CN1895540A - 一种治疗心血管疾病的药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种心血管疾病的药物组合物，它是由人参皂苷、麦冬皂苷为活性成分加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的注射剂。本发明还提供了该药物组合物的制备方法。本发明药物原料人参皂苷、麦冬皂苷发挥了协同增效的作用，且制剂稳定性高，可控性强，为临床提供了一种新的选择。

Description

一种治疗心血管疾病的药物组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明提供了一种治疗心血管疾病的药物组合物及其制备方法和用途。具体地说，是以中药材中的活性成分为原料制备而成的药物组合物。

背景技术

心、脑血管疾病是当今人类生命和健康受到严重威胁的疾病之一。中年以后的心脑血管病主要是指冠心病及脑卒中(又称脑中风)。这两种常见病、多发病对我国人群的健康威胁日益增大。据卫生部“1998年全国卫生事业发展情况统计公报”，1998年我国心血管病死亡率在城市人群为244.3/10万，在农村人群为193.1/10万，均列为目前我国第一死因。在我国，每年大约有260万人死于心脑血管疾病，每天就是7000多人，每12秒就有1人因心脑血管疾病而死亡。心脑血管疾病是威胁全球人民健康与生命的头号杀手。我国在中风的发生率居高不下的同时，心肌梗死的发生率迅速上升，中风与心肌梗死的发病率之比由上世纪80年代的8∶1降为90年代末的4∶1，目前则可能已成为3∶1或2∶1，与西方发达国家的1∶1逐渐接近。这说明，继上世纪六七十年代因中风高发病率引起的心脑血管疾病高潮后，我国即将面临心脑血管疾病发病的第二次浪潮。随着我国人口结构老龄化的来临及人们生活水平的提高，心、脑血管疾病的发病率及死亡率还将升高。针对上述情形，目前临床上参麦注射液的使用量也不断增大，由红参、麦冬两味中药材制成的参麦注射液是国家中医药管理局推荐的首批急症必备中成药品种之一。它具有补气生津、强心固脱之功能，临床主要用于心源性休克、心脏衰弱引起的低血压、流行性出血热、心律失常、心肌炎、冠心病、肺心病等疾病的治疗。目前采用参麦注射剂的的制备方法是：采用红参100g，麦冬100g，取红参(切片或出粗粉)加乙醇浸渍后，回流提取6次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至每1ml含生药0.3-0.4g，冷藏后滤过，于滤液中按体积加1％活性炭，搅拌后滤过，滤液减压回收乙醇，加3-4倍量的纯化水，冷藏，滤过后调pH至7.5，煮沸，冷藏，滤过，备用。另取麦冬加乙醇浸渍后，回流提取2次，自“每次2小时”起同法制成麦冬药液。合并上述红参、麦冬药液，按处方量加入0.5％吐温-80，搅匀，加注射用水至1000ml，调pH至7.5，滤过，灌封，灭菌，即得。这种方法虽然制作工艺简单，成本较低，却存在不可忽视的问题：(1)制成的制剂为黄褐色液体，含有大量色素类；(2)该药的有效部分皂苷在水中不稳定、易水解，常使制剂产生沉淀或浑浊，直接影响制剂质量。(3)制剂质量标准不完善，可控指标少，仅有皂苷定性鉴别和总皂苷含量测定，没有有效成分含量测定指标，加之缺乏原料质量控制技术指标，产品质量控制难度大，这与现代化的中药制剂的现状不相吻合。且虽然原料相同，由于提取方法不同，有效成分配伍不同，药效存在较大的差异，因此研究一种疗效确切，成份清楚，配方合理，质量可控的药物非常必要。

发明内容

本发明提供了一种治疗心血管疾病的药物组合物，它是由人参皂苷、麦冬皂苷为活性成分制备而成的注射剂。本发明还提供了该药物组合物的制备方法及用途。

本发明提供了一种治疗心血管疾病的药物组合物，它是由下述重量配比的活性成分制备而成的注射剂：

人参皂苷0.1份-100份、麦冬皂苷0.1份-100份。

进一步地，它是由下述重量配比的活性成分制备而成的注射剂：

人参皂苷0.1-25份、麦冬皂苷0.1-25份。

所述的注射剂是：注射液、粉针剂、静脉滴液。

其中，所述的注射剂的指纹图谱如图1所示。

本发明提供了一种制备该药物组合物的方法，它包括如下步骤：

a、取红参加水煮沸后保温1-4小时，过滤；药渣加8-20倍的水煮沸后保温1-4小时，过滤；药渣再加8-20倍的水煮沸后保温1-3小时，过滤，合并滤液，离心除去沉淀物得人参水提液；

