CN1293887C - 一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于中药制药技术领域，具体公开了一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于它是由三七总皂苷与人参提取物和水溶性注射液用药用辅料制备而成的，具有“益气养血、活血通脉”功能；本发明还公开了上述药物组合物的制备方法。药理实验表明，本发明的药物组合物具有很好的预防和治疗心脑血管疾病的作用。

Description

一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明属中药制药技术领域，具体涉及一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法，这种药物组合物又称之为复方血塞通注射制剂。

背景技术

心脑血管疾病在临床上是常见病、多发病，近年来，随着人们生活水平的提高，心脑血管疾病的发病年龄有所提前，加上人口结构的老龄化，其发病率呈逐年上升的趋势，开发治疗心脑血管疾病的药物渐成研究的热点。越来越多的临床报道显示，中药在治疗心脑血管疾病方面具有良好的应用前景，并日益得到人们的重视。

在现有的治疗心脑血管疾病的中药中，其组方几乎都是一味具有活血化瘀功能的药物或数味具有活血化淤功能药物的简单组合，制成的药物中的有效成分均具有活血化淤的作用。在临床上应用时，短期内治疗效果可能明显，但是长时间给药后，效果改善会越来越小，最终的治疗效果并不是非常的理想。人体的各个系统是一个复杂的整体，相互之间是密切相关的。心脑血管疾病的发生常常伴有其它系统功能的降低。如果心脑血管疾病单纯依靠治疗心脑血管疾病的药物来治疗，只是对循环系统的症状进行了改善，对人体其它系统的改善非常的小或甚至没有，所以对于患者疾病的治疗就不会达到预期的治疗效果。

中医理论认为，心脑血管疾病当以化瘀散结、益气活血为其主要治法。益气和活血是相辅相成的。“益气”可改善整体功能，有利于“活血”的进行，有利于血管阻塞的消除，增加心肌供血，减小心肌梗塞范围及损伤程度，促进病变修复。

三七总皂苷[许海琴，等。常用天然提取物质量标准参考手册。化学工业出版社，2003，109]是五加科植物三七的芦头按一定工艺提制的总皂苷，有活血去淤、通脉活络的功效；五加科植物人参具有大补元气之功效，其中所含的人参总皂苷是其活性成分。

在资料检索中未发现有以刺五加、人参组方的药物组合物的任何报道。

发明内容

在研究中我们发现，将三七总皂苷和人参提取物合用，具有“益气养血、活血通脉”功能，祛瘀行气并举，而以祛瘀为主，二者作用互补，协同增效，对于心脑血管疾病有很好的疗效效果。

本发明的目的是公开一种中药药物组合物。

本发明的另一个目的是公开了上述药物组合物的制备方法。

本发明还提供了上述药物组合物在制备治疗心脑血管疾病药物中的应用。

本发明通过以下技术方案实现：

一、工艺制法

(1)提取物制备

本发明中所用的三七总皂苷为市售，质量标准符合参考文献[许海琴，等。常用天然提取物质量标准参考手册。化学工业出版社，2003，109]。

本发明中所用的人参提取物的制备方法为：将人参药材粉碎，放入超声提取罐中，加入6-12倍量0％-80％的乙醇水溶液进行超声振荡提取，频率为20-100kHz，时间为30-90分钟，提取2-4次，控制温度为室温；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩至溶液∶药材为1∶1，以12000-20000转/分的速度离心，离心液用截流分子量为5000-10000的超滤膜超滤，滤液过已处理好的非极性或弱极性大孔吸附树脂柱，先用2-4倍柱体积的水洗脱，再用4-8倍柱体积的20％-80％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液回收至无醇味，浓缩，干燥，粉碎，得到人参提取物。

(2)注射制剂的制备

水针制剂的制备：将上述三七总皂苷7-8重量份、人参提取物3-5重量份合并，用注射用水溶解，调pH值为5.0-7.0，过滤，灭菌，制备成本发明复方血塞通水针制剂。

输液制剂的制备：将上述三七总皂苷7-8重量份、人参提取物3-5重量份合并，用注射用水溶解，加入葡萄糖调等渗，调pH值为5.0-7.0，过滤，灭菌，制备成本发明复方血塞通输液制剂。

粉针制剂的制备：将上述三七总皂苷7-8重量份、人参提取物3-5重量份合并，用注射用水溶解，加入赋形剂，调pH值为5.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，喷雾干燥，包装得到本发明复方血塞通粉针制剂。

冻干粉针制剂的制备：将上述三七总皂苷7-8重量份、人参提取物3-5重量份合并，用注射用水溶解，加入赋形剂，调pH值为5.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，包装得到本发明复方血塞通冻干粉针制剂。

