CN101669915A - 冬凌草甲素干乳及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了冬凌草甲素干乳及其制备方法。该干乳稳定性好，可长期存放，加水复建后得到的冬凌草乳剂粒径小，可用于静脉注射、肌肉注射或口服。干乳制剂也可以直接用于口服或用于制备其他剂型，包括片剂、胶囊、干混悬剂、粉雾剂。该干乳含有0.01％～20％的冬凌草甲素，5％～80％的油脂，0.5％～25％的乳化剂，1％～50％的支撑剂。该干乳的制备方法包括喷雾干燥法、冷冻干燥法、减压蒸馏法和吸干法。

Description

冬凌草甲素干乳及其制备方法

技术领域

本发明涉及生物医药领域，特别涉及冬凌草甲素干乳及其制备方法。

背景技术

冬凌草甲素(Rubescensin A)是从冬凌草(Rabdosia rubescens)中提取的一种烯类二萜。冬凌草又名冰凌草，具有清热解毒、消炎止痛之功效，产于我国河南、河北、山西、四川等地，也是民间治疗食管癌和胃癌的一种草药。1991年我国卫生部批准将冬凌草干燥叶及地上部分作为中药材，收入部颁中药材标准。我国从二十世纪70年代起对冬凌草的化学成分、药理作用及临床应用开始研究，从中提取到多种贝壳杉烯类二萜，包括冬凌草甲素、乙素、丙素、丁素、戊素等，其中以冬凌草甲素为主(刘晨江，赵志鸿.冬凌草的研究进展.中国药学杂志，1998，33(10)：577)。用乙醚或乙醇提取即可得到冬凌草甲素。

体内外抗癌实验表明，冬凌草甲素对很多癌细胞系都有明显的抑制杀灭作用，包括对多种移植性小鼠肿瘤株和体外培养的人癌细胞如人体食道癌109细胞株、人体肝癌BEL 7402、人体食管鳞癌细胞株CAES-17、肝癌及组织细胞肉瘤实体型、L1210、P388、艾氏腹水癌ECA、S180腹水型，平均抑瘤率为41％，其中对食管癌CaEs-17和胃腺癌MGC80-3最敏感。50mg/L的冬凌草甲素对食管癌CaEs-17和胃腺癌MGC80-3可产生超过3个对数杀灭的细胞毒效应。冬凌草甲素能抑制DNA、RNA的合成，对于DNA合成期(S)、有丝分裂期(M)及DNA合成后期或分裂前期(G2)的细胞有杀伤作用。它可以延长细胞周期时间，其中对G2期的延缓更加明显，可引起细胞在G2期及M期的堆积。这种抑制在一定范围内，会随药物作用时间和浓度的增加而增强，说明冬凌草甲素抗癌活性的作用位点可能是在核苷酸底物聚合形成DNA的过程中(林碧莲，等.冬凌草素的抗癌分子药理与临床应用策略.广东药学，2000，10(4)：8)。另外冬凌草甲素对K 562/A 02细胞有诱导凋亡、逆转耐药性的作用，是一种很有希望的抗白血病药(郭娟娟，等.安徽中医学院学报，2000，19(3)：34)。冬凌草甲素对活性氧自由基也有清除作用。

临床研究证明冬凌草粗提物和冬凌草甲素对食管癌、原发性肝癌、膀胱癌、胰腺癌、大肠癌和乳腺癌都有明显疗效(河南医学院第一附属医院肿瘤科.冬凌草单用及与化疗药物并用治疗恶性肿瘤50例临床疗效观察.河南医学院学报，1975，10(2)：17；王瑞林.冬凌草与化疗合用治疗食管癌增效作用的探讨.中华肿瘤杂志，1986，8(4)：291；陈绍棠，等.鲁山冬凌草治疗食管贲门癌80例疗效观察.中西医结合杂志，1988，8(1)：43；王瑞林.食管癌437例临床疗效观察.中西医结合杂志，1989，9(12)：74；河南省冬凌草研究协作组.冬凌草治疗食管癌、贲门癌95例临床疗效结果.肿瘤防治研究，1994，11(2)：86)。

冬凌草甲素为白色结晶性粉末，不溶于水，溶于乙醇和乙酸乙酯。在已报道的研究中，通常采用冬凌草甲素的口服制剂或采用冬凌草甲素乙醇溶液静脉注射。由于冬凌草甲素不溶于水，静脉注射采用乙醇，对人体产生一定刺激，影响了患者适应性，有时会很难给药。