取麦冬加水煮沸后保温1-4小时，过滤；药渣加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保温1-2小时，过滤；药渣再加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保温1-3小时，过滤，合并滤液，高速离心除去沉淀物得麦冬水提液；

b.纯化、干燥：取a步骤制备的提取物采用大孔树脂、结晶、超滤、分子蒸馏或膜分离进行分离纯化，得到人参和麦冬有效部位干提取物尤其是皂苷类成分，人参提取物中人参皂苷以人参皂苷Re计，重量百分比不低于70％；麦冬提取物中麦冬皂苷以麦冬皂苷Ra计，重量百分比不低于50％；

c、将b步骤制备制备的人参皂苷、麦冬皂苷按下述重量配比混合，加入注射剂用附加剂，制备成注射剂：人参皂苷0.1份-100份、麦冬皂苷0.1份-100份。

进一步地，本发明药物组合物的制备方法包括如下步骤：

a、药材前处理和提取

检验合格的红参、麦冬药材分别经挑选、洗净、烘干、粉碎成片状或颗粒状。

称取红参加水煮沸后保温1-4小时，过滤；药渣加8-20倍的水煮沸后保温1-4小时，过滤；药渣再加8-20倍的水煮沸后保温1-3小时，过滤，合并滤液，离心除去沉淀物得人参水提液。

称取一定量的麦冬加水煮沸后保温1-4小时，过滤；药渣加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保温1-2小时，过滤；药渣再加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保温1-3小时，过滤，合并滤液，高速离心除去沉淀物得麦冬水提液。

b.纯化，干燥

可采用大孔树脂、结晶、超滤、分子蒸馏、膜分离等方式进行分离纯化，得到人参和麦冬有效部位干提取物尤其是皂苷类成分，提取物中人参皂苷含量≥70％，麦冬皂苷含量≥50％。

以大孔树脂纯化法为例：

1、人参水提液的纯化、干燥

人参水提液用各种强碱，弱碱，盐类溶液洗层析柱至层析液无色，包括氢氧化钠溶液、碳酸氢钠、Na₂CO₃、碳酸钾、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氢氧化钙、磷酸氢钙、碳酸氢钙等溶液中的一种或几种并且不仅限于以上溶液，然后至层析液pH中性时，用有机溶液洗脱，可采用包括乙醇、乙醚，乙酸乙酯，甲醇，甲苯，丙酮，氯仿等有机溶液中的一种或几种并且不限于以上溶液，至无皂苷反应，洗脱液匀速过精致树脂层析柱，收集流出液，静置12-24小时，过滤，浓缩至无有机溶液，过滤，获透明浅黄色人参提取液，干燥后得到人参有效部位干提取物，采用喷雾干燥，冷冻干燥，烘干，薄膜干燥等各种干燥方法，得到人参提取物人参皂苷含量以人参皂苷Re计≥70％；

2、麦冬水提液的纯化、干燥

麦冬水提液用各种强碱，弱碱，盐类溶液洗层析柱至层析液无色，包括氢氧化钠溶液、碳酸氢钠、Na₂CO₃、碳酸钾、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氢氧化钙、磷酸氢钙、碳酸氢钙等溶液中的一种或几种并且不仅限于以上溶液，然后至层析液pH中性时，用有机溶液洗脱，可采用包括乙醇、乙醚、乙酸乙酯、甲醇、甲苯、丙酮、氯仿等有机溶液中的一种或几种并且不限于以上溶液，至无皂苷反应，洗脱液匀速过精致树脂层析柱，收集流出液，静置12-36小时，过滤，浓缩，获透明浅黄色麦冬提取液，干燥，得麦冬有效部位干提取物，麦冬皂苷以麦冬皂苷Ra计含量≥50％。

