CN105030864A - 一种经皮给药具有镇痛抗炎效果的药物组合物及其应用与制备方法 - Google Patents

Abstract

现有技术中中药挥发油丁香油对布洛芬无透皮促渗效果，吴茱萸油、防风油有透皮促渗效果但本身不具显著镇痛抗炎活性，故目前外用制剂仍用氮酮类作为布洛芬的透皮促渗剂。由此，本发明提供经皮给药具有镇痛抗炎效果的药物组合物，其由川芎油1~80份、布洛芬1~10份（重量）制成。同时本发明提供含有上述药物组合物的外用制剂，优选为凝胶剂、乳膏剂，最优选为凝胶剂。最后提供上述凝胶剂的制备方法。本发明经实验研究首次发现川芎油对布洛芬具有显著的透皮吸收促进作用；并且基于川芎油自身的镇痛抗炎活性和透皮吸收效果，能够与布洛芬发挥镇痛抗炎的协同作用，这是常用促渗剂所不具备的；同时川芎油作为透皮吸收促进剂的安全性明显优于常用促渗剂氮酮。

Description

一种经皮给药具有镇痛抗炎效果的药物组合物及其应用与制备方法

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种经皮给药具有镇痛抗炎效果的药物组合物及应用其制备的外用制剂及其制备方法。

背景技术

布洛芬是临床常用的镇痛抗炎药物，是公认的儿童首选抗炎药，给药途径以口服为主，有片剂、胶囊剂、混悬液等，其副作用主要为消化道反应，如胃烧灼感或消化不良、胃痛或不适感（胃肠道刺激或溃疡形成）、恶心、呕吐等，发生率可达3~9%。将布洛芬制成外用制剂可以克服口服给药存在的不良反应，并且直接作用于患处，例如市售布洛芬乳膏和布洛芬凝胶，可以用于缓解局部软组织疼痛，如肌肉痛、关节痛、腰背痛，以及扭伤、拉伤、劳损引起的疼痛，也可用于骨关节炎的对症治疗。布洛芬的镇痛、消炎作用机制尚未完全阐明，可能作用于炎症组织局部，通过抑制前列腺素或其他递质的合成而起作用，由于白细胞活动及溶酶体酶释放被抑制，使组织局部的痛觉冲动减少，痛觉受体的敏感性降低。从其作用机制上看，也非常适合局部应用。

皮肤是人体中最难通过的生物膜屏障，大多数药物都很难透过皮肤发挥作用。将布洛芬溶液分别口服和经皮给药于兔，经皮给药相对于口服的相对生物利用度约为18.9%，不得不借助于离子导入等物理技术促渗（中国药学杂志，2000,35（3）：189）。因此开发新型透皮吸收促进剂，有效提升其透皮吸收效果，是布洛芬外用发挥镇痛抗炎作用的关键问题。

中药挥发油，也称精油，是从中药中提取分离得到的一类具有挥发性、可随水蒸气蒸馏、与水不想混溶的油状液体。中药挥发油大多具有芳香嗅味，并具有较强的生物活性，某些中药挥发油也具有透皮促渗的效果，因此，如能从镇痛中药中筛选具有镇痛抗炎活性的挥发油与布洛芬协同作用，可以发挥镇痛抗炎与透皮促渗双管齐下的作用。但是目前的研究表明，镇痛抗炎中药挥发油，如丁香油，对于布洛芬并无透皮促渗效果（辽宁中医药大学学报，2013,15（8）：45-47）。而对布洛芬具有透皮促渗效果的中药挥发油，例如吴茱萸油、防风油（中药材，2007,30（5）：571-573）自身又不具有显著的镇痛抗炎活性。目前对于布洛芬外用制剂的透皮促渗效果，仍然是以氮酮类透皮吸收促进剂为好（湖北中医学院学报，2010,12（4）：45-47）。

