CN1651003A - 一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于中药制药技术领域,具体公开了一种治疗心脑血管疾病的药物组合物,其特征在于它是由银杏叶、刺五加、人参的提取物和水溶性药用辅料制备而成的;本发明还公开了上述药物组合物的制备方法。药理实验表明,本发明的药物组合物具有很好的预防和治疗心脑血管疾病的作用。
Description
技术领域
本发明属中药制药技术领域,具体涉及一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法,这种药物组合物又称之为复方银杏叶注射制剂。
背景技术
心脑血管疾病在临床上是常见病、多发病,已经成为危害人类生命的第一大杀手,因此开发治疗心脑血管疾病的药物成为人们研究的热点。在人类“回归自然”的热潮中,中药以其疗效好、副作用小、资源丰富而倍受人们的青睐;而且越来越多的临床报道显示,中药在治疗心脑血管疾病方面具有良好的应用前景,并日益得到患者的认可。
银杏叶、刺五加、人参组成的制剂有力可生颗粒[杨义芳,等。力可生颗粒剂中芦丁及总甙含量测定。江西中医学院学报,1997,9(3):35],具有活血通络、益气固本之功效;方中银杏叶的主要有效成分为银杏总黄酮和银杏内酯,具有扩张动脉血管,对抗肾上腺所致的血管收缩,扩张冠状动脉,降低血液粘度,疏通血管,增加冠脉流量,改善循环代谢等作用[徐巧玲,等。银杏叶提取物药理研究进展。人民军医,2004,47(10):609];人参补心气、养心阴,可调节中枢神经功能,提高机体适应能力,增强心肌收缩力,增强机体免疫功能等作用,其中所含的总皂苷是其主要有效成分;刺五加具有活血化瘀之功效,其中所含的黄酮类化合物是其主要有效成分,还能调节机体新陈代谢及调节免疫功能。
力可生颗粒为口服制剂,患者用药后吸收差,生物利用度低,体内的血药浓度低,在临床应用中治疗效果非常的不理想。因此,对于力可生颗粒进一步的开发,使其发挥更好的疗效,是很有必要的。
在资料检索中未发现有关于银杏叶、刺五加、人参为原料的注射制剂的任何报道。
发明内容
本发明的目的是公开一种以银杏叶、刺五加、人参为原料的药物组合物。
本发明的另一个目的是公开了上述药物组合物的制备方法。
本发明通过以下技术方案实现:
一、制备方法
本发明治疗心脑血管疾病的药物组合物的原料药材为银杏叶、刺五加和人参,其各重量份组成为:银杏叶30-50份,刺五加40-60份,人参20-40份。
本发明通过以下方法制备:
(1)提取物制备
将银杏叶、刺五加和人参药材粉碎,加入6-12倍量0%-80%的乙醇水溶液回流提取三次,每次0.5-2小时;合并提取液,静置,过滤,滤液减压浓缩至相对密度为1.20,过滤,滤液过已处理好的非极性或弱极性大孔吸附树脂柱,先用3-3倍柱体积的水洗脱,再用4-6倍柱体积的50%-80%乙醇溶液洗脱,收集乙醇洗脱液回收至无醇味,以12000-20000转/分的速度离心,离心液用截流分子量为5000-10000的超滤膜超滤,滤液浓缩,干燥,粉碎,得到提取物1.0-3.5重量份。
(2)注射制剂的制备
水针制剂的制备:将上述提取物用注射用水溶解,用葡甲胺调pH值为7.5-8.0用0.22μm微孔滤膜过滤,灭菌,制备成本发明复方银杏叶水针制剂。
输液制剂的制备:将上述提取物用注射用水溶解,加入氯化钠或葡萄糖调等渗,用葡甲胺调pH值为7.5-8.0,用0.22μm微孔滤膜过滤,灭菌,制备成本发明复方银杏叶输液制剂。
粉针制剂的制备:将上述提取物用注射用水溶解,加入水溶性冻干赋形剂,用葡甲胺调pH值为7.5-8.0,用0.22μm微孔滤膜过滤,喷雾干燥,包装得到本发明复方银杏叶粉针制剂。
冻干粉针制剂的制备:将上述提取物用注射用水溶解,加入水溶性冻干赋形剂,用葡甲胺调pH值为7.5-8.0,用0.22μm微孔滤膜过滤,冷冻干燥,包装得到本发明复方银杏叶冻干粉针制剂。
