CN1888906A - 盐酸克伦特罗－莱克多巴胺二联检测卡及其检测样品的处理方法 - Google Patents

盐酸克伦特罗－莱克多巴胺二联检测卡及其检测样品的处理方法 Download PDF

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Abstract

盐酸克伦特罗－莱克多巴胺二联检测卡，它是在检测卡外壳中安装测试条，外壳表面有检测窗孔和加样孔，测试条是由支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜，两端部分别叠置粘贴吸水膜和样品垫，硝酸纤维素膜两端分别与吸水膜及样品垫内端搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭部之间夹置粘贴一段含抗盐酸克伦特罗和抗莱克多巴胺克隆抗体胶体金标记物的胶体金膜，硝酸纤维素膜上有两条分别含盐酸克伦特罗蛋白质偶联物及莱克多巴胺蛋白质偶联物的检测带，一条抗兔抗体或抗鼠抗体质孔带；测试条的样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。本发明的优点是能同时检测盐酸克伦特罗和莱克多巴胺。制备容易且检测快捷，灵敏准确。

Description

盐酸克伦特罗-莱克多巴胺二联检测卡及其检测样品的处理方法
技术领域：本发明涉及一种检测β-受体兴奋剂的器具，特别是涉及一种盐酸克伦特罗——莱克多巴胺二联检测卡及其检测样品的处理方法。
背景技术：现代畜牧业为人们提供了极其丰富的各种食品，但同时畜牧业中大量养殖添加剂的使用，特别是在家畜饲料中使用β-受体兴奋剂盐酸克伦特罗(clenbuterol)俗称“瘦肉精”，以及β-受体兴奋剂莱克多巴胺(ractopamine)，利用它促进脂肪分解和增加肌肉生长作用，以提高瘦肉率，它的非法滥用却对人的健康产生了不良影响，人食用了用克伦特罗这类添加剂饲养的畜产品后，会出现中毒症状。因此，我国已明文规定严禁使用。
目前，现有技术对于盐酸克伦特罗及莱克多巴胺的检测主要依赖酶免疫检测试剂盒，也有单独检测盐酸克伦特罗的检测试纸条，但到目前为止，没有同时检测这两种物质的检测器具。
发明内容：本发明的目的在于提供一种能同时检测盐酸克伦特罗和莱克多巴胺的检测器具，克服现有技术只能逐一单独检查的缺陷。
本发明的技术方案是盐酸克伦特罗——莱克多巴胺二联检测卡及及其检测样品的处理方法，一种盐酸克伦特罗——莱克多巴胺二联检测卡，它是在长条扁平薄壳状的检测卡外壳中设置测试条，检测卡外壳表面有检测窗孔和加样孔，其特征在于测试条是由支承背板上通过不干胶在其上粘贴四种元件组成，支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜，支承背板一端部上叠置粘贴吸水膜，另一端部上叠置粘贴样品垫，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜一端搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金膜，胶体金膜是含抗盐酸克伦特罗和抗莱克多巴胺单克隆抗体或多克隆抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有2条检测带和1条质孔带，一条检测带分别含盐酸克伦特罗蛋白质偶联物，另一条检测带含莱克多巴胺蛋白质偶联物，质孔带为抗兔抗体或抗鼠抗体；测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。
采用上述盐酸克伦特罗——莱克多巴胺二联检测卡，检测样品可以是尿液样品、饲料样品或动物组织、肉、肝脏样品，对于各种不同的检测样品有不同的处理方法。
针对尿液样品的处理方法是：尿液直接用作检测样品，若尿样呈浑浊状，需先经滤纸滤过，取上清液作测试样品。
针对饲料样品的处理方法是：称取0.5克饲料样品，加入1ml样品抽取提液，在试管中搅拌1分钟，静置10分钟后，取清亮上层液作测试样品。
针对动物组织、肉、肝脏样品的处理方法是：取1克剪碎或匀浆过的动物组织、肉、肝脏样品，置于含1ml样品抽提液的试管中，扭紧管盖，振摇样品一分钟后，经100℃水浴5分钟，冷却至室温，取清亮的中间部分作测试样品。
本发明的优点是能同时检测出尿液或饲料、动物组织、肉、肝脏中含有的盐酸克伦特罗和莱克多巴胺，易于制备且节省检测费用，使用方便，检测快速，灵敏度高，结果准确。
附图说明：
图1是盐酸克伦特罗——莱克多巴胺二联检测卡外壳及测试条在外壳内的安置图。
图2是盐酸克伦特罗——莱克多巴胺二联检测卡的检测试条结构示意图。
图3是检测试条的硝酸玻璃纤维膜上显示印迹示意图。
本发明结合具体实施例参见附图进一步说明如下：
一种盐酸克伦特罗——莱克多巴胺二联检测卡，它是在检测卡外壳1中设置测试条2，检测卡外壳1的结构及测试条2的设置参见附图1，检测卡外壳1为长条扁平薄壳状外壳，长7cm，宽2cm，厚0.5cm，薄壳壁厚0.1cm，由工程塑料制成。检测卡外壳1由壳盖与壳座两半联接构成，在检测卡外壳1壳盖上有检测窗孔3和加样孔4。测试条2放置在检测卡外壳1的壳座内。