乳剂(emulsions)系指互不相溶的两相液体混合，其中一相液体以液滴状态分散于另一相中形成的非均匀相液体分散体系。乳剂液滴大小一般在0.1～10微米之间。乳剂中的液滴分散度很大，药物吸收和药效的发挥很快，有利于提高生物利用度；脂溶性药物制成乳剂能保证剂量准确，而且使用方便；静脉注射乳剂注射后分布较快、药效高、有靶向性；静脉营养乳剂可以提供高能量。口服乳剂容易被淋巴系统摄取，静脉注射乳剂在体内可以被网状内皮系统吞噬(如肝、脾、肾)，具有靶向性。因此乳剂是抗癌药物常采用的剂型，如鸦胆子油乳、氟尿嘧啶乳剂、康莱特注射液等。乳剂中的油脂还可以提供一定营养能量。

但乳剂作为一种热力学不稳定体系，易发生分层、絮凝甚至破乳等物理不稳定现象，给生产、贮存、运输和应用带来了极大不便和不良影响，而将液态乳转变为干乳则是改善这些问题的一种有效途径。自20世纪60年代以来，人们即开始尝试将液体乳剂制备成干乳，其制备过程主要是在液体乳剂(原乳)中加入一定水溶或水不溶性载体(支撑剂)，然后通过喷雾干燥、冷冻干燥、减压蒸馏等方法将水分除去或吸收，最终制得固体颗粒或粉末，即干乳，其中油相并未除去，加水后可以迅速分布于水中恢复成均匀乳剂。

发明内容

本发明人发现可以将冬凌草甲素制备成干乳。该干乳稳定性好，可长期存放，加水复建后乳剂粒径小，可用于静脉注射、肌肉注射或口服。干乳制剂也可以直接用于口服或制备成其他剂型，包括片剂、胶囊、干混悬剂、粉雾剂。本发明因此首次设计并制备了冬凌草甲素干乳。

本发明中的冬凌草甲素干乳，其特征是该干乳含有0.01％～20％的冬凌草甲素，5％～80％的油脂，0.5％～25％的乳化剂，1％～50％的支撑剂；优选的是该干乳含有0.1％～10％的冬凌草甲素，10％～60％的油脂，2％～20％的乳化剂，10％～50％的支撑剂；更优选的是该干乳含有0.5％～5％的冬凌草甲素，20％～50％的油脂，5％～10％的乳化剂，20％～40％的支撑剂。上述所有百分数为重量百分数。

在某些减压蒸馏法制备冬凌草甲素干乳过程中，不需要乳化剂参与，因此本发明又设计了一种冬凌草甲素干乳，其特征是该干乳含有0.01％～20％的冬凌草甲素，5％～80％的油脂，1％～50％的支撑剂；优选的是该干乳含有0.1％～10％的冬凌草甲素，10％～60％的油脂，10％～50％的支撑剂；更优选的是该干乳含有0.5％～5％的冬凌草甲素，20％～50％的油脂，20％～40％的支撑剂。上述所有百分数为重量百分数。

在某些吸干法制备冬凌草甲素干乳过程中，采用吸收剂而不是支撑剂制备冬凌草甲素干乳，因此本发明又设计了另一种冬凌草甲素干乳，其特征是该干乳含有0.01％～20％的冬凌草甲素，5％～80％的油脂，0.5％～25％的乳化剂，1％～50％的吸收剂；优选的是该干乳含有0.1％～10％的冬凌草甲素，10％～60％的油脂，2％～20％的乳化剂，10％～50％的吸收剂；更优选的是该干乳含有0.5％～5％的冬凌草甲素，20％～50％的油脂，5％～10％的乳化剂，20％～40％的吸收剂。上述所有百分数为重量百分数。

本发明中的冬凌草甲素干乳含有的油脂可选自大豆油、玉米油、山茶油、芝麻油、花生油、橄榄油、棉籽油、菜籽油、蓖麻油、油酸乙酯、矿物油，优选的是大豆油、玉米油、山茶油、油酸乙酯，更优选的是大豆油和玉米油。

本发明中的冬凌草甲素干乳含有的乳化剂可选自磷脂、氧乙烯氧丙烯嵌段共聚物、司盘、聚山梨酯(吐温)、聚氧乙烯脂肪醇醚、聚氧乙烯氢化蓖麻油、蔗糖脂肪酸酯，优选的是磷脂、氧乙烯氧丙烯嵌段共聚物、聚山梨酯，更优选的是大豆磷脂、泊洛沙姆、吐温80。

