CN1869059B

CN1869059B - 从人参叶中制备人参皂苷单体的方法

Info

Publication number: CN1869059B
Application number: CN2006100936159A
Authority: CN
Inventors: 桂明玉; 金永日; 李绪文; 金永学
Original assignee: Asia Pharmacy Co Ltd Hainan
Current assignee: Hainan Asia Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority date: 2006-06-21
Filing date: 2006-06-21
Publication date: 2012-04-18
Anticipated expiration: 2026-06-21
Also published as: CN1869059A

Abstract

本发明公开了从人参叶中提取分离人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷F₁，尤其是提取分离人参皂苷F₁、人参皂苷F₂、三七皂苷Fe的方法。本发明通过氧化铝柱层析的方法将人参叶总皂苷分成组成简单的若干个混合皂苷后再通过柱层析方法获得各种人参皂苷单体。

Description

从人参叶中制备人参皂苷单体的方法

技术领域

本发明涉及从人参叶中提取分离各种人参皂苷单体的方法，更加具体地说公开了从人参叶中提取分离人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷F₁，尤其是提取分离人参皂苷F₁、人参皂苷F₂、三七皂苷Fe的方法，属于天然药物化学研究领域。

背景技术

人参叶是人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥叶，秋季采收，晾干或烘干；具有补气，益肺，祛暑，生津之功能；用于气虚咳嗽，暑热烦燥，津伤口渴，头目不清，四肢疲乏。

到目前为止人们从人参叶中分得多种人参皂苷，其中主要包括人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re等三醇组人参皂苷和人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、人参皂苷F₂、三七皂苷Fe等二醇组人参皂苷，其中人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd研究得较多，而关于人参皂苷F₁、人参皂苷F₂、三七皂苷Fe的报道则很少。

因为不同的人参皂苷具有不同的生物活性，比如说人参皂苷Rg₁是所有人参皂苷中抗疲劳活性最强的人参皂苷，而人参皂苷Rb₂具有最强的降血脂作用。在研制开发新药或保健食品的过程中往往涉及设法获得各种人参皂苷的单体，因此研究发明能够简单地获得人参皂苷单体的新方法是一件非常有意义的工作。

发明内容

人参皂苷F₁、人参皂苷F₂、三七皂苷Fe难以通过酸水解或碱水解其他人参皂苷的方法获得，只能通过生物转化的方法如酶解等获得。我们发现人参叶中人参皂苷F₁、人参皂苷F₂以及三七皂苷Fe含量较高，利用人参叶是能够同时获得人参皂苷F₁、人参皂苷F₂和三七皂苷Fe。当然也可以从人参叶中提取分离人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等其他人参皂苷单体。

本发明提供一种从人参叶提取分离各种人参皂苷单体，尤其是人参皂苷F₁、人参皂苷F₂以及三七皂苷Fe的新方法。具体是将人参叶提取物(人参叶总皂苷)上氧化铝柱，用水洗脱，获得主要由人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re组成的混合皂苷A，然后将混合皂苷A进行柱层析分离，获得人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re单体；将人参叶提取物上氧化铝柱，用水将人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re洗脱完全后用有机溶剂的水溶液洗脱，获得主要由人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd组成的混合皂苷B，将混合皂苷B进行柱层析分离，获得人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd单体；将人参叶提取物上氧化铝柱，用有机溶剂的水溶液洗脱后用四氢呋喃的水溶液洗脱，获得主要由人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃组成的混合皂苷C，然后将混合皂苷C进行柱层析分离，获得人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃单体；将人参叶提取物上氧化铝柱，用水洗脱后用四氢呋喃的水溶液洗脱，获得主要由人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃组成的混合皂苷D后将混合皂苷D进行柱层析分离，获得人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃单体；将人参叶提取物上氧化铝柱，用水洗脱，获得主要由人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re组成的混合皂苷A，然后将混合皂苷A用水或醇的水溶液进行重结晶，过滤，除掉部分人参皂苷Re，母液回收溶剂后进行柱层析分离，获得人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re单体。

上述过程中使用的氧化铝最好是中性氧化铝；柱层析可以是硅胶或ODS柱层析或两者联合应用；有机溶剂选自乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇、异丙醇或它们的两种或两种以上混合溶液。获得的人参皂苷单体可用于制备药物组合物、保健食品及其他产品。具体如下。

至今为止，提起人参叶总皂苷，认为其中的主要成分是人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃，很少提到人参皂苷F₁、人参皂苷F₂、三七皂苷Fe。我们发现，其实人参叶中人参皂苷F₁、人参皂苷F₂以及三七皂苷Fe的含量也较高，尤其是人参皂苷F₁、人参皂苷F₂。因此，应该说人参叶总皂苷是人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷F₂、人参皂苷Re、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃的混合皂苷。