本发明提供了该药物组合物在制备抗休克的药物中的用途。

本发明提供了该药物组合物在制备改善微循环、心肌缺血的药物中的用途。

本发明提供了该药物组合物在制备治疗静脉血栓的药物中的用途。

本发明原料由人参和麦冬组成，采用科学合理的生产工艺，严格操作。人参兴奋中枢神经，兴奋呼吸，有“扶正培本”，补充机体阴、阳、气、血等不足的功能；麦冬滋阴生津，润肺止咳，清心除烦，近代药理研究亦证明，麦冬有强心作用。本发明将有效成分人参皂苷与麦冬皂苷配伍注射使用，益气固脱，养阴生津，补心复脉之功效更佳，具有抗心肌缺血、缺氧、对内因毒素所致的血脑屏障、神经细胞的损害等有保护作用，能延缓死亡的时间，增强网状内皮系统(RES)的吞噬功能，并能提高免疫功能等作用。本发明药物制备方法采用了经过处理的大孔树脂来纯化提取物，减少了色素沉积，同时采用水进行提取，降低了成本，并且有效成分提取率高。与原参麦注射液相比具有成分更清晰、疗效确切、稳定性好、质量可控便于运输等优点，对传统工艺进行了革新，还重点研究了注射用大孔树脂理化性质、预处理与再生方法、残物检查、吸附、洗脱条件等相关阐述，在完成了大孔树脂残物紫外检查技术的基础上，独创了灵敏度更高，专一性更好的高效液相色谱法检查技术，并进行了中药材的指纹图谱实验，为临床提供了一种新的选择。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1本发明药物组合物指纹图谱

具体实施方式

实施例1本发明药物制备方法

一、药材前处理和提取

检验合格的红参、麦冬药材分别经挑选、洗净、烘干、粉碎成片状或颗粒状。

称取红参加水煮沸后保温1-4小时，过滤；药渣加8-20倍的水煮沸后保温1-4小时，过滤；药渣再加8-20倍的水煮沸后保温1-3小时，过滤，合并滤液，离心除去沉淀物得人参水提液。

称取一定量的麦冬加水煮沸后保温1-4小时，过滤；药渣加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保温1-2小时，过滤；药渣再加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保温1-3小时，过滤，合并滤液，高速离心除去沉淀物得麦冬水提液。

二、纯化，干燥

可采用大孔树脂、结晶、超滤、分子蒸馏、膜分离等方式进行分离纯化，得到人参和麦冬有效部位干提取物尤其是皂苷类成分，人参提取物中人参皂苷以人参皂苷Re计，重量百分比不低于70％；麦冬提取物中麦冬皂苷以麦冬皂苷Ra计，重量百分比不低于50％。

现仅以大孔树脂纯化法为例：

3、人参水提液的纯化、干燥

人参水提液用各种强碱，弱碱，盐类溶液洗层析柱至层析液无色，包括氢氧化钠溶液、碳酸氢钠、Na₂CO₃、碳酸钾、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氢氧化钙、磷酸氢钙、碳酸氢钙等溶液中的一种或几种并且不仅限于以上溶液，然后至层析液pH中性时，用有机溶液洗脱，可采用包括乙醇、乙醚，乙酸乙酯，甲醇，甲苯，丙酮，氯仿等有机溶液中的一种或几种并且不限于以上溶液，至无皂苷反应，洗脱液匀速过精致树脂层析柱，收集流出液，静置12-24小时，过滤，浓缩至无有机溶液，过滤，获透明浅黄色人参提取液，干燥后得到人参有效部位干提取物，采用喷雾干燥，冷冻干燥，烘干，薄膜干燥等各种干燥方法，得到人参提取物人参皂苷含量以人参皂苷Re计≥70％。

4、麦冬水提液的纯化、干燥

麦冬水提液匀速通过吸附树脂层析柱，吸附完毕后，用各种强碱，弱碱，盐类溶液洗层析柱至层析液无色，包括氢氧化钠溶液、碳酸氢钠、Na₂CO₃、碳酸钾、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氢氧化钙、磷酸氢钙、碳酸氢钙等溶液中的一种或几种并且不仅限于以上溶液，然后至层析液pH中性时，用有机溶液洗脱，可采用包括乙醇、乙醚，乙酸乙酯，甲醇，甲苯，丙酮，氯仿等有机溶液中的一种或几种并不限于以上溶液，至无皂苷反应，洗脱液匀速过精致树脂层析柱，收集流出液，静置12-36小时，过滤，浓缩，获透明浅黄色麦冬提取液，干燥，得麦冬有效部位干提取物，麦冬皂苷以麦冬皂苷Ra计含量≥50％。

