CN102331499A - 一种同时检测卡马西平和丙戊酸钠的双通道检测卡及其检测方法 - Google Patents
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Abstract
一种同时检测卡马西平和丙戊酸钠的双通道检测卡及其检测方法,属于抗癫痫药血药浓度监测技术领域。该检测卡外壳表面有检测窗孔和加样孔,壳内有测试条,测试条由支承背板中部粘贴硝酸纤维素膜,支承背板一端粘贴吸水膜,另一端粘贴样品垫,两者之间夹置粘贴两段胶体金膜,胶体金膜分别是含抗卡马西平和抗丙戊酸钠单克隆抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜;硝酸纤维素膜上横向有三条间隔开的显示印迹带:一条是含卡马西平蛋白质偶联物的检测带,另一条是含丙戊酸钠蛋白质偶联物的检测带,第三条是含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带,样品垫正对加样孔,硝酸纤维素膜正对检测窗孔。本检测卡能同时检测血清样品中的两种抗癫痫药成分,节省检测费用,使用方便,检测快速,灵敏度高,结果准确。
Description
技术领域
本发明涉及一种检测抗癫痫药物血药浓度的器具,特别是涉及一种同时检测卡马西平和丙戊酸钠的双通道检测卡,属于抗癫痫药物血药浓度检测技术领域。
背景技术
卡马西平(CBZ)为亚氨基二苯乙烯衍生物,化学结构与三环类抗抑郁药丙咪嗦相似。1962年Bolm首次用于治疗三叉神经痛,疗效满意,继而用于治疗癫痫等多种疾病。其抗癫痫作用类似于苯妥英钠,能增强细胞膜电位的稳定性,阻止脑部异常电位活动向周围脑组织扩散,因而阻止癫痛的发作。为广谱抗癫痫药,广泛用于治疗各型癫痫,尤其对癫痫大发作、神经运动性发作疗效较好,是目前治疗神经运动性发作的首选药物。卡马西平口服吸收慢且不完全,达峰时间2~8 h,血浆蛋白结合率约80%。常见的不良反应有眩晕、嗜睡及皮疹等。卡
马西平达峰时间、峰值血药浓度、消除半衰期的个体差异大,有效血药浓度与中毒浓度接近甚至重叠。因此,应及时监测其血药浓度,力求个体化给药,避免不良反应,以达安全、合理用药的目的。
丙戊酸钠是临床常用的广谱抗癫痫药物,尤其对单纯失神发作、全身性强直-陈挛发作、肌陈挛发作疗效显著,对单纯部分性发作、复杂部分性发作也有良好疗效,有效血药浓度范围为50-100μg/mL。但丙戊酸钠体内过程和疗效个体差异大,剂量与血药浓度的相关性不稳定,且血药浓度过高易引起恶心、呕吐及肝功能损害等不良反应,因而通过监测血药浓度来调整剂量,是确保疗效和用药安全的必要手段。
测定体内抗癫痫药物血药浓度最常用的方法为荧光偏振免疫法,也有采用填充柱气相色谱法,前者需用专用的试剂盒,价格昂贵,也不能分离和排除丙戊酸代谢产物和内源性杂质的干扰,后者分离效果欠佳、灵敏度低,测定低浓度样品误差较大,影响结果的准确性。而且这些方法普遍存在操作繁琐,对实验仪器设备要求高,需要专门技术人员操作等缺点。
为此,本发明拟发明一种基于卡马西平、丙戊酸钠这些小分子物质与蛋白质偶联后从而具备抗原性的免疫学检测方法,采取免疫学竞争法的原理,结合胶体金标记技术和免疫层析法设计的一种快速检测试剂,可快速特异地检测血清中的卡马西平和丙戊酸钠含量。根据检测卡样品测试线(T)和对照线(C)的有无来判定血清中的卡马西平和丙戊酸钠含量。反应是利用小分子物质与蛋白质偶联后具有抗原性而建立的一种检测方法,具有特异性强的优点,可避免其它检测方法的假阳性导致的误检问题。同时检测卡操作简单快速,无需特殊的仪器设备,结果准确,准确率大于95%。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能同时检测卡马西平和丙戊酸钠的器具,克服现有技术操作繁琐、专业要求高的缺陷,用于检测血药浓度,保证用药安全。