目前从人参叶中提取分离人参叶总皂苷，最常用的方法是大孔吸附树脂法。即人参叶加水煎煮提取，提取液过大孔吸附树脂吸附，用水洗净，乙醇溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，获得人参叶总皂苷，即人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rg₁、人参皂苷F₂、人参皂苷Re、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃的混合皂苷。上述方法是目前提取人参皂苷最常用的方法，是已有技术。如何利用人参叶总皂苷分得单体人参皂苷是本发明要解决的问题。当然除了常用的大孔吸附树脂法外还可以通过水提醇沉法、醇提水沉法等其他方法获得人参叶总皂苷。本发明优先采用大孔吸附树脂法。

获得人参叶总皂苷后本发明首先将其中的人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re同其他人参皂苷分开，尤其是将人参皂苷Rg₁和人参皂苷F₂，人参皂苷Re和三七皂苷Fe分开，获得只含有人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂和人参皂苷Re这些相对好分离的人参皂苷混合物(混合皂苷A)和只含有人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃的混合皂苷D。然后从混合皂苷D中再将人参皂苷F₂、三七皂苷Fe分离出来，获得只含有人参皂苷F₂、三七皂苷Fe和人参皂苷Rd的混合皂苷，即混合皂苷B；最后获得只含有人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃的混合皂苷C。然后利用柱层析方法获得相应的人参皂苷单体。由于首先将极性比较接近的人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂同人参皂苷F₂，人参皂苷Re同三七皂苷Fe分离开来，因此使分离人参皂苷单体的工作变得简单容易，效率大大提高。具体如下。

人参叶总皂苷上氧化铝柱，用水冲洗，这时洗脱下来的是人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂和人参皂苷Re，而人参皂苷F₂和三七皂苷Fe等其它人参皂苷仍然吸附在氧化铝上，达到了将人参皂苷Re和三七皂苷Fe，人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂和人参皂苷F₂这两对极性接近的成分分开的目的。水洗脱液重新用大孔吸附树脂吸附，乙醇洗脱，回收溶剂，获得主要由人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re组成的混合皂苷A。然后用乙醇或甲醇或丙酮或正丙醇或异丙醇的水溶液或他们的混合物的水溶液继续洗脱液氧化铝柱，这时被洗脱下来的是人参皂苷F₂、三七皂苷Fe和部分人参皂苷Rd，回收溶剂后获得主要由人参皂苷F₂、三七皂苷Fe和人参皂苷Rd组成的混合皂苷B，最后用四氢呋喃的水溶液洗脱，这时洗脱下来的主要是人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃，回收溶剂后获得人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃组成的混合皂苷C。或者将人参叶总皂苷上氧化铝柱，用水将人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂和人参皂苷Re洗脱完全后用四氢呋喃的水溶液洗脱，获得主要由人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃组成的混合皂苷D。

将上述方法获得的混合皂苷进行柱层析分离，就可以获得各种人参皂苷单体。即将人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re的混合皂苷，即混合皂苷A进行柱层析分离，可以分别获得人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re单体；将人参皂苷F₂、三七皂苷Fe和人参皂苷Rd的混合皂苷，即混合皂苷B进行柱层析分离，可以分别获得人参皂苷F₂、三七皂苷Fe和人参皂苷Rd单体；将人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃的混合皂苷，即混合皂苷C进行柱层析分离，可以分别获得人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃单体；将人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃组成的混合皂苷即混合皂苷D进行柱层析分离，可以分别获得人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃单体。

由于获得的人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re的混合皂苷中人参皂苷Re的含量最高，而且人参皂苷Re的水溶性较低，因此可以采用如下步骤先获得人参皂苷Re单体后再通过柱层析方法获得人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂单体。即将人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re的混合皂苷用水或醇的水溶液加热溶解，冷却，沉淀，滤过，获得人参皂苷Re单体和母液，母液重新过大孔吸附树脂吸附，乙醇洗脱，洗脱液回收溶剂后进行柱层析分离，获得人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re单体，沉淀反复进行重结晶，获得人参皂苷Re单体。

上述氧化铝柱层析中乙醇或甲醇或丙酮或正丙醇或异丙醇或他们的混合物的水溶液浓度在45％—85％之间，最好在60％左右；四氢呋喃的水溶液的浓度在30％—85％之间，最好在50％左右；使用的氧化铝最好是中性氧化铝。