上述刺五加药材包括刺五加的根、根茎、茎、叶;上述人参药材包括园参、山参、红参、人参叶。
大孔吸附树脂对银杏叶、刺五加中的黄酮类有效成分,银杏叶中的银杏内酯有效成分,人参中的总皂苷有效成分均有很好的吸附作用。利用这一性质可以对提取液中含有的有效成分进行富集和纯化。
利用截留分子量合适的超滤膜,可以除去提取液中少量的、但容易使注射制剂变质的鞣质、蛋白质、淀粉等大分子物质,使得制成的注射制剂杂质含量少、稳定性好、有效期更长。
二、含量分析
仪器与试药:752型紫外可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)。高效液相色谱仪包括LC-10ATvp型溶剂输送泵,SPD-10ATvp型紫外可见检测器(日本岛津公司);N2000色谱工作站(浙江大学智能信息工程研究所);KQ3200型超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司),TGL-16G高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)。对照品均购自中国药品生物制品检定所;其它试剂均为分析醇。本发明的6批提取物均由广东天之骄药物开发有限公司提供。
1、总黄酮类有效成分含量测定
含量测定方法按照参考文献[李梅,等。紫外分光光度法测定复方银杏胶囊中银杏叶总黄酮含量。中国医院药学杂志,1998,18(2):85]中的紫外分光光度法进行测定。含量测定结果见表1。
表1 总黄酮类有效成分含量测定结果
批号 总黄酮含量(%)
1 28.4
2 31.6
3 25.0
4 26.7
5 33.2
6 30.1
由表1的含量测定结果可以看出,本发明的6批提取物中总黄酮类有效成分的重量百分含量大于或等于25%。
2、银杏内酯有效成分含量测定
含量测定方法按照参考文献[许海琴,等。常用天然提取物质量标准参考手册。化学工业出版社,2003,271]中银杏叶提取物中萜类内酯的高效液相色谱法进行测定。含量测定结果见表2。
表2 银杏内酯有效成分含量测定结果
批号 银杏内酯含量(%)
1 7.46
2 6.25
3 9.83
4 7.17
5 5.00
6 8.54
由表2的含量测定结果可以看出,本发明的6批提取物中银杏内酯有效成分的重量百分含量大于或等于5%。
3、人参总皂苷有效成分含量测定
含量测定方法按照参考文献[许海琴,等。常用天然提取物质量标准参考手册。化学工业出版社,2003,109]中人参叶茎总皂苷中的分光光度法进行测定。含量测定结果见表3。
表3 人参总皂苷有效成分含量测定结果
批号 银杏内酯含量(%)
1 24.7
2 20.0
3 21.3
4 27.8
5 30.4
6 28.5
由表3的含量测定结果可以看出,本发明的6批提取物中人参总皂苷有效成分的重量百分含量大于或等于20%。
三、药理实施例
为了充分说明本发明复方银杏叶注射制剂对于力可生颗粒的开发具有科学性、合理性,本发明研究人员以力可生颗粒为对照,对本发明制剂进行了药效学研究。
在以下实验中,所使用的本发明复方银杏叶注射制剂的编号为:1、本发明水针制剂,2、本发明输液制剂,3、本发明粉针制剂,4、本发明冻干粉针剂,均由广东天之骄药物开发有限公司提供。
1、对小鼠缺氧耐力的影响实验
实验方法:取健康昆明种小鼠30只,体重20-24g。随机分成对照组,力可生颗粒组、本发明水针制剂组。每组10只,雌雄各半,分笼饲养。以人常规治疗剂量折算为小鼠的剂量。折算公式为:待测动物试用剂量=已知动物给药量×待测动物的体表面积比值/已知动物的体表面积比值。对照组给生理盐水,1次/天,连续7d。于末次给药后1h,将小鼠分别置于体积为150ml磨口瓶中,内放15g钠石灰密闭观察其存活时间。结果见表4。
