬组的单独干预，表明姜黄素与吡啶甲酸铬有协同作用。

具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是所述含有姜黄素的组合物按照重量份数由150份姜黄素、40份蜂胶、6份灵芝多糖、0.075份吡啶甲酸铬、419.6份微晶纤维素、150份微粉硅胶、30份羧甲淀粉钠、5份硬脂酸镁和45份羟丙甲纤维素组成。

本实施方式中所述蜂胶中黄酮的质量含量为20％以上。

本实施方式中给8名志愿者口服2g姜黄素，然后检测人血清中姜黄素含量很低或检测不到，峰值浓度仅为(01006±01005)mg·L^-1，当3h时浓度就达到零。

具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是所述含有姜黄素的组合物为片剂，每片由150mg姜黄素、419.6mg微晶纤维素、150mg微粉硅胶、30mg羧甲淀粉钠、5mg硬脂酸镁和45mg羟丙甲纤维素组成。

具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是所述含有姜黄素的组合物为片剂，每片由150mg姜黄素、0.075mg吡啶甲酸铬、419.6mg微晶纤维素、150mg微粉硅胶、30mg羧甲淀粉钠、5mg硬脂酸镁和45mg羟丙甲纤维素组成。

具体实施方式十：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是所述含有姜黄素的组合物为片剂，每片由150mg姜黄素、0.075mg吡啶甲酸铬、419.6mg微晶纤维素、150mg微粉硅胶、30mg羧甲淀粉钠、5mg硬脂酸镁和45mg羟丙甲纤维素组成。

具体实施方式十一：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是所述含有姜黄素的组合物为片剂，每片由150mg姜黄素、40mg蜂胶、6mg灵芝多糖、419.6mg微晶纤维素、150mg微粉硅胶、30mg羧甲淀粉钠、5mg硬脂酸镁和45mg羟丙甲纤维素组成。

具体实施方式十二：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是所述含有姜黄素的组合物为片剂，每片由150mg姜黄素、0.075mg吡啶甲酸铬、40mg蜂胶、6mg灵芝多糖、419.6mg微晶纤维素、150mg微粉硅胶、30mg羧甲淀粉钠、5mg硬脂酸镁和45mg羟丙甲纤维素组成。

本实施方式中将含有姜黄素的组合物用于辅助降血糖功能试验，试验过程如下：

1、对象与方法

1.1受试对象

按自愿原则选择经饮食控制或口服降糖药物治疗后病情稳定，不需要更换药物品种及剂量、仅服用维持量的2型糖尿病患者，空腹血糖≥每升7.8毫摩尔；排除1型糖尿病和严重心、肝、肾脏等主要脏器疾患者。符合上述标准的患者80例随机分为试食组和对照组，2组病程、服药种类、临床表现等经均衡性检验，具有可比性。每组受试者40例，最后试验有效病例38例。

1.2方法

试验前对每一位受试者按性别、年龄和劳动强度、理想体重，参照原来生活习惯，规定相应的饮食。试验期间2组坚持饮食控制、原有药物种类和剂量不变。试验组加服含有姜黄素的组合物，每天3次，每次2片，连续观察30天。

1.3观察指标

各项指标在试验开始及结束时各检查1次。测定所用生化试剂全部为中生公司产品。贝科曼全自动生化分析仪、美国库尔特GT型血球计数仪、美国AMES200型尿分析仪。

1.3.1功效性观察：

按有关标准观察临床症状改善率，主要临床症状包括口渴多饮、多食易饥、倦怠乏力和多尿等。测定试验前后空腹血糖、餐后2h血糖(受试者食用100g精粉馒头，2h后采血测定)

及试食前后尿糖。

1.3.2安全性观察：

①一般症状体征的观察包括精神、睡眠、饮食、血压等；②血生化指标包括总胆固醇、甘油三酯、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白尿素氮、肌酐等测定；③血常规检查包括白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白的检查；④胸透、心电图、腹部B超。