具体实施方式

实施例1

人参叶7公斤，加水煎煮提取三次，每次加水量分别是人参叶重量的18、14、12倍，煎煮时间分别是2、1.5、1小时，合并煎煮液，过D4020大孔吸附树脂吸附，用水冲净，85％乙醇洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷Re和人参皂苷Rd为止(硅胶薄层层析，正丁醇：乙酸乙酯：水＝4：1：5，上层，10％硫酸喷雾，105℃加热显色，以下相同)，回收乙醇，获得人参叶总皂苷980克。

取人参叶总皂苷12克，上氧化铝柱，用水洗脱至洗脱液检测不到人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止。水洗脱液过D4020大孔吸附树脂吸附，85％乙醇洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止，回收溶剂，得主要含有人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re和人参皂苷Rg₁的混合皂苷，即混合皂苷A6.8克。接着用75％的乙醇水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，得主要含有人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd的混合皂苷，即混合皂苷B1.2克。最后用50％四氢呋喃的水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，得主要含有人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃的混合皂苷，即混合皂苷C1.6克。

实施例2

取人参叶总皂苷12克，上氧化铝柱，用水洗脱至洗脱液检测不到人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止。水洗脱液过AB-8大孔吸附树脂吸附，85％乙醇洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止，回收溶剂，得主要含有人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re和人参皂苷Rg₁的混合皂苷，即混合皂苷A6.3克。接着用50％的甲醇水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，得主要含有人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd的混合皂苷，即混合皂苷B1.8克。最后用50％四氢呋喃的水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，得主要含有人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃的混合皂苷，即混合皂苷C1.9克。

实施例3

取人参叶总皂苷12克，上氧化铝柱，用水洗脱至洗脱液检测不到人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止。水洗脱液过D101大孔吸附树脂吸附，85％乙醇洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止，回收溶剂，得主要含有人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re和人参皂苷Rg₁的混合皂苷，即混合皂苷A7.4克。接着用55％的丙酮水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，得主要含有人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd的混合皂苷，即混合皂苷B2.1克。最后用50％四氢呋喃的水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，得主要含有人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃的混合皂苷1.1克。

实施例4

取人参叶总皂苷12克，上氧化铝柱，用水洗脱至洗脱液检测不到人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止。水洗脱液过860021大孔吸附树脂吸附，85％乙醇洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止，回收溶剂，得主要含有人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re和人参皂苷Rg₁的混合皂苷，即混合皂苷A7.1克。接着用55％的正丙醇水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，得主要含有人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd的混合皂苷，即混合皂苷B1.3克。最后用50％四氢呋喃的水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，得主要含有人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃的混合皂苷，即混合皂苷C1.4克。

实施例5

取人参叶总皂苷12克，上氧化铝柱，用水洗脱至洗脱液检测不到人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止。水洗脱液过HP-20大孔吸附树脂吸附，85％乙醇洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止，回收溶剂，得主要含有人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re和人参皂苷Rg₁的混合皂苷，即混合皂苷A6.9克。接着用60％的异丙醇水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，得主要含有人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd的混合皂苷，即混合皂苷B2.0克。最后用70％四氢呋喃的水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，得主要含有人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃的混合皂苷，即混合皂苷C1.1克。

实施例6

取人参叶总皂苷12克，上氧化铝柱，用水洗脱至洗脱液检测不到人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止。水洗脱液过HP-20大孔吸附树脂吸附，85％乙醇洗脱至洗脱液中检测不到人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为止，回收溶剂，得主要含有人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re和人参皂苷Rg₁的混合皂苷，即混合皂苷A6.9克。接着用70％四氢呋喃的水溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，得主要含有人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃的混合皂苷，即混合皂苷D3.1克。

实施例7

取人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re和人参皂苷Rg₁的(混合皂苷A)1.0克，湿法装柱，干法上样，以乙酸乙酯：甲醇＝9：1为洗脱液进行硅胶柱层析，TLC检测，分别收集人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re部分，回收溶剂，得人参皂苷F₁30毫克，人参皂苷Rg₂8毫克，人参皂苷Rg₁102毫克和人参皂苷Re365毫克。

实施例8

取人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd的混合皂苷(混合皂苷B)1.0克。湿法装柱，干法上样，以乙酸乙酯：甲醇＝8：1为洗脱液进行硅胶柱层析，TLC检测，分别收集人参皂苷F₂、三七皂苷Fe和人参皂苷Rd部分，回收溶剂，得人参皂苷F₂180毫克，三七皂苷Fe60毫克，人参皂苷Rd200毫克。

实施例9

取人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃的混合皂苷(混合皂苷C)1.0克，湿法装柱，干法上样，以乙酸乙酯：甲醇＝5：1至1：1为洗脱液进行硅胶柱层析梯度洗脱，TLC检测，分别收集人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃部分，回收溶剂，得人参皂苷Rd204毫克，人参皂苷Rb₂150毫克、人参皂苷Rc131毫克，人参皂苷Rb₁68毫克和人参皂苷Rb₃23毫克。