本发明所用的三七总皂苷为市售，其中干燥品中三七总皂苷的重量百分含量大于或等于88％；质量标准符合参考文献[许海琴，等。常用天然提取物质量标准参考手册。化学工业出版社，2003，109]中三七总皂苷项下各规定。

上述的人参药材包括园参、山参、红参、人参叶；人参提取物可以是园参、山参、红参、人参叶中的一种或几种的提取物。

超声振荡仪产生的超声波能产生强烈振动，高速度，强烈的空化效应，搅拌作用，加速药材中的有效成分溶解，可以提高有效成分的提出率。超声振荡所需设备简单、操作方便、提取时间短、提取率高、节能、节约药材、无需加热，不但人参药材中的有效成分在提取完全的同时保持稳定，而且低温下提取出的杂质的量大大降低，使得后续的富集和纯化变得更加容易。

利用截留分子量合适的超滤膜，可以除去超声振荡提取液中少量的、但容易使注射制剂变质的鞣质、蛋白质、淀粉等大分子物质，使得制成的注射制剂杂质含量少、稳定性好、有效期更长。

大孔吸附树脂对人参皂苷有很好的吸附作用。利用这一性质可以对人参提取液中的皂苷类成分进行富集和纯化。

二、含量测定分析

总皂苷的含量测定方法按照血塞通注射液(部颁中药19册)标准含量测定项下的薄层扫描法进行测定；血塞通注射液由黑龙江省佳木斯晨星药业有限责任公司生产，规格为2ml/支(含总皂苷100mg)；5批本发明复方血塞通注射制剂均由广东天之骄药物开发有限公司提供。测定结果见表1。

                       表1含量测定分析

批号	总皂苷含量(mg/支)
			血塞通注射液中三七总皂苷含量	本发明复方血塞通注射制剂中三七总皂苷和人参总皂苷之和含量
	12345	93.292.694.895.590.2			93.795.491.294.192.6

由以上数据可以看出，本发明复方血塞通注射制剂中的三七总皂苷和人参总皂苷的含量之和与血塞通注射液中的三七总皂苷含量相当。

三、药理实施例

为了充分说明本发明制剂处方的选择具有科学性、合理性，本发明研究人员以市售的血塞通注射液为对照，对本发明制剂进行了药效学研究。

在以下实验中，所使用的本发明制剂的编号为：1、本发明水针制剂，2、本发明输液制剂，3、本发明粉针制剂，4、本发明冻干粉针剂，均由广东天之骄药物开发有限公司提供；血塞通注射液由黑龙江省佳木斯晨星药业有限责任公司生产，规格为2ml/支(含三七总皂苷100mg)。

1、对小鼠缺氧耐力的影响实验

实验方法：取健康昆明种小鼠30只，体重20-24g。随机分成对照组，血塞通注射液组、本发明水针制剂组。每组10只，雌雄各半，分笼饲养。以人常规治疗剂量折算为小鼠的剂量。折算公式为：待测动物试用剂量＝已知动物给药量×待测动物的体表面积比值/已知动物的体表面积比值。对照组给生理盐水，1次/天，连续7d。于末次给药后1h，将小鼠分别置于体积为150ml磨口瓶中，内放15g钠石灰，密闭观察其存活时间。结果见表2。

           表2对小鼠常压缺氧的影响(X±SD)

组别	鼠数(只)	平均存活时间(min)
			对照组血塞通注射液组本发明1号组	101010	15.44±4.2228.78±3.92*32.26±3.47*#

注：与对照组比较：^*P＜0.01；

与血塞通注射液组比较：#P＜0.05。

本发明注射制剂、血塞通注射液均能提高小鼠常压缺氧耐力，平均存活时间比对照组显著延长(P＜0.01)；本发明注射制剂和血塞通注射液相比，平均存活时间也有差异(P＜0.05)。说明：本发明注射制剂的作用强于血塞通注射液。

2、对小鼠心肌缺氧的保护作用实验

实验方法：取健康昆明种小鼠30只，体重18-22g，随机分成3组，随机分成对照组，血塞通注射液组、本发明输液制剂组。每组雌雄各半，分笼饲养。以人常规治疗剂量折算为小鼠的剂量。折算公式为：待测动物试用剂量＝已知动物给药量×待测动物的体表面积比值/已知动物的体表面积比值。对照组给生理盐水。给药方法：1次/天，连续6天。于末次给药后1小时用乌拉坦1.2g/kg腹腔注射麻醉，背部固定，分离气管，以动脉夹夹闭气管，用心电仪观察心电，并用秒表记下小鼠夹闭气管后至心电消失的时间。结果见表3。

