CN1961866A - 一种雷公藤多甙纳米乳药物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗类风湿性关节炎的中药——雷公藤多甙纳米乳。该制剂由雷公藤多甙雷公藤多甙0.10％～2.00％、表面活性剂15.00％～40.00％、助表面活性剂0.00％～10.00％、油3.00％～10.00％、促渗剂0.00％～5.00％、蒸馏水55.00％～75.00％和余量的蒸馏水组成。该纳米乳外观呈透明状，粒径在10～100nm之间。该雷公藤纳米乳稳定性好，能较快地渗透进入皮肤，具有很好的抗炎、镇痛和免疫抑制作用，且本制剂提高了雷公藤多甙的溶解度，克服其在体内半衰期短、血药浓度变化波动大的缺点，降低其毒副作用，而且通过透皮给药，提高患者的顺应性，便于随时给药和停药。

Description

一种雷公藤多甙纳米乳药物及其制备方法

技术领域

本发明属于医药领域，涉及一种治疗具有抗炎、镇痛、免疫抑制作用的抗类风湿性关节炎药物雷公藤多甙的新剂型，具体涉及一种雷公藤多甙纳米乳药物及其制备方法。

背景技术

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种以累及周围关节的多系统炎症性自身免疫疾病。对称性、周围多个关节的慢性炎症病变是RA的特征性症状，其临床表现为受累的关节疼痛、肿胀、功能下降、病变呈持续性，反复发作过程。本病呈全球性分布，发病年龄多在25～55岁之间，女性患者是男性患者的2～3倍，我国的患病率为0.32％～0.36％，是造成我国人群丧失劳动力和致残的主要病因之一。

雷公藤(Triterygium Wilfird Hook)属卫茅科植物，别名很多，如黄药根、断肠草、南蛇根、三棱花等。最早收载于《神农本草经》，此药有大毒，具有祛风除湿、清热解毒、消肿止痛、活血通络之功能。根据近年来各地的试验研究及临床应用，其主要药理作用有抗炎、抗菌、免疫抑制、活血化瘀、抗癌等。自20世纪60年代雷公藤用于临床治疗以来，其临床应用已十分广泛，在多种疾病治疗中已取得显著的治疗效果，特别是对类风湿性疾病。但雷公藤毕竟属于毒性很强的药物，其临床不良反应多，主要表现在消化系统、皮肤和粘膜、泌尿系统、生殖系统等。其中消化系统不良反应发生率可高达34％，主要是口服雷公藤及其制剂进入胃肠道可刺激粘膜引起的胃纳减少、恶心、呕吐、胃痛、腹泻等症状。目前常用的雷公藤多甙片因不良反应多、毒性较大、长期用药无法耐受限制了其临床应用。

发明内容

本发明的目的是克服现有剂型中的不足，提出一种新的雷公藤多甙纳米乳药物，该纳米乳药物提高雷公藤多甙的溶解度，克服其生物利用度低的缺点，降低其毒副作用，而且，通过透皮给药来提高患者的顺应性，可以随时给药停药，该制剂制备方法简单，生产成本低。