川芎为伞形科植物川芎LigusticumchuanxiongHort.的根茎，属于活血止痛药，具有活血行气，祛风止痛的功效。川芎辛散温通，既能活血化瘀，又能行气止痛，为“血中之气药”，具有通达气血功效，此外还能治疗风湿痹痛。

川芎中含挥发油，川芎油主要成分为藁本内酯（ligustilide）、3-丁酜内酯（3-butylphthalide）和香桧烯（sabinene）等，其中藁本内酯一般占川芎油的30%以上。川芎油具有活血、镇痛、抗炎等药理作用，川芎油中的主要成分藁本内酯具有确切的镇痛抗炎作用（中国实验方剂学杂志，2011,17（11）：165-168）。

川芎油的透皮促渗作用研究较少，并且有报道表明其对于黄芩中黄酮类成分的透皮吸收不仅没有促进反而产生了抑制效果（中成药，2012,34（3）：580-582）。有报道川芎油可以促渗氟比洛芬，但促渗效果不如油酸，且该报道中川芎油含藁本内酯含量低于20%（药学服务与研究，2006,6（6）：413-416）。也有川芎油促渗丹皮酚的报道，但该报道先采用0.5mL处理皮肤12h后再给药，在实际应用中显然不具备可行性（中国药业，2013,22（5）：6-7）。

发明内容

解决技术问题：为了解决现有技术的不足，本发明提供一种经皮给药具有镇痛抗炎效果的川芎油与布洛芬的组合物，两者联用不仅能够显著提升镇痛抗炎治疗效果，而且川芎油还具有对布洛芬显著的透皮吸收促进作用，因此能够进一步提高现有的布洛芬外用制剂的疗效。

技术方案：为实现以上目的，本发明提供一种川芎油与布洛芬的药物组合物及应用其制备的外用制剂，并提供了外用制剂的制备方法。

一种经皮给药具有镇痛抗炎效果的药物组合物，由川芎油与布洛芬按下列重量份配比所制成：川芎油1~80份，布洛芬1~10份。

作为本发明的进一步改进，川芎油与布洛芬的重量配比为8:1~1:1。

作为本发明的更进一步改进，川芎油与布洛芬的重量配比为4:1。

本发明中川芎油中含有30%以上的藁本内酯，具有更强的透皮促渗作用。

本发明同时提供一种经皮给药具有镇痛抗炎效果的外用制剂，其含有以上的药物组合物与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂制成的临床上任何可接受的外用剂型形式，包括凝胶剂、软膏剂、乳膏剂、贴膏剂、洗剂、搽剂、涂剂、涂膜剂、膜剂。

作为本发明的进一步改进，所述外用剂型形式为凝胶剂、乳膏剂。

作为本发明的更进一步改进，所述外用剂型形式为凝胶剂。

再次，本发明提供上述经皮给药具有镇痛抗炎效果的凝胶剂制备方法，采用卡波姆作为水凝胶基质，采用三乙醇胺或氢氧化钠调碱，布洛芬和川芎油溶解在无水乙醇中加入基质，具体制备步骤如下：

步骤（1）：将1~5份卡波姆细粉，均匀撒于25~125份水中，溶胀；

步骤（2）：用三乙醇胺或氢氧化钠调节pH至6.0~8.0，配成凝胶基质；

步骤（3）：将0.1~0.5份布洛芬和0.8~4份的川芎油溶解于1~10份的无水乙醇中；

步骤（4）：将1份含有布洛芬与川芎油的无水乙醇加入5~15份凝胶基质中，搅匀，分装，即得。

有益效果

本发明经实验研究首次发现川芎油对布洛芬具有显著的透皮吸收促进作用，并且两者在镇痛抗炎方面具有协同作用。因此将两者以一定比例合用后，第一，基于川芎油对布洛芬的透皮吸收促进作用，与常用的促渗剂氮酮相比，能够显著提高布洛芬的透皮吸收效果；第二，基于川芎油自身的镇痛抗炎活性和透皮吸收效果，能够与布洛芬发挥镇痛抗炎的协同作用，这是常用促渗剂所不具备的；第三，皮肤刺激性和皮肤细胞毒性试验结果表明，川芎油作为透皮吸收促进剂的安全性明显优于常用促渗剂氮酮。以上三点相结合，最终为提供了一种给药方便、没有胃肠道不良反应的具有镇痛抗炎作用的新型组合物及其外用制剂，基于中西药的有机结合提供了一种安全有效且顺应性高的新型药品。