1.4统计学处理

采用SPSS 10.0for Windows，分别采用x2检验和重复测量方差分析，α＝0.05。

2结果

2.1本发明组合物对糖尿病主要临床症状的影响

试食组糖尿病主要临床症状：口渴多饮5.3％(2/38)、多食易饥18.4％(7/38)、倦怠乏力7.9％(3/38)和多尿5.3％(2/38)；对照组分别为76.3(29/38)，50％(19/38)，92.1％(35/38)和39.5％(15/38)。试食含有姜黄素的组合物组均优于对照组(P＜0.05)。

2.2本发明组合物对血糖、尿糖的影响

见表1。由表1可见，2组试验前空腹血糖及餐后血糖差异无统计学意义(P＞0.05)，试验后试食组空腹血糖、餐后血糖及尿糖下降幅度分别为21.2％，17.0％和64.3％，均高于对照组的6.3％，6.3％和7.1％(P＜0.01)。

表1试验前后空腹餐后血糖及尿糖测定结果(mmol/L)

表2试验前后安全性指标检测结果

表2显示2组血生化指标、血常规试验前后均在正常范围内，经重复测量数据的方差分析，差异无统计学意义(P＞0.05)。胸透、心电图、腹部B超试验前后均正常。

3、结果

结果表明：本实施方式组合物能降低空腹血糖、餐后血糖和尿糖，受试者试食后血常规、肝肾功能无明显改变。根据国家食品与药品监督管理局《保健食品检验和技术评价规范》，本实施方式组合物具有辅助调节血糖作用。

具体实施方式十三：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是所述含有姜黄素的组合物为片剂，每片由150mg姜黄素、0.05mg吡啶甲酸铬、40mg蜂胶、6mg灵芝多糖、419.6mg微晶纤维素、150mg微粉硅胶、30mg羧甲淀粉钠、5mg硬脂酸镁和45mg羟丙甲纤维素组成。

具体实施方式十四：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是所述含有姜黄素的组合物为片剂，每片由150mg姜黄素、0.1mg吡啶甲酸铬、40mg蜂胶、6mg灵芝多糖、419.6mg微晶纤维素、150mg微粉硅胶、30mg羧甲淀粉钠、5mg硬脂酸镁和45mg羟丙甲纤维素组成。

本实施方式中将具体实施方式十三的含有姜黄素的组合物、本实施方式的含有姜黄素的组合物用于辅助降血糖功能试验，试验过程如下：

1材料与方法

1.1试验材料

具体实施方式十三的含有姜黄素的组合物、本实施方式的含有姜黄素的组合物，体重为(350±30)g的雄性SD大鼠，雄性SD大鼠由中国科学院上海试验动物中心提供(动物质量合格证：中科动管第003号)，四氧嘧啶(美国Sigma公司产品，规格：10gP瓶，分析纯)，葡萄糖试剂盒(由卫生部上海生物制品研究所提供)，果糖胺试剂盒(由上海复旦张江生物医药有限公司提供，其他试剂均为国产分析纯。

1.2糖尿病动物模型的建立和试验动物分组

雄性SD大鼠禁食不禁水24h，测空腹血糖值后，按照每千克体重40mg的剂量尾静脉注射四氧嘧啶，7d后动物禁食不禁水12h，测定血糖值，选择血糖值在20mmolPL左右的为糖尿病大鼠。将糖尿病大鼠随机分为4组(各组动物平均血糖值相差不应大于111mmolPL)，每组12只，分别为模型组、具体实施方式十三含有姜黄素的组合物组(WSP1)，本实施方式组合物组(WSP2)。

阳性对照组(拜糖苹)，另取12只雄性SD大鼠组成正常对照组。

1.3糖尿病动物的给药方法

将3.3g具体实施方式十三组合物(用WSP1表示)溶于1000ml质量浓度为1％羧甲基纤维素钠中，制成受试药液，然后按每100g体重1mL灌胃。

将6.6g本实施方式组合物(用WSP2表示)溶于1000ml质量浓度为1％羧甲基纤维素钠中，制成受试药液，然后按每100g体重1mL灌胃。

阳性对照组：拜糖苹用生理盐水配成溶液(浓度为1gPL)，按每100g体重1mL灌胃。

正常组、模型组每天用质量分数为0.9％的生理盐水按每100g体重1mL灌胃。

所有动物每天加一次饲料，自由饮水。

每天早上9:00和下午3:00前2次灌胃给药，持续8周。

1.4测定方法

每周动物禁食不禁水12h后，尾静脉取血一次，经过37℃水浴加热1h，以3000rPmin离心10min，分离血清，测各组血糖值。给药7周后所有SD大鼠眼球取血，经过37℃水浴加热1h，以3000rPmin离心10min，分离血清，测定血糖和果糖胺。

