CN102283911A

CN102283911A - 治疗缺血性中风的益气活血风静胶囊

Info

Publication number: CN102283911A
Application number: CN 201110274741
Authority: CN
Inventors: 张留记; 李振国; 屠万倩; 周继春; 傅蔓华; 李向阳; 侯惠鸣
Original assignee: HENAN PROVINCE CHINESE MEDICINE RESEARCH INSTITUTE
Current assignee: HENAN PROVINCE CHINESE MEDICINE RESEARCH INSTITUTE
Priority date: 2011-09-16
Filing date: 2011-09-16
Publication date: 2011-12-21
Anticipated expiration: 2031-09-16
Also published as: CN102283911B

Abstract

本发明公开了一种治疗缺血性中风的益气活血风静胶囊，它是由原药人参和牡丹皮制备而成，首先从人参中提取人参总皂苷，从牡丹皮中提取丹皮酚和牡丹皮总苷，然后将丹皮酚包合β-环糊精制成丹皮酚β-环糊精包合物后，按照人参总皂苷120g，丹皮酚β-环糊精包合物160g，牡丹皮总苷30g的比例混合均匀后装入1000粒胶囊中即可。本发明的优点在于抗缺血性中风药理活性较好，毒性较小、安全性较好。本胶囊利用人参的有效部位和牡丹皮的有效部位组成的胶囊制剂，以人参的大补元气，复脉固脱，牡丹皮活血化瘀，清热凉血之功效，二者配伍，相辅相成，标本兼治，通补结合，具有益气通络，活血化瘀的作用。

Description

治疗缺血性中风的益气活血风静胶囊

技术领域

本发明涉及中药，尤其是涉及一种治疗缺血性中风的益气活血风静胶囊。

背景技术

缺血性中风是指因脑组织血液供应障碍，缺血、缺氧引起的局灶性脑组织缺血性坏死或软化，是脑血管疾病中的多发病，具有病死率高、致残率高、复发率高、合并症多、治愈率低的特点。我国是中风病高发区之一，且发病率不断增加，1984～2004年间，其中风发病率城市由100.5/10万人口升至213.2/10万人口，其中缺血性中风占全部中风的比例由52.9%升至85.7%。在生存者中约有70%～80%的病人留有不同程度的残废。在我国人口老龄化趋势日益加速的情况下,中风发病率呈上升趋势，同时，随着物质条件的改善和生存环境的变化，中风患者还出现了年轻化的趋势，因此，中风病的危害性日益突出。目前西医治疗中风病的主要手段为介入、溶栓、抗凝、降纤、扩容和抗血小板等。随着中医气血相关理论研究的不断深入，现已将缺血性中风的基本病因归纳为气虚血瘀，气虚为本，血瘀为标，病机为气虚血瘀致痹阻脑络，经脉失养，治疗应标本兼治、益气活血，故采用益气活血法治疗缺血性中风已日趋广泛。由于中医药防治缺血性中风具有副作用小、价格低廉、疗效确切的优势，所以研制出安全有效的治疗缺血性中风的天然药物将具有较大的市场需求和较好的开发前景。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有益气通络、活血化瘀作用的治疗缺血性中风的益气活血风静胶囊。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的治疗缺血性中风的益气活血风静胶囊，它是由原药人参和牡丹皮制备而成，首先从人参中提取人参总皂苷，从牡丹皮中提取丹皮酚和牡丹皮总苷，然后将丹皮酚包合β-环糊精制成丹皮酚β-环糊精包合物后，按照人参总皂苷:丹皮酚β-环糊精包合物:牡丹皮总苷=120: 160:30的比例混合后装入胶囊即可。

所述人参总皂苷的制备方法为：原料药人参加水煎煮2次，每次1.5-2小时，煎液过滤、合并后，通过大孔吸附树脂柱，用水洗脱至无色，再用60-70%的乙醇洗脱，收集洗脱液，过滤、回收乙醇后浓缩至稠膏，减压干燥、粉碎后即得人参总皂苷提取物。

所述丹皮酚β-环糊精包合物的制备方法为：将原药牡丹皮加水浸泡后，蒸馏，收集馏出物，密闭冷藏过夜，过滤后得丹皮酚结晶；然后加6倍量的β-环糊精，在50℃下用胶体磨研磨30分钟，4℃冷藏24小时后过滤，固体物40℃以下低温干燥，即得丹皮酚β-环糊精包合物。

所述牡丹皮总苷的制备方法为：牡丹皮加水浸泡后蒸馏，蒸馏后的母液过滤后放置备用；药渣用70%乙醇加热回流提取3次，每次1小时，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后加入上述丹皮酚蒸馏后的母液，浓缩至稠膏状；然后在其中加入2-3倍药材重量的水，放置24小时，滤过，通过大孔吸附树脂柱，用水和10%乙醇洗脱至无色，再用40%-50%乙醇洗脱，收集洗脱液，滤液回收乙醇并浓缩至稠膏，减压干燥、粉碎，即得牡丹皮总苷提取物。