附图说明

图1不同浓度川芎油对布洛芬的体外透皮促渗效果（n=5）。

图2含0.8%川芎油布洛芬组中藁本内酯的体外透皮吸收效果（n=5）。

图3不同布洛芬凝胶经皮给药后在大鼠体内的药动学（n=5）。

具体实施方式

下面结合具体实施例进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。

实施例1川芎油对布洛芬的透皮促渗作用

以40%乙醇-生理盐水为溶剂，分别配制0.4%、0.8%和1.2%的川芎油溶液，加入布洛芬，使其浓度为2mg/mL，即得混合溶液。同法配制2mg/mL布洛芬溶液（不含促渗剂），作为对照。取上述溶液各1.5mL，置于Franz扩散池上，以离体大鼠腹部皮肤为皮肤模型，以40%乙醇—生理盐水为接受液，测定不同时间点接受液中布洛芬的浓度，计算累积透过量，考察川芎油对布洛芬的透皮促渗效果，如图1所示。可见加入川芎油后，布洛芬的透皮吸收速度和累积透过量都显著提升，并以0.8%的透皮促渗效果最好。同时测定布洛芬+0.8%川芎油组中藁本内酯的透皮吸收效果，见图2，可见在促渗的同时，川芎油的镇痛抗炎活性成分藁本内酯也同时透皮吸收，从而与布洛芬发挥协同作用。

实施例2布洛芬川芎油凝胶的制备

取3g卡波姆940撒于40g蒸馏水上，室温放置过夜，充分溶胀，再加入4g三乙醇胺，搅匀，备用。另取2g布洛芬和8g川芎油，加入25mL无水乙醇，混匀，备用。将后者缓慢加入前者中，边加边搅拌，再加蒸馏水至100g，搅匀，分装，即得。

实施例3布洛芬川芎油凝胶的制备

布洛芬川芎油凝胶的制备，与实施例2不同的是，川芎油的用量为12g，卡波姆采用卡波姆934。

实施例4布洛芬川芎油凝胶的制备

布洛芬川芎油凝胶的制备，与实施例2不同的是，川芎油的用量为4g，卡波姆采用卡波姆941。

实施例5布洛芬川芎油凝胶的制备

布洛芬川芎油凝胶的制备，与实施例2不同的是，川芎油是先制成羟丙基-β-环糊精包合物后再加入的。

实施例6布洛芬川芎油乳膏的制备

取凡士林24g，羊毛脂3g，十八醇15g，单硬脂酸甘油酯2g，加热至60℃搅匀，制成油相，；另取十二烷基硫酸钠2g，甘油15g，尼泊金乙酯0.4g，纯化水150g，加热至60℃搅匀，制成水相。取川芎油6g和1.5g布洛芬加入油相后，迅速将水相加入油相中搅拌均匀，边搅拌边放冷至室温，即得O/W型乳膏。