1.5数据统计

用NDST818W软件统计，计量资料用t检验评价试验结果。

2结果与分析

2.1本发明组合物对糖尿病大鼠血糖影响

本发明组合物对糖尿病大鼠血糖影响结果见表3。

表3糖尿病及正常对照组SD大鼠血糖浓度8周的变化单位：mol/L

从统计结果可以看出，第1周糖尿病模型组与组合物组(WSP1及WSP2)的血糖统计结果差异不显著，与正常对照组相比差异极显著，说明糖尿病模型的复制是成功的。糖尿病模型组的血糖水平在试验期间处于稳步上升状态，而给予组合物治疗的糖尿病大鼠血糖上升的趋势平缓，经过7周的治疗，在一定程度上有效地控制了糖尿病大鼠血糖的上升，说明组合物可以延缓糖尿病血糖值的升高，对于治疗糖尿病起到重要的作用。给药1周后，WSP1，WSP2，阳性组与模型组相比差异不显著，但是与模型组相比分别下降了13.2％，11.0％和15.9％；给药2周后，各组与模型组相比分别下降了22.3％，17.8％，和16.5％，其中WSP1与模型组相比差异显著(P＜0.05)，其他组与模型组相比差异不显著；给药3周后，各组与模型组相比分别下降了22.2％，28.0％和14.2％，其中WSP1，WSP2及阳性对照组与模型组相比差异极显著(P＜0.01)；给药4周后，各组与模型组相比分别下降了17.9％，12.8％和14.5％，其中WSP1，阳性组与模型组相比差异显著(P＜0.05)；给药5周后，各组与模型组相比分别下降了27.3％，13.4％和2419％，其中WSP1，阳性组与模型组相比差异极显著(P＜0.01)，给药6周后，各组与模型组相比分别下降了33.8％，27.1％和18.2％，其中WSP1，WSP2及阳性对照组与模型组相比差异极显著(P＜0.01)，给药7周后，各组与模型组相比分别下降了30.4％，26.4％和23.5％，其中WSP1，WSP2，及阳性对照组与模型组相比差异极显著(P＜0.01)。由此可以看出，随着时间的延长，不论WSP1组还是WSP2组均能较好地控制血糖，并且控制血糖的效果与给药时间成正相关。

2.2组合物对糖尿病大鼠果糖胺(FRU)的影响结果见表4。

表4

从FRU的统计结果可以看出，WSP1，WSP2，阳性对照组与模型组相比分别下降了21.5％，19.4％和17.0％，其中WSP1，WSP2，阳性对照组与模型组相比差异极显著(P＜0.01)，这一结果与空腹血糖值测定结果一致。

结论：

从本试验的结果可以看出，不同比例的组合物组(WSP1及WSP2)大鼠的果糖胺水平均比模型组低，而且组合物的降血糖效果与拜糖苹差异不显著。从每周的空腹血糖水平可以看出，在试验期间，组合物组的血糖上升程度比模型组趋势要缓和，而且随着时间的延长，效果越来越明显。

本实施方式中将本实施方式的含有姜黄素的组合物用于急性毒性试验，试验过程如下：

(1)试验材料

a、样品(受试物)本实施方式组合物

b、试验动物：Wistar品系大鼠(许可证号：SCXK-(吉)2003-0001)均购自吉林大学医学院基础医学部试验动物中心，体重60-80g，雌雄各半。

(2)样品的制备

将330mg本实施方式组合物(用WSP2表示)溶于1ml浓度为1％羧甲基纤维素钠中制成受试物。

(3)试验设计：根据保健食品安全性毒理学评价程序和检验方法规范，采用最大耐受量法，即24小时内用最大使用浓度和最大灌胃容量，经口给予受试物。

(4)试验方法：动物购买后在本试验室条件下饲养(饲养条件为温度：22～25℃；湿度：45％～55％；光照：自然光照)，观察动物的一般状况，3日后挑选健康状况良好的大、小鼠各20只，雌雄各半，投入试验，大、小鼠体重分别为180～220g和18～22g，给予最大灌胃容量和最大使用浓度，试验前将大、小鼠称重编号，禁食16小时后，经口分两次于1日内灌胃，灌胃容量为20ml/kg.bw，剂量相当于13.32g/kg.bw，观察期为14天。