三、冻干粉针剂的制备

称取人参皂苷、麦冬提取物，在无菌条件下，加水使溶解，备用。另称取计算好的辅料(辅料的选择是粉针剂常用辅料)置无菌容器中，加水使溶解。两种溶液在轻轻搅拌下充分混匀，再加水补足至500-1000ml。经微孔滤膜过滤除菌后，分装于已灭菌的冻干西林瓶中，2-20ml/支，冷冻干燥，压塞、压盖，即得。

四、大输液的制备

称取人参皂苷和麦冬皂苷后按常规制备大输液的工艺方法制成参麦大输液。

五、小水针的制备

称取人参皂苷和麦冬皂苷后按常规制备水针的工艺方法制成参麦注射液。

实施例2本发明药物冻干粉针剂的制备

1、处方

实施例1制备的人参皂苷   6g

实施例1制备的麦冬皂苷   0.6g

辅料                    100g

注射用水  加至          500ml

2、制法

精密称取上述人参皂苷、麦冬提取物，在无菌条件下，加水使溶解，备用。另称取计算好的辅料(辅料的选择是粉针剂常用辅料)置无菌容器中，加水使溶解。两种溶液在轻轻搅拌下充分混匀，再加水补足至500-1000ml。经微孔滤膜过滤除菌后，分装于已灭菌的冻干西林瓶中，2-20ml/支，冷冻干燥，压塞、压盖，即得。

实施例3本发明药物冻干粉针剂的制备

处方

实施例1制备的人参皂苷  24g

实施例1制备的麦冬皂苷  0.6g

辅料                   150g

注射用水 加至          1000ml

按实施例2的方法制备。

实施例4本发明药物冻干粉针剂的制备

处方

实施例1制备的人参皂苷  15g

实施例1制备的麦冬皂苷  1g

辅料                   120g

注射用水  加至         800ml

按实施例2的方法进行制备。

实施例5冻干粉针剂的制备

处方

实施例1制备的人参皂苷  9g

实施例1制备的麦冬皂苷  1.5g

辅料                   100g

注射用水  加至         800ml

按实施例2的方法进行制备。

实施例6注射液的制备

按实施例2的配比称取人参皂苷和麦冬皂苷后按常规制备注射液的工艺方法制成2ml，4ml，10ml的参麦注射液。

实施例7大输液的制备

按实施例4的配比称取人参皂苷和麦冬皂苷后按常规制备大输液的工艺方法制成250ml或500ml参麦大输液。

实施例8本发明药物质量控制方法

本发明药物制剂建立了一套完整的质量控制方法。内容包括：性状、鉴别(薄层色谱对照品法)、检查(pH值、热原、不溶性微粒、有关物质、装量差异、无菌)和含量测定(红参总皂苷和麦冬皂苷)等检查项目。并且还制订了本发明药物的指纹图谱，标准图谱见图1：

色谱条件：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，乙腈-水(21∶79)为流动相，流速每分钟1.1ml，检测波长为203nm，柱温25度。

以参照物人参皂苷Re对应的色谱峰(S)的相对保留时间和相对％峰面积为1，计算各指纹峰的相对保留时间和相对％峰面积比值。供试品指纹图谱与质量标准所附的指纹图谱模式标准经计算机模拟相似度计算软件计算，相似度应大于0.9。

实施例9大输液的制备

按实施例3的配比称取人参皂苷和麦冬皂苷后按常规制备50ml或100ml或200ml大输液的工艺方法制成参麦大输液，并通过质量检测合格。

以上实施例仅为了对本发明做进一步的说明，而本发明的范围不受所举实施例的局限。

以下通过药效学试验证明本发明药物的有益效果。

试验例1本发明药物回阳救逆试验

抗休克作用试验研究：本发明药物注射剂对失血性休克猫和内毒素休克大鼠进行主要药效学试验研究结果表明：本发明药物注射剂40mg/kg可明显提高失血性休克猫的颈动脉收缩压、舒张压(SBP、DBP)及左心室压(LVP)，在给药30分钟后即有明显作用，并可持续至90分钟后，其提高心室去极化波(QRS)振幅在给药后90分钟作用最明显。在给本发明药物注射剂40mg/kg后10分钟即可提高左心室等容期压力最大变化速率(±dp/dt)，其作用可持续90分钟以上。本发明药物注射剂60mg/kg对内毒素休克大鼠的颈动脉血压(SBP、DBP)、左心室压(LVP)及其最大变化速率(±dp/dt)在给药10分钟后即有明显提升作用，并可持续60分钟以上，供试本发明药物注射剂(冻干)与参麦注射液在同等剂量下相比较，上述各项作用均相似，无明显统计学差异，但本发明药物注射剂提升血压作用时间较参麦注射液持久。