实施例7布洛芬川芎油乳膏的制备

布洛芬当归油乳膏的制备，与实施例6不同的是，川芎油的用量为12g。

实施例8布洛芬川芎油乳膏的制备

布洛芬当归油乳膏的制备，与实施例6不同的是，川芎油的用量为3g。

实施例9布洛芬川芎油乳膏的制备

布洛芬当归油乳膏的制备，与实施例6不同的是，川芎油的用量为9g，并且是先制成β-环糊精包合物后再加入的。

实施例10布洛芬川芎油软膏的制备

取十八醇70g，凡士林30g，硬脂酸20g，羊毛脂4g，液状石蜡5g，加热至80℃搅匀，立即加入8g川芎油和2g布洛芬，边加边搅拌放冷至室温，即得。

实施例11布洛芬川芎油贴膏的制备

取30gPVA加入150g水中制成溶液，另取30gPVP和60gCMC-Na加入150g水中制成溶液。将PVA溶液加入到PVP与CMC-Na溶液中，再加入80g甘油，混匀，制成水溶性基质。将25g布洛芬分散溶解在50g川芎油中，加入上述水溶性基质，乳化。加入50g高岭土，混匀。将含药基质涂布于背衬层上，适当干燥，覆盖防黏层，裁切，密封包装，于凉暗处贮存。

实施例12布洛芬川芎油贴膏的制备

布洛芬川芎油贴膏的制备，与实施例11不同的是，川芎油是先制成羟丙基-β-环糊精包合物后再加入的。

实施例13布洛芬川芎油凝胶的镇痛作用

取实施例2中制备的布洛芬川芎油凝胶，同法制备不含促渗剂的布洛芬凝胶和含与川芎油相同比例氮酮的布洛芬凝胶。选用ICR小鼠，雌雄各半，随机分组，每组10只，腹部脱毛，阴性组给予空白凝胶剂，阳性组给予市售布洛芬混悬液灌胃60mg/kg剂量，给药组给予不含促渗剂的布洛芬凝胶、含与川芎油相同比例氮酮的布洛芬凝胶、川芎油凝胶和布洛芬川芎油凝胶（布洛芬剂量为120mg/kg），给药后4h腹腔注射0.7%醋酸10mL/kg，记录注射后30min内小鼠的扭体次数和抑制率。

如表1所示。可见，布洛芬与川芎油联用以后能够显著提高镇痛效果，说明在镇痛时存在显著的协同作用。

实施例14布洛芬川芎油凝胶的抗炎作用

取实施例2中制备的布洛芬川芎油凝胶，同法制备不含促渗剂的布洛芬凝胶和含与川芎油相同比例氮酮的布洛芬凝胶。选用ICR小鼠，雌雄各半，随机分组，每组10只，腹部脱毛，阴性组给予空白凝胶剂，阳性组给予市售布洛芬混悬液灌胃100mg/kg剂量，给药组给予不含促渗剂的布洛芬凝胶、含与川芎油相同比例氮酮的布洛芬凝胶、川芎油凝胶和布洛芬川芎油凝胶（布洛芬剂量为200mg/kg），给药后4h，于小鼠右耳两面涂二甲苯0.02mL致炎，左耳作为正常对照。1h后处死小鼠，沿耳廓基线剪下双耳，用直径6mm打孔器分别取下左右耳相同部位的耳片，称取重量，记录数据，测定肿胀率和抑制率。

如表2所示。可见，布洛芬与川芎油联用以后能够显著提高抗炎效果，说明在抗炎时存在显著的协同作用。

实施例15布洛芬川芎油凝胶的透皮吸收作用

取实施例2中制备的布洛芬川芎油凝胶，同法制备布洛芬凝胶和布洛芬氮酮凝胶（氮酮比例与川芎油相同）。大鼠给药前腹部机械脱毛，经皮给予凝胶剂后（三种凝胶剂给药的布洛芬剂量均为100mg/kg），于给药前及给药后不同时间点取血分离血浆，-20℃保存，HPLC法分析测定血药浓度，结果如图3所示。可见，在凝胶中加入川芎油对于布洛芬有显著的促渗效果，并且促渗效果明显优于氮酮，血药浓度曲线下面积AUC是氮酮组的1.2倍。

实施例16皮肤细胞毒性试验

采用角质形成细胞无血清培养基和10%新生胎牛血清的DMEM培养基，于37℃、5%CO₂培养箱中培养人角质形成细胞HaCaT细胞，每2-3天换液1次，待细胞生长至融合，进行传代。选择生长旺盛、形态良好的细胞用于实验。