本发明的优点在于抗缺血性中风药理活性较好，毒性较小、安全性较好。本胶囊利用人参的有效部位（人参皂苷提取物）和牡丹皮的有效部位（牡丹皮总苷提取物和丹皮酚包合物）组成的胶囊制剂，以人参的大补元气，复脉固脱，牡丹皮活血化瘀，清热凉血，二者配伍，既能补充已损之正气，使气行以消脉中之瘀，气旺以资新血生化之源，使气恢复其帅血功能和防止活血祛瘀药的克伐正气，还能通行血脉，祛除瘀塞，使益气之品借血脉鼓动，通行周身而行其功，二者合用，相辅相成，标本兼治，通补结合，具有益气通络，活血化瘀的作用。

文献资料表明，人参中主要含有皂苷类、多糖、挥发油、有机酸、蛋白质、多肽等成分，皂苷是主要有效成分。人参皂苷除了具有抗肿瘤、抗老年痴呆等作用外，还有很好的对脑缺血保护作用和免疫调节作用。其中，人参皂苷中主要成分人参皂苷Rg₁具有抗血栓、促进免疫、抗缺血损伤等作用，人参皂苷Rb₁除了对中枢神经系统具有保护作用外，还具有明显的抗脑缺血损伤作用和免疫调节作用。此外，人参皂苷Rb₃可减轻脑水肿程度，减少脑梗死面积，减轻组织病理学损伤，对大鼠局灶性脑缺血损伤有较明显的保护作用，人参皂苷Rd通过抑制炎症反应，起到保护神经的作用。

牡丹皮中主要含有芍药苷、氧化芍药苷、苯甲酰芍药苷等单萜苷类化合物和丹皮酚、丹皮酚苷、丹皮酚原苷等酚类和酚苷类成分。药理实验表明，芍药苷使局灶性脑缺血模型大鼠的神经行为学、脑组织含水量、组织病理学改变和血脑屏障通透性均得到改善，大脑局部血流量显著增加，对脑缺血后脑水肿、血脑屏障、大脑局部血流量具有保护作用和抗神经元凋亡作用，其作用可能是通过调节脑内能量代谢和NO的生成或调节脑组织中水通道蛋白-4（AQP4）来完成；芍药苷对全脑缺血模型大鼠有明显的保护作用，有减轻脑水肿、脑组织氧化应激损伤、细胞超微结构病变等作用，其保护机制与制细胞内钙离子超载、抗自由基和脑组织兴奋性氨基酸（EAA）有关；此外，体外试验表明，芍药苷有抗大鼠海马神经元损伤的作用。研究表明，芍药苷有显著的神经保护作用，其机制与活化腺苷A1受体、改善胆碱能神经功能、平衡离子通道、抑制氧化应激、抑制神经细胞凋亡、促进神经生长、作用于胶质细胞及可透过血脑屏障密切相关。

牡丹皮中的丹皮酚药理作用十分广泛，具有镇静、解热、抗炎、抗过敏、抗肿瘤、抗血栓、抗动脉粥样硬化、改善血流变学和免疫调节等活性，近年来丹皮酚在心脑血管方面的药理作用越来越受重视。研究表明，丹皮酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用，其作用机制可能与抑制炎症因子生成有关，或通过降低缺血区脑组织黏附分子表达发挥脑保护作用；丹皮酚减轻缺血再灌注脑组织损伤程度，降低神经细胞凋亡率，机制可能与抑制脑组织内Toll样受体（TLR4）表达有关，丹皮酚保护脑缺血损伤和血管内皮的作用机制之一，可能是丹皮酚能减少脑缺血再灌注损伤时一氧化氮（NO）及内皮素（ET）生成，调节ET-1和NO的平衡；丹皮酚对离体培养的大鼠神经元缺糖再灌注损伤具有明显保护作用，机制可能与抗氧化及减弱N-甲基-D-天门冬氨酸受体（NMDA受体）结合力有关。

综上所述，人参皂苷具有较好的抗脑缺血损伤和免疫调节活性，是人参的主要心脑血管活性部位；牡丹皮中苷类成分血脑屏障通透性较好，可起到增加血流量，抗神经元凋亡，改善神经行为学等作用，丹皮酚具有抗炎、改善血流动力学、降低脑缺血再灌注损伤等作用，二者是牡丹皮中抗缺血性中风的主要有效部位。