表4 对小鼠常压缺氧的影响(X±SD)
组别 鼠数(只) 平均存活时间(min)
对照组 10 15.54±4.65
力可生颗粒组 10 23.67±4.03*
本发明1号组 10 32.28±3.52**
注:与对照组比较:*P<0.05;**P<0.01。
由表4实验结果看出,本发明注射制剂能显著提高小鼠常压缺氧耐力,平均存活时间比力可生颗粒组显著延长。说明:本发明复方银杏叶注射制剂的药理作用强于力可生颗粒。
2、对小鼠心肌缺氧的保护作用实验
实验方法:取健康昆明种小鼠30只,体重18-22g,随机分成3组,随机分成对照组,力可生颗粒组、本发明输液制剂组。每组雌雄各半,分笼饲养。以人常规治疗剂量折算为小鼠的剂量。折算公式为:待测动物试用剂量=已知动物给药量×待测动物的体表面积比值/已知动物的体表面积比值。对照组给生理盐水。给药方法:1次/天,连续6天。于末次给药后1小时用乌拉坦1.2g/kg腹腔注射麻醉,背部固定,分离气管,以动脉夹夹闭气管,用心电仪观察心电,并用秒表记下小鼠夹闭气管后至心电消失的时间。结果见表5。
表5 对小鼠心肌缺氧的影响(X±SD)
组别 鼠数(只) 平均存活时间(min)
对照组 10 6.24±0.95
力可生颗粒组 10 10.65±0.89*
本发明2号组 10 14.33±0.64**
注:与对照组比较:*P<0.05;**P<0.01。
由表5实验结果看出,本发明注射制剂对小鼠心肌缺氧起显著的保护作用,小鼠平均存活时间比力可生颗粒组显著延长。说明:本发明注射制剂的药理作用强于力可生颗粒。
3、对大鼠体内血栓形成的影响
将大鼠随机分成3组,每组10只,分别为生理盐水对照组、力可生颗粒组、本发明粉针制剂组。将各组动物给药(生理盐水组给予等体积的生理盐水),每日1次,连续给药7天,末次给药后1小时,将大鼠用10%水合氯醛,按0.3g/kg体重麻醉后固定,分离左颈总动脉,在血栓仪上以2mA电流刺激血管7min后,记录血栓形成时间。结果见表6。
表6 对大鼠体内血栓形成的影响(X±SD)
组别 鼠数(只) 血栓形成时间(min)
对照组 10 633.46±84.25
力可生颗粒组 10 734.13±78.82*
本发明3号组 10 810.08±70.46**
注:与对照组比较:*P<0.05;**P<0.01。
由表6实验结果看出,本发明注射制剂能显著延长大鼠体内血栓的形成,血栓形成时间比力可生颗粒组显著延长。说明:本发明注射制剂的药理作用强于力可生颗粒。
4、抗血小板聚集作用
将大鼠随机分成3组,每组10只,分别为对照组、力可生颗粒组、本发明冻干粉针剂组。各组动物给药,每日1次,连续给药7天,末次给药后1小时,动物麻醉后自腹主动脉取血,抗凝剂采用3.28%枸橼酸钠,与血液以1∶9比例混合。将抗凝全血在20℃条件下1500r·min-1离心5min,获得富血小板血浆(platelet-richplasma,PRP)。留取定量PRP后,将剩余PRP再次以3000r·min-1离心10min,获得自身对照贫血小板血浆(platelet-poorplasma,PPP)。以PPP调节PRP浓度,使各PRP浓度相同。将PRP在37℃的恒温孔中预热后,加入ADP(终浓度为3μmol·L-1)引起血小板聚集,记录最大聚集率。结果见表7。
表7 抗血小板聚集作用(X±SD)
组别 鼠数(只) 最大聚集率(η/%)
对照组 10 93.74±16.24
力可生颗粒组 10 84.56±17.58*
本发明4号组 10 71.55±14.88**
注:与对照组比较:*P<0.05;**P<0.01。
表7实验结果看出,本发明注射制剂能明显抑制血小板聚集,最大聚集率比力可生颗粒组显著缩小。说明:本发明注射制剂的作用强于力可生颗粒。