本发明中的冬凌草甲素干乳含有的支撑剂选自羟丙甲纤维素、羟乙基淀粉、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、乳糖、海藻糖、甘露糖、木糖、半乳糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、甘氨酸、明胶、麦芽糊精、糊精、环糊精、右旋糖酐、尿素、甘氨酸、酪蛋白、白蛋白、胶体硅、磷酸氢钙、硅酸铝镁。

本发明中的冬凌草甲素干乳含有的吸收剂选自亲水性硅胶、亲油性硅胶、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、氧化镁、碳酸镁、甘油磷酸钙、氢氧化铝、蔗糖、乳糖、甘露醇，优选自亲水性硅胶、亲油性硅胶。

本发明中的冬凌草甲素干乳，除含有冬凌草甲素、油脂、乳化剂、支撑剂或吸收剂外，还可以含有制剂制备所需的药用辅料。这些制剂制备所需的药用辅料选自助溶剂、等渗调节剂、矫味剂、着色剂、pH调节剂、抗氧化剂、防腐剂。助溶剂可选自乙醇、乙二醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、醋酸、N’，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜，优选的是乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇。等渗调节剂选自氯化钠、葡萄糖、甘油、丙二醇、甘露醇、木糖醇、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠，优选自氯化钠、葡萄糖。矫味剂选自各种甜味剂和芳香剂。甜味剂可以选自糖精或其钠盐、甜叶菊苷、阿斯巴甜、甜蜜素、甘草甜素，优选的是糖精钠、甜叶菊苷、阿斯巴甜。芳香剂可以选自各种天然和人工香精以及芳香调味剂，具体选自香兰素、肉桂醛、香矛醇、桉油醇、橙叶油、小茴香油、薄荷醇、薄荷油、柠檬香精、樱桃香精、草莓香精、菠萝香精、杨梅香精、葡萄香精、巧克力香精、咖啡香精、桃子香精。着色剂可以选自胡萝卜素、日落黄、甜菜红、柠檬黄、叶绿素、胭脂红、苋菜红、赤藓红。pH调节剂可以选自乳酸、柠檬酸、盐酸、酒石酸、硼酸、醋酸、磷酸、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、碳酸钠、碳酸氢钠、柠檬酸钠、醋酸钠、乳酸钠、磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、酒石酸盐、氢氧化钠、硼砂、三羟甲基氨基甲烷。抗氧化剂可选自亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、硫脲、维生素C、半胱氨酸、硫代甘油、维生素E叔丁基对羟基茴香醚、二丁甲苯酚、培酸丙酯，优选的是亚硫酸氢钠、维生素C。防腐剂可选自对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、苯甲酸及其盐、山梨酸及其盐。

上述所列举的成分并不是本发明的限制，只要符合冬凌草甲素干乳组成比例并能制备得到干乳或相关剂型的成分都可以应用。

本发明中的冬凌草甲素干乳剂的制备方法，可包括以下步骤：

(1)先制备冬凌草甲素乳剂；

(2)在冬凌草甲素乳剂中加入支撑剂；

(3)干燥。

其中干燥方法优选自喷雾干燥法、冷冻干燥法。

制备冬凌草甲素乳剂的方法可参考本领域专业书籍和文献，或咨询专业技术人员就可以获得。本发明中的冬凌草甲素乳剂的制备方法主要涉及药物和添加剂的溶解和分散。选择合适的方法就可以获得理想粒径的冬凌草甲素乳剂。在冬凌草甲素乳剂中加入支撑剂或吸收剂，然后通过某种干燥方式就可以得到冬凌草甲素干乳；也可以采用其他方法不经过冬凌草甲素乳剂步骤直接得到冬凌草甲素干乳，加入水或水溶液后能形成乳剂。