注射用本发明注射剂对犬结扎冠脉所致的心肌缺血的影响：采用结扎犬左冠状动脉前降支造成犬心肌缺血模型，动物随机分四组。第一组给予本发明药物注射剂骨架剂，第二组给予生脉注射液(华西医科大学药厂)，第三组给予小剂量本发明药物注射剂，第四组给予大剂量本发明药物注射剂，来观察供试本发明药物注射剂，结果表明，给生脉注射液或本发明药物注射剂药物的动物比起骨架剂组的动物，其缺血后的心肌功能和心脏作功能力得到明显改善和提高，外周阻力降低；血中的磷酸肌酸激酶活性和乳酸脱氢酶活性均降低；心电图显示缺血得到改善，心肌缺血组织范围减少。通过本实验，表明本发明药物注射剂有改善心肌缺血的作用，这种药效作用与用药剂量大小有关。

试验例2本发明药物注射剂对心气不足的标本兼治试验

本发明药物注射剂对犬血流动力学及心肌氧耗量的影响试验：供试本发明药物注射剂按50、25、12.5mg/kg分别给予各组麻醉犬后，其心率及血压均无明显影响。但50、25mg/kg组可见冠脉流量逐渐增加，30分钟达高峰，60分钟时仍有明显作用，冠脉阻力也呈现同步的下降变化，上述变化与阳性对照组参麦注射液类似。大中剂量组的本发明药物注射剂能明显升高左室内压和左室内压最大上升速率及左室内压下降速率(但对左室舒张末期压无明显影响)，明显增加心输出量及左室作功。本发明药物注射剂大中剂量还能明显降低心肌耗氧量，但对耗氧指数及氧利用率无明显影响。本发明药物注射剂还显示显著降低外周血管阻力的作用。

本发明药物注射剂对体外心肌细胞缺血培养的改善作用：对培养成功的心肌细胞给予缺O₂和缺糖培养，造成心肌细胞发生缺O₂和缺营养损伤。在缺O₂和缺糖培养细胞的同时第一组细胞培养液中加入本发明药物注射剂骨架剂，第二组加入生脉注射液，第三组加入小剂量本发明药物注射剂，第四组加入中剂量本发明药物注射剂，第五组加入大剂量本发明药物注射剂。培养4小时后，加入本发明药物注射剂或生脉注射液的心肌细胞释放出的乳酸脱氢酶(LDH)明显少于骨架剂对照组。心肌细胞受损的百分率也明显少于骨架剂对照组。结果表明，供试本发明药物注射剂有明显的抗缺O₂和缺糖对心肌细胞的损伤作用。这种药效作用具有量效关系。

试验例3本发明药物注射剂主要药效学辅助试验

本发明药物注射剂对大鼠的动—静脉短路血栓形成的影响：用建立大鼠右颈动脉与左颈静脉的短路模型，并在短路的聚乙烯管内放置一条手术丝线观测在丝线上血栓形成。动物随机分五组，第一组给予本发明药物注射剂骨架剂；第二组给予生脉注射液；第三组给予小剂量本发明药物注射剂，第四组给予中剂量本发明药物注射剂；第五组给予大剂量本发明药物注射剂进行实验。结果发现给予了供试本发明药物注射剂和生脉注射液的大鼠，其血栓明显小于骨架剂组。即本发明药物注射剂(冻干)有抗血栓形成的作用，这种药效作用与本发明药物注射剂剂量大小有关，本发明药物注射剂剂量大则抑制血栓形成的作用强。

本发明药物注射剂对大鼠肠系膜微循环的影响试验：在固定肠系膜于微循环分析系统下，滴加去甲肾上腺素造成微循环障碍的动物模型，来观察药物对大白鼠肠系膜微循环作用的影响。结果发现本发明药物注射剂能使滴加了去甲肾上腺素的大鼠肠系膜微循环恢复到正常时间缩短，使滴加了去甲肾上腺素大鼠肠系膜微动脉管径开放程度加大。即本发明药物注射剂有明显改善微循环作用，中剂量本发明药物注射剂(冻干)的改善微循环作用强度与生脉注射液组相同。本发明药物注射剂改善微循环的药效作用有量效关系。