总结:以上药理实验说明,由银杏叶、刺五加、人参为原料药材,用本发明制备方法精制而成的复方银杏叶注射制剂,对于心脑血管疾病具有很好的治疗作用,比由三味药材制成的口服制剂具有更好的药理作用。说明,本发明复方银杏叶制剂的开发是科学的、合理的,在临床的应用中更具有实用性。
四、制备实施例
实施例1
将银杏叶500g、刺五加根600g和园参400g粉碎,加入12倍量80%乙醇溶液回流提取三次,每次0.5小时;合并提取液,静置,过滤,滤液减压浓缩至相对密度为1.20,过滤,滤液过已处理好的D101型大孔吸附树脂柱,先用5倍柱体积的水洗脱,再用4倍柱体积的80%乙醇溶液洗脱,收集乙醇洗脱液回收至无醇味,以20000转/分的速度离心,离心液用截流分子量为5000的超滤膜超滤,滤液浓缩,干燥,粉碎,得到提取物35.0g。
实施例2
将银杏叶300g、刺五加根茎400g和山参200g粉碎,加入6倍量水回流提取三次,每次2小时;合并提取液,静置,过滤,滤液减压浓缩至相对密度为1.20,过滤,滤液过已处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱,先用3倍柱体积的水洗脱,再用6倍柱体积的50%乙醇溶液洗脱,收集乙醇洗脱液回收至无醇味,以12000转/分的速度离心,离心液用截流分子量为10000的超滤膜超滤,滤液浓缩,干燥,粉碎,得到提取物10.0g。
实施例3
将银杏叶400g、刺五加茎500g和红参300g粉碎,加入10倍量50%乙醇溶液回流提取三次,每次1小时;合并提取液,静置,过滤,滤液减压浓缩至相对密度为1.20,过滤,滤液过已处理好的NKA型大孔吸附树脂柱,先用4倍柱体积的水洗脱,再用5倍柱体积的70%乙醇溶液洗脱,收集乙醇洗脱液回收至无醇味,以16000转/分的速度离心,离心液用截流分子量为8000的超滤膜超滤,滤液浓缩,干燥,粉碎,得到提取物18.7g。
实施例4
将银杏叶450g、刺五加根和叶450g、人参叶250g粉碎,加入8倍量70%乙醇溶液回流提取三次,每次1.5小时;合并提取液,静置,过滤,滤液减压浓缩至相对密度为1.20,过滤,滤液过已处理好的D101型大孔吸附树脂柱,先用3倍柱体积的水洗脱,再用6倍柱体积的60%乙醇溶液洗脱,收集乙醇洗脱液回收至无醇味,以18000转/分的速度离心,离心液用截流分子量为6000的超滤膜超滤,滤液浓缩,干燥,粉碎,得到提取物26.6g。
实施例5
将银杏叶350g、刺五加根和茎550g、园参和山参350g粉碎,加入11倍量40%乙醇溶液回流提取三次,每次2小时;合并提取液,静置,过滤,滤液减压浓缩至相对密度为1.20,过滤,滤液过已处理好的NKA型大孔吸附树脂柱,先用5倍柱体积的水洗脱,再用4倍柱体积的55%乙醇溶液洗脱,收集乙醇洗脱液回收至无醇味,以14000转/分的速度离心,离心液用截流分子量为7500的超滤膜超滤,滤液浓缩,干燥,粉碎,得到提取物12.5g。
实施例6
将银杏叶330g、刺五加根茎和叶560g、红参和山参和人参叶280g粉碎,加入9倍量30%乙醇溶液回流提取三次,每次0.5小时;合并提取液,静置,过滤,滤液减压浓缩至相对密度为1.20,过滤,滤液过已处理好的D101型大孔吸附树脂柱,先用4倍柱体积的水洗脱,再用5倍柱体积的75%乙醇溶液洗脱,收集乙醇洗脱液回收至无醇味,以15000转/分的速度离心,离心液用截流分子量为6500的超滤膜超滤,滤液浓缩,干燥,粉碎,得到提取物23.8g。
实施例7
将银杏叶480g、刺五加根和根茎和茎和叶430g、园参和山参和红参和人参叶320g药材粉碎,加入7倍量10%乙醇溶液回流提取三次,每次1小时;合并提取液,静置,过滤,滤液减压浓缩至相对密度为1.20,过滤,滤液过已处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱,先用5倍柱体积的水洗脱,再用5倍柱体积的65%乙醇溶液洗脱,收集乙醇洗脱液回收至无醇味,以13000转/分的速度离心,离心液用截流分子量为8000的超滤膜超滤,滤液浓缩,干燥,粉碎,得到提取物15.5g。