实现上述发明目的的技术方案是一种雷公藤多甙纳米乳药物，其特征在于它是由下述重量百分比的原料制成：

雷公藤多甙      0.10％～2.00％

表面活性剂      15.00％～40.00％

助表面活性剂    0.00％～10.00％

油              3.00％～10.00％

促渗剂          0.00％～5.00％

蒸馏水          55.00％～75.00％

上述原料的总重量为100％。

所述的表面活性剂是大豆卵磷脂、甘油三酯、吐温-80、氢化蓖麻油聚氧乙烯醚(如RH-40)、蓖麻油聚氧乙烯醚(如EL-40)中的任一种。

所述的助表面活性剂的助乳化剂为司盘-80、无水乙醇、正丁醇、甘油、1，3-丁二醇中的任一种。

所述的油相为食用大豆油、液体药用石蜡、食用色拉油、蓖麻油、肉豆蔻酸异丙酯、油酸乙酯、棕榈酸异辛酯中的一种或几种混合物。

所述的促渗剂为氮酮、薄荷油中的任一种。

在有些配方中，不用加入助表面活性剂。还有些配方中所用的表面活性剂或油本身具有促渗功能，故也不用加入促渗剂。

本发明的另一目的是提供一种雷公藤多甙纳米乳制剂的制备方法。

实现上述发明目的的技术方案是一种雷公藤纳米乳的制备方法，包括以下步骤：

1)按配方比例称取原料活性成分、表面活性剂、助表面活性剂、一种油或混合油、蒸馏水和促渗剂，备用；

2)将处方量的雷公藤多甙原料药溶于表面活性剂中，并加入处方量的助表面活性剂和油，混匀备用；

3)将所述量的蒸馏水为水相；

4)在室温下搅拌，同时缓慢滴加水，直至体系呈透明的液体；

5)在室温下将所述量的促渗剂加入到体系中，即得到粒径在10～100nm，外观透明的雷公藤多甙纳米乳透皮制剂。

将所制的雷公藤多甙纳米乳13000r/min离心20min，在4℃、25℃、37℃和60℃条件下留样观察，均未发现破乳、絮凝和分层，且外观无明显变化。

本发明的雷公藤多甙纳米乳外观透明，粒径介于10～100nm，其黏度可根据需要调整，有利于活性成分的吸收，方便给药，提高了患者的顺应性。

本发明与其它现有技术相比，具有以下的有益效果：

1.本发明解决了雷公藤多甙毒性大的问题。通过有效的透皮给药大大减少服药造成的胃肠道反应。

2.本发明所制备的纳米乳药物可以解决传统剂型严重的肝脏首过效应，增加药物在机体内的吸收；

3.可增加雷公藤多甙的分散性，提高药物的生物利用度；

4.纳米乳药物可以进一步加入任意比例的水分稀释，形成澄清透明的纳米乳，该纳米乳热力学稳定，可过滤除菌，易于制备和储存；

5.本发明采用的配方和方法便于大规模工业化生产。

附图说明

图1为空白纳米乳电镜照片。

图2为本发明的雷公藤多甙纳米乳药物的透射电镜照片。

试验例1稳定性试验

1、离心加速试验对纳米乳液稳定性的影响

取制得的本发明适量于离心管中，密封管口，置高速离心机中，以13,000r/min进行离心，经20min离心，纳米乳液仍保持原来外观，澄清透明，未见油水分层现象。

2、光稳定性实验

将本发明雷公藤多甙纳米乳装入玻璃瓶中，密封置于日光下，室温光照10d，于1d、3d、5d、10d取样。结果表明，本发明保持澄清透明外观，颜色没有发生变化，无分层和破乳等现象。

3、温度稳定性实验

将本发明雷公藤多甙纳米乳分装于几个玻璃瓶中，密封之后置于在4℃、25℃、37℃和60℃条件下留样考察3个月，每10d取样观察。结果表明，本发明在此四种温度条件下均保持澄清透明的外观，未破乳和分层。

试验例2本发明雷公藤多甙纳米乳的抗炎和免疫抑制实验及与普通片剂组的药效学比较

1、试验材料

受试药物：按照实施例的配方和方法制备雷公藤多甙纳米乳、市售的雷公藤多甙片(黄石飞云制药有限公司生产，批号：20060117)。

试验动物：昆明种雄性小鼠48只，体重18～22g。

2、试验方法

2.1二甲苯致小鼠耳肿胀试验

动物饲养于普通级动物房，温度为20℃～26℃，湿度为55％～70％，随机分为实验组(高、中、低三个剂量组)和片剂对照组，每组各6只，实验前仔细剪去小鼠腹部皮肤。实验组小鼠腹部涂抹雷公藤多甙纳米乳，每天1次；对照组灌服雷公藤多甙片生理盐水混悬液。用药第5d，给药30min后，用棉签蘸二甲苯对右耳进行双面涂抹。致炎1h后颈椎脱臼处死小鼠，取其左右耳，用6mm打孔器打下相同的圆耳片，电子天平称重。以两耳片的重量差异为肿胀度，并按下式计算肿胀抑制率：抑制率＝(空白组肿胀度-实验组肿胀度)/空白组肿胀度×100％