具体实施方式

本发明所述治疗缺血性中风的益气活血风静胶囊，它是由原药人参和牡丹皮制备而成，首先从人参中提取人参总皂苷，从牡丹皮中提取丹皮酚和牡丹皮总苷，然后将丹皮酚包合β-环糊精制成丹皮酚β-环糊精包合物后，按照人参总皂苷120g，丹皮酚β-环糊精包合物160g，牡丹皮总苷30g的比例混合均匀后装入1000粒胶囊中即可（每粒胶囊重约0.3g）。

口服剂量：口服，一日三次，一次一粒。

所述丹皮酚β-环糊精的制备方法为：将原药牡丹皮适当粉碎后，加水浸泡，蒸馏，收集馏出物，密闭冷藏过夜，过滤后得丹皮酚结晶；然后加6倍量的β-环糊精，在50℃下用胶体磨研磨30分钟，4℃冷藏24小时后过滤，固体物40℃以下低温干燥，即得丹皮酚β-环糊精包合物。

本发明的药效学和毒理学实验结果如下：

1、对大鼠实验性血栓形成的影响：以阿司匹林为阳性对照药，利用动－静脉旁路的方法造成大鼠血栓形成模型，观察益气活血风静胶囊、人参有效部位和牡丹皮有效部位的抗血栓作用。

实验方法：将50只动物随机分为5组，每组10只，雌雄各半，灌胃给药，每天1次，连续5天。末次给药后１h，将动物用乌拉坦静脉注射麻醉(1g/kg)，仰卧位固定，气管插管，分离右侧颈总动脉和左侧颈外静脉，将充满肝素生理盐水(50u/ml)三段相连的聚乙烯管（中段长8cm，内径2mm，内置一5cm长的４号手术线；动、静脉段均为10cm长，内径1mm）一端插入左颈外静脉，由聚乙烯管准确注入肝素抗凝(50u/kg)，再将另一端迅速插入右颈总动脉，打开动脉夹，开放血流15min，迅速取出丝线称重，总重量减去丝线重即得血栓重量，按下式计算抑制率。

统计学方法：实验结果进行组间比较ｔ检验。

结果：本发明益气活血风静胶囊和人参皂苷、牡丹皮有效部位均对大鼠血栓形成具有明显的抑制作用，与空白对照组比较有显著性差异，且益气活血风静组血栓抑制率明显优于人参有效部位组和牡丹皮有效部位组。见表1。

表1 对大鼠血栓形成的影响(

±s)

组别	剂量 (/kg.d)	动物数（只）	血栓湿重（mg）	抑制率（%）
					空白组	0.5%CMC-Na,10ml	10	47.75±18.86	—
阿司匹林组	0.03g	10	16.52±8.29	65.40**
					益气活血风静组	1g	10	15.33±7.54	67.89**
人参有效部位组	0.3g	10	23.06±9.44	51.71**
					牡丹皮有效部位组	0.7g	10	18.99±7.69	60.23**

注: 与空白组比较,* P < 0.05，** P < 0.01

2、对局灶性脑缺血模型大鼠的影响：通过阻断大鼠一侧大脑中动脉(MCAO)造成局灶性脑缺血模型，以尼莫地平为阳性对照药，观察观察益气活血风静胶囊、人参有效部位和牡丹皮有效部位对MCAO大鼠治疗作用。

实验方法：

MCAO大鼠造模：将动物用氯胺酮腹腔注射麻醉(100mg/kg)，置左侧卧位，沿耳眼连线中点切开皮肤，分离颞肌，咬断颧弓，在颧弓根前方用牙科钻钻孔，手术显微镜下撕开硬脑膜，暴露大脑中动脉(MCA) ，在大脑下静脉和嗅束间用11-0号外科无创伤缝合线结扎，血流中断后于远侧切断，假手术组大鼠用针线穿过大脑中动脉，不结扎和不切断血管。分层缝合肌肉和皮肤。

分组与给药：手术后，将模型动物随机分为假手术对照组、模型组、尼莫地平阳性对照药组、本发明益气活血风静组、人参有效部位组和牡丹皮有效部位组，术后立即灌胃给药，每天一次，连续五天。

观察指标：

凝血功能、血液流变性与血小板聚集测定：造模第５天被动性条件反射测定后，将动物用25%乌拉坦麻醉(1g/Kg,ip)，下腔静脉取血，血凝仪测定凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)。

脑组织含水量测定：断头取脑，取右侧大脑半球，称湿重后，置于80℃烤箱中烤至恒重，称干重，计算脑组织含水量。

结果：

对血液流变学的影响：模型组大鼠凝血酶时间明显缩短，纤维蛋白原含量明显升高；与模型组比较, 益气活血风静组和丹皮有效部位组能延长模型组大鼠血浆凝血酶时间，降低纤维蛋白原的含量，对其他指标无显著影响，见表2。

表2 对凝血功能的影响(

±s)