试验例4本发明药物急性毒理学试验

供试本发明药物注射剂对昆明种小鼠和大鼠(SD)的急性毒理试验研究结果表明，用Bliss计算求得本发明药物注射剂对昆明种小鼠静脉注射的LD₅₀及其95％的可信限为82.72±(91.35-74.90)g生药/kg，相当于人参皂苷496.3±(548.1-449.4)mg/kg，为临床使用剂量的496倍；用Bliss法求得本发明药物注射剂对SD大鼠静脉注射的LD₅₀及其95％的可信限为36.2±(34.16-38.36)g生药/kg，相当于人参皂苷217.2±(205.2-225.2)mg/kg，为临床使用剂量的217倍。这说明本品安全性较好。

死亡动物大多发生在注射后20分钟以内，死亡前出现活动减少，发绀，呼吸先于心跳停止，死因为明显的呼吸抑制，可见到由呼吸急促到呼吸困难，进而产生死亡的全身痉挛现象。

试验例5本发明药物动物长期毒理学试验

本发明药物注射剂以400mg/kg/day、180mg/kg/day、80mg/kg/day(分别相当于临床拟用剂量的200、90、40倍)、辅料液20ml/kg/day和同体积的氯化钠注射液，每天一次，连续8周的犬长期毒性试验结果表明：

Beagle犬静脉滴注辅料液20ml/kg/day 4周和8周后，均未见临床症状异常，体重、心电图、血液学、血液生化、尿液等指标与正常对照组均无明显差异。

Beagle犬静脉滴注本发明药物注射剂400mg/kg/Day 2周后，2条犬在滴注药液后约20分钟出现短时呕吐和流涎，持续约10分钟左右即恢复；有4条犬摄食量减少、精神状况较差；2、3天后，其中两条犬摄食量和精神状况基本恢复正常；另两条犬摄食量持续减少，精神状况一直较差；给药后第34天，一条犬卧地不起，呼吸困难，在抽血和测心电图后不久死亡；在整个给药期间，有一条犬外观症状一直较差；高剂量组其他4条犬和其他各组犬均无明显异常临床表现；从给药后第4周起，高剂量组犬的体重开始有所减轻，并一直持续减轻；其他两给药组与辅料组的体重增长均无明显差异。给药4周后，Hb、ALP、ALT值明显高于辅料组；给药8周后，WBC、ALP、ALT、BUN、Crea均明显高于辅料组。给药4周后，2条犬尿液的BLD由“-”变成“±”和“++”。给药8周后，肝脏、脾脏、肾脏系数均明显大于辅料组。病理学检查发现5条犬中3条肾脏有病变。给药8周后，骨髓象均出现不同程度红细胞系统增生，粒/红比下降，以中幼红增生为主，无核红细胞大小不均、畸形；粒系虽减少，但各阶段细胞未见增生不良。除以上变化外，其他各项观察检测指标与辅料组均无明显差异。

Beagle犬静脉滴注本发明药物注射剂180mg/kg/Day4周后，WBC、、ALT明显高于辅料组；给药8周后，WBC、ALT明显高于辅料组。骨髓象均出现不同程度红细胞系统增生，粒/红比下降，以中幼红增生为主，无核红细胞大小不均、畸形；粒系虽减少，但各阶段细胞未见增生不良。除以上变化外，其他各项观察检测指标与辅料组均无明显差异。Beagle犬静脉滴注本发明药物注射剂80mg/kg/Day 4和8周后，各项观察检测指标与辅料组均无明显差异。

在停药2周的观察期中，各组动物的外观症状、摄食、体重增长等均无明显异常；停药2周后，各给药组的心电图、血液学、血液生化、尿液、脏器系数(除高剂量组犬的肝脏和肾脏系数仍明显大于辅料组外)和骨髓检查的各项指标与辅料对照组均无明显差异；病理检查各脏器也未见有明显差异。