测试条2是多层结构的窄条薄片，片长约6.0cm，片宽约0.4cm，厚度小于2.5mm。测试条2是多层结构：底层是支承背板5，为聚氯乙烯塑料薄片，厚约0.5mm，长6.0cm，宽0.4cm；支承背板5中部叠置粘贴硝酸纤维素膜6，硝酸纤维素膜厚0.5mm，长2-2.5cm，宽0.4cm。硝酸纤维素膜6上有三条间隔开的横向显示印迹带，参见附图3，三条显示印迹中，一条是检测带10，含盐酸克伦特罗蛋白质偶联物，另一条是检测带11，含莱克多巴胺蛋白质偶联物，第三条是质孔带12，含抗兔抗体或抗鼠抗体。支承背板5一端部上叠置粘贴吸水膜9，支承背板5另一端部上叠置粘贴样品垫8，吸水膜9内端与样品垫8内端各自分别与硝酸纤维素膜6一端搭接，在样品垫8与硝酸纤维素膜6的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金膜7，胶体金膜7是含抗盐酸克伦特罗和抗莱克多巴胺单克隆抗体或多克隆抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜。胶体金膜7厚0.5-0.8mm，长0.5-0.6cm，宽0.4cm。样品垫8厚0.5-0.8mm，长2cm，宽0.4cm。吸水膜9厚0.5-0.8mm，长1.6-2cm，宽0.4cm。胶体金膜7、样品垫8及吸水膜9与硝酸纤维素膜搭接长度为0.1-0.2cm。吸水膜9材料是吸水纸，样品垫8材料是吸水玻璃纤维膜。
本发明盐酸克伦特罗——莱克多巴胺二联检测卡用于检测畜牧饲料或动物尿样或动物组织、肉、肝脏中是否含有盐酸克伦特罗、莱克多巴胺，据此鉴别畜牧食品的安全性。
对于不同的检测样品，有不同的处理方法：
针对尿液样品的处理方法是：尿液直接用作检测样品，若尿样呈浑浊状，需先经滤纸滤过，取上清液作测试样品。
针对饲料样品的处理方法是：称取0.5克饲料样品，加入1ml样品抽取提液，在试管中搅拌1分钟，静置10分钟后，取清亮上层液作测试样品。
针对动物组织、肉、肝脏样品的处理方法是：取1克剪碎或匀浆过的动物组织、肉、肝脏样品，置于含1ml样品抽提液的试管中，扭紧管盖，振摇样品一分钟后，经100℃水浴5分钟，冷却至室温，取清亮的中间部分作测试样品。
使用盐酸克伦特罗——莱克多巴胺二联检测卡进行检测时，先将待检测的样品液从加样孔中4滴注入盐酸克伦特罗——莱克多巴胺二联检测卡2的样品垫8，由于虹吸作用原理，带动待检测的样品液及胶体金膜7所含的抗盐酸克伦特罗和莱克多巴胺单克隆或多克隆抗体胶体金标记物一起向硝酸纤维素膜6扩散，5-10分钟内观察结果。
检测卡的主要反应是免疫学的抗原和抗体反应，在硝酸纤维素膜上迁移的胶体金标记的抗体，在测试带上分别与含盐酸克伦特罗蛋白质偶联物、莱克多巴胺蛋白质偶联物，以及质孔带抗兔抗体或抗鼠抗体反应，形成棕红色条带。若样品中有相应的待检盐酸克伦特罗和莱克多巴胺存在，当样品加入后即与相应的抗体发生反应，而不会与相应的检测带所含的盐酸克伦特罗蛋白质偶联物、莱克多巴胺蛋白质偶联物反应，从而不显色。主要反应的结果有以下5种情况：
1、如果显示检测带10、11和质孔带12同时显现棕红色印迹带，表示检测结果为阴性，说明被检测样品中不含盐酸克伦特罗和莱克多巴胺。
2、反之，检测带10、11不显示颜色，只有质孔带12同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中同时含有盐酸克伦特罗和莱克多巴胺。
3、如果检测带10不显示颜色，检测带11和质孔带12同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中含有盐酸克伦特罗。
4、如果检测带11不显示颜色，检测带10和质孔带12同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中含有莱克多巴胺。
5、如果检测带10、11和质孔带12均不显色，则表明检测试条失效。

Claims (1)

1、一种盐酸克伦特罗——莱克多巴胺二联检测卡，它是在长条扁平薄壳状的检测卡外壳中设置测试条，检测卡外壳表面有检测窗孔和加样孔，其特征在于测试条是由支承背板上通过不干胶在其上粘贴四种元件组成，支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜，支承背板一端部上叠置粘贴吸水膜，另一端部上叠置粘贴样品垫，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜一端搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金膜，胶体金膜是含抗盐酸克伦特罗和抗莱克多巴胺单克隆抗体或多克隆抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有2条检测带和1条质孔带，一条检测带分别含盐酸克伦特罗蛋白质偶联物，另一条检测带含莱克多巴胺蛋白质偶联物，质孔带为抗兔抗体或抗鼠抗体；测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。
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