注：与假手术组比较，*P<0.05；与模型组比较，▲P<0.05

对局灶性脑缺血大鼠脑含水量的影响：与假手术组比较,模型组大鼠脑组织含水量明显增加；益气活血风静组能显著降低模型大鼠脑组织含水量，与模型对照组比较有显著性差异；人参皂苷组、丹皮有效部位组与模型对照组比较，对含水量有降低的趋势，但无统计学意义。见表3。

表3 对CIR大鼠脑含水量的影响(

±s)

组别	剂量（/kg.d）	数量(只)	脑湿重（g）	脑干重（g）	含水率（%）
						假手术组	10ml	10	0.676±0.048	0.148±0.011	78.03±0.22
模型对照组	10ml	10	0.706±0.036	0.153±0.009	78.38±0.29**
						尼莫地平组	30mg	10	0.734±0.028	0.159±0.009	78.47±0.82
益气活血风静组	1g	10	0.720±0.053	0.158±0.023	77.92±0.54▲
						人参有效部位组	0.3g	10	0.707±0.041	0.155±0.011	78.33±0.28
牡丹皮有效部位组	0.7g	10	0.708±0.046	0.154±0.012	78.25±0.36

注:与假手术组比较　**P<0.01；与模型组比较　▲P<0.05

本发明急性毒性实验：

实验方法：取体重为♀20.6±0.88g，♂20.1±1.62g小鼠，雌雄各半，随机分为5组。实验室温度23±10℃，相对湿度50～60%。根据预实验测得的最大致死量160mg/kg，最小致死量50.11mg/kg，从160mg/kg开始按1：0.75的比例用0.5%CMC-Na等比稀释，禁食12小时(自由饮水)后，分别给5组小鼠一次灌服不同剂量本发明的益气活血风静胶囊内容物，最大可灌胃容积0.4ml/10g。给药后，每日观察小鼠外观、毛色、活动、精神状态、食量、饮水量、大小便、呼吸及口、眼、鼻有无异常分泌物；体重变化及动物死亡、毒性反应情况，连续观察7天。用Bliss法NDST程序计算小鼠半数致死量及95%的可信限。

结果：给小鼠灌服益气活血风静胶囊内容物后，部分动物在数分钟或数小时出现四肢运动障碍、竖毛、昏睡；呼吸、心跳逐渐停止而死亡。随着给药剂量的减低，小鼠毒性反应减轻，死亡例数减少。死亡小鼠尸检肉眼观及主要脏器病理组织学检查未见明显异常改变。未死亡小鼠毛色、活动、精神状态、食量、排泄物等均未见异常。用Bliss法测得LD₅₀为9117mg/Kg；95%的可信限为8330mg/Kg至11800mg/Kg。说明益气活血风静胶囊一次大剂量口服后有一定毒性。

Claims

1.一种治疗缺血性中风的益气活血风静胶囊，其特征在于：它是由原药人参和牡丹皮制备而成，首先从人参中提取人参总皂苷，从牡丹皮中提取丹皮酚和牡丹皮总苷，然后将丹皮酚包合β-环糊精制成丹皮酚β-环糊精包合物后，按照人参总皂苷: 丹皮酚β-环糊精包合物:牡丹皮总苷=120: 160:30的比例混合后装入胶囊即可。

2.根据权利要求1所述的治疗缺血性中风的益气活血风静胶囊，其特征在于：所述人参总皂苷的制备方法为：原药人参加水煎煮2次，每次1.5-2小时，煎液过滤、合并后，通过大孔吸附树脂柱，用水洗脱至无色，再用60-70%的乙醇洗脱，收集洗脱液，过滤、回收乙醇后浓缩至稠膏，减压干燥、粉碎后即得人参总皂苷提取物。

3.根据权利要求1所述的治疗缺血性中风的益气活血风静胶囊，其特征在于：所述丹皮酚β-环糊精包合物的制备方法为：将原药牡丹皮加水浸泡后，蒸馏，收集馏出物，密闭冷藏过夜，过滤后得丹皮酚结晶；然后加6倍量的β-环糊精，在50℃下用胶体磨研磨30分钟，4℃冷藏24小时后过滤，固体物40℃以下低温干燥，即得丹皮酚β-环糊精包合物。

4.根据权利要求1所述的治疗缺血性中风的益气活血风静胶囊，其特征在于：所述牡丹皮总苷的制备方法为：牡丹皮加水浸泡后蒸馏，蒸馏后的母液过滤后放置备用；药渣用70%乙醇加热回流提取3次，每次1小时，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后加入上述丹皮酚蒸馏后的母液，浓缩至稠膏状；然后在其中加入2-3倍稠膏重量的水，放置24小时，滤过，通过大孔吸附树脂柱，用水和10%乙醇洗脱至无色，再用40%-50%乙醇洗脱，收集洗脱液，滤液回收乙醇并浓缩至稠膏，减压干燥、粉碎，即得牡丹皮总苷提取物。