            表3对小鼠心肌缺氧的影响(X±SD)

组别	鼠数(只)	平均存活时间(min)
			对照组血塞通注射液组本发明2号组	101010	7.02±0.7613.27±0.68*15.44±0.83*#

注：与对照组比较：^*P＜0.01；

与血塞通注射液组比较：#P＜0.05

本发明注射制剂、血塞通注射液均能对小鼠心肌缺氧起保护作用，平均存活时间比对照组显著延长(P＜0.01)；本发明注射制剂和血塞通注射液相比，平均存活时间也有差异(P＜0.05)。说明：本发明注射制剂的作用强于血塞通注射液。

3、对大鼠体内血栓形成的影响

将大鼠随机分成3组，每组10只，分别为生理盐水对照组、血塞通注射液组、本发明粉针制剂组。以人常规治疗剂量折算为小鼠的剂量。折算公式为：待测动物试用剂量＝已知动物给药量×待测动物的体表面积比值/已知动物的体表面积比值。将各组动物给药(生理盐水组给予等体积的生理盐水)，每日1次，连续给药7天，末次给药后1小时，将大鼠用10％水合氯醛，按0.3g/kg体重麻醉后固定，分离左颈总动脉，在血栓仪上以2mA电流刺激血管7min后，记录血栓形成时间。结果见表4。

       表4对大鼠体内血栓形成的影响(X±SD)

组别	鼠数(只)	血栓形成时间(min)
			对照组血塞通注射液组本发明3号组	101010	597.88±93.56774.34±81.49*842.56±77.36*#

注：与对照组比较：^*P＜0.01；

与血塞通注射液组比较：#P＜0.05

本发明注射制剂和血塞通注射液都能延长大鼠体内血栓的形成(P＜0.01)；本发明注射制剂和血塞通注射液相比，延长时间也有差异(P＜0.05)。说明：本发明注射制剂的作用强于血塞通注射液。

4、抗血小板聚集作用

将大鼠随机分成3组，每组10只，分别为对照组、血塞通注射液组、本发明冻干粉针剂组。以人常规治疗剂量折算为小鼠的剂量。折算公式为：待测动物试用剂量＝已知动物给药量×待测动物的体表面积比值/已知动物的体表面积比值。各组动物给药，每日1次，连续给药7天，末次给药后1小时，动物麻醉后自腹主动脉取血，抗凝剂采用3.28％枸橼酸钠，与血液以1∶9比例混合。将抗凝全血在20℃条件下1500r·min^-1离心5min，获得富血小板血浆(platelet-richplasma，PRP)。留取定量PRP后，将剩余PRP再次以3000r·min^-1离心10min，获得自身对照贫血小板血浆(platelet-poorplasma，PPP)。以PPP调节PRP浓度，使各PRP浓度相同。将PRP在37℃的恒温孔中预热后，加入ADP(终浓度为3μmol·L^-1)引起血小板聚集，记录最大聚集率。结果见表5。

         表5抗血小板聚集作用(X±SD)

组别	鼠数(只)	最大聚集率(η/％)
			对照组	10	89.65±18.46

血塞通注射液组本发明4号组

1010

70.37±16.28*63.15±15.34*#

注：与对照组比较：^*P＜0.01；

与血塞通注射液组比较：#P＜0.05

本发明注射制剂和血塞通注射液都能明显抑制血小板聚集(P＜0.01)；本发明注射制剂和血塞通注射液相比，也有差异(P＜0.05)。说明：本发明注射制剂的作用强于血塞通注射液。

以上药理实验证明，本发明的由三七总皂苷和人参提取物为原料组方的复方血塞通注射制剂具有很好的药理作用。由此说明，按照“益气养血、活血通脉”的中医理论组方、利用本发明制备方法制成的复方血塞通注射制剂具有很好的预防和治疗心脑血管疾病的作用。

四、制备实施例

以下实施例旨在进一步举例说明，而不是限制本发明。在不违背本发明的精神和原则的前提下，对发明个别技术步骤进行的任何改动或改变将落入本发明权利要求范围内。

本发明中所用的三七总皂苷均为市售，质量标准符合参考文献[许海琴，等。常用天然提取物质量标准参考手册。化学工业出版社，2003，109]。

实施例1

将园参粉碎，放入超声提取罐中，加入6倍量的水进行超声振荡提取，频率为100kHz，时间为30分钟，提取2次，控制温度为室温；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩至溶液∶药材为1∶1，以20000转/分的速度离心，离心液用截流分子量为10000的超滤膜超滤，滤液过已处理好的D₁₀₁型大孔吸附树脂柱，先用2倍柱体积的水洗脱，再用8倍柱体积的20％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液回收至无醇味，浓缩，干燥，粉碎，得到人参提取物。