结果显示，Beagle犬静脉滴注本发明药物注射剂400mg/kg/Day(临床拟用剂量的200倍)后，ALP、ALT、BUN、Crea均明显高于辅料组；2条犬尿液的BLD由“-”变成“±”和“++”；肝脏、肾脏系数均明显大于辅料组。病理学检查发现5条犬中3条肾脏有病变；表明肝、肾功能明显受损。Beagle犬静脉滴注本发明药物注射剂180mg/kg/Day(临床拟用剂量的90倍)8周后，也出现类似高剂量组的毒性反应，但程度较轻。Beagle犬静脉滴注本发明药物注射剂80mg/kg/Day(临床拟用剂量的40倍)8周后，未见任何明显的毒性反应。

结果提示，Beagle犬静脉滴注本发明药物注射剂8周后，主要毒性靶器官是肝、肾功能明显受损，损伤程度与剂量有关；但损伤是可逆的，停药2周后，可基本恢复。Beagle犬静脉滴注本发明药物注射剂8周的无毒性剂量为80mg/Kg，为临床拟用剂量的40倍，说明临床拟用剂量基本上是安全的。

本发明药物注射剂大鼠腹腔注射给药长期毒性实验本发明药物注射剂以150、75、37.5mg/kg/day三个剂量组分别给大鼠连续腹腔注射给药12周的长期毒性试验结果表明：各剂量组动物一般行为表现正常，生长良好，动物体重随时间而增长，与对照组比较无显著性差异(P＞0.05)；血液学和血液生化学指标均属正常，与空白对照组比较无显著性差异(P＞0.05)；各组动物大体解剖观察未见明显异常，各组脏器系数与空白对照组比较无显著性差异(P＞0.05)，各主要脏器病理学检查未发现药物引起的病理变化。停药3周后，以上各项检查项目也未发现异常变化，未见延迟性毒性反应。上述结果表明本发明药物注射剂连续腹腔注射给药12周的无毒反应剂量为150mg/kg/day，是临床剂量的75倍。

本发明药物注射剂的一般安全性试验对本发明药物注射剂全身主动和被动过敏反应进行了试验：结果表明本发明药物注射剂高、中、低剂量组及骨架剂均未引起全身主动和被动过敏皮肤反应，同时对本发明药物注射剂进行了肌肉和血管刺激实验：结果表明对肌肉和血管无刺激。

试验例6本发明药物原料配比筛选试验

通过本发明药物注射剂对内毒素休克大鼠左心室内压(lVP)的影响试验，证明本发明药物的最佳配比合理，并且人参和麦冬联合用药具有较好的协同增效作用。

实验药品：选用申请人自制的各种配比的冻干粉针，每60mg相当于原生药材2g，采用骨架剂作为空白对照。

仪器：四道生理记录仪rm-6000

动物：SD大鼠50只，雌雄各半，体重200-300g，健康一级。

方法：大鼠ip异戊巴比妥钠80mg/kg麻醉后，分离右侧股静脉及股动脉，故静脉插入塑料导管连于三通供注射给药，iv肝素3mg/只抗凝，股动脉插管记录血压，(血压换能计tp200t，载波放大器Ap601G，血压数字显示计AP611G)，分离右侧颈总动脉，从右侧颈总动脉插入自制塑料导管入左心室腔记录左心室内压(lvp)，再经微分器(EQ601G)测定左室内压最大变化速率(dp/dt max，min)，上述指标同步记录于四道生理记录仪。术毕稳定30分钟，记录各项正常指标，然后经股静脉注入大肠杆菌内毒素0111B435mg/kg(容积为1ml/只，每次注完后冲入NS 0.5ml)，当血压下降至正常2/3时，立即iv给与受试药物，并测定给药后10，30，60分钟各项指标，并以不同观察时间点的实测值进行组间t检测，判断其显著性，结果见表1。

试验结果：

表1 药物对内毒素休克大鼠左心室内压(LVP)的影响(X±S，n＝10)