本发明的技术方案:一种同时检测卡马西平和丙戊酸钠的检测卡,在长条扁平薄壳状的检测卡外壳1中设置测试条2,检测卡外壳表面有检测窗孔3和加样孔4,测试条是由支承背板5上粘贴五种元件组成:支承背板中部粘贴硝酸纤维素膜6,支承背板一端部上叠置粘贴吸水膜10,另一端部上叠置粘贴样品垫9,吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜一端搭接,在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部,两者之间夹置粘贴两段胶体金膜7、8,胶体金膜7、8依次是含抗卡马西平及抗丙戊酸钠单克隆抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜;硝酸纤维素膜上横向有三条间隔开的显示印迹带:一条是含卡马西平蛋白质偶联物的检测带11,另一条是含丙戊酸钠蛋白质偶联物的检测带12,第三条是含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带13;测试条置入检测卡外壳内,样品垫正对加样孔,硝酸纤维素膜正对检测窗孔。
同时检测卡马西平和丙戊酸钠的检测卡的检测方法,应用免疫学的方法直接检测样品卡马西平和丙戊酸钠的含量;
在患者连续服药一周以后,于早晨服药前抽取静脉血2mL,3000r/min离心10min,分离血清,立即处理或于-20℃下48h以内保存;
反应的结果有以下5种情况:
检测带11、12和质控带13同时显现棕红色印迹带,表示被检测样品中卡马西平和丙戊酸钠含量均低于一定值。
检测带11、12不显示颜色,只有质控带13显现棕红色印迹,表明被检测样品中卡马西平和丙戊酸钠含量均高于一定值。
检测带11不显示颜色,检测带12和质控带13同时显现棕红色印迹,表明被检测样品中卡马西平高于一定值,而丙戊酸钠低于一定值。
检测带12不显示颜色,检测带11和质控带13同时显现棕红色印迹,表明被检测样品中丙戊酸钠高于一定值,而卡马西平低于一定值。
检测带11、12和质控带13均不显色,则表明检测试条失效。
本发明的优点是能同时检测出患者血清样品中的卡马西平和丙戊酸钠,易于制备且节省检测费用,使用方便,检测快速,灵敏度高,结果准确。
附图说明
图1卡马西平和丙戊酸钠的双通道检测卡及测试条在外壳内的安置图。1、外壳,2、测试条,3、检测窗孔,4、加样孔。
图2测试条的硝酸纤维素膜上显示印迹示意图。6、硝酸纤维素膜,11、检测带(含卡马西平蛋白质偶联物),12、检测带(含丙戊酸钠蛋白质偶联物),13、质控带。
图3卡马西平和丙戊酸钠的双通道检测卡的检测试条结构示意图。5、支承背板,6、硝酸纤维素膜,7、胶体金膜(含抗卡马西平抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜),8、胶体金膜(含抗丙戊酸钠单克隆抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜),样品垫9,吸水膜10。
具体实施方式
本发明结合具体实施例参见附图进一步说明如下:
实施例1
一种卡马西平和丙戊酸钠的双通道检测卡,它是在检测卡外壳1中设置测试条2,检测卡外壳1的结构及测试条2的设置参见附图1和附图3,检测卡外壳1为长条扁平薄壳状壳体,长7cm,宽2cm,厚0.5cm,薄壳壁厚0.1cm,由工程塑料制成。检测卡外壳1由壳盖与壳座两半联接构成,在检测卡外壳1壳盖上有检测窗孔3和加样孔4。测试条2放置在检测卡外壳1的壳座内。
测试条2是多层结构的窄条薄片,片长约6.0cm,片宽约 0.4cm,厚度小于2.5mm。测试条2是多层结构:底层是支承背板5,为聚氯乙烯塑料薄片,厚约0.5mm,长6.0cm,宽0.4cm;支承背板5中部叠置粘贴硝酸纤维素膜6,硝酸纤维素膜厚0.5mm,长2-2.5cm,宽0.4cm。硝酸纤维素膜6上有三条间隔开的横向显示印迹带,参见附图2,三条显示印迹带中,一条是检测带11,含卡马西平蛋白质偶联物,另一条是检测带12,含丙戊酸钠蛋白质偶联物,第三条是质控带13,含抗鼠抗体。支承背板5一端部上叠置粘贴吸水膜10,支承背板5另一端部上叠置粘贴样品垫9,吸水膜10内端与样品垫9内端各自分别与硝酸纤维素膜6一端搭接,在样品垫9与硝酸纤维素膜6的搭接部,两者之间夹置粘贴两段胶体金膜7、8,胶体金膜7是含抗卡马西平抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜,胶体金膜8是含抗丙戊酸钠抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜。胶体金膜7和胶体金膜8各为厚0.5-0.8mm,长0.5-0.6cm,宽0.4cm。样品垫9厚0.5-0.8mm,长2cm,宽0.4cm。吸水膜10厚0.5-0.8mm,长1.6-2cm,宽0.4cm。胶体金膜7、8、样品垫9及吸水膜10与硝酸纤维素膜搭接长度为0.1-0.2cm。吸水膜10材料是吸水纸,样品垫9材料是吸水玻璃纤维膜。