冬凌草甲素干乳的制备方法，选自喷雾干燥法、冷冻干燥法、减压蒸馏法和吸干法，优选自喷雾干燥法、冷冻干燥法。这些方法在本领域参考文献中可以获得。在喷雾干燥法、冷冻干燥法中，一般地，在冬凌草甲素乳剂中加入适量支撑剂，在喷雾干燥或冷冻干燥设备上进行干燥，就可以得到冬凌草甲素干乳。减压蒸馏法是将支撑剂与含冬凌草甲素的油相或油包水型乳剂混合，加入水相，然后在低温水浴中减压蒸馏除去水分从而得到玻璃态的冬凌草甲素干乳。吸干法是将亲水性吸收剂加入到含冬凌草甲素的油包水型乳剂中吸取水分，形成乳膏状初乳，然后加入亲油性吸收剂，吸干初乳，得到流动性较好的干燥粒子；也可直接将亲水性吸收剂分散到含冬凌草甲素的油相中，再将水相滴加到油相中制得以初乳，然后加入亲油性吸收剂吸干油相，即得冬凌草甲素干乳。

冬凌草甲素干乳加入水或水溶液后，经过适当的振摇或搅拌就可以得到冬凌草甲素乳剂。该乳剂可用于静脉注射、肌肉注射或口服。

冬凌草甲素干乳除了通过加水或水溶液得到冬凌草甲素乳剂外，还可以制备成其他剂型，包括片剂、胶囊、干混悬剂、粉雾剂。选择各种不同剂型所需的适当辅料和工艺就可以制备得到以冬凌草甲素干乳为组成的各种剂型。这些剂型的制备通过查阅本领域专业书籍或咨询本领域专业人员都可以做到。这些剂型可通过不同给药途径给药，包括口服、肺吸入。冬凌草甲素干乳片具体还可以包括口服普通片剂、口服薄膜衣片、口腔崩解片、口腔速溶片、分散片。

上述所列举的冬凌草甲素干乳及相关剂型的制备方法并不是本发明的限制，只要能制备得到冬凌草甲素干乳及相关剂型的方法都可以应用。

具体实施方式

实施例1、冬凌草甲素干乳1号

冬凌草甲素                0.2g

大豆油                    120g

大豆磷脂                  50g

甘油                      3g

甘露醇                    30g

注射用水                  1000ml

将处方量冬凌草甲素、大豆油、大豆磷脂、甘油共同加热至80℃，另取80℃注射用水500ml，一起加入组织捣碎机，并高速搅拌，8000转/分钟，每次持续3分钟，重复3次，得到白色乳剂。乳剂冷却后，加入注射用水至1000ml，在高压乳匀机中循环乳化3次。显微镜下观察，大部分乳滴粒径在1微米以下，只有5％左右的粒子直径在1～2微米。在该乳剂中加入处方量甘露醇，溶解混匀，在冷冻干燥机上干燥，得到疏松的干燥粉末，分装于玻璃安瓿中，即为冬凌草甲素干乳。取适量干乳粉末加入注射用水后，轻微振摇，立刻形成均匀的乳剂。该干乳室温存放2年后，外观没有变化，加水振摇，立刻形成均匀的乳剂。

实施例2、冬凌草甲素干乳2号

冬凌草甲素                      5g

玉米油                          150g

大豆磷脂                        60g

泊洛沙姆P188                    5g

甜菊糖苷                        0.5g

柠檬酸                          1g

苯甲酸钠                        1g

乳糖                            80g

注射用水                        1000ml

冬凌草甲素乳剂的制备工艺类似实施例1，主要是将药物、油相、乳化剂加热溶解后与除乳糖的水溶性成分水溶液混合制备得到乳剂。检测乳滴粒径在1微米以下的占90％，1～2微米的占6％，其余在2微米以上，没有大于5微米的粒子。在乳剂中加入处方量乳糖，溶解混匀，在喷雾干燥机上干燥，得到疏松的干燥粉末，分装于玻璃安瓿中，即为冬凌草甲素干乳。取适量干乳粉末加入注射用水后，轻微振摇，立刻形成均匀的乳剂。该冬凌草甲素干乳在加水复建乳剂后可用于口服，也可以直接口服，稍有甜味，无刺激，患者易接受。该干乳室温存放2年后，外观没有变化，加水振摇，立刻形成均匀的乳剂。