2.2乙酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性试验

动物饲养于普通级动物房，温度为20℃～26℃，湿度为55％～70％，随机分为实验组(高、中、低三个剂量组)和片剂对照组，每组各6只。实验组小鼠腹部涂抹雷公藤多甙纳米乳，每天1次；对照组灌服雷公藤多甙片生理盐水混悬液，每天1次。用药第5d，给药30min后，各尾静脉注射0.5％伊文思蓝生理盐水溶液0.2mL，随即腹腔注射0.6％的乙酸溶液0.1mL/10g体重，0.6％的醋酸溶液0.2mL只。20min后脱颈椎处死小鼠，剪开腹腔，用6mL生理盐水冲洗腹腔数次，合并冲洗液加入生理盐水至10mL，静置片刻，3000r·min^-1离心15min，取上清液，于波长590nm处进行比色，测定各组动物腹腔冲洗液吸光度值(A)。

3、试验结果

3.1动物耳部肿胀率和肿胀抑制率见表1。由表中结果可以看出，雷公藤多甙片组和雷公藤多甙纳米乳三个剂量组均可显著抑制二甲苯致炎的耳肿胀。且纳米乳剂量组的抑制率显著高于普通片剂组和阿司匹林组，说明纳米乳药物载体使雷公藤多甙的抗炎疗效显著提高。

3.2小鼠腹腔毛细血管通透性试验结果见表1。由结果可以看出雷公藤多甙片组和雷公藤多甙纳米乳剂量组及阿司匹林组的吸光度值显著低于空白模型组，雷公藤多甙片组和阿司匹林组差异显著，雷公藤多甙纳米乳剂量组差异极显著，雷公藤多甙片剂组与纳米乳组的吸光度值也存在显著性差异。说明雷公藤多甙可显著降低血管的通透性，抑制炎症的发生或减少炎症的渗出，且纳米乳药物载体使雷公藤多甙的疗效显著提高。

表1雷公藤多甙纳米乳耳肿胀和抑制率的影响及对腹腔血管通透性的影响

组别	动物(只)	剂量(mg/kg)	肿胀度(mg)	肿胀抑制率(％)	吸光度值(A)
						空白模型组雷公藤多甙片组雷公藤多甙纳米乳高剂量组雷公藤多甙纳米乳中剂量组雷公藤多甙纳米乳低剂量组阿司匹林组	666666	08.7517.58.754.37200	14.1±0.28.3±0.3*4.1±0.5**#5.0±0.2*#5.2±0.4*#8.5±0.6	41.170.764.363.138.3	0.228±0.0130.176±0.004*0.111±0.003**#0.124±0.003**#0.128±0.001**#0.168±0.002*

注：空白模型组肿胀度和吸光度值与其他试验组比较显示：* 0.01＜P＜0.05、**P＜0.01。雷公藤多甙片组的肿胀度和吸光度值与雷公藤多甙纳米乳组比较显示：#P＜0.01。

4讨论

雷公藤多甙为治疗类风湿性关节炎的药物，但治疗剂量与中毒剂量相近，影响了药物的临床应用，把其制成纳米剂型后通过透皮给药，相同剂量下显著增强了药物的疗效，且可降低对胃肠道等器官的毒副作用。推荐使用剂量为中剂量或低剂量。

实验过程中观察本发明对皮肤的刺激性。雷公藤多甙纳米乳高剂量组中有两只小鼠腹部出现皮肤反应，按照皮肤刺激反应评分标准打分为0.49～2，属于中毒刺激，其他四只按照皮肤刺激反应评分标准打分为0～0.49，属于无皮肤刺激。其他剂量组评分为0～0.49，属于无刺激。结果表明本发明在推荐剂量范围内对动物无刺激，由于动物对刺激性物质比人要敏感，可以确定其对人皮肤无刺激性作用。

下面结合具体实施例子来进一步说明本发明的产品和制备方法。

具体实施方式

实施例1

1)称取雷公藤多甙0.01g、聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油1.80g、棕榈酸异辛酯0.20g、蒸馏水7.99g，备用。

2)将所述重量的雷公藤多甙0.01g、聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油1.80g、混匀并使其溶解，加入棕榈酸异辛酯0.20g，使雷公藤多甙完全溶解并作为为油相。