实施例2

将园参和红参粉碎，放入超声提取罐中，加入12倍量的80％乙醇溶液进行超声振荡提取，频率为20kHz，时间为90分钟，提取4次，控制温度为室温；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩至溶液∶药材为1∶1，以12000转/分的速度离心，离心液用截流分子量为5000的超滤膜超滤，滤液过已处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，先用4倍柱体积的水洗脱，再用4倍柱体积的80％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液回收至无醇味，浓缩，干燥，粉碎，得到人参提取物。

实施例3

将山参和人参叶粉碎，放入超声提取罐中，加入10倍量的50％的乙醇进行超声振荡提取，频率为60kHz，时间为50分钟，提取3次，控制温度为室温；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩至溶液∶药材为1∶1，以15000转/分的速度离心，离心液用截流分子量为8000的超滤膜超滤，滤液过已处理好的NKA型大孔吸附树脂柱，先用2倍柱体积的水洗脱，再用6倍柱体积的50％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液回收至无醇味，浓缩，干燥，粉碎，得到人参提取物。

实施例4

将山参和红参粉碎，放入超声提取罐中，加入8倍量的70％的乙醇进行超声振荡提取，频率为80kHz，时间为60分钟，提取4次，控制温度为室温；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩至溶液∶药材为1∶1，以14000转/分的速度离心，离心液用截流分子量为6000的超滤膜超滤，滤液过已处理好的D₁₀₁型大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积的水洗脱，再用5倍柱体积的40％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液回收至无醇味，浓缩，干燥，粉碎，得到人参提取物。

实施例5

将红参粉碎，放入超声提取罐中，加入9倍量的30％的乙醇进行超声振荡提取，频率为40kHz，时间为40分钟，提取2次，控制温度为室温；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩至溶液∶药材为1∶1，以18000转/分的速度离心，离心液用截流分子量为9000的超滤膜超滤，滤液过已处理好的D₁₀₁型大孔吸附树脂柱，先用4倍柱体积的水洗脱，再用7倍柱体积的70％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液回收至无醇味，浓缩，干燥，粉碎，得到人参提取物。

实施例6

将红参、山参和园参粉碎，放入超声提取罐中，加入7倍量的40％的乙醇进行超声振荡提取，频率为50kHz，时间为45分钟，提取3次，控制温度为室温；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩至溶液∶药材为1∶1，以16000转/分的速度离心，离心液用截流分子量为7000的超滤膜超滤，滤液过已处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积的水洗脱，再用5倍柱体积的30％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液回收至无醇味，浓缩，干燥，粉碎，得到人参提取物。

实施例7

将红参和人参叶粉碎，放入超声提取罐中，加入11倍量的30％的乙醇进行超声振荡提取，频率为30kHz，时间为70分钟，提取3次，控制温度为室温；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩至溶液∶药材为1∶1，以13000转/分的速度离心，离心液用截流分子量为6500的超滤膜超滤，滤液过已处理好的D₁₀₁型大孔吸附树脂柱，先用2倍柱体积的水洗脱，再用4倍柱体积的60％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液回收至无醇味，浓缩，干燥，粉碎，得到人参提取物。

实施例8

将山参粉碎，放入超声提取罐中，加入6倍量的80％的乙醇进行超声振荡提取，频率为95kHz，时间为85分钟，提取4次，控制温度为室温；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩至溶液∶药材为1∶1，以19000转/分的速度离心，离心液用截流分子量为8500的超滤膜超滤，滤液过已处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，先用4倍柱体积的水洗脱，再用2倍柱体积的80％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液回收至无醇味，浓缩，干燥，粉碎，得到人参提取物。

实施例9

将园参和山参和人参叶粉碎，放入超声提取罐中，加入12倍量的水进行超声振荡提取，频率为35kHz，时间为75分钟，提取2次，控制温度为室温；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩至溶液∶药材为1∶1，以14000转/分的速度离心，离心液用截流分子量为7000的超滤膜超滤，滤液过已处理好的NKA型大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积的水洗脱，再用5倍柱体积的20％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液回收至无醇味，浓缩，干燥，粉碎，得到人参提取物。