组别	剂量(mg/kg)	正常值(X10mmHg)	Iv内毒素后	iv给药后
							10分	30分	60分
				对照组(骨架剂)	40	9.0±0.7				6.6±0.7	6.6±1.3	6.4±1.0	6.3±1.7
麦冬皂苷组	40	8.8±2.0	6.4±2.4				6.9±2.3	7.6±2.9	6.5±2.9
				人参皂苷组	40	8.9±2.3				6.8±1.4	7.3±2.0	7.9±2.5	7.0±1.8
本发明药物注射剂组(人参皂苷30份，麦冬皂苷0.8份)	40	9.9±1.3	7.4±1.2				8.9±1.3**	9.2±1.4**	8.9±2.3**
				本发明药物注射剂组(人参皂苷40份，麦冬皂苷4份)	40	9.8±1.2				7.8±1.2	9.0±1.8**	9.5±1.7**	9.3±1.2**
本发明药物注射剂组(人参皂苷17份，麦冬皂苷1份)	40	9.8±1.6	6.8±1.5				8.5±0.9**	9.3±1.5**	9.5±2.0**
				本发明药物注射剂(人参皂苷100份，麦冬皂苷0.08份)	40	9.7±1.5				6.6±1.5	7.8±1.3	8.4±1.6	7.1±1.6

注：与对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01

由表可见，本发明药物注射剂注射后10分钟即可显著增加内毒素休克大鼠的左心室收缩力，采用本发明配比的本发明药物注射剂比较其他配比的本发明药物注射剂增加内毒素休克大鼠左心室收缩力作用强，并且人参皂苷和麦冬皂苷联用比较单独使用的作用更明显，具有协同增效的作用。

本发明药物将原料人参、麦冬采用水煮提取、大孔吸附树脂吸附分离和乙醇精制新工艺，具有生产成本低，制备的红参有效部位以人参皂苷Re计，其总皂苷含量不低于70％；麦冬有效部位以麦冬皂苷Ra计，其总皂苷含量不低于50％；并且对君药红参还建立了有效成分人参皂苷Rg₁和Re定量质量控制指标。本发明药物强心作用最大特点是在具有增强心脏功能作用同时，还能明显降低冠脉阻力和外周血管阻力，增加冠脉流量，表现为对耗氧指数及氧利用率无明显影响。具有明显的抗休克作用，其提升血压作用时间较参麦注射液持久。具有改善微循环作用。具有改善心肌缺血作用。对静脉血栓形成具有明显抑制作用。具有生产技术先进、可控，制剂几乎无色素杂质，毒性更低、安全性更高，急性毒性为人体正常用量的200倍，特别是采用了微孔滤膜过滤除菌和冻干技术，能有效避免皂苷等有效成分水解，制剂稳定性高，可控性强，为临床提供了一种新的选择。

Claims (8)

1、一种治疗心血管疾病的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的活性成分制备而成的注射剂：

人参皂苷0.1份-100份、麦冬皂苷0.1份-100份。

2、根据权利要求1所述的治疗心血管疾病的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的活性成分制备而成的注射剂：

人参皂苷0.1-25份、麦冬皂苷0.1-25份。

3、根据权利要求1或2所述的治疗心血管疾病的药物组合物，其特征在于：所述的注射剂是：注射液、粉针剂、静脉滴液。

4、根据权利要求3所述的治疗心血管疾病的药物组合物，其特征在于：所述的注射剂的指纹图谱如图1所示。

5、一种制备治疗权利要求1所述的心血管疾病的药物组合物的方法，它包括如下步骤：

a、取红参加水煮沸后保温1-4小时，过滤；药渣加8-20倍的水煮沸后保温1-4小时，过滤；药渣再加8-20倍的水煮沸后保温1-3小时，过滤，合并滤液，离心除去沉淀物得人参水提液；

取麦冬加水煮沸后保温1-4小时，过滤；药渣加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保温1-2小时，过滤；药渣再加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保温1-3小时，过滤，合并滤液，高速离心除去沉淀物得麦冬水提液；

b、纯化、干燥：将a步骤制备的人参提取物、麦冬水提液采用大孔树脂、结晶、超滤、分子蒸馏或膜分离进行分离纯化，得到人参和麦冬有效部位干提取物，人参提取物中人参皂苷以人参皂苷Re计，重量百分比不低于70％；麦冬提取物中麦冬皂苷以麦冬皂苷Ra计，重量百分比不低于50％；

c、将b步骤制备的提取物按下述重量配比混合，加入注射剂用附加剂，制备成注射剂：人参皂苷0.1份-100份、麦冬皂苷0.1份-100份。

6、权利要求1所述的药物组合物在制备抗休克的药物中的用途。

7、权利要求1所述的药物组合物在制备改善微循环、心肌缺血的药物中的用途。

8、权利要求1所述的药物组合物在制备治疗冠心病、心肌炎、静脉血栓的药物中的用途。

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