于96孔板中加入100μL密度为7×10⁴的HaCaT细胞混悬液，于37℃、5%CO₂培养箱中培养24h；小心吸弃上清液，加入浓度为48μg/mL的川芎油溶液100μL，溶剂为1%DMSO的DMEM培养基溶液，并以相同浓度的氮酮溶液为对照组，以不加挥发油的溶剂为阴性组，以不含细胞的溶剂为本底值组，每组3个复孔，继续培养24h；吸出上清液，用100μLDMEM培养基小心洗涤2次，再加入100μLDMEM培养基及10μLCCK-8试剂，培养箱内孵育1h，立刻用酶标仪在450nm处，以630nm参比波长，测定其吸光度（OD）值。则各组理论OD值=各组测得OD值-本底值组的OD值，细胞存活率%=各组理论OD值/阴性组理论OD值×100。以细胞存活率衡量挥发油对细胞的毒性。

在浓度同为48μg/mL的条件下，结果测得氮酮组的细胞存活率为0.5%，而川芎油组的细胞存活率为57%，说明与氮酮相比，川芎油对于皮肤细胞的毒性显著降低。

实施例17皮肤刺激性试验

取实施例2中制备的布洛芬川芎油凝胶，同法制备布洛芬氮酮凝胶（氮酮比例与川芎油相同）。

豚鼠6只，分笼饲养。于给药前24h将豚鼠背部脊柱两侧对称脱毛，每侧各约20cm²，不损伤皮肤。采用同体自身对照法，一侧涂以布洛芬川芎油凝胶，另一侧涂以布洛芬氮酮凝胶。每日给药一次，连续给药10天，末次给药24h后洗去剩余药物，观察并记录给药部位出现红斑和水肿的情况，以及涂药部位是否有色素沉着、出血点、皮肤粗糙等情况。对涂抹部位有无红斑和水肿等情况进行评分（如表3），计算平均积分值（公式见表4的表注），并进行刺激强度评价（如表4），结果表明布洛芬川芎油凝胶组无刺激性，而布洛芬氮酮凝胶组存在轻度刺激性。

注：计算公式为每组动物平均积分=∑（红斑评分+水肿评分）/受试动物数。

Claims (7)

1.一种经皮给药具有镇痛抗炎效果的药物组合物，其特征在于：由川芎油与布洛芬按下列重量份配比所制成：川芎油1~80份，布洛芬1~10份。

2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：川芎油与布洛芬的重量配比为8:1~1:1。

3.如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于：川芎油与布洛芬的重量配比为4:1。

4.一种经皮给药具有镇痛抗炎效果的外用制剂，其特征在于：含有权利要求1~3中任一项所述的药物组合物与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂制成的临床上任何可接受的外用剂型形式，包括凝胶剂、软膏剂、乳膏剂、贴膏剂、洗剂、搽剂、涂剂、涂膜剂、膜剂。

5.如权利要求4所述的经皮给药具有镇痛抗炎效果的外用制剂，其特征在于：所述外用剂型形式为凝胶剂、乳膏剂。

6.如权利要求4所述的经皮给药具有镇痛抗炎效果的外用制剂，其特征在于：所述外用剂型形式为凝胶剂。

7.权利要求6中所述的经皮给药具有镇痛抗炎效果的外用制剂的制备方法，其采用卡波姆作为水凝胶基质，采用三乙醇胺或氢氧化钠调碱，布洛芬和川芎油溶解在无水乙醇中加入基质，具体制备步骤如下：

步骤（1）：将1~5份卡波姆细粉，均匀撒于25~125份水中，溶胀；

步骤（2）：用三乙醇胺或氢氧化钠调节pH至6.0~8.0，配成凝胶基质；

步骤（3）：将0.1~0.5份布洛芬和0.8~4份的川芎油溶解于1~10份的无水乙醇中；

步骤（4）：将1份含有布洛芬与川芎油的无水乙醇加入5~15份凝胶基质中，搅匀，分装，即得。