实施例10

将园参和山参和红参和人参叶粉碎，放入超声提取罐中，加入10倍量的45％的乙醇进行超声振荡提取，频率为35kHz，时间为65分钟，提取2次，控制温度为室温；合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩至溶液∶药材为1∶1，以12000转/分的速度离心，离心液用截流分子量为5000的超滤膜超滤，滤液过已处理好的D₁₀₁型大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积的水洗脱，再用3倍柱体积的55％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液回收至无醇味，浓缩，干燥，粉碎，得到人参提取物。

实施例11

取三七总皂苷70g、上述人参提取物50g合并，用注射用水溶解，调pH值为7.0，过滤，灭菌，制备成本发明复方血塞通水针制剂1000支。

实施例12

取三七总皂苷80g、上述人参提取物30g，用注射用水溶解，加入氯化钠调等渗，调pH值为5.0，过滤，灭菌，制备成本发明复方血塞通输液制剂1000瓶。

实施例13

取三七总皂苷75g、上述人参提取物40g，用注射用水溶解，加入葡萄糖调等渗，调pH值为6.0，过滤，灭菌，制备成本发明复方血塞通输液制剂1000瓶。

实施例14

取三七总皂苷73g、上述人参提取物44g合并，用注射用水溶解，加入聚乙烯吡咯烷酮183g，调pH值为5.5，用0.22μm微孔滤膜过滤，喷雾干燥，包装得到本发明复方血塞通粉针制剂1000支。

实施例15

取三七总皂苷77g、上述人参提取物36g合并，用注射用水溶解，加入甘露醇和右旋糖苷共187g，调pH值为6.5，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，包装得到本发明复方血塞通冻干粉针制剂1000支。

实施例16

取三七总皂苷74g、上述人参提取物41g合并，用注射用水溶解，加入聚乙烯吡咯烷酮和乳糖共185g，调pH值为5.3，用0.22μm微孔滤膜过滤，喷雾干燥，包装得到本发明复方血塞通粉针制剂1000支。

实施例17

取三七总皂苷72g、上述人参提取物47g合并，用注射用水溶解，加入乳糖181g，调pH值为6.7，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，包装得到本发明复方血塞通冻干粉针制剂1000支。

实施例18

取三七总皂苷79g、上述人参提取物32g合并，用注射用水溶解，加入甘露醇189g，调pH值为6.2，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，包装得到本发明复方血塞通冻干粉针制剂1000支。

实施例19

取三七总皂苷78g、上述人参提取物35g，用注射用水溶解，加入氯化钠调等渗，调pH值为5.6，过滤，灭菌，制备成本发明复方血塞通输液制剂1000瓶。

实施例20

取三七总皂苷71g、上述人参提取物49g合并，用注射用水溶解，调pH值为6.8，过滤，灭菌，制备成本发明复方血塞通水针制剂1000支。

本发明注射制剂肌肉注射，一次1支，一日1-2次；静脉滴注，一次2-4支，一日1次。

Claims (2)

1.一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由三七总皂苷7-8重量份，人参提取物3-5重量份和水溶性注射液用药用辅料制备而成的水针剂、输液剂、粉针剂或冻干粉针剂；其制备方法为：

(1)将人参药材粉碎，用6-12倍量的极性溶剂0％-80％的乙醇水溶液超声振荡提取2-4次，每次30-90分钟，超声振荡提取的振荡频率为20-100kHz，合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩至溶液：药材为1∶1，高速离心，离心的速度为12000-20000转/分，离心液用超滤膜超滤，超滤膜的截留分子量为5000-10000，滤液过已处理好的大孔吸附树脂柱，大孔吸附树脂为非极性或弱极性，先用2-4倍柱体积的水洗脱，再用4-8倍柱体积的20％-80％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液回收至无醇味，浓缩，干燥，粉碎，得到上述人参提取物；

(2)将上述重量份的三七总皂苷、人参提取物合并，用注射用水溶解，调pH值为5.0-7.0，过滤，灭菌，制备成水针制剂；

或将上述重量份的三七总皂苷、人参提取物合并，用注射用水溶解，加入葡萄糖调等渗，调pH值为5.0-7.0，过滤，灭菌，制备成输液制剂；

或将上述重量份的三七总皂苷、人参提取物合并，用注射用水溶解，加入赋形剂，调pH值为5.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，喷雾干燥，包装得到粉针制剂；

或将上述重量份的三七总皂苷、人参提取物合并，用注射用水溶解，加入赋形剂，调pH值为5.0-7.0，用0.22μm微孔滤膜过滤，冷冻干燥，包装得到冻干粉针制剂。

2.根据权利要求1所述的药物组合物在制备治疗心脑血管疾病药物中的应用。