实施例8
将上述提取物用注射用水溶解,用葡甲胺调pH值为7.5,用0.22μm微孔滤膜过滤,灭菌,制备成本发明复方银杏叶水针制剂1000支。
实施例9
将上述提取物用注射用水溶解,加入氯化钠调等渗,用葡甲胺调pH值为8.0,用0.22μm微孔滤膜过滤,灭菌,制备成本发明复方银杏叶输液制剂1000瓶。
实施例10
将上述提取物用注射用水溶解,加入葡萄糖调等渗,用葡甲胺调pH值为7.7,用0.22μm微孔滤膜过滤,灭菌,制备成本发明复方银杏叶输液制剂1000瓶。
实施例11
将上述提取物用注射用水溶解,加入甘露醇,用葡甲胺调pH值为7.6,用0.22μm微孔滤膜过滤,喷雾干燥,包装得到本发明复方银杏叶粉针制剂1000支。
实施例12
将上述提取物用注射用水溶解,加入聚乙烯吡咯烷酮,用葡甲胺调pH值为7.8,用0.22μm微孔滤膜过滤,冷冻干燥,包装得到本发明复方银杏叶冻干粉针制剂1000支。
Claims (7)
1、一种治疗心脑血管疾病的药物组合物,其特征在于它是由银杏叶30-50重量份、刺五加40-60重量份、人参20-40重量份的提取物1.0-3.5重量份和水溶性药用辅料制备而成的;其特征还在于提取物中总黄酮类有效成分重量百分含量大于25%,银杏内酯有效成分重量百分含量大于5%,人参总皂苷有效成分重量百分含量大于20%;其特征还在于该药物是注射制剂,包括水针剂,输液剂,粉针剂和冻干粉针剂。
2、根据权利要求1所述的药物组合物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
将银杏叶、刺五加和人参药材粉碎,加入6-12倍量的极性溶剂回流提取三次,每次0.5-2小时;合并提取液,静置,过滤,滤液减压浓缩至相对密度为1.20,过滤,滤液过已处理好的大孔吸附树脂柱,先用3-5倍柱体积的水洗脱,再用4-6倍柱体积的50%-80%乙醇溶液洗脱,收集乙醇洗脱液回收至无醇味,高速离心,离心液用超滤膜超滤,滤液浓缩,干燥,粉碎,得到提取物。
3、根据权利要求2所述的药物组合物的制备方法,其特征在于,极性溶剂为0%-80%的乙醇水溶液。
4、根据权利要求2所述的药物组合物的制备方法,其特征在于,大孔吸附树脂为非极性或弱极性。
5、根据权利要求2所述的药物组合物的制备方法,其特征在于,离心的速度为12000-20000转/分。
6、根据权利要求2所述的药物组合物的制备方法,其特征在于,超滤膜的截留分子量为5000-10000。
7、根据权利要求1所述的药物组合物的制备方法,其特征在于还包括以下步骤:
水针制剂的制备:将上述提取物用注射用水溶解,用葡甲胺调pH值为7.5-8.0,用0.22μm微孔滤膜过滤,灭菌,制备成本发明水针制剂。
输液制剂的制备:将上述提取物用注射用水溶解,加入氯化钠或葡萄糖调等渗,用葡甲胺调pH值为7.5-8.0,用0.22μm微孔滤膜过滤,灭菌,制备成本发明输液制剂。
粉针制剂的制备:将上述提取物用注射用水溶解,加入水溶性冻干赋形剂,用葡甲胺调pH值为7.5-8.0,用0.22μm微孔滤膜过滤,喷雾干燥,包装得到本发明粉针制剂。
冻干粉针制剂的制备:将上述提取物用注射用水溶解,加入水溶性冻干赋形剂,用葡甲胺调pH值为7.5-8.0,用0.22μm微孔滤膜过滤,冷冻干燥,包装得到本发明冻干粉针制剂。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
AD01 | Patent right deemed abandoned | ||
C20 | Patent right or utility model deemed to be abandoned or is abandoned |