实施例3、冬凌草甲素干乳3号

冬凌草甲素                    20g

乙醇                          20ml

大豆油                        200g

吐温80                        65g

蔗糖硬脂酸酯                  5g

阿斯巴甜                      1g

对羟基苯甲酸甲酯              1g

对羟基苯甲酸丙酯              1g

乳糖                          80g

甘露醇                        50g

注射用水                      1000ml

冬凌草甲素乳剂的制备工艺类似实施例1，主要是将药物、油相、乳化剂、助溶剂加热溶解后与除乳糖、甘露醇的水溶性成分水溶液混合制备得到乳剂。检测乳滴粒径在1微米以下的占90％，1～2微米的占6％，其余在2微米以上，没有大于5微米的粒子。在乳剂中加入处方量乳糖和甘露醇，溶解混匀，在喷雾干燥机上干燥，得到疏松的干燥粉末，分装于铝箔袋中，即为冬凌草甲素干乳。取适量干乳粉末加入注射用水后，轻微振摇，立刻形成均匀的乳剂。该冬凌草甲素干乳在加水复建乳剂后可用于口服，也可以直接口服，稍有甜味，无刺激，患者易接受。该干乳室温存放2年后，外观没有变化，加水振摇，立刻形成均匀的乳剂。

实施例4、冬凌草甲素干乳片

在实施例3制备得到冬凌草甲素干乳粉末中加入10％重量比的微晶纤维素，5％重量比的羧甲基淀粉钠，加入1％重量比的硬脂酸镁，混匀，在压片机上直接压片就可以得到冬凌草甲素干乳片。该干乳片用于口服。体外实验中，该干乳片能迅速崩解，并形成均匀乳剂。

实施例5、冬凌草甲素干乳胶囊

在实施例2制备得到冬凌草甲素干乳粉末中加入2％重量比的滑石粉，混匀，装入胶囊壳，就可以得到冬凌草甲素干乳胶囊。该胶囊用于口服。体外实验中，该干乳胶囊能迅速崩解，并形成均匀乳剂。

实施例6、冬凌草甲素干乳粉雾剂

在实施例1制备得到冬凌草甲素干乳粉末直接装入专门的胶囊壳中，放在粉雾剂专用装置中，就可以得到冬凌草甲素干乳粉雾剂。该粉雾剂用于肺吸入，主要用于肺癌的治疗。

Claims (10)

1.一种冬凌草甲素干乳，其特征是该干乳含有0.01％～20％的冬凌草甲素，5％～80％的油脂，0.5％～25％的乳化剂，1％～50％的支撑剂，上述所有百分数为重量百分数。

2.一种冬凌草甲素干乳，其特征是该干乳含有0.01％～20％的冬凌草甲素，5％～80％的油脂，1％～50％的支撑剂，上述所有百分数为重量百分数。

3.一种冬凌草甲素干乳，其特征是该干乳含有0.01％～20％的冬凌草甲素，5％～80％的油脂，0.5％～25％的乳化剂，1％～50％的吸收剂，上述所有百分数为重量百分数。

4.如权利要求1、2和3其中任意一项所述的冬凌草甲素干乳，含有制剂制备所需的药用辅料，选自助溶剂、等渗调节剂、矫味剂、着色剂、pH调节剂、抗氧化剂、防腐剂。

5.如权利要求1、2和3其中任意一项所述的冬凌草甲素干乳，含有的油脂选自大豆油、玉米油、山茶油、芝麻油、花生油、橄榄油、棉籽油、菜籽油、蓖麻油、油酸乙酯、矿物油。

6.如权利要求1或3所述的冬凌草甲素干乳，含有的乳化剂选自磷脂、氧乙烯氧丙烯嵌段共聚物、司盘、聚山梨酯、聚氧乙烯脂肪醇醚、聚氧乙烯氢化蓖麻油、蔗糖脂肪酸酯。

7.如权利要求1或2所述的冬凌草甲素干乳，含有的支撑剂选自羟丙甲纤维素、羟乙基淀粉、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、乳糖、海藻糖、甘露糖、木糖、半乳糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、甘氨酸、明胶、麦芽糊精、糊精、环糊精、右旋糖酐、尿素、甘氨酸、酪蛋白、白蛋白、胶体硅、磷酸氢钙、硅酸铝镁。

8.如权利要求3所述的冬凌草甲素干乳，含有的吸收剂选自亲水性硅胶、亲油性硅胶、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、氧化镁、碳酸镁、甘油磷酸钙、氢氧化铝、蔗糖、乳糖、甘露醇。

9.如权利要求1所述的冬凌草甲素干乳，其制备方法包括以下步骤：

(1)先制备冬凌草甲素乳剂；

(2)在冬凌草甲素乳剂中加入支撑剂；

(3)干燥。

10.如权利要求9所述的冬凌草甲素干乳，其制备方法中的干燥方法选自喷雾干燥法、冷冻干燥法。