3)将所述重量的蒸馏水作为水相。

4)在室温下搅拌油相，搅拌的同时缓慢滴加蒸馏水，直至体系呈透明的液体，即得到粒径在10～100nm的雷公藤多甙纳米乳。

实施例2

1)称取雷公藤多甙0.18g、Tween-80 2.88g、Span-80 0.48g、石蜡油1.44g、氮酮0.20g、蒸馏水7.10g，备用。

2)将所述重量的雷公藤多甙0.08g和Tween-80 2.88g混匀并使其溶解，加入Span-80 0.48g、石蜡油1.44g，使雷公藤多甙完全溶解并作为油相。

3)将所述重量的蒸馏水作为水相。

4)在室温下搅拌油相，搅拌的同时缓慢滴加蒸馏水，直至体系呈透明的液体，即得到粒径在10～100nm的雷公藤多甙纳米乳。

5)在室温下将所述重量的促渗剂氮酮加入到体系中

实施例3

1)称取雷公藤多甙0.40g、聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油10.00g、肉豆蔻酸异丙脂1.10g、蒸馏水21.90g，备用。

2)将所述重量的雷公藤多甙0.40g、聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油10.00g、肉豆蔻酸异丙脂1.10g，在室温下混匀，使雷公藤多甙完全溶解并作为油相。

3)将所述重量的蒸馏水作为水相。

4)在室温下搅拌油相，搅拌的同时缓慢滴加水，不断搅拌直至体系呈透明的液体。即得到粒径在10～100nm的雷公藤多甙纳米乳。

实施例4

1)称取雷公藤多甙0.30g、Tween-80 3.36g、Span-80 0.84g、石蜡油1.04g、氮酮0.20g、蒸馏水9.26g，备用。

2)将所述重量的雷公藤多甙0.30g和Tween-80 3.36g混匀并使其溶解，加入Span-80 0.84g、石蜡油1.04g，使雷公藤多甙完全溶解并作为油相。

3)将所述重量的蒸馏水作为水相。

4)在室温下搅拌油相，搅拌的同时缓慢滴加蒸馏水，直至体系呈透明的液体，即得到粒径在10～100nm的雷公藤多甙纳米乳。

5)在室温下将所述重量的促渗剂氮酮加入到体系中。

Claims (8)

1.一种雷公藤多甙纳米乳药物，其特征在于它是由下述重量百分比的原料制成：

雷公藤多甙       0.10％～2.00％

表面活性剂       15.00％～40.00％

助表面活性剂     0.00％～10.00％

油               3.00％～10.00％

促渗剂           0.00％～5.00％

蒸馏水           55.00％～75.00％

上述原料的总重量百分比为100％。

2.根据权利要求1所述的雷公藤多甙纳米乳，其特征在于，所述的表面活性剂是大豆卵磷脂、甘油三酯、吐温-80、聚氧乙烯醚氢化蓖麻油(RH-40)、蓖麻油聚氧乙烯醚(EL-40)中的任一种。

3.根据权利要求1所述的雷公藤多甙纳米乳，其特征在于，所述的所述的助表面活性剂的助乳化剂为司盘-80、无水乙醇、正丁醇、甘油、1，3-丁二醇中的任一种。

4.根据权利要求1所述的雷公藤多甙纳米乳，其特征在于，所述的所述的油相为食用大豆油、液体药用石蜡、食用色拉油、蓖麻油、肉豆蔻酸异丙酯、油酸乙酯、棕榈酸异辛酯中的一种或几种混合物。

5.根据权利要求1所述的雷公藤多甙纳米乳，其特征在于，所述的所述的促渗剂为氮酮、薄荷油中的任一种。

6.根据权利要求1所述的雷公藤多甙纳米乳，其特征在于，所述的蒸馏水是蒸馏水。

7.根据权利要求1所述的雷公藤多甙纳米乳，其特征在于，所述的纳米乳的粒径在10～100nm之间。

8.制备权利要求1所述的雷公藤多甙纳米乳的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)按配方比例称取原料活性成分、表面活性剂、助表面活性剂、一种油或混合油、蒸馏水和促渗剂，备用；

2)将处方量的雷公藤多甙原料药溶于表面活性剂中，并加入处方量的助表面活性剂和油，混匀备用；

3)将处方量的蒸馏水为水相；

4)在室温下搅拌，同时缓慢滴加水，直至体系呈透明的液体；

5)在室温下将处方量的促渗剂加入到体系中，即得到粒径在10～100nm，外观透明的雷公藤多甙纳米乳。