测试条2置入外壳1内,样品垫9正对加样孔4,硝酸纤维素膜6正对检测窗孔3。
实施例2
样品的处理方法是:
在患者连续服药一周以后,于早晨服药前抽取静脉血2mL,3000r/min离心10min,分离血清,立即处理或于-20℃下48h以内保存;
检测卡的主要反应是免疫学的抗原和抗体反应,在硝酸纤维素膜上迁移的胶体金标记的抗体,在测试带上分别与含卡马西平蛋白质偶联物、丙戊酸钠蛋白质偶联物,以及质控带抗鼠抗体反应,形成棕红色条带。若样品中有相应的待检卡马西平和丙戊酸钠都高于允许值,当样品加入后即与相应的抗体发生反应,而不会与相应的检测带所含的卡马西平蛋白质偶联物、丙戊酸钠蛋白质偶联物反应,从而不显色。主要反应的结果有以下5种情况:
1、检测带11、12和质控带13同时显现棕红色印迹带,表示被检测样品中卡马西平和丙戊酸钠均低于一定值。
2、检测带11、12不显示颜色,只有质控带13显现棕红色印迹,表明被检测样品中卡马西平和丙戊酸钠均高于一定值。
3、检测带11不显示颜色,检测带12和质控带13同时显现棕红色印迹,表明被检测样品中卡马西平高于一定值,而丙戊酸钠低于一定值。
4、检测带12不显示颜色,检测带11和质控带13同时显现棕红色印迹,表明被检测样品中丙戊酸钠高于一定值,而卡马西平低于一定值。
5、检测带11、12和质控带13均不显色,则表明检测试条失效。
Claims (2)
1.一种同时检测卡马西平和丙戊酸钠的检测卡,其特征在于在长条扁平薄壳状的检测卡外壳(1)中设置测试条(2),检测卡外壳表面有检测窗孔(3)和加样孔(4);测试条是由支承背板(5)上粘贴五种元件组成:支承背板中部粘贴硝酸纤维素膜(6),支承背板一端部上叠置粘贴吸水膜(10),另一端部上叠置粘贴样品垫(9),吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜一端搭接,在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部,两者之间夹置粘贴两段胶体金膜(7)、(8),胶体金膜(7)是含抗卡马西平单克隆抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜,胶体金膜(8)是含抗丙戊酸钠单克隆抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜;硝酸纤维素膜上横向有三条间隔开的显示印迹带:一条是含卡马西平蛋白质偶联物的检测带(11),另一条是含丙戊酸钠蛋白质偶联物的检测带(12),第三条是含抗鼠抗体或抗兔抗体的质控带(13);测试条置入检测卡外壳内,样品垫正对加样孔,硝酸纤维素膜正对检测窗孔。
2.权利要求1所述同时检测卡马西平和丙戊酸钠的检测卡的检测方法,其特征是应用免疫学的方法直接检测样品卡马西平和丙戊酸钠的含量;样品的处理方法是:
在患者连续服药一周以后,于早晨服药前抽取静脉血2mL,3000r/min离心10min,分离血清,立即处理或于-20℃下48h以内保存;
反应的结果有以下5种情况:
检测带11、12和质控带13同时显现棕红色印迹带,表示被检测样品中卡马西平和丙戊酸钠均呈阴性,低于一定值;
检测带11、12不显示颜色,只有质控带13显现棕红色印迹,表明被检测样品中卡马西平和丙戊酸钠均呈阳性,高于一定值;
检测带11不显示颜色,检测带12和质控带13同时显现棕红色印迹,表明被检测样品中卡马西平呈阳性,高于一定值;而丙戊酸钠呈阴性,低于一定值;
检测带12不显示颜色,检测带11和质控带13同时显现棕红色印迹,表明被检测样品中丙戊酸钠呈阳性,高于一定值;而卡马西平呈阴性,低于一定值;
检测带11、12和质控带13均不显色,则表明检测试条失效。
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