实施例10

取混合皂苷A10克，加20毫升水加热溶解，放冷，沉淀，滤过。沉淀用水反复重结晶，得人参皂苷Re2.45克。母液过941脱色树脂脱色，过大孔吸附树脂吸附，85％乙醇洗脱，洗脱液回收溶剂，得产物6.3克。取此产物6.0克，湿法装柱，干法上样，以乙酸乙酯：甲醇＝8：1为洗脱液进行硅胶柱层析，TLC检测，分别收集人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re部分，回收溶剂，得人参皂苷F₁420毫克，人参皂苷Rg₂120毫克，人参皂苷Rg₁980毫克和人参皂苷Re630毫克。

实施例11

取人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃的混合皂苷(混合皂苷D)10.0克，，以乙酸乙酯：甲醇＝10：1至1：1为洗脱液进行硅胶柱层析梯度洗脱，TLC检测，分别收集人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃部分，回收溶剂，得人参皂苷F₂430mg、三七皂苷Fe98mg、人参皂苷Rd904毫克，人参皂苷Rb₂350毫克、人参皂苷Rc431毫克，人参皂苷Rb₁168毫克和人参皂苷Rb₃93毫克。

实施例12

取人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd的混合皂苷B1.0克。湿法装柱，干法上样，以甲醇：水＝7：1为洗脱液进行ODS柱层析，TLC检测，分别收集人参皂苷F₂、三七皂苷Fe和人参皂苷Rd部分，回收溶剂，得人参皂苷F₂189毫克，三七皂苷Fe64毫克，人参皂苷Rd217毫克。

实施例13

取人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re和人参皂苷Rg₁的混合皂苷1.0克，湿法装柱，干法上样，以甲醇：水＝7：1为洗脱液进行ODS柱层析，TLC检测，分别收集人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re部分，回收溶剂，得人参皂苷F₁30毫克，人参皂苷Rg₂8毫克，人参皂苷Rg₁102毫克和人参皂苷Re400毫克。

本发明利用水作洗脱液通过氧化铝柱层析的方法，将人参叶中的人参皂苷Re和三七皂苷Fe、人参皂苷Rg₁和人参皂苷F₂分离开来，降低了分离难度，具有分离难度低、效率高、生产成本低、操作简单、无环境污染等优点。

Claims

1.人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re单体的制备方法，其特征在于将人参叶总皂苷上氧化铝柱，用水洗脱，获得主要由人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re组成的混合皂苷A后将混合皂苷A进行柱层析分离。

2.人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd单体的制备方法，其特征在于将人参叶总皂苷上氧化铝柱，用水将人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re洗脱完全后用有机溶剂的水溶液洗脱，获得主要由人参皂苷F₂、三七皂苷Fc、人参皂苷Rd组成的混合皂苷B后将混合皂苷B进行柱层析分离，所述有机溶剂的水溶液其浓度为45％至85％，所述的有机溶剂选自乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇、异丙醇或它们的两种以上混合溶液。

3.人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Fb₁和人参皂苷Rb₃单体的制备方法，其特征在于将人参叶总皂苷上氧化铝柱，用有机溶剂的水溶液将人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re、人参皂苷F₂、三七皂苷Fe洗脱完全后用四氢呋喃的水溶液洗脱，获得主要由人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃组成的混合皂苷C后将混合皂苷C进行柱层析分离，所述有机溶剂的水溶液其浓度为45％至85％，所述四氢呋喃水溶液其浓度为30％至85％，所述的有机溶剂选自乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇、异丙醇或它们的两种以上混合溶液。

4.人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rc单体的制备方法，其特征在于将人参叶提取物上氧化铝柱，用水洗脱，获得主要由人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rc组成的混合皂苷A后将混合皂苷A用水或醇的水溶液进行重结晶，获得的母液回收溶剂后进行柱层析分离。

5.人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃单体的制备方法，其特征在于将人参叶提取物上氧化铝柱，用水将人参皂苷F₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Re洗脱完全后用四氢呋喃的水溶液洗脱，获得主要由人参皂苷F₂、三七皂苷Fe、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rb₃组成的混合皂苷D后将混合皂苷D进行柱层析分离，所述四氢呋喃水溶液其浓度为30％至85％。

6.权利要求1-5的任何一项制备方法，其特征在于所述的氧化铝是中性氧化铝。

7.权利要求1-5的任何一项制备方法，其特征在于所述的柱层析是硅胶柱层析和/或ODS柱层析。