(5)观察指标：中毒表现及死亡时间

(6)试验结果：在14天观察期内，两性别大、小鼠状态良好，未出现任何中毒症状，无动物死亡，根据试验剂量设计，观察的结果及大、小鼠急性毒性判定标准，可以认为该受试物的大、小鼠经口急性毒性均大于13.32g/kg.bw，属无毒物质。

2、采用本实施方式含有姜黄素的组合物喂养30天试验

(1)试验材料：

a、样品(受试物)：姜黄素由河北食品添加剂有限公司提供，为橙黄色粉末，具有姜黄特别的香辛味，感官未见异常，生产批号为080111；吡啶甲酸铬由沈阳还中天精细化工厂提供，为深红色细小结晶性粉末，感官未见异常，生产批号为20070605；胡椒碱由西安华萃生物技术有限责任公司提供，为类白色粉末，有辛辣味，感官未见异常，生产批号为SH080510。

b、试验动物：Wistar品系大鼠(许可证号：SCXK-(吉)2007-0003)均购自吉林大学医学院基础医学部试验动物中心，体重60-80g，雌雄各半。在本试验室条件下饲养，观察动物的一般状况。

(2)剂量设计：按照《保健食品毒理学评价程序》规定。下设两个剂量组及另设一个空白对照组，采用经口灌胃方法给予受试物，按10ml/kg.bw容量进行灌胃，连续30天。各剂量组灌胃体积一致，每天灌胃的时间点相似。

(3)观察指标

A.一般情况观察：每天观察并记录动物的一般表现、行为、中毒表现和死亡情况。每周称一次体重和2次食物摄入量，计算每周及总的食物利用率。

B.血液学指标：于试验结束时测定血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数及分类。

C.血液生化学指标：谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、肌酐、血糖、血清白蛋白、总蛋白、总胆固醇和甘油三酯。

D.病理检查：大体解剖、脏器称重(肝、肾、脾、睾丸的绝对重量和相对重量)、组织病理学检查(肝、肾、脾、胃肠、睾丸及卵巢)。

(4)数据处理：将所观察到的结果，计量资料采用方差分析或t检验，计数资料采用X2检验、泊松分布。

(5)试验结果：30天喂养的整个试验过程中，各组动物一般状况良好，行为正常，未见任何中毒表现，亦动物死亡，试验结果表明，姜黄素复方受试物对大鼠体重增长，大鼠各周及总食物利用率，血红蛋白含量，红细胞及白细胞分类计数以及各项生化指标，各脏器绝对重量，脏/体比值等均无明显影响，病理组织学检查亦未见异常。

Claims (5)

1.一种含有姜黄素的组合物，其特征在于含有姜黄素的组合物含有三价铬和姜黄素，三价铬为0.001～0.1重量份，姜黄素为100～400重量份；其中所述三价铬由铬酵母、吡啶甲酸铬、烟酸铬及三氯化铬中的一种或其中几种组成。

2.根据权利要求1所述的含有姜黄素的组合物，其特征在于含有姜黄素的组合物还含有蜂胶和/或灵芝多糖，其中蜂胶为100～400重量份，灵芝多糖为10～100重量份。

3.根据权利要求2所述的含有姜黄素的组合物，其特征在于所述含有姜黄素的组合物按照重量份数含有0.03～0.08份吡啶甲酸铬、110～300份蜂胶、40～70份灵芝多糖和200～390份姜黄素。

4.根据权利要求2所述的含有姜黄素的组合物，其特征在于所述含有姜黄素的组合物按照重量份数含有0.06份吡啶甲酸铬、200份蜂胶、50份灵芝多糖和150份姜黄素。

5.权利要求1所述姜黄素作为制备调节血糖组合物的应用，其特征在于姜黄素用于制备调